ES3049875T3

ES3049875T3 - Diagnostic anti-pd-l1 antibody and use thereof

Info

Publication number: ES3049875T3
Application number: ES17778222T
Authority: ES
Inventors: Claudia Wilm; Klaus Schneider; Heike Dahmen
Original assignee: PFIZER; Merck Patent GmbH; Pfizer Inc
Current assignee: PFIZER; Merck Patent GmbH; Pfizer Inc
Priority date: 2016-09-20
Filing date: 2017-09-20
Publication date: 2025-12-18
Anticipated expiration: 2037-09-20
Also published as: IL265485A; JP2019532633A; JP2023011568A; IL265485B1; US10738120B2; WO2018054940A1; CN109963872A; IL265485B2; US20190211104A1; AU2017329780A1; EP3515942B1; EP3515942A1; CA3037230A1; JP7525261B2; AU2017329780B2; CN109963872B

Abstract

La presente invención proporciona un anticuerpo o su fragmento de unión al antígeno que se une a un epítopo de PD-L1 humano con alta especificidad y reproducibilidad. El anticuerpo inventivo o su fragmento de unión al antígeno puede utilizarse para evaluar la expresión de PD-L1 en muestras de tejido y facilitar la estratificación de pacientes. La presente invención proporciona además métodos para producir el anticuerpo inventivo. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

[0001] DESCRIPCIÓN

[0003] Anticuerpo anti-PD-LI de diagnóstico y uso del mismo

[0005] Campo de la invención

[0007] La presente invención pertenece al campo del diagnóstico del cáncer, en particular al uso de un anticuerpo de diagnósti

[0009] Antecedentes de la invención

[0011] El ligando 1 de la muerte celular programada (PD-L1), también conocido como grupo de diferenciación (CD274) u homólogo 1 de B7 (B7-H1), es una proteína que en los humanos está codificada por el gen CD274 y es, junto a PD-L2 (CD273), uno de los ligandos de PD-1 (CD279). El PD-L1 es una proteína transmembrana de tipo 1 de 40kDa que se expresa en muchas células hematopoyéticas, incluyendo las células dendríticas, los macrófagos, las células madre mesenquimales y los mastocitos derivados de la médula ósea. Se ha descubierto que el PD-L1 se expresa induciblemente en las células epiteliales y endoteliales a través de la acción de los interferones. Se descubrió que los lugares con privilegio inmunitario, tales como los sincitiotrofoblastos de la placenta y la retina, expresan PD-L1 de forma constitutiva.

[0013] La expresión de PD-L1 en la placenta aumenta al inicio del segundo trimestre, se regula al alza con el aumento de oxígeno y se pierde rápidamente con concentraciones bajas de oxígeno. Los experimentos han demostrado que la vía PD-1-PD-L regula el equilibrio entre las señales estimuladoras e inhibidoras necesarias para una respuesta inmunitaria eficaz frente a los microbios y el mantenimiento de la autotolerancia, respectivamente. Muchos microorganismos que causan infecciones crónicas aprovechan la vía PD-1-PD-L1 para eludir los mecanismos efectores inmunitarios del hospedero. Con base en un modelo de ratón de infección hepática, también se cree que la vía PD-PD-L1 regula el daño tisular mediado por el sistema inmunitario durante la infección viral, ya que los ratonesPD-1nulos muestran un mayor daño hepático tras la eliminación del adenovirus en comparación con los ratones de tipo silvestre, que se cree que está causado por células T muy activas y agresivas.

[0015] El ataque inmunitario a través de la liberación de IFNy conduce a la regulación al alza inducible de PD-L1 por la mucosa creando un “escudo inmunitario” para proteger contra el ataque autoinmunitario en el entorno de una inflamación o infección crónica. El PD-L1 aumentado en estas células se une a la PD-1 en las células T contribuyendo al desarrollo del agotamiento de las células T

[0017] Las células tumorales han co-optado este mecanismo regulador PD-1 - PD-L1, que en un entorno fisiológico normal protege la mucosa del ataque autoinmune, y en su lugar sobreexpresan PD-L1 para evitar la vigilancia inmunológica, promoviendo así el crecimiento del cáncer.

[0019] Este mecanismo inmunosupresor puede ser secuestrado por las células tumorales PD-L1 positivas, lo que conduce finalmente a que los tumores escapen a la eliminación por parte del sistema inmunitario. La inhibición de la interacción PD-1/PD-L1 mediante un anticuerpo monoclonal proporciona un concepto prometedor para el tratamiento de tumores con expresión de PD-L1. Actualmente se están llevando a cabo ensayos clínicos de anticuerpos monoclonales de bloqueo contra PD-1 y PD-L1 para pacientes que padecen diversas neoplasias malignas.

[0021] El análisis estadístico de los datos publicados de ensayos clínicos anti-PD-L1 que comparan la tasa de respuesta clínica de pacientes positivos para PD-L1 o negativos para PD-L1 indica que la expresión de PD-L1 es un marcador predictivo de respuesta clínica para determinados tipos de cáncer y un biomarcador de correlación para otros (Gandini et al., Crit Rev Oncol Hematol. 2016 Abr;100:88-98). En el melanoma metastásico, por ejemplo, la expresión de PD-L1 en el tejido tumoral se asocia a un pronóstico significativamente mejor, ya que los pacientes positivos para PD-L1 que reciben terapia anti-PD-L1 muestran una reducción de la mortalidad del 53%.

[0023] Los estudios también han demostrado que en múltiples tipos de cáncer se observaron respuestas a la terapia anti-PD-L1 en pacientes con tumores que expresaban niveles elevados de PD-L1, en particular cuando PD-L1 se expresaba en las células inmunitarias infiltrantes del tumor (véase, por ejemplo, Herbst et al., Nature. 2014 Nov 27;515(7528):563-7; Ilie et al., Annals of Oncology 27: 147-153, 2016). En el cáncer papilar de tiroides se observó que la expresión de PD-L1 se correlaciona con la recidiva y con una menor supervivencia libre de enfermedad, lo que apoya el uso de la expresión de PD-L1 en este tipo de tumor como un marcador pronóstico (Chowdhury et al., Oncotarget. 2016 Abr 12 ).

[0025] La detección y puntuación de la expresión de PD-L1 en muestras de tejido tumoral suele realizarse mediante inmunohistoquímica en secciones de tejido tumoral congeladas o fijadas con formalina e incrustadas en parafina (FFPE). La puntuación de la expresión de PD-L1 puede realizarse utilizando diferentes metodologías: Un enfoque, por ejemplo, empleaba una puntuación binaria de un espécimen de ser positivo o negativo para la expresión de PD-L1, con un resultado positivo definido en términos del porcentaje de células tumorales que exhibían evidencia histológica de tinción de la membrana de la superficie celular. Se han utilizado dos valores de corte diferentes del 1% y el 5% del total de células tumorales en los que una muestra tumoral se puntuaba como positiva para PD-L1 (Cancer. 2011 May 15;117(10):2192-201; N Engl J Med 2012;366:2443-54.). La expresión de PD-L1 en las muestras tumorales también se ha cuantificado puntuando tanto las células tumorales como las células inmunitarias infiltrantes del tumor que muestran una tinción membranosa, en comparación con las células tumorales que mostraban tanto una tinción membranosa como una tinción citoplasmática prominente. Posteriormente se realizó la puntuación de los especimenes en función de la expresión de PD-L1, para lo que se asignaron puntuaciones IHC de 0, 1, 2 o 3. Una muestra se puntuó con “0” si menos del 1% de las células eran positivas para PD-L1, "1" para más del 1%, pero menos del 5%, “2” si más del 5%, pero menos del 10%, o “3” si más del 10% de las células eran positivas para PD-L1 (Herbst et al. Nature. 2014 Nov 27;515(7528):563-7). La expresión de PD-L1 en las células mononucleares infiltrantes de tumores (TIMC) se ha evaluado mediante un enfoque semicuantitativo de acuerdo con tres categorías con puntuaciones respectivas de 0, 1 o 2 en función del número de TIMC en la muestra: 0% = 0, <5% = 1, >5% = 2.

[0027] La solicitud de patente internacional publicada WO 2014/165422 A1 divulga un anticuerpo anti-PD-L 1 denominado 22C3. La solicitud describe además el uso de este anticuerpo en inmunohistoquímica en muestras tumorales humanas y su uso en un kit.

[0029] La publicación Jorgensen, Expert Review of Molecular Diagnostics (2015), Vol. 16, No. 2, p. 131-133 se ocupa de los ensayos de diagnóstico complementario para los inhibidores del punto de control PD-1/PD-L1 en el cáncer de pulmón no microcítico (CPNM). El documento divulga que el ensayo PD-L 1 IHC 22C3 pharmDx ha recibido la aprobación reglamentaria como diagnóstico complementario vinculado al uso del anticuerpo anti-PD1 pembrolizumab.

[0031] La solicitud de patente internacional publicada WO 2015/181342 A1 divulga en el párrafo [0197] la preparación de un anticuerpo monoclonal de conejo anti-PD-L1 producido contra un péptido comprendido en SEQ ID NO: 1 de la presente solicitud.

[0033] Smith et al., Patología diagnóstica (2016), Vol. 11:44, N.° 1 describen que un anticuerpo PD-L1 denominado SP263 demostró tener una alta sensibilidad en ensayos de inmunohistoquímica (IHC) en muestras fijadas en formol e incrustadas en parafina (FFPE) de pacientes con CPNM.

[0035] La especificidad y la reproducibilidad de la mayoría de los anticuerpos anti-PD-L1 disponibles en el mercado no se han evaluado a fondo y se ha informado de las limitaciones de algunos anticuerpos ampliamente utilizados (véase, por ejemplo, Cáncer 2011;117: 2192-201; Carvajal-Hausorf et al., Laboratory Investigation (2015) 95, 385-396). Por ejemplo, WO 2014/165422 A1, WO 2016/007235 A1 divulgan un anticuerpo anti-PD-L1 y pautas de puntuación para su uso con el anticuerpo respectivo para evaluar la expresión de PD-L1.

[0037] Existe, por lo tanto, una necesidad continua de ampliar el repertorio en anticuerpos anti-PD-L1 disponibles que sean altamente específicos para PD-L1 y que arrojen resultados reproducibles para ayudar en la estratificación de pacientes tumorales susceptibles de una terapia a base de anti-PD-L1.

[0039] Breve descripción de la invención

[0041] La presente invención es como se define en las reivindicaciones adjuntas. Específicamente, la presente invención se refiere a un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno del mismo que se une a un epítopo comprendido en la secuencia de aminoácidos de acuerdo con SEQ ID NO: 1 (por lo cual SEQ ID NO: 1 corresponde a una porción intracelular de PD-L1 humana), de acuerdo con la reivindicación 1 adjunta. La presente invención también se refiere a usos de dicho anticuerpo o fragmento de unión a antígeno en métodos de detección, polinucleótidos aislados que codifican dicho anticuerpo o fragmento de unión a antígeno, vectores de expresión que comprenden dichos polinucleótidos, células hospedera que comprenden dicho vector de expresión y usos de los mismos. Otras realizaciones se definen en las reivindicaciones dependientes del pliego de reivindicaciones adjunto.

[0043] Los presentes inventores han descubierto sorprendentemente que un anticuerpo o fragmentos de unión a antígeno del mismo dirigidos contra un epítopo comprendido en la secuencia de aminoácidos de acuerdo con SEQ ID NO:1 se une al PD-L1 humano con alta especificidad y reproducibilidad.

[0045] Se divulga un anticuerpo o fragmentos de unión a antígeno del mismo que se une a un epítopo comprendido en la secuencia de aminoácidos de acuerdo con SEQ ID NO: 1 con alta especificidad y produce resultados reproducibles, por lo que el anticuerpo o fragmento de unión a antígeno del mismo comprende todas de SEQ ID<n>O:3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8 en su secuencia de cadena ligera y todas de SEQ ID NO:9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 14 en su secuencia de cadena pesada.

[0047] El anticuerpo inventivo o fragmento de unión a antígeno del mismo puede ser, de acuerdo con una realización, un fragmento Fab.

[0048] De acuerdo con una realización, el fragmento inventivo de unión a antígeno es un fragmento F(ab')2. De acuerdo con una realización, el fragmento inventivo de unión a antígeno es un fragmento Fab'.

[0049] En una realización, el anticuerpo inventivo es un scFv.

[0050] De acuerdo con una realización, el anticuerpo inventivo es un di-scFv.

[0051] De acuerdo con una realización, el anticuerpo inventivo es un anticuerpo monoclonal.

[0052] De acuerdo con una realización, el anticuerpo inventivo es un anticuerpo de tipo IgG.

[0053] La cadena ligera del anticuerpo inventivo o el fragmento de unión a antígeno del mismo comprende todas de SEQ ID NO:3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8.

[0054] El anticuerpo inventivo o el fragmento de unión a antígeno del mismo comprende todas de SEQ ID NO:9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 12, .SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 14.

[0055] El anticuerpo inventivo comprende una cadena pesada o un fragmento de unión a antígeno de la misma que comprende la secuencia de aminoácidos de acuerdo con SEQ ID NO: 110 y una cadena ligera o fragmento de unión a antígeno de la misma que comprende la secuencia de aminoácidos de acuerdo con SEQ ID NO: 111. De acuerdo con una realización preferida, la cadena ligera del anticuerpo inventivo comprende la secuencia de aminoácidos de acuerdo con SEQ ID NO: 15 y la cadena pesada comprende la secuencia de aminoácidos de acuerdo con SEQ ID NO: 16.

[0056] En una realización preferida, la cadena ligera del anticuerpo inventivo comprende la secuencia de aminoácidos de acuerdo con SEQ ID NO: 114 y la cadena pesada del anticuerpo comprende la secuencia de aminoácidos de acuerdo con SEQ ID NO: 115.

[0057] En una realización preferida, el anticuerpo inventivo es un anticuerpo de conejo, o un anticuerpo derivado de conejo.

[0058] De acuerdo con una realización, el anticuerpo inventivo o el fragmento de unión a antígeno del mismo divulgado anteriormente se acopla además a una etiqueta detectable.

[0059] De acuerdo con una realización, la etiqueta detectable del anticuerpo inventivo o fragmento de unión a antígeno del mismo es uno de una enzima, o fluoróforo, o sustrato enzimático.

[0060] De acuerdo con una realización, el anticuerpo inventivo o el fragmento de unión a antígeno del mismo, como se divulga anteriormente, se utiliza para detectar la presencia o la expresión de un epítopo comprendido en SEQ ID NO: 1 en una muestra, que de acuerdo con una realización es una muestra biológica, preferiblemente, una muestra de tejido, una muestra de tejido fijado o un tejido fijado con formaldehído e incrustado en parafina (FFPE), más preferiblemente, un tejido derivado de un tumor fijado con formaldehído e incrustado en parafina (FFPE).

[0061] En una realización, la detección de la presencia o ausencia de un epítopo comprendido en SEQ ID NO: 1 como se divulga anteriormente se realiza mediante citometría de flujo, ELISA o Western blot utilizando el anticuerpo inventivo o el fragmento de unión a antígeno del mismo como se divulga anteriormente.

[0062] De acuerdo con una realización preferida, la detección de la presencia o expresión de un epítopo comprendido en SEQ ID NO: 1 utilizando el anticuerpo inventivo o el fragmento de unión a antígeno del mismo, como se divulga anteriormente, se realiza mediante inmunohistoquímica (IHC).

[0063] En una realización, la presente invención proporciona un método para detectar la presencia o expresión de PD-L1 humano o cualquier fragmento del mismo en una muestra que comprende la secuencia de aminoácidos de acuerdo con SEQ ID NO: 1 por lo que el método inventivo comprende el paso de poner en contacto la muestra con el anticuerpo inventivo o fragmento de unión a antígeno del mismo y detectar la presencia de anticuerpo unido o fragmento de unión a antígeno del mismo.

[0064] En una realización, el método inventivoin vitrodivulgado anteriormente se utiliza en una muestra biológica, una muestra de tejido, una muestra de tejido fijado, preferiblemente una muestra de tejido fijado con formaldehído e incrustado en parafina (FFPE), más preferiblemente una muestra de tejido tumoral fijado con formaldehído e incrustado en parafina (FFPE).

[0065] De acuerdo con una de las realizaciones, la muestra utilizada en el métodoin vitroinventivo antes descrito procede de un sujeto que padece o corre el riesgo de padecer cáncer, disfunción de las células T, infección aguda o crónica o inmunidad tumoral.

[0067] En una realización, la presente invención se refiere al uso del anticuerpo inventivo o fragmento de unión a antígeno como se divulga anteriormente en presencia o expresión de un epítopo comprendido en SEQ ID NO: 1 en una muestra.

[0069] En una realización, la presente invención proporciona un polinucleótido aislado que codifica el anticuerpo inventivo o un fragmento de unión a antígeno del mismo como se divulga anteriormente.

[0071] De acuerdo con una realización, la presente invención proporciona un vector de expresión que comprende el polinucleótido que codifica el anticuerpo inventivo o un fragmento de unión a antígeno del mismo.

[0073] En una realización, la presente invención proporciona un vector de expresión como se divulga anteriormente para su uso en la producción del anticuerpo inventivo.

[0075] En una realización, la presente invención proporciona al menos una célula hospedera que comprende al menos un vector de expresión de acuerdo con la invención.

[0077] En una realización, la presente invención proporciona al menos una célula hospedera de acuerdo con la invención para su uso en la fabricación del anticuerpo inventivo.

[0079] Se divulga un método de tratamiento del cáncer en un paciente que comprende los pasos de detectar la presencia o expresión de PD-L1 humano en una muestra de dicho paciente utilizando el anticuerpo anti-PD-L1 inventivo divulgado anteriormente, comparar la expresión de PD-L1 en la muestra del paciente con una muestra de referencia y administrar un inhibidor del punto de control inmunitario (por ejemplo, un anticuerpo anti-PD-L1 o anti-PD-1) al paciente si la expresión de PD-L1 en la muestra del paciente está aumentada en comparación con la muestra de referencia. Cualquier referencia a un método de tratamiento o diagnóstico practicado en el cuerpo humano o animal debe interpretarse como sustancias y composiciones para su uso en dichos métodos.

[0081] Breve descripción de los dibujos

[0083] Figura 1:Resultados ELISA para el anticuerpo inventivo clon MKP1A07310 utilizando 50 pl/pocillo de inmunógeno a una concentración de 1 pg/ml para el recubrimiento de los pocillos de la placa ELISA.

[0084] Figura 2:Western Blot utilizando el anticuerpo inventivo clon MKP1A07310 en diluciones de 1:10000 y 1:25000 y un anticuerpo de control (anti-CD247, dilución 1:250) utilizando los lisados celulares indicados. El Western blot se realizó utilizando lisados celulares de HEK293 transfectadas con PD-L1, MDA-MB 231 que expresan PD-L1, interferencias génicas de PDL1 ARNip de MDA-MB 231 y la línea celular A549 baja en PD-L1.

[0085] Figura 3:Tinción inmunohistoquímica utilizando el anticuerpo inventivo (MKP1A07310) y un anticuerpo anti-PD-L1 diferente dirigido contra un epítopo extracelular de PD-L1 humano en una interferencia génica (knockdown) de ARNip en células MDA-MB 231. La tinción de PD-L1 se redujo en las células con interferencia génica de ARNip.

[0086] Figura 4:El anticuerpo inventivo (MKP1A07310), así como un anticuerpo dirigido contra un epítopo extracelular de PD-L1 humano (MKP1B19610) se caracterizaron utilizando MKP1A7310 en una concentración de 1 pg/ml, y MKP1B19610 en tres concentraciones diferentes (2 pg/ml, 5 pg/ml y 10 pg/ml) en una matriz de líneas celulares de cáncer de 70 líneas celulares para evaluar y comparar sus respectivas características de unión y determinar la concentración óptima de trabajo para estudios posteriores. La matriz de líneas celulares de cáncer (CAX09_70_MB, fabricada por Multiblock GmbH y Zytomed Systems GmbH) se utilizó para la evaluación de las propiedades de los anticuerpos en IHC. Las líneas celulares de cáncer que se utilizaron para la fabricación del conjunto personalizado de líneas celulares de cáncer se fijaron en paraformaldehído al 4% amortiguado con fosfato, pH 7 durante 16 a 48 horas a temperatura ambiente y posteriormente se incrustaron en parafina.

[0087] Figura 5:Variabilidad intracorriente del anticuerpo inventivo (MKP1A07310) en la matriz de tejidos CAX08_60, coeficientes de correlación de r= 0,99 entre los distintos portaobjetos.

[0088] Figura 6:Se probaron el anticuerpo inventivo (MKP1A07310, marcado con “#”) y un anticuerpo dirigido contra un epítopo extracelular del PD-L1 humano (MKP1B19610) en la matriz de células cancerosas Ca X09_70 con MKP1A7310 a una concentración de 1 pg/ml y MKP1B19610 a una concentración de 10 pg/ml.

[0089] Figura 7: (A)Detección IHC de células positivas para PD-L1 utilizando el anticuerpo inventivo con DAB como cromógeno (imagen derecha); detección del cromógeno mediante software informático (imagen central); detección de la tinción azul de núcleos y citoplasma (imagen derecha). Las flechas indican células positivas.(B)Tinción IHC en tejidos de control positivo y negativo utilizando el anticuerpo inventivo MKP1A07310 a una concentración de 1 pg/ml.

Claims

1. REIVINDICACIONES

1. Un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno del mismo que se une a un epítopo comprendido en la secuencia de aminoácidos de acuerdo con SEQ ID NO:1 (por lo que SEQ ID NO: 1 corresponde a una porción intracelular de PD-L1 humano), en donde la cadena pesada del anticuerpo o fragmento de unión a antígeno del mismo comprende la secuencia de aminoácidos de acuerdo con SEQ ID NO: 110 y la cadena ligera del anticuerpo o fragmento de unión a antígeno del mismo comprende la secuencia de aminoácidos de acuerdo con SEQ ID NO: 111.

2. El fragmento de unión a antígeno de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el fragmento de unión a antígeno es uno de los siguientes:

- un Fab

- un F(ab')2

- un Fab'

- un scFv

- un di-scFv.

3. El anticuerpo de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el anticuerpo es un anticuerpo monoclonal de tipo IgG.

4. El anticuerpo de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 3, en donde

la cadena ligera del anticuerpo comprende la secuencia de aminoácidos de acuerdo con SEQ ID NO: 15 y la cadena pesada del anticuerpo comprende la secuencia de aminoácidos de acuerdo con SEQ ID NO: 16, o la cadena ligera del anticuerpo comprende la secuencia de aminoácidos de acuerdo con SEQ ID NO: 114 y la cadena pesada del anticuerpo comprende la secuencia de aminoácidos de acuerdo con SEQ ID NO: 115.

5. El anticuerpo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1, 3 y 4 o fragmento de unión a antígeno del mismo de acuerdo con la reivindicación 2,

en donde dicho anticuerpo o fragmento de unión a antígeno del mismo se acopla además a una etiqueta detectable, en donde la etiqueta detectable es una enzima, un fluoróforo o un radioisótopo.

6. Un uso del anticuerpo o fragmento de unión a antígeno del mismo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5 en la detección de la presencia o expresión de un epítopo comprendido en SEQ ID NO: 1 en una muestrain vitro.

7. Un métodoin vitrode detección de la presencia o expresión de PD-L1 humano o de cualquier fragmento del mismo que comprende la secuencia de aminoácidos de acuerdo con SEQ ID NO: 1 en una muestra, en donde el método comprende el paso de poner en contacto dicha muestra con un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno del mismo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5 y detectar la presencia de anticuerpo unido o fragmento de unión a antígeno del mismo.

8. El método de acuerdo con la reivindicación 7, en donde la muestra se deriva de

- un sujeto que padece o corre el riesgo de padecer cáncer;

- un sujeto con disfunción de células T, en donde la disfunción de células T se refiere a un estado patológico de las células T CD8;

- un sujeto que tiene una infección aguda o crónica; o

- un sujeto que corre riesgo de mostrar o que muestra inmunidad tumoral.

9. Un usoin vitrode un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno del mismo de acuerdo con una de las reivindicaciones 1-5 en un método de acuerdo con la reivindicación 7.

10. Un polinucleótido aislado que codifica el anticuerpo o fragmento de unión a antígeno del mismo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-4.

11. Un vector de expresión que comprende el polinucleótido de acuerdo con la reivindicación 10.

12. Un usoin vitrode un vector de expresión de acuerdo con la reivindicación 11 en la fabricación de un anticuerpo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-3, en donde el anticuerpo comprende las secuencias de aminoácidos de acuerdo con SEQ ID NO: 15 y la SEQ ID NO: 16.

13. Una célula hospedera que comprende al menos un vector de expresión de acuerdo con la reivindicación 11.

14. Un usoin vitrode una célula hospedera de acuerdo con la reivindicación 13 en la fabricación de un anticuerpo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-3, en donde la cadena ligera del anticuerpo comprende la secuencia de aminoácidos de acuerdo con SEQ ID NO: 15 y la cadena pesada del anticuerpo comprende la secuencia de aminoácidos de acuerdo con SEQ ID NO: 16.