ES3049803T3 - Tetrazole derivatives as trpa1 inhibitors - Google Patents

Abstract

La presente divulgación describe ciertos derivados de tetrazol que inhiben el potencial transitorio del receptor anquirina 1 (TRPA1) y, por lo tanto, son útiles para el tratamiento de enfermedades que pueden tratarse mediante la inhibición de TRPA1. También se proporcionan composiciones farmacéuticas que los contienen y procedimientos para su preparación. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

[0001] DESCRIPCIÓN

[0003] Derivados de tetrazol como inhibidores de TRPA1

[0005] CAMPO DE LA INVENCIÓN

[0007] La presente divulgación proporciona ciertos derivados de tetrazol que son inhibidores de potencial de receptor transitorio anquirina 1 (TRPA1) y por tanto son útiles para el tratamiento de enfermedades que pueden tratarse mediante la inhibición de TRPA1. También se proporcionan composiciones farmacéuticas que contienen los mismos y procesos para preparar dichos compuestos.

[0009] INFORMACIÓN DE ANTECEDENTES

[0011] Los canales de potencial de receptor transitorio (canales TRP) son un grupo de canales iónicos regulados por voltaje ubicados en su mayoría en la membrana plasmática de numerosos tipos de células de mamífero. Son aproximadamente 30 canales TRP relacionados estructuralmente clasificados en grupos: TRPA, TRPC, TRPM, TRPML, TRPN, TRPP y TRPV. El canal catiónico de potencial de receptor transitorio, subfamilia A, miembro 1 (TRPA1), también conocido como potencial de receptor transitorio anquirina 1, es el único miembro de la subfamilia de genes TRPA. Estructuralmente, los canales TRP<a>están caracterizados por múltiples repeticiones de anquirina N-terminales (~14 en el extremo N-terminal de TRPA1 humano) lo que da lugar a la “A” para la designación de la anquirina (Montell, 2005).

[0013] TRPA1 se expresa altamente en la membrana plasmática de neuronas sensoriales en la raíz dorsal y los ganglios nudosos que sirven tanto para la piel como para el pulmón, así como en el intestino delgado, colon, páncreas, músculo esquelético, corazón, cerebro, vejiga y linfocitos (https://www.proteinat-las.org/) así como en fibroblastos pulmonares humanos.

[0015] TRPA1 es más conocido como sensor para agentes irritantes medioambientales dando lugar a modalidades somatosensoriales tales como dolor, resfriado y picor. TRPA1 se activa mediante un número de estímulos electrófilos, reactivos, (por ejemplo, isotiocianato de alilo, especies reactivas de oxígeno), así como compuestos no reactivos (por ejemplo, icilina), implicados en tos asociada con asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), fibrosis pulmonar idiopática (FPI) o tos posvírica o para tos idiopática crónica así como tos en pacientes sensibles (Song y Chang, 2015; Grace y Belvisi, 2011). Los inhibidores de TRPA1 son útiles en el tratamiento de FPI en la que la tos es altamente prevalente debido al vínculo entre tos y lesión pulmonar, basándose en estudios que muestran la elevación inducida por tos de TGF-p (Xieet al.,2009; Froeseet al.,2016; Tschumperlinet al.,2003; Yamamotoet al.,2002; Ahamedet al.,2008). Los antagonistas de TRPA1 inhiben la señalización de calcio desencadenada por desencadenantes de tos tales como estrés oxidativo por extracto de humo de cigarrillos (EHC), liberación de mediadores inflamatorios y expresión génica antioxidante regulada por disminución (Linet al.,2015; Wanget al.,2019). Los antagonistas de TRPA1 son efectivos en estudios de dermatitis atópica (Ohet al.,2013; Wilsonet al.,2013), dermatitis por contacto (Liuet al.,2013), picor asociado a psoriasis (Wilsonet al.,2013) y picor dependiente de IL-31 (Cevikbaset al.,2014). Una ganancia de función de TRPA1 humano se ha asociado con síndrome de dolor episódico familiar (Kremeyeret al.,2010). Un antagonista de TRPA1 fue efectivo en un modelo de comportamiento de alodinia relacionada con migraña (Edelmayeret al.,2012). TRPA1 se aumenta de manera selectiva en ganglios del trigémino que inervan dientes dañados en comparación con la expresión de TRPA1 en ganglios del trigémino que inervan dientes sanos (Haaset al.,2011). Se conoce que varios anestésicos son agonistas de TRPA1, incluyendo isoflurano (Mattaet al.,2008), proporcionando un fundamento para los inhibidores de TRPA1 para el alivio de dolor posquirúrgico. Ratones inactivados para TRPA1 y ratones de tipo silvestre tratados con un antagonista de TRPA1 mostraron fenotipos de tipo ansiolítico y antidepresivo (de Mouraet al.,2014). Se espera que los inhibidores de TRPA1 tengan un beneficio en el tratamiento de neuropatía diabética basándose en estudios que muestran un vínculo mecanístico de regulación inversa entre AMPK y TRPA1 (Hiyamaet al.,2018; Koivisto y Pertovaara, 2013; Wanget al.,2018). Los ratones inactivados para TRPA1 presentan tamaños de infarto de miocardio menores en comparación con ratones de tipo silvestre (Conklinet al.,2019). La inactivación de TRPA1 y la intervención farmacológica inhibieron la colitis inducida por TNBS en ratones (Engelet al.,2011). En un modelo de isquemia cerebral de ratón, la inactivación de TRPA1 y antagonistas de TRPA1 reducen el daño de mielina (Hamiltonet al.,2016). Los cristales de urato y la inflamación articular están reducidos en ratones inactivados para TRPA1 en un modelo de rato de urato monosódico de gota (Moilanenet al.,2015). La deleción de TRPA1 en ratas mejoró la inflamación articular y la hiperalgesia en un modelo de rata de brotes de gota agudos (Trevisanet al.,2014). La activación de TRPA1 provoca una respuesta inflamatoria en condrocitos osteoartríticos (Nummenmaaet al.,2016). La inhibición y deleción genética de TRPA1 reducen los mediadores inflamatorios en condrocitos de ratón osteoartríticos y cartílago murino (Nummenmaaet al.,2016). Finalmente, ratones inactivados para TRPA1 mostraron mejoras en el soporte de peso en la extremidad osteoartrítica en un modelo de hinchazón de rodilla provocada por MIA (Horvathet al.,2016). TRPA1 se expresa de manera diferencial en el epitelio de la vejiga de ratas (Duet al.,2007) y de pacientes con obstrucción de la salida de la vejiga (Duet al.,2008). La modulación del receptor TRPA1 atenúa la hiperactividad de la vejiga en un modelo de rata de lesión de médula espinal (Andradeet al.,2011) y la administración intratecal de antagonistas de TRPA1 atenúa la cistitis inducida por ciclofosfamida en ratas con micción por hiperreflexia (Chenet al.,2016).

[0016] Por tanto, es deseable proporcionar inhibidores de TRPA1 potentes.

[0017] Inhibidores de TRPA1 de diversas clases estructurales se revisan en S. Skerratt, Progress in Medicinal Chemistry, 2017, volumen 56, 81-115 y en D. Preti, G. Saponaro, A. Szallasi, Pharm. Pat. Anal. (2015) 4 (2), 75-94.

[0018] El documento WO2017/060488 da a conocer compuestos que son antagonistas de TRPA1, que tienen la fórmula estructural generalizada

[0021]

[0023] La actividad de TRPA1 de los ejemplos 28 y 29 que portan un anillo de tetrazolilo en los mismos no se da a conocer. L. Schenkel,et al.,J. Med. Chem. 2016, 59, 2794-2809 dan a conocer antagonistas de TRPA1 a base de quinazolinona que incluyen compuestos de la fórmula estructural generalizada

[0026]

[0028] de los que el compuesto 31, en el que R es OH, se da a conocer como que tiene una actividad de TRPA1 antagonística de CI<50>58 nM en un ensayo FLIPR y que tiene un aclaramiento intrínseco en microsomas de hígado humano de <14 |jl/min/kg.

[0029] DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN

[0030] La presente invención da a conocer derivados de tetrazol novedosos que son inhibidores de potencial de receptor transitorio anquirina 1 (TRPA1), que presentan propiedades farmacológicas y farmacocinéticas apropiadas que posibilitan su uso como medicamentos para el tratamiento de estados y/o enfermedades que pueden tratarse mediante la inhibición de TRPA1.

[0031] Los compuestos de la presente invención pueden proporcionar varias ventajas, tales como potencia mejorada, alta estabilidad metabólica y/o química, alta selectividad, seguridad y tolerabilidad, solubilidad potenciada, permeabilidad potenciada, unión a proteínas plasmáticas deseable, biodisponibilidad potenciada, perfiles farmacocinéticos adecuados y la posibilidad de formar sales estables.

[0032] Los compuestos de la invención

[0033] La presente invención proporciona derivados de tetrazol novedosos que son inhibidores de TRPA1 sorprendentemente potentes (ensayo A), caracterizados adicionalmente por

[0034] - una estabilidad mejorada en microsomas de hígado humano (ensayo B)

[0035] - una estabilidad mejorada en hepatocitos humanos (ensayo C).

[0036] Los compuestos de la presente invención difieren estructuralmente de los ejemplos 28 y 29 en el documento WO2017/060488 porque contienen un núcleo de dioxodihidropirimidina monocíclico con sustituyentes N, sustituyentes amido así como sustituyentes adyacentes a un alcohol alifático secundario. Los compuestos de la presente invención difieren de manera adicional estructuralmente del ejemplo 31 en L. Schenkel,et al.,J. Med. Chem. 2016, 59, 2794-2809, porque portan un anillo de tetrazolilo. Estas diferencias estructurales conducen inesperadamente a una combinación favorable de (i) inhibición de TRPA1, (ii) estabilidad en microsomas de hígado humano y (iii) estabilidad en hepatocitos humanos.

[0037] Por tanto, los compuestos de la invención son superiores a los dados a conocer en la técnica anterior en términos de la combinación de los siguientes parámetros:

[0038] - potencia como inhibidores de TRPA1

[0039] - estabilidad en microsomas de hígado humano

[0040] - estabilidad en hepatocitos humanos

[0041] La estabilidad en microsomas de hígado humano se refiere a la susceptibilidad de los compuestos a biotransformación en el contexto de la selección y/o del diseño de fármacos con propiedades farmacocinéticas favorables como primera etapa de examen. El sitio de metabolismo primario para muchos fármacos es el hígado. Los microsomas de hígado humano contienen el citocromo P450s (CYPs) y por tanto representan un sistema de modelo para estudiar el metabolismo farmacológico de fase Iin vitro.Una estabilidad potenciada en microsomas de hígado humano está asociada con varias ventajas, incluyendo una biodisponibilidad aumentada y una semivida adecuada, que pueden posibilitar una dosificación menor y menos frecuente de pacientes. Por tanto, una estabilidad potenciada en microsomas de hígado humano es una característica favorable para compuestos que deben usarse para fármacos. Por tanto, se espera que los compuestos de la presente invención, además de ser capaces de inhibir TRPA1, tengan un aclaramientoin vivofavorable y por tanto la duración de acción deseada en humanos.

[0042] La estabilidad en hepatocitos humanos se refiere a la susceptibilidad de los compuestos a biotransformación en el contexto de la selección y/o de diseño de fármacos con propiedades farmacocinéticas favorables. El sitio de metabolismo primario para muchos fármacos es el hígado. Los hepatocitos humanos contienen el citocromo P450s (CYPs) y otras enzimas que metabolizan fármacos, y por tanto representan un sistema de modelo para estudiar el metabolismo farmacológicoin vitro(de manera importante, en contraste con ensayos de microsomas de hígado, el ensayo de hepatocitos cubre también biotransformaciones de fase II así como procesos mediados por transportadores específicos del hígado, y por tanto representa un sistema más completo para estudios de metabolismo farmacológico). La estabilidad potenciada en hepatocitos humanos está asociada con varias ventajas, incluyendo una biodisponibilidad aumentada y una semivida adecuada, que pueden posibilitar una dosificación menor y menos frecuente de pacientes. Por tanto, una estabilidad potenciada en hepatocitos humanos es una característica favorable para compuestos que deben usarse para para fármacos.

[0043] La presente invención proporciona compuestos novedosos según la fórmula (I)

[0046]

[0048] en la que

[0049] A se selecciona del grupo que consiste en fenilo, tiofenilo, benzotiofenilo o benzofuranilo, no sustituido o sustituido con uno, dos o tres miembros del grupo R<3>que consiste en halógeno, alquilo C<1-4>, fluoroalquilo C<1-4>, cicloalquilo C<3-4>, ciclofluoroalquilo C<3-4>, -O-alquilo C<1-4>, -O-ciclopropilo y NC-;

[0050] o

[0051] A se selecciona del grupo que consiste en

[0054]

[0055] y

[0058]

[0061] R<1>se selecciona del grupo que consiste en alquilo C<1-4>, fluoroalquilo C<1-4>, cicloalquilo C<3-6>, R<4>-(H<2>C)<m>- y R<5>-(H<2>C)<n>-;

[0062] en donde

[0063] m es 1 o 2;

[0064] n es 2;

[0065] R<4>es cicloalquilo C<3-6>;

[0066] R<5>es -O-alquilo C<1-4>u -O-fluoroalquilo C<1-4>;

[0067] R<2>se selecciona del grupo que consiste en H, alquilo C<1-4>, cicloalquilo C<3-6>, ciclofluoroalquilo C<3-6>, HO-alquil C<1-4>-, fluoroalquilo C<1-4>, R<6>-(H<2>C)<p>-, R<7>-(H<2>C)<q>-, R<6>-(H(R<8>)C)<p>- y R<7>-(H(R<9>)C)<q>-;

[0068] en donde

[0069] p es 1 o 2;

[0070] q es 2;

[0071] R<6>se selecciona del grupo que consiste en HO-alquil C<1-2>-, cicloalquilo C<3-6>, C-morfolinilo, C-imidazolilo y C-pirazolilo;

[0072] en donde dicho C-pirazolilo, C-imidazolilo y C-morfolinilo no está sustituido o está sustituido con alquilo C<1-4>o fluoroalquilo C<1-4>;

[0073] R<7>se selecciona del grupo que consiste en -O-alquilo C<1-4>, -O-fluoroalquilo C<1-4>, alquil C<1-4>-S(O)<2>-, N-morfolinilo, N-imidazolilo y N-pirazolilo;

[0074] en donde dicho N-pirazolilo, N-imidazolilo, N-morfolinilo no está sustituido o está sustituido con alquilo C<1-4>o fluoroalquilo C<1-4>;

[0075] R<8>y R<9>se seleccionan independientemente de H o alquilo C<1-4>.

[0076] Otra realización de la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula (I), en la que

[0077] A se selecciona del grupo que consiste en fenilo, tiofenilo, benzotiofenilo o benzofuranilo, no sustituido o sustituido con uno o dos miembros del grupo R<3>que consiste en halógeno, alquilo C<1-4>, -O-alquilo C<1-4>y NC-; o

[0078] A es

[0081]

[0084] R<1>se selecciona del grupo que consiste en alquilo C<1-4>, cicloalquilo C<3-6>, R<4>-(H<2>C)<m>- y R<5>-(H<2>C)<n>-;

[0085] en donde

[0086] m es 1 o 2;

[0087] n es 2;

[0088] R<4>es cicloalquilo C<3-6>;

[0089] R<5>es -O-alquilo C<1-4>;

[0090] R<2>se selecciona del grupo que consiste en H, alquilo C<1-4>, cicloalquilo C<3-6>, HO-alquil C<1-4>-, fluoroalquilo C<1-4>, R<6>-(H<2>C)<p>- y R<7>-(H<2>C)<q>-;

[0091] en donde

[0092] p es 1 o 2;

[0093] q es 2;

[0094] R<6>se selecciona del grupo que consiste en cicloalquilo C<3-6>, C-morfolinilo, C-imidazolilo y C-pirazolilo; en donde dicho C-pirazolilo, C-imidazolilo y C-morfolinilo no está sustituido o está sustituido con alquilo C<1-4>; R<7>se selecciona del grupo que consiste en -O-alquilo C<1-4>, -O-fluoroalquilo C<1-4>, alquil C<1-4>-S(O)<2>-, N-morfolinilo, N-imidazolilo y N-pirazolilo;

[0095] en donde dicho N-pirazolilo, N-imidazolilo, N-morfolinilo no está sustituido o está sustituido con alquilo C<1-4>. Otra realización de la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula (I) en la que

[0096] A se selecciona del grupo que consiste en fenilo, tiofenilo, benzotiofenilo o benzofuranilo, no sustituido o sustituido con uno o dos miembros del grupo R<3>que consiste en Cl, F, Br, H<3>C, H<3>C-O- y NC-;

[0097] o

[0098] A es

[0101]

[0104] y los sustituyentes R1 y R2 se definen como en la realización anterior.

[0105] Otra realización de la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula (I)

[0106] en la que

[0107] A se selecciona del grupo que consiste en

[0110]

[0111] y

[0113] no sustituido o sustituido con uno o dos miembros del grupo R<3>que consiste en Cl, F, Br, H<3>C, H<3>C-O- y NC-, o

[0114] A es

[0117]

[0120] y los sustituyentes R1 y R2 se definen como en cualquiera de las reivindicaciones anteriores.

[0121] Otra realización de la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula (I), en la que

[0122] A se selecciona del grupo que consiste en

[0125]

[0126] y

[0127] y los sustituyentes R<1>y R<2>se definen como en cualquiera de las reivindicaciones anteriores. Otra realización de la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula (I), en la que R<1>se selecciona del grupo que consiste en alquilo C<1-4>, cicloalquilo C<3-6>, R<4>-(H<2>C)<m>- y R<5>-(H<2>C)<n>-; en donde

[0128] m es 1;

[0129] n es 2;

[0130] R<4>es cicloalquilo C<3-6>;

[0131] R<5>es -O-alquilo C<1-4>;

[0132] y los sustituyentes A y R<2>se definen como en cualquiera de las reivindicaciones anteriores. Otra realización de la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula (I),

[0133] en la que

[0134] R<1>se selecciona del grupo que consiste en alquilo C<1-4>, cicloalquilo C<3-4>, R<4>-(H<2>C)<m>- y R<5>-(H<2>C)<n>-; en donde

[0135] m es 1;

[0136] n es 2;

[0137] R<4>es cicloalquilo C<3-4>;

[0138] R<5>es -O-alquilo C<1-4>;

[0139] y los sustituyentes A y R<2>se definen como en cualquiera de las reivindicaciones anteriores. Otra realización de la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula (I), en la que R<1>se selecciona del grupo que consiste en alquilo C<1-4>, cicloalquilo C<3-4>, R<4>-(H<2>C)<m>- y R<5>-(H<2>C)<n>-; en donde

[0140] m es 1;

[0141] n es 2;

[0142] R<4>es cicloalquilo C<3-4>;

[0143] R<5>es H<3>C-O-;

[0144] y los sustituyentes A y R<2>se definen como en cualquiera de las reivindicaciones anteriores. Otra realización de la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula (I), en la que R<1>se selecciona del grupo que consiste en H<3>C, H<3>CH<2>C, H<3>COH<2>CH<2>C,

[0147]

[0149] y los sustituyentes A y R<2>se definen como en cualquiera de las reivindicaciones anteriores. Otra realización de la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula (I), en la que R<1>es H<3>C;

[0150] y los sustituyentes A y R<2>se definen como en cualquiera de las reivindicaciones anteriores. Otra realización de la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula (I), en la que R<2>se selecciona del grupo que consiste en H, alquilo C<1-4>, cicloalquilo C<3-6>, HO-alquil C<1-4>-, fluoroalquilo C<1-4>, R<6>-(H<2>C)<p>- y R<7>-(H<2>C)<q>-;

[0151] en donde

[0152] p es 1;

[0153] q es 2;

[0154] R<6>se selecciona del grupo que consiste en cicloalquilo C<3-6>, C-morfolinilo, C-imidazolilo y C-pirazolilo; en donde dicho C-pirazolilo, C-imidazolilo y C-morfolinilo no está sustituido o está sustituido con alquilo C<1-4>; R<7>se selecciona del grupo que consiste en -O-alquilo C<1-4>, -O-fluoroalquilo C<1-4>, alquil C<1-4>-S(O)<2>-, N-morfolinilo, N-imidazolilo y N-pirazolilo;

[0155] en donde dicho N-pirazolilo, N-imidazolilo, N-morfolinilo no está sustituido o está sustituido con alquilo C<1-4>; y los sustituyentes A y R<1>se definen como en cualquiera de las reivindicaciones anteriores.

[0156] Otra realización de la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula (I), en la que

[0157] R<2>se selecciona del grupo que consiste en H, alquilo C<1-4>, cicloalquilo C<3-6>, HO-alquil C<1-4>-, fluoroalquilo C<1-2>, R<6>-(H<2>C)<p>- y R<7>-(H<2>C)<q>-;

[0158] en donde

[0159] p es 1;

[0160] q es 2;

[0161] R<6>se selecciona del grupo que consiste en cicloalquilo C<3-6>, C-morfolinilo, C-imidazolilo y C-pirazolilo; en donde dicho C-pirazolilo, C-imidazolilo y C-morfolinilo no está sustituido o está sustituido con H<3>C;

[0162] R<7>se selecciona del grupo que consiste en H<3>C-O-, -O-fluorometilo, H<3>C-S(O)<2>-, N-morfolinilo, N-imidazolilo y N-pirazolilo;

[0163] en donde dicho N-pirazolilo, N-imidazolilo, N-morfolinilo no está sustituido o está sustituido con H<3>C;

[0164] y los sustituyentes A y R<1>se definen como en cualquiera de las reivindicaciones anteriores.

[0165] Otra realización de la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula (I), en la que

[0166] R<2>se selecciona del grupo que consiste en H, alquilo C<1-4>, cicloalquilo C<3-6>, HO-alquil C<1-4>-, fluoroalquilo C<1-2>, R<6>-(H<2>C)<p>- y R<7>-(H<2>C)<q>-;

[0167] en donde

[0168] p es 1;

[0169] q es 2;

[0170] R<6>se selecciona del grupo que consiste en cicloalquilo C<3-6>,

[0173]

[0175] y

[0176]

[0178] R7 se selecciona del grupo que consiste en H<3>C-O, -O-fluorometilo, H3C-S(O)2-,

[0179] y

[0180] y los sustituyentes A y R1 se definen como en cualquiera de las reivindicaciones anteriores.

[0181] Otra realización de la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula (I), en la que

[0182] R2 se selecciona del grupo que consiste en H, H<3>C, H<3>CH<2>C, H<3>COH<2>CH<2>C, F<2>HCH<2>C, F<3>CH<2>C, FH<2>CH<2>C, H<3>C(O)<2>SH<2>CH<2>C, F<3>COH<2>CH<2>C,

[0184]

[0186] y

[0187]

[0190] y los sustituyentes A y R1 se definen como en cualquiera de las reivindicaciones anteriores. Otra realización de la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula (I), en la que R2 es H;

[0191] y los sustituyentes A y R1 se definen como en cualquiera de las reivindicaciones anteriores. Se prefiere un compuesto de fórmula (I), seleccionado del grupo que consiste en

[0194]

[0195]

[0196]

[0197]

[0198]

[0200] y el sustituyente A se define como en cualquiera de las reivindicaciones anteriores.

[0201] Se prefiere el compuesto según la fórmula (I) seleccionado de

[0203]

[0205] y el sustituyente A se define como en cualquiera de las reivindicaciones anteriores.

[0206] Se prefiere particularmente el compuesto según la fórmula (I) seleccionado del grupo que consiste en

[0207]

[0208]

[0209]

[0210]

[0211]

[0212]

[0213]

[0216] TÉRMINOS USADOS Y DEFINICIONES

[0218] A los términos no definidos específicamente en el presente documento se les deben los significados que se les darían por un experto en la técnica a la luz de la divulgación y del contexto. Tal como se usan en la memoria descriptiva, sin embargo, a menos que se especifique lo contrario, los siguientes términos tienen el significado indicado y se cumple con las siguientes convenciones.

[0219] En los grupos, radicales o restos definidos a continuación, el número de átomos de carbono se especifica a menudo después del grupo, por ejemplo, “alquilo C<1-6>” significa un grupo o radical alquilo que tiene de 1 a 6 átomos de carbono. En general, en grupos como HO, H<2>N, (O)S, (O)<2>S, NC (ciano), HOOC, F<3>C o similares, el experto en la técnica puede ver el/los punto(s) de unión de radicales a la molécula a partir de las valencias libres del propio grupo. Para grupos combinados que comprenden dos o más subgrupos, el subgrupo mencionado en último lugar es el punto de unión de radicales, por ejemplo, el sustituyente “aril-alquilo C<1-3>” significa un grupo arilo que está unido a un alquilo C<1-3>, el último de los cuales está unido al núcleo o al grupo al que está unido el sustituyente. En el caso de que un compuesto de la presente invención se represente en forma de un nombre químico y como fórmula, en el caso de cualquier discrepancia prevalecerá la fórmula. Puede usarse un asterisco en subfórmulas para indicar el enlace que está conectado a la molécula de núcleo tal como se define.

[0220] La numeración de los átomos de un sustituyente empieza con el átomo que está más próximo al núcleo o al grupo al que está unido el sustituyente.

[0221] Por ejemplo, el término “grupo 3-carboxipropilo” representa el siguiente sustituyente:

[0224]

[0226] en donde el grupo carboxilo está unido al tercer átomo de carbono del grupo propilo. Los términos grupo “1-metilpropilo”, “2,2-dimetilpropilo” o “ciclopropilmetilo” representan los siguientes grupos:

[0229]

[0231] El asterisco puede usarse en subfórmulas para indicar el enlace que está conectado a la molécula de núcleo tal como se define.

[0232] El término “alquilo C<1-n>”, en donde n es un número entero seleccionado de 2, 3, 4 o 5, ya sea solo o en combinación con otro radical, designa un radical hidrocarbonado acíclico, saturado, ramificado o lineal con de 1 a n átomos de C. Por ejemplo, el término alquilo C<1-5>abarca los radicales H<3>C-, H<3>C-CH<2>-, H<3>C-CH<2>-CH<2>-, H<3>C-CH(CH<3>)-, H<3>C-CH<2>-CH<2>-CH<2>-, H<3>C-CH<2>-CH(CH<3>)-, H<3>C-CH(CH<3>)-CH<2>-, H<3>C-C(CH<3>)<2>-, H<3>C-CH<2>-CH<2>-CH<2>-CH<2>-, H<3>C-CH<2>-CH<2>-CH(CH<3>)-, H<3>C-CH<2>-CH(CH<3>)-CH<2>-, H<3>C-CH(CH<3>)-CH<2>-CH<2>-, H<3>C-CH<2>-C(CH<3>)<2>-, H<3>C-C(CH<3>)<2>-CH<2>-, H<3>C-CH(CH<3>)-CH(CH<3>)- y H<3>C-CH<2>-CH(CH<2>CH<3>)-.

[0233] El término “fluoro” añadido a un grupo “alquilo”, “alquileno” o “cicloalquilo” (saturado o insaturado) significa un grupo alquilo o cicloalquilo de este tipo en el que uno o más átomos de hidrógeno están reemplazados por un átomo de flúor. Los ejemplos incluyen, pero no se limitan a: H<2>FC-, HF<2>C- y F<3>C-.

[0234] El término “cicloalquilo C<3-n>”, en donde n es un número entero de desde 4 hasta n, ya sea solo o en combinación con otro radical, designa un radical hidrocarbonado cíclico, saturado, no ramificado, con de 3 a n átomos de C. Por ejemplo, el término cicloalquilo C<3-6>incluye ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo y ciclohexilo.

[0235] El término halógeno designa generalmente flúor, cloro, bromo y yodo.

[0236] El término “fenilo” se refiere al radical del siguiente anillo

[0239]

[0241] El término “tiofenilo” se refiere al radical del siguiente anillo

[0244]

[0247] El término “benzotiofenilo” se refiere al radical del siguiente anillo

[0248]

[0251] El término “benzofuranilo” se refiere al radical del siguiente anillo

[0254]

[0257] El término “tetrazolilo” se refiere al radical del siguiente anillo

[0260]

[0262] El término “dioxodihidropirimidincarboxamida” se refiere al radical del siguiente núcleo

[0265]

[0268] El término “C-morfolinilo” se refiere al radical del siguiente anillo

[0271]

[0273] El término “C-imidazolilo” se refiere al radical del siguiente anillo

[0276]

[0278] El término “C-pirazolilo” se refiere al radical del siguiente anillo

[0281]

[0283] El término “N-morfolinilo” se refiere al radical del siguiente anillo

[0286]

[0288] El término “N-imidazolilo” se refiere al radical del siguiente anillo

[0291]

[0293] El término “N-pirazolilo” se refiere al radical del siguiente anillo

[0294]

[0297] El término “sustituido” tal como se usa en el presente documento, significa que uno cualquiera o más hidrógenos en el átomo designado está reemplazado por una selección del grupo indicado, siempre que no se supere la valencia normal del átomo designado y que la sustitución dé como resultado un compuesto estable.

[0299] A menos que se indique específicamente, a lo largo de toda la memoria descriptiva y las reivindicaciones adjuntas, una fórmula o nombre químico dado abarcará tautómeros y todos los estereoisómeros, isómeros ópticos y geométricos (por ejemplo, enantiómeros, diastereómeros, isómeros E/Z, etc.) y racematos de los mismos así como mezclas en diferentes proporciones de los enantiómeros independientes, mezclas de diastereómeros o mezclas de cualquiera de las formas anteriores en las que existan tales isómeros y enantiómeros, así como sales, incluyendo sales farmacéuticamente aceptables de los mismos y solvatos de los mismos tal como, por ejemplo, hidratos incluyendo solvatos de los compuestos libres o solvatos de una sal del compuesto.

[0301] En general, pueden obtenerse estereoisómeros sustancialmente puros según principios de síntesis conocidos por un experto en el campo, por ejemplo, mediante la separación de mezclas correspondientes, usando materiales de partida estereoquímicamente puros y/o mediante síntesis estereoselectiva. En la técnica se conoce cómo preparar formas ópticamente activas, tal como mediante resolución de formas racémicas o mediante síntesis, por ejemplo, partiendo de materiales de partida ópticamente activos y/o usando reactivos quirales.

[0303] Pueden prepararse compuestos enantioméricamente puros de esta invención o productos intermedios por medio de síntesis asimétrica, por ejemplo, mediante la preparación y la separación posterior de compuestos diastereoméricos o productos intermedios apropiados que pueden separarse mediante métodos conocidos (por ejemplo, mediante separación cromatográfica o cristalización) y/o usando reactivos quirales, tales como materiales de partida quirales, catalizadores quirales o agentes auxiliares quirales.

[0305] Además, el experto en la técnica conoce cómo preparar compuestos enantioméricamente puros a partir de las mezclas racémicas correspondientes, tal como mediante la separación cromatográfica de las mezclas racémicas correspondientes en fases estacionarias quirales; o mediante la resolución de una mezcla racémica usando un agente de resolución apropiado, por ejemplo, por medio de la formación de la sal diastereomérica del compuesto racémico con ácidos o bases ópticamente activos, la resolución posterior de las sales y la liberación del compuesto deseado a partir de la sal; o mediante la derivatización de los compuestos racémicos correspondientes con reactivos auxiliares quirales ópticamente activos, la separación de diastereómeros posterior y la eliminación del grupo auxiliar quiral; o mediante la resolución cinética de un racemato (por ejemplo, mediante resolución enzimática); mediante cristalización enantioselectiva a partir de un conglomerado de cristales enantiomorfos en condiciones adecuadas; o mediante cristalización (fraccional) a partir de un disolvente adecuado en presencia de un agente auxiliar quiral ópticamente activo.

[0307] La frase “farmacéuticamente aceptable” se emplea en el presente documento para hacer referencia a aquellos compuestos, materiales, composiciones y/o formas de dosificación que son, dentro del alcance del juicio médico sensato, adecuados para su uso sin toxicidad, irritación, respuesta alérgica excesiva, u otro problema o complicación, y proporcionales con una relación de beneficio/riesgo razonable.

[0309] Tal como se usa en el presente documento, “sal farmacéuticamente aceptable” se refiere a derivados de los compuestos dados a conocer en los que el compuesto parental forma una sal o un complejo con un ácido o una base. Los ejemplos de ácidos que forman una sal farmacéuticamente aceptable con un compuesto parental que contiene un resto básico incluyen ácidos minerales u orgánicos tales como ácido bencenosulfónico, ácido benzoico, ácido cítrico, ácido etanosulfónico, ácido fumárico, ácido gentísico, ácido bromhídrico, ácido clorhídrico, ácido maleico, ácido málico, ácido malónico, ácido mandélico, ácido metanosulfónico, ácido 4-metilbencenosulfónico, ácido fosfórico, ácido salicílico, ácido succínico, ácido sulfúrico y ácido tartárico.

[0311] Los ejemplos de cationes y bases que forman una sal farmacéuticamente aceptable con un compuesto parental que contiene un resto ácido incluyen Na+, K+, Ca2+, Mg2+, NH<4>+, L-arginina, 2,2'-iminobisetanol, L-lisina, N-metil-D-glucamina o tris(hidroximetil)-aminometano. Las sales farmacéuticamente aceptables de la presente invención pueden sintetizarse a partir del compuesto parental que contiene un resto básico o ácido mediante métodos químicos convencionales. Generalmente, tales sales pueden prepararse haciendo reaccionar las formas de ácido o base libre de estos compuestos con una cantidad suficiente de la base o ácido apropiado en agua o en un diluyente orgánico tal como éter, acetato de etilo, etanol, isopropanol o acetonitrilo, o una mezcla de los mismos.

[0312] Las sales de ácidos distintos a los mencionados anteriormente que, por ejemplo, son útiles para purificar o aislar los compuestos de la presente invención (por ejemplo, sales de trifluoroacetato) forman también parte de la presente invención.

[0313] ENSAYOS BIOLÓGICOS

[0314] Evaluación de la actividad de TRPA1

[0315] Ensayo A: ensayo de TRPA1

[0316] La actividad de los compuestos de la invención puede demostrarse usando el siguiente ensayo celular de TRPA1in vitro:

[0317] Método:

[0318] Una línea de células HEK293 humanas que sobreexpresa el canal iónico de TRPA1 humano (Perkin Elmer, n.° de producto AX-004-PCL) se usa como sistema de prueba para la eficacia y potencia del compuesto. La actividad del compuesto se determina midiendo el efecto de los compuestos sobre la concentración de calcio intracelular inducida mediante el agonismo de AITC (isotiocianato de alilo) en un sistema FLIPRtetra (Molecular Devices). Cultivo celular:

[0319] Las células se obtienen como células congeladas en crioviales y se almacenan hasta su uso a -150°C.

[0320] Las células se hacen crecer en medio de cultivo (medio MEM/EBSS con FCS al 10% y geneticina 0,4 mg/ml). Es importante que la densidad no supere el 90% de confluencia. Para el subcultivo, las células se desprenden de los frascos mediante Versene. El día antes del ensayo, las células se desprenden, se lavan dos veces con medio (medio MEM/EBSS con FCS al 10%) y se siembran 20000 células en 20 |jl/pocillo en placas de 284 pocillos biorrecubiertas con poli-D-lisina (negras, fondo claro, cat. 356697) de Corning. Las placas se incuban durante 24 horas a 37°C/5% de CO2 antes de su uso en el ensayo.

[0321] Preparación de los compuestos

[0322] Los compuestos de prueba se disuelven en DMSO al 100% a una concentración de 10 mM y en una primera etapa se diluyen en DMSO hasta una concentración de 5 mM, seguida de etapas de dilución en serie en DMSO al 100%. El factor de dilución y el número de etapas de dilución pueden variar según las necesidades. Normalmente se preparan 8 concentraciones diferentes mediante diluciones 1:5, diluciones intermedias adicionales (1:20) de las sustancias se llevan a cabo con tampón HBSS/HEPES (1xHEPES, cat. 14065 de Gibco, HEPES 20 mM, cat.

[0323] 83264 de SIGMA, BSA al 0,1% cat.11926 de Invitrogen, pH 7.4

[0324] Ensayo FLIPR:

[0325] El día del ensayo, las células se lavan 3x con tampón de ensayo, quedando 20 j l de tampón en los pocillos tras el lavado. 10 j l del tampón de carga Ca6 kit (cat. R8191 Molecular Devices) en HBSS/HEPES se añaden a las células y las placas se incuban con tapa durante 120 minutos a 37°/5% de CO2. 10 j l de compuesto o controles en tampón HBSS/HEPES/5% de DMSO de la placa de dilución intermedia se añaden cuidadosamente a los pocillos. La luminiscencia (que indica el influjo o la liberación de calcio) se lee en el dispositivo FLIPRtetra durante 10 minutos para monitorizar los efectos inducidos por el compuesto (por ejemplo, agonismo). Finalmente se añaden 10 j l del agonista AITC 50 jM disuelto en tampón HBSS/HEPES/0,05% de DMSO (concentración final 10 jM ) a los pocillos seguido de una lectura adicional en el dispositivo FLIPRtetra durante 10 minutos. El área bajo la curva de señal (AUC) tras la adición de AITC se usa para los cálculos de CI50/% de inhibición.

[0326] Evaluación de los datos y cálculo:

[0327] Cada placa de microtitulación de ensayo contiene pocillos con controles de vehículo (DMSO al 1%) en lugar de compuesto como controles para la luminiscencia inducida por AITC (100%CTL; controles altos) y pocillos con controles de vehículo sin AITC como controles para cambios no específicos en la luminiscencia (0%CTL; controles bajos).

[0328] El análisis de los datos se realiza mediante el cálculo del área bajo la curva de señal de los pocillos individuales. Basándose en este valor se calcula el valor en % para la medición de cada concentración de sustancia (AUC(muestra) - AUC(baja))*100/(AUC(alta) - AUC(baja)) usando el software MegaLab (desarrollo interno). Los valores de CI50 se calculan a partir de los valores de control en % usando el software MegaLab. Cálculo: [y=(ad)/(1+(x/c)Ab)+d], a = valor bajo, d = valor alto; x = conc M; c=CI50 M; b = pendiente; y = % de ctrl

[0329] Tabla 1: Datos biológicos para los compuestos de la invención tal como se obtienen en el ensayo A

[0332]

[0333]

[0335] Tabla 2: Datos biológicos para compuestos de la técnica anterior (ejemplos 28 y 29 en el documento WO2017/060488) tal como se obtienen en el ensayo A.

[0338]

[0340] Tabla 3: Datos biológicos para compuestos de la técnica anterior (ejemplo 31 en L. Schenkel,et al.,J. Med.

[0341] Chem. 2016, 59, 2794-2809) tal como se obtienen en el ensayo A.

[0344]

[0346] Evaluación del aclaramiento microsomal

[0347] Ensayo B: Aclaramiento microsomal:

[0348] La degradación metabólica del compuesto de prueba se somete a ensayo a 37°C con microsomas de hígado agrupados. El volumen de incubación final de 100 |jl por punto de tiempo contiene tampón TRIS pH 7,6 a TA (0,1 M), cloruro de magnesio (5 mM), proteína microsomal (1 mg/ml) y el compuesto de prueba a una concentración final de 1 jM .

[0349] Tras un corto periodo de preincubación a 37°C, las reacciones se inician mediante la adición de beta-nicotinamida adenín dinucleótido fosfato, formada reducida (NADPH, 1 mM) y se terminan transfiriendo una alícuota a disolvente tras diferentes puntos de tiempo (0, 5, 15, 30, 60 min). Adicionalmente, la degradación independiente de NADPH se monitoriza en incubaciones sin NADPH, terminadas en el último punto de tiempo. El [%] que queda de compuesto de prueba tras la incubación independiente de NADPH se refleja mediante el parámetro c(control) (estabilidad metabólica). Las incubaciones extinguidas se sedimentan mediante centrifugación (10000 g, 5 min). Una alícuota del sobrenadante se somete a ensayo mediante LC-MS/MS para la cantidad de compuesto parental. La semivida (t1/2 INVITRO) se determina mediante la pendiente del gráfico semilogarítmico del perfil de concentración-tiempo.

[0350] El aclaramiento intrínseco (CL_INTRÍNSECO) se calcula considerando la cantidad de proteína en la incubación: CL_INTRÍNSECO [jl/min/mg de proteína] = (Ln 2/(semivida [min] * contenido de proteína [mg/ml])) * 1000 CLJNTRÍNSECOJNVIVO [ml/min/kg] = (CL_INTRÍNSECO [jl/min/mg de proteína] x MPPGL [mg de proteína/g de hígado] x factor de hígado [g/kg de peso corporal])/1000

[0351] Q h [% ] = C L [m l/m in /k g ] /flujo sanguíneo hepático [m l/m in /k g ] ) Hepatocelularidad, humana: 120x10e6 células/g de hígado

[0352] Factor de hígado, humano: 25,7 g/kg de peso corporal

[0353] Flujo sanguíneo, humano: 21 ml/(min x kg)

[0354] Tabla 4: Datos biológicos para compuestos de la invención tal como se obtienen en el ensayo B

[0357]

[0358]

[0360] Tabla 5: Datos biológicos para compuestos de la técnica anterior (ejemplos 28 y 29 en el documento WO2017/060488) tal como se obtienen en el ensayo B.

[0363]

[0365] Tabla 6: Datos biológicos para compuestos de la técnica anterior (ejemplo 31 en L. Schenkel,et al.,J. Med.

[0366] Chem. 2016, 59, 2794-2809) tal como se obtienen en el ensayo B.

[0369]

[0371] Evaluación del aclaramiento de hepatocitos

[0372] Ensayo C: Aclaramiento de hepatocitos

[0373] La degradación metabólica del compuesto de prueba se somete a ensayo en una suspensión de hepatocitos. Los hepatocitos (criopreservados) se incuban en medio Eagle modificado de Dulbecco (suplementado con 3,5 |jg de glucagón/500 ml, 2,5 mg de insulina/500 ml y 3,75 mg/500 ml hidrocortisona) que contiene un 5% o 50% de suero de especie.

[0374] Tras una preincubación de 30 min en un incubador (37°C, 10% de CO2), 5 j l de disolución de compuesto de prueba (80 jM ; desde 2 mM en disolución madre de DMSO diluida 1:25 con medio) se añaden a 395 j l de suspensión de hepatocitos (densidad celular en el intervalo de 0,25-5 millones de células/ml dependiendo de la especie, normalmente 1 millón de células/ml; concentración final de compuesto de prueba 1 jM , concentración de DMSO final 0,05%).

[0375] Las células se incuban durante seis horas (incubador, agitador orbital) y se toman muestras (25 jl) a las 0, 0,5, 1, 2, 4 y 6 horas. Las muestras se transfieren a acetonitrilo y se sedimentan mediante centrifugación (5 min). El sobrenadante se transfiere a una nueva placa de 96 pocillos profundos, se evapora bajo nitrógeno y se resuspende. La disminución de compuesto parental se analiza mediante HPLC-MS/MS

[0376] CLint se calcula tal como sigue CL_INTRÍNSECO = Dosis/AUC = (C0/CD)/(AUD cúltim./k) x 1000/60. C0: concentración inicial en la incubación [jM ], CD: densidad celular de células vivas [10e6cells/ml], AUD: área bajo los datos [jM x h], cúltim.: concentración del último punto de dato [jM ], k: pendiente de la línea de regresión para la disminución parental [h-1].

[0377] El aclaramiento intrínseco hepáticoin vitrocalculado puede aumentarse a escala hasta el aclaramiento hepáticoin vivointrínseco y usarse para predecir el aclaramiento (CL) sanguíneoin vivohepático mediante el uso de un modelo de hígado (modelo bien agitado).

[0378] CLJNTRÍNSECOJNVIVO [ml/min/kg] = (CL_INTRÍNSECO [pl/min/10e6cells] x hepatocelularidad [10e6 células/g de hígado] x factor de hígado [g/kg de peso corporal])/1000

[0379] CL [ml/min/kg] = CLJNTRÍNSECOJNVIVO [ml/min/kg] x flujo sanguíneo hepático [ml/min/kg]/(CLjNTRÍNSECOJNVIVO [ml/min/kg] flujo sanguíneo hepático [ml/min/kg])

[0381] Q h [% ] = C L [m l/m in /k g ] /flujo sanguíneo hepático [m l/m in /k g ] ) Hepatocelularidad, humana: 120x10e6 células/g de hígado

[0382] Factor de hígado, humano: 25,7 g/kg de peso corporal

[0383] Flujo sanguíneo, humano: 21 ml/(min x kg)

[0384] Tabla 7: Datos biológicos para compuestos de la invención tal como se obtienen en el ensayo C

[0387]

[0388] Tabla 8: Datos biológicos para compuestos de la técnica anterior (ejemplos 28 y 29 en el documento WO2017/060488) tal como se obtienen en el ensayo C.

[0391]

[0393] Tabla 9: Datos biológicos para compuestos de la técnica anterior (ejemplo 31 en L. Schenkel,et al.,J. Med.

[0394] Chem. 2016, 59, 2794-2809) tal como se obtienen en el ensayo C.

[0397]

[0399] Evaluación de la permeabilidad

[0400] Se siembran células Caco-2 (1 - 2 x 105 células/1 cm2 de área) en insertos de filtro (filtros de policarbonato o PET Costar transwell, 0,4 |jm de tamaño de poro) y se cultivan (DMEM) durante de 10 a 25 días.

[0401] Los compuestos se disuelven en disolvente apropiado (como DMSO, disoluciones madre 1 - 20 mM). Las disoluciones madre se diluyen con tampón HTP-4 (NaCl 128,13 mM, KCl 5,36 mM, MgSO4 1 mM, CaCl2 1,8 mM, NaHCO3 4,17 mM, Na2HPO4 x 7H2O 1,19 mM, NaH2PO4xH2O 0,41 mM, HEPES 15 mM, glucosa 20 mM, BSA al 0,25%, pH 7,2) para preparar las disoluciones de transporte (compuesto 0,1 - 300 jM , DMSO final <= 0,5%). La disolución de transporte (TL) se aplica al lado donador apical o basolateral para medir la permeabilidad A-B o B-A (3 réplicas de filtro), respectivamente. Se recogen muestras al principio y al final del experimento del donador y a diversos intervalos de tiempo durante hasta 2 horas también desde el lado receptor para la medición de concentración mediante HPLC-MS/MS o recuento por escintilación. Los volúmenes de receptor muestreados se reemplazan por disolución de receptor nueva.

[0402] Evaluación de la unión a proteínas plasmáticas

[0403] Esta técnica de diálisis de equilibrio (ED) se usa para determinar la unión fraccionalin vitroaproximada de compuestos de prueba a proteínas plasmáticas. Se usan células de diálisis Dianorm Teflon (micro 0.2). Cada célula consiste en una cámara donadora y una aceptora, separadas por una membrana semipermeable ultradelgada con un límite de peso molecular de 5 kDa. Se preparan disoluciones madre para cada compuesto de prueba en DMSO a 1 mM y se diluyen hasta una concentración final de 1,0 jM . Las disoluciones de diálisis posteriores se preparan en plasma humano o de rata agrupado (con NaEDTA) de donadores macho y hembra. Alícuotas de 200 j l de tampón de diálisis (fosfato de potasio 100 mM, pH 7,4) se dispensan a la cámara de tampón. Alícuotas de 200 j l de disolución de diálisis de compuesto de prueba se dispensan a las cámaras de plasma. Se lleva a cabo una incubación durante 2 horas bajo rotación a 37°C.

[0404] Al final del periodo de diálisis, el dializado se transfiere a tubos de reacción. Los tubos para la fracción de tampón contienen 0,2 ml de ACN/agua (80/20). Alícuotas de 25 j l del dializado de plasma se transfieren a placas de pocillos profundos y se mezclan con 25 j l de ACN/agua (80/20), 25 j l de tampón, 25 j l de disolución de calibración y 25 j l de disolución estándar interna. Se realiza una precipitación de proteína añadiendo 200 j l de ACN. Alícuotas de 50 j l del dializado de tampón se transfieren a placas de pocillos profundos y se mezclan con 25 j l de plasma de blanco, 25 j l de disolución estándar interna y 200 j l de ACN. Las muestras se miden en sistemas de HPLC-MS/MS y se evalúan con software Analyst. El porcentaje de unión se calcula con la fórmula: % unido = (concentración de plasma - concentración de tampón/concentración de plasma) X 100.

[0405] Evaluación de la solubilidad

[0406] Se preparan disoluciones saturadas en placas de pocillos (el formato depende del robot) añadiendo un volumen apropiado de medios acuosos seleccionados (normalmente en el intervalo de 0,25 - 1,5 ml) a cada pocillo que contiene una cantidad conocida de sustancia farmacológica sólida (normalmente en el intervalo de 0,5 - 5,0 mg). Los pocillos se sacuden o agitan durante un periodo de tiempo predefinido (normalmente en un intervalo de 2 - 24 h) y entonces se filtran usando membranas de filtro apropiadas (normalmente filtros de PTFE con 0,45 jm de tamaño de poro). La absorción de filtro se evita descartando las primeras pocas gotas de filtrado. La cantidad de sustancia farmacológica disuelta se determina mediante espectroscopia UV. Además, el pH de la disolución saturada acuosa se mide usando un pH-metro de electrodo de vidrio.

[0407] Evaluación de características farmacocinéticas en roedores

[0408] El compuesto de prueba se administra o bien por vía intravenosa a ratas alimentadas o bien por vía oral a ratas en ayunas. Se toman muestras de sangre a varios puntos de tiempo tras la aplicación del compuesto de prueba, se someten a anticoagulación y se centrifugan.

[0410] La concentración de analitos - el compuesto administrado y/o metabolitos - se cuantifica en las muestras de plasma. Los parámetros PK se calculan usando métodos no compartimentados. El AUC y la Cmáx se normalizan a una dosis de 1 |jmol/kg.

[0412] Evaluación del metabolismo en hepatocitos humanosin vitro

[0414] La ruta metabólica de un compuesto de prueba se investiga usando hepatocitos humanos primarios en suspensión. Tras la recuperación a partir de la criopreservación, los hepatocitos humanos se incuban en medio Eagle modificado de Dulbecco que contiene un 5% de suero humano y suplementado con 3,5 jg de glucagón/500 ml, 2,5 mg de insulina/500 ml y 3,75 mg/500 ml de hidrocortisona.

[0416] Tras una preincubación de 30 min en un incubador de cultivo celular (37°C, 10% de CO<2>), la disolución de compuesto de prueba se añade en una cantidad conocida a la suspensión de hepatocitos para obtener una densidad celular final de 1,0*106 a 4,0*106 células/ml (dependiendo de la tasa de renovación metabólica del compuesto observada con hepatocitos humanos primarios), una concentración de compuesto de prueba final de 10 jM y una concentración de DMSO final del 0,05%.

[0418] Las células se incuban durante seis horas en un incubador de cultivo celular sobre un agitador horizontal y las muestras se retiran de la incubación tras 0, 0.5, 1, 2, 4 o 6 horas, dependiendo de la tasa de renovación metabólica. Las muestras se extinguen con acetonitrilo y se sedimentan mediante centrifugación. El sobrenadante se transfiere a una placa de 96 pocillos profundos, se evapora bajo nitrógeno y se resuspende antes del bioanálisis mediante cromatografía de líquidos-espectrometría de masas de alta resolución para la identificación de supuestos metabolitos.

[0420] Las estructuras se asignan provisionalmente basándose en datos de transformada de Fourier-MSn. Los metabolitos se notifican como porcentaje del parental en incubación de hepatocitos humanos con un umbral de > 4%.

[0422] MÉTODO DE TRATAMIENTO

[0424] La presente invención se refiere a compuestos de fórmula general 1 que son útiles en la prevención y/o el tratamiento de una enfermedad y/o estado asociado con o modulado por la actividad de TRPA1, incluyendo, pero sin limitarse a, el tratamiento y/o la prevención de enfermedad fibrótica, trastornos inflamatorios e inmunorreguladores, enfermedades o molestias respiratorias o gastrointestinales, enfermedades oftálmicas, enfermedades inflamatorias de las articulaciones y enfermedades inflamatorias de la nasofaringe, los ojos y la piel, y dolor y trastornos neurológicos. Dichos trastornos, enfermedades y molestias incluyen tos, fibrosis pulmonar idiopática, otras enfermedades intersticiales pulmonares y otras enfermedades fibróticas, asmáticas o alérgicas, enfermedades eosinofílicas, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, así como trastornos inflamatorios e inmunorreguladores, tales como artritis reumatoide y aterosclerosis, así como dolor y trastornos neurológicos, tales como dolor agudo, dolor quirúrgico, dolor crónico y depresión y trastornos de la vejiga.

[0426] Los compuestos de fórmula general 1 son útiles para la prevención y/o el tratamiento de:

[0428] (1) Tos tal como tos idiopática crónica o tos resistente crónica, tos asociada con asma, EPOC, cáncer de pulmón, infección posvírica y fibrosis pulmonar idiopática y otras enfermedades intersticiales pulmonares.

[0429] (2) Enfermedades fibróticas pulmonares tales como neumonitis o neumonitis intersticial asociada con colagenosis, por ejemplo, lupus eritematoso, esclerodermia sistémica, artritis reumatoide, polimiositis y dermatomisitis, neumonías intersticiales idiopáticas, tales como fibrosis de pulmón pulmonar (FpI), neumonía intersticial no específica, enfermedad pulmonar intersticial asociada con bronquiolitis respiratoria, neumonía intersticial de descamación, neumonía criptogenética organizada, neumonía intersticial aguda y neumonía intersticial linfocítica, limangioleiomiomatosis, proteinosis alveolar pulmonar, histiocitosis de células de Langerhan, fibroelastosis parenquimal pleural, enfermedades de pulmón intersticiales de causa conocida, tales como neumonitis intersticial como resultado de exposiciones ocupacionales tales como asbestosis, silicosis, pulmón de minero (polvo de carbón), pulmón de granjero (heno y moho), pulmón de criador de palomas (aves) u otros desencadenantes portados por el aire ocupacionales tales como polvo de metal o micobacterias, o como resultado de tratamiento tal como radiación, metotrexato, amiodarona, nitrofurantoína o agentes quimioterápicos, o para enfermedad granulomatosa, tal como granulomatosis con poliangitis, síndrome de Churg-Strauss, sarcoidosis, neumonitis por hipersensibilidad, o neumonitis intersticial provocada por diferentes orígenes, por ejemplo, aspiración, inhalación de gases tóxicos, vapores, bronquitis o neumonitis o neumonitis intersticial provocada por insuficiencia cardiaca, rayos X, radiación, quimioterapia, M. boeck o sarcoidosis, granulomatosis, fibrosis quística o mucoviscidosis, o deficiencia de alfa-1-antitripsina.

[0430] (3) Otras enfermedades fibróticas tales como fibrosis hepática con puentes, cirrosis hepática, esteatohepatitis no alcohólica (NASH), fibrosis auricular, fibrosis endomiocárdica, infarto antiguo de miocardio, cicatriz glial, rigidez arterial, artrofibrosis, contractura de Dupuytren, queloide, esclerodermia/esclerosis sistémica, fibrosis mediastínica, mielofibrosis, enfermedad de Peyronie, fibrosis sistémica nefrogénica, fibrosis retroperitoneal, capsulitis adhesiva.

[0432] (4) Enfermedades y estados inflamatorios, autoinmunes o alérgicos tales como rinitis o sinusitis alérgica o no alérgica, sinusitis o rinitis crónica, poliposis nasal, rinosinusitis crónica, rinosinusitis aguda, asma, asma pediátrico, bronquitis alérgica, alveolitis, vías respiratorias hiperreactivas, conjuntivitis alérgica, bronquiectasia, síndrome de dificultad respiratoria del adulto, edema bronquial y pulmonar, bronquitis o neumonitis, celulitis eosinofílica (por ejemplo, síndrome de Well), neumonías eosinofílicas (por ejemplo, síndrome de Loeffler, neumonía eosinofílica crónica), fasciitis eosinofílica (por ejemplo, síndrome de Shulman), hipersensibilidad de tipo retardado, asma no alérgico; broncoconstricción inducida por ejercicio; enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), bronquitis aguda, bronquitis crónica, tos, enfisema pulmonar; anafilaxis sistémica o respuestas de hipersensibilidad, alergias a fármacos (por ejemplo, a penicilina, cefalosporina), síndrome de eosinofiliamialgia debido a la ingesta de triptófano contaminado, alergias a picaduras de insectos; enfermedades autoinmunitarias, tales como artritis reumatoide, enfermedad de Graves, síndrome de Sjogren, artritis psoriásica, esclerosis múltiple, lupus eritematoso sistémico, miastenia grave, trombocitopenia inmune (ITP en adultos, trombocitopenia neonatal, ITP pediátrica), anemia hemolítica inmune (autoinmune e inducida por fármacos), síndrome de Evans (citopenias inmunes de plaquetas y glóbulos rojos), enfermedad de Rh del recién nacido, síndrome de Goodpasture (enfermedad anti-GBM), celiaquía, diabetes de aparición juvenil por cardiomiopatía autoinmune; glomerulonefritis, tiroiditis autoinmune, enfermedad de Behcet; rechazo de injerto (por ejemplo, en trasplante), incluyendo rechazo de aloinjerto o enfermedad de injerto frente a huésped; enfermedades intestinales inflamatorias, tales como enfermedad de Crohn y colitis ulcerosa; espondiloartropatías; esclerodermia; psoriasis (incluyendo psoriasis mediada por células T) y dermatosis inflamatorias tales como una dermatitis, eccema, dermatitis atópica, dermatitis por contacto alérgica, urticaria; vasculitis (por ejemplo, vasculitis necrotizante, cutánea y por hipersensibilidad); eritema nudoso; miositis eosinofílica, fasciitis eosinofílica, cánceres con infiltración de leucocitos de la piel u órganos; enfermedades oftálmicas tales como degeneración macular relacionada con la edad, retinopatía diabética y edema macular diabético, queratitis, queratitis eosinofílica, queratoconjuntivitis, queratoconjuntivitis vernal, cicatrices, cicatrices del segmento anterior, blefaritis, blefaroconjuntivitis, trastornos bullosos, penfigoide cicatricial, melanoma conjuntival, conjuntivitis papilar, ojo seco, epiescleritis, glaucoma, gliosis, granuloma anular, oftalmopatía de Graves, melanoma intraocular, pinguécula, vitreorretinopatía proliferativa, pterigión, escleritis, uveítis, brotes de gota agudos, gota u osteoartritis.

[0434] (5) Dolor tal como síndrome del dolor idiopático crónico, dolor neuropático, disestesia, alodinia, migraña, dolor dental y dolor posquirúrgico.

[0436] (6) Depresión, ansiedad, neuropatía diabética y trastornos de la vejiga tales como obstrucción de la salida de la vejiga, vejiga hiperactiva, cistitis; lesión por reperfusión miocárdica o lesión por isquemia cerebral.

[0438] Por consiguiente, la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula general 1 para su uso como medicamento.

[0440] Además, la presente invención se refiere al uso de un compuesto de fórmula general 1 para el tratamiento y/o la prevención de una enfermedad y/o estado asociado con o modulado por la actividad de TRPA1.

[0442] Además, la presente invención se refiere al uso de un compuesto de fórmula general 1 para el tratamiento y/o la prevención de enfermedad fibrótica, trastornos inflamatorios e inmunorreguladores, enfermedades o molestias respiratorias o gastrointestinales, enfermedades oftálmicas, enfermedades inflamatorias de las articulaciones y enfermedades inflamatorias de la nasofaringe, ojos y la piel, dolor y trastornos neurológicos. Dichos trastornos, enfermedades y molestias incluyen tos, fibrosis pulmonar idiopática, otras enfermedades intersticiales pulmonares y otras enfermedades fibróticas, asmáticas o alérgicas, enfermedades eosinofílicas, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, así como trastornos inflamatorios e inmunorreguladores, tal como artritis reumatoide y aterosclerosis, así como dolor y trastornos neurológicos, tales como dolor agudo, dolor quirúrgico, dolor crónico y depresión y trastornos de la vejiga.

[0444] Además, la presente invención se refiere al uso de un compuesto de fórmula general 1 para el tratamiento y/o la prevención de:

[0446] (1) Tos tal como tos idiopática crónica o tos resistente crónica, tos asociada con asma, EPOC, cáncer de pulmón, infección posvírica y fibrosis pulmonar idiopática y otras enfermedades intersticiales pulmonares.

[0447] (2) Enfermedades fibróticas pulmonares tales como neumonitis o neumonitis intersticial asociada con colagenosis, por ejemplo, lupus eritematoso, esclerodermia sistémica, artritis reumatoide, polimiositis y dermatomisitis, neumonías intersticiales idiopáticas, tales como fibrosis de pulmón pulmonar (FPI), neumonía intersticial no específica, enfermedad pulmonar intersticial asociada con bronquiolitis respiratoria, neumonía intersticial de descamación, neumonía criptogenética organizada, neumonía intersticial aguda y neumonía intersticial linfocítica, limangioleiomiomatosis, proteinosis alveolar pulmonar, histiocitosis de células de Langerhan, fibroelastosis parenquimal pleural, enfermedades de pulmón intersticiales de causa conocida, tales como neumonitis intersticial como resultado de exposiciones ocupacionales tales como asbestosis, silicosis, pulmón de minero (polvo de carbón), pulmón de granjero (heno y moho), pulmón de criador de palomas (aves) u otros desencadenantes portados por el aire ocupacionales tales como polvo de metal o micobacterias, o como resultado de tratamiento tal como radiación, metotrexato, amiodarona, nitrofurantoína o agentes quimioterápicos, o para enfermedad granulomatosa, tal como granulomatosis con poliangitis, síndrome de Churg-Strauss, sarcoidosis, neumonitis por hipersensibilidad, o neumonitis intersticial provocada por diferentes orígenes, por ejemplo, aspiración, inhalación de gases tóxicos, vapores, bronquitis o neumonitis o neumonitis intersticial provocada por insuficiencia cardiaca, rayos X, radiación, quimioterapia, M. boeck o sarcoidosis, granulomatosis, fibrosis quística o mucoviscidosis, o deficiencia de alfa-1-antitripsina.

[0449] (3) Otras enfermedades fibróticas tales como fibrosis hepática con puentes, cirrosis hepática, esteatohepatitis no alcohólica (NASH), fibrosis auricular, fibrosis endomiocárdica, infarto antiguo de miocardio, cicatriz glial, rigidez arterial, artrofibrosis, contractura de Dupuytren, queloide, esclerodermia/esclerosis sistémica, fibrosis mediastínica, mielofibrosis, enfermedad de Peyronie, fibrosis sistémica nefrogénica, fibrosis retroperitoneal, capsulitis adhesiva.

[0451] (4) Enfermedades y estados inflamatorios, autoinmunes o alérgicos tales como rinitis o sinusitis alérgica o no alérgica, sinusitis o rinitis crónica, poliposis nasal, rinosinusitis crónica, rinosinusitis aguda, asma, asma pediátrico, bronquitis alérgica, alveolitis, vías respiratorias hiperreactivas, conjuntivitis alérgica, bronquiectasia, síndrome de dificultad respiratoria del adulto, edema bronquial y pulmonar, bronquitis o neumonitis, celulitis eosinofílica (por ejemplo, síndrome de Well), neumonías eosinofílicas (por ejemplo, síndrome de Loeffler, neumonía eosinofílica crónica), fasciitis eosinofílica (por ejemplo, síndrome de Shulman), hipersensibilidad de tipo retardado, asma no alérgico; broncoconstricción inducida por ejercicio; enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), bronquitis aguda, bronquitis crónica, tos, enfisema pulmonar; anafilaxis sistémica o respuestas de hipersensibilidad, alergias a fármacos (por ejemplo, a penicilina, cefalosporina), síndrome de eosinofiliamialgia debido a la ingesta de triptófano contaminado, alergias a picaduras de insectos; enfermedades autoinmunitarias, tales como artritis reumatoide, enfermedad de Graves, síndrome de Sjogren, artritis psoriásica, esclerosis múltiple, lupus eritematoso sistémico, miastenia grave, trombocitopenia inmune (ITP en adultos, trombocitopenia neonatal, ITP pediátrica), anemia hemolítica inmune (autoinmune e inducida por fármacos), síndrome de Evans (citopenias inmunes de plaquetas y glóbulos rojos), enfermedad de Rh del recién nacido, síndrome de Goodpasture (enfermedad anti-GBM), celiaquía, diabetes de aparición juvenil por cardiomiopatía autoinmune; glomerulonefritis, tiroiditis autoinmune, enfermedad de Behcet; rechazo de injerto (por ejemplo, en trasplante), incluyendo rechazo de aloinjerto o enfermedad de injerto frente a huésped; enfermedades intestinales inflamatorias, tales como enfermedad de Crohn y colitis ulcerosa; espondiloartropatías; esclerodermia; psoriasis (incluyendo psoriasis mediada por células T) y dermatosis inflamatorias tales como una dermatitis, eccema, dermatitis atópica, dermatitis por contacto alérgica, urticaria; vasculitis (por ejemplo, vasculitis necrotizante, cutánea y por hipersensibilidad); eritema nudoso; miositis eosinofílica, fasciitis eosinofílica, cánceres con infiltración de leucocitos de la piel u órganos; enfermedades oftálmicas tales como degeneración macular relacionada con la edad, retinopatía diabética y edema macular diabético, queratitis, queratitis eosinofílica, queratoconjuntivitis, queratoconjuntivitis vernal, cicatrices, cicatrices del segmento anterior, blefaritis, blefaroconjuntivitis, trastornos bullosos, penfigoide cicatricial, melanoma conjuntival, conjuntivitis papilar, ojo seco, epiescleritis, glaucoma, gliosis, granuloma anular, oftalmopatía de Graves, melanoma intraocular, pinguécula, vitreorretinopatía proliferativa, pterigión, escleritis, uveítis, brotes de gota agudos, gota u osteoartritis.

[0453] (5) Dolor tal como síndrome del dolor idiopático crónico, dolor neuropático, disestesia, alodinia, migraña, dolor dental y dolor posquirúrgico.

[0455] (6) Depresión, ansiedad, neuropatía diabética y trastornos de la vejiga tales como obstrucción de la salida de la vejiga, vejiga hiperactiva, cistitis; lesión por reperfusión miocárdica o lesión por isquemia cerebral.

[0457] En un aspecto adicional, la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula general 1 para su uso en el tratamiento y/o la prevención de enfermedades y estados mencionados anteriormente.

[0459] En un aspecto adicional, la presente invención se refiere al uso de un compuesto de fórmula general 1 para la preparación de un medicamento para el tratamiento y/o la prevención de enfermedades y estados mencionados anteriormente.

[0461] TERAPIA DE COMBINACIÓN

[0463] Los compuestos de la invención pueden combinarse adicionalmente con uno o más, preferiblemente un agente terapéutico adicional. Según una realización, el agente terapéutico adicional se selecciona del grupo de agentes terapéuticos útiles en el tratamiento de enfermedades o trastornos descritos anteriormente en el presente documento, en particular asociados con enfermedades fibróticas, trastornos inflamatorios e inmunorreguladores, enfermedades o molestias respiratorias o gastrointestinales, enfermedades inflamatorias de las articulaciones o de la nasofaringe, los ojos y la piel o estados tales como por ejemplo, tos, fibrosis pulmonar idiopática, otras enfermedades intersticiales pulmonares, asma o enfermedades alérgicas, enfermedades eosinofílicas, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, dermatitis atópica así como patologías autoinmunes, tales como artritis reumatoide y aterosclerosis, o agentes terapéuticos útiles para el tratamiento de enfermedades oftálmicas, dolor y depresión.

[0465] Los agentes terapéuticos adicionales que son adecuados para tales combinaciones incluyen en particular aquellos que, por ejemplo, potencian el efecto terapéutico de una o más sustancias activas con respecto a una de las indicaciones mencionadas y/o permiten reducir la dosificación de una o más sustancias activas.

[0467] Por tanto, un compuesto de la invención puede combinarse con uno o más agentes terapéuticos adicionales seleccionados del grupo que consiste en agentes antifibróticos, agentes antitusivos, agentes antiinflamatorios, agentes anti-dermatitis atópica, analgésicos, anticonvulsivos, ansiolíticos, sedantes, relajantes de músculos esqueléticos o antidepresivos.

[0469] Agentes antifibróticos son, por ejemplo, nintedanib, pirfenidona, inhibidores de la fosfodiesterasa-IV (PDE4) tal como roflumilast, inhibidores de autotaxina tales como GLPG-1690 o BBT-877; anticuerpos de bloqueo del factor de crecimiento de tejido conectivo (CTGF) tal como Pamrevlumab; anticuerpos de bloqueo del receptor de factor de activación de células B (BAFF-R) tal como Lanalumab; inhibidores del bloqueo de alfa-V/beta-6 tales como BG-00011/STX-100, pentraxina-2 (PTX-2) recombinante tal como PRM-151; inhibidores de la quinasa N-terminal c-Jun (JNK) tal como CC-90001; inhibidores de la galectina-3 tal como TD-139; inhibidores del receptor 84 acoplado a proteína G (GPR84) tal como GLPG-1205; inhibidores duales del receptor 84 acoplado a proteína G/receptor 40 acoplado a proteína G tal como PBI-4050; inhibidores de la proteína quinasa 2 que contiene hélice helicoidal asociada a Rho (ROCK2) tal como KD-025; ARN de interferencia pequeño de proteína de choque térmico 47 (HSP47) tales como BMS-986263/ND-L02-s0201; inhibidor de la ruta de Wnt tal como SM-04646; inhibidores de LD4/PDE3/4 tal como Tipelukast; dominios inmunomoduladores recombinantes de histidil tARN sintetasa (HARS) tal como ATYR-1923; inhibidores de la prostaglandina sintasa tales como ZL-2102/SAR-191801; ácido 15-hidroxieicosapentaenoico (15-HEPE, por ejemplo, DS-102); inhibidores de lisil oxidasa tipo 2 (LOXL2) tales como PAT-1251, PXS-5382/PXS-5338; inhibidores duales de fosfoinositida 3-quinasas (PI3K)/diana de mamífero de rapamicina (mTOR) tal como HEC-68498; inhibidores de la calpaína tal como BLD-2660; inhibidores de la proteína quinasa quinasa quinasa activada por mitógenos (MAP3K19) tal como MG-S-2525; inhibidores de la quitinasa tal como OATD-01; inhibidores de la proteína quinasa 2 activada por proteína quinasa activada por mitógenos (MAPKAPK2) tal como MMI-0100; ARN de interferencia pequeño del factor de crecimiento transformante beta 1 (TGF-beta1) tales como TRK250/BNC-1021; o antagonistas del receptor de ácido lisofosfatídico tal como BMS-986278.

[0471] Agentes antitusivos son, por ejemplo, antagonistas del receptor purinoceptor 3 (P2X3) tales como gefapixant, S-600918, BAY-1817080 o BLU-5937; antagonista del receptor de neuroquinina 1 (NK-1) tal como Orvepitant, Aprepitant; estimulador de la subunidad del receptor acetilcolina nicotínico alfa 7 tales como ATA-101/bradaniclina; codeína, gabapentina, pregablina o azitromicina. Agentes antiinflamatorios son, por ejemplo, corticosteroides tales como prednisolona o dexametasona; inhibidores de la ciclo-oxigenasa-2 (COX2) tales como celecoxib, rofecoxib, parecoxib, valdecoxib, deracoxib, etoricoxib o lumiracoxib; antagonistas de prostaglandina E2; antagonistas de leucotrieno B4; antagonistas de leucotrieno D4 tal como monteleukast; inhibidores de la 5-lipoxigenasa; u otros agentes antiinflamatorios no esteroideos (AINE) tales como aspirina, diclofenaco, diflunisal, etodolaco, ibuprofeno o indometacina.

[0473] Agentes anti-dermatitis atópica son, por ejemplo, ciclosporina, metotrexato, micofenolato mofetilo, azatioprina, inhibidores de la fosfodiesterasa (por ejemplo, apremilast, crisaborol), inhibidores de la quinasa asociada a Janus (JAK) (por ejemplo, tofacitinib), anticuerpos neutralizantes frente a IL-4/IL-13 (por ejemplo, dupilamab), IL-13 (por ejemplo, lebrikizumab, tralokinumab) y IL-31 (nemolizumab). Analgésicos son, por ejemplo, de tipo opioide, tal como morfina, oximorfina, levopanol, oxicodona, propoxifeno, nalmefeno, fentanilo, hidrocodona, hidromorfona, meripidina, metadona, nalorfina, naloxona, naltrexona, buprenorfina, butorfanol, nalbufina, pentazocina; o de tipo no opioide, tal como acetofenamina.

[0475] Antidepresivos son, por ejemplo, antidepresivos tricíclicos tales como amitriptilina, clomipramina, despramina, doxepina, desipramina, imipramina, nortriptilina; antidepresivos inhibidores de la recaptación de serotonina selectivos (SSRI) tales como fluoxetina, paroxetina, sertralina, citalopram, escitalopram; antidepresivos inhibidores de la recaptación de norepinefrina (SNRI) tales como maprotilina, lofepramina, mirtazapina, oxaprotilina, fezolamina, tomoxetina, mianserina, buproprión, hidroxibuproprión, nomifensina, viloxazina; antidepresivos inhibidores de la recaptación de serotonina-norepinefrina duales (SNRI) tales como duloxetina, venlafaxina, desvenlafaxina, levomilnaciprán; antidepresivos atípicos tales como trazodona, mirtazapina, vortioxetina, vilazodona, bupropión; o antidepresivos inhibidores de la monoamina oxidasa (MAOI) tales como tranilcipromina, fenelzina o isocarboxazida.

[0476] Ansiolíticos son, por ejemplo, benzodiazepinas tales como alprazolam, bromazepam, clordiazepóxido, clonazepam, clorazepato, diazepam, flurazepam, lorazepam, oxazepam, temazepam, triazolam o tofisopam; o son hipnóticos distintos de benzodiazepina tales como eszopiclona, zaleplón, zolpidem o zopiclona; o son carbamatos, por ejemplo, meprobamato, carisoprodol, tibamato o lorbamato; o son antihistaminas tales como hidroxizina, clorfeniramina o difenhidramina.

[0478] Sedantes son, por ejemplo, sedantes barbitúricos, tales como amobarbital, aprobarbital, butabarbital, butabital, mefobarbital, metarbital, metohexital, pentobarbital, secobarbital, talbutal, teamilal o tiopental; o son sedantes no barbitúricos tales como glutetimida, meprobamato, metacualona o dicloalfenazona.

[0480] Relajantes de músculos esqueléticos son, por ejemplo, baclofeno, meprobamato, carisoprodol, ciclobenzaprina, metaxalona, metocarbamol, tizanidina, clorzoxazona u orfenadrina. Otras parejas de combinación adecuadas son inhibidores de inhibidores de la acetilcolinesterasa tal como donepezilo; antagonistas de 5-HT-3 tal como ondansetrón; antagonistas del receptor de glutamato metabotrópico; antiarrítmicos tales como mexiletina o fenitoína; o antagonistas del receptor de NMDA. Parejas de combinación adecuadas adicionales son medicaciones para la incontinencia, por ejemplo, anticolinérgicos tales como oxibutinina, tolterodina, darifenacina, fesoterodina, solifenacina o trospio; o son relajantes del músculo esquelético de la vejiga tal como mirabegrón; o son alfabloqueantes tales como tamsulosina, alfuzosina, silodosina, doxazosina o terazosina.

[0482] La dosificación para las parejas de combinación mencionadas anteriormente es de desde habitualmente 1/5 de la dosis mínima recomendada normalmente hasta 1/1 de la dosis recomendada normalmente.

[0484] Por tanto, en otro aspecto, esta invención se refiere al uso de un compuesto según la invención en combinación con uno o más agentes terapéuticos adicionales descritos anteriormente en el presente documento y a continuación en el presente documento para el tratamiento de enfermedades o estados que pueden verse afectados o que están mediados por TRPA1, en particular enfermedades o estados tal como se han descrito anteriormente en el presente documento y a continuación en el presente documento.

[0486] En un aspecto adicional, esta invención se refiere a un método para tratar una enfermedad o estado que puede verse influido por la inhibición de TRPA1 en un paciente que incluye la etapa de administrar al paciente que necesita tal tratamiento una cantidad terapéutica efectiva de un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en combinación con una cantidad terapéuticamente efectiva de uno o más agentes terapéuticos adicionales.

[0488] En un aspecto adicional, esta invención se refiere al uso de un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en combinación con uno o más agentes terapéuticos adicionales para el tratamiento de enfermedades o estados que pueden verse influidos por la inhibición de TRPA1 en un paciente que o necesita.

[0490] En aún otro aspecto, la presente invención se refiere a un método para el tratamiento de una enfermedad o estado mediado por la actividad de TRPA1 en un paciente que incluye la etapa de administrar al paciente, preferiblemente un humano, que necesita tal tratamiento una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la presente invención en combinación con una cantidad terapéuticamente efectiva de uno o más agentes terapéuticos adicionales descritos anteriormente en el presente documento y a continuación en el presente documento.

[0492] El uso del compuesto según la invención en combinación con el agente terapéutico adicional puede tener lugar simultáneamente o en momentos escalonados.

[0494] El compuesto según la invención y el uno o más agentes terapéuticos adicionales pueden estar ambos presentes juntos en una formulación, por ejemplo, un comprimido o cápsula, o por separado en dos formulaciones idénticas o diferentes, por ejemplo, como un denominado kit de partes. En consecuencia, en otro aspecto, esta invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende un compuesto según la invención y uno o más agentes terapéuticos adicionales descritos anteriormente en el presente documento y a continuación en el presente documento, opcionalmente junto con uno o más portadores y/o diluyentes inertes.

[0496] En aún otro aspecto, la presente invención se refiere al uso de un compuesto según la invención en un dispositivo de medición de la tos.

[0498] Otras características y ventajas de la presente invención resultarán evidentes a partir de los siguientes ejemplos más detallados que ilustran, a modo de ejemplo, los principios de la invención.

[0500] PREPARACIÓN

[0502] Los compuestos según la presente invención y sus productos intermedios pueden obtenerse usando métodos de síntesis que conoce un experto en la técnica y descritos en la bibliografía de síntesis orgánica. Preferiblemente, los compuestos se obtienen de manera análoga a los métodos de preparación explicados más completamente a continuación en el presente documento, en particular tal como se describe en la sección experimental. En algunos casos, el orden a la hora de llevar a cabo las etapas de reacción puede variarse. Las variantes de los métodos de reacción que conoce un experto en la técnica, pero no descritos en detalle en el presente documento, también pueden usarse.

[0504] Los procesos generales para preparar los compuestos según la invención resultarán evidentes para un experto en la técnica estudiando los siguientes esquemas. Cualquier grupo funcional en los materiales de partida o productos intermedios puede protegerse usando grupos protectores convencionales. Estos grupos protectores pueden escindirse de nuevo en una fase adecuada dentro de la secuencia de reacción usando métodos familiares para el experto en la técnica.

[0506] Los compuestos según la invención se preparan mediante los métodos de síntesis descritos a continuación en el presente documento en los que los sustituyentes de las fórmulas generales tienen los significados facilitados anteriormente en el presente documento. Estos métodos están previstos como ilustración de la invención sin restringir su contenido y el alcance de los compuestos reivindicado para estos ejemplos. Cuando se describe la preparación de compuestos de partida, están disponibles comercialmente o pueden prepararse de manera análoga a compuestos o métodos conocidos descritos en el presente documento. Las sustancias descritas en la bibliografía se preparan según los métodos de síntesis publicados. Las abreviaturas son tal como se definen en la sección de Ejemplos.

[0508] Esquema 1

[0511]

[0514] En el esquema 1, el clorometiltetrazol se N-alquila con un derivado de etanona apropiado que porta un grupo saliente “Lg ” (por ejemplo, Cl o Br) alfa con respecto al grupo carbonilo en presencia de una base (por ejemplo, K<2>CO<3>) para dar una mezcla de dos regioisómeros. El regioisómero no deseado (no mostrado) puede eliminarse mediante cromatografía usando un gradiente apropiado. La cetona resultante (A) puede reducirse de un modo enantioselectivo usando sistemas catalíticos apropiados usando un complejo de metal de transición (de, por ejemplo, Ru o Ir) en combinación con un ligando quiral (por ejemplo, ([(1S,2S)-2-amino-1,2-difeniletil](4-toluenosulfonil)amido) y una fuente de hidrógeno tal como complejo de ácido fórmico-trietilamina para dar alcohol (B).

[0515] El derivado de uracilo (D) puede sintetizarse a partir de una urea monosustituida y 2-(etoximetiliden)propanodioato de 1,3-dietilo en condiciones puras a temperatura elevada para o bien dar directamente (D) o bien dar (C), que puede hacerse reaccionar adicionalmente para dar (D) en condiciones básicas tales como NaOEt en EtOH a temperatura elevada. La amida primaria (E) puede sintetizarse a partir de éster (D) agitando con amoniaco en un disolvente tal como agua o un alcohol a temperatura elevada en un recipiente sellado.

[0517] Los compuestos finales (I) pueden sintetizarse mediante la alquilación de (E) con el producto intermedio (B) en presencia de una base tal como K<2>CO<3>. Alternativamente, la alquilación del producto intermedio (D) con (B) en presencia de una base da (F), que puede hidrolizarse con un reactivo adecuado tal como LiOH para dar un ácido (G). El ácido (G) puede acoplarse posteriormente a una amina en presencia de un reactivo de acoplamiento de amida tal como<h>A<t>U y en presencia de una base tal como DIPEA para proporcionar los compuestos finales (I).

[0518] Alternativamente, pueden prepararse compuestos de fórmula (I) tal como se muestra en el esquema 2 a continuación.

[0521]

[0524] En el esquema 2, el producto intermedio (H) puede prepararse mediante la alquilación de (E) con un derivado de acetonitrilo que porta un grupo saliente “LG” (por ejemplo, Cl o Br) en presencia de una base tal como DIPEA. La formación del tetrazol (J) puede llevarse a cabo mediante condiciones de reacción típicas para la formación de tetrazol (por ejemplo, usando NaN3 en presencia de TEA/hidrocloruro de TEA en DMF). La alquilación del tetrazol (J) con un derivado de etanona apropiado que porta un grupo saliente “LG” (por ejemplo, Cl o Br) alfa con respecto al grupo carbonilo se ejecuta en presencia de una base tal como DIPEA para proporcionar una mezcla de dos regioisómeros. El regioisómero no deseado (no mostrado) puede eliminarse mediante cromatografía usando un gradiente apropiado. Finalmente, el grupo ceto de (K) puede reducirse de un modo enantioselectivo usando sistemas catalíticos apropiados usando un complejo de metal de transición (de, por ejemplo, Ru o Ir) en combinación con un ligando quiral (por ejemplo, ([(1S,2SJ-2-amino-1,2-difeniletil](4-toluenosulfonil)amido) y una fuente de hidrógeno tal como complejo de ácido fórmico-trietilamina para proporcionar los compuestos finales (I). Alternativamente, los compuestos finales (I) pueden prepararse mediante la alquilación del producto intermedio (J) con un derivado de etanol aromático o heteroaromático apropiado que porta un grupo saliente “LG” (por ejemplo, Cl o Br) alfa con respecto al grupo hidroxilo, en presencia de una base tal como DIpEA, y el posterior aislamiento del regioisómero deseado.

[0525] EJEMPLOS

[0527] PREPARACIÓN

[0529] Los compuestos según la invención y sus productos intermedios pueden obtenerse usando métodos de síntesis que conoce un experto en la técnica y descritos en la bibliografía de síntesis orgánica, por ejemplo, usando métodos descritos en “Comprehensive Organic Transformations”, 2a edición, Richard C. Larock, John Wiley & Sons, 2010, y “March's Advanced Organic Chemistry”, 7a edición, Michael B. Smith, John Wiley & Sons, 2013. Preferiblemente los compuestos se obtienen de manera análoga a los métodos de preparación explicados más completamente a continuación en el presente documento, en particular tal como se describe en la sección experimental. En algunos casos, la secuencia adoptada a la hora de llevar a cabo los esquemas de reacción puede variarse. Las variantes de estas reacciones que conoce el experto en la técnica, pero que no se describen en detalle en el presente documento, también pueden usarse. Los procesos generales para preparar los compuestos según la invención resultarán evidentes al experto estudiando los esquemas que siguen. Los compuestos de partida están disponibles comercialmente o pueden prepararse mediante métodos que se describen en la bibliografía o en el presente documento, o pueden prepararse de manera análoga o similar. Antes de llevar a cabo la reacción, cualquier grupo funcional correspondiente en los compuestos de partida puede protegerse usando grupos protectores convencionales. Estos grupos protectores pueden escindirse de nuevo en una etapa adecuada dentro de la secuencia de reacción usando métodos familiares para el experto y descritos en la bibliografía, por ejemplo, en “Protecting Groups”, 3a edición, Philip J. Kocienski, Thieme, 2005, y “Protective Groups in Organic Synthesis”, 4a edición, Peter G. M. Wuts, Theodora W. Greene, John Wiley & Sons, 2006. Los términos “temperatura ambiental” y “temperatura ambiente” se usan de manera intercambiable y designan una temperatura de aproximadamente 20°C, por ejemplo, de entre 19 y 24°C.

[0531] Abreviaturas:

[0533]

[0534]

[0536] Preparación de productos intermedios

[0537] Producto intermedio I

[0538] Producto intermedio I.1 (procedimiento general)

[0539] 2-[5-(Clorometil)-2H-1,2,3,4-tetrazol-2-il]-1-(4-dorofenil)etan-1-ona

[0542]

[0544] A 1,00 g (8,44 mmol) de 5-(clorometil)-2H-1,2,3,4-tetrazol y 2,17 g (9,28 mmol) de bromuro de 4-clorofenacilo en 15 ml de DMA se le añaden 1,63 g (11,8 mmol) de K<2>CO<3>con agitación a TA. La mezcla de reacción se agita durante 30 min a TA y posteriormente se filtra. El filtrado se diluye con agua y disolución de NaCl ac. sat. y se extrae con EtOAc tres veces. Las fases orgánicas combinadas se lavan con agua, se secan sobre Na2SO4, se filtran a través de carbón activado y el disolvente se elimina a presión reducida. El residuo se purifica mediante cromatografía en columna (gel de sílice; CH/EtOAc, gradiente de 80/20 a 50/50) para proporcionar el producto.

[0547]

[0549] Los siguientes compuestos se preparan usando procedimientos análogos a los descritos para el producto intermedio I.1 usando materiales de partida apropiados. Tal como aprecian los expertos en la técnica, estos ejemplos análogos pueden implicar variaciones en las condiciones de reacción generales.

[0551]

[0552]

[0553]

[0556] Producto intermedio II

[0558] Producto intermedio II.1 (procedimiento general)

[0560] (1R)-2-[5-(Clorometil)-2H-1,2,3,4-tetrazol-2-il]-1-(4-clorofenil)etan-1-ol

[0563]

[0566] 1,30 g (4,80 mmol) de 1-(4-clorofenil)-2-[5-(clorometil)-2H-1,2,3,4-tetrazol-2-il]etan-1-ona (producto intermedio I.1) se disuelven en 20 ml de ACN bajo atmósfera inerte. 12 mg (0.02 mmol) de cloro([(1S,2S)-2-amino-1,2-difeniletil](4-toluenosulfonil)amido)(mesitilen)rutenio (II) (CAS 174813-81-1) se añaden seguido de la adición gota a gota de 0,72 ml (1,73 mmol) de complejo de ácido fórmico-trietilamina complejo (5:2). Tras agitar a TA durante 3 h, el disolvente se elimina a presión reducida. A la mezcla bruta restante se le añade agua y esta mezcla se extrae con EtOAc. Las fases orgánicas se combinan, se secan sobre Na2SO4, se filtran, se tratan con carbón activado, se filtran y el disolvente se elimina a presión reducida para proporcionar el producto intermedio II.1.

[0569]

[0570] Los siguientes compuestos se preparan usando procedimientos análogos a los descritos para el producto intermedio II.1 usando materiales de partida apropiados. Tal como aprecian los expertos en la técnica, estos ejemplos análogos pueden implicar variaciones en las condiciones de reacción generales.

[0571]

[0572]

[0574] Producto intermedio III

[0575] 3-Metil-2,4-dioxo-1,2,3,4-tetrahidropirimidin-5-carboxamida

[0578]

[0580] 10,0 g (50,46 mmol) de 3-metil-2,4-dioxo-1,2,3,4-tetrahidropirimidin-5-carboxilato de etilo (CAS: 154942-22-0, producto intermedio XII.<6>) en amoniaco ac. al 33% (120 ml) se agitan en un recipiente sellado a 100°C durante 10 h. La mezcla de reacción se enfría hasta TA y se concentra a presión reducida. El residuo se tritura con ACN, se separa mediante filtración y se seca a 50°C para proporcionar el producto intermedio III.

[0583]

[0584] Rt (HPLC): 0,48 min (método B)

[0585] Producto intermedio IV

[0586] Producto intermedio IV.1 (procedimiento general) 1 -(5,6-Difluoro-1 -benzofuran-2-il)etan-1 -ona

[0589]

[0591] 5,00 g (31,6 mmol) de 4,5-difluoro-2-hidroxibenzaldehido en 50 ml de acetona se tratan con 6,99 g (50,6 mmol) de carbonato de potasio bajo argón a 0°C. Tras una agitación adicional durante 10 min a 0°C, se añaden gota a gota 3,78 ml (47,4 mmol) de cloroacetona y se agita la mezcla de reacción a 70°C durante 3 h. La mezcla de reacción se enfría hasta TA y se concentra. El producto bruto se extrae con EtOAc/agua y la fase orgánica se concentra a presión reducida para proporcionar el producto intermedio IV.1.

[0592] C<10>H<6>F<2>O<2>(M = 196,2 g/mol)

[0593] 1H RMN (300 MHz, DMSO-de) 5 ppm: 2,56 (s, 3 H), 7,89 (m, 1 H), 7,92 (m, 1 H), 8,01 (m, 1 H)

[0594] Los siguientes compuestos se preparan usando procedimientos análogos a los descritos para el producto intermedio IV.1 usando materiales de partida apropiados. Tal como aprecian los expertos en la técnica, estos ejemplos análogos pueden implicar variaciones en las condiciones de reacción generales.

[0596]

[0598] Producto intermedio V

[0599] Ácido 5-bromo-1-benzofuran-2-carboxílico

[0602]

[0603] A 6,58 g (24,4 mmol) de 5-bromo-1-benzofuran-2-carboxilato de etilo (IV.4) en 3 ml de EtOH, 66 ml de THF y 33 ml de agua se le añaden 1,23 g (29,3 mmol) de LiOH*H<2>O a 0°C. La mezcla de reacción se agita a TA durante 2 h y posteriormente se concentra a presión reducida. El residuo se acidifica con HCl 1 M hasta pH 5 y el precipitado resultante se separa mediante filtración y se seca para proporcionar el producto intermedio V.

[0604] CgHeBrOa (M = 241,0 g/mol)

[0605] 1H RMN (300 MHz, DMSO-de) 5 ppm: 7,59-7,76 (m, 3 H), 8,02 (d,J=2,0 Hz, 1 H), 13,5 - 14,2 (s a, 1 H). Producto intermedio VI

[0606] 5-Bromo-2-fluoro-1-benzofurano

[0609]

[0611] 5,00 g (20,7 mmol) de ácido 5-bromo-1-benzofuran-2-carboxílico (V), 14,70 g (41,5 mmol) de Selectflour y 4,82 g (83,0 mmol) de fluoruro de potasio en 185 ml de DCE y 95 ml de agua se agitan en un tubo sellado a 70°C durante 20 h. Posteriormente, la mezcla de reacción se extrae con DCM/agua. La fase orgánica se lava con salmuera, se seca sobre Na2SO4 y se concentra a presión reducida. El residuo se purifica mediante cromatografía en columna (gel de sílice, DCM).

[0612] CsH4BrFO (M = 215,0 g/mol)

[0613] 1H RMN (300 MHz, DMSO-de) 5 ppm: 6,36 (dd,J=6,4, 0,9 Hz, 1 H), 7,47 (dd, J=8,7, 2,1 Hz, 1 H), 7,58 (d, J= 8,7Hz, 1 H), 7,82 (d,J=2,1 Hz, 1 H)

[0614] Producto intermedio VII

[0615] 1-(2-Fluoro-1-benzofuran-5-il)etan-1-ona

[0618]

[0620] A 218 mg (1,0 mmol) de 5-bromo-2-fluoro-1-benzofurano (VI) en 3 ml de DMF y 0,3 ml de agua se le añaden 168 mg (1,2 mmol) de carbonato de potasio con agitación a TA. La mezcla se purga con argón seguido de la adición de 25 mg (0,1 mmol) de 1,3-bis(difenilfosfino)propano, dppp, 7 mg de acetato de paladio(II) y 183 mg (2,5 mmol) de etilvinil éter. La mezcla de reacción se agita a 80°C durante la noche, entonces se enfría hasta RT y se trata con HCl 1 M ac. (20 ml). Tras agitar a TA durante 30 min, la mezcla se extrae con EtOAc y las fases orgánicas combinadas se concentran a presión reducida. El producto bruto se purifica mediante cromatografía en columna (gel de sílice; EtOAc/hexano, gradiente).

[0621] C<10>H<7>FO<2>(M = 178,2 g/mol)

[0622] 1H RMN (300 MHz, DMSO-de) 5 ppm: 2,63 (s, 3H), 6,49 (dd,J=6,4, 0,8 Hz, 1H), 7,70 (dt,J=8,7, 0,8 Hz, 1H), 7,93 (dd, J=8,7, 1,9 Hz, 1H), 8,25 (dd,J=1,9, 0,6 Hz, 1H)

[0623] Producto intermedio VIII

[0624] Producto intermedio VIII.1 (procedimiento general)

[0625] 2-Bromo-1-(2-fluoro-1-benzofuran-5-il)etan-1-ona

[0628]

[0629] 126 mg (0,71 mmol) de 1-(2-fluoro-1-benzofuran-5-il)etan-1-ona (VII) en 1,5 ml de THF se tratan gota a gota con 0,34 g (0,71 mmol) de tribromuro de tetrabutilamonio en 0,08 ml de MeOH y 0,8 ml de THF con agitación a TA. Tras agitar durante 2 h, la mezcla de reacción se concentra a presión reducida y el residuo se extrae con EtOAc/agua. La fase orgánica se concentra a presión reducida y el producto bruto se purifica mediante cromatografía en columna (gel de sílice; hexano/EtOAc, gradiente).

[0631] C10H6BrFO2 (M = 257,1 g/mol)

[0633] 1H RMN (300 MHz, DMSO-de) 5 ppm: 4,99 (s, 2H), 6,53 (dd,J=6,4, 0,9 Hz, 1H), 7,75 (d,J=8,7, 1H), 7,88-8,03 (m, 1H), 8,31 (dd,J=1,9, 0,6 Hz, 1H)

[0635] Los siguientes compuestos se preparan usando procedimientos análogos a los descritos para el producto intermedio VMM usando materiales de partida apropiados. Tal como aprecian los expertos en la técnica, estos ejemplos análogos pueden implicar variaciones en las condiciones de reacción generales.

[0637]

[0640] Producto intermedio IX

[0642] 1-({2-[(2R)-2-(4-Clorofenil)-2-hidroxietil]-2H-1,2,3,4-tetrazol-5-il}metil)-3-metil-2,4-dioxo-1,2,3,4-tetrahidropirimidine-5-carboxilato de etilo

[0645]

[0648] A 200 mg (1,01 mmol) de 3-metil-2,4-dioxo-1,2,3,4-tetrahidropirimidin-5-carboxilato de etilo (CAS: 154942-22-0, producto intermedio XII.6) en 8 ml de DMF se le añaden 303 mg (1,11 mmol) de (1R)-2-[5-(clorometil)-2H-1,2,3,4-tetrazol-2-il]-1 -(4-clorofenil)etan-1-ol (producto intermedio II.1) y 418 mg (3,03 mmol) de K<2>CO<3>y se agita la mezcla a 50°C durante 5 h, entonces a TA durante 17 h. El producto bruto se purifica mediante HPLC de fase inversa (gradiente de ACN/H<2>O, TFA al 0,1%) para dar el producto deseado.

[0650] C18H19ClN6O5 (M = 434,8 g/mol)

[0651]

[0653] Producto intermedio X

[0654] Ácido 1-({2-[(2R)-2-(4-clorofenM)-2-hidroxietil]-2H-1,2,3,4-tetrazol-5-il}metil)-3-metil-2,4-dioxo-1,2,3,4-tetrahidropirimidin-5-carboxílico

[0657]

[0659] A 200 mg (0,46 mmol) de producto intermedio IX en 1 ml de metanol, 1 ml de THF y 100 |jl de agua se añaden 44 mg (1,8 mmol) de hidróxido de litio. La mezcla de reacción se agita durante 1 h a 50°C y posteriormente se enfría hasta TA y se diluye con agua. La fase ac. se lava con DCM tres veces, se acidifica con ácido fórmico y el precipitado resultante se separa mediante filtración y se seca a 50°C para dar el producto deseado.

[0662]

[0664] Producto intermedio XI

[0665] Producto intermedio XI.1 (procedimiento general)

[0666] 2-{[(Ciclobutilcarbamoil)amino]metiliden}propanodioato de 1,3-dietilo

[0669]

[0671] 1,00 g (8,76 mmol) de ciclobutilurea y 3,79 g (17,52 mmol) de 2-(etoximetiliden)propanodioato de 1,3-dietilo se calientan en condiciones puras a 100°C durante 2,5 h, y a 130°C durante 5 h. La mezcla de reacción se enfría hasta TA, se diluye con metanol y se purifica mediante HPLC de fase inversa (gradiente ACN/H<2>O, TFA al 0,1%) para proporcionar el producto intermedio XI.1.

[0674]

[0676] Los siguientes compuestos se preparan usando procedimientos análogos a los descritos para el producto intermedio XI.1 usando materiales de partida apropiados. Tal como aprecian los expertos en la técnica, estos ejemplos análogos pueden implicar variaciones en las condiciones de reacción generales.

[0677]

[0680] Producto intermedio XII

[0682] Producto intermedio XII.1 (procedimiento general)

[0684] 1 -Ciclobutil-2-hidroxi-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-5-carboxilato de etilo

[0687]

[0690] A 2,00 g (7,03 mmol) de producto intermedio XI.1 en 30 ml de etanol se le añaden 957 mg (14,1 mmol) de etóxido de sodio y se agita la mezcla a 80°C durante 3 h, posteriormente se diluye con etanol y se purifica mediante HPLC de fase inversa (gradiente de ACN/H<2>O, TFA al 0,1%).

[0693]

[0694] Los siguientes compuestos se preparan usando procedimientos análogos a los descritos para el producto intermedio XII.1 usando materiales de partida apropiados. Tal como aprecian los expertos en la técnica, estos ejemplos análogos pueden implicar variaciones en las condiciones de reacción generales.

[0696]

[0698] Producto intermedio XII.6

[0699] 3-Metil-2,4-dioxo-1,2,3,4-tetrahidropirimidin-5-carboxilato de etilo

[0702]

[0704] 500 mg (6,75 mmol) de metilurea y 1,36 g (6,75 mmol) de 2-(metoximetiliden)propanodioato de 1,3-dietilo se agitan en condiciones puras a 120°C durante 2 h, a TA durante 17 h, a 100°C durante 66 h, a 150°C durante 17 h y a 120°C durante 17 h. Posteriormente, la mezcla se diluye con EtOAc y se somete a reflujo. La mezcla se enfría lentamente hasta TA y el producto intermedio precipitado se separa mediante filtración.

[0707]

[0709] Producto intermedio XIII

[0710] Producto intermedio XIII.1 (procedimiento general)

[0711] 1 -Ciclobutil-2-hidroxi-6-oxo-1,6-dihidropi rimidin-5-carboxamida

[0712]

[0714] 630 mg (0,03 mmol) de producto intermedio XII.1 en 10 ml de amoniaco ac. (33%) se agitan a 85°C durante 17 h en un recipiente sellado. Se continúa con la agitación a 100°C y se añade amoniaco ac. hasta que el material de partida se ha consumido completamente. Posteriormente, la mezcla de reacción se concentra a presión reducida para proporcionar el producto intermedio XIII. 1.

[0717]

[0719] Los siguientes compuestos se preparan usando procedimientos análogos a los descritos para el producto intermedio XIII.1 usando materiales de partida apropiados. Tal como aprecian los expertos en la técnica, estos ejemplos análogos pueden implicar variaciones en las condiciones de reacción generales.

[0721]

[0723] Producto intermedio XIV.1

[0724] (Ciclopropilmetil)urea

[0727]

[0728] A 530 mg (4,93 mmol) de hidrocloruro de 1-ciclopropilmetanamina en 2 ml de agua se le añaden 599 mg (7,39 mmol) de cianato de potasio en porciones pequeñas y se agita la mezcla a 100°C durante 3 h. La mezcla de reacción se deja a TA durante 14 h, entonces se separa mediante filtración el producto intermedio XIV.1.

[0731]

[0733] Producto intermedio XIV.2

[0734] (2-Metoxietil)urea

[0737]

[0739] A 2,0 g (26,63 mmol) de 2-metoxietilamina en 8 ml de agua se le añaden 3,24 g (39,94 mmol) de cianato de potasio en porciones pequeñas y se agita la mezcla a 100°C durante 3 h, se enfría hasta TA, se diluye con agua/metanol y se purifica mediante HPLC de fase inversa (gradiente de ACN/H<2>O, TFA al 0,1%).

[0742]

[0744] Preparación de los compuestos finales

[0745] Ejemplo 1 (procedimiento general)

[0746] 1-({2-[(2R)-2-(4-Clorofenil)-2-hidroxietil]-2H-1,2,3,4-tetrazol-5-il}metil)-3-metil-2,4-dioxo-1,2,3,4-tetrahidropirimidin-5-carboxamida

[0749]

[0751] A 100 mg (0,59 mmol) de 3-metil-2,4-dioxo-1,2,3,4-tetrahidropirimidin-5-carboxamida (producto intermedio III) en 5 ml de DMF se le añaden 178 mg (0,65 mmol) de (1R)-2-[5-(clorometil)-2H-1,2,3,4-tetrazol-2-il]-1-(4-clorofenil)etan-1-ol (producto intermedio II.1) y 245 mg (1,77 mmol) de K<2>CO<3>y se agita la mezcla a TA durante la noche. La mezcla se purifica mediante HPLC de fase inversa (gradiente de ACN/H<2>O, TFA al 0,1%) para dar el producto deseado.

[0754]

[0756] 1H RMN (400 MHz, DMSO-de) 5 ppm: 3,21 (s, 3 H), 4,73 - 4,84 (m, 2 H), 5,13 (m, 1 H), 5,45 (s, 2 H), 5,92 (d, J=2,4 Hz, 1 H), 7,35-7,42 (m, 4 H), 7,64 (a d, J=3,4 Hz, 1 H), 8,20 (a d, J=3,4 Hz, 1 H), 8,77 (s, 1 H)

[0757] Los siguientes compuestos se preparan usando procedimientos análogos a los descritos para el ejemplo 1 usando materiales de partida apropiados. Tal como aprecian los expertos en la técnica, estos ejemplos análogos pueden implicar variaciones en las condiciones de reacción generales.

[0758]

[0759]

[0760]

[0761]

[0763] Datos analíticos para los compuestos descritos en la tabla anterior:

[0764]

[0765]

[0767] Ejemplo 22 (procedimiento general)

[0768] 1-({2-[(2R)-2-(4-Clorofenil)-2-hidroxietil]-2H-1,2,3,4-tetrazol-5-il}metil)-N-(2-metoxietil)-3-metil-2,4-dioxo-1,2,3,4-tetrahidropirimidin-5-carboxamida

[0771]

[0773] A 20 mg (0,05 mmol) de producto intermedio X en 1,0 ml de DMF se le añaden 25 |jl (0,15 mmol) de DIPEA y 22 mg (0,06 mmol) de HATU con agitación a TA. Tras 30 min, se añaden 8 j l (0,10 mmol) de 2-met-oxietan-1-amina y se agita la mezcla a TA durante 90 min. La purificación posterior mediante HPLC de fase inversa (gradiente de ACN/H<2>O, TFA al 0,1%) da el producto deseado.

[0776]

[0778] 1H RMN (400 MHz, DMSO-de) 5 ppm 3,22 (s, 3 H), 3,28 (s, 3 H), 3,41 - 3,51 (m, 4 H), 4,73 - 4,84 (m, 2 H), 5,13 (m, 1 H), 5,45 (s, 2 H), 5,5 - 6,4 (s a, 1 H), 7,38 (m, 4 H), 8,77 (s, 1 H), 8,94 (m, 1 H).

[0779] Los siguientes compuestos se preparan usando procedimientos análogos a los descritos para el ejemplo 22 usando materiales de partida apropiados. Tal como aprecian los expertos en la técnica, estos ejemplos análogos pueden implicar variaciones en las condiciones de reacción generales.

[0780]

[0781]

[0782]

[0784] Datos analíticos para los compuestos descritos en la tabla anterior:

[0785]

[0786]

[0788] Métodos de HPLC analíticos

[0789] Método A

[0791]

[0793] Método B

[0795]

[0797] Método C

[0799]

[0800] Método D

[0802]

[0804] Método E

[0806]

[0808] Método F

[0810]

[0812] Método G

[0814]

[0816] Método H

[0818]

[0820] Método I

[0822]

[0823]

[0825] Método J

[0826]

Claims (25)

1. REIVINDICACIONES

1.- Un compuesto según la fórmula (I)

en la que

A se selecciona del grupo que consiste en fenilo, tiofenilo, benzotiofenilo o benzofuranilo, no sustituido o sustituido con uno, dos o tres miembros del grupo R3 que consiste en halógeno, alquilo C<1-4>, fluoroalquilo C<1-4>, cicloalquilo C<3-4>, ciclofluoroalquilo C<3-4>, O-alquilo C<1-4>, O-ciclopropilo y NC-;

o

A se selecciona del grupo que consiste en

y

R1 se selecciona del grupo que consiste en alquilo C<1-4>, fluoroalquilo C<1-4>, cicloalquilo C<3-6>, R4-(H<2>C)m- y R5-(H2C)n-;

en donde

m es 1 o 2;

n es 2;

R4 es cicloalquilo C<3-6>;

R5 es -O-alquilo C1-4 u -O-fluoroalquilo C1-4;

R2 se selecciona del grupo que consiste en H, alquilo C<1-4>, cicloalquilo C<3-6>, ciclofluoroalquilo C<3-6>, HO-alquil C<1>-<4>-, fluoroalquilo C<1-4>, R6-(H<2>C)p-, R7-(H<2>C)q-, R6-(H(R8)C)p- y R7-(H(R9)C)q-;

en donde

p es 1 o 2;

q es 2;

R6 se selecciona del grupo que consiste en HO-alquil C<1-2>-, cicloalquilo C<3-6>, C-morfolinilo, C-imidazolilo y C-pirazolilo;

en donde dicho C-pirazolilo, C-imidazolilo y C-morfolinilo no está sustituido o está sustituido con alquilo C<1-4>o fluoroalquilo C<1-4>;

R7 se selecciona del grupo que consiste en alquil C<1-4>-O-, fluoroalquil C<1-4>-O-, alquil C1-4-S(O)2-, N-morfolinilo, N-imidazolilo y N-pirazolilo;

en donde dicho N-pirazolilo, N-imidazolilo, N-morfolinilo no está sustituido o está sustituido con alquilo C<1-4>o fluoroalquilo C<1-4>;

R8 y R9 se seleccionan independientemente de H o alquilo C<1-4>.

2.- El compuesto de fórmula (I) según la reivindicación 1, en el que A se selecciona del grupo que consiste en fenilo, tiofenilo, benzotiofenilo o benzofuranilo, no sustituido o sustituido con uno o dos miembros del grupo R3 que consiste en Cl, F, Br, H<3>C, H<3>C-O- y NC-;

o

A es

3.- El compuesto de fórmula (I) según la reivindicación 1, en el que A se selecciona del grupo que consiste en

y

no sustituido o sustituido con uno o dos miembros del grupo R3 que consiste en Cl, F, Br, H<3>C, H<3>C-O- y NC-,

o

A es

4. - El compuesto de fórmula (I) según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que R1 se selecciona del grupo que consiste en alquilo C<1-4>, cicloalquilo C<3-6>, R4-(H<2>C)m- y R5-(H<2>C)n-; en donde

m es 1;

n es 2;

R4 es cicloalquilo C<3-6>; y

R5 es -O-alquilo C<1-4>.

5. - El compuesto de fórmula (I) según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que R1 se selecciona del grupo que consiste en alquilo C<1-4>, cicloalquilo C<3-4>, R4-(H<2>C)m- y R5-(H<2>C)n-; en donde

m es 1;

n es 2;

R4 es cicloalquilo C<3-4>; y

R5 es -O-alquilo C1-4.

6. - El compuesto de fórmula (I) según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que R2 se selecciona del grupo que consiste en H, alquilo C<1-4>, cicloalquilo C<3-6>, HO-alquil C<1-4>-, fluoroalquilo C<1-4>, R6-(H<2>C)p- y R7-(H<2>C)q-;

en donde

p es 1;

q es 2;

R6 se selecciona del grupo que consiste en cicloalquilo C<3-6>, C-morfolinilo, C-imidazolilo y C-pirazolilo;

en donde dicho C-pirazolilo, C-imidazolilo y C-morfolinilo no está sustituido o está sustituido con alquilo C<1-4>. R7 se selecciona del grupo que consiste en -O-alquilo C<1-4>, -O-fluoroalquilo C<1-4>, alquil C1-4-S(O)2-, N-morfolinilo, N-imidazolilo y N-pirazolilo;

en donde dicho N-pirazolilo, N-imidazolilo, N-morfolinilo no está sustituido o está sustituido con alquilo C<1-4>.

7. - El compuesto de fórmula (I) según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que R2 se selecciona del grupo que consiste en H, alquilo C<1-4>, cicloalquilo C<3-6>, HO-alquil C<1-4>-, fluoroalquilo C<1-2>, R6-(H<2>C)p- y R7-(H<2>C)q-;

en donde

p es 1;

q es 2;

R6 se selecciona del grupo que consiste en cicloalquilo C<3-6>, C-morfolinilo, C-imidazolilo y C-pirazolilo;

en donde dicho C-pirazolilo, C-imidazolilo y C-morfolinilo no está sustituido o está sustituido con H<3>C;

R7 se selecciona del grupo que consiste en H<3>C-O, -O-fluorometilo, H3C-S(O)2-, N-morfolinilo, N-imidazolilo y N-pirazolilo;

en donde dicho N-pirazolilo, N-imidazolilo, N-morfolinilo no está sustituido o está sustituido con H<3>C.

8.- El compuesto de fórmula (I) según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que R2 se selecciona del grupo que consiste en H, alquilo C<1-4>, cicloalquilo C<3-6>, HO-alquil C<1-4>-, fluoroalquilo C<1-2>, R6-(H<2>C)p- y R7-(H<2>C)q-; en donde

p es 1;

q es 2;

R6 se selecciona del grupo que consiste en cicloalquilo C<3-6>,

y

R7 se selecciona del grupo que consiste en H<3>C-O, -O-fluorometilo, H<3>C-S(O)<2>-,

y

9.- El compuesto de fórmula (I) según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, seleccionado del grupo que consiste en

5

10.- El compuesto de fórmula (I) según la reivindicación 1, seleccionado del grupo que consiste en

5

5

5

5

y

11.- El compuesto de fórmula (I) según la reivindicación 1, que tiene la estructura

12.- El compuesto de fórmula (I) según la reivindicación 1, que tiene la estructura

13.- El compuesto de fórmula (I) según la reivindicación 1, que tiene la estructura

14.- El compuesto de fórmula (I) según la reivindicación 1, que tiene la estructura

15.- El compuesto de fórmula (I) según la reivindicación 1, que tiene la estructura

16.- El compuesto de fórmula (I) según la reivindicación 1, que tiene la estructura

17.- El compuesto de fórmula (I) según la reivindicación 1, que tiene la estructura

18.- El compuesto de fórmula (I) según la reivindicación 1, que tiene la estructura

19.- El compuesto de fórmula (I) según la reivindicación 1, que tiene la estructura

20.- El compuesto de fórmula (I) según la reivindicación 1, que tiene la estructura

21. - Una sal, particularmente una sal farmacéuticamente aceptable, de un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 20.

22. - Una composición farmacéutica que comprende al menos un compuesto de fórmula I según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 20 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables.

23. - El compuesto de fórmula (I) según una o más de las reivindicaciones 1 a 20, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso como medicamento.

24. - El compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 20, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento o la prevención de enfermedades inflamatorias de las vías respiratorias o enfermedades fibróticas o tos.

25. - El compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 20, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento o la prevención de enfermedad pulmonar idiopática (FPI) o tos.