ES2984371T3 - Colorante basado en antocianinas - Google Patents
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Abstract
1. Composición colorante a base de antocianina que comprende entre un 50 y un 90 % en moles, en base a la cantidad total de antocianinas, de antocianinas a base de pelargonidina, y en donde (i) > 70 % en moles de todas las antocianinas están aciladas con al menos un ácido fenólico; y (ii) > 20 % en moles de todas las antocianinas están aciladas con al menos un ácido hidroxicinámico; y en donde la composición tiene un color rojo con un valor de tono H >= en el sistema de color L*C*h* en el intervalo de 10-30, medido a un valor L* de (70,0 ± 0,1) en un tampón de citrato trisódico dihidrato de 0,1 mol/l a pH 3 en una celda de cuarzo de 1 cm de longitud utilizando Spectraflash 650 (Datacolor) en modo de transmisión bajo iluminante D65 10 Deg. Además, la presente invención se refiere al uso de las composiciones anteriores como colorante alimentario. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)
Description
DESCRIPCIÓN
Colorante basado en antocianinas
Campo de la invención
La presente invención se refiere al campo técnico de los colorantes naturales, especialmente los colorantes alimenticios que pueden obtenerse a partir de extractos de plantas, y además se refiere al uso de estos colorantes para la coloración alimentaria.
Antecedentes
Los colorantes que contienen sustancias colorantes naturales se usan comúnmente en la fabricación de, por ejemplo, productos alimenticios y productos farmacéuticos. Sin embargo, hay requisitos cada vez más estrictos que deben satisfacer los colorantes naturales para que se acepten como un agente colorante comercial, especialmente en el campo de los colorantes para productos alimenticios, dulces y productos farmacéuticos.
En primer lugar, un colorante debe ser estable en condiciones de uso común. Esto significa que, en muchas aplicaciones alimentarias, un colorante debe ser térmicamente estable frente a la exposición al calor que se produce en la ocasión de, por ejemplo, la pasteurización de alimentos antes del envasado o el calentamiento por parte del consumidor antes del consumo. Además, los colorantes deben mostrar una fotoestabilidad suficiente, es decir, deben ser estables frente a la exposición a la luz durante la vida útil del producto (alimento) coloreado sin cambio o desaparición sustancial de color (decoloración).
Además, el colorante debe ser estable frente a la interacción química con otros compuestos en el entorno de los alimentos. Como muchos productos alimenticios tienen un pH en el intervalo ácido, esto significa que el colorante debe ser estable en medios que tengan un pH bajo. Esto se aplica especialmente en el caso de bebidas, que tienen un pH relativamente bajo en el intervalo de 2,0-4,5, y más comúnmente de 2,5-3,6. Por ejemplo, los preparados de fruta tienen generalmente un pH en el intervalo de 3,6-4,3 y más comúnmente 3,9-4,1 y en yogures generalmente tienen un pH en el intervalo de 4,1-4,7.
Además, el propio colorante no debe tener un sabor y/u olor intenso por sí mismo. Sin embargo, dependiendo del origen del colorante natural, un colorante a veces puede tener un sabor y/u olor intenso por sí mismo, lo que lo haría inadecuado como colorante para determinados productos (alimenticios). Este es el caso del colorante producido a partir del rábano rojo o la lombarda.
Las antocianinas son bien conocidas como un grupo de compuestos que dan color a alimentos, verduras y flores y son responsables del color azul, púrpura, violeta, magenta, rojo y naranja de muchas especies de plantas. Las antocianinas son pigmentos no tóxicos y solubles en agua y, por lo tanto, se han usado antocianinas extraídas de frutas y verduras como colorantes alimenticios para proporcionar colores en el intervalo de color naranja a púrpura.
Otsuki y col., Phytochemistry 60 (2002), 79-87, describen antocianinas aciladas procedentes del rábano rojo. Pero el rábano rojo tiene un regusto desagradable debido a compuestos sulfurosos.
Figueiredo y col., Phytochemistry 51 (1999), 125-132, describen la copigmentación intramolecular de antocianinas. Sin embargo, este documento no describe ninguna mezcla que comprenda pelargonidinas.
Dangles y col., Phytochemistry 34 (1993), 119-124, describen la copigmentación intramolecular de antocianinas. Pero este documento no describe ninguna mezcla que comprenda pelargonidinas.
Rodriguez y col., Journal of Food science 63 (1998), 458-464, describen las composiciones de pigmento de antocianina de patatas de pulpa roja. Pero este documento no describe ninguna mezcla que comprenda pelargonidinas.
A pesar de la utilidad conocida de los colorantes alimentarios naturales, incluidos los colorantes alimenticios de antocianina, existe el deseo de desarrollar una mayor diversidad de tonos de color adecuados para los colorantes comerciales. También, especialmente para colorear alimentos tales como bebidas, leche, crema helada y dulces, son deseables colorantes que tengan un alto brillo, proporcionando así un tono de color claro y distinto, especialmente tal como un tono de color rojo.
Resumen de la invención
En vista de lo anterior, el problema subyacente a la presente invención reside en la provisión de un nuevo colorante natural rojo-naranja especialmente adecuado para la coloración de alimentos, que es al menos tan estable como los colorantes alimentarios de antocianina conocidos, tiene un alto brillo y tiene un tono de color claro y distinto. En una realización preferida, el tono de color rojo-naranja obtenido es claramente diferente del tono de color de la mayoría de los otros colorantes de antocianina rojos. Además, el colorante debe estar libre de regustos desagradables o malos olores que lo harían inadecuado para su uso en aplicaciones de coloración de alimentos, tales como bebidas. Los tonos de color rojo-naranja también se pueden obtener usando otros colorantes, tales como ácido carmínico o extractos de rábano rojo. Sin embargo, el ácido carmínico se obtiene de una fuente animal (insectos) y, por lo tanto, no es adecuado para los consumidores vegetarianos. El rábano rojo es problemático ya que contiene compuestos de azufre y, por lo tanto, tiene un olor y sabor característicos indeseables.
Como resultado de la investigación completa de los inventores realizada en un intento de resolver el problema anterior, se ha descubierto sorprendentemente que tal colorante deseable se puede obtener proporcionando composiciones en las que la mayoría de las antocianinas son antocianinas basadas en pelargonidina que tienen un alto grado de acilación (es decir, relación molar de antocianinas aciladas a todas las antocianinas presentes) y que tienen un grado mínimo específico de acilación por ácido hidroxicinámico (es decir, una cantidad mínima específica de antocianinas aciladas con ácido hidroxicinámico).
Por lo tanto, la presente invención proporciona una composición que es una composición colorante basada en antocianinas, que comprende 50-90 % en moles, basado en la cantidad total de antocianinas, de antocianinas basadas en pelargonidina, y en donde
(i) > 70 % en moles de todas las antocianinas está acilada con al menos un ácido benzoico; y
<(ii) >>20<% en moles de todas las antocianinas está acilada con al menos un ácido hidroxicinámico;>
y en donde la composición tiene un color rojo con un valor de tono H en el sistema de color L*C*h* en el intervalo de 10-30, medido para un valor L* de (70,0 ± 0,1) en un tampón de citrato trisódico dihidratado de 0,1 mol/l a pH 3 en una celda de cuarzo de 1 cm de longitud usando Spectraflash 650 (Datacolor) en modo de transmisión bajo iluminante D65<a>10<grados, y en donde la composición no contiene o solo contiene cantidades traza de compuestos de azufre, en>donde la composición comprende, en función de la cantidad total de antocianinas, 5-55 % en moles de un derivado de<pelargonidina acilado (>1<) de la siguiente fórmula (mostrada en la forma protonizada y por lo tanto con carga positiva):>
y en donde la composición comprende, en función de la cantidad total de antocianinas, 3-60 % en moles de un derivado<de pelargonidina acilado (>2<) de la siguiente fórmula (mostrada en la forma protonizada y por lo tanto con carga positiva):>
Además, la presente invención proporciona el uso de la composición anterior como colorante alimentario, específicamente como colorante alimentario para bebidas, preparaciones alimenticias, lácteos, crema helada y dulces, y preferiblemente para bebidas o preparaciones de frutas que tienen un pH en los intervalos definidos anteriormente.
Las realizaciones preferidas de la presente invención se describen en la siguiente descripción y/o se identifican en las reivindicaciones dependientes adjuntas.
Descripción detallada de la invención
Preferiblemente, la presente composición no tiene un sabor y/u olor desagradable y, especialmente, ningún sabor y/u olor desagradable vinculado a la presencia de compuestos de azufre. Esto hace que la composición sea adecuada incluso para los alimentos colorantes que tienen un sabor y/u olor muy débil por sí mismos, tales como aguas minerales puras o ligeramente aromatizadas, leche y diversas cremas heladas.
El experto en la técnica sabe que el sabor y/o el olor desagradable de los alimentos a menudo es la consecuencia de la presencia de compuestos que contienen azufre. Esto también se aplica al rábano rojo y a la lombarda, en donde los compuestos que contienen azufre son al menos parcialmente responsables del fuerte sabor y/u olor, y dan un sabor y olor muy distintos a los extractos colorantes obtenidos de estas verduras.
En vista de lo anterior, también se prefiere que la presente composición no contenga compuestos que contengan azufre que proporcionen un sabor y/u olor desagradable en una cantidad que haga al sabor u olor de la composición inadecuado para la coloración de alimentos. Preferiblemente, la presente composición no contiene, o solo contiene cantidades traza, de dichos compuestos que contienen azufre.
Por lo tanto, la presente composición cumple preferiblemente al menos una de las siguientes condiciones (i)-(iii), más preferiblemente dos (es decir (i)+(ii), (i)+(iii) o (ii)+ (iii)), y lo más preferible las tres de las mismas:
(i) la presente composición no tiene sabor ni/u olor desagradable,
(ii) la presente composición no contiene un componente derivado de rábano rojo o lombarda, si está presente, este componente como tal cumple con los requisitos actuales (i) y/o (iii),
(iii) la presente composición no contiene o solo contiene cantidades traza de compuestos que contienen azufre. Especialmente, la presente composición cumple preferiblemente las condiciones (i) y/o (iii), y más preferiblemente no contiene un componente derivado de rábano rojo o lombarda.
Las antocianinas (no sustituidas y mostradas en la forma catiónica) son compuestos de la siguiente fórmula química, en donde los grupos R<3'>,R<4'>,R3 R5,R6 y R7 son H, OH u -OCH<3>:
Las formas no glicosiladas de la antocianinas son las denominadas antocianidinas. Las principales representantes entre ellas son cianidina, delfinidina, malvidina, pelargonidina, peonidina y petunidina, que tienen las siguientes fórmulas:
Las antocianinas naturales en frutas, verduras y flores no están presentes en su forma de aglicona, sino que están presentes en forma de glicósidos de antocianinas. En los mismos, las moléculas de azúcar se unen mediante un enlace O-glicosídico a un grupo hidroxi, generalmente presente en la posición 3 y/o 5 de la molécula de antocianina. Más comúnmente, la glicosilación está presente en la posición 3 y, si está presente, una segunda glicosilación está presente en la posición 5. Sin embargo, también un grupo hidroxi presente en la posición 7, 3', 4' o 5' puede someterse a glicosilación. Los ejemplos de azúcares comúnmente encontrados en los glicósidos de antocianina son glucosa, galactosa, arabinosa, ramnosa y xilosa. Pueden estar presentes como moléculas de azúcar individuales o en forma de disacáridos o trisacáridos. La estructura de glicósido puede estar presente solo en la posición 3 o 5 de la molécula de antocianina (monoglicósido) o puede estar presente tanto en la posición 3 como en la 5 de la misma (diglicósido). Como se ha dicho anteriormente, las glicosilaciones pueden estar también presentes en otras posiciones.
Además de la sustitución por moléculas de azúcar, las antocianinas naturales se pueden acilar dentro de las estructuras de los residuos de azúcar. Por lo tanto, una antocianina acilada es una antocianina donde el grupo hidroxilo de un residuo de azúcar se sustituye por un ácido carboxílico bajo la formación de una estructura de tipo éster, en donde el ácido carboxílico se esterifica con un resto de azúcar. Los ácidos carboxílicos adecuados para la acilación de antocianinas y que se encuentran frecuentemente en las antocianinas naturales son los ácidos hidroxicinámicos, (tales como ácido cumárico, ácido cafeico y ácido ferúlico) y ácido málico (véase también a continuación).
Los ácidos fenólicos son adecuados para la acilación de antocianinas. Los ácidos fenólicos son ácidos carboxílicos que tienen un anillo de fenol y un grupo de ácido carboxílico e incluyen los grupos de los ácidos benzoicos y los ácidos hidroxicinámicos ya mencionados.
En mayor detalle, entre los derivados de ácido benzoico especialmente adecuados están los denominados ácidos hidroxibenzoicos de la siguiente fórmula
en donde cada uno de R<1>y R<2>son individualmente H, OH u OCH<3>, tal como ácido p-hidroxibenzoico (R<1>= R<2>= H) ácido protocatechuico (R<1>= OH, R<2>= H), ácido vainílico (R<1>= OCH<3>R<2>= H), ácido gálico (R<1>= R<2>= OH) y ácido siríngico (R<1>= R, = OCH<3>).
Los ácidos hidroxicinámicos se entienden generalmente como un grupo de compuestos de la fórmula
en donde cada uno de R<1>y R<2>son individualmente H, OH u OCH<3>, tal como ácido p-cumárico (R<1>= R<2>= H), ácido cafeico (R<1>= OH, R<2>= H), ácido ferúlico (R<1>= OCH<3>, R<2>= H) y ácido sinápico (R<1>= R<2>= OCH<3>).
Se sabe que las antocianinas aciladas muestran en general una mayor estabilidad (termoestabilidad, fotoestabilidad y estabilidad química en entornos fisiológicos y/o alimentarios) en comparación con las antocianinas no aciladas (C. Malien-Aubert y col., J. Agric. Food Chem., 49, 170-176 (2001)). Por lo tanto, el grado actualmente requerido de acilación (es decir, la cantidad de antocianinas aciladas) de al menos el 70 % en moles de todas las antocianinas presentes en la composición de la invención proporciona una estabilidad suficiente de los colorantes reivindicados. Preferiblemente, al menos el 70 % en moles de todas las antocianinas está acilado con al menos un ácido fenólico. También preferiblemente, la cantidad de antocianinas aciladas es al menos 80 % en moles, más preferiblemente al menos 85 % en moles, incluso más preferiblemente al menos 90 % en moles en función de todas las antocianinas presentes en la composición.
Como los presentes inventores han descubierto, para la provisión de una composición de antocianina roja-naranja altamente estable y brillante, la acilación con ácidos hidroxicinámicos es especialmente preferida, es decir, la acilación con ácidos hidroxicinámicos hace que las antocianinas sean especialmente estables frente a las influencias de la luz, el calor y la degradación química en un entorno alimenticio. Por lo tanto, el grado de acilación por ácidos hidroxicinámicos en las presentes composiciones es al menos del 20 % en moles. Aunque el grado de acilación por<ácidos hidroxicinámicos con respecto a la estabilidad puede ser de hasta>100<%, por motivos prácticos, es>preferiblemente 20-80 % en moles, más preferiblemente 25-75 % en moles o incluso 30-70 % en moles y siendo especialmente preferido 35-70 % en moles.
La presente invención se refiere a composiciones que comprenden antocianinas basadas en pelargonidina como el componente de antocianina principal. Más precisamente, la cantidad de antocianinas basadas en pelargonidina, basada en todas las antocianinas presentes en la composición de la presente invención es del 50-90 % en moles. Preferiblemente, la cantidad de antocianinas basadas en pelargonidina es 55-85 % en moles, más preferido 60-80 % en moles.
El resto de otros colorantes de antocianinas (no basados en pelargonidina) presentes en la composición de la invención puede ser cualesquiera antocianinas siempre que la cantidad total de antocianinas muestre la cantidad de antocianinas aciladas y el contenido de restos de acilación de ácido hidroxicinámico definidos anteriormente, y además muestre un tono de color rojo-naranja dentro del intervalo de 10-30, preferiblemente 15-25, medido como se ha definido anteriormente.
Las otras antocianinas generalmente representan componentes menores y traza de extractos de antocianinas obtenidos a partir de materiales de reserva de plantas adecuadas. Estas otras antocianinas generalmente no son necesarias ni se desean, y pueden eliminarse mediante técnicas bien conocidas por el experto en la técnica (por ejemplo, mediante procesos cromatográficos continuos o no continuos) Sin embargo, si se desea, pueden añadirse otras antocianinas intencionalmente a una composición de antocianinas basada en pelargonidina para obtener una composición según la invención. Por lo tanto, la presente composición puede ser un zumo o extracto como el obtenido de una materia prima de planta adecuada, o puede purificarse adicionalmente y/o complementarse con un material de antocianina adicional. Por supuesto, la invención también abarca mezclas de dos o más de cualquiera de dichas composiciones de antocianinas.
Además, la presente invención abarca realizaciones en las que el componente de antocianina consiste en antocianinas basadas en pelargonidina.
Además, pueden estar presentes otros componentes colorantes (no de antocianina) en la composición de la invención, siempre que se cumplan los requisitos de color definidos en el presente documento. Pueden ser sustancias colorantes coexistentes con antocianinas en los zumos de plantas o extractos utilizados para preparar la presente composición o pueden añadirse intencionalmente colorantes de origen vegetal u otro, preferiblemente natural. Sin embargo, también, estos otros componentes colorantes, en principio, no son necesarios ni se desean y, por lo tanto, se mantienen preferiblemente a niveles bajos.
En otra realización preferida, la presente composición no contiene compuestos colorantes no de antocianina, es decir, se prefieren también composiciones en donde los componentes colorantes consisten en compuestos de antocianinas.
La kuromanina es cianidina-3-glicósido y se usa como patrón en la determinación del contenido de antocianinas. Para este fin, se prepara una curva de calibración en HPLC de este compuesto para correlacionar el área del pico de HPLC con la concentración de kuromanina (en mg/ml). Posteriormente, se inyecta una muestra a investigar en HPLC para obtener un cromatograma, y las áreas de pico del área de picos de las antocianinas se integran y convierten en concentraciones (en mg/ml) usando la curva de calibración de kuromanina. Por lo tanto, las concentraciones de compuestos de antocianinas en la muestra se expresan como mg/ml de equivalentes de kuromanina.
Preferiblemente, la cantidad de antocianinas en la composición (equivalentes de kuromanina) es 2-40 mg/ml, preferiblemente 2-30 mg/ml, más preferiblemente 5-25 mg/ml y especialmente preferido 8-21 mg/ml, o 10-18 mg/ml, para un colorante en 40-60 % de materia seca.
Sin embargo, la presente composición también puede estar presente en forma de concentrado. En dicho concentrado, el contenido de materia seca es preferiblemente de 10-95 % en peso, más preferiblemente de 15-85 % en peso y especialmente de 20-60 % en peso. Alternativamente, la presente composición podría estar presente como polvo. En dichas composiciones de concentrado o polvo seco, el contenido de antocianinas puede estar preferiblemente en el intervalo de 1-10 % en peso, más preferentemente 2-5 % en peso, en función del peso total de la composición.
El contenido de materia seca de una muestra puede determinarse pesando con precisión 1-2 g de la muestra en forma líquida o de polvo y ponerlo en un recipiente de porcelana seca, almacenando el recipiente en un horno seco a 110 °C durante 2 h (polvos) o 3 h (líquidos), enfriando la muestra en un desecador y pesándolo de nuevo. El contenido de<materia seca (% en peso) es>100<x (peso de muestra tras el secado/peso de muestra pesada en el recipiente).>
Preferiblemente, la presente composición está presente en forma de un concentrado que presenta un grado Brix de 20-80, preferiblemente 25-75 y especialmente preferido 30-70.
Además, en los casos en los que un extracto vegetal contiene las antocianinas, las antocianinas aciladas y/o las antocianinas aciladas por el ácido hidroxicinámico en cantidades insuficientes, los intervalos respectivos de la invención como se definió anteriormente podrían lograrse eliminando selectivamente los componentes indeseables de antocianinas. Esto puede lograrse mediante técnicas comúnmente conocidas, tales como métodos cromatográficos también conocidos por el experto en el campo técnico actual. Adicional o alternativamente, los compuestos que falten (agotados) se pueden añadir en las cantidades necesarias.
Cabe señalar que los azúcares para formar glicósidos de antocianina así como los ácidos carboxílicos que forman antocianinas aciladas que se han mencionado anteriormente representan solo ejemplos y ejemplos preferidos, mientras que la presente invención no está restringida a estos azúcares y/o ácidos carboxílicos.
La presente composición colorante tiene un tono de color rojo-naranja que tiene un intervalo de valor de tono en el sistema de color CIELAB L*C*h* en el intervalo de 15-25, cuando se mide a un valor L* de (70,0 ± 0,1) en un tampón de citrato trisódico dihidratado 0,1 mol/l a pH 3 en una celda de cuarzo de 1 cm de longitud usando el spectra flash 650 (color de datos, en modo de transmisión bajo iluminante D65 a 10 grados).
Se observa que este intervalo de color se sabe conseguir usando extractos de rábano rojo. Sin embargo, como se discutió en detalle anteriormente, los extractos de antocianinas de rábano rojo muestran generalmente un sabor desagradable resultado de la presencia de compuestos que contienen azufre en el rábano rojo, de modo que estos extractos colorantes normalmente no son adecuados como colorantes alimenticios en ninguna aplicación, y especialmente para colorear bebidas y ciertos alimentos tales como crema helada, lácteos y dulces.
Por este motivo, y en una realización específica, las composiciones obtenidas a partir de extractos de rábano rojo se excluyen de la presente invención.
Además, debe mencionarse que los extractos de rábano rojo no contienen cantidades detectables de antocianinas basadas en peonidina. Por lo tanto, en una realización preferida, el 4-15 % en moles de todas las antocianinas de la composición son antocianinas basadas en peonidina.
La acilación de antocianinas por al menos un ácido orgánico o al menos un ácido fenólico (preferiblemente por al menos un ácido fenólico) así como la acilación específica por ácido hidroxicinámico según lo requiera la presente invención pueden estar presentes en antocianinas basadas en pelargonidina así como también en otras antocianinas presentes además del 50-90 % en moles de antocianinas basadas en pelargonidina. Sin embargo, preferiblemente, las acilaciones están predominantemente presentes en las antocianinas basadas en pelargonidina, y preferiblemente al menos el 80 % en moles, más preferiblemente al menos el 85 % en moles de todas las antocianinas basadas en pelargonidina presentes en la composición están aciladas. Como límite superior, es posible el 100 % y se incluye dentro del alcance de la presente invención. Sin embargo, por motivos prácticos, otros límites superiores alternativos son 99 % en moles, 97 % en moles o 95 % en moles.
Además, también la acilación con ácido hidroxicinámico está predominantemente presente en las antocianinas basadas en pelargonidina, y preferiblemente 15-95 % en moles o 25-90 % en moles de las antocianinas basadas en pelargonidina presentes en la presente composición están aciladas por al menos un ácido hidroxicinámico.
Las antocianinas basadas en pelargonidina en la presente composición incluyen uno o ambos de los siguientes<derivados de pelargonidina (>1<) y (>2<):>
Según una realización preferida de la presente invención, la cantidad de derivado de pelargonidina (1), basada en la cantidad total de antocianinas presentes en la composición, es 5-55 % en moles, más preferiblemente 10-50 % en moles, incluso más preferiblemente 15-45 % en moles, aún más preferiblemente 20-40 % en moles y de manera especialmente preferible 25-35 % en moles.
Similarmente, el contenido de derivado de pelargonidina (2), basado en la cantidad total de antocianinas presentes en la composición, es preferiblemente 3-60 % en moles, más preferiblemente 5-58 % en moles, incluso más preferiblemente 8-56 % en moles, aún más preferiblemente 13-54 % en moles y de manera especialmente preferible 18-52 % en moles o 23-50 % en moles.
En las definiciones anteriores se prefieren más los valores más altos de los límites inferiores por la razón de que se logran las composiciones colorantes que tienen propiedades colorantes mejoradas. Los valores más bajos de los límites superiores no son específicamente preferibles sobre los límites superiores más altos en términos de propiedades colorantes, sino por ser más fáciles de conseguir en la práctica a partir de extractos naturales de plantas y, por lo tanto, pueden preferirse por razones comerciales.
Como ya se ha mencionado, la presente composición colorante proporciona una composición de coloración rojonaranja estable y brillante, que es especialmente adecuada para la coloración de alimentos, y especialmente para colorear bebidas, preparaciones alimenticias, lácteos, crema helada y dulces. Debido a la falta de regustos y aromas desagradables, por ejemplo, sabores desagradables y aromas desagradables vinculados a la presencia de compuestos de azufre, la presente composición colorante también puede usarse para composiciones alimenticias sensibles a la coloración tales como bebidas, lácteos, crema helada y dulces sin efecto negativo sobre el aroma general y el sabor del mismo.
La presente composición puede, en principio, estar hecha de compuestos de antocianinas puras, puede estar compuesta por extractos de diferentes variedades de plantas, o puede obtenerse extrayendo una única variedad de plantas y, si es necesario, refinando al extracto obtenido. Por supuesto, una fuente preferida de la presente composición sería una variedad de plantas cuyo extracto puede usarse directamente como una composición de la presente invención.
Ejemplos de fuentes adecuadas son la aronia, el arándano, la zanahoria negra, la grosella negra, el arándano, la cereza, el saúco, el hibisco, el arándano rojo, el maíz morado, la uva roja, la col roja, la batata morada y la batata roja, y un ejemplo preferido es la variedad roja de batataIpomoea batatas (L.) Lam(denominada a partir de ahora en la presente memoria como RSWP). Por lo tanto, preferiblemente la presente composición se puede obtener de zumos o extractos de RSWP, que incluyen ambas composiciones que consisten en o que comprenden principalmente zumos o extractos de RSWP.
A continuación, la presente invención se describirá mediante ejemplos y ejemplos comparativos sin limitarse a los mismos.
Breve descripción de las figuras
Fig. 1 Perfil cromatográfico (superior) a 520 nm y huella digital de masa (inferior) de antocianinas de batata roja.
Fig. 2 Espectros de UV-visible de las dos principales antocianinas aisladas de extracto de batata roja.
Fig. 3 Estructura de la antocianina 1.
Fig. 4 Estructura de la antocianina 2.
Fig. 5 Evolución del DE* 2000 durante el almacenamiento de 2 meses de un modelo de medio de bebida coloreado en cámara frigorífica.
Fig. 6 Evolución del DE* 2000 durante el almacenamiento de 2 meses de un modelo de medio de bebida coloreado bajo exposición a la luz.
Fig. 7 Evolución del DE* 2000 durante el almacenamiento de 2 meses de un modelo de medio de bebida coloreado bajo exposición al calor.
Fig. 8 Evolución del DE* 2000 durante el almacenamiento de 2 meses de un modelo de medio de bebida coloreado que contiene ácido ascórbico en cámara frigorífica.
Fig. 9 Evolución del DE* 2000 durante el almacenamiento de 2 meses de un modelo de medio de bebida coloreado que contiene ácido ascórbico bajo exposición a la luz.
Fig. 10 Evolución del DE* 2000 durante el almacenamiento de 2 meses de un modelo de medio de bebida coloreado que contiene ácido ascórbico bajo exposición al calor.
Fig.11 Evolución del DE* 2000 durante el almacenamiento de 2 semanas de una preparación de fruta/mezclas de masa blanca en cámara frigorífica a 4 °C.
Fig. 12 Evolución DE DE* 2000 durante el almacenamiento de 1 mes de la preparación de fruta coloreada.
Ejemplos
Como un ejemplo ilustrativo de un colorante de la invención y un procedimiento para su preparación, se describirá la extracción y caracterización de antocianinas de Batata roja (RSWP), es decir, la variedad rojaIpomoea batatas (L.) Lam.
Como referencia, en el presente documento se ha utilizado ácido carmínico en algunos casos, ya que obtiene un tono naranja muy estable cuando se añade a bebidas y, por lo tanto, puede verse como un colorante de referencia en al menos este campo de aplicación. Sin embargo, las concentraciones legalmente admisibles del ácido carmínico en bebidas son demasiado bajas para lograr los tonos de color que se pueden lograr con las antocianinas, y especialmente como se pueden lograr con la composición de la presente invención. Por lo tanto, aunque una comparación con ácido carmínico en los tonos de color previstos podría mostrar una estabilidad superior del ácido carmínico, dicha realización sería inadecuada en la práctica debido a niveles inadmisiblemente altos de ácido carmínico. Por lo tanto, se ha usado ácido carmínico únicamente como referencia, a fines comparativos se han seleccionado las antocianinas conocidas.
Ejemplo 1
Caracterización de las principales antocianinas de RSWP
A) Extracción
Un concentrado de RSWP se preparó cortando los tubérculos de RSWP en rodajas y “lavándolos” 4 veces con agua acidificada para llevar a cabo una extracción, y a continuación sometiendo el extracto obtenido a microfiltración y posterior purificación en una resina absorbente. El extracto de antocianina resultante se concentró y se pasteurizó a continuación.
Las antocianinas se aislaron y concentraron en un cartucho Sep-Pak C18 (Waters®). El cartucho se lavó con 2 ml de metanol y a continuación con 2 ml de agua acidificada (HCl al 0,3 %) antes de agregar unas gotas de concentrado de RSWP. Una vez lavado el cartucho con 4 ml de agua acidificada (HCl al 0,3 %), y luego con 2 ml de acetato de etilo, se eluyeron finalmente las antocianinas con un volumen mínimo de metanol acidificado (HCl al 0,1 %).
B) Análisis
Se analizó el extracto de antocianina mediante HPLC rápida/ESI-TI. Se obtuvo la separación a 30 °C usando una columna BEH (Waters®) C18 (50 mm x 2,1 mm, 1,8 |jm), inyectando 1 j l del extracto filtrado. La fase móvil consistió en dos disolventes: A, agua/acetonitrilo/HCOOH (95,7/3,3/1, v/v/v) y B, agua/acetonitrilo/HCOOH (44/55/1, v/v/v) con un caudal de 0,8 ml/min. El gradiente utilizado fue el siguiente:
Se realizaron los análisis de espectrometría de masas en un Bruker Daltonics HCT Ultra, funcionando en el modo de ionización mediante electropulverización positiva. El software seleccionó automáticamente los iones a fragmentar en<la MS>2<o MS>3<Se obtiene la fragmentación mediante un cribado de potencia que determina la potencia mínima>necesaria para romper los enlaces.
C) Resultados y discusión
En la Figura 1 se presenta el perfil cromatográfico de las antocianinas de RSWP. Este perfil refleja la presencia de dos picos principales, eluidos en 28,8 y 37,6 min, y otras numerosas antocianinas en baja cantidad. Usando datos de espectrometría de masas, se caracterizaron once compuestos diferentes; en la Tabla 1 se presentan su longitud de onda de absorción máxima y sus fragmentaciones de masa. Se realizó un intento de identificación del núcleo de antocianina de cada compuesto, que muestra una mayoría de pigmentos derivados de pelargonidina en RSWP. La espectrometría de masas reveló la presencia de dos antocianinas diferentes bajo el pico principal, estando compuesto este pico principalmente del compuesto basado en pelargonidina (m/z 877).
Esta primera caracterización de las antocianinas de RSWP mostró la presencia de dos antocianinas principales a las que se hace referencia en el presente documento comoAntocianina 1yAntocianina 2,respectivamente. Estos compuestos tienen un peso molecular de 877 y 1039 g/mol y están ambos basados en pelargonidina. En la Tabla 1 se muestran sus características, junto con otras antocianinas basadas en pelargonidina que se encuentran en cantidades menores en RSWP.
Tabla 1
Basándose en las áreas de los picos visibles en la Figura 1, se descubrió que el contenido de antocianinas basadas en pelargonidina presentes en el extracto era de aproximadamente 58 % en moles. Se estimó que la cantidad deAntocianina 1yAntocianina 2,basada en todas las antocianinas era del 46,1 % en moles.
Ejemplo 2
Extracción y aislamiento de las principales antocianinas
<Se extrajo un extracto concentrado de RSWP a>8<CU/kg usando acetato de etilo para eliminar los compuestos fenólicos>excepto las antocianinas. Se diluyó un volumen de 30 ml de extracto concentrado en 270 ml de agua acidificada (pH 3) y luego se lavó tres veces con 300 ml de acetato de etilo. La fase acuosa se concentró al vacío.
El extracto de antocianina obtenido se purificó en una columna Sephadex LH20 (400 mm x 260 mm, Pharmacia), eluyéndose con ácido acético/agua (4,6:100, v/v) a un caudal de 16 ml/h. Se recogieron dos bandas de color rojo. Todas las fracciones recogidas se analizaron mediante HPLC y se agruparon las fracciones de alta pureza (> 85 %). Se llevó a cabo la HPLC analítica utilizando una columna LiChosorb RP-18 (250 mm x 4,6 mm, 5,0 pm) inyectando 10 pl de los extractos filtrados. Se usó una combinación de dos disolventes para la elución: A, agua/HCOOH/acetonitrilo (87/10/3, v/v/v) y B, agua/HCOOH/acetonitrilo (40/10/50, v/v/v). El flujo de la columna se ajustó a 0,8 ml/min y la temperatura de la columna a 30 °C. El gradiente utilizado fue como se resume a continuación:
Las fracciones que contenían alta pureza de una de las dos antocianinas de interés se agruparon y a continuación se concentraron al vacío antes de la liofilización. Los polvos de cada antocianina se analizaron mediante RMN.
Ejemplo 3
Análisis de RMN
A) Métodos
Se obtuvieron los experimentos de RMN (1H, COSY, ROESY, HSQC, HSQC-TOCSY, HMBC,13C) a 600,13 MHz en un instrumento BRUKER Avance II 600 provisto de una CryoProbe TCI 1H-13C/15N a 27 °C. Las muestras secas se solubilizaron en 500 j l en DMSO-d6-TFA-d 99,99 % 90:10.
B) Resultados y discusión
Se aislaron las antocianinas 1 y 2 en cantidades suficientes para su caracterización por RMN. Se identificaron sus estructuras mediante espectroscopia de RMN de 1H y 13C en DMSO/TFA (90:10). Las Tablas 2 y 3 muestran la asignación de 1H y 13C y las correlaciones HSQC y TOCSY de laAntocianina 1y laAntocianina2, respectivamente. En la misma,n.r.= no resuelto, s = singlete,d= doblete yt= triplete.
Tabla 2: Antocianina 1
Tabla 2: Antocianina 1
Tabla 3: Antocianina 2
A partir de los datos anteriores, se identificó laAntocianina 1como pelargonidina 3-O-(2-O-(6-O-para-hidroxibenzoilglucopiranosil)-glucopiranósido)-5-O-glucopiranósido:
Del mismo modo, laAntocianina 2fue identificada como pelargonidina 3-O-(2-O-(6-O-para-hidroxibenzoilglucopiranosN)-6-O-trans-cafeoil-glucopiranósido)-5-O-glucopiranósido:
Estas estructuras concuerdan con los datos de espectrometría de masas y los espectros UV-visibles analizados anteriormente.
Ejemplo 4
Tono y estabilidad del líquido a granel preparado a partir de RSWP
Se evalúa el concentrado líquido de RSWP para determinar su tono frente a otras antocianinas de referencia y la estabilidad durante el almacenamiento en frío.
A) Preparación del concentrado de RSWP
Los tubérculos cortados se agotaron mediante extracciones con agua acidificada. Tras la etapa de clarificación, el filtrado se purificó con una resina absorbente. La concentración final conduce a un producto a 65° Brix.
B) Evaluación del color y prueba de estabilidad
Se evaluó el tono transmitido por el concentrado de RSWP frente a otra antocianina de referencia, el rábano rojo, que tiene un tono similar pero que presenta regustos desagradables (compuestos de azufre).
<Las muestras de concentrado líquido se almacenaron en una cámara frigorífica a 4-8 °C durante>6<meses, incluida>una evaluación analítica regular. Las muestras se desecharon después de cada evaluación. Se evaluó la estabilidad a granel mediante mediciones espectrofotométricas y colorimétricas, turbidez y cantidad de lodos.
Las mediciones espectrofotométricas se realizaron en una celda de cuarzo de 1 cm de longitud en un tampón a pH 3<usando el espectrofotómetro HP8354. El concentrado de batata roja se caracterizó por la intensidad del E>3<(expresada>en unidades de color/kg).
Las mediciones colorimétricas se realizaron en una celda de cuarzo de 1 cm de longitud en un tampón a pH 3 usando Spectraflash 650 (Datacolor) en modo de transmisión bajo el iluminante D65 a 10 grados. Se midió la turbidez en un turbidímetro VWR.
C) Resultados
La Tabla 4 proporciona parámetros de color comparativos del concentrado de RSWP y polvo de rábano rojo, y la Tabla 5 muestra la estabilidad durante el almacenamiento en frío del concentrado de RSWP.
Tabla 4:
El concentrado de RSWP presenta un brillo similar al del rábano rojo puro pero su tono es más rojo-naranja.
Tabla 5
El concentrado de RSWP mantenido en condiciones de frío es altamente estable considerando el color, así como los parámetros fisicoquímicos.
Ejemplo 5
Estabilidad en la aplicación a bebidas de un colorante elaborado a partir de RSWP
Se evalúa el concentrado de RSWP en un modelo de un medio de bebida sometido a una etapa de pasteurización para determinar estabilidades en frío, calor y a la luz frente a dos referencias estándar que tienen tonos similares y se utilizan en esta solicitud.
A) Preparación de un modelo de un medio de bebida coloreado
El modelo de medio de bebida se preparó según la siguiente receta.
Sacarosa 43,00 %
Sorbato de potasio 0,09 %
Benzoato de sodio 0,07 %
Ácido cítrico anhidro 0,86 %
AguaMilli Q55,98 %
Se obtuvo un concentrado de bebida suave alrededor de 40° Brix y se diluyó adicionalmente con aguaMilli Qhasta 11° Brix. El pH se ajustó finalmente a 3,0 ± 0,2 con ácido cítrico.
Como colorante se añadió concentrado de RSWP al 0,22 % directamente en el modelo de medio de bebida. Como comparación, se utilizó una mezcla de antocianinas de rábano rojo/zanahoria negra (denominada a partir de ahora en el presente documento rr/bc) al 0,13 % y con básicamente el mismo tono de color. Como referencia (DE* 2000 = 0) se usó 8,2 % en peso de ácido carmínico en una cantidad de 0,4 % en peso
T ras someterlas a una etapa de pasteurización (denominada HT) a 92 °C durante 40 segundos, las bebidas coloreadas se vertieron en botellas de PET y luego se almacenaron en las siguientes condiciones:
Para determinar la exposición a la luz diurna, temperatura ambiente
estabilidad a la luz:
Para determinar la en una incubadora de aglutinante a 40 °C, 65 % de
estabilidad al calor: HR
Para establecer el en una cámara frigorífica a 4 °C en la oscuridad almacenamiento de
referencia:
Se realizó el seguimiento colorimétrico cada semana durante un mes y luego después de un almacenamiento de 2 meses. Las mediciones se realizaron directamente en las botellas de PET usando Spectraflash 650 (Datacolor) en modo de transmisión bajo el iluminante D65 a 10 grados.
Resultados
La Tabla 6 resume los tonos del modelo de un medio de bebida coloreado con RSWP o las referencias en el día 0. Tabla 6
La bebida coloreada con RSWP es ligeramente más mate que la coloreada con ácido carmínico pero es más brillante que la bebida coloreada con rr/bc. Los tonos provocados por el concentrado de RSWP y la comparación (rr/bc) y la referencia (ácido carmínico) son similares.
La Tabla 7 muestra la estabilidad al color tras la pasteurización (HT) del modelo de un medio de bebida coloreado con RSWP o rr/bc.
Tabla 7
La bebida coloreada con RSWP es más estable a través de la pasteurización en comparación con la bebida coloreada con rr/bc. Sin embargo, permanece ligeramente más sensible que una bebida coloreada con ácido carmínico.
La Figura 5 muestra la evolución de DE* 2000 a lo largo de un almacenamiento de 2 meses del modelo de medio de bebida coloreado en cámara frigorífica.
Las bebidas coloreadas con ácido carmínico, RSWP o rr/bc, respectivamente, presentan estabilidades similares en el almacenamiento en frío. La evolución de la coloración no se detecta visualmente independientemente de la referencia de color.
En las Figuras 6 y 7, se muestra respectivamente la evolución de DE* 2000 durante el almacenamiento de 2 meses de un modelo de medio de bebida coloreado bajo (i) exposición a la luz y (ii) exposición al calor.
La bebida coloreada con RSWP es tan estable como la coloreada con ácido carmínico tras la exposición a la luz de 2 meses (no se detecta ningún cambio visual de tono en ambos casos) y es mucho más estable en ambos ensayos que una bebida coloreada con rr/bc, que experimenta una amplia evolución de la coloración.
Ejemplo 6
Impacto del ácido ascórbico sobre la estabilidad del color de una bebida coloreada con extracto de RSWP
A) Datos experimentales
El concentrado de RSWP se evalúa en un modelo de un medio de bebida que contiene ácido ascórbico para determinar las estabilidades al frío, al calor y a la luz frente a una referencia estándar que tiene un tono similar.
Se usó el modelo de medio de bebida preparado en el Ejemplo 5, excepto que se añadieron 250 ppm de ácido ascórbico antes del ajuste final del pH a 3,0 ± 0,2 con ácido cítrico.
Se añadieron los colores de la misma manera que se describe en el Ejemplo 5 y, a continuación, las bebidas coloreadas se vertieron en botellas de PET y se almacenaron en las condiciones definidas en el Ejemplo 5. Los seguimiento colorimétricos y las mediciones también se realizaron después como se define en el Ejemplo 5.
B) Resultados
La Figura 8 muestra la evolución de DE* 2000 a lo largo de un almacenamiento de 2 meses del modelo de medio de bebida coloreado en cámara frigorífica.
Las bebidas coloreadas con ácido carmínico, RSWP o rr/bc, respectivamente, presentan estabilidades similares en el almacenamiento en frío. La evolución de la coloración no se detecta visualmente independientemente de la referencia de color.
En las Figuras 9 y 10 se muestra respectivamente la evolución de DE* 2000 durante el almacenamiento de 2 meses de un modelo de medio de bebida coloreado bajo (i) exposición a la luz y (ii) exposición al calor.
La bebida coloreada con RSWP es tan estable como la coloreada con ácido carmínico tras 2 meses de exposición a la luz en presencia de ácido ascórbico y el cambio de tonalidad es limitado. Por el contrario, las bebidas coloreadas con rr/bc presentan una estabilidad mucho menor a la exposición a la luz en presencia de ácido ascórbico.
Asimismo, la bebida coloreada con RSWP, aunque presenta una estabilidad aún no óptima como el ácido carmínico, proporciona una gran mejora con respecto al rr/bc, teniendo en cuenta la evolución de la tonalidad asociada al uso de este colorante comparativo tradicional.
Ejemplo 7
Estabilidad del color de un preparado de fruta coloreada con RSWP
Se evalúa el concentrado de RSWP en una aplicación de preparado de fruta para determinar las estabilidades durante el almacenamiento del propio preparado de fruta y el almacenamiento de una mezcla de preparado de fruta/masa blanca frente una referencia estándar que se utiliza en esta solicitud. Se describen también las estabilidades comparadas con la etapa de pasteurización de las mezclas del preparado de fruta/masa blanca.
A) Ingredientes y proceso
El preparado del modelo de fruta es un preparado de fruta de fresa a pH 3,82 y 40,3°Brix. Se añadieron los colores directamente al preparado de fruta a las siguientes dosis:
Concentrado de RSWP al 0,9 %
Laca de carmín solubilizada al 0,56 %
El modelo de masa blanca es un producto comercial que contiene 3,5 % de grasa.
El preparado de fruta coloreado se incorporó en la masa blanca a una relación en peso de 15/85 y la mezcla se pasteurizó adicionalmente a 90 °C durante 5 minutos.
B) Evaluación de la estabilidad
Los preparados de fruta coloreados se almacenaron durante un mes a 10 °C y las mezclas del preparado de fruta/masa blanca se almacenaron durante 14 días en una cámara frigorífica a 4 °C en la oscuridad.
Se realizó el seguimiento colorimétrico cada semana durante dos semanas para las mezclas del preparado de fruta/masa blanca, y después de un almacenamiento de un mes para los preparados de fruta solos. Se realizaron las mediciones en placas Petri utilizando Datacolor SF 450 en modo de reflexión.
C) Resultados
La Tabla 8 resume los tonos de las mezclas del preparado de fruta/masa blanca coloreado con RSWP o la laca de carmín de referencia el día 0 antes de la etapa de pasteurización.
Tabla 8
La mezcla coloreada con RSWP es más apagada y anaranjada que la coloreada con la laca de carmín.
La Tabla 9 muestra la estabilidad de las mezclas del preparado de fruta/masa blanca coloreado con RSWP o el carmín de referencia durante la etapa de pasteurización.
Tabla 9
La mezcla del preparado de fruta/masa blanca coloreado con concentrado de RSWP es mucho más estable a lo largo de la pasteurización en comparación con la mezcla coloreada con laca de carmín y la variación de tono es aceptable (DE* 2000 por debajo de 2). Esto implica que la diferencia de tono entre las dos mezclas de preparado de fruta/masa blanca se reduce después de la pasteurización (DE* 2000 = 2,04).
La Figura 11 muestra la evolución de DE* 2000 durante el almacenamiento de 2 semanas de las mezclas del preparado de fruta/masa blanca en la cámara frigorífica a 4 °C.
La mezcla del preparado de fruta/masa blanca coloreado con concentrado de RSWP es menos estable en comparación con el coloreado con laca de carmín en almacenamiento en frío. El desarrollo del tono es detectable visualmente en el primer caso, pero se considera como aceptable en base al valor de DE 2000 por debajo de 2.
La Figura 12 muestra la evolución de DE* 2000 durante el almacenamiento de 1 mes del preparado de fruta coloreado.
El preparado de fruta coloreado con concentrado de RSWP es casi tan estable como el coloreado con ácido carmínico después de un almacenamiento en frío de 1 mes a 10 °C y no se detecta ningún cambio visual de tono en ambos casos.
Claims (1)
- REIVINDICACIONES Una composición que es una composición colorante basada en antocianinas, que comprende 50-90 % en moles, basado en la cantidad total de antocianinas, de antocianinas basadas en pelargonidina, y en donde (i) > 70 % en moles de todas las antocianinas está acilada con al menos un ácido benzoico; y (ii) > 20 % en moles de todas las antocianinas está acilada con al menos un ácido hidroxicinámico; en donde la composición tiene un color rojo con un valor de tono H en el sistema de color L*C*h* en el intervalo de 10-30, medido para un valor L* de (70,0 ± 0,1) en un tampón de citrato trisódico dihidratado de 0,1 mol/l a pH 3 en una celda de cuarzo de 1 cm de longitud usando Spectraflash 650 (Datacolor) en modo de transmisión bajo iluminante D65 a 10 grados, en donde la composición no contiene o solo contiene cantidades traza de compuestos de azufre, en donde la composición comprende, en función de la cantidad total de antocianinas, 5-55 % en moles de un derivado de pelargonidina acilado (1) de la siguiente fórmula (mostrada en la forma protonizada y por lo tanto con carga positiva):en donde la composición comprende, en función de la cantidad total de antocianinas, 3-60 % en moles de un derivado de pelargonidina acilado (2) de la siguiente fórmula (mostrada en la forma protonizada y por lo tanto con carga positiva):La composición de la reivindicación 1, en donde 4-15 % en moles de todas las antocianinas son antocianinas basadas en peonidina. La composición de cualquiera de las reivindicaciones 1-2, en donde > 80 % en moles, preferiblemente > 85 % en moles y más preferiblemente > 90 % en moles de todas las antocianinas está acilada con al menos un ácido benzoico. La composición de cualquiera de las reivindicaciones 1-3, en donde hasta 80 % en moles, preferiblemente 25-75 % en moles, más preferiblemente 30-70 % en moles y especialmente preferiblemente 35-65 % en moles de todas las antocianinas está acilada con al menos un ácido hidroxicinámico 5. La composición de cualquiera de las reivindicaciones 1-4, que tiene un valor de tono de color H en el intervalo de 13-27 y preferiblemente 18-24. 6. La composición de la reivindicación 5, en donde el contenido del derivado de pelargonidina (1) es 10-50 % en moles, preferiblemente 15-45 % en moles, más preferiblemente 20-40 % en moles, e incluso más preferido 25-35 % en moles. 7. La composición de la reivindicación 6, en donde el contenido del derivado de pelargonidina (2) es 5-58 % en moles, preferiblemente 8-56 % en moles, más preferiblemente 13-54 % en moles, incluso más preferiblemente 18-52 % en moles y especialmente preferiblemente 23-50 % en moles. 8. La composición de cualquiera de las reivindicaciones 1-7, que tiene un contenido de antocianina, en términos de equivalentes de kuromanina, de 2-30 mg/ml, preferiblemente 5-25 mg/ml, más preferido 8-21 mg/ml y especialmente preferido 10-18 mg/ml para un colorante a 40-60 % de materia seca. 9. La composición de cualquiera de las reivindicaciones 1-8, que está presente en forma de un concentrado que tiene un contenido de materia seca de 10-95 % en peso, preferiblemente 15-85 % en peso y más preferiblemente 20-60 % en peso 10. El uso de la composición de cualquiera de las reivindicaciones 1-9 como colorante alimenticio. 11. El uso de la reivindicación 10, en donde el alimento se selecciona de bebidas, preparaciones de frutas, lácteos, crema helada y dulces, y preferiblemente es una bebida.
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