ES3038967T3

ES3038967T3 - Tricyclic parp1 inhibitors and uses thereof

Info

Publication number: ES3038967T3
Application number: ES23797297T
Authority: ES
Inventors: Robert L Hoffman; Porino Jinjo Va; Joseph Robert Pinchman; Qing Dong
Original assignee: Xinthera Inc
Current assignee: Xinthera Inc
Priority date: 2022-04-28
Filing date: 2023-04-27
Publication date: 2025-10-16
Anticipated expiration: 2043-04-27
Also published as: TW202540112A; US12421241B2; CR20240461A; EP4355749A1; FI4497438T3; HRP20250969T1; TW202400596A; CN119173516A; US20240109904A1; US20230348473A1; HUE072274T2; US11795173B1; PT4355749T; NZ815323A; CO2024014603A2; KR102903399B1; DOP2024000218A; HRP20251173T1; TWI891000B; FI4355749T3

Abstract

Se describen aquí inhibidores tricíclicos de PARP1 y composiciones farmacéuticas que los contienen. Estos compuestos y composiciones son útiles para el tratamiento del cáncer. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Inhibidores tricíclicos de la parpl y usos de los mismos

REFERENCIA CRUZADA

[0001] La presente solicitud reclama el beneficio de Solicitud Provisional de EE.UU. N.° de Serie 63/336,078, depositada el 28 de abril de 2022 y Solicitud Provisional de EE.UU. N.° de Serie 63/381,482, depositada el 28 de octubre de 2022.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

[0002] La poli(ADP-ribosa)polimerasa (PARP) o poli(ADP-ribosa)sintasa (PARS) desempeña un papel esencial en la reparación del ADN, el control de la transcripción del ARN, la mediación de la muerte celular, y la regulación de la respuesta inmunitaria. Estas acciones convierten a los inhibidores de PARP en dianas para un amplio espectro de trastornos. Los inhibidores de PARP han demostrado su eficacia en numerosos modelos de enfermedad, en particular en modelos de lesión por isquemia reperfusión, enfermedades inflamatorias, enfermedades degenerativas, protección frente a los efectos adversos de compuestos citotóxicos, y potenciación de la terapia citotóxica contra el cáncer. La PARP también se ha indicado en la infección retroviral y, por tanto, los inhibidores pueden tener utilidad en la terapia antirretroviral. Los inhibidores de la PARP han resultado eficaces para prevenir lesiones por isquemia y reperfusión en modelos de infarto de miocardio, ictus, otros traumatismos neurales, trasplante de órganos, así como reperfusión ocular, renal, intestinal, y muscular esquelética. Los inhibidores han resultado eficaces en enfermedades inflamatorias como la artritis, la gota, la enfermedad inflamatoria intestinal, la inflamación del CNS como la esclerosis múltiple y la encefalitis alérgica, la sepsis, el shock séptico, el shock hemorrágico, la fibrosis pulmonar, y la uveítis. Los inhibidores de la PARP también han demostrado ser beneficiosos en varios modelos de enfermedades degenerativas, como la diabetes (así como sus complicaciones) y la enfermedad de Parkinson. Los inhibidores de la PARP pueden mejorar la toxicidad hepática tras una sobredosis de paracetamol, las toxicidades cardiacas y renales de la doxorrubicina y los agentes antineoplásicos a base de platino, así como las lesiones cutáneas secundarias a las mostazas azufradas. En varios modelos de cáncer, se ha demostrado que los inhibidores de la PARP potencian la radiación y la quimioterapia aumentando la muerte celular de las células cancerosas, limitando el crecimiento tumoral, disminuyendo la metástasis, y prolongando la supervivencia de los animales portadores de tumores.

[0003] PARP1 y PARP2 son las PARPs más ampliamente estudiadas por su papel en la reparación del daño en el ADN. PARP1 se activa por roturas de ADN dañado y cataliza la adición de cadenas de poli (ADP-ribosa) (PAR) a proteínas diana. Esta modificación postraduccional, conocida como PARilación, media en el reclutamiento de factores adicionales de reparación del ADN a las lesiones del ADN.

[0004] Una vez completada esta función de reclutamiento, la autoparilación de PARP desencadena la liberación de PARP unida al ADN para permitir el acceso a otras proteínas de reparación del ADN para completar la reparación. Así pues, la unión de la PARP a los sitios dañados, su actividad catalítica, y su eventual liberación del ADN son etapas importantes para que una célula cancerosa responda al daño del ADN causado por los agentes quimioterapéuticos y la radioterapia.

[0005] La inhibición de las enzimas de la familia PARP se ha explotado como estrategia para destruir selectivamente células cancerosas mediante la inactivación de vías complementarias de reparación del ADN. Varios estudios preclínicos y clínicos han demostrado que las células tumorales que presentan alteraciones deletéreas de BRCA1 o BRCA2, proteínas supresoras tumorales clave implicadas en la reparación de la rotura de doble cadena del ADN (DSB) por recombinación homóloga (HR), son selectivamente sensibles a los inhibidores de moléculas pequeñas de la familia PARP de enzimas de reparación del ADN. Estos tumores presentan deficiencias en las vías de reparación de la recombinación homóloga (HRR) y dependen de la función de las enzimas PARP para sobrevivir. Aunque la terapia con inhibidores de PARP se ha dirigido predominantemente a los cánceres con mutación SRCA, los inhibidores de PARP se han probado clínicamente en tumores sin mutación SRCA, aquellos que presentan deficiencia de recombinación homóloga (HRD).

[0006] Los inhibidores de PARP se divulgan, por ejemplo, en Johannes, J.W., et al., Journal of Medicinal Chemistry, 64 (2021): 14498-14512, y WO 2021/260092 A1.078

[0007] Se cree que los inhibidores de PARP que tienen una selectividad mejorada para PARP1 pueden poseer una eficacia mejorada y una toxicidad reducida en comparación con otros inhibidores de PARP1 /2 clínicos. También se cree que la fuerte inhibición selectiva de PARP1 conduciría al atrapamiento de PARP1 en el ADN, dando lugar a roturas de doble cadena de ADN (DSBs) a través del colapso de las horquillas de replicación en fase S. También se cree que el atrapamiento del ADN por PARP1 es un mecanismo eficaz para destruir selectivamente las células tumorales que presentan HRD. Por tanto, existe una necesidad médica no cubierta de inhibidores de PARP eficaces y seguros. En particular, inhibidores de PARP selectivos para PARP1.

RESUMEN DE LA INVENCIÓN

[0008] La presente invención se define en las reivindicaciones adjuntas.

[0009]En un primer aspecto, la presente invención proporciona un compuesto de Fórmula (Ip), o una sal, solvato, estereoisómero, o tautómero farmacéuticamente aceptable del mismo:

donde:

R1' es hidrógeno;

Z es CRZ;

RZ es hidrógeno, deuterio, halógeno, o alquiloC1-C6;

R2 es hidrógeno, deuterio, o alquiloC1-C6;

R3 es hidrógeno, deuterio, o alquiloC1-C6;

cada R4 es independientemente deuterio, alquilo C1-C6, haloalquilo C1-C6, deuteroalquilo C1-C6, hidroxialquilo C1-C6, aminoalquilo C1-C6, heteroalquilo C1-C6, alquenilo C2-C6, o alquinilo C2-C6; o dos R4 en el mismo carbono se unen para formar un oxo;

m es 0-2;

R5 es hidrógeno, halógeno, o alquilo C1-C6;

R6 es hidrógeno, halógeno, o alquilo C1-C6;

R7 es hidrógeno, halógeno, o alquilo C1-C6;

R8 es alquilo C1-C6 o cicloalquilo, donde el alquilo y el cicloalquilo están opcionalmente sustituidos con uno o más R; y

cada R es independientemente halógeno, -CN, -OH, -OCi-C3alquilo, -OCi-C3haloalquilo, -SC1-C3alquilo, -S(=O)Ci-C3alquilo, -S(=O)2Ci-C3alquilo, -S(=O)2NH2, -S(=O)2NHCi-C3alquilo, -S(=O)2N(Ci-C3alquilo)2, -NH2, -NHC1-C3alquilo, -N(C1-C3alquilo)2, -C(=O)C1-C3alquilo, -C(=O)OH, -C(=O)OC1-C3alquilo, -C(=O)NH2, -C(=O)NHCi-C3alquilo, -C(=O)N(Ci-C3alquilo)2, Ci-C3alquilo, Ci-C3haloalquilo, Ci-C3deuteroalquilo, Ci-C3hidroxialquilo, Ci-C3aminoalquilo, Ci-C3heteroalquilo, o C3-C6cicloalquilo; o dos R en el mismo átomo se unen para formar un oxo.

[0010]En un segundo aspecto, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto del primer aspecto, o una sal, solvato, estereoisómero, o tautómero farmacéuticamente aceptable del mismo, y un excipiente farmacéuticamente aceptable.0123

[0011]En un tercer aspecto, la presente invención proporciona un compuesto del primer aspecto, o una sal, solvato, estereoisómero, o tautómero farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en un método de tratamiento del cáncer en un sujeto que lo necesite. En algunas realizaciones, el cáncer comprende una mutación BRCA1 y/o BRCA2. En alguna realización, el cáncer comprende una mutación en un gen que confiere deficiencia de reparación homóloga. En algunas realizaciones, la mutación en un gen que confiere deficiencia de reparación homóloga comprende ATM, BRCA1, BRCA2, BARD1, BRIP1, CDK12, CHEK1, CHEK2, FANCL, PALB2, RAD51B, RAD51C, RAD51D, o RAD54L, o cualquier combinación de los mismos. En algunas realizaciones, el cáncer es cáncer de vejiga, cáncer cerebral y del CNS, cáncer de mama, cáncer de cuello uterino, cáncer colorrectal, cáncer de esófago, linfoma de Hodgkin, linfoma no Hodgkin, cáncer de riñón, leucemia, cáncer de pulmón, melanoma, mieloma, cáncer de cavidad oral, cáncer de ovario, cáncer de páncreas, cáncer de próstata, cáncer de piel, cáncer de estómago, cáncer de tiroides, o cáncer de útero. En algunas realizaciones, el cáncer es cáncer de mama, cáncer de ovario, cáncer de páncreas, cáncer de próstata, cáncer hematológico, cáncer gastrointestinal, o cáncer de pulmón. En algunas realizaciones, el cáncer es metastásico. En algunas realizaciones, el cáncer ha hecho metástasis en el cerebro.

[0012]En algunas realizaciones del tercer aspecto, el cáncer está presente en el cerebro.

[0013]En algunas realizaciones del tercer aspecto, el cáncer es cerebral.

DESCRIPCIÓN DETALLADA

Definiciones

[0014]En la siguiente descripción, se exponen ciertos detalles específicos con el fin de proporcionar una comprensión completa de varias realizaciones. Sin embargo, un experto en la materia entenderá que la invención puede practicarse sin estos detalles. En otros casos, no se han mostrado o descrito en detalle estructuras bien conocidas para evitar oscurecer innecesariamente las descripciones de las realizaciones. A menos que el contexto requiera lo contrario, a lo largo de la especificación y reivindicaciones que siguen, la palabra "comprende" y sus variaciones, tales como "comprende" y "que comprende" deben interpretarse en un sentido abierto e inclusivo, es decir, como "que incluye, pero no se limita a". Además, los encabezamientos que figuran en el presente documento se utilizan únicamente por comodidad y no interpretan el alcance o el significado de la invención reivindicada.

[0015]La referencia a lo largo de esta especificación a "algunas realizaciones" o "una realización" significa que un rasgo, estructura o característica particular descrita en relación con la realización está incluida en al menos una realización. Por lo tanto, la frase "en una realización" que aparece en varios lugares de esta especificación no se refiere necesariamente a la misma realización. Además, los rasgos, estructuras o características particulares pueden combinarse de cualquier manera adecuada en una o más realizaciones. Asimismo, tal como se utilizan en esta especificación y en las reivindicaciones anexas, las formas singulares singulares "un/una" y "el/la" incluyen referentes plurales a menos que el contenido dicte claramente lo contrario. También debe tenerse en cuenta que el término "o" se emplea generalmente en su sentido, incluido "y/o", a menos que el contenido dicte claramente lo contrario.

[0016]Los términos que figuran a continuación, tal como se utilizan en el presente documento, tienen los siguientes significados, a menos que se indique lo contrario:

"oxo" se refiere a =O.

"Carboxilo" se refiere a -COOH.

"Ciano" se refiere a -CN.

[0017]"Alquilo" se refiere a un hidrocarburo saturado monorradical de cadena recta o ramificada que tiene de uno a unos diez átomos de carbono, más preferentemente de uno a seis átomos de carbono. Los ejemplos incluyen, pero no se limitan a metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, 2-metil-1 -propilo, 2-metil-2-propilo, 2-metilo-1-butilo, 3-metilo-1 -butilo, 2-metilo-3-butilo, 2,2- dimetilo-1-propilo, 2-metilo-1-pentilo, 3-metilo-1-pentilo, 4-metilo-1-pentilo, 2-metilo-2-pentilo, 3-metilo-2-pentilo, 4-metilo-2-pentilo, 2,2-dimetilo-1-butilo, 3,3-dimetilo-1 -butilo, 2-etilo-1 -butilo, n-butilo, isobutilo, sec-butilo, t-butilo, n-pentilo, isopentilo, neopentilo, terc-amilo y hexilo, y grupos alquilo más largos, como heptilo, octilo y similares. Siempre que aparezca en el presente documento, un intervalo numérico como "alquilo C1-C6" o "alquilo C1-6", significa que el grupo alquilo puede estar formado por 1 átomo de carbono, 2 átomos de carbono, 3 átomos de carbono, 4 átomos de carbono, 5 átomos de carbono, o 6 átomos de carbono, aunque la presente definición también abarca la aparición del término "alquilo" cuando no se designa ningún intervalo numérico. En algunas realizaciones, el alquilo es un alquilo C1-10. En algunas realizaciones, el alquilo es un alquilo C1-6. En algunas realizaciones, el alquilo es un alquilo C1-5. En algunas realizaciones, el alquilo es un alquilo C1-4. En algunas realizaciones, el alquilo es un alquilo C1-3. A menos que se indique específicamente lo contrario en la especificación, un grupo alquilo puede estar opcionalmente sustituido, por ejemplo, con oxo, halógeno, amino, nitrilo, nitro, hidroxilo, haloalquilo, alcoxi, carboxilo, carboxilato, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, heteroarilo, y similares. En algunas realizaciones, el alquilo está opcionalmente sustituido con oxo, halógeno, -CN, -COOH, -COOMe, -Oh , -OMe, -NH2, o -NO2. En algunas realizaciones, el alquilo está opcionalmente sustituido con halógeno, -CN, -OH, u -OMe. En algunas realizaciones, el alquilo está opcionalmente sustituido con halógeno.

[0018]"Alquenilo" se refiere a un hidrocarburo monoradical de cadena recta o ramificada que tiene uno o más dobles enlaces carbono-carbono y tiene de dos a aproximadamente diez átomos de carbono, más preferentemente de dos a aproximadamente seis átomos de carbono. El grupo puede estar en conformacióncisotransrespecto al doble enlace o dobles enlaces, y debe entenderse que incluye ambos isómeros. Los ejemplos incluyen, pero no se limitan a etenilo (-CH=CH2), 1-propenilo (-CH2CH=CH2), isopropenilo [-C(CH3)=CH2], butenilo, 1,3-butadienilo y similares. Siempre que aparezca en el presente documento, un intervalo numérico como "alquenilo C2-C6" o "alquenilo C2-6", significa que el grupo alquenilo puede estar formado por 2 átomos de carbono, 3 átomos de carbono, 4 átomos de carbono, 5 átomos de carbono, o 6 átomos de carbono, aunque la presente definición también abarca la aparición del término "alquenilo" cuando no se designa ningún intervalo numérico. A menos que se indique específicamente lo contrario en la especificación, un grupo alquenilo puede estar opcionalmente sustituido, por ejemplo, con oxo, halógeno, amino, nitrilo, nitro, hidroxilo, haloalquilo, alcoxi, carboxilo, carboxilato, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, heteroarilo, y similares. En algunas realizaciones, el alquenilo está opcionalmente sustituido con oxo, halógeno, -CN, -COOH, -COOMe, -OH, -OMe, -NH2, o -NO2. En algunas realizaciones, el alquenilo está opcionalmente sustituido con halógeno, -CN, -OH, u -OMe. En algunas realizaciones, el alquenilo está opcionalmente sustituido con halógeno.

[0019]"Alquinilo" se refiere a un hidrocarburo monoradical de cadena recta o ramificada que tiene uno o más enlaces triples carbono-carbono y tiene de dos a aproximadamente diez átomos de carbono, más preferentemente de dos a aproximadamente seis átomos de carbono. Los ejemplos incluyen, pero no se limitan a, etinilo, 2-propinilo, 2-butinilo, 1,3-butadiinilo y similares. Siempre que aparezca aquí, un rango numérico como "alquinilo C2-C6" o "alquinilo C2-6", significa que el grupo alquinilo puede consistir en 2 átomos de carbono, 3 átomos de carbono, 4 átomos de carbono, 5 átomos de carbono, o 6 átomos de carbono, aunque la presente definición también cubre la aparición del término "alquinilo" donde no se designa ningún rango numérico. A menos que se indique específicamente lo contrario en la especificación, un grupo alquinilo puede estar opcionalmente sustituido, por ejemplo, con oxo, halógeno, amino, nitrilo, nitro, hidroxilo, haloalquilo, alcoxi, carboxilo, carboxilato, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, heteroarilo, y similares. En algunas realizaciones, el alquinilo está opcionalmente sustituido con oxo, halógeno, -CN, -COOH, COOMe, -OH, -OMe, -NH2, o -NO2. En algunas realizaciones, el alquinilo está opcionalmente sustituido con halógeno, -CN, - OH, u -OMe. En algunas realizaciones, el alquinilo está opcionalmente sustituido con halógeno.

[0020]"Alquileno" se refiere a una cadena hidrocarbonada divalente recta o ramificada. A menos que se indique específicamente lo contrario en la especificación, un grupo alquileno puede estar opcionalmente sustituido, por ejemplo, con oxo, halógeno, amino, nitrilo, nitro, hidroxilo, haloalquilo, alcoxi, carboxilo, carboxilato, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, heteroarilo, y similares. En algunas realizaciones, el alquileno está opcionalmente sustituido con oxo, halógeno, -CN, -COOH, COOMe, -OH, -OMe, -NH2, o -NO2. En algunas realizaciones, el alquileno está opcionalmente sustituido con halógeno, -CN, -OH, u -OMe. En algunas realizaciones, el alquileno está opcionalmente sustituido con halógeno.

[0021]"Alcoxi" se refiere a un radical de la fórmula -ORa donde Ra es un radical alquilo como se define. A menos que se indique específicamente lo contrario en la especificación, un grupo alcoxi puede estar opcionalmente sustituido, por ejemplo, con oxo, halógeno, amino, nitrilo, nitro, hidroxilo, haloalquilo, alcoxi, carboxilo, carboxilato, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, heteroarilo, y similares. En algunas realizaciones, el alcoxi está opcionalmente sustituido con halógeno, -CN, -COOH, COOMe, -OH, -OMe, -NH2, o -NO2. En algunas realizaciones, el alcoxi está opcionalmente sustituido con halógeno, -CN, -OH, u -OMe. En algunas realizaciones, el alcoxi está opcionalmente sustituido con halógeno.

[0022]"Arilo" se refiere a un radical derivado de un sistema de anillos de hidrocarburos que comprende de 6 a 30 átomos de carbono y al menos un anillo aromático. El radical arilo puede ser un sistema de anillo monocíclico, bicíclico, tricíclico, o tetracíclico, que puede incluir sistemas de anillo fusionado (cuando se fusiona con un anillo de cicloalquilo o heterocicloalquilo, el arilo se une a través de un átomo de anillo aromático) o puenteado. En algunas realizaciones, el arilo es un arilo de 6 a 10 miembros. En algunas realizaciones, el arilo es un arilo de 6 miembros (fenilo). Los radicales arilo incluyen, pero no se limitan a, radicales arilo derivados de los sistemas de anillos de hidrocarburos de antrileno, naftaleno, fenantrileno, antraceno, azuleno, benceno, criseno, fluoranteno, fluoreno, as-indaceno, s-indaceno, indano, indeno, naftaleno, fenaleno, fenantreno, pleiadeno, pireno, y trifenileno. A menos que se indique específicamente lo contrario en la especificación, un arilo puede estar opcionalmente sustituido, por ejemplo, con halógeno, amino, nitrilo, nitro, hidroxilo, alquilo, alquenilo, alquinilo, haloalquilo, alcoxi, carboxilo, carboxilato, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, heteroarilo, y similares. En algunas realizaciones, el arilo está opcionalmente sustituido con halógeno, metilo, etilo, -CN, -COOH, COOMe, -CF3, -OH, -OMe, -NH2, o -NO2. En algunas realizaciones, el arilo está opcionalmente sustituido con halógeno, metilo, etilo, -CN, -CF3, -OH, o -OMe. En algunas realizaciones, el arilo está opcionalmente sustituido con halógeno.

[0023]"Cicloalquilo" se refiere a un anillo carbocíclico parcial o totalmente saturado, monocíclico o policíclico, que puede incluir sistemas de anillos fusionados (cuando se fusiona con un anillo arilo o heteroarilo, el cicloalquilo se une a través de un átomo de anillo no aromático) o puenteados. En algunas realizaciones, el cicloalquilo está totalmente saturado. Los cicloalquilos representativos incluyen, pero no se limitan a, cicloalquilos que tienen de tres a quince átomos de carbono (cicloalquilo C3-C15 o cicloalquenilo C3-C15), de tres a diez átomos de carbono (cicloalquilo C3-C10 o cicloalquenilo C3-C10), de tres a ocho átomos de carbono (cicloalquilo C3-C8 o cicloalquenilo C3-C8), de tres a seis átomos de carbono (cicloalquilo C3-C6 o cicloalquenilo C3-C6), de tres a cinco átomos de carbono (cicloalquilo C3-C5 o cicloalquenilo C3-C5), o de tres a cuatro átomos de carbono (cicloalquilo C3-C4 o cicloalquenilo C3-C4). En algunas realizaciones, el cicloalquilo es un cicloalquilo de 3 a 10 miembros o un cicloalquenilo de 3 a 10 miembros. En algunas realizaciones, el cicloalquilo es un cicloalquilo de 3 a 6 miembros o un cicloalquenilo de 3 a 6 miembros. En algunas realizaciones, el cicloalquilo es un cicloalquilo de 5 a 6 miembros o un cicloalquenilo de 5 a 6 miembros. Los cicloalquilos monocíclicos incluyen, por ejemplo, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo, y ciclooctilo. Los cicloalquilos policíclicos incluyen, por ejemplo, adamantilo, norbornilo, decalinilo, biciclo[3.3.0]octano, biciclo[4.3.0]nonano, cis-decalina, trans-decalina, biciclo[2.1.1]hexano, biciclo[2.2.1]heptano, biciclo[2.2.2]octano, biciclo[3.2.2]nonano, y biciclo[3.3.2]decano, y 7,7-dimetilo-biciclo[2.2.1]heptanilo. Los cicloalquilos parcialmente saturados incluyen, por ejemplo, el ciclopentenilo, el ciclohexenilo, el cicloheptenilo, y el ciclooctenilo. A menos que se indique específicamente lo contrario en la especificación, un cicloalquilo está opcionalmente sustituido, por ejemplo, con oxo, halógeno, amino, nitrilo, nitro, hidroxilo, alquilo, alquenilo, alquinilo, haloalquilo, alcoxi, carboxilo, carboxilato, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, heteroarilo, y similares. En algunas realizaciones, un cicloalquilo está opcionalmente sustituido con oxo, halógeno, metilo, etilo, -CN, -COOH, COOMe, -CF3, -OH, -OMe, -NH2, o -NO2. En algunas realizaciones, un cicloalquilo está opcionalmente sustituido con oxo, halógeno, metilo, etilo, -CN, -CF3, -OH, o -OMe. En algunas realizaciones, el cicloalquilo está opcionalmente sustituido con halógeno.

[0024]"Halo" o "halógeno" se refiere a bromo, cloro, fluoro o yodo. En algunas realizaciones, el halógeno es fluoro o cloro. En algunas realizaciones, el halógeno es fluoro.

[0025]"Haloalquilo" se refiere a un radical alquilo, como se ha definido anteriormente, que está sustituido por uno o más radicales halo, como se ha definido anteriormente, por ejemplo, trifluorometilo, difluorometilo, fluorometilo, triclorometilo, 2,2,2-trifluoroetilo, 1,2-difluoroetilo, 3-bromo-2-fluoropropilo, 1,2-dibromoetilo, y similares.

[0026]"Hidroxialquilo" se refiere a un radical alquilo, como se ha definido anteriormente, que está sustituido por uno o más hidroxilos. En algunas realizaciones, el alquilo está sustituido con un hidroxilo. En algunas realizaciones, el alquilo está sustituido con uno, dos, o tres hidroxilos. Los hidroxialquilos incluyen, por ejemplo, hidroximetilo, hidroxietilo, hidroxipropilo, hidroxibutilo, o hidroxipentilo. En algunas realizaciones, el hidroxialquilo es hidroximetilo.

[0027]"Aminoalquilo" se refiere a un radical alquilo, como se ha definido anteriormente, que está sustituido por una o más aminas. En algunas realizaciones, el alquilo está sustituido con una amina. En algunas realizaciones, el alquilo está sustituido con una, dos, o tres aminas. Los aminoalquilos incluyen, por ejemplo, aminometilo, aminoetilo, aminopropilo, aminobutilo, o aminopentilo. En algunas realizaciones, el aminoalquilo es aminometilo.

[0028]"Deuteroalquilo" se refiere a un radical alquilo, como se ha definido anteriormente, que está sustituido por uno o más deuterios. En algunas realizaciones, el alquilo está sustituido con un deuterio. En algunas realizaciones, el alquilo está sustituido con uno, dos, o tres deuterios. En algunas realizaciones, el alquilo está sustituido con uno, dos, tres, cuatro, cinco, o seis deuterios. Los deuteroalquilos incluyen, por ejemplo, CD3, CH2D, CHD2, CH2CD3, CD2CD3, CHDCD3, CH2CH2D, o CH2CHD2. En algunas realizaciones, el deuteroalquilo es CD3.

[0029]"Heteroalquilo" se refiere a un grupo alquilo en el que uno o más átomos esqueléticos del alquilo se seleccionan de un átomo distinto del carbono, por ejemplo, oxígeno, nitrógeno (por ejemplo, -NH-, -N(alquilo)-), azufre, fósforo, o combinaciones de los mismos. Un heteroalquilo se une al resto de la molécula en un átomo de carbono del heteroalquilo. En un aspecto, un heteroalquilo es un heteroalquilo C1-C6 donde el heteroalquilo está compuesto de 1 a 6 átomos de carbono y uno o más átomos distintos del carbono, por ejemplo, oxígeno, nitrógeno (por ejemplo, -NH-, -N(alquilo)-), azufre, fósforo, o combinaciones de los mismos en los que el heteroalquilo está unido al resto de la molécula en un átomo de carbono del heteroalquilo. Ejemplos de dichos heteroalquilos son, por ejemplo, -CH2OCH3, -CH2CH2OCH3, -CH2CH2OCH2CH2OCH3, -CH(CH3)OCH3, -CH2NHCH3, -CH2N(CH3)2, -CH2CH2NHCH3, o -CH2CH2N(CH3)2. A menos que se indique específicamente lo contrario en la especificación, un heteroalquilo está opcionalmente sustituido, por ejemplo, con oxo, halógeno, amino, nitrilo, nitro, hidroxilo, alquilo, alquenilo, alquinilo, haloalquilo, alcoxi, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, heteroarilo, y similares. En algunas realizaciones, un heteroalquilo está opcionalmente sustituido con oxo, halógeno, metilo, etilo, -CN, -CF3, -OH, -OMe, -NH2, o -NO2. En algunas realizaciones, un heteroalquilo está opcionalmente sustituido con oxo, halógeno, metilo, etilo, -CN, -CF3, -OH, o -OMe. En algunas realizaciones, el heteroalquilo está opcionalmente sustituido con halógeno.

[0030]"Heterocicloalquilo" se refiere a un radical en anillo parcial o totalmente saturado de 3 a 24 miembros que comprende de 2 a 23 átomos de carbono y de uno a 8 heteroátomos seleccionados del grupo que consiste en nitrógeno, oxígeno, fósforo y azufre. En algunas realizaciones, el heterocicloalquilo está totalmente saturado. En algunas realizaciones, el heterocicloalquilo comprende de uno a tres heteroátomos seleccionados del grupo que consiste en nitrógeno, oxígeno, y azufre. En algunas realizaciones, el heterocicloalquilo comprende de uno a tres heteroátomos seleccionados del grupo que consiste en nitrógeno y oxígeno. En algunas realizaciones, el heterocicloalquilo comprende de uno a tres nitrógenos. En algunas realizaciones, el heterocicloalquilo comprende uno o dos nitrógenos. En algunas realizaciones, el heterocicloalquilo comprende un nitrógeno. En algunas realizaciones, el heterocicloalquilo comprende un nitrógeno y un oxígeno. A menos que se indique específicamente lo contrario en la especificación, el radical heterocicloalquilo puede ser un sistema de anillo monocíclico, bicíclico, tricíclico, o tetracíclico, que puede incluir sistemas de anillo fusionado (cuando se fusiona con un anillo arilo o heteroarilo, el heterocicloalquilo se une a través de un átomo de anillo no aromático) o puenteado; y los átomos de nitrógeno, carbono, o azufre del radical heterocicloalquilo pueden estar opcionalmente oxidados; el átomo de nitrógeno puede estar opcionalmente cuaternizado. Los heterocicloalquilos representativos incluyen, pero no se limitan a, heterocicloalquilos que tienen de dos a quince átomos de carbono (heterocicloalquilo C2-C15 o heterocicloalquenilo C2-C15), de dos a diez átomos de carbono (heterocicloalquilo C2-C10 o heterocicloalquenilo C2-C10), de dos a ocho átomos de carbono (heterocicloalquilo C2-C8 o heterocicloalquenilo C2-C8), de dos a siete átomos de carbono (heterocicloalquilo C2-C7 o heterocicloalquenilo C2-C7), de dos a seis átomos de carbono (heterocicloalquilo C2-C6 o heterocicloalquenilo C2-C6), de dos a cinco átomos de carbono (heterocicloalquilo C2-C5 o heterocicloalquenilo C2-C5), o de dos a cuatro átomos de carbono (heterocicloalquilo C2-C4 o heterocicloalquenilo C2-C4). Ejemplos de tales radicales heterocicloalquilo incluyen, pero no se limitan a, aziridinilo, azetidinilo, oxetanilo, dioxolanilo, tienilo[1,3]ditianilo, decahidroisoquinolilo, imidazolinilo, imidazolidinilo, isotiazolidinilo, isoxazolidinilo, morfolinilo, octahidroindolilo, octahidroisoindolilo, 2-oxopiperazinilo, 2-oxopiperidinilo, 2-oxopirrolidinilo, oxazolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, 4-piperidonilo, pirrolidinilo, pirazolidinilo, quinuclidinilo, tiazolidinilo, tetrahidrofurilo, tritianilo, tetrahidropiranilo, tiomorfolinilo, tiamorfolinilo, 1-oxo-tiomorfolinilo, 1,1-dioxo-tiomorfolinilo, 1,3-dihidroisobenzofurano-1-ilo, 3-oxo-1,3-dihidroisobenzofurano-1-ilo, metilo-2-oxo-1,3-dioxol-4-ilo, y 2-oxo-1,3-dioxol-4-ilo. El término heterocicloalquilo también incluye todas las formas de anillo de los hidratos de carbono, incluidos, entre otros, los monosacáridos, los disacáridos, y los oligosacáridos. Salvo que se indique lo contrario, los heterocicloalquilos tienen de 2 a 10 carbonos en el anillo. Se entiende que cuando se hace referencia al número de átomos de carbono de un heterocicloalquilo, el número de átomos de carbono del heterocicloalquilo no es el mismo que el número total de átomos (incluidos los heteroátomos) que componen el heterocicloalquilo (es decir, los átomos esqueléticos del anillo de heterocicloalquilo). En algunas realizaciones, el heterocicloalquilo es un heterocicloalquilo de 3 a 8 miembros. En algunas realizaciones, el heterocicloalquilo es un heterocicloalquilo de 3 a 7 miembros. En algunas realizaciones, el heterocicloalquilo es un heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros. En algunas realizaciones, el heterocicloalquilo es un heterocicloalquilo de 4 a 6 miembros. En algunas realizaciones, el heterocicloalquilo es un heterocicloalquilo de 5 a 6 miembros. En algunas realizaciones, el heterocicloalquilo es un heterocicloalquenilo de 3 a 8 miembros. En algunas realizaciones, el heterocicloalquilo es un heterocicloalquenilo de 3 a 7 miembros. En algunas realizaciones, el heterocicloalquilo es un heterocicloalquenilo de 3 a 6 miembros. En algunas realizaciones, el heterocicloalquilo es un heterocicloalquenilo de 4 a 6 miembros. En algunas realizaciones, el heterocicloalquilo es un heterocicloalquenilo de 5 a 6 miembros. A menos que se indique específicamente lo contrario en la especificación, un heterocicloalquilo puede estar opcionalmente sustituido como se describe a continuación, por ejemplo, con oxo, halógeno, amino, nitrilo, nitro, hidroxilo, alquilo, alquenilo, alquinilo, haloalquilo, alcoxi, carboxilo, carboxilato, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, heteroarilo, y similares. En algunas realizaciones, el heterocicloalquilo está opcionalmente sustituido con oxo, halógeno, metilo, etilo, -CN, -COOH, COOMe, -CF3, -OH, -OMe, -NH2, o -NO2. En algunas realizaciones, el heterocicloalquilo está opcionalmente sustituido con halógeno, metilo, etilo, -CN, -CF3, -OH, o -OMe. En algunas realizaciones, el heterocicloalquilo está opcionalmente sustituido con halógeno.

[0031] "Heteroarilo" se refiere a un radical de sistema de anillo de 5 a 14 miembros que comprende de uno a trece átomos de carbono, de uno a seis heteroátomos seleccionados del grupo que consiste en nitrógeno, oxígeno, fósforo, y azufre, y al menos un anillo aromático. En algunas realizaciones, el heteroarilo comprende de uno a tres heteroátomos seleccionados del grupo que consiste en nitrógeno, oxígeno, y azufre. En algunas realizaciones, el heteroarilo comprende de uno a tres heteroátomos seleccionados del grupo que consiste en nitrógeno y oxígeno. En algunas realizaciones, el heteroarilo comprende de uno a tres nitrógenos. En algunas realizaciones, el heteroarilo comprende uno o dos nitrógenos. En algunas realizaciones, el heteroarilo comprende un nitrógeno. El radical heteroarilo puede ser un sistema de anillo monocíclico, bicíclico, tricíclico, o tetracíclico, que puede incluir sistemas de anillo fusionado (cuando se fusiona con un anillo de cicloalquilo, o heterocicloalquilo, el heteroarilo se une a través de un átomo de anillo aromático) o puenteado; y los átomos de nitrógeno, carbono, o azufre del radical heteroarilo pueden estar opcionalmente oxidados; el átomo de nitrógeno puede estar opcionalmente cuaternizado. En algunas realizaciones, el heteroarilo es un heteroarilo de 5 a 10 miembros. En algunas realizaciones, el heteroarilo es un heteroarilo de 5 a 6 miembros. En algunas realizaciones, el heteroarilo es un heteroarilo de 6 miembros. En algunas realizaciones, el heteroarilo es un heteroarilo de 5 miembros. Los ejemplos incluyen, pero no se limitan a, azepinilo, acridinilo, bencimidazolilo, benzotiazolilo, benzindolilo, benzodioxolilo, benzofuranoilo, benzooxazolilo, benzotiazolilo, benzotiadiazolilo, benzo[b][1,4]dioxepinilo, 1,4-benzodioxanilo, benzonaftofuranoilo, benzoxazolilo, benzodioxinilo, benzopiranilo, benzopiranonilo, benzofuranoilo, benzofuranoonilo, benzotienilo (benzotiofenilo), benzotriazolilo, benzo[4,6]imidazo[1,2-a]piridinilo, carbazolilo, cinolinilo, dibenzofuranoilo, dibenzotiofenilo, furanilo, furanonilo, isotiazolilo, imidazolilo, indazolilo, indolilo, isoindolilo, indolinilo, isoindolinilo, isoquinolilo, indolizinilo, isoxazolilo, naftiridinilo, oxadiazolilo, 2-oxoazepinilo, oxazolilo, oxiranilo, 1 -oxidopiridinilo, 1-oxidopirimidinilo, 1 -oxidopirazinilo, 1 -oxidopiridazinilo, 1-fenilo-1H-pirrolilo, fenazinilo, fenotiazinilo, fenoxazinilo, ftalazinilo, pteridinilo, purinilo, pirrolilo, pirazolilo, piridinilo, pirazinilo, pirimidinilo, piridazinilo, quinazolinilo, quinoxalinilo, quinolinilo, quinuclidinilo, isoquinolinilo, tetrahidroquinolinilo, tiazolilo, tiadiazolilo, triazolilo, tetrazolilo, triazinilo, y tiofenilo (es decir, tienilo). A menos que se indique específicamente lo contrario en la especificación, un heteroarilo puede estar opcionalmente sustituido, por ejemplo, con halógeno, amino, nitrilo, nitro, hidroxilo, alquilo, alquenilo, alquinilo, haloalquilo, alcoxi, carboxilo, carboxilato, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, heteroarilo, y similares. En algunas realizaciones, el heteroarilo está opcionalmente sustituido con halógeno, metilo, etilo, -CN, -COOh , COOMe, -CF3, -OH, -OMe, -NH2, o -NO2. En algunas realizaciones, el heteroarilo está opcionalmente sustituido con halógeno, metilo, etilo, -CN, -CF3, -OH, o -OMe. En algunas realizaciones, el heteroarilo está opcionalmente sustituido con halógeno.

[0032] Los términos "opcional" u "opcionalmente" significan que el suceso o circunstancia descrito posteriormente puede ocurrir o no y que la descripción incluye casos en los que dicho suceso o circunstancia ocurre y casos en los que no. Por ejemplo, "alquilo opcionalmente sustituido" significa "alquilo" o "alquilo sustituido" como se ha definido anteriormente. Además, un grupo opcionalmente sustituido puede ser no sustituido (por ejemplo, -CH2CH3), totalmente sustituido (por ejemplo, -CF2CF3), monosustituido (por ejemplo, -CH2CH2F) o sustituido a un nivel intermedio entre totalmente sustituido y monosustituido (por ejemplo, -CH2CHF2, -CH2CF3, -CF2CH3, -CFHCHF2, etc.). Se entenderá por los expertos en la técnica con respecto a cualquier grupo que contenga uno o más sustituyentes que tales grupos no pretenden introducir ninguna sustitución o patrones de sustitución (por ejemplo, alquilo sustituido incluye grupos cicloalquilo opcionalmente sustituidos, que a su vez se definen como incluyendo grupos alquilo opcionalmente sustituidos, potencialmente ad infinitum) que sean estéricamente impracticables y/o sintéticamente inviables. Por lo tanto, cualquier sustituyente descrito debe entenderse generalmente como teniendo un peso molecular máximo de alrededor de 1.000 daltons, y más típicamente, hasta alrededor de 500 daltons.

[0033] El término "uno o más" cuando se refiere a un sustituyente opcional significa que el grupo sujeto está opcionalmente sustituido con uno, dos, tres, cuatro, o más sustituyentes. En algunas realizaciones, el grupo sujeto está opcionalmente sustituido con uno, dos, tres, o cuatro sustituyentes. En algunas realizaciones, el grupo sujeto está opcionalmente sustituido con uno, dos, o tres sustituyentes. En algunas realizaciones, el grupo sujeto está opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes. En algunas realizaciones, el grupo sujeto está opcionalmente sustituido con un sustituyente. En algunas realizaciones, el grupo sujeto está opcionalmente sustituido con dos sustituyentes.

[0034] Una "cantidad eficaz" o "cantidad terapéuticamente eficaz" se refiere a una cantidad de un compuesto administrada a un sujeto mamífero, ya sea como dosis única o como parte de una serie de dosis, que es eficaz para producir un efecto terapéutico deseado.

[0035] "Tratamiento" de un individuo (por ejemplo, un mamífero, como un humano) o de una célula es cualquier tipo de intervención utilizada en un intento de alterar el curso natural del individuo o de la célula. En algunas realizaciones, el tratamiento incluye la administración de una composición farmacéutica, posterior al inicio de un evento patológico o al contacto con un agente etiológico e incluye la estabilización de la afección (por ejemplo, la afección no empeora) o el alivio de la afección.

[0036] "Sinergia" o "sinergizar" se refiere a un efecto de una combinación que es mayor que el aditivo de los efectos de cada componente solo a las mismas dosis.

[0037] Como se usa aquí, una "enfermedad o trastorno asociado con PARP" o, alternativamente, "una enfermedad o trastorno mediado por PARP" significa cualquier enfermedad u otra condición deletérea en la que PARP, o un mutante de la misma, se sabe o se sospecha que juega un papel.

[0038] Como se usa aquí, una "enfermedad o trastorno asociado con PARP1" o, alternativamente, "una enfermedad o trastorno mediado por PARP1" significa cualquier enfermedad u otra condición deletérea en la que PARP1, o un mutante de la misma, se sabe o se sospecha que juega un papel.

Compuestos

[0039] Aquí se describen compuestos, o una sal farmacéuticamente aceptable, solvato, o estereoisómero de los mismos, útiles en el tratamiento del cáncer.

[0040] Se describe en el presente documento (pero no según la invención) un compuesto de Fórmula (I), o una sal, solvato, o estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo:

donde:

El anillo A tomado con X e Y es un heterocicloalquilo de 5 miembros o un heteroarilo de 5 miembros; X es C, CH, o N;

Y es C, CH, o N;

cada R1 es independientemente deuterio, halógeno, alquilo C1-C6, haloalquilo C1-C6, deuteroalquilo C1-Ca, hidroxialquilo C1-C6, aminoalquilo C1-C6, heteroalquilo C1-C6, cicloalquilo, o heterocicloalquilo; donde el alquilo, cicloalquilo, y heterocicloalquilo está opcionalmente sustituido con uno o más R;

o dos R1 en el mismo carbono se unen para formar un oxo;

n es 0-6;

Z es N o CRZ;

RZ es hidrógeno, deuterio, halógeno, alquilo C1-Ca, haloalquilo C1-Ca, deuteroalquilo C1-Ca, hidroxialquilo C1-Ca, aminoalquilo C1-Ca, heteroalquilo C1-Ca, cicloalquilo, o heterocicloalquilo; donde el alquilo, cicloalquilo, y heterocicloalquilo está opcionalmente sustituido con uno o más R;

R2 es hidrógeno, deuterio, halógeno, alquilo C1-Ca, haloalquilo C1-Ca, deuteroalquilo C1-Ca, hidroxialquilo C1-Ca, aminoalquilo C1-Ca, heteroalquilo C1-Ca, cicloalquilo, o heterocicloalquilo; donde el alquilo, cicloalquilo, y heterocicloalquilo está opcionalmente sustituido con uno o más R;

R3 es hidrógeno, deuterio, halógeno, alquilo C1-Ca, haloalquilo C1-Ca, deuteroalquilo C1-Ca, hidroxialquilo C1-Ca, aminoalquilo C1-Ca, heteroalquilo C1-Ca, cicloalquilo, o heterocicloalquilo; donde el alquilo, cicloalquilo, y heterocicloalquilo está opcionalmente sustituido con uno o más R;

o R2 y R3 se toman juntos para formar un cicloalquilo o un heterocicloalquilo; cada uno opcionalmente sustituido con uno o más R;

cada R4 es independientemente deuterio, alquilo C1-Ca, haloalquilo C1-Ca, deuteroalquilo C1-Ca, hidroxialquilo C1-Ca, aminoalquilo C1-Ca, heteroalquilo C1-Ca, alquenilo C2-Ca, o alquinilo C2-Ca; o dos R4 en el mismo carbono se unen para formar un oxo;

o dos R4 en el mismo carbono o diferentes carbonos se toman juntos para formar un cicloalquilo o heterocicloalquilo; cada uno opcionalmente sustituido con uno o más R;

m es 0-4;

R5 es hidrógeno, deuterio, halógeno, -CN, -OH, -ORa, -NRcRd, alquilo C1-Ca, haloalquilo C1-Ca, deuteroalquilo C1-Ca, hidroxialquilo C1-Ca, aminoalquilo C1-Ca, heteroalquilo C1-Ca, alquenilo C2-Ca, alquinilo C2-C6, cicloalquilo, o heterocicloalquilo; donde el alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, y heterocicloalquilo está opcionalmente sustituido con uno o más R;

R6 es hidrógeno, deuterio, halógeno, -CN, -OH, -ORa, -NRcRd, alquilo C1-C6, haloalquilo C1-C6, deuteroalquilo C1-C6, hidroxialquilo C1-C6, aminoalquilo C1-C6, heteroalquilo C1-C6, alquenil alquinilo C2-C6, cicloalquilo, o heterocicloalquilo; donde el alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, y heterocicloalquilo está opcionalmente sustituido con uno o más R;

R7 es hidrógeno, deuterio, halógeno, -CN, -OH, -ORa, -NRcRd, alquilo C1-C6, haloalquilo C1-C6, deuteroalquilo C1-C6, hidroxialquilo C1-C6, aminoalquilo C1-C6, heteroalquilo C1-C6, alquenil alquinilo C2-C6, cicloalquilo, o heterocicloalquilo; donde el alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, y heterocicloalquilo está opcionalmente sustituido con uno o más R;

R8 es hidrógeno, alquilo C1-C6, haloalquilo C1-C6, deuteroalquilo C1-C6, hidroxialquilo C1-C6, aminoalquilo C1-C6, heteroalquilo C1-C6, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, cicloalquilo, o heterocicloalquilo; en el que el alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, y heterocicloalquilo está opcionalmente sustituido con uno o más R;

cada Ra es independientemente alquilo C1-C6, haloalquilo C1-C6, deuteroalquilo C1-C6, hidroxialquilo C1-C6, aminoalquilo C1-C6, heteroalquilo C1-C6, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, cicloalquilo, o heterocicloalquilo; donde cada alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, y heterocicloalquilo está independientemente sustituido de forma opcional con uno o más R;

cada Rcy Rd son independientemente hidrógeno, alquilo C1-C6, haloalquilo C1-C6, deuteroalquilo C1-C6, hidroxialquilo C1-C6, aminoalquilo C1-C6, heteroalquilo C1-C6, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, cicloalquilo, o heterocicloalquilo; en donde cada alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, y heterocicloalquilo está independientemente sustituido de forma opcional con uno o más R;

o Rc y Rd se toman junto con el átomo al que están unidos para formar un heterocicloalquilo opcionalmente sustituido con uno o más R; y

cada R es independientemente halógeno, -CN, -OH, -OC1-C3alquilo, -OC1-C3haloalquilo, -SC1-C3alquilo, -S(=O)C1-C3alquilo, -S(=O)2C1-C3alquilo, -S(=O)2NH2, -S(=O)2NHC1-C3alquilo, -S(=O)2N(Cr C3alquilo)2, -NH2, -NHC1-C3alquilo, -N(C1-C3alquilo)2, -C(=O)C1-C3alquilo, -C(=O)OH, -C(=O)OC1-C3alquilo, -C(=O)NH2, -C(=O)NHC1-C3alquilo, -C(=O)N(C1-C3alquilo)2, C1-C3alquilo, C1-C3haloalquilo,

C1-C3deuteroalquilo, C1-C3hidroxialquilo, C1-C3aminoalquilo, C1-C3heteroalquilo, o C3-C6cicloalquilo; o dos R en el mismo átomo se unen para formar un oxo.

[0041]Por ejemplo, un compuesto de Fórmula (I) es el compuesto de Fórmula (la):

donde R1' es hidrógeno o R1.

[0042]Por ejemplo, un compuesto de Fórmula (I) es el compuesto de Fórmula (Ib):

donde R1' es hidrógeno o R1.

[0043]Por ejemplo, un compuesto de Fórmula (I) es el compuesto de Fórmula (Ic):

donde R1' es hidrógeno o R1.

[0044]Por ejemplo, un compuesto de Fórmula (I) es el compuesto de Fórmula (Id):

donde R1 es hidrógeno o R1.

[0045]Por ejemplo, un compuesto de Fórmula (I) es el compuesto de Fórmula (Ie):

donde R1' es hidrógeno o R1.

[0046]Por ejemplo, un compuesto de Fórmula (I) es el compuesto de Fórmula (If):

donde R1' es hidrógeno o R1.

[0047]Por ejemplo, un compuesto de Fórmula (I) es el compuesto de Fórmula (Ig):

donde R1' es hidrógeno o R1.

[0048]Por ejemplo, un compuesto de Fórmula (I) es el compuesto de Fórmula (Ih):

donde R1' es hidrógeno o R1.

[0049]Por ejemplo, un compuesto de Fórmula (I) es el compuesto de Fórmula (Ii):

donde R1' es hidrógeno o R1.

[0050]Por ejemplo, un compuesto de Fórmula (I) es el compuesto de Fórmula (Ij):

donde R1' es hidrógeno o R1.

[0051]Por ejemplo, un compuesto de Fórmula (I) es el compuesto de Fórmula (Ik):

donde R1' es hidrógeno o R1.

[0052]Por ejemplo, un compuesto de Fórmula (I) es el compuesto de Fórmula (Il):

donde R1' es hidrógeno o R1.

[0053]Por ejemplo, un compuesto de Fórmula (I) es el compuesto de Fórmula (Im):

donde R1' es hidrógeno o R1.

[0054]Por ejemplo, un compuesto de Fórmula (I) es el compuesto de Fórmula (In):

donde R1' es hidrógeno o R1.

[0055]Por ejemplo, un compuesto de Fórmula (I) es el compuesto de Fórmula (Io):

donde R1' es hidrógeno o R1.

[0056]Por ejemplo, un compuesto de Fórmula (I) es el compuesto de Fórmula (Ip):

donde R1' es hidrógeno o R1.

[0057]Por ejemplo, un compuesto de Fórmula (I) es el compuesto de Fórmula (Iq):

donde R1' es hidrógeno o R1.

[0058]Por ejemplo, un compuesto de Fórmula (I) es el compuesto de Fórmula (Ir):

donde R1' es hidrógeno o R1.

[0059]Sólo los compuestos de Fórmula (Ip) son conformes a la invención.

[0060]Un compuesto del primer aspecto de la presente invención es un compuesto de Fórmula (Ip), o una sal, solvato, estereoisómero, o tautómero farmacéuticamente aceptable del mismo:

donde R1' es hidrógeno.

[0061]En un compuesto de Fórmula (Ip) Z es CRZ

[0062]En un compuesto de Fórmula (Ip), RZ es hidrógeno, deuterio, halógeno, o alquilo C1-C6. En algunas realizaciones de un compuesto de Fórmula (Ip), RZ es hidrógeno. En algunas realizaciones de un compuesto de Fórmula (Ip), RZ es halógeno. En algunas realizaciones de un compuesto de Fórmula (Ip), RZ es alquilo C1-C6.

[0063]En un compuesto de Fórmula (Ip), R2 es hidrógeno, deuterio, o alquilo C1-C6. En algunas realizaciones de un compuesto de Fórmula (Ip), R2 es hidrógeno o deuterio. En algunas realizaciones de un compuesto de Fórmula (Ip), R2 es deuterio o alquilo C1-C6. En algunas realizaciones de un compuesto de Fórmula (Ip), R2 es hidrógeno o alquilo C1-C6. En algunas realizaciones de un compuesto de Fórmula (Ip), R2 es hidrógeno. En algunas realizaciones de un compuesto de Fórmula (Ip), R2 es deuterio. En algunas realizaciones de un compuesto de Fórmula (Ip), R2 es alquilo C1-C6.

[0064]En un compuesto de Fórmula (Ip), R3 es hidrógeno, deuterio, o alquilo C1-C6. En algunas realizaciones de un compuesto de Fórmula (Ip), R3 es hidrógeno o deuterio. En algunas realizaciones de un compuesto de Fórmula (Ip), R3 es deuterio o alquilo C1-C6. En algunas realizaciones de un compuesto de Fórmula (Ip), R3 es hidrógeno o alquilo C1-C6. En algunas realizaciones de un compuesto de Fórmula (Ip), R3 es hidrógeno. En algunas realizaciones de un compuesto de Fórmula (Ip), R3 es deuterio. En algunas realizaciones de un compuesto de Fórmula (Ip), R3 es alquilo C1-C6.

[0065]En algunas realizaciones de un compuesto de Fórmula (Ip), R2 es hidrógeno y R3 es hidrógeno.

[0066]En algunas realizaciones de un compuesto de Fórmula (Ip), cada R4 es independientemente deuterio, alquilo C1-Ca, o haloalquilo C1-C6. En algunas realizaciones de un compuesto de Fórmula (Ip), cada R4 es independientemente alquilo Ci-Ca.

[0067]En un compuesto de Fórmula (Ip), m es 0-2. En algunas realizaciones de un compuesto de Fórmula (Ip), m es 0 o 1. En algunas realizaciones de un compuesto de Fórmula (Ip), m es 0. En algunas realizaciones de un compuesto de Fórmula (Ip), m es 1. En algunas realizaciones de un compuesto de Fórmula (Ip), m es 2.

[0068]En un compuesto de Fórmula (Ip), R5 es hidrógeno, halógeno, o alquilo C1-Ca.

[0069]En algunas realizaciones de un compuesto de Fórmula (Ip), R5 es hidrógeno. En algunas realizaciones de un compuesto de Fórmula (Ip), R5 es halógeno.

[0070]En un compuesto de Fórmula (Ip), Ra es hidrógeno, halógeno o alquilo C1-Ca. En algunas realizaciones de un compuesto de Fórmula (Ip), Ra es hidrógeno. En algunas realizaciones de un compuesto de Fórmula (Ip), Ra es halógeno.

[0071]En un compuesto de Fórmula (Ip), R7 es hidrógeno, halógeno o alquilo C1-Ca. En algunas realizaciones de un compuesto de Fórmula (Ip), R7 es hidrógeno. En algunas realizaciones de un compuesto de Fórmula (Ip), R7 es halógeno.

[0072]En un compuesto de Fórmula (Ip), R8 es alquilo C1-Ca o cicloalquilo, donde el alquilo y cicloalquilo está opcionalmente sustituido con uno o más R. En algunas realizaciones de un compuesto de Fórmula (Ip), R8 es alquilo C1-Ca o cicloalquilo. En algunas realizaciones de un compuesto de Fórmula (Ip), R8 es alquilo C1-Ca. En algunas realizaciones de un compuesto de Fórmula (Ip), R8 es metilo. En algunas realizaciones de un compuesto de Fórmula (Ip), R8 es cicloalquilo. En algunas realizaciones de un compuesto de Fórmula (Ip), R8 es ciclopropilo.

[0073]En algunas realizaciones de un compuesto divulgado en el presente documento, p. ej, un compuesto de Fórmula (Ip), cada R es independientemente halógeno, -CN, -OH, -OC1-C3alquilo, -OC1-C3haloalquilo, -NH2, -NHC1-C3alquilo, -N(C1-C3alquilo)2, -C(=O)C1-C3alquilo, -C(=O)OH, -C(=O)OCr C3alquilo, -C(=O)NH2, -C(=O)NHC1-C3alquilo, -C(=O)N(C1-C3alquilo)2, C1-C3alquilo, C1-C3haloalquilo, C1-C3deuteroalquilo, C1-C3hidroxialquilo, C1-C3aminoalquilo, C1-C3heteroalquilo, o C3-Cacicloalquilo; o dos R en el mismo átomo se unen para formar un oxo. En algunas realizaciones de un compuesto divulgado aquí, cada R es independientemente halógeno, -CN, -OH, alquilo -OC1-C3, haloalquilo -OC1-C3, -NH2, alquilo C1-C3, haloalquilo C1-C3, deuteroalquilo C1-C3, hidroxialquilo C1-C3, aminoalquilo C1-C3, heteroalquilo C1-C3, o cicloalquilo C3-Ca; o dos R en el mismo átomo se toman juntos para formar un oxo. En algunas realizaciones de un compuesto divulgado aquí, cada R es independientemente halógeno, -CN, -OH, alquilo -OC1-C3, -NH2, alquilo C1-C3, o haloalquilo C1-C3; o dos R en el mismo átomo se toman juntos para formar un oxo. En algunas realizaciones de un compuesto divulgado en el presente documento, cada R es independientemente halógeno, -CN, -OH, alquilo -OC1-C3, -NH2, alquilo C1-C3; o dos R en el mismo átomo se toman juntos para formar un oxo. En algunas realizaciones de un compuesto divulgado en el presente documento, cada R es independientemente halógeno o alquilo C1-C3.

[0074]En el presente documento se contempla cualquier combinación de los grupos descritos anteriormente para las distintas variables. A lo largo de la especificación, los grupos y sustituyentes de los mismos son elegidos por un experto en la materia para proporcionar fracciones y compuestos estables.

[0075]Por ejemplo, un compuesto descrito en el presente documento, o una sal farmacéuticamente aceptable, solvato, o estereoisómero del mismo, se selecciona de un compuesto que se encuentra en laTabla 1.Sólo los Ejemplos 9, 15, 1a, 22, 24, 2a, 27, 29, 31, y 32 son conformes a la invención tal como se reivindica; todos los demás ejemplos son sólo de referencia.

TABLA 1

(continuación)

Otras formas de los compuestos aquí descritos

Isómeros/Estereoisómeros

[0076]Los compuestos aquí descritos pueden existir como isómeros geométricos. Los compuestos aquí descritos pueden poseer uno o más dobles enlaces. Los compuestos aquí presentados incluyen todos los isómeros cis, trans, syn, anti, entgegen (E), y zusammen (Z), así como las correspondientes mezclas de los mismos. En algunas situaciones, los compuestos aquí descritos poseen uno o más centros quirales y cada centro existe en la configuración R, o en la configuración S. Los compuestos aquí descritos incluyen todas las formas diastereoméricas, enantioméricas, y epiméricas, así como sus correspondientes mezclas. En algunas realizaciones, los compuestos de Fórmula (Ip) existen como estereoisómeros. Las mezclas de enantiómeros y/o diastereoisómeros, resultantes de una única etapa preparativa, combinación, o interconversión, pueden ser útiles para las aplicaciones descritas en el presente documento. Los compuestos aquí descritos pueden prepararse como sus estereoisómeros individuales haciendo reaccionar una mezcla racémica del compuesto con un agente de resolución ópticamente activo para formar un par de compuestos diastereoisoméricos, separando los diastereómeros y recuperando los enantiómeros ópticamente puros. Pueden preferirse complejos disociables. Los diastereómeros pueden tener propiedades físicas distintas (por ejemplo, puntos de fusión, puntos de ebullición, solubilidades, reactividad, etc.) y pueden separarse aprovechando estas disimilitudes. Los diastereómeros pueden separarse mediante cromatografía quiral o, preferiblemente, mediante técnicas de separación/resolución basadas en diferencias de solubilidad. El enantiómero ópticamente puro puede recuperarse entonces, junto con el agente de resolución, por cualquier medio práctico que no dé lugar a la racemización.

Compuestos etiquetados

[0077]Los compuestos aquí descritos pueden existir en sus formas isotópicamente marcadas. Los métodos aquí descritos pueden incluir métodos de tratamiento de enfermedades mediante la administración de dichos compuestos marcados isotópicamente. Los métodos aquí descritos pueden incluir métodos de tratamiento de enfermedades mediante la administración de dichos compuestos marcados isotópicamente como composiciones farmacéuticas. Por lo tanto, los compuestos descritos en el presente documento pueden incluir compuestos marcados isotópicamente, que son idénticos a los descritos en el presente documento, pero por el hecho de que uno o más átomos se sustituyen por un átomo que tiene una masa atómica o número másico diferente de la masa atómica o número másico que se encuentra normalmente en la naturaleza. Ejemplos de isótopos que pueden incorporarse a los compuestos aquí descritos incluyen isótopos de hidrógeno, carbono, nitrógeno, oxígeno, fósforo, azufre, flúor y cloruro, tales como 2H, 3H, 13C, 14C, 15N, 18O, 170 , 31P, 32P, 35S, 18F, y 36Cl, respectivamente. Los compuestos descritos en el presente documento y las sales, solvatos, o estereoisómeros farmacéuticamente aceptables de los mismos que contengan los isótopos antes mencionados y/u otros isótopos de otros átomos están dentro del alcance de esta invención. Ciertos compuestos marcados isotópicamente, por ejemplo aquellos a los que se incorporan isótopos radiactivos como 3H y 14C, son útiles en ensayos de distribución tisular de fármacos y/o sustratos. Los isótopos tritiados, es decir, 3H y carbono-14, es decir, 14C, son particularmente preferidos por su facilidad de preparación y detectabilidad. Además, la sustitución con isótopos pesados como el deuterio,es decir,2H, produce ciertas ventajas terapéuticas derivadas de una mayor estabilidad metabólica, por ejemplo, un aumento de la semivida in vivo o una reducción de los requisitos de dosificación.

[0078]Los compuestos descritos en el presente documento pueden etiquetarse por otros medios, incluyendo, entre otros, el uso de cromóforos o elementos fluorescentes, etiquetas bioluminiscentes, o etiquetas quimioluminiscentes.

Sales farmacéuticamente aceptables

[0079]Los compuestos aquí descritos pueden existir como sus sales farmacéuticamente aceptables. En algunas realizaciones, los compuestos de Fórmula (Ip) existen como sus sales farmacéuticamente aceptables. Los métodos aquí descritos pueden incluir métodos de tratamiento de enfermedades mediante la administración de dichas sales farmacéuticamente aceptables. Los métodos aquí descritos pueden incluir métodos de tratamiento de enfermedades mediante la administración de dichas sales farmacéuticamente aceptables como composiciones farmacéuticas.

[0080]Los compuestos aquí descritos pueden poseer grupos ácidos o básicos y, por lo tanto, reaccionar con cualquiera de una serie de bases inorgánicas u orgánicas, y ácidos inorgánicos y orgánicos, para formar una sal farmacéuticamente aceptable. Estas sales pueden prepararsein situdurante el aislamiento y purificación final de los compuestos aquí descritos, o de un solvato, o estereoisómero de los mismos, o haciendo reaccionar por separado un compuesto purificado en su forma libre con un ácido o base adecuados, y aislando la sal así formada.

[0081]Ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables incluyen aquellas sales preparadas por reacción de los compuestos aquí descritos con un mineral, ácido orgánico o base inorgánica, tales sales incluyen, acetato, acrilato, adipato, alginato, aspartato, benzoato, bencenosulfonato, bisulfato, bisulfito, bromuro, butirato, butin-1,4-dioato, canforato, canforsulfonato, caproato, caprilato, clorobenzoato, cloruro, citrato, ciclopentanopropionato, decanoato, digluconato, dihidrogenofosfato, dinitrobenzoato, dodecilsulfato, etanosulfonato, formiato, fumarato, glucoheptanoato, glicerofosfato, glicolato, hemisulfato, heptanoato, hexanoato, hexino-1,6-dioato, hidroxibenzoato, Y-hidroxibutirato, hidrocloruro, hidrobromuro, hidroyoduro, 2-hidroxietanosulfonato, yoduro, isobutirato, lactato, maleato, malonato, metanosulfonato, mandelato, metafosfato, metanosulfonato, metoxibenzoato, metilbenzoato, monohidrogenofosfato, 1-naftalenosulfonato, 2-naftalenosulfonato, nicotinato, nitrato, palmoato, pectinato, persulfato, 3-fenilpropionato, fosfato, picrato, pivalato, propionato, pirosulfato, pirofosfato, propiolato, ftalato, fenilacetato, fenilbutirato, sulfonato de propano, salicilato, succinato, sulfato, sulfito, succinato, suberato, sebacato, sulfonato, tartrato, tiocianato, tosilato, undecanoato, y xilenosulfonato.

[0082]Además, los compuestos aquí descritos pueden prepararse como sales farmacéuticamente aceptables formadas por reacción de la forma de base libre del compuesto con un ácido inorgánico u orgánico farmacéuticamente aceptable, incluyendo, pero no limitado a, ácidos inorgánicos tales como ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico, ácido metafosfórico, y similares; y ácidos orgánicos como ácido acético, ácido propiónico, ácido hexanoico, ácido ciclopentanopropiónico, ácido glicólico, ácido pirúvico, ácido láctico, ácido malónico, ácido succínico, ácido málico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido p-toluenosulfónico, ácido tartárico, ácido trifluoroacético, ácido cítrico, ácido benzoico, ácido 3-(4-hidroxibenzoil)benzoico, ácido cinámico, ácido mandélico, ácido arilsulfónico, ácido metanosulfónico, ácido etanosulfónico, ácido 1,2-etanodisulfónico, ácido 2-hidroxietanosulfónico, ácido bencenosulfónico, ácido 2-naftalenosulfónico, 4-metilbiciclo-[2.2.2]oct-2-eno-1-carboxílico, ácido glucoheptónico, ácido 4,4'-metilenbis-(3-hidroxi-2-eno-1-carboxílico), ácido 3-fenilpropiónico, ácido trimetilacético, ácido butilacético terciario, ácido lauril sulfúrico, ácido glucónico, ácido glutámico, ácido hidroxinaftoico, ácido salicílico, ácido esteárico, y ácido mucónico. Otros ácidos, como el oxálico, aunque en sí mismos no son farmacéuticamente aceptables, pueden emplearse en la preparación de sales útiles como intermedios en la obtención de los compuestos aquí divulgados, solvatos, o estereoisómeros de los mismos y sus sales de adición ácida farmacéuticamente aceptables.

[0083]Los compuestos descritos en el presente documento que comprenden un grupo ácido libre pueden reaccionar con una base adecuada, como el hidróxido, carbonato, bicarbonato, sulfato, de un catión metálico farmacéuticamente aceptable, con amoníaco, o con una amina orgánica primaria, secundaria, terciaria, o cuaternaria farmacéuticamente aceptable. Las sales representativas incluyen las sales alcalinas o alcalinotérreas, como las de litio, sodio, potasio, calcio, y magnesio, y las sales de aluminio y similares. Ejemplos ilustrativos de bases incluyen hidróxido de sodio, hidróxido de potasio, hidróxido de colina, carbonato de sodio, N+(alquilo C-m )4, y similares.

[0084]Las aminas orgánicas representativas útiles para la formación de sales de adición de base incluyen etilamina, dietilamina, etilendiamina, etanolamina, dietanolamina, piperazina y similares. Debe entenderse que los compuestos aquí descritos también incluyen la cuaternización de cualquier grupo básico que contenga nitrógeno. Por ejemplo, mediante dicha cuaternización se obtienen productos solubles o dispersables en agua o aceite.

Solvatos

[0085]Los compuestos aquí descritos pueden existir como solvatos. En algunas realizaciones, los compuestos de Fórmula (Ip) existen como solvatos, y se describen métodos para tratar enfermedades mediante la administración de dichos solvatos. En el presente documento se describen además métodos de tratamiento de enfermedades mediante la administración de dichos solvatos como composiciones farmacéuticas.

[0086]Los solvatos contienen cantidades estequiométricas o no estequiométricas de un solvente y, en algunas realizaciones, se forman con solventes farmacéuticamente aceptables como agua, etanol, y similares. Los hidratos se forman cuando el disolvente es agua, o los alcoholatos cuando el disolvente es alcohol. Los solvatos de los compuestos aquí descritos pueden prepararse o formarse convenientemente durante los procesos aquí descritos. A modo de ejemplo únicamente, los hidratos de los compuestos descritos en el presente documento pueden prepararse convenientemente a partir de una mezcla de disolventes acuosos/orgánicos, utilizando disolventes orgánicos que incluyen, entre otros, dioxano, tetrahidrofurano, o metanol. Además, los compuestos proporcionados en el presente documento pueden existir en formas disueltas y no disueltas. En general, las formas solvatadas se consideran equivalentes a las formas no solvatadas a efectos de los compuestos y métodos aquí descritos.

Tautómeros

[0087]En algunas situaciones, los compuestos existen como tautómeros. Los compuestos aquí descritos incluyen todos los tautómeros posibles dentro de las fórmulas aquí descritas. Los tautómeros son compuestos interconvertibles por migración de un átomo de hidrógeno, acompañada de un cambio de un enlace sencillo y un enlace doble adyacente. En las disposiciones de enlace en las que es posible la tautomerización, existirá un equilibrio químico de los tautómeros. Se contemplan todas las formas tautoméricas de los compuestos aquí descritos. La proporción exacta de los tautómeros depende de varios factores, como la temperatura, el disolvente, y el pH. En algunas realizaciones, los compuestos de Fórmula (Ip) existen como tautómeros.

Método de Tratamiento

[0088] Cualquier referencia a métodos de tratamiento en los párrafos anteriores y posteriores de esta descripción debe interpretarse como una referencia a los compuestos, composiciones farmacéuticas y/o medicamentos de la presente invención para su uso en métodos de tratamiento del cuerpo humano (o animal) mediante terapia (o diagnóstico). Se describen en el presente documento métodos de tratamiento de una enfermedad en la que la inhibición de PARP es beneficiosa, comprendiendo el método la administración de un compuesto descrito en el presente documento. También se describen en el presente documento métodos de tratamiento de una enfermedad en la que la inhibición de PARP 1 es beneficiosa, comprendiendo el método la administración de un compuesto descrito en el presente documento. Según el tercer aspecto de la invención, la enfermedad es el cáncer. En algunas realizaciones, el cáncer es cáncer de mama, cáncer de ovario, cáncer de páncreas, cáncer de próstata, un cáncer hematológico, un cáncer gastrointestinal como el cáncer gástrico y el cáncer colorrectal, o cáncer de pulmón. En algunas realizaciones, el cáncer es cáncer de mama, cáncer de ovario, cáncer de páncreas, o cáncer de próstata. En algunas realizaciones, el cáncer es leucemia, cáncer de colon, glioblastoma, linfoma, melanoma, o cáncer de cuello de útero. En algunas realizaciones, el cáncer es cáncer de vejiga, cáncer cerebral y del CNS, cáncer de mama, cáncer de cuello uterino, cáncer colorrectal, cáncer de esófago, linfoma de Hodgkin, linfoma no Hodgkin, cáncer de riñón, leucemia, cáncer de pulmón, melanoma, mieloma, cáncer de cavidad oral, cáncer de ovario, cáncer de páncreas, cáncer de próstata, cáncer de piel, cáncer de estómago, cáncer de tiroides, o cáncer de útero.

[0089] En algunas realizaciones del tercer aspecto, el cáncer es metastásico. En algunas realizaciones, el cáncer ha hecho metástasis en el cerebro.

[0090] En algunas realizaciones del tercer aspecto, el cáncer comprende una mutación BRCA1 y/o BRCA2.

[0091] En algunas realizaciones del tercer aspecto, el cáncer que comprende una mutación BRCA1 y/o una mutación BRCA2 es cáncer de vejiga, cáncer de cerebro & CNS, cáncer de mama, cáncer de cuello uterino, cáncer colorrectal, cáncer de esófago, linfoma de Hodgkin, linfoma no Hodgkin, cáncer de riñón, leucemia, cáncer de pulmón, melanoma, mieloma, cáncer de cavidad oral, cáncer de ovario, cáncer de páncreas, cáncer de próstata, cáncer de piel, cáncer de estómago, cáncer de tiroides, o cáncer de útero.

[0092] En algunas realizaciones del tercer aspecto, el cáncer es un cáncer deficiente en la actividad de reparación DSB del<a>D<n>dependiente de Recombinación Flomóloga (FIR). La vía de reparación de DSB de ADN dependiente de FIR repara las roturas de doble cadena (DSB) en el ADN mediante mecanismos homólogos para reformar una hélice de ADN continua. Los componentes de la vía de reparación de DSB del ADN dependiente de FIR incluyen, entre otros, ATM (NM_000051), RAD51 (NM_002875), RAD51 L1 (NM_002877), RAD51 C (NM_002876), RAD51 L3 (NM_002878), DMC1 (NM_007068), XRCC2 (NM_005431), XRCC3 (NM_005432), RAD52 (NM_002879), RAD54L (NM_003579), RAD54B (NM_012415), BRCA1 (NM_007295), BRCA2 (NM_000059), RAD50 (NM_005732), MRE1 1 A (NM_005590) y NBS1 (NM_002485). Otras proteínas implicadas en la vía de reparación DSB del ADN dependiente de FIR incluyen factores reguladores como e Ms Y. En algunas realizaciones del tercer aspecto, el cáncer que es deficiente en la reparación de DSB de ADN dependiente de FIR comprende una o más células cancerosas que tienen una capacidad reducida o abrogada para reparar DSB de ADN a través de esa vía, en relación con las células normales, es decir, la actividad de la vía de reparación de DSB de ADN dependiente de FIR puede estar reducida o abolida en la una o más células cancerosas.

[0093] En algunas realizaciones del tercer aspecto, la actividad de uno o más componentes de la vía de reparación DSB del<a>D<n>dependiente de FIR se suprime en una o más células cancerosas de un individuo que tiene un cáncer que es deficiente en la reparación DSB del ADN dependiente de FIR.

[0094] En algunas realizaciones del tercer aspecto, las células cancerosas tienen un fenotipo BRCA1 y/o BRCA2 deficiente, es decir, la actividad BRCA1 y/o BRCA2 está reducida o abolida en las células cancerosas. Las células cancerosas con este fenotipo pueden ser deficientes en BRCA1 y/o BRCA2, es decir, la expresión y/o actividad de BRCA1 y/o BRCA2 puede estar reducida o abolida en las células cancerosas, por ejemplo mediante mutación o polimorfismo en el ácido nucleico codificante, o mediante amplificación, mutación o polimorfismo en un gen que codifica un factor regulador, por ejemplo el gen EMSY que codifica un factor regulador de BRCA2. BRCA1 y BRCA2 son supresores tumorales conocidos cuyos alelos de tipo salvaje se pierden con frecuencia en tumores de portadores heterocigotos. También se sabe que la amplificación del gen EMSY, que codifica un factor de unión a BRCA2, está asociada al cáncer de mama y de ovario. Los portadores de mutaciones en BRCA1 y/o BRCA2 también tienen un riesgo elevado de padecer determinados tipos de cáncer, como cáncer de mama, ovario, páncreas, próstata, hematológico, gastrointestinal, y pulmón.

[0095] También se describe en el presente documento un método para tratar un cáncer que comprende una mutación en un gen que confiere deficiencia de reparación homóloga en un sujeto que lo necesita, el método comprende administrar un compuesto divulgado en el presente documento, o una sal, solvato, o estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo. La mutación en un gen que confiere deficiencia de reparación homóloga puede comprender ATM, BRCA1, BRCA2, BARD1, BRIP1, CDK12, CHEK1, CHEK2, FANCL, PALB2, RAD51B, RAD51C, RAD51D, o RAD54L, o cualquier combinación de los mismos.

[0096]También se describe en el presente documento un método para tratar un cáncer que está presente en el cerebro, el método comprende administrar un compuesto divulgado en el presente documento, o una sal, solvato, o estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0097]Por ejemplo, el cáncer que está presente en el cerebro surge de tumores periféricos primarios que han hecho metástasis en el cerebro, o el cáncer que está presente en el cerebro surge de tejidos cerebrales primarios.

[0098]También se describe en el presente documento un método para tratar el cáncer cerebral, que comprende la administración de un compuesto descrito en el presente documento o una sal, solvato, o estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0099]El cáncer cerebral puede ser un tumor cerebral primario que comienza en el cerebro y tiende a permanecer allí.

[0100]El cáncer cerebral puede ser un tumor cerebral secundario. Estos cánceres empiezan en otra parte del cuerpo y se desplazan hasta el cerebro. Los cánceres de pulmón, mama, riñón, colon, y piel se encuentran entre los más frecuentes que se propagan al cerebro.

[0101]El compuesto aquí divulgado, o una sal, solvato, o estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo, puede ser capaz de penetrar la barrera hematoencefálica (BBB). Por ejemplo, la proporción de compuesto que penetra en la BBB es > 0,1, siendo 1 la penetración completa en la BBB, y 0 la ausencia de penetración. Por ejemplo, la proporción de compuesto que penetra en la BBB es > 0,2. Por ejemplo, la proporción de compuesto que penetra en la BBB es > 0,3. La proporción de compuesto que penetra en la BBB puede medirse utilizando el ensayo kp,uu de rata. Por ejemplo, el compuesto tiene una relación >0,3 (es decir, de 0,3 a 1) determinada en el ensayo kp,uu de rata.

Administración

[0102]Las composiciones que contienen el (los) compuesto(s) aquí descrito(s) se administran para tratamientos profilácticos y/o terapéuticos. En ciertas aplicaciones terapéuticas, las composiciones se administran a un paciente que ya padece una enfermedad o afección, en una cantidad suficiente para curar o al menos detener parcialmente al menos uno de los síntomas de la enfermedad o afección. Las cantidades eficaces para este uso dependen de la gravedad y el curso de la enfermedad o afección, la terapia previa, el estado de salud del paciente, su peso, y su respuesta a los fármacos, así como del criterio del médico tratante. Las cantidades terapéuticamente eficaces se determinan opcionalmente por métodos que incluyen, pero no se limitan a, un escalado de dosis y/o un ensayo clínico de rango de dosis.

[0103]En aplicaciones profilácticas, las composiciones que contienen los compuestos descritos en el presente documento se administran a un paciente susceptible de padecer una enfermedad, trastorno, o afección particular, o en riesgo de padecerla. Dicha cantidad se define como una "cantidad o dosis profilácticamente eficaz". En este uso, las cantidades precisas también dependen del estado de salud del paciente, su peso y similares. Cuando se utilizan en pacientes, las cantidades eficaces para este uso dependerán de la gravedad y evolución de la enfermedad, trastorno o afección, de la terapia previa, del estado de salud del paciente y de su respuesta a los fármacos, así como del criterio del médico tratante. En un aspecto, los tratamientos profilácticos incluyen la administración a un mamífero, que previamente experimentó al menos un síntoma o factor de riesgo de la enfermedad que se está tratando y que actualmente está en remisión, de una composición farmacéutica que comprende un compuesto descrito en el presente documento, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para prevenir un retorno de los síntomas de la enfermedad o afección.

[0104]En ciertos ejemplos en los que la afección del paciente no mejora, a discreción del médico, la administración de los compuestos puede administrarse de forma crónica, es decir, durante un periodo de tiempo prolongado, incluida la duración de la vida del paciente, con el fin de mejorar o controlar o limitar de otro modo los síntomas de la enfermedad o afección del paciente.

[0105]Una vez que las condiciones del paciente hayan mejorado, se administrará una dosis de mantenimiento si es necesario. Posteriormente, en ejemplos específicos, la dosis, o la frecuencia de administración, o ambas, se reducen, en función de los síntomas, hasta un nivel en el que se mantiene la mejora de la enfermedad, el trastorno o la afección. Sin embargo, en determinados casos, el paciente puede necesitar tratamiento intermitente o diario a largo plazo ante cualquier reaparición de los síntomas.

[0106]La cantidad de un agente dado que corresponde a tal cantidad varía dependiendo de factores tales como el compuesto particular, la condición de la enfermedad y su gravedad, la identidad (por ejemplo, peso, sexo) del sujeto o huésped que necesita tratamiento, pero sin embargo se determina según las circunstancias particulares que rodean el caso, incluyendo, por ejemplo, el agente específico que se administra, la vía de administración, la condición que se trata, y el sujeto o huésped que se trata.

[0107]En general, sin embargo, las dosis empleadas para el tratamiento de humanos adultos se encuentran típicamente en el rango de 0,01 mg-5000 mg por día. En un aspecto, las dosis empleadas para el tratamiento de humanos adultos son de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 1000 mg por día. Por ejemplo, la dosis deseada se presenta convenientemente en una dosis única o en dosis divididas administradas simultáneamente o a intervalos apropiados, por ejemplo como dos, tres, cuatro, o más subdosis al día.

[0108]Las dosis diarias apropiadas para el compuesto aquí descrito, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, pueden ser de aproximadamente 0,01 a aproximadamente 50 mg/kg por peso corporal. Por ejemplo, la dosis diaria, o la cantidad de activo en la forma de dosificación son inferiores o superiores a los rangos aquí indicados, en función de una serie de variables con respecto a un régimen de tratamiento individual. En varios ejemplos, las dosis diarias y unitarias se modifican en función de una serie de variables que incluyen, entre otras, la actividad del compuesto utilizado, la enfermedad o afección a tratar, el modo de administración, los requisitos del sujeto individual, la gravedad de la enfermedad o afección a tratar, y el criterio del profesional.

[0109]La toxicidad y la eficacia terapéutica de dichos regímenes terapéuticos se determinan mediante procedimientos farmacéuticos estándar en cultivos celulares o animales de experimentación, incluyendo, entre otros, la determinación de la LD10 y la ED90. La relación de dosis entre los efectos tóxicos y terapéuticos es el índice terapéutico y se expresa como la relación entre la LD50 y la ED50. Por ejemplo, los datos obtenidos de ensayos en cultivos celulares y estudios en animales se utilizan para formular el intervalo de dosis diaria terapéuticamente eficaz y/o la cantidad de dosis unitaria terapéuticamente eficaz para su uso en mamíferos, incluidos los seres humanos. Por ejemplo, la cantidad de dosis diaria de los compuestos aquí descritos se encuentra dentro de un rango de concentraciones circulantes que incluyen la ED50 con una toxicidad mínima. Por ejemplo, el intervalo de dosis diaria y/o la cantidad de dosis unitaria varía dentro de este intervalo dependiendo de la forma de dosificación empleada y de la vía de administración utilizada.

Vías de Administración

[0110]Las vías de administración adecuadas incluyen, entre otras, la administración oral, intravenosa, rectal, en aerosol, parenteral, oftálmica, pulmonar, transmucosa, transdérmica, vaginal, ótica, nasal, y tópica. Además, a modo de ejemplo únicamente, la administración parenteral incluye inyecciones intramusculares, subcutáneas, intravenosas, intramedulares, así como intratecales, intraventriculares directas, intraperitoneales, intralinfáticas, e intranasales.

[0111]Un compuesto como el aquí descrito puede administrarse de forma local en lugar de sistémica, por ejemplo, mediante inyección del compuesto directamente en un órgano, a menudo en una preparación de depósito o formulación de liberación sostenida. Por ejemplo, las formulaciones de acción prolongada se administran por implantación (por ejemplo, por vía subcutánea o intramuscular) o por inyección intramuscular. Además, en otros ejemplos, el fármaco se administra en un sistema de administración de fármacos dirigido, por ejemplo, en un liposoma recubierto con anticuerpo específico de órgano. Los liposomas pueden dirigirse al órgano y ser absorbidos selectivamente por él. En otros ejemplos, el compuesto aquí descrito se proporciona en forma de una formulación de liberación rápida, en forma de una formulación de liberación prolongada, o en forma de una formulación de liberación intermedia. En otros ejemplos, el compuesto aquí descrito se administra por vía tópica.

Composiciones/Fórmulas farmacéuticas

[0112]Los compuestos aquí descritos se administran a un sujeto que los necesite, solos o en combinación con portadores, excipientes o diluyentes farmacéuticamente aceptables, en una composición farmacéutica, de acuerdo con la práctica farmacéutica estándar. Por ejemplo, los compuestos de esta invención pueden administrarse a animales. Los compuestos pueden administrarse por vía oral o parenteral, incluidas las vías de administración intravenosa, intramuscular, intraperitoneal, subcutánea, rectal, y tópica.

[0113]En un segundo aspecto, la presente invención proporciona composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto del primer aspecto, o una sal, solvato, estereoisómero, o tautómero farmacéuticamente aceptable del mismo, y al menos un excipiente farmacéuticamente aceptable. Las composiciones farmacéuticas se formulan de manera convencional utilizando uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables que facilitan la transformación de los compuestos activos en preparados que pueden utilizarse farmacéuticamente. La formulación adecuada depende de la vía de administración elegida. Un resumen de las composiciones farmacéuticas aquí descritas puede encontrarse, por ejemplo, en Remington: The Science and Practice of Pharmacy, Nineteenth Ed (Easton, Pa.: Mack Publishing Company, 1995); Hoover, John E., Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, Pennsylvania 1975; Liberman, H.A. and Lachman, L., Eds., Pharmaceutical Dosage Forms, Marcel Decker, New York, N.Y., 1980; y Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, Seventh Ed. (Lippincott Williams & Wilkins1999).

[0114]En algunas realizaciones, el excipiente farmacéuticamente aceptable se selecciona entre portadores, aglutinantes, agentes de relleno, agentes de suspensión, agentes aromatizantes, agentes edulcorantes, agentes desintegrantes, agentes dispersantes, tensioactivos, lubricantes, colorantes, diluyentes, solubilizantes, agentes humectantes, plastificantes, estabilizantes, potenciadores de la penetración, agentes humectantes, agentes antiespumantes, antioxidantes, conservantes, y cualquier combinación de los mismos.

[0115]Las composiciones farmacéuticas descritas en el presente documento se administran a un sujeto por vías de administración apropiadas, incluidas, entre otras, las vías de administración oral, parenteral (por ejemplo, intravenosa, subcutánea, intramuscular), intranasal, bucal, tópica, rectal o transdérmica. Las formulaciones farmacéuticas aquí descritas incluyen, entre otras, dispersiones líquidas acuosas, líquidos, geles, jarabes, elixires, lechadas, suspensiones, dispersiones autoemulsionables, soluciones sólidas, dispersiones liposomales, aerosoles, formas farmacéuticas orales sólidas, polvos, formulaciones de liberación inmediata, formulaciones de liberación controlada, formulaciones de fusión rápida, comprimidos, cápsulas, píldoras, polvos, grageas, formulaciones efervescentes, formulaciones liofilizadas, formulaciones de liberación retardada, formulaciones de liberación prolongada, formulaciones de liberación pulsátil, formulaciones multiparticuladas, y formulaciones mixtas de liberación inmediata y controlada.

[0116]Las composiciones farmacéuticas que incluyen los compuestos descritos en el presente documento, o una sal, solvato, o estereoisómero farmacéuticamente aceptable de los mismos, se fabrican de manera convencional, como, a modo de ejemplo únicamente, mediante procesos convencionales de mezclado, disolución, granulación, dragado, levigado, emulsión, encapsulación, atrapamiento, o compresión.

[0117]Las composiciones farmacéuticas para uso oral se obtienen mezclando uno o más excipientes sólidos con uno o más de los compuestos aquí descritos, moliendo opcionalmente la mezcla resultante, y procesando la mezcla de gránulos, tras añadir auxiliares adecuados, si se desea, para obtener comprimidos o núcleos de grageas. Entre los excipientes adecuados se incluyen, por ejemplo, cargas tales como azúcares, entre los que se incluyen la lactosa, la sacarosa, el manitol o el sorbitol; preparados de celulosa como, por ejemplo, almidón de maíz, almidón de trigo, almidón de arroz, almidón de patata, gelatina, goma tragacanto, metilcelulosa, celulosa microcristalina, hidroxipropilmetilcelulosa, carboximetilcelulosa sódica; u otros como polivinilpirrolidona (PVP o povidona) o fosfato cálcico. Si se desea, se añaden agentes desintegrantes, como la croscarmelosa sódica reticulada, la polivinilpirrolidona, el agar, o el ácido algínico o una sal del mismo, como el alginato sódico. Pueden añadirse colorantes o pigmentos a los comprimidos o recubrimientos de grageas para su identificación o para caracterizar diferentes combinaciones de dosis de compuestos activos.

[0118]Las composiciones farmacéuticas que se administran por vía oral incluyen cápsulas a presión hechas de gelatina, así como cápsulas blandas, y selladas hechas de gelatina y un plastificante, como glicerol o sorbitol. Las cápsulas autoadhesivas contienen los principios activos mezclados con sustancias de relleno como la lactosa, aglutinantes como los almidones, y/o lubricantes como el talco o el estearato de magnesio y, opcionalmente, estabilizantes. En las cápsulas blandas, los compuestos activos se disuelven o suspenden en líquidos adecuados, como aceites grasos, parafina líquida, o polietilenglicoles líquidos. En algunas realizaciones, se añaden estabilizadores.

[0119]Las composiciones farmacéuticas para uso parental se formulan como infusiones o inyecciones. En algunas realizaciones, la composición farmacéutica adecuada para inyección o infusión incluye soluciones acuosas estériles, o dispersiones, o polvos estériles que comprenden un compuesto descrito aquí, o una sal farmacéuticamente aceptable, solvato, o estereoisómero del mismo. En algunas realizaciones, la composición farmacéutica comprende un portador líquido. En algunas realizaciones, el portador líquido es un disolvente o medio de dispersión líquido que comprende, por ejemplo, agua, solución salina, etanol, un poliol (por ejemplo, glicerol, propilenglicol, polietilenglicoles líquidos, y similares), aceites vegetales, ésteres de glicerilo no tóxicos, y cualquier combinación de los mismos. En algunas realizaciones, las composiciones farmacéuticas comprenden además un conservante para prevenir el crecimiento de microorganismos.

Combinación

[0120]En el presente documento se describen métodos para tratar el cáncer utilizando un compuesto descrito en el presente documento, o una sal, solvato, o estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo, en combinación con un agente terapéutico adicional.

[0121]Por ejemplo, el agente terapéutico adicional es un agente anticancerígeno.

[0122]El agente terapéutico adicional puede administrarse al mismo tiempo que el compuesto aquí divulgado, o el agente terapéutico adicional y el compuesto aquí divulgado pueden administrarse secuencialmente. Por ejemplo, el agente terapéutico adicional se administra con menos frecuencia que el compuesto aquí descrito. Por ejemplo, el agente terapéutico adicional se administra con mayor frecuencia que el compuesto aquí descrito. Por ejemplo, el agente terapéutico adicional se administra antes de la administración del compuesto aquí descrito. Por ejemplo, el agente terapéutico adicional se administra después de la administración del compuesto aquí divulgado.

EJEMPLOS

[0123]Los compuestos no incluidos en las reivindicaciones se dan únicamente a título ilustrativo.

[0124]Sólo los Ejemplos 9, 15, 16, 22, 24, 26, 27, 29, 31 y 32 son conformes a la invención tal como se reivindica.

Ejemplo 1

[0125]

Etapa 1 y Etapa 2: Preparación de N-(3-bromo-2,6-difluorofenilo)-2H-pirazol-3-carboxamida:

[0126]Una solución de ácido 2H-pirazol-3-carboxílico (3,00 g, 26,76 mmol, 1,00 equiv.) en SOCI2 (30 mL) se agitó durante la noche a 90°C bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente. Los sólidos precipitados se recogieron por filtración y se lavaron con tolueno (3 x 50 mL). La mezcla resultante se concentró a presión reducida. El producto bruto 1,6,7,12-tetraazatriciclo[7.3.0.0A{3,7}]dodeca-3,5,9,11-tetraeno-2,8-diona (2,3 g) se utilizó en la siguiente etapa directamente sin purificación adicional.

[0127]A una solución agitada de 1,6,7,12-tetraazatriciclo[7.3.0.0A{3,7}]dodeca-3,5,9,11-tetraeno-2,8-diona (2,30 g, 12,22 mmol, 1,00 equiv.) y 3-bromo-2,6-difluoroanilina (5,09 g, 24,45 mmol, 2,00 equiv.) en THF (100 mL,) se añadió NaHMDS (2M, 30,56 mL, 61,12 mmol, 5,00 equiv.) gota a gota a -10°C. La mezcla resultante se agitó durante 2 h adicionales a -10 °C. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla se neutralizó a pH 7 con CH3CO2H. La mezcla resultante se concentró a presión reducida. El residuo se disolvió en H2O (100 mL). La mezcla resultante se extrajo con EtOAc (3 x 100 mL). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (3 x 100 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron. El producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice, eluyendo con PE / EA (gradiente 0%-30% en 30 min) para obtener N-(3-bromo-2,6-difluorofenilo)-2H-pirazol-3-carboxamida (6 g,74,4%). LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H]+ = 301.9; 1H NMR (300 MHz, DMSO-dej 613.49 (s, 1H), 10.01 (s, 1H), 7.92 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.78-7.66 (m, 1H), 7.25 (td, J = 9.1, 1.9 Hz, 1H), 6.77 (d, J = 2.2 Hz, 1H).

Etapa 3: Preparación de 7-bromo-6-fluoro-5H-pirazolo[1,5-a]32uinoxalina-4-ona:

[0128]A una solución agitada de N-(3-bromo-2,6-difluorofenilo)-2H-pirazol-3-carboxamida (5,80 g, 19,20 mmol, 1,00 equiv.) en DMA (2 mL) se añadió NaH (1,15 g, 28,80 mmol, 1,50 equiv., 60% en aceite mineral) en porciones a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante toda la noche a 120°C bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente. La reacción se extinguió con agua (50 mL) a 0°C. La mezcla resultante se diluyó con agua (100 mL). La mezcla resultante se extrajo con EtOAc (3 x 300 mL). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (3 x 100 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron. El residuo se disolvió en DMSO (20 mL) y se purificó por cromatografía flash inversa (columna: C18; fase móvil: MeOH en agua (0,1% TFA), gradiente 50- 70% en 40 min; detector, UV 254 nm) para proporcionar 7-bromo-6-fluoro-5H-pirazolo[1,5-a]quinoxalin-4-ona (1,5 g, 26,3%). LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H]+ =281.9; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 612.14 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.89 (d,J= 8.9 Hz, 1H), 7.58 (t,J =7.7 Hz, 1H), 7.21 (s, 1H).

Etapa 4: Preparación de 6-fluoro-7-(hidroximetilo)-5H-pirazolo[1,5-a]quinoxalin-4-ona:

[0129]A una solución agitada de 7-bromo-6-fluoro-5H-pirazolo[1,5-a]quinoxalin-4-ona (1,00 g, 3,54 mmol, 1,00 equiv.) y (tributiltanil)metanol (1366 mg, 4,25 mmol, 1,20 equiv.) en dioxano (16 mL) se añadió Precatalizador XPhos de 2.a Generación (279 mg, 0,35 mmol, 0,10 equiv.) a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante 2 h a 80 °C bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla resultante se filtró y la torta filtrada se lavó con DCM/MeOH(1:5) (3x150 mL). El filtrado se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice, eluyendo con CH2Ch / MeOH (gradiente 0%-7% en 30 min) para obtener 6-fluoro-7-(hidroximetilo)-5H-pirazolo[1,5-a]quinoxalin-4-ona (400 mg, 45,9%). LC-MS: (ES+H, m/z):

[M+H]+ = 234.0; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) 6 11.95 (s, 1H), 8.10 (d,J =2.1 Hz, 1H), 7.93 (dd,J= 8.5, 1.4 Hz, 1H), 7.38 (dd,J =8.5, 7.0 Hz, 1H), 7.19 (d,J =2.1 Hz, 1H), 5.42 (t,J= 5.8 Hz, 1H), 4.63 (dd,J =5.8, 1.5 Hz, 2H).

Etapa 5: Preparación de 7-(clorometilo)-6-fluoro-5H-pirazolo[1,5-a]quinoxalin-4-ona:

[0130]A una solución agitada de 6-fluoro-7-(hidroximetilo)-5H-pirazolo[1,5-a]quinoxalin-4-ona (300 mg, 1,28 mmol, 1,00 equiv.) en DCM (8 mL) se añadió SOCh (765 mg, 6,43 mmol, 5,00 equiv.) y DMF (5 mg, 0,07 mmol, 0,05 equiv.) gota a gota a temperatura ambiente. La mezcla resultante se agitó durante toda la noche a temperatura ambiente. La reacción se monitorizó mediante LCMS. Los sólidos precipitados se recogieron por filtración y se lavaron con DCM (3x30 mL). El producto bruto (7-(clorometilo)-6-fluoro-5H-pirazolo[1,5-a]quinoxalin-4-ona) se utilizó en la siguiente etapa directamente sin purificación adicional. LC-M<s>: (ES+H, m/z): [M+H]+ =252.0.

Etapa 6: Preparación de 6-fluoro-5-[4-({6-fluoro-4-oxo-5H-pirazolo[1,5-a]quinoxalin-7-ilo}-metilo)piperazin-1-ilo]-N-metilpiridina-2-carboxamida:

[0131]A una mezcla agitada de 7-(clorometilo)-6-fluoro-5H-pirazolo[1,5-a]quinoxalin-4-ona (180 mg, 0,71 mmol, 1,00 equiv.) y 6-fluoro-N-metilo-5-(piperazin-1-ilo)piridin-2-carboxamida (204 mg, 0,86 mmol, 1,20 equiv.) en MeCN (10 ml) se añadieron KI (24 mg, 0,14 mmol, 0,20 equiv.) y DIEA (462 mg, 3,57 mmol, 5,00 equiv.) a temperatura ambiente. La mezcla resultante se agitó durante 2 h a 80°C bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente. La mezcla resultante se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (CH2C h/ MeOH (gradiente 0%-10% en 30 min) para obtener 6-fluoro-5-[4-({6-fluoro-4-oxo-5H-pirazolo[1,5-a]quinoxalin-7-ilo}metilo)piperazin-1-ilo]-N-metilpiridina-2-carboxamida. El producto bruto se purificó mediante Prep-HPLC (Columna: Columna xBridge Shield RP18 OBD, 50*250 mm, 10pm; Fase móvil A: Agua (0,05%NH3H2O), Fase móvil B: MeCN; Caudal: 25 mL/min; Gradiente: 5% B a 40% B en 35 min, 40% B; Longitud de onda: 254/220 nm; RT1 (min): 30,5) para producir 6-fluoro-5-[4-({6-fluoro-4-oxo-5H-pirazolo[1,5-a]quinoxalin-7-ilo}metilo)piperazin-1-ilo]-N-metilpiridina-2-carboxamida (204,4 mg, 62,4%). LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H]+= 454.1; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) 8 11.98 (s, 1H), 8.40 (q,J= 4.7 Hz, 1H), 8.10 (d,J= 2.1 Hz, 1H), 7.94 (dd,J= 8.5, 1.2 Hz, 1H), 7.84 (dd,J= 8.1, 1.4 Hz, 1H), 7.55 (dd,J= 10.6, 8.1 Hz,1H), 7.34 (dd,J= 8.5, 6.8 Hz, 1H), 7.19 (d,J= 2.1 Hz, 1H), 3.69 (s, 2H), 3.17-3.14 (m, 4H), 2.77 (d,J =4.7 Hz, 3H), 2.65-2.57 (m, 4H). 19F NMR (282 MHz, DMSO-dej 8-72.57, -131.02.

[0132]Los siguientes ejemplos se realizaron utilizando procedimientos similares a los mostrados para el Ejemplo 1.

(continuación)

Ejemplo 6

[0133]

Etapa 1: Preparación de 3-amino-2-fluoro-4-iodobenzoato de metilo:

[0134]Una solución de 3-amino-2-fluorobenzoato de metilo (20,00 g, 118,23 mmol, 1,00 equiv.) y NIS (23,94 g, 106,41 mmol, 0,90 equiv.) en AcOH (250 mL) se agitó durante 1 h a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla resultante se concentró a presión reducida. La mezcla resultante se diluyó con agua (200 mL). La mezcla resultante se extrajo con EtOAc (3 x 200 mL). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (2 x 100 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía combi-flash reversa (columna: C18; fase móvil, MeOH en agua (0,1% FA), gradiente de 10% a 50% en 10 min; detector, UV 254 nm) para obtener 3-amino-2-fluoro-4-iodobenzoato de metilo (4,00 g, 11,4%). LC-MS: (ES+H,m/z):[M+H]+=295.80; 1H NMR (300 MHz, DMSO-cfe) 87.52 (dd,J =8.4, 1.5 Hz, 1H), 6.81 (dd,J= 8.3, 6.7 Hz, 1H), 5.43 (s, 2H), 3.83 (s, 3H).

Etapa 2: Preparación de 2-fluoro-3-(furano-3-amido)-4-yodobenzoato de metilo:

[0135]En un matraz de fondo redondo de 250 mL se añadieron 3-amino-2-fluoro-4-iodobenzoato de metilo (4,00 g, 13,55 mmol, 1,00 equiv.), ácido 3-furoico (1,52 g, 13,55 mmol, 1,00 equiv.), T3P (43,14 g, 67,78 mmol, 5,00 equiv., 50% en EA) y DIEA (2,08 g, 16,10 mmol, 5,00 equiv.) a temperatura ambiente. La mezcla resultante se agitó durante toda la noche a 100°C bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente. La mezcla resultante se diluyó con agua (100 mL). La mezcla resultante se extrajo con EtOAc (3 x 100 mL). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (2x100 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (PE / EA (gradiente de 0 a 20% en 30 min)) para obtener 2-fluoro-3-(furano-3-amido)-4-iodobenzoato de metilo (4,50 g, 85,3%). LC-MS: (ES+H, m/z):

[M+H]+= 389.85; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) 89.99 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 7.91 (dd,J =8.4, 1.2 Hz, 1H), 7.83 (t,J =1.7 Hz, 1H), 7.61 (dd,J =8.4, 7.0 Hz, 1H), 7.02 - 6.96 (m, 1H), 3.86 (s, 3H).

Etapa 3: Preparación de 3-[N-(terc-butoxicarbonilo) furano-3-amido]-2-fluoro-4-iodobenzoato de metilo:

[0136]A una mezcla agitada de 2-fluoro-3-(furano-3-amido)-4-iodobenzoato de metilo (2,60 g, 6,68 mmol, 1,00 equiv.) y (Boc)2O (2,92 g, 13,36 mmol, 2,00 equiv.) en DCE (50 mL) se añadió DMAP (0,82 g, 6,68 mmol, 1,00 equiv.) en porciones a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante toda la noche a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante TLC (PE: EA=5: 1, r=0,5). La mezcla resultante se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice, eluyendo con PE / EA (gradiente de 0 a 20% en 30 min) para obtener 3-[N-(terc-butoxicarbonil) furan-3-amido]-2-fluoro-4-iodobenzoato de metilo (3,00 g, 91,7%).

Etapa 4: Preparación de 6-fluoro-4-oxo-5H-furo[3,2-c] quinolina-7-carboxilato de metilo:

[0137]A una solución agitada de 3-[N-(terc-butoxicarbonilo) furano-3-amido]-2-fluoro-4-iodobenzoato de metilo (3,00 g, 6,13 mmol, 1,00 equiv.) en DMF (30 mL) se añadió PCy3 (344 mg, 1,22 mmol, 0,20 equiv.), Pd(OAc)2 (275 mg, 1,22 mmol, 0,20 equiv.), y K2CO3 (1,69 g, 12,26 mmol, 0,20 equiv.) a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se irradió con radiación de microondas durante 2 h a 120 °C. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla resultante se diluyó con agua (50 mL) y se extrajo con EtOAc (3 x 100 mL). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (2 x 50 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (PE / EtOAc (gradiente de 0 a 20% en 30 min)) para obtener 6-fluoro-4-oxo-5H-furo[3,2-c] quinolina-7-carboxilato de metilo (310 mg, 19,3%). LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H+MeCN]+ = 302.95.

Etapa 5: Preparación de 6-fluoro-7-(hidroximetilo)-5H-furo[3,2-c] quinolin-4-ona:

[0138]A una solución agitada de 6-fluoro-4-oxo-5H-furo[3,2-c] quinolina-7-carboxilato de metilo (150 mg, 0,57 mmol, 1,00 equiv.) en THF (10 mL) se añadió LiAlH4 (0,46 mL, 1,14 mmol, 2,00 equiv., 2,5M en THF) gota a gota a 0°C bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante 2 h a 0°C bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La reacción se extinguió añadiendo HCl(aq.) (1m , 1,2 mL) a 0°C. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (CH2Ch / MeOH (gradiente de 0 a 10% en 30 min)) para obtener 6-fluoro-7-(hidroximetilo)-5H-furo[3,2-c] quinolin-4-ona (100 mg, 74,6%). LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H]+ = 233.95.

Etapa 6: Preparación de 7-(clorometilo)-6-fluoro-5H-furo[3,2-c] quinolin-4-ona:

[0139]A una solución agitada de 6-fluoro-7-(hidroximetilo)-5H-furo[3,2-c] quinolin-4-ona (100 mg, 0,42 mmol, 1,00 equiv.) y DMF (2 mg, 0,03 mmol, 0,10 equiv.) en d Cm (10 mL) se añadió SOCh (0,24 mL, 3,30 mmol, 10,00 equiv.) gota a gota a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante 2h a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla resultante se concentró a presión reducida para obtener 7-(clorometilo)-6-fluoro-5H-furo[3,2-c] quinolin-4-ona (100 mg, 92,6%). LC-MS: (ES+H, m/z):

[M+H] = 252.00.

Etapa 7: Preparación de 6-fluoro-5-[4-({6-fluoro-4-oxo-5H-furo[3,2-c] quinolin-7-ilo} metilo) piperazin-1-ilo]-N-metilpiridina-2-carboxamida:

[0140]Una solución de 6-fluoro-N-metilo-5-(piperazin-1-ilo) piridina-2-carboxamida (95 mg, 0,39 mmol, 1,00 equiv.) en MeCN (5 mL) se trató con DIEA (205 mg, 1,58 mmol, 4,00 equiv.) durante 5 min a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno seguido de la adición de KI (7 mg, 0,04 mmol, 0,10 equiv.), 7-(clorometilo)-6-fluoro-5H-furo[3,2-c] quinolin-4-ona (100 mg, 0,39 mmol, 1,00 equiv.). La mezcla resultante se agitó durante 2 h a 80°C bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente. La mezcla resultante se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía flash inversa (gel C18; fase móvil, MeOH en agua (0,1% NH3.H2O), gradiente del 10% al 50% en 10 min; detector, UV 254 nm) para obtener 6-fluoro-5-[4-({ 6-fluoro-4-oxo-5H-furo[3,2-c] quinolin-7-ilo} metilo) piperazin-1-ilo]-N-metilpiridina-2-carboxamida (43,2 mg, 23,8%). LC-MS: (ES+H,m/z):[M+H]+=454.10; 1H NMR (400 MHz, DMSO-de) 6 11.84 - 11.57 (m, 1H), 8.39 (q,J =4.7 Hz, 1H), 8.13 (d,J =2.1 Hz, 1H), 7.84 (dd,J =8.1, 1.4 Hz, 1H), 7.73 (d,J =8.1 Hz, 1H), 7.55 (dd,J =10.6, 8.1 Hz, 1H), 7.33 (dd,J =8.2, 6.2 Hz, 1H), 7.11 (d,J =2.1 Hz, 1H), 3.72 (s, 2H), 3.19 -3.16 (m, 4H), 2.77 (d,J =4.7 Hz, 3H), 2.62 -2.60 (m, 4H). 19F NMR (377 MHz, DMSO-de) 6 - 72.56, 6 -132.19.

[0141]Los siguientes ejemplos se realizaron utilizando procedimientos similares a los mostrados parael Ejemplo 6.

(continuación)

Ejemplo 7

[0142]

Etapa 1: Preparación de 3-amino-2-fluoro-4-iodobenzoato de metilo:

[0143]Una solución de 3-amino-2-fluorobenzoato de metilo (10 g, 59,12 mmol, 1,00 equiv.) y NIS (12 g, 53,21 mmol, 0,90 equiv.) en AcOH (120 mL) se agitó durante 1 h a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla se concentró a presión reducida. El residuo se disolvió en acetato de etilo (10 mL) y se vertió en NaHCO3 (100 mL) (aq.). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (3x100 mL) y las capas orgánicas combinadas se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía flash en fase inversa (C18; fase móvil: MeOH en agua (0,1% FA), gradiente de 10% a 50% en 10 min; detector, UV 254 nm) para obtener 3-amino-2-fluoro-4-iodobenzoato de metilo (2,1 g, 11,98%). LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H]+ = 295.80; 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfej 87.52 (d,J =8.4, 1.3 Hz, 1H), 6.83-6.78 (m,J =8.3, 6.7 Hz, 1H), 5.44 (s, 2H), 3.82 (s, 3H).

Etapa 2: Preparación de 2-[2-amino-3-fluoro-4-(metoxicarbonil)fenil]pirrol-1-carboxilato de terc-butilo:

[0144]A una solución agitada de 3-amino-2-fluoro-4-iodobenzoato de metilo (1 g, 3,39 mmol, 1,00 equiv.) y ácido 1-(tercbutoxicarbonilo)pirrol-2-ilborónico (1 g, 6,78 mmol, 2,00 equiv.) en 1,4-dioxano (120 mL) se añadió Pd(dppf)Cl2.CH2Ch (276 mg, 0,34 mmol, 0,10 equiv.) y CsF (1 g, 6,78 mmol, 2,00 equiv.) a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se calentó y se agitó durante 2 h a 100 °C bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla resultante se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía flash en fase inversa (C18; fase móvil: MeCN en agua (10 mmol/L NH4HCO3), gradiente de 10% a 50% en 10 min; detector, UV 254 nm) para proporcionar 2-[2-amino-3-fluoro-4-(metoxicarbonilo)fenilo]pirrol-1 -carboxilato de terc-butilo (420 mg, 29,84%). lC-MS: (Es H, m/z): [M+H]+ = 335.10.

Etapas 3-4: Preparación de 7-fluoro-8-(hidroximetilo)-6H-pirrolo[1,2-c]quinazolin-5-ona:

[0145]Una solución de 2-[2-amino-3-fluoro-4-(metoxicarbonilo)fenilo]pirrol-1-carboxilato de terc-butilo (380 mg, 1,14 mmol, 1,00 equiv.) en HCl en 1,4-dioxano (5 mL) se agitó durante 1 h a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla resultante se concentró a presión reducida para proporcionar 7-fluoro-5-oxo-6H-pirrolo[1,2-c]quinazolina-8-carboxilato de metilo (370 mg, crudo).

[0146]A la solución de 7-fluoro-5-oxo-6H-pirrolo[1,2-c]quinazolina-8-carboxilato de metilo (en bruto) en THF(10 mL) se añadió LÍAIH4 (0,9 mL, 2,28 mmol, 2,00 equiv., 2,5M en THF) a 0°C bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla se agitó a 0°C durante 2h. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla se vertió en agua (50 mL) y se extrajo con EtOAc (3 x 10 mL). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (2x50 mL) y se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (PE / Ea (3:1 -1:1)) para obtener 7-fluoro-8-(hidroximetilo)-6H-pirrolo[1,2-c]quinazolin-5-ona (160 mg, 40,98%). LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H]+= 233.1; 1H NMR (300 MHz, DMSO-de) 8 11.54 (s, 1H), 7.74 (d,J =8.1 Hz, 1H), 7.64 (dd,J= 3.1, 1.5 Hz, 1H), 7.30-7.23 (m, 1H), 7.04 (dd,J = 3.6, 1.5 Hz, 1H), 6.72-6.68 (m, 1H), 5.37-5.32 (m, 1H), 4.60 (dd,J =5.7, 1.5 Hz, 2H).

Etapas 5-6: Preparación de 6-fluoro-5-[4-({7-fluoro-5-oxo-6H-pirrolo[1,2-c]qumazolm-8-No}metNo)piperazm-1-No]-N-metilpiridina-2-carboxamida:

[0147]A una solución agitada de 7-fluoro-8-(hidroximetilo)-6H-pirrolo[1,2-c]quinazolin-5-ona (130 mg, 0,560 mmol, 1,00 equiv.) y 2 gotas de DMF en DCM(15 mL) se añadió SOCh (333 mg, 2,8 mmol, 5,00 equiv.) a 0°C bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante 1h a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla resultante se concentró a presión reducida. La mezcla de productos crudos se utilizó en la siguiente etapa directamente sin más purificación.

[0148]A una solución agitada de 8-(clorometilo)-7-fluoro-6H-pirrolo[1,2-c]quinazolin-5-ona (130 mg, en bruto) y 6-fluoro-N-metilo-5-(piperazin-1-ilo)piridina-2-carboxamida (124 mg, 0,52 mmol, 1,00 equiv, sal HCl) en MeCN (15 mL) se añadió KI (9 mg, 0,1 mmol, 0,10 equiv.) y DIEA (201 mg, 1,56 mmol, 3,00 equiv.) a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante 1h a 80°C bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla resultante se vertió en agua (35 mL) y se extrajo con EtOAc (3 x 50mL). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (3x100 mL) y se concentraron a presión reducida. El producto bruto (200 mg) se purificó por Prep-HPLC (Columna: Columna Xselect CSH C18 OBD 50*250mm 10pm,; Fase móvil A: Agua (0,1% NH4HCO3), Fase móvil B: MeCN-----Preparativo; Caudal: 100mL/min; Gradiente: 35% B a 55% B en 30min, 52% B; Longitud de onda: 254/220 nm; RT1 (min): 27)) para producir 6-fluoro-5-[4-({7-fluoro-5-oxo-6H-pirrolo[1,2-c]quinazolin-8-ilo}metilo)piperazin-1-ilo]-N-metilpiridina-2-carboxamida (50,2 mg, 21,2%). LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H]+= 453.15; 1H NMR (300 MHz, DMSO-de) 8 11.57 (s, 1H), 8.40 (q,J =4.9 Hz, 1H), 7.84 (dd,J =8.1, 1.5 Hz, 1H), 7.74 (d,J =8.1 Hz, 1H), 7.65 (dd,J= 3.1, 1.5 Hz, 1H), 7.61-7.52 (m, 1H), 7.28-7.18 (m, 1H), 7.06 (dd,J =3.6, 1.5 Hz, 1H), 6.75-6.67 (m, 1H), 3.67 (s, 2H), 3.25-3.11 (m, 4H), 2.76 (d,J =4.7 Hz, 3H), 2.66-2.56 (m, 4H). 19F NMR (282 MHz, DMSO-de) 8 -72.56, -133.82.

Ejemplo 9

[0149]

Etapa 1: Preparación de 6-fluoro-4-oxo-2H,3H,5H-furo[3,2-c] quinolina-7-carboxilato de metilo:

[0150]A una solución agitada de 6-fluoro-4-oxo-5H-furo[3,2-c] quinolina-7-carboxilato de metilo (200 mg, 0,76 mmol, 1,00 equiv.) en CF3CH2OH (50 mL) se añadió Pd/C (163 mg, 10%) a temperatura ambiente. La mezcla resultante se agitó durante toda la noche a temperatura ambiente bajo una atmósfera de hidrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. Una vez completada, la mezcla resultante se filtró y la torta del filtro se lavó con CH2Ch/MeOH (10:1, 3 x 50 mL). El filtrado se concentró a presión reducida y después se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice, eluyendo con CH2Ch / MeOH (gradiente de 0 a 10% en 30 min) para obtener 6-fluoro-4-oxo-2H,3H,5H-furo[3,2-c] quinolina-7-carboxilato de metilo (70 mg, 34,7%). LC-MS: (ES+H,m/z):[M+H] =263.95; 1H NMR (300 MHz, DMSO-de) 8 11.68 (s, 1H), 7.58 (dd,J =8.4, 6.1 Hz, 1H), 7.49 (d,J =8.5 Hz, 1H), 4.85 (t,J =9.4 Hz, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.10 (t,J =9.4 Hz, 2H). 19F NMR (377 MHz, DMSO-de) 8 -124.45.

Etapa 2: Preparación de 6-fluoro-7-(hidroximetilo)-2H,3H,5H-furo[3,2-c] quinolin-4-ona:

[0151]A una solución agitada de 6-fluoro-4-oxo-2H,3H,5H-furo[3,2-c] quinolina-7-carboxilato de metilo (60 mg, 0,22 mmol, 1,00 equiv.) en THF (5 mL) se añadió LiAlH4 (0,18 mL, 0,45 mmol, 2,00 equiv., 2,5M en THF) gota a gota a 0°C bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante 2 h a 0°C bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La reacción se extinguió añadiendo HCl (aq.) (1M, 0,5 mL) a 0°C. La mezcla resultante se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice, eluyendo con CH2Cl2 / MeOH (gradiente de 0 a 10% en 30 min) para obtener 6-fluoro-7-(hidroximetilo)-2H,3H,5H-furo[3,2-c] quinolin-4-ona (50 mg, 93,2%). LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H] = 236.0.

Etapa 3: Preparación de 7-(clorometilo)-6-fluoro-2H,3H,5H-furo[3,2-c] quinolin-4-ona:

[0152]A una solución agitada de 6-fluoro-7-(hidroximetilo)-2H,3H,5H-furo[3,2-c] quinolin-4-ona (50 mg, 0,21 mmol, 1,00 equiv.) y DMF (2 mg, 0,02 mmol, 0,10 equiv.) en DCM (10 mL) se añadió SOCh (253 mg, 2,13 mmol, 10,00 equiv.) gota a gota a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante toda la noche a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla resultante se concentró a presión reducida para obtener 7-(clorometilo)-6-fluoro-2H,3H,5H-furo[3,2-c] quinolin-4-ona (50 mg, 92,7%). LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H]+ = 254.0.

Etapa 4: Preparación de 6-fluoro-5-[4-({6-fluoro-4-oxo-2H,3H,5H-furo[3,2-c] quinolin-7-ilo} metilo) piperazin-1-ilo]-N-metilpiridina-2-carboxamida:

[0153]Una solución de 6-fluoro-N-metilo-5-(piperazin-1-ilo) piridina-2-carboxamida (47 mg, 0,19 mmol, 1,00 equiv) en MeCN (3 mL) se trató con DIEA (102 mg, 0,78 mmol, 4,00 equiv.) durante 5 min a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno seguido de la adición de KI (3 mg, 0,02 mmol, 0,10 equiv.) y 7-(clorometilo)-6-fluoro-2H,3H,5H-furo[3,2-c] quinolin-4-ona (50 mg, 0,19 mmol, 1,00 equiv.). La mezcla resultante se agitó durante 2 h a 80°C bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente. La mezcla resultante se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (CH2Cl2 / MeOH (gradiente de 0 a 10% en 30 min)) para obtener 6-fluoro-5-[4-({6-fluoro-4-oxo-2H,3H,5H-furo[3,2-c] quinolin-7-ilo} metilo) piperazin-1-ilo]-N-metilpiridina-2-carboxamida (44,0 mg, 47,7%). LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H] = 456.05; 1H NMR (300 MHz, DMSO-dej 6 11.42 (s, 1H), 8.40 (d,J =5.0 Hz, 1H), 7.84 (dd,J =8.1, 1.4 Hz, 1H), 7.55 (dd,J =10.6, 8.1 Hz, 1H), 7.41 (d,J =8.2 Hz, 1H), 7.27 - 7.19 (m, 1H), 4.82 (t,J= 9.3 Hz, 2H), 3.69 (s, 2H), 3.18 - 3.15 (m, 4H), 3.07 (t,J =9.3 Hz, 2H), 2.76 (d,J =4.8 Hz, 3H), 2.60 - 2.57 (m, 4H). 19F NMR (377 MHz, DMSO-dej 6 -72.57, -132.99.

[0154]Los siguientes ejemplos se realizaron utilizando procedimientos similares a los mostrados parael Ejemplo 9.

(continuación)

Ejemplo 10

Etapa 1: Preparación de 1-(4-bromo-3-fluoro-2-nitrofenilo)pirrol-2-carboxilato de metilo:

[0156]A una solución agitada de pirrol-2-carboxilato de metilo (1,1 g, 8,791 mmol, 1 equiv.) y K2CO3 (2,4 g, 17,58 mmol, 2 equiv.) en DMF (10 mL) se añadió 1-bromo-2,4-difluoro-3-nitrobenceno (3,1 g, 13,19 mmol, 1,50 equiv.) a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante 2h a 100°C bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla resultante se vertió en agua (100 mL) y se extrajo con EtOAc (3 x 100 mL). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (3x150 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron, y se concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (PE / EtOAc (0-30%)) para obtener el producto bruto. El producto bruto (2,5 g) se purificó mediante Prep-HPLC (Columna: YMC-Triart Prep C18-S, 100*250 mm, S-100|jm, 120A; Fase móvil A: Agua (0,05% NHa.H2O+12 ,5 mmol/L NH4HCO3), Fase móvil B: MeOH; Caudal: 120 mL/min; Gradiente: 45% B a 85% B en 40 min, 74% B; Longitud de onda: 254/220 nm; RT1 (min): 27;) para obtener 1-(4-bromo-3-fluoro-2-nitrofenilo)pirrol-2-carboxilato de metilo (1,2 g, 38,8%). LC-MS: (ES+H,m/z):[M+H]+= 342.95; 1H NMR (300 MHz, DMSO-de) 68.19 (dd,J= 8.7, 7.3 Hz, 1H), 7.53 (dd,J=8.7, 1.8 Hz, 1H), 7.32 (dd,J =2.8, 1.7 Hz, 1H), 7.07 (dd,J =3.9, 1.7 Hz, 1H), 6.42 (dd,J =3.9, 2.8 Hz,1H), 3.64 (s, 3H).

Etapa 2: Preparación de 7-bromo-6-fluoro-5H-pirrolo[1,2-a]quinoxalin-4-ona:

[0157]A una solución agitada de 1-(4-bromo-3-fluoro-2-nitrofenilo)pirrol-2-carboxilato de metilo (1,1 g, 3,206 mmol, 1 equiv.) y Fe (895 mg, 16,030 mmol, 5 equiv.) en AcOH (10 mL) a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante 2 h a 75 °C bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla resultante se filtró y la torta del filtro se lavó con MeOH (2x10 mL). El filtrado se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice, eluyendo con CH2Ch / MeOH (1 :0- 10 : 1 ) para producir 7-bromo-6-fluoro-5H-pirrolo[1,2-a]quinoxalin-4-ona (800 mg, 88,7%). LC-MS: (ES+H,m/z):[M+H]+= 281.0; 1H NMR (300 MHz, DMSO-de) 6 11.47 (s, 1H), 8.22 (dd,J =2.9, 1.5 Hz, 1H), 7.89 (dd,J =9.0, 1.7 Hz, 1H), 7.50 (dd,J =8.9, 6.8 Hz, 1H), 7.11 (dd,J =3.9, 1.4 Hz, 1H), 6.74 (dd,J =3.9, 2.8 Hz, 1H).

Etapa 3: Preparación de 6-fluoro-7-(hidroximetilo)-5H-pirrolo[1,2-a]quinoxalin-4-ona:

[0158]A una solución agitada de 7-bromo-6-fluoro-5H-pirrolo[1,2-a]quinoxalin-4-ona (380 mg, 1,352 mmol, 1,00 equiv.) y (tributilestannil)metanol (521 mg, 1,622 mmol, 1,2 equiv.) en 1,4-dioxano (10 mL) se añadió XPhos Pd G2 (53 mg, 0,068 mmol, 0,05 equiv.) a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante 16h a 80°C bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla resultante se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (CH2C h/ MeOH (0-20%)) para obtener 6- fluoro-7-(hidroximetilo)-5H-pirrolo[1,2-a]quinoxalin-4-ona (250 mg, 79,6%). LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H]+= 233.3; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) 6 11.28 (s, 1H), 8.18 (dd,J= 2.9, 1.5 Hz, 1H), 7.88 (dd,J= 8.6 , 1.4 Hz, 1H), 7.26 (dd,J = 8.5, 7.2 Hz, 1H), 7.08 (dd,J =3.9, 1.4 Hz, 1H), 6.71 (dd,J=3.9, 2.8 Hz, 1H), 5.36 (t,J =5.8 Hz, 1H), 4.61-4.59 (m, 2H).

Etapas 4-5: Preparación de 6-fluoro-5-[4-({6-fluoro-4-oxo-5H-pirrolo[1,2-a]quinoxalin-7-ilo}-metilo)piperazin-1-ilo]-N-metilpiridina-2-carboxamida:

[0159]A una solución agitada de 6-fluoro-7-(hidroximetilo)-5H-pirrolo[1,2-a]quinoxalin-4-ona (150 mg, 0,646 mmol, 1 equiv.) y SOCh (384 mg, 3,230 mmol, 5 equiv.) en DCM (5 mL) se añadió DMF (9 mg, 0,129 mmol, 0,2 equiv.) a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante 1h a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla resultante se concentró a presión reducida. La mezcla cruda resultante se utilizó en la siguiente etapa directamente sin más purificación. A una solución agitada de 7- (clorometilo)-6-fluoro-5H-pirrolo[1,2-a]quinoxalin-4-ona (cruda) y 6-fluoro-N-metilo-5-(piperazin-1-ilo)piridin-2-carboxamida (142 mg, 0,598 mmol, 1 equiv.,1 eq de sal HCl) en MeCN (5 mL) se añadieron KI (10 mg, 0,060 mmol, 0,1 equiv.) y DIEA (232 mg, 1,794 mmol, 3 equiv.) a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante 5h a 80°C bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla resultante se vertió en agua (20 mL), se extrajo con CH2Ch (3 x 50 mL). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (2x10 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron. El producto bruto (300 mg) se purificó por Prep-HPLC (Columna: Columna Xselect CSH C18 OBD 30* 150mm 5|jm; Fase móvil A: Agua (0,1% de ácido fórmico), Fase móvil B: MeOH-----Preparativo; Caudal: 60 mL/min; Gradiente: 21% B a 36% B en 9 min, 36% B; Longitud de onda: 254/220 nm; RT1 (min): 8,12;) para producir 6-fluoro-5-[4-({6-fluoro-4-oxo-5H-pirrolo[1,2-a]quinoxalin-7-ilo}metilo)piperazin-1-ilo]-N-metilpiridina-2-carboxamida (54 mg, 19,3%). LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H]+ = 453.15; 1H NMR (300 MHz, DMSO-da) 8 11.30 (s, 1H), 8.40 (q,J =4.9 Hz, 1H), 8.20 (dd,J =2.9, 1.5 Hz, 1H), 7.96 -7.77 (m, 2H), 7.56 (dd,J =10.6, 8.1 Hz, 1H), 7.23 (t,J =8.1 Hz,1H), 7.09 (dd,J =3.9, 1.4 Hz, 1H), 6.72 (t,J =3.6 Hz, 1H), 3.66 (s, 2H), 3.17 (t,J =4.6 Hz, 4H), 2.76 (d,J =4.8 Hz, 3H), 2.60 (t,J =4.8 Hz, 4H). 19F NMR (282 MHz, DMSO-d6) 8 -72.56, -131.51.

Ejemplos 19 y 20

[0160]

Etapa 1: Preparación de 2-amino-4-bromo-3-fluorobenzoato de metilo:

[0161]Una solución de ácido 2-amino-4-bromo-3-fluorobenzoico (15,00 g, 64,09 mmol, 1,00 equiv.) en DMF (200 mL) se trató con DIEA (33,14 g, 256,38 mmol, 4,00 equiv.) durante 5 min a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno seguida de la adición de CH3I (16,38 g, 115,37 mmol, 1,80 equiv.) gota a gota a temperatura ambiente. La mezcla resultante se agitó durante toda la noche a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla resultante se diluyó con EtOAc (1000 mL). La mezcla resultante se lavó con salmuera (3 x 500 mL) y las capas orgánicas combinadas se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (PE / EtOAc (gradiente de 0% a 20% en 30 min)) para obtener 2-amino-4-bromo-3-fluorobenzoato de metilo (12,30 g, 73,4%). LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H]+= 247.8/249.8; 1H NMR (300 MHz, DMSO-dej 87.48 (dd, J=8.8 , 1.7 Hz, 1H), 6.93 - 6.22 (m, 3H), 3.82 (s, 3H).

Etapa 2: Preparación de 4-bromo-2-acetamido-3-fluorobenzoato de metilo:

[0162]A una solución agitada de 2-amino-4-bromo-3-fluorobenzoato de metilo (12,30 g, 49,58 mmol, 1,00 equiv.) en MeCN (100 mL) se añadió cloruro de acetilo (5,84 g, 74,38 mmol, 1,50 equiv.) gota a gota a 0°C bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante 3h a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla resultante se concentró a presión reducida. El residuo se purificó por trituración con EtOAc (50 mL) para obtener 4-bromo-2-acetamido-3-fluorobenzoato de metilo (9,00 g, 73,4%). LC-MS: (ES+H, m/z):

[M+H]+ = 290.2/290.2.

Etapa 3: Preparación de 7-bromo-8-fluoro-4-hidroxi-1H-quinolin-2-ona:

[0163]A una solución agitada de 4-bromo-2-acetamido-3-fluorobenzoato de metilo (9,50 g, 32,74 mmol, 1,00 equiv.) en THF (80 mL) se añadió LiHMDS (81 mL, 1,0 mol/L, 2,50 equiv.) gota a gota a -78°C bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante 2 h a 0°C bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La reacción se extinguió con agua a 0°C. La mezcla resultante se diluyó con agua (100 mL) y se acidificó a pH 5 con HCl (ac.). Los sólidos precipitados se recogieron por filtración y se lavaron con agua (2 x 50 mL) para proporcionar 7-bromo-8-fluoro-4-hidroxi-1H-quinolin-2-ona (6,40 g, 76,9%). LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H]+ = 257.8/259.8.

Etapa 4: Preparación de (3Z)-7-bromo-3-[(dimetilamino)metilideno]-8-fluoro-1H-quinolina-2,4-diona:

[0164]Una solución de 7-bromo-8-fluoro-4-hidroxi-1H-quinolin-2-ona (6,50 g, 25,18 mmol, 1,00 equiv.) y DMF-DMA (4,50 g, 37,78 mmol, 1,50 equiv.) en tolueno (70 mL) se agitó durante 24h a 80°C bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente. Los sólidos precipitados se recogieron por filtración, se lavaron con tolueno (3 x 30 mL) y se secaron al vacío para obtener (3Z)-7-bromo-3-[(dimetilamino)metilideno]-8-fluoro-1H-quinolina-2,4-diona (2,50 g, crudo). El producto bruto se utilizó en la siguiente etapa directamente sin más purificación. LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H]+ = 313.2/315.2.

Etapa 5: Preparación de 7-bromo-4-cloro-8-fluoro-2-oxo-1H-quinolina-3-carbaldehído:

[0165]Una solución de (3Z)-7-bromo-3-[(dimetilamino)metilideno]-8-fluoro-1H-quinolina-2,4-diona (2,50 g, 7,98 mmol, 1,00 equiv.) y POCh (1,46 g, 9,58 mmol, 1 ,20 equiv.) en DMF (40 mL) se agitó durante 10 min a 0°C bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante 24h a 60°C bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla resultante se diluyó con agua (50 mL) a 0°C. Los sólidos precipitados se recogieron por filtración y se lavaron con agua (3 x 20 mL) para obtener 7-bromo-4-cloro-8-fluoro-2-oxo-1H-quinolina-3-carbaldehído (2,25 g, crudo). El producto bruto se utilizó en la siguiente etapa directamente sin más purificación. LC-MS: (ES+H, m/z):

[M+H]+ = 303.8/305.8.

Etapa 6: Preparación de 7-bromo-6-fluoro-1-metilo-5H-pirazolo[4,3-c]quinolin-4-ona y 7-bromo-6-fluoro-2-metilo-5H-pirazolo[4,3-c]quinolin-4-ona:

[0166]Una solución de 7-bromo-4-cloro-8-fluoro-2-oxo-1H-quinolina-3-carbaldehído (2,25 g, 7,38 mmol, 1,00 equiv.), K2CO3 (2,04 g, 14,77 mmol, 2,00 equiv.) y metilhidrazina (1,28 g, 8,86 mmol, 1,20 equiv.) en DMF (25 mL) se agitó durante la noche a 80°C bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente. Los sólidos precipitados se recogieron por filtración y se lavaron con agua (3 x 50 mL). El sólido resultante se secó al vacío para obtener una mezcla de 7-bromo-6-fluoro-1-metilo-5H-pirazolo[4,3-c]quinolin-4-ona y 7-bromo-6-fluoro-2-metilo-5H-pirazolo[4,3-c]quinolin-4-ona (3,50 g, bruto). El producto bruto se utilizó en la siguiente etapa directamente sin más purificación. LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H]+ = 295.9/297.9. 1H NMR (300 MHz, DMSO-dej 6 11.38 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.97 (dd, J=8.8 , 1.5 Hz, 1H), 7.55 (dd, J=8.8 , 6.5 Hz, 1H), 4.35 (s, 3H).

Etapa 7: Preparación de 6-fluoro-7-(hidroximetilo)-1-metilo-5H-pirazolo[4,3-c]quinolin-4-ona y 6-fluoro-7-(hidroximetilo)-2-metilo-5H-pirazolo[4,3-c]quinolin-4-ona:

[0167]Una solución de 7-bromo-6-fluoro-1-metilo-5H-pirazolo[4,3-c]quinolin-4-ona y 7-bromo-6-fluoro-2-metilo-5H-pirazolo[4,3-c]quinolin-4-ona (3,5 g, 11,82 mmol, 1,00 equiv.), Precatalizador XPhos de 2.a Generación (930 mg, 1,18 mmol, 0,10 equiv.) y (tributilstannil)metanol (4,55 g, 14,18 mmol, 1,20 equiv.) en dioxano (20 mL) se agitó durante la noche a 80°C bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente. La mezcla resultante se concentró al vacío y el residuo bruto se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (CH2C h / MeOH (gradiente de 0% a 10% en 20 min)) para obtener 6-fluoro-7-(hidroximetilo)-1-metilo-5H-pirazolo[4,3-c]quinolin-4-ona y 6-fluoro-7-(hidroximetilo)-2-metilo-5H-pirazolo[4,3-c]quinolin-4-ona (mezcla, 700 mg, 23,9%). LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H]+ = 247.9.

Etapa 8: Preparación de 7-(clorometilo)-6-fluoro-1-metilo-5H-pirazolo[4,3-c]quinolin-4-ona y 7-(clorometilo)-6-fluoro-2-metilo-5H-pirazolo[4,3-c]quinolin-4-ona:

[0168]A una solución agitada de 6-fluoro-7-(hidroximetilo)-1-metilo-5H-pirazolo[4,3-c]quinolin-4-ona y 6-fluoro-7-(hidroximetilo)-2-metilo-5H-pirazolo[4,3-c]quinolin-4-ona (700 mg, 2,83 mmol.83 mmol, 1,00 equiv.) y DMF (20 mg, 0,28 mmol, 0 ,10 equiv.) en Dc M (10 mL) se añadió SOCh (3368 mg, 28,31 mmol, 10,00 equiv.) gota a gota a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante 2 h a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla resultante se concentró al vacío para obtener 7-(clorometilo)-6-fluoro-1-metilo-5H-pirazolo[4,3-c]quinolin-4-ona y 7-(clorometilo)-6-fluoro-2-metilo-5H-pirazolo[4,3-c]quinolin-4-ona (700 mg, bruto). El producto bruto se utilizó en la siguiente etapa directamente sin más purificación. LCMS: (ES+H, m/z): [M+H]+ = 265.95.

Etapa 9: Preparación de 6-fluoro-5-[4-({6-fluoro-1-metilo-4-oxo-5H-pirazolo[4,3-c]qumolm-7-ilo}-metilo)piperazm-1-ilo]-N-metilpiridina-2-carboxamida y 6-fluoro-5-[4-({6-fluoro-2-metilo-4-oxo-5H-pirazolo[4,3-c]qumolm-7-ilo}-metilo)piperazm-1-ilo]-N-metilpiridma-2-carboxamida:

[0169]Una solución de 7-(dorometilo)-6-fluoro-1-metilo-5H-pirazolo[4,3-c]quinolin-4-ona y 7-(clorometilo)-6-fluoro-2-metilo-5H-pirazolo[4,3-c]quinolin-4-ona (700 mg, 2,63 mmol, 1,00 equiv.), KI (43 mg, 0,26 mmol, 0,10 equiv.), DIEA (1702 mg, 13,17 mmol, 5,00 equiv.) y 6-fluoro-N-metilo-5-(piperazin-1-ilo)piridin-2-carboxamida (627 mg, 2,63 mmol, 1,00 equiv.) en MeCN (20 mL) se agitó durante 3 h a 80°C bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente. Los sólidos precipitados se recogieron por filtración y se lavaron con CH3CN (3 x 10 mL) para obtener el producto bruto. Los productos brutos se purificaron mediante HPLC (Columna: YMC-Actus Triart C18 ExRS, 30*150 mm, 5pm; Fase móvil A: Agua (10 mmol/L NH4HCO3+0 ,1 %NH3.H2O), Fase móvil B: MeOH-— Preparativo; Caudal: 60 mL/min; Gradiente: 45% B a 56% B en 13 min, 56% B; Longitud de onda: 254/220 nm) para obtener 6-fluoro-5-[4-({6-fluoro-1-metilo-4-oxo-5H-pirazolo[4,3-c]quinolin-7-ilo}metilo)piperazin-1-ilo]-N-metilpiridina-2-carboxamida (Ejemplo 19, 54 mg, 4,35 %) y 6-fluoro-5-[4-({6-fluoro-2-metilo-4-oxo-5H-pirazolo[4,3-c]quinolin-7-ilo}metilo)piperazin-1-ilo]-N-metilpiridina-2-carboxamida (Ejemplo 20, 1,8 mg, 0,14 %).

[0170] Ejemplo 19:LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H]+ =468.05; 1H NMR (400 MHz, DMSO-de) 6 11.34 (s, 1H), 8.40 (d,J =5.1 Hz, 1H), 8.13 (s, 1H), 8.02 (d,J =8.4 Hz, 1H), 7.84 (dd,J =8.0, 1.4 Hz, 1H), 7.56 (dd,J =10.6, 8.1 Hz, 1H), 7.34 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 4.36 (s, 3H), 3.74 (s, 2H), 3.23 - 3.11 (m, 4H), 2.76 (d,J =4.8 Hz, 3H), 2.66 - 2.56 (m, 4H). 19F NMR (377 MHz, DMSO-de) 6 -72.56, -131.30.

[0171] Ejemplo 20:LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H]+ = 468.0; 1H NMR (400 MHz, DMSO-de) 6 11.05 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.40 (d,J =5.5 Hz, 1H), 7.82 (dd,J =16.8, 8.0 Hz, 2H), 7.55 (t,J =9.4 Hz, 1H), 7.24 (t,J= 7.4 Hz, 1H), 4.10 (s, 3H), 3.69 (s, 2H), 3.24 -3.08 (m, 4H), 2.76 (d,J =4.7 Hz, 3H), 2.66 -2.56 (m, 4H). 19F NMR (377 MHz, DMSO-de) 6-72.54, -132.86.

Ejemplo 25

[0172]

Etapa 1: Preparación de 1-bencilo-5-fluoro-1H-pirazol-3-carboxilato de etilo:

[0173]A una solución agitada de 3-fluoro-1H-pirazol-5-carboxilato de etilo (1,00 g, 2,10 mmol, 1,00 equiv.) y K2CO3 (1,75 g, 12,64 mmol, 2,00 equiv.) en DMF(10 mL) se añadió BnBr (2,16 g, 12,64 mmol, 2,00 equiv.) a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante 1h a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla resultante se diluyó con agua (120 mL). La mezcla resultante se extrajo con EtOAc (3 x 100 mL), se secó sobre Na2SO4 anhidro, se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice [PE/ EtOAc (gradiente de 0 a 30% en 30 min)] para obtener 1-bencilo-5-fluoro-1H-pirazol-3-carboxilato de etilo (1,3 g, 82,8%). LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H]+ = 249.1; 1H NMR (300 MHz, DMSO-de) 67.41 -7.24 (m, 3H), 7.23 -7.12 (m, 2H), 6.68 (d,J =6.1 Hz, 1H), 5.61 (s, 2H), 4.29 (q,J =7.1 Hz, 2H), 1.26 (t,J =7.1 Hz, 3H).

Etapa 2: Preparación del ácido 1-bencilo-5-fluoro-1H-pirazol-3-carboxílico:

[0174]A una solución agitada de 1-bencilo-5-fluoro-1H-pirazol-3-carboxilato de etilo (1,30 g, 8,22 mmol, 1,00 equiv.) en THF (10 mL) se añadió LiOH (984 mg, 41,10 mmol, 5,00 equiv., 2M en agua) a temperatura ambiente. La solución resultante se agitó durante 2 ha temperatura ambiente. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla se acidificó a pH 3 con HCl(aq.) 2N y la mezcla resultante se extrajo con EtOAc (3 x 100 mL), se secó sobre Na2SO4 anhidro, se filtró y se concentró para obtener ácido 1-bencilo-5-fluoro-1H-pirazol-3-carboxílico (1,10 g, 95,6%). LC-MS: (ES-H, m/z): [M-H]- = 219.0.

Etapa 3: Preparación de 1-bencilo-N-(3-bromo-2,6-difluorofenilo)-3-fluoro-1H-pirazol-5-carboxamida:

[0175]A una solución agitada de ácido 1-bencilo-5-fluoro-1H-pirazol-3-carboxílico (1,00 g, 4,54 mmol, 1,00 equiv.) y 3-bromo-2,6-difluoroanilina (1,13 g, 5,44 mmol, 1,20 equiv.) en T3P (2 mL, 50% en EA) se añadió DIEA (1,76 g, 13,62 mmol, 3.00 equiv.) a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante 2h a 100°C bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente. La mezcla resultante se diluyó con agua (20 mL) y se extrajo con EtOAc (3 x 20 mL). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice, eluyendo con PE/ EtOAc (gradiente de 0 a 20% en 30 min) para obtener 1-bencilo-N-(3-bromo-2,6-difluorofenilo)-3-fluoro-1H-pirazol-5-carboxamida (1,40 g, 96,3%). LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H]+= 409.9; 1H NMR (400 MHz, DMSO-dej 8 10.58 (s, 1H), 7.80-7.78 (m, 1H), 7.39-7.26 (m, 4H), 7.26-7.14 (m, 2H), 6.85 (d,J= 5.8 Hz, 1H), 5.61 (s, 2H).

Etapa 4: Preparación de 3-(2-bencilo-5-fluoropirazol-3-amido)-2,4-difluorobenzoato de etilo:

[0176]A una solución agitada de 2-bencilo-N-(3-bromo-2,6-difluorofenilo)-5-fluoropirazol-3-carboxamida (800 mg, 1,95 mmol, 1,00 equiv.) y Pd(dppf)Ch (142 mg, 0,19 mmol, 0,10 equiv.) en EtOH (6 mL) se añadió TEA (592 mg, 5,85 mmol, 3.00 equiv.) a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante 2 días a 110 °C en atmósfera de monóxido de carbono. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente. La mezcla resultante se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (PE/ EtOAc (gradiente de 0 a 20% en 30 min)) para obtener 3-(2-bencilo-5-fluoropirazol-3-amido)-2,4-difluorobenzoato de etilo (300 mg, 38,1%). LC-MS: (ES-H, m/z): [M-H]- = 402.1; 1H NMR (300 MHz, DMSO-dej 810.52 (s, 1H), 7.99-7.91 (m, 1H), 7.45-7.24 (m, 4H), 7.23-7.17 (m, 2H), 6.85 (d,J =5.9 Hz, 1H), 5.62 (s, 2H), 4.34 (q,J =7.1 Hz, 2H), 1.32 (t,J =7.1 Hz, 3H).

Etapa 5: Preparación de 2,4-difluoro-3-(3-fluoro-1H-pirazol-5-carboxamido)benzoato de etilo:

[0177]A una solución agitada de 3-(1-bencilo-3-fluoro-1H-pirazol-5-carboxamido)-2,4-difluorobenzoato de etilo (200 mg, 0,51 mmol, 1,00 equiv.) en MeOH (3 mL) y HCl 2M. (aq.) (0,2 mL) se añadió Pd(OH)2/C (72 mg, 0,10 mmol, 0,20 equiv., 20%) a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante toda la noche a temperatura ambiente bajo atmósfera de hidrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla resultante se filtró y la torta del filtro se lavó con MeOH (3x3 mL). El filtrado se concentró a presión reducida y el residuo bruto se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (PE/ EtOAc (gradiente de 0 a 20% en 30 min)) para obtener 2,4-difluoro-3-(3-fluoro-1H-pirazol-5-carboxamido)benzoato de etilo (240 mg, 39,0%). LC-MS: (ES-H, m/z): [M-H]' = 311.9; 1H NMR (300 MHz, DMSO-dej 8 13.57 (d,J =2.2 Hz, 1H), 10.46 (s, 1H), 8.07-7.80 (m, 1H), 7.44-7.37 (m, 1H), 6.76 (dd,J =6.2, 2.3 Hz, 1H), 4.34 (q,J =7.1 Hz, 2H), 1.32 (t,J =7.1 Hz, 3H).

Etapa 6: Preparación de 2,6-difluoro-4-oxo-4,5-dihidropirazolo[1,5-a]quinoxalina-7-carboxilato de etilo:

[0178]A una solución agitada de 2,4-difluoro-3-(5-fluoro-2H-pirazol-3-amido)benzoato de etilo (300 mg, 0,95 mmol, 1,00 equiv.) en DMA (4 mL) se añadió NaH (76 mg, 1,91 mmol, 2,00 equiv., 60% en aceite mineral) a 0°C bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante toda la noche a 120°C bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente. La mezcla resultante se diluyó con agua (40 mL). La mezcla resultante se extrajo con EtOAc (3 x 30 mL). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (2x40 mL), se secaron sobre Na2SO anhidro, se filtraron y se concentraron. El producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (PE/ EtOAc (gradiente de 0 a 30% en 30 min) para obtener 2,6-difluoro-4-oxo-4,5-dihidropirazolo[1,5-a]quinoxalina-7-carboxilato de etilo (160 mg, 56,9%). LC-MS: (ES-H, m/z): [M-H]- = 292.0; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) 8 12.32 (s, 1H), 7.88-7.83 (m, 1H), 7.80-7.75 (m, 1H), 7.08 (d,J= 5.6 Hz, 1H), 4.36 (q,J =7.1 Hz, 2H), 1.34 (t,J =7.1 Hz, 3H).

Etapa 7: Preparación de 2,6-difluoro-7-(hidroximetilo)pirazolo[1,5-a]quinoxalin-4(5H)-ona:

[0179]A una solución agitada de 2,6-difluoro-4-oxo-5H-pirazolo[1,5-a]quinoxalina-7-carboxilato de etilo (150 mg, 0,10 mmol, 1,00 equiv.) en THF(4 mL) se añadió LiEtaBH (1,5 mL, 1,53 mmol, 3,00 equiv., 1M en THF) gota a gota a 0°C bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante 2 h a 0°C bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La reacción se extinguió añadiendo agua (1mL) a 0°C. La mezcla resultante se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (PE/ EtOAc (gradiente de 40 a 70% en 30 min) para obtener 2,6-difluoro-7-(hidroximetilo)pirazolo[1,5-a]quinoxalin-4(5H)-ona (102 mg, bruto). LC-MS: (ES-H, m/z): [M-H]- = 250.0.

Etapa 8: Preparación de 7-(dorometMo)-2,6-difluoropirazolo[1,5-a]qumoxaMn-4(5H)-ona:

[0180]A una solución agitada de 2,6-difluoro-7-(hidroximetilo)-5H-pirazolo[1,5-a]quinoxalin-4-ona (90 mg, 0,35 mmol, 1,00 equiv.) y DMF (2 mg, 0,03 mmol, 0,10 equiv.) en CH2Ch (3mL) se añadió SOCh (255 mg, 2,14 mmol, 6,00 equiv.) gota a gota a 0°C bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante toda la noche a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. El filtrado se concentró a presión reducida para obtener 7-(clorometilo)-2,6-difluoropirazolo[1,5-a]quinoxalin-4(5H)-ona (90 mg, crudo). LC-MS: (ES-H, m/z): [M-H]- = 268.0.

Etapa 9: Preparación de 5-[4-({2,6-difluoro-4-oxo-5H-pirazolo[1,5-a]qumoxaMn-7-No}metMo)piperazm-1-No]-6-fluoro-N-metilpiridina-2-carboxamida:

[0181]A una solución agitada de 7-(clorometilo)-2,6-difluoro-5H-pirazolo[1,5-a]quinoxalin-4-ona (90 mg, 0,33 mmol, 1,00 equiv.) y clorhidrato de 6-fluoro-N-metilo-3-(piperazin-1-ilo)picolinamida (79 mg, 0,33 mmol, 1,00 equiv.) en MeCN (5 ml) se añadieron DIEA (215 mg, 1,67 mmol, 5,00 equiv.) y KI (5 mg, 0,03 mmol, 0,10 equiv.) a temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante 3h a 80°C bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente. Los sólidos precipitados se recogieron por filtración y se lavaron con MeOH (3x5 mL). Los sólidos precipitados se purificaron por trituración con MeOH (6 mL). Los sólidos precipitados se filtraron y se lavaron con MeOH (3x5 mL) para obtener 5-[4-({2,6-difluoro-4-oxo-5H-pirazolo[1,5-a]quinoxalin-7-ilo}metilo)piperazin-1-ilo]-6-fluoro-N-metilpiridina-2-carboxamida (82,3 mg, 50,4%). LC-MS: (ES+H, m/z):

[M+H]+ = 472.2; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) 8 12.17 (s, 1H), 8.41 (d,J= 4.9 Hz, 1H), 7.87 -7.72 (m, 2H), 7.56 (dd,J= 10.7, 8.1 Hz, 1H), 7.40 - 7.30 (m, 1H), 6.98 (d,J= 5.7 Hz, 1H), 3.69 (s, 2H), 3.18-3.15 (m, 4H), 2.76 (d,J =4.8 Hz, 3H), 2.63-2.60 (m, 4H). 19F NMR (282 MHz, DMSO-d 6) 8 - 72.59, -126.66, -131.30.

Ejemplo 28

[0182]

Etapa 1: Preparación de 4-fluoro-2H-pirazol-3-carboxilato de etilo:

[0183]A una solución agitada de ácido 4-fluoro-2H-pirazol-3-carboxílico (850 mg, 6,53 mmol, 1,00 equiv.) en EtOH (15 mL) se añadió SOCh (4,66 g, 39,21 mmol, 6,00 equiv.) a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante 1h a 70°C bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla resultante se concentró a presión reducida para obtener 4-fluoro-2H-pirazol-3-carboxilato de etilo (1,00 g, 96,7%). LC-MS: (ES-H, m/z): [M-H]-= 157.1; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) 8 7.60 (d,J= 4.5 Hz, 1H), 4.38 (q,J= 7.1 Hz, 2H), 1.35 (t,J= 7.1 Hz, 3H).

Etapa 2: Preparación de 1-bencilo-4-fluoro-1H-pirazol-3-carboxilato de etilo y 1-bencil-4-fluoro-1H-pirazol-5-carboxilato de etilo:

[0184]A una solución agitada de 4-fluoro-2H-pirazol-3-carboxilato de etilo (1,00 g, 6,32 mmol, 1,00 equiv.) y K2CO3 (2,62 g, 18,97 mmol, 3,00 equiv.) en DMF (30 mL) se añadió (bromometilo)benceno (2,16 g, 12,64 mmol, 2,00 equiv.) a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante 1h a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla resultante se diluyó con EtOAc (150 mL), se lavó con agua (2 x 100 mL), se secó sobre Na2SO4 anhidro, se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (PE/ EtOAc (gradiente de 0 a 30% en 30 min)) para obtener una mezcla de 1-bencilo-4-fluoro-1H-pirazol-3-carboxilato de etilo y 1-bencilo-4-fluoro-1H-pirazol-5-carboxilato de etilo (1,30 g, 82,8%). LC MS: (ES+H, m/z): [M+H]+ =249.0; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) 87.50 - 7.29 (m, 6 H), 7.28 - 7.20 (m, 4H), 5.69 (s, 1H), 5.32 (s, 2H), 4.46 (q,J =7.2 Hz, 2H), 4.36 (q,J =7.1 Hz, 1H), 1.43 (t,J =7.1Hz, 3H), 1.36 (t,J =7.1 Hz, 2H).

Etapa 3: Preparación de ácido 1-bencilo-4-fluoro-1H-pirazol-3-carboxílico y ácido 1-bencilo-4-fluoro-1H-pirazol-5-carboxílico:

[0185]A una solución agitada de 1-bencilo-4-fluoro-1H-pirazol-3-carboxilato de etilo y 1-bencilo-4-fluoro-1H-pirazol-5-carboxilato de etilo (1,30 g, 5,23 mmol, 1,00 equiv.) en THF (15 mL) se añadió LiOH (15 mL, 30,00 mmol, 5,73 equiv., 2M en agua) a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante 1h a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla resultante se diluyó con agua (100 mL) y se lavó con EtOAc (1x80 mL). La capa acuosa se acidificó a pH 6 con ácido cítrico. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (3x100 mL) y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron para obtener ácido 1-bencilo-4-fluoro-1H-pirazol-3-carboxílico y ácido 1-bencilo-4-fluoro-1H-pirazol-5-carboxílico (1,10 g, 95,4%). LC-MS: (ES-H, m/z): [M-H]- = 219.1.

Etapa 4: Preparación de 2-bencilo-N-(3-bromo-2,6-difluorofenilo)-5-fluoropirazol-3-carboxamida y 1-bencilo-N-(3-bromo-2,6-difluorofenilo)-4-fluoro-1H-pirazol-3-carboxamida:

[0186]A una solución agitada de ácido 1-bencilo-4-fluoro-1H-pirazol-3-carboxílico y ácido 1-bencilo-4-fluoro-1H-pirazol-5-carboxílico (1,10 g, 4,99 mmol, 1,00 equiv.) en T3P (40 mL, 50% en EA) se añadieron DIEA (1,94 g, 14,98 mmol, 3,00 equiv.) y 3-bromo-2,6-difluoroanilina (1,25 g, 5,99 mmol, 1,20 equiv.) a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante toda la noche a 100 °C bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente. La mezcla resultante se diluyó con EtOAc (120 mL). La mezcla resultante se lavó con 2x100 mL de agua, se secó sobre Na2SO4 anhidro, se filtró y se concentró. El producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (PE/ EtOAc (gradiente de 0 a 30% en 30 min)) para obtener una mezcla de 2-bencilo-N-(3-bromo-2,6-difluorofenilo)-5-fluoropirazol-3-carboxamida y 1-bencilo-N-(3-bromo-2.6- difluorofenilo)-4-fluoro-1H-pirazol-3-carboxamida (1,60 g, 78,0%). LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H]+= 410.0/412.0; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) 8 10.25 (s, 1H), 10.06 (s, 1H), 8.22 (d,J =4.4 Hz, 1H), 7.84 - 7.67 (m, 2H), 7.45 - 7.28 (m, 7H), 7.28 - 7.15 (m, 3H), 5.56 (s, 1H), 5.40 (s, 2H).

Etapa 5: Preparación de 3-(2-bencilo-4-fluoropirazol-3-amido)-2,4-difluorobenzoato de etilo y 3-(1-bencilo-4-fluoro-1H-pirazol-3-carboxamido)-2,4-difluorobenzoato de etilo:

[0187]A una solución de 2-bencilo-N-(3-bromo-2,6-difluorofenilo)-5-fluoropirazol-3-carboxamida y 1-bencilo-N-(3-bromo-2.6- difluorofenilo)-4-fluoro-1H-pirazol-3-carboxamida (1,20 g, 2,92 mmol, 1,00 equiv.) en EtOH (8 mL) se añadió Pd(dppf)Cl2 (214 mg, 0,29 mmol, 0,10 equiv.) en un tanque de presión. La mezcla se purgó con nitrógeno durante 10 min y luego se presurizó a 50 atm con monóxido de carbono a 120°C durante la noche. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se filtró para eliminar los sólidos insolubles. La mezcla resultante se concentró a presión reducida y se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (PE/ EtOAc (gradiente de 0 a 40% en 40 min)) para obtener una mezcla de 3-(2-bencilo-4-fluoropirazol-3-amido)-2,4-difluorobenzoato de etilo y 3-(1-bencil-4-fluoro-1H-pirazol-3-carboxamido)-2,4-difluorobenzoato de etilo (1,10 g, 93,2%). LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H]+ = 404.1; 1H NMR (400 MHz, DMSO-dej 8 10.18 (s, 1H), 10.00 (s, 2H), 8.21 (d,J =4.4 Hz, 2H), 7.99 -7.86 (m, 3H), 7.78 (d,J =4.3 Hz, 1H), 7.46 - 7.25 (m, 16H), 7.23 - 7.16 (m, 2H), 5.56 (s,2H), 5.40 (s, 4H), 4.38-4.3 (m, 6 H), 1.35-1.28 (m, 9H).

Etapa 6: Preparación de 2,4-difluoro-3-(4-fluoro-2H-pirazol-3-amido)benzoato de etilo:

[0188]A una solución de 3-(2-bencilo-4-fluoropirazol-3-amido)-2,4-difluorobenzoato de etilo y 3-(1-bencilo-4-fluoro-1H-pirazol-3-carboxamido)-2,4-difluorobenzoato de etilo (500 mg, 1,24 mmol, 1,00 equiv.) en 20 mL de MeOH/HCl=10:1 se añadió Pd(OH)2/C (1,04 g, 1,49 mmol, 1,20 equiv, 20%) en un depósito a presión. La mezcla se hidrogenó a temperatura ambiente bajo 30 psi de presión de hidrógeno durante toda la noche y después se filtró a través de una almohadilla de Celite® que se lavó de nuevo con DCM: MeOH=10:1 (3x50 mL). La mezcla resultante se concentró a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna de gel de sílice (PE/EtOAc (gradiente del 30 al 60 % en 30 min)) para obtener 2,4-difluoro-3-(4-fluoro-2H-pirazol-3-amido)benzoato de etilo (150 mg, 38,6 %). LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H]+ = 314.1.

Etapa 7: Preparación de 3,6-difluoro-4-oxo-5H-pirazolo[1,5-a]quinoxalina-7-carboxilato de etilo:

[0189]A una solución agitada de 2,4-difluoro-3-(4-fluoro-2H-pirazol-3-amido)benzoato de etilo (160 mg, 0,51 mmol, 1,00 equiv.) en DMF (10 mL) se añadió Cs2CO3 (499 mg, 1,53 mmol, 3,00 equiv.) a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante 2 h a 80°C bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente. La mezcla resultante se diluyó con agua (40 mL). La mezcla resultante se extrajo con CH2Ch: IPA=10:1 (3 x 30 mL). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (2x40 mL), se secaron sobre Na2SO anhidro, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice [PE/ EtOAc (gradiente de 0 a 40% en 40 min)] para obtener 3,6-difluoro-4-oxo-5H-pirazolo[1,5-a]quinoxalina-7-carboxilato de etilo (60 mg, 40,0%). LC-MS: (ES-H, m/z): [M-H]- = 292.0; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d a) 6 12.11 (s, 1H), 8.32 (d,J =3.8 Hz, 1H), 7.99 (dd,J =8.8 , 1.3 Hz, 1H), 7.77 (dd,J =8.8 , 6.9 Hz, 1H), 4.37 (q,J =7.1 Hz, 2H), 1.34 (t,J =7.1 Hz, 3H).

Etapa 8: Preparación de 3,6-difluoro-7-(hidroximetilo)-5H-pirazolo[1,5-a]quinoxalin-4-ona:

[0190]A una solución agitada de 3,6-difluoro-4-oxo-5H-pirazolo[1,5-a]quinoxalina-7-carboxilato de etilo (60 mg, 0,20 mmol, 1,00 equiv.) en THF (4 mL) se añadió LiEtaBH (0,61 mL, 0,61 mmol, 3,00 equiv., 1M en THF) gota a gota a 0°C bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante 2 h a 0°C bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La reacción se extinguió añadiendo agua (0,2 ml) a 0 °C. La mezcla resultante se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (CH2Ch/ MeOH (gradiente de 0 a 10% en 30 min)] para obtener 3,6-difluoro-7-(hidroximetilo)-5H-pirazolo[1,5-a]quinoxalin-4-ona (50 mg, 97,2%). LC MS: (ES-H, m/z): [M-H]' = 249.9.

Etapa 9: Preparación de 7-(clorometilo)-3,6-difluoro-5H-pirazolo[1,5-a]quinoxalin-4-ona:

[0191]A una solución agitada de 3,6-difluoro-7-(hidroximetilo)-5H-pirazolo[1,5-a]quinoxalin-4-ona (50 mg, 0,19 mmol, 1,00 equiv.) y DMF (1 mg, 0,02 mmol, 0,10 equiv.) en DCM (1 mL) se añadió SOCl2 (118 mg, 0,99 mmol, 5,00 equiv.) a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante 2h a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla resultante se concentró a presión reducida para obtener 7-(clorometilo)-3,6-difluoro-5H-pirazolo[1,5-a]quinoxalin-4-ona (50 mg, bruto). LC-MS: (ES-H, m/z): [M-H]- = 268.0.

Etapa 10: Preparación de 5-[4-({3,6-difluoro-4-oxo-5H-pirazolo[1,5-a]quinoxalin-7-ilo}metilo)piperazin-1-ilo]-6-fluoro-N-metilpiridina-2-carboxamida:

[0192]A una solución agitada de 7-(clorometilo)-3,6-difluoro-5H-pirazolo[1,5-a]quinoxalin-4-ona (50 mg, 0,18 mmol, 1,00 equiv.) y clorhidrato de 6-fluoro-N-metilo-5-(piperazin-1-ilo)piridina-2-carboxamida (50 mg, 0,18 mmol, 1,00 equiv.) en MeCN (3 mL) se añadieron KI (3 mg, 0,01 mmol, 0,10 equiv.) y DIEA (95 mg, 0,74 mmol, 4,00 equiv.) a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante 2 h a 80°C bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente. La mezcla resultante se diluyó con MeCN (5 mL) y los sólidos precipitados se recogieron por filtración y se lavaron con MeOH (3x3 mL). Los sólidos precipitados se purificaron por trituración con MeOH (4 mL), se filtraron y se lavaron con MeOH (3x2 mL). Los sólidos precipitados se purificaron mediante trituración con hexano (4 mL). Los sólidos precipitados se recogieron por filtración y se lavaron con MeOH (3x2 mL) para obtener 5-[4-({3,6-difluoro-4-oxo-5H-pirazolo[1,5-a]quinoxalin-7-ilo}metilo)piperazin-1-ilo]-6-fluoro-N-metilpiridina-2-carboxamida (42 mg, 46,9%). LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H]+ = 472.1; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) 6 11.95 (s, 1H), 8.40 (q,J =4.6 Hz, 1H), 8.22 (d,J =3.8 Hz, 1H), 7.91 (dd,J= 8.5, 1.3 Hz, 1H), 7.84 (dd,J =8.0, 1.5 Hz, 1H), 7.56 (dd,J= 10.6, 8.1 Hz, 1H), 7.35 (dd,J= 8.6 , 6.8 Hz, 1H), 3.69 (s, 2H), 3.19-3.16 (m, 4H), 2.76 (d,J =4.8 Hz, 3H), 2.63-2.59 (m, 4H). 19F NMR (282 MHz, DMSO-d 6) 6 -72.59, -130.76, - 168.39.

[0193]Los siguientes ejemplos se realizaron utilizando procedimientos similares a los mostrados para el Ejemplo 28.

Etapa 1: Preparación de 7-bromo-8-fluoro-1H-3,1-benzoxazina-2,4-diona:

[0195]A una mezcla agitada de ácido 2-amino-4-bromo-3-fluorobenzoico (50,00 g, 213,65 mmol, 1,00 equiv.) en THF (500 mL) se añadió carbonato de ditriclorometilo (31,70 g, 106,82 mmol, 0,50 equiv.) en THF (200 mL) gota a gota a 0°C bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante 2h a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla resultante se concentró a presión reducida. El residuo se disolvió en THF (100 mL), se agitó durante 30 min, y se concentró. El residuo se disolvió en hexano (100 mL). La mezcla resultante se agitó durante 30 min a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. Los sólidos precipitados se recogieron por filtración y se lavaron con hexano (3x100 mL). La mezcla resultante se concentró a presión reducida para obtener 7-bromo-8-fluoro-1H-3,1-benzoxazina-2,4-diona (54 g, 97,2%). LC-MS: (ES-H, m/z): [M-H]- = 257.8/259.8; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d a) 8 12.15 (s, 1H), 7.68 (dt,J =8.6 , 1.6 Hz, 1H), 7.53 (ddd,J =8.4, 6.0, 1.9 Hz, 1H). 19F NMR (377 MHz, DMSO-d 6) 8 -122.54.

Etapa 2: Preparación de 3-(2-amino-4-bromo-3-fluorobenzoil)dihidrofurano-2(3H)-ona-5,5-d2:

[0196]Preparación de dihidrofurano-2(3H)-ona-5,5-d2: A una solución agitada de anhídrido succínico (10,00 g, 100,02 mmol, 1,00 equiv.) en THF (200 mL) se añadió LiAlD4 (60 mL, 60,01 mmol, 0,60 equiv., 1M en THF) gota a gota a -55°C bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla se dejó calentar hasta 0°C y se agitó durante 1,5 h. La reacción se monitorizó mediante TLC (PE:EA=1:1). La reacción se apagó añadiendo HCl (aq. 6 M) (35 mL) a -15°C. La mezcla resultante se extrajo con CH2Ch (3 x 500 mL). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (2x300 mL), se secaron sobre MgSO4 anhidro, se filtraron y se concentraron para obtener dihidrofurano-2(3H)-ona-5,5-d2 (4,5 g, 51,0%). 1H NMR (400 MHz, CDCla) 82.56 - 2.47 (m, 2H), 2.31 - 2.20 (m, 2H).

[0197]A una mezcla agitada de 7-bromo-8-fluoro-1H-3,1-benzoxazina-2,4-diona (4,50 g, 17,30 mmol, 1,00 equiv.) y dihidrofurano-2(3H)-ona-5,5-d2 (2,29 g, 25,95 mmol, 1,50 equiv.) en THF (90 mL) se añadió LDA (30,29 mL, 60,57 mmol, 3,50 equiv, 2M en THF) gota a gota a -70°C bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante 1h a 0°C bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La reacción se apagó añadiendo MeOH (30 mL) a -15°C. La mezcla resultante se concentró a presión reducida. El producto bruto se utilizó en la siguiente etapa directamente sin más purificación. LC-MS: (ES-H, m/z): [M-H]- =301.9/303.9.

Etapa 3: Preparación de 7-bromo-8-fluoro-4-hidroxi-3-(2-hidroxietilo-2,2-d2)quinolin-2(1H)-ona:

[0198]A una solución agitada de 3-(2-amino-4-bromo-3-fluorobenzoil)dihidrofurano-2(3H)-ona-5,5-d2 (5,3 g, rendimiento supuesto del 100%, 17,42 mmol, 1,00 equiv.) en DMF (100 mL) se añadió K2CO3 (4,82 g, 34,85 mmol, 2,00 equiv.) a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante 2 h a 80°C bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente. La mezcla se diluyó con agua helada (800 mL) y luego se acidificó a pH 4 con ácido cítrico. La mezcla resultante se agitó durante 1h a temperatura ambiente. Los sólidos precipitados se recogieron por filtración, se lavaron con agua (3x100 mL) y se secaron para obtener 7-bromo-8-fluoro-4-hidroxi-3-(2-hidroxietilo-2,2-d2)quinolin-2(1H)-ona (3,5 g, 66,0%). LC-MS: (ES+H,m/z):[M+H]+ = 304.0/306.0; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) 8 11.55 (s, 1H), 7.60 (dd,J= 8.7, 1.4 Hz, 1H), 7.39 (dd,J= 8.7, 6.2 Hz, 1H), 2.79 (s, 2H).

Etapa 4: Preparación de 7-bromo-6-fluoro-3,5-dihidrofuro[3,2-c]quinolin-4(2H)-ona-2,2-d2:

[0199]A una mezcla agitada de 7-bromo-8-fluoro-4-hidroxi-3-(2-hidroxietilo-2,2-d2)quinolin-2(1H)-ona (3,00 g, 9,86 mmol, 1.00 equiv.) en DMA (30 mL) se añadió H2SO4 (3 mL) gota a gota a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante 3h a 140°C bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente. La mezcla resultante se diluyó con agua helada (500 mL) y se agitó durante 1h a temperatura ambiente. Los sólidos precipitados se recogieron por filtración y se lavaron con agua (3x100 mL). Se añadió MeOH (30 mL) y los sólidos precipitados se recogieron por filtración y se lavaron con MeOH (3x5 mL). El sólido resultante se secó para obtener 7-bromo-6-fluoro-3,5-dihidrofuro[3,2-c]quinolin-4(2H)-ona-2,2-d2 (1,34 g, 47,4%). LC-MS: (ES+H,m/z):[M+H]+ 285.9/287.9. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) 8 11.63 (s, 1H), 7.43 (dd,J= 8.6 , 6.0 Hz, 1H), 7.36 (dd,J= 8.6 , 1.2 Hz, 1H), 3.05 (s, 2H).

Etapa 5: Preparación de 6-fluoro-7-(hidroximetilo)-3,5-dihidrofuro[3,2-c]quinolin-4(2H)-ona-2,2-d2:

[0200]A una mezcla agitada de 7-bromo-6-fluoro-3,5-dihidrofuro[3,2-c]quinolin-4(2H)-ona-2,2-d2 (1,34 g, 4,68 mmol, 1,00 equiv.) y (tributilestannil)metanol (3,01 g, 9,36 mmol, 2,00 equiv.) en dioxano (10 mL) se añadió precatalizador XPhos de segunda generación (737 mg, 0,93 mmol, 0,20 equiv.) a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante toda la noche a 80°C en atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla resultante se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (CH2Ch / MeOH (gradiente de 0% a 5% en 30 min)) para obtener 6-fluoro-7-(hidroximetilo)-3,5-dihidrofuro[3,2-c]quinolin-4(2H)-ona-2,2-d2 (730 mg, 65,7%). LC-MS: (ES-H, m/z): [M-H]- = 238.0; 1H NMR (300 MHz, DMSO-de) 811.38 (s, 1H), 7.40 (d,J =8.1 Hz, 1H), 7.26 (dd,J =8.2, 6.3 Hz, 1H), 5.44 (s, 1H), 4.64 (s, 2H), 3.05 (s, 2H). 19F NMR (282 MHz, DMSO-d 6) 8-134.69.

Etapa 6: Preparación de 7-(clorometilo)-6-fluoro-3,5-dihidrofuro[3,2-c]quinolin-4(2H)-ona-2,2-d2:

[0201]A una mezcla agitada de 6-fluoro-7-(hidroximetilo)(2,2-2H2)-3H,5H-furo[3,2-c]quinolin-4-ona (711 mg, 2,99 mmol, 1.00 equiv.) en DCM (10 mL) se añadió SOCh (2139 mg, 17,98 mmol, 6,00 equiv.) gota a gota a 0°C bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante toda la noche a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla resultante se concentró a presión reducida para obtener 7(dorometilo)-6-fluoro-3,5-dihidrofuro[3,2-c]quinolin-4(2H)-ona-2,2-d2 (779 mg, bruto). LC-MS: (ES+H,m/z):[M+H]+ = 256.0.

Etapa 7: Preparación de 6-fluoro-5-(4-((6-fluoro-4-oxo-2,3,4,5-tetrahidrofuro[3,2-c]qumolm-7-Mo-2,2-d2)metilo)piperazin-1-ilo)-N-metilpicolinamida:

[0202]A una mezcla agitada de 7-(dorometNo)-6-fluoro-3,5-dihidrofuro[3,2-c]quinoNn-4(2H)-ona-2,2-d2 (779 mg, rendimiento asumido del 100 %, 3,04 mmol, 1,00 equiv.) y clorhidrato de 6-fluoro-N-metilo-5-(piperazin-1-ilo)piridina-2-carboxamida (837 mg, 3,04 mmol, 1,00 equiv.) en MeCN (30 mL) se añadieron DIEA (1,58 g, 12,18 mmol, 4,00 equiv.) y KI (51 mg, 0,30 mmol, 0,10 equiv.) a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante 2 h a 80°C bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. Los sólidos precipitados se recogieron por filtración y se lavaron con MeCN (3x20 mL). El residuo se trituró con DMSO (15 mL) y los sólidos precipitados se recogieron por filtración y se lavaron con MeOH (3x20 mL). El producto bruto (400 mg) se purificó por Prep-HPLC (Columna: Columna XBridge Shield C18 OBD, 19*250 mm, 10pm; Fase móvil A: Agua (10 mmol/L NH4HCO3+0 ,1 % NH3H2O), Fase móvil B: MeCN; Caudal: 100 mL/min; Gradiente: 10% B a 40% B en 30 min; Longitud de onda: 254/220 nm; RT1 (min): 10) para obtener 6-fluoro-5-(4-((6-fluoro-4-oxo-2,3,4,5-tetrahidrofuro[3,2-c]quinolin-7-ilo-2,2-d2)metilo)piperazin-1-ilo)-N-metilpicolinamida (239,5 mg, 17,1%, en dos etapas). LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H]+= 458.15; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d a) 811.42 (s, 1H), 8.41 (d,J =4.9 Hz, 1H), 7.84 (dd,J= 8.2, 1.4 Hz, 1H), 7.55 (dd,J =10.6, 8.1 Hz, 1H), 7.41 (d,J =8.1 Hz, 1H), 7.23 (dd,J =8.2, 6.1 Hz, 1H), 3.69 (s, 2H), 3.17 (d,J= 5.1 Hz, 4H), 3.06 (s, 2H), 2.76 (d,J =4.8 Hz, 3H), 2.58 (s, 4H). 19F NMR (282 MHz, DMSO-de) 8 -72.56, -132.97.

Ejemplo 32

[0203]

Etapa 1: Preparación de dihidrofurano-2(3H)-ona-4,4-d2:

[0204]Se disolvió sodio (1,2 g, 51,76 mmol, 1,54 equiv.) en metan-d3-ol-d (128 mL). Una vez consumido el sodio, se añadió ácido butanodioico, éster monometílico (4,4 g, 33,61 mmol, 1,00 equiv.), seguido de metano-d3-ol-d (68 mL). La solución se calentó a reflujo durante 24 h y después se enfrió en hielo, y se añadió ácido-d3 acético-d (1,2 g, 18,15 mmol, 0,54 equiv.). La solución se agitó durante 20 minutos y el disolvente se eliminóin vacuo.El sólido blanco se disolvió en agua (50 mL) y se enfrió en un baño de agua mientras se añadía lentamente NaBH4 (10,9 g, 289,02 mmol, 8,60 equiv.), seguido de más agua (15 mL). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 12,5 h y después se enfrió en hielo. Conc. HCl (29 mL), seguido de conc. HCl (5,9 mL) y la solución se calentó a 110 °C durante 1 h. Después se enfrió a temperatura ambiente, se saturó con NaCl y se extrajo con DCM (4 x 150 mL). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO4 y se concentraron para obtener dihidrofurano-2(3H)-ona-4,4-d2 (1,8 g, 60,8%). 1H NMR (300 MHz, CDCh) 84.35 (s, 2H), 2.49 (s, 2H).

E tapa 2& 3: P rep a ra c ión de7 -b ro m o -8 -flu o ro -4 -h id ro x i-3 -(2 -h id ro x ie tilo -1 ,1 -d 2 )q u in o lin -2 (1 H )-o n a :

[0205]A una mezcla agitada de 7-bromo-8-fluoro-1H-3,1-benzoxazina-2,4-diona (3,00 g, 11,54 mmol, 1,00 equiv.) en THF (20 mL) se añadió dihidrofurano-2(3H)-ona-4,4-d2 (1,20 g, 13,85 mmol, 1,20 equiv.) a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla se dejó enfriar hasta -70°C. A la mezcla anterior se añadió<l>D<a>(20 mL, 40,38 mmol, 3,50 equiv., 2M en THF) gota a gota durante 1 h a -70°C. La mezcla resultante se agitó durante 3 h adicionales a 0 °C. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La reacción se apagó añadiendo MeOH (20 mL) a 0°C y se concentró. Se añadió DMF (50 mL) al residuo seguido de K2CO3 (3,20 g, 23,15 mmol, 2,00 equiv.) a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante 3 h más a 80°C bajo atmósfera de nitrógeno y se enfrió a temperatura ambiente. La mezcla se diluyó con agua helada (500 mL), se acidificó a pH 4 con ácido cítrico y se agitó durante 1h a temperatura ambiente. Los sólidos precipitados se recogieron por filtración, se lavaron con agua (3x50 mL) y se secaron a 45°C para obtener 7-bromo-8-fluoro-4-hidroxi-3-(2-hidroxietilo-1,1-d2)quinolin-2(1H)-ona (1,9 g, 54,3%, en dos etapas). LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H]+ = 303.9.

Etapa 4: Preparation of7-bromo-6-fluoro-3,5-dihydrofuro[3,2-c]quinolin-4(2H)-ona-3,3-d2:

[0206]A una mezcla agitada de 7-bromo-8-fluoro-4-hidroxi-3-(2-hidroxietilo-1,1-d2)quinolin-2(1H)-ona (1,90 g, 6,25 mmol, 1,00 equiv.) en DMA (30 mL) se añadió conc. H2SO4 (3 mL) gota a gota a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno (nota: exotérmico). La mezcla resultante se agitó durante 3 h a 140 °C bajo atmósfera de nitrógeno, se enfrió a temperatura ambiente, y se vertió en agua helada. La mezcla resultante se agitó durante 30 minutos más a temperatura ambiente. Los sólidos precipitados se recogieron por filtración, se lavaron con agua (3x20 mL) y se secaron a 45°C para obtener 7-bromo-6-fluoro-3,5-dihidrofuro[3,2-c]quinolin-4(2H)-ona-3,3-d2 (1,1 g, 61,5%). LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H]+= 285.9/287.9; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d a) 811.61 (s, 1H), 7.53 -7.26 (m, 2H), 4.82 (s, 2H). 19F NMR (282 MHz, DMSO-d6) 8-121.96.

Etapa 5: Preparación de 6-fluoro-7-(hidroximetilo)-3,5-dihidrofuro[3,2-c]quinolin-4(2H)-ona-3,3-d2:

[0207]A una mezcla agitada de 7-bromo-6-fluoro-3,5-dihidrofuro[3,2-c]quinolin-4(2H)-ona-3,3-d2 (1,10 g, 3,85 mmol, 1,00 equiv.) y precatalizador XPhos de segunda generación (303 mg, 0,39 mmol, 0,10 equiv.) en dioxano (15 mL) se añadió (tributilestannil)metanol (1,50 g, 4,61 mmol, 1,20 equiv.) a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante 3h a 80°C bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla resultante se concentró a presión reducida y el producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (CH2Ch / MeOH (0%-10% en 30 min)) para obtener 6-fluoro-7-(hidroximetilo)-3,5-dihidrofuro[3,2-c]quinolin-4(2H)-ona-3,3-d2 (470 mg, 51,5%). LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H]+= 238.0; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) 8 11.37 (s, 1H), 7.41 (dd,J =8.2, 1.0 Hz, 1H), 7.26 (dd,J= 8.2, 6.3 Hz, 1H), 5.43 (t,J =5.8 Hz, 1H), 4.81 (s, 2H), 4.64 (dd,J =5.8, 1.6 Hz, 2H). 19F NMR (282 MHz, DMSO-dej 8 -135.04.

Etapa 6: Preparación de 7-(clorometilo)-6-fluoro-3,5-dihidrofuro[3,2-c]quinolin-4(2H)-ona-3,3-d2:

[0208]A una mezcla agitada de 6-fluoro-7-(hidroximetilo)-3,5-dihidrofuro[3,2-c]quinolin-4(2H)-ona-3,3-d2 (470 mg, 1,98 mmol, 1,00 equiv.) en DCM (15 mL) se añadió SOCh(0,9 mL, 11,89 mmol, 6,00 equiv.) gota a gota a 0°C bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante 5 h a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla resultante se diluyó con CH2Ch (10mL) y se concentró a presión reducida. El producto bruto se diluyó con THF (40 mL) y se concentró a presión reducida. El producto se purificó mediante trituración con MeCN (10 mL) para obtener 7-(clorometilo)-6-fluoro-3,5-dihidrofuro[3,2-c]quinolin-4(2H)-ona-3,3-d2 (560 mg, bruto). LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H]+ = 256.1

Etapa 7: Preparación de 6-fluoro-5-(4-((6-fluoro-4-oxo-2,3,4,5-tetrahidrofuro[3,2-c]quinolin-7-ilo-3,3-d2)metil)piperazin-1-ilo)-N-metilpicolinamida:

[0209]A una mezcla agitada de 7-(clorometilo)-6-fluoro-3,5-dihidrofuro[3,2-c]quinolin-4(2H)-ona-3,3-d2 (540 mg, 2,11 mmol, 1,00 equiv.) y clorhidrato de 6-fluoro-N-metilo-5-(piperazin-1-ilo)piridina-2-carboxamida (580 mg, 2,11 mmol, 1,00 equiv.) en MeCN (15 mL) se añadieron DIEA (1,10 g, 8,45 mmol, 4,00 equiv.) y KI (175 mg, 1,06 mmol, 0,50 equiv.) a temperatura ambiente. La mezcla resultante se agitó durante 2 h a 80°C bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente. La reacción se monitorizó mediante LCMS. La mezcla resultante se diluyó con MeCN (10 mL) y los sólidos precipitados se recogieron por filtración y se lavaron con MeCN (3x5 mL). El residuo se purificó por trituración con MeOH (10 mL). Los sólidos precipitados se recogieron por filtración y se lavaron con MeOH (3x10 mL). El residuo se purificó por trituración con DMSO (5mL). Los sólidos precipitados se recogieron por filtración y se lavaron con MeOH (3x10 mL). El sólido resultante se secó a presión reducida y el producto bruto (550 mg) se purificó por Prep-HPLC (Columna: Columna XBridge Shield C18 OBD, 19*250 mm, 10pm; Fase móvil A: Agua (10 mmol/L NH4HCO3+0 ,1 %NH3H2O), Fase móvil B: MeCN; Caudal: 100 mL/min; Gradiente: 10% B a 40% B en 30 min; Longitud de onda: 254/220 nm) para producir 6-fluoro-5-(4-((6-fluoro-4-oxo-2,3,4,5-tetrahidrofuro[3,2-c]quinolin-7-ilo-3,3-d2)metil)piperazin-1-ilo)-N-metilpicolinamida (409,8 mg, 42,0%). LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H]+= 458.15; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) 8 11.42 (s, 1H), 8.40 (d,J =5.0 Hz, 1H), 7.84 (dd,J =8.0, 1.5 Hz, 1H), 7.55 (dd,J =10.6, 8.1 Hz, 1H), 7.40 (d,J =8.1 Hz, 1H), 7.22 (dd,J= 8.2, 6.1 Hz, 1H), 4.81 (s, 2H), 3.69 (s, 2H), 3.16 (d,J =5.4 Hz, 4H), 2.76 (d,J =4.8 Hz, 3H), 2.59 (d,J =4.8 Hz, 4H). 19F NMR (282 MHz, DMSO-d 6) 8 -72.56, - 133.00.

Ejemplos Comparativos:

Ejemplo Comparativo 1 (Ejemplo 19 en WO2023025307)

[0210]

Etapa 1: Preparación de 4-[2-metilo-6-(metilcarbamoil) piridin-3-ilo]piperazina-1-carboxilato de terc-butilo:

[0211]Una mezcla de 5-bromo-N,6-dimetilpiridina-2-carboxamida (1,00 g, 4,37 mmol, 1,00 equiv), piperazina-1-carboxilato de terc-butilo (975 mg, 5,23 mmol, 1,20 equiv), BINAP (272 mg, 0,44 mmol, 0,10 equiv), Pd(OAc)2 (98 mg, 0,44 mmol, 0,10 equiv) y Cs2CO3 (3,56 g, 10,91 mmol, 2,50 equiv) en tolueno (20,00 mL) se agitó durante h a 80 °C en atmósfera de nitrógeno. La reacción se enfrió a temperatura ambiente. La mezcla resultante se filtró, la torta del filtro se lavó con EtOAc (100 mL). El filtrado se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante flash combinado inverso con las siguientes condiciones (70% de MeOH en agua con 0,1% de NH3H2O) para obtener 4-[2-metilo-6-(metilcarbamoil)piridin-3-ilo]piperazin-1-carboxilato de terc-butilo (1,17 g, 79,9%) como sólido blanco. LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H]+ = 335.3. 1H NMR (300 MHz, CD4OD) 87.89 (d,J= 8.2 Hz, 1H), 7.51 (d,J =8.3 Hz, 1H), 3.63 (t,J= 5.0 Hz, 4H), 2.97 (d,J= 4.4 Hz, 7H), 2.59 (s, 3H), 1.51 (s, 9H).

Etapa 2: Preparación de clorhidrato de N,6-dimetilo-5-(piperazin-1-ilo)picolinamida:

[0212]A una solución agitada de 4-[2-metilo-6-(metilcarbamoil)piridin-3-ilo]piperazina-1-carboxilato de terc-butilo (200 mg, 0,60 mmol, 1 equiv) en DCM (4 mL) se añadió HCl (gas)en 1,4-dioxano (4 mL, 16,00 mmol, 26,75 equiv, 4M) a temperatura ambiente. La solución resultante se agitó a rt durante 1h. LCMS estaba bien. La mezcla resultante se concentró a presión reducida para obtener clorhidrato de N,6-dimetilo-5-(piperazin-1-ilo)picolinamida (160 mg, crudo) como sólido blanco que se utilizó directamente en la etapa siguiente sin purificación adicional. LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H]+ = 235.2

Etapa 3: Preparación de 3-(furano-3-amido)-4-yodobenzoato de metilo:

[0213]Una mezcla de 3-amino-4-yodobenzoato de metilo (10,00 g, 36,09 mmol, 1,00 equiv), ácido 3-furoico (8,09 g, 72,18 mmol, 2,00 equiv), T3P (114,84 g, 180,46 mmol, 5,00 equiv, 50%wt en EA) y DIEA (23,32 g, 180,46 mmol, 5,00 equiv) en DCM (100 mL) se agitó durante la noche a 60 °C bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente. La mezcla resultante se diluyó con agua (150 mL) y se extrajo con EtOAc (3 x 150 mL). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (2 x 200 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro. Tras la filtración, el filtrado se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice, eluyendo con PE / EA (PE a 5:1) para obtener 3-(furano-3-amido)-4-yodobenzoato de metilo (6,80 g, 50,76%) como sólido blanco. LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H]+ = 372.0.

Etapa 4: Preparación de 3-[N-(terc-butoxicarbonilo)furano-3-amido]-4-yodobenzoato de metilo:

[0214]Una solución de 3-(furano-3-amido)-4-yodobenzoato de metilo (6,00 g, 16,167 mmol, 1,00 equiv), (Boc)2O (7,06 g, 32,34 mmol, 2,00 equiv) y DMAP (1,98 g, 16,17 mmol, 1,00 equiv) en DCE (100 mL) se agitó durante la noche a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se diluyó con EtOAc (250 mL) y se lavó con agua (2 x 200 mL). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (2 x 200 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro. Tras la filtración, el filtrado se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice, eluyendo con PE/EtOAc (PE a 3:1) para obtener 3-[N-(terc-butoxicarbonilo)furano-3-amido]-4-iodobenzoato de metilo (5,00 g, 65,63%) como sólido blanco. 1H NMR (300 MHz, DMSO-de) 88.31 (dd, 1H), 8.13 (d, 1H), 7.90 (d, 1H), 7.79 (t, 1H), 7.69 (dd, 1H), 6.79 (dd, 1H), 3.87 (s, 3H), 1.34 (s, 9H).

Etapa 5: Preparación de 4-oxo-5H-furo[3,2-c]quinolina-7-carboxilato de metilo:

[0215]A una mezcla de 3-[N-(terc-butoxicarbonilo)furano-3-amido]-4-yodobenzoato de metilo (400 mg, 0,85 mmol, 1,00 equiv) y PCy3 (48 mg, 0,17 mmol, 0,20 equiv) en DMF (12 mL) se añadieron Pd(OAc)2 (38 mg, 0,17 mmol, 0,20 equiv) y K2CO3 (235 mg, 1,70 mmol, 2,00 equiv) a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción final se irradió con radiación de microondas durante 2 h a 100 °C. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente. La mezcla resultante se diluyó con EtOAc (50 mL). La mezcla resultante se lavó con agua (2 x 25 mL). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (2x25 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro. Tras la filtración, el filtrado se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice, eluyendo con PE / EtOAc (100: 1 a 1:2) para obtener 4-oxo-5H-furo[3,2-c]quinolina-7-carboxilato de metilo (120 mg, 58,13%) como sólido amarillo. LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H]+ = 244.0.

Etapa 6: Preparación de 4-oxo-2H,3H,5H-furo[3,2-c]quinolina-7-carboxilato de metilo:

[0216]A una solución de 4-oxo-5H-furo[3,2-c]quinolina-7-carboxilato de metilo (480 mg, 1,97 mmol, 1,00 equiv) en MeOH/DCM (80 mL/20 mL) se añadió Pd/C (200 mg, 10%wt) bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla se hidrogenó a temperatura ambiente durante 2 días en atmósfera de hidrógeno. La mezcla de reacción se filtró a través de una almohadilla de Celite y el filtrado se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía combiflash inversa con las siguientes condiciones: columna, C18; fase móvil, MeCN en agua, gradiente de 20% a 50% en 10 min; detector, UV 220 nm para obtener 4-oxo-2H,3H,5H-furo[3,2-c]quinolina-7-carboxilato de metilo (170 mg, 35%) como sólido blanco. LC-MS: (ES+H, m/z):

[M+H]+ = 246.2.

Etapa 7: Preparación de 7-(hidroximetilo)-2H,3H,5H-furo[3,2-c]quinolin-4-ona:

[0217]A una solución agitada de 4-oxo-2H,3H,5H-furo[3,2-c]quinolina-7-carboxilato de metilo (170 mg, 0,69 mmol, 1,00 equiv) en THF (8 mL) se añadió LiAlH4 (0,55 mL, 1,39 mmol, 2,00 equiv, 2,5M en THF) gota a gota a 0°C bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante 2 h a 0°C bajo atmósfera de nitrógeno. La reacción se extinguió añadiendo HCl 1M aq (10 mL) a 0°C. La mezcla resultante se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice, eluyendo con CH2C h / MeOH (10 :1 a 2 :1 ) para obtener 7-(hidroximetilo)-2H,3H,5H-furo[3,2-c]quinolin-4-ona (150 mg, 100%) como sólido blanco. LC-MS: (ES+H,m/z):[M+H]+ = 218.0. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) 8 11.38 (s, 1H), 7.53 (d, 1H), 7.34 (s, 1H), 7.09 (dd, 1H), 5.40-5.36 (m, 1H), 4.79 (t, 2H), 4.56 (s, 2H), 3.03 (t, 2H).

Etapa 8: Preparación de 7-(clorometilo)-2H,3H,5H-furo[3,2-c]quinolin-4-ona:

[0218]A una solución agitada de 7-(hidroximetilo)-2H,3H,5H-furo[3,2-c]quinolin-4-ona (170 mg, 0,78 mmol, 1,00 equiv) y DMF (29 mg, 0,39 mmol, 0,50 equiv) en DCM (6 mL) se añadió cloruro de tionilo (744 mg, 6,26 mmol, 8,00 equiv) gota a gota a 0°C bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante toda la noche a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice, eluyendo con CH2Ch/MeOH (30:1 a 10:1) para obtener 7-(clorometilo)-2H,3H,5H-furo[3,2-c]quinolin-4-ona (160 mg, 87%) como sólido blanco. LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H]+ = 236.0.

Etapa 9: Preparación de N,6-dimetilo-5-[4-({4-oxo-2H,3H,5H-furo[3,2-c]quinolin-7-ilo}metilo)piperazin-1-ilo]piridina-2-carboxamida:

[0219]Una mezcla de 7-(clorometilo)-2H,3H,5H-furo[3,2-c]quinolin-4-ona (200 mg, 0,849 mmol, 1,00 equiv), clorhidrato de N,6-dimetilo-5-(piperazin-1-ilo)piridina-2-carboxamida (299 mg, rendimiento asumido del 100 %, 1,10 mmol, 1,30 equiv), DIEA (438,74 mg, 3,396 mmol, 4 equiv) y KI (14,09 mg, 0,085 mmol, 0,10 equiv) en MeCN (5 mL) se agitó durante 2 h a 80 °C en atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se diluyó con agua (15 mL) y se extrajo con CH2Ch: MeOH=10: 1 (3 x 20 mL). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con CH2Ch (3 x 5 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro y se filtraron. El filtrado se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice, eluyendo con CH2C h / MeOH (gradiente de 0 a 10% en 30 min) para obtener N,6-dimetilo-5-[4-({4-oxo2H,3H,5H-furo[3,2-c]quinolin-7-ilo}metilo)piperazin-1-ilo]piridina-2-carboxamida (100 mg) como sólido amarillo. El residuo se purificó por trituración con MeCN (5 mL). Los sólidos precipitados se recogieron por filtración y se lavaron con MeCN (1x1 mL) para obtener N,6-dimetilo-5-[4-({4-oxo-2H,3H,5H-furo[3,2-c]quinolin-7-ilo}metilo)piperazin-1-ilo]piridina-2-carboxamida (72 mg, 19,3%) como sólido blanco. LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H] =434.15. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d a) 6 11.34 (s, 1H), 8.41 (q,J= 4.8 Hz, 1H), 7.79 (d,J =8.2 Hz, 1H), 7.56 (d,J =8.1 Hz, 1H), 7.48 (d,J= 8.3 Hz, 1H), 7.35 (d,J =1.5 Hz, 1H), 7.17 (dd,J =8.2, 1.5 Hz, 1H), 4.79 (t,J= 9.2 Hz, 2H), 3.62 (s, 2H), 3.04 (t,J= 9.2 Hz, 2H), 2.95 (t,J =4.7 Hz, 4H), 2.80 (d,J =4.8 Hz, 3H), 2.58 (s, 4H), 2.49 (s, 3H).

Ejemplo Comparativo 2 (Ejemplo 18 en WO2023025307)

[0220]

Etapa 1: Preparación de 4-[6-(metoxicarbonilo)piridin-3-ilo]piperazina-1-carboxilato de terc-butilo:

[0221]A una mezcla agitada de 5-bromopiridina-2-carboxilato de metilo (10,00 g, 46,28 mmol, 1,00 equiv) y piperazina-1-carboxilato de terc-butilo (12,93 g, 69,43 mmol, 1,50 equiv) en 1,4-dioxano (100 mL) se añadieron Cs2CO3 (30,16 g, 92,57 mmol, 2,00 equiv) y RuPhos Palladacycle Gen.3 (1,94 g, 2,31 mmol, 0,05 equiv) a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante 5 h a 100°C bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente. La mezcla resultante se filtró y la torta de filtración se lavó con EA (300 mL). El filtrado se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice, eluyendo con PE / EA (20 ~ 50% en 25 min), la fracción pura se concentró al vacío para obtener 4-[6-(metoxicarbonilo)piridin-3-ilo]piperazin-1-carboxilato de terc-butilo (11 g, Y= 67,2%) como sólido blanco. LC-MS:

(ES+H, m/z): [M+H]+ = 322.2.

Etapa 2: Preparación de 4-[6-(metilcarbamoil)piridin-3-ilo]piperazina-1-carboxilato de terc-butilo:

[0222]Una solución de 4-[6-(metoxicarbonilo)piridin-3-ilo]piperazina-1-carboxilato de terc-butilo (5,00 g, 15,55 mmol, 1,00 equiv) en MeOH (50 mL) se trató con CH3NH2 (15 mL, 25~30% en agua) durante 10 min a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante toda la noche a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se concentró al vacío para obtener 4-[6-(metilcarbamoil)piridin-3-ilo]piperazina-1-carboxilato de terc-butilo (5 g, Y= 96,8%) como sólido amarillo. La mezcla resultante se utilizó en la siguiente etapa directamente sin más purificación. LC-MS: (ES+H, m/z):

[M+H]+ = 321.3.

Etapa 3: Preparación de 4-[2-cloro-6-(metilcarbamoil)piridin-3-ilo]piperazina-1-carboxilato de terc-butilo:

[0223]Una solución de 4-[6-(metilcarbamoil)piridin-3-ilo]piperazina-1-carboxilato de terc-butilo (5 g, 15,60 mmol, 1,00 equiv) en MeCN (30 mL) se trató con NCS (2,71 g, 20,28 mmol, 1,30 equiv) en MeCN (20 mL) durante 10 min a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante toda la noche a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice, eluyendo con PE / EA (20~50% en 25 min), la fracción pura se concentró al vacío para obtener 4-[2-cloro-6-(metilcarbamoil)piridin-3-ilo]piperazin-1-carboxilato de terc-butilo (3,5 g, Y= 63,2%) como sólido amarillo. LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H]+ =355.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) 6 8.45 (q,J= 4.7 Hz, 1H), 7.95 (d,J =8.1 Hz, 1H), 7.68 (d,J =8.2 Hz, 1H), 3.60 - 3.44 (m, 4H), 3.13 - 3.01 (m, 4H), 2.79 (d,J= 4.8 Hz, 3H), 1.43 (s, 9H).

E ta p a 4: P re p a ra c ió n d e c lo rh id ra to d e 6 -c lo ro -N -m etM o -5 -(p ip erazm -1 -M o )p irid m a-2 -c a rb o xa m id a :

[0224]Una solución de 4-[2-doro-6-(metilcarbamoil)piridin-3-ilo]piperazina-1-carboxilato de terc-butilo (300 mg, 0,84 mmol, 1,00 equiv) en DCM (3 mL) se trató con HCl en 1,4-dioxano (2 mL) durante 1 min a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante toda la noche a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se concentró al vacío para obtener clorhidrato de 6-cloro-N-metilo-5-(piperazin-1-ilo)piridina-2-carboxamida (251 mg, crudo) como sólido amarillo. La mezcla resultante se utilizó en la siguiente etapa directamente sin más purificación. LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H]+ =255.1.

Etapa 5: Preparación de 6-cloro-N-metilo-5-[4-({4-oxo-2H,3H,5H-furo[3,2-c]quinolin-7-ilo}-metilo)piperazin-1-ilo]piridina-2-carboxamida:

[0225]A una mezcla agitada de clorhidrato de 6-cloro-N-metilo-5-(piperazin-1-ilo)piridina-2-carboxamida (203 mg, 0,70 mmol, 1,50 equiv) y 7-(clorometilo)-2H,3H,5H-furo[3,2-c]quinolin-4-ona (110 mg, 0,46 mmol, 1,00 equiv) en MeCN (5 mL) se añadió KI (15 mg, 0,09 mmol, 0,20 equiv) y DIEA (301 mg, 2,33 mmol, 5,00 equiv) a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante 2 h a 80°C bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente. La mezcla resultante se filtró, la torta del filtro se lavó con CH2Ch/MeOH (10:1, 10mL). El filtrado se concentró a presión reducida. El producto bruto se purificó por Prep-HPLC con las siguientes condiciones (Columna: Columna XBridge Prep OBD C18, 30* 150 mm, 10pm; Fase móvil A: Agua (10mmol/L NH4HCO3 0,05% NH3H2O), Fase móvil B: MeOH; Caudal: 60 mL/min; Gradiente: 53% B a 68% B en 8 min; Longitud de onda: 254nm/220nm; RT1(min): 9.27). La fracción pura se concentró al vacío y se liofilizó para obtener 6-cloro-N-metilo-5-[4-({4-oxo-2H,3H,5H-furo[3,2-c]quinolin-7-ilo}metilo)piperazin-1-ilo]piridina-2-carboxamida (77,8 mg, Y=36,4%) como sólido blanco. LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H]+=454.20. 1H NMR (400 MHz, DMSO-dej 6 11.36 (s, 1H), 8.43 (q,J =4.7 Hz, 1H), 7.94 (d,J =8.1 Hz, 1H), 7.70 -7.63 (m, 1H), 7.56 (d,J =8.0 Hz, 1H), 7.34 (d,J =1.4 Hz, 1H), 7.16 (d,J =8.1, 1.7 Hz, 1H), 4.79 (t,J =9.2 Hz, 2H), 3.61 (s, 2H), 3.16 - 2.99 (m, 6 H), 2.79 (d,J= 4.7 Hz, 3H), 2.58 (s, 4H).

Ejemplo Comparativo 3 (Ejemplo 64 en WO2023025307)

[0226]

Etapa 1: Preparación de 4-(((trifluorometilo)sulfonilo)oxi)-2,5-dihidrofurano-3-carboxilato de metilo:

[0227]A una mezcla agitada de 4-oxotetrahidrofurano-3-carboxilato de metilo (5,00 g, 34,69 mmol, 1,00 equiv) en CH2Ch (50 mL) se añadió DIEA (7 mL, 41,63 mmol, 1,20 equiv) gota a gota a -78°C bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante 10 min a -78°C bajo atmósfera de nitrógeno. A la mezcla anterior se añadió Tf2O (7 mL, 41,63 mmol, 1,20 equiv) gota a gota a -78°C. La mezcla resultante se agitó durante 2h a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de sílice ge1, eluyendo con PE / EtOAc (gradiente de 0 a 20% en 30 min) para obtener 4-(((trifluorometilo)sulfonilo)oxi)-2,5-dihidrofurano-3-carboxilato de metilo (8,40 g, 87,6%) como líquido rojo. 1H NMR (400 MHz, CDCla) 84.91 (dd,J= 5.8, 4.5 Hz, 2H), 4.79 (dd,J= 5.9, 4.5 Hz, 2H), 3.83 (s, 3H). 19F NMR (377 MHz, CDCh) 8 -73.79.

Etapa 2: Preparación de 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-ilo)-2,5-dihidrofurano-3-carboxilato de metilo:

[0228]A una mezcla agitada de 4-(((trifluorometilo)sulfonilo)oxi)-2,5-dihidrofurano-3-carboxilato de metilo (8,20 g, 29,69 mmol, 1,00 equiv) y diborón bis(pinacolato) (9,05 g, 35,63 mmol, 1,20 equiv) en dioxano (300 mL) se añadieron Pd(dppf)Ch (1,09 g, 1,49 mmol, 0,05 equiv) y KOAc (8,74 g, 89,07 mmol, 3,00 equiv) a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante 2h a 100°C bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente. La mezcla resultante se filtró, la torta del filtro se lavó con EtOAc (3x100 mL). El filtrado se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel, eluyendo con PE / EtOAc (gradiente de 10% a 40% en 30 min) para obtener 4-(4,4,5,5-tetrametilo-1,3,2-dioxaborolan-2-ilo)-2,5-dihidrofurano-3-carboxilato de metilo (4,20 g, 55,6%) como aceite amarillo claro. LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H]+ =255.1. 1H NMR (300 MHz, CDCla) 84.93 (td,J= 5.2, 4.8, 1.0 Hz, 2H), 4.83 (td,J =5.2, 1.0 Hz, 2H), 3.78 (s, 3H), 1.36 (s, 12H).

Etapa 3: Preparación de 4-cloro-2-fluoro-6-nitroanilina:

[0229]Una mezcla de 2-fluoro-6-nitroanilina (2,00 g, 12,81 mmol, 1,00 equiv) y NCS (1,80 g, 13,45 mmol, 1,05 equiv) en DMF (20 mL) se agitó durante la noche a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se diluyó con EtOAc (300 mL). La capa orgánica se lavó con agua (3x100 mL), se secó sobre Na2SO4 anhidro. Tras la filtración, el filtrado se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice, eluyendo con PE / EtOAc (gradiente de 0 a 20% en 30 min) para obtener 4-cloro-2-fluoro-6-nitroanilina (1,80 g, 73,7%) como sólido amarillo. LC-MS: (ES-H, m/z): [M-H]- = 189.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 7.85 (t,J =2.2 Hz, 1H), 7.68 (dd,J =11.0, 2.5 Hz, 1H), 7.45 (s, 2H).

Etapa 4: Preparación de 2-bromo-5-cloro-1-fluoro-3-nitrobenceno:

[0230]Una mezcla de CuBr2 (3,99 g, 17,84 mmol, 2,00 equiv) y nitrito de terc-butilo (5,35 mL, 44,61 mmol, 5,00 equiv) en MeCN (15 mL) se agitó durante 10 min a 60°C bajo atmósfera de nitrógeno. A la mezcla anterior se añadió 4-cloro-2-fluoro-6-nitroanilina (1,70 g, 8,92 mmol, 1,00 equiv) en MeCN (10 mL) gota a gota a 60°C. La mezcla resultante se agitó durante 2 h más a 60°C. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente. La mezcla resultante se diluyó con agua (100 mL). La mezcla resultante se extrajo con EtOAc (3 x100 mL). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (3x100 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro. Tras la filtración, el filtrado se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice, eluyendo con PE / EtOAc (gradiente de 0 a 5% en 30 min) para obtener 2-bromo-5-cloro-1-fluoro-3-nitrobenceno (1,70 g, 74,8%) como sólido blanco. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) 8 8.19 - 8.13 (m, 1H), 8.05 (ddt,J =8.5, 2.3, 0.9 Hz, 1H).

Etapa 5: Preparación de 4-(4-cloro-2-fluoro-6-nitrofenilo)-2,5-dihidrofurano-3-carboxilato de metilo:

[0231]A una mezcla agitada de 2-bromo-5-cloro-1-fluoro-3-nitrobenceno (700 mg, 2,75 mmol, 1,00 equiv) y 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-ilo)-2,5-dihidrofuran-3-carboxilato de metilo (699 mg, 2,75 mmol, 1,00 equiv) en dioxano (20 mL) y H2O (1 mL) se añadieron Pd(dppf)Ch.CH2Ch (112 mg, 0,14 mmol, 0,05 equiv) y K2CO3 (1141 mg, 8,25 mmol, 3,00 equiv). La mezcla resultante se agitó durante toda la noche a 80°C en atmósfera de nitrógeno. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente. La mezcla resultante se diluyó con agua (200 mL). La mezcla resultante se extrajo con EtOAc (3 x 200mL). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (3x200 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro. Tras la filtración, el filtrado se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice, eluyendo con PE / EtOAc (gradiente de 0 a 20% en 30 min) para obtener 4-(4-cloro-2-fluoro-6-nitrofenilo)-2,5-dihidrofurano-3-carboxilato de metilo (300 mg, 36,1%) como sólido amarillo. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 88.22 (t,J =1.8 Hz, 1H), 8.13 (dd,J =9.2, 2.0 Hz, 1H), 4.91 (s, 4H), 3.55 (s, 3H).

Etapa 6: Preparación de 7-cloro-9-fluoro-3,5-dihidrofuro[3,4-c]quinolin-4(1H)-ona:

[0232]A una mezcla agitada de 4-(4-cloro-2-fluoro-6-nitrofenilo)-2,5-dihidrofurano-3-carboxilato de metilo (300 mg, 1,00 mmol, 1,00 equiv) y Fe (245 mg, 4,31 mmol, 10,00 equiv) en EtOH (10 mL) se añadió CaCh (662 mg, 5,97 mmol, 6,00 equiv). La mezcla resultante se agitó durante 2h a 90°C bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente. La mezcla resultante se diluyó con agua (100 mL). La mezcla resultante se extrajo con EtOAc (3 x 100mL). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (3x100 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro. Tras la filtración, el filtrado se concentró a presión reducida. El residuo se purificó por trituración con MeCN (3mL) para obtener 7-cloro-9-fluoro-3,5-dihidrofuro[3,4-c]quinolin-4(1H)-ona (170 mg, 71,3%) como sólido blanco. LC-MS: (ES+H, m/z):

[M+H]+ = 240.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 12.15 (s, 1H), 7.28 (dd,J =10.4, 1.9 Hz, 1H), 7.24 (dd,J =2.0, 0.9 Hz, 1H), 5.30 (td,J= 4.3, 2.2 Hz, 2H), 4.92 (t,J =4.2 Hz, 2H).

E tap a 7: P re p a ra c ió n d e 9 -flu o ro -7 -(h id ro x im e tN o )-3 ,5 -d ih id ro fu ro [3 ,4 -c ]q u in o lm -4 (1 H )-o n a :

[0233]A una mezcla agitada de 7-doro-9-fluoro-3,5-dihidrofuro[3,4-c]quinolin-4(1H)-ona (190 mg, 0,79 mmol, 1,00 equiv) y Precatalizador XPhos de 2.a Generación (62 mg, 0,08 mmol, 0,10 equiv) en dioxano (6 mL) se añadió (tributilstannil)metanol (509 mg, 1,59 mmol, 2,00 equiv). La mezcla resultante se agitó durante 2h a 100°C bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente. La mezcla resultante se diluyó con agua (50 mL). La mezcla resultante se extrajo con CH2Cl2 /MeOH(10:1)(3 x50 mL). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (2x50 mL), se secaron sobre Na2SO4 anhidro. Tras la filtración, el filtrado se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice, eluyendo con CH2Cl2 / MeOH (gradiente de 0 a 10% en 30 min) para obtener 9-fluoro-7-(hidroximetilo)-3,5-dihidrofuro[3,4-c]quinolin-4(1H)-ona (80 mg, 42,9%) como sólido blanco. LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H]+ = 236.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO-deJ 6 12.06 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 6.95 (d,J= 11.3 Hz, 1H), 5.51 (t,J= 5.7 Hz, 1H), 5.32 (tt,J= 3.9, 1.8 Hz, 2H), 4.93 (t,J= 4.2 Hz, 2H), 4.57 (d,J =5.7 Hz, 2H).

Etapa 8: Preparación de 7-(clorometilo)-9-fluoro-3,5-dihidrofuro[3,4-c]quinolin-4(1H)-ona:

[0234]A una mezcla agitada de 9-fluoro-7-(hidroximetilo)-3,5-dihidrofuro[3,4-c]quinolin-4(1H)-ona (60 mg, 0,26 mmol, 1,00 equiv) y DMF (2 mg, 0,03 mmol, 0,10 equiv) en CH2Cl2 (4 mL) se añadió SoCl2 (0,06 mL, 0,77 mmol, 3,00 equiv) gota a gota a 0°C bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante toda la noche a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se concentró a presión reducida para obtener 7-(clorometilo)-9-fluoro-3,5-dihidrofuro[3,4-c]quinolin-4(1H)-ona (50 mg, bruto) como sólido amarillo. LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H]+ =253.9.

Etapa 9: Preparación de 6-fluoro-5-(4-((9-fluoro-4-oxo-1,3,4,5-tetrahidrofuro[3,4-c]qumolm-7-No)metNo)piperazm-1-ilo)-N-metilpicolinamida:

[0235]A una mezcla agitada de 7-(clorometilo)-9-fluoro-3,5-dihidrofuro[3,4-c]quinolin-4(1H)-ona (45 mg, 0,18 mmol, 1,00 equiv) y clorhidrato de 6-fluoro-N-metilo-5-(piperazin-1-ilo)picolinamida (73 mg, 0,27 mmol, 1,50 equiv) en MeCN (3 mL) se añadieron KI (6 mg, 0,04 mmol, 0,20 equiv) y DIEA (115 mg, 0,89 mmol, 5,00 equiv). La mezcla resultante se agitó durante 2 h a 80°C bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente. La mezcla resultante se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice, eluyendo con CH2Cl2 / MeOH (gradiente de 0 a 10% en 30 min) para obtener producto bruto (70 mg). El producto bruto (70 mg) se purificó por Prep-HPLC con las siguientes condiciones (Columna: Columna Xselect CSH C18 OBD 30* 150mm, 5pm; Fase móvil A: Agua(0,1% HCOOH), Fase móvil B: MeCN; Caudal: 60 mL/min mL/min; Gradiente: 4% B a 15% B en 8 min; Longitud de onda: 254nm/220nm nm; RT1(min): 12,82). La fracción pura se concentró a presión reducida y se liofilizó para obtener 6-fluoro-5-(4-((9-fluoro-4-oxo-1,3,4,5-tetrahidrofuro[3,4-c]quinolin-7-ilo)metil)piperazin-1-ilo)-N-metilpicolinamida (28,0 mg, 34,2%) como sólido blanco. LC-MS: (ES+H, m/z): [M+H]+= 456.10. 1H NMR (300 MHz, DMSO-deJ 6 12.03 (s, 1H), 8.41 (q,J =4.7 Hz, 1H), 7.85 (dd,J= 8.0, 1.5 Hz, 1H), 7.57 (dd,J =10.6, 8.1 Hz, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.03 (d,J =11.2 Hz, 1H), 5.32 (d,J =5.1 Hz, 2H), 4.93 (t,J =4.2 Hz, 2H), 3.62 (s, 2H), 3.26 - 3.11 (m, 4H), 2.77 (d,J= 4.7 Hz, 3H), 2.57 (t,J= 4.6 Hz, 4H). 19F NMR (282 MHz, DMSO-d 6) 6 -72.508, -118.241.

Ejemplo comparativo 4 (Ejemplo 4 en CN115232129A)

[0236]

Ejemplo A: Ensayo de inhibición del crecimiento celular

[0237]El objetivo de este estudio es evaluar el efecto del compuesto aquí divulgado sobre la proliferación celular a través del ensayo de viabilidad celular en líneas celulares DLD-1 BRCA2(-/-) y parental isogénica y MDA-MB-436 (BRCA1 mutado). El ensayo de viabilidad celular basado en CellTiter-Glo (CTG) está diseñado para determinar el número de células viables en el cultivo por efecto de compuestos, mediante la cuantificación del ATP, que indica la presencia de células metabólicamente activas.

[0238]Las células DLD-1 BRCA2(-/-) y el par parental isogénico se cultivaron en RPMI 1640 suplementado con 10% de suero fetal bovino (FBS), y las células MDA-MB-436 se cultivaron en DMEM suplementado con 10% de FBS. Ambos se cultivan a 37°C con un 5% de CO2. Los compuestos de la invención se distribuyeron en la placa de 384 pocillos (Corning, 3764) utilizando un manipulador de líquidos acústico Echo para formar una concentración final diluida en serie 1:3 con una dosis máxima de 10 o 30 pM. Las células se sembraron en la placa a una densidad de 50 células/pocillo (DLD-1 parental), 200 células/pocillo (D<l>D-1 BRCA2-/-), o 500 células/pocillo (MDA-MB-436). Tras un breve centrifugado, las células se cultivaron en una incubadora bien humedecida a 37°C con un 5% de CO2 durante 7 días sin perturbaciones.

La viabilidad celular se midió con el kit de ensayo CellTiter Glo 2.0 (Promega, G9243), y se calculó la tasa de inhibición del crecimiento y se representó gráficamente frente a la concentración final del compuesto, y los datos se ajustaron en Xfit para generar IC50.

Ejemplo B: Ensayo bioquímico (FP)

[0239]Los ensayos basados en polarización fluorescente (FP) han sido ampliamente utilizados en el descubrimiento de fármacos debido al formato homogéneo, rendimiento robusto y falta de interferencia observada en otros ensayos. Para caracterizar nuestros compuestos, utilizamos un ensayo que mide el desplazamiento de un inhibidor de PARP 1 /2 comercialmente disponible marcado con fluorescencia (PARPi-FL, Tocris Biosciences, #6461) como se ejemplifica en los ensayos realizados en WO2014/064149 y WO2021/013735A1. El ensayo se realizó utilizando el método siguiente:

[0240]Los compuestos se disolvieron en DMSO y se utilizó un manipulador de líquidos Echo550 para realizar diluciones seriadas en el rango de concentración deseado en placas Optiplate-384F. Se utilizó DMSO al 100% para las muestras de control alto (con proteínas) y bajo (sin proteínas). Se añadieron 20 nL de compuesto o DMSO solo a pocillos individuales de la placa de ensayo.

[0241]Las proteínas PARP1 y PARP2 fueron expresadas, purificadas y diluidas en tampón de ensayo conteniendo 50 mM Tris pH 8,0, 0,001% Triton X-100, 10 mM MgCh, 150 mM NaCl hasta una concentración final de 20nM. A continuación, se añadió PARPi-FL a una concentración final de 3nM.

[0242]La placa de ensayo se centrifuga a 1000rpm durante 1min y se incuba durante 4h a temperatura ambiente.

[0243]La polarización fluorescente se lee utilizando un lector de placas Envision utilizando los siguientes ajustes: Filtro de excitación - FITC FP 480-Ex Ranura 3

Filtro de emisión - FITC FP P-pol 535-Em Ranura 4

2.° Filtro de emisión - FITC FP S-pol 535-Em Ranura 3

Módulo espejo - FITC FP Dual Enh-Slot 1

[0244]La tasa de inhibición se calcula utilizando el porcentaje de distancias de Mahalanobis permutadas mayores que las muestras de control (valor mP) siguiendo la ecuación siguiente:

[0245]XLFit (ecuación 201) se utiliza para calcular un IC50 reportado para cada compuesto.

[0246]Los datos de los ejemplos A y B se proporcionan en la Tabla 2.

TABLA 2

(continuación)

Ejemplo C: Eflujo de transportadores humanos in vitro

Ejemplo C1: MDR1 y BCRP

[0247]Las células de riñón canino Madin-Darby (MDCKII) que expresan MDR1 o BCRP se sembraron en soportes de policarbonato permeable (poro de 0,4 |jm) Corning HTS Transwell® de 96 pocilios a una densidad de 545.000 células/cm2 Las células se incubaron durante 4-8 días antes del ensayo, y la integridad de la monocapa se evaluó midiendo la resistencia eléctrica transepitelial (TEER). Los compuestos de ensayo y de referencia se diluyeron con el tampón de transporte (HBSS HEPES pH7,4) hasta concentraciones de 10 y 1 jM , respectivamente. La concentración final de disolvente orgánico fue del 0,5% (v/v). El flujo bidireccional (de apical a basolateral y de basolateral a apical) de los compuestos de prueba y de referencia se determinó durante una incubación de 2 horas a 37°C y 5% de CO2 con una humedad relativa del 95%. Al final de la incubación, se tomaron muestras de la cara apical y basolateral y se precipitaron con acetonitrilo que contenía patrón interno. Tras centrifugación a 3200 x g, los sobrenadantes se diluyeron 1:1 (v/v) con agua y se sometieron a análisis mediante HPLC-MS/MS. La integridad de las monocapas celulares durante el ensayo se confirmó utilizando el marcador amarillo Lucifer a una concentración final de 100 jM .

Ejemplo C2: Caco-2

[0248]Después de un período de equilibrio de 1 hora en medio de cultivo celular mantenido a 37 °C en una incubadora con una atmósfera de 5% de CO2 y 95% de humedad relativa, se sembraron placas de soporte permeable HTS Transwell® de Corning de 96 pocillos con 34.300 células Caco-2 (ATCC) por pocillo. Una vez sembradas, las placas se cultivaron durante 14-18 días, sustituyendo el medio de cultivo celular cada dos días a más tardar 24 horas después de la siembra. La integridad de la barrera monocapa se controló durante el período de cultivo mediante mediciones de la resistencia eléctrica transepitelial (TEER) realizadas con un sistema Millicell Epithelial Volt-Ohm. Las monocapas Caco-2 se consideraron listas para su uso cuando el valor TEER > 230 ohm-cm2. Se prepararon reservas de trabajo de artículos de ensayo individuales a una concentración de 5 jM diluyendo reservas de 1 mM preparadas en DMSO en HEPES 10 mM. Antes de realizar el ensayo, las placas Caco-2 se lavaron dos veces con He Pe S 10 mM precalentado y luego se equilibraron en HEPES 10 mM durante 30 min. a 37 °C. Tras el equilibrado, el flujo del artículo de ensayo se probó bidireccionalmente (tanto en dirección apical a basolateral como basolateral a apical) añadiendo los stocks de trabajo del artículo de ensayo a las cámaras apical o basolateral. En los lados opuestos se añadió HEPES 10 mM en blanco. A continuación, las placas se incubaron a 37 °C durante 2 horas. Al final de la incubación, se lavaron alícuotas de ambos lados de cada monocapa con 4 volúmenes de ACN que contenían patrones internos. Tras una etapa de centrifugación, los sobrenadantes se diluyeron con agua pura antes del análisis mediante LC-MS/MS.

[0249]La permeabilidad aparente (Papp, x10'6 cm/s) se calculó para todos los ensayos de transporte utilizando la siguiente ecuación:

Donde:

Papp es la permeabilidad aparente (x10 ‘6 cm/s).

dQ/dt es la velocidad de transporte del fármaco (pmol/s).

A es la superficie de la membrana (cm2).

Do es la concentración inicial del donante (nM; pmol/cm3).

[0250]La relación de eflujo se determinó calculando la relación entre la Papp en la dirección basolateral a apical y la Papp en la dirección apical a basolateral utilizando la siguiente ecuación:

Papp (B-a-A)

Relación de effnjo

P a p p ( A - a - B )

Donde:

Papp(B-Io-A) es la permeabilidad aparente en la dirección basolateral-apical.

Papp (A-to-B) es la permeabilidad aparente en la dirección apical-basolateral.

[0251]Los datos del ejemplo C1 y C2 se proporcionan en la Tabla 3.

Tabla 3: MDR1, BCRP y Caco-2

Ejemplo D: Determinación in vivo del Kp,uu de rata

Determinación de la fracción no ligada en plasma (Pu)

[0252]Se utilizó el método de diálisis de equilibrio para investigar la unión in vitro de los artículos de prueba y los compuestos de referencia a las proteínas plasmáticas. Se añadieron muestras de plasma que contenían 5 pM de artículo de ensayo o solución amortiguadora de diálisis en blanco (PBS, pH 7,4) a cámaras separadas de los pocillos de diálisis del dispositivo de diálisis de equilibrio de alto rendimiento (HTD). La placa de diálisis se selló y se colocó en una incubadora a 37°C con 5% de CO2 con agitación a aproximadamente 100 rpm durante 6 horas. Todos los experimentos se realizaron por duplicado. Se utilizó ketoconazol (5 pM) como compuesto de referencia. Tras la incubación, se retiró el precinto y se pipetearon 50 pl de muestras post-diálisis de ambas cámaras de tampón y plasma en placas de 96 pocillos nuevas. Las muestras se equimatrizaron añadiendo plasma blanco a las muestras de tampón o añadiendo tampón blanco a las muestras de plasma. Posteriormente, se añadieron 400 pl (4 volúmenes) de acetonitrilo con contenido interno a todas las muestras para precipitar las proteínas antes del análisis por UPLC-MS/MS para determinar las concentraciones relativas de los artículos de prueba. Las fracciones no unidas en el plasma se calcularon utilizando las concentraciones de los artículos de ensayo en las muestras de tampón y plasma de acuerdo con la siguiente ecuación:

Determinación de la fracción no ligada en el homogeneizado cerebral (Bu)

[0253]Se utilizó el método de diálisis de equilibrio para investigar la unión in vitro de los artículos de prueba y los compuestos de referencia al homogeneizado de cerebro de roedor. Se pesaron los cerebros recogidos de animales ingenuos y se homogeneizaron en 4 volúmenes de PBS, pH 7,4. Se añadieron muestras de homogeneizado cerebral que contenían 1 pM de artículo de ensayo o solución tampón de diálisis en blanco (PBS, pH 7,4) a cámaras separadas de los pocillos de diálisis del dispositivo de diálisis en equilibrio de alto rendimiento (HTD). La placa de diálisis se selló y se colocó en una incubadora a 37°C con 5% de CO2 con agitación a aproximadamente 100 rpm durante 6 horas. Todos los experimentos se realizaron por duplicado. Se utilizó telmisartán (5 pM) como compuesto de referencia. Tras la incubación, se retiró el precinto y se pipetearon 50 pl de muestras post-diálisis de ambas cámaras de tampón y homogeneizado cerebral en placas de 96 pocillos nuevas. Las muestras se equimatrizaron mediante la adición de homogeneizado en blanco a las muestras de tampón o mediante la adición de tampón en blanco a las muestras de homogeneizado. Posteriormente, se añadieron 400 pl (4 volúmenes) de acetonitrilo con contenido interno a todas las muestras para precipitar las proteínas antes del análisis por UPLC-MS/MS para determinar las concentraciones relativas de los artículos de prueba. Las fracciones no unidas en el homogeneizado cerebral diluido se calcularon utilizando las concentraciones de los artículos de ensayo en las muestras de tampón y homogeneizado de acuerdo con la siguiente ecuación:

Por c e nt aj e de d omog e r.i za do no u ni do (%} =

Beiaciún de ana l i to con área pico IS ícárrara reguladora)

Relación de Íinalito C<?n arco pi-CQ15(cánqra de hom^genizsdo) ]_QQ

[0254]La corrección al porcentaje no unido en el cerebro no diluido se logró con la siguiente ecuación:

Determinación del Coeficiente de Partición Cerebro-Plasma del Fármaco (Kp) y del Kp no unido al fármaco (Kp,uu) en la Rata

[0255]Los compuestos se formularon individualmente o en un casete (como mezcla) a una concentración de 0,1 mg/mL/compuesto en agua estéril que contenía 0,5% (p/v) de metilcelulosa 400 cP y se administraron a ratas macho Sprague-Dawley por sonda oral a un volumen de dosis de 10 mL/kg. Se sacrificó un animal en cada uno de los siguientes momentos: 0,5, 1, 2, 4, 8 , y 24 horas después de la dosis, y se recogieron muestras de cerebro y sangre. El plasma se preparó a partir de la sangre mediante centrifugación refrigerada, y las muestras de plasma se almacenaron congeladas a -80 °C hasta el bioanálisis. Las muestras de cerebro se enjuagaron con solución salina para eliminar la sangre residual y se secaron con una toallita de papel. A continuación, las muestras de cerebro se pesaron y homogeneizaron con 3 volúmenes (v/p) de agua y se almacenaron congeladas a -80°C hasta su bioanálisis.

[0256]Antes del bioanálisis, las muestras de plasma y cerebro se extrajeron con 4 volúmenes de acetonitrilo con estándar interno y se centrifugaron durante 15 minutos. Los sobrenadantes se diluyeron con 2 volúmenes de agua y se inyectaron para su análisis mediante HPLC-MS/MS. Las concentraciones de fármaco en plasma y homogeneizado cerebral se determinaron comparándolas con curvas de calibración generadas añadiendo plasma de rata blanco u homogeneizado cerebral con fármaco en un intervalo de concentración apropiado. La concentración del homogeneizado cerebral se corrigió en función del factor de dilución del tampón de homogeneización para obtener las concentraciones totales del fármaco cerebral.

[0257]Se determinó el coeficiente de partición cerebro-plasma (Kp) para cada compuesto, calculado como: AUCcerebro:AUCplasma, siempre que tlast fuera idéntico en cada matriz. Si el perfil de concentración del fármaco frente al tiempo para una matriz caía por debajo del límite inferior de cuantificación en un punto temporal anterior al de la otra matriz, entonces el Kp cerebral se calculaba como la media de los cocientes de la concentración total del fármaco cerebral y la concentración total del fármaco plasmático medidos en cada punto temporal en el que las concentraciones del fármaco en ambas matrices eran cuantificables.

[0258]El Kp,uu se calculó entonces a partir del Kp utilizando la siguiente ecuación: Kp,uu = Kp * (fracción no ligada en homogeneizado cerebral/fracción no ligada en plasma).

[0259]Los datos del ejemplo D se proporcionan en la Tabla 4.

Tabla 4: Kp,uu Datos

Ejemplo E: Ensayos HLM y hHEP

HLM

[0260]Se prepararon stocks de trabajo de artículos de prueba individuales a una concentración de 100 pM diluyendo stocks de 10 mM preparados en DMSO 100 veces (v:v) en ACN. Los microsomas hepáticos descongelados se suspendieron en tampón fosfato potásico 100 mM, pH 7,4 hasta una concentración de proteína microsomal de 0,562 mg/mL. Los microsomas diluidos se combinaron con una solución de 10 mM de NADPH, y la mezcla se precalentó a 37 °C durante 8 minutos. Las reacciones se iniciaron mediante la adición de los stocks de trabajo del artículo de ensayo para alcanzar una concentración final del artículo de ensayo de 1 pM. Las concentraciones finales de proteína microsomal y NADPH fueron de 0,5 mg/mL y 1 mM, respectivamente. Las incubaciones con NADPH se realizaron por duplicado. Las pérdidas de artículos de ensayo mediadas por mecanismos distintos de CYP se evaluaron en un conjunto paralelo de incubaciones realizadas en ausencia de NADPH. Las incubaciones que carecían de NADPH consistieron en 1 réplica por artículo de ensayo. Tras la incubación en un baño de agua a 37 °C, alícuotas de reacciones individuales se enfriaron con ACN frío que contenía patrones internos a los 0,5, 15, 30, 60, 90, y 120 minutos. La proteína precipitada se precipitó mediante centrifugación refrigerada. Los sobrenadantes se diluyeron en un volumen igual de agua pura y se mezclaron bien antes del análisis mediante LC-MS/MS. Los aclaramientos intrínsecos in vitro (CLint) en pL/min/mg se determinaron para cada incubación a partir de las semividas in vitro calculadas mediante un enfoque de regresión log-lineal estándar. Los valores de CLint in vitro se escalaron utilizando los siguientes factores de escala fisiológica: 40 mg de proteína microsomal / g de hígado humano y 25,7 g de hígado humano / kg de peso corporal. Los valores de aclaramiento intrínseco escalados se introdujeron finalmente en el modelo de hígado bien agitado con el fin de calcular el aclaramiento hepático humano previsto (CLhep,pred) en mL/min/kg suponiendo un flujo sanguíneo hepático humano de 21 mL/min/kg y sin hacer correcciones por la unión del artículo de ensayo a los glóbulos rojos, las proteínas plasmáticas, o los componentes del sistema de incubación.

hHEP

[0261]Se prepararon stocks de trabajo de artículos de prueba individuales a concentraciones de 100 pM diluyendo stocks de 10 mM preparados en DMSO 100 veces (v:v) en ACN/H2O (50/50, v:v). Los hepatocitos humanos criopreservados se descongelaron en un baño de agua a 37 °C en < 2 min, se suspendieron en medio de descongelación y se centrifugaron a 100 x g durante 10 min. Se aspiró el medio de descongelación y los hepatocitos precipitados se resuspendieron en medio de incubación a 1,5x106 células/mL. La viabilidad celular se determinó mediante una tinción con naranja de acridina y yodo de propidio, y los hepatocitos se diluyeron con medio de incubación hasta alcanzar 0,5x106 células viables/mL. Se añadieron alícuotas de 198 pL de hepatocitos a los pocillos de una placa de 96 pocillos y se iniciaron las incubaciones del artículo de ensayo añadiendo 2 pL de stocks de trabajo de 100 pM. Las placas se incubaron a 37°C en una atmósfera con un 5% de CO2 y un 95% de humedad relativa en un agitador orbital a 300 rpm. Las incubaciones se realizaron por duplicado. Tras la incubación, se terminaron alícuotas de reacciones individuales añadiendo ACN con estándares internos a los 0, 30, 60, 90, 120, y 240 minutos. La proteína precipitada se precipitó mediante centrifugación refrigerada. Los sobrenadantes se diluyeron en un volumen igual de agua pura y se mezclaron bien antes del análisis mediante LC-MS/MS. Los aclaramientos intrínsecos in vitro (CLint) en pL/min/106 células se determinaron para cada incubación a partir de las semividas in vitro calculadas mediante un enfoque de regresión log-lineal estándar. Los valores de CLint in vitro se escalaron utilizando los siguientes factores de escala fisiológica: 99x106 células / g de hígado humano y 25,7 g de hígado humano / kg de peso corporal. Los valores de aclaramiento intrínseco escalados se introdujeron finalmente en el modelo de hígado bien agitado con el fin de calcular el aclaramiento hepático humano previsto (CLhep,pred) en mL/min/kg suponiendo un flujo sanguíneo hepático humano de 21 mL/min/kg y sin hacer correcciones por la unión del artículo de ensayo a los glóbulos rojos, las proteínas plasmáticas, o los componentes del sistema de incubación.

[0262]Los datos del ejemplo E se proporcionan en la Tabla 5.

Tabla 5<:>Datos HLM y HHEP

Claims

REIVINDICACIONES 1. Un compuesto de Fórmula (Ip), o una sal, solvato, estereoisómero, o tautómero farmacéuticamente aceptable del mismo:

donde: R1' es hidrógeno; Z es CRZ; RZ es hidrógeno, deuterio, halógeno, o alquiloC1-C6; R2 es hidrógeno, deuterio, o alquiloC1-C6; R3 es hidrógeno, deuterio, o alquiloC1-C6; cada R4 es independientemente deuterio, alquilo C1-C6, haloalquilo C1-C6, deuteroalquilo C1-C6, hidroxialquilo C1-C6, aminoalquilo C1-C6, heteroalquilo C1-C6, alquenilo C2-C6, o alquinilo C2-C6; o dos R4 en el mismo carbono se unen para formar un oxo; m es 0-2 ; R5 es hidrógeno, halógeno, o alquilo C1-C6; R6 es hidrógeno, halógeno, o alquilo C1-C6; R7 es hidrógeno, halógeno, o alquilo C1-C6; R8 es alquilo C1-C6 o cicloalquilo, donde el alquilo y el cicloalquilo están opcionalmente sustituidos con uno o más R; y cada R es independientemente halógeno, -CN, -OH, -OC1-C3alquilo, -OC1-C3haloalquilo, -SC1-C3alquilo, -S(=O)C1-C3alquilo, -S(=O)2C rC 3alquilo, -S(=O)2NH2, -S(=O)2NHC1-C3alquilo, -S(=O)2N(C1-C3alquilo)2, -NH2, -NHC1-C3alquilo, -N(C1-C3alquilo)2, -C(=O)C1-C3alquilo, -C(=O)OH, -C(=O)OC1-C3alquilo, -C(=O)NH2, -C(=O)NHC1-C3alquilo, -C(=O)N(C1-C3alquilo)2, C1-C3alquilo, C1-C3haloalquilo, C1-C3deuteroalquilo, C1-C3hidroxialquilo, C1-C3aminoalquilo, C1-C3heteroalquilo, o C3-C6cicloalquilo; o dos R en el mismo átomo se unen para formar un oxo.
2. El compuesto de la reivindicación 1, o una sal, solvato, estereoisómero, o tautómero farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que m es 0.
3. El compuesto de la reivindicación 1 o 2, o una sal, solvato, estereoisómero, o tautómero farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que R5 es halógeno.
4. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1-3, o una sal, solvato, estereoisómero, o tautómero farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que R6 es hidrógeno.
5. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1-4, o una sal, solvato, estereoisómero, o tautómero farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que R7 es hidrógeno.
6. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1-5, o una sal, solvato, estereoisómero, o tautómero farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que R8 es alquilo C1-C6.
7. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1-6, o una sal, solvato, estereoisómero, o tautómero farmacéuticamente aceptable del mismo, y un excipiente farmacéuticamente aceptable.
8. Un compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1-6, o una sal, solvato, estereoisómero, o tautómero farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en un método de tratamiento del cáncer en un sujeto que lo necesite.
9. El compuesto o sal farmacéuticamente aceptable, solvato, estereoisómero, o tautómero del mismo para uso de la reivindicación 8 , donde: (A) el cáncer es cáncer de mama, cáncer de ovario, cáncer de páncreas, cáncer de próstata, un cáncer hematológico, cáncer gastrointestinal, o cáncer de pulmón; (B) el cáncer es un cáncer que comprende una mutación BRCA1 y/o una mutación BRCA2; (C) el cáncer es un cáncer que comprende una mutación en un gen que confiere deficiencia de reparación homóloga, en el que opcionalmente la mutación en un gen que confiere deficiencia de reparación homóloga comprende ATM, BRCA1, BRCA2, BARD1, BRIP1, CDK12, CHEK1, CHEK2, FANCL, PALB2, RAD51B, RAD51C, RAD51D, o RAD54L, o cualquier combinación de los mismos; (D) el cáncer es cáncer de vejiga, cáncer cerebral y del CNS, cáncer de mama, cáncer de cuello uterino, cáncer colorrectal, cáncer de esófago, linfoma de Hodgkin, linfoma no Hodgkin, cáncer de riñón, leucemia, cáncer de pulmón, melanoma, mieloma, cáncer de cavidad oral, cáncer de ovario, cáncer de páncreas, cáncer de próstata, cáncer de piel, cáncer de estómago, cáncer de tiroides, o cáncer de útero; (E) el cáncer es metastásico; (F) el cáncer ha hecho metástasis en el cerebro; (G) el cáncer es un cáncer presente en el cerebro; o (H) el cáncer es cerebral.