ES3026739T3 - Method of providing seedstocks of sphagnum - Google Patents
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Abstract
La presente invención se refiere a un método para obtener una reserva de semillas de Sphagnum. El método comprende proporcionar Sphagnum in vitro, aplicarlo a una superficie de crecimiento y cultivarlo in vivo sobre dicha superficie. El método también comprende cosechar el Sphagnum cultivado de la superficie de crecimiento y, posteriormente, trozarlo para obtener una reserva de semillas de Sphagnum para cultivo. Esta reserva comprende varios fragmentos de Sphagnum in vivo. La presente invención también se refiere a Sphagnum y a las reservas de semillas de Sphagnum que se pueden obtener mediante el método. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)
Description
DESCRIPCIÓN
Procedimiento de suministro de material de siembra deSphagnum(esfagno)
[0001] La presente descripción se refiere aSphagnum,en particular a procedimientos para proporcionar un material de siembra deSphagnum.
[0002]Sphagnumes un género de musgo. Es una planta inferior, o una planta no vascular, y es un ejemplo de una briofita. A menudo se conoce como musgo de turba y generalmente crece en la naturaleza en turberas o humedales. Ejemplos de hábitats adecuados paraSphagnumincluyen ciénagas, como ciénagas elevadas y ciénagas de cobertura, pantanos, páramos y marjales.Sphagnumtiene una capacidad particularmente alta para mantener el agua en sus células hialinas. Como tal, en su entorno natural, elSphagnumgeneralmente crece en condiciones húmedas, como en las turberas.
[0003] Las turberas de todo el mundo se forman cuando las capas inferiores deSphagnumse descomponen para formar turba, mientras que la capa superior continúa creciendo en la superficie. Como resultado de esto, el carbono se almacena dentro de la turba mientras que elSphagnumsuperior en crecimiento activo continúa secuestrando el dióxido de carbono de la atmósfera. Las turberas cubren aproximadamente el 3 % de la tierra en la superficie de la Tierra, pero almacenan más de 500 gigatoneladas de carbono, más que todos los demás tipos de vegetación combinados. Sin embargo, debido a los impactos adversos en las turberas (por ejemplo, contaminación industrial, drenaje, particularmente para la agricultura y la recogida de turba), elSphagnumsuperior en crecimiento activo se ha erosionado (o ahora está ausente) en muchas turberas, exponiendo así la turba a la atmósfera. Esta ausencia deSphagnumsuperficial permite que el carbono se libere de la turbera. Este es un problema ambiental apremiante, y las turberas dañadas ahora contribuyen con alrededor del 6 % de las emisiones antropogénicas de dióxido de carbono a nivel mundial. Como resultado, existe una necesidad apremiante de restauración efectiva de turberas y procedimientos para cultivarSphagnumde manera efectiva con fines de restauración. Los procedimientos convencionales de restauración de turberas generalmente implican la translocación deSphagnumdesde otros sitios, incluidas las turberas, lo que claramente no es sostenible.
[0004] La turba también se utiliza como medio de cultivo hortícola. A medida que esta turba se recoge de la naturaleza, esto daña las turberas y, en última instancia, exacerba las emisiones de carbono. Existe una creciente demanda de alternativas a la turba en los medios de cultivo, y el propioSphagnumse ha identificado como una alternativa clave a la turba. Por lo tanto, existe la necesidad de un procedimiento eficaz de cultivo deSphagnumcon fines de recogida, tal como para medios de cultivo.
[0005] A diferencia de las plantas superiores o las plantas vasculares,Sphagnumno tiene raíces. Esto tiene varias implicaciones, una de las cuales es que el agua no se absorbe principalmente desde abajo (por ejemplo, desde las raíces), sino que se absorbe a través del cuerpo principal de la planta, como el tallo, las hojas o las ramas.Sphagnumse propaga principalmente a partir de nuevas ramificaciones llamadas innovaciones. Como se usa en esta invención, el término "innovación" puede denominarse de otra manera como un "punto de crecimiento". Una planta individual deSphagnumcrece en una hebra. Una hebra deSphagnumcomprende un tallo con pequeñas hojas dispuestas intermitentemente a lo largo de la longitud del tallo. La hebra también comprende ramas más grandes que ramifican desde el tallo. En la parte superior del tallo, la hebra comprende un capitulum que es una cabeza de nuevas innovaciones. El capitulum es el punto de crecimiento primario deSphagnum.Debido a esto, el agua se desea principalmente en la parte superior deSphagnum,lo que hace un buen uso de la recolección de agua, por ejemplo, de la lluvia o el riego desde arriba.Sphagnumtambién puede comprender innovaciones donde las ramas brotan del tallo principal. Las innovaciones pueden eventualmente dar como resultado nuevos tallos que se desprenden del tallo original para formar una nueva hebra deSphagnum.Múltiples hebras deSphagnumjuntas crecen como un pequeño montículo(hummock).La creación de nuevas hebras es el resultado de la reproducción vegetativa deSphagnum,y permite queSphagnumcrezca en alfombras que cubren una superficie.Sphagnumtambién puede reproducirse a través de esporas, pero la abundancia de esporas deSphagnuma menudo es muy baja en la naturaleza, y en la mayoría de los sitios la reproducción a través de esporas es limitada, y en cualquier caso se limita a una ventana de tiempo específica y estrecha en el año. Como tal, la reproducción vegetativa a menudo domina.
[0006] Otra propiedad deSphagnumresultante de su falta de raíces es que no se puede plantar de manera convencional. Los procedimientos típicos de aplicación deSphagnuma una superficie implican enterrar parcialmente un grumo deSphagnum,tal como en la maleza de una turbera. Proporcionar grumos deSphagnumda como resultado una cobertura no uniforme deSphagnumen las áreas discretas de los grumos, y requiere una gran cantidad de material de partida que puede ser costoso, especialmente si se desea un alto grado de cobertura inicial. Como elSphagnuma menudo se transloca de otras fuentes silvestres, el uso de una gran cantidad de material de partida es, por supuesto, perjudicial para el medio ambiente. Cuando es posible una producción sostenible deSphagnum,por ejemplo, a través del cultivo de tejidos, se puede mitigar el daño al medio ambiente, pero el costo de proporcionar una gran cantidad inicial de material de partida puede ser costoso, y a menudo prohibitivo.
[0007] Otros procedimientos de aplicación deSphagnumincluyen la dispersión de hebras deSphagnumen una superficie, como una turbera expuesta para restauración. Tales procedimientos son ineficaces ya que las hebras no están sujetas al suelo, a menudo se secan antes de establecerse y anclarse, y desaparecen con el viento o la lluvia, ambos factores particularmente significativos en las turberas.
[0008] La presente descripción busca abordar uno o más de los problemas anteriores.
[0009] El documento CN103609443 A describe un procedimiento para obtener y cultivar protonema deSphagnum.
[0010] El documento JP2007129912 A describe una unidad para cultivar musgo de turba estructurada de modo que los cuerpos de las plantas de musgo de turba, el agua y el gas que contienen dióxido de carbono coexistan en un espacio que incluye una parte de pared externa o la totalidad de la cual permite la transmisión de luz desde el exterior, y sustancialmente llena de vapor.
[0011] La propagación de Sphagnum a partir de material vegetativo en cultivo de tejidos estériles y la introducción de musgos juveniles en el campo se describe en "Sphagnum restoration on degraded blanket and raised bogs in the UK using micropropagated source material: a review of progress", S.J.M Caporn y Al., publicado en "Mires and peat", Volumen 20 (2017/18), Artículo 09, págs. 1 -17 (doi: 10.19189/ MaP.2017.OMB.306).
[0012] El documento GB2478353 A describe técnicas de restauración donde se recoge Sphagnum silvestre de un sitio donante y se planta en un sitio receptor.
[0013] En las reivindicaciones independientes se establecen aspectos de la invención y en las reivindicaciones dependientes se establecen características preferidas.
[0014] Según un primer ejemplo de la presente descripción, que no se reivindica independientemente, pero puede proporcionarse como parte del procedimiento de la invención reivindicada como se describe en esta invención, se proporciona una suspensión deSphagnum,comprendiendo: una solución fluida comprendiendo: agua; y un agente espesante disuelto en el agua, donde el agente espesante comprende un agente espesante a base de celulosa o a base de almidón; y una pluralidad de fragmentos deSphagnumsuspendidos en la solución.
[0015] En esta solicitud se describe una suspensión deSphagnum,que no se reivindica independientemente, pero puede proporcionarse como parte del procedimiento de la invención reivindicada como se describe en esta invención, comprendiendo: una solución fluida comprendiendo: agua; y un agente espesante a base de celulosa disuelto en el agua; y una pluralidad de fragmentos deSphagnumsuspendidos en la solución.
[0016] En esta solicitud se describe una suspensión deSphagnum,que no se reivindica independientemente, pero puede proporcionarse como parte del procedimiento de la invención reivindicada como se describe en esta invención, comprendiendo: una solución fluida comprendiendo: agua; un agente espesante; y una pluralidad de fragmentos deSphagnumsuspendidos en la solución. Opcionalmente, la suspensión comprende además nutrientes. Opcionalmente, los nutrientes comprenden calcio. Opcionalmente, el agente espesante comprende un agente espesante a base de celulosa. Opcionalmente, el agente espesante comprende un agente espesante a base de almidón.
[0017] Los inventores han desarrollado la suspensión que proporciona un medio para transportarSphagnumpara permitir la propagación efectiva deSphagnumsobre una superficie, por ejemplo, sobre una turbera para restauración o sobre una superficie para propagación, por ejemplo, en un invernadero o en un campo. Opcionalmente, la suspensión es adecuada para recubrir una superficie, en particular una superficie de crecimiento donde se puede cultivarSphagnum.Opcionalmente, elSphagnumen la suspensión es adecuado para el crecimiento. En otras palabras, no está seco ni muerto. Preferentemente, la suspensión no es tóxica para elSphagnum.
[0018] La suspensión comprende una solución fluida. La solución fluida comprende agua. Preferentemente, el agua puede ser agua de lluvia u otra agua baja en sal tal como agua destilada o agua de ósmosis inversa. En otros ejemplos, el agua puede ser agua desionizada o agua limpia de otro modo. Debido a la presencia del agua, la solución puede denominarse como una solución acuosa. La solución fluida es preferentemente un líquido a temperatura ambiente, en particular a 20 °C.
[0019] Preferentemente, la solución fluida es un líquido por encima de 0 °C y por debajo de 50 °C, preferentemente al menos entre 5 °C y 25 °C.
[0020] La solución fluida también comprende un agente espesante. El agente espesante se disuelve en el agua y, por lo tanto, es soluble en agua. El agente espesante actúa para espesar la solución. En otras palabras, el agente espesante aumenta la viscosidad de la solución. Por lo tanto, la viscosidad de la solución es mayor que la del agua líquida sola. Esta solución puede denominarse como una solución fluida espesada o un fluido viscoso. Opcionalmente, la solución fluida puede denominarse como un gel líquido.
[0021] La solución fluida debe diferenciarse de los sólidos donde se añaden cantidades suficientes de agentes espesantes, agentes gelificantes o agentes solidificantes a un líquido de modo que el líquido se convierta en un sólido. En otras palabras, la solución fluida no es un sólido. En un ejemplo, la solución fluida no es un gel sólido. Por el contrario, la solución fluida puede fluir. En particular, la solución fluida puede adoptar la forma de su recipiente, por ejemplo, como un líquido.
[0022] El agente espesante se disuelve en el agua. Esto debe diferenciarse de las situaciones donde un agente espesante se mezcla simplemente con agua. Un ejemplo de esto es cuando el agente espesante comprende un agente espesante a base de almidón. El almidón es insoluble en agua a temperatura ambiente. Por lo tanto, la mera adición de almidón al agua no proporcionará una solución fluida espesada como se describe en esta invención. En cambio, el almidón se puede calentar para disolverse en el agua en un procedimiento denominado gelatinización del almidón, en cuyo punto el almidón actúa para espesar el agua para formar una solución fluida.
[0023] En el primer ejemplo de la presente descripción, el agente espesante comprende un agente espesante a base de celulosa o a base de almidón. Como se usa en esta invención, "a base de celulosa" preferentemente connota un agente espesante comprendiendo celulosa, tal como un compuesto que contiene celulosa. Por ejemplo, el agente espesante contiene celulosa y está hecho de celulosa, pero puede estar formado por otros átomos o moléculas. En otras palabras, el agente espesante puede derivar de celulosa. Un ejemplo de un agente espesante a base de celulosa es la hidroxietilcelulosa. Igualmente, "a base de almidón" connota preferentemente un agente espesante comprendiendo almidón.
[0024] En algunos ejemplos, la suspensión contiene uno o más agentes espesantes. Por ejemplo, la suspensión puede contener un agente espesante a base de celulosa y un agente espesante a base de almidón. En otros ejemplos, el agente espesante puede consistir en un agente espesante particular. Por ejemplo, el agente espesante puede consistir en un agente espesante a base de celulosa. Por ejemplo, el agente espesante puede consistir en un agente espesante a base de almidón.
[0025] Preferentemente, el agente espesante comprende un agente espesante a base de celulosa. El agente espesante a base de celulosa es más preferible al agente espesante a base de almidón. La celulosa es un polisacárido. Es preferible que la celulosa se obtenga de material vegetal.
[0026] Más preferentemente, el agente espesante comprende un éter de celulosa. Incluso más preferentemente, el agente espesante comprende hidroxietilcelulosa. La hidroxietilcelulosa a menudo se conoce como HEC. Se ha descubierto que la hidroxietilcelulosa es particularmente preferible, ya que es compatible conSphagnum,y se ha descubierto que no es tóxica y apoya el crecimiento deSphagnum.También se ha descubierto que proporciona las características físicas deseadas de la solución fluida, incluida la capacidad de suspenderSphagnum.
[0027] Preferentemente, la hidroxietilcelulosa tiene un peso molecular promedio de al menos 500.000 Da (daltons, o unidad de masa atómica unificada), más preferentemente de al menos 750.000 Da, incluso más preferentemente de al menos 1.000.000 Da, incluso más preferentemente de al menos 1.250.000 Da. En un ejemplo, el peso molecular medio está entre 1.000.000 Da y 1.500.000 Da. Proporcionar un peso molecular medio más alto permite que la viscosidad sea mayor para una concentración dada en solución acuosa.
[0028] Por ejemplo, el agente espesante puede ser hidroxietilcelulosa Natrosol™, disponible comercialmente en forma de polvo en Ashland, EE. UU. En algunos ejemplos, el agente espesante puede comprender Natrosol™ 250 HHW. Más preferentemente, el agente espesante comprende Natrosol™ 250 HX o HHX.
[0029] Natrosol™250 HX tiene un peso molecular medio de 1.000.000 Da, Natrosol™ 250 HHX tiene un peso molecular medio de 1.300.000 Da, y Natrosol™ 250 HHW tiene un peso molecular medio de 1.300.000 Da. Lo más preferentemente, el agente espesante comprende Natrosol™ 250 HHX.
[0030] La hidroxietilcelulosa se puede disolver en agua a temperatura ambiente para espesar la solución fluida. Como tal, se ha descubierto que es un agente espesante particularmente preferible.
[0031] Opcionalmente, el agente espesante comprende metilcelulosa, tal como carboximetilcelulosa.
[0032] Opcionalmente, la solución fluida es viscoelástica. Esto significa que exhibe propiedades tanto viscosas como elásticas. Opcionalmente, la solución fluida es un fluido pseudoplástico. Opcionalmente, la solución fluida es un fluido no newtoniano. Una solución acuosa de hidroxietilcelulosa es un ejemplo de un fluido viscoelástico, pseudoplástico y no newtoniano.
[0033] Opcionalmente, la solución fluida comprende entre 1 g y 20 g de hidroxietilcelulosa por L de agua, más preferentemente entre 2 g y 18 g, incluso más preferentemente entre 3 g y 15 g, y todavía más preferentemente entre 4 g y 12 g. Incluso más preferentemente, la solución fluida comprende entre 5 g y 10 g de hidroxietilcelulosa por L de agua. Se ha descubierto que esto proporciona una viscosidad óptima para proporcionar los beneficios como se describe en esta invención. Para Natrosol™ HX, preferentemente la solución comprende entre 5 g y 15 g de agente espesante por L de agua, más preferentemente entre 8 g y 10 g, lo más preferentemente aproximadamente 9 g por L. Para Natrosol™ HHX, preferentemente la solución comprende entre 2 g y 10 g de agente espesante por L de agua, más preferentemente entre 5 g y 8 g.
Por ejemplo, puede haber entre 5 g y 10 g por L. En un ejemplo particularmente preferido, hay 7,25 g por L de HHX. A alrededor de 20 °C, esto proporciona propiedades óptimas de la suspensión, como la viscosidad. Por ejemplo, proporcionar entre 5 y 15 g de hidroxietilcelulosa por L de agua garantiza que elSphagnumesté bien suspendido y fluya con la solución fluida y no flote ni se hunda cuando se almacena en recipientes.
[0034] En una realización particularmente preferida, la solución fluida comprende entre 2 g y 13 g de hidroxietilcelulosa por L de agua, donde la hidroxietilcelulosa tiene un peso molecular promedio de entre 1.000.000 Da y 1.300.000 Da. Más preferentemente, la solución fluida con la hidroxietilcelulosa que tiene un peso molecular medio de entre 1.000.000 Da y 1.300.000 Da comprende entre 3 g y 12 g de hidroxietilcelulosa por L de agua, incluso más preferentemente entre 4 g y 11 g, y aún más preferentemente entre 5 g y 10 g.
[0035] Preferentemente, la relación de un peso molecular medio de la hidroxietilcelulosa (Da) a un peso de hidroxietilcelulosa por L de agua está entre 50.000 y 500.000, más preferentemente entre 75.000 y 350.000, incluso más preferentemente entre 100.000 y 200.000.
[0036] Preferentemente, el agente espesante comprende un agente espesante a base de almidón. El almidón es un polisacárido. Es preferible que el almidón se obtenga de material vegetal. Por ejemplo, se sabe que el almidón en forma de harina de maíz es un agente espesante. Es más preferible que el agente espesante comprenda un agente espesante a base de celulosa que el almidón porque se ha descubierto que esto soporta mejor el crecimiento deSphagnumsin causar daños.
[0037] Como se mencionó anteriormente, el almidón se puede disolver en agua calentando el almidón y el agua. Dependiendo del almidón, la mezcla se puede calentar a alrededor de 55 °C - 85 °C para disolver el almidón en el agua. Esto se conoce como gelatinización del almidón. Al disolver el almidón en agua de esta manera, se puede obtener una solución fluida espesada.
[0038] Opcionalmente, la solución fluida comprende entre 10 g y 100 g de almidón por L de agua, preferentemente entre 20 g y 50 g, más preferentemente entre 30 g y 40 g. Opcionalmente, el agente espesante comprende un almidón natural, tal como un almidón de maíz. Opcionalmente, el agente espesante comprende un almidón parcialmente pregelatinizado. Preferentemente, el agente espesante comprende entre 30 g y 40 g de un almidón parcialmente pregelatinizado. Opcionalmente, el agente espesante comprende LYCATAB (RTM) PGS, disponible comercialmente de Roquette Pharma. Preferentemente, el agente espesante comprende un almidón pregelatinizado (es decir, completamente pregelatinizado). Este es soluble en agua fría, que es preferible para proporcionar el agente espesante disuelto en agua. Opcionalmente, el agente espesante comprende PREGEFLO (RTM) CH 40, disponible comercialmente de Roquette Pharma.
[0039] Opcionalmente, el agente espesante comprende un extracto de una planta. Preferentemente, el agente espesante comprende un extracto de una planta vascular. Las plantas vasculares tienen tejidos conductores (vasculares) como un xilema o floema, para transportar recursos. Una planta vascular puede denominarse de otro modo como una planta superior. Preferentemente, el término planta vascular excluye plantas no vasculares (es decir, plantas inferiores) tales como briofitas y algas. Como tal, el agente espesante puede estar hecho de un extracto a base de plantas de una planta vascular. Por ejemplo, el extracto a base de plantas puede ser celulosa o almidón.
[0040] Opcionalmente, el agente espesante comprende un agente espesante a base de polímero. Un polímero es una molécula de subunidades monoméricas repetidas. El polímero puede ser natural o sintético.
[0041] Opcionalmente, el agente espesante comprende un agente espesante a base de polisacárido. Un polisacárido es una hebra de polímero de carbohidrato comprendiendo monómeros de monosacáridos unidos entre sí. El almidón es un ejemplo de un polisacárido y está hecho de una hebra de monómeros de glucosa, donde la glucosa es un monosacárido. Un agente espesante a base de polisacárido preferentemente significa un agente espesante derivado de o comprendiendo un polisacárido.
[0042] Opcionalmente, el agente espesante comprende un agente espesante a base de proteínas. Por ejemplo, el agente espesante puede comprender gelatina. En otro ejemplo, el agente espesante puede comprender colágeno. Opcionalmente, el agente espesante puede comprender agua de garbanzo.
[0043] Opcionalmente, el agente espesante puede comprender goma guar. Opcionalmente, el agente espesante puede comprender goma xantana. Opcionalmente, el agente espesante comprende un agente espesante a base de fibra. Opcionalmente, el agente espesante puede comprender semillas de chía. Opcionalmente, el agente espesante comprende cáscara de psyllium. Opcionalmente, el agente espesante comprende una harina, por ejemplo, harina de coco, harina de garbanzo o harina de maíz.
[0044] Opcionalmente, el agente espesante no comprende alginato de sodio. Opcionalmente, el agente espesante no comprende algina. La algina, o también conocida como ácido algínico, es un polisacárido. La algina deriva de algas (una planta no vascular) y, por lo tanto, no deriva de una planta vascular. La algina se usa a menudo en forma de sal como alginato de sodio. El alginato de sodio es soluble en agua y, a menudo, se combina con calcio, como en forma de cloruro de calcio, para solidificar la solución de alginato de sodio en un gel sólido. El calcio forma enlaces cruzados con el alginato y hace que la solución se solidifique, y el alginato de calcio resultante no es soluble en agua. Este procedimiento se usa a menudo para producir perlas de alginato sólidas, como en la preparación de alimentos. Tal resultado no es preferible para la suspensión de la presente descripción, ya que esto inhibiría las propiedades beneficiosas de la solución fluida. En particular, el gel de alginato sólido no sería un fluido y, en cambio, se convertiría en un sólido. En otras palabras, el gel de alginato sólido fraguaría y no dejaría de fraguarse. Por lo tanto, el uso de alginato de sodio y cloruro de calcio causaría el fraguado del gel, y se ha descubierto que forma grumos indeseables alrededor delSphagnum.Esto evita que una suspensión comprenda una solución fluida porque, en cambio, el gel se solidifica, lo que significa que elSphagnumno se puede extender como se desea en esta invención.
[0045] Además, es preferible no usar alginato de sodio en la solución de la presente descripción porque la algina se aglomera y solidifica en presencia de nutrientes de calcio. En algunos casos, puede ser deseable añadir calcio como nutriente en la suspensión, como se describe con más detalle a continuación, en cuyo caso el alginato de sodio no sería deseable para un agente espesante. En algunos casos, el agua utilizada puede comprender nutrientes como el calcio (como en el agua subterránea que absorbe el calcio del suelo/rocas) y, por lo tanto, el alginato puede solidificarse cuando se utiliza incluso cuando el calcio no se añade específicamente como nutriente. Además, el calcio a menudo se puede encontrar en el suelo donde se extiende la suspensión y puede hacer que el alginato se solidifique. Además, se ha descubierto que el alginato impide el crecimiento deSphagnuma medida que el alginato se aglomera alrededor delSphagnumy evita la absorción de agua y aire.
[0046] En general, la algina también reaccionaría para solidificar la solución para formar un gel sólido en presencia de cualquier catión divalente. Divalente significa que tiene una valencia de 2. Por ejemplo, el catión divalente puede comprender calcio (es decir, Ca2+). En otros ejemplos, el catión divalente puede comprender magnesio. Otros cationes divalentes incluyen hierro (2+), berilio, estroncio, bario y radio.
[0047] Por lo tanto, es deseable seleccionar un agente espesante que retenga una solución fluida, incluso en presencia de calcio. Se ha descubierto que es preferible un agente espesante a base de celulosa o un agente espesante a base de almidón.
[0048] Preferentemente, el agente espesante no comprende agar. El agar es un sólido a temperatura ambiente (por ejemplo, 20 °C) y, por lo tanto, no proporciona una solución fluida adecuada para su uso en la presente descripción. Aunque el agar se puede usar como un medio de crecimiento sólido, tal como durante el cultivoin vitrodeSphagnum,esto no forma una suspensión ya que elSphagnumsimplemente descansa sobre el medio sólido, y el agar no forma una solución fluida.
[0049] En los casos en que el agente espesante es un polímero, el agente espesante comprende opcionalmente un homopolímero. Un homopolímero es un polímero comprendiendo unidades monoméricas repetidas del mismo monómero. Esto está en contraste, por ejemplo, con un copolímero comprendiendo dos o más monómeros que se alternan en una hebra. Opcionalmente, el homopolímero comprende un monómero de glucosa. Por ejemplo, la celulosa y el almidón son homopolímeros comprendiendo monómeros de glucosa. Como ejemplo, algina es un copolímero y no es un homopolímero.
[0050] En los casos en que el agente espesante es un polímero, cada monómero del agente espesante es opcionalmente eléctricamente neutro. Opcionalmente, cada monómero del agente espesante no comprende un grupo carboxilato. Por ejemplo, la celulosa y el almidón tienen monómeros de glucosa que son eléctricamente neutros y no comprenden un grupo carboxilato.
[0051] Opcionalmente, la solución fluida también comprende nutrientes. Los nutrientes se pueden proporcionar para facilitar el crecimiento delSphagnumdentro de la suspensión. Los nutrientes se pueden disolver en el agua y, por consiguiente, son solubles en agua. Por ejemplo, los nutrientes pueden estar en forma de sales nutricionales. Los nutrientes pueden proporcionar condiciones que facilitan el crecimiento deSphagnum.Esto puede ser particularmente beneficioso para los fragmentos deSphagnumcuando comienzan a crecer inicialmente. Especialmente en turberas donde las condiciones son duras, proporcionar nutrientes para facilitar el crecimiento puede resultar en un mejor establecimiento, especialmente al principio. Al proporcionar los nutrientes en la suspensión, no es necesario aplicar más nutrientes durante un período de tiempo determinado, por ejemplo, hasta después de que elSphagnum sehaya establecido y comience a crecer rápidamente (por ejemplo, de dos a tres semanas cuando se cultiva en un invernadero, o de dos a tres meses cuando se cultiva en un campo). CuandoSphagnumse cultiva en una turbera, normalmente no se complementa con nutrientes después del establecimiento debido a su inaccesibilidad y, por lo tanto, proporcionar el suministro inicial de nutrientes es especialmente beneficioso. CuandoSphagnumse cultiva con fines de cultivo, como en un invernadero o en un campo, puede ser beneficioso tratar elSphagnumen una etapa posterior con riego y más nutrientes para facilitar el crecimiento. En tales casos, los nutrientes en la suspensión proporcionan una fuente inicial.
[0052] Los nutrientes se pueden mezclar en toda la solución, lo que permite un acceso uniforme a los nutrientes por parte delSphagnum.Opcionalmente, los nutrientes se dispersan homogénea o sustancialmente homogéneamente por toda la suspensión. Esto facilita la uniformidad del crecimiento delSphagnumcuando la suspensión se aplica sobre una superficie, debido al suministro uniforme de nutrientes.
[0053] La solución espesada también retiene los nutrientes dentro de la suspensión. En ausencia de un agente espesante, los nutrientes no se retendrían bien y podrían lavarse o separarse delSphagnum.Por lo tanto, el agente espesante retiene los nutrientes para proporcionar un suministro alSphagnumdurante un período de tiempo prolongado. Debido a que los nutrientes se mantienen en la suspensión, esto proporciona un sistema mejorado en comparación con simplemente proporcionar nutrientes a través del riego en una suspensión no comprendiendo nutrientes. La aplicación de nutrientes, particularmente poco después de la aplicación de la suspensión, puede resultar en el lavado de la suspensión antes de que se establezca. Por lo tanto, es preferible no aplicar riego o tratamiento con nutrientes durante un período, como al menos dos semanas, después de la aplicación. Sin embargo, esto dependerá de las condiciones ambientales, como, por ejemplo, si está particularmente seco, a continuación puede ser deseable aplicar una pequeña cantidad de riego poco después de la aplicación para evitar la desecación delSphagnum,pero evitar lavar el nutriente. Por lo tanto, proporcionar una fuente de nutrientes puede proporcionar un suministro inicial donde es deseable no aplicar nutrientes durante un período de tiempo después de la aplicación. Además, elSphagnumpuede absorber el nutriente y mantenerlo suelto hasta que sea necesario, lo que puede ayudarse evitando el exceso de riego.
[0054] Opcionalmente, los nutrientes comprenden calcio. Se ha descubierto que el calcio es un nutriente particularmente útil para el crecimiento deSphagnum.Preferentemente, los nutrientes comprenden al menos 1 mg de calcio por L (litro) de agua. Preferentemente, los nutrientes comprenden menos de 100 mg de calcio por L de agua. Preferentemente, los nutrientes comprenden entre 1,17 mg y 92,39 mg de calcio por L de agua. Más preferentemente, los nutrientes comprenden entre 1 mg y 50 mg de calcio por L de agua, incluso más preferentemente entre 2 mg y 25 mg, incluso más preferentemente entre 5 mg y 20 mg. Por ejemplo, el calcio puede proporcionarse en forma de una sal de calcio, tal como óxido de calcio (CaO), cloruro de calcio (CaCh) o nitrato de calcio (Ca(NO<3>)<2>). Se ha descubierto que incluso niveles bajos de calcio pueden ser beneficiosos para el crecimiento deSphagnum.
[0055] La cantidad de nutrientes se puede ajustar dependiendo de la cantidad deSphagnumen la suspensión. Por ejemplo, los niveles de nutrientes anteriores pueden usarse para 100 g deSphagnumpor L de suspensión (100 g calculados utilizando el perfume de masa estandarizado comprimiendoSphagnumen 16 g / cm2, que proporciona un peso seco de alrededor de 1,43 g). Se comprenderá que los valores descritos en esta invención están optimizados para 100 g de peso estándar deSphagnum,y cada valor puede escalarse a una concentración diferente para una cantidad diferente deSphagnum.Por ejemplo, los nutrientes pueden comprender entre 1 mg y 100 mg de calcio por 100 g de peso estandarizado (comprimido por 16 g / cm2) deSphagnum.Opcionalmente, los nutrientes pueden comprender entre 0,7 mg y 70 mg de calcio por 1 g de peso seco deSphagnum.
[0056] Opcionalmente, la suspensión no se solidifica en presencia de calcio. En otras palabras, la solución fluida permanece fluida en presencia de calcio. Por ejemplo, se puede añadir calcio a la suspensión como nutriente. En otros casos, el calcio puede estar presente en el suelo al que se aplica la suspensión. En otros casos, el calcio puede estar presente en el agua de la suspensión, o el agua añadida a la suspensión, como el riego durante el crecimiento. Por lo tanto, es preferible que la suspensión permanezca fluida y no se solidifique en presencia de calcio, lo que permite que se adapte para su uso en cultivo. Opcionalmente, la suspensión no se solidifica en presencia de ningún nutriente, incluidos los nutrientes descritos en esta invención, como el magnesio.
[0057] Opcionalmente, los nutrientes comprenden al menos uno de: magnesio, nitrógeno, potasio y/o fósforo. Por ejemplo, esto puede ser además o en lugar de la presencia de calcio.
[0058] Opcionalmente, los nutrientes comprenden magnesio. Preferentemente, los nutrientes comprenden al menos 0,1 mg de magnesio por L de agua. Preferentemente, los nutrientes comprenden menos de 50 mg de magnesio por L de agua. Preferentemente, los nutrientes comprenden entre 0.33 mg y 32,93 mg de magnesio por L de agua. Más preferentemente, los nutrientes comprenden entre 1 mg y 15 mg de magnesio por L de agua, más preferentemente aún entre 3 mg y 10 mg. Como anteriormente, la cantidad de magnesio se puede ajustar dependiendo de la cantidad deSphagnumpor L de suspensión. Opcionalmente, los nutrientes comprenden entre 0,1 mg y 50 mg de magnesio por 100 g de peso estandarizado (comprimido por 16 g / cm2) deSphagnum.Opcionalmente, los nutrientes pueden comprender entre 0,07 mg y 50 mg de magnesio por 1 g de peso seco deSphagnum.
[0059] Opcionalmente, los nutrientes comprenden nitrógeno. Como se usa en esta invención, el término "nitrógeno" incluye preferentemente elementos o compuestos que contienen nitrógeno y, por lo tanto, es un contenido total de nitrógeno de los nutrientes presentes. Preferentemente, "nitrógeno" incluye nitrato, amonio y nitrógeno ureico.
[0060] Preferentemente, los nutrientes comprenden al menos 15 mg de nitrógeno por L de agua. Preferentemente, los nutrientes comprenden menos de 250 mg de nitrógeno por L de agua. Preferentemente, los nutrientes comprenden entre 18,05 mg y 240,81 mg de nitrógeno por L de agua. Más preferentemente, los nutrientes comprenden entre 15 mg y 100 mg de nitrógeno por L de agua, incluso más preferentemente entre 25 mg y 75 mg. Como se indicó anteriormente, la cantidad de nitrógeno se puede ajustar dependiendo de la cantidad deSphagnumpor L de suspensión. Opcionalmente, los nutrientes comprenden entre 15 mg y 250 mg de nitrógeno por 100 g de peso estandarizado (comprimido por 16 g / cm2) deSphagnum.Opcionalmente, los nutrientes pueden comprender entre 10 mg y 175 mg de nitrógeno por 1 g de peso seco deSphagnum.
[0061] Opcionalmente, los nutrientes comprenden fósforo. Preferentemente, los nutrientes comprenden al menos 5 mg de fósforo por L de agua. Preferentemente, los nutrientes comprenden menos de 75 mg de fósforo por L de agua. Preferentemente, los nutrientes comprenden entre 10,99 mg y 61,41 mg de fósforo por L de agua. Más preferentemente, los nutrientes comprenden entre 5 mg y 50 mg de fósforo por L de agua, incluso más preferentemente entre 10 mg y 20 mg. Como anteriormente, la cantidad de fósforo se puede ajustar dependiendo de la cantidad deSphagnumpor L de suspensión. Opcionalmente, los nutrientes comprenden entre 5 mg y 75 mg de fósforo por 100 g de peso estandarizado (comprimido por 16 g / cm2) deSphagnum.Opcionalmente, los nutrientes pueden comprender entre 3,5 mg y 55 mg de fósforo por 1 g de peso seco deSphagnum.
[0062] Opcionalmente, los nutrientes comprenden potasio. Preferentemente, los nutrientes comprenden al menos 20 mg de potasio por L de agua. Preferentemente, los nutrientes comprenden menos de 300 mg de potasio por L de agua. Preferentemente, los nutrientes comprenden entre 66,84 mg y 266,25 mg de potasio por L de agua. Más preferentemente, los nutrientes comprenden entre 50 mg y 150 mg de potasio por L de agua. Como se indicó anteriormente, la cantidad de potasio se puede ajustar dependiendo de la cantidad deSphagnumpor L de suspensión. Opcionalmente, los nutrientes comprenden entre 20 mg y 300 mg de potasio por 100 g de peso estandarizado (comprimido por 16 g/cm2) deSphagnum.Opcionalmente, los nutrientes pueden comprender entre 14 mg y 210 mg de potasio por 1 g de peso seco deSphagnum.La incrustación de los nutrientes se puede aplicar a otros valores para cada nutriente descrito en esta invención, donde cada valor descrito corresponde a 100 g deSphagnumpor peso estandarizado, o 1,43 g por peso seco.
[0063] Opcionalmente, los nutrientes comprenden azufre. Opcionalmente, los nutrientes comprenden entre 4,30 mg y 65,59 mg de azufre por L de agua.
[0064] Opcionalmente, los nutrientes comprenden hierro. Opcionalmente, los nutrientes comprenden entre 0,31 mg y 9,15 mg de hierro por L de agua.
[0065] Opcionalmente, los nutrientes comprenden sodio, manganeso, cobre, zinc, boro, molibdeno y/o cloruro. Opcionalmente, los nutrientes comprenden entre 2,51 mg y 53,47 mg de sodio por L de agua, entre 0,21 mg y 1,94 mg de manganeso por L de agua, entre 0,09 mg y 0,25 mg de cobre por L de agua, entre 0,37 mg y 1,56 mg de zinc por L de agua, entre 0,14 mg y 1,02 mg de boro por L de agua, entre 0,01 mg y 0,15 mg de molibdeno por L de agua, y/o entre 0,16 mg y 97,64 mg de cloruro por L de agua.
[0066] Algunos nutrientes pueden estar presentes en el suelo donde se extiende la suspensión y, por lo tanto, es posible que no sea necesario incluir algunos nutrientes en la suspensión.
[0067] Opcionalmente, la suspensión no comprende azúcar (por ejemplo, sacarosa), vitaminas y/u hormonas de crecimiento vegetal.
[0068] Opcionalmente, la solución fluida no se solidifica durante al menos 6 horas a una temperatura entre 5 °C y 25 °C. Preferentemente, la suspensión no se endurece. Como se usa en esta invención, el término "no fraguado" preferentemente significa que la suspensión no se solidifica durante al menos 6 horas, en particular a 20 °C, preferentemente entre 5 °C y 25 °C. Además, preferentemente, la suspensión no se endurece en presencia de calcio. En otras palabras, preferentemente la solución fluida sigue siendo un líquido.
[0069] La solución fluida generalmente aumenta de espesor a una temperatura más baja, pero no se solidificará hasta que se congele. Cuando se usa un agente espesante a base de celulosa tal como hidroxietilcelulosa, la solución no se congela incluso a 0 °C. A temperaturas más altas, la solución se volverá menos viscosa y por encima de 30 °C se volverá muy líquida. Por encima de 40 °C, comenzará a dañar elSphagnum.Por lo tanto, es preferible mantener la suspensión almacenada entre 0 °C y 30 °C.
[0070] A medida que los fragmentos deSphagnumse suspenden en la solución, la suspensión es, por lo tanto, una solución fluida espesada que lleva fragmentos deSphagnum,que se mantienen en la suspensión.
[0071] Se puede usar cualquier especie deSphagnumadecuada (u opcionalmente una combinación de las mismas) en la presente descripción. Como diferentes especies deSphagnumpueden tener diferentes requisitos de crecimiento, las especies deSphagnumpara su uso en la presente descripción pueden seleccionarse dependiendo del entorno.
[0072] La suspensión comprende una o más especies deSphagnum.Se podría usar cualquier especie, pero en un ejemplo la presente descripción comprende el uso de una o más especies deSphagnumseleccionadas del grupo que consiste en:Sphagnum angustifolium, Sphagnum australe, Sphagnum capillifolium, Sphagnum céntrale, Sphagnum compactum, Sphagnum cuspidatum, Sphagnum denticulatum, Sphagnum fallax, Sphagnum fimbriatum, Sphagnum fuscum, Sphagnum imbricatum (austinii), Sphagnum inundatum, Sphagnum magellanicum (medio), Sphagnum palustre, Sphagnum papillosum, Sphagnum pulchrum, Sphagnum russowii, Sphagnum squarrosum, Sphagnum subnitens, Sphagnum tenellumySphagnum cristatum.En un ejemplo, el procedimiento comprende el uso de una o más especies deSphagnumseleccionadas del grupo que consiste en:Sphagnum palustre, Sphagnum capillifolium, Sphagnum capillifolium rubellum, Sphagnum subnitens, Sphagnum denticulatum, Sphagnum squarrosum, Sphagnum fallax, Sphagnum fimbriatum, Sphagnum cuspidatum, Sphagnum magellanicumySphagnum papillosum.En un ejemplo, la invención comprende el uso de una o más especies deSphagnumseleccionadas del grupo que consiste en:Sphagnum palustre, Sphagnum capillifolium, Sphagnum capillifolium rubellum, Sphagnum subnitens, Sphagnum squarrosum, Sphagnum magellanicumySphagnum papillosum.
[0073] En un ejemplo, una especie deSphagnumpara su uso en la presente descripción puede ser una o más especies seleccionadas del grupo que consiste en:Sphagnum palustre, Sphagnum capillifolium, Sphagnum fallax, Sphagnum magellanicum, Sphagnum papillosumySphagnum squarrosum.
[0074] Lo más preferentemente, la especieSphagnumesSphagnum palustre.Por ejemplo,Sphagnum palustrepuede ser preferible para su uso en un medio de cultivo debido a sus propiedades físicas.
[0075] También se prevé que la invención pueda aplicarse a cualquier especie híbrida deSphagnum.
[0076] Opcionalmente, la pluralidad de fragmentos deSphagnumcomprende al menos una de las especies deSphagnumdescritas en esta invención.
[0077] Opcionalmente, la pluralidad de fragmentos deSphagnumcomprende al menos 2, 3, 4, 5 o más especies deSphagnum.
[0078] A medida que la pluralidad de fragmentos deSphagnumse suspenden en la solución, preferentemente esto significa que los fragmentos deSphagnumse mantienen dispersos dentro de la solución, y al menos algunos de los fragmentos deSphagnumno flotan en la solución y/o no se hunden debajo de la solución. En otras palabras, los fragmentos no se dejan atrás cuando se mueve la solución, como al verterse o extenderse. Esto significa que elSphagnumse puede distribuir sobre una superficie de manera efectiva cuando se aplica la suspensión. Una vez que se ha aplicado la suspensión, la suspensión también retiene elSphagnumsustancialmente en posición de modo que elSphagnumno se caiga de la suspensión, por ejemplo, hundiéndose en el fondo. Esto permite que elSphagnumse fije generalmente en posición con la suspensión, y no, por ejemplo, que se lave mientras se deja el resto de la suspensión. Esto también permite que elSphagnumabsorba los nutrientes en la suspensión durante un período de tiempo prolongado, lo que es particularmente ventajoso para el período inicial de crecimiento después de la aplicación, donde el suministro de nutrientes puede ayudar al establecimiento.
[0079] Opcionalmente, los fragmentos deSphagnumse dispersan uniformemente por toda la suspensión. Por ejemplo, elSphagnumpuede extenderse homogéneamente en la solución (es decir, densidad uniforme). En algunos casos, puede ser aceptable proporcionar una suspensión completamente mezclada, por ejemplo, de modo que al menos el 50 % de los fragmentos no se depositen en el fondo o la parte superior de la mezcla.
[0080] El agente espesante proporciona propiedades de la suspensión que ayudan a retener el propioSphagnumdentro de la suspensión. Al mezclar a fondo elSphagnumdentro de la solución de la suspensión, elSphagnumse puede distribuir por toda la suspensión, y la viscosidad de la solución retendrá elSphagnum.En ausencia de un agente espesante adecuado, elSphagnumno se mantendría suspendido solo por el agua, sino que se hundiría hacia el fondo de la solución. Del mismo modo, el agente espesante y la cantidad del mismo se eligen preferentemente para permitir una mezcla suficiente. Si la viscosidad es demasiado alta, elSphagnumno se mezclará bien, puede flotar en la parte superior de la superficie superior de la solución espesa o puede dañarse por la mezcla.
[0081] Preferentemente, la suspensión no se aglomera alrededor delSphagnum.Mediante la elección adecuada del agente espesante como se describe en esta invención, la suspensión no se aglomerará alrededor delSphagnumy/o alrededor de los nutrientes.
[0082] Un agente espesante a base de celulosa o un agente espesante a base de almidón actúa como un agente espesante adecuado que proporciona los beneficios anteriores.
[0083] La suspensión se puede usar para proporcionar una densidad más uniforme deSphagnumcuando se extiende sobre una superficie que las técnicas convencionales. En particular, elSphagnumse puede mezclar para crear una densidad sustancialmente uniforme deSphagnumdentro de la suspensión y, debido a que la suspensión puede retener bien elSphagnum,cuando la suspensión se aplica a la superficie, se puede preservar la densidad. El agente espesante ayuda a esta retención en comparación con los líquidos más finos y menos viscosos, como en ausencia de un agente espesante disuelto en la solución fluida.
[0084] La suspensión puede proporcionar una densidad uniforme deSphagnumque se puede aplicar de manera más uniforme que las técnicas convencionales. Por ejemplo, se puede aplicar una densidad sustancialmente uniforme deSphagnummediante pulverización, en comparación con la plantación de grumos individuales deSphagnumsobre un área. Además, la cobertura de una superficie se puede aumentar más fácilmente, ya que la suspensión se puede extender para cubrir completamente una superficie. La densidad deSphagnumdentro de la suspensión puede a continuación controlarse para proporcionar la cobertura inicial deseada deSphagnumsobre el área.
[0085] La solución espesada es preferentemente pegajosa. Esto permite que la suspensión se adhiera a la superficie a la que se aplica y proporciona un medio de sujeción para sujetar la suspensión a la superficie. Esto puede aliviar el problema de que elSphagnumno seguro desaparezca o sea arrastrado por la lluvia. En cambio, la suspensión puede retener elSphagnumen su posición durante el tiempo suficiente para proporcionar nutrientes alSphagnumdurante su fase inicial de establecimiento y el tiempo suficiente para que elSphagnumse establezca lo suficiente como para continuar creciendo.
[0086] Opcionalmente, la suspensión es adhesiva a un sustrato en crecimiento. Opcionalmente, la suspensión es adhesiva a un sustrato en crecimiento comprendiendo tierra, arena, compost, turba y/oSphagnum seco.Esto significa que la suspensión se adhiere al sustrato cuando se pone en contacto con él. Por ejemplo, el sustrato puede ser una superficie de turba o compost en una bandeja. Esto permite que la suspensión retenga elSphagnumen la superficie y lo ancle.
[0087] Opcionalmente, la suspensión proporciona contacto capilar con una superficie a la que se aplica para permitir la transferencia de fluido entre la superficie y la suspensión. Como se usa en esta invención, "contacto capilar" preferentemente significa proporcionar una vía de fluido, tal como a través de la acción capilar. De esta manera, la suspensión puede entrar en contacto con la superficie a la que se aplica y proporcionar una vía de fluido entre la superficie y elSphagnum,permitiendo así la transferencia de fluidos. Por ejemplo, cuando se aplica a una superficie de turba, la suspensión puede permitir la transferencia de agua y nutrientes de la turba a la solución para su uso por elSphagnumen el crecimiento. El contacto capilar es promovido por la solución de fluido espesado porque el área de superficie en contacto con la superficie aumenta en comparación con un sólido (por ejemplo, un gel sólido) debido a sus propiedades de flujo. La suspensión espesada también retiene ese contacto con el tiempo, lo que es ventajoso en comparación con el líquido sin un agente espesante apropiado, que en su lugar se lavaría o drenaría. Se ha descubierto que un agente espesante a base de celulosa o a base de almidón proporciona un contacto capilar óptimo y promueve la transferencia de fluidos. Se ha descubierto que el uso de agentes espesantes alternativos, como el alginato, inhibe la transferencia de fluidos e impide la absorción de aire y agua.
[0088] La solución fluida en la suspensión permite que la suspensión se extienda sobre una superficie, por ejemplo, mediante pulverización. Esto permite cubrir grandes áreas rápidamente, especialmente cuando la pulverización puede realizarse con una máquina o un pulverizador manual, y mucho más rápido que la aplicación manual de grumos deSphagnum. La pulverización también permite una aplicación mucho más fácil que una suspensión sólida.
[0089] Al proporcionar fragmentos deSphagnum,elSphagnumse puede pulverizar más fácilmente que las hebras largas que se ha descubierto que se obstruyen y enredan en un sistema de pulverización. Preferentemente, al tener fragmentos de longitud inferior a 50 mm, más preferentemente entre 5 mm y 30 mm, los fragmentos se pulverizan fácilmente y evitan la obstrucción o el enredo.
[0090] Opcionalmente, la suspensión puede pulverizarse a través de una boquilla que tiene un diámetro de entre 5 mm y 10 mm. Por lo tanto, la viscosidad de la suspensión se proporciona para permitir dicha pulverización. Si la suspensión es demasiado viscosa, por ejemplo, si comprende un gel más sólido, la suspensión no podría pulverizarse a través de dicha boquilla. Es preferible que la suspensión sea capaz de ser pulverizada de esta manera, mientras se retiene elSphagnumdisperso en la solución. Esto proporciona una viscosidad ideal, donde si la viscosidad es demasiado alta, tal como con un gel sólido, la suspensión no se podría pulverizar, y donde si la viscosidad es demasiado baja, tal como con una solución no espesada, la suspensión no podría retener elSphagnumy elSphagnumno se llevaría con la solución. Por lo tanto, la solución fluida espesada de la presente descripción proporciona una suspensión optimizada para contenerSphagnumpara su aplicación a una superficie.
[0091] Opcionalmente, la solución fluida tiene una viscosidad de entre 1000 y 4000 mPa-s a 25 °C. Más preferentemente, la solución fluida tiene una viscosidad de entre 1500 y 4000 mPa-s a 25 °C, incluso más preferentemente entre 1750 y 3750, incluso más preferentemente entre 2000 y 3500. Como se usa en esta invención, la viscosidad se mide usando la escala estándar de Brookfield, tal como usando un viscosímetro de lectura de diales Brookfield LVF, disponible comercialmente en Brookfield Engineering Laboratories, Inc, EE. UU.
[0092] Se puede obtener una representación de la viscosidad según los Ejemplos 10 y 11. El tiempo para que la suspensión cruce la línea de 15 cm es proporcional a la viscosidad. Preferentemente, el tiempo a 15 °C está entre 5 s y 60 s. Esto proporciona una suspensión que es capaz de fluir suficientemente y se diferencia de los geles sólidos. Más preferentemente, el tiempo a 15 °C está entre 10 y 50 s, incluso más preferentemente entre 15 y 45 s, incluso más preferentemente entre 20 y 40 s, incluso más preferentemente entre 25 y 35 s, lo más preferentemente entre 28 y 32 s. Cada uno contiene preferentemente entre 50 g y 150 g deSphagnumpor L de suspensión, más preferentemente entre 75 g y 125 g, incluso más preferentemente alrededor de 100 g. Preferentemente, la suspensión sin elSphagnumtiene un tiempo de entre 5 s y 30 s, más preferentemente entre 10 s y 20 s, incluso más preferentemente entre 12,5 s y 17,5 s. El agente espesante se puede seleccionar para proporcionar la propiedad deseada. Esto puede proporcionar las propiedades deseables de la suspensión que permiten que elSphagnumse sostenga y suspenda lo suficiente. Preferentemente, el tiempo a una temperatura entre 10 °C y 25 °C está entre 5 s y 60 s, más preferentemente entre 10 y 50 s.
[0093] Opcionalmente, la solución fluida tiene un pH de entre 3,5 y 6,5, preferentemente entre 5,0 y 6,0.
[0094] Para proporcionar una forma sostenible de cultivarSphagnum,es preferible que la fuente no se traslade desde un sitio silvestre. Por ejemplo, cuando se aplicaSphagnumpara restaurar una turbera dañada o para la producción de medios de cultivo, es claramente preferible que elSphagnumutilizado no se traslade de otro sitio silvestre, como una turbera. Preferentemente, elSphagnumproviene de una fuente cultivada. En un ejemplo, elSphagnumpodría cultivarse o crecer en un invernadero. En algunos ejemplos, esto podría originarse en un sitio silvestre, pero elSphagnumpuede aumentarse mediante el cultivo en un invernadero, lo que significa que se puede usar másSphagnumpor una cierta cantidad tomada del sitio silvestre.
[0095] Los fragmentos deSphagnumse cultivanin vitro.Esto significa que elSphagnumse ha propagado en condiciones de laboratorio controladas, tal como en un recipiente de cultivo tal como una placa de Petri, un tubo de ensayo u otro recipiente estéril. Preferentemente, elSphagnum in vitrose ha cultivado utilizando técnicas de cultivo de tejidos. Preferentemente, los fragmentos deSphagnumse micropropagan. Esto significa que elSphagnumse cultivó utilizando técnicas de cultivo de tejidos clonales para producir plántulas genéticamente idénticas. Esto generalmente se realiza en un laboratorio iniciandoSphagnum in vitro.Esto puede requerir solo una pequeña cantidad de material silvestre recogido, lo que reduce el impacto ambiental.
[0096] Los fragmentos deSphagnumse han cultivado posteriormentein vivo.Como se usa en esta invención, cultivar"in vivo"preferentemente significa cultivar fuera de las condiciones de laboratorio, tal como fuera de las condiciones de cultivoin vitroo tisular. Por ejemplo, después de crecerin vitro,tal como por micropropagación, elSphagnumse transfiere y se cultivain vivo,tal como en un invernadero. Preferentemente, elSphagnumse cultivain vivodurante al menos un mes, preferentemente al menos cuatro meses. ElSphagnuma continuación se recoge y se corta para formar la pluralidad de fragmentos deSphagnumpara su uso en la suspensión de la presente descripción.
[0097] Proporcionar fragmentos deSphagnumimplica cortar hebras deSphagnumpara proporcionar la longitud deseada. Por ejemplo, una longitud deseada puede estar entre 5 mm y 30 mm.
[0098] Opcionalmente, al menos el 50 % en masa de los fragmentos deSphagnumtienen una longitud de al menos 5 mm. Durante el procedimiento de corte, se pueden formar fragmentos más pequeños debido a las ineficiencias en el mecanismo de corte y la tendencia de las ramas y hojas a desprenderse debido a la fragilidad de las hebras. Mediante la elección adecuada de un mecanismo de corte, este efecto puede mitigarse, pero una pequeña proporción de los fragmentos tendrá una longitud más corta de lo deseado. Por ejemplo, es deseable minimizar el número de fragmentos con una longitud inferior a 5 mm. Estos fragmentos tienden a tener menos puntos de crecimiento potenciales, son menos resistentes y tienen una menor probabilidad de establecimiento de calidad. Preferentemente, menos del 60 % en masa de los fragmentos deSphagnumen la suspensión tendrán una longitud inferior a 5 mm, más preferentemente inferior al 50 %, aún más preferentemente inferior al 40 %, aún más preferentemente inferior al 35 %. Las mediciones del número de fragmentos de menos de 5 mm se muestran en el Ejemplo 3 a continuación.
[0099] Opcionalmente, los fragmentos deSphagnumtienen una longitud media de entre 5 mm y 50 mm, preferentemente entre 5 mm y 30 mm. Opcionalmente, los fragmentos deSphagnumque tienen una longitud de al menos 5 mm tienen una longitud media de entre 5 mm y 30 mm. Opcionalmente, los fragmentos deSphagnumque tienen una longitud de al menos 5 mm tienen una longitud media de entre 5 mm y 50 mm. Preferentemente, los fragmentos deSphagnumque tienen una longitud de al menos 5 mm tienen una longitud media de entre 5 mm y 25 mm, más preferentemente entre 7,5 mm y 20 mm, incluso más preferentemente entre 7,5 y 15 mm. Las mediciones de las longitudes de los fragmentos deSphagnumse muestran en el Ejemplo 4 a continuación.
[0100] Opcionalmente, la suspensión comprende al menos 1000 fragmentos deSphagnumque tienen una longitud de al menos 5 mm por L de solución fluida. Preferentemente, la suspensión comprende al menos 2000 fragmentos deSphagnumque tienen una longitud de al menos 5 mm por L de solución fluida. Las mediciones de la cantidad de fragmentos deSphagnumse muestran en el Ejemplo 3 a continuación.
[0101] Opcionalmente, la suspensión comprende una masa total de fragmentos deSphagnumde al menos 50 g por L de solución fluida. Opcionalmente, la suspensión comprende una masa total de fragmentos deSphagnumde entre 50 g y 100 g por L de solución fluida, preferentemente de aproximadamente 100 g por L. Opcionalmente, la suspensión comprende una masa total de fragmentos deSphagnumde al menos 25 g por L de solución fluida. Opcionalmente, la suspensión comprende una masa total de fragmentos deSphagnumde menos de 500 g por L de solución fluida. Opcionalmente, la suspensión comprende una masa total de fragmentos deSphagnumde menos de 400 g por L de solución fluida, preferentemente menos de 300 g por L. La masa total puede calcularse comprimiendo elSphagnuma una masa estandarizada por volumen comprimiendo con una fuerza de 16 g / cm2 para eliminar el exceso de agua para garantizar una masa estandarizada.
[0102] Opcionalmente, la suspensión comprende una masa seca total de fragmentos deSphagnumde al menos 1 g por L de solución fluida. La masa seca se puede calcular secando elSphagnumpara eliminar el agua. Como es estándar en la técnica, el secado se puede realizar calentando elSphagnuma alrededor de 110 °C durante al menos 24 horas. Alternativamente, el secado se puede realizar secando a alrededor de 25 °C con una humedad de menos del 50 % hasta que no se mida más pérdida de peso. Esto garantiza que se haya evaporado toda el agua y que quede la masa seca delSphagnum.Por supuesto, esto matará alSphagnum,por lo que esto simplemente proporciona un procedimiento útil para el cálculo de la masa seca. Las mediciones de la masa seca total de fragmentos deSphagnumse muestran en el Ejemplo 6 a continuación.
[0103] Opcionalmente, los fragmentos deSphagnumtienen un diámetro medio del tallo de entre 0,1 mm y 1 mm. Las mediciones del diámetro del tallo de los fragmentos deSphagnumse muestran en el Ejemplo 5 a continuación.
[0104] Según un segundo ejemplo de la presente descripción, que no se reivindica independientemente, pero puede proporcionarse como parte del procedimiento de la invención reivindicada como se describe en esta invención, se proporciona un procedimiento para producir una suspensión deSphagnum,comprendiendo el procedimiento: proporcionar una pluralidad de fragmentos deSphagnum;preparar una solución fluida comprendiendo: proporcionar agua; y disolver un agente espesante en el agua, donde el agente espesante comprende un agente espesante a base de celulosa o a base de almidón; y mezclar la pluralidad de fragmentos deSphagnumcon la solución fluida para suspender la pluralidad de fragmentos deSphagnumen la solución fluida.
[0105] En esta invención se describe un procedimiento para producir una suspensión deSphagnum,que no se reivindica independientemente, pero puede proporcionarse como parte del procedimiento de la invención reivindicada como se describe en esta invención, comprendiendo el procedimiento: proporcionar una pluralidad de fragmentos deSphagnum;preparar una solución fluida comprendiendo: proporcionar agua; y disolver un agente espesante en el agua; y mezclar la pluralidad de fragmentos deSphagnumcon la solución fluida para suspender la pluralidad de fragmentos deSphagnumen la solución fluida. Opcionalmente, la suspensión comprende además nutrientes. Opcionalmente, los nutrientes comprenden calcio. Opcionalmente, el agente espesante comprende un agente espesante a base de celulosa. Opcionalmente, el agente espesante comprende un agente espesante a base de almidón.
[0106] Opcionalmente, el procedimiento del segundo ejemplo comprende proporcionar la suspensión comprendiendo cualquiera de las características descritas en relación con la suspensión del primer ejemplo.
[0107] Las características descritas en relación con el primer ejemplo se pueden aplicar al segundo ejemplo solo o en combinación, y viceversa. En particular, las características de los fragmentos deSphagnum,los nutrientes y el agente espesante descritos en relación con el primer ejemplo pueden aplicarse al segundo ejemplo, y viceversa.
[0108] Según un primer aspecto de la presente descripción, según la invención reivindicada, se proporciona un procedimiento para proporcionar un material de siembra deSphagnumcomprendiendo: proporcionarSphagnum invitro;aplicar elSphagnum auna superficie de crecimiento; cultivar elSphagnum in vivoen la superficie de crecimiento; recoger elSphagnumcultivado de la superficie de crecimiento; cortar elSphagnumrecogido para proporcionar una pluralidad de fragmentosde Sphagnum in vivo;y mezclar la pluralidad de fragmentos deSphagnumcon una primera solución fluida para proporcionar un material de siembra deSphagnumpara el cultivo, comprendiendo el material de siembra una suspensión de la pluralidad de fragmentos delSphagnum in vivoen la primera solución fluida.
[0109] ElSphagnumpuede ser una o más de las especies deSphagnumdescritas en esta invención. Preferentemente, elSphagnumesSphagnum palustre.
[0110] ElSphagnumesin vitro.Esto significa que elSphagnumse ha propagado en condiciones de laboratorio controladas. Preferentemente, elSphagnum in vitrose ha cultivado utilizando técnicas de cultivo de tejidos. Preferentemente, elSphagnumse ha micropropagado. Esto significa que elSphagnumse cultivó utilizando técnicas de cultivo de tejidos clonales para producir plantas genéticamente idénticas. Preferentemente, elSphagnum in vitrose ha cultivado en condiciones estériles o condiciones sustancialmente estériles.
[0111] El término"Sphagnum in vitro"abarcaSphagnumque se ha cultivadoen condiciones in vitro,como en un laboratorio. ElSphagnum in vitrocontrasta con elSphagnum in vivoque se ha cultivado fuera de las condiciones controladas de laboratorio, como en un invernadero o en un campo. El cultivoin vitroaísla elSphagnumy reduce la exposición a patógenos, lo que resulta en un producto más limpio. La propagación clonalin vitropuede producir plántulas idénticas a partir de la fuente original.
[0112] Preferentemente, elSphagnum in vitrono se ha cultivadoin vivo, por ejemplo,fuera de un laboratorio tal como en un invernadero, antes de aplicarse a la superficie de crecimiento. En otras palabras, el término"Sphagnum in vitro"preferentemente no incluyeSphagnumque se ha cultivado fuera de las condiciones de laboratorio, por ejemplo, durante más de un mes, antes de aplicarse a la superficie de crecimiento. Sin embargo, se apreciará que elSphagnum in vitrose puede retirar brevemente de las condicionesin vitro,tal como durante la preparación de una suspensión comprendiendo elSphagnum in vitrocomo se describirá a continuación, por ejemplo, retirando elSphagnumdel laboratorio para cortar en fragmentos y mezclar con una solución fluida para formar una suspensión deSphagnum in vitro,y que el término"Sphagnum in vitro"se extiende preferentemente a este breve período fuera de las condiciones de laboratorio.
[0113] De esta manera, elSphagnum in vitroestá limpio. ElSphagnumpuede cultivarse en un medio nutritivo y, por ejemplo, complementarse con iluminación artificial para cultivar elSphagnum in vitro.ElSphagnumpuede cultivarse en recipientes de cultivo tales como placas de Petri que están selladas o sustancialmente selladas para evitar la contaminación. Por lo tanto, la exposición delSphagnum in vitroa los contaminantes es mínima. Los cultivos y/o equipos también pueden esterilizarse antes del inicio, reduciendo el riesgo de contaminación y asegurando un producto limpio.
[0114] ProporcionarSphagnum micropropagado in vitropermite la producción clonal que proporciona una fuente sostenible, con menos daño al medio ambiente que la recogida deSphagnum silvestre.También se puede seleccionarunaespecie deseada particular, por ejemplo, seleccionando especies particulares y/o de una ubicación particular que puede ser importante para fines de restauración y reintroducción. En otros casos, se pueden seleccionar especies particulares que tengan características de crecimiento deseables para el cultivo deSphagnum. Por ejemplo, se ha descubierto queSphagnum palustrees particularmente adecuado por sus propiedades físicas y produce una recogida de alta productividad y un medio de cultivo de gran volumen.
[0115] ElSphagnumse aplica a una superficie de crecimiento. La superficie de crecimiento es una superficie adecuada para facilitar el crecimiento delSphagnum.Por ejemplo, la superficie de crecimiento puede comprender un sustrato de crecimiento tal como compost, suelo, arena, turba,Sphagnumseco y/o medios de crecimiento alternativos.
[0116] A continuación, elSphagnumse cultivain vivoen la superficie de crecimiento. Como se usa en esta invención, "cultivar" significa preferentemente mantener elSphagnumen un estado vivo. El cultivo abarca y preferentemente se refiere a facilitar el crecimiento delSphagnum.Preferentemente, el procedimiento comprende cultivar elSphagnum in vivo enla superficie de crecimiento. Como se usa en esta invención, cultivar"in vivo"preferentemente significa cultivar fuera de las condicionesin vitro,o en otras palabras fuera de las condiciones de laboratorio controladas. Por ejemplo,el cultivo in vivoabarca el cultivo en un invernadero o en un campo.
[0117] A continuación, elSphagnumse recogida de la superficie de crecimiento. Después de un período de tiempo deseado cultivando elSphagnum,elSphagnumpuede retirarse de la superficie de crecimiento. Esto puede determinarse por la cantidad de tiempo, o por el tamaño o la cobertura delSphagnumdespués de una cantidad suficiente de crecimiento.
[0118] ElSphagnumrecogido se corta a continuación para proporcionar un material de siembra deSphagnumpara el cultivo, comprendiendo el material de siembra una pluralidad de fragmentos delSphagnum in vivo.En otras palabras, elSphagnum in vivorecogido se corta en una pluralidad de fragmentos que forman el material de siembra. El propósito del corte es proporcionar fragmentos de un tamaño deseado para un crecimiento adicional. Preferentemente, los fragmentos cortados todavía están vivos y son capaces de crecer. Preferentemente, elSphagnumrecogido está vivo cuando se corta. En particular, elSphagnumrecogido preferentemente no se seca ni muere antes de cortarlo.
[0119] La pluralidad de fragmentos deSphagnum in vivoproporciona así el material de siembra. La material de siembra actúa como un suministro deSphagnumpara un mayor crecimiento. Por ejemplo, el material de siembra se puede usar extendiendo los fragmentos en una superficie de crecimiento para el crecimiento. En otras palabras, el término "material de siembra" no significa semillas per se, sino más bien partes vegetativas deSphagnumque se pueden usar para un mayor crecimiento. ComoSphagnumse puede cultivar a partir de fragmentos de material vegetativo, los fragmentos se pueden utilizar como material de siembra. El material de siembra incluye una suspensión deSphagnumcomo se describirá a continuación, que puede actuar como un medio particularmente eficaz para esparcir elSphagnum.
[0120] ElSphagnum in vivoresultante en el material de siembra es particularmente adecuado para un mayor crecimiento. Debido a que se originó de una fuentein vitro,conserva las propiedades de esa fuente. Por ejemplo, el material es clonal y su propagación es sostenible, y todavía está relativamente limpio dadas las condiciones apropiadas de cultivoin vivo.
[0121] Además, los fragmentos resultantes deSphagnum in vivoen el material de siembra tienen características significativamente diferentes alSphagnum in vitro.
[0122]Sphagnumgeneralmente crece a partir de puntos de crecimiento discretos individuales llamados innovaciones. En plantas enteras deSphagnum silvestre,cada hebra crece principalmente a partir de un capitulum grande en la parte superior del tallo. Esto da lugar a un número muy pequeño de puntos de crecimiento en un área definida deSphagnum,en gran parte limitada por el número de capitula.El Sphagnum in vitroforma una hebra larga y delgada con un pequeño capitulum y sin ninguna rama. En la Figura 1 se muestra un ejemplo de hebra deSphagnum in vitro.El tallo comprende pequeñas hojas separadas alrededor de 0,5-1 mm a lo largo de la longitud del tallo. Si se utilizaSphagnum in vitrocomo material de siembra, se obtienen muchas de las ventajas del materialin vitro,por ejemplo, un producto limpio y sostenible. Además, se ha descubierto que siSphagnum in vitrose corta en una pluralidad de fragmentos para el material de siembra, cada hoja tiene el potencial de formar una innovación. En otras palabras, cada hoja es una innovación potencial. En cada fragmento, una o más hojas típicamente formarán una innovación y comenzarán a crecer cuando se apliquen a una superficie de crecimiento. Esto da lugar a un gran número de innovaciones en comparación con el crecimiento del capitulum. Proporcionar un gran número de innovaciones es útil en un material de siembra, ya que aumenta la cobertura inicial deSphagnum.Sin embargo, los inventores han descubierto que el material de siembra se puede mejorar aún más cultivando elSphagnum in vitro in vivoy a continuación usando el material posterior como el material de siembra.
[0123] En contraste conSphagnum in vitro,las hebras resultantes deSphagnum in vivoson físicamente diferentes. En la Figura 2 se muestra un ejemplo de una hebra deSphagnum in vivo.ElSphagnum in vivocomprende una serie de ramas a lo largo de la longitud del tallo, más similar alSphagnum silvestre.Las ramas suelen estar dispuestas a unos 5 mm de distancia a lo largo de la longitud del tallo. Cuando elSphagnum in vivose corta y el material de siembra se aplica a una superficie de crecimiento, las ramas pueden formar innovaciones. En otras palabras, las ramas son innovaciones potenciales, en lugar de las hojas. Al cortar los fragmentos para proporcionar generalmente alrededor de una rama por fragmento, se puede proporcionar una innovación potencial por fragmento. Esto da lugar a un número ligeramente menor de innovaciones totales en comparación con la misma cantidad de materialin vitro.Por lo tanto, podría esperarse que el rendimiento del crecimiento fuera peor. Sin embargo, sorprendentemente, elSphagnum in vivoproporciona una mejora del crecimiento en comparación con elSphagnum in vitro,especialmente durante la fase de crecimiento de establecimiento inicial.
[0124] Se ha descubierto que los fragmentos resultantes deSphagnum in vivoson más robustos que elSphagnum in vitro.En particular, el diámetro del tallo de los fragmentos es mucho mayor que el diámetro de los tallos deSphagnum in vitro.Esto permite una mejor absorción y transporte de agua y nutrientes, lo que promueve un mejor crecimiento cuando el material de siembrain vivose aplica a una superficie de crecimiento. Los tallos más gruesos proporcionan un material más fuerte que es más resistente a la sequía y los contaminantes, y tiene una mejor capacidad de retención de agua.
[0125] También se ha encontrado que cuando elSphagnum in vivoen el material de siembra se aplica a una superficie de crecimiento, el tamaño de cada innovación también es mucho mayor que el tamaño de las innovaciones delSphagnum in vitro.Como cada punto de crecimiento individual es mucho más grande, esto significa que es más resistente y resistente cuando se cultiva más. Esto lo hace particularmente adecuado para el establecimiento inicial, especialmente en condiciones difíciles, como en una turbera. ElSphagnum in vivoque se origina de la fuentein vitrotodavía tiene una mayor densidad de innovaciones que elSphagnum silvestre.Por lo tanto, la fase de cultivo del presente procedimiento hace que elSphagnum seadapte más al medio ambiente, de modo que cuando el material de siembra se aplica a una superficie y se cultiva, se establece de manera más rápida y efectiva. Las innovaciones más grandes están menos dominadas por competidores como algas, otros musgos o hepáticas, y dan como resultado una mayor eficiencia de establecimiento queSphagnum in vitro.Los tallos más gruesos proporcionan una capacidad de retención de agua mejorada que puede mejorar el establecimiento en malas condiciones. ElSphagnum in vivodel material de siembra proporciona así un óptimo entre el número de innovacionesdel material in vitroy las innovaciones más grandes y más robustas del cultivoin vivo.
[0126] Los fragmentosin vivoson más rápidos de establecer debido a sus puntos de crecimiento más grandes. Los fragmentos también son más resistentes a las condiciones ambientales debido a su exposición durante la etapa de cultivo del procedimiento. Esto también evita el efecto del shocken el Sphagnum in vitrodespués de la propagación inmediata directamente desde el laboratorio.
[0127] Las mediciones del crecimiento comparativo de fragmentos deSphagnum in vitroy fragmentos deSphagnum in vivose muestran en los Ejemplos 1 y 2 a continuación.
[0128] Opcionalmente, los fragmentos deSphagnum in vivotienen un diámetro medio del tallo que es al menos un 50 % más grueso que un diámetro medio del tallo delSphagnum in vitro.Opcionalmente, los fragmentos deSphagnum in vivotienen un diámetro medio de tallo que es al menos un 20 % más grueso que un diámetro medio de tallo delSphagnum in vitro,preferentemente al menos un 30 % más grueso, más preferentemente al menos un 40 %, incluso más preferentemente al menos un 50 %, incluso más preferentemente al menos un 60 %, incluso más preferentemente al menos un 70 %. Opcionalmente, al menos el 25 % de los fragmentos deSphagnum in vivotienen un diámetro del tallo al menos un 25 % más grueso que un diámetro medio del tallo delSphagnum in vitro,preferentemente al menos un 50 % más grueso. Opcionalmente, al menos el 50 % de los fragmentos deSphagnum in vivotienen un diámetro de tallo al menos un 25 % más grueso que un diámetro de tallo medio delSphagnum in vitro,preferentemente al menos un 50 % más grueso.
[0129] Opcionalmente, los fragmentos deSphagnum in vivotienen un diámetro medio de tallo de al menos 0,4 mm. Opcionalmente, los fragmentos deSphagnum in vivotienen un diámetro medio de tallo de al menos 0,3 mm, preferentemente al menos 0,35 mm, más preferentemente al menos 0,4 mm, incluso más preferentemente al menos 0,45 mm. Opcionalmente, elSphagnum in vitrotiene un diámetro medio del tallo inferior a 0,3 mm. Opcionalmente, elSphagnumin vitro tiene un diámetro medio de tallo inferior a 0,45 mm, preferentemente inferior a 0,4 mm, más preferentemente inferior a 0,35 mm, incluso más preferentemente inferior a 0,3 mm. Opcionalmente, el diámetro medio del tallo de los fragmentos deSphagnum in vivoes al menos 0,05 mm mayor que el diámetro medio del tallo deSphagnum in vitro,preferentemente al menos 0,075 mm, más preferentemente al menos 0,1 mm, incluso más preferentemente al menos 0,15 mm, incluso más preferentemente al menos 0,2 mm.
[0130] Las mediciones del diámetro medio del tallo se muestran en el Ejemplo 5 a continuación.
[0131] Opcionalmente, los fragmentos deSphagnum in vivotienen una longitud media de entre 5 y 50 mm. Opcionalmente, los fragmentos deSphagnum in vivotienen una longitud media de entre 5 y 30 mm, preferentemente entre 10 y 20 mm. Es preferible maximizar el número de fragmentos deSphagnum in vivocon una longitud de al menos 5 mm para maximizar el número de fragmentos con una rama con el potencial de formar una innovación. Opcionalmente, al menos el 25 % de los fragmentos deSphagnum in vivotienen una longitud de al menos 5 mm, preferentemente al menos el 30 %, más preferentemente al menos el 40 %, incluso más preferentemente al menos el 50 %. Opcionalmente, al menos el 25 % de los fragmentos deSphagnum in vivotienen una longitud entre 5 mm y 50 mm, preferentemente al menos el 30 %, más preferentemente al menos el 40 %, incluso más preferentemente al menos el 50 %.
[0132] Opcionalmente, proporcionarSphagnum in vitrocomprende cortarSphagnum in vitroen una pluralidad de fragmentos deSphagnum in vitro.Los fragmentos deSphagnum in vitropueden tener cualquier longitud descrita en relación con elSphagnum in vivo.Por ejemplo, los fragmentos deSphagnum in vitropueden tener una longitud media de entre 5 y 50 mm, preferentemente entre 5 y 30 mm.
[0133] Opcionalmente, proporcionarSphagnum in vitrocomprende mezclar la pluralidad de fragmentos deSphagnum in vitrocon una segunda solución fluida para proporcionar una primera suspensión deSphagnum in vitro.
[0134] Por ejemplo, los fragmentos deSphagnum in vitrose pueden mezclar con la segunda solución fluida agitando con un agitador mecánico, o agitando con un utensilio operado a mano.
[0135] Opcionalmente, la segunda solución fluida comprende agua y un agente espesante disuelto en el agua. La suspensión puede comprender cualquiera de las características de la suspensión descrita en esta invención, tal como en el primer ejemplo de la presente descripción. Por ejemplo, la segunda solución fluida puede comprender cualquiera de las características descritas en relación con la solución fluida del primer ejemplo de la presente descripción. Por ejemplo, el agente espesante puede comprender un agente espesante a base de celulosa o a base de almidón. Preferentemente, el agente espesante está basado en celulosa, más preferentemente es hidroxietilcelulosa, tal como en una concentración descrita anteriormente. Por ejemplo, la solución fluida puede comprender nutrientes como se describió anteriormente.
[0136] Opcionalmente, la suspensión deSphagnum in vitrocomprende al menos 50 g deSphagnum in vitropor L de la segunda solución fluida. Opcionalmente, entre 50 g y 150 g, preferentemente alrededor de 100 g. Opcionalmente, la segunda solución fluida comprende una masa seca total de fragmentos deSphagnumde al menos 1 g por L de agua, más preferentemente de al menos 1,5 g, incluso más preferentemente de al menos 2 g.
[0137] Opcionalmente, la aplicación comprende aplicar la suspensión deSphagnum in vitrosobre la superficie de crecimiento a una densidad de entre 0,5 y 5 L / m2 Preferentemente, la aplicación comprende aplicar la suspensión deSphagnum in vitrosobre la superficie de crecimiento a una densidad de entre 0,5 y 3 L / m2. Más preferentemente, la aplicación comprende aplicar la suspensión deSphagnum in vitrosobre la superficie de crecimiento a una densidad de entre 1 y 3 L/ m2. Incluso más preferentemente, la suspensión se aplica sobre la superficie de crecimiento entre 1,5 y 2,5 L / m2, lo más preferentemente aproximadamente 2 L / m2.
[0138] Opcionalmente, la aplicación comprende pulverizar la suspensión deSphagnum in vitrosobre la superficie de crecimiento.
[0139] Opcionalmente, la pulverización comprende bombear la suspensión deSphagnum in vitroa través de una abertura para golpear una placa de desviación. Preferentemente, la abertura tiene menos de 10 mm de diámetro, más preferentemente entre 5 mm y 10 mm, lo más preferentemente aproximadamente 6 mm. La placa deflectora proporciona una extensión sobre un área mayor y una extensión más uniforme. Por ejemplo, la suspensión se puede rociar utilizando una bomba peristáltica. Una bomba peristáltica bombea uniformemente la suspensión sin que los fragmentos deSphagnumse enreden en la bomba. Para tamaños de fragmentos inferiores a aproximadamente 30 mm, se ha descubierto que una bomba peristáltica proporciona un bombeo óptimo sin enredos. Alternativamente, la bomba puede ser una bomba de paletas que tenga paletas suaves y lisas para evitar daños alSphagnum.
[0140] Opcionalmente, la aplicación comprende aplicar la suspensión en cantidades discretas sobre la superficie de crecimiento. Por ejemplo, la suspensión puede bombearse sobre celdas individuales en una bandeja de celdas de tapón. Esto da como resultado pequeños grumos deSphagnumque crecen en tapones individuales de la superficie de crecimiento, como un medio de crecimiento.
[0141] Opcionalmente, la superficie de crecimiento comprende compost, suelo, arena, turba y/oSphagnum seco.De manera alternativa, la superficie de crecimiento puede comprender un medio de crecimiento alternativo, tal como un medio de crecimiento libre de turba. Preferentemente, la superficie de crecimiento comprende turba y/oSphagnum seco.La superficie de crecimiento es preferentemente la superficie más superior, por ejemplo, expuesta al aire (antes de aplicarSphagnum).Por ejemplo, el sustrato de crecimiento puede ser un medio de crecimiento tal como compost, turba,Sphagnumseco y/o medios de crecimiento alternativos. La superficie de crecimiento puede ser un área al aire libre tal como un campo o una turbera. Alternativamente, la superficie de crecimiento puede ser una cama de cultivo hortícola, tal como una cama interior o exterior. La superficie de crecimiento puede disponerse en una bandeja, tal como una bandeja hortícola para su uso en un invernadero o politúnel o al aire libre. Por ejemplo, la superficie de crecimiento puede comprender un medio de crecimiento hortícola (por ejemplo, un medio de crecimiento a base de turba) aplicado a una bandeja. La bandeja puede ser una bandeja de celdas de tapón que tiene celdas individuales para tapones, o puede ser una bandeja de alfombra que tiene una sola región más grande para medios de cultivo.
[0142] Opcionalmente, el cultivo se lleva a cabo en condiciones ambientales controladas. Opcionalmente, las condiciones ambientales controladas comprenden al menos uno de: riego, suministro de nutrientes, iluminación, sombreado, temperatura y/o humedad. Por ejemplo, el cultivo puede llevarse a cabo en una sala de cultivo interior tal como un invernadero o un politúnel. Opcionalmente, la sala de cultivo interior se calienta. Opcionalmente, la sala de cultivo interior comprende iluminación artificial para reemplazar o complementar la iluminación natural para el crecimiento deSphagnum.En un ejemplo, el cultivo se lleva a cabo en un invernadero, opcionalmente donde el invernadero está controlado por temperatura y/o humedad.
[0143] Opcionalmente, el cultivo comprende irrigar elSphagnum.Opcionalmente, el riego comprende aplicar agua alSphagnuma una tasa de al menos 1 L/m2/ día. Opcionalmente, el riego se realiza usando riego por pulverización tal como usando rociadores de gotitas pequeñas o un sistema de nebulización. La cantidad de riego puede depender de la pérdida de agua por evaporación. En otras palabras, el flujo de aire húmedo puede afectar la aplicación de agua requerida, y se puede aplicar más o menos agua según sea necesario.
[0144] Opcionalmente, el cultivo comprende aplicar nutrientes alSphagnum.Opcionalmente, los nutrientes están contenidos en el agua suministrada a través del riego. Por ejemplo, los nutrientes pueden ser iguales o diferentes a los nutrientes proporcionados en la suspensión. Opcionalmente, los nutrientes se aplican después de cultivar durante al menos dos semanas. Por ejemplo, como la suspensión contiene un suministro de nutrientes, en algunos casos no es necesario suministrar nutrientes durante un período inicial de cultivo. Los nutrientes pueden comprender cualquiera de los nutrientes en cualquiera de las concentraciones o intervalos como se describe en relación con el primer o segundo ejemplo de la presente descripción.
[0145] Opcionalmente, el cultivo se lleva a cabo durante al menos un mes. Preferentemente, el cultivo se lleva a cabo durante al menos cuatro meses. Más preferentemente, el cultivo se lleva a cabo durante entre cuatro y seis meses. En algunos casos, el cultivo se puede llevar a cabo durante más tiempo, como cuando está fuera y el crecimiento deSphagnumes más lento.
[0146] Opcionalmente, el corte delSphagnumrecogido comprende cortar de manera que al menos el 50 % en peso de los fragmentos deSphagnum in vivotengan una longitud de al menos 5 mm. Opcionalmente, al menos el 30 %, preferentemente al menos el 40 %, más preferentemente al menos el 50 %, incluso más preferentemente al menos el 60 %.
[0147] Según la invención reivindicada, proporcionar el material de siembra deSphagnumcomprende mezclar la pluralidad de fragmentos deSphagnum in vivocon la primera solución fluida para proporcionar una suspensión deSphagnum in vivo.Por ejemplo, la primera solución fluida puede ser la misma que la segunda solución fluida. En otros casos, la primera solución fluida puede ser diferente. Por ejemplo, puede tener un agente espesante o concentración diferente, o una composición de nutrientes diferente. Aunque se hace referencia a ella como la "primera" solución fluida, en algunos ejemplos el material de siembra puede comprender una solución fluida, mientras que elSphagnum in vitrono está suspendido en una solución fluida. En otras palabras, la primera solución fluida no se limita a la inclusión de la segunda solución fluida.
[0148] Opcionalmente, la primera solución fluida comprende agua y un agente espesante disuelto en el agua. Por ejemplo, la primera solución fluida puede comprender cualquiera de las características de la solución fluida descrita en esta invención, tal como en el primer ejemplo de la presente descripción. Por ejemplo, el agente espesante puede comprender un agente espesante a base de celulosa o a base de almidón. Por ejemplo, la primera solución fluida puede comprender nutrientes tales como calcio. Preferentemente, la primera solución fluida comprende hidroxietilcelulosa como agente espesante. Se pueden usar las concentraciones de hidroxietilcelulosa descritas en esta invención. Preferentemente, la primera solución fluida comprende entre 3 g y 12 g de hidroxietilcelulosa por L de agua, más preferentemente entre 4 g y 11 g, más preferentemente aún entre 5 g y 10 g.
[0149] En algunos ejemplos, la primera solución fluida comprende más agente espesante que la segunda solución fluida. En un ejemplo, la primera solución fluida comprende alrededor de 0,5 g más de hidroxietilcelulosa por L de agua. Opcionalmente, la primera solución fluida comprende una masa seca total de fragmentos deSphagnumde al menos 1 g por L de agua.
[0150] En otras palabras, el material de siembra comprende la suspensión deSphagnum.Como se describe en esta invención, la suspensión proporciona un medio particularmente eficaz para transportar elSphagnumy para esparcirlo.
[0151] Opcionalmente, el procedimiento comprende además aplicar el material de siembra deSphagnuma una superficie de crecimiento.
[0152] Opcionalmente, el procedimiento comprende además aplicar el material de siembra deSphagnuma una superficie de crecimiento. Para completar, el procedimiento comprende: proporcionarSphagnum in vitro;aplicar elSphagnuma una superficie de crecimiento; cultivar elSphagnum in vivoen la superficie de crecimiento; recoger elSphagnumcultivado de la superficie de crecimiento; cortar elSphagnumrecogido para proporcionar un material de siembra deSphagnumpara el cultivo, comprendiendo el material de siembra una pluralidad de fragmentos delSphagnum in vivo;y aplicar el material de siembra deSphagnuma una superficie de crecimiento. La superficie de crecimiento puede comprender cualquiera de las características descritas anteriormente en relación con la superficie de crecimiento sobre la que se aplica la primera suspensión. Por ejemplo, aplicar el material de siembra deSphagnuma una superficie de crecimiento puede comprender pulverizar la suspensión deSphagnum in vivosobre la superficie de crecimiento. La aplicación del material de siembra a una superficie de crecimiento permite el cultivo delSphagnumen el material de siembra.
[0153] De manera opcional, el procedimiento comprende además cultivar elSphagnumen el material de siembrain vivoen la superficie de crecimiento. El cultivo puede comprender cualquiera de las características descritas anteriormente en relación con el cultivo delSphagnum in vitro in vivo enla superficie de crecimiento. Por ejemplo, el cultivo puede realizarse en interiores, tal como en un invernadero que puede calentarse.
[0154] Se ha descubierto que realizar esta segunda etapa de cultivo adicional da como resultadoSphagnumque es aún más mejorado. En particular, elSphagnum esmás resistente después de crecer más tiempoin vivo.Este cultivo da como resultadoSphagnum in vivode segunda generación que se distingue deSphagnum in vivode primera generación que resulta de la primera etapa de cultivo. Este material de segunda generación a continuación se puede usar para el crecimiento.
[0155] Opcionalmente, el procedimiento comprende además recoger elSphagnumdel material de siembra de la superficie de crecimiento. EsteSphagnumse puede a continuación plantar en un sitio, por ejemplo, para la restauración de turberas. Por ejemplo, los grumos deSphagnumpueden tomarse después de al menos cuatro meses de crecimiento y plantarse en un sitio, lo que puede proporcionar un establecimiento más rápido que cubrir un área con fragmentos picados. EsteSphagnumde segunda generación tendrá propiedades deseables en el sentido de que el establecimiento se mejora en comparación con el materialin vitroy elSphagnumsilvestre recogido, y también se mejora aún más en comparación con el materialin vivode primera generación.
[0156] Opcionalmente, el procedimiento comprende proporcionar un medio de cultivo comprendiendo elSphagnumrecogido del material de siembra, comprendiendo secar elSphagnumrecogido del material de siembra.
[0157] Opcionalmente, el procedimiento comprende además cortar elSphagnumrecogido del material de siembra para proporcionar un segundo material de siembra deSphagnumpara el cultivo, comprendiendo el segundo material de siembra una pluralidad de fragmentos deSphagnum in vivode segunda generación. Esto proporciona un material de siembra adicional que contieneSphagnum in vivode segunda generación, que proporciona un mecanismo útil para fomentar el establecimiento rápido a partir de pequeños fragmentos. Por ejemplo, elSphagnumpuede cortarse como se describe en esta invención y en las longitudes descritas en esta invención.
[0158] Opcionalmente, proporcionar el segundo material de siembra comprende mezclar la pluralidad de fragmentos deSphagnum in vivode segunda generación con una tercera solución fluida para proporcionar una suspensión deSphagnum in vivode segunda generación. La tercera solución fluida puede comprender cualquiera de las características descritas anteriormente en relación con la primera o segunda soluciones fluidas, o la solución fluida del primer ejemplo de la presente descripción.
[0159] Opcionalmente, la tercera solución fluida comprende agua y un agente espesante disuelto en el agua. Opcionalmente, el agente espesante es un agente espesante a base de celulosa o a base de almidón. Opcionalmente, el agente espesante comprende hidroxietilcelulosa. Opcionalmente, la tercera solución fluida comprende entre 5 g y 10 g de hidroxietilcelulosa por L de agua. Opcionalmente, la tercera solución fluida comprende una masa seca total de fragmentos deSphagnumde al menos 1 g por L de agua.
[0160] Esta tercera suspensión se puede a continuación cultivar para producir medios de cultivo como se describió anteriormente.
[0161] Según un segundo aspecto de la presente descripción, según la invención reivindicada, se proporciona un material de siembra deSphagnumque se puede obtener mediante el procedimiento del primer aspecto. Como se apreciará, la diferencia física entre elSphagnum in vitroy elSphagnum in vivoresultante del material de siembra representa una
alteración técnica significativa y detectable impartida por el procedimiento. Por ejemplo, diferencias claras se muestran en las Figuras 1 y 2.
[0162] El material de siembra es detectablemente diferente en comparación con elSphagnumanterior, ya que elSphagnumde segunda generación tiene diferencias visibles que conducen a un establecimiento y una tasa de crecimiento más rápidos. Además, el material de siembra es diferente ya que contiene una pluralidad de fragmentos de dichoSphagnum.
[0163] Las realizaciones relacionadas con el procedimiento se pueden aplicar alSphagnumque se puede obtener mediante el procedimiento, yviceversa.
[0164] Otras definiciones de términos pueden aparecer a lo largo de la memoria descriptiva. Antes de que las realizaciones ejemplares se describan con más detalle, debe entenderse que esta descripción no se limita a las realizaciones particulares descritas, y como tal puede variar. También debe entenderse que la terminología usada en esta invención solo tiene la finalidad de describir realizaciones particulares y no pretende ser limitativa, ya que el alcance de la presente descripción solo se verá limitado por las reivindicaciones adjuntas.
[0165] Cuando se proporciona un intervalo de valores, se entiende que cada valor intermedio, hasta la décima parte de la unidad del límite inferior a menos que el contexto indique claramente lo contrario, entre los límites superior e inferior de ese intervalo también se describe específicamente. Cada intervalo menor entre cualquier valor establecido o valor intermedio en un intervalo establecido y cualquier otro valor establecido o intermedio en ese intervalo establecido está comprendido dentro de la presente descripción. Los límites superior e inferior de estos intervalos más pequeños pueden incluirse o excluirse independientemente en el intervalo, y cada intervalo donde ninguno o ambos límites se incluyen en los intervalos más pequeños también se incluye dentro de la presente descripción, sujeto a cualquier límite específicamente excluido en el intervalo indicado. Cuando el intervalo establecido incluye uno o ambos límites, los intervalos que excluyen ambos o uno de esos límites incluidos también están incluidos en esta descripción.
[0166] Realizaciones de la descripción se describen a continuación, solo a modo de ejemplo, con referencia a las Figuras y Ejemplos dibujos adjuntos.
La Figura 1 muestra una fotografía de una hebra deSphagnum in vitro.
La Figura 2 muestra una fotografía de una hebra deSphagnum in vivo.
La Figura 3 muestra una tabla del número de innovaciones contadas cuando se aplicóSphagnuma una superficie en el Ejemplo 1.
La Figura 4 muestra una fotografía de la cobertura deSphagnumpara el Ensayo 1 del Ejemplo 1. La Figura 5 muestra una fotografía de la cobertura deSphagnumpara el Ensayo 2 del Ejemplo 1.
La Figura 6 muestra una fotografía de la cobertura deSphagnumpara el Ensayo 3 del Ejemplo 1.
La Figura 7 muestra una tabla del número de innovaciones contadas cuando se aplicóSphagnuma una superficie al aire libre en el Ejemplo 2.
La Figura 8 muestra una gráfica del porcentaje de cobertura delSphagnumen el Ejemplo 2.
La Figura 9 muestra una fotografía de la cobertura deSphagnumpara el Ensayo 1 del Ejemplo 2.
La Figura 10 muestra una fotografía de la cobertura deSphagnumpara el Ensayo 2 del Ejemplo 2.
La Figura 11 muestra una fotografía de la cobertura deSphagnumpara el Ensayo 3 del Ejemplo 2.
La Figura 12 muestra una tabla de la proporción de fragmentos deSphagnumque tienen una longitud de al menos 5 mm para el Ensayo 1 del Ejemplo 3.
La Figura 13 muestra una tabla de la proporción de fragmentos deSphagnumque tienen una longitud de al menos 5 mm para el Ensayo 2 del Ejemplo 3.
La Figura 14 muestra una tabla de la proporción de fragmentos deSphagnumque tienen una longitud de al menos 5 mm para el Ensayo 3 del Ejemplo 3.
La Figura 15 muestra una tabla de las longitudes de fragmentos deSphagnumque tienen una longitud de al menos 5 mm para el Ensayo 1 del Ejemplo 4.
La Figura 16 muestra una tabla de las longitudes de fragmentos deSphagnumque tienen una longitud de al menos 5 mm para el Ensayo 2 del Ejemplo 4.
La Figura 17 muestra una tabla de las longitudes de fragmentos deSphagnumque tienen una longitud de al menos 5 mm para el Ensayo 3 del Ejemplo 4.
La Figura 18 muestra una tabla de los diámetros de tallo deSphagnumpara el Ensayo 1 del Ejemplo 5.
La Figura 19 muestra una tabla de los diámetros de tallo deSphagnumpara el Ensayo 2 del Ejemplo 5.
La Figura 20 muestra una tabla de los diámetros de tallo deSphagnumpara el Ensayo 3 del Ejemplo 5.
La Figura 21 muestra una tabla del peso húmedo, peso seco y contenido de agua de fragmentos deSphagnumpara el Ensayo 1 del Ejemplo 6.
La Figura 22 muestra una tabla del peso húmedo, peso seco y contenido de agua de fragmentos deSphagnumpara el Ensayo 2 del Ejemplo 6.
La Figura 23 muestra una tabla del peso húmedo, peso seco y contenido de agua de fragmentos deSphagnumpara el Ensayo 3 del Ejemplo 6.
La Figura 24 muestra una tabla de la distancia entre ramas para el Ensayo 1 del Ejemplo 7.
La Figura 25 muestra una tabla de la distancia entre ramas para el Ensayo 2 del Ejemplo 7.
La Figura 26 muestra una tabla de la distancia entre ramas para el Ensayo 3 del Ejemplo 7.
La Figura 27 muestra una fotografía del establecimiento del Ensayo 1 del Ejemplo 8.
La Figura 28 muestra una fotografía del establecimiento del Ensayo 2 del Ejemplo 8.
La Figura 29 muestra una gráfica de las tasas de crecimiento deSphagnumde los Ensayos 1 y 2 del Ejemplo 9. La Figura 30 muestra una tabla del tiempo para que fluyan las suspensiones del Ejemplo 10.
La Figura 31 muestra una tabla del tiempo para que fluyan las suspensiones del Ejemplo 11.
EJEMPLOS
EJEMPLO 1
Suspensiones deSphagnum
Materiales y Procedimientos
[0167] Las suspensiones deSphagnumse prepararon según la presente descripción. Se realizaron tres ensayos. El Ensayo 1 fueSphagnum in vitrotomado inmediatamente del laboratorio después de 3 meses de crecimiento. El Ensayo 2 fueSphagnum in vivode primera generación recogido después de 6 meses de crecimiento en un invernadero interior calentado, donde se aplicóSphagnum in vitropara producir elSphagnum in vivo.El Ensayo 3 también fue elSphagnum in vivode primera generación recogido después de 6 meses de crecimiento en un invernadero interior calentado, pero elSphagnumno estaba cortado.
[0168] Las hebras deSphagnumde las pruebas 1 y 2 se cortaron en longitudes típicas de alrededor de 5 a 30 mm con una máquina. En el Ensayo 3, las hebras no se cortaron y tenían una longitud atípica de alrededor de 50-100 mm.
[0169] A continuación, se preparó una solución fluida mediante la preparación de una solución madre de nutrientes. Se utilizó Hortimix 15-5-15, disponible comercialmente de Hortifeeds, Reino Unido. A continuación, los nutrientes se diluyeron en agua para proporcionar 0,75 g de Hortimix 15-5-15 por L de agua.
[0170] A continuación, se disolvió un agente espesante en la solución nutritiva. El agente espesante fue hidroxietilcelulosa, en forma de Natrosol™ HX, disponible comercialmente de Ashland, EE. UU. Se utilizaron 8 mg de hidroxietilcelulosa por L de solución.
[0171] Los fragmentos deSphagnumde cada ensayo se mezclaron a continuación con la solución. Esto suspendió los fragmentos deSphagnumdentro de la solución espesada. A continuación, la suspensión se pulverizó sobre una superficie a una tasa de aplicación de 2 L por m2 y se cultivó en un invernadero interior calentado durante 4 semanas. El riego se suministró mediante la aplicación de agua para mantener la humedad, y no se aplicaron más nutrientes.
[0172] Se tomó una fotografía de cada uno de los tres ensayos. Se situó un anillo de estandarización en la superficie deSphagnumen la fotografía para calibrar el tamaño. Al medir el tamaño del anillo en la fotografía, se calculó una relación de ajuste para la calibración. A continuación se midió el ancho y la longitud de la fotografía para cada ensayo, y estos valores se multiplicaron para proporcionar un área medida para cada fotografía. Esta área a continuación se multiplicó por la relación de ajuste para proporcionar el área verdadera en la fotografía.
[0173] El número de innovaciones se contó a continuación en cada ensayo. En particular, el número de innovaciones pequeñas y el número de innovaciones grandes se contabilizaron individualmente para proporcionar un número total de innovaciones. Las innovaciones pequeñas se definieron como aquellas que carecían de ramas significativas. Al dividir el número de innovaciones por el área, se calculó el número total de innovaciones por m2. Al dividir el número de innovaciones por m2 por 2 L (la tasa de aplicación), se calculó el número de innovaciones por L de suspensión. Los resultados se muestran en las Figuras 3 a 6.
Resultados
[0174] ElSphagnum in vivosin cortar muestra una caída significativa en el número de innovaciones en comparación con elSphagnum in vivopicado, lo que demuestra que la capitula inhibe el número de puntos de crecimiento a lo largo del tallo. Al cortar elSphagnumen tamaños adecuados, se puede maximizar el número de innovaciones.
[0175] En el Ensayo 2, el número total de innovaciones por L de suspensión para elSphagnum in vivosin cortar fue de 8.312. En el Ensayo 2, el número de innovaciones grandes por L de suspensión para elSphagnum in vivofue de 794.
[0176] En el Ensayo 3, el número total de innovaciones por L de suspensión para elSphagnum in vivosin cortar fue de 60.067. En el Ensayo 3, el número de innovaciones grandes por L de suspensión para elSphagnum in vivosin cortar fue de 828.
[0177] El Sphagnumin vivosin cortar muestra una caída significativa en el número de innovaciones en comparación con elSphagnum in vivopicado, lo que demuestra que la capitula inhibe el número de puntos de crecimiento a lo largo del tallo. Al cortar elSphagnumen tamaños apropiados, se puede maximizar el número de innovaciones.
[0178] Aunque el número de innovaciones deSphagnum in vitroes mayor que el deSphagnum in vivo,el número de innovaciones grandes es mucho mayor en el ensayoin vivo.Esto muestra que elSphagnum in vivose vuelve más robusto y produce innovaciones más grandes que ayudan al establecimiento inicial. Las innovaciones grandes son particularmente importantes para la supervivencia inicial en condiciones deficientes, como en las turberas.
[0179] Al considerar el establecimiento total en términos del número de innovaciones y el tamaño de esas innovaciones, elSphagnum in vivodel Ensayo 2 muestra una mejora significativa sobre elSphagnum in vitrodel Ensayo 1 y elSphagnumsin cortar del Ensayo 3.
EJEMPLO 2
Crecimiento exterior - Suspensiones deSphagnum
Materiales y Procedimientos
[0180] Las suspensiones deSphagnumse prepararon según la presente descripción. Se realizaron tres ensayos, con tres muestras replicadas para cada ensayo. El ensayo 1 fuein vitro Sphagnumtomado inmediatamente del laboratorio. El Ensayo 2 fueSphagnum in vivode primera generación recogido después de aproximadamente 6 meses de crecimiento en un invernadero, donde se aplicóSphagnum in vitropara producir elSphagnum in vivo.El ensayo 3 fueSphagnum in vivo de segunda generación,que fueSphagnum in vivode primera generación posteriormente cortado y cultivado nuevamente en el invernadero durante otros 6 meses.
[0181] Las hebras deSphagnumde cada ensayo se cortaron en longitudes típicas de alrededor de 5 a 30 mm con una máquina. A continuación, se preparó una solución fluida mediante la preparación de una solución madre de nutrientes. Se utilizó Hortimix 15-5-15, disponible comercialmente de Hortifeeds, Reino Unido. A continuación, los nutrientes se diluyeron en agua para proporcionar 0,75 g de Hortimix 15-5-15 por L de agua. A continuación, se disolvió un agente espesante en la solución nutritiva. El agente espesante fue hidroxietilcelulosa, en forma de Natrosol™ HX, disponible comercialmente de Ashland, EE. UU. Se utilizaron 8 mg de hidroxietilcelulosa por L de solución. Los fragmentos deSphagnumde cada ensayo se mezclaron a continuación con la solución. Esto suspendió los fragmentos deSphagnumdentro de la solución espesada.
[0182] A continuación, la suspensión se pulverizó sobre una superficie de crecimiento en forma de una bandeja que contenía un medio de crecimiento, a una tasa de aplicación de 3 L de suspensión por m2. La bandeja tenía una superficie de 2016 cm2. A continuación, elSphagnumse cultivó en el exterior durante 5 semanas. El riego se suministró mediante la aplicación de agua para mantener elSphagnumhúmedo, y no se aplicaron más nutrientes.
[0183] Después de las 5 semanas de crecimiento al aire libre, se tomó una fotografía de cada uno de los tres ensayos. El número de innovaciones por cuarto de bandeja a continuación se contó en cada ensayo. En particular, el número de innovaciones pequeñas y el número de innovaciones grandes se contabilizaron individualmente para proporcionar un número total de innovaciones. Las innovaciones grandes eran generalmente donde capitula había comenzado a crecer bien. Las innovaciones pequeñas se definieron como aquellas que carecían de ramas significativas. Las innovaciones pequeñas tenían un tamaño típico de 0,25 cm2, mientras que las innovaciones grandes tenían un tamaño típico de 2,25 cm2. El área de las innovaciones pequeñas y las innovaciones grandes para cada ensayo se calculó multiplicando el número por el tamaño medio. El área de las innovaciones a continuación se sumó y dividió por el área conocida de la bandeja, proporcionando el porcentaje de cobertura de las innovaciones sobre el área. Los resultados se muestran en las Figuras 7 a 11.
Resultados
[0184] Los resultados numéricos se muestran en una tabla en la Figura 7. Los resultados del porcentaje de cobertura se muestran en una gráfica en la Figura 8. Las Figuras 9 a 11 muestran las fotografías de los resultados de innovación de una réplica de los Ensayos 1 a 3, respectivamente. En el Ensayo 1, el número de innovaciones pequeñas por cuarto de bandeja (504 cm2) para elSphagnum in vitrofue de 54,3 con un error, según la variación en los ensayos replicados, de 2,0. El número de innovaciones grandes por cuarto de bandeja para elSphagnum in vitrofue de 0,0 con un error de 0,0. El porcentaje de cobertura de innovaciones pequeñas y grandes fue del 2,7 % con un error del 0,1 %.
[0185] En el Ensayo 2, el número de innovaciones pequeñas por cuarto de bandeja para elSphagnum in vivofue de 126,0 con un error de 20,1. En el Ensayo 2, el número de innovaciones grandes por cada cuarto de bandeja fue de 30,7 con un error de 1,8. El porcentaje de cobertura de innovaciones pequeñas y grandes fue del 19,9 % con un error del 1,3 %.
[0186] En el Ensayo 3, el número de innovaciones pequeñas por cuarto de bandeja para la segunda generación deSphagnum in vivofue de 70,3 con un error de 5,4. En el Ensayo 3, el número de innovaciones grandes por cada cuarto de bandeja fue de 52,3 con un error de 4,8. El porcentaje de cobertura de innovaciones pequeñas y grandes fue del 26,9 % con un error del 2,2 %.
[0187] El porcentaje de cobertura de las innovaciones aumenta significativamente entre elSphagnum in vitrodel Ensayo 1 y elSphagnum in vivodel Ensayo 2 que se había sometido al procedimiento de la presente descripción. Como se muestra en la Figura 10, no solo la cobertura total es mayor, sino que hay más innovaciones más grandes (capitula) que en la Figura 9. Esto reduce el tiempo de establecimiento y mejora aún más la tasa de supervivencia. Esto confirma que, especialmente en condiciones deficientes como el establecimiento al aire libre, elSphagnum in vivologra un mejor establecimiento inicial y obtiene una mayor cobertura. Esto es particularmente importante para aplicarSphagnumpara la restauración de turberas, ya que típicamenteSphagnumtendrá que aplicarse a un entorno hostil, por lo que la supervivencia en ausencia de refugio, calor y nutrientes, por ejemplo, es enormemente beneficiosa.
[0188] La cobertura y el número de innovaciones grandes se incrementan aún más con el Ensayo 3, como se muestra en la Figura 11. Las etapas adicionales de cultivo y corte en interiores impartidos alSphagnumde segunda generación endurecen aún más elSphagnumpara hacerlo más resistente, lo que lleva a un mejor establecimiento. EJEMPLO 3
Número de fragmentos deSphagnum
Materiales y Procedimientos
[0189] El Ensayo 1 fueSphagnum in vitrotomado inmediatamente del laboratorio después de 4 meses de crecimiento. El Ensayo 2 fueSphagnum in vivode primera generación recogido después de 6 meses de crecimiento en un invernadero interior calentado, donde se aplicóSphagnum in vitropara producir elSphagnum in vivo.El ensayo 3 fueSphagnum in vivode segunda generación recogido después de 6 meses de crecimiento en un invernadero interior con calefacción, donde la primera generación deSphagnum in vivose recogió después de 6 meses de crecimiento en un invernadero interior con calefacción y se aplicó para producir la segunda generación deSphagnum in vivo.Se recogieron muestras de 1 g deSphagnum.El contenido de agua se estandarizó comprimiendo elSphagnumcon una fuerza correspondiente a 16 g /cm2 para proporcionar una masa estandarizada por volumen. Se tomaron tres muestras para el Ensayo 1 y cinco muestras para los Ensayos 2 y 3.
[0190] Las muestras se hicieron flotar en agua y todos los fragmentos que tenían una longitud de al menos 5 mm se seleccionaron para el recuento. El material restante se coló en un tamiz y se retiró con pinzas para pesarlo.
[0191] Se midió el peso de los fragmentos que tenían una longitud de al menos 5 mm y se contó el número de fragmentos. También se midió el peso de los fragmentos de menos de 5 mm. El peso se estandarizó drenando hasta que no hubiera más agua drenada por gravedad, y a continuación se pesó. A continuación se calculó la proporción de fragmentos que tenían una longitud de al menos 5 mm en peso para cada muestra. Este procedimiento se repitió para cada muestra en cada ensayo. A continuación, se calcularon la media y las desviaciones estándar para cada ensayo. El número de fragmentos que tienen una longitud de al menos 5 mm por L de suspensión a continuación se calculó para cada ensayo multiplicando el número promedio de fragmentos contados por muestra y multiplicando por 100 para proporcionar el número de fragmentos por 100 g (aproximadamente por L de suspensión). Los resultados se muestran en las Figuras 12 a 14.
Resultados
[0192] Los resultados numéricos se muestran en las tablas de las Figuras 12 a 14 para los Ensayos 1 a 3, respectivamente. En el Ensayo 1, la proporción media de fragmentos de al menos 5 mm en peso para elSphagnum in vitrofue del 57 %. En el Ensayo 1, el número medio de fragmentos de al menos 5 mm por L de suspensión para elSphagnum in vitrofue de 6.633.
[0193] En el Ensayo 2, la proporción media de fragmentos de al menos 5 mm en peso para la primera generación deSphagnum in vivofue del 48 %. En el Ensayo 2, el número medio de fragmentos de al menos 5 mm por L de suspensión para elSphagnum in vivode primera generación fue de 4.360.
[0194] En el Ensayo 3, la proporción media de fragmentos de al menos 5 mm en peso para la segunda generación deSphagnum in vivofue del 77 %. En el Ensayo 3, el número medio de fragmentos de al menos 5 mm por L de suspensión para elSphagnum in vivode segunda generación fue de 3.840.
EJEMPLO 4
Longitudes de fragmentos deSphagnum
Materiales y Procedimientos
[0195] El Ensayo 1 fueSphagnum in vitrotomado inmediatamente del laboratorio después de 4 meses de crecimiento. El Ensayo 2 fueSphagnum in vivode primera generación recogido después de 6 meses de crecimiento en un invernadero interior calentado, donde se aplicóSphagnum in vitropara producir elSphagnum in vivo.El ensayo 3 fueSphagnum in vivode segunda generación recogido después de 6 meses de crecimiento en un invernadero interior con calefacción, donde la primera generación deSphagnum in vivose recogió después de 6 meses de crecimiento en un invernadero interior con calefacción y se aplicó para producir la segunda generación deSphagnum in vivo.Se recogieron muestras de aproximadamente 1 g deSphagnum.El contenido de agua se estandarizó comprimiendo elSphagnumcon una fuerza correspondiente a 16 g/cm2 para proporcionar una masa estandarizada por volumen. Se tomaron tres muestras para cada uno de los ensayos.
[0196] Las muestras se hicieron flotar en agua y todos los fragmentos que tenían una longitud de al menos 5 mm se seleccionaron para el recuento.
[0197] Las longitudes de los fragmentos de al menos 5 mm de longitud en cada muestra se midieron utilizando una regla de acero de escala fina. A continuación, se calculó la longitud media de los fragmentos para cada muestra. A continuación, se calculó la longitud media de los fragmentos para cada ensayo. Los resultados se muestran en las Figuras 15 a 17.
Resultados
[0198] Los resultados numéricos se muestran en las tablas de las Figuras 15 a 17 para los Ensayos 1 a 3, respectivamente. En el Ensayo 1, la longitud media de los fragmentos de al menos 5 mm para elSphagnum in vitrofue de 10,7 mm. En el Ensayo 2, la longitud media de los fragmentos de al menos 5 mm para elSphagnum in vivode primera generación fue de 8,3 mm. En el Ensayo 3, la longitud media de los fragmentos de al menos 5 mm para elSphagnum in vivode segunda generación fue de 15,7 mm.
EJEMPLO 5
Diámetros de los tallos deSphagnum
Materiales y Procedimientos
[0199] El Ensayo 1 fueSphagnum in vitrotomado inmediatamente del laboratorio después de 4 meses de crecimiento. El Ensayo 2 fueSphagnum in vivode primera generación recogido después de 6 meses de crecimiento en un invernadero interior calentado, donde se aplicóSphagnum in vitropara producir elSphagnum in vivo.El ensayo 3 fueSphagnum in vivode segunda generación recogido después de 6 meses de crecimiento en un invernadero interior con calefacción, donde la primera generación deSphagnum in vivose recogió después de 6 meses de crecimiento en un invernadero interior con calefacción y se aplicó para producir la segunda generación deSphagnum in vivo.Se recogieron muestras de aproximadamente 100 g deSphagnum.Se seleccionaron diez hebras de muestra al azar de estas para cada uno de los ensayos.
[0200] Se midió el diámetro de los tallos de las hebras en cada muestra. El diámetro del tallo se mide como el espesor del tallo, preferentemente perpendicular a la longitud del tallo. Se utilizó un microscopio para medir el diámetro del tallo en píxeles, y este se convirtió en un diámetro en mm. El microscopio utilizado tiene un aumento estándar de 449 píxeles por mm. En otros casos, como para diámetros más grandes, esto se puede medir mediante el uso de una herramienta de medición de longitud, como calibres. Se tomaron tres mediciones a lo largo de la longitud de cada hebra. A continuación se calculó el diámetro medio de cada muestra sumando las mediciones y dividiendo por el número de mediciones (tres).
[0201] A continuación, se calculó el diámetro medio de los tallos para cada ensayo. Por lo tanto, la media se puede calcular sumando el diámetro medio de cada muestra y dividiendo la suma total por el número de muestras (diez). Los resultados se muestran en las Figuras 18 a 20.
Resultados
[0202] Los resultados numéricos se muestran en las tablas de las Figuras 18 a 20 para los Ensayos 1 a 3, respectivamente. En el Ensayo 1, el diámetro medio de los fragmentos para elSphagnum in vitrofue de 0,27 mm. En el Ensayo 2, el diámetro medio de los fragmentos para elSphagnum in vivode primera generación fue de 0,49 mm. En el Ensayo 3, el diámetro medio de los fragmentos para elSphagnum in vivode segunda generación fue de 0,48 mm.
[0203] El diámetro medio aumentó significativamente entre elSphagnum in vitroy elSphagnum in vivode primera generación. Esto demuestra el rápido aumento del grosor del tallo debido al cultivoin vivo.El aumento en el grosor del tallo produce un fragmento mucho más robusto que está más adaptado para la absorción de agua y nutrientes y la capacidad de retención de agua, y proporciona un establecimiento inicial más efectivo.
EJEMPLO 6
Peso de fragmentos deSphagnum
Materiales y Procedimientos
[0204] El Ensayo 1 fueSphagnum in vitrotomado inmediatamente del laboratorio después de 4 meses de crecimiento. El Ensayo 2 fueSphagnum in vivode primera generación recogido después de 6 meses de crecimiento en un invernadero interior calentado, donde se aplicóSphagnum in vitropara producir elSphagnum in vivo.El ensayo 3 fueSphagnum in vivode segunda generación recogido después de 6 meses de crecimiento en un invernadero interior con calefacción, donde la primera generación deSphagnum in vivose recogió después de 6 meses de crecimiento en un invernadero interior con calefacción y se aplicó para producir la segunda generación deSphagnum in vivo.Se tomaron tres muestras para cada uno de los ensayos.
[0205] Se midió el peso húmedo de la muestra de fragmentos. El contenido de agua se estandarizó comprimiendo elSphagnuma una masa estándar por volumen aplicando una fuerza de 16 g / cm2 y permitiendo el drenaje.
[0206] A continuación, se midió el peso seco de la muestra de fragmentos. El peso seco se define como el peso delSphagnumcuando no se puede eliminar más agua. Esto se realizó secando elSphagnuma 25 °C con una humedad inferior al 50 % hasta que no se registró ninguna pérdida de peso adicional. En otros ejemplos, elSphagnumse puede calentar a 110 °C durante 24 horas.
[0207] A continuación, se calculó el porcentaje de contenido de agua de las muestras dividiendo el peso húmedo por el peso seco. Los resultados se muestran en las Figuras 21 a 23.
Resultados
[0208] Los resultados numéricos se muestran en las tablas de las Figuras 21 a 23 para los Ensayos 1 a 3, respectivamente. En el Ensayo 1, el peso seco medio de los fragmentos para elSphagnum in vitrofue de 1,43 g. El porcentaje medio de contenido de agua fue del 98 %. En el Ensayo 2, el peso seco medio de los fragmentos para la primera generación deSphagnum in vivofue de 2,95 g. El porcentaje medio de contenido de agua fue del 97 %. En la Prueba 3, el peso seco medio de los fragmentos para la segunda generación deSphagnum in vivofue de 3,06 g. El porcentaje medio de contenido de agua fue del 97 %.
EJEMPLO 7
Distancia entre ramas
Materiales y procedimientos
Resultados
[0209] Cada uno de los tres ensayos involucró muestras deSphagnum in vivode primera generación recogidas después de 6 meses de crecimiento en un invernadero interior calentado, donde se aplicóSphagnum in vitropara producir elSphagnum in vivo.Cada uno de los ensayos utilizóSphagnum palustre.Se tomaron cinco tallos de muestra para cada ensayo.
[0210] La distancia entre las ramas de cada tallo se midió con calibres con una precisión de 0,5 mm. Se tomaron al menos seis mediciones en cada tallo. Las mediciones se iniciaron aproximadamente 1 cm por debajo de la capitula. Los resultados se muestran en las Figuras 24 a 26.
Resultados
[0211] Los resultados numéricos se muestran en las tablas de las Figuras 24 a 26 para los Ensayos 1 a 3, respectivamente. En el Ensayo 1, la distancia media entre ramas fue de 5,27 mm. En el Ensayo 2, la distancia media entre ramas fue de 4,95 mm. En el Ensayo 3, la distancia media entre ramas fue de 5,00 mm. En general, la media en cada ensayo es de 5,08 mm. Esto permite proporcionar tamaños de fragmentos de al menos unos 5 mm para proporcionar una rama como una innovación potencial.
EJEMPLO 8
Comparación vsSphagnumsilvestre - Borth
Materiales y Procedimientos
[0212] Los ensayos se realizaron en Cors Fochno, Borth, Gales. El ensayo 1 fueSphagnumsilvestre recogido y translocado al sitio del ensayo. El Ensayo 2 fueSphagnumcultivado según la presente descripción. En particular, el Ensayo 2 fueSphagnumcultivado a partir deSphagnum in vivode segunda generación. Cada ensayo contenía tres especies: S.papillosum(izquierda de las Figuras 28 y 29), S.capillifolium(centro) y S.palustre(derecha), y cada especie tenía tres réplicas. Las pruebas se realizaron en una turbera elevada y se dejaron al aire libre durante 5 meses.
Después de 5 meses de crecimiento, se tomaron fotografías y se calculó el porcentaje de crecimiento por aumento de área.
Resultados
[0213] Las fotografías se muestran en las Figuras 27 y 28 para el Ensayo 1 y 2, respectivamente. En el Ensayo 1,se ve visualmente que elSphagnumha crecido lentamente. El porcentaje de aumento en el crecimiento fue del 37 %.
[0214] En el Ensayo 2, elSphagnumcreció mucho más rápido y fue mucho más rápido de establecer. Se observa que las tres especies han crecido con éxito, y cada muestra creció mejor que el Ensayo 1. El porcentaje de aumento en el crecimiento fue del 285 %. Esto proporciona más de 7 veces la tasa de crecimiento delSphagnumsilvestre del Ensayo 1.
[0215] Esto muestra que, no solo elSphagnumcultivado según la presente descripción proporciona una mejora en comparación con el cultivo deSphagnum in vitro,sino que también proporciona una mejora en comparación con elSphagnumsilvestre.
EJEMPLO 9
Comparación vsSphagnum silvestre -Kinder Scout
Materiales y Procedimientos
[0216] Los ensayos se realizaron en Kinder Scout, Derbyshire Peak District, Inglaterra. El ensayo 1 fueSphagnumsilvestre recogido y translocado al sitio del ensayo. El Ensayo 2 fueSphagnumcultivado según la presente descripción. En particular, el Ensayo 2 fueSphagnumcultivado a partir deSphagnum in vivode segunda generación. Las pruebas se dejaron al aire libre durante 24 meses. Después de intervalos de 12 meses de crecimiento, se midió el aumento porcentual en el área para cada ensayo.
Resultados
[0217] Los valores se presentan en la gráfica de la Figura 29. En el Ensayo 1, el aumento porcentual en el área fue constantemente inferior al del Ensayo 2. Después de 24 meses, el aumento porcentual en el área para el Ensayo 1 fue de aproximadamente el 60 %, mientras que para el Ensayo 2 fue superior al 150 %.
[0218] Esto muestra que elSphagnumcultivado según la presente descripción proporciona una mejora en el establecimiento rápido y también en las tasas de crecimiento a largo plazo en comparación con elSphagnumsilvestre recogido.
EJEMPLO 10
Propiedades de viscosidad
Materiales y procedimientos
[0219] Las suspensiones deSphagnumse prepararon según la presente descripción. Se probó un control, que contenía la suspensión sin elSphagnum.El Ensayo 1 y el Ensayo 2 fueron la misma suspensión, con aproximadamente 100 g por L deSphagnumen la suspensión. Las suspensiones comprendían una solución fluida de un agente espesante de hidroxietilcelulosa disuelta en agua. El agente espesante fue Natrosol™ HHX presente a 7,25 g por L. El Ensayo 2 fue la misma suspensión que el Ensayo 1, pero se obtuvo después de varias horas después de la mezcla inicial para probar cualquier efecto de fluctuación de temperatura
[0220] Se utilizó una bandeja para observar la velocidad de flujo horizontal de las suspensiones. La bandeja tenía una longitud interna de 34 cm y un ancho de 27 cm. La bandeja se dividió en una región de retención y una región de flujo mediante un divisor en forma de una almohadilla de poliestireno que se extiende a través de un ancho de la bandeja. La región de retención se definió como la región entre el divisor y el extremo de la bandeja. La región de retención tenía un área de aproximadamente 192 cm2. Se marcó una línea de meta en la bandeja a una distancia de 15 cm de la región de retención.
[0221] La bandeja se colocó en una superficie nivelada, que se aseguró mediante el uso de un nivel de burbuja. Para cada prueba, se colocaron 500 ml de la suspensión en la región de retención de la bandeja. Se midió que la temperatura de la suspensión era de 14 °C en cada ensayo. El divisor retuvo la suspensión en la región de retención. A continuación, el divisor se elevó para permitir que la suspensión fluyera libremente a través de la bandeja. Inmediatamente se puso en marcha un temporizador cuando se levantó el divisor. El temporizador a continuación se detuvo cuando la línea de flujo del borde de ataque de la suspensión había cruzado por completo la línea de meta. A continuación se registró el tiempo transcurrido.
[0222] A continuación, la suspensión se retiró de la bandeja y la bandeja se volvió a colocar en la superficie nivelada y el divisor se bajó a su posición. Este procedimiento se repitió tres veces con diferentes muestras de la misma suspensión para proporcionar cuatro tiempos de muestra para cada suspensión. A continuación, se calculó una media de las cuatro muestras.
Resultados
[0223] El tiempo para que la suspensión fluya fuera de la región de retención y a través de la línea de meta proporciona una indicación de las propiedades viscosas de la suspensión. Cuanto más viscosa sea la suspensión, más tiempo tardará la suspensión en cruzar la línea de meta.
[0224] Los valores se presentan en la tabla de la Figura 30. El control proporcionó un tiempo medio de 15,5 segundos. El ensayo 1 proporcionó un tiempo medio de 30,5 segundos. Esto muestra que elSphagnumaumenta significativamente la viscosidad de la suspensión. Esto también proporciona una medida de la viscosidad deseada de una realización preferida de la presente descripción. El Ensayo 2 proporcionó un tiempo medio de 29,2 segundos, consistente con el Ensayo 1.
EJEMPLO 11
Viscosidad - efecto de la temperatura
Materiales y Procedimientos
[0225] Las suspensiones deSphagnumse prepararon según la presente descripción. El Ensayo 1 y el Ensayo 2 fueron suspensiones que comprendían una solución fluida de un agente espesante de hidroxietilcelulosa disuelta en agua. El Ensayo 1 contenía un agente espesante de Natrosol™ HHX presente a 7,25 g por L. El Ensayo 2 era la misma suspensión que el Ensayo 1, pero en su lugar contenía un agente espesante de Natrosol™ HX presente a 9 g por L. Cada ensayo se probó a diferentes temperaturas ambiente, incluidos 10 °C, 15 °C y 20 °C.
[0226] Cada uno de los ensayos se sometió a continuación al experimento de temporización del Ejemplo 10. Resultados
[0227] Los valores se presentan en la tabla de la Figura 31. El ensayo 1 proporcionó un tiempo de 43,8 segundos a 10 °C, 39,1 segundos a 15 °C y 32,5 °C a 20 °C. El ensayo 2 proporcionó un tiempo de 46,6 segundos a 10 °C, 35,6 segundos a 15 °C y 38,0 segundos a 20 °C. Esto muestra que el tiempo entre las diferentes composiciones (es decir, entre diferentes agentes espesantes) puede ser similar para diferentes temperaturas. En otras palabras, se pueden lograr propiedades de viscosidad similares a través de la selección adecuada de la concentración del agente espesante.
Claims (14)
1. Un procedimiento de suministro de un material de siembra deSphagnum,comprendiendo: proporcionarSphagnum in vitro;
aplicar elSphagnuma una superficie de crecimiento;
cultivar elSphagnum in vivoen la superficie de crecimiento;
recoger elSphagnumcultivado de la superficie de crecimiento;
cortar elSphagnumrecogido para proporcionar una pluralidad de fragmentosde Sphagnum in vivo;y mezclar la pluralidad de fragmentos deSphagnumcon una primera solución fluida para proporcionar un material de siembra deSphagnumpara el cultivo, comprendiendo el material de siembra una suspensión de la pluralidad de fragmentos delSphagnum in vivoen la primera solución fluida.
2. El procedimiento según la reivindicación 1, donde proporcionarSphagnum in vitrocomprende cortarSphagnum in vitroen una pluralidad de fragmentos deSphagnum in vitro.
3. El procedimiento según la reivindicación 2, donde proporcionarSphagnum in vitrocomprende mezclar la pluralidad de fragmentos deSphagnum in vitrocon una segunda solución fluida para proporcionar una suspensión deSphagnum in vitro.
4. El procedimiento según cualquier reivindicación anterior, donde la primera solución fluida comprende agua y un agente espesante disuelto en el agua, opcionalmente donde el agente espesante es un agente espesante a base de celulosa o a base de almidón.
5. El procedimiento según la reivindicación 4, donde el agente espesante comprende hidroxietilcelulosa, opcionalmente donde la primera solución fluida comprende entre 5 g y 10 g de hidroxietilcelulosa por L de agua.
6. El procedimiento según cualquier reivindicación anterior, comprendiendo además aplicar el material de siembra deSphagnuma una superficie de crecimiento.
7. El procedimiento según la reivindicación 6, comprendiendo además cultivar elSphagnumdel material de siembrain vivosobre la superficie de crecimiento.
8. El procedimiento según la reivindicación 7, comprendiendo además recoger elSphagnumdel material de siembra de la superficie de crecimiento.
9. El procedimiento según la reivindicación 8, comprendiendo además proporcionar un medio de cultivo comprendiendo elSphagnumrecogido del material de siembra, comprendiendo secar elSphagnumrecogido del material de siembra.
10. El procedimiento según la reivindicación 8, comprendiendo además cortar elSphagnumrecogido del material de siembra para proporcionar un segundo material de siembra deSphagnumpara el cultivo, comprendiendo el segundo material de siembra una pluralidad de fragmentos deSphagnum in vivo de segunda generación.
11. El procedimiento según la reivindicación 10, donde proporcionar el segundo material de siembra deSphagnumcomprende mezclar la pluralidad de fragmentos deSphagnum in vivode segunda generación con una tercera solución fluida para proporcionar una suspensión deSphagnum in vivo.
12. El procedimiento según la reivindicación 11, donde la tercera solución fluida comprende agua y un agente espesante disuelto en el agua, opcionalmente donde el agente espesante es un agente espesante a base de celulosa o a base de almidón.
13. El procedimiento según la reivindicación 12, donde el agente espesante comprende hidroxietilcelulosa, opcionalmente donde la tercera solución fluida comprende entre 5 g y 10 g de hidroxietilcelulosa por L de agua.
14. Un material de siembra deSphagnumque se puede obtener mediante el procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 o cualquiera de las reivindicaciones 10 a 13.
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