ES3030988T3 - Cosmetic, nutraceutical or dermatological use of a lactobacillus crispatus strain and/or of a composition comprising same - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere al uso cosmético, nutracéutico y/o farmacéutico, en particular dermatológico, de una cepa de Lactobacillus crispatus y/o de una composición que la comprende, para mantener y/o aumentar la expresión de las moléculas de la matriz extracelular de la piel y/o de las mucosas y en particular para mantener y/o aumentar las propiedades biomecánicas de la piel sana y/o de las mucosas sanas, preferentemente la firmeza y/o la elasticidad y/o la densidad de la piel sana y/o de las mucosas sanas. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Uso cosmético, nutracéutico o dermatológico de una cepa de Lactobacillus crispatus y/o de una composición que la comprende

La presente invención se refiere al uso cosmético, nutracéutico y/o farmacéutico, en particular dermatológico, de una cepa de Lactobacillus crispatus y/o de una composición que la comprende para mantener y/o aumentar la expresión de moléculas de la matriz extracelular de la piel y/o de las mucosas y, en particular, para mantener y/o aumentar las propiedades biomecánicas de la piel sana y/o de las mucosas, preferiblemente la firmeza y/o elasticidad y/o densidad de la piel sana y/o mucosas sanas, aún más preferiblemente, la firmeza y/o elasticidad de la piel sana y/o mucosas sanas.

La estructura y las propiedades de la piel cambian bajo el efecto de complejos procesos biológicos, físicos y biomecánicos, que conducen a una reducción de la elasticidad, la firmeza y la densidad de la dermis, en particular bajo el efecto de la modificación de las moléculas de la matriz extracelular.

La matriz extracelular de la piel y las mucosas, conocida como MEC, está compuesta por una combinación de tres tipos de moléculas:

- fibras: colágeno y elastina,

- glicoproteínas: menos abundantes que las fibras, pero desempeñan un papel más importante en la adhesión celular, como la fibronectina y la laminina,

- polisacáridos muy hidratados que forman un gel que rellena la matriz. Esta matriz desempeña un papel clave en el mantenimiento de la estructura y las propiedades de la piel, en particular la elasticidad, la firmeza y la densidad de la dermis.

Dado que estas moléculas de la MEC son sintetizadas por los fibroblastos y los queratinocitos, su renovación es esencial para mantener las propiedades biomecánicas de la piel.

La elastina es una proteína que forma las fibras elásticas al asociarse con otras moléculas como las fibrilinas y las MAGP (Glicoproteínas Asociadas a Microfibrillas).

La elastina se sintetiza en forma de tropoelastina soluble, que adquiere sus propiedades fisicoquímicas (insolubilidad, elasticidad) tras su reticulación intra- e intermolecular por una lisil oxidasa (LOX) y su depósito en las microfibrillas. En la piel, las fibras elásticas funcionales están formadas por los fibroblastos de la dermis, pero también se han encontrado ciertos componentes necesarios para el desarrollo de las fibras elásticas en las células epidérmicas.

La tasa de renovación de las fibras elásticas es muy baja en la vida adulta, aunque el nivel general de elastina en la piel puede aumentar. En los recién nacidos, las microfibrillas no están todas completamente cubiertas de elastina, y llegan a estarlo alrededor de la pubertad. A partir de los 40 años, aparecen inclusiones en las fibras, más frecuentes en las mujeres, seguidas de la fragmentación de las fibras elásticas y su desaparición por debajo de la unión dermoepidérmica (UDE). Esta fragmentación y/o desaparición por debajo de la UDE provoca una reducción de la elasticidad de la piel y la formación de arrugas. Durante el fotoenvejecimiento, se observa la síntesis de fibras elásticas no funcionales, pero este aumento va acompañado de una reducción acelerada de las fibras elásticas bajo la UDE.

El colágeno es una proteína constituyente de la matriz extracelular (MEC) presente en grandes cantidades en los tejidos de los vertebrados. Es una gran familia que comprende 29 tipos diferentes.

Entre los distintos tipos de colágeno, el colágeno de tipo I se encuentra en muchos tejidos humanos tales como tendones, ligamentos, córnea y piel, localizado más concretamente en la dermis. El colágeno de tipo I es el principal colágeno de la piel.

El colágeno fibrilar se forma a partir de fibras de procolágeno, que luego se ensamblan en una red y se estabilizan mediante enlaces cruzados. Es el colágeno el que confiere a los tejidos su resistencia mecánica y, por consiguiente, contribuye a mantener su firmeza.

A medida que la piel envejece, la cantidad de colágeno sintetizado disminuye globalmente y aumenta su degradación, lo que provoca una disminución de la firmeza.

Este fenómeno se acentúa cuando la piel está expuesta a los rayos UV. Es lo que se conoce como envejecimiento fotobiológico.

Por ello, las moléculas de la matriz extracelular son objeto de numerosos estudios e innovaciones en el campo de la cosmética para el desarrollo y la mejora de principios activos cosméticos destinados a mantener las propiedades biomecánicas de la piel.

En los últimos años, las técnicas avanzadas de secuenciación genómica han revelado que la piel alberga millones de microorganismos (bacterias, virus, hongos) que constituyen la microbiota cutánea, también conocida como flora cutánea. La mayoría de estos microorganismos (esta microbiota) son comensales y beneficiosos para la piel. Cohabitan e interactúan con las células cutáneas, y algunos han desarrollado una simbiosis con la piel. Ayudan a defender la piel sintetizando o estimulando la síntesis de moléculas de defensa cutánea. Ayudan a reparar la piel en caso de lesión y combaten la inflamación. Estos microorganismos comensales beneficiosos segregan moléculas y metabolitos que contribuyen a la homeostasis y el equilibrio de la piel.

La composición y la calidad de la microbiota cutánea cambian con el envejecimiento. Sorprendentemente, el demandante ha demostrado que con la edad determinadas bacterias están menos presentes y son menos abundantes en la piel. Es el caso, en particular, de la bacteria Lactobacillus crispatus.

La mayoría de las soluciones existentes en el mercado se ocupan de las consecuencias visibles del envejecimiento y no tienen en cuenta la microbiota cutánea, algunas de cuyas especies viven en simbiosis con las células de la piel y contribuyen a su equilibrio y aspecto.

La presente invención tiene la ventaja de ser más completa, ya que reequilibra la microbiota de la piel envejecida completándola con bacterias de la flora cutánea, que disminuyen con el tiempo. Estas bacterias, a su vez, ayudan a rejuvenecer la piel y proporcionan una protección duradera contra los agresores externos, al reactivar los procesos biológicos que disminuyen con la edad.

Las bacterias probióticas y sus derivados ya se utilizan para tratar problemas de envejecimiento de la piel, pero, en la mayoría de los casos, las bacterias utilizadas no proceden de la piel. Las bacterias de la presente invención tienen la ventaja de estar presentes en forma natural en la piel joven.

La solicitud WO2009031106 divulga el uso de una combinación de hesperidina y un probiótico para prevenir la reducción o reforzar la función de barrera de la piel. La solicitud no divulga el uso de la cepa de Lactobacillus crispatus para mantener y/o aumentar la expresión de moléculas de matriz extracelular cutánea y/o mucosa.

La solicitud WO2019111189 divulga el uso que comprende un probiótico del género Lactobacillus para la prevención del daño inducido por la radiación UV. La solicitud no divulga el uso de la cepa de Lactobacillus crispatus para mantener y/o aumentar la expresión de moléculas de matriz extracelular cutánea y/o mucosa. Así pues, según el leal saber y entender del solicitante, ninguna técnica anterior divulga o sugiere el uso cosmético, nutracéutico y/o farmacéutico, en particular dermatológico, de una cepa de Lactobacillus crispatus y/o de una composición que la comprenda para mantener y/o aumentar la expresión de moléculas de la matriz extracelular de la piel y/o de las mucosas, o para mantener y/o aumentar las propiedades biomecánicas de la piel y/o de las mucosas, o para mantener y/o aumentar la expresión de colágenos en la piel y/o en las mucosas y/o de fibras elásticas en la piel y/o en las mucosas.

El primer objeto de la presente invención es el uso cosmético y/o nutracéutico de una cepa de Lactobacillus crispatus para mantener y/o aumentar la expresión de moléculas de la matriz extracelular de piel sana y/o mucosas sanas.

También es objeto de un método de cuidado cosmético, caracterizado porque comprende la aplicación tópica, en al menos una zona de piel sana y/o de mucosa sana, de una cepa de Lactobacillus crispatus según la invención, o de una composición cosmética que la comprende, para mantener y/o aumentar la expresión de las moléculas de la matriz extracelular de la piel sana y/o de la mucosa sana, preferiblemente para mantener y/o aumentar la expresión de los colágenos de la piel sana y/o de las mucosas sanas y/o de las fibras elásticas de la piel sana y/o de las mucosas sanas, y/o para mantener y/o aumentar las propiedades biomecánicas de la piel sana y/o de las mucosas sanas, en particular la firmeza y/o la elasticidad y/o la densidad, preferiblemente la firmeza.

Otro objeto de la invención es una cepa de Lactobacillus crispatus según la invención, o una composición dermatológica que la comprende, para el tratamiento y/o la prevención de patologías de la piel y/o de las mucosas que implican una reducción de la cantidad y/o de la expresión de moléculas de la matriz extracelular de la piel y/o de las mucosas, en particular una reducción de la cantidad y/o de la expresión de los colágenos de la piel y/o de las mucosas y/o de las fibras elásticas de la piel y/o de las mucosas, y/o una reducción de las propiedades biomecánicas de la piel y/o de las mucosas, en particular una reducción de la firmeza de la piel y/o de las mucosas y/o de la elasticidad y/o de la densidad.

También se refiere a una cepa de Lactobacillus crispatus depositada en virtud del Tratado de Budapest en el Institut Pasteur (28 rue du Docteur Roux, F-75024 Paris cedex 15) el 09/09/2020 bajo la designación CNCM I-5579 o a una composición cosmética que la comprende, para mantener y/o aumentar la expresión de moléculas de matriz extracelular de piel y/o mucosas sanas, en particular para mantener y/o aumentar la expresión de los colágenos de la piel sana y/o de las mucosas sanas y/o de las fibras elásticas de la piel sana y/o de las mucosas sanas, y/o para mantener y/o aumentar las propiedades biomecánicas de la piel sana y/o de las mucosas sanas, en particular la firmeza y/o la elasticidad y/o la densidad, preferiblemente la firmeza. Por último, se trata de una cepa de Lactobacillus crispatus depositada en virtud del Tratado de Budapest en el Institut Pasteur (28 rue du Docteur Roux, F-75024 Paris cedex 15) el 09/09/2020 bajo la denominación CNCM I-5579 o de una composición dermatológica que la comprende, para el tratamiento y/o la prevención de patologías cutáneas y/o mucosas que implican una disminución de la cantidad y/o de la expresión de moléculas de la matriz extracelular de la piel y/o de las mucosas, en particular una disminución de la cantidad y/o de la expresión de colágenos y/o de fibras elásticas de la piel y/o de las mucosas, y/o una disminución de la cantidad y/o de las propiedades biomecánicas de la piel y/o de las mucosas, y/o una disminución de la cantidad y/o de las propiedades biomecánicas de la piel y/o de las mucosas, en particular una disminución de la cantidad y/o de la expresión de los colágenos y/o de las fibras elásticas de la piel y/o de las mucosas, y/o una disminución de la cantidad y/o de las propiedades biomecánicas de la piel y/o de las mucosas, en particular una disminución de la firmeza de la piel y/o de las mucosas y/o una disminución de la elasticidad de la piel y/o de las mucosas y/o una disminución de la densidad de la piel y/o de las mucosas.

En el sentido de la presente invención, por “uso y/o composición cosmética” se entiende un uso y/o composición no farmacéutica, es decir, que no está destinada a un uso terapéutico y que se aplica a una parte del cuerpo denominada sana, en particular a una zona de la piel y/o de las mucosas denominada sana. En el sentido de la presente invención, por “uso nutracéutico y/o composición nutracéutica” se entiende un uso y/o composición destinado a uso oral no farmacéutico, es decir, que no requiere tratamiento terapéutico. A los efectos de la presente invención, por “piel sana” o “mucosa sana”, se entiende una zona de piel o mucosa a la que se aplica la cepa según la invención y que un dermatólogo considera “no patológica”, es decir, que no muestra infección, cicatriz, enfermedad o trastorno de la piel como candidiasis, impétigo, psoriasis, eczema, acné o dermatitis, ni heridas o lesiones.

De acuerdo con la invención, por “mucosa(s)”, se entiende la mucosa ocular, la mucosa nasal, la mucosa auricular, la mucosa urogenital y/o la mucosa bucal, en particular la mucosa bucal, labial y/o gingival, preferiblemente la mucosa ocular y/o bucal, y aún más preferiblemente la mucosa labial y/u ocular.

Ventajosamente, no incluye la mucosa vaginal.

En el sentido de la presente invención, “mantener y/o aumentar la expresión de moléculas de matriz extracelular” significa evitar una disminución y/o aumentar el nivel de expresión génica, es decir, de ARNm (ARN mensajeros), y/o de síntesis proteica de moléculas de matriz extracelular de piel sana y/o mucosas sanas, tratadas con la cepa según la invención, en comparación con el nivel de expresión génica y/o de síntesis proteica detectado en ausencia de la cepa según la invención. Preferiblemente, se trata de mantener y/o aumentar la expresión proteica de las moléculas de la matriz extracelular.

De acuerdo con la invención, las “moléculas de la MEC” se refieren a moléculas orgánicas que constituyen y/o están contenidas en la matriz extracelular y que son sintetizadas por células de origen humano o animal. En particular, se trata de las proteínas constituyentes de la MEC, seleccionadas en particular de entre:

- la familia del colágeno de la MEC,

- la familia de las fibras elásticas de la MEC: elastina, tropoelastina, proteínas asociadas a la elastina, en particular la fibrilina 1, lisiloxidasas, en particular LOX y LOX<l>, EBP (Elastin Binding Protein), fibullinas 3 y 5, emilinas 1 y 2.

Se trata de los proteoglicanos constitutivos de la MEC, en particular los proteoglicanos secretados seleccionados de entre el perlecano, el versicano y los proteoglicanos ricos en leucina (SLRP), en particular la decorina, el biglicano y el lumicano.

También son glicoproteínas constituyentes de la MEC, en particular la fibronectina, la laminina, la SPARC (Secreted Protein Rich in Cystein, “proteína secretada rica en cisterna”) y la latenascina. También incluye los glicosaminoglicanos (GAG) que componen la MEC, en particular el ácido hialurónico, el sulfato de heparano, el sulfato de dermatano y el sulfato de condroitina.

También se trata de factores de crecimiento de la MEC, que son proteínas contenidas en la MEC, en particular VEGF, PDGF, HGF, FGF, y en particular FGF2 y FGF7.

Las “moléculas de la MEC” se refieren a moléculas en la MEC o en otros compartimentos, en particular compartimentos intracelulares y extracelulares en el medio de cultivo, posiblemente en forma de precursores. De acuerdo con la invención, por “precursor de molécula de la MEC”, se entiende una forma nativa y/o intermedia de la molécula de la MEC, sintetizada por la célula, antes de constituir o estar contenida en la MEC. Estas formas sufren fenómenos de maduración antes de estar en la MEC, por lo que a menudo se designan con los prefijos “Pro” o “Tropo”. Algunos ejemplos son los procolágenos, los tropocolágenos, la proelastina y la tropoelastina.

Preferiblemente, las moléculas de matriz extracelular se eligen entre los colágenos de piel sana y/o mucosas sanas, y/o las fibras elásticas de piel sana y/o mucosas sanas.

En el sentido de la presente invención, “mantener y/o aumentar la expresión de colágenos de piel sana y/o mucosas sanas y/o fibras elásticas de piel sana y/o mucosas sanas” significa evitar una disminución y/o aumentar el nivel de expresión génica, es decir, la expresión de ARNm (ARN mensajero) y/o la síntesis proteica de colágenos en piel sana y/o mucosas sanas y/o fibras elásticas en piel sana y/o mucosas sanas tratadas con la cepa según la invención, en comparación con la expresión génica y/o la síntesis proteica medidas en ausencia de la cepa según la invención.

En particular, se produce un aumento del nivel de expresión génica y/o síntesis proteica de colágenos y/o fibras elásticas de al menos un 20 %, preferiblemente de al menos un 40 % y, aún más preferiblemente, de al menos un 50 %, en comparación con el nivel de expresión génica y/o proteica de colágenos y/o fibras elásticas medido en ausencia de la cepa de Lactobacillus crispatus según la invención.

En un modo preferido de la invención, esto implica un aumento del nivel de expresión proteica de fibulina-5 y/o emilina-1 de al menos un 20 %, preferiblemente de al menos un 40 % y aún más preferiblemente de al menos un 50 % en comparación con el nivel de expresión proteica medido en células de fibroblastos dérmicos cultivadas in vitro en ausencia de la cepa, como por ejemplo se describe en el ejemplo 3.

Ventajosamente, la medición del aumento de la expresión proteica de fibulina-5 y/o emilina-1 se lleva a cabo mediante medición in vitro, preferiblemente tras análisis por electroforesis capilar, por ejemplo según el método tal como se presenta en el ejemplo 3.

A los efectos de la presente invención, por “análisis por electroforesis capilar”, se entiende la técnica que consiste en unir un anticuerpo específico de la proteína en estudio, fibulina-5 y/o emilina-1, a dicha proteína, conjugado con una peroxidasa y un sustrato quimioluminiscente, con vistas a detectar la proteína midiendo la señal quimioluminiscente.

A efectos de la presente invención, se entiende por “colágeno” las proteínas colágenas de tipo I, III, IV, V, VI, VIl, XII, XIII, XIV, XVI, XVII, XXIV, XXIX, presentes en la piel sana y/o en las mucosas sanas. De acuerdo con una modalidad ventajosa, los colágenos se eligen entre colágenos de tipo I, III, IV, V y/o XIV, preferiblemente colágenos de tipo I, IV y/o V, aún más preferiblemente colágeno de tipo I.

En el sentido de la presente invención, se entiende por proteína de “colágeno de tipo I” la proteína de colágeno presente en la piel, la córnea, los tendones, los ligamentos y los huesos, incluso más preferiblemente en la piel. Así, en un modo preferido de la invención, la cepa de Lactobacillus crispatus según la invención se utiliza para mantener y/o aumentar la expresión proteica del colágeno de tipo I en piel sana y/o mucosas sanas.

De acuerdo con un modo ventajoso de la invención, se trata de un aumento en comparación con el nivel de expresión génica y/o proteica del colágeno medido en células de fibroblastos dérmicos cultivados in vitro en ausencia de la cepa de Lactobacillus crispatus según la invención.

En una realización preferida de la invención, el nivel de expresión proteica del colágeno de tipo I aumenta al menos un 10 %, preferiblemente al menos un 50 % y, aún más preferiblemente, al menos un 20 % en comparación con el nivel de expresión proteica medido en células de fibroblastos dérmicos cultivadas in vitro en ausencia de la cepa según el protocolo descrito, por ejemplo, en el ejemplo 2.

Ventajosamente, la medición del aumento de la expresión proteica se lleva a cabo mediante medición in vitro, preferiblemente tras ensayo inmunoenzimático o ELISA, por ejemplo según el método tal como se presenta en el ejemplo 2.

En el sentido de la presente invención, se entiende por “dosificación inmunoenzimática” la técnica que consiste en fijar un anticuerpo específico de una proteína de colágeno dada, preferiblemente la proteína de colágeno de tipo I, a dicha proteína, con vistas a una revelación por medición de la fluorescencia. Ventajosamente, la revelación se efectúa por fluorescencia.

De acuerdo con otra realización ventajosa, el aumento de la expresión génica se mide in vitro, preferiblemente tras RT-qPCR.

En una realización preferida, la cepa según la invención se utiliza para mantener y/o aumentar las propiedades biomecánicas de la piel sana y/o de las mucosas sanas, preferiblemente la firmeza y/o la elasticidad y/o la densidad de la piel sana y/o de las mucosas sanas, aún más preferiblemente la firmeza de la piel sana y/o de las mucosas sanas, en particular de la dermis sana, y/o la elasticidad de la piel sana y/o de las mucosas sanas, en particular de la dermis sana.

A los efectos de la presente invención, por “propiedades biomecánicas de la piel sana y/o mucosas sanas”, se entiende la firmeza y/o elasticidad y/o densidad y/o resistencia a la compresión y/o resistencia al estiramiento y/o flexibilidad y/o extensibilidad y/o capacidad para resistir la deformación de la piel sana y/o mucosas sanas. Preferiblemente, la firmeza y/o elasticidad y/o densidad de la piel sana y/o de las membranas mucosas, en particular de la dermis sana, aún más preferiblemente la firmeza de la piel sana y/o de las membranas mucosas, en particular de la dermis sana y/o la elasticidad de la piel sana y/o de las membranas mucosas, en particular de la dermis sana.

Las propiedades biomecánicas de la piel sana y/o de las mucosas sanas pueden estudiarse mediante técnicas de medición conocidas por el experto en la técnica, en particular por tracción, torsión, succión, indentación, levatometría, balistometría, ecografía de alta resolución o elastografía, preferiblemente por indentación o ecografía de alta resolución.

A los efectos de la presente invención, “mantener y/o aumentar las propiedades biomecánicas de la piel sana y/o de las mucosas sanas” significa evitar una reducción y/o aumentar las propiedades biomecánicas de la piel sana y/o de las mucosas sanas, preferiblemente la firmeza de la piel sana y/o de las mucosas sanas, en particular de la dermis sana, y/o la elasticidad de la piel sana y/o de las mucosas sanas, en particular de la dermis sana, y/o la densidad de la piel sana y/o de las mucosas sanas, en particular de la dermis sana, tratadas con la cepa según la invención en comparación con las propiedades biomecánicas de la piel sana y/o de las mucosas sanas medidas en ausencia de la cepa según la invención.

Preferiblemente, esto implica un aumento de al menos el 5 %, preferiblemente el 10 %, de las propiedades biomecánicas de la piel sana y/o de las membranas mucosas sanas tratadas con la cepa de Lactobacillus crispatus según la invención en comparación con las propiedades biomecánicas de la piel sana y/o de las membranas mucosas sanas medidas en ausencia de la cepa de Lactobacillus crispatus según la invención. En el sentido de la presente invención, desde un punto de vista cosmético, por “mantener y/o aumentar la firmeza de la piel sana y/o de las mucosas sanas, en particular de la dermis sana”, se entiende evitar la disminución y/o el aumento, con fines estéticos, de la firmeza de la piel sana y/o de las mucosas sanas, en particular de las que han perdido firmeza, en particular bajo el efecto de factores intrínsecos. Los factores intrínsecos pueden ser el envejecimiento de la piel y/o de las mucosas, es decir, el envejecimiento cronoinducido, que puede observarse, por ejemplo, en la denominada piel madura, es decir, la piel de las personas mayores de 40 años. Esto puede deberse al estrés celular, a variaciones fisiológicas no patológicas, como un cambio en la dieta, o a variaciones hormonales, especialmente durante la pubertad, el embarazo, la menopausia y/o la andropausia. Esta disminución de la firmeza también puede producirse bajo el efecto de factores extrínsecos, como agentes ambientales agresivos como la contaminación, el humo, el tabaco, las toxinas o las agresiones climáticas y/o mecánicas.

De acuerdo con una modalidad preferida, la reducción de la firmeza no es inducida por la radiación UV. Preferiblemente, se produce un aumento de la firmeza en la piel sana y/o en las membranas mucosas sanas, en particular en la dermis sana, de al menos un 1 %, preferiblemente de al menos un 3 %, incluso más ventajosamente, de al menos un 5 %, en presencia de una cepa de Lactobacillus crispatus según la invención. En una realización ventajosa de la invención, se trata de un aumento medido in vivo, preferiblemente en la piel del rostro humano.

En el sentido de la presente invención, desde un punto de vista cosmético, por “mantener y/o aumentar la elasticidad de la piel sana y/o de las mucosas sanas, en particular de la dermis sana”, se entiende evitar la reducción y/o provocar el aumento, con fines estéticos, de la elasticidad de la piel sana y/o de las mucosas sanas que han perdido elasticidad, en particular bajo el efecto de factores intrínsecos, como el envejecimiento tisular de la piel y/o de las mucosas, es decir, el envejecimiento cronoinducido, que se encuentra, por ejemplo, en la denominada piel madura, es decir, la piel de las personas de más de 40 años, en particular de más de 50, el estrés celular, las variaciones fisiológicas no patológicas, como un cambio de alimentación, las variaciones hormonales, en particular durante la pubertad, el embarazo, la menopausia y/o la andropausia. Esta disminución de la elasticidad también puede deberse a factores extrínsecos, como agentes ambientales agresivos como la contaminación, el humo, el tabaco, las toxinas o las agresiones climáticas y/o mecánicas. De acuerdo con una realización preferida, la reducción de la elasticidad no es inducida por la radiación UV. Además, por “aumento de la elasticidad” de la piel y/o de las mucosas se entiende un aumento de la elasticidad medida in vivo de al menos un 2 %, ventajosamente de al menos un 4 %, aún más ventajosamente de al menos un 6 % en presencia de la deformación según la invención en comparación con la elasticidad detectada en ausencia de la deformación. En una realización preferida de la invención, esta medición se lleva a cabo en la piel del rostro humano. En una realización preferida, este aumento se evalúa después de al menos 10, preferiblemente 28, aún más preferiblemente 30 y ventajosamente al menos 56 días de tratamiento en presencia de la cepa según la invención.

Aún más ventajosamente, la elasticidad se evalúa midiendo sus diversos componentes de elasticidad, en particular la elasticidad neta, la recuperación elástica y/o la elasticidad global, en particular como se describe en el ejemplo 4.

En el sentido de la presente invención, desde un punto de vista cosmético, “mantener y/o aumentar la densidad de la piel sana y/o de las mucosas sanas, en particular de la dermis sana” significa evitar la reducción y/o el aumento, con fines estéticos, de la densidad de la piel sana y/o de las mucosas sanas, en particular de las que han perdido densidad por efecto de factores intrínsecos. Los factores intrínsecos pueden ser el envejecimiento tisular de la piel y/o de las mucosas, es decir, el envejecimiento cronoinducido, que puede encontrarse, por ejemplo, en la denominada piel madura, es decir, la piel de las personas mayores de 40 años. Esto puede deberse al estrés celular, a variaciones fisiológicas no patológicas, como un cambio en la dieta, o a variaciones hormonales, especialmente durante la pubertad, el embarazo, la menopausia y/o la andropausia. Esta reducción de la densidad también puede producirse como consecuencia de factores extrínsecos, como agentes ambientales agresivos como la contaminación, el humo, el tabaco, las toxinas o las agresiones climáticas y/o mecánicas.

De acuerdo con una realización preferida, la reducción de la densidad no es inducida por la radiación UV. Preferiblemente, se produce un aumento de la densidad en la piel sana y/o en las mucosas sanas, en particular en la dermis sana, de al menos un 1 %, preferiblemente de al menos un 3 %, incluso más ventajosamente, de al menos un 5 % en presencia de una cepa de Lactobacillus crispatus según la invención. En una realización ventajosa de la invención, se trata de un aumento medido in vivo, preferiblemente en la piel del rostro humano.

La medición in vivo de la firmeza y/o de la elasticidad y/o de la densidad puede realizarse según los métodos convencionales conocidos por el experto, en particular mediante la medición con un cutométre, un Tonoderm™, un ecógrafo o incluso un DynaSKIN® asociado a un dermaTOP.

De acuerdo con la presente invención, la cepa de Lactobacillus crispatus puede utilizarse en forma entera, en particular viable y/o inactivada, en particular muerta, y/o en forma de lisado, y/o en forma de una o varias de sus fracciones, y/o en forma de uno o varios de sus metabolitos, preferiblemente su secretoma. Para cada una de sus formas, la cepa según la invención puede aislarse o asociarse a su medio de fermentación y/o de cultivo.

Preferiblemente, la cepa según la invención está asociada con su medio de fermentación y/o cultivo.

Para los fines de la presente invención, “aislada” significa no mezclada con uno o más compuestos que puedan estar asociados con ella en su medio de fermentación y/o cultivo.

Para los fines de esta invención, “forma entera” significa su forma nativa, una forma en la que la envoltura bacteriana está intacta, en contraposición a una forma lisada. Cuando se utiliza en forma entera, la cepa de Lactobacillus crispatus puede ser viable y/o inactivada y/o muerta.

Para los fines de la presente invención, “viable” significa una cepa de Lactobacillus crispatus según la presente invención capaz de formar colonias en cultivo.

La producción de la cepa de Lactobacillus crispatus en forma entera viable puede llevarse a cabo por cualquier método conocido convencionalmente por el experto en la técnica. Ventajosamente, se llevará a cabo según el protocolo descrito, por ejemplo, en el ejemplo 1.a o 1.f.

Para los fines de la invención, “inactivada” significa una cepa de Lactobacillus crispatus según la presente invención que ya no es capaz, temporal o permanentemente, de formar colonias en cultivo.

La inactivación de la cepa de Lactobacillus crispatus puede llevarse a cabo por cualquier método conocido convencionalmente por el experto en la técnica. En particular, puede inactivarse por irradiación, tratamiento térmico o, en determinadas condiciones, por liofilización, tratamiento a alta presión o extrusión. Ventajosamente, se llevará a cabo por tratamiento térmico, aún más ventajosamente según el protocolo descrito, por ejemplo, en el ejemplo 1.b.

La inactivación térmica puede lograrse incubando la cepa de Lactobacillus crispatus durante un período de tiempo determinado, ventajosamente de unos 10 s a 90 min, preferiblemente de unos 15 minutos a una hora, y a una temperatura ventajosamente de unos 60 °C a 150 °C. Preferiblemente, se incubará durante unos 30 minutos a unos 80 °C.

Para los fines de la invención, “muerta” significa una cepa de Lactobacillus crispatus según la presente invención que ya no es permanentemente capaz de formar colonias en cultivo.

Para los fines de la invención, “lisado” significa un material obtenido tras la destrucción o disolución de células biológicas por un fenómeno conocido como lisis celular, causando así la liberación de constituyentes biológicos intracelulares contenidos naturalmente en las células del microorganismo en cuestión y fragmentos de componentes de la membrana celular. El lisado utilizado se compone, por lo tanto, de todos los constituyentes biológicos intracelulares y de los constituyentes de las paredes y membranas celulares de la cepa de Lactobacillus crispatus según la invención.

El lisado puede obtenerse por cualquier método conocido convencionalmente por el experto en la técnica. En particular, puede obtenerse por choque osmótico, choque térmico, ultrasonido, lisis enzimática, por tindalización, o tensión mecánica del tipo centrifugación, o por aumento de la presión, o combinaciones de estas diferentes tecnologías.

Preferiblemente, el lisado se obtendrá mediante una combinación de acción mecánica y aumento de la presión. Aún más preferiblemente, el lisado se obtendrá según el protocolo descrito, por ejemplo, en el ejemplo 1.b.

En una realización preferida de la invención, el lisado se combinará con el cultivo bacteriano y/o el medio de fermentación.

A los efectos de la presente invención, por “fracción” se entiende un fragmento de la cepa de Lactobacillus crispatus según la presente invención con una eficacia para mantener y/o aumentar la expresión de las moléculas de la matriz extracelular de la piel sana y/o de las mucosas sanas, y/o para mantener y/o aumentar las propiedades biomecánicas de la piel sana y/o de las mucosas sanas. Esta fracción corresponde a una parte no total de los constituyentes biológicos intracelulares y de los constituyentes de las paredes y membranas celulares obtenidos por lisis de la cepa de Lactobacillus crispatus según la invención.

De acuerdo con un modo particular de la invención, las fracciones pueden ser el protoplasma de la bacteria. En una realización preferida de la invención, las fracciones estarán asociadas al cultivo bacteriano y/o al medio de fermentación.

Para los fines de la presente invención, “metabolitos” significa una o más moléculas orgánicas y/o inorgánicas resultantes del metabolismo de la cepa de Lactobacillus crispatus según la presente invención y que también tienen una eficacia para mantener y/o aumentar la expresión de las moléculas de la matriz extracelular de la piel sana y/o de las membranas mucosas sanas, y/o para mantener y/o aumentar las propiedades biomecánicas de la piel sana y/o de las membranas mucosas sanas. Preferiblemente, se trata del secretoma de la cepa de Lactobacillus crispatus según la invención.

En una realización particular de la invención, los metabolitos estarán asociados al cultivo bacteriano y/o al medio de fermentación.

A los efectos de la presente invención, por “secretoma” se entiende el conjunto de moléculas orgánicas y/o inorgánicas secretadas por la cepa de Lactobacillus crispatus según la presente invención que es eficaz para mantener y/o aumentar la expresión de las moléculas de la matriz extracelular de la piel sana y/o de las membranas mucosas sanas, y/o para mantener y/o aumentar las propiedades biomecánicas de la piel sana y/o de las membranas mucosas sanas.

El secretoma puede obtenerse por cualquier método conocido convencionalmente por el experto en la técnica. Ventajosamente, se obtendrá según el protocolo descrito, por ejemplo, en el ejemplo 1.d o 1e.

En una realización preferida de la invención, el secretoma se asociará con el cultivo bacteriano y/o el medio de fermentación.

De acuerdo con una realización preferida de la invención, la cepa de Lactobacillus crispatus según la invención se utilizará en forma entera viable y/o en forma de lisado.

La cepa de Lactobacillus crispatus según la invención puede derivarse de cualquier especie conocida de Lactobacillus crispatus. Preferiblemente, la cepa de Lactobacillus crispatus es la especie depositada bajo el Tratado de Budapest en el Instituto Pasteur (28 rue du Docteur Roux, F-75024 Paris cedex 15) el 09/09/2020 bajo la designación CNCM I-5579.

La ventaja de esta cepa concreta de Lactobacillus crispatus es que es la primera especie de Lactobacillus crispatus que se encuentra de forma natural en la piel sana.

De acuerdo con la invención, la cepa de Lactobacillus crispatus según la invención puede utilizarse sola, en forma de principio activo y/o en una composición cosmética y/o nutracéutica y/o farmacéutica, en particular una composición dermatológica, destinada preferiblemente a una aplicación tópica y/u oral, aún más preferiblemente a una aplicación tópica.

Cuando se utiliza en la forma entera viva según la invención, y cuando se utiliza sola en forma de ingrediente activo, la cepa según la invención puede estar en forma seca, es decir, en forma de polvo, ventajosamente en maltodextrina, preferiblemente con un contenido de cepa del 10%al 80%(p/p) en peso de la cepa, preferiblemente del 30 % al 70 % (p/p), incluso más ventajosamente del 40 % al 60 % (p/p) en peso de la cepa en relación con el peso total del polvo.

Alternativamente, la forma entera viva según la invención puede utilizarse soluble y/o diluida en un disolvente. Preferiblemente, este disolvente contiene menos del 20 % (v/v) en volumen de agua, aún más preferiblemente menos del 5 % (v/v) en volumen de agua, aún más preferiblemente el disolvente no contiene agua. Muy preferiblemente, este disolvente es un aceite cosméticamente aceptable.

Cuando se utiliza en forma inactivada entera, en particular muerta, y/o en forma de lisado, y/o en forma de una o varias de sus fracciones, y/o en forma de uno o varios de sus metabolitos, en particular su secretoma, y cuando se utiliza sola en forma de principio activo, la cepa según la invención puede estar en forma seca, es decir en polvo, ventajosamente en maltodextrina, preferiblemente con un contenido de cepa del 5 % al 80 % (p/p) en peso de la cepa, preferiblemente del 10 % al 70 % (p/p) en peso de la cepa, muy preferiblemente, de aproximadamente el 20 % al 50 % (p/p) en peso de la cepa en relación con el peso total del polvo, incluso más ventajosamente del 10 % al 50 % (p/p) en peso de la cepa en relación con el peso total del polvo.

Alternativamente, las formas enteras inactivadas, en particular las formas muertas, y/o los lisados, y/o las fracciones, y/o los metabolitos, en particular el secretoma según la invención, pueden usarse solubles y/o diluidos en un disolvente, en particular un disolvente polar, como agua, un alcohol o un poliol, un glicol tal como pentilenglicol y/o hexilenglicol y/o caprililglicol, o una mezcla de los mismos, preferiblemente una mezcla hidroglicólica o hidroalcohólica, comprendiendo aún más preferiblemente un glicol seleccionado de entre hexilenglicol, caprililglicol y sus mezclas.

En otra realización, la cepa según la invención puede incorporarse a una composición cosmética y/o nutracéutica que comprenda al menos un excipiente cosmética y/o nutracéuticamente aceptable. De preferencia, se incorpora a una composición cosmética que comprende al menos un excipiente cosméticamente aceptable.

A los efectos de la presente invención, por excipiente “cosméticamente aceptable”, se entiende un compuesto y/o disolvente tópicamente aceptable, es decir, que no induce una respuesta alérgica al contacto con la piel, incluido el cuero cabelludo humano, y/o las membranas mucosas, no es tóxico y no es químicamente inestable.

En una realización preferida de la invención, la cepa según la invención está presente en la composición cosmética y/o dermatológica en un contenido de entre 1 x 10-4 % y 10 % (v/v) en volumen, preferiblemente entre 1 x 10-4 % y 5 % (v/v) en volumen, aún más ventajosamente, entre 1 x 10-3 % y 3 % (v/v) en volumen, aún más preferiblemente, entre 0,1 % y 2 % (v/v) en volumen, en relación con el volumen total de la composición, comprendiendo dicha composición, además, al menos un excipiente cosméticamente aceptable.

Ventajosamente, la cepa según la invención está presente en la composición cosmética y/o dermatológica, a una concentración de 1 x 10-4 % a 10 % en peso, preferiblemente entre 1 x 10-4 % y 5 % en peso, aún más ventajosamente, entre 1 x 10-3 % y 0,5 % en peso, con relación al peso total de la composición, comprendiendo dicha composición también al menos un excipiente cosméticamente aceptable.

De manera particularmente ventajosa, cuando la cepa según la invención se utiliza en forma de uno o varios de sus metabolitos, en particular su secretoma, está presente en la composición cosmética y/o dermatológica, en una concentración del 0,05 al 0,5 % en peso, aún más ventajosamente, en una concentración de aproximadamente el 0,1 % en peso, con relación al peso total de la composición, comprendiendo, además, dicha composición al menos un excipiente cosméticamente aceptable.

De manera particularmente ventajosa, cuando la cepa según la invención se utiliza en forma entera viable, está presente en la composición cosmética y/o dermatológica, a una concentración del 0,01 al 0,1 % en peso, más preferiblemente, a una concentración de aproximadamente el 0,025 % en peso, en relación con el peso total de la composición, comprendiendo, además, dicha composición al menos un excipiente cosméticamente aceptable.

La composición cosmética y/o dermatológica de la invención puede elegirse de entre una solución acuosa u oleosa, una crema o gel acuoso o un gel oleoso, en particular un gel de ducha, un champú; una leche; una emulsión, una microemulsión o una nanoemulsión, en particular una emulsión de aceite en agua o de agua en aceite o múltiple o de silicona; una mascarilla; un suero; una loción; un jabón líquido; una barra dermatológica; una pomada; un bálsamo; una manteca; una mousse; un parche; un producto anhidro, preferiblemente líquido, pastoso o sólido, por ejemplo, en forma de polvos, barras o bastoncillos de maquillaje, en particular en forma de barra de labios.

También puede ser un producto de maquillaje o un desmaquillante.

Ventajosamente, la cepa de Lactobacillus crispatus o la composición de la invención está destinada a aplicarse en la totalidad o en parte del cuerpo y/o de la cara y/o del cuero cabelludo, preferiblemente en las piernas, los muslos, los brazos, el vientre, el escote, el cuello, las axilas, los labios, incluso más preferiblemente en la totalidad o en parte de la cara, y preferiblemente en las mejillas, la frente, la barbilla, los labios y el contorno de los ojos.

Ventajosamente, la cepa y/o la composición que la comprende está destinada a aplicarse en una zona de piel sana que presenta flacidez y/o en una zona de piel sana que se ha colapsado y/o en una zona de piel sana que carece de tono.

Ventajosamente, por lo tanto, la composición cosmética está destinada a la aplicación tópica sobre piel sana y/o membranas mucosas sanas.

Preferiblemente, la cepa de Lactobacillus crispatus según la invención es particularmente adecuada para formular composiciones denominadas neutras y suaves para respetar la glándula sebácea, en particular la piel incluyendo el cuero cabelludo y/o las membranas mucosas.

Alternativamente, la cepa de Lactobacillus crispatus según la invención puede presentarse en cualquier forma galénica utilizada convencionalmente para aplicación oral, en particular en forma de principio activo nutracéutico y/o composición nutracéutica.

Las composiciones según la invención pueden contener cualquier disolvente adecuado y/o cualquier vehículo adecuado y/o cualquier excipiente adecuado, opcionalmente en combinación con otros compuestos de interés.

En consecuencia, para estas composiciones, el excipiente contiene, por ejemplo, al menos un compuesto seleccionado del grupo que comprende conservantes, emolientes, emulsionantes, tensioactivos, humectantes, espesantes, acondicionadores, matificantes, estabilizantes, antioxidantes, agentes de textura, agentes de brillo, agentes formadores de película, solubilizantes, pigmentos, colorantes, fragancias y filtros solares. Estos excipientes se seleccionan preferiblemente del grupo que consiste en aminoácidos y sus derivados, poligliceroles, ésteres, polímeros de celulosa y derivados, derivados de lanolina, fosfolípidos, lactoferrinas, lactoperoxidasas y estabilizantes a base de sucrosa, vitamina E y sus derivados, ceras naturales y sintéticas, aceites vegetales, triglicéridos, insaponificables, fitoesteroles, ésteres vegetales, siliconas y sus derivados, hidrolizados de proteínas, aceite de jojoba y sus derivados, ésteres grasos/hidrosolubles, betaínas, aminóxidos, extractos de plantas, ésteres de sacarosa, dióxidos de titanio, glicinas y parabenos, y más preferiblemente del grupo que consiste en butilenglicol, esteareth-2, esteareth-21, glicol-15 estearil éter, alcohol cetearílico, fenoxietanol, metilparabeno y etilparabeno, propilparabeno, butilparabeno, butilenglicol, tocoferoles naturales, glicerina, fosfato sódico dihidroxiacetílico, éter isopropilhidroxiacetílico, estearato de glicol, triisononanoína, cocoato de octilo, poliacrilamida, isoparafina, laureth-7, carbómero, propilenglicol, glicerol, bisabolol, dimeticona, hidróxido de sodio, PEG 30-dipolihidroxiesterato, triglicéridos cápricos/caprílicos, octanoato de cetearilo, adipato de dibutilo, aceite de semilla de uva, aceite de jojoba, sulfato de magnesio, EDTA, ciclometicona, goma xantana, ácido cítrico, laurilsulfato de sodio, ceras y aceites minerales, isoestearato de isoestearilo, dipelargonato de propilenglicol, isoestearato de propilenglicol, PEG 8, cera de abejas, glicéridos de aceite de palmito hidrogenado, glicéridos de aceite de palma hidrogenado, aceite de lanolina, aceite de sésamo, lactato de cetilo, alcohol de lanolina, aceite de ricino, dióxido de titanio, lactosa, sacarosa, polietileno de baja densidad, solución salina isotónica y sus mezclas.

El experto en la técnica conoce numerosos principios activos cosméticos para mejorar la salud y/o el aspecto físico de la piel (incluido el cuero cabelludo) y/o las mucosas. El experto sabe cómo formular composiciones cosméticas, nutracéuticas o dermatológicas para obtener los mejores efectos. Además, estos compuestos pueden tener un efecto sinérgico cuando se combinan entre sí. Tales combinaciones también están cubiertas por la presente invención. El CTFA Cosmetic Ingredient Handbook, Second Edition (1992) describe varios ingredientes cosméticos y farmacéuticos utilizados habitualmente en la industria cosmética y farmacéutica, que son especialmente adecuados para uso tópico. Ejemplos de estas clases de ingredientes incluyen, pero sin limitación, los siguientes compuestos: abrasivos, absorbentes, compuestos estéticos como perfumes, pigmentos, colorantes, aceites esenciales, astringentes (por ejemplo, aceite de clavo, mentol, alcanfor, aceite de eucalipto, eugenol, lactato de mentilo, destilado de hamamelis), agentes antiacné, agentes antifloculantes, agentes antiespumantes, agentes antimicrobianos (por ejemplo: butilcarbamato de yodopropilo), antioxidantes, aglutinantes, aditivos biológicos, agentes tamponadores, agentes de carga, agentes quelantes, aditivos, agentes biocidas, desnaturalizantes, espesantes y vitaminas, y sus derivados o equivalentes, materiales formadores de película, polímeros, agentes opacificantes, ajustadores del pH, agentes reductores, agentes despigmentantes o aclarantes (por ejemplo : hidroquinona, ácido kójico, ácido ascórbico, ascorbil fosfato de magnesio, ascorbil glucosamina), agentes acondicionadores (por ejemplo: humectantes).

La composición cosmética también puede comprender otros agentes cosméticos y/o nutracéuticos que posean las mismas propiedades e induzcan un efecto sinérgico o no sinérgico con la cepa de Lactobacillus crispatus según la invención, o agentes cosméticos con efectos complementarios.

Pueden ser, por ejemplo, ingredientes antiarrugas, agentes estimulantes de la actividad o proliferación de fibroblastos, agentes estimulantes de moléculas de matriz extracelular.

También pueden ser ingredientes activos antienvejecimiento y/o agentes tensores para un efecto sinérgico con la cepa de Lactobacillus crispatus. Ventajosamente, se trata de principios activos que aumentan la expresión génica y/o proteica del colágeno o de principios activos que impiden la degradación del colágeno como el retinol, la vitamina C, un extracto de Davilla rugosa comercializado con el nombre de Collguard™ por BASF Beauty Care Solutions, un extracto de semillas de Hibiscus abelmoschus comercializado con el nombre Linefactor™, un péptido comercializado con el nombre Dermican™ por el solicitante o productos comercializados con los nombres Matrixyl™, Matrixyl 3000™ y Regestril™ por Sederma o Neuroguard por Codif, o Eternaline™ por Silab.

Los agentes tensores que pueden utilizarse en la invención pueden seleccionarse de entre polímeros sintéticos, como los látex de poliuretano o los látex acrílicos, polímeros de origen natural, en particular los polisacáridos en forma de almidón o en forma de carragenanos, alginatos, agares, gelanos, polímeros de celulosa y pectinas; proteínas e hidrolizados de proteínas vegetales; silicatos mixtos; micropartículas de cera; partículas coloidales de relleno inorgánico elegidas, por ejemplo, entre sílice y compuestos de sílice-alúmina; y mezclas de los mismos.

Por último, pueden intervenir ingredientes cosméticos, como agentes antimicrobianos, agentes antirradicales, agentes suavizantes, calmantes o relajantes, agentes que actúan sobre la microcirculación para mejorar la luminosidad de la tez, en particular del rostro, agentes cicatrizantes o agentes adelgazantes. Ventajosamente, la composición cosmética y/o dermatológica de la presente invención contiene también uno o varios agentes tensores y/o uno o varios agentes antimicrobianos y/o uno o varios agentes antirradicales y/o uno o varios agentes calmantes y/o uno o varios agentes adelgazantes y/o uno o varios agentes activos sobre la microcirculación.

Entre los agentes antimicrobianos asociados a la cepa de Lactobacillus crispatus en una realización preferida de la presente invención, cabe mencionar 2,4,4'-tricloro-2'-hidroxidifenil éter (o triclosán), 3,4,4'-triclorobanilida, fenoxietanol, fenoxipropanol, fenoxisopropanol, isetionato de hexamidina, metronidazol y sus sales, miconazol y sus sales, fenoxietanol, fenoxipropanol, fenoxisopropanol, isetionato de hexamidina, metronidazol y sus sales, miconazol y sus sales, itraconazol, terconazol, econazol, ketoconazol, saperconazol, fluconazol, clotrimazol, butoconazol, oxiconazol, sulfaconazol, sulconazol, laterbinafina, ácido undecilénico y sus sales, peróxido de benzoilo, ácido 3-hidroxibenzoico, ácido 4-hidroxibenzoico, ácido fítico, N-acetil-L-cisteína, ácido lipoico, ácido azelaico y sus sales, ácido araquidónico, resorcinol, octoxiglicerina, octanoilglicina, caprililglicol, ácido 10-hidroxi-2-decanoico, farnesol, fitoesfingosinas y sus mezclas.

Los agentes antirradicales pueden ser la vitamina C y sus derivados, incluido el ascorbilglucósido, los fenoles y polifenoles, en particular los taninos, el ácido elágico y el ácido tánico; la epigalocatequina y los extractos naturales que la contienen, en particular los extractos de té verde; las antocianinas; los ácidos fenólicos y los estilbenos; secuestrantes de compuestos aromáticos mono- o policíclicos, taninos como el ácido elágico y derivados indólicos y/o secuestrantes de metales pesados como el EDTA, secuestrantes de radicales libres como la vitamina E y sus derivados como el acetato de tocoferilo; bioflavonoides; coenzima Q10 o ubiquinona.

Los triterpenos pentacíclicos, el ácido ursólico y sus sales, el ácido oleanólico y sus sales, el ácido betulínico y sus sales, las sales del ácido salicílico y, en particular, el salicilato de zinc, el bisabolol y la alantoína pueden utilizarse como agentes calmantes en la composición de la invención, aceites insaturados omega 3, cortisona, hidrocortisona, indometacina y betametasona, principios activos antiinflamatorios, y en particular los descritos en la solicitud FR2847267, en particular el extracto de raíz de Pueraria lobata comercializado con el nombre de Inhipase™ por el solicitante, extractos de Theobroma cacao.

Los principios activos vasoprotectores o vasodilatadores que actúan sobre la microcirculación pueden seleccionarse de entre flavonoides, ruscogeninas, nicotinatos y aceites esenciales.

Los principios activos adelgazantes pueden seleccionarse, en particular, de entre agentes inhibidores de la lipoproteína lipasa como los descritos en la patente US2003086949 (Coletica) y, en particular, un extracto de liana peruana (Uncaria tomentosa); principios activos drenantes, en particular laurato de hesperitina (Flavagrum™) o caprilato de quercitina (Flavenger™), agentes inhibidores de la enzima fosfodiestarasa, agentes activadores de la adenilato ciclasa, AMPc y/o principios activos capaces de atrapar espermina y/o espermidina. Algunos ejemplos son el extracto de raíz de Coleus Forskohlii, el extracto de Cecropia obtusa, el extracto de Uvalactuca, la cafeína, la forskolina, la teofilina, la teobromina y/o sus derivados, un producto de kappa carragenina hidrolizada conocido como Slimexcess™ comercializado por el solicitante y/o sus mezclas.

El objeto de la presente invención es también un método de cuidado cosmético que comprende la aplicación tópica en al menos una zona de piel sana y/o mucosa sana de una cepa de Lactobacillus crispatus según la invención, o de una composición cosmética que la comprende, para mantener y/o aumentar la expresión de las moléculas de la matriz extracelular de piel sana y/o mucosa sana, preferiblemente para mantener y/o aumentar la expresión de los colágenos de la piel sana y/o de las mucosas sanas y/o de las fibras elásticas de la piel sana y/o de las mucosas sanas, y/o para mantener y/o aumentar las propiedades biomecánicas de la piel sana y/o de las mucosas sanas, en particular la firmeza y/o la elasticidad y/o la densidad, preferiblemente la firmeza.

Ventajosamente, la cepa de Lactobacillus crispatus según la invención, preferiblemente en forma de una composición cosmética según la invención, se utiliza mediante aplicación tópica regular, preferiblemente al menos una vez al día, ventajosamente dos veces al día, durante al menos 10 días, preferiblemente durante 20 días y, aún más preferiblemente, durante al menos 28 días.

Ventajosamente, la aplicación tópica de una cepa de Lactobacillus crispatus según la invención o de una composición cosmética que la comprende se realiza sobre todo o parte del cuerpo y/o cara y/o cuero cabelludo, preferiblemente las piernas, los muslos, los brazos, el estómago, el escote, el cuello, las axilas, los labios, aún más preferiblemente, sobre todo o parte del rostro, y preferiblemente las mejillas, la frente, la barbilla, los labios y el contorno de los ojos.

El procedimiento de cuidado cosmético según la invención para mantener y/o aumentar la expresión de moléculas de matriz extracelular de piel sana y/o mucosas sanas, preferiblemente para mantener y/o aumentar la expresión de colágenos de piel sana y/o mucosas sanas y/o fibras elásticas de piel sana y/o mucosas sanas, y/o para mantener y/o aumentar las propiedades biomecánicas de la piel sana y/o de las mucosas sanas, en particular la firmeza y/o la elasticidad y/o la densidad, preferiblemente la firmeza, comprende ventajosamente las etapas siguientes:

- la identificación de una zona de piel sana y/o mucosa en un individuo, en la que se desea mantener y/o aumentar la expresión de moléculas de matriz extracelular de piel sana y/o mucosa, preferiblemente mantener y/o aumentar la expresión de los colágenos de la piel sana y/o de las mucosas sanas y/o de las fibras elásticas de la piel sana y/o de las mucosas sanas, y/o mantener y/o aumentar las propiedades biomecánicas de la piel sana y/o de las mucosas sanas, en particular la firmeza y/o la elasticidad y/o la densidad, preferiblemente la firmeza, y

- la aplicación tópica en esta zona de piel sana y/o mucosas sanas de una composición cosmética que comprende la cepa de Lactobacillus crispatus según la invención, en una cantidad eficaz para mantener y/o aumentar la expresión de las moléculas de la matriz extracelular de piel sana y/o mucosas sanas, preferiblemente para mantener y/o aumentar la expresión de los colágenos de la piel sana y/o de las mucosas sanas y/o de las fibras elásticas de la piel sana y/o de las mucosas sanas, y/o para mantener y/o aumentar las propiedades biomecánicas de la piel sana y/o de las mucosas sanas, en particular la firmeza y/o la elasticidad y/o la densidad, preferiblemente la firmeza, concretamente en un contenido de cepa de Lactobacillus crispatus de:

- entre 1 x 10-4 % y 10 % (v/v) en volumen, preferiblemente entre 1 x 10-4 % y 5 % (v/v) en volumen, aún más ventajosamente, entre 1 x 10-3 % y 3 % (v/v) en volumen, aún más preferiblemente, entre 0,1 % y 2 % (v/v) en volumen, en base al volumen total de la composición, y/o

- entre 1 x 10-4 % y 10 % (p/p) en peso, preferiblemente entre 1 x 10-4 % y 5 % (p/p) en peso, aún más ventajosamente, entre 1 x 10-3 % y 0,5 % (p/p) en peso, en relación con el peso total de la composición. A los efectos de la presente invención, “vía tópica” significa la aplicación local directa y/o la pulverización de la cepa de Lactobacillus crispatus o de la composición según la invención sobre la superficie de la zona de piel sana y/o mucosa sana.

A los efectos de la presente invención, “aceptable por vía tópica y/u oral” significa un ingrediente que es adecuado para la aplicación tópica y/u oral, respectivamente, que no es tóxico, que no irrita la piel, incluido el cuero cabelludo, que no induce una respuesta alérgica y que no es químicamente inestable.

Otro objeto de la invención es la cepa de Lactobacillus crispatus según la invención, sola o en una composición dermatológica que la comprende, para utilizarla, ventajosamente por vía tópica, para el tratamiento y/o la prevención de patologías de la piel y/o de las mucosas que implican una reducción de la cantidad y/o de la expresión de moléculas de la matriz extracelular de la piel y/o de las mucosas, y/o una reducción de la cantidad y/o de la expresión de los colágenos y/o de las fibras elásticas de la piel y/o de las mucosas, y/o una reducción de la cantidad y/o de las propiedades biomecánicas de la piel y/o de las mucosas, en particular una reducción de la firmeza de la piel y/o de las mucosas y/o una reducción de la elasticidad de la piel y/o de las mucosas, y/o una reducción de la densidad de la piel y/o de las mucosas. En el sentido de la presente invención, desde un punto de vista dermatológico, se entiende por “tratamiento y/o prevención de patologías de la piel y/o de las mucosas que impliquen una disminución de la firmeza de la piel y/o de las mucosas”, con fines terapéuticos, un aumento de la firmeza de la piel y/o de las mucosas que hayan perdido firmeza bajo el efecto de patologías de la piel y/o de las mucosas como, por ejemplo, la rosácea y las telangiectasias.

En el sentido de la presente invención, desde un punto de vista dermatológico, se entiende por “tratamiento y/o prevención de patologías de la piel y/o de las mucosas que implican una disminución de la elasticidad de la piel y/o de las mucosas”, con fines terapéuticos, un aumento de la elasticidad de la piel y/o de las mucosas que han perdido su elasticidad bajo el efecto de patologías de la piel y/o de las mucosas como, por ejemplo, la elastosis solar y/o la patología cutis laxa.

En el sentido de la presente invención, desde un punto de vista dermatológico, por “tratamiento y/o prevención de patologías de la piel y/o de las mucosas que implican una disminución de la densidad de la piel y/o de las mucosas” se entiende un aumento con fines terapéuticos de la densidad de la piel y/o de las mucosas que han perdido su densidad bajo el efecto de patologías de la piel y/o de las mucosas como, por ejemplo, el síndrome de Ehlers-Danlos y/o la dermatoporosis. La cepa de Lactobacillus crispatus según la invención puede presentarse en forma de una composición farmacéutica, preferiblemente dermatológica, que comprende al menos un excipiente farmacéutica y/o dermatológicamente aceptable. En una realización de la invención, dicha composición se aplica por vía tópica y/u oral, preferiblemente por vía tópica.

Ventajosamente, está presente en la composición farmacéutica, preferiblemente dermatológica, en una concentración de 1 x 10-4 % a 10 % en peso, preferiblemente entre 1 x 10-4 % y 5 % en peso, aún más ventajosamente entre 1 x 10-3 % y 0,5 % en peso relativo al peso total de la composición, dicha composición comprende, además, al menos un excipiente farmacéuticamente aceptable.

Ventajosamente, la cepa de Lactobacillus crispatus según la invención está presente en la composición farmacéutica, preferiblemente dermatológica, en una concentración de 1 x 10-4 % a 10 % (v/v) en volumen, preferiblemente de 1 x 10-4 % a 5 % (v/v) en volumen, aún más ventajosamente, de 1 x 10-3 % a 0,5 % (v/v) en volumen, aún más preferiblemente, entre 0,1 % y 2 % (v/v) en volumen, en relación con el volumen total de la composición, dicha composición comprende, además, al menos un excipiente farmacéuticamente aceptable.

La invención se comprenderá mejor al leer la descripción y los ejemplos siguientes.

A continuación, se dan ejemplos que hacen referencia a la descripción de la invención. Estos ejemplos se dan a título ilustrativo y no limitan en modo alguno el alcance de la invención. Cada uno de los ejemplos es de alcance general.

Los ejemplos forman parte integrante de la presente invención, y cualquier característica que parezca nueva en relación con cualquier estado de la técnica anterior a partir de la descripción en su conjunto, incluidos los ejemplos, forma parte integrante de la invención.

Por otra parte, en los ejemplos, todos los porcentajes se expresan en peso, salvo indicación contraria, la temperatura se expresa en grados Celsius, salvo indicación contraria, y la presión es la presión atmosférica, salvo indicación contraria.

Ejemplo 1. Preparación de diferentes formas de Lactobacillus crispatus

Ejemplo 1.a:producción de una forma entera viable de L. crispatus.

Se sembraron bacterias aisladas de L. crispatus (CNCM I-5579) en un medio de cultivo de tipo MRS y se incubaron anaeróbicamente a 37 °C. El pH se mantuvo en pH = 6, y el medio se incubó durante 24 horas. Al final de la incubación, se centrifugó el medio, se resuspendió el concentrado celular en el medio de fermentación y se liofilizó en presencia de maltodextrina, para una cantidad final de maltodextrina del 70 % (p/p) en peso en relación con el peso total del ingrediente.

Ejemplo 1.b:producción de la forma entera inactivada deL. crispatus

Se sembraron bacterias aisladas de L. crispatus (CNCM I-5579) en un medio de cultivo de tipo MRS y se incubaron anaeróbicamente a 37 °C. El pH se mantuvo en pH = 6 y el medio se incubó durante 24 horas. Al final de la incubación, se centrifugó el medio y se inactivó el concentrado celular calentándolo a 80 °C durante 30 minutos. A continuación, el concentrado celular se volvió a suspender en glicerina.

Ejemplo 1.c:producción de lisado a partir de la bacteriaL. crispatus

Se sembraron bacterias aisladas de L. crispatus (CNCM I-5579) en un medio de cultivo de tipo MRS y se incubaron anaeróbicamente a 37 °C. El pH se mantuvo en pH = 6 y el medio se incubó durante 24 horas. Al final de la incubación, se pasó todo el lote por un homogeneizador de alta presión. A continuación, el lisado se volvió a suspender en glicerina.

Ejemplo 1.d:producción del secretoma de la bacteriaL. crispatus

Se sembraron bacterias aisladas de L. crispatus (CNCM I-5579) en un medio de cultivo de tipo MRS y se incubaron anaeróbicamente a 37 °C. El pH se mantuvo en pH = 6, y el medio se incubó durante 24 horas. Al final de la incubación, se filtró el medio para recuperar el secretoma bacteriano. A continuación, el secretoma se volvió a suspender en glicerina.

Ejemplo 1.e:producción del secretoma de la bacteriaL. crispatusen forma de polvo

Se sembraron bacterias aisladas de L. crispatus (CNCM I-5579) en un medio de cultivo de tipo MRS y se incubaron anaeróbicamente a 37 °C. El pH se mantuvo en pH = 6, y el medio se incubó durante 24 horas. Al final de la incubación, se filtró el medio para recuperar el secretoma bacteriano. A continuación, el secretoma se roció con maltodextrina para obtener un contenido final de maltodextrina del 90 % (p/p) en peso del ingrediente total.

Ejemplo 1.f:producción de una forma entera viable deL. crispatus.

Se sembraron bacterias aisladas de L. crispatus (CNCM I-5579) en un medio de cultivo de tipo MRS y se incubaron anaeróbicamente a 37 °C. El pH se mantuvo en pH = 6, y el medio se incubó durante 24 horas. Al final de la incubación, se centrifugó el medio, se resuspendió el concentrado celular en el medio de fermentación y se liofilizó en presencia de maltodextrina, para una cantidad final de maltodextrina del 50 % (p/p) en peso en relación con el peso total del ingrediente.

Ejemplo 2: Aumento de la expresión de colágeno de tipo I por los fibroblastos en presencia de la cepa de L. crispatus según la invención

Los denominados fibroblastos humanos “normales”, es decir, libres de patología, procedentes de un donante sano de 34 años de edad se sembraron en placas de 24 pocillos y se cultivaron en medio DMEM hasta confluencia.

Se continuó la incubación durante 48 horas en presencia de bacterias L. crispatus según el ejemplo 1.a sembradas en vainas sobre los pocillos de cultivo en medio MRS diluido con PBS a una concentración de 106 UFC/mL. El mismo medio de cultivo sin la adición de la cepa según la invención se utilizó como control. Al final de la incubación, se retiraron las bacterias y se lisaron las células utilizando tampón de hidróxido de amonio. A continuación, se retiró el tampón y se saturaron los pocillos con una mezcla de PBS/BSA (tampón fosfato salino/albúmina de suero bovino).

Tras la saturación, se incubó durante unos minutos el anticuerpo primario anticolágeno I (Interchim/Acris, Montlugon, Francia, LH0284/R1038), seguido del anticuerpo secundario conjugado con europio (Perkin Elmer). A continuación, se midió la fluorescencia a (Aexc. 340 nm/Aem. 615 nm) utilizando un lector de placas multietiqueta EnVision® (Perkin Elmer).

Los resultados de fluorescencia se normalizaron con respecto a la fluorescencia obtenida con el mismo medio celular en ausencia de la cepa de L. crispatus según la invención (control) y se relacionaron con la cantidad de ADN obtenida en cada condición. Los resultados presentados corresponden a la media de 6 ensayos (n=6).

Resultados

La cepa de L.crispatus según el ejemplo 1.a producida por la invención mostró una estimulación significativa del colágeno I por fibroblastos de piel humana cultivados in vitro. Por lo tanto, puede utilizarse para aumentar la firmeza de la piel sana y/o de las membranas mucosas sanas.

Ejemplo 3: Aumento de la expresión de las proteínas fibulina-5 y emilina-1 implicadas en la formación de fibras elásticas por los fibroblastos en presencia de la cepa de L. crispatus según la invenciónLos denominados fibroblastos humanos “normales”, es decir, sin patología, procedentes de un donante sano de 19 años de edad se cultivaron en FGM (Fibroblast Growth Medium). Una vez cultivados, se continuó la incubación durante 48 horas en presencia del secretoma bacteriano de L. crispatus obtenido según el ejemplo 1.e a una concentración del 0,1 % (p/p) en relación con el peso total del medio de cultivo y el secretoma. El mismo medio de cultivo sin adición de la cepa según la invención se utilizó como control. Al final de la incubación, se retiró el medio de cultivo, y se lisaron las células utilizando tampón de lisis.

La fibulina-5 y la emilina-1 se identificaron y cuantificaron mediante un sistema de análisis de proteínas basado en electroforesis capilar. Una cantidad de proteína procedente de lisados celulares, 0,2 mg/mL de lisado para la fibulina-5 y 0,2 mg/mL de sobrenadante de lisado para la emilina-1, se depositó en capilares a los que se añadió un anticuerpo primario anti-fibulina-5 o un anticuerpo anti-emilina-1 seguido de un anticuerpo secundario conjugado con peroxidasa de rábano picante y un sustrato quimioluminiscente. La combinación se incubó durante 30 minutos y, a continuación, la señal quimioluminiscente resultante de la detección de la proteína fibulina-5 se cuantificó mediante electroforesis capilar utilizando el software adecuado.

Los resultados son la media de las pruebas realizadas ± la desviación estándar, expresada en porcentaje, en relación con el control no tratado normalizado al 100 %. Los resultados se analizaron estadísticamente en relación con el control no tratado mediante la prueba ANOVA unidireccional. El nivel de significación se fijó en el 5 %.

Resultados

El secretoma de la cepa de Lactobacillus crispatus según el ejemplo 1.e de la invención mostró un aumento significativo del 50 % en la expresión proteica de fibulina-5 por fibroblastos de piel humana cultivados in vitro. Por lo tanto, la cepa de Lactobacillus crispatus, y en particular su secretoma, puede utilizarse para aumentar la elasticidad de la piel sana y/o de las membranas mucosas sanas.

El secretoma de la cepa de Lactobacillus crispatus según el ejemplo 1.e de la invención mostró un aumento significativo del 53 % en la expresión proteica de emilina-1 por fibroblastos de piel humana cultivados in vitro. Por consiguiente, la cepa de Lactobacillus crispatus y, en particular, su secretoma pueden utilizarse para aumentar la elasticidad de la piel sana y/o de las membranas mucosas sanas.

Ejemplo 4: Medición in vivo del aumento de la elasticidad de la piel en presencia de la cepa de L. crispatus según la invención

Una población de 30 mujeres de edades comprendidas entre 40 y 50 años, con elasticidad cutánea reducida en el rostro, se aplicó en la mitad del rostro una crema en forma de emulsión como la descrita en el ejemplo 7b), que comprendía una concentración final en peso del secretoma de la cepa L. crispatus según el ejemplo 1.e del 1 % (p/p) en relación con el peso total de la crema o en forma de la misma emulsión denominada placebo, en la que dicho secretoma ha sido sustituido por agua, a razón de 2 aplicaciones al día y durante 2 meses.

Las propiedades biomecánicas de la piel se evaluaron utilizando un cutométre®. Este equipo de evaluación clínica tiene la capacidad de medir 3 parámetros distintos: elasticidad global, elasticidad inmediata y recuperación elástica de la piel, los 3 reflejan la elasticidad de la piel. A partir de estas mediciones, se han obtenido diversos parámetros que reflejan el estado de elasticidad de la piel.

La elasticidad global inmediata y la recuperación elástica de la piel se midieron con el cutométre® al inicio del estudio (D0), tras un mes de aplicación (D28) y, por último, tras 2 meses de aplicación (D56).

La eficacia del secretoma de la cepa de Lactobacillus crispatus según el ejemplo 1.e se comparó con la obtenida con la emulsión placebo.

Resultados

Tras 2 meses de uso, la formulación que contenía el secretoma de la cepa de Lactobacillus crispatus según el ejemplo 1.e indujo un aumento significativo de todos los parámetros de elasticidad. Este aumento fue significativo en comparación con el inicio del estudio de DO y también en comparación con el placebo.

Estos resultados muestran el efecto beneficioso de la cepa formulada de Lactobacillus crispatus, en particular su secretoma, para mantener y/o aumentar in vivo las propiedades biomecánicas de la piel y/o mucosa sanas, en particular la elasticidad de la piel y/o mucosa sanas.

Ejemplo 5: Medición in vivo del aumento de la densidad cutánea en presencia de la cepa de L. crispatus según la invención

Una población de 31 mujeres de edades comprendidas entre 45 y 65 años, con arrugas en la frente y una reducción de las propiedades biomecánicas de la piel del rostro, se aplicó en la mitad del rostro una crema en forma de emulsión como la descrita en la formulación presentada en el ejemplo 7.c, que comprende una concentración final en peso de la cepa de L. crispatus obtenida según el ejemplo 1.f del 0,05 % (p/p) en relación con el peso total de la crema o en forma de la misma emulsión denominada placebo, en la que dicha cepa se sustituyó por agua, a razón de 2 aplicaciones al día y durante 2 meses.

La densidad cutánea se evaluó mediante un escáner equipado con una sonda de ultrasonidos. El escáner se utiliza para visualizar la densidad cutánea, que refleja la síntesis de compuestos de la matriz extracelular. Las mejoras en la densidad y el grosor de la piel se midieron al inicio del estudio (D0), tras un mes de aplicación (D28) y, por último, tras 2 meses de aplicación (D56).

La eficacia de la cepa de Lactobacillus crispatus según el ejemplo 1.f se comparó con la de una emulsión placebo.

Resultados

Tras 2 meses de uso, la formulación de la cepa de Lactobacillus crispatus según el ejemplo 1.f indujo un aumento significativo de la densidad cutánea. Este aumento fue significativo en comparación con el inicio del estudio de DO, pero también en comparación con el placebo.

Estos resultados muestran el efecto beneficioso de la cepa formulada de Lactobacillus crispatus para mantener y/o aumentar in vivo las propiedades biomecánicas de la piel y/o mucosa sanas, en particular la densidad de la piel y/o mucosa sanas.

Ejemplo 6: Ejemplo de ingrediente cosmético que comprende la cepa de Lactobacillus crispatus según la invención

Ejemplo 7: Ejemplo de composición cosmética que comprende la cepa de Lactobacillus crispatus según la invención

Ejemplo 7.a:Ejemplo de composición cosmética que comprende la cepa de Lactobacillus crispatus según el ejemplo 1.c.

Se utilizan métodos conocidos por el experto en la técnica para mezclar las distintas fases A, B, C y D a continuación, con el fin de preparar una composición según la presente invención. Las proporciones se expresan en %, y los nombres en mayúsculas corresponden a los nombres INCI de los ingredientes.

Fase A

ESTEARATO DE GLICERILO Y ESTEARATO DE PEG-100 4,00

DIESTEARATO DE PENTAERITRITILO 1,50

ISONONANOATO DE CETEARILO 3,00

CAPRILATO DE PROPILHEPTILO 5,00

CAPRILATO DE COCO 2,00

CARBONATO DE DICAPRILILO 3,00

DIMETICONA 1,00

Fase B

Agua 64,43

Propilenglicol, fenoxietanol, clorfenesina, metilparabeno 1,00

Glicerina 1,57

Goma xantana 0,20

Butilenglicol 2,00

Hidróxido de sodio, agua 0,15

Fase C

Carbómero 0,15

Agua 10

Fase D

Extracto de Lactobacillus crispatus obtenido según el ejemplo 1c) 1,00

Ejemplo 7.b: Ejemplo de composición cosmética que comprende la cepa de Lactobacillus crispatus según el ejemplo 1.e

Las proporciones se expresan en %, y los nombres en mayúsculas corresponden a las denominaciones INCI de los ingredientes.

FaseA

GLICERINA 5,00

BUTILENGLICOL 10,00

GOMA DE XANTANa 2,00

Fase B

Agua 58,95

Benzoato de sodio 0,25

GLICERINA, AGUA, LEVULINATO DE SODIO, ANISATO DE SODIO 1,00

Fase C

DIPOLIHIDROXIESTEARATO DE POLIGLICERILO-2 1,00

CARBONATO DE DIPROPILHEPTILO 3,00

CARBONATO DE DICAPRILILO 3,00 CAPRILATO/CAPRATO DE CAPRILILO 10,00

CITRATO DE LAURETH-7 0,50

Fase D

Ácido cítrico

3,00

Fase E

Extracto de Lactobacillus crispatus obtenido según el ejemplo 1e 1,00

Agua 4,00

Las distintas fases A, B y C se mezclan a temperatura ambiente según métodos conocidos por el experto, añadiéndose B a A mientras se agita y luego C a AB. El pH se ajusta a 4,9 con D. A continuación se añade la fase E. El pH se ajusta a 4,9 con D. A continuación se añade la fase E. Por último, se lleva a cabo la homogeneización mediante Ultra Turrax para preparar una composición según la presente invención.

Ejemplo 7.c: Ejemplo de composición cosmética que comprende la cepa de Lactobacillus crispatus según el ejemplo 1.f.

La cepa de Lactobacillus crispatus obtenida según el ejemplo 1.f se añade justo antes de la aplicación a la piel en una formulación como se define a continuación según la Tabla 8, a una concentración final del 0,05 % (p/p) en relación con el peso total de la formulación.

Ejemplo 8: Ejemplo de composición dermatológica

Ejemplo 8a): Pomada que contiene la cepa entera viable de L. crispatus según la invención

La composición que se presenta a continuación se prepara según métodos conocidos por el experto en la técnica, en particular en lo que se refiere a las diferentes fases que deben mezclarse.

Las cantidades indicadas se expresan en porcentaje en peso con respecto al peso total de la composición. Ingrediente* 3,00 ;Excipiente: ;Polietileno de baja densidad 5,50 ;Parafina líquida Csp 100 ;* El ingrediente se prepara según el ejemplo 1a) anterior. El ingrediente según la invención se esteriliza y luego se seca antes de incorporarlo en la composición en forma de pomada.

Ejemplo 8b): Crema que contiene la cepa de Lactobacillus crispatus según el ejemplo 1c)

Las fases A y B se calientan a 75 °C y luego se mezclan con agitación. Una vez que la mezcla ha vuelto a la temperatura ambiente, se añaden las fases C y D con agitación.

Claims (15)

REIVINDICACIONES

1. Uso cosmético y/o nutracéutico de una cepa de Lactobacillus crispatus, siendo preferiblemente la cepa de Lactobacillus crispatus la especie depositada bajo la designación CNCM I-5579, para mantener y/o aumentar la expresión de moléculas de la matriz extracelular de piel sana y/o mucosas sanas.

2. Uso de acuerdo con la reivindicación 1, en donde las moléculas de la matriz extracelular de la piel sana y/o de las mucosas sanas se seleccionan de entre fibras de colágeno de la piel sana y/o de las mucosas sanas, y/o fibras elásticas de la piel sana y/o de las mucosas sanas.

3. Uso de acuerdo con la reivindicación 1 o 2, para mantener y/o aumentar la expresión de colágenos de tipo I, III, IV, V, VI, VII, XII, XIII, XIV, XVI, XVII, XXIV y/o XXIX, preferiblemente fibras de colágeno de tipo I, III, IV, V y/o XIV, preferiblemente fibras de colágeno de tipo I, IV y/o V, aún más preferiblemente fibras de colágeno de tipo I; y/o para mantener y/o aumentar las propiedades biomecánicas de la piel sana y/o de las mucosas sanas, preferiblemente la firmeza y/o elasticidad y/o densidad de la piel sana y/o de las mucosas sanas, aún más preferiblemente, la firmeza y/o elasticidad de la piel sana y/o de las mucosas sanas.

4. Uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde la cepa se utiliza en forma entera, en particular viable y/o inactivada, en particular muerta, y/o en forma de lisado, y/o en forma de una o varias de sus fracciones, y/o en forma de uno o varios de sus metabolitos, preferiblemente su secretoma.

5. Uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde la cepa se utiliza en forma entera viable y/o en forma de lisado y/o en donde la cepa utilizada es la cepa de Lactobacillus crispatus depositada bajo la designación CNCM I-5579.

6. Uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde la cepa de Lactobacillus crispatus está asociada a su medio de fermentación y/o de cultivo.

7. Uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde la cepa de Lactobacillus crispatus se aplica tópicamente sobre piel sana y/o mucosas sanas.

8. Uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, de tal manera que la cepa de Lactobacillus crispatus está presente en la composición cosmética a una concentración de 1 x 10-4 % a 10 % en peso, preferiblemente entre 1 x 10-4 % y 5 % en peso, aún más ventajosamente, entre 1 x 10-3 % y 0,5 % en peso respecto del peso total de la composición, comprendiendo, además, dicha composición al menos un excipiente cosméticamente aceptable.

9. Procedimiento de cuidado cosmético, caracterizado porque comprende la aplicación por vía tópica, en al menos una zona de piel sana y/o mucosa sana, de una cepa de Lactobacillus crispatus de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 4, 5 o 6, o de una composición cosmética de acuerdo con la reivindicación 8, con el fin de mantener y/o aumentar la expresión de las moléculas de la matriz extracelular de piel sana y/o mucosa sana, preferiblemente para mantener y/o aumentar la expresión de los colágenos de la piel sana y/o de las mucosas sanas y/o de las fibras elásticas de la piel sana y/o de las mucosas sanas, y/o para mantener y/o aumentar las propiedades biomecánicas de la piel sana y/o de las mucosas sanas, en particular la firmeza y/o la elasticidad y/o la densidad, preferiblemente la firmeza.

10. Procedimiento de cuidado cosmético de acuerdo con la reivindicación 9, en donde la aplicación tópica de una cepa de Lactobacillus crispatus de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 4, 5 o 6, o de una composición cosmética de acuerdo con la reivindicación 8, se lleva a cabo sobre todo o parte del cuerpo y/o rostro y/o cuero cabelludo, preferiblemente las piernas, los muslos, los brazos, el estómago, el escote, el cuello, las axilas, los labios, aún más preferiblemente toda o parte del rostro, y preferiblemente las mejillas, la frente, la barbilla, los labios y el contorno de ojos.

11. Procedimiento de cuidado cosmético de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 9 a 10, en donde la composición cosmética comprende la cepa de Lactobacillus crispatus de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 4, 5 o 6 en una concentración de 1 x 10-4 % a 10 % en peso, preferiblemente entre 1 x 10-4 % y 5 % en peso, aún más ventajosamente, entre 1 x 10-3 % y 0,5 % en peso respecto del peso total de la composición, comprendiendo, además, dicha composición al menos un excipiente cosméticamente aceptable.

12. Cepa de Lactobacillus crispatus, o composición dermatológica que la comprende, para su utilización, ventajosamente por vía tópica, en el tratamiento y/o la prevención de patologías cutáneas y/o mucosas que impliquen una reducción de la cantidad y/o la expresión de moléculas de la matriz extracelular de la piel y/o mucosas, y/o una reducción de la cantidad y/o expresión de colágenos y/o fibras elásticas de la piel y/o mucosas, y/o una reducción de las propiedades biomecánicas de la piel y/o mucosas, en particular una reducción de la firmeza de la piel y/o mucosas y/o una reducción de la elasticidad de la piel y/o mucosas y/o una reducción de la densidad de la piel y/o mucosas, en donde la cepa se utiliza en forma entera, en particular viable y/o inactivada, en particular muerta, y/o en forma de lisado, y/o en forma de una o varias de sus fracciones, y/o en forma de uno o varios de sus metabolitos, preferiblemente su secretoma, y/o la cepa asociada a su medio de fermentación y/o de cultivo.

13. Cepa de Lactobacillus crispatus para su uso de acuerdo con la reivindicación 12, caracterizada porque se presenta en forma de una composición dermatológica que comprende al menos un excipiente dermatológicamente aceptable.

14. Cepa de Lactobacillus crispatus para su uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 12 a 13, caracterizada porque está presente en la composición farmacéutica, preferiblemente dermatológica, a una concentración de 1 x 10-4 % a 10 % en peso, preferiblemente entre 1 x 10-4 % y 5 % en peso, aún más ventajosamente, entre 1 x 10-3 % y 0,5 % en peso respecto del peso total de la composición, comprendiendo, además, dicha composición al menos un excipiente farmacéuticamente aceptable.

15. Cepa de Lactobacillus crispatus para su uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 12 a 14, caracterizada porque la cepa es de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 4, 5 o 6.