ES3034384T3 - Cyclic compounds and methods of using same - Google Patents

Cyclic compounds and methods of using same

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ES3034384T3 ES22715442T ES22715442T ES3034384T3 ES 3034384 T3 ES3034384 T3 ES 3034384T3 ES 22715442 T ES22715442 T ES 22715442T ES 22715442 T ES22715442 T ES 22715442T ES 3034384 T3 ES3034384 T3 ES 3034384T3
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Haifeng Tang
Xianhai Huang
Adam Marc Levinson
Leah FRYE
Sathesh Bhat
Pieter Harm Bos
Zef Konst
Phani Ghanakota
Jeremy Robert Greenwood
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Abstract

La presente solicitud se refiere a compuestos de Fórmula (I), tal como se definen en el presente documento, y a sus sales farmacéuticamente aceptables. La presente solicitud también describe una composición farmacéutica que comprende un compuesto de Fórmula (I) y sus sales farmacéuticamente aceptables, así como métodos para usar los compuestos y composiciones para inhibir la actividad de las quinasas y para el tratamiento del cáncer. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN
Compuestos cíclicos y métodos de uso de los mismos
Campo técnico
La presente solicitud se refiere a compuestos tricíclicos y otros multicíclicos que son útiles para tratar trastornos proliferativos como el cáncer.
Antecedente
El cáncer se caracteriza por el crecimiento y la proliferación celulares aberrantes. La inestabilidad genómica es un sello distintivo de las células cancerosas, con altas tasas de mutación y reordenamientos genómicos que conducen a tumores agresivos y resistentes a la terapia.VerHanahan y Weinberg, Cell, 144, páginas 646-674 (2011)) y McGranahan y Swanton, Cell 168, páginas 613-628 (2017)). La desregulación de la replicación del ADN contribuye a la inestabilidad genómica y a la tumorigénesis. Las células eucariotas se dividen mediante un proceso gradual, dirigido y altamente regulado, conocido como ciclo celular. La replicación del ADN es una parte esencial del ciclo celular altamente regulado y gradual, y esta estricta regulación garantiza que la replicación del ADN ocurra solo una vez durante la fase S y ocurra con alta fidelidad.
Durante la fase tardía de G1 a S, la quinasa CDC7 (también conocida como DDK) se activa al unirse a su proteína reguladora, DBF4 (ASK en eucariotas), que luego fosforila las proteínas 2, 4 y 6 de mantenimiento (MCM) de minicromosomas cargadas con cromatina, en múltiples sitios de fosforilación para iniciar la síntesis de ADN.VerJiang, et al., EMBO J., 18, páginas 5703-5713 (1999), Cho, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. EE.UU., 103, páginas 11521-11526 (2006) y Masai, et al., J Biol Chem., 281, páginas 39249-39261 (2006). La quinasa CDC7 juega papeles importantes en el mantenimiento de las horquillas de replicación del ADN y las rutas de respuesta al daño del a Dn .VerYamada, et al., Cell Cycle 13, páginas 1859-1866 (2014)).
La CDC7 es una serina/treonina quinasa altamente conservada desde la levadura hasta los humanos. Se ha mostrado que la eliminación de CDC7 provoca la muerte celular en las células cancerosas, pero no en las células normales, en las que las rutas dependientes de p53 detienen el ciclo celular en la fase<g>1. La respuesta apoptótica inducida en las células cancerosas por el agotamiento de CDC7 no está mediada por p53, sino por p38 MAPK.VerMontagnoli, et al., Cancer Res., 64, páginas 7110-7116 (2004) y Im y Lee, J. Biol. Chem, 283, páginas 25171-25177 (2008). Además, la regulación positiva de CDC7 se ha correlacionado con un mal pronóstico en diversos tipos de cáncer.Ver,por ejemplo, Kulkarni, et al., Clin. Cancer Res., 15, páginas 2417 2425 (2009); Choschzick, et al., Hum. Pathol., 41, páginas 358-365 (2010); Datta, et al., EMBO Rep., 18, páginas 2030-2050 (2017)); Cheng, et al., Cancer Lett., 337, 218-225 (2013). El documento WO 2018/217439 se refiere a compuestos de [5,6]cíclico-4(3H)-pirimidinona sustituidos y sus métodos de preparación. En particular, se refiere a compuestos de [5,6]cíclico-4(3H)-pirimidinona sustituidos útiles como inhibidores de proteína quinasas, específicamente inhibidores de CDC7. El documento WO2010/101302 se refiere a compuestos de tienopirimidina sustituidos que tienen una fuerte actividad inhibidora de CDC7, que es útil para la profilaxis o el tratamiento del cáncer. De manera similar, el documento EP2540728 se refiere a compuestos de tienopirimidina sustituidos que tienen una fuerte actividad inhibidora de CDC7, que son útiles para la profilaxis o el tratamiento del cáncer. El documento WO2011/123419 se refiere a compuestos tricíclicos para inhibir la actividad de PBK.
Resumen
Ahora se ha encontrado que ciertos compuestos fusionados son inhibidores de quinasa CDC7 y son útiles para tratar enfermedades, tales como las enfermedades proliferativas tales como los cánceres.
De acuerdo con ello, se proporciona en el presente documento un compuesto de la Fórmula (I):
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde R1, R2, R3, R4, Anillo A y m son como se define en el presente documento.
También se proporciona en el presente documento una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y al menos un excipiente farmacéuticamente aceptable. Cualquier referencia a métodos de tratamiento en los párrafos posteriores de esta descripción debe interpretarse como referencias a los compuestos, composiciones farmacéuticas y medicamentos de la presente invención para su uso en un método para el tratamiento del cuerpo humano (o animal) mediante terapia (o para diagnóstico).
También se proporciona en el presente documento un método para inhibir la proliferación celular,in vitrooin vivo,que comprende poner en contacto una célula con una cantidad efectiva de un compuesto de la Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o una composición farmacéutica del mismo, como se define en el presente documento.
También se proporciona en el presente documento un método para inhibir la actividad de quinasa CDC7,in vitrooin vivo,que comprende poner en contacto una célula con una cantidad efectiva de un compuesto de la Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o una composición farmacéutica del mismo, como se define en el presente documento.
También se proporciona en el presente documento un método para tratar el cáncer en un sujeto que necesita dicho tratamiento, que comprende administrar al sujeto una cantidad efectiva de un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o una composición farmacéutica del mismo, como se define en el presente documento.
También se proporciona en el presente documento un método para tratar una enfermedad o trastorno asociados con CDC7 en un sujeto que necesita dicho tratamiento, que comprende administrar al sujeto una cantidad efectiva de un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o una composición farmacéutica del mismo, como se define en el presente documento.
También se proporciona en el presente documento un método para tratar un cáncer en un sujeto que lo necesita, que comprende administrar una cantidad efectiva de un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o una composición farmacéutica del mismo, como se define en el presente documento, a un sujeto identificado como que tiene un cáncer asociado con CDC7.
También se proporciona en el presente documento un método para tratar el cáncer y/o inhibir la metástasis asociada con un cáncer particular en un sujeto que necesita dicho tratamiento, que comprende administrar al sujeto una cantidad efectiva de un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o una composición farmacéutica del mismo, como se define en el presente documento.
También se proporciona en el presente documento un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o una composición farmacéutica del mismo, como se define en el presente documento, para su uso en el tratamiento del cáncer.
También se proporciona en el presente documento un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o una composición farmacéutica del mismo, como se define en el presente documento, para su uso en el tratamiento de una enfermedad o trastorno asociados con CDC7.
También se proporciona en el presente documento un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o una composición farmacéutica del mismo, como se define en el presente documento, para su uso en el tratamiento del cáncer y/o la inhibición de la metástasis asociada con un cáncer en particular.
También se proporciona en el presente documento un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para su uso en la inhibición de la actividad de quinasa CDC7.
También se proporciona en el presente documento un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o una composición farmacéutica del mismo, como se define en el presente documento, para su uso en el tratamiento de una enfermedad o trastorno asociados con CDC7.
También se proporciona en el presente documento un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define en el presente documento, en la fabricación de un medicamento para el tratamiento del cáncer y/o la inhibición de la metástasis asociada con un cáncer en particular.
También se proporciona en el presente documento un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, definido en el presente documento, en la fabricación de un medicamento para la inhibición de la actividad de quinasa CDC7.
También se proporciona en el presente documento un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define en el presente documento, en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad o trastorno asociados con CDC7.
También se proporcionan métodos para tratar a un individuo con un cáncer asociado con CDC7, que incluyen administrar un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, antes, durante o después de la administración de otro(s) fármaco(s) contra el cáncer (por ejemplo, un primer inhibidor de quinasa CDC7 u otro inhibidor de la quinasa).
También se proporciona en el presente documento un proceso para preparar un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
También se proporciona en el presente documento un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, obtenido mediante un proceso de preparación del compuesto como se define en el presente documento.
A menos que se defina de otro modo, todos los términos técnicos y científicos utilizados en el presente documento tienen el mismo significado que comúnmente entiende una persona con conocimientos ordinarios en la técnica a la que pertenece esta divulgación. En el presente documento se describen métodos y materiales para su uso en la presente divulgación; también se pueden utilizar otros métodos y materiales adecuados conocidos en la técnica. Los materiales, métodos y ejemplos son sólo ilustrativos y no pretenden ser limitantes. En caso de conflicto, prevalecerá la presente especificación, incluyendo las definiciones.
Otros rasgos y ventajas de la divulgación serán evidentes a partir de la siguiente descripción detallada y de las reivindicaciones.
Descripción detallada
Definiciones
El término "compuesto", como se utiliza en el presente documento, incluye todos los estereoisómeros, isómeros geométricos, tautómeros y variantes isotópicamente enriquecidas de las estructuras representadas. Los compuestos identificados en el presente documento por nombre o estructura como una forma tautomérica particular, pretenden incluir otras formas tautoméricas a menos que se especifique de otro modo.
El término "tautómero", como se utiliza en el presente documento, se refiere a compuestos cuyas estructuras difieren notablemente en la disposición de los átomos, pero que existen en un equilibrio fácil y rápido, y debe entenderse que los compuestos proporcionados en el presente documento pueden representarse como diferentes tautómeros, y cuando los compuestos tienen formas tautoméricas, todas las formas tautoméricas están destinadas a estar dentro del alcance de la divulgación, y la denominación de los compuestos no excluye ningún tautómero. Un ejemplo de una forma tautomérica incluye el siguiente ejemplo:
Se notará que ciertos compuestos proporcionados en el presente documento pueden contener uno o más centros de asimetría y, por lo tanto, pueden prepararse y aislarse en una mezcla de isómeros, tal como una mezcla racémica, o en una forma enantioméricamente pura.
El término "halo" se refiere a uno de los halógenos, grupo 17 de la tabla periódica. En particular, el término se refiere al flúor, cloro, bromo y yodo. Preferiblemente, el término se refiere a flúor o cloro.
El término "alquilo C1-C6" se refiere a una cadena de hidrocarburo lineal o ramificada que contiene 1, 2, 3, 4, 5 o 6 átomos de carbono, por ejemplo metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, sec-butilo, terc-butilo, n-pentilo y n-hexilo. Los grupos alquilo pueden estar no sustituidos o sustituidos por uno o más sustituyentes como se describe en el presente documento.
El término "haloalquilo C1-C6" se refiere a una cadena de hidrocarburo sustituida con al menos un átomo de halógeno elegido independientemente en cada aparición, por ejemplo flúor, cloro, bromo y yodo. El átomo de halógeno puede estar presente en cualquier posición de la cadena de hidrocarburo. Por ejemplo, haloalquilo C1-C6 puede referirse a clorometilo, fluorometilo, difluorometilo, trifluorometilo, cloroetilo, por ejemplo, 1-cloroetilo y 2-cloroetilo, tricloroetilo, por ejemplo, 1,2,2-tricloroetilo, 2,2,2-tricloroetilo, fluoroetilo, por ejemplo, 1-fluorometilo y 2-fluoroetilo, trifluoroetilo, por ejemplo, 1,2,2-trifluoroetilo y 2,2,2-trifluoroetilo, cloropropilo, tricloropropilo, fluoropropilo, trifluoropropilo.
El término "alcoxi C1-C6" se refiere a un grupo alquilo C1-C6 que está unido a una molécula a través del oxígeno. Esto incluye unidades estructurales donde la parte alquílica puede ser lineal o ramificada, tales como metoxi, etoxi, n-propoxi, isopropoxi, n-butoxi, sec-butoxi, terc-butoxi, n-pentoxi y n-hexoxi.
Como se utiliza en el presente documento, el término "hidroxilo" se refiere a un radical -OH.
El término "hidroxialquilo C1-C6" se refiere a una cadena de hidrocarburo sustituida con un radical hidroxilo. El radical hidroxilo puede estar presente en cualquier posición de la cadena de hidrocarburos. Por ejemplo, hidroxialquilo C1-C6 puede referirse a hidroximetilo, hidroxietilo, por ejemplo, 1 -hidroxietilo y 2-hidroxietilo y 2-hidroxiisopropilo.
Como se utiliza en el presente documento, el término "arilo" se refiere a un sistema de Anillo Aromático mono o bicíclico de 6-10 solo carbonos. Los ejemplos no limitantes de grupos arilo incluyen fenilo y naftilo.
Como se utiliza en el presente documento, el término "heteroarilo" se refiere a un grupo monocíclico o bicíclico de 5-10 miembros, en donde cada anillo del sistema es aromático; en donde uno o más átomos de carbono en al menos un anillo del sistema está(n) reemplazado(s) por un heteroátomo seleccionado independientemente entre N, O y S. Ejemplos no limitantes de grupos heteroarilo incluyen piridina, pirimidina, pirrol, imidazol e indol.
Como se utiliza en el presente documento, el término "cicloalquilo" se refiere a un grupo de carbono mono o bicíclico saturado o parcialmente insaturado que tiene de 3 a 10 átomos en el anillo; en donde los sistemas bicíclicos incluyen sistemas de anillos fusionados, espiro (opcionalmente denominados grupos "espirocicloalquilo") y que forman puente. Los grupos cicloalquilo fusionados pueden incluir un Anillo Aromático y otro anillo saturado o parcialmente saturado, como 1,2,3,4-tetrahidronaftaleno y 2,3-dihidro-1H-indeno. Los ejemplos no limitantes de grupos cicloalquilo incluyen ciclopropilo, ciclohexilo, espiro[2.3]hexilo y biciclo[1.1.1]pentilo. Como sustituyente, por ejemplo en un grupo alquilo, un grupo cicloalquilo puede compartir un átomo de carbono con la cadena alquilo.
El término "heterociclilo" se refiere a un sistema de anillo monocíclico o bicíclico de hidrocarburo saturado o parcialmente insaturado que no es completamente aromático y que tiene al menos un heteroátomo dentro del anillo, seleccionado entre N, O y S. Los grupos heterociclilo bicíclicos incluyen sistemas de anillos fusionados, espiro (opcionalmente denominados grupos "espiroheterociclilo") y que forman puente. Los grupos heterociclilo fusionados pueden contener un Anillo Aromático y otro anillo saturado o parcialmente saturado, tal como la 5,6,7,8-tetrahidroquinolina e indolina. El grupo heterociclilo puede designarse como un "grupo heterociclilo de 3 a 10 miembros", que es un sistema de anillo que contiene 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 o 10 átomos, siendo al menos uno un heteroátomo. Por ejemplo puede haber 1, 2 o 3 heteroátomos, opcionalmente 1 o 2. El grupo heterociclilo puede estar unido al resto de la molécula a través de cualquier átomo de carbono o a través de un heteroátomo tal como el nitrógeno. Los grupos heterociclilo ejemplares incluyen, pero no se limitan a, piperidinilo, piperazinilo, morfolino, tetrahidropiranilo, azetidinilo, oxetanilo y 2-azaspiro[3.3]heptanilo. Como sustituyente, por ejemplo en un grupo alquilo, un grupo heterociclilo puede compartir un átomo de carbono con la cadena alquilo.
Como se utiliza en el presente documento, el término "geminal" se refiere a átomos o grupos sustituyentes unidos al mismo átomo en una molécula.
Como se utiliza en el presente documento, el término "oxo" se refiere a un grupo "=O" unido a un átomo de carbono.
Como se utiliza en el presente documento, el símbolo representa el punto de unión de un átomo o unidad estructural al átomo o grupo indicado en el resto de la molécula.
Se debe entender que el anillo A en los compuestos de la Fórmula (I) que comprende, no contiene dos átomos de oxígeno adyacentes o dos átomos de S adyacentes.
Los compuestos de la Fórmula (I) incluyen sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. Además, los compuestos de la Fórmula (I) también incluyen otras sales de dichos compuestos que no son necesariamente sales farmacéuticamente aceptables y que pueden ser útiles como intermedios para preparar y/o purificar compuestos de la Fórmula (I) y/o para separar enantiómeros de compuestos de la Fórmula (I). Los ejemplos no limitantes de sales farmacéuticamente aceptables de compuestos de la Fórmula (I) incluyen ácido trifluoroacético y sales de clorhidrato.
Se notará además que los compuestos de la Fórmula (I) o sus sales pueden aislarse en forma de solvatos y, de acuerdo con ello, que cualquier solvato de este tipo está incluido dentro del alcance de la presente divulgación. Por ejemplo, los compuestos de la Fórmula (I) y sus sales pueden existir en formas no solvatadas así como solvatadas con solventes farmacéuticamente aceptables tales como agua, etanol y similares.
En algunas realizaciones, los compuestos de la Fórmula (I) incluyen los compuestos de los Ejemplos 1-96 y sus sales y solvatos farmacéuticamente aceptables. En algunas realizaciones, los compuestos de la Fórmula (I) están en forma de base libre. En algunas realizaciones, los compuestos de la Fórmula (I) están en forma de sal (por ejemplo, una sal farmacéuticamente aceptable).
En algunas realizaciones, los compuestos de la Fórmula (I) incluyen estereoisómeros y sales y solvatos farmacéuticamente aceptables de los mismos. En algunas realizaciones, los compuestos de la Fórmula (I) están en forma de base libre. En algunas realizaciones, los compuestos de la Fórmula (I) están en forma de sal.
El término "farmacéuticamente aceptable" indica que el compuesto, o sal o composición del mismo es compatible química y/o toxicológicamente con los demás ingredientes que comprenden una formulación y/o el sujeto que se trata con ellos.
Los grupos protectores pueden ser un sustituyente temporal que protege a un grupo funcional potencialmente reactivo, de transformaciones químicas no deseadas. La elección del grupo protector particular empleado está dentro de las habilidades de una persona con conocimientos ordinarios en la técnica. Una serie de consideraciones pueden determinar la elección del grupo protector, incluyendo, pero no limitado a, el grupo funcional que se está protegiendo, otra funcionalidad presente en la molécula, las condiciones de reacción en cada paso de la secuencia de síntesis, otros grupos protectores presentes en la molécula, la tolerancia del grupo funcional a las condiciones requeridas para retirar el grupo protector y las condiciones de reacción para la descomposición térmica de los compuestos proporcionados en el presente documento. Se ha revisado el campo de la química de grupos protectores (Greene, T. W.; Wuts, P. G. M. Protective Groups in Organic Synthesis, 2.a ed. Sup.; Wiley: Nueva York, 199l).
Un grupo protector de nitrógeno puede ser cualquier sustituyente temporal que protege una unidad estructural de amina de transformaciones químicas no deseadas. Los ejemplos de unidades estructurales formadas cuando dichos grupos protectores se unen a una amina incluyen, pero no se limitan a, alilamina, bencilaminas (por ejemplo, bencilamina, p-metoxibencilamina, 2,4-dimetoxibencilamina y tritilamina), acetilamida, tricloroacetamida, trifluoroacetamida, pent-4-enamida, ftalimidas, carbamatos (por ejemplo, carbamato de metilo, f-carbamato de butilo, carbamato de bencilo, carbamatos de alilo, carbamato de 2,2,2-tricloroetilo y carbamato de 9-fluorenilmetilo), iminas y sulfonamidas (por ejemplo, bencenosulfonamida, ptoluenosulfonamida, yp-nitrobencenosulfonamida).
Un grupo protector de oxígeno puede ser cualquier sustituyente temporal que protege una unidad estructural hidroxilo de transformaciones químicas no deseadas. Los ejemplos de unidades estructurales formadas cuando dichos grupos protectores están unidos a un hidroxilo incluyen, pero no se limitan a, ésteres (por ejemplo, acetilo, f-butilcarbonilo y benzoilo), bencilo (por ejemplo, bencilo, p-metoxibencilo y 2,4-dimetoxibencilo y tritilo), carbonatos (por ejemplo, carbonato de metilo, carbonato de alilo, carbonato de 2,2,2-tricloroetilo y carbonato de bencilo) cetales y acetales y éteres.
Los compuestos proporcionados en el presente documento también pueden contener proporciones no naturales de isótopos atómicos en uno o más de los átomos que constituyen dichos compuestos. Es decir, un átomo, en particular cuando se menciona en relación con un compuesto de acuerdo con la Fórmula (I), comprende todos los isótopos y mezclas isotópicas de ese átomo, ya sean de ocurrencia natural o producidos sintéticamente, ya sea con abundancia natural o en una forma isotópicamente enriquecida. Por ejemplo, cuando se menciona hidrógeno, se entiende que se refiere a 1H, 2H, 3H o mezclas de ellos; cuando se menciona carbono, se entiende que se refiere a 11C, 12C, 13C, 14C o mezclas de ellos; cuando se menciona nitrógeno, se entiende que se refiere a 13N, 14N, 15N o mezclas de los mismos; cuando se menciona oxígeno, se entiende que se refiere a 14O, 15O, 16O, 17O, 18O o mezclas de los mismos, y cuando se menciona fluoro, se entiende que se refiere a 18F, 19F o mezclas de los mismos, a menos que se indique expresamente de otro modo. Por ejemplo, en los grupos deuteroalquilo y deuteroalcoxi, donde uno o más átomos de hidrógeno se reemplazan específicamente con deuterio (2H). Como algunos de los isótopos mencionados anteriormente son radiactivos, los compuestos proporcionados en el presente documento también comprenden compuestos con uno o más isótopos de uno o más átomos y mezclas de los mismos, incluyendo compuestos radiactivos, en donde uno o más átomos no radiactivos han sido reemplazados por uno de sus isótopos radiactivos enriquecidos. Los compuestos radiomarcados son útiles como agentes terapéuticos, por ejemplo, agentes terapéuticos contra el cáncer, reactivos de investigación, por ejemplo, reactivos de ensayo y agentes de diagnóstico, por ejemplo, agentes de formaciónin vivode imágenes. Se pretende que todas las variaciones isotópicas de los compuestos proporcionados en el presente documento, sean radiactivos o no, queden comprendidas dentro del alcance de la presente divulgación.
Con fines ilustrativos, en el presente documento se proporcionan métodos generales para preparar los compuestos, así como compuestos intermedios clave. Para obtener una descripción más detallada de los pasos de reacción individuales, vea la sección de Ejemplos a continuación. Los expertos en la técnica notarán que se pueden utilizar otras rutas de síntesis para sintetizar los compuestos de la invención. Aunque los materiales de partida y reactivos específicos se representan en los Esquemas y se discuten a continuación, otros materiales de partida y reactivos se pueden sustituir fácilmente para proporcionar una variedad de derivados y/o condiciones de reacción. Además, muchos de los compuestos preparados mediante los métodos descritos a continuación pueden modificarse aún más a la luz de esta divulgación utilizando química convencional bien conocida por aquellos expertos en la técnica.
La capacidad de los compuestos de prueba para actuar como inhibidores de CDC7 puede demostrarse mediante los ensayos biológicos y computacionales descritos en el presente documento. Los valores IC50 se muestran en las Tablas 2 y 3.
Los compuestos de la Fórmula (I) (por ejemplo, una cualquiera de las Fórmulas (I-A) a (I-P)), o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, son útiles para tratar enfermedades y trastornos que pueden tratarse con un inhibidor de quinasa CDC7, tales como cánceres asociados con CDC7, incluyendo cánceres hematológicos y tumores sólidos.
Como se utilizan en el presente documento, los términos "tratar" o "tratamiento" se refieren a medidas terapéuticas o paliativas. Los resultados clínicos beneficiosos o deseados incluyen, pero no se limitan a, alivio, total o parcial, de los síntomas asociados con una enfermedad o trastorno o condición, disminución de la extensión de la enfermedad, estado estabilizado (es decir, que no empeora) de la enfermedad, retraso o desaceleración de la progresión de la enfermedad, mejora o paliación del estado de la enfermedad (por ejemplo, uno o más síntomas de la enfermedad) y remisión (ya sea parcial o total), ya sea detectable o indetectable. "Tratamiento" también puede significar prolongar la supervivencia en comparación con la supervivencia esperada si no se recibe tratamiento.
Como se utiliza en el presente documento, el término "sujeto" se refiere a cualquier animal, incluyendo mamíferos como ratones, ratas, otros roedores, conejos, perros, gatos, cerdos, ganado, ovejas, caballos, primates y seres humanos. En algunas realizaciones, el sujeto es un ser humano. En algunas realizaciones, el sujeto ha experimentado y/o exhibido al menos un síntoma de la enfermedad o trastorno que se va a tratar y/o prevenir.
En algunas realizaciones, el sujeto ha sido identificado o diagnosticado con un cáncer con una desregulación de un gen CDC7, una proteína CDC7 o expresión o actividad, o nivel de cualquiera de los mismos (un cáncer asociado con CDC7) (por ejemplo, según se determina utilizando un ensayo o kit aprobado por una agencia reguladora, por ejemplo, aprobado por la FDA). En algunas realizaciones, el sujeto tiene un tumor que es positivo para una desregulación de un gen CDC7, una proteína CDC7 o expresión o actividad, o nivel de cualquiera de los mismos (por ejemplo, según se determina utilizando un ensayo o kit aprobado por una agencia reguladora). El sujeto puede ser un sujeto con un tumor(es) que sea positivo para una desregulación de un gen CDC7, una proteína CDC7 o expresión o actividad, o nivel de cualquiera de los mismos (por ejemplo, identificado como positivo utilizando un ensayo o kit aprobado por una agencia reguladora, por ejemplo, aprobado por la FDA). El sujeto puede ser un sujeto cuyos tumores tienen una desregulación de un gen CDC7, una proteína CDC7 o expresión o actividad, o un nivel de la misma (por ejemplo, cuando el tumor se identifica como tal utilizando un kit o ensayo aprobado por una agencia reguladora, por ejemplo, aprobado por la FDA). En algunas realizaciones, se sospecha que el sujeto tiene un cáncer asociado con CDC7. En algunas realizaciones, el sujeto tiene un historial clínico que indica que el sujeto tiene un tumor que tiene una desregulación de un gen CDC7, una proteína CDC7, o expresión o actividad, o nivel de cualquiera de los mismos (y opcionalmente el historial clínico indica que el sujeto debería ser tratado con cualquiera de las composiciones proporcionadas en el presente documento). En algunas realizaciones, el sujeto es un sujeto pediátrico. En algunas realizaciones, se ha identificado o diagnosticado al sujeto con un cáncer que, con base en un examen histológico, se determina que está asociado con una desregulación de un gen CDC7, una proteína CDC7 o la expresión o actividad, o el nivel de cualquiera de los mismos (un cáncer asociado con CDC7).
El término "sujeto pediátrico" como se utiliza en el presente documento se refiere a un sujeto menor de 21 años en el momento del diagnóstico o tratamiento. El término "pediátrico" puede dividirse además en varias subpoblaciones que incluyen: neonatos (desde el nacimiento hasta el primer mes de vida); bebés (desde 1 mes hasta los dos años de edad); niños (desde los dos años de edad hasta los 12 años de edad); y adolescentes (desde los 12 años de edad hasta los 21 años de edad (hasta el vigésimo segundo cumpleaños, pero sin incluirlo)). Berhman RE, Kliegman R, Arvin AM, Nelson WE. Nelson Textbook of Pediatrics, 15a edición. Filadelfia: W.B. Saunders Company, 1996; Rudolph AM, y otros. Rudolph's Pediatrics, 21a edición, Nueva York: McGraw-Hill, 2002; y Avery MD, First LR. Pediatric Medicine, 2a ed. Baltimore: Williams y Wilkins; 1994. En algunas realizaciones, un sujeto pediátrico es desde el nacimiento hasta los primeros 28 días de vida, desde los 29 días de edad hasta menos de dos años de edad, desde los dos años de edad hasta menos de 12 años de edad, o desde los 12 años de edad hasta los 21 años de edad (hasta, pero sin incluir, el vigésimo segundo cumpleaños). En algunas realizaciones, un sujeto pediátrico es desde el nacimiento hasta los primeros 28 días de vida, desde los 29 días de edad hasta menos de 1 año de edad, desde un mes de edad hasta menos de cuatro meses de edad, desde los tres meses de edad hasta menos de siete meses de edad, desde los seis meses de edad hasta menos de 1 año de edad, desde 1 año de edad hasta menos de 2 años de edad, desde los 2 años de edad hasta menos de 3 años de edad, desde los 2 años de edad hasta menos de siete años de edad, desde los 3 años de edad hasta menos de 5 años de edad, desde los 5 años de edad hasta menos de 10 años de edad, desde los 6 años de edad hasta menos de 13 años de edad, desde los 10 años de edad hasta menos de 15 años de edad, o desde los 15 años de edad hasta menos de 22 años de edad.
En algunas realizaciones, los compuestos de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, son útiles para prevenir enfermedades y trastornos como se define en el presente documento, (por ejemplo, enfermedades autoinmunes, enfermedades inflamatorias y cáncer). El término "prevenir" como se utiliza en el presente documento significa la prevención de la aparición, recurrencia o propagación, total o parcial, de la enfermedad o condición como se describe en el presente documento, o un síntoma de la misma.
El término "cáncer asociado con CDC7" como se utiliza en el presente documento se refiere a cánceres asociados con o que tienen una desregulación de un gen CDC7, una quinasa CDC7 (también llamada en el presente documento proteína quinasa CDC7), o la expresión o actividad o nivel de cualquiera (por ejemplo, uno o más) de los mismos (por ejemplo, cualquiera de los tipos de desregulación de un gen CDC7, una quinasa CDC7, un dominio de quinasa CDC7, o la expresión o actividad o nivel de cualquiera de los mismos descritos en el presente documento). Los ejemplos no limitantes de una enfermedad o trastorno asociado con CDC7 incluyen, por ejemplo, cáncer y trastornos gastrointestinales como el síndrome (IBS) del intestino irritable.
El término "cáncer asociado con CDC7", como se utiliza en el presente documento, se refiere a cánceres asociados con o que tienen una desregulación de un gen CDC7, una quinasa CDC7, o expresión o actividad, o nivel de cualquiera de los mismos. Se describen en el presente documento ejemplos no limitantes de un cáncer asociado con CDC7.
La frase "desregulación de un gen CDC7, una quinasa CDC7 o la expresión o actividad o nivel de cualquiera de los mismos" se refiere a una mutación genética (por ejemplo, una translocación cromosómica que da como resultado la expresión de una proteína de fusión que incluye un dominio de quinasa CDC7 y un asociado de fusión, una mutación en un gen CDC7 que da como resultado la expresión de una proteína CDC7 que incluye una eliminación de al menos un aminoácido en comparación con una proteína CDC7 de tipo silvestre, una mutación en un gen CDC7 que da como resultado la expresión de una proteína CDC7 con una o más mutaciones puntuales en comparación con una proteína CDC7 de tipo silvestre, una mutación en un gen CDC7 que da como resultado la expresión de una proteína CDC7 con al menos un aminoácido insertado en comparación con una proteína CDC7 de tipo silvestre, una duplicación de gen que da como resultado un aumento del nivel de la proteína CDC7 en una célula, o una mutación en una secuencia reguladora (por ejemplo, un promotor y/o potenciador) que da como resultado un aumento del nivel de la proteína CDC7 en una célula), una versión empalmada alternativa de un ARNm CDC7 que da como resultado una proteína CDC7 que tiene una eliminación de al menos un aminoácido en la proteína CDC7 en comparación con la proteína CDC7 de tipo silvestre), o una mayor expresión (por ejemplo, mayores niveles) de una quinasa CDC7 de tipo silvestre en una célula de mamífero debido a una señalización celular aberrante y/o una señalización autocrina/paracrina desregulada (por ejemplo, en comparación con una célula de control no cancerosa). Como otro ejemplo, una desregulación de un gen CDC7, una proteína CDC7, o la expresión o actividad, o el nivel de cualquiera de los mismos, puede ser una mutación en un gen CDC7 que codifica una proteína CDC7 que es constitutivamente activa o tiene una actividad aumentada en comparación con una proteína codificada por un gen CDC7 que no incluye la mutación. Como ejemplo adicional, un mayor número de copias del gen CDC7 puede resultar en una sobreexpresión de quinasa CDC7. Por ejemplo, una desregulación de un gen CDC7, una proteína CDC7, o la expresión o actividad, o el nivel de cualquiera de los mismos, puede ser el resultado de una translocación genética o cromosómica que da como resultado la expresión de una proteína de fusión que contiene una primera porción de CDC7 que incluye un dominio de quinasa funcional y una segunda porción de una proteína asociada (es decir, que no es CDC7). En algunos ejemplos, la desregulación de un gen CDC7, una proteína CDC7 o la expresión o actividad o nivel de cualquiera de los mismos puede ser resultado de una translocación genética de un gen CDC7 con otro gen que no sea CDC7.
El término "tipo silvestre" describe un ácido nucleico (por ejemplo, un gen CDC7 o un ARNm de CDC7) o una proteína (por ejemplo, una proteína CDC7) que se encuentra en un sujeto que no tiene una enfermedad asociada con CDC7, por ejemplo, un cáncer asociado con CDC7 (y opcionalmente tampoco tiene un mayor riesgo de desarrollar una enfermedad asociada con CDC7 y/o no se sospecha que tenga una enfermedad asociada con CDC7), o se encuentra en una célula o tejido de un sujeto que no tiene una enfermedad asociada con CDC7, por ejemplo, un cáncer asociado con CDC7 (y opcionalmente tampoco tiene un mayor riesgo de desarrollar una enfermedad asociada con CDC7 y/o no se sospecha que tenga una enfermedad asociada con CDC7).
El término "agencia reguladora" se refiere a la agencia de un país para la aprobación del uso médico de agentes farmacéuticos en ese país. Por ejemplo, un ejemplo no limitante de una agencia reguladora es la Food and Drug Administration de Estados Unidos (FDA).
En el presente documento se proporcionan compuestos de la Fórmula (I):
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde:
R1 es hidrógeno o halógeno;
R2 es un heteroarilo de 5-6 miembros opcionalmente sustituido con 1 o 2 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en halógeno y alquilo C1-C6; o un heterociclilo de 5-6 miembros opcionalmente sustituido con 1 o 2 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en halógeno y alquilo C1-C6;
R3 es hidrógeno o alquilo C1-C6;
el Anillo A es un cicloalquilo C6-C10 o un heterociclilo de 6 a 10 miembros;
cada R4 se selecciona independientemente del grupo que consiste en halógeno, hidroxilo, alquilo C1-C6, alcoxi C1-C6, hidroxialquilo C1-C6, haloalquilo C1-C6, alcoxi C1-C6(alquilo C1-C6)-, - C(=O)alquilo C1-C6, alquinilo C2-C6, cicloalquilo C3-C6, -NRARB, y heterociclilo de 4-6 miembros opcionalmente sustituido con 1 o 2 halógenos seleccionados independientemente; cada RA y RB es independientemente hidrógeno o alquilo C1-C6; y
m es 0, 1, 2, 3 o 4.
En algunas realizaciones, m es 1. En algunas realizaciones, m es 2. En algunas realizaciones, m es 3. En algunas realizaciones, m es 4.
En algunas realizaciones, R2 es un heteroarilo de 5 miembros opcionalmente sustituido con 1 o 2 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en halógeno y alquilo C1-C6. En algunas realizaciones, R2 es un heteroarilo de 5 miembros sustituido con 1 o 2 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en halógeno y alquilo C1-C6.
En algunas realizaciones, R2 es un grupo heteroarilo de 5 miembros seleccionado del grupo que consiste en pirrolilo, pirazolilo, imidazolilo, triazolilo, tetrazolilo, furanilo, tiofenilo, oxazolilo, isoxazolilo, isotiazolilo, tiazolilo, furzanilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, oxatriazolilo y tiatriazolilo. En algunas realizaciones, el heteroarilo de 5 miembros de R2 es pirazolilo o isotiazolilo. En algunas realizaciones, R2 es 4-pirazolilo, 5-pirazolilo o 5-isotiazolilo.
En algunas realizaciones, R2 es un heteroarilo de 6 miembros opcionalmente sustituido con 1 o 2 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en halógeno y alquilo C1-C6. En algunas realizaciones, R2 es un heteroarilo de 6 miembros sustituido con 1 o 2 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en halógeno y alquilo C1-C6.
En algunas realizaciones, R2 es un grupo heteroarilo de 6 miembros seleccionado del grupo que consiste en piridilo, pirimidinilo, pirazinilo, piridazinilo y triazinilo. En algunas realizaciones, el heteroarilo de 6 miembros de R2 es piridilo, pirimidinilo o piridazinilo. En algunas realizaciones, el heteroarilo de 6 miembros de R2 es piridilo. En algunas realizaciones, R2 es 4-piridilo. En algunas realizaciones, R2 es 4-pirimidinilo. En algunas realizaciones, R2 es 4-piridazinilo.
En algunas realizaciones, el heteroarilo de R2 está sustituido con un sustituyente seleccionado entre halógeno y alquilo C1-C6. En algunas realizaciones, el heteroarilo de R2 se sustituye con un sustituyente seleccionado entre fluoro, cloro y metilo. En algunas realizaciones, el heteroarilo de R2 está sustituido con dos sustituyentes seleccionados independientemente entre halógeno y alquilo C1-C6. En algunas realizaciones, el heteroarilo de R2 está sustituido con dos sustituyentes seleccionados independientemente entre fluoro y metilo.
En algunas realizaciones, los sustituyentes en R2 son los mismos. En algunas realizaciones, los sustituyentes en R2 son diferentes
En algunas realizaciones, R2 es un heteroarilo de 5-6 miembros no sustituido, tal como un pirazolilo, isotiazolilo, piridilo o piridazinilo no sustituido.
En algunas realizaciones, R2 es un heterociclilo de 5-6 miembros opcionalmente sustituido con 1 o 2 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en halógeno y alquilo C1-C6. En algunas realizaciones, R2 es un heterociclilo de 5-6 miembros no sustituido. En algunas realizaciones, R2 es morfolinilo, piperidinilo o piperazinilo. En algunas realizaciones, R2 es morfolinilo. En algunas realizaciones, R2 es 4-morfolinilo.
En algunas realizaciones, el Anillo A es cicloalquilo C6-C10. En algunas realizaciones, el Anillo A es ciclohexilo. En algunas realizaciones, el Anillo A es biciclo[2.2.2]octanilo.
En algunas realizaciones, el Anillo A es heterociclilo de 6 a 10 miembros. En algunas realizaciones, el Anillo A es tetrahidropiranilo. En algunas realizaciones, el Anillo A es piperidinilo.
En algunas realizaciones, uno o dos R4 es independientemente halógeno. En algunas realizaciones, un R4 es fluoro o cloro. En algunas realizaciones, un R4 es fluoro. En algunas realizaciones, un R4 es cloro. En algunas realizaciones, dos R4 son fluoro.
En algunas realizaciones, un R4 es hidroxilo.
En algunas realizaciones, un R4 es independientemente alquilo C1-C6. En algunas realizaciones, uno o dos R4 es alquilo C1-C6 seleccionado independientemente. En algunas realizaciones, un R4 se selecciona independientemente del grupo que consiste en -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH(CH3)CH2CH3, -C(CH3)2CH2CH3, y -C(CH3)3.
En algunas realizaciones, cada R4 es independientemente alcoxi C1-C6. En algunas realizaciones, un R4 es alcoxi C1-C6. En algunas realizaciones, cada R4 es independientemente metoxi, etoxi o isopropoxi. En algunas realizaciones, un R4 es metoxi, etoxi o isopropoxi. En algunas realizaciones, cada R4 es metoxi. En algunas realizaciones, un R4 es metoxi.
En algunas realizaciones, un R4 es hidroxialquilo C1-C6. En algunas realizaciones, un R4 es hidroxialquilo C1-C6. En algunas realizaciones, un R4 es -CH2OH o -C(CH3)OH. En algunas realizaciones, un R4 es -CH2OH o -C(CH3)2OH.
En algunas realizaciones, un R4 es haloalquilo C1-C6. En algunas realizaciones, uno o dos R4 son haloalquilo C1-C6 seleccionados independientemente. En algunas realizaciones, un R4 es -CF3. En algunas realizaciones, un R4 es -CHF2. En algunas realizaciones, un R4 es -CF3. En algunas realizaciones, un R4 es -CHF2. En algunas realizaciones, un R4 es -CF2CH3. En algunas realizaciones, un R4 es CH2CF2CH3.
En algunas realizaciones, un R4 es alcoxi C1-C6(alquilo C1-C6)-. En algunas realizaciones, un R4 es alcoxi C1-C3(alquilo C1-C3)-. En algunas realizaciones, un R4es independientemente metoxi(alquilo C1-C6)-. En algunas realizaciones, un R4 es -CH2OCH3.
En algunas realizaciones, un R4 es -C(=O)alquilo C1-C6. En algunas realizaciones, R4 es C(=O)CH3.
En algunas realizaciones, un R4 es alquinilo C2-C6. En algunas realizaciones, un R4 es 1-propinilo.
En algunas realizaciones, un R4 es cicloalquilo C3-C6. En algunas realizaciones, R4 es ciclopentilo.
En algunas realizaciones, un R4 es -NRARB. En algunas realizaciones, uno de RA y RB es hidrógeno y el otro de RA y RB es alquilo C1-C6. En algunas realizaciones, RA y RB son ambos alquilo C1-C6. En algunas realizaciones, R4 es -NH2.
En algunas realizaciones, un R4 es un heterociclilo de 4-6 miembros opcionalmente sustituido con 1 o 2 halógenos seleccionados independientemente. En algunas realizaciones, un R4 es un heterociclilo de 4-6 miembros sustituido con 1 o 2 halógenos seleccionados independientemente. En algunas realizaciones, un R4 es un heterociclilo de 4-6 miembros sustituido con 1 o 2 fluoro. En algunas realizaciones, un R4 es un heterociclilo de 4-6 miembros sustituido con grupos difluoro germinales.
En algunas realizaciones, un R4 es azetidinilo, oxetanilo, pirrolidinilo, tetrahidrofurilo, piperidinilo, piperazinilo, tetrahidrofurilo, morfolinilo o dioxanilo; cada uno opcionalmente sustituido con 1 o 2 halógenos seleccionados independientemente. En algunas realizaciones, un R4 es pirrolidinilo opcionalmente sustituido con 1 o 2 halógenos seleccionados independientemente. En algunas realizaciones, un R4 es pirrolidinilo sustituido con 1 o 2 halógenos seleccionados independientemente. En algunas realizaciones, un R4 es azetidinilo opcionalmente sustituido con 1 o 2 halógenos seleccionados independientemente. En algunas realizaciones, un R4 es azetidinilo sustituido con 1 o 2 halógenos seleccionados independientemente. En algunas realizaciones, los 1 o 2 halógenos seleccionados independientemente son fluoro. En algunas realizaciones, los 2 halógenos seleccionados independientemente son grupos difluoro germinales.
En algunas realizaciones, un R4 es un heterociclilo de 4-6 miembros no sustituido. En algunas realizaciones, el heterociclilo de 4-6 miembros no sustituido de R4 es azetidinilo, oxetanilo, pirrolidinilo, tetrahidrofurilo, piperidinilo, piperazinilo, tetrahidrofurilo, morfolinilo o dioxanilo. En algunas realizaciones, un R4 es un pirrolidinilo no sustituido o un azetidinilo no sustituido.
En algunas realizaciones, un R4 se selecciona del grupo que consiste en
*D.
En algunas realizaciones, m es 2, 3 o 4; y dos de los 2, 3 o 4 grupos R4 son gemínales. En algunas realizaciones, m es 2; y ambos (es decir, dos) R4 los grupos son geminales. En algunas realizaciones, m es 3; y en donde dos de los tres R4 Los grupos son geminales. En algunas realizaciones, m es 4; y donde cada par de R4 Los grupos son geminales.
En algunas realizaciones, R1 es halógeno. En algunas realizaciones, R1 es fluoro o cloro. En algunas realizaciones, R1 es fluoro. En algunas realizaciones, R1 es hidrógeno.
En algunas realizaciones, R3 es alquilo C1-C6. En algunas realizaciones, R3 es metilo. En algunas realizaciones, R3 es hidrógeno.
En algunas realizaciones, m es 2; un R4 es hidroxilo; y el otro R4 es alquilo C1-C6.
En algunas realizaciones, m es 2 y cada R4 es fluoro.
En algunas realizaciones, m es 2; un R4 es hidroxilo; y el otro R4 es haloalquilo C1-C6.
En algunas realizaciones, m es 2; un R4 es hidroxilo; y el otro R4 es alquinilo C2-C6.
En algunas realizaciones, m es 2; un R4 es hidroxilo; y el otro R4 es cicloalquilo C3-C6.
En algunas realizaciones, m es 2; un R4 es hidroxilo; y el otro R4 es alcoxi C1-C6(alquilo C1-C6)- .
En algunas realizaciones, m es 2; cada R4 es alquilo C1-C6 seleccionado independientemente.
En algunas realizaciones, m es 2; un R4 es alquilo C1-C6; y el otro R4 es hidroxialquilo C1-C6.
En algunas realizaciones, m es 2; un R4 es alquilo C1-C6; y el otro R4 es alcoxi C1-C6.
En algunas realizaciones, m es 2; un R4 es alquilo C1-C6; y el otro R4 es - NRARB.
En algunas realizaciones, m es 2; un R4 es alquilo C1-C6; y el otro R4 es un heterociclilo de 4-6 miembros opcionalmente sustituido con 1 o 2 halógenos seleccionados independientemente.
En algunas realizaciones, m es 4; dos R4 son fluoro; un R4 es alcoxi C1-C6; y un R4 es alquilo C1-C6.
En algunas realizaciones, m es 4; dos R4 son fluoro; un R4 es hidroxialquilo C1-C6; y un R4 es alquilo C1-C6. En algunas realizaciones, m es 4; dos R4 son fluoro; un R4 es hidroxilo; y un R4 es alquilo C1-C6.
En algunas realizaciones, m es 4; dos R4 son fluoro; un R4 es hidroxilo; y un R4 es alcoxi C1-C6(alquilo C1-C6)-.
En algunas realizaciones, R1 es hidrógeno; R2 es un pirazolilo no sustituido; m es 2; un R4 es hidroxilo; y el otro R4 es alquilo C1-C6.
En algunas realizaciones, R1 es hidrógeno; R2 es un pirazolilo no sustituido; m es 2 y cada R4 es fluoro. En algunas realizaciones, R1 es hidrógeno; R2 es un pirazolilo no sustituido; m es 2; un R4 es hidroxilo; y el otro R4 es haloalquilo C1-C6.
En algunas realizaciones, R1 es hidrógeno; R2 es un pirazolilo no sustituido; m es 4; dos R4 son fluoro; un R4 es alcoxi C1-C6; y un R4 es alquilo C1-C6.
En algunas realizaciones, R1 es hidrógeno; R2 es un pirazolilo no sustituido; m es 4; dos R4 son fluoro; un R4 es hidroxialquilo C1-C6; y un R4 es alquilo C1-C6.
En algunas realizaciones, R1 es hidrógeno; R2 es un piridinilo no sustituido; m es 2; un R4 es hidroxilo; y el otro R4 es alquilo C1-C6.
En algunas realizaciones, R1 es hidrógeno; R2 es un piridinilo no sustituido; m es 2 y cada R4 es fluoro.
En algunas realizaciones, R1 es hidrógeno; R2 es un piridinilo no sustituido; m es 2; un R4 es hidroxilo; y el otro R4 es haloalquilo C1-C6.
En algunas realizaciones, R1 es hidrógeno; R2 es un piridinilo no sustituido; m es 4; dos R4 son fluoro; un R4 es alcoxi C1-C6; y un R4 es alquilo C1-C6.
En algunas realizaciones, R1 es hidrógeno; R2 es un piridinilo no sustituido; m es 4; dos R4 son fluoro; un R4 es hidroxialquilo C1-C6; y un R4 es alquilo C1-C6.
En algunas realizaciones, R1 es hidrógeno; R2 es un isotiazolilo no sustituido; m es 2; un R4 es hidroxilo; y el otro R4 es alquilo C1-C6.
En algunas realizaciones, R1 es hidrógeno; R2 es un isotiazolilo no sustituido; m es 2 y cada R4 es fluoro. En algunas realizaciones, R1 es hidrógeno; R2 es un isotiazolilo no sustituido; m es 2; un R4 es hidroxilo; y el otro R4 es haloalquilo C1-C6.
En algunas realizaciones, R1 es hidrógeno; R2 es un isotiazolilo no sustituido; m es 4; dos R4 son fluoro; un R4 es alcoxi C1-C6; y un R4 es alquilo C1-C6.
En algunas realizaciones, R1 es hidrógeno; R2 es un isotiazolilo no sustituido; m es 4; dos R4 son fluoro; un R4 es hidroxialquilo C1-C6; y un R4 es alquilo C1-C6.
En algunas realizaciones, el Anillo A es ciclohexilo; m es 2; un R4 es hidroxilo; y el otro R4 es alquilo C1-C6. En algunas realizaciones, el Anillo A es ciclohexilo; m es 2 y cada R4 es fluoro.
En algunas realizaciones, el Anillo A es ciclohexilo; m es 2; un R4 es hidroxilo; y el otro R4 es haloalquilo C1-C6.
En algunas realizaciones, el Anillo A es ciclohexilo; m es 4; dos R4 son fluoro; un R4 es alcoxi C1-C6; y un R4 es alquilo C1-C6.
En algunas realizaciones, el Anillo A es ciclohexilo; m es 4; dos R4 son fluoro; un R4 es hidroxialquilo C1-C6; y un R4 es alquilo C1-C6.
En algunas realizaciones, el Anillo A es biciclo[2.2.2]octanilo; m es 2; un R4 es hidroxilo; y el otro R4 es alquilo C1-C6.
En algunas realizaciones, el Anillo A es biciclo[2.2.2]octanilo; m es 2 y cada R4 es fluoro.
En algunas realizaciones, el Anillo A es biciclo[2.2.2]octanilo; m es 2; un R4 es hidroxilo; y el otro R4 es haloalquilo C1-C6.
En algunas realizaciones, el Anillo A es biciclo[2.2.2]octanilo; m es 4; dos R4 son fluoro; un R4 es alcoxi C1-C6; y un R4 es alquilo C1-C6.
En algunas realizaciones, el Anillo A es biciclo[2.2.2]octanilo; m es 4; dos R4 son fluoro; un R4 es hidroxialquilo C1-C6; y un R4 es alquilo C1-C6.
En algunas realizaciones, el Anillo A es tetrahidropiranilo; m es 2; un R4 es hidroxilo; y el otro R4 es alquilo C1-C6.
En algunas realizaciones, el Anillo A es tetrahidropiranilo; m es 2 y cada R4 es fluoro.
En algunas realizaciones, el Anillo A es tetrahidropiranilo; m es 2; un R4 es hidroxilo; y el otro R4 es haloalquilo C1-C6.
En algunas realizaciones, el Anillo A es piperidinilo; m es 3; un R4 es hidroxilo; un R4 es alquilo C1-C6; y un R4 es -C(=O)alquilo C1-C6. En algunas realizaciones, cuando el Anillo A es piperidinilo, un R4 está unido al átomo de nitrógeno del piperidinilo.
En algunas realizaciones, el Anillo A es tetrahidropiranilo; m es 4; dos R4 son fluoro; un R4 es alcoxi C1-C6; y un R4 es alquilo C1-C6.
En algunas realizaciones, el Anillo Aes tetrahidropiranilo; m es 4; dos R4son fluoro; un R4es hidroxialquilo C1-C6; y un R4 es alquilo C1-C6.
En algunas realizaciones, los compuestos de la Fórmula (I-A), (I-B), (I-C), (I-D), (I-E), (I-F), (I-G), (I-H), (I-I), (I-J), (I-K), (I-L), (I-M), (I-N), (I-O), y (I-P), y sus sales farmacéuticamente aceptables, como se describe en el presente documento, R1, R2, R4, y m son como se describen respecto a la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.
En algunas realizaciones, el compuesto de la Fórmula (I) es un compuesto de la Fórmula (I-A):
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En algunas realizaciones, el compuesto de la Fórmula (I) es un compuesto de la Fórmula (I-B):
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En algunas realizaciones, el compuesto de la Fórmula (I) es un compuesto de la Fórmula (I-C):
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En algunas realizaciones, el compuesto de la Fórmula (I) es un compuesto de la Fórmula (I-D):
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En algunas realizaciones, el compuesto de la Fórmula (I) es un compuesto de la Fórmula (I-E):
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En algunas realizaciones, el compuesto de la Fórmula (I) es un compuesto de la Fórmula I-F):
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En algunas realizaciones, el compuesto de la Fórmula (I) es un compuesto de la Fórmula I-G):
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En algunas realizaciones, el compuesto de la Fórmula (I) es un compuesto de la Fórmula I-H):
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En algunas realizaciones, el compuesto de la Fórmula (I) es un compuesto de la Fórmula I-I):
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En algunas realizaciones, el compuesto de la Fórmula (I) es un compuesto de la Fórmula I-J):
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En algunas realizaciones, el compuesto de la Fórmula (I) es un compuesto de la Fórmula I-K):
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En algunas realizaciones, el compuesto de la Fórmula (I) es un compuesto de la Fórmula I-L):
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En algunas realizaciones, el compuesto de la Fórmula (I) es un compuesto de la Fórmula I-M):
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En algunas realizaciones, el compuesto de la Fórmula (I) es un compuesto de la Fórmula I-N):
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En algunas realizaciones, el compuesto de la Fórmula (I) es un compuesto de la Fórmula I-O):
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En algunas realizaciones, el compuesto de la Fórmula (I) es un compuesto de la Fórmula I-P):
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
La Tabla 1 representa compuestos de la Fórmula (I). A menos que se especifique de otro modo, se entiende que toda la estereoquímica de la Tabla 1 se asigna de forma arbitraria.
En algunas realizaciones, el compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, es un compuesto seleccionado de la Tabla 1, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
Tabla 1: Compuestos de ejemplo
Métodos de tratamiento
Se proporciona en el presente documento un método para tratar el cáncer (por ejemplo, un cáncer asociado con CDC7) en un sujeto que necesita dicho tratamiento, comprendiendo el método administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o una composición farmacéutica del mismo. Por ejemplo, en el presente documento se proporcionan métodos para tratar un cáncer asociado con CDC7 en un sujeto que necesita dicho tratamiento, comprendiendo el método a) detectar una desregulación de un gen CDC7, una quinasa CDC7 o la expresión o actividad o nivel de cualquiera de los mismos en una muestra del sujeto; y b) administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas realizaciones, la desregulación de un gen CDC7, una quinasa CDC7, o la expresión o actividad o nivel de cualquiera de los mismos incluye una o más proteínas de fusión.
En algunas realizaciones de cualquiera de los métodos o usos descritos en el presente documento, el cáncer (por ejemplo, cáncer asociado con CDC7) es un cáncer hematológico. En algunas realizaciones de cualquiera de los métodos o usos descritos en el presente documento, el cáncer (por ejemplo, cáncer asociado con CDC7) es un tumor sólido. En algunas realizaciones de cualquiera de los métodos o usos descritos en el presente documento, el cáncer (por ejemplo, cáncer asociado con CDC7) es un cáncer de pulmón (por ejemplo, carcinoma de pulmón de célula pequeña o carcinoma de pulmón de célula no pequeña), cáncer de tiroides (por ejemplo, cáncer de tiroides papilar, cáncer de tiroides medular (por ejemplo, cáncer de tiroides medular esporádico o cáncer de tiroides medular hereditario), cáncer de tiroides diferenciado, cáncer de tiroides recurrente o cáncer de tiroides diferenciado refractario), adenoma de tiroides, neoplasias de glándulas endocrinas, adenocarcinoma de pulmón, carcinoma de célula pulmonar de bronquiolos, neoplasia tipo 2A o 2B (MEN2A o MEN2B, respectivamente) endocrina múltiple, feocromocitoma, hiperplasia paratiroidea, cáncer de mama, cáncer mamario, carcinoma mamario, neoplasia mamaria, cáncer colorrectal (por ejemplo, cáncer colorrectal metastásico), carcinoma de célula renal papilar, ganglioneuromatosis de la mucosa gastroentérica, tumor miofibroblástico inflamatorio o cáncer de cuello uterino. En algunas realizaciones de cualquiera de los métodos o usos descritos en el presente documento, el cáncer (por ejemplo, cáncer asociado con CDC7) se selecciona del grupo de: leucemia (ALL) linfoblástica aguda, leucemia (AML) mieloide aguda, cáncer en adolescentes, carcinoma adrenocortical, cáncer anal, cáncer de apéndice, astrocitoma, tumor teratoide/rabdoide atípico, carcinoma de célula basal, cáncer de ducto biliar, cáncer de vejiga, cáncer óseo, glioma del tronco encefálico, tumor cerebral, cáncer de mama, tumor bronquial, linfoma de Burkitt, tumor carcinoide, carcinoma primario desconocido, tumores cardíacos, cáncer de cuello uterino, cánceres infantiles, cordoma, leucemia (<c>L<l>) linfocítica crónica, leucemia (CML) mieloide crónica, neoplasias mieloproliferativas crónicas, neoplasias por sitio, neoplasias, cáncer de colon, cáncer colorrectal, craneofaringioma, linfoma cutáneo de célula T, angiosarcoma cutáneo, cáncer de ducto biliar, carcinoma ductal in situ, tumores embrionarios, cáncer de endometrio, ependimoma, cáncer de esófago, estesioneuroblastoma, sarcoma de Ewing, tumor de célula germinal extracraneal, tumor de célula germinal extragonadal, cáncer de ducto biliar extrahepático, cáncer ocular, cáncer de trompas de Falopio, histiocitoma fibroso óseo, cáncer de vesícula biliar, cáncer gástrico, tumor carcinoide gastrointestinal, tumores (GIST) del estroma gastrointestinal, tumor de células germinales, enfermedad trofoblástica gestacional, glioma, tumor de célula pilosa, leucemia de célula pilosa, cáncer de cabeza y cuello, neoplasias torácicas, neoplasias de cabeza y cuello, tumor del CNS, tumor primario del CNS, cáncer cardíaco, cáncer hepatocelular, histiocitosis, linfoma de Hodgkin, cáncer hipofaríngeo, melanoma intraocular, tumores de célula de islote, tumores neuroendocrinos pancreáticos, sarcoma de Kaposi, cáncer de riñón, histiocitosis de célula de Langerhans, cáncer de laringe, leucemia, cáncer de labio y cavidad oral, cáncer de hígado, cáncer de pulmón, linfoma, macroglobulinemia, histiocitoma fibroso maligno de hueso, osteocarcinoma, melanoma, carcinoma de célula de Merkel, mesotelioma, cáncer de cuello escamoso metastásico, carcinoma del tracto medio, cáncer de boca, síndromes de neoplasia endocrina múltiple, mieloma múltiple, micosis fungoide, síndromes mielodisplásicos, neoplasias mielodisplásicas/mieloproliferativas, neoplasias por localización, neoplasias, leucemia mielógena, leucemia mieloide, mieloma múltiple, neoplasias mieloproliferativas, cáncer de cavidad nasal y senos paranasales, cáncer nasofaríngeo, neuroblastoma, linfoma no Hodgkin, cáncer de pulmón de célula no pequeña, neoplasia de pulmón, cáncer de pulmón, neoplasias pulmonares, neoplasias del tracto respiratorio, carcinoma broncogénico, neoplasias bronquiales, cáncer oral, cáncer de cavidad oral, cáncer de labio, cáncer orofaríngeo, osteosarcoma, cáncer de ovario, cáncer de páncreas, papilomatosis, paraganglioma, cáncer de senos paranasales y cavidad nasal, cáncer de paratiroides, cáncer de pene, cáncer de faringe, feocromositoma, cáncer de hipófisis, neoplasia de células plasmáticas, blastoma pleuropulmonar, cáncer de mama asociado con el embarazo, linfoma primario del sistema nervioso central, cáncer peritoneal primario, cáncer de próstata, cáncer de recto, cáncer de colon, neoplasias colónicas, cáncer de célula renal, inoblastoma CDC7, rabdomiosarcoma, cáncer de glándulas salivales, sarcoma, síndrome de Sézary, cáncer de piel, tumores de Spitz, cáncer de pulmón de célula pequeña, cáncer de intestino delgado, sarcoma de tejidos blandos, carcinoma de célula escamosa, cáncer de cuello escamoso, cáncer de estómago, linfoma de célula T, cáncer testicular, cáncer de garganta, timoma y carcinoma tímico, cáncer de tiroides, cáncer de células transicionales de la pelvis renal y uCDC7er, carcinoma primario desconocido, cáncer uCDC7hral, cáncer uterino, sarcoma uterino, cáncer vaginal, cáncer vulvar y tumor de Wilms.
En algunas realizaciones, un cáncer hematológico (por ejemplo, cánceres hematológicos asociados con CDC7) se selecciona del grupo que consiste en leucemias, linfomas (linfoma no Hodgkin), enfermedad de Hodgkin (también llamada linfoma de Hodgkin) y mieloma, por ejemplo, leucemia (ALL) linfocítica aguda, leucemia (AML) mieloide aguda, leucemia (APL) promielocítica aguda, leucemia (CLL) linfocítica crónica, leucemia (CML) mieloide crónica, leucemia (CMML) mielomonocítica crónica, leucemia (CNL) neutrofílica crónica, leucemia (AUL) aguda no diferenciada, linfoma (ALCL) anaplásico de célula grande, leucemia (PML) prolinfocítica, leucemia (JMML) mielomonocítica juvenil, ALL de célula T adulta, AML con mielodisplasia (AML/TMDS)trilinaje, leucemia (MLL) de linaje mixto, síndromes (MDSs) mielodisplásicos, trastornos (MPD) mieloproliferativos y mieloma (MM) múltiple. Otros ejemplos de cánceres hematológicos incluyen trastornos (MPD) mieloproliferativos, como policitemia (PV) vera, trombocitopenia (ET) esencial y mielofibrosis (IMF/IPF/PMF) primaria idiopática. En algunas realizaciones, el cáncer hematológico (por ejemplo, el cáncer hematológico que es un cáncer asociado con CDC7) es AML o CMML.
En algunas realizaciones, el cáncer (por ejemplo, el cáncer asociado con CDC7) es un tumor sólido. Los ejemplos de tumores sólidos (por ejemplo, tumores sólidos que son cánceres asociados con CDC7) incluyen, por ejemplo, cáncer de tiroides (por ejemplo, carcinoma papilar de tiroides, carcinoma medular de tiroides), cáncer de pulmón (por ejemplo, adenocarcinoma de pulmón, carcinoma de pulmón de célula pequeña), cáncer de páncreas, carcinoma del ducto pancreático, cáncer de mama, cáncer de colon, cáncer colorrectal, cáncer de próstata, carcinoma de célula renal, tumores de cabeza y cuello, neuroblastoma y melanoma. Véase, por ejemplo, Nature Reviews Cancer, 2014, 14, 173-186.
En algunas realizaciones, el cáncer se selecciona del grupo que consiste en cáncer de pulmón, cáncer de tiroides papilar, cáncer de tiroides medular, cáncer de tiroides diferenciado, cáncer de tiroides recurrente, cáncer de tiroides diferenciado refractario, neoplasia endocrina múltiple tipo 2A o 2B (MEN2A o MEN2B, respectivamente), feocromocitoma, hiperplasia paratiroidea, cáncer de mama, cáncer colorrectal, carcinoma papilar de células renales, ganglioneuromatosis de la mucosa gastroentérica y cáncer de cuello uterino.
En algunas realizaciones, el sujeto es un ser humano.
Los compuestos de la Fórmula (I) y sus sales y solvatos farmacéuticamente aceptables también son útiles para tratar un cáncer asociado con CDC7.
De acuerdo con ello, también se proporciona en el presente documento un método para tratar a un sujeto diagnosticado con o identificado como que tiene un cáncer asociado con CDC7, por ejemplo, cualquiera de los cánceres asociados con CDC7 ejemplares divulgados en el presente documento, que comprende administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o una composición farmacéutica del mismo, como se define en el presente documento. En algunas realizaciones, un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se selecciona de los Ejemplos 1-96, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas realizaciones, el compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, administrado al sujeto es un compuesto de la Fórmula (I-A), (I-B), (I-C), (I-D), (I-E), (I-F), (I-G), (I-H), (I-I), (I-J), (I-K), (I-L), (I-M), (I-N), (I-O) o (I-P), o una sal farmacéuticamente aceptable de cualquiera de los anteriores.
La desregulación de una quinasa CDC7, un gen CDC7 o la expresión o actividad o nivel de cualquiera (por ejemplo, uno o más) de los mismos puede contribuir a la tumorigénesis. Por ejemplo, una proteína de fusión puede tener una actividad de quinasa incrementada, en comparación con una proteína CDC7 de tipo silvestre, puede ocurrir una expresión incrementada (por ejemplo, niveles incrementados) de una quinasa CDC7 de tipo silvestre en una célula de mamífero, debido a una señalización celular aberrante y/o una señalización autocrina/paracrina desregulada (por ejemplo, en comparación con una célula de control no cancerosa), las variantes de empalme del ARNm de CDC7 también pueden resultar en una desregulación de CDC7.
En algunas realizaciones, los compuestos proporcionados en el presente documento exhiben capacidad de penetración en el cerebro y/o el sistema (CNS) nervioso central. Estos compuestos son capaces de atravesar la barrera hematoencefálica e inhibir una quinasa CDC7 en el cerebro y/u otras estructuras del CNS. En algunas realizaciones, los compuestos proporcionados en el presente documento son capaces de cruzar la barrera hematoencefálica en una cantidad efectiva. Por ejemplo, el tratamiento de un sujeto con cáncer (por ejemplo, un cáncer asociado con CDC7, como un cáncer de cerebro o del CNS asociado con CDC7) puede incluir la administración (por ejemplo, administración oral) del compuesto al sujeto. En algunas de dichas realizaciones, los compuestos proporcionados en el presente documento son útiles para tratar un tumor cerebral primario o un tumor cerebral metastásico. Por ejemplo, los compuestos se pueden utilizar en el tratamiento de uno o más gliomas como el glioblastoma (también conocido como glioblastoma multiforme), astrocitomas, oligodendrogliomas, ependimomas y gliomas mixtos, meningiomas, meduloblastomas, gangliogliomas, schwannomas (neurilemomas) y craneofaringiomas (véanse, por ejemplo, los tumores enumerados en Louis, DN et al. Acta Neuropathol 131(6), 803-820 (junio de 2016)). En algunas realizaciones, el tumor cerebral es un tumor cerebral primario. En algunas realizaciones, el sujeto ha sido tratado previamente con otro agente contra el cáncer, por ejemplo, otro inhibidor de CDC7 (por ejemplo, un compuesto que no es un compuesto de la Fórmula general (I)) o un inhibidor de múltiples quinasas. En algunas realizaciones, el tumor cerebral es un tumor cerebral metastásico. En algunas realizaciones, el sujeto ha sido tratado previamente con otro agente contra el cáncer, por ejemplo, otro inhibidor de CDC7 (por ejemplo, un compuesto que no es un compuesto de la Fórmula (I)) o un inhibidor de múltiples quinasas.
En algunas realizaciones de cualquiera de los métodos o usos descritos en el presente documento, un ensayo utilizado para determinar si el sujeto tiene una desregulación de un gen CDC7, o una quinasa CDC7, o expresión o actividad o nivel de cualquiera de los mismos, utilizando una muestra de un sujeto puede incluir, por ejemplo, secuenciación de próxima generación, inmunohistoquímica, microscopía de fluorescencia, análisis FISH de separación de señales, transferencia Southern, transferencia Western, análisis FACS, transferencia Northern y amplificación basada en PCR (por ejemplo, RT-PCR y RT-PCR cuantitativa en tiempo real). Como es bien sabido en la técnica, los ensayos se realizan típicamente, por ejemplo, con al menos una sonda de ácido nucleico marcada o al menos un anticuerpo marcado o un fragmento del mismo de unión a antígeno. Los ensayos pueden utilizar otros métodos de detección conocidos en la técnica para detectar la desregulación de un gen CDC7, una quinasa CDC7, o la expresión o actividad o los niveles de cualquiera de los mismos. En algunas realizaciones, la muestra es una muestra biológica o una muestra de biopsia (por ejemplo, una muestra de biopsia incrustada en parafina) del sujeto. En algunas realizaciones, el sujeto es un sujeto sospechoso de tener un cáncer asociado con CDC7, un sujeto que tiene uno o más síntomas de un cáncer asociado con CDC7 y/o un sujeto que tiene un mayor riesgo de desarrollar un cáncer asociado con CDC7).
En algunas realizaciones, la desregulación de un gen CDC7, una quinasa CDC7 o la expresión o actividad o nivel de cualquiera de los mismos se puede identificar utilizando una biopsia de líquido (denominada biopsia de fluido o biopsia en fase fluida). Los métodos de biopsia de líquido se pueden utilizar para detectar la carga tumoral total y/o la desregulación de un gen CDC7, una quinasa CDC7 o la expresión, actividad o nivel de cualquiera de los mismos. Las biopsias de líquido se pueden realizar en muestras biológicas obtenidas con relativa facilidad de un sujeto (por ejemplo, a través de una simple extracción de sangre) y generalmente son menos invasivas que los métodos tradicionales utilizados para detectar la carga tumoral y/o la desregulación de un gen CDC7, una quinasa CDC7 o la expresión o actividad o nivel de cualquiera de los mismos. En algunas realizaciones, se pueden utilizar biopsias de líquido para detectar la presencia de desregulación de un gen CDC7, una quinasa CDC7, o la expresión o actividad o nivel de cualquiera de los mismos en una etapa más temprana, que los métodos tradicionales. En algunas realizaciones, la muestra biológica que se utilizará en una biopsia de líquido puede incluir sangre, plasma, orina, líquido cefalorraquídeo, saliva, esputo, lavado broncoalveolar, bilis, líquido linfático, líquido quístico, heces, ascites y combinaciones de los mismos. En algunas realizaciones, se puede utilizar una biopsia de líquido para detectar células tumorales circulantes (CTCs). En algunas realizaciones, se puede utilizar una biopsia de líquido para detectar ADN libre de células. En algunas realizaciones, el ADN libre de células detectado mediante una biopsia de líquido es ADN tumoral circulante (ADNct) que se deriva de células tumorales. El análisis de ADNct (por ejemplo, utilizando técnicas de detección sensibles tales como, sin limitación, secuenciación de próxima generación (NGS), PCR tradicional, PCR digital o análisis de microarreglos) se puede utilizar para identificar la desregulación de un gen CDC7, una quinasa CDC7 o la expresión o actividad o nivel de cualquiera de los mismos.
En algunas realizaciones, el ADNct derivado de un solo gen se puede detectar utilizando una biopsia de líquido. En algunas realizaciones, el ADNct derivado de una pluralidad de genes (por ejemplo, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85 , 90, 95, 100 o más, o cualquier número de genes entre estos números) se puede detectar utilizando una biopsia de líquido. En algunas realizaciones, el ADNct derivado de una pluralidad de genes se puede detectar utilizando cualquiera de una variedad de paneles de prueba disponibles comercialmente (por ejemplo, paneles de prueba disponibles comercialmente diseñados para detectar la desregulación de un gen CDC7, una quinasa CDC7 o la expresión o actividad o nivel de cualquiera de los mismos). Las biopsias de líquido se pueden utilizar para detectar la desregulación de un gen CDC7, una quinasa CDC7 o la expresión o actividad o nivel de cualquiera de los mismos, incluyendo, sin limitación, mutaciones puntuales o variantes de un solo nucleótido (SNVs), variantes del número de copias (CNVs), fusiones genéticas (por ejemplo, translocaciones o reordenamientos), inserciones, eliminaciones o cualquier combinación de las mismas. En algunas realizaciones, se puede utilizar una biopsia de líquido para detectar una mutación de la línea germinal. En algunas realizaciones, se puede utilizar una biopsia de líquido para detectar una mutación somática. En algunas realizaciones, se puede utilizar una biopsia de líquido para detectar una mutación genética primaria (por ejemplo, una mutación primaria o una fusión primaria que está asociada con el desarrollo inicial de una enfermedad, por ejemplo, cáncer). En algunas realizaciones, una desregulación de un gen CDC7, una quinasa CDC7, o la expresión o actividad o nivel de cualquiera de los mismos identificados mediante una biopsia de líquido, también está presente en una célula cancerosa que está presente en el sujeto (por ejemplo, en un tumor). En algunas realizaciones, cualquiera de los tipos de desregulación de un gen CDC7, una quinasa CDC7, o la expresión o actividad o nivel de cualquiera de los mismos descritos en el presente documento pueden ser detectados utilizando una biopsia de líquido. En algunas realizaciones, se puede utilizar una mutación genética identificada mediante una biopsia de líquido, para identificar al sujeto como candidato para un tratamiento particular. Por ejemplo, la detección de una desregulación de un gen CDC7, una quinasa CDC7, o la expresión o actividad o nivel de cualquiera de los mismos en el sujeto, puede indicar que el sujeto responderá a un tratamiento que incluye la administración de un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
Las biopsias de líquido se pueden realizar en varios tiempos durante un curso de diagnóstico, un curso de monitoreo y/o un curso de tratamiento, para determinar uno o más parámetros clínicamente relevantes que incluyen, sin limitación, la progresión de la enfermedad y/o la eficacia de un tratamiento. Por ejemplo, una primera biopsia de líquido se puede realizar en un primer punto de tiempo y una segunda biopsia de líquido se puede realizar en un segundo punto de tiempo durante un curso de diagnóstico, un curso de monitoreo y/o un curso de tratamiento. En algunas realizaciones, el primer punto de tiempo puede ser un punto de tiempo anterior al diagnóstico de un sujeto con una enfermedad (por ejemplo, cuando el sujeto está sano), y el segundo punto de tiempo puede ser un punto de tiempo posterior a que el sujeto haya desarrollado la enfermedad (por ejemplo, el segundo punto de tiempo puede ser utilizado para diagnosticar el sujeto con la enfermedad). En algunas realizaciones, el primer punto de tiempo puede ser un punto de tiempo anterior al diagnóstico de un sujeto con una enfermedad (por ejemplo, cuando el sujeto está sano), después de lo cual se monitorea al sujeto, y el segundo punto de tiempo puede ser un punto de tiempo posterior al monitoreo del sujeto. En algunas realizaciones, el primer punto de tiempo puede ser un punto de tiempo después de diagnosticar a un sujeto con una enfermedad, después de lo cual se administra un tratamiento al sujeto, y el segundo punto de tiempo puede ser un punto de tiempo después de que se administra el tratamiento; en tales casos, el segundo punto de tiempo se puede utilizar para evaluar la eficacia del tratamiento (por ejemplo, si la(s) mutación(es) genéticas detectadas en el primer punto de tiempo se reducen en abundancia o son indetectables). En algunas realizaciones, un tratamiento que se administrará a un sujeto puede incluir un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En algunas realizaciones, la eficacia de un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se puede determinar evaluando la frecuencia alélica de una desregulación de un gen CDC7 en ADNcf obtenido de un sujeto en diferentes puntos de tiempo, por ejemplo, ADNcf obtenido del sujeto en un primer punto de tiempo y ADNcf obtenido del sujeto en un segundo punto de tiempo, donde al menos una dosis de un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se administra al sujeto entre el primer y el segundo puntos de tiempo. Algunas realizaciones de estos métodos pueden incluir además administrar al sujeto al menos una dosis del compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, entre el primer y el segundo puntos de tiempo. Por ejemplo, una reducción (por ejemplo, una reducción del 1% a aproximadamente un 99%, una reducción del 1% a aproximadamente un 95%, una reducción del 1% a aproximadamente un 90%, una reducción del 1% a aproximadamente un 85%, una reducción del 1% a aproximadamente un 80%, una reducción del 1% a aproximadamente un 75%, una reducción del 1% a aproximadamente una reducción de 70%, una reducción del 1% a aproximadamente una reducción de 65%, una reducción del 1% a aproximadamente una reducción de 60%, una reducción del 1% a aproximadamente una reducción de 55%, una reducción del 1% a aproximadamente una reducción de 50%, una reducción del 1% a aproximadamente una reducción de 45%, una reducción del 1% a aproximadamente una reducción de 40%, una reducción del 1% a aproximadamente una reducción de 35%, una reducción del 1% a aproximadamente una reducción de 30%, una reducción del 1% a aproximadamente una reducción de 25%, una reducción del 1% a aproximadamente una reducción de 20%, una reducción del 1% a aproximadamente una reducción de 15%, una reducción del 1% a aproximadamente una reducción de 10%, una reducción del 1% a aproximadamente un 5%, reducción de 5% a aproximadamente un 99%, reducción de aproximadamente 10% a aproximadamente un 99%, reducción de aproximadamente 15% a aproximadamente un 99%, reducción de aproximadamente 20% a aproximadamente un 99%, reducción de aproximadamente 25% a aproximadamente un 99%, reducción de aproximadamente 30% a aproximadamente un 99%, reducción de aproximadamente 35% a aproximadamente un 99%, reducción de aproximadamente 40% a aproximadamente un 99%, reducción de aproximadamente 45% a aproximadamente un 99%, reducción de aproximadamente 50% a aproximadamente un 99%, reducción de aproximadamente 55% a aproximadamente un 99%, reducción de aproximadamente 60% a aproximadamente un 99%, reducción de aproximadamente 65% a aproximadamente un 99%, reducción de aproximadamente 70% a aproximadamente un 99% de reducción, aproximadamente reducción de aproximadamente 75% a aproximadamente un 95%, aproximadamente reducción de aproximadamente 80% a aproximadamente un 99%, aproximadamente una reducción del 90% a aproximadamente un 99% de reducción, aproximadamente una reducción del 95% a aproximadamente un 99% de reducción, aproximadamente una reducción del 5% a aproximadamente un 10%, aproximadamente una reducción del 5% a aproximadamente un 25%, aproximadamente una reducción del 10% a aproximadamente un 30%, aproximadamente una reducción del 20% a aproximadamente un 40%, aproximadamente una reducción del 25% a aproximadamente un 50%, aproximadamente una reducción del 35% a aproximadamente un 55%, aproximadamente una reducción del 40% a aproximadamente un 60%, aproximadamente una reducción del 50% a aproximadamente un 75%, aproximadamente una reducción del 60% a aproximadamente un 80% de reducción, o aproximadamente una reducción del 65% a aproximadamente un 85%) en la frecuencia (AF) alélica de la desregulación de un gen CDC7 en el ADNcf obtenido del sujeto en el segundo punto de tiempo comparado con la frecuencia (AF) alélica de la desregulación de un gen CDC7 en el ADNcf obtenido del sujeto en el primer punto de tiempo, indica que el compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, fue efectiva en el sujeto. En algunas realizaciones, el AF se reduce de tal manera que el nivel está por debajo del límite de detección del instrumento. Alternativamente, un aumento en la frecuencia (AF) alélica de la desregulación de un gen CDC7 en el ADNcf obtenido del sujeto en el segundo punto de tiempo, en comparación con la frecuencia (AF) alélica de la desregulación de un gen CDC7 en el ADNcf obtenido del sujeto en el primer punto de tiempo, indica que el compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, no fue efectiva en el sujeto. Algunas realizaciones de estos métodos pueden incluir además la administración de dosis adicionales de un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, a un sujeto en el cual se determinó que un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, era efectivo. Algunas realizaciones de estos métodos pueden incluir además la administración de un tratamiento diferente (por ejemplo, un tratamiento que no incluye la administración de un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como una monoterapia) a un sujeto en el cual se determinó que un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, no era efectiva.
En algunas realizaciones, el cáncer asociado con CDC7 es un cáncer con alta inestabilidad (MSI-H) de microsatélites. En otras realizaciones, el cáncer asociado con CDC7 no es un cáncer con alta inestabilidad (MSI-H) de microsatélites. En algunas realizaciones, el estado MSI-H se determina mediante la detección de secuencias de ADN repetitivas seleccionadas del grupo que consiste en: marcadores de repetición de mononucleótido, marcadores de repetición de dinucleótido, marcadores cuasimonomórficos o una combinación de cualquiera de los anteriores.
En algunas realizaciones, un tumor asociado con el cáncer comprende un fenotipo seleccionado del grupo que consiste en: inestabilidad (CIN) cromosómica, un defecto de ensamblaje del punto de control del huso, un defecto de mitosis, un defecto del punto de control Gl/S y combinaciones de los mismos. En algunas realizaciones, un tumor asociado con el cáncer comprende una mutación de la ruta de señalización de Wnt. En algunas realizaciones, la mutación de la ruta de señalización de Wnt se selecciona del grupo que consiste en: una mutación del gen de coli (APC) de poliposis Adenomatosa, una mutación FAT1, una mutación FAT4 o una combinación de cualquiera de las anteriores.
En algunos ejemplos de estos métodos, la diferencia de tiempo entre el primer y el segundo puntos de tiempo puede ser de aproximadamente 1 día a aproximadamente 1 año, de aproximadamente 1 día a aproximadamente 11 meses, de aproximadamente 1 día a aproximadamente 10 meses, de aproximadamente 1 día a aproximadamente 9 meses, de aproximadamente 1 día a aproximadamente 8 meses, de aproximadamente 1 día a aproximadamente 7 meses, de aproximadamente 1 día a aproximadamente 6 meses, de aproximadamente 1 día a aproximadamente 5 meses, de aproximadamente 1 día a aproximadamente 4 meses, de aproximadamente 1 día a aproximadamente 3 meses, de aproximadamente 1 día a aproximadamente 10 semanas, de aproximadamente 1 día a aproximadamente 2 meses, de aproximadamente 1 día a aproximadamente 6 semanas, de aproximadamente 1 día a aproximadamente 1 mes, de aproximadamente 1 día a aproximadamente 25 días, de aproximadamente 1 día a aproximadamente 20 días, de aproximadamente 1 día a aproximadamente 15 días, de aproximadamente 1 día a aproximadamente 10 días, de aproximadamente 1 día a aproximadamente 5 días, de aproximadamente 2 días a aproximadamente 1 año, de aproximadamente 5 días a aproximadamente 1 año, de aproximadamente 10 días a aproximadamente 1 año, aproximadamente 15 días a aproximadamente 1 año, aproximadamente 20 días a aproximadamente 1 año, aproximadamente 25 días a aproximadamente 1 año, aproximadamente 1 mes a aproximadamente 1 año, aproximadamente 6 semanas a aproximadamente 1 año, aproximadamente 2 meses a aproximadamente 1 año, aproximadamente 3 meses a aproximadamente 1 año, aproximadamente 4 meses a aproximadamente 1 año, aproximadamente 5 meses a aproximadamente 1 año, aproximadamente 6 meses a aproximadamente 1 año, aproximadamente 7 meses a aproximadamente 1 año, aproximadamente 8 meses a aproximadamente 1 año, aproximadamente 9 meses a aproximadamente 1 año, aproximadamente 10 meses a aproximadamente 1 año, aproximadamente 11 meses a aproximadamente 1 año, aproximadamente 1 día a aproximadamente 7 días, aproximadamente 1 día a aproximadamente 14 días, aproximadamente 5 días a aproximadamente 10 días, aproximadamente 5 días a aproximadamente 20 días, aproximadamente 10 días a aproximadamente 20 días, aproximadamente 15 días a aproximadamente 1 mes, aproximadamente 15 días a aproximadamente 2 meses, aproximadamente 1 semana a aproximadamente 1 mes, aproximadamente 2 semanas a aproximadamente 1 mes, aproximadamente 1 mes a aproximadamente 3 meses, aproximadamente 3 meses a aproximadamente 6 meses, aproximadamente 4 meses a aproximadamente 6 meses, aproximadamente 5 meses a aproximadamente 8 meses, o aproximadamente 7 meses a aproximadamente 9 meses. En algunas realizaciones de estos métodos, el sujeto puede ser identificado previamente como portador de un cáncer que tiene un gen CDC7 desregulado (por ejemplo, cualquiera de los ejemplos de un gen CDC7 desregulado descritos en el presente documento). En algunas realizaciones de estos métodos, un sujeto puede haber sido diagnosticado previamente con cualquiera de los tipos de cáncer descritos en el presente documento. En algunas realizaciones de estos métodos, el sujeto puede tener una o más metástasis (por ejemplo, una o más metástasis cerebrales).
En algunas de las realizaciones anteriores, el ADNcf comprende ADNct tal como ADNct asociado con CDC7. Por ejemplo, el ADNcf es ADNct tal como el ADNct asociado con CDC7. En algunas realizaciones, se determina que al menos algo de porción de ADNcf es ADNct asociado con CDC7, por ejemplo, se determina que una cantidad secuenciada y/o cuantificada del ADNcf total tiene una fusión de CDC7 y/o sobreexpresión de CDC7.
En el campo de la oncología médica es una práctica normal utilizar una combinación de diferentes formas de tratamiento para tratar a cada sujeto con cáncer. En oncología médica, el(los) otro(s) componente(s) de dicho tratamiento o terapia conjunta, además de las composiciones proporcionadas en el presente documento, pueden ser, por ejemplo, cirugía, radioterapia y agentes quimioterapéuticos, tales como otros inhibidores de quinasa, inhibidores de la transducción de señal y/o anticuerpos monoclonales. Por ejemplo, una cirugía puede ser una cirugía abierta o una cirugía mínimamente invasiva. Por lo tanto, los compuestos de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, también pueden ser útiles como adyuvantes para el tratamiento del cáncer, es decir, se pueden usar en combinación con una o más terapias o agentes terapéuticos adicionales, por ejemplo, un agente quimioterapéutico que funciona mediante el mismo mecanismo de acción o mediante uno diferente. En algunas realizaciones, se puede usar un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, antes de la administración de un agente terapéutico adicional o una terapia adicional. Por ejemplo, a un sujeto que lo necesite se le puede administrar una o más dosis de un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo durante un período de tiempo y luego someterse a un resección al menos parcial del tumor. En algunas realizaciones, el tratamiento con una o más dosis de un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, reduce el tamaño del tumor (por ejemplo, la carga tumoral) antes de la resección al menos parcial del tumor. En algunas realizaciones, a un sujeto que lo necesite se le puede administrar una o más dosis de un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo durante un período de tiempo y bajo una o más rondas de radioterapia. En algunas realizaciones, el tratamiento con una o más dosis de un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, reduce el tamaño del tumor (por ejemplo, la carga tumoral) antes de una o más rondas de radioterapia.
En algunas realizaciones, un sujeto tiene un cáncer (por ejemplo, un tumor localmente avanzado o metastásico) que es refractario o intolerante a la terapia estándar (por ejemplo, administración de un agente quimioterapéutico, tal como un primer inhibidor de CDC7 o un inhibidor de multiquinasa, inmunoterapia o radiación (por ejemplo, yodo radiactivo)). En algunas realizaciones, un sujeto tiene un cáncer (por ejemplo, un tumor localmente avanzado o metastásico) que es refractario o intolerante a una terapia previa (por ejemplo, administración de un agente quimioterapéutico, como un primer inhibidor de CDC7 o un inhibidor de multiquinasa, inmunoterapia o radiación (por ejemplo, yodo radiactivo)). En algunas realizaciones, un sujeto tiene un cáncer (por ejemplo, un tumor localmente avanzado o metastásico) que no tiene una terapia estándar. En algunas realizaciones, un sujeto no ha sido expuesto a inhibidores de quinasa CDC7. Por ejemplo, el sujeto no ha sido expuesto a tratamiento con un inhibidor selectivo de quinasa CDC7. En algunas realizaciones, un sujeto ha sido expuesto al inhibidor de quinasa CDC7.
En algunas realizaciones, un sujeto ha recibido una terapia previa. En algunas realizaciones, un sujeto que tiene NSCLC (por ejemplo, un NSCLC asociado con CDC7) ha recibido tratamiento con una quimioterapia basada en platino, inmunoterapia PD-1/PDL1 o ambas antes del tratamiento con un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas realizaciones, un sujeto que tiene un cáncer de tiroides (por ejemplo, un cáncer de tiroides asociado con CDC7) ha recibido tratamiento con uno o más de sorafenib, lenvatinib y yodo radiactivo antes del tratamiento con un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas realizaciones, un sujeto que tiene un cáncer colorrectal (por ejemplo, un cáncer colorrectal asociado con CDC7) ha recibido tratamiento con una quimioterapia basada en fluoropirimidina, con o sin terapia dirigida ant-VEGF o terapia dirigida anti-EGFR, antes del tratamiento con un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas realizaciones, un sujeto que tiene un cáncer de páncreas (por ejemplo, un cáncer de páncreas asociado con CDC7) ha recibido tratamiento con una o más de una quimioterapia basada en fluoropirimidina, una quimioterapia basada en gemcitabina y una quimioterapia S-1 antes del tratamiento con un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas realizaciones, un sujeto que tiene un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama asociado con CDC7) ha recibido tratamiento con uno o más de antraciclina, taxano, terapia dirigida a HER2 y terapia hormonal antes del tratamiento con un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas realizaciones, un sujeto que tiene un MTC (por ejemplo, un cáncer de MTC asociado con CDC7) ha recibido tratamiento con uno o más de caboxantinib y vandetanib antes del tratamiento con un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En algunas realizaciones de cualquiera de los métodos descritos en el presente documento, el compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se administra en combinación con una cantidad efectiva de al menos un agente terapéutico adicional seleccionado entre una o más terapias o agentes terapéuticos (por ejemplo, quimioterapéuticos) adicionales.
Los ejemplos no limitantes de agentes terapéuticos adicionales incluyen: otros agentes terapéuticos dirigidos a CDC7 (es decir, un primer o segundo inhibidores de quinasa CDC7), otros inhibidores de quinasa (por ejemplo, agentes terapéuticos dirigidos a la quinasa del receptor de tirosina (por ejemplo, inhibidores de Trk o inhibidores de EGFR)), inhibidores de la ruta de transducción de señal, inhibidores de puntos de control, moduladores de la ruta de apoptosis (por ejemplo, obataclax); quimioterapéuticos citotóxicos, terapias dirigidas a la angiogénesis, agentes dirigidos al sistema inmunitario, incluyendo la inmunoterapia y la radioterapia.
En algunas realizaciones, el otro agente terapéutico dirigido a CDC7 es un inhibidor de multiquinasa que exhibe actividad de inhibición de CDC7. En algunas realizaciones, el otro inhibidor terapéutico dirigido a CDC7 es selectivo para una quinasa CDC7. Los inhibidores ejemplares de quinasa CDC7 pueden exhibir actividad (IC50) de inhibición contra una quinasa CDC7 de menos de aproximadamente 1000 nM, menos de aproximadamente 500 nM, menos de aproximadamente 200 nM, menos de aproximadamente 100 nM, menos de aproximadamente 50 nM, menos de aproximadamente 25 nM, menos de aproximadamente 10 nM o menos de aproximadamente 1 nM, según lo medido en un ensayo como se describe en el presente documento. En algunas realizaciones, los inhibidores de quinasa CDC7 pueden exhibir actividad (IC50) de inhibición contra una quinasa CDC7 de menos de aproximadamente 25 nM, menos de aproximadamente 10 nM, menos de aproximadamente 5 nM o menos de aproximadamente 1 nM, según lo medido en un ensayo como se proporciona en el presente documento.
Los ejemplos no limitantes de agentes terapéuticos dirigidos a la quinasa (por ejemplo, un primer inhibidor de CDC7 o un segundo inhibidor de CDC7) incluyen TAK931, SRA141 y PHA-767491.
Los ejemplos no limitantes de inhibidores de multiquinasas incluyen alectinib (9-Etil-6,6-dimetil-8-[4-(morfolin-4-il)piperidin-1-il]-11-oxo-6,11-dihidro-5H-benzo[b]carbazol-3-carbonitrilo); amuvatinib (MP470, H<p>K56) (N-(1,3-benzodioxol-5-ilmetil)-4-([1]benzofuro[3,2-d]pirimidin-4-il)piperazina-1-carbotioamida); apatinib (YN968D1) (N-[4-(1-cianociclopentil)fenil-2-(4-picolil)amino-3-Nicotinamida metanosulfonato); cabozantinib (Cometriq XL-184) (N-(4-((6,7-Dimetoxiquinolin-4-il)oxi)fenil)-N'-(4-fluorofenil)ciclopropano-1,1-dicarboxamida); dovitinib (TKI258; GFKI-258; CHIR-258) ((3Z)-4-amino-5-fluoro-3-[5-(4-metilpiperazin-1-il)-1,3-dihidrobencimidazol-2-ilideno]quinolin-2-ona); famitinib (5-[2-(dietilamino)etil]-2-[(Z)-(5-fluoro-2-oxo-1H-indol-3-ilideno)metil]-3-metil-6,7-dihidro-1H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona); fedratinib (sA r 302503, TG101348) (N-(2-Metil-2-propanil)-3-{[5-metil-2-({4-[2-(1-pirrolidinil)etoxi]fenil}amino)-4-pirimidinil]amino}bencenosulfonamida); foCDC7inib (XL880, EXEL-2880, GSK1363089, GSK089) (N1'-[3-fluoro-4-[[6-metoxi-7-(3-morfolinopropoxi)-4-quinolil]oxi]fenil]-N1-(4-fluorofenil)ciclopropano-1,1-dicarboxamida); fostamantinib (R788) (2H-Pirido[3,2-b]-1,4-oxazin-3(4H)-ona, 6-[[5-fluoro-2-[(3,4,5-trimetoxifenil)amino]-4-pirimidinil]amino]-2,2-dimetil-4-[(fosfonooxi)metil]-, sal sódica (1:2)); ilorasertib (ABT-348) (1-(4-(4-amino-7-(1-(2-hidroxietil)-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-c]piridin-3-il)fenil)-3-(3-fluorofenil)urea); lenvatinib (E7080, Lenvima) (4-[3-cloro-4-(ciclopropilaminocarbonil)aminofenoxi]-7-metoxi-6-quinolincarboxamida); motesanib (AMG 706) (N-(3,3-Dimetil-2,3-dihidro-1H-indol-6-il)-2-[(piridin-4-ilmetil)amino]piridina-3-carboxamida); nintedanib (3-Z-[1-(4-(N-((4-metil-piperazin-1-il)-metilcarbonil)-N-metil-amino)-anilino)-1-fenil-metileno]-6-metoxicarbonil-2-indolinona); ponatinib (AP24534) (3-(2-Imidazo[1,2-b]piridazin-3-iletinil)-4-metil-N-[4-[(4-metilpiperazin-1-il)metil]-3-(trifluorometil)fenil]benzamida); P<p>242 (torkinib) (2-[4-Amino-1-(1-metiletil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-il]-1H-indol-5-ol); quizartinib (1-(5-(terc-Butil)isoxazol-3-il)-3-(4-(7-(2-morfolinoetoxi)benzo[d]imidazo[2,1-b]tiazol-2-il)fenil)urea); regorafenib (BAY 73-4506, stivarga) (hidrato de 4-[4-({[4-Cloro-3-(trifluorometil)fenil]carbamoil}amino)-3-fluorofenoxi]-N-metilpiridina-2-carboxamida); RXDX-105 (CEP-32496, agerafenib) (1-(3-((6,7-dimetoxiquinazolin-4-il)oxi)fenil)-3-(5-(1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)isoxazol-3-il)urea); semaxanib (SU5416) ((3Z)-3-[(3,5-dimetil-1H-pirrol-2-il)metilideno]-1,3-dihidro-2H-indol-2-ona); sitravatinib (MGCD516, MG516) (N-(3-Fluoro-4-{[2-(5-{[(2-metoxietil)amino]metil}-2-piridinil)tieno[3,2-b]piridin-7-il]oxi}fenil)-N'-(4-fluorofenil)-1,1-ciclopropanodicarboxamida); sorafenib (BAY 43-9006) (4-[4-[[[[4-cloro-3-(trifluorometil)fenil]amino]carbonil]amino]fenoxi]-N-metil-2-piridinacarboxamida); vandetanib (N-(4-bromo-2-fluorofenil)-6-metoxi-7-[(1-metilpiperidin-4-il)metoxi]quinazolin-4-amina); vatalanib (PTK787, PTK/ZK, ZK222584) (N-(4-clorofenil)-4-(piridin-4-ilmetil)ftalazin- 1-amina); AD-57 (N-[4-[4-amino-1-(1-metiletil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-il]fenil]-N'-[3-(trifluorometil)fenil]-urea); AD-80 (1-[4-(4-amino-1-propan-2ilpirazolo[3,4-d]pirimidin-3-il)fenil]-3-[2-fluoro-5-(trifluorometil)fenil]urea); AD-81 (1-(4-(4-amino-1-isopropil-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-il)fenil)-3-(4-doro-3-(trifluorometil)fenil)urea); ALW-II-41-27 (N-(5-((4-((4-etilpiperazin-1-il)metil)-3-(trifluorometil)fenil)carbamoil)-2-metilfenil)-5-(tiofen-2-il)nicotinamida); BPR1K87l (1 -(3-clorofenil)-3-(5-(2-((7-(3-(dimetilamino)propoxi)quinazolin-4-il)amino)etil)tiazol-2-il)urea); CLM3 (1 -fenetil-N-(1 -feniletil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-amina); EBI-907 (N-(2-cloro-3-(1-ciclopropil-8-metoxi-3H-pirazolo[3,4-c]isoquinolin-7-il)-4-fluorofenil)-3-fluoropropano-1-sulfonamida); NVP-AST-487 (N-[4-[(4-etil-1-piperazinil)metil]-3-(trifluorometil)fenil]-N'-[4-[[6-(metilamino)-4-pirimidinil]oxi]fenil]-urea); NVP-BBT594 (BBT594) (5-((6-acetamidopirimidin-4-il)oxi)-N-(4-((4-metilpiperazin-1-il)metil)-3-(trifluorometil)fenil)indolina-1-carboxamida); PD173955 (6-(2,6-didorofenil)-8-metil-2-(3-metilsulfanilino)pirido[2,3-d]pirimidin-7-ona); PP2 (4-amino-5-(4-dorofenil)-7-(dimetiletil)pirazolo[3,4-d]pirimidina); PZ-1 (N-(5-(terc-butil)isoxazol-3-il)-2-(4-(5-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-1Hbenzo[d]imidazol-1-il)fenil)acetamida); RPI-1 (1,3-dihidro-5,6-dimetoxi-3-[(4-hidroxifenil)metileno]-H-indol-2-ona; (3E)-3-[(4-hidroxifenil)metilideno]-5,6-dimetoxi-1H-indol-2-ona); SGI-7079 (3-[2-[[3-fluoro-4-(4-metil-1-piperazinil)fenil]amino]-5-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il]-bencenoacetonitrilo); SPP86 (1-Isopropil-3-(feniletinil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-amina); SU4984 (4-[4-[(E)-(2-oxo-1H-indol-3-ilideno)metil]fenil]piperazina-1 -carbaldehído); sunitinb (SU11248) (N-(2-Dietilaminoetil)-5-[(Z)-(5-fluoro-2-oxo-1H-indol-3-ilideno)metil]-2,4-dimetil-1H-pirrol-3-carboxamida); TG l0 l209 (N-terc-butil-3-(5-metil-2-(4-(4-metilpiperazin-1-il)fenilamino)pirimidin-4-ilamino)bencenosulfonamida); Withaferina A ((4p,5p,6p,22R)-4,27-Dihidroxi-5,6:22,26-diepoxiergosta-2,24-dieno-1,26-diona); XL-999 ((Z)-5-((1-etilpiperidin-4-il)amino)-3-((3-fluorofenil)(5-metil-1H-imidazol-2-il)metileno)indolin-2-ona); BPR1J373 (un derivado de 5-feniltiazol-2-ilaminapirimínida); CG-806 (CG'806); DCC-2157; GTX-186; HG-6-63-01 ((E)-3-(2-(4-cloro-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-5-il)vinil)-N-(4-((4-etilpiperazin-1-il)metil)-3-(trifluorometil)fenil)-4-metilbenzamida); SW-01 (clorhidrato de Ciclobenzaprina); XMD15-44 (N-(4-((4-etilpiperazin-1-il)metil)-3-(trifluorometil)fenil)-4-metil-3-(piridin-3-iletinil)benzamida (generada a partir de la estructura)); Y078-DM1 (un conjugado de anticuerpo y fármaco compuesto por un anticuerpo CDC7 (Y078) unido a un derivado del agente citotóxico maitansina); Y078-DM4 (un conjugado de anticuerpo y fármaco compuesto por un anticuerpo CDC7 (Y078) unido a un derivado del agente citotóxico maitansina); ITRI-305 (D0N5TB, DIB003599); BLU-667 ((1S,4R)-N-((S)-1-(6-(4-fluoro-1H-pirazol-1-il)piridin-3-il)etil)-1-metoxi-4-(4-metil-6-((5-metil-1H-pirazol-3-il)amino)pirimidin-2-il)ciclohexano-1-carboxamida); BLU6864; DS-5010; GSK3179106; GSK3352589; NMS-E668 ; TAS0286/HM05; TPX0046; y N-(3-(2-(dimetilamino)etoxi)-5-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(4-etoxi-6-oxo-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil) acetamida.
Los ejemplos no limitantes de agentes terapéuticos dirigidos al receptor de tirosina quinasa (por ejemplo, Trk) incluyen afatinib, cabozantinib, cetuximab, crizotinib, dabrafenib, entrectinib, erlotinib, gefitinib, imatinib, lapatinib, lestaurtinib, nilotinib, pazopanib, panitumumab, pertuzumab, sunitinib, trastuzumab, 1-((3S,4R)-4-(3-fluorofenil)-1-(2-metoxietil)pirrolidin-3-il)-3-(4-metil-3-(2-metilpirimidin-5-il)-1-fenil-1H-pirazol-5-il)urea, AG 879, AR-772, AR-786, AR-256, AR-618, AZ-23, AZ623, DS-6051, Go 6976, GNF-5837, GTx-186, GW 441756, LOXO-101, MGCD516, PLX7486, RXDX101, VM-902A, TPX-0005, TSR-011, GNF-4256, N-[3-[[2,3-dihidro-2-oxo-3-(1H-pirrol-2-ilmetileno)-1H-indol-6-il]amino]-4-metilfenil]-N'-[2-fluoro-5-(trifluorometil)fenil]-urea, AZ623, AZ64, (S)-5-Cloro-N2-(1-(5-fluoropiridin-2-il)etil)-N4-(5-isopropoxi-1H-pirazol-3-il)pirimidina-2,4-diamina, AZD7451, CEP-751, CT327, sunitinib, GNF-8625 y (R)-1-(6-(6-(2-(3-fluorofenil)pirrolidin-1-il)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)-[2,4'-bipiridin]-2'-il)piperidin-4-ol.
Los ejemplos no limitantes de un inhibidor de BRAF incluyen dabrafenib, vemurafenib (también llamado RG7204 o PLX4032), tosilato de sorafenib, PLX-4720, GDC-0879, BMS-908662 (Bristol-Meyers Squibb), LGX818 (Novartis), PLX3603 (Hofmann-LaRoche), RAF265 (Novartis), RO5185426 (Hofmann-LaRoche) y GSK2118436 (GlaxoSmithKline). Se conocen en la técnica ejemplos adicionales de un inhibidor de BRAF.
En algunas realizaciones, el inhibidor de la tirosina quinasa del receptor es un inhibidor de la tirosina quinasa del receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR). Por ejemplo, los inhibidores de EGFR pueden incluir osimertinib (merelectinib, Tagrisso), erlotinib (Tarceva), gefitinib (Iressa), cetuximab (Erbitux), necitumumab (Portrazza), neratinib (Nerlynx), lapatinib (Tykerb), panitumumab (Vectibix) y vandetanib (Caprelsa).
En algunas realizaciones, los inhibidores de la ruta de transducción de señal incluyen inhibidores de la ruta Ras-Raf-MEK-ERK (por ejemplo, binimetinib, selumetinib, encorafenib, sorafenib, trametinib y vemurafenib), inhibidores de la ruta PI3K-Akt-mTOR-S6K (por ejemplo, everolimus, rapamicina, perifosina, temsirolimus) y otros inhibidores de quinasas, como baricitinib, brigatinib, capmatinib, danusertib, ibrutinib, milciclib, quercetina, regorafenib, ruxolitinib, semaxanib, AP32788, BLU285, BLU554, INCB39110, INCB40093, INCB50465, INCB52793, INCB54828, MGCD265, NMS-088, NMS-1286937, PF 477736 ((R)-amino-N-[5,6-dihidro-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-6-oxo-1Hpirrolo[4,3,2-ef][2,3]benzodiazepin-8-il]-ciclohexanoacetamida), PLX3397, PLX7486, PLX8394, PLX9486, PRN1008, PRN1371, RXDX103, RXDX106, RXDX108 y TG101209 (N-tercbutil-3-(5-metil-2-(4-(4-metilpiperazin-1-il)fenilamino)pirimidin-4-ilamino)bencenosulfonamida).
Los ejemplos no limitantes de inhibidores de punto de control incluyen ipilimumab, tremelimumab, nivolumab, pidilizumab, MPDL3208A, MEDI4736, MSB0010718C, BMS-936559, BMS-956559, BMS-935559 (MDX-1105), AMP-224 y pembrolizumab.
En algunas realizaciones, los quimioterapéuticos citotóxicos se seleccionan de trióxido de arsénico, bleomicina, cabazitaxel, capecitabina, carboplatino, cisplatino, ciclofosfamida, citarabina, dacarbazina, daunorrubicina, docetaxel, doxorrubicina, etopósido, fluorouracilo, gemcitabina, irinotecán, lomustina, metotrexato, mitomicina C, oxaliplatino, paclitaxel, pemetrexed, temozolomida y vincristina.
Los ejemplos no limitantes de terapias dirigidas a la angiogénesis incluyen aflibercept y bevacizumab.
En algunas realizaciones, una terapia adicional o un agente terapéutico puede incluir un polipéptido de histidil-ARNt sintetasa (HRS) o un nucleótido expresable que codifica el polipéptido HRS.
El término "inmunoterapia" se refiere a un agente que modula el sistema inmunitario. En algunas realizaciones, una inmunoterapia puede aumentar la expresión y/o actividad de un regulador del sistema inmunitario. En algunas realizaciones, una inmunoterapia puede disminuir la expresión y/o actividad de un regulador del sistema inmunitario. En algunas realizaciones, una inmunoterapia puede reclutar y/o mejorar la actividad de una célula inmunitaria.
En algunas realizaciones, la inmunoterapia es una inmunoterapia celular (por ejemplo, terapia de célula T adoptiva, terapia de célula dendrítica, terapia de célula asesina natural). En algunas realizaciones, la inmunoterapia celular es sipuleucel-T (APC8015; Provenge™; Plosker (2011) Drugs 71(1): 101-108). En algunas realizaciones, la inmunoterapia celular incluye células que expresan un receptor (CAR) de antígeno quimérico. En algunas realizaciones, la inmunoterapia celular es una terapia de célula CAR-T. En algunas realizaciones, la terapia con célula CAR-T es tisagenlecleucel (Kymriah™).
En algunas realizaciones, la inmunoterapia es una terapia con anticuerpo (por ejemplo, un anticuerpo monoclonal, un anticuerpo conjugado). En algunas realizaciones, la terapia con anticuerpo es bevacizumab (Mvasti™, Avastin®), trastuzumab (Herceptin®), avelumab (Bavencio®), rituximab (MabThera™, Rituxan®), edrecolomab (Panorex), daratumumab (Darzalex®), olaratumab (Lartruvo™), ofatumumab (Arzerra®), alemtuzumab (Campath®), cetuximab (Erbitux®), oregovomab, pembrolizumab (Keytruda®), dinutiximab (Unituxin®), obinutuzumab (Gazyva®), tremelimumab (CP-675,206), ramucirumab (Cyramza®), ublituximab (TG-1101), panitumumab (Vectibix®), elotuzumab (Empliciti™), avelumab (Bavencio®), necitumumab (Portrazza™), cirmtuzumab (UC-961), ibritumomab (Zevalin®), isatuximab (SAR650984), nimotuzumab, fresolimumab (GC1008), lirilumab (INN), mogamulizumab (Poteligeo®), ficlatuzumab (AV-299), denosumab (Xgeva®), ganitumab, urelumab, pidilizumab o amatuximab.
En algunas realizaciones, la inmunoterapia es un conjugado anticuerpo-fármaco. En algunas realizaciones, el conjugado anticuerpo-fármaco es gemtuzumab ozogamicina (Mylotarg™), inotuzumab ozogamicina (Besponsa®), brentuximab vedotina (Adcetris®), ado-trastuzumab emtansina (TDM-1; Kadcyla®), mirvetuximab soravtansina (IMGN853) o anetumab ravtansina
En algunas realizaciones, la inmunoterapia incluye blinatumomab (AMG103; Blincyto®) o midostaurina (Rydapt).
En algunas realizaciones, la inmunoterapia incluye una toxina. En algunas realizaciones, la inmunoterapia es denileuquina diftitox (Ontak®).
En algunas realizaciones, la inmunoterapia es una terapia con citoquina. En algunas realizaciones, la terapia con citoquina es una terapia con interleuquina 2 (IL-2), una terapia con interferón alfa (IFNa), una terapia con factor (G-CSF) estimulante de colonia de granulocito, una terapia con interleuquina 12 (lL-12), una terapia con interleuquina 15 (IL-15), una terapia con interleuquina 7 (IL-7) o una terapia con eritropoyetina alfa (EPO). En algunas realizaciones, la terapia con IL-2 es aldesleuquina (Proleukin®). En algunas realizaciones, la terapia con IFNa es IntronA® (Roferón-A®). En algunas realizaciones, la terapia con G-CSF es filgrastim (Neupogen®).
En algunas realizaciones, la inmunoterapia es un inhibidor del punto de control inmunitario. En algunas realizaciones, la inmunoterapia incluye uno o más inhibidores de punto de control inmunitario. En algunas realizaciones, el inhibidor del punto de control inmunitario es un inhibidor de CTLA-4, un inhibidor de PD-1 o un inhibidor de PD-L1. En algunas realizaciones, el inhibidor de CTLA-4 es ipilimumab (Yervoy®) o tremelimumab (CP-675,206). En algunas realizaciones, el inhibidor de PD-1 es pembrolizumab (Keytruda®) o nivolumab (Opdivo®). En algunas realizaciones, el inhibidor de PD-L1 es atezolizumab (Tecentriq®), avelumab (Bavencio®) o durvalumab (Imfinzi™).
En algunas realizaciones, la inmunoterapia es inmunoterapia basada en ARNm. En algunas realizaciones, la inmunoterapia basada en ARNm es CV9104 (véase, por ejemplo, Rausch y otros. (2014) Human Vaccin Immunother 10(11): 3146-52; y Kubler et al. (2015) J. Immunother Cancer 3:26).
En algunas realizaciones, la inmunoterapia es la terapia con bacilo de Calmette-Guerin (BCG).
En algunas realizaciones, la inmunoterapia es una terapia viral oncolítica. En algunas realizaciones, la terapia viral oncolítica es talimogén alherparepvec (T-VEC; Imlygic®).
En algunas realizaciones, la inmunoterapia es una vacuna contra el cáncer. En algunas realizaciones, la vacuna contra el cáncer es una vacuna contra el virus (HPV) del papiloma humano. En algunas realizaciones, la vacuna contra el HPV es Gardasil®, Gardasil9® o Cervarix®. En algunas realizaciones, la vacuna contra el cáncer es una vacuna contra el virus de la hepatitis B (HBV). En algunas realizaciones, la vacuna contra el HBV es Engerix-B®, Recombivax HB® o GI-13020 (Tarmogen®). En algunas realizaciones, la vacuna contra el cáncer es Twinrix® o Pediarix®. En algunas realizaciones, la vacuna contra el cáncer es BiovaxID® Oncophage®, GVAX, ADXS11-001, ALVAC-CEA, PROSTVAC®, Rindopepimut®, CimaVax-EGF, lapuleucel-T (APC8024; Neuvenge™), GRNVAC1, GRNVAC2, GRN-1201, hepcortespenlisimut-L (Hepko-V5), DCVAX®, SCIB1, BMT CTN 1401, PrCa VBIR, PANVAC, ProstAtak®, DPX-Survivac o viagenpumatucel-L (HS-110).
En algunas realizaciones, la inmunoterapia es una vacuna peptídica. En algunas realizaciones, la vacuna peptídica es nelipepimut-S (E75) (NeuVax™), IMA901 o SurVaxM (SVN53-67). En algunas realizaciones, la vacuna contra el cáncer es una vacuna neoantigénica personal inmunogénica (véase, por ejemplo, Ott et al. (2017) Nature 547: 217-221; Sahin et al. (2017) Nature 547: 222-226). En algunas realizaciones, la vacuna contra el cáncer es RGSH4K o NEO-PV-01. En algunas realizaciones, la vacuna contra el cáncer es una vacuna basada en ADN. En algunas realizaciones, la vacuna basada en ADN es una vacuna de ADN de mamaglobina-A (véase, por ejemplo, Kim et al. (2016) OncoImmunology 5(2): e1069940).
En algunas realizaciones, los agentes inmunodirigidos se seleccionan entre aldesleuquina, interferón alfa-2b, ipilimumab, lambrolizumab, nivolumab, prednisona y sipuleucel-T.
Los ejemplos no limitantes de radioterapia incluyen la terapia con yoduro radiactivo, la radiación de haz externo y la terapia con radio 223.
Los inhibidores de quinasa adicionales incluyen aquellos descritos, por ejemplo, en Patente de EE. UU. número 7,514,446; 7,863,289; 8,026,247; 8,501,756; 8,552,002; 8,815,901; 8,912,204; 9,260,437; 9,273,051; Publicación de EE.UU. número U.S. 2015/0018336; Publicación Internacional número WO 2007/002325; documento WO 2007/002433; documento WO 2008/080001; documento WO 2008/079906; documento WO 2008/079903; documento WO 2008/079909; documento WO 2008/080015; documento WO 2009/007748; documento WO 2009/012283; documento WO 2009/143018; documento WO 2009/143024; documento WO 2009/014637; documento 2009/152083; documento WO 2010/111527; documento WO 2012/109075; documento WO 2014/194127; documento WO 2015/112806; documento WO 2007/110344; documento WO 2009/071480; documento WO 2009/118411; documento WO 2010/031816; documento WO 2010/145998; documento WO 2011/092120; documento WO 2012/101032; documento WO 2012/139930; documento WO 2012/143248; documento WO 2012/152763; documento WO 2013/014039; documento WO 2013/102059; documento WO 2013/050448; documento WO 2013/050446; documento WO 2014/019908; documento WO 2014/072220; documento WO 2014/184069; documento WO 2016/075224; documento WO 2016/081450; documento WO 2016/022569; documento WO 2016/011141; documento WO 2016/011144; documento WO 2016/011147; documento WO 2015/191667; documento WO 2012/101029; documento WO 2012/113774; documento WO 2015/191666; documento WO 2015/161277; documento WO 2015/161274; documento WO 2015/108992; documento WO 2015/061572; documento WO 2015/058129; documento WO 2015/057873; documento WO 2015/017528; documento WO/2015/017533; documento WO 2014/160521; y documento WO 2014/011900
Aunque la base genética de la tumorigénesis puede variar entre diferentes tipos de cáncer, los mecanismos celulares y moleculares necesarios para la metástasis parecen ser similares para todos los tipos de tumores sólidos. Durante una cascada metastásica, las células cancerosas pierden respuestas inhibidoras del crecimiento, experimentan alteraciones en la adhesividad y producen enzimas que pueden degradar los componentes de la matriz extracelular. Esto conduce al desprendimiento de células tumorales del tumor original, la infiltración en la circulación a través de la vasculatura recién formada, la migración y extravasación de las células tumorales en sitios distantes favorables, donde pueden formar colonias. Se han identificado varios genes como promotores o supresores de la metástasis. Por ejemplo, la sobreexpresión del factor (GDNF) neurotrófico derivado de células gliales y su receptor tirosina quinasa CDC7 se han correlacionado con la proliferación y la metástasis del cáncer. Véase, por ejemplo Zeng, et al. J. Int. Med. Res. (2008) 36(4): 656-64.
De acuerdo con ello, también se proporcionan en el presente documento métodos para inhibir, prevenir, ayudar a prevenir o disminuir los síntomas de metástasis de un cáncer en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar al sujeto una cantidad efectiva de un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o una composición farmacéutica del mismo. Dichos métodos pueden utilizarse en el tratamiento de uno o más de los cánceres descritos en el presente documento. Véase, por ejemplo, Publicación de EE. UU. número 2013/0029925; Publicación Internacional número WO 2014/083567; y Patente de EE. UU. número 8,568,998. Véase también, por ejemplo, Hezam K et al., Rev Neurosci 26 de enero de 2018;29:93-98; Gao L, et al., Pancreas, enero de 2015; 44: 134-143; Ding K et al., J Biol Chem 6 de junio de 2014; 289:16057-71; y Amit M et al., Oncogene 8 de junio de 2017; 36:3232-3239. En algunas realizaciones, el cáncer es un cáncer asociado con CDC7. En algunas realizaciones, el compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se usa en combinación con una terapia adicional u otro agente terapéutico, incluyendo un agente quimioterapéutico, tal como un inhibidor de quinasa. Por ejemplo, un primer o segundo inhibidores de quinasa CDC7. En algunas realizaciones, el agente terapéutico adicional es crizotinib. En algunas realizaciones, el agente terapéutico adicional es osimertinib. En algunas realizaciones, al sujeto se le ha administrado una o más dosis de un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, antes de la administración de la composición farmacéutica. En algunas realizaciones, el cáncer es un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón asociado con CDC7). En algunas realizaciones, el agente terapéutico adicional es un inhibidor de PARP (por ejemplo, olaparib). En algunas realizaciones, el agente terapéutico adicional es un inhibidor de ATR (por ejemplo, ceralasertib). En algunas realizaciones, el agente terapéutico adicional es un inhibidor de Wee1 (por ejemplo, AZD-1775). En algunas realizaciones, el agente terapéutico adicional es un inhibidor de EGFR (por ejemplo, lapatinib).
El término "metástasis" es un término conocido en la técnica y significa la formación de un tumor adicional (por ejemplo, un tumor sólido) en un sitio distante de un tumor primario en un sujeto, donde el tumor adicional incluye las mismas células cancerosas o células cancerosas similares a las del tumor primario.
También se proporcionan métodos para disminuir el riesgo de desarrollar una metástasis o una metástasis adicional en un sujeto que tiene un cáncer asociado con CDC7 que incluyen: selección, identificación o diagnóstico de que un sujeto tiene un cáncer asociado con CDC7, y administración de una cantidad efectiva de un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo al sujeto seleccionado, identificado o diagnosticado como que tiene un cáncer asociado con CDC7. También se proporcionan métodos para disminuir el riesgo de desarrollar una metástasis o una metástasis adicional en un sujeto que tiene un cáncer asociado con CDC7, que incluye administrar una cantidad efectiva de un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo a un sujeto que tiene un cáncer asociado con CDC7. La disminución del riesgo de desarrollar una metástasis o una metástasis adicional en un sujeto que tiene un cáncer asociado con CDC7 se puede comparar con el riesgo de desarrollar una metástasis o una metástasis adicional en el sujeto antes del tratamiento, o en comparación con un sujeto o una población de sujetos que tienen un cáncer similar o el mismo cáncer asociado con CDC7 que no ha recibido tratamiento o ha recibido un tratamiento diferente. En algunas realizaciones, el agente terapéutico adicional es crizotinib. En algunas realizaciones, el agente terapéutico adicional es osimertinib. En algunas realizaciones, al sujeto se le ha administrado una o más dosis de un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, antes de la administración de la composición farmacéutica. En algunas realizaciones, el cáncer es un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón asociado con CDC7).
La frase "riesgo de desarrollar una metástasis" significa el riesgo de que un sujeto que tiene un tumor primario desarrolle un tumor adicional (por ejemplo, un tumor sólido) en un sitio distante de un tumor primario en un sujeto durante un período de tiempo determinado, donde el tumor adicional incluye las mismas células cancerosas o células cancerosas similares al tumor primario. En el presente documento se describen métodos para reducir el riesgo de desarrollar una metástasis en un sujeto que tiene cáncer.
La frase "riesgo de desarrollar metástasis adicionales" significa el riesgo de que un sujeto que tiene un tumor primario y uno o más tumores adicionales en sitios distantes del tumor primario (donde uno o más tumores adicionales incluyen las mismas células cancerosas o similares que el tumor primario) desarrolle uno o más tumores adicionales distantes del tumor primario, donde los tumores adicionales incluyen las mismas células cancerosas o similares que el tumor primario. En el presente documento se describen métodos para reducir el riesgo de desarrollar metástasis adicional.
El tratamiento de un sujeto que tiene cáncer con un inhibidor (MKI) de múltiples quinasas o un inhibidor de quinasa específico del objetivo (por ejemplo, un inhibidor de BRAF, un inhibidor de EGFR, un inhibidor de MEK, un inhibidor de ALK, un inhibidor de ROS1, un inhibidor de MET, un inhibidor de aromatasa, un inhibidor de RAF, un inhibidor de RET o un inhibidor de RAS) puede dar como resultado una desregulación de un gen CDC7, una quinasa CDC7 o la expresión o actividad o nivel de la misma en el cáncer, y/o resistencia a un inhibidor de CDC7. Véase, por ejemplo. Bhinge et al., Oncotarget 8:27155-27165, 2017; Chang et al., Yonsei Med. J. 58:9-18, 2017; y Lopez-Delisle et al., doi: 10.1038/s41388-017-0039-5, Oncogene 2018.
El tratamiento de un sujeto que tiene cáncer con un inhibidor de CDC7, en combinación con un inhibidor de múltiples quinasas o un inhibidor de quinasa específico del objetivo (por ejemplo, un inhibidor de BRAF, un inhibidor de EGFR, un inhibidor de MEK, un inhibidor de ALK, un inhibidor de ROS1, un inhibidor de MET, un inhibidor de aromatasa, un inhibidor de RAF, un inhibidor de RET o un inhibidor de RAS) puede tener una mayor eficacia terapéutica, en comparación con el tratamiento del mismo sujeto o un sujeto similar con el inhibidor de CDC7 como una monoterapia, o el inhibidor de múltiples quinasas o el inhibidor de quinasa específico del objetivo, como una monoterapia. Véase, por ejemplo, Tang et al., doi: 10.1038/modpathol.2017.109, Mod. Pathol. 2017; Andreucci et al., Oncotarget 7:80543-80553, 2017; Nelson-Taylor et al., Mol. Cancer Ther.
16:1623-1633, 2017; y Kato et al., Clin. Cancer Res. 23:1988-1997, 2017.
En el presente documento se proporcionan métodos para tratar a un sujeto que tiene un cáncer (por ejemplo, cualquiera de los cánceres descritos en el presente documento) y al que se le administró previamente un inhibidor (MKI) de múltiples quinasas o un inhibidor de quinasa específico del objetivo (por ejemplo, un inhibidor de BRAF, un inhibidor de EGFR, un inhibidor de MEK, un inhibidor de ALK, un inhibidor de ROS1, un inhibidor de MET, un inhibidor de aromatasa, un inhibidor de RAF, un inhibidor de RET o un inhibidor de RAS) (por ejemplo, como una monoterapia) que incluyen: administrar al sujeto (i) una dosis efectiva de un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo como una monoterapia, o (ii) una dosis efectiva de un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y una dosis efectiva del MKI previamente administrado o el inhibidor de quinasa específico del objetivo administrado previamente.
En el presente documento se proporcionan métodos para tratar a un sujeto que tiene un cáncer (por ejemplo, cualquiera de los cánceres descritos en el presente documento) al que se le administró previamente un MKI o un inhibidor de quinasa específico del objetivo (por ejemplo, un inhibidor de BRAF, un inhibidor de EGFR, un inhibidor de MEK, un inhibidor de ALK, un inhibidor de ROS1, un inhibidor de MET, un inhibidor de aromatasa, un inhibidor de RAF, un inhibidor de RET o un inhibidor de RAS) (por ejemplo, como una monoterapia) que incluyen: identificar a un sujeto que tiene una célula cancerosa que tiene una desregulación de un gen CDC7, una quinasa CDC7 o la expresión o actividad o nivel de la misma; y administrar al sujeto identificado (i) una dosis efectiva de un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo como una monoterapia, o (ii) una dosis efectiva de un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y una dosis efectiva del MKI previamente administrado o el inhibidor de quinasa específico del objetivo administrado previamente.
En el presente documento se proporcionan métodos para tratar a un sujeto que tiene un cáncer (por ejemplo, cualquiera de los cánceres descritos en el presente documento) que incluyen: administrar a un sujeto una cantidad efectiva de un MKI o un inhibidor de quinasa específico del objetivo (por ejemplo, un inhibidor de BRAF, un inhibidor de EGFR, un inhibidor de MEK, un inhibidor de ALK, un inhibidor de ROS1, un inhibidor de MET, un inhibidor de aromatasa, un inhibidor de RAF, un inhibidor de RET o un inhibidor de RAS) (por ejemplo, como una monoterapia) durante un primer período de tiempo; después del período de tiempo, identificar a un sujeto que tiene una célula cancerosa que tiene una desregulación de un gen CDC7, una quinasa CDC7 o la expresión o actividad o nivel de la misma; y administrar al sujeto identificado (i) una dosis efectiva de un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo como una monoterapia, o (ii) una dosis efectiva de un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y una dosis efectiva del MKI administrado previamente o el inhibidor de quinasa específico del objetivo administrado previamente.
También se proporciona un método para inhibir la actividad de quinasa CDC7 en una célula de mamífero, que comprende poner en contacto la célula de mamífero con un compuesto de la Fórmula (I). En algunas realizaciones, el contacto esin vitro.En algunas realizaciones, el contacto esin vivo.En algunas realizaciones, el contacto esin vivo,en donde el método comprende administrar una cantidad efectiva de un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo a un sujeto que tiene una célula de mamífero con actividad de quinasa CDC7. En algunas realizaciones, la célula de mamífero es una célula cancerosa de mamífero. En algunas realizaciones, la célula cancerosa de mamífero es cualquier cáncer como se describe en el presente documento. En algunas realizaciones, la célula cancerosa de mamífero es una célula cancerosa de mamífero asociada con CDC7.
También se proporciona un método para inhibir la actividad de quinasa CDC7 en una célula de mamífero, que comprende poner en contacto la célula de mamífero con un compuesto de la Fórmula (I). En algunas realizaciones, el contacto esin vitro.En algunas realizaciones, el contacto esin vivo.En algunas realizaciones, el contacto esin vivo,en donde el método comprende administrar una cantidad efectiva de un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo a un mamífero que tiene una célula de mamífero con actividad de quinasa CDC7. En algunas realizaciones, la célula de mamífero es una célula cancerosa de mamífero. En algunas realizaciones, la célula cancerosa de mamífero es cualquier cáncer como se describe en el presente documento. En algunas realizaciones, la célula cancerosa de mamífero es una célula cancerosa de mamífero asociada con CDC7. En algunas realizaciones, la célula de mamífero es una célula gastrointestinal de mamífero.
Como se utiliza en el presente documento, el término "poner en contacto" se refiere a la unión de unidades estructurales indicadas, en un sistemain vitroo un sistemain vivo.Por ejemplo, "poner en contacto" una quinasa CDC7 con un compuesto proporcionado en el presente documento incluye la administración de un compuesto proporcionado en el presente documento a un sujeto, tal como un ser humano, que tiene una quinasa CDC7, así como, por ejemplo, introducir un compuesto proporcionado en el presente documento en una muestra que contiene una preparación celular o purificada de mamífero, que contiene la quinasa CDC7.
También se proporciona en el presente documento un método para inhibir la proliferación de células de mamíferos,in vitrooin vivo,comprendiendo el método poner en contacto una célula de mamífero con una cantidad efectiva de un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o una composición farmacéutica del mismo, como se define en el presente documento.
Un "inhibidor de quinasa CDC7" como se define en el presente documento, incluye cualquier compuesto que exhibe actividad de inhibición de CDC7. En algunas realizaciones, un inhibidor de quinasa CDC7 es selectivo para una quinasa CDC7. Los inhibidores ejemplares de quinasa CDC7 pueden exhibir actividad de inhibición (IC50) contra una quinasa CDC7, de menos de aproximadamente 1000 nM, menos de aproximadamente 500 nM, menos de aproximadamente 200 nM, menos de aproximadamente 100 nM, menos de aproximadamente 50 nM, menos de aproximadamente 25 nM, menos de aproximadamente 10 nM o menos de aproximadamente 1 nM según lo medido en un ensayo como se describe en el presente documento. En algunas realizaciones, un inhibidor de quinasa CDC7 puede exhibir actividad de inhibición (IC50) contra una quinasa CDC7 de menos de aproximadamente 25 nM, menos de aproximadamente 10 nM, menos de aproximadamente 5 nM o menos de aproximadamente 1 nM según lo medido en un ensayo como se proporciona en el presente documento.
Como se usa en el presente documento, un "primer inhibidor de quinasa CDC7" o "primer inhibidor de CDC7" es un inhibidor de quinasa CDC7 como se define en el presente documento, pero que no incluye un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define en el presente documento. Como se usa en el presente documento, un "segundo inhibidor de quinasa CDC7" o un "segundo inhibidor de CDC7" es un inhibidor de quinasa CDC7 como se define en el presente documento, pero que no incluye un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define en el presente documento. Cuando están presentes tanto un primer como un segundo inhibidor de CDC7 en un método proporcionado en el presente documento, el primer y el segundo inhibidores de quinasa CDC7 son diferentes.
En el presente documento se describen primero y segundo inhibidores ejemplares de quinasa CDC7. En algunas realizaciones, se puede seleccionar un primer o segundo inhibidor de quinasa CDC7 del grupo que consiste en TAK931, SRA141 y PHA-767491.
La frase "cantidad efectiva" significa una cantidad de compuesto que, cuando se administra a un sujeto que necesita dicho tratamiento, es suficiente para (i) tratar una enfermedad o trastorno asociado con CDC7 (tal como un cáncer asociado con CDC7), (ii) atenuar, mejorar o eliminar uno o más síntomas de la enfermedad, condición o trastorno particular, o (iii) retrasar la aparición de uno o más síntomas de la enfermedad, condición o trastorno particular descrito en el presente documento. La cantidad de un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, que corresponderá a dicha cantidad, variará dependiendo de factores tales como el compuesto particular, la condición de la enfermedad y su gravedad, la identidad (por ejemplo, el peso) del sujeto que necesita el tratamiento, pero, no obstante, puede ser determinada de manera rutinaria por un experto en la técnica.
Cuando se emplean como productos farmacéuticos, los compuestos de la Fórmula (I), incluyendo sus sales farmacéuticamente aceptables, se pueden administrar en forma de composiciones farmacéuticas. Estas composiciones se pueden preparar de una manera bien conocida en la técnica farmacéutica y se pueden administrar por una variedad de rutas, dependiendo de si se desea un tratamiento local o sistémico y del área que se va a tratar. La administración puede ser tópica (incluyendo la transdérmica, epidérmica, oftálmica y en las membranas mucosas, incluyendo la entrega intranasal, vaginal y rectal), pulmonar (por ejemplo, por inhalación o insuflación de polvos o aerosoles, incluso por nebulizador; intratraqueal o intranasal), oral o parenteral. La administración oral puede incluir una forma de dosificación formulada para administración una vez al día o dos veces al día (BID). La administración parenteral incluye la administración intravenosa, intraarterial, subcutánea, intraperitoneal, intramuscular o inyección o infusión; o intracraneal, por ejemplo, intratecal o intraventricular. La administración parenteral puede realizarse en forma de una dosis única en bolo o, por ejemplo, mediante una bomba de perfusión continua. Las composiciones y formulaciones farmacéuticas para administración tópica pueden incluir parches transdérmicos, ungüentos, lociones, cremas, geles, gotas, supositorios, aerosoles, líquidos y polvos. Pueden ser necesarios o deseables portadores farmacéuticos convencionales, bases acuosas, en polvo u oleosas, espesantes y similares.
También se proporcionan en el presente documento composiciones farmacéuticas que contienen, como ingrediente activo, un compuesto de la Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en combinación con uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables. En algunas realizaciones, el compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, presente en la composición es un compuesto de la Fórmula (I-A), (I-B), (I-C), (I-D), (I-E), (I-F), (I-G), (I-H), (I-I), (I-J), (I-K), (I-L), (I-M), (I-N), (I-O), o (I-P), o una sal farmacéuticamente aceptable de cualquiera de los anteriores.
Por ejemplo, una composición farmacéutica preparada utilizando un compuesto de la Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas realizaciones, la composición es adecuada para administración tópica. Al preparar las composiciones proporcionadas en el presente documento, el ingrediente activo es mezclado típicamente con un excipiente, se diluye con un excipiente o se encierra dentro de dicho portador en forma de, por ejemplo, una cápsula, sobre, papel u otro contenedor. Cuando el excipiente sirve como diluyente, puede ser un material sólido, semisólido o líquido, que actúa como portador, vehículo o medio para el ingrediente activo. Así, las composiciones pueden presentarse en forma de comprimidos, píldoras, polvos, pastillas, sobres, sellos, elíxires, suspensiones, emulsiones, soluciones, jarabes, aerosoles (como un sólido o en un medio líquido), ungüentos que contengan, por ejemplo, hasta 10 % en peso del compuesto activo, cápsulas blandas y duras de gelatina, supositorios, soluciones inyectables estériles y polvos empacados estériles. En algunas realizaciones, la composición está formulada para administración oral. En algunas realizaciones, la composición es una formulación oral sólida. En algunas realizaciones, la composición se formula como un comprimido o cápsula.
Además, se proporcionan en el presente documento composiciones farmacéuticas que contienen un compuesto de la Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo con un portador farmacéuticamente aceptable. Las composiciones farmacéuticas que contienen un compuesto de la Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo como el ingrediente activo se pueden preparar mezclando íntimamente el compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, con un portador farmacéutico de acuerdo con técnicas de preparación farmacéutica convencionales. El portador puede adoptar una amplia variedad de formas dependiendo de la ruta de administración deseada (por ejemplo, oral, parenteral). En algunas realizaciones, la composición es una composición oral sólida.
Los portadores farmacéuticamente aceptables adecuados son bien conocidos en la técnica. Se pueden encontrar descripciones de algunos de estos portadores farmacéuticamente aceptables en The Handbook of Pharmaceutical Excipients, publicado por American Pharmaceutical Association y Pharmaceutical Society of Great Britain.
Los métodos de formulación de composiciones farmacéuticas se han descrito en numerosas publicaciones tales como Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets, Segunda Edición, Revisada y Expandida, Volúmenes 1-3, editado por Lieberman et al; Pharmaceutical Dosage Forms: Parenteral Medications, Volúmenes 1-2, editado por Avis et al; y Pharmaceutical Dosage Forms: Disperse Systems, Volúmenes 1-2, editado por Lieberman et al; publicado por Marcel Dekker, Inc.
En la preparación de las composiciones en forma de dosificación oral, se puede emplear cualquiera de los medios farmacéuticos habituales. Así, para preparaciones orales líquidas tales como suspensiones, elíxires y soluciones, los portadores y aditivos adecuados incluyen agua, glicoles, aceites, alcoholes, agentes aromatizantes, conservantes, estabilizantes, agentes colorantes y similares; para preparaciones orales sólidas, tales como polvos, cápsulas y tabletas, los portadores y aditivos adecuados incluyen almidones, azúcares, diluyentes, agentes de granulación, lubricantes, aglutinantes, agentes de desintegración y similares. Los aglutinantes adecuados incluyen, sin limitación, almidón, gelatina, azúcares naturales tales como glucosa o beta-lactosa, edulcorantes de maíz, gomas naturales y sintéticas tales como acacia, tragacanto u oleato de sodio, estearato de sodio, estearato de magnesio, benzoato de sodio, acetato de sodio, cloruro de sodio y similares. Los agentes de desintegración incluyen, sin limitación, almidón, metilcelulosa, agar, bentonita, goma xantana y similares. Las preparaciones orales sólidas también pueden recubrirse con sustancias como azúcares o tener un recubrimiento entérico para modular el sitio principal de absorción. Para la administración parenteral, el portador generalmente consistirá en agua esterilizada y se pueden agregar otros ingredientes para aumentar la solubilidad o la conservación. También se pueden preparar suspensiones o soluciones inyectables utilizando portadores acuosos junto con aditivos apropiados. Las composiciones farmacéuticas de este documento contendrán, por unidad de dosificación, por ejemplo, tableta, cápsula, polvo, inyección, cucharadita y similares, una cantidad del ingrediente activo necesaria para administrar una dosis efectiva como se describe en el presente documento.
Las composiciones que comprenden un compuesto de la Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo se pueden formular en una forma de dosificación unitaria, conteniendo cada dosificación de aproximadamente 1 a aproximadamente 1,000 mg (1 g) del ingrediente activo. El término "forma de dosificación unitaria" se refiere a unidades físicamente discretas adecuadas como dosis unitarias para sujetos humanos y otros sujetos, conteniendo cada unidad una cantidad predeterminada de material activo (es decir, un compuesto de la Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo), calculada para producir el efecto terapéutico deseado, en asociación con un excipiente farmacéutico adecuado.
El compuesto activo puede ser efectivo en un amplio intervalo de dosificaciones y generalmente se administra en una cantidad farmacéuticamente efectiva. Las dosificaciones óptimas que se van a administrar pueden ser determinadas fácilmente por los expertos en la técnica. Se entenderá, por lo tanto, que la cantidad del compuesto realmente administrado generalmente será determinada por un médico y variará de acuerdo con las circunstancias relevantes, incluyendo el modo de administración, el compuesto real administrado, la fuerza de la preparación, la condición que se va a tratar y el avance de la condición de la enfermedad. Además, los factores asociados con el sujeto particular que se esté tratando, incluyendo la respuesta del sujeto, la edad, el peso, la dieta, el momento de administración y la gravedad de los síntomas del sujeto, darán lugar a la necesidad de ajustar las dosificaciones.
Un experto en la técnica reconocerá que ambos ensayosin vivoein vitroque utilizan modelos celulares y/o animales adecuados, conocidos y generalmente aceptados permiten predecir la capacidad de un compuesto de prueba para tratar o prevenir un trastorno determinado.
Un experto en la técnica reconocerá además que los ensayos clínicos en humanos, incluyendo los primeros ensayos en humanos, los ensayos de determinación de dosis y los ensayos de eficacia, en sujetos sanos y/o en aquellos que padecen un trastorno determinado, pueden completarse de acuerdo con métodos bien conocidos en las técnicas clínicas y médicas.
Se proporcionan en el presente documento kits farmacéuticos útiles, por ejemplo, en el tratamiento de enfermedades o trastornos asociados con CDC7, tales como cáncer, que incluyen uno o más recipientes que contienen una composición farmacéutica que comprende una cantidad efectiva de un compuesto proporcionado en el presente documento. Dichos kits pueden incluir además, si se desea, uno o más de diversos componentes de kits farmacéuticos convencionales, tales como, por ejemplo, recipientes con uno o más portadores farmacéuticamente aceptables, recipientes adicionales, etc., como será fácilmente evidente para los expertos en la técnica. También se pueden incluir en el kit instrucciones, ya sea en forma de insertos o de etiquetas, que indiquen cantidades de los componentes que se deben administrar, pautas para la administración y/o pautas para mezclar los componentes.
Ejemplos
Materiales y métodos
Los compuestos proporcionados en el presente documento, incluyendo sus sales, se pueden preparar utilizando técnicas de síntesis orgánica conocidas y se pueden sintetizar de acuerdo con cualquiera de las numerosas rutas de síntesis posibles.
Las reacciones para preparar los compuestos proporcionados en el presente documento se pueden llevar a cabo en solventes adecuados que pueden ser fácilmente seleccionados por una persona experta en la técnica de la síntesis orgánica. Los solventes adecuados pueden ser sustancialmente no reactivos con los materiales de partida (reactivos), los productos intermedios o los productos, a las temperaturas a las que se llevan a cabo las reacciones, por ejemplo, temperaturas que pueden variar desde la temperatura de congelación del solvente hasta la temperatura de ebullición del solvente. Una reacción dada puede llevarse a cabo en un solvente o en una mezcla de más de un solvente. Dependiendo del paso de reacción particular, el técnico experto puede seleccionar solventes adecuados para un paso de reacción particular.
La preparación de los compuestos proporcionados en el presente documento puede implicar la protección y desprotección de diversos grupos químicos. La necesidad de protección y desprotección, y la selección de grupos protectores apropiados, pueden ser determinadas fácilmente por un experto en la técnica. La química de los grupos protectores puede ser encontrada, por ejemplo, en Protecting Group Chemistry, 1a ed., Oxford University Press, 2000; March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, 5a ed., Wiley-Interscience Publication, 2001; y Peturssion, S. et al., "Protecting Groups in Carbohydrate Chemistry," J. Chem. Educ., 74(11), 1297 (1997).
Las reacciones se pueden vigilar según cualquier método adecuado conocido en la técnica. Por ejemplo, la formación de producto se puede vigilar mediante medios espectroscópicos, como la espectroscopia de resonancia magnética nuclear (por ejemplo, 1H o 13C), espectroscopia infrarroja, espectrofotometría (por ejemplo, UV-visible), espectrometría de masas o por métodos cromatográficos tales como cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC), cromatografía líquida-espectroscopia de masas (LCMS) o cromatografía de capa fina (TLC). Los expertos en la técnica pueden purificar los compuestos mediante diversos métodos, incluyendo la cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC) ("Preparative LC-MS Purification: Improved Compound Specific Method Optimization" K.F. Blom, et al., J. Combi. Chem. 6(6), 874 (2004), cromatografía de sílice en fase normal y cromatografía (SFC) de fluido supercrítico.
A menos que se especifique de otro modo, se entiende que la estereoquímica de los compuestos 1-58 en los ejemplos a continuación es asignada de forma arbitraria.
Todos los solventes y reactivos se obtuvieron de fuentes comerciales y se utilizaron sin purificación adicional a menos que se indique de otro modo. Los solventes anhidros se adquirieron y utilizaron tal como se suministraron. Las reacciones se monitorearon mediante cromatografía de capa fina (TLC), visualizando con una lámpara UV (254 nm) y tinción con KMnO4. Los espectros de RMN se obtuvieron en un espectrómetro Bruker Neo 400M que operaba a 400 MHz. Los desplazamientos químicos se informan en partes por millón (8) a partir de la resonancia de tetrametilsilano en el solvente indicado. Los espectros de masas lC se tomaron con un espectrómetro de masas de cuadrupolo simple Agilent 1260-6125B utilizando una columna Welch Biomate (C18, 2.7 pm, 4.6*50 mm) o un sistema waters H-Class SQD2. La detección se realizó mediante DAD (254 nm y 210 nm y 280 nm). La HPLC quiral se realizó en el sistema Waters acquity UPC2 con base que contenía Daicel chiralpak AD-H (5 pm, 4.6*250 mm), Daicel chiralpak OD-H (5 pm, 4.6*250 mm), Daicel chiralpak IG-3 (3 pm, 4.6*150 mm), Chiral Technologies Europe A d -3 (3 pm, 3.0*150 mm) y Trefoil TM Technology Trefoil TM AMY1 (2.5 pm, 3.0*150 mm). La detección se realizó mediante DAD (254 nm). La HPLC preparativa se realizó en el sistema LC GILSON Trilution utilizando una columna Welch XB-C18 (5um, 21.2*150 mm). La cromatografía instantánea se llevó a cabo en el sistema Biotage Isolera Prime utilizando columnas flash Welch WelFlash (40-63 pm). Los compuestos sintetizados son todos con una pureza > 95%, y a menos que se especifique de otro modo.
Abreviaturas
* = una indicación de que la cantidad de solvente o reactivo que precede al "*" se utiliza en la técnica un número de veces igual al número que sigue al "*".
°C = grados Celsius
1H RMN = espectro de resonancia magnética nuclear de protón
AcOH = ácido acético
Boc2O = anhídrido de ferc-butoxicarbonilo
con. = concentrado
d = doblete
DCM = diclorometano
DIAD = diisopropilazodicarboxilato
DIPEA = N,N-diisopropiletilamina
DMF = N,N-dimetilformamida
EA = acetato de etilo
ESI = ionización por electroatomización
g = gramo(s)
h = hora(s)
HATU = (1-[Bis(dimetilamino)metileno]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]piridinio 3-óxido hexafluorofosfato, Hexafluorofosfato de Azabenzotriazol Tetrametil Uronio
HPLC = cromatografía líquida de alto rendimiento
LCMS = cromatógrafo líquido-espectro de masas
M = masa
m/z = relación masa-carga
MeCN = acetonitrilo
MeOH = metanol
MeONa = metóxido de sodio
mg = miligramo(s)
mL = mililitro
mmol = milimol(es)
mol = mol(es)
MS = espectro de masas
NBS = N-bromosuccinimida
obs. = observado
PCy3 = triciclohexilfosfina
Pd(AcO)2 = acetato de paladio (II)
Pd(dppf)Cl2 = dicloruro de (1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno)paladio(II)
PE = éter de petróleo
ppm = partes por millón
PTSA = ácido para-toluenosulfónico
ta = temperatura ambiente
SFC = cromatografía de fluido supercrítico
s = singlete
t = triplete
TBAF = fluoruro de tetrabutilamonio
TFA = ácido trifluoroacético
THF = tetrahidrofurano
TLC = cromatografía de capa fina
Trixiefos = rac-2-(Di-terc-butilfosfino)-1,1'-binaftilo
Ejemplo 1 - Compuesto 1: 2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona
Paso A: 6,7,8,9-tetrahidro-4H-tieno[2,3-c]cromen-4-ona:
A una solución de 3-bromotiofeno-2-carboxilato de metilo (1.00 g, 4.52 mmol, 1.0 eq.), (5-difenilfosfanil-9,9-dimetil-xanten-4-il)-difenilfosfano (787 mg, 1.36 mmol, 0.3 eq.), carbonato de cesio (3.68 g, 11.30 mmol, 2.5 eq.), metabisulfito de sodio (172 mg, 0.90 mmol, 0.2 eq.) y tris(dibencilidenacetona)dipaladio (824 mg, 0.90 mmol, 0.20 eq.) en tolueno (40.0 mL) se añadió ciclohexanona (888 mg, 9.04 mmol, 2.0 eq.) a ta. Se agitó la mezcla de reacción a 105 °C durante 16 h bajo N2. El solvente se concentró a sequedad y se purificó el residuo mediante cromatografía instantánea (SO 2, 0 - 10% de EtOAc en PE) para proporcionar 6,7,8,9-tetrahidro-4H-tieno[2,3-c]cromen-4-ona (600 mg, 64%). MS obs. (ESI+): 207.0 [(M+H)+].
Paso B: 2-yodo-6, 7, 8,9-tetrahidro-4H-tieno[2, 3-c]cromen-4-ona:
A una solución de 6,7,8,9-tetrahidro-4H-tieno[2,3-c]cromen-4-ona (400 mg, 1.94 mmol, 1.0 eq.) en THF (15.0 mL) se añadió (diisopropilamino)litio (2 M en THF, 1.1 mL, 2.2 mmol, 1.1 eq.) a -78 °C. Se agitó la mezcla durante 30 min a -78 °C y, a continuación se añadió I2 (492 mg, 1.94 mmol, 1.0 eq.). Se agitó la mezcla durante 1 h a -78 °C y luego se detuvo la reacción con Na2SO3 acuoso (10mL) a 0 °C. Se sometió la mezcla a extracción con DCM (10 mL * 3) y Se lavaron las fases orgánicas combinadas con agua (20 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron. Se purificó el residuo mediante cromatografía instantánea en columna (SO 2, 0 - 10% de EtOAc en PE) para proporcionar 2-yodo-6,7,8,9-tetrahidro-4H-tieno[2,3-c]cromen-4-ona (300 mg, 46%). MS obs. (ESI+): 333.1 [(M+H)+].
Paso C: 2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8, 9-tetrahidro-4H-tieno[2,3-c]cromen-4-ona:
A una solución de 2-yodo-6,7,8,9-tetrahidro-4H-tieno[2,3-c]cromen-4-ona (300 mg, 903 |jmol, 1.0 eq.), 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-pirazol (175 mg, 900 jmol, 1.0 eq.), carbonato de sodio (287.18 mg, 2.71 mmol, 3.0 eq.) y diciclohexil-[2-(2,4,6-triisopropilfenil)fenil]fosfano (129 mg, 270.96 jmol, 0.3 eq.) en agua (2.0 mL) y 1,4-dioxano (10.0 mL) se añadió [1,1'-Bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio(II) (132 mg, 181 jmol, 0.20 eq.) a ta. Se agitó la mezcla durante 2 h a 110 °C en un reactor de microondas, luego se concentró y se purificó el residuo mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 0 - 50% de EtOAc en PE) para proporcionar 2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-4H-tieno[2,3-c]cromen-4-ona (230 mg, 93%). MS obs. (ESI+): 273.2 [(M+H)+].
Paso D: 2-(1H-pirazol-4-il)-6, 7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona(Compuesto 1):
A una solución de 2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-4H-tieno[2,3-c]cromen-4-ona (230 mg, 844.59 jmol, 1.0 eq.) en metanol (2.0 mL) se añadió amoníaco acuoso (6.0 mL, 28% p/p). Se agitó la mezcla durante 16 h a 120 °C en un tubo sellado. Después de enfriar a temperatura ambiente, se concentró la mezcla hasta sequedad. El residuo se disolvió en DMF y se purificó por HPLC preparativa para proporcionar 2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (14 mg, 6.0 %). MS obs. (ESI+): 272.1 [(M+H)+]; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 13.19 (s, 1H), 11.15 (s, 1H), 8.28 (brs, 1H), 7.96 (brs, 1H), 7.42 (s, 1H), 2.67 - 2.62 (m, 2H), 2.53 - 2.50 (m, 2H), 1.75 (s, 4H).
Ejemplo 2 - Compuesto 2: 1,8,8-trifluoro-2-(1H-pirazol-4-il)-5,6,7,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4-ona
Paso A: 3,5-dibromo-4-fluoro-tiofeno-2-carboxilato de metilo:
A una solución de 4-fluorotiofeno-2-carboxilato de metilo (1.00 g, 6.24 mmol, 1.0 eq.) en tetracloruro de carbono (5.0 mL) se añadió FeBr3 (1.29 g, 4.37 mmol, 1.0 eq.) y bromo (39.9 g, 250 mmol, 20.0 mL, 40.0 eq.) a 25 °C y se agitó la mezcla durante 16 h a 25 °C. Se concentró y purificó la mezcla mediante cromatografía instantánea en columna (SO 2, 0 - 15% de EtOAc en PE) para proporcionar 3,5-dibromo-4-fluoro-tiofeno-2-carboxilato de metilo (480 mg, 24.0 %). 1H RMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm: 3.91 (s, 3H).
Paso B: 3-bromo-4-fluoro-5-[1-(2-trímetilsililetoximetil)pirazol-4-il]tiofeno-2-carboxilato de metilo:
Se agitó a 25 °C durante 5 min bajo N2 una solución de acetato de paladio (II) (8 mg, 0.04 mmol, 0.05 eq.) y (5-difenilfosfanil-9,9-dimetil-xanten-4-il)-difenilfosfano (22 mg, 0.04 mmol, 0.05 eq.) en THF (10.0 mL). A la mezcla se le añadió 3,5-dibromo-4-fluoro-tiofeno-2-carboxilato de metilo (240 mg, 0.75 mmol, 1.0 eq.), trimetil-[2-[[4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)pirazol-1-il]metoxi]etil]silano (367 mg, 1.13 mmol, 1.5 eq.) y ortofosfato tripotásico (481 mg, 2.26 mmol, 3.0 eq.) y se agitó la mezcla durante 16 h a 60 °C bajo N2. Luego se concentró la mezcla al vacío y se la purificó mediante cromatografía instantánea en columna (SO 2, 0 - 30% de EtOAc en PE) para proporcionar 3-bromo-4-fluoro-5-[1-(2-trimetilsililetoximetil)pirazol-4-il]tiofeno-2-carboxilato de metilo (168 mg, 51%). MS obs. (ESI+): 79Br/81Br 435.3/437.3 [(M+H)+].
Paso C: 1,8,8-trifluoro-2-[1-(2-trimetilsililetoximetil)pirazol-4-il]-7,9-dihidro-6H-tieno[2,3-c]cromen-4-ona
A una solución de 3-bromo-4-fluoro-5-[1-(2-trimetilsililetoximetil)pirazol-4-il]tiofeno-2-carboxilato de metilo (464 mg, 1.07 mmol, 1.0 eq.) en tolueno (100.0 mL) se le añadió tris(dibencilidenoacetona)dipaladio (98 mg, 0.11 mmol, 0.10 eq.), 4,5-Bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno (93 mg, 0.16 mmol, 0.15 eq.), carbonato de cesio (1.0 g, 3.20 mmol, 3.0 eq.), metabisulfito de sodio (20 mg, 0.11 mmol, 0.1 eq.) y 4,4-difluorociclohexanona (429 mg, 3.20 mmol, 3.0 eq.). Se purgó la mezcla con N2, luego se calentó a 105 °C y se agitó durante 16 h. Se concentró la mezcla a sequedad y se purificó el residuo mediante cromatografía instantánea (SO 2, 0 - 30% de EtOAc en PE) para proporcionar el producto 1,8,8-trifluoro-2-[1-(2-trimetilsililetoximetil)pirazol-4-il]-7,9-dihidro-6H-tieno[2,3-c]cromen-4-ona (217 mg, 44%). MS obs. (ESI+): 457.3 [(M+H)+].
Paso D: 1,8,8-trifluoro-2-[1-(2-trimetilsililetoximetil)pimzol-4-il]-5,6,7,9-tetmhidrotieno[2,3-c]quinolin-4-ona:
A una solución de 1,8,8-trifluoro-2-[1-(2-trimetilsililetoximetil)pirazol-4-il]-7,9-dihidro-6H-tieno[2,3-c]cromen-4-ona (110 mg, 0.24 mmol, 1.0 eq.) en MeOH (5.0 mL) se añadió hidróxido de amonio (4.5 g, 128 mmol, 5.0 mL, 320 eq.) a 25 °C y se agitó la mezcla durante 8 h a 95 °C bajo irradiación de microondas. Se enfrió la solución y se la concentró para proporcionar 1, 8,8-trifluoro-2-[1-(2-trimetilsililetoximetil)pirazol-4-il]-5,6,7,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4-ona (109 mg, cruda), que se utilizó para el siguiente paso sin purificación adicional. MS obs. (ESI+): 456.3 [(M+H)+].
Paso E: 1,8,8-trifluoro-2-(1H-pirazol-4-il)-5, 6.7,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4-ona(Compuesto 2):
A una solución de 1,8,8-trifluoro-2-[1-(2-trimetilsililetoximetil)pirazol-4-il]-5,6,7,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4-ona (109 mg, 0.24 mmol, 1.0 eq.) en DCM (1.0 mL) se le añadió ácido 2,2,2-trifluoroacético (5.9 g, 52 mmol, 4.0 mL, 220 eq.) y se agitó la mezcla durante 1 h a 25 °C. Se concentró la mezcla a sequedad y se purificó el residuo mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 0 - 8 % de MeOH en DCM) para proporcionar un producto impuro. Se purificó el residuo aún más mediante cromatografía en columna de fase inversa (C18 SiO2, 0 - 40% MeCN, 0.1% de FA en agua) para proporcionar 1,8,8-trifluoro-2-(1H-pirazol-4-il)-5,6,7,9-tetrahidrotieno[2,3-c] quinolin-4-ona (22 mg, 28%). MS obs. (ESI+): 326.2 [(M+H)+].
Ejemplos 3 y 4 - Compuestos 3 y 4: (S)-6-hidroxi-2-(1H-pirazol-4-M)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]qumolm-4(5H)-ona (Compuesto 3) & (R)-6-hidroxi-2-(1H-pirazol-4-M)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]qumolm-4(5H)-ona (Compuesto 4) (la estereoquímica para los Compuestos 3 y 4 se asigna arbitrariamente)
Paso A: 2-benciloxicidohexanol:
Se añadió gota a gota BnOH (910 mg, 20 mmol, 2.0 eq.) a una suspensión agitada de NaH (820 mg, 21.4 mmol, 60% en aceite mineral, 2.0 eq.) en DMF anhidro (25 mL) a 0 °C. Se agitó la mezcla a 0 °C durante 1 hora antes de añadir 7-oxabiciclo[4.1.0]heptano (1.0 g, 10 mmol, 1.0 eq.). Se calentó la mezcla a 60 °C durante 2 h, luego se enfrió. Se añadió agua y se sometió la mezcla a extracción con EtOAc. Se lavaron con salmuera las capas orgánicas combinadas, se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 0 - 50% de EtOAc en PE) para dar 2-benciloxiciclohexanol (1.0 g, 48%). MS obs. (ESI+): 207.3 [(M+H)+].
Paso B: 2-benciloxiciclohexanona:
Se disolvió cloruro de oxalilo (738 mg, 5.82 mmol, 1.2 eq.) en DCM anhidro (5.0 mL) en atmósfera de nitrógeno y se enfrió a -78 °C. Se añadió gota a gota una solución de DMSO (909 mg, 11.6 mmol, 2.0 eq.) en DCM anhidro (5.0 mL) y se agitó la mezcla resultante durante 20 min. Se añadió gota a gota 2-Benciloxiciclohexanol (1.0 g, 4.85 mmol, 1.0 eq.) en DCM anhidro (5.0 mL) para formar un precipitado blanco. Se agitó la mezcla durante 30 min, se calentó a -60 °C y se añadió gota a gota trietilamina anhidra (2.5 g, 24 mmol, 3.4 mL, 1.0 eq.). La mezcla se mantuvo a -60 °C durante 5 min y luego se calentó a temperatura ambiente durante 2 h. La reacción se extinguió la reacción con H2O y se la sometió a extracción con EtOAc. Las capas orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 0 - 50% de EtOAc en PE) para proporcionar 2-benciloxiciclohexanona (770 mg, 78%). MS obs. (ESI+): 205.2 [(M+H)+].
Paso C: 6-(benciloxi)-6,7,8, 9-tetrahidrotieno[2,3-c]cromen-4-ona:
A una solución de 3-bromotiofeno-2-carboxilato de metilo (1.0 g, 4.5 mmol, 1.0 eq.) en tolueno (15 mL) se añadió 2-benciloxicidohexanona (1.4 g, 6.8 mmol, 1.5 eq.), tris(dibencilidenacetona)dipaladio (414 mg, 0.45 mmol, 0.1 eq.), 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno (785 mg, 1.36 mmol, 0.30 eq.), carbonato de cesio (3.0 g, 9.1 mmol, 2.0 eq.) y metabisulfito de sodio (170 mg, 0.90 mmol, 0.20 eq.). Se purgó la reacción con nitrógeno y se agitó durante 3 h a 105 °C. Se concentró la mezcla al vacío, y se purificó el residuo mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 0 - 50% de EtOAc en PE) para proporcionar 6-(benciloxi)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]cromen-4-ona (450 mg, 32%). MS obs. (ESI+): 313.3 [(M+H)+].
Paso D: 6-(benciloxi)-2-yodo-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]cromen-4-ona
A una solución de 6-benciloxi-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]cromen-4-ona (350 mg, 1.12 mmol, 1.0 eq.) y I2 (569 mg, 2.24 mmol, 2.0 eq. en THF (5.0 mL), se le añadió LDA (2 M en THF, 2.2 mL, 4.0 eq.) a -65 °C. Se agitó la mezcla a -65 °C durante 1 h y, a continuación, se extinguió la reacción con H2O y se sometió a extracción con EtOAc. Se lavaron con salmuera las capas orgánicas combinadas, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío, y se purificó el residuo mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 0 - 50 % de EtOAc en PE) para proporcionar 6-(benciloxi)-2-yodo-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]cromen-4-ona (300 mg, 61%). MS obs. (ESI+): 439.3 [(M+H)+].
Paso E : 6-(benciloxi)-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-4H-tieno[2,3-c]cromen-4-ona:
Se irradió una suspensión de trimetil-[2-[[4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)pirazol-1-il]metoxi]etil]silano (444 mg, 1.37 mmol, 1.2 eq.), 6-(benciloxi)-2-yodo-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]cromen-4-ona (500 mg, 1.10 mmol, 1.0 eq.), Pd(dppf)Ch (80 mg, 0.11 mmol, 0.1 eq.), X-Phos (104 mg, 0.22 mmol, 0.2 eq.) y Cs2CO3 (1.08 g, 3.30 mmol, 3.0 eq.) en una mezcla de 1,4-dioxano (15.0 mL) y H2O (5.0 mL), en un reactor de microondas a 110 °C durante 2 h. Se enfrió la mezcla y se la sometió a extracción con EtOAc. Se concentró la capa orgánica a sequedad y se purificó el residuo mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 0 - 70% de EtOAc en PE) para proporcionar 6-(benciloxi)-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-4H-tieno[2,3-c]cromen-4-ona (450 mg, 80%). MS obs. (ESI+): 509.7 [(M+H)+].
Paso F: 6-(benciloxi)-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona:
Se irradió una suspensión de 6-(benciloxi)-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-4H-tieno[2,3-c]cromen-4-ona (500 mg, 1.32 mmol, 1.0 eq.) en una mezcla de MeOH (7.0 mL) y amoníaco acuoso al 25% (7.0 mL) en un reactor de microondas a 100 °C durante 3 h. El sólido resultante se filtró, se lavó con MeOH y se secó para proporcionar 6-(benciloxi)-2-(1-((2-(trimetilsMM)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (250 mg, 50%). MS obs. (ESI+): 508.7 [(M+H)+]
Paso G: (S)-6-hidroxi-2-(1H-pirazol-4-il)-6, 7,8, 9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 3) y (R)-6-hidroxi-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona(Compuesto 4):
Se calentó a 70 °C durante 1 h una solución de 6-bencNoxi-2-[1-(2-trimetNsiNletoximetN)pirazol-4-N]-6,7,8,9-tetrahidro-5H-tieno[2,3-c]quinolin-4-ona (250 mg, 0.49 mmol, 1.0 eq.) en ácido trifluoroacético (10.0 mL). Se retiró el solvente y se añadió NH3 al residuo (7 M en MeOH, 5.0 mL). Se agitó la mezcla a ta durante 5 min, se concentró y se purificó el residuo mediante HPLC preparativa para proporcionar 6-hidroxi-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (60 mg, 40%). MS obs. (ESI+): 288.4 [(M+H)+].
Se separó el producto racémico mediante SFC quiral para proporcionar cada enantiómero. (S)-6-hidroxi-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 3): MS obs. (ESI+): 288.2 [(M+H)+]. (R)-6-hidroxi-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 4): MS obs. (ESI+): 288.2 [(M+H)+]; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 13.20 (s, 1H), 10.82 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 5.22 (d,J =5.6 Hz, 1H), 4.49 - 4.46 (m, 1H), 2.70 - 2.65 (m, 1H), 2.51 - 2.49 (m, 1H), 1.89 -1.82 (m, 2H), 1.78 - 1.69 (m, 2H).
Ejemplos 5 y 6 - Compuestos 5 y 6: (R)-6-(3,3-difluoropirroNdm-1-N)-2-(1H-pirazol-4-N)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 5) & (S)-6-(3,3-difluoropirroNdm-1-N)-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 6). (La estereoquímica para los Compuestos 5 y 6 se asigna arbitrariamente)
Paso A: 6-bmmo-2-(1H-pirazol-4-il)-6J,8,9-tetrahidmtiemo[2,3-c]quimoím-4(5H)-oma:
Se agitó una suspensión de 6-hidroxi-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-5H-tieno[2,3-c]quinolin-4-ona (120 mg, 0.41 mmol, 1.0 eq.) en TMSBr (8.0 mL) en un tubo sellado a 80 °C durante 6 h. Se retiró el solvente al vacío, y se utilizó el residuo directamente en el siguiente paso sin purificación adicional. MS obs. (ESI+): 302.4 [(M-Br+OCHs)+H)+].
Paso B: (R)-6-(3,3-difluoropirrolidim- 1-il)-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotiemo[2,3-c]quimolim-4(5H)-oma (Compuesto 5) y (S)-6-(3,3-difluoropirrolidim-1-il)-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotiemo[2,3-c]quimolim-4(5H)-oma(Compuesto 6 ):
Se agitó una suspensión de clorhidrato de 3,3-DifluoropirroMdina (1.9 g, 14 mmol, 20 eq.) yN,N-diisopropiletilamina (1.8 g, 13.88 mmol, 20.0 eq.) en MeCN (10.0 mL) a ta durante 2 h. Se filtró el sólido y se añadió el filtrado a un vial sellado que contenía 6-bromo-2-(IH-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-5H-tieno[2,3-c]quinolin-4-ona (200 mg, 0.69 mmol, 1.0 eq.). Al vial se añadió NaI (103 mg, 0.69 mmol, 1.0 eq.). Se agitó la mezcla a ta durante 16 h y luego se concentró al vacío, y se purificó el residuo mediante cromatografía instantánea en columna (SiÜ2, 0 -100% de EtOAc en PE) para proporcionar 6-(3,3-difluoropirrolidin-1-il)-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona racémica (60 mg, 19%). MS obs. (ESI+): 377.5 [(M+H)+].
Se separaron los enantiómeros individuales mediante SFC quiral. (R)-6-(3,3-difluoropirrolidin-1-il)-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 5): MS obs. (ESI+): 377.3 [(M+H)+]; 1 H RMN (400 MHz, DMSO-d6) S ppm: 13.20 (s, 1H), 10.53 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 3.73 (t,J =5.6 Hz, 1H), 3.06 - 2.93 (m, 2H), 2.87 - 2.78 (m, 2H), 2.68 - 2.62 (m, 2H), 2.30 - 2.22 (m, 2H), 1.98 - 1.95 (m, 1H), 1.84 - 1.77 (m, 2H), 1.74 - 1.71 (m, 1H). (S)-6-(3,3-difluoropirrolidin-1-il)-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 6 ): MS obs. (ESI+): 377.3 [(M+H)+].
Ejemplos 7 y 8 -Compuestos 7 y 8: 6-metoxi-2-(1H-pirazol-4-N)-6,7,8,9-tetrahidro-,9-etanotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 7) & 6-hidroxi-2-(1H-pirazol-4-N)-6,7,8,9-tetrahidro-6,9-etanotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 8).
Paso A: 6-metoxi-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-4H-6,9-etanotieno[2, 3-c]cromen-4-ona:
Se añadieron carbonato de cesio (230 mg, 720 ^mol, 3.0 eq.) y Sphos-Pd-G3 (37 mg, 48 ^mol, 0.2 eq.) a una solución de 3-bromo-5-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)tiofeno-2-carboxilato de metilo (100 mg, 240 ^mol, 1.0 eq.) y 1-metoxibiciclo[2,2,2¡octan-2-ona (74 mg, 480 ^mol, 2.0 eq., sintetizada de acuerdo con el procedimiento descrito en el documento WÜ2007070201) en tolueno (6.0 mL). Se calentó la mezcla a 105 °C bajo nitrógeno durante 8 h antes de concentrarla al vacío. Se purificó el residuo resultante mediante cromatografía instantánea en columna (SiÜ2, 0 - 25% de EtOAc en PE) para dar 6-metoxi-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-4H-6,9-etanotieno[2,3-c]cromen-4-ona (32 mg, 24%, 82% de pureza). MS obs. (ESI+): 459.4 [(M+H)+].
Paso B: 6-metoxi-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)- 1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-6,9-etanotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona:
A una solución de 6-metoxi-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-4H-6,9-etanotieno[2,3-c]cromen-4-ona (20 mg, 44 nmol, 1.0 eq.) en isopropanol (3.0 mL) se añadió amoníaco acuoso (17% p/p, 12.0 mL). Se agitó la mezcla a 60 °C durante 16 h, luego se concentró al vacío y se purificó mediante cromatografía instantánea en columna (SiO20 - 5% de MeOH en DCM) para proporcionar 6-metoxi-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-6,9-etanotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (10 mg, 24%, 48% de pureza). MS obs. (ESI+): 458.4 [(M+H)+].
Paso C: 6-metoxi-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-6,9-etanotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona(Compuesto7):
Se enfrió a 0 °C una solución de 6-metoxi-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-6,9-etanotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (28 mg, ~50% de pureza, 29 pmol, 1.0 eq.) en DCM (4.0 mL) antes de agregar ácido trifluoroacético (1.0 mL). Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 2 h y luego se concentró al vacío y se purificó por HPLC preparativa para proporcionar 6-metoxi-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-6,9-etanotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 7, 5 mg, 51%). MS obs. (ESI+): 328.1 [(M+H)+]; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 13.16 (s, 1H), 10.52 (s, 1H), 8.10 (s, 2H), 7.59 (s, 1H), 3.39 (s, 3H), 3.40 - 3.92 (m, 1H), 2.12 (t,J =10.4 Hz, 2H), 1.88 (t,J=10.4 Hz, 2H), 1.49 - 1.44 (m, 2H), 1.36 -1.31 (m, 2H).
Paso D: 6-hidroxi-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-6,9-etanotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona(Compuesto 8):
Se calentó a 100 °C durante 8 h una solución de 6-metoxi-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-6,9-etanotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (55 mg, 120 pmol, 1.0 eq) en HBr (40% ac., 5.0 mL). Se concentró la mezcla al vacío y se purificó por cromatografía en columna de fase inversa (C18 SiO2, 0 - 40% MeCN en agua, 0.1 % de NH4HCO3 en agua) para dar la 6-hidroxi-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-6,9-etanotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Ejemplo 8 , 16.2 mg, 31%). MS obs. (ESI+): 314.2 [(M+H)+]; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6 ) 5 ppm: 13.17 (s, 1H), 10.22 (s, 1H), 8.14 (brs, 2H), 7.58 (s, 1H), 5.72 (s, 1H), 3.30 (s, 1H), 1.84 - 1.80 (m, 4H), 1.43 (d,J=6.4 Hz, 4H).
Ejemplo 9 - Compuesto 9: 6-hidroxi-2-(piridin-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-6,9-etanotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona
Paso A: 3-bromo-5-(piridin-4-il)tiofeno-2-carboxilato de metilo:
Se añadió carbonato de cesio (210 mg, 680 |jmol, 2.0 eq.), Pd(dppf)Cl2 (240 mg, 330 |jmol, 1.0 eq.) y diciclohexil-[2-(2,4,6-triisopropilfenil)fenil]fosfano (160 mg, 330 jmol, 1.0 eq.) a una solución de 3,5-dibromotiofeno-2-carboxilato de metilo (100 mg, 330 jmol, 1.0 eq.) y ácido 4-piridilborónico (45 mg, 370 jmol, 1.1 eq.) en 1,4-dioxano (10.0 mL). Se desgasificó la mezcla con N2 dos veces antes de calentarla a 80 °C durante 1 h. Se concentró la mezcla al vacío, luego se purificó mediante cromatografía en columna (SO 2, 0 -25% de EtOAc en PE) proporcionó 3-bromo-5-(piridin-4-il)tiofeno-2-carboxilato de metilo (65 mg, 56%). MS obs. (ESI+): 298.0 [(M+H)+].
Paso B: 6-metoxi-2-(piridin-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-4H-6,9-etanotieno[2,3-c]cromen-4-ona:
Se añadieron carbonato de cesio (330 mg, 1.0 mmol, 3.0 eq.) y Sphos-Pd-G3 (52 mg, 67 jmol, 0.2 eq.) a una solución de 3-bromo-5-(4-piridil)tiofeno-2-carboxilato de metilo (100 mg, 340 jmol, 1.0 eq.) y 1-metoxibiciclo[2.2.2]octan-2-ona (100 mg, 670 jm ol, 2.0 eq.) en tolueno (4.0 mL). Se agitó la mezcla a 100 °C durante 16 h bajo nitrógeno, se concentró al vacío y se purificó mediante cromatografía instantánea en columna (SO 2, 0 - 10% de MeOH en DCM) para dar 6-metoxi-2-(piridin-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-4H-6,9-etanotieno[2,3-c]cromen-4-ona (21 mg, 16%, 82% de pureza). MS obs. (ESI+): 340.4 [(M+H)+].
Paso C: 6-metoxi-2-(piridin-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-4H-6,9-etanotieno[2,3-c]cromen-4-ona:
A una solución de 6-metoxi-2-(piridin-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-4H-6,9-etanotieno[2,3-c]cromen-4-ona (15 mg, 44.19 jmol, 1.0 eq.) en isopropanol (4.0 mL) se añadió una solución de amoníaco acuoso (25% p/p, 16.0 mL). Se agitó la mezcla a 60 °C durante 16 h y luego se concentró al vacío para dar 6-metoxi-2-(piridin-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-4H-6,9-etanotieno[2,3-c]cromen-4-ona (15 mg, cruda), que se usó sin purificación adicional. MS obs. (ESI+): 357.3 [(M+H)+].
Paso D: 6-metoxi-2-(piridin-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-6,9-etanotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona:
Se disolvió 3-(4-metoxi-3-oxobiciclo[2,2,2]octan-2-il)-5-(piridin-4-il)tiofeno-2-carboxamida cruda (30 mg) en tolueno (4.0 mL) y ácido p-toluenosulfónico (3 mg, 17 jmol, 0.20 eq). Se agitó la mezcla a 100 °C durante 1 h antes de añadir NaHCO3 (sat. ac. 10 mL). Se sometió la mezcla a extracción con EtOAc (3 x 15 mL) y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 y se filtró. La concentración al vacío proporcionó 6-metoxi-2-(piridin-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-6,9-etanotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (28 mg, cruda) que se usó sin purificación adicional. MS obs. (ESI+): 339.2 [(M+H)+].
Paso E: 6-hidroxi-2-(piridin-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-6,9-etanotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona(Compuesto 9):
Se calentó a 100 °C durante 16 h una solución de 6-metoxi-2-(piridin-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-6,9-etanotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (30 mg, 89 ^mol) en HBr (48 % ac., 4.0 mL), se concentró al vacío, y se purificó por HPLC preparativa para proporcionar 6-hidroxi-2-(piridin-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-6,9-etanotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 9, 11 mg, 38%). MS obs. (ESI+): 325.1 [(M+H)+]; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 10.59 (s, 1H), 8.68 - 8.67 (m, 2H), 8.23 (s, 1H), 7.82 - 7.81 (m, 2H), 5.76 (s, 1H), 3.43 - 3.41 (m, 1H), 1.85 - 1.78 (m, 4H), 1.46 - 1.43 (m, 4H).
Ejemplos 10 y 11 - Compuestos 10 y 11: (R)-4-metoxi-8-(1H-pirazol-4-N)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 10) y (S)-4-metoxi-8-(1H-pirazol-4-N)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 11) (la estereoquímica se asigna arbitrariamente)
Paso A: 4-metoxi-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)- 1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro- 1H;6H-pirano[4;3-b]tieno[3;2-d]piran-6-ona
A una solución de 3-bromo-5-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)tiofeno-2-carboxilato de metilo (300 mg, 0.72 mmol, 1.0 eq., preparado de manera análoga al compuesto 9 paso A) y 3-metoxitetrahidropiran-4-ona (190 mg, 1.4 mmol, 2.0 eq., síntesis descrita en el documento WO2005014537) en tolueno (7.0 mL) se añadió metabisulfito de sodio (14 mg, 72 ^mol, 0.1 eq.), Cs2CO3 (700 mg, 2.2 mmol, 3.0 eq.), Pd2(dba)3 (130 mg, 0.14 mmol, 0.2 eq.) y Xantphos (170 mg, 0.29 mmol, 0.4 eq.). Se agitó la mezcla a 100 °C durante 16 h, se concentró y se purificó por cromatografía en columna (SiO2, 0 - 25 % de EtOAc en PE) para proporcionar 4-metoxi-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (160 mg, 51%). MS obs. (ESI+): 435.4 [(M+H)+].
Paso B: 4-metoxi-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)- 1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro- 1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona:
Se agitó durante 2 h a ta una solución de 4-metoxi-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (160 mg, 0.37 mmol, 1.0 eq.) en ácido trifluoroacético/DCM 1:4 (10 mL). Se concentró la mezcla para dar 4-metoxi-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (112 mg, cruda) que se usó sin purificación adicional. MS obs. (ESI+): 305.2 [(M+H)+].
Paso C: (R)-4-metoxi-8-(1H-pirazol-4-il)- 1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 10) y (S)-4-metoxi-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidm-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]pirídin-6-ona(Compuesto 11):
Se agitó una solución de 4-metoxi-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metM)-1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona ( 110 mg, 1.0 eq) en NH4OH/MeOH=1 / 1 ( 10 mL) durante 6 h a 100 °C en un reactor de microondas. Se concentró la mezcla al vacío y se purificó por HPLC preparativa para proporcionar 4-metoxi-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona racémica (75 mg, 77%). MS obs. (ESI+): 304.2 [(M+H)+].
Se separaron los enantiómeros individuales mediante SFC quiral. (R)-4-metoxi-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 10): m S obs. (ESI+): 304.2 [(M+H)+]; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 13.23 (s, 1H), 11.53 (s, 1H), 8.30 (brs, 2H), 7.44 (s, 1H), 4.88 - 4.69 (m, 1H), 4.64 -4.46 (m, 1H), 4.18 (d,J= 12.0 Hz, 1H), 4.01 (s, 1H), 3.70 (d,J= 12.0 Hz, 1 H), 3.39 (s, 3 H). (S)-4-metoxi-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 11): MS obs. (ESI+): 304.2 [(M+H)+].
Ejemplos 12 y 13 - Compuestos 12 y 13: (S)-6-(azetidin-1-il)-8,8-difluoro-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 12) & (R)-6-(azetidin-1-il)-8,8-difluoro-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 13) (la estereoquímica se asigna arbitrariamente)
Paso A: 5,5-difluoro-2,2-dimetoxi-dclohexanol:
Se disolvieron 4,4-Difluorociclohexanona (4.0 g, 30 mmol, 1.0 eq.) y KOH (4.0 g, 72 mmol, 3.0 eq.) en MeOH (80.0 mL). Se enfrió la mezcla a 0 °C y se añadió gota a gota una solución de I2 (8.3 g, 33 mmol, 1.1 eq. en 100.0 mL de MeOH) durante 1 h. Se agitó la reacción a temperatura ambiente durante 18 h y se concentró al vacío,y el aceite se suspendió en 80 mL de DCM. Se filtró el precipitado y se concentró la solución para proporcionar 5,5-difluoro-2,2-dimetoxi-ciclohexanol crudo (4.2 g, crudo).
Paso B: (((5,5-difluoro-2,2-dimetoxidclohexil)oxi)metil)benceno
Se añadió hidruro de sodio (610 mg, 15 mmol, 60% en aceite mineral, 1.2 eq.) a una solución de BnBr (2.8 g, 17 mmol, 1.3 eq.) en DMF (30.0 mL) a 0 °C. Después de 30 min, se añadió 5,5-difluoro-2,2-dimetoxiciclohexanol (2.5 g crudo, 13 mmol, 1.0 eq.) y se agitó la mezcla durante 16 h a ta. Se vertió la mezcla en agua y se sometió a extracción con EtOAc (15 mL * 2). La capa orgánica se secó, se filtró, se concentró y se purificó mediante cromatografía en columna (Si2O, 0 - 12% de EtOAc en PE) para proporcionar (((5,5-difluoro-2,2-dimetoxiciclohexil)oxi)metil)benceno (3.2 g, 64%). 1H RMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm: 7.37 - 7.25 (m, 5H), 4.72 (d,J =12.0 Hz, 1H), 4.56 (d,J =12.0 Hz, 1H), 3.70 (t,J =8.0 Hz, 1H), 3.24 (s, 3H), 3.22 (s, 3H), 2.38 - 2.35 (m, 1H), 2.11 -1.74 (m, 5H).
Paso C: 2-(benciloxi)-4, 4-difluorociclohexan-l-ona:
A una solución de (((5,5-difluoro-2,2-dimetoxiciclohexil)oxi)metil)benceno (2.2 g, 7.7 mmol, 1.0 eq.) en acetona (60.0 mL) se añadió I2 (195 mg, 768 jmol, 0.1 eq.). Después de 30 min, se añadió Na2S2O3 (sat. ac.) y se sometió a extracción la fase acuosa con DCM (15 mL * 3). Se lavaron las fases orgánicas combinadas con Na2S2O3 (sat. ac.), se filtró y se concentró. La purificación por cromatografía en columna (SO 2, 0 - 8% de EtOAc en PE) proporcionó 2-(benciloxi)-4,4-difluorociclohexan-1-ona (1.3 g, 70%). 1H RMN (400 MHz, CDCh): 8 ppm: 7.36 -7.25 (m, 5H), 4.85 (d,J =11.2 Hz, 1H), 4.51 (d,J =11.2 Hz, 1H), 4.15 -4.11 (m, 1H), 2.75 -2.14 (m, 6 H).
Paso D: 6-(benciloxi)-8,8-difluoro-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-4H-tieno[2,3-c]cromen-4-ona:
A una solución de 3-bromo-5-[1-(2-trimetilsililetoximetil)pirazol-4-il]tiofeno-2-carboxilato de metilo (400 mg, 960 |jmol, 1.0 eq.) y 2-(benciloxi)-4,4-difluorociclohexan-1-ona (460 mg, 1.9 mmol, 2.0 eq.) en tolueno (80.0 mL) se añadió Cs2CO3 (940 mg, 2.9 mmol, 3.0 eq.), Pd2(dba)3 (180 mg, 190 jmol, 0.2 eq.), Xantphos (170 mg, 270 jmol, 0.3 eq.) y Na2S2O5 (54 mg, 290 jmol, 0.3 eq.). Se agitó la mezcla y se calentó a 105 °C durante 16 h. Se enfrió, se filtró y se concentró la mezcla, y se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice (SiO2, 0 - 28% de EtOAc en PE) proporcionó 6-(benciloxi)-8,8-difluoro-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-4H-tieno[2,3-c]cromen-4-ona (360 mg, 55%). MS obs. (ESI+): 545.3 [(M+H)+].
Paso E: 6-(benciloxi)-8,8-difluoro-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona:
A una solución de 6-(benciloxi)-8,8-difluoro-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-4H-tieno[2,3-c]cromen-4-ona (150 mg, 200 jmol, 1.0 eq.) en MeOH (8.0 mL) se añadió amoníaco acuoso (30% p/p, 8.0 mL). Se calentó la mezcla en un reactor de microondas a 95 °C durante 8 h y luego se enfrió. Se sometió la mezcla a extracción con DCM (10 mL * 3) y las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. La purificación por cromatografía en columna (SÍO2, 0 - 4% de MeOH en DCM) dio 6-(benciloxi)-8,8-difluoro-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (90 mg, 69%). MS obs. (ESI+): 544.4 [(M+H)+].
Paso F: 8,8-difluoro-6-hidroxi-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona:
Se enfrió a 0 °C una solución de 6-(benciloxi)-8,8-difluoro-2-(1 -((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (200 mg, 367 ^mol, 1.0 eq.) en DCM (12.0 mL) y se añadió BCh (1 M en n-hexano, 3.68 mL, 3.68 mmol, 10 eq.). Después de 1 h a 0 °C, se añadió MeOH (3.0 mL) y se concentró la solución para proporcionar un sólido. Trituración (1:1 W-hexano/MeOH) proporcionó 8,8-difluoro-6-hidroxi-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (110 mg, 92% de rendimiento) de suficiente pureza para el siguiente paso. MS obs. (ESI+): 324.1 [(M+H)+].
Paso G: (R)-6-(azetidim-1-il)-8,8-difluoro-2-(1H-pirazol-4-il)-6, 7,8, 9-tetrahidrotiemo[2, 3-c]quimolim-4(5H)-oma (Compuesto 12) y (S)-6-(azetidin-1-il)-8,8-difluoro-2-(1H-pirazol-4-il)-6, 7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-oma(Compuesto 13):
A 8,8-difluoro-6-hidroxi-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (70 mg, 190 ^mol, 1.0 eq.) se le añadió lentamente SOCh (2.5 g, 21 mmol, 1.5 mL, 11 eq.) a ta. Después de 4 h, se concentró la mezcla. El concentrado, que contenía 6-cloro-8,8-difluoro-2-(1H-pirazol-4-il)-5,6,7,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4-ona, se disolvió en MeCN (3.0 mL) y se añadieron KI (241 mg, 1.45 mmol, 10.0 eq.) y azetidina (170 mg, 2.9 mmol, 20 eq.). Se agitó la mezcla durante 12 h a ta antes de concentrarla y purificarla mediante cromatografía de fase inversa para proporcionar 6-(azetidin-1-il)-8,8-difluoro-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (34 mg, 55%, 85% de pureza). m S obs. (ESI+): 363.3 [(M+H)+].
Se separaron los enantiómeros individuales mediante SFC quiral. (R)-6-(azetidin-1-il)-8,8-difluoro-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 12): MS obs. (ESI+): 363.4 [(M+H)+]. (S)-6-(azetidin-1-il)-8,8-difluoro-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 13): MS obs. (ESI+): 363.3 [(M+H)+].
Ejemplos 14 y 15 - Compuestos 14 y 15: (S)-8,8-difluoro-6-(hidroximetN)-6-metil-2-(1H-pirazol-4-N)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 14) & (R)-8,8-difluoro-6-(hidroximetN)-6-metM-2-(1H-pirazol-4-M)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]qumolm-4(5H)-ona (Compuesto 15) (la estereoquímica se asigna arbitrariamente)
Paso A: 5,5-difluoro-2-hidroxiciclohex-1-eno-1-carboxilato de metilo:
Se añadió una solución de 4,4-difluorociclohexanona (2.0 g, 15 mmol, 1.0 eq.) en DMF (4.0 mL) a una suspensión a 0 °C de NaH (430 mg, 18 mmol, 60% en aceite mineral, 1.2 eq.) en DMF (13.0 mL). Después de 30 min a 0 °C, se añadió una solución de carbonato de dimetilo (1.6 g, 18 mmol, 1.5 mL, 1.2 eq.) en DMF (3.0 mL) y se agitó la mezcla a ta durante 16 h antes de añadir NH4Cl (sat. ac.). La mezcla se diluyó con agua (10 mL) y se sometió a extracción con DCM (20 mL * 3). Las capas orgánicas combinadas se secaron (Na2SO4), concentraron al vacío y purificaron por cromatografía en columna (SiO2, 0 - 8% de EtOAc en PE) para proporcionar 5,5-difluoro-2-hidroxiciclohex-1-eno-1-carboxilato de metilo (2.0 g, 70%). 1H RMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm: 12.17 (s, 1H), 3.78 (s, 3H), 2.74 (t,J =14.4 Hz, 2H), 2.55 (t,J =6.8 Hz, 2H), 2.17 -2.07 (m, 2H).
Paso B: 5,5-difluom-1-metil-2-oxoddohexano-1-carboxilato de metilo:
A un matraz que contenía 5,5-difluoro-2-hidroxiciclohex-1-eno-1-carboxilato de metilo (1.0 g, 6.4 mmol, 1.0 eq.) en acetona (12.0 mL) se añadió K2CO3 (2.7 g, 19 mmol, 3.0 eq.) y yodometano (2.7 g, 19 mmol, 3.0 eq.) a temperatura ambiente. Se calentó la mezcla a 50 °C y se agitó durante 3 horas antes de agregar agua. Se sometió la mezcla a extracción con t-butil metil éter (30 mL * 3), y se lavaron con agua, salmuera las capas orgánicas combinadas y se secaron (Na2SO4). La filtración, concentración al vacío, y purificación por cromatografía en columna (SO 2, 0 -15% de EtOAc en PE) proporcionó 5,5-difluoro-1-metil-2-oxociclohexano-1-carboxilato de metilo (800 mg, 66%). 1H RMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm: 3.76 (s, 3H), 3.09 - 2.88 (m, 2H), 2.61 - 2.54 (m, 1H), 2.46 - 2.35 (m, 1H), 2.26 - 1.98 (m, 2H), 1.37 (d,J=0.8 Hz, 3H).
Paso C: 8,8-difluoro-6-metil-4-oxo-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-4H-tieno[2,3-c]cromeno-6-carboxilato de metilo:
A una solución de 3-yodo-5-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)tiofeno-2-carboxilato de metilo (200 mg, 430 pmol, 1.0 eq.) y 5,5-difluoro-1-metil-2-oxociclohexano-1-carboxilato de metilo (180 mg, 860 pmol, 2.0 eq.) en tolueno (12.0 mL) se añadió Cs2CO3 (420 mg, 1.3 mmol, 3.0 eq.), Pd2(dba)3 (79 mg, 86 pmol, 0.2 eq.), Xantphos (74 mg, 130 pmol, 0.30 eq.) y Na2S2O5 (16 mg, 86 pmol, 0.2 eq.). Se calentó la mezcla en un reactor de microondas a 105 °C durante 2 h antes de enfriarla, concentrarla y purificarla (SO 2, 0 - 32% de EtOAc en PE). El material se purificó aún más mediante cromatografía de fase inversa para dar 8,8-difluoro-6-metil-4-oxo-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-4H-tieno[2,3-c]cromeno-6-carboxilato de metilo (100 mg, 46%). MS obs. (ESI+): 511.4 [(M+H)+].
Paso D : 8,8-difluoro-6-(hidroximetil)-6-metil-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-4H-tieno[2,3-c]cromen-4-ona:
eq.) A una solución enfriada (0°C) de 8,8-difluoro-6-metil-4-oxo-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-4H-tieno[2,3-c]cromeno-6-carboxilato de metilo (100 mg, 200 pmol, 1.0 eq.) en EtOH (12.0 mL) se le añadió CaCh (45 mg, 410 pmol, 2.0 eq.). Después de 10 min, se añadió NaBH4 (116 mg, 3.08 mmol, 15.0 eq.) y se retiró el baño de hielo. Se agitó la mezcla durante 20 min a ta antes de enfriarla a 0 °C y se añadió NH4O (sat. ac.). Se sometió la mezcla a extracción con DCM (10 mL x 3) y las fases orgánicas combinadas se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron. La purificación por cromatografía en columna (SiO20 - 70% de EtOAc en PE) proporcionó 8,8-difluoro-6-(hidroximetil)-6-metil-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-4H-tieno[2,3-c]cromen-4-ona (55 mg, 48%). MS obs. (ESI+): 483.4 [(M+H)+].
Paso E: 8,8-difíuoro-6-(hidroximetil)-6-metil-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6J,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona:
A una solución de 8,8-difluoro-6-(hidroximetil)-6-metil-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-4H-tieno[2,3-c]cromen-4-ona (98 mg, 200 ^mol, 1.0 eq.) en MeOH (5.0 mL) se añadió amoníaco acuoso (5.0 mL, 30% p/p). Se calentó la mezcla en un reactor de microondas a 95 °C durante 8 h. Se concentró y purificó la mezcla mediante cromatografía en columna (SiO20 - 7% de MeOH en DCM) para dar 8 ,8-difluoro-6-(hidroximetil)-6-metil-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (68 mg, 56%). MS obs. (ESI+): 482.4 [(M+H)+].
Paso F : (S)-8,8-difíuoro-6-(hidroximetil)-6-metil-2-(1H-pirazol-4-il)-6J,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]qumolin-4(5H)-ona (Compuesto 14) y (R)-8,8-difluoro-6-(hidrüximetil)-6-metil-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrvtieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona(Compuesto 15):
A una solución enfriada (0°C) de 8,8-difluoro-6-(hidroximetil)-6-metil-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (43 mg, 89 ^mol) en DCM (4.0 mL) se añadió ácido Trifluoroacético (2.0 mL). Se calentó la mezcla a ta y se agitó durante 2 h antes de concentrarla al vacío y se purificó por cromatografía de fase inversa para proporcionar 8,8-difluoro-6-(hidroximetil)-6-metil-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (22 mg, 69%). MS obs. (ESI+): 352.0 [(M+H)+]; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 ppm 13.22 (s, 1H), 10.86 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 5.23 (s, 1H), 3.84 (d,J =10.8 Hz, 1H), 3.41 (d,J =10.4 Hz, 1H), 3.29 -3.13 (m, 2H), 2.58 -2.46 (m, 1H), 2.03 - 1.94 (m, 1H), 1.30 (s, 3H).
Se separaron los enantiómeros individuales mediante SFC quiral para proporcionar cada enantiómero. (S)-8 ,8-difluoro-6-(hidroximetil)-6-metil-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 14): MS obs. (ESI+): 352.1 [(M+H)+]. (R)-8,8-difluoro-6-(hidroximetil)-6-metil-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 15): MS obs. (ESI+): 352.1 [(M+H)+].
Ejemplos 16 y 17 - Compuestos 16 y 17: (S)-4-hidroxi-4-isopropil-8-(1H-pirazol-4-N)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 16) y (R)-4-hidroxi-4-isopropii-8-(1H-pirazol-4-N)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridm-6-ona (Compuesto 17)
Paso A: 4-(bendloxi)-8-(1-((2-(trímetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-3, 4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona:
A una solución de 3-bromo-5-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)tiofeno-2-carboxilato de metilo (5.0 g, 12 mmol, 1.0 eq.) y 3-(benciloxi)tetrahidro-4H-piran-4-ona (4.9 g, 24 mmol, 2.0 eq.) en 1,4-dioxano (600 mL) se añadió Na2S2O5 (228 mg, 1.20 mmol, 0.1 eq.), Cs2CO3 (12 g, 36 mmol, 3.0 eq.), Pd2(dba)3 (2.19 g, 2.40 mmol, 0.20 eq.) y Xantphos (2.8 g, 4.8 mmol, 0.40 eq.). Se desgasificó la mezcla con N2 dos veces, luego se agitó y se calentó a 100 °C durante 16 h. Se filtró la mezcla y se concentró al vacío, y se purificó mediante cromatografía instantánea en columna (SO 2, 0 - 60% de EtOAc en PE) para dar 4-(benciloxi)-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (3.5 g, rendimiento del 38%, pureza del 81%). MS obs. (ESI+): 511.5 [(M+H)+].
Paso B: 4-(benciloxi)-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona:
Se agitó a 100 °C durante 6 h con calentamiento por microondas, una solución de 4-(benciloxi)-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (1.00 g, 1.6 mmol, 81% de pureza, 1.0 eq.) y NH4OH (6 mL) en MeOH (6.0 mL). Se concentró la mezcla al vacío para dar el residuo, que se purificó mediante cromatografía instantánea en columna (SO 2, 0 -10% de MeOH en DCM) para dar 4-(benciloxi)-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-1,3,4, 5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (560 mg, 68 %). MS obs. (ESI+): 510.2 [(M+H)+].
Paso C: 4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona:
A una solución de 4-(benciloxi)-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (300 mg, 590 jmol, 1.0 eq.) en DCM (2.0 mL) se le añadió BCh (1 M en hexano, 5.9 mL, 10 eq.). Se agitó la mezcla a 0 °C durante 15 min y luego se concentró al vacío para proporcionar 4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (170 mg, cruda) que se usó en la siguiente reacción sin purificación adicional. MS obs. (ESI+): 290.0 [(M+H)+].
Paso D: 4-(4-hidroxi-6-oxo-3,4,5,6-tetrahidro-1H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-8-il)-1H-pirazol-1-carboxilato de terc-butilo:
A una suspensión de 4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (170 mg, cruda) en DMF (2.0 mL) se añadió trimetilamina (119 mg, 1.18 mmol, 2.0 eq.), DmAP (36 mg, 290 |jmol, 0.5 eq.) y (Boc)2O (130 mg, 590 jmol, 1.0 eq.). Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 10 min, luego se vertió en agua y se sometió a extracción con EtOAc/THF (10:1, 15 mL * 2). Las capas orgánicas combinadas se secaron, se filtraron, se concentraron y se purificaron mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 0 - 10% de MeOH en DCM) para proporcionar 4-(4-hidroxi-6-oxo-3,4,5,6-tetrahidro-1H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-8-il)-1H-pirazol-1-carboxilato de terc-butilo (130 mg, 56% en 2 pasos). MS obs. (ESI+): 390.0 [(M+H)+].
Paso E: 4-(4,6-dioxo-3,4,5,6-tetrahidro- 1H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-8-il)-IH-pirazol- 1-carboxilato de tercbutilo:
Se añadió peryodinano de Dess-Martin (425 mg, 1.00 mmol, 3.0 eq.) a una solución de 4-(4-hidroxi-6-oxo-3,4,5,6-tetrahidro-1H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-8-il)-1H-pirazol-1-carboxilato de terc-butilo (130 mg, 334 pmol, 1.0 eq.) en DCM (3.0 mL) y DMF (3.0 mL) a 0 °C. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 2 h y, a continuación, se añadió Na2S2O3 (ac) saturado y NaHCO3 (ac) junto con agua (10 mL). Se sometió la mezcla a extracción con DCM/MeOH (10:1,20 mL * 3) y las capas orgánicas combinadas se secaron, filtraron, concentraron y purificaron mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 0 -10% de MeOH en DCM) para dar 4-(4,6-dioxo-3,4,5,6-tetrahidro-1H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-8-il)-1H-pirazol-1-carboxilato de terc-butilo (70 mg, 54%). MS obs. (ESI+): 388.0 [(M+H)+].
Paso F: (S)-4-hidroxi-4-isopropil-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 16) y (R)-4-hidroxi-4-isopropil-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona(Compuesto 17):
A una solución de 4-(4,6-dioxo-3,4,5,6-tetrahidro-1H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-8-il)-1H-pirazol-1-carboxilato de terc-butilo (1.96 g, 5.06 mmol, 1.0 eq.) en THF anhidro (6.0 mL) se añadió i-PrMgCl-LiCl (1.3 M en THF, 80 mL, 20 eq.). Se agitó la mezcla a 0 °C durante 30 min, luego se extinguió la reacción con NH4Cl acuoso saturado y se sometió a extracción con EtOAc/THF (10:1, 30 mL * 2). Las capas orgánicas combinadas se secaron, se filtraron, se concentraron y se purificaron mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 0 - 10% de MeOH en DCM) para proporcionar 4-hidroxi-4-isopropil-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona racémica (680 mg, 41%). MS obs. (ESI+): 332.0 [(M+<h>)+].
Se separaron los enantiómeros individuales mediante SFC quiral. (S)-4-hidroxi-4-isopropil-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 16): MS obs. (ESI+): 332.0 [(M+H)+]; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 5 ppm: 13.22 (s, 1H), 10.81 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 5.25 (s, 1H), 4.67 (s, 2H), 3.96 (d,J =11.6 Hz, 1H), 3.53 (d,J =11.6 Hz, 1H), 2.41 - 2.34 (m, 1H), 1.00 (d,J =6.8 Hz, 3H), 0.76 (d,J =6.8 Hz, 3H). (R)-4-hidroxi-4-isopropil-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 17): MS obs. (ESI+): 332.0 [(M+H)+].
Ejemplos 18 y 19 - Compuestos 18 y 19: (S)-4-etN-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-N)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 18) & (R)-4-etil-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 19)
A una solución de 4-(4,6-dioxo-3,4,5,6-tetrahidro-1H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-8-il)-1H-pirazol-1-carboxilato de terc-butilo (180 mg, 460 ^mol) en THF anhidro (2.0 mL), se añadió EtMgCl (2 M en T<h>F, 12.0 mL, 52 eq.) y se agitó la mezcla a 0 °C durante 1 h. Se extinguió la mezcla con NH4Cl saturado (ac) y se sometió a extracción con EtOAc:THF (10:1, 30 mL x 2). Las capas orgánicas combinadas se secaron, se filtraron, se concentraron y se purificaron mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 0 - 10% de MeOH en DCM) para proporcionar 4-etil-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6 -ona racémica (60 mg, 41%). MS obs. (ESI+): 318.1 [(M+H)+].
Se separaron los enantiómeros individuales mediante SFC quiral. (S)-4-etil-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 18): MS obs. (ESI+): 318.0 [(M+H)+]; 1H RM<n>(400 MHz, DMSO-CÍ6) 5 ppm: 13.22 (s, 1H), 10.88 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.40 (s, 1H), 5.28 (s, 1H), 4.86 -4.49 (m, 2H), 3.85 (d,J =11.2 Hz, 1H), 3.54 (d,J =11.2 Hz, 1H), 2.00 -1.79 (m, 2H), 0.85 (t,J =7.6 Hz, 3H). (R)-4-etil-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 19): MS obs. (ESI+): 318.0 [(M+H)+].
Ejemplos 20 y 21 - Compuestos 20 y 21: (S)-4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro-1H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridina-6(5H)-ona (Compuesto 20) & (R)-4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro-1H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridma-6(5H)-ona (Compuesto 21). (La estereoquímica para los Compuestos 20 y 21 se asigna arbitrariamente)
A una solución de terc-butil 4-(4,6-dioxo-3,4,5,6-tetrahidro-1H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-8-il)-1HSe añadió -pirazol-1-carboxilato (50 mg, 0.13 mmol, 1.0 eq.) en THF anhidro (4.0 mL). t-BuMgCl (1 M en THF, 3.9 mL, 30 eq.) a 0 °C. Se agitó la mezcla a 0 °C durante 0.5 h. Se extinguió la mezcla con NH3 acuoso saturado.4Solución de Cl (10 mL) y extraída con EtOAc (20 mL x 3). Se lavaron con salmuera las capas orgánicas combinadas, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 0 - 10% de MeOH en DCM) para proporcionar 4-( racémicotercbutil)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro-1H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridina-6(5H)-ona (10 mg, 23%). MS obs. (ESI+): 346.5 [(M+H)+].
Se separaron los enantiómeros individuales mediante SFC quiral. (S)-4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro-1H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridina-6(5H)-ona (Compuesto 20): MS obs. (ESI+): 346.1 [(M+H)+]; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 13.23 (s, 1H), 10.02 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.40 (s, 1H), 5.32 (s, 1H), 4.80 (m, 2H), 4.14 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 3.46 (d,J =11.6 Hz, 1H), 1.03 (s, 9H). (R)-4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro-1H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridina-6(5H)-ona (Compuesto 2 1 ): MS obs. (ESI+): 346.1 [(M+H)+].
Ejemplos 22 y 23 - Compuestos 22 y 23: (S)-4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(piridm-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 22) & (R)-4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(piridm-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 23) (La estereoquímica para los Compuestos 22 y 23 se asigna arbitrariamente)
A una solución de 3-bromo-5-(4-piridil)tiofeno-2-carboxilato de metilo (1.0 g, 3.4 mmol, 1.0 eq.) y 3-benciloxitetrahidropiran-4-ona (1.4 g, 6.7 mmol, 2.0 eq.) en tolueno (50.0 mL) se añadió Cs2CO3 (2.2 g, 6.71 mmol, 2.0 eq.), Pd2(dba)3 (614 mg, 0.67 mmol, 0.2 eq.), Xantphos (582 mg, 1.01 mmol, 0.3 eq.) y Na2S2O5 (64 mg, 0.34 mmol, 0.1 eq.) a temperatura ambiente bajo atmósfera de N2. Se agitó la mezcla a 105 °C durante 16 h, se enfrió, se filtró y se concentró al vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía instantánea (SO 2, 0 - 10% de MeOH en DCM) para proporcionar 4-(benciloxi)-8-(piridin-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (457 mg, 32%). MS obs. (ESI+): 392.1 [(M+H)+].
Paso B: 4-(bendloxi)-8-(piridin-4-il)- 1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona:
A una solución de 4-(benciloxi)-8-(piridin-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (1.0 g, 2.55 mmol, 1.0 eq.) en MeOH (9.0 mL) se añadió NH4OH (9.0 mL). Se calentó la mezcla en un reactor de microondas a 100 °C durante 3 h y se controló mediante LCMS hasta su finalización. Se filtró la mezcla y se lavó la torta de filtración con MeOH (50.0 mL) y se secó al vacío para proporcionar 4-(benciloxi)-8-(piridin-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (512 mg, 50%). MS obs. (ESI+): 391.2 [(M+H)+].
Paso C: 4-hidroxi-8-(piridin-4-il)- 1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona:
A una solución de 4-(benciloxi)-8-(piridin-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (475 mg, 1.22 mmol, 1.0 eq.) en Dc M (12.0 mL) se añadió BCl3 (1 M en DCM, 12.2 mL, 10.0 eq.). Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 1 h y luego se extinguió la reacción con NaHCO3 ac. (24.0 mL) y se diluyó con EtOAc (25.0 mL). Se filtró la mezcla y se lavó la torta de filtración con EtOAc (25.0 mL) y se secó al vacío para proporcionar 4-hidroxi-8-(piridin-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (360 mg, 92%). MS obs. (ESI+): 301.0 [(M+H)+].
Paso D: 8-(piridin-4-il)-1,5-dihidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridina-4,6(3H)-diona:
A una solución de 4-hidroxi-8-(piridin-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (10 mg, 0.033 mmol, 1.0 eq.) en DCM (1.0 mL) y Dm F (1.0 mL) se añadió peryodinano de Dess-Martin (140 mg, 0.333 mmol, 10 eq.). Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 2 h y luego se extinguió la reacción con solución acuosa saturada de NaHCO3 (2.0 mL) y se sometió a extracción con EtOAc (10 mL x 2). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. Se purificó el residuo mediante cromatografía en gel de sílice (SiO2, 1 - 30 % de MeOH en DCM) para proporcionar 8-(piridin-4-il)-1,5-dihidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridina-4,6(3H)-diona (6 mg, 60%). MS obs. (ESI+): 299.3 [(M+H)+].
Paso E: (S)-4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(pirídin-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]pirídin-6-ona (Compuesto 22) & (R)-4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(piridin-4-il)-1, 3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona(Compuesto 23):
A una solución de 8-(piridin-4-il)-1,5-dihidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridina-4,6(3H)-diona (25 mg, 0.08 mmol, 1.0 eq.) en THF anhidro (1.5 mL) se añadió t-BuMgBr (1 M en THF, 1.7 mL, 20.0 eq.) a 0 °C. Se agitó la mezcla a 0 °C durante 2 h. Se extinguió la mezcla con solución acuosa saturada de NH4Cl (2.0 mL), se sometió a extracción con EtOAc (20.0 mL * 3). Se lavaron con salmuera las capas orgánicas combinadas, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 0 - 10% de MeOH en DCM) para proporcionar 4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(piridin-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona racémica (5 mg, 17%). MS obs. (ESI+): 357.1 [(M+H)+].
Se separaron los enantiómeros individuales mediante SFC quiral. (S)-4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(piridin-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 22): MS obs. (ESI+): 357.2 [(m H)+]; 1H RMN (400 MHz, DMSO-de) 5 ppm: 10.35 (s, 1H), 8.70 (d,J= 6.0Hz, 2H), 8.03 (s, 1H), 7.82 (d,J= 6.0 Hz, 2H), 5.35 (s, 1H), 4.87 (m, 2H), 4.15 (d,J =11.2 Hz, 1H), 3.47 (d,J= 11.2 Hz, 1H), 1.03 (s, 9H). (R)-4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(piridin-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 23): MS obs. (ESI+): 357.2 [(M+H)+].
Ejemplos 24 y 25 - Compuestos 24 y 25: (S)-4-hidroxi-4-isopropM-8-(3-metiMH-pirazol-4-N)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 24) & (R)-4-hidroxi-4-isopropN-8-(3-metiMH-pirazol-4-M)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridm-6-ona (Compuesto 25) (La estereoquímica para los Compuestos 24 y 25 se asigna arbitrariamente)
Sintetizado por ruta análoga a los Compuestos 16 y 17. (S)-4-hidroxi-4-isopropil-8-(3-metil-1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 24). m S obs. (ESI+): 346.2 [(M+H)+]; 1H RMN (400 MHz, DMSO-de) 5 ppm: 12.94 (brs, 1H), 10.81 (brs, 1H), 7.96 (brs, 1H), 7.29 (s, 1H), 5.27 (s, 1H), 4.69 (s, 2H), 3.96 (d,J= 11.8 Hz, 1H), 3.53 (d,J= 11.6 Hz, 1H), 2.48 (s, 3H), 2.40 -2.34 (m, 1H), 1.00 (d,J= 6.8 Hz, 3H), 0.76 (d,J= 6.8 Hz, 3H). (R)-4-hidroxi-4-isopropil-8-(3-metil-1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 25). MS obs. (ESI+): 346.2 [(M+H)+].
Ejemplos 26 y 27 - Compuestos 26 y 27: (R)-8-(3-fluoro-1H-pirazol-4-M)-4-hidroxi-4-isopropiM,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 26) & (S)-8-(3-fluoro-1H-pirazol-4-M)-4-hidroxi-4-isopropil-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 27) (La estereoquímica para los Compuestos 26 y 27 se asigna arbitrariamente)
Paso A: 4-bromo-3-fluoro- 1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol:
A una solución de 4-bromo-3-fluoro-1H-pirazol (1.5 g, 9.1 mmol, 1.0 eq.) en DMF (15 mL) se añadió hidruro de sodio (60% en aceite mineral, 700 mg, 18 mmol, 2.0 eq.) a 0 °C. Se agitó la mezcla a 0 °C durante 10 min., a continuación, se añadió 2-(clorometoxi)etil-trimetil-silano (2.27 g, 13.6 mmol, 2.41 mL, 1.5 eq.). Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 2 h y luego se extinguió la reacción mediante la adición de NH4Cl (ac) saturado seguido de agua (200 mL). Se sometió la mezcla a extracción con EtOAc (50 mL * 3) y se lavaron con salmuera las fases orgánicas combinadas, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío para dar el residuo, que se purificó mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 0 - 4% de EtOAc en PE) para proporcionar 4-bromo-3-fluoro-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol (2.6 g, 96%); 1H RMN (400 MHz, CDCb) 5 ppm: 7.45 (d,J= 2.0 Hz, 1H), 5.24 (d,J= 0.8 Hz, 2H), 3.58 (m, 2H), 0.92 (m, 2H), 0.00 (s, 9H).
Paso B: 3-fluoro-4-(4, 4,5, 5-tetrametil-1, 3, 2-dioxaborolan-2-il)-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol:
Se calentó a 100 °C bajo nitrógeno durante 16 h una mezcla de 4-bromo-3-fluoro-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol (850 mg, 2.88 mmol, 1.0 eq.), 4,4,5,5-tetrametil-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,3,2-dioxaborolano (804 mg, 3.17 mmol, 1.1 eq.), Pd(dppf)Cl2 (421 mg, 576 ^mol, 0.2 eq.) y acetato de potasio (848 mg, 8.64 mmol, 3.0 eq.) en 1,4-dioxano (17.0 mL). Se enfrió la mezcla y se concentró al vacío, luego se añadió agua (50 mL) y se sometió la mezcla a extracción con EtOAc (40 mL * 3). Se lavaron con salmuera las fases orgánicas combinadas, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío para proporcionar un residuo, que se purificó por cromatografía instantánea en columna (SiO2, 0 - 8 % de EtOAc en PE) para proporcionar 3-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol (650 mg, 66 %). 1H RMN (400 MHz, CDCb) 5 ppm: 7.66 (d,J= 2.4 Hz, 1H), 5.26 (s, 2H), 3.59 (m, 2H), 1.34 (s, 12H), 0.92 (m, 2H), 0.00 (s, 9H).
Paso C: 3-bmmo-5-(3-fluom-1-((2-(trímetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)tiofeno-2-carboxilato de metilo:
Se desgasificó con N2 una solución de 3,5-dibromotiofeno-2-carboxilato de metilo (1.37 g, 4.56 mmol, 1.2 eq.), 3-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol (1.3 g, 3.80 mmol, 1.0 eq.), Xantphos (440 mg, 760 ^mol, 0.20 eq.), K3PO4 (2.4 g, 11 mmol, 3.0 eq.) y Pd(OAc)2 (85 mg, 380 ^mol, 0.10 eq.) en THF (60.0 mL) y se agitó la mezcla a 60 °C durante 16 h. Se filtró la mezcla y se la concentró al vacío, y se purificó el residuo mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 0 - 7% de EtOAc en PE) para proporcionar 3-bromo-5-(3-fluoro-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)tiofeno-2-carboxilato de XX (810 mg, 49%). MS obs. (ESI+): 79Br/81Br 435.2, 437.2 [(M+H)+].
Paso D: 4-(benciloxi)-8-(3-fluoro-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-4-isopropil-3, 4-dihidro-1H, 6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona:
A una solución de 3-bromo-5-(3-fluoro-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)tiofeno-2-carboxilato de XX (400 mg, 918.73 |jmol, 1.0 eq.), 3-(benciloxi)-3-isopropiltetrahidro-4H-piran-4-ona (462 mg, 1.86 mmol, 2.0 eq., preparada de manera análoga al compuesto 28, pasos B-C) y carbonato de cesio (909 mg, 2.79 mmol, 3.0 eq.) en tolueno (20.0 mL) se añadió Pd2(dba)3 (170 mg, 186 jmol, 0.20 eq.) y Xantphos (215 mg, 372 jmol, 0.40 eq.). Se desgasificó la mezcla con N2 dos veces y se agitó a 105 °C durante 16 h. Se filtró la mezcla y se concentró al vacío para proporcionar un residuo, que se purificó mediante cromatografía instantánea en columna (SO 2, 0 - 16% de EtOAc en PE) para proporcionar 4-(benciloxi)-8-(3-fluoro-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-4-isopropil-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (275 mg, 51%). MS obs. (ESI+): 571.3 [(M+H)+].
Paso E: 8-(3-fluoro-1H-pirazol-4-il)-4-hidroxi-4-isopropil-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona:
A una solución de 4-(benciloxi)-8-(3-fluoro-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-4-isopropil-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (275 mg, 482 jmol, 1.0 eq.) en DCM (12.0 mL) se añadió BCh (1 M, 1.93 mL, 4.0 eq.) a 0 °C, y se agitó la mezcla a 0 °C durante 40 min. Se concentró la mezcla mediante una corriente de nitrógeno y se ajustó el pH a aproximadamente 9 añadiendo progresivamente NH4OH (ac.) a 0 °C. Se concentró la mezcla al vacío para proporcionar 8-(3-fluoro-1H-pirazol-4-il)-4-hidroxi-4-isopropil-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (400 mg, cruda), que se utilizó sin purificación adicional. MS obs. (ESI+): 351.1 [(M+H)+].
Paso F : (R)-8-(3-fluoro-1H-pirazol-4-il)-4-hidroxi-4-isopropil-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona Compuesto 26) & (S)-8-(3-fluoro-1H-pirazol-4-il)-4-hidroxi-4-isopropil-1, 3, 4, 5-tetrahidro-6H-pirano[4, 3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona(Compuesto 27):
A una solución de 8-(3-fluoro-1H-pirazol-4-il)-4-hidroxi-4-isopropil-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (400 mg, cruda) en isopropanol (6.5 mL) se añadió solución acuosa de NH4OH (6.5 mL). Se agitó la mezcla a 95 °C durante 4 h bajo calentamiento por microondas, luego se concentró y se purificó mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 0 - 6 % de MeOH en DCM) para proporcionar 8-(3-fluoro-1H-pirazol-4-il)-4-hidroxi-4-isopropil-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (75 mg, 31% en 2 pasos). MS obs. (ESI+): 350.1 [(M+H)+].
Se separó la mezcla racémica mediante SFC quiral para proporcionar cada enantiómero. (R)-8-(3-fluoro-1H-pirazol-4-il)-4-hidroxi-4-isopropil-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 26): MS obs. (ESI+): 350.0 [(M+H)+]; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 12.89 (brs, 1H), 10.90 (brs, 1H), 8.32 (d,J= 1.2 Hz, 1H), 7.35 (s, 1H), 5.27 (s, 1H), 4.68 (s, 2H), 3.96 (d,J =12.0 Hz, 1H), 3.53 (d,J =12.0 Hz, 1H), 2.41 - 2.34 (m, 1H), 1.00 (d,J= 6.8 Hz, 3H), 0.76 (d,J=6.8 Hz, 3H). (S)-8-(3-fluoro-1H-pirazol-4-il)-4-hidroxi-4-isopropil-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 27): MS obs. (ESI+): 350.0 [(M+H)+].
Ejemplos 28 y 29 - Compuestos 28 y 29: (S)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-M)-4-(trifluorometM)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 28) & (R)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-M)-4-(trifluorometil)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 29) (La estereoquímica para los Compuestos 28 y 29 se asigna arbitrariamente)
Paso A: 4,4-dimetoxi-3-(trifluorometil)tetrahidro-2H-piran-3-ol:
A una solución de 4,4-dimetoxidihidro-2H-piran-3(4H)-ona (500 mg, 3.12 mmol, 1.0 eq., sintetizada de acuerdo con el procedimiento descrito en el documento W<o>2013152269) en THF (5.0 mL) se añadió TBAF (81.6 mg, 312 |jmol, 90.4 |<j>L, 0.10 eq.) a 0 °C. Se agitó la mezcla a 0 °C durante 10 min. antes de añadir gota a gota trimetil(trifluorometil)silano (666 mg, 4.68 mmol, 744 jL , 1.5 eq.). Se dejó calentar la mezcla a temperatura ambiente, donde se agitó durante 16 h. Se concentró y purificó la mezcla mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 12 - 25% de EtOAc en PE) para proporcionar 4,4-dimetoxi-3-(trifluorometil)tetrahidro-2H-piran-3-ol (480 mg, 66 %). 1H RMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm: 4.02 - 3.99 (m, 2H), 3.85 - 3.82 (m, 2H), 3.37 (s, 6 H), 2.03 -2.02 (m, 2H).
Paso B: 3-(benciloxi)-4,4-dimetoxi-3-(trifluorometil)tetrahidro-2H-pirano:
A una solución de 4,4-dimetoxi-3-(trifluorometil)tetrahidropiran-3-ol (1 g, 4.34 mmol, 1.0 eq.) en DMF (8.0 mL) se añadió NaH (333 mg, 8.69 mmol, 60% en aceite mineral, 2.0 eq.) a 0 °C. Se agitó la mezcla a 0 °C durante 10 min. a continuación, se añadió bromometilbenceno (1.49 g, 8.69 mmol, 1.03 mL, 2.0 eq.) gota a gota. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 3 h y luego se extinguió la reacción con NH4Cl saturado (ac.), diluido con agua (120 mL) y se sometió a extracción con EtOAc (50 mL * 3). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron para dar el residuo, que se purificó por cromatografía instantánea en columna (SO 2, 0 - 7% de EtOAc en PE) para dar el 3-(benciloxi)-4,4-dimetoxi-3-(trifluorometil)tetrahidro-2H-pirano (690 mg, 49%). 1H RMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm: 7.38 - 7.20 (m, 5H), 4.87 (d,J=10.5 Hz, 1H), 4.75 (d,J =10.5 Hz, 1H), 4.13 - 4.06 (m, 2H), 3.77 - 3.70 (m, 2H), 3.39 (s, 3H), 3.37 (s, 3H), 2.22 -2.16 (m, 1H), 1.99 - 1.93 (m, 1H).
Paso C: 3-(benciloxi)-3-(trifluorometil)tetrahidro-4H-piran-4-ona:
A una solución de 3-(benciloxi)-4,4-dimetoxi-3-(trifluorometil)tetrahidro-2H-pirano (690 mg, 2.15 mmol, 1.0 eq.) en acetona (15.0 mL) se añadió yodo (54.68 mg, 215.42 jmol. 0.1 eq.). Se agitó la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 1 h y luego se extinguió la reacción con Na2SO3 saturado (ac) (25 mL) y se sometió a extracción en DCM (35 mL * 3). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron. Se purificó el residuo mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 0 - 8% de EtOAc en PE) para proporcionar 3-(benciloxi)-3-(trifluorometil)tetrahidro-4H-piran-4-ona (550 mg, 93%). 1H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 ppm: 7.39 - 7.20 (m, 5H), 4.90 (d,J =11.0 Hz, 1H), 4.62 (d,J =11.0 Hz, 1H), 4.33 (d,J= 12.8 Hz, 1H), 4.23 -4.17 (m, 1H), 3.90 (d,J= 12.8 Hz, 1H), 3.88 -3.81 (m, 1H), 3.02 -2.94 (m, 1H), 2.54 -2.48 (m, 1H).
Paso D: 4-(benciloxi)-4-(trifluorometil)-8-(1 -((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-3, 4-dihidro- 1H, 6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona:
A una solución de 3-bromo-5-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)tiofeno-2-carboxilato de metilo (200 mg, 480 jmol, 1.0 eq.), 3-benciloxi-3-(trifluorometil)tetrahidropiran-4-ona (263 mg, 958 jmol, 2.0 eq.) y carbonato de cesio (468 mg, 1.44 mmol, 3.0 eq.) en tolueno (12.0 mL) se añadió Pd2(dba)3 (87.8 mg, 95.8 |jmol, 0.2 eq.) y Xantphos (111 mg, 192 jmol, 0.4 eq.). Se desgasificó la mezcla con N2 y se agitó a 105 °C durante 16 h. Se filtró la mezcla y se concentró al vacío, luego se purificó mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 0 - 20% de EtOAc en PE) para proporcionar 4-(benciloxi)-4-(trifluorometil)-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (185 mg, 66%). MS obs. (ESI+): 579.5 [(M+H)+].
Paso E: 4-(benciloxi)-4-(trifíuorometil)-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-1,3, 4, 5-tetrahidro-6H-pirano[4, 3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona:
A una solución de 4-(benciloxi)-4-(trifluorometil)-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (185 mg, 320 jm ol) en MeOH (5.0 mL) se añadió hidróxido de amonio (5.0 mL). Se agitó la mezcla a 100 °C durante 6 h en un reactor de microondas, luego se concentró al vacío para proporcionar un residuo, que se purificó mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 0 -4% de MeOH en DCM) para dar 4-(benciloxi)-4-(trifluorometil)-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (105 mg, 57%). MS obs. (ESI+): 578.3 [(M+H)+].
Paso F: (S)-4-hidmxi-8-(1H-pirazol-4-iO-4-(trífíuommetil)-1,3, 4,5-tetrahidm-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 28) & (R)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-4-(trifluorometil)-1, 3, 4, 5-tetrahidm-6H-pirano[4, 3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona(Compuesto 29):
Se disolvió 4-(Benciloxi)-4-(trifluorometil)-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (105 mg, 181.76 jm ol, 1.0 eq.) en ácido trifluoroacético (2.6 mL) a 0 °C. Se agitó la mezcla durante 2 h a 60 °C bajo irradiación de microondas, luego se concentró y se ajustó el pH a alrededor de 9 mediante la adición progresiva de NH3/MeOH (7 M). Se concentró la mezcla al vacío y se purificó mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 0 - 6 % de MeOH en DCM) para dar 4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-4-(trifluorometil)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona racémica (54 mg, 83%). MS obs. (ESI+): 358.0 [(M+H)+].
Se separaron los enantiómeros individuales mediante SFC quiral. (S)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-4-(trifluorometil)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 28): MS obs. (ESI+): 358.0 [(M+H)+]; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 13.25 (s, 1H), 10.94 (s, 1H), 8.27 (brs, 2H), 7.48 (s, 1H), 7.13 (s, 1H), 4.89 - 4.77 (m, 2H), 4.23 (d,J= 12.4 Hz, 1H), 3.71 (m, 1H). (R)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-4(trifluorometil)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 29): MS obs. (ESI+): 358.0 [(M+H)+].
Ejemplos 30 y 31 - Compuestos 30 y 31: (S)-4-hidroxi-8-(1-metiMH-pirazol-5-N)-4-(trifluorometil)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 30) y (R)-4-hidroxi-8-(1-metil-1H-pirazol-5-M)-4-(trifluorometil)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridm-6-ona (Compuesto 31) (La estereoquímica para los Compuestos 30 y 31 se asigna arbitrariamente)
Sintetizado por ruta análoga a los compuestos 28 y 29. (S)-4-hidroxi-8-(1-metM-1H-pirazol-5-il)-4-(trifluorometM)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 30). MS obs. (ESI+): 372.1 [(M+H)+]; 1H RMN (400 MHz, DMSO-da) 5 ppm: 11.21 (brs, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.54 (d,J= 2.0 Hz, 1H), 7.19 (brs, 1H), 6.72 (d,J= 2.0 Hz, 1H), 4.96 (d,J= 15.2 Hz, 1H), 4.81 (d,J=15.2 Hz, 1H), 4.25 (d,J= 12.0 Hz, 1H), 4.05 (s, 3H), 3.71 (d,J= 12.0 Hz, 1H). (R)-4-hidroxi-8-(1-metil-1H-pirazol-5-N)-4-(trifluorometN)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 31). MS obs. (ESI+): 372.1 [(M+H)+].
Ejemplos 32 y 33 - Compuestos 32 y 33: (S)-4-hidroxi-8-(5-metiMH-pirazol-4-N)-4-(trifluorometil)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 32) & (R)-4-hidroxi-8-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-(trifluorometil)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 33) (La estereoquímica para los Compuestos 32 y 33 se asigna arbitrariamente).
Sintetizado por ruta análoga a los compuestos 28 y 29. (S)-4-hidroxi-8-(5-metil-1H-pirazol-4-N)-4-(trifluorometN)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona. MS obs. (ESI+): 372.0 [(M+H)+]; 1H RMN (400 MHz, DMSO-^6) 5 ppm: 12.98 (brs, 1H), 10.90 (brs, 1H), 8.23 -7.86 (m, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.14 (s, 1H), 4.92 (d, 15.02 Hz, 1H), 4.78 (d, 15.02 Hz, 1H), 4.24 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 3.70 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 2.43 (s, 3H). (R)-4-hidroxi-8-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-(trifluorometil)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona. MS obs. (ESI+): 372.0 [(M+H)+].
Ejemplos 34 y 35 - Compuestos 34 y 35: (S)-4-(hidroximetil)-4-metN-8-(1H-pirazol-4-il)-1,5-dihidro-2H-pirano[3,4-b]tieno[3,2-d]piridin-6(4H)-ona (Compuesto 34) y (R)-4-(hidroximetil)-4-metil-8-(1H-pirazol-4-il)-1,5-dihidro-2H-pirano[3,4-b]tieno[3,2-d]piridin-6(4H)-ona (Compuesto 35) (La estereoquímica para los Compuestos 34 y 35 se asigna arbitrariamente)
Paso A: 2-(2-hidroxitetrahidrofuran-2-il)acetato de bencilo:
Se agitó a 70 °C durante 16 h una mezcla de 2-bromoacetato de bencilo (19.2 g, 83.6 mmol, 1.2 eq.), indio (9.60 g, 83.6 mmol, 1.2 eq.), tetrahidrofurano-2-ona (6.0 g, 69.7 mmol, 1.0 eq.) y THF (21.0 mL). Se extinguió la reacción con solución (20 ml) acuosa saturada de NaHCO3 y se sometió a extracción con EtOAc (60 mL * 2). Se lavaron con salmuera las capas orgánicas combinadas, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron. La purificación mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 10 - 20% de EtOAc en DCM) proporcionó 2-(2-hidroxitetrahidrofuran-2-il)acetato de bencilo (4.0 g, 24%). MS obs. (ESI+): 219.2 [(M+H-H2O)+].
Paso B: 2-diazo-6-hidroxi-3-oxohexanoato de bencilo:
A una solución de 2-(2-hidroxitetrahidrofuran-2-il)acetato de bencilo (700 mg, 2.96 mmol, 1.0 eq.) yN-diazo-2,4,6-triisopropil-bencenosulfonamida (1.01 g, 3.26 mmol, 1.1 eq) en THF (10.0 mL) se añadió N,N-dietiletanamina (900 mg, 8.9 mmol, 3.0 eq.) a 0 °C. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 16 h y luego se concentró. Se purificó el residuo por cromatografía instantánea en columna (SiO2, 15-30 % de EtOAc en PE) para dar 2-diazo-6-hidroxi-3-oxo-hexanoato de bencilo (1.18 g, 81%). MS obs. (ESI+):263.2 [(M+H)+].
Paso C: 3-oxotetrahidro-2H-piran-2-carboxilato de bencilo:
Se añadió una solución de 2-diazo-6-hidroxi-3-oxo-hexanoato de bencilo (1.0 g, 3.81 mmol, 1.0 eq.) en benceno (50.0 mL) a una solución de Rh2(OAc)4 (50.0 mg, 113 pmol, 0.030 eq.) en benceno (50.0 mL) gota a gota durante 35 min a 100 °C. Se agitó la mezcla a 100 °C durante 1 h, se filtró y se concentró para proporcionar 3-oxotetrahidro-2H-piran-2-carboxilato de bencilo (180 mg, crudo), que se utilizó en el siguiente paso sin purificación. MS obs. (ESI+): 235.2 [(M+H)+].
Paso D: 2-metil-3-oxotetrahidro-2H-piran-2-carboxilato de bencilo:
A una solución de 3-oxotetrahidro-2H-piran-2-carboxilato de bencilo (890 mg, 3.80 mmol, 1.0 eq.) en DMF (15 mL) se le añadió hidruro de sodio (247 mg, 5.70 mmol, 60% en aceite mineral, 1.5 eq.) a -20 °C. Se agitó la mezcla durante 10 min., a continuación se añadió yodometano (1.62 g, 11.40 mmol, 3.0 eq.) y se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 16 h. Se vertió la mezcla en agua y se sometió a extracción con acetato de etilo (30 mL * 2). Se lavaron con salmuera las capas orgánicas combinadas, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío, y se purificó el residuo mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 0 - 10% de EtOAc en PE) para dar 2-metil-3-oxotetrahidro-2H-piran-2-carboxilato de bencilo (474 mg, 50%). MS obs. (ESI+): 271.0 [(M+Na)+].
Paso E: 4-metil-6-oxo-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-1,2,4,6-tetrahidropirano[3, 4-b]tieno[3,2-d]piran-4-carboxilato de bencilo:
Se agitó durante 16 h a 105 °C una mezcla de 3-bromo-5-[1-(2-trimetilsililetoximetil)pirazol-4-il]tiofeno-2-carboxilato de metilo (84.1 mg, 201 pmol, 1.0 eq.), 2-metil-3-oxotetrahidro-2H-piran-2-carboxilato de bencilo (100 mg, 403 |jmol, 2.0 eq.), metabisulfito de sodio (11.5 mg, 60.4 jmol, 0.3 eq.), CS2CO3 (197 mg, 604 jmol, 3.0 eq.), Sphos-Pd-G3 (31.4 mg, 40.3 jmol, 0.2 eq.) y tolueno (15.0 mL). Se vertió la mezcla en agua y se sometió a extracción con EtOAc (70 mL * 2). Se lavaron con salmuera las capas orgánicas combinadas, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron. Se purificó el residuo mediante cromatografía instantánea en columna (SO 2, 0 - 25% de EtOAc en PE) para dar 4-metil-6-oxo-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-1,2,4,6-tetrahidropirano[3,4-b]tieno[3,2-d]piran-4-carboxilato de bencilo (78 mg, 70%). MS obs. (ESI+): 553.5 [(M+H)+].Paso F: 4-(hidroximetil)-4-metil-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-1,4-dihidropirano[3,4-b]tieno[3,2-d]piran-6(2H)-ona:
Se agitó durante 20 min a ta. una mezcla de 4-metil-6-oxo-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-1,2,4,6-tetrahidropirano[3,4-b]tieno[3,2-d]piran-4-carboxilato de bencilo (50 mg, 90.5 jmol, 1.0 eq.), diclorocalcio (50.2 mg, 452 jmol, 5 eq.) y EtOH (5.0 mL), luego se añadió borohidruro de sodio (51.3 mg, 1.36 mmol, 15.0 eq.) en porciones a la mezcla a 0 °C, seguido de agitación durante 20 min a temperatura ambiente. Se vertió la mezcla en agua y se sometió a extracción con EtOAc (30 mL * 2). Se lavaron con salmuera las capas orgánicas combinadas, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron. Se purificó el residuo mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 50% de EtOAc en PE) para dar 4-(hidroximetil)-4-metil-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-1,4-dihidropirano[3,4-b]tieno[3,2-d]piran-6(2H)-ona (20 mg, 49%). MS obs. (ESI+): 449.2 [(M+H)+].
Paso G: 4-(hidroximetil)-4-metil-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-IH-pirazol-4-il)-1,5-dihidro-2H-pirano[3,4-b]tieno[3,2-d]piridin-6(4H)-ona:
Se agitó durante 3 h a 100 °C en un reactor de microondas una mezcla de 4-(hidroximetil)-4-metil-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-1,4-dihidropirano[3,4-b]tieno[3,2-d]piran-6(2H)-ona (60 mg, 134 jmol), hidróxido de amonio (3.5 mL) y MeOH (3.5 mL). Se concentró la mezcla al vacío y se purificó el residuo por cromatografía instantánea en columna (SiO2, 15-35 % de EtOAc en PE) para dar 4-(hidroximetil)-4-metil-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-1,5-dihidro-2H-pirano[3,4-b]tieno[3,2-d]piridin-6(4H)-ona (20 mg, 33%). MS obs. (ESI+): 448.5 [(M+H)+].
Paso H: (S)-4-(hidroximetil)-4-metil-8-(1H-pirazol-4-il)-1,5-dihidro-2H-pirano[3,4-b]tieno[3,2-d]piridin-6(4H)-ona(Compuesto 34) &(R)-4-(hidroximetil)-4-metil-8-(1H-pirazol-4-il)-1,5-dihidro-2H-pirano[3,4-b]tieno[3,2-d]piridin-6(4H)-ona(Compuesto 35):
Se añadió tricloroborano (1 M, 890 jL , 5.0 eq.) a una solución de 4-(hidroximetil)-4-metil-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-1,5-dihidro-2H-pirano[3,4-b]tieno[3,2-d]piridin-6(4H)-ona (80 mg, 180 jmol) en DCM (50.0 mL) a 0 °C. Se agitó la mezcla durante 2 h a temperatura ambiente, se extinguió la reacción con MeOH y se concentró al vacío. El residuo se basificó con NaHCO3.3 y se purificó por cromatografía en columna (SiO2, 0 - 6% de MeOH en DCM) para dar 4-(hidroximetil)-4-metil-8-(1H-pirazol-4-il)-1,5-dihidro-2H-pirano[3,4-b]tieno[3,2-d]piridin-6(4H)-ona racémica (32 mg, 56%). MS obs. (ESI+): 318.5 [(M+H)+].
Se separaron los enantiómeros individuales mediante SFC quiral. (S)-4-(hidroximetil)-4-metil-8-(1H-pirazol-4-il)-1,5-dihidro-2H-pirano[3,4-b]tieno[3,2-d]piridin-6(4H)-ona (Compuesto 34): MS obs. (ESI+): 318.0 [(M+H)+]; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 13.22 (brs, 1H), 10.90 (brs, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 4.87 (s, 1H), 4.09 - 3.96 (m, 1H), 3.93 - 3.72 (m, 2H), 3.51 (d,J =11.6 Hz, 1H), 2.86 - 2.58 (m, 2H), 1.39 (s, 3H). (R)-4-(hidroximetil)-4-metil-8-(1H-pirazol-4-il)-1,5-dihidro-2H-pirano[3,4-b]tieno[3,2-d]piridin-6(4H)-ona (Compuesto 35): MS obs. (ESI+): 318.0 [(M+H)+].
Ejemplos 36 y 37 - Compuestos 36 y 37: (S)-6-(difluorometN)-6-hidroxi-2-(1H-pirazol-4-N)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 36) & (R)-6-(difluorometil)-6-hidroxi-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 37) (La estereoquímica para los Compuestos 36 y 37 se asigna arbitrariamente)
Paso A: 2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)- 1H-pirazol-4-il)-8,9-dihidro-4H-tieno(2.3-c]cromeno-4,6(7H)-diona:
Se disolvieron 3-bromo-5-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)tiofeno-2-carboxilato de metilo (200 mg, 480 ^mol, 1.0 eq) y ciclohexano-1,2-diona (1.1 g, 9.6 mmol, 20 eq) en tolueno anhidro (40.0 mL) antes de añadir Sphos-Pd-G3 (56 mg, 96 ^mol, 0.20 eq), Cs2CÜ3 (470 mg, 1.40 mmol, 3.0 eq) y Na2S2Ü5 (18 mg, 0.096 mmol, 0.20 eq). Se desgasificó la mezcla con N2 y se calentó a 105 °C durante 16 h. Se enfrió la mezcla, se concentró al vacío, y se purificó mediante cromatografía instantánea en columna (SiÜ2, 0 - 45% de EtOAc en PE). La purificación adicional (SiO2, 0 - 8 % de MeOH en DCM) proporcionó 2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-8,9-dihidro-4H-tieno[2,3-c]cromeno-4,6(7H)-diona (20 mg, 10%). MS obs. (ESI+): 417.5 [(M+H)+].
Paso B: 6-(difíuommetil)-6-hidmxi-2-(1-((2-(trímetilsilil)etoxi)metil)-1H-pimzol-4-il)-6J,8,9-tetmhidm-4H-tieno[2,3-c]cromen-4-ona:
Se añadió fluoruro de cesio (55 mg, 0.36 mmol, 2.5 eq) a una solución de 2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-8,9-dihidro-4H-tieno[2,3-c]cromeno-4,6(7H)-diona (60 mg, 0.144 mmol, 1.0 eq) en d Mf anhidro (4.0 mL) bajo atmósfera de N2 seguida de difluorometil (trimetil)silano (90 mg, 0.72 mmol, 100 ^L, 5.0 eq). Se agitó la mezcla durante 24 h a ta, luego se diluyó con agua (50 mL) y se sometió a extracción con EtOAc (40 mL x 4). Las fases orgánicas combinadas se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron. La purificación (SiO2, 0 -39% de EtOAc en PE) proporcionó 6-(difluorometil)-6-hidroxi-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-4H-tieno[2,3-c]cromen-4-ona (23 mg, 34%). MS obs. (ESI+): 469.4 [(M+H)+].Paso C: 6-(difíuommetil)-6-hidmxi-2-(1-((2-(trímetilsilil)etoxi)metil)-1H-pimzol-4-il)-6J,8,9-tetmhidm-4H-tieno[2,3-c]cromen-4-ona:
Se añadió 6-(Difluorometil)-6-hidroxi-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-4H-tieno[2,3-c]cromen-4-ona (65 mg, 0.14 mmol) a NH4OH (5.0 mL, sat. ac.) seguido de MeOH (5.0 mL). Se calentó la mezcla a 95 °C en un reactor de microondas durante 10 h. luego se concentró para proporcionar 6-(difluorometil)-6-hidroxi-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-4H-tieno[2,3c]cromen-4-ona (65 mg, cruda). Este material se utilizó en el siguiente paso sin purificación adicional. MS obs. (ESI+): 468.5 [(M+H)+].
Paso D: (S)-6-(difluorometil)-6-hidroxi-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 36) y (R)-6-(difluommefíl)-6-hidmxi-2-(1H-pimzol-4-il)-6,7,8,9-tetmhidmtieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona(Compuesto 37):
Se disolvió 6-(difluorometil)-6-hidroxi-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-4H-tieno[2,3-c]cromen-4-ona (180 mg, 370 ^mol) en DCM (15.0 mL) y se enfrió a 0 °C antes de añadir ácido trifluoroacético (3.0 mL). Se dejó que la mezcla de reacción se calentara a ta y después de 4 h se concentró la mezcla al vacío. Se purificó el residuo (C18 SiO2 0 - 25% de MeCN en agua (0.1% de NH4OH)) para proporcionar 6-(difluorometil)-6-hidroxi-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona racémica (40 mg, 26%). MS obs. (ESI+): 388.4 [(M+H)+].
Se separaron los enantiómeros individuales mediante SFC quiral. (S)-6-(difluorometil)-6-hidroxi-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 36): m S obs. (ESI+): 388.1 [(M+H)+]. (R)-6-(difluorometil)-6-hidroxi-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 37): MS obs. (ESI+): 388.1 [(M+H)+]; 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 5 ppm: 13.22 (s, 1H), 10.68 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 6.52 (t,J= 55.6 Hz, 1H), 6.26 (s, 1H), 2.77 -2.73 (m, 1H), 2.68 -2.61 (m, 1H), 2.10 -2.04 (m, 1H), 1.87 -1.85 (m, 3H).
Ejemplos 38 y 39 - Compuestos 38 y 39: (S)-9-metoxi-9-metN-2-(1H-pirazol-4-N)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]qumolm-4(5H)-ona (Compuesto 38) & (R)-9-metoxi-9-metN-2-(1H-pirazol-4-N)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 39) (La estereoquímica para los Compuestos 38 y 39 se asigna arbitrariamente)
Paso A: 7,8-dihidro-4H-tieno[2,3-c]cromeno-4,9(6H)-diona:
Se disolvieron 3-bromotiofeno-2-carboxilato de metilo (0.50 g, 2.3 mmol, 1.0 eq.) y ciclohexano-1,3-diona (1.5 g, 14 mmol, 6.0 eq.) en tolueno (80.0 mL), antes de añadir Cs2CO3 (2.2 g, 6.8 mmol, 3.0 eq.) y SPhos-Pd-G3 (180 mg, 230 ^mol, 0.10 eq.). Se calentó la mezcla a 105 °C durante 16 h, se enfrió y se diluyó con H2O (50 mL). Se sometió la mezcla a extracción con EtOAc (50 mL * 3) y se lavaron con salmuera las fases (50 mL) orgánicas combinadas, se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron. La purificación por cromatografía en columna (SiO2, 0 - 20% de EtOAc en PE para proporcionar 7,8-dihidro-4H-tieno[2,3-c]cromeno-4,9(6H)-diona (82 mg, 14%). MS obs. (ESI+): 221.2 [(M+H)+].
Paso B: 7, 8-dihidrotieno[2, 3-c]quinolina-4,9(5H, 6H)-diona:
Se disolvió 7,8-Dihidro-4H-tieno[2,3-c]cromeno-4,9(6H)-diona (550 mg, 2.50 mmol, 1.0 eq.) en MeOH (8.0 mL) antes de añadir NH4OH (8 mL, ac. sat.). Se calentó la mezcla de reacción a 90 °C durante 4 h en un reactor de microondas, se enfrió y se concentró al vacío. La purificación por cromatografía en columna (SO 2, 0 - 25% de MeOH en DCM) proporcionó 7,8-dihidrotieno[2,3-c]quinolina-4,9(5H,6H)-diona (420 mg, 77%). MS obs. (ESI+): 220.2 [(M+H)+].
Paso C: 5-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-7, 8-dihidrotieno[2, 3-c]quinolina-4, 9(5H, 6H)-diona:
Se enfrió a 0 °C una solución de 7,8-dihidrotieno[2,3-c]quinolina-4,9(5H,6H)-diona (1.3 g, 5.9 mol, 1.0 eq.) en DMF anhidro (60.0 mL), antes de agregar NaH (360 mg, 8.9 mmol, 60% en aceite mineral, 1.5 eq.). Después de 30 min, se añadió 2-(clorometoxi)etil-trimetil-silano (2.0 g, 12 mmol, 2.1 mL, 2.0 eq.) y se calentó la mezcla a ta, donde se agitó durante 2 h. Se añadió agua (150 mL) y se sometió la mezcla a extracción con EtOAc (100 mL x 3 ). Se lavaron (salmuera, 100 mL) las fases orgánicas combinadas, se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron al vacío. La purificación por cromatografía en columna (SO 2, 0 - 30% de EtOAc en PE) proporcionó 5-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-7,8-dihidrotieno[2,3-c]quinolina-4,9(5H,6H)-diona (1.0 g, 48%). MS obs. (ESI+): 350.5 [(M+H)+].
Paso D: 9-hidroxi-9-metil-5-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-6, 7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona:
Se disolvió 5-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-7,8-dihidrotieno[2,3-c]quinolina-4,9(5H,6H)-diona (1.0 g, 2.9 mmol, 1.0 eq.) en THF (30.0 mL) y se enfrió a 0 °C la solución antes de añadir bromuro de metilmagnesio (1 M, 57.0 mL, 57 mmol, 20 eq.). Se calentó la mezcla de reacción a ta y se agitó durante 2 h antes de agregar agua (100 mL). Se sometió la mezcla a extracción con EtOAc (100 mL x 3) y se lavaron con salmuera (100 mL) las fases orgánicas combinadas, se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron al vacío. La purificación por cromatografía en columna (SiO2 0 -30% de EtOAc en PE proporcionó 9-hidroxi-9-metil-5-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (320 mg, 27%). MS obs. (ESI+): 366.5 [(M+H)+].
Paso E: 9-metoxi-9-metil-5-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-6, 7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona:
Se añadieron hidruro de sodio (145 mg, 3.61 mmol, 60% en aceite mineral, 4.0 eq.) y yodometano (1.3 g, 9.0 mmol, 0.6 mL, 10.0 eq.) a una solución de 9-hidroxi-9-metil-5-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (330 mg, 0.90 mmol, 1.0 eq.) en Th F anhidro (15.0 mL). Después de 2 h, se añadió agua (50 mL) y se sometió la mezcla a extracción con EtOAc (30 mL x 3). Se lavaron con salmuera (30 mL) las fases orgánicas combinadas, se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron al vacío. La purificación por cromatografía en columna (SiO2, 0 -15% de EtOAc en PE) proporcionó 9-metoxi-9-metil-5-((2(trimetilsilil)etoxi)metil)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (190 mg, 55%). MS obs. (ESI+): 380.6 [(M+H)+].
Paso F: 2-yodo-9-metoxi-9-metil-5-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona:
Se disolvió 9-Metoxi-9-metil-5-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (140 mg, 0.37 mmol, 1.0 eq.) en THF (8.0 mL) y se enfrió a -65 °C. Se añadió diisopropilamina de litio (2 M, 0.7 mL, 1.5 mmol, 4.0 eq.), seguida de yodo (190 mg, 0.74 mmol, 2.0 eq.), y se agitó la mezcla a -65 °C durante 2 h. Se añadió agua (10 mL) y se sometió la mezcla a extracción con EtOAc (10 mL * 3). Se lavaron con salmuera las fases orgánicas combinadas (10 mL), se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraronal vacío. La purificaciónpor cromatografía en columna (SiO2, 0 - 15% de EtOAc en PE) proporcionó 2-yodo-9-metoxi-9-metil-5-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (120 mg, 62%). MS obs. (ESI+): 506.6 [(M+H)+].
Paso G: 9-metoxi-9-metil-5-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona:
Se añadieron Pd(dppf)Cl2 (32 mg, 40 ^mol, 0.20 eq.), XPhos (42 mg, 90 ^mol, 0.40 eq.) y Na2CO3 (70 mg, 0.65 mmol, 3.0 eq.) a una solución de 2-yodo-9-metoxi-9-metil-5-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (110 mg, 0.22 mmol, 1.0 eq.) y trimetil-[2-[[4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)pirazol-1-il]metoxi]etil]silano (110 mg, 0.35 mmol, 1.6 eq.) en H2O/1,4-dioxano (8.0 mL, mezcla 1:3). Se calentó la mezcla a 110 °C durante 2 h y luego se concentró al vacío. La purificación por cromatografía en columna (0 - 30% de EtOAc en PE) proporcionó 9-metoxi-9-metil-5-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (110 mg, 88%).<m>S obs. (ESI+): 576.9 [(M+H)+].
Paso H: (9S)-9-metoxi-9-metil-2-(1H-pirazol-4-il)-5,6,7,8-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4-ona(Compuesto 38) y(9R)-9-metoxi-9-metil-2-(1H-pirazol-4-il)-5,6,7,8-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4-ona(Compuesto 39):
Se añadió BCh (1.0 M, 1.1 mL, 1.1 mmol, 5.0 eq.) a una solución de 9-metoxi-9-metil-5-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (130 mg, 0.22 mmol, 1.0 eq.) en DCM (13.0 mL) a 0 °C. Después de 10 min, se añadió NH3/MeOH (a pH 9) y se concentró la mezcla al vacío.La purificación por cromatografía en columna (C18 SiO2, 0 - 20% de MeCN en agua (0.1% de NH4OH)) proporcionó 9-metoxi-9-metil-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona racémica (24 mg, 34%). MS obs. (ESI+): 316.2 [(M+H)+].
Se separaron los enantiómeros individuales mediante SFC quiral. (9S)-9-metoxi-9-metil-2-(1H-pirazol-4-il)-5,6,7,8-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4-ona (Compuesto 38): m S obs. (ESI+): 316.2 [(M+H)+]. (9R)-9-metoxi-9-metil-2-(1H-pirazol-4-il)-5,6,7,8-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4-ona (Compuesto 39): MS obs. (ESI+): 316.2 [(M+H)+]; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 13.21 (s, 1H), 11.29 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 2.94 (s, 3H), 2.70 -2.52 (m, 2H), 2.15 -2.01 (m, 1H), 1.95 - 1.87 (m, 1H), 1.83 - 1.67 (m, 1H), 1.55 -1.65 (m, 1H), 1.50 (m, 3H).
Ejemplos 40 y 41 - Compuestos 40 y 41: (S)-6-hidroxi-6-metN-2-(1H-pirazol-4-N)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 40) & (R)-6-hidroxi-6-metN-2-(1H-pirazol-4-N)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 41) (La estereoquímica para los Compuestos 40 y 41 se asigna arbitrariamente)
Paso A: 4-(6-hidroxi-4-oxo-4, 5,6, 7,8, 9-hexahidrotieno[2, 3-c]qumolin-2-il)-1H-pirazol-1-carboxilato de tercbutilo:
Se añadió trietilamina (280 mg, 2.8 mmol, 2.0 eq), DMAP (85 mg, 70 ^mol, 0.50 eq.) y (Boc)2O (300 mg, 1.40 mmol, 1.0 eq.) a una suspensión de 6-hidroxi-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-5H-tieno[2,3-c]quinolin-4-ona (400 mg, 1.40 mmol, 1.0 eq.) en DMF (20.0 mL). Se agitó la mezcla a ta durante 16 h y luego se sometió a extracción con EtOAc (50 mL * 3). Se lavaron con salmuera las fases orgánicas combinadas, se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron. La purificación por cromatografía en columna (SiO2, 0 - 100% de EtOAc en PE) proporcionó 4-(6-hidroxi-4-oxo-4,5,6,7,8,9-hexahidrotieno[2,3-c]quinolin-2-il)-1H-pirazol-1-carboxilato de terc-butilo (400 mg, 74%). MS obs. (ESI+): 388.5 [(M+H)+].
Paso B: 4-(4,6-dioxo-5J,8,9-tetrahidrotiemo[2,3-c]qumolim-2-il)pimzol-1-carboxilato de terc-butilo:
Se agitó a ta durante 1 h una suspensión de 4-(6-hidroxi-4-oxo-4,5,6,7,8,9-hexahidrotieno[2,3-c]quinolin-2-il)-1H-pirazol-1-carboxilato de terc-butilo (140 mg, 0.36 mmol, 1.0 eq.) y acetato de (1,1-diacetoxi-3-oxo-1,2-benziodoxol-1-ilo) (110 mg, 3.6 mmol, 10 eq.) en DCM (14.0 mL). Se concentró la mezcla y purificó el residuo mediante cromatografía en columna (SiO2, 0 -10% de MeOH en DCM) para proporcionar 4-(4,6-dioxo-5,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-2-il)pirazol-1-carboxilato de terc-butilo (120 mg, 87%). MS obs. (ESI+): 386.5 [(M+H)+].
Paso C: (S)-6-hidmxi-6-metil-2-(1H-pirazol-4-iO-6J,8,9-tetrahidmtiemo[2,3-c]quimolm-4(5H)-oma(Compuesto 40) y(R)-6-hidroxi-6-metil-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2, 3-c]quimohm-4(5H)-oma(Compuesto 41):
Se añadió bromuro de metilmagnesio (1.0 M, 4.8 mL, 4.8 mmol, 3.0 eq.) a una solución de 4-(6-hidroxi-4-oxo-4.5.6.7.8.9- hexahidrotieno[2,3-c]quinolin-2-il)-1H-pirazol-1-carboxilato de terc-butilo (60 mg, 0.16 mmol, 1.0 eq.) en THF (24.0 mL). Se agitó la mezcla a ta durante 2 h, luego se añadió MeOH y la mezcla resultante se concentró al vacío y se purificó por cromatografía en columna (SO 2, 0 - 10% de MeOH en DCM) para proporcionar 6-hidroxi-6-metil-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona racémica (39 mg, 62%).
Se separaron los enantiómeros individuales mediante SFC quiral. (S)-6-hidroxi-6-metil-2-(1H-pirazol-4-il)-6.7.8.9- tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 40): MS obs. (ESI+): 302.1 [(M+H)+]; 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 8 ppm: 13.10 (s, 1H), 10.51 (s, 1H), 8.12 (s, 2H), 7.46 (s, 1H), 5.12 (s, 1H), 2.32 -2.51 (m, 2H), 1.88 - 1.82 (m, 3H), 1.78 - 1.67 (m, 1H), 1.46 (s, 3H). (R)-6-hidroxi-6-metil-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 41): MS obs. (ESI+): 302.1 [(M+H)+].
Ejemplos 42 y 43 - Compuestos 42 y 43: (S)-4-(difluorometM)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-M)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 42) & (R)-4-(difluorometM)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 43) (La estereoquímica para los Compuestos 42 y 43 se asigna arbitrariamente)
Paso A: 4-hidroxi-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-3, 4-dihidro-1H, 6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona:
Se añadió hidruro de sodio (140 mg, 3.4 mmol, 60% en aceite mineral, 2.0 eq.) a una solución enfriada (0°C) de 4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (500 mg, 1.7 mmol, 1.0 eq.) en DMF (20.0 mL). Después de 10 min a 0 °C, se añadió lentamente SEMCl (370 pL, 350 mg, 2.0 mmol, 1.2 eq.) a la mezcla. Se agitó la mezcla durante 2 h a ta, luego se extinguió la reacción con cloruro de amonio (sat. ac.) y luego se sometió a extracción con EtOAc (25 mL x 3). Las fases orgánicas combinadas se trataron con salmuera, se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron. La purificación por cromatografía en columna (SO 2, 0 - 40% de EtOAc en DCM) proporcionó 4-hidroxi-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (400 mg, 52%). MS obs. (ESI+): 421.2 [(M+H)+].
Paso B: 8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)- 1H-pirazol-4-il)-il)- 1H,3H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-4,6-diona:
Se disolvió 4-Hidroxi-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (400 mg, 950 pmol, 1.0 eq.) en D<c>M (20.0 mL) y DMF (20.0 mL), y se añadió acetato de (1,1-diacetoxi-3-oxo-1,2-benziodoxol-1-ilo) (1.2 g, 2.9 mmol, 3.0 eq.). Se agitó la mezcla a ta durante 16 h y luego se extinguió la reacción con Na2S2O3 (sat. ac.) y NaHCO3 (sat. ac.). Se sometió la mezcla a extracción con EtOAc (30 mL * 3) y las fases orgánicas combinadas se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron. La purificación por cromatografía en columna (SiO2, 0 - 30% de EtOAc en DCM) proporcionó 8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-1H,3H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-4,6-diona (270 mg, 63%). m S obs.
(ESI+): 419.2 [(M+H)+], 436.2 [(M+NH4)+].
Paso C: 4-(difluorometil)-4-hidroxi-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-3, 4-dihidro-1H, 6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona:
Se añadió fluoruro de cesio (210 mg, 1.4 mmol, 2.5 eq.) a una solución de 8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-1H,3H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-4,6-diona (270 mg, 560 ^mol, 1.0 eq.) en DMF (24.0 mL) seguido de TMSCF2H (350 mg, 2.8 mmol, 400 ^L, 5.0 eq.). Se agitó la mezcla durante l 6 h. Se añadió agua y se sometió a extracción con EtOAc (25 mL x 5). Se lavaron con salmuera las fases orgánicas combinadas, se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron. La purificación por cromatografía en columna (SiO2, 0 - 40% de EtOAc en PE) proporcionó 4-(difluorometil)-4-hidroxi-8-(1 -((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (48 mg, 16%). MS obs. (ESI+): 471.4 [(M+H)+].
Paso D: 4-(difluorometil)-4-hidroxi-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona:
Se añadió amoníaco acuoso (8.0 mL, 25% p/p) a una solución de 4-(difluorometil)-4-hidroxi-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (140 mg, 260 ^mol, 1.0 eq.) en i-PrOH (8.0 mL). Se calentó la mezcla a 100 °C en un reactor de microondas durante 6 h, luego se enfrió y se concentró. La purificación por cromatografía en columna (SiO2, 0 - 8% de MeOH en DCM) proporcionó 4-(difluorometil)-4-hidroxi-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (55 mg, 41%). MS obs. (ESI+): 470.2 [(M+H)+].
Paso E: (S)-4-(difluorometil)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3, 4, 5-tetrahidro-6H-pirano[4, 3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona(Compuesto 42) y(R)-4-(difluorometil)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona(Compuesto 43):
Se disolvió 4-(Difluorometil)-4-hidroxi-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (10 mg, 21 ^mol) en DCM: ácido trifluoroacético (4.0 mL, 3: 1). Se agitó la mezcla a ta durante 1 h, luego se concentró y se purificó por HPLC de fase inversa (C18 SiO2, 0 - 15% de MeCN en agua (0.1 % de NH4OH)). La purificación adicional mediante cromatografía en columna (SiO2, 0 - 8% de MeOH en DCM) produjo 4-(difluorometil)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona racémica (1.3 mg, 17%). MS obs. (ESI+): 340.0 [(M+H)+].
Se separaron los enantiómeros individuales mediante SFC quiral. (S)-4-(difluorometil)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 42): MS obs. (ESl+): 340.2 [(M+H)+]; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 13.24 (s, 1H), 11.04 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 6.57 (s, 1H), 6.44 (t,J= 55.0 Hz, 1H), 4.76 (s, 2H), 4.11 (d,J=12.0 Hz, 1H), 3.72 (d,J= 12.0 Hz, 1H). (R)-4-(difluorometil)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona Compuesto 43): MS obs. (ESI+): 340.2 [(M+H)+].
Ejemplos 44 y 45 - Compuestos 44 y 45: (S)-4-hidroxi-4-isopropN-8-(pmdm-4-M)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 44) y (R)-4-hidroxi-4-isopropil-8-(piridin-4-il)-1,3,4,5tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 45) (La estereoquímica para los Compuestos 44 y 45 se asigna arbitrariamente)
Paso A: 4,4-dimetoxi-3-(prop-1-en-2-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol:
A una solución de 4,4-dimetoxidihidro-2H-piran-3(4H)-ona (5.0 g, 31 mmol, 1.0 eq. sintetizada de acuerdo el procedimiento descrito en el documento WO2013152269) en THF anhidro (100 mL) bajo atmósfera de N2 se añadió bromo(isopropenil)magnesio (1 M, 125.0 mL, 125 mmol, 4.0 eq.) a 0 °C. Tras la adición, se agitó la mezcla a 0 °C durante 30 min. después, se calentó a 25 °C y se agitó bajo atmósfera de N2 otras 2 h. Se enfrió la mezcla a 0 °C y luego se extinguió la reacción con NH4Cl saturado (ac.) (120 mL), se diluyó con agua (100 mL) y se sometió a extracción con EtOAc (100 mL * 3). Se lavaron con salmuera (100 mL) las capas orgánicas combinadas, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se evaporaron al vacío. La purificación por cromatografía en columna (SO 2, 0 - 25% de EtOAc en PE) proporcionó 4,4-dimetoxi-3-(prop-1-en-2-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol (3.5 g, 55%). 1H RMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm: 5.37 (m, 1H), 5.08 - 5.03 (m, 1H), 3.76 (d,J =11.4 Hz, 1H), 3.72 -3.60 (m, 2H), 3.36 (d,J= 11.4 Hz, 1H), 3.32 (d,J= 2.8 Hz, 6H), 2.08 - 1.99 (m, 1H), 1.98 - 1.95 (m, 3H), 1.94 - 1.87 (m, 1H).
Paso B: 3-hidroxi-3-isopropiltetrahidro-4H-piran-4-ona:
A un recipiente a presión de 1 L se añadió 4,4-dimetoxi-3-(prop-1-en-2-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol (17.5 g, 82.20 mmol) a metanol (500.0 mL), HCl ac. 4 N (20.0 mL) y Pd/C (998.34 mg, 8.22 mmol) bajo una atmósfera de nitrógeno. El recipiente se selló y se agitó a temperatura ambiente a 20 atm de presión de hidrógeno durante 8 h. Tras purgar con nitrógeno, se abrió el recipiente y se filtró la mezcla a través de una almohadilla de Celite. Se concentró el filtrado al vacío para proporcionar 3-hidroxi-3-isopropiltetrahidro-4H-piran-4-ona (10.9 g, 65.46 mmol, 79.63% de rendimiento, 95% de pureza) como un líquido amarillo. MS obs. (ESI+): 159.2 [(M+H)+].
Paso C: 4-hidroxi-4-isopropil-8-(piridin-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona:
A una solución de 3-hidroxi-3-isopropiltetrahidro-4H-piran-4-ona (106 mg, 0.67 mmol, 2.0 eq.) en tolueno (10.0 mL) se le añadió 3-bromo-5-(piridin-4-il)tiofeno-2-carboxilato de metilo (100 mg, 0.34 mmol, 1.0 eq.), tris(dibencilidenoacetona)dipaladio (61 mg, 0.67 mmol, 0.20 eq.), 4,5-Bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno (116 mg, 0.20 mmol, 0.60 eq.), carbonato de cesio (219 mg, 0.67 mmol, 2.0 eq.) y metabisulfito de sodio (13 mg, 0.070 mmol, 0.20 eq.). Se agitó la mezcla a 105 °C durante 16 h y luego se concentró. Se diluyó el residuo con agua (20 mL), se sometió a extracción con EtOAc (20 mL * 3). Se lavaron con salmuera las capas orgánicas combinadas, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron. Se purificó el residuo mediante cromatografía en columna (SiO2, 1 - 50 % de EtOAc en PE) para proporcionar 4-hidroxi-4-isopropil-8-(piridin-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona racémica. M<s>obs. (ESI+): 344.4 [(M+H)+].
Paso D: (S)-4-hidroxi-4-isopropil-8-(piridin-4-il)- 1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4, 3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona(Compuesto 44) &(R)-4-hidrvxi-4-isopropil-8-(piridin-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona(Compuesto 45):
Se calentó una solución de 4-hidroxi-4-isopropil-8-(piridin-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (62 mg, 0.18 mmol, 1.0 eq.) en una mezcla de NH4OH (3.0 mL) y MeOH (3.0 mL) en un reactor de microondas a 100 °C durante 3 h. Se concentró la mezcla y purificó el residuo mediante cromatografía en columna (SiO2, 1-5% de EtOAc en PE) para proporcionar 4-hidroxi-4-isopropil-8-(piridin-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona racémica (17 mg, 28%). MS obs. (ESI+): 343.5 [(M+H)+].
Se separaron los enantiómeros individuales mediante SFC quiral. (S)-4-hidroxi-4-isopropil-8-(piridin-4-il)-1.3.4.5- tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 44): MS obs. (ESI+): 343.2 [(m H)+]; 1H RMN (400 MHz, DMSO-de) 5 ppm: 11.07 (s, 1H), 8.69 (d,J = 6.0Hz, 2H), 8.04 (s, 1H), 7.81 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 5.31 (s, 1H), 4.73 (s, 2H), 3.98 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 3.55 (d,J =11.6 Hz, 1H), 2.39 - 2.25 (m, 1H), 1.00 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 0.77 (d,J =7.2 Hz, 3H). (R)-4-hidroxi-4-isopropil-8-(piridin-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 45): MS obs. (ESI+): 343.2 [(M+H)+].
Ejemplos 46 y 47 - Compuestos 46 y 47: (S)-4-hidroxi-4-isopropN-8-(isotiazol-5-M)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 46) & (R)-4-hidroxi-4-isopropN-8-(isotiazol-5-M)-1.3.4.5- tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 47)
La 4-hidroxi-4-isopropil-8-(isotiazol-5-il)-3,4-dihidro-1H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6(5H)-ona racémica se sintetizó a través de un ruta análoga a los Compuestos 43 y 44). La separación mediante SFC quiral proporcionó cada enantiómero. (S)-4-hidroxi-4-isopropil-8-(isotiazol-5-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 46): MS obs. (ESI+): 349.0 [(M+H)+]. (R)-4-hidroxi-4-isopropil-8-(isotiazol-5-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 47): MS obs. (ESI+): 349.0 [(M+H)+]; 1H RMN (400 MHz, DMSO-de) 5 ppm: 11.10 (s, 1H), 8.64 (d,J= 2.0 Hz, 1H), 7.84 (d,J= 2.0 Hz, 1H), 7.81 (s, 1H), 5.31 (s, 1H), 4.71 (s, 2H), 3.97 (d,J= 11.6 Hz, 1H), 3.54 (d,J= 11.6 Hz, 1H), 2.40 -2.37 (m, 1H), 1.01 - 0.99 (d,J= 6.8 Hz, 3H), 0.77 - 0.75 (d,J= 6.8 Hz, 3H).
Ejemplos 48 y 49 - Compuestos 48 y 49: (S)-8,8-difluoro-6-hidroxi-6-(metoximetN)-2-(1H-pirazol-4-M)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 48) & (R)-8,8-difluoro-6-hidroxi-6-(metoximetil)-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 49)
Paso A: 5,5-difluoro-2,2-dimetoxiciclohexan-1-ona:
A una solución de 5,5-difluoro-2,2-dimetoxi-cidohexanol (29.4 g, 150 mmol, sintetizado de acuerdo con el procedimiento del Compuesto 12, paso A) en DCM (800.0 mL), se añadió peryodinano de Dess-Martin (95.4 g, 225 mmol) en porciones durante 20 min. Se agitó la mezcla durante 2 hr. y luego se concentró. Se diluyó el residuo con agua, se lavó con éter de petróleo:acetato de etilo (10:1, 500 mL) y las capas orgánicas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. Se purificó el residuo mediante cromatografía en columna (SiO2, 12% de EtOAc en PE) para dar 5,5-difluoro-2,2-dimetoxiciclohexan-1-ona (16.2 g, 55%). 1H RMN (400 MHz, CDCla): 8 ppm: 3.27 (s, 6H), 3.04 (t,J= 14.4 Hz, 2H), 2.28 ppm (m, 2H), 2.02 (m, 2H).
Paso B: 5,5-difluom-2,2-dimetoxi-1-vinilddohexan-1-ol:
A una solución de 5,5-difluoro-2,2-dimetoxiciclohexan-1-ona (1.2 g, 6.2 mmol, 1.0 eq.) en THF anhidro (30.0 mL) se añadió bromo(vinil)magnesio (1 M, 18.5 mL, 3.0 eq.) gota a gota a 0 °C. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 1 h. a continuación, se vertió en NH4Cl saturado (ac.) (10 mL) y se sometió a extracción con acetato de etilo (40 mL * 2). Se lavaron con salmuera las capas orgánicas combinadas, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía en columna (SiO2, 0 -10% de EtOAc en PE) para dar 5,5-difluoro-2,2-dimetoxi-1-vinilciclohexan-1-ol (630 mg, 45%). 1H RMN (400 MHz, CDCla): 8 ppm: 6.19 (dd,J= 17.2, 10.8 Hz, 1H), 5.47 (dd,J= 17.2, 1.6 Hz, 1H), 5.13 (dd,J= 10.8, 1.6 Hz, 1H), 3.24 (s, 3H), 3.23 (s, 3H), 2.54 (s, 1H), 2.16 -1.74 (m, 6H).
Paso C: (((5,5-difluom-2,2-dimetoxi-1-vinilddohexil)oxi)metíl)benceno:
Se añadió hidruro de sodio (305 mg, 7.63 mmol, 60% en aceite mineral, 1.5 eq.) a una solución de 5,5-difluoro-2,2-dimetoxi-1-vinilciclohexan-1-ol (1.13 g, 5.08 mmol, 1.0 eq.) en DMF anhidro (30.0 mL) en porciones a 0 °C. Se agitó la mezcla a 0 °C durante 1 h. A continuación, se añadió bromuro de bencilo (2.61 g, 15.2 mmol, 3.0 eq.) y se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 1 h más. Se vertió la mezcla en agua helada y se sometió a extracción con DCM (30 mL * 2). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron. Se purificó el residuo mediante cromatografía en columna (SO 2, 0 -10% de EtOAc en PE) para proporcionar (((5,5-difluoro-2,2-dimetoxi-1-vinilciclohexil)oxi)metil)benceno (1.3 g, 81%). 1H RMN (400 MHz, CDCh): 8 ppm: 7.38 - 7.28 (m, 5H), 6.13 - 6.04 (m, 1H), 5.44 (dd,J =11.2, 0.8 Hz, 1H), 5.29 (d,J =18.0 Hz, 1H), 4.44 (dd,J =34.8, 11.2 Hz, 2H), 3.42 (s, 3H), 3.28 (s, 3H), 2.50 - 1.80 (m, 6H).
Paso D: (1-(bendloxi)-5,5-difluoro-2,2-dimetoxiddohexil)metanol:
Se hizo burbujear ozono a través de una solución de (((5,5-difluoro-2,2-dimetoxi-1-vinilciclohexil)oxi)metil)benceno (650 mg, 2.08 mmol, 1.0 eq.) en DCM (20.0 mL) a - 78 °C. Se agitó la mezcla durante 30 min a -78 °C y luego se dejó calentar a ta. Se añadieron MeOH (5.0 ml) y NaBH4 )236 mg, 6.24 mmol, 3.0 eq.) y se agitó la mezcla durante 5 min. Se vertió la mezcla en agua y se sometió a extracción con acetato de etilo (70 mL * 2). Se lavaron con salmuera las capas orgánicas combinadas, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron. Se purificó el residuo mediante cromatografía en columna (SiO2 15 - 30% de EtOAc en PE) para proporcionar (1-(benciloxi)-5,5-difluoro-2,2dimetoxicidohexil)metanol (1.1 g, 83%). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): 5 ppm: 7.36 - 7.19 (m, 5H), 4.53 (d, J = 1.6 Hz, 2H), 3.92 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 3.69 - 3.57 (m, 1H), 3.38 (s, 3H), 3.25 (s, 3H), 2.35 (m, 2H), 2.08-1.85 (m, 4H).
Paso E: (((5,5-difluoro-2,2-dimetoxi-1-(metoximetil)ciclohexil)oxi)metil)benceno:
Se añadió hidruro de sodio (265 mg, 6.64 mmol, 60% en aceite mineral, 1.4 eq.) en porciones a una solución de (1-(benciloxi)-5,5-difluoro-2,2-dimetoxicidohexil)metanol (1.5 g, 4.74 mmol, 1.0 eq.) en DMF anhidro (30.0 mL) a 0 °C. Se agitó la mezcla durante 1 h a temperatura ambiente y luego se añadió yodometano (6.73 g, 47.4 mmol, 10 eq.). Se agitó la mezcla durante 2 h, luego se vertió en agua helada y se sometió a extracción con DCM (60 mL x 2). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron. Se purificó el residuo mediante cromatografía en columna (SO 2, 0 -10% de EtOAc en PE) para proporcionar (((5,5-difluoro-2,2-dimetoxi-1-(metoximetil)ciclohexil)oxi)metil)benceno (1.2 g, 76%). 1H R<m>N (400 MHz, CDCla): 5 ppm: 7.38 - 7.17 (m, 5H), 4.72 (s, 2H), 3.74 (s, 2H), 3.39 (s, 3H), 3.34 (s, 3H), 3.30 (s, 3H), 2.64 - 2.25 (m, 3H), 2.22 - 1.75 (m, 3H).
Paso F: 2-(bendloxi)-4,4-difluoro-2-(metoximetil)ddohexan-1-ona:
Se agitó durante 2 h a temperatura ambiente una mezcla de (((5,5-difluoro-2,2-dimetoxi-1-(metoximetil)ciclohexil)oxi)metil)benceno (1.33 g, 4.03 mmol, 1.0 eq.), I2 (102 mg, 402 pmol, 0.1 eq.) y acetona (30.0 mL). Se vertió la mezcla en agua, se extinguió la reacción con Na2S2O3 saturado (ac) y se sometió a extracción con DCM (60 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron. Se purificó el residuo mediante cromatografía instantánea en columna (SO 2, 0 -5% de EtOAc en PE) para proporcionar 2-(benciloxi)-4,4-difluoro-2-(metoximetil)ciclohexan-1-ona (1.05 g, 91%). 1H RMN (400 MHz, CDCla): 5 ppm: 7.42 - 7.26 (m, 5H), 4.60 (dd, J=11.4 Hz, 1H), 4.40 (dd, J=11.4 Hz, 1H), 3.68 (m, 2H), 3.37 (s, 3H), 2.92 - 2.62 (m, 2H), 2.52 - 2.23 (m, 4H).
Paso G: 6-(benciloxi)-8,8-difluoro-6-(metoximetil)-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi) metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-4H-tieno[2,3-c]cromen-4-ona:
Se agitó durante 16 h a 105 °C bajo nitrógeno una mezcla de 3-bromo-5-[1-(2-trimetilsililetoximetil)pirazol-4-il]tiofeno-2-carboxilato de metilo (660 mg, 1.6 mmol, 1.8 eq.), 2-(benciloxi)-4,4-difluoro-2-(metoximetil)ciclohexan-1-ona (250 mg, 880 pmol, 1.0 eq.), metabisulfito de sodio (50 mg, 263 pmol, 0.3 eq.), carbonato de cesio (859 mg, 2.64 mmol, 3.0 eq.), Sphos-Pd-G3 (137 mg, 175 pmol, 0.20 eq.) y tolueno (50.0 mL). Se vertió la mezcla en agua y se sometió a extracción con EtOAc (60 mL x 2). Se lavaron con salmuera las capas orgánicas combinadas, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron. Se purificó el residuo mediante cromatografía en columna (SiO2, 0 - 35% de EtOAc en PE) para dar 6-(benciloxi)-8,8-difluoro-6-(metoximetil)-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-4H-tieno[2,3-c]cromen-4-ona (360 mg, 69%). MS obs. (ESI+): 589.5 [(M+H)+].
Paso H: 6-(benciloxi)-8,8-difluoro-6-(metoximetil)-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona:
Se agitó durante 4 h a 100 °C en un reactor de microondas una mezcla de 6-(benciloxi)-8,8-difluoro-6-(metoximetil)-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-4H-tieno[2,3-c]cromen-4-ona (180 mg, 305 pmol, 1.0 eq.), hidróxido de amonio (8.0 mL) y 2-propilalcohol (8.0 mL). Se concentró la mezcla al vacío, y se purificó el residuo mediante cromatografía en columna (SiO2, 0 - 1% de MeOH en DCM) para proporcionar 6-(benciloxi)-8,8-difluoro-6-(metoximetil)-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (80 mg, 44%). MS obs. (ESI+): 588.5 [(M+H)+].
Paso I: (S)-8,8-difluoro-6-hidroxi-6-(metoximetil)-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona(Compuesto 48) &(R)-8,8-difluoro-6-hidroxi-6-(metoximetil)-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona(Compuesto 49):
Se añadió tricloruro de boro (1 M, 4.7 mL, 15 eq.) a una solución de 6-(benciloxi)-8,8-difluoro-6-(metoximetil)-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (190 mg, 320 pmol, 1.0 eq.) en DCM (25.0 mL) a 0 °C. Se agitó la mezcla durante 2 h a temperatura ambiente, se extinguió la reacción con MeOH, se concentró y se neutralizó con NH3/MeOH (7 M). Se purificó el residuo mediante cromatografía en columna (SiO2, 0 - 4% de MeOH en DCM) para dar 8,8-difluoro-6-hidroxi-6-(metoximetil)-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona racémica (64 mg, 53%). MS obs. (ESI+): 368.0 [(M+H)+].
La separación mediante SFC proporcionó cada enantiómero. (S)-8,8-difluoro-6-hidroxi-6-(metoximetil)-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 48): MS obs. (ESI+): 368.0 [(M+H)+]. (R)-8,8-difluoro-6-hidroxi-6-(metoximetil)-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 49): MS obs. (ESI+): 368.0 [(M+H)+]; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 13.23 (s, 1H), 10.70 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.58 (s, 1H), 5.69 (s, 1H), 3.60 (dd, J = 45.2, 10.0 Hz, 2H), 3.29 (s, 3H), 3.21 -3.10 (m, 2H), 2.77 -2.61 (m, 1H), 2.38 -2.19 (m, 1H).
Ejemplos 50 y 51 - Compuestos 50 y 51: (S)-6-etN-8,8-difluoro-6-hidroxi-2-(1H-pirazol-4-N)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 50) y (R)-6-etN-8,8-difluoro-6-hidroxi-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 51)
Paso A: 1-etil-5,5-difluoro-2,2-dimetoxiciclohexan-1-ol:
A una solución de 5,5-difluoro-2,2-dimetoxi-1-vinilcidohexan-1-ol (1.8 g, 8.1 mmol, 1.0 eq.) en MeOH (90 mL) y H2O (2.0 mL) se añadió Pd/C humedecido (10%, 540 mg). Se purgó la mezcla con nitrógeno y luego se agitó a 50 °C durante 16 h bajo una atmósfera de hidrógeno. Se enfrió la mezcla de reacción a temperatura ambiente, se la filtró a través de celite y se lavó la torta de filtro con MeOH (100 mL). Se concentró el filtrado al vacío, y se purificó mediante cromatografía instantánea en columna (SO 2, 10 - 50% de EtOAc en PE) para dar 1-etil-5,5-difluoro-2,2-dimetoxiciclohexan-1-ol (1.5 g, 82%). 1H RMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm: 3.39 (s, 3H), 3.33 (s, 3H), 1.99 - 1.62 (m, 8H), 0.99 (t,J= 7.6 Hz, 3H).
Paso B: 2-etil-4,4-difluom-2-hidmxiddohexan-1-ona:
A una solución de 1-etil-5,5-difluoro-2,2-dimetoxiciclohexan-1-ol (1.8 g, 8.03 mmol, 1.0 eq.) en DCM (28.0 mL) se añadió agua (7.0 mL) y ácido trifluoroacético (7.0 mL). Se agitó la mezcla durante 1 h a temperatura ambiente y luego se concentró. La purificación por cromatografía en columna (SO 2, 10 - 50 % de EtOAc en PE) proporcionó 2-etil-4,4-difluoro-2-hidroxiciclohexan-1-ona (1.2 g, 85%). 1H RMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm: 2.84 -2.70 (m, 2H), 2.59 -2.46 (m, 2H), 2.29 -2.11 (m, 2H), 1.97 - 1.87 (m, 1H), 1.84 - 1.74 (m, 1H), 0.84 (t,J=7.2 Hz, 3H).
Paso C: 6-etil-8,8-difluoro-6-hidroxi-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-4H-tieno[2,3-c]cromen-4-ona:
A una solución de 2-etil-4,4-difluoro-2-hidroxiciclohexan-1-ona (205 mg, 1.15 mmol, 2.0 eq.) y 3-bromo-5-[1-(2-trimetilsililetoximetil)pirazol-4-il]tiofeno-2-carboxilato de metilo (240 mg, 0.58 mmol, 1.0 eq.) en tolueno (15.0 mL) se añadió metabisulfito de sodio (22 mg, 0.12 mmol, 0.2 eq.), Cs2CO3 (374 mg, 1.15 mmol, 2.0 eq.) y Pd2(dba)3 (105 mg, 0.12 mmol, 0.2 eq.), Xantphos (100 mg, 0.17 mmol, 0.3 eq.) bajo una atmósfera de N2. Se agitó la mezcla a 105 °C durante 16 h. luego se filtró y se concentró al vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía en columna (SiO2, 0 - 100 % de EtoAc en PE) para dar 6-etil-8,8-difluoro-6-hidroxi-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-4H-tieno[2,3-c]cromen-4-ona (224 mg, 80%).<m>S obs. (ESI+): 483.7 [(M+H)+].
Paso D: 6-etil-8,8-difluoro-6-hidroxi-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona:
Se calentó una solución de 6-etil-8,8-difluoro-6-hidroxi-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-4H-tieno[2,3-c]cromen-4-ona (595 mg, 1.23 mmol, 1.0 eq.) en una mezcla de MeOH (9 mL) y NH4OH (9.0 mL) en un reactor de microondas a 100 °C durante 3 h. Se concentró la mezcla y purificó el residuo mediante cromatografía en columna (SiO2, 0 -10 % de MeOH en DCM) para dar 6-etil-8,8-difluoro-6-hidroxi-2(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (360 mg, 60%). MS obs. (ESI+): 482.7 [(M+H)+].
Paso E: (S)-6-etil-8,8-difluoro-6-hidroxi-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona(Compuesto 50) y(R)-6-etil-8,8-difluoro-6-hidroxi-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona(Compuesto 51):
A una solución de 6-etil-8,8-difluoro-6-hidroxi-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (357 mg, 0.74 mmol, 1.0 eq.) en DCM (5.0 mL) se añadió ácido trifluoroacético (5.0 mL). Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 1 h, luego se concentró al vacío y se purificó el residuo por cromatografía en columna (SiO2, 0 - 10% de MeOH en DCM) para dar 6-etil-8,8-difluoro-6-hidroxi-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona racémica (140 mg, 54%). MS obs. (ESI+): 352.4 [(M+H)+].
Los isómeros individuales se separaron mediante SFC quiral. (S)-6-etil-8,8-difluoro-6-hidroxi-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 50): MS obs. (ESI+): 352.2 [(M+H)+]. (R)-6-etil-8,8-difluoro-6-hidroxi-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 51): MS obs. (ESI+): 352.0 [(M+H)+]; 1H RMN (400 MHz, DMSO-de) 5 ppm: 13.23 (s, 1H), 10.74 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 5.33 (s, 1H), 3.30 - 3.27 (m, 2H), 2.68 - 2.54 (m, 1H), 2.33 - 2.20 (m, 1H), 1.96 - 1.87 (m, 1H), 1.83 - 1.74 (m, 1H), 0.89 - 0.84 (m, 3H).
Ejemplos 52 y 53 - Compuestos 52 y 53: (S)-8,8-difluoro-6-metoxi-6-metM-2-(1H-pirazol-4-N)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]qumolm-4(5H)-ona (Compuesto 52) & (R)-8,8-difluoro-6-metoxi-6-metil-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 53) (Los estereoisómeros se asignan arbitrariamente)
Paso A: 5,5-difluoro-2,2-dimetoxi- 1-metilciclohexan- 1-ol:
A un matraz de tres cuellos seco que contenía 5,5-difluoro-2,2-dimetoxiciclohexan-1-ona (5.65 g, 29.1 mmol, 1.0 eq.) en THF anhidro (270.0 mL) se añadió bromuro de metilmagnesio (3 M en éter dietílico, 29.1 mL, 87.4 mmol, 3.0 eq.) a 0 °C. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 2 h bajo atmósfera de N2 y se vigiló por TLC hasta su finalización. Se extinguió la mezcla con NH4Cl saturado (ac.) a 0 °C, se diluyó con agua (125 mL) y se sometió a extracción con EtOAc (90 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron, se concentraron al vacío y se purificó el residuo por cromatografía en columna (SiO2, 0 - 20% de EtOAc en PE) para dar 5,5-difluoro-2,2-dimetoxi-1-metilciclohexan-1-ol (5.98 g, 97%). 1H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 ppm: 3.41 (s, 3H), 3.32 (s, 3H), 2.69 (s, 1H), 2.20 -2.06 (m, 2H), 2.03 -1.90 (m, 2H), 1.85 - 1.68 (m, 2H), 1.32 (s, 3H).
Paso B: 4, 4-difluoro-1,1,2-trímetoxi-2-metilddohexano:
Aun matraz de fondo redondo de tres bocas seco que contenía hidruro de sodio (2.28 g, 56.7 mmol, 60% en aceite mineral, 2.0 eq) se añadió THF anhidro (170.0 mL) a 0 °C, seguido de una mezcla de 5,5-difluoro-2,2-dimetoxi-1-metilcidohexan-1-ol (5.98 g, 28.5 mmol, 1.0 eq ) en THF (3.0 mL). Se agitó la mezcla a 0 °C durante 30 min, luego se añadió yodometano (40.4 g, 285 mmol, 10.0 eq) y se agitó la mezcla durante 1.5 h más. Se añadió yodometano adicional (40.4 g, 285 mmol, 10.0 eq) a la mezcla de reacción a 0 °C. Se agitó la mezcla durante 1.5 h más, luego se añadió agua a 0 °C. Se sometió la mezcla a extracción con EtOAc (160 mL * 2) y se lavaron con salmuera (150 mL * 2) las capas orgánicas combinadas, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron al vacío. La purificación por cromatografía en columna (SO 2, 0 -10% de EtOAc en PE) proporcionó 4,4-difluoro-1,1,2-trimetoxi-2-metilciclohexano (5.1 g, 80%). 1H RMN (400 MHz, CDCla) 5 ppm: 3.37 (s, 3H), 3.33 (s, 3H), 3.27 (s, 3H), 2.27 -2.20 (m, 1H), 2.18 -2.05 (m, 2H), 2.00 - 1.86 (m, 2H), 1.80 - 1.69 (m, 1H), 1.29 (s, 3H).
Paso C: 4,4-difíuom-2-metoxi-2-metilcidohexan-1-ona:
A un matraz que contenía 4,4-difluoro-1,1,2-trimetoxi-2-metilciclohexano (2.58 g, 11.51 mmol) en DCM (28 mL), se añadieron agua (7 mL) y ácido trifluoroacético (7 mL) a 0 °C. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 5 h. a continuación, se sometió a extracción con DCM (30 mL * 2). Las capas orgánicas combinadas se concentraron al vacío. Se diluyó el residuo con DCM (20 mL), se lavó con NaHCO3 acuoso (10 mL * 2) y la fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio anhidro. Se filtró la mezcla y se concentró al vacío dar 4,4-difluoro-2-metoxi-2-metilciclohexan-1-ona (1.9 g, 10.1 mmol, 88%). 1H RMN (400 MHz, CDCla) 5 ppm: 3.21 (s, 3H), 2.91 - 2.85 (m, 1H), 2.65 - 2.57 (m, 1H), 2.48 - 2.41 (m, 2H), 2.23 - 2.09 (m, 2H), 1.30 (s, 3H).
Paso D: 8,8-difluoro-6-metoxi-6-metil-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-4H-tieno[2,3-c]cromen-4-ona:
A una solución de 3-bromo-5-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)tiofeno-2-carboxilato de metilo (1.0 g, 2.4 mmol) y 4,4-difluoro-2-metoxi-2-metilciclohexan-1-ona (598 mg, 3.35 mmol) en tolueno (30.0 mL) se añadió Cs2COs (2.34 g, 7.19 mmol), Pd2(dba)3 (439 mg, 479 pmol) y Na2S2O5 (91.1 mg, 479 pmol). Se agitó la mezcla bajo nitrógeno durante 12 h a 105 °C. Se enfrió la mezcla a 0 °C, se añadió H2O (40 mL) y se sometió la mezcla resultante a extracción con EtOAc (30 mL * 3). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron. La purificación por cromatografía en columna (SiO2, 0 - 10% de EtOAc en PE) dio 8,8-difluoro-6-metoxi-6-metil-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-4H-tieno[2,3-c]cromen-4-ona (385 mg, 33%). MS obs. (ESI+): 483.4 [(M+H)+].
Paso E: 8,8-difluoro-6-metoxi-6-metil-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona:
A una solución de 8,8-difluoro-6-metoxi-6-metil-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-4H-tieno[2,3-c]cromen-4-ona (0.70 g, 1.45 mmol) en MeOH (6.0 mL) se añadió hidróxido de amonio (6.0 mL). Se agitó la mezcla a 95 °C durante 2 h en un reactor de microondas. Se enfrió la mezcla a 0 °C y se añadió H2O (20 mL). Se sometió la mezcla resultante a extracción con EtOAc (50 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron. Se purificó el producto crudo mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 0 - 30% de EtOAc en PE) para proporcionar 8,8-difluoro-6-metoxi-6-metil-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (170 mg, 24%). MS obs. (ESI+): 482.5 [(M+H)+].
Paso F: (S)-8,8-difluoro-6-metoxi-6-metil-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona(Compuesto 52) &(R)-8,8-difluoro-6-metoxi-6-metil-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona(Compuesto 53):
A una solución de 8,8-difluoro-6-metoxi-6-metil-2-[1-(2-trimetilsililetoximetil)pirazol-4-il]-7,9-dihidro-5H-tieno[2,3-c]quinolin-4-ona (170 mg, 353 |jmol, 1.0 eq.) en DCM (5.0 mL), se le añadió ácido trifluoroacético (402 mg, 3.53 mmol, 272 jL , 10.0 eq.) a 0 °C. Se agitó la mezcla a 25 °C durante 15 h. A continuación, se enfrió la mezcla a 0 °C y se añadió gota a gota (20 mL) de NaHCO3 acuoso saturado, a 0 °C. Se sometió la mezcla resultante a extracción con EtOAc (20 mL x 3). Se secó la fase orgánica combinada sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró. Se purificó el producto crudo mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 0 - 10% de MeOH en DCM) para dar 8,8-difluoro-6-metoxi-6-metil-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona racémica (100 mg, 80%).
Los enantiómeros individuales se aislaron mediante SFC quiral. (S)-8,8-difluoro-6-metoxi-6-metil-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 52): MS obs. (ESI+): 352.1 [M+H]+. (R)-8,8-difluoro-6-metoxi-6-metil-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 53): MS obs. (ESI+): 352.1 [M+H]+; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 13.23 (s, 1H), 11.02 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 3.44 - 3.37 (m, 2H), 3.07 (s, 3H), 2.82 - 2.61 (m, 1H), 2.40 - 2.26 (m, 1H), 1.56 (s, 3H).
Ejemplos 54 y 55 - Compuestos 54 y 55: (R)-8,8-difluoro-6-hidroxi-6-metM-2-(1H-pirazol-4-N)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 54) & (S)-8,8-difluoro-6-hidroxi-6-metil-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 55) (Los estereoisómeros se asignan arbitrariamente)
Paso A: (((5,5-difluoro-2,2-dimetoxi-1-metilciclohexil)oxi)metil)benceno:
A una solución de 5,5-difluoro-2,2-dimetoxi-1-metilcidohexan-1-ol (300 mg, 1.43 mmol, 1.0 eq.) en DMF anhidro (3.0 mL) se le añadió NaH (109 mg, 2.85 mmol, 60% en aceite mineral, 2.0 eq.) a 0 °C. Se agitó la mezcla a 0 °C durante 10 min. a continuación, se añadió gota a gota bromuro de bencilo (488.16 mg, 2.85 mmol, 339 jL , 2.0 eq.). Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 1 h. luego se extinguió la reacción con solución de NH4Cl acuoso saturado y se diluyó con agua (60 mL). Se sometió la mezcla a extracción con EtOAc (40 mL x 3) y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron. Se purificó el residuo mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 0 - 4% de EtOAc en PE) para dar (((5,5-difluoro-2,2-dimetoxi-1-metilciclohexil)oxi)metil)benceno (370 mg, 86%). 1H RMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm: 7.36 - 7.24 (m, 5H), 4.60 - 4.52 (m, 2H), 3.39 (s, 3H), 3.33 (s, 3H), 2.50 - 2.35 (m, 1H), 2.26 - 2.22 (m, 1H), 2.15 -2.07 (m, 1H), 2.05 - 1.89 (m, 2H), 1.83 - 1.77 (m, 1H), 1.38 (s, 3H).
Paso B: 2-(benciloxi)-4,4-difluom-2-metilddohexan-1-ona:
A una solución de (((5,5-difluoro-2,2-dimetoxi-1-metilciclohexil)oxi)metil)benceno (370 mg, 1.23 mmol, 1.0 eq.) en acetona (15.0 mL) se añadió yodo (31.7 mg, 125 jmol, 0.10 eq.). Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 10 min. luego se extinguió la reacción con Na2SO3 saturado (ac.) (20 mL) y se sometió a extracción con DCM (30 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron. Se purificó el residuo mediante cromatografía instantánea en columna (SO 2, 0 - 10% de EtOAc en PE) para dar 2-(benciloxi)-4,4-difluoro-2-metilciclohexan-1-ona (280 mg, 88%). 1H RMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm: 7.35 - 7.26 (m, 5H), 4.56 (d,J=11.6 Hz, 1H), 4.26 (d,J =11.6 Hz, 1H), 2.94 -2.91 (m, 1H), 2.79 -2.74 (m, 1H), 2.48 -2.42 (m, 2H), 2.25 -2.18 (m, 2H), 1.41 (s, 3H).
Paso C: 6-(bendloxi)-8,8-difluoro-6-metil-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-IH-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-4H-tieno[2,3-c]cromen-4-ona:
A una solución de 3-bromo-5-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)tiofeno-2-carboxilato de metilo (240 mg, 575 jmol, 1.0 eq.) y 2-(benciloxi)-4,4-difluoro-2-metilciclohexan-1-ona (292 mg, 1.15 mmol, 2.0 eq.) en tolueno (18.0 mL) se añadió Pd2(dba)3 (105 mg, 115 jmol, 0.20 eq.), Xantphos (133 mg, 230 jmol, 0.40 eq.) y carbonato de cesio (562 mg, 1.72 mmol, 3.0 eq.). Se agitó la mezcla a 105 °C durante 16 h bajo nitrógeno, luego se enfrió y se filtró. Se concentró el filtrado al vacío, y se purificó el residuo mediante cromatografía en columna (SiO2, 0 - 16% de EtOAc en PE) para dar 6-(benciloxi)-8,8-difluoro-6-metil-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-4H-tieno[2,3-c]cromen-4-ona (220 mg, 68%). m S obs. (ESI+): 559.5 [(M+H)+].
Paso D: 6-(benciloxi)-8,8-difluoro-6-metil-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona:
A una solución de 6-(benciloxi)-8,8-difluoro-6-metil-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidro-4H-tieno[2,3-c]cromen-4-ona (220 mg, 394 ^mol) en MeOH (7 mL) se añadió amoníaco (7 M en MeOH, 7.0 mL). Se agitó la mezcla a 95 °C durante 16 h. luego se enfrió y se concentró al vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía en columna (SiO2, 0 - 5% de MeOH en DCM) para dar 6-(benciloxi)-8,8-difluoro-6-metil-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (180 mg, 77%). MS obs. (ESI+): 558.6 [(M+H)+].
Paso E: (R)-8,8-difluoro-6-hidroxi-6-metil-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8, 9-tetrahidrotieno[2, 3-c]quinolin-4(5H)-ona(Compuesto 54) &(S)-8,8-difluoro-6-hidroxi-6-metil-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona(Compuesto 55) (Los estereoisómeros se asignan arbitrariamente):
A una solución de 6-(benciloxi)-8,8-difluoro-6-metil-2-(1-((2-(trimetilsilil) etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (90 mg, 161 ^mol, 1.0 eq.) en DCM (10.0 mL) se añadió tricloruro de boro (1 M, 2.0 mL, 12 eq.) a -5 °C. Se agitó la mezcla durante 1.5 h a -5 °C, se extinguió la reacción con MeOH y se concentró bajo una corriente de nitrógeno. Se ajustó el pH a alrededor de 9 añadiendo progresivamente NH3/MeOH (7 M). Luego se concentró la mezcla al vacío, y se purificó el residuo mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 0 -10% de MeOH en DCM) para dar 8,8-difluoro-6-hidroxi-6-metil-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona racémica (23 mg, 42%). MS obs. (ESI+): 338.3 [(M+H)+].
Se separaron los enantiómeros individuales mediante SFC quiral. (R)-8,8-difluoro-6-hidroxi-6-metil-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 54): MS obs. (ESI+): 338.0 [(M+H)+]; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 13.24 (s, 1H), 10.88 (s, 1H), 8.13 (s, 2H), 7.56 (s, 1H), 5.57 (s, 1H), 3.33 - 3.24 (m, 2H), 2.50 - 2.42 (m, 2H), 1.54 (s, 3H). (S)-8,8-difluoro-6-hidroxi-6-metil-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 55): MS obs. (ESI+): 338.0 [(M+H)+].
Ejemplos 56 y 57 - Compuestos 56 y 57: (S)-4-(2-hidroxipropan-2-N)-4-metN-8-(1H-pirazol-4-N)-1,5-dihidro-2H-pirano[3,4-b]tieno[3,2-d]piridin-6(4H)-ona (Compuesto 56) & (R)-4-(2-hidroxipropan-2-il)-4-metM-8-(1H-pirazol-4-M)-1,5-dihidro-2H-pirano[3,4-b]tieno[3,2-d]piridm-6(4H)-ona (Compuesto 57)
Paso A: 4-metil-6-oxo-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-1,4,5, 6-tetrahidro-2H-pirano[3,4-b]tieno[3,2-d]piridina-4-carbaldehído:
Se agitó durante 24 h a 45 °C una mezcla de 4-(hidroximetil)-4-metil-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-1,5-dihidro-2H-pirano[3,4-b]tieno[3,2-d]piridin-6(4H)-ona (100 mg, 223 |jmol, 1.0 eq., sintetizada de acuerdo con los procedimientos de los compuestos 34 & 35), IBX (626 mg, 2.23 mmol, 10.0 eq.) y DCM (12 mL). Se extinguió la mezcla con solución acuosa saturada de Na2SO3, se sometió a extracción con DCM (30 mL x 3 ). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron. Se purificó el residuo mediante cromatografía en columna (SiO2, 0 - 4% de MeOH en DCM) para dar 4-metil-6-oxo-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-1,4,5,6-tetrahidro-2H-pirano[3,4-b]tieno[3,2-d]piridina-4-carbaldehído (80 mg, 80%). MS obs. (ESI+): 464.3 [(M+H2O+H)+].
Paso B: 4-(1-hidroxietil)-4-metil-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-1,5-dihidro-2H-pirano[3,4-b]tieno[3,2-d]piridin-6(4H)-ona:
A una solución de 4-metil-6-oxo-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-1,4,5,6-tetrahidro-2H-pirano[3,4-b]tieno[3,2-d]piridina-4-carbaldehído (160 mg, 360 jmol, 1.0 eq.) en THF (7.5 mL) se añadió bromuro de metilmagnesio (3 M en éter dietílico, 23.3 mL, 195 eq.). Se agitó la mezcla a ta durante 1.5 h y se extinguió la reacción con saturado NH4Cl (ac.), luego se vertió en agua y se sometió a extracción con DCM (50 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron. Se purificó el residuo mediante cromatografía en columna (SO 2, 0 - 4 % de MeOH en DCM) para dar 4-(1-hidroxietil)-4-metil-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-1,5-dihidro-2H-pirano[3,4-b]tieno[3,2-d]piridin-6(4H)-ona (152 mg, 82%). MS obs. (ESI+): 462.3 [(M+H)+].
Paso C: 4-acetil-4-metil-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-1,5-dihidro-2H-pirano[3, 4-b]tieno[3,2-d]piridin-6(4H)-ona:
A una solución de 4-(1-hidroxietil)-4-metil-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-1,5-dihidro-2H-pirano[3,4-b]tieno[3,2-d]piridin-6(4H)-ona (126 mg, 273 jmol, 1.0 eq.) en DCM (40.0 mL) se le añadió Peryodinano de Dess-Martin (694 mg, 1.64 mmol, 6.0 eq.) en pequeñas porciones a 0 °C. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 1.5 hr., a continuación, se extinguió la reacción con Na2SO3 saturado (ac.) y se sometió a extracción con DCM (30 mL x 3 ). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron. Se purificó el residuo mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 0 - 3% de MeOH en DCM) para dar 4-acetil-4-metil-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-1,5-dihidro-2H-pirano[3,4-b]tieno[3,2-d]piridin-6(4H)-ona (85 mg, 67%). MS obs. (ESI+): 460.3 [(M+H)+].
Paso D: 4-(2-hidroxipropan-2-il)-4-metil-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-1,5-dihidro-2H-pirano[3, 4-b]tieno[3, 2-d]piridin-6(4H)-ona:
A una solución de 4-acetil-4-metil-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-1,5-dihidro-2H-pirano[3,4-b]tieno[3,2-d]piridin-6(4H)-ona (85 mg, 185 jmol, 1.0 eq.) en THF (2.0 mL) se añadió bromuro de metilmagnesio (3 M en éter dietílico, 2.0 mL, 32.4 eq.). Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 2 hr., se extinguió la reacción con NH4CI saturado (ac.), luego se vertió en agua y se sometió a extracción con DCM (30 mL x 3 ). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron. Se purificó el residuo mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 0 - 4% de MeOH en DCM) para dar 4-(2-hidroxipropan-2-il)-4-metil-8-(1 -((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-1,5-dihidro-2H-pirano[3,4-b]tieno[3,2-d]piridin-6(4H)-ona (50 mg, 56%). MS obs. (ESI+): 476.3 [(M+H)+].
Paso E: (S)-4-(2-hidroxipropan-2-il]-4-metil-8-(1H-pirazol-4-il)-1,5-dihidro-2H-pirano[3,4-b]tieno[3,2-d]piridin-6(4H)-ona(Compuesto 56) &(R)-4-(2-hidroxipropan-2-il)-4-metil-8-(1H-pirazol-4-il)-1,5-dihidro-2H-pirano[3,4-b]tieno[3,2-d]piridin-6(4H)-ona(Compuesto 57):
A una solución de 4-(2-hidroxipropan-2-il)-4-metil-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-1,5-dihidro-2H-pirano[3,4-b]tieno[3,2-d]piridin-6(4H)-ona (75 mg, 160 pmol, 1.0 eq.) en DCM (6.0 mL) se añadió ácido trifluoroacético (2.0 mL) a 0 °C. Se dejó calentar la mezcla a temperatura ambiente y se agitó durante 4 hr. Se concentró la mezcla bajo una corriente de nitrógeno y se ajustó el pH a alrededor de 9 añadiendo progresivamente NH3/MeOH (7 M) a 0 °C. Se concentró la mezcla para proporcionar un residuo, que se purificó por cromatografía en columna (SiO2, 0 - 7% de MeOH en DCM) para dar 4-(2-hidroxipropan-2-il)-4-metil-8-(1H-pirazol-4-il)-1,5-dihidro-2H-pirano[3,4-b]tieno[3,2-d]piridin-6(4H)-ona racémica (48 mg, 85%). MS obs. (ESI+): 346.0 [(M+H)+].
Se separaron los enantiómeros individuales mediante SFC quiral. (S)-4-(2-hidroxipropan-2-il)-4-metil-8-(1H-pirazol-4-il)-1,5-dihidro-2H-pirano[3,4-b]tieno[3,2-d]piridin-6(4H)-ona (Compuesto 56): MS obs. (ESI+): 346.2 [(M+H)+]; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 13.22 (s, 1H), 10.21 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 5.98 (s, 1H), 4.02 - 3.89 (m, 2H), 2.76 - 2.60 (m, 2H), 1.53 (s, 3H), 1.27 (s, 3H), 1.00 (s, 3H). (R)-4-(2-hidroxipropan-2-il)-4-metil-8-(1H-pirazol-4-il)-1,5-dihidro-2H-pirano[3,4-b]tieno[3,2-d]piridin-6(4H)-ona (Compuesto 57): MS obs. (ESI+): 346.2 [(M+H)+].
Ejemplo 58 - Compuesto 58: 4,4-dimetil-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona
Paso A: 4,4-dimetil-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)- 1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro- 1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona:
Se disolvió ácido metil 3-bromo-5-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)tiofeno-2-carboxílico (100 mg, 240 pmol, 1.0 eq.) en DMF (10.0 mL), antes añadir de 3,3-dimetiltetrahidropiran-4-ona (61 mg, 480 pmol, 2.0 eq.), Na2S2O5 (9.0 mg, 48 pmol, 0.20 eq.), Cs2CO3 (230 mg, 720 pmol, 3.0 eq.) y BINAP-Pd-G3 (24 mg, 24 pmol, 0.10 eq.). Se agitó la mezcla a 105 °C durante 16 h, se enfrió, se filtró y se concentró. La purificación por cromatografía en columna (SiO2 0 - 4% de MeOH en DCM proporcionó 4,4-dimetil-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (20 mg, 19%). MS obs. (ESI+): 433.4 [(M+H)+].
Paso B: 4, 4-dimetil-8-(1H-pirazol-4-il)-3, 4-dihidro-1H, 6H-pirano[4, 3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona:
Se agitó a ta durante 2 h una mezcla de 4,4-dimetil-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (45 mg, 100 ^mol), DCM (5.0 mL) y ácido trifluoroacético (1.5 mL). Se concentró la mezcla al vacío para dar 4,4-dimetil-8-(1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (40 mg) que se utilizó sin purificación adicional. MS obs. (ESI+): 303.2 [(M+H)+].
Paso C: 4, 4-dimetil-8-(1H-pirazol-4-il)-1, 3, 4,5-tetrahidro-6H-pirano[4, 3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona:
Se calentó una mezcla de 4,4-dimetil-8-(1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (40 mg, cruda), NH4OH (5.0 mL) y MeOH (5.0 mL) a 100 °C durante 4 h en un reactor de microondas. Se concentró la mezcla al vacío, y se purificó el residuo mediante cromatografía en columna (SiO2, 0 - 5% de MeOH en DCM) para proporcionar 4,4-dimetil-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (9.0 mg, 36%). MS obs. (ESI+): 302.2 [(M+H)+]; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 13.21 (brs, 1H), 11.20 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 4.69 (s, 2H), 3.57 (s, 2H), 1.26 (s, 6 H).
Ejemplos 59 y 60 - Compuestos 59 y 60: (S)-4-(terc-butN)-8-(3-fluoropmdm-4-N)-4-hidroxM,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 59) y (R)-4-(terc-butil)-8-(3-fluoropmdm-4-N)-4-hidroxM,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]pmdm-6-ona (Compuesto 60) (La estereoquímica para los Compuestos 59 y 60 se asigna arbitrariamente)
Paso A: 4,4-dimetoxitetrahidro-2H-piran-3-ol:
Se enfrió a 0 °C una solución de tetrahidropiran-4-ona (40.0 g, 400 mmol, 1.0 eq.) e hidróxido de potasio (67.3 g, 1.20 mol, 3.0 eq.) en MeOH (1.7 L) y se añadió I2 lentamente (117 g, 459 mmol, 1.15 eq.). Se dejó que la mezcla de reacción se calentara a ta y después de 4 h se concentró la mezcla. El producto crudo se trituró con EtOAc (300 mL) para proporcionar 4,4-dimetoxitetrahidro-2H-piran-3-ol (50 g, utilizado sin purificación adicional). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6 ) 54.75 (s, 1H), 3.68 - 3.54 (m, 2H), 3.52 - 3.41 (m, 2H), 3.32 - 3.25 (m, 1H), 3.12 (s, 3H), 3.11 (s, 3H), 1.84 - 1.76 (m, 1H), 1.62 - 1.57 (m, 1H).
Paso B: 4,4-dimetoxidihidro-2H-piran-3(4H)-ona:
Se enfrió a 0 °C una solución de 4,4-dimetoxitetrahidropiran-3-ol (40.0 g, 247 mmol, 1.0 eq.) en DCM (900 mL) y se añadió DMP (157 g, 370 mmol, 1.5 eq.). Se calentó la mezcla a 30 °C durante 16 h antes de agregar una mezcla de éter de petróleo y EtOAc (8:1, 400 mL). El filtrado se concentró y se purificó (SO 2, 5% de éter de petróleo en EtOAc) para dar 4,4-dimetoxidihidro-2H-piran-3(4H)-ona (23 g, 45%, 2 pasos) como un sólido amarillo claro.
1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 83.99 (s, 2H), 3.87 - 3.80 (m, 2H), 3.14 (s, 6H), 2.16 - 2.10 (m, 2H).
Paso C: 3-(terc-butil)-3-hidroxitetrahidro-4H-piran-4-ona:
Se enfrió a -78 °C una solución de 4,4-dimetoxitetrahidropiran-3-ona (10.0 g, 62.4 mmol, 1.0 eq.) en THF anhidro (100 mL) y se añadió gota a gota t-BuLi (1.3 M en THF, 62 mL, 1.3 eq.) durante 30 min. Se agitó la mezcla a -78 °C durante 2 h antes de añadir gota a gota HCl (2 M ac., 94 mL) durante 15 min. Tras la adición, se agitó la mezcla a 0 °C durante 2 h. Se sometió la mezcla a extracción con EtOAc (3 * 100 mL), se lavó con salmuera (2 * 100 mL) y las capas orgánicas combinadas se concentraron y purificaron (SiO2, 0 - 10% de EtOAc en PE) para dar 3-(terc-butil)-3-hidroxitetrahidro-4H-piran-4-ona (3.6 g, 33%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 85.05 (s, 1H), 4.06 (dd, J = 12.0, 1.2 Hz, 1H), 4.03 - 3.95 (m, 1H), 3.75 - 3.64 (m, 1H), 3.35 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 2.60 -2.52 (m, 2H), 0.95 (s, 9H).
Paso D: 4-(terc-butil)-4-hidroxi-3, 4-dihidro-1H, 6H-pirano[4, 3-b]tieno[3, 2-d]piran-6-ona:
A un matraz de tres cuellos seco que contenía 3-bromotiofeno-2-carboxilato de metilo (2 g, 9.05 mmol, 1.0 eq.) y 3-terc-butil-3-hidroxi-tetrahidropiran-4-ona (1.56 g, 9.05 mmol, 1.0 eq.) se añadió tolueno anhidro (50 mL). Se desgasificó la mezcla y se purgó con N2 (3 x) antes de añadir Pd2(dba)3 (414 mg, 452 pmol, 0.050 eq.), Xantphos (524 mg, 905 pmol, 0.10 eq.), K3PO4 (3.84 g, 18.1 mmol, 2.0 eq.). Se desgasificó y se purgó con N2 (3 x) nuevamente y se agitó a 105 °C durante 16 h. Se enfrió la mezcla a ta, se filtró y el filtrado se concentró. La purificación por cromatografía en columna (SiO2, 0 - 30% de EtOAc en PE) y purificación adicional mediante cromatografía en columna de fase inversa (C18 SiO2, 0 - 30% de MeCN en agua (0.1% de NH4OH) proporcionó 4-(terc-butil)-4-hidroxi-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (600 mg, 2.14 mmol, 24%) como un sólido blanco. MS obs. (ESI+): 281.2 [(M+H)+].
Paso E: Ácido (4-(terc-butií\-4-hidroxi-6-oxo-4,6-dihidro-1H,3H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-8-il)borónico:
Se agitó a 85 °C durante 24 h una mezcla de 4-(terc-butil)-4-hidroxi-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (500 mg, 1.78 mmol, 1.0 eq.), 4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (1.37 g, 10.7 mmol, 1.55 mL, 6.0 eq.), dímero de (1,5-Ciclooctadieno)(metoxi)iridio (59.1 mg, 89.2 pmol, 0.050 eq. ), 2.6-diisopropil-N-(piridin-2-ilmetileno)anilina (47.5 mg, 178 pmol, 0.10 eq.) y DME anhidro (10 mL). Se enfrió la mezcla y se concentró al vacío para dar ácido (4-(terc-butil)-4-hidroxi-6-oxo-4,6-dihidro-1H,3H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-8-il)borónico (2 g, crudo) que se usó sin purificación adicional. MS obs. (ESI+): 325.5 [(M+H)+].
Paso F: 10-terc-butil-4-(3-fluoro-4-piridil)-10-hidroxi-8,12-dioxa-5-tiatriciclo[7.4.0.026]trideca-1(9),2(6),3-trien-7-ona:
A la mezcla de ácido (10-terc-butil-10-hidroxi-7-oxo-8,12-dioxa-5-tiatriciclo[7.4.0.026]trideca-1(9),2(6),3-trien-4-il)borónico (130 mg, 401 ^mol, 1.0 eq.), Na2CO3 (128 mg, 1.20 mmol, 3.0 eq.) en THF (12 mL) y H2O se añadió 3-fluoro-4-yodo-piridina (99 mg, 441 ^mol, 1.1 eq.) y Sphos-Pd-G3 (32 mg, 40.1 ^mol, 0.10 eq.). Se desgasificó la mezcla y se purgó con N2 (2 x) antes de agitar a 50 °C durante 6 h. Se concentró la mezcla de reacción y se diluyó el residuo con DCM/MeoH=10/1 (300 mL). Se filtró la mezcla y se concentró el filtrado al vacío. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía instantánea en columna (SiO20 - 5% de MeOH en DCM) para dar 10-terc-butil-4-(3-fluoro-4-piridil)-10-hidroxi-8,12-dioxa-5-tiatriciclo[7.4.0.026]trideca-1(9),2(6),3-trien-7-ona (280 mg, 23%) como un sólido amarillo. MS obs. (ESI+): 376.4 [(M+H)+].
Paso G: (S)-4-(terc-butil)-8-(3-fluoropiridm-4-il)-4-hidroxi-1, 3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4, 3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona(Compuesto 59) y(R)-4-(terc-butil)-8-(3-fluoropiridin-4-il)-4-hidroxi-1, 3, 4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3, 2-d]piridin-6-ona(Compuesto 60):
Se agitó a 95 °C durante 3 h una solución de 10-terc-butil-4-(3-fluoro-4-piridii)-10-hidroxi-8,12-dioxa-5-tiatriciclo[7.4.0.026]trideca-1(9),2(6),3-trien-7-ona (140 mg, 373 |jmol, 1.0 eq.) en NHs/MeOH (7.0 M, 10 mL). Se enfrió la mezcla de reacción y se la concentró al vacío para dar el residuo, que se purificó por cromatografía instantánea en columna (SiO20 -5 % de MeOH en DCM) para dar 4-(terc-butil)-8-(3-fluoropiridin-4-il)-4-hidroxi-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (123 mg, 44%) MS obs. (ESI+): 375.0 [(M+H)+].
Se separaron los enantiómeros mediante SFC quiral. (S)-4-(terc-butil)-8-(3-fluoropiridin-4-il)-4-hidroxi-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 59): Ms obs. (ESI+): 375.0 [(M+H)+]; 1H RMn (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 10.41 (s, 1H), 8.78 (d,J =2.8 Hz, 1H), 8.57 (dd,J =5.2, 0.8 Hz, 1H), 8.08 -7.99 (m, 2H), 5.36 (s, 1H), 4.82 (dd,J =44.0, 15.2 Hz, 2H), 4.14(d, J =11.2 Hz, 1H), 3.46 (d,J =11.2 Hz, 1H), 1.04 (s, 10 H). (R)-4-(terc-butil)-8-(3-fluoropiridin-4-il)-4-hidroxi-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 60): MS obs. (ESI+): 375.0 [(M+H)+].
Ejemplos 61 y 62 - Compuestos 61 y 62: (S)-4-(terc-butN)-4-hidroxi-8-(2-metNpiridm-4-N)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 61) y (R)-4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(2-metilpiridin-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 62) (La estereoquímica para los Compuestos 61 y 62 se asigna arbitrariamente)
Paso A: 10-terc-butil-10-hidroxi-4-(2-metil-4-piridil)-8,12-dioxa-5-tiatriciclo[7.4.0.026]trideca-1(9),2(6),3-trien-7-ona:
Se sometió 4-Yodo-2-metil-piridina a condiciones similares a las descritas para el compuesto 59, paso F, para proporcionar 10-terc-butil-10-hidroxi-4-(2-metil-4-piridil)-8,12-dioxa-5-tiatriciclo[7.4.0.02,6]trideca-1(9),2(6),3-trien-7-ona (169 mg, 29%). MS obs. (ESI+): 372.2 [M+H]+.
Paso B: (S)-4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(2-metilpirídin-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3, 2-d]piridin-6-ona(Compuesto 61) y(R)-4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(2-metilpiridin-4-il)-1, 3, 4, 5-tetrahidro-6H-pirano[4, 3-b]tieno[3, 2-d]piridin-6-ona(Compuesto 62):
Se sometió 10-Terc-butil-10-hidroxi-4-(2-metil-4-piridil)-8,12-dioxa-5-tiatriciclo[7.4.0.02,6]trideca-1(9),2(6),3-trien-7-ona a condiciones similares a las descritas para el Compuesto 59, Paso G, para proporcionar 4-(tercbutil)-4-hidroxi-8-(2-metilpiridin-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (200 mg, 78%). MS obs. (ESI+): 371.1 [M+H]+.
Se separaron los enantiómeros mediante SFC quiral. (S)-4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(2-metilpiridin-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 61): MS obs. (ESI+): 371.0 [(M+H)+]; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 510.32 (s, 1H), 8.55 (d,J =5.2 Hz, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.61 (dd,J =5.2, 1.6 Hz, 1H), 5.35 (s, 1H), 4.80 (dd,J= 38.8, 14.8 Hz, 2H), 4.14 (d,J =11.2 Hz, 1H), 3.45 (d,J =11.2 Hz, 1H), 2.55 (s, 3H), 1.03 (s, 9H). (R)-4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(2-metilpiridin-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 62): MS obs. (ESI+): 371.0 [(M+H)+].
Ejemplos 63 y 64 - Compuestos 63 y 64: (S)-4-(terc-butN)-8-(5-doropirimidm-4-M)-4-hidroxi-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 63) y (R)-4-(terc-butN)-8-(5-doropirim idm-4-M)4-hidroxM,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridm-6-ona (Compuesto 64) (La estereoquímica para los Compuestos 63 y 64 se asigna arbitrariamente)
Paso A: 5-cloro-4-yodopirimidina:
A la solución de 5-doropirimidin-4-amina (500 mg, 3.86 mmol, 1.0 eq.) y diyodometano (2.07 g, 7.72 mmol, 622 ^L, 2.0 eq.) en CH3CN (20 mL) se añadió gota a gota a 0 °C nitrito de isopentilo (995 mg, 8.49 mmol, 1.14 mL, 2.2 eq.) en CH3CN (1 mL). Se agitó la mezcla a 0 °C durante 30 min antes de calentar a 70 °C durante 16 h. Se concentró la mezcla de reacción al vacío y el residuo crudo se purificó mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 0 - 3% de EtOAc en PE) para dar 5-cloro-4-yodopirimidina (410 mg, rendimiento del 44%). MS obs. (ESI+): 241.1 [(M+H)+].
Paso B: 4-(terc-butil)-8-(5-cloropirimidin-4-il)-4-hidroxi-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona:
Se utilizaron condiciones similares a las descritas en el Compuesto 59, Paso F para el ácido (4-(terc-butil)-4-hidroxi-6-oxo-4,6-dihidro-1H,3H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-8-il)borónico y 5-doro-4-yodopirimidina para proporcionar 4-(terc-butil)-8-(5-cloropirimidin-4-il)-4-hidroxi-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (76 mg, 31%). MS obs. (ESI+): 393.4 [(M+H)+].
Paso C : (S)-4-(terc-butil)-8-(5-dompirímidin-4-il)-4-hidmxi- 1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona(Compuesto 63) y(R)-4-(terc-butil)-8-(5-dompirímidin-4-il)-4-hidmxi-1,3,4,5-tetrahidm-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona(Compuesto 64):
Se utilizaron condiciones similares a las descritas en el Compuesto 59, Paso G para 4-(terc-butil)-8-(5-cloropirimidin-4-il)-4-hidroxi-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona para dar 4-(terc-butil)-8-(5-cloropirimidin-4-il)-4-hidroxi-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (53 mg, 70%) como un sólido amarillo. MS obs. (ESI+): 392.4 [(M+H)+].
Se utilizó SFC quiral para separar los enantiómeros. (S)-4-(terc-butil)-8-(5-cloropirimidin-4-il)-4-hidroxi-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 63): MS obs. (ESI+): 392.0 [(M+H)+] ; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5ppm: 10.46 (s, 1H), 9.22 (s, 1H), 9.10 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 5.36 (s, 1H), 4.93 -4.76 (m, 2H), 4.14 (d,J =11.2 Hz, 1H), 3.46 (d,J= 11.6 Hz, 1H), 1.04 (s, 9H). (R)-4-(terc-butil)-8-(5-cloropirimidin-4-il)-4-hidroxi-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 64): MS obs. (ESI+): 392.0 [(M+H)+].
Ejemplos 65 y 66 - Compuestos 65 y 66: (R)-4-(terc-butN)-8-(3-fluoro-1H-pirazol-4-N)-4-hidroxM,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridm-6-ona (Compuesto 65) y (S)-4-(terc-butil)-8-(3-fluoro-1H-pirazol-4-il)-4-hidroxi-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 66) (La estereoquímica para los Compuestos 65 y 66 se asigna arbitrariamente)
Paso A: 4-(terc-butil)-8-(3-fluoro-1 -((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)- 1H-pirazol-4-il)-4-hidroxi-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4, 3-b]tieno[3, 2-d]piran-6-ona:
Se sometió 4-Bromo-3-fluoro-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol a condiciones similares a las descritas para el compuesto 59, Paso D, para proporcionar 4-(terc-butil)-8-(3-fluoro-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-4-hidroxi-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (10 mg, 13%). MS obs. (ESI+): 495.5 [(M+H)+].
Paso B: 4-(terc-butil)-8-(3-fíuoro-1H-pirazol-4-il)-4-hidroxi-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona:
A una solución de 4-(terc-butil)-8-(3-fluoro-1 -((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-4-hidroxi-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (100 mg, 202 ^mol, 1.0 eq.) en DCM (5 mL) se añadió tricloruro de boro (1.0 M, 1.0 mL, 5.0 eq.) a -78 °C. Se agitó la mezcla a -78 °C durante 2 h antes de añadir MeOH. Se concentró la mezcla al vacío para dar 4-(terc-butil)-8-(3-fluoro-1H-pirazol-4-il)-4-hidroxi-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (75 mg, usado sin purificación adicional). MS obs. (ESI+): 365.5 [(M+H)+].
Paso C: (R)-4-(terc-butil)-8-(3-fluoro-1H-pirazol-4-il)-4-hidroxi-1, 3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona(Compuesto 65) y(S)-4-(terc-butil)-8-(3-fluoro-1H-pirazol-4-il)-4-hidroxi-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b[tieno[3,2-d]piridin-6-ona(Compuesto 66):
Se sometió 4-(Terc-butil)-8-(3-fluoro-1H-pirazol-4-il)-4-hidroxi-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona a condiciones similares a las descritas para el Compuesto 59, Paso G, para proporcionar 4-(terc-butil)-8-(3-fluoro-1H-pirazol-4-il)-4-hidroxi-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (40 mg, 110 Mmol, 45%, 2 pasos). MS obs. (ESI+): 364.4 [(M+H)+].
Se separaron los isómeros mediante HPLC quiral. (R)-4-(terc-butil)-8-(3-fluoro-1H-pirazol-4-il)-4-hidroxi-1.3.4.5- tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 65): M<s>obs. (ESI+): 364.0 [(M+H)+]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 12.83 (brs, 1H), 10.16 (brs, 1H), 8.32 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.33 (s, 1H), 5.33 (s, 1H), 4.75 (dd, J = 34.2, 14.8 Hz, 2H), 4.12 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 3.44 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 1.03 (s, 9H). (S)-4-(terc-butil)-8-(3-fluoro-1H-pirazol-4-il)-4-hidroxi-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 66): MS obs. (ESI+): 364.0 [(M+H)+].
Ejemplos 67 y 68 - Compuestos 67 y 68: (S)-4-(terc-butM)-4-hidroxi-8-(piridazm-4-M)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 67) y (R)-4-(terc-butM)-4-hidroxi-8-(piridazm-4-M)-1.3.4.5- tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 68) (La estereoquímica para los Compuestos 67 y 68 se asigna arbitrariamente)
Paso A: 4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(piridazin-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona:
Se utilizaron condiciones similares a las descritas en el Compuesto 59, Paso F para el bromhidrato de 4-bromopiridazina para dar 4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(piridazin-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (53 mg, 40%). MS obs. (ESI+): 359.4 [(M+H)+].
Paso B: (S)-4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(piridazin-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4, 3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona(Compuesto 67) y(R)-4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(piridazin-4-il)-1,3, 4, 5-tetrahidro-6H-pirano[4, 3-b]tieno[3, 2-d]piridin-6-ona(Compuesto 68):
Se utilizaron condiciones similares a las descritas en el Compuesto 59, Paso G para 4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(piridazin-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona para dar 4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(piridazin-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (37 mg, 66%). MS obs. (ESI+): 358.4 [(M+H)+].
Se separaron los enantiómeros mediante SFC quiral. (S)-4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(piridazin-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 67): MS obs. (ESI+): 358.0 [(M+H)+]; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) S ppm: 10.45 (s, 1H), 9.76 - 9.75 (m, 1H), 9.35 - 9.33 (m, 1H), 8.22 (s, 1H), 8.08 - 8.06 (m, 1H), 5.37 (s, 1H), 4.87 - 4.75 (m, 2H), 4.14 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 3.46 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 1.03 (s, 9H). (R)-4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(piridazin-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 68): MS obs. (ESI+): 358.0 [(M+H)+].
Ejemplos 69 y 70 - Compuestos 69 y 70: (S)-4-(terc-butM)-4-hidroxi-8-(3-metMpmdm-4-M)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 69) y (R)-4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(3-metilpiridin-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 70) (La estereoquímica para los Compuestos 69 y 70 se asigna arbitrariamente)
Compuesto 69 Compuesto 70
Paso A: 4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(3-metilpiridin-4-il)-3,4-dihidro- 1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona:
Se utilizaron condiciones similares a las descritas en el Compuesto 59, Paso F para el clorhidrato de 4-bromo-3-metilpiridina para proporcionar 4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(3-metilpiridin-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (87 mg, 63%) como un sólido amarillo. MS obs. (ESI+): 372.4 [(M+H)+].
Paso B : (S)-4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(3-metilpiridin-4-il)- 1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4, 3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona(Compuesto 69) y(R)-4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(3-metilpiridin-4-il-1,3, 4,5-tetrahidro-6H-pirano[4, 3-b]tieno[3, 2-d]piridin-6-ona(Compuesto 70):
Se utilizaron condiciones similares a las descritas en el Compuesto 59, Paso G para 4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(3-metilpiridin-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona para dar 4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(3-metilpiridin-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (36 mg, 41%). MS obs. (ESI+): 371.4 [(M+H)+].
Se separaron los enantiómeros mediante SFC quiral. (S)-4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(3-metilpiridin-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 69): MS obs. (ESI+): 371.0 [(M+H)+]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 10.30 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.52 (d,J =4.8 Hz, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.55 (d,J =4.8 Hz, 1H), 5.35 (s, 1H), 4.87 -4.72 (m, 2H), 4.14 (d,J =11.2 Hz, 1H), 3.45 (d,J =11.2 Hz, 1H), 1.04 (s, 9H). (R)-4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(3-metilpiridin-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 70) (27.2 mg 29%). MS obs. (ESI+): 371.0 [(M+H)+].
Ejemplos 71 - Compuesto 71: 4-metil-8-(1H-pirazol-4-il)-4-(pirrolidin-1-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona
Paso A: 4-hidroxi-4-metil-8-(1H-pirazol-4-il)-1¡3¡4¡5-tetrahidro-6H-pirano[4¡ 3-b]tieno[3, 2-d]pirídin-6-ona:
A un matraz de tres cuellos seco que contenía 4-(4-hidroxi-4-metil-6-oxo-3,4,5,6-tetrahidro-1H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-8-il)-1H-pirazol-1-carboxilato de terc-butilo (500 mg, 1.29 mmol, 1.0 eq.) se añadió THF (50 mL) y se desgasificó la mezcla y se purgó con N2 (3 x). Se añadió bromuro de metilmagnesio (1 M, 25.8 mL, 20.0 eq.) a 0 °C antes de calentar a ta. Después de 2 h se añadió solución de NH4Cl (13 mL) y se sometió la mezcla a extracción con EtOAc (3 x 50 mL). Las capas orgánicas combinadas se secaron (MgSO4), se filtró y se concentró para dar el residuo que se purificó mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 0 - 8% de MeOH en DCM) para dar 4-hidroxi-4-metil-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (340 mg, 69%). MS obs. (ESI+): 304.1 [(M+H)+].
Paso B: 4-doro-4-metil-8-(1H-pirazol-4-il)-1, 3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4, 3-b]tieno[3, 2-d]piridin-6-ona:
Se añadieron cloruro de oxalilo (15 mL) y N, N-dimetilformamida (0.1 mL) a una solución de 4-hidroxi-4-metil-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (340 mg, 1.12 mmol, 1.0 eq.) en<d>C<m>(50 mL). Se calentó la mezcla de reacción a 40 °C y se agitó durante 16 h. Se concentró la mezcla al vacío para dar 4-cloro-4-metil-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (280 mg, usado sin purificación adicional).
Paso C: 4-metil-8-(1H-pirazol-4-il)-4-(pirrolidin-1 -il)-1,3,4,5-te trahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona(Compuesto 71):
Se enfrió a 0 °C una solución de 4-cloro-4-metil-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (280 mg, cruda) en acetonitrilo (40 mL), antes de agregar pirrolidina (15 mL) gota a gota. Se dejó calentar a ta la mezcla de reacción y durante 16 h, antes de concentrarla y purificarla mediante cromatografía en columna de fase inversa (0 - 20% de MeCN en agua (0.1 % de FA). La purificación adicional mediante prep-TLC (SiO2, 0-10 % de MeOH en DCM) proporcionó 4-metil-8-(1H-pirazol-4-il)-4-(pirrolidin-1-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 71) (2.2 mg, 17%). MS obs. (ESI+): 357.2 [(M+H)+]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 8.11 (s, 2H), 7.40 (s, 1H), 4.74 (d,J =14.2 Hz, 1H), 4.61 (d,J =14.2 Hz, 1H), 4.12 (d,J =11.6 Hz, 1H), 3.58 (d,J=11.8 Hz, 1H), 2.80 (d,J=6.4 Hz, 2H), 2.44 - 2.38 (m, 1H), 2.06 - 1.92 (m, 1H), 1.65 (s, 4H), 1.42 (s, 3H).
Ejemplos 72 y 73 - Compuestos 72 y 73: (S)-4-hidroxi-4-(prop-1-m-1-N)-8-(1H-pirazol-4-N)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 72) y (R)-4-hidroxi-4-(prop-1-m-1-N)-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 73) (La estereoquímica para los Compuestos 72 y 73 se asigna arbitrariamente)
A una solución de terc-butil 4-(7,10-dioxo-12-oxa-5-tia-8-azatriciclo[7.4.0.02’6]trideca-1(9),2(6),3-trien-4-il)pirazol-1-carboxilato (100 mg, 258 ^mol, 1.0 eq.) en 1,4-dioxano (20 mL) se añadió bromuro de prop-1-in-1-ilmagnesio (0.5 M, 10 mL, 20 eq.) a 0 °C. Se agitó la mezcla a 0 °C durante 1 h antes de añadir 20 mL de H2O lentamente a 0 °C. Se sometió la mezcla resultante a extracción con EtOAc (3 x 350 mL) y la fase orgánica combinada se secó (Na2SO4), filtró y concentró al vacío. Se purificó el producto crudo mediante cromatografía instantánea en columna de gel de sílice (SiO2, 0 -10% de MeOH en DCM) para dar 4-hidroxi-4-(prop-1-in-1-il)-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (110 mg, 43%). MS obs. (ESI+): 328.0 [(M+H)+].
Se separaron los enantiómeros mediante SFC quiral. (S)-4-hidroxi-4-(prop-1-in-1-il)-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 72): MS obs. (ESI+): 328.1 [(M+H) ]; 1H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 5 ppm: 13.23 (s, 1H), 10.90 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 6.20 (s, 1H), 4.74 (s, 2H), 3.94 (d,J =11.2 Hz, 1H), 3.76 (d,J=11.2 Hz, 1H), 1.86 (s, 3H). (R)-4-hidroxi-4-(prop-1-in-1-il)-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 73): MS obs. (ESI+): 327.8 [(M+H)+].
Ejemplos 74, 75, 76 y 77 - Compuestos 74, 75, 76 y 77: (S)-4-((S)-sec-butN)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-N)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 74), (R)-4-((R)-sec-butil)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 75), (S)-4-((R)-sec-butil)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 76) y (R)-4-((S)-sec-butil)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 77) (La estereoquímica para los Compuestos 74, 75, 76 y 77 se asigna arbitrariamente)
Se realizó un procedimiento similar al del Compuesto 72, Paso A con cloruro de terc-pentilmagnesio (1 M en THF, 7.74 mL, 30 eq.) para proporcionar 4-(sec-butil)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (35.2 mg, 39%). MS obs. (ESI+): 346.2 [(M+H)+].
Los cuatro diastereoisómeros se separaron mediante SFC quiral. (S)-4-((S)-sec-butil)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 74): M<s>obs. (ESI+): 346.2 [(M+H)+]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 13.22 (s, 1H), 10.80 (s, 1H), 8.28 (brs, 1H), 7.96 (brs, 1H), 7.42 (s, 1H), 5.27 (s, 1H), 4.77 -4.53 (m, 2H), 3.92 (d,J= 11.6 Hz, 1H), 3.56 (d,J =11.6 Hz, 1H), 2.12-2.07 (m, 1H), 1.87 - 1.80 (m, 1H), 1.09 - 0.97 (m, 1H), 0.92 (t,J=7.2 Hz, 3H), 0.72 (d,J =7.2 Hz, 3H). (R)-4-((R)-sec-butil)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 75): MS obs. (ESI+): 346.0 [(M+H)+]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 13.22 (s, 1H), 10.82 (s, 1H), 8.28 (brs, 1H), 7.96 (brs, 1H), 7.41 (s, 1H), 5.24 (s, 1H), 4.73 - 4.53 (m, 2H), 3.93 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 3.54 (d,J =11.6 Hz, 1H), 2.13 -2.02 (m, 1H), 1.15 - 1.05 (m, 2H), 0.98 (d,J =7.2 Hz, 3H), 0.77 (t,J =7.2 Hz, 3H). (S)-4-((R)-secbutil)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 76): MS obs. (ESI+): 346.0 [(M+H)+]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 13.22 (s, 1H), 10.82 (s, 1H), 8.09 (brs, 2H), 7.41 (s, 1H), 5.25 (s, 1H), 4.72 - 4.62 (m, 2H), 3.93 (d,J =11.6 Hz, 1H), 3.54 (d,J =11.6 Hz, 1H), 2.13 -2.02 (m, 1H), 1.13 - 1.09 (m, 2H), 0.98 (d,J =7.2 Hz, 3H), 0.76 (d,J =7.2 Hz, 3H). (R)-4-((S)-sec-butil)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 77): MS obs. (ESI+): 346.0 [(M+H)+]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 13.22 (s, 1H), 10.81 (s, 1H), 8.27 (brs, 1H), 7.96 (brs, 1H), 7.42 (s, 1H), 5.27 (s, 1H), 4.65 (t,J =9.2 Hz, 2H), 3.92 (d,J =11.6 Hz, 1H), 3.56 (d,J =11.6 Hz, 1H), 2.14 -2.03 (m, 1H), 1.91 - 1.82 (m, 1H), 0.97 -1.10 (m, 1H), 0.92 (t,J =7.2 Hz, 3H), 0.72 (d,J =7.2 Hz, 3H).
Ejemplos 78 y 79 - Compuestos 78 y 79: (S)-4-ciclopentN-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-N)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 78) y (R)-4-ciclopentN-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-N)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 79) (La estereoquímica para los Compuestos 78 y 79 se asigna arbitrariamente)
Se añadió rápidamente bromuro de ciclopentil magnesio (17 mmol, 17 mL, 10 eq.) a una solución de 4-(4,6-dioxo-3,4,5,6-tetrahidro-1H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-8-il)-1H-pirazol-1-carboxilato de terc-butilo (1.0 g, 1.73 mmol, 1.0 eq.) en THF (100 mL) a ta. La mezcla de reacción se desgasificó y se purgó con N2 y se agitó durante 2 h a ta. Se añadió una solución de NH4Cl (160 mL) y se sometió la mezcla a extracción con EtOAc (3 x 40 mL). La capa orgánica combinada se secó (Na2SO4), filtró y concentró. La cromatografía en columna (SiO2, 0 - 5% de MeOH en DCM) seguida de cromatografía en columna de fase inversa (C18-SiO2, 0 - 20% de MeCN en agua (0.1 % de FA)) dio 4-ciclopentil-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (130 mg, 14%). MS obs. (ESI+): 358.1 [(M+H)+].
Se separaron los enantiómeros mediante SFC quiral. (S)-4-ciclopentil-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 78): MS obs. (ESI+): 357.8 [(M+H)+]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 13.23 (s, 1H), 10.62 (s, 1H), 8.11 (brs, 2H), 7.40 (s, 1H), 5.29 (s, 1H), 4.71 (q,J =14.4 Hz, 2H), 3.90 (d,J =11.2 Hz, 1H), 3.57 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 1.69 - 1.37 (m, 9H). (R)-4-ciclopentil-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 79): MS obs. (ESI+): 357.8 [(M+H)+].
Ejemplos 80 y 81 - Compuestos 80 y 81: (S)-4-hidroxi-4-(terc-pentN)-8-(1H-pirazol-4-N)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 80) y (R)-4-hidroxi-4-(terc-pentil)-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 81) (La estereoquímica para los Compuestos 80 y 81 se asigna arbitrariamente)
Se realizó un procedimiento similar al del Compuesto 72, Paso A con doro(1,1-dimetilpropil)magnesio para proporcionar 4-(sec-butil)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (30 mg, 32%). MS obs. (ESI+): 360.2 [(M+H)+].
Se separaron los enantiómeros mediante SFC quiral. (S)-4-hidroxi-4-(terc-pentil)-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 80): MS obs. (ESI+): 360.2 [(M+H)+]; 1H RMN (400 MHz, DMSO) 513.23 (s, 1H), 9.99 (s, 1H), 8.29 (brs, 1H), 7.96 (brs, 1H), 7.40 (s, 1H), 5.31 (s, 1H), 4.74 (q,J =14.8 Hz, 2H), 4.17 (d,J =11.4 Hz, 1H), 3.44 (d,J=11.4 Hz, 1H), 1.63 -1.56 (m, 1H), 1.33 -1.38 (m, 1H), 0.96 (d,J=6.0 Hz, 7H), 0.76 (s, 2H). (R)-4-hidroxi-4-(terc-pentil)-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 81): MS obs. (ESI+): 360.2 [(M+H)+].
Ejemplos 82 y 83 - Compuestos 82 y 83: (S)-4-(dimetMammo)-4-metM-8-(1H-pirazol-4-M)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridm-6-ona (Compuesto 82) y (R)-4-(dimetilammo)-4-metM-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 83) (La estereoquímica para los Compuestos 82 y 83 se asigna arbitrariamente)
Paso A: N-(4,4-dimetoxidihidm-2H-pimn-3(4H)-ilideno)-2-metilpmpano-2-sumnamida:
A una solución de 2-metilpropano-2-sulfinamida (15.2 g, 125 mmol, 2.0 eq.) y 4,4-dimetoxitetrahidropiran-3-ona (10 g, 62 mmol, 1.0 eq.) en THF (150 mL) se añadió Ti(EtO)4 (28.6 g, 125 mmol, 2.0 eq.). Se agitó la mezcla a 70 °C durante 16 h antes de enfriarla. Se añadió agua (100 mL) y se sometió la mezcla bifásica a extracción con EtOAc (100 mL * 3). Las fases orgánicas recolectadas se lavaron con salmuera (100 mL), se secaron (Na2SO4) y concentrado. Se purificó el residuo mediante cromatografía instantánea en columna de gel de sílice (SiO2, 0 - 60 % de EtOAc en PE) para dar N-(4,4-dimetoxitetrahidropiran-3-ilideno)-2-metil-propano-2-sulfinamida (8.4 g, 51%) como un aceite incoloro. MS obs. (ESI+): 264.1 [(M+H)+].
Paso B: N-(4,4-dimetoxi-3-metiltetrahidro-2H-piran-3-il)-2-metilpropano-2-sulfinamida:
Se enfrió a 0 °C una solución de N-(4,4-dimetoxitetrahidropiran-3-ilideno)-2-metil-propano-2-sulfinamida (8.4 g, 32 mmol, 1.0 eq.) en THF (150 mL) y se añadió gota a gota MeMgBr (1.0 M, 96 mL, 96 mmol, 3.0 eq.). Se agitó la mezcla a 0 °C durante 0.5 h y a ta durante 3 h. Se añadió solución saturada de NH4O (100 mL) y se sometió la mezcla bifásica a extracción con EtOAc (100 mL * 3) y las capas orgánicas combinadas se concentraron. Se purificó el residuo mediante cromatografía instantánea en columna de gel de sílice (SiO2, 0 - 70% de EtOAc en PE) para proporcionar N-(4,4-dimetoxi-3-metil-tetrahidropiran-3-il)-2-metil-propano-2-sulfinamida (5.4 g, 61%).
1H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 ppm: 4.10 (s, 1H), 3.82 - 3.74 (m, 2H), 3.51 - 3.36 (m, 2H), 3.35 (s, 3H), 3.27 (s, 3H), 1.91 -1.77 (m, 2H), 1.46 (s, 3H), 1.21 (s, 9H).
Paso C: N-(3-metil-4-oxo-tetrahidropiran-3-il)carbamato de terc-butilo:
A una solución de N-(4,4-dimetoxi-3-metil-tetrahidropiran-3-il)-2-metil-propano-2-sulfinamida (660 mg, 2.36 mmol, 1.0 eq.) en 1,4-dioxano (10 mL) se añadió HCl/1,4-dioxano (10 mL) y se agitó la mezcla a ta durante 4 h. Se retiró el solvente para proporcionar la sal HCl 3-amino-3-metiltetrahidropiran-4-ona (477 mg, cruda). Se disolvió el residuo crudo en THF (5 mL) y se añadieron (Boc)2O (1.03 g, 4.72 mmol, 2.0 eq.) y trietilamina (955 mg, 9.44 mmol, 1.32 mL, 4.0 eq.). Se agitó la mezcla a ta durante 16 h, se retiró el solvente y se purificó el residuo mediante cromatografía instantánea en columna de gel de sílice (SO 2, 0 - 70% de EtOAc en PE) para proporcionar N-(3-metil-4-oxo-tetrahidropiran-3-il)carbamato de terc-butilo (350 mg, 1.53 mmol, 64%). 1H RMN (400 MHz, CDCla) 5 ppm: 5.56 (brs, 1H), 4.30 - 4.29 (m, 1H), 4.19 - 4.15 (m, 1H), 3.81 - 3.75 (m, 1H), 3.66 (d, J=11.2 Hz, 1H), 2.80 -2.79 (m, 1H), 2.54 -2.50 (m, 1H), 1.55 (s, 3H), 1.43 (s, 9H).
Paso D: (4-metil-6-oxo-8-(1-((2-(trimetilsililsilil)metil)-1H-pirazol-4-il)-4,6-dihidro-1H,3H-pirano[4,3-b]tieno[3, 2-d]piran-4-il)carbamato de terc-butilo:
Se desgasificó y se purgó con N2 una solución de 3-bromo-5-[1-(2-trimetilsililetoximetil)pirazol-4-il]tiofeno-2-carboxilato de metilo (1.60 g, 3.84 mmol, 2.0 eq.) y N-(3-metil-4-oxo-tetrahidropiran-3-il)carbamato de terc-butilo (440 mg, 1.92 mmol, 1.0 eq.) en tolueno (10 mL), antes de añadir Pd2(dba)3 (352 mg, 384 pmol, 0.20 eq.), xantfos (444 mg, 768 pmol, 0.40 eq.), Cs2CO3 (1.25 g, 3.84 mmol, 2.0 eq.) y Na2S2O5 (73 mg, 380 pmol, 2.0 eq.). Se desgasificó la mezcla y se purgó con N2 y se agitó durante 16 h a 105 °C. La suspensión se enfrió a ta, se filtró y se concentró al vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía instantánea en columna de gel de sílice (SO 2, 0 - 50% de EtOAc en PE) para dar terc-butil N-[10-metil-7-oxo-4-[1-(2-trimetilsililetoximetil)pirazol-4-il]-8,12-dioxa-5-tiatriciclo[7.4.0.02,6]trideca-1(9),2(6),3-trien-10-il]carbamato (412 mg, 40%). MS obs. (ESI+): 478.2 [(M-55)+].
Paso E: 4-amino-4-metil-8-(1H-pirazol-4-il)-3, 4-dihidro-IH, 6H-pirano[4, 3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona:
A una suspensión de 2,2-dimetil-N-[10-metil-7-oxo-4-[1-(2-trimetilsililetoximetil)pirazol-4-il]-12-oxa-5-tia-8-azatriciclo[7.4.0.026]trideca-1(9),2(6),3-trien-10-il]propanamida (400 mg, 770 pmol) en DCM (15 mL), se añadió TFA (5 mL) y se agitó la mezcla a ta durante 5 h. Se retiró el solvente y se purificó el residuo mediante cromatografía en columna de fase inversa (0 - 20% de MeCN en agua (0.1 % de NH4OH)] para dar 10-amino-10-metil-4-(1H-pirazol-4-il)-12-oxa-5-tia-8-azatriciclo[7.4.0.026]trideca-1(9),2(6),3-trien-7-ona (130 mg, 57%). MS obs. (ESI+): 287.0 [(M-16)+].
Paso F: 4-amino-4-metil-8-(1H-pirazol-4-il)-1, 3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4, 3-b]tieno[3, 2-d]piridin-6-ona:
Se agitó a 100 °C bajo microondas una suspensión de 10-amino-10-metil-4-(1H-pirazol-4-il)-8,12-dioxa-5-tiatriciclo[7.4.0.026]trideca-1(9),2(6),3-trien-7-ona (130 mg, 428.57 umol) en NH4OH (8 mL) e IPA (8 mL), durante 5 h. Se retiró el solvente al vacío para proporcionar 10-amino-10-metil-4-(1H-pirazol-4-il)-12-oxa-5-tia-8-azatriddo[7.4.0.02e]trideca-1(9),2(6),3-trien-7-ona cruda (110 mg, cruda). MS obs. (ESI+): 303.0 [(M+H)+].
Paso G: (S)-4-(dimetilamino)-4-metil-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona(Compuesto 82) y(R)-4-(dimetilamino)-4-metil-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3, 4, 5-tetrahidro-6H-pirano[4, 3-b]tieno[3, 2-d]piridin-6-ona(Compuesto 83):
A una suspensión de 10-amino-10-metil-4-(1H-pirazol-4-il)-12-oxa-5-tia-8-azatridclo[7.4.0.02e]trideca-1(9),2(6),3-trien-7-ona (70 mg, 231 pmol) en metanol (20 mL) se añadió paraformaldehído (42 mg, 1.4 mmol, 39 pL), NaBHsCN (116 mg, 1.85 mmol) y AcOH (70 mg, 1.16 mmol). Se agitó la mezcla a 60 °C durante 2 h, se concentró y se purificó mediante cromatografía en columna de fase inversa (C18 SiO2, 0 - 20% de MeCN en agua (0.1 % de NH4OH)) para proporcionar 10-(dimetilamino)-10-metil-4-(1H-pirazol-4-il)-12-oxa-5-tia-8-azatriciclo[7.4.0.02,6]trideca-1(9),2(6),3-trien-7-ona (60 mg, 78%). MS obs. (ESI+): 330.9 [(M+H)+].
Se separaron los enantiómeros mediante SFC. (S)-4-(dimetilamino)-4-metil-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 82): MS obs. (ESI+): 330.9 [(M+H)+] ; 1H RMN (400 MHz, DMSO-de) 5 ppm: 13.22 (s, 1H), 10.62 (s, 1H), 8.28 (brs, 1H), 7.96 (brs, 1H), 7.25 (s, 1H), 4.74 (d,J =14.0 Hz, 1H), 4.60 (d,J =14.0 Hz, 1H), 4.16 (d,J =12.0 Hz, 1H), 3.50 (d,J =12.0 Hz, 1H), 2.25 (s, 6H), 1.38 (s, 3H). ((R)-4-(dimetilamino)-4-metil-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 83): MS obs. (ESI+): 331.0 [(M+H)+].
Ejemplo 84 - Compuesto 84: 4-metil-4-(metilamino)-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona
Paso A: 3-metil-3-(metilamino)tetrahidro-2H-piran-4-ol:
Se disolvió (3-metil-4-oxotetrahidro-2H-piran-3-il)carbamato de terc-butilo (2.0 g, 8.7 mmol, 1.0 eq.) en THF (40.0 mL) y se añadió LiAlH4 (1.0 M, 35 mmol, 35 mL, 4.0 eq.). Se calentó la mezcla a 65 °C durante 6 h antes de agregar agua (1.0 mL). La suspensión resultante se filtró y el filtrado se concentró para proporcionar 3-metil-3-(metilamino)tetrahidro-2H-piran-4-ol (700 mg, utilizado sin purificación adicional). 1H RMN (400 MHz, CDCh) 5 ppm: 3.92 - 3.90 (m, 1H), 3.87 - 3.83 (m, 1H), 3.64 - 3.60 (m, 3H), 3.55 - 3.52 (m, 1H), 3.42 - 3.30 (m, 2H), 3.12 (d, J =12 Hz, 1H), 2.29 (s, 3H), 1.04 (s, 3H).
Paso B: (4-hidroxi-3-metiltetrahidro-2H-piran-3-il)(metil)carbamato de terc-butilo:
OH Boc
A una solución de 3-metil-3-(metilamino)tetrahidro-2H-piran-4-ol (700 mg, crudo) en THF (30 mL) se añadió (Boc)2O (3.2 g, 14 mmol, 3.0 eq.) y trietilamina (2.4 g, 24 mmol, 5.0 eq.). Después de 16 h a ta, se concentró y purificó la mezcla (SiO2, 0 - 40% de EtOAc en PE) para proporcionar (4-hidroxi-3-metiltetrahidro-2H-piran-3il)(metil)carbamato de terc-butilo (700 mg, 32%). 1H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 ppm: 4.49 - 4.02 (m, 1H), 3.96 -3.85 (m, 1H), 3.78 - 3.55 (m, 1H), 3.51 -3.35 (m, 2H), 2.92 - 2.87 (m, 3H), 2.03 - 1.68 (m, 2H), 1.48 - 1.45 (m, 9H), 1.27 - 1.24 (m, 3H).
Paso C: metil(3-metil-4-oxotetrahidro-2H-piran-3-il)carbamato de terc-butilo:
Se disolvió (4-hidroxi-3-metiltetrahidro-2H-piran-3-il)(metil)carbamato de terc-butilo (620 mg, 2.53 mmol, 1.0 eq.) en DCM (24 mL) y se añadió DMP (2.14 g, 5.05 mmol, 2.0 eq.). Después de 16 h, a ta se añadió NaHCO3 (sat. ac.) y se sometió la mezcla a extracción con EtOAc. Las capas orgánicas se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron. La purificación (SiO2, 0 - 30% de EtOAc en PE) proporcionó metil(3-metil-4-oxotetrahidro-2H-piran-3-il)carbamato de terc-butilo (530 mg, 86 %). 1H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm: 4.20 - 4.17 (m, 2H), 3.72 - 3.66 (m, 1H), 3.24 (d,J=8 , 1Hz), 2.99 (s, 3H), 2.92 -2.82 (m, 1H), 2.33 -2.29 (m, 1H), 1.42 (s, 9H), 1.15 (s, 3H).
Paso D: metil(4-metil-6-oxo-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-1,3, 4, 6-tetrahidropirano[4, 3-b]tieno[3, 2-d]piran-4-il)carbamato de terc-butilo:
Se calentó a 105 °C durante 16 h una mezcla de metil(3-metil-4-oxotetrahidro-2H-piran-3-il)carbamato de tercbutilo (210 mg, 0.86 mmol, 1.0 eq.), 3-bromo-5-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)tiofeno-2-carboxilato de metilo (200 mg, 0.48, 1.8 eq.), Sphos-Pd-G3 (75 mg, 0.10 mmol, 0.20 eq.) y Cs2CO3 (470 mg, 1.4 mmol, 3.0 eq. en tolueno (10 mL). La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc y se filtró. El filtrado se concentró y se purificó (SiO2, 0 - 30% de EtOAc en PE) para proporcionar metil(4-metil-6-oxo-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-1,3,4,6-tetrahidropirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-4-il)carbamato de tercbutilo (120 mg, 45%). MS obs. (ESI+): 492.6 [(M-56(t-Bu)+H)+].
Paso E: 4-metil-4-(metilamino)-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4, 3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 84):
Se disolvió metil(4-metil-6-oxo-8-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-1,3,4,6-tetrahidropirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-4-il)carbamato de terc-butilo (120 mg) en TFA y DCM (1:1, 5 mL). Después de 2 h a ta, se concentró la mezcla y se sometió a condiciones similares a las descritas en el Compuesto 82, Paso G para dar 4-metil-4-(metilamino)-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 84) (27 mg, 32%). MS obs. (ESI+): 317.1 [(M+H)+]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-de) 5 ppm: 13.22 (s, 1H), 11.08 (brs, 1H), 8.27 (brs, 1H), 7.97 (brs, 1H), 8.00 -7.92 (m, 1H), 7.40 (s, 1H), 4.68 (s, 2H), 3.82 (d, J=11.2 Hz, 1H), 3.51 (d, J= 11.2 Hz, 1H), 2.07 (s, 3H), 1.31 (s, 3H).
Ejemplos 85 - Compuesto 85: (S)-4-(terc-butM)-4-hidroxi-8-morfolmo-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona
Paso A: metil 3-bromo-5-morfolinotiofeno-2-carboxilato:
Se desgasifico y se purgo con N2 una mezcla de 3,5-dibromotiofeno-2-carboxilato de metilo (200 mg, 670 jmol, 1.0 eq.), morfolina (87 mg, 1.0 mmol, 1.5 eq.), Cs2CO3 (430 mg, 1.3 mmol, 2.0 eq.) en tolueno (5 mL), (1E,4E)-1,5-difenilpenta-1,4-dien-3-ona paladio (30 mg, 33 jmol, 0.050 eq.), (5-difenilfosfanil-9,9-dimetil-xanten-4-il)-difenilfosfano (39 mg, 67 jmol, 0.10 eq.). Se agitó la mezcla durante 16 h a 80 °C antes de enfriarla y filtrarse. Se concentró el filtrado al vacío y se purificó el residuo mediante cromatografía en columna (SiO2, 15% de EtOAc en PE) para dar 3-bromo-5-morfolinotiofeno-2-carboxilato de metilo (110 mg, 54%). MS obs. (ESI+): 306.1, 308.1 [(M+H)+].
Paso B: (R)-3-(terc-butil)-3-hidroxitetrahidro-4H-piran-4-ona:
Se separó 3-(terc-butil)-3-hidroxitetrahidro-4H-piran-4-ona (1.0 g, 5.8 mmol) mediante HPLC quiral utilizando las condiciones que se indican a continuación (Columna:IG-3, Tamaño de columna: 0.46 cm * 100 mm 3 um, Inyección: 2.0 ml. Cosolvente:CO2:EtOH (0.1% de DEA), Caudal: 3 mL/min, Tiempo de ejecución: 6.0 Minutos, Temperatura: 25 °C) para dar (R)-3-(terc-butil)-3-hidroxitetrahidro-4H-piran-4-ona (370 mg, 37%), primer pico de elución. La estereoquímica se asigna arbitrariamente. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 5.05 (s, 1H), 4.06 (dd, J= 12.0, 1.2 Hz, 1H), 4.03 -3.95 (m, 1H), 3.75 -3.64 (m, 1H), 3.35 (d, J= 12.0 Hz, 1H), 2.60 -2.52 (m, 2H), 0.95 (s, 9H).
Paso C: (R)-4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-morfolino-3,4-dihidro- 1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona:
Se desgasificó y se purgó con N2 una solución de 3-bromo-5-morfolinotiofeno-2-carboxilato de metilo (110 mg, 360 |jmol, 1.0 eq.), (R)-3-(terc-butil)-3-hidroxitetrahidro-4H-piran-4-ona (74 mg, 430 jmol, 1.2 eq.), Cs2CO3 (350 mg, 1.1 mmol, 3.0 eq.) en tolueno (5 mL), (1E,4E)-1,5-difenilpenta-1,4-dien-3-ona paladio (33 mg, 36 jmol, 0.1 eq.), (5-difenilfosfanil-9,9-dimetil-xanten-4-il)-difenilfosfano (41 mg, 72 jmol, 0.20 eq.), antes de calentar a 100 °C durante 16 h. Se vertió la mezcla en agua y se sometió a extracción con DCM (20 mL x 3). Las capas orgánicas se combinaron, se lavaron (NaCl) y se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron al vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía en columna (SiO2, 3% de MeOH en DCM) para dar (R)-4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-morfolino-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (75 mg, 57%). m S obs. (ESI+): 366.4 [(M+H)+].
Paso D: (S)-4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-morfolino-1, 3, 4,5-tetrahidro-6H-pirano[4, 3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona(Compuesto 85):
Se agitó durante 48 h a 120 °C una mezcla de (R)-4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-morfolino-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (70 mg, 191.55 ^mol, 1.0 eq.), una solución ac. de NH4OH (8 mL) e isopropanol (8 mL). Se concentró la mezcla al vacío, se purificó el residuo mediante cromatografía en columna (SiO2, 3 % de MeOH en DCM) para dar (S)-4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-morfolino-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 85) (30 mg, 43%) como un sólido amarillo. MS obs. (ESI+): 365.0 [(M+H)+]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 9.62 (s, 1H), 6.20 (s, 1H), 5.27 (s, 1H), 4.60 (q, J = 14.8 Hz, 2H), 4.09 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 3.83 - 3.68 (m, 4H), 3.40 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 3.28 - 3.19 (m, 4H), 1.00 (s, 9H).
Ejemplo 86 - Compuesto 86: 4-(2,2-difluoropropil)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona
Paso A: 4,4-dimetoxi-3-(2-metilalil)tetrahidro-2H-piran-3-ol:
A una solución de 4,4-dimetoxidihidro-2H-piran-3(4H)-ona (5.0 g, 31 mmol, 1.0 eq.) en THF (5 mL) se añadió cloro(2-metilalil)magnesio (0.5 M en THF, 125 mL, 2.0 eq.) a ta. Después de 1 h se añadió NH4Cl (sat. ac., 40 mL). Se sometió la mezcla bifásica a extracción con EtOAc (100 mL * 3) y las capas orgánicas se secaron, filtraron y concentraron. La purificación mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 0 - 30% de EtOAc en PE) para dar 4,4-dimetoxi-3-(2-metilalil)tetrahidro-2H-piran-3-ol (1.5 g, 55%) como un aceite incoloro.
1H RMN (400 MHz, CDCh) 5 ppm: 4.96 (dd,J =2.4, 1.6 Hz, 1H), 4.82 (dd,J =2.4, 1.6 Hz, 1H), 3.82 - 3.72 (m, 1H), 3.68 (dd,J= 11.4, 1.2 Hz, 1H), 3.43 (s, 4H), 3.31 (s, 3H), 3.10 (dd,J= 11.4, 1.2 Hz, 1H), 2.53 (d,J= 13.8 Hz, 1H), 2.36 (d,J =13.8 Hz, 1H), 1.96 - 1.87 (m, 4H), 1.80 - 1.67 (m, 2H).
Paso B: 3-(benciloxi)-4,4-dimetoxi-3-(2-metilalil)tetrahidro-2H-pirano:
Se agitó a 0 °C durante 2 h una mezcla de 4,4-dimetoxi-3-(2-metilalil)tetrahidro-2H-piran-3-ol (4.2 g, 19 mmol, 10 eq.), BnBr (3.14 g, 29.1 mmol, 1.5 eq.) y NaH (893 mg, 38.8 mmol, 2.0 eq.) en DMF (50 mL). Se añadió hielo y se sometió la mezcla bifásica a extracción con DCM (60 mL * 3). Las capas orgánicas se concentraron y se purificó el residuo mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 0 - 30% de EtOAc en PE) para dar 3-(benciloxi)-4,4-dimetoxi-3-(2-metilalil)tetrahidro-2H-pirano (5.6 g, 94%). 1H RMN (400 MHz, CDCh) 5 ppm:
7.35 - 7.21 (m, 5H), 4.95 (dd,J =4.0, 2.0 Hz, 1H), 4.84 (dd,J =2.4, 1.6 Hz, 1H), 4.76 - 4.70 (m, 2H), 4.53 (d,J= 11.8 Hz, 1H), 4.32 (dd,J =14.8, 4.0 Hz, 1H), 4.14 (dd,J =14.8, 1.9 Hz, 1H), 4.00 (d,J =12.4 Hz, 1H), 3.79 (d,J =12.4 Hz, 1H), 3.56 (s, 3H), 3.48 (s, 3H), 2.84 - 2.42 (m, 3H), 1.80 (s, 3H).
Paso C: 3-(benciloxi)-3-(2-metilalil)tetrahidro-4H-piran-4-ona:
A una solución de 3-(benciloxi)-4,4-dimetoxi-3-(2-metilalil)tetrahidro-2H-pirano (980 mg, 3.33 mmol, 1.0 eq.) en acetona (15 mL) se añadió I2 (84 mg, 0.33 mmol, 0.10 eq.). Se agitó la mezcla de reacción a ta durante 16 h antes de agregar Na2SO3 ac. (20 mL) y se sometió la mezcla bifásica a extracción con DCM (30 mL * 3). Las capas orgánicas se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron. La cromatografía en columna (SiO2, 0 -10% de EtOAc en PE) proporcionó 3-(benciloxi)-3-(2-metilalil)tetrahidro-4H-piran-4-ona (310 mg, 37%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) 87.42 - 7.20 (m, 5H), 4.95 - 4.84 (m, 1H), 4.81 (d,J =0.8 Hz, 1H), 4.70 (d,J =11.2 Hz, 1H), 4.30 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.10 -3.85 (m, 3H), 3.68 (d,J =12.0 Hz, 1H), 2.83 -2.83 (m, 2H), 2.56 -2.41 (m, 2H), 1.81 (s, 3H).
Paso D: 4-(benciloxi)-4-(2-metilalil)-8-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il-1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro-1H, 6H-pirano[4,3-b]tieno[3, 2-d]piran-6-ona:
A una solución de 3-(benciloxi)-3-(2-metilalil)tetrahidro-4H-piran-4-ona (210 mg, 0.81 mmol, 1.5 eq.) y 3-bromo-5-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-il)tiofeno-2-carboxilato de metilo (200 mg, 0.56 mmol, 1.0 eq.) en dioxano (10 mL) se añadió Cs2cOa (439 mg, 1.35 mmol, 2.0 eq. ) y sphos Pd G3 (93 mg, 0.11 mmol, 0.20 eq.). Se desgasificó la mezcla y se purgó con N2, antes de calentar a 105 °C durante 16 h. La mezcla se purificó mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 0 - 50% de EtOAc en PE) para dar 4-(benciloxi)-4-(2-metilalil)-8-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (60 mg, 21%) como un sólido amarillo. MS obs. (ESI+): 519.3 [(M+H)+].
Paso E: 4-(benciloxi)-4-(2-oxopropil)-8-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona:
Se enfrió a -75 °C una solución de 4-(benciloxi)-4-(2-metilalil)-8-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (80 mg, 0.15 mmol) en DCM (5 mL) y MeOH (5 mL), antes de hacer burbujear ozono en la solución durante 20 min. Se añadió sulfuro de dimetilo (8 gotas) a -75 °C, se agitó la mezcla a -75 °C durante 30 min antes de calentar hasta ta. Se concentró y purificó la mezcla mediante cromatografía instantánea en columna (SO 2, 0 - 50% de EtOAc en PE) para dar 4-(benciloxi)-4-(2-oxopropil)-8-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazoi-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (52 mg, 65%). MS obs. (ESI+): 413.2 [(M-OBn)].
Paso F: 4-(benciloxi)-4-(2,2-difluoropropil)-8-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-il)-3, 4-dihidro-IH, 6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona:
Se agitó a 35 °C durante 16 h una mezcla de 4-(benciloxi)-4-(2-oxopropil)-8-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (50 mg, 0.10 mmol, 1.0 eq.) en CHCh (0.20 mL) y DAST (10 mL). Se enfrió la mezcla a 0 °C y se diluyó con EtOAc (20 mL) y NaHCO3 acuoso (20 mL). Se concentró la capa orgánica y se purificó el residuo mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 0 50% de EtOAc en PE) para dar 4-(benciloxi)-4-(2,2-difluoropropil)-8-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (21 mg, 40%). MS obs. (ESI+): 543.2 [(M+H)+].Paso G: 4-(2,2-difluoropropil)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona:
Se agitó a 35 °C durante 3 h una solución de 4-(benciloxi)-4-(2,2-difluoropropil)-8-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (40 mg, 0.070 mmol, 1.0 eq.) en DCE (4 mL) y TFA (1 mL). Se añadió NH4OH a ta y se concentró la mezcla para proporcionar 4-(2,2-difluoropropil)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (25 mg, cruda) que se utilizó para el siguiente paso. MS obs. (ESI+): 369.4 [(M+H)+].
Paso H: 4-(2,2-difluoropropil)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)- 1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3, 2-d]piridin-6-ona(Compuesto 86):
Se agitó a 95 °C durante 16 h una mezcla de 4-(2,2-difluoropropil)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (25 mg, cruda), /-PrOH (2.5 mL) y NH4 OH (2.5 mL). Se concentró y purificó la mezcla mediante cromatografía en columna de fase inversa (Ci4SiO2, 0 - 40% de MeCN en agua (0.1% de NH4OH)) para dar 4-(2,2-difluoropropil)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 86 ) (2.6 mg, 10%). MS obs. (ESI+): 368.0 [(M+H)+]; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 13.23 (s, 1H), 11.00 (s, 1H), 8.32 (brs, 1H), 8.26 (brs, 1H), 7.42 (s, 1H), 5.76 (s, 1H), 4.90 -4.55 (m, 2H), 4.04 (d,J =11.6 Hz, 1H), 3.65(d, J=11.6 Hz, 1H), 2.65 -2.52 (m, 2H), 1.70 (t,J =19.6 Hz, 3H). Ejemplos 87 y 88 - Compuestos 87 y 88: (S)-6-hidroxi-6-isopropN-2-(1H-pirazol-4-N)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 87) y (R)-6-hidroxi-6-isopropN-2-(1H-pirazol-4-N)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (Compuesto 88) (La estereoquímica para los Compuestos 87 y 88 se asigna arbitrariamente)
A una solución de 6-hidroxi-6-isopropil-2-(1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (100 mg, 220 ^mol, 1.0 eq.) en DCM (7 mL) se añadió BCl3 (1.0 M, 650 ^L, 3.0 eq.). Se agitó la mezcla a -70 °C durante 10 min. Se hizo burbujear N2 en la mezcla de reacción durante 2 min antes de añadir NH4OH (25% ac., 1 mL). Se agitó la mezcla a 0 °C durante 15 min antes de agregar MeOH (2 mL). Después de otros 10 min a 0 °C se concentró la mezcla al vacío para dar 6-hidroxi-6-isopropil-2-(1H-pirazol-4-il)-6,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4(5H)-ona (20 mg). MS obs. (ESI+): 330.1 [(M+H) ]. Se separaron los enantiómeros mediante SFC quiral. (6S)-6-hidroxi-6-isopropil-2-(1H-pirazol-4-il)-5,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4-ona (Compuesto 87): MS obs. (ESI+): 311.9 [(M-17)+];
1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 13.20 (s, 1H), 10.36 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 5.00 (s, 1H), 2.78 - 2.65 (m, 1H), 2.54 - 2.32 (m, 2H), 1.76 - 1.69 (m, 4H), 0.97 (d,J =6.8 Hz, 3H), 0.59 (d,J =6.8 Hz, 3H). (6R)-6-hidroxi-6-isopropil-2-(1H-pirazol-4-il)-5,7,8,9-tetrahidrotieno[2,3-c]quinolin-4-ona (Compuesto 88): MS obs. (ESI+): 329.9 [(M+H)+].
Ejemplos 89 y 90 - Compuestos 89 y 90: (S)-4-(terc-butN)-4-hidroxi-8-(1-metiMH-pirazol-5-N)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridm-6-ona (Compuesto 89) y (R)-4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(lmetiMH-pirazol-5-N)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]pirídm-6-ona (Compuesto 90) (La estereoquímica para los Compuestos 89 y 90 se asigna arbitrariamente)
Paso A: 4-(benciloxi)-8-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-3, 4-dihidro-IH, 6H-pirano[4, 3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona:
Se realizaron condiciones similares a las descritas en el Compuesto 16, Paso A con 3-bromo-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)tiofeno-2-carboxilato de metilo para dar 4-(benciloxi)-8-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (1.3 g, 50%). MS obs. (ESI+): 395.1 [(M+H)+].
Paso B: 4-(benciloxi)-8-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-1,3, 4, 5-tetrahidro-6H-pirano[4, 3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona:
Se utilizaron condiciones similares a las descritas en el Compuesto 16, Paso B para proporcionar 4-(benciloxi)-8-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (870 mg, 55%). MS obs. (ESI+): 394.3 [(M+H)+].
Paso C: 4-hidroxi-8-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-1, 3, 4, 5-tetrahidro-6H-pirano[4, 3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona:
Se agitó a 80 °C durante 3 h una solución de 4-(benciloxi)-8-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (680 mg, 1.73 mmol, 1.0 eq.) en TFA(7 mL). Se concentró la mezcla al vacío y se añadió NH^MeOH (7 M) a 0 °C para lograr un pH de ~9. Se concentró la mezcla al vacío y se la purificó mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 0 - 9% de MeOH en DCM) para dar 4-hidroxi-8-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (455 mg, 87%). MS obs. (ESI+): 304.2 [(M+H)+].
Paso D: 8-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-1,5-dihidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridina-4,6(3H)-diona:
Se emplearon las condiciones de reacción descritas en el Compuesto 16, Paso E para proporcionar 8-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-1,5-dihidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridina-4,6(3H)-diona (330 mg, 73%). MS obs. (ESI+): 302.1 [(M+H)+].
Paso E: (S)-4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona(Compuesto 89) y(R)-4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-1,3, 4, 5-tetrahidro-6H-pirano[4, 3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona(Compuesto 90):
Se enfrió a 0 °C una solución de 8-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-1,5-dihidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridina-4,6(3H)-diona (110 mg, 370 ^mol, 1.0 eq.) en THF (6 mL) antes de añadir t-BuMgCl (1.0 M, 6 mL, 16.5 eq.). Se agitó la mezcla de reacción a 0 °C durante 2 h antes de añadir solución acuosa de NH4Cl. Se vertió la mezcla en agua (20 mL) y se sometió a extracción con DCM/MeOH (10:1, v/v) (40 mL * 3). Las capas orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron al vacío. La purificación (SiO2, 0 - 6% de MeOH en DCM) dio 4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (56 mg, 43%). MS obs. (ESI+): 360.3 [(M+H)+].
Se separaron los enantiómeros mediante SFC quiral. (S)-4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 89): MS obs. (ESI+): 360.2 [(M+H)+] ; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 10.31 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.53 (d,J =2.0 Hz, 1H), 6.70 (d,J =2.0 Hz, 1H), 5.35 (s, 1H), 4.87 - 4.72 (m, 2H), 4.14 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.04 (s, 3H), 3.45 (d,J =11.2 Hz, 1H), 1.03 (s, 9H). (R)-4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 90): MS obs. (ESI+): 360.2 [(M+H)+].
Ejemplos 91 y 92 - Compuestos 91 y 92: (S)-4-(terc-butN)-4-hidroxi-8-(3-metiMH-pirazol-4-N)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 91) y (R)-4-(terc-butN)-4-hidroxi-8-(3-metil-1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 92) (La estereoquímica para los Compuestos 91 y 92 se asigna arbitrariamente)
Paso A: 3-bromo-5-(3-metil-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)tiofeno-2-carboxilato de metilo y 3-bromo-5-(5-metil-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)tiofeno-2-carboxilato de metilo:
A una solución de 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-pirazol (10 g, 48.1 mmol, 1 eq.) en DMF (150 mL) se añadió NaH (2.39 g, 59.9 mmol, 60% de pureza, 1.25 eq.) a 0 °C. Se agitó la mezcla a 0 °C durante 1 hr, antes de añadir 2-(clorometoxi)etil-trimetilsilano (12.0 g, 72.1 mmol, 12.76 mL, 1.5 eq.). Se agitó la reacción a ta durante 3 h antes de diluirla con agua. Se sometió la mezcla bifásica a extracción con EtOAc (80 mL * 3) y se lavó con salmuera. La capa orgánica se secó, se filtró y se concentró para dar la mezcla de 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol y 5-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol (16 g, crudo). La mezcla cruda se disolvió en 1,4-dioxano (160 mL) y se agregaron Pd(dppf)Cl2 (3.46 g, 4.73 mmol, 0.1 eq.), K3PO4(30.1 g, 141.88 mmol, 3 eq.), agua (160 mL) y CH3CN (160 mL). Se calentó la mezcla de reacción a 90 °C durante 8 h, se enfrió y se filtró. Se concentró el filtrado al vacío y purificado mediante columna de gel de sílice (SiO2, 0 - 10% de EtOAc en PE) para dar la mezcla de 3-bromo-5-(3-metil-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)tiofeno-2-carboxilato de metilo y 3-bromo-5-(5-metil-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)tiofeno-2-carboxilato de metilo (12 g, 59%, 2 pasos). 1H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 ppm: 7.66 (s, 1H), 7.05 (s, 1H), 5.47 (s, 2H), 3.92 (s, 3H), 3.64 - 3.58 (m, 2H), 2.55 (s, 3H), 0.97 - 0.90 (m, 2H), 0.01 (s, 9H).
1H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 ppm: 7.75 (s, 1H), 7.05 (s, 1H), 5.38 (s, 2H), 3.91 (s, 3H), 3.64 -3.58 (m, 2H), 2.47 (s, 3H), 0.97 - 0.90 (m, 2H), 0.02 (s, 9H).
Paso B: 4-(benciloxi)-8-(3-metil-1-((2-(trimetil)silil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona y 4-(bendloxi)-8-(5-metil-1-((2-(trímetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-3, 4-dihidro-IH, 6H-pirano[4, 3-b]tieno[3, 2-d]piran-6-ona:
Se disolvió una mezcla de 3-bromo-5-(3-metil-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)tiofeno-2-carboxilato de XX y 3-bromo-5-(5-metil-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)tiofeno-2-carboxilato de metilo (20 g, 46 mmol, 1.0 eq.) en 1,4-dioxano (600 mL) y se añadieron 3-benciloxitetrahidropiran-4-ona (19.1 g, 92.7 mmol, 2.0 eq.), Cs2CO3 (45.3 g, 139 mmol, 3.0 eq.), Pd2(dba)3 (2.12 g, 2.32 mmol, 0.050 eq.), Na2S2O5 (881 mg, 4.64 mmol. 0.10 eq.) y Xantphos (2.68 g, 4.64 mmol, 0.1 eq.). Se calentó la mezcla de reacción a 105 °C durante 16 h, se enfrió, se filtró y se concentró. Se trituró el residuo crudo con MeOH para dar la mezcla de 4-(benciloxi)-8-(3-metil-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona y 4-(benciloxi)-8-(5-metil-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (11.5 g, 46%). MS. Obs.. (ESI+): 525.5 [M+H]+.
Paso C: 4-(benciloxi)-8-(3-metil-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-yl)-1il)-1,3, 4, 5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona y 4-(benciloxi)-8-(5-metil-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona:
A una solución de 4-(benciloxi)-8-(3-metil-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona y 4-(benciloxi)-8-(5-metiM-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (3.0 g, 11 mmol, 1 eq.) en i-PrOH (30 mL) se añadió NH4OH (30 mL). Se agitó la reacción a 100 °C durante 20 h, se enfrió, se concentró y se filtró. La trituración con MeOH proporcionó 4-(benciloxi)-8-(3-metil-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona y 4-(benciloxi)-8-(5-metil-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (3.8 g, 63%). MS. Obs. (ESI+): 524.5 [M+H]+.
Paso D: 4-(4-hidroxi-6-oxo-3,4,5,6-tetrahidro-1H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-djpiridin-8-il)-3-metil-1H-pirazol-1-carboxilato de terc-butilo:
Se disolvió una mezcla de 4-(benciloxi)-8-(3-metil-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona y 4-(benciloxi)-8-(5-metil-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (5.4 g, 10. mmol, 1.0 eq.) en DCM (150 mL) y se enfrió a 0 °C y se añadió BCh (1.0 M, 50 mL, 5 eq.). Se agitó la reacción a 0 °C durante 1 h antes de agregar MeOH. Se concentró la mezcla para dar 4-hidroxi-8-(3-metil-1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (3.2 g, cruda). MS. Obs. (ESI+): 304.0 [M+H]+. Se disolvió el residuo crudo en DMF (90 mL) y se añadieron Et3N (4.20 g, 41.5 mmol), DMAP (169 mg, 1.38 mmol) y (Boc)2O (3.63 g, 16.6 mmol). Se agitó la mezcla a ta durante 6 h antes de concentrarla al vacío. Se trituró el residuo con DCM para dar 4-(4-hidroxi-6-oxo-3,4,5,6-tetrahidro-1H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-8-il)-3-metil-1H-pirazol-1-carboxilato de terc-butilo (4.8 g, crudo). MS obs. (ESI+): 404.2 [(M+H)+].
Paso E: 4-(4,6-dioxo-3,4,5,6-tetrahidro-1H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-8-il)-3-metil-1H-pirazol- 1-carboxilato de terc-butilo:
Las condiciones de reacción descritas en el Compuesto 16, Paso E proporcionaron 4-(4,6-dioxo-3,4, 5.6-tetrahidro-1H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-8-il)-3-metil-1H-pirazol-1-carboxilato de terc-butilo (750 mg, 50%). MS. Obs. (ESI+): 402.0 [(M+H)+].
Paso F: (S)-4-(terc-butil)-4-hidmxi-8-(3-metil-1H-pirazol-4-il)- 1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona(Compuesto 91) y(R)-4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(3-metil-1H-pirazol-4-il)-1,3, 4, 5-tetrahidro-6H-pirano[4, 3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona(Compuesto 92):
Condiciones de reacción similares a las descritas en el Compuesto 89, Paso E para proporcionar 4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(3-metil-1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (30 mg, 32%). MS. Obs. (ESI+): 360.2 [M+H]+.
Se separaron los enantiómeros mediante SFC. (S)-4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(3-metil-1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 91): MS. Obs. (ESI+): 360.2 [(M+H)+]; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) ppm: 12.96 (s, 1H), 10.02 (s, 1H), 8.17-7.87 (m, 1H), 7.27 (s, 1H), 5.32 (s, 1H), 4.80 (d,J= 15.2 Hz, 1H), 4.71 (d,J =15.2 Hz, 1H), 4.13 (d,J= 11.6 Hz, 1H), 3.45 (d,J =11.6 Hz, 1H), 2.45 (s, 3H), 1.03 (s, 9H). (R)-4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(3-metil-1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 92): MS. Obs. (ESI+): 360.0 [(M+H)+].
Ejemplo 93 - Compuesto 93: 4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidrotieno[2,3-c][1,6]naftiridin-6(2H)-ona
Paso A: 3-(benzoiloxi)-4,4-dimetoxipiperidina-1-carboxilato de bencilo:
A una solución de hidróxido de potasio (7.22 g, 129 mmol, 3.0 eq.) en MeOH (450 mL) se le añadió 4-oxopiperidina-1-carboxilato de bencilo (10 g, 43 mmol, 8.5 mL, 1.0 eq.) a 0 °C antes de añadir I2 (15.2 g, 60.0 mmol, 1.4 eq.) lentamente bajo atmósfera de N2. Tras la adición, se dejó calentar a ta la mezcla de reacción y se agitó durante 2 h. Se concentró la mezcla de reacción al vacío. El producto crudo se agitó en 150 mL de DCM y se filtró el precipitado. Se concentró el filtrado al vacío para dar 3-hidroxi-4,4-dimetoxipiperidina-1-carboxilato de Bencilo (14.2 g, crudo). Se disolvió el residuo crudo en piridina (140 mL) y se enfrió a 0 °C antes de agregar cloruro de benzoilo (16.9 g, 120 mmol, 13.8 mL, 2.5 eq.). Tras la adición, se agitó la mezcla de reacción a ta durante 4 h. Se concentró la mezcla al vacío y se purificó (SiO2, 0 - 9% de EtOAc en PE) para dar 3-(benzoiloxi)-4,4-dimetoxipiperidina-1-carboxilato de Bencilo (9.8 g, 57%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 7.96 - 7.86 (m, 2H), 7.72 - 7.69 (m, 1H), 7.63 - 7.50 (m, 2H), 7.49 - 7.33 (m, 2H), 7.17 - 7.07 (m, 2H), 7.02 - 6.93 (m, 1H), 5.07 - 4.99 (m, 2H), 4.88 - 4.57 (m, 1H), 4.24 - 4.18 (m, 1H), 4.07 - 4.02 (m, 1H), 3.30 - 3.32 (m, 1H), 3.26 (s, 3H), 3.07 (s, 3H), 2.97 -2.82 (m, 1H), 2.02 - 1.99 (m, 1H), 1.85 - 1.82 (m, 1H).
Paso B: 3-(benzoiloxi)-4-oxopiperidina-1-carboxilato de bencilo:
A la solución de 3-(benzoiloxi)-4,4-dimetoxipiperidina-1-carboxilato de bencilo (9.8 g, 24 mmol, 1.0 eq.) en acetona (100 mL) se añadió yodo molecular (1.25 g, 4.91 mmol, 0.1 eq.). Después de 16 h a ta se añadió Na2SO3 (100 mL, sat. ac.) y se sometió la mezcla a extracción con DCM (120 mL * 3). Las fases orgánicas combinadas se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron. La purificación mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 0 - 11% de EtOAc en PE) dio 3-(benzoiloxi)-4-oxopiperidina-1-carboxilato de bencilo (4.7 g, 54%). 1H RMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm: 8.06 (d,J =7.2 Hz, 2H), 7.61 - 7.57 (m, 1H), 7.47 -7.43 (m, 2H), 7.37 (s, 5H), 5.41 -5.37 (m, 1H), 5.20 (s, 2H), 4.73 -4.57 (m, 1H), 4.43 -4.40 (m, 1H), 3.44 -3.26 (m, 2H), 2.65 (s, 2H).
Paso C: 4-(benzoiloxi)-6-oxo-8-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-il)-4,6-dihidro-1H-tieno[3',2':4,5]pirano[3,2-c]piridina-2(3H)-carboxilato de bencilo:
Se calentó a 105 °C durante 2 h una mezcla de 3-bromo-5-(1-tetrahidropiran-2-ilpirazol-4-il)tiofeno-2-carboxilato de metilo (500 mg, 1.35 mmol, 1.0 eq.), 3-(benzoiloxi)-4-oxopiperidina-1-carboxilato de bencilo (714 mg, 2.02 mmol, 1.5 eq.), Cs2CO3, (1.32 g, 4.04 mmol, 3.0 eq.), Pd2(dba)3 (123 mg, 135 pmol, 0.10 eq.) y Xantphos (156 mg, 269 pmol, 0.20 eq.) en tolueno (18 mL). La mezcla de reacción se filtró y se la concentró al vacío y se la purificó mediante cromatografía instantánea en columna (SO 2, 0 - 36% de EtOAc en PE) para dar 4-(benzoiloxi)-6-oxo-8-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-il)-4,6-dihidro-1H-tieno[3',2':4,5]pirano[3,2-c]piridina-2(3H)-carboxilato de bencilo (450 mg, 55%). MS obs. (ESI+): 612.4 [(M+H)+].
Paso D: 4-hidroxi-6-oxo-8-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-il)-3,4,5,6-tetrahidrotieno[2, 3-c][1,6]naftiridina-2(1H)-carboxilato de bencilo:
Se agitó a 95 °C durante 2 h una solución de 4-(benzoiloxi)-6-oxo-8-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-il)-4,6-dihidro-1H-tieno[3',2':4,5]pirano[3,2-c]piridina-2(3H)-carboxilato de bencilo (900 mg, 1.47 mmol, 1.0 eq.) en NH3/MeOH (7 M, 10 mL, 10 mL). Se concentró la mezcla de reacción al vacío y se purificó mediante cromatografía instantánea en columna (SO 2, 0 - 4% de MeOH en DCM) para dar 4-hidroxi-6-oxo-8-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-il)-3,4,5,6-tetrahidrotieno[2,3-c][1,6]naftiridina-2(1H)-carboxilato de bencilo (500 mg, 67%). MS obs. (ESI+): 507.4 [(M+H)+].
Paso E: 4,6-dioxo-8-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-il)-3,4,5,6-tetrahidrotieno[2, 3-c][1,6]naftiridina-2(1H)-carboxilato de bencilo:
Las condiciones de reacción descritas en el Compuesto 16, Paso E se utilizaron para proporcionar 4,6-dioxo-8-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-il)-3,4,5,6-tetrahidrotieno[2,3-c][1,6]naftiridina-2(lH)-carboxilato de bencilo (395 mg, 79%). MS obs. (ESI+): 505.4 [(M+H)+].
Paso F: 4-(terc-butil)-4-hidroxi-6-oxo-8-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-il)-3,4,5,6-tetrahidrotieno[2,3-c][1,6]naftiridina-2(1H)-carboxilato de bencilo:
A la solución de 4,6-dioxo-8-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-il)-3,4,5,6-tetrahidrotieno[2,3-c][1,6]naftiridina-2(1H)-carboxilato de bencilo (200 mg, 396 pmol, 1.0 eq.) en THF (12 mL) se añadió ZnCh (0.50 M, 1.19 mL, 1.5 eq.). Se agitó la mezcla a 0 °C durante 10 min antes de añadir t-BuMgCl (1.0 M, 3.96 mL, 10.0 eq.). Después de 1 h a 0 °C se añadió NH4Cl saturado (ac.) y se sometió la mezcla bifásica a extracción con DCM/MeOH (35 mL * 3, 20:1 v/v). Las capas orgánicas se secaron (Na2SÜ4), filtraron, concentraron, y purificaron mediante cromatografía instantánea en columna (SiÜ2, 0 - 3% de MeOH en DCM) para dar 4-(tercbutil)-4-hidroxi-6-oxo-8-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-il)-3,4,5,6-tetrahidrotieno[2,3-c][1,6]naftiridina-2(1H)-carboxilato de bencilo (57 mg, 26%). MS obs. (ESI+): 563.5 [(M+H)+].
Paso G: 4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)- 1,3,4,5-tetrahidrotieno[2,3-c][1,6]naftiridin-6(2H)-ona(Compuesto 93):
Se calentó a 80 °C durante 1 h una solución de 4-(terc-butil)-4-hidroxi-6-oxo-8-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-il)-3,4,5,6-tetrahidrotieno[2,3-c][1,6]naftiridina-2(1H)-carboxilato de Bencilo (15 mg, 27 pmol, 1.0 eq.) en TFA (3.00 mL). Se concentró al vacío la mezcla resultante y se enfrió a 0 °C antes de añadir NH3/MeOH para ajustar el pH a ~9. Se concentró la mezcla al vacío y se purificó por cromatografía en columna de fase inversa (SiÜ2, 0 - 30% de MeCN en agua (0.1 % de FA)) para dar 4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidrotieno[2,3-c][1,6]naftiridin-6(2H)-ona (Compuesto 93) (4.7 mg, 51%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) ó ppm: 13.23 (s, 1H), 9.51 (s, 1H), 8.15 (brs, 2H), 7.46 (s, 1H), 5.22 (s, 1H), 3.95 - 3.80 (m, 2H), 3.32 (s, 1H), 2.78 (d,J =12.8 Hz, 1H), 1.03 (s, 9H).
Ejemplo 94 - Compuesto 94: 2-acetN-4-terc-butN-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-N)-3,5-dihidro-1H-tieno[2J3-c][1,6]naftiridin-6-ona
Paso A: 4-(terc-butil)-4-hidroxi-8-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-il)- 1,3,4,5-tetrahidrotieno[2, 3-c][1,6]naftiridin-6(2H)-ona:
A la solución de 4-(terc-butil)-4-hidroxi-6-oxo-8-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-il)-3,4,5,6-tetrahidrotieno[2,3-c][1,6]naftiridina-2(1H)-carboxilato de bencilo (57 mg, 100 pmol, 1.0 eq.) en IPA (6 mL) se añadió Pd/C (13 mg, 10.1 pmol, 10% Pd, 0.1 eq.). Se desgasificó la mezcla y se purgó con H2 y se agitó a ta durante 1.5 h. La mezcla de reacción se filtró y se concentró al vacío para dar la 4- (terc-butil)-4-hidroxi-8-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidrotieno[2,3-c][1,6]naftiridin-6(2H)-ona (42 mg, cruda) como un sólido amarillo, que se usó directamente para el siguiente paso sin purificación adicional. MS obs. (ESI+): 429.5 [(M+H)+].
Paso B: 2-acetil-4-terc-butil-4-hidroxi-8-(1-tetrahidropiran-2-ilpirazol-4-il)-3, 5-dihidro-1H-tieno[2,3-c][1,6]naftiridin-6-ona:
Se enfrió a 0 °C una solución de 4-terc-butil-4-hidroxi-8-(1-tetrahidropiran-2-ilpirazol-4-il)-1,2,3,5-tetrahidrotieno[2,3-c][1,6]naftiridin-6-ona (47 mg, 110 pmol, 1.0 eq.) y trietilamina (33 mg, 330 pmol, 3.0 eq.) en DCM (3 mL). Se añadió cloruro de acetilo (8.61 mg, 110 pmol, 1.0 eq.) gota a gota y se calentó la mezcla de reacción a ta. Después de 2 h se agregaron Na2CO3 (2 mL) ac. saturado y MeCN (3 mL). Se agitó la mezcla a ta durante 3 h, se diluyó con salmuera (30 mL), se sometió a extracción con DCM (30 mL x 3 ) y se lavó con salmuera (30 mL x 2 ). Las capas orgánicas combinadas se concentraron y se purificaron mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 0 - 6 % de MeOH en DCM) para dar 2-acetil-4-terc-butil-4-hidroxi-8-(1-tetrahidropiran-2-ilpirazol-4-il)-3,5-dihidro-1H-tieno[2,3-c][1,6]naftiridin-6-ona (20 mg, 39%). MS obs. (ESI+):471.4 [(M+1)+].
Paso C: 2-acetil-4-terc-butil-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-3,5-dihidro- 1H-tieno[2, 3-c][1,6]naftiridin-6-ona(Compuesto 94):
Se agitó a 0 °C durante 1 h una solución de 2-acetil-4-terc-butil-4-hidroxi-8-(1-tetrahidropiran-2-ilpirazol-4-il)-3,5-dihidro-1H-tieno[2,3-c][1,6]naftiridin-6-ona (20 mg, 42 pmol, 1.0 eq.) en HCl/MeOH (4 M, 2 mL). Se concentró la mezcla al vacío y se ajustó el pH a ~ 9 añadiendo NH3/MeOH a 0 °C. Se concentró la mezcla al vacío y se purificó por HPLC Prep (ACN/agua/0.1% de FA) para dar 2-acetil-4-terc-butil-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-3,5-dihidro-1H-tieno[2,3-c][1,6]naftiridin-6-ona (Compuesto 94) (9.6 mg, 58%). MS obs. (ESI+): 386.1 [(M+1)+]; 1H RMN (400 MHz, DMSO-da) 5 13.25 (s, 1H), 10.03 (d,J =37.6 Hz, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.58 (d,J =1.2 Hz, 1H), 5.61 (d,J =55.2 Hz, 1H), 4.96 - 4.05 (m, 3H), 2.68 (d,J =13.2 Hz, 1H), 2.16 (d,J =18.8 Hz, 3H), 0.95 (d,J =12.8 Hz, 9H).
Ejemplos 95 y 96 - Compuestos 95 y 96: (S)-4-(1,1-difluoroetN)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-N)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 95) y (R)-4-(1,1-difluoroetN)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 96) (La estereoquímica para los Compuestos 95 y 96 se asigna arbitrariamente)
Paso A: 3-(benciloxi)-3-(prop-1 -en-2-il)tetrahidro-2H-piran-4-ol:
Se enfrio a 0 °C una solución de 3-(benciloxi)-3-(prop-1-en-2-il)tetrahidro-4H-piran-4-ona (5.0 g, 20.3 mmol, 1.0 eq.) en metanol (50 mL), antes de añadir en porciones NaBH4 (922 mg, 24.4 mmol, 1.2 eq.). Se dejó calentar la mezcla a ta durante 1 h y se añadió NH4Cl (sat. ac.). Se sometió la mezcla bifásica a extracción con DCM (50 mL x 3) y se lavaron con salmuera las fases orgánicas combinadas, se secaron con Na2SO4, se filtraron y se concentraron al vacío. La purificación mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 0 - 12% de EtOAc en PE) dio diastereoisómeros trans y cis, asignados arbitrariamente: (3R,4S)-3-benciloxi-3-isopropeniltetrahidropiran-4-ol y (3S,4S)-3-benciloxi-3-isopropenil-tetrahidropiran-4-ol (2.4 g, 48%); 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 7.39 - 7.31 (m, 4H), 7.27 - 7.25 (m, 1H), 5.12 (s, 1H), 5.09 (s, 1H), 4.55 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 4.41 (d, J = 3.2 Hz, 2H), 3.86 - 3.77 (m, 3H), 3.51 (d,J =12.0 Hz, 1H), 3.47 - 3.40 (m, 1H), 1.89 -1.81 (m, 1H), 1.78 (s, 3H), 1.64 -1.60 (m, 1H). (3S,4R)-3-benciloxi-3-isopropenil-tetrahidropiran-4-ol y (3R,4R)-3-benciloxi-3-isopropenil-tetrahidropiran-4-ol (2.3 g, 46 %); 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 7.33 - 7.27 (m, 4H), 7.26 -7.24 (m, 1H), 5.09 (s, 1H), 4.82 (d,J = 4.4Hz, 1H), 4.78 (s, 1H), 4.39 (d,J =11.2 Hz, 1H), 4.09 (d,J =11.2 Hz, 1H), 3.99 (d,J =12.4 Hz, 1H), 3.78 - 3.72 (m, 2H), 3.63 -3.59 (m, 2H), 2.15 -2.12 (m, 1H), 1.71 (s, 3H), 1.40 -1.36 (m, 1H).
Paso B: benzoato de 3-(benciloxi)-3-(prop-1-en-2-il)tetrahidro-2H-piran-4-ilo:
Se enfrió a 0 °C una mezcla de (3R,4S)-3-benciloxi-3-isopropenil-tetrahidropiran-4-ol y (3S,4S)-3-benciloxi-3-isopropenil-tetrahidropiran-4-ol (2.4 g, 9.67 mmol, 1.0 eq., asignado arbitrariamente) en piridina (24 mL) antes de agregar cloruro de benzoilo (5.43 g, 38.7 mmol, 4.45 mL, 4.0 eq.), y se calentó la mezcla de reacción a ta. Se concentró la mezcla al vacío y se diluyó el residuo con EtOAc (100 mL). Las capas orgánicas se lavaron con HCl (5 x 60 mL, 1.0 M ac.) y salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron al vacío. La purificación mediante cromatografía instantánea en columna (SO 2, 0 - 5% de EtOAc en PE) dio benzoato de 3-(benciloxi)-3-(prop-1-en-2-il)tetrahidro-2H-piran-4-ilo (3.0 g, 88%). 1H RMN (400 MHz, DMSo-d6) 5 ppm: 8.00 -7.94 (m, 2H), 7.68 -7.64 (m, 1H), 7.56 -7.50 (m, 2H), 7.36 -7.30 (m, 4H), 7.27 -7.25 (m, 1H), 5.50 -5.47 (m, 1H), 5.17 (s, 1H), 5.13 (s, 1H), 4.51 -4.39 (m, 2H), 4.04 -4.01 (m, 1H), 3.92 -3.88 (m, 1H), 3.80 (d,J =12.4 Hz, 1H), 3.69 - 3.64 (m, 1H), 2.16 - 2.07 (m, 1H), 1.88 - 1.83 (m, 1H), 1.76 (s, 3H).
Paso C: benzoato de 3-acetil-3-(bendloxi)tetrahidro-2H-piran-4-ilo:
Se enfrió a -78 °C una solución de benzoato de 3-(benciloxi)-3-(prop-1-en-2-il)tetrahidro-2H-piran-4-ilo (3.0 g, 8.51 mmol, 1.0 eq.) en DCM (60 mL). Se hizo burbujear ozono suavemente a través de la solución en agitación a -78 °C aproximadamente 1.5 h, antes de pasar N2 a través de la solución durante 10 min. Se añadieron cinco gotas de sulfuro de dimetilo y se calentó la mezcla de reacción lentamente a ta. Se concentró la mezcla de reacción al vacío y se purificó mediante cromatografía instantánea en columna (SÍO2, 0 - 6 % de EtOAc en PE) para dar benzoato de 3-acetil-3-(benciloxi)tetrahidro-2H-piran-4-ilo (2.5 g, 83%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6 ) 8 ppm: 7.99 - 7.97 (m, 2H), 7.70 - 7.66 (m, 1H), 7.57 - 7.53 (m, 2H), 7.39 - 7.27 (m, 5H), 5.57 - 5.54 (m, 1H), 4.57 (s, 2H), 4.14 (d,J =12.8 Hz, 1H), 3.89 - 3.85 (m, 2H), 3.70 - 3.67 (m, 1H), 2.27 (s, 3H), 2.08 - 2.05 (m, 1H), 1.95 - 1.92 (m, 1H).
Paso D: benzoato de 3-(bendloxi)-3-(1,1-difluoroetil)tetrahidro-2H-piran-4-ilo:
A una mezcla de benzoato de 3-acetil-3-(benciloxi)tetrahidro-2H-piran-4-ilo (1.5 g, 4.23 mmol, 1.0 eq.) en cloroformo (1.5 mL) se le añadió DAST (18.3 g, 114 mmol, 15 mL, 26.8 eq.) y se agitó la mezcla a 75 °C durante 16 h. Se diluyó la mezcla de reacción con DCM (50 mL) y agua helada (150 mL) y se la sometió a extracción con DCM (70 mL * 3). La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó (Na2SO4), se filtró y se concentró al vacío. La cromatografía en columna (SO 2, 0 - 5% de EtOAc en PE) dio benzoato de 3-(benciloxi)-3-(1,1-difluoroetil)tetrahidro-2H-piran-4-ilo (470 mg, 29%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm: 7.97 - 7.95 (m, 2H), 7.70 - 7.66 (m, 1H), 7.57 - 7.53 (m, 2H), 7.47 (d,J =7.6 Hz, 2H), 7.42 - 7.38 (m, 2H), 7.34 - 7.32 (m, 1H), 5.46 - 5.43 (m, 1H), 4.92 (d,J =11.2 Hz, 1H), 4.70 (d,J =10.8 Hz, 1H), 4.47 (d,J =13.2 Hz, 1H), 3.98 - 3.95 (m, 1H), 3.66 -3.61 (m, 2H), 2.13 -2.09 (m, 1H), 1.91 -1.89 (m, 1H), 1.68 (t,J =20.4 Hz, 3H).
Paso E: 3-(benciloxi)-3-(1,1-difluoroetil)tetrahidro-2H-piran-4-ol:
Se agitó a ta durante 2 h una mezcla de benzoato de 3-(benciloxi)-3-(1,1-difluoroetil)tetrahidro-2H-piran-4-ilo (470 mg, 1.25 mmol, 1.0 eq.) en THF (5 mL), H2O (5 mL), MeOH (5 mL) y UOH H2O (157 mg, 3.75 mmol, 3.0 eq.). Se sometió la mezcla a extracción con DCM (30 mL * 3), se combinaron las fases orgánicas, se lavaron con salmuera, se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron. La purificación mediante cromatografía instantánea en columna (SO 2, 0 - 9% de EtOAc en PE) dio 3-(benciloxi)-3-(1,1-difluoroetil)tetrahidro-2H-piran-4-ol (305 mg, 89 %). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6 ) 8 ppm: 7.43 (d,J = 7.2Hz, 2H), 7.37 - 7.34 (m, 2H), 7.30 -7.26 (m, 1H), 4.84 (d,J =8.0 Hz, 1H), 4.77 (d,J =11.2 Hz, 1H), 4.54 -4.51 (m, 1H), 4.35 (d,J =13.2 Hz, 1H), 3.89 - 3.85 (m, 1H), 3.80 - 3.77 (m, 1H), 3.43 - 3.39 (m, 1H), 3.36 - 3.31 (m, 1H), 1.99 - 1.90 (m, 1H), 1.81 (t,J =20.4 Hz, 3H), 1.60 - 1.56 (m, 1H).
Paso F: 3-(benciloxi)-3-(1,1-difluoroetil)tetrahidro-4H-piran-4-ona:
A la mezcla de 3-benciloxi-3-(1,1-difluoroetil)tetrahidropiran-4-ol (525 mg, 1.93 mmol, 1.0 eq.) en DCM (6 mL) y DMF (6 mL) se le añadió Dm P (1.64 g, 1.93 mmol, 2.0 eq.) y se agitó la mezcla a 50 °C durante 2 h. Se añadieron solución acuosa de Na2SO3 y agua (70 mL) y se sometió la mezcla bifásica a extracción con EtOAc (35 mL * 3). La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó (Na2SO4), se filtró y se concentró. La cromatografía en columna (SiO2, 0 - 6 % de EtOAc en PE) dio 3-(benciloxi)-3-(1,1-difluoroetil)tetrahidro-4H-piran-4-ona (505 mg, 96%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6 ) 8 ppm: 7.38 - 7.34 (m, 4H), 7.33 - 7.30 (m, 1H), 4.75 (d,J =11.2 Hz, 1H), 4.57 (d,J =11.2 Hz, 1H), 4.31 (d,J =12.8 Hz, 1H), 4.11 -4.04 (m, 2H), 3.97 -3.94 (m, 1H), 2.84 -2.80 (m, 1H), 2.53 - 2.52 (m, 1H), 1.70 (t,J =20.4 Hz, 3H).
Paso G: 4-(benciloxi)-4-(1,1-difluoroetil)-8-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-il)-3, 4-dihidro-1H, 6H-pirano[4, 3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona:
A una solución de 3-(benciloxi)-3-(1,1-difluoroetil)tetrahidro-4H-piran-4-ona (505 mg, 1.87 mmol, 1.5 eq.) y 3-bromo-5-(1-tetrahidropiran-2-ilpirazol-4-il)tiofeno-2-carboxilato de metilo (460 mg, 1.24 mmol, 1.0 eq.) en tolueno (18 mL) se añadió CS2CO3 (1.21 g, 3.72 mmol, 3.0 eq.), Sphos-Pd-G3 (107 mg, 124 ^mol, 0.10 eq.). Se calentó la mezcla a 105 °C durante 2 h, se enfrió y se filtró. Se concentró el filtrado al vacío y se purificó mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 0 - 27% de EtOAc en PE) para dar 4-(benciloxi)-4-(1,1-difluoroetil)-8-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (260 mg, 39%). MS obs. (ESI+): 529.2 [(M+H)+].
Paso H: (S)-4-(1,1-difluoroetil)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-], 3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3, 2 d]piridin-6-ona(Compuesto 95) y(R)-4-(1,1-difluoroetil)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona(Compuesto 96):
Se agitó a 50 °C durante 1 h una solución de 4-(benciloxi)-4-(1,1-difluoroetil)-8-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (260 mg, 492 ^mol) en TFA (6 mL). Se concentró la mezcla de reacción al vacío para dar 4-(1,1-difluoroetil)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-3,4-dihidro-1H,6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piran-6-ona (305 mg, cruda). Se disolvió el residuo crudo en isopropanol (8 mL) y se añadió amoníaco (8 mL sat. ac.). Se agitó la mezcla a 95 °C durante 16 h antes de enfriarla y concentrarla al vacío, y se purificó mediante cromatografía instantánea en columna (SiO2, 0 - 5% de MeOH en DCM) para dar 4-(1,1-difluoroetil)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (138 mg, 45%). MS obs. (ESI+): 354.0 [(M+H)+].
Se separaron los enantiómeros mediante SFC quiral. (S)-4-(1,1-difluoroetil)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 95): MS obs. (ESI+): 354.0 [(M+H)+]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) S ppm: 13.26 (s, 1H), 10.36 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 6.44 (s, 1H), 4.85 -4.74 (m, 2H), 4.13 (d,J= 12.0 Hz, 1H), 3.62 (d,J=12.0 Hz, 1H), 1.67 (t,J=19.6 Hz, 3H). (R)-4-(1,1-difluoroetil)-4-hidroxi-8-(1H-pirazol-4-il)-1,3,4,5-tetrahidro-6H-pirano[4,3-b]tieno[3,2-d]piridin-6-ona (Compuesto 96): MS obs. (ESI+): 354.0 [(M+H)+].
Ensayos biológicos
Protocolo del ensayo bioquímico de quinasa CDC7:
Se adquirió la proteína CDC7 humana de longitud completa coexpresada con DBF4 de SignalChem (China). Se determinó la actividad de quinasa CDC7 con PDKtide (SignalChem) como sustrato y midiendo la producción de ADP utilizando el kit ADP-Glo™ Kinase Assay (Promega) siguiendo las instrucciones del fabricante. La reacción de la quinasa fue realizada utilizando las siguientes condiciones: Amortiguador: Tris 40 mM pH 7.5, MgCl220 mM, BSA 0.1 mg/mL y DTT 50 ^M. La mezcla de reacción final contenía 0.1 nM de CDC7/DBF4, 1 ^M de ATP y 10 ^M de PDKtide. El tiempo de reacción de la quinasa fue de 4 h. La señal de ADP-Glo se midió con un lector de placas EnVision (PerkinELmer).
El porcentaje de inhibición de la actividad de quinasa CDC7 se calculó sobre la base de la siguiente fórmula:
SMuestra: señal de los compuestos
SCtrl alto: señal de control alto (DMSO)
SControl bajo: señal de control bajo (control positivo inhibidor de CDC7)
Ensayo de Electroquimioluminiscencia MSD de MCM2 fosforilado
El efecto de los inhibidores de CDC7 sobre la fosforilación celular del sustrato CDC7 MCM2 se determinó utilizando el siguiente protocolo:
Se sembró en placa un total de 40,000 células colo205 en 100 ^L de medio de cultivo (medio 1640 10% de suero bovino fetal 1% de Penicilina-Estreptomicina) en placas de cultivo celular de 96 pocillos y se dejó adherir durante 6 horas. Se prepararon diluciones seriadas triples de los compuestos de prueba en PBS completo a una concentración final de 25X y se agregaron 4 ^L de cada uno a las células y se incubaron durante 20 horas a 37°C, 5% de CO2. Cada concentración se probó por duplicado. Después de 20 h de incubación, las células se lavaron con 150 ^L de PBS y se lisaron con 40 ^L de amortiguador de lisis MSD (obtenido de Meso Scale Diagnostics) suministrado con inhibidor cóctel ULTRA completo 1X (obtenido de Roche). Para detectar la fosforilación de MCM2 S53, se agregaron 30 ^L de solución de anticuerpo de captura (obtenida de Abnova, número de catálogo H00004171-M01, 1:500) a cada pocillo de High Bind Plate MULTI-ARRAY de 96 pocillos y se incubó durante la noche. Se retiró la solución de anticuerpo, se bloquearon los pocillos con solución de BSA y se lavaron las placas, seguido de la adición de 30 ^l de lisado celular por pocillo. Después de 2 h de incubación, se lavaron las placas. Luego se agregaron 30 ^L de solución de anticuerpos de detección 1X (obtenida de Abcam, número de catálogo ab109133, 1:1000) a cada pocillo y se incubó durante 1 hora. Se lavaron las placas y se agregaron 30 ^L de solución de anticuerpo secundario 1X (obtenida de MSD, número de catálogo R32AB-1, 1:5000) a cada pocillo y se incubaron durante 1 hora. Se lavaron las placas y se agregaron 150 ^L de 1X Read Buffer T a cada pocillo de la placa MSD. La señal de electroquimioluminiscencia se midió en un lector de placas MESO SECTOR S600. El porcentaje de señal MCM2 fosforilada restante se calculó siguiendo la siguiente ecuación.
% de Inhibición= 100 XR HC R cpds
R HC ~ R LC
HC (control alto): Células tratadas con DMSO
Cpds: Células tratadas con compuestos de prueba
LC (control bajo): Células tratadas con inhibidor de CDC7 de control positivo
Tabla 2: Datos biológicos
Tabla 3: Ensayo de electroquimioluminiscencia

Claims (15)

  1. REIVINDICACIONES 1. Un compuesto de la Fórmula (I):
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; en donde: R1 es hidrógeno o halógeno; R2 es un heteroarilo de 5-6 miembros opcionalmente sustituido con 1 o 2 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en halógeno y alquilo C1-C6; o un heterociclilo de 5-6 miembros opcionalmente sustituido con 1 o 2 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en halógeno y alquilo C1-C6; R3 es hidrógeno o alquilo C1-C6; Anillo A es un cicloalquilo C6-C10 o un heterociclilo de 6-a--10 miembros; cada R4 se selecciona independientemente del grupo que consiste en halógeno, hidroxilo, alquilo C1-C6, alcoxi C1-C6, hidroxialquilo C1-C6, haloalquilo C1-C6, alcoxi C1-C6 (alquilo C1-C6)-, -C(=O) alquilo C1-C6, alquinilo C2-C6, cicloalquilo C3-C6, -NRARB, y heterociclilo de 4-6 miembros opcionalmente sustituido con 1 o 2 halógenos seleccionados independientemente; cada RA y RB es independientemente hidrógeno o alquilo C1-C6; y m es 0, 1, 2, 3 o 4; en donde el término "cicloalquilo" se refiere a un grupo carbonado mono o bicíclico saturado o parcialmente insaturado que tiene de 3 a 10 átomos en el anillo; donde los sistemas bicíclicos incluyen sistemas de anillo fusionados, espiro (opcionalmente denominados grupos "espirocicloalquilo") y que forman puente; y en donde los grupos cicloalquilo fusionados pueden incluir un anillo que es aromático y otro anillo que es saturado o parcialmente saturado; en donde el término "heterociclilo" se refiere a un sistema de anillo hidrocarbonado monocíclico o bicíclico saturado o parcialmente insaturado que no es completamente aromático que tiene al menos un heteroátomo dentro del anillo, seleccionado entre N, O y S; en donde los grupos heterociclilo bicíclicos incluyen sistemas de anillo fusionados, espiro (opcionalmente denominados grupos "espiroheterociclilo") y que forman puente; y en donde los grupos heterociclilo fusionados pueden contener un anillo que es aromático y otro anillo que es saturado o parcialmente saturado; y en donde el término "heteroarilo de 5-6 miembros" se refiere a un grupo monocíclico de 5-6 miembros en donde el sistema de anillo es aromático; en donde uno o más átomos de carbono en el sistema de anillo está(n) reemplazado(s) por un heteroátomo seleccionado independientemente entre N, O y S.
  2. 2. El compuesto de la reivindicación 1, en donde m es 1,2, 3 o 4.
  3. 3. El compuesto de la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en donde R2 es un heteroarilo de 5 miembros opcionalmente sustituido con 1 o 2 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en halógeno y alquilo C1-C6.
  4. 4. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1-3, en donde el heteroarilo de 5 miembros de R2 es pirazolilo o isotiazolilo.
  5. 5. El compuesto de la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en donde R2 es un heteroarilo de 6 miembros opcionalmente sustituido con 1 o 2 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en halógeno y alquilo C1-C6.
  6. 6. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1,2 y 5, en donde el heteroarilo de 6 miembros de R2 es piridilo, pirimidinilo o piridazinilo.
  7. 7. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1-6, en donde R2 es un heteroarilo de 5-6 miembros no sustituido.
  8. 8. El compuesto de la reivindicación 7, en donde R2 se selecciona del grupo que consiste en pirazolilo, isotiazolilo, piridilo y piridazinilo.
  9. 9. El compuesto de una cualquiera de la reivindicación 1 o reivindicación 2, en donde R2 es un heterociclilo de 5-6 miembros opcionalmente sustituido con 1 o 2 sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en halógeno y alquilo C1-C6.
  10. 10. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1, 2 y 9, en donde R2 es morfolinilo.
  11. 11. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1-10, en donde el Anillo A es cicloalquilo C6-C10.
  12. 12. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1-10, en donde el Anillo A es heterociclilo de 6-10 miembros.
  13. 13. El compuesto de la reivindicación 1, en donde m es 0.
  14. 14. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1-13, en donde el compuesto de la Fórmula (I) es un compuesto de la Fórmula (I-A):
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; un compuesto de la Fórmula (I-B):
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; un compuesto de la Fórmula (I-C):
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; un compuesto de la Fórmula (I-D):
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; un compuesto de la Fórmula (I-E):
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; un compuesto de la Fórmula (I-F):
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; un compuesto de la Fórmula (I-G):
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; compuesto de la Fórmula (I-H):
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; un compuesto de la Fórmula (I-I):
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; un compuesto de la Fórmula (I-J):
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; un compuesto de la Fórmula (I-K):
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; un compuesto de la Fórmula (I-L):
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; un compuesto de la Fórmula (I-M):
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; un compuesto de la Fórmula (I-N):
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; un compuesto de la Fórmula (I-O):
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; o un compuesto de la Fórmula (I-P):
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
  15. 15. El compuesto de la reivindicación 1, en donde el compuesto se selecciona del grupo que consiste en los compuestos de la tabla siguiente y sus sales farmacéuticamente aceptables.
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