ES3052416T3 - Vaccinium macrocarpon extract and anti-ageing cosmetic effects thereof - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a un extracto de Vaccinium macrocarpon que comprende al menos un 80% de péptidos en peso de materia seca del extracto, en particular a una sustancia activa cosmética que lo comprende, a una composición cosmética que comprende dicha sustancia activa y a usos cosméticos antienvejecimiento. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

[0001] DESCRIPCIÓN

[0002] Extracto deVaccinium macrocarpony sus efectos cosméticos antiedad

[0003] Campo técnico

[0004] La invención se refiere a un extracto deVaccinium macrocarponque comprende al menos el 80 % de péptidos en peso de materias secas del extracto, en particular a un principio activo cosmético que lo comprende, a una composición cosmética que comprende dicho principio activo y a sus usos cosméticos antiedad.

[0005] Estado de la técnica

[0006] El auge de las videoconferencias ha hecho evolucionar profundamente nuestros modos de comunicación personal y profesional y ha creado nuevas preocupaciones cosméticas, como el efectoZoom face.Este fenómeno se produce cuando nuestra cara aparece en directo y en primer plano en la pantalla y no podemos evitar analizar las arrugas y otros defectos que se producen al mismo tiempo que nuestras expresiones. Por tanto, el auge de las reuniones virtuales ha conllevado el de las búsquedas en Internet de soluciones antiedad globales.

[0007] La oferta de ingredientes activos antiedad es enorme. Ya se conocen numerosas moléculas activas por su eficacia cosmética y su inocuidad. Entre estas moléculas denominadas de referencia, puede citarse el retinol, la niacinamida, las vitaminas C y E o incluso los péptidos. Estos últimos se han impuesto como ingredientes activos imprescindibles desde la década de 1980, periodo durante el cual se comenzaron a integrar en productos cosméticos.

[0008] La mayor parte de los péptidos presentes en el mercado son de origen sintético, procedentes de la industria química o de las biotecnologías. Los péptidos sintéticos están dotados de una eficacia realmente potente pero presentan el inconveniente de estar limitados a una diana biológica. Aunque se describen como naturales debido a su composición en aminoácidos, su producción mediante procesos químicos necesita emplear disolventes tóxicos. Por su parte, la síntesis mediante procesos biotecnológicos necesita recurrir a organismos genéticamente modificados (OGM). Estos modos de fabricación ya no están en línea con las necesidades actuales de los consumidores, que ponen los cuidados cosméticos procedentes de la botánica entre sus principales expectativas. El documento DE102008012068 describe el uso en cosmética de un extracto de arándanos (Vaccinium macrocarpon) en el sector capilar. La fracción peptídica se obtiene mediante un procedimiento de hidrólisis enzimática que da como resultado la obtención de un extracto que comprende oligosacáridos y péptidos.

[0009] Ahora bien, el mundo vegetal oculta una gran diversidad de moléculas entre las cuales los péptidos naturales se muestran como compuestos activos muy prometedores. Aunque algunos péptidos existen libremente en esta forma, la mayoría proceden de proteínas nativas de las que pueden liberarse mediante hidrólisis.

[0010] Por tanto, existe una necesidad de nuevos ingredientes activos cosméticos de origen natural y constituidos por péptidos de origen natural para luchar contra el envejecimiento cutáneo y que presenten por tanto una eficacia antiedad global.

[0011] Resumen de la invención

[0012] Para responder a esta necesidad, la invención propone un nuevo extracto obtenido a partir del arándano (Vaccinium macrocarpon) que comprende al menos el 80 % de péptidos en peso de materias secas del extracto, en particular se trata de un principio activo cosmético que comprende dicho extracto para una aplicación cosmética antiedad.

[0013] El arándano (Vaccinium macrocarpon(A.)) es un arbusto de hojas perennes que mide treinta centímetros. Crece en estado natural en las turberas ácidas de las regiones frías, los bosques montañosos y los prados arenosos de América del Norte. Cuando llega el verano, flores campanuladas rosa y moradas ofrecen su corola abierta a los polinizadores. A lo largo de la estación, el desarrollo de las bayas rojas transforma estas regiones en grandes extensiones llamativas. Es en otoño cuando se cosechan los frutos maduros.

[0014] El arándano, también denominado Atoca por los amerindios, se empleaba tradicionalmente por sus propiedades medicinales. Cuando llegaron los primeros europeos al territorio americano, los colonos descubrieron y también apreciaron esta baya de sabor acidulado. A partir de mediados del siglo XIX, médicos alemanes contribuyeron a extender su consumo en el mundo moderno. El arándano se convirtió poco a poco en el producto nutracéutico actual y en la actualidad se considera un verdadero superfruto.

[0015] El arándano se conoce concretamente por su interés nutricional y sus beneficios sobre la salud, en particular por sus efectos antioxidantes. En efecto, el arándano es rico en vitamina C y en otros antioxidantes permitiendo prevenir la aparición de ciertos cánceres, enfermedades cardiovasculares, y diversas enfermedades asociadas al envejecimiento. El arándano también se usa en la prevención de las infecciones urinarias, pero también para curar o prevenir la gingivitis y la periodontitis.

[0016] Además, se le han podido atribuir propiedades antiedad debido a la presencia de numerosas moléculas antioxidantes. La presente invención se refiere a un extracto específico rico en péptidos y desprovisto de las moléculas antioxidantes naturalmente presentes en el fruto, y que presenta una eficacia cosmética, en particular antiedad.

[0017] Por tanto, la invención se refiere a un extracto deVaccinium macrocarponque comprende al menos el 80 % de péptidos en peso de materias secas del extracto.

[0018] Preferiblemente, dicho extracto se obtiene a partir de los frutos deVaccinium macrocarpon,más preferiblemente a partir de las tortas de prensa deVaccinium macrocarpon.

[0019] Dicho extracto es un principio activo cosmético particularmente de interés como principio activo natural para luchar contra el envejecimiento cutáneo.

[0020] Así, el principio activo cosmético según la invención que comprende los péptidos de origen natural presenta ventajosamente un efecto antiedad global, en particular presenta un efecto antiarrugas y/o permite mejorar el brillo de la tez y/o mejorar la calidad de la unión dermoepidérmica, y/o mejorar la homeostasis cutánea.

[0021] Por tanto, responde a los problemas de la técnica anterior y la presente invención se refiere a las aplicaciones cosméticas anteriormente mencionadas, preferiblemente cuando el principio activo está integrado en una composición cosmética que comprende al menos el 0,1 % de dicho principio activo y un medio fisiológicamente aceptable, para una aplicación tópica.

[0022] La presente invención también se refiere a un procedimiento de obtención del principio activo según la invención que comprende concretamente una solubilización de las tortas de frutos deVaccinium macrocarponen agua, seguido de hidrólisis enzimáticas, una separación de la fase soluble e insoluble y la recuperación de la fase soluble, una inactivación enzimática, una purificación de la fracción peptídica y eventualmente una concentración del extracto seguida de una esterilización por filtración.

[0023] Otras características y ventajas se desprenderán de la descripción detallada de la invención y de los siguientes ejemplos.

[0024] Descripción detallada de la invención

[0025] Definiciones

[0026] Por “principio activo cosmético” en el sentido de la invención, se entiende un extracto que comprende al menos una molécula, preferiblemente un conjunto de moléculas, más preferiblemente las moléculas son péptidos, que presentan un efecto cosmético sobre la piel. Preferiblemente el efecto cosmético sobre la piel es un efecto antiedad.

[0027] Por “Vaccinium macrocarpon” en el sentido de la invención, se entiende un arbusto de la familia de lasEricaceae,también conocido con el nombre de arándano rojo grande, arándano de frutos grandes, Cranberry (en inglés) o incluso con los nombres científicos:Oxycoca macrocarpa (A.), Oxycoccus macrocarpus (A.)oSchollera macrocarpos (A.).Por “hidrolizado deVaccinium macrocarpon” en el sentido de la invención, se entiende cualquier principio activo procedente de los frutos deVaccinium macrocarpon,en particular de las tortas deVaccinium macrocarpon,obtenido mediante un procedimiento que comprende al menos una etapa de hidrólisis, preferiblemente dos etapas de hidrólisis sucesivas deVaccinium macrocarpon.El término hidrolizado deVaccinium macrocarponexcluye las moléculas extraídas únicamente mediante maceración o decantación deVaccinium macrocarpon.

[0028] Por “péptidos” en el sentido de la invención, se entienden péptidos de tamaño, expresado en masa molar, inferior o igual a 2000 Da.

[0029] Por “aminoácidos ácidos” en el sentido de la invención, se entiende un aminoácido cargado negativamente a pH neutro, tal como el ácido aspártico o el ácido glutámico.

[0030] Por “aminoácidos básicos” en el sentido de la invención, se entiende un aminoácido cargado positivamente a pH neutro, tal como la arginina, la histidina o la lisina.

[0031] Por “péptidos catiónicos” en el sentido de la invención, se entienden péptidos de tamaño, expresado en masa molar, inferior o igual a 2000 Da y formados principalmente por aminoácidos básicos.

[0032] Por “tortas” en el sentido de la invención, se entienden los residuos sólidos procedentes de la extracción del aceite de las semillas o de los frutos, en particular de las semillas y de la pulpa deVaccinium macrocarpon.Concretamente, se trituran las semillas y la pulpa y se extrae el aceite mediante un procedimiento de extracción por presión en frío bien conocido por el experto en la técnica. Este procedimiento permite recuperar el aceite de arándano y los subproductos residuales sólidos: las tortas.

[0033] Por “película” en el sentido de la invención se entiende un producto cosmético que se aplica temporalmente sobre la piel y que se retira después de un determinado tiempo de aplicación, que presenta un efecto cosmético o dermocosmético. Puede tratarse, por ejemplo, de una máscara, un parche o una banda, para la cara o el cuerpo. Principio activo según la invención

[0034] Por tanto, la presente invención tiene por objeto un principio activo cosmético que comprende al menos un extracto deVaccinium macrocarponque comprende al menos el 80 % de péptidos en peso de materias secas del extracto. El extracto según la invención es un ingrediente activo de origen natural, incluyendo los péptidos presentes en dicho extracto. La especificidad del extracto según la invención es que está constituido por al menos el 80 % de péptidos de origen natural, es decir que no son sintéticos y, por tanto, procedentes de la industria química o de las biotecnologías. Para ello, el extracto se obtiene a partir deVaccinium macrocarpon,preferiblemente de los frutos, más preferiblemente de las tortas deVaccinium macrocarpon.

[0035] Las tortas deVaccinium macrocarponse obtienen preferiblemente tras una primera etapa de extracción de los frutos del arándano que permite, por un lado, recoger el jugo de arándano y, por otro lado, las semillas y la pulpa residual procedentes del fruto. A continuación se trituran las semillas y la pulpa y se extrae el aceite por presión en frío. Entonces queda la torta de arándano, materia prima del extracto según la invención.

[0036] Según una realización preferida, el extracto según la invención es un hidrolizado de las tortas deVaccinium macrocarpon,preferiblemente un hidrolizado enzimático de las tortas deVaccinium macrocarpon.

[0037] De manera particularmente ventajosa, el hidrolizado enzimático se obtiene después de dos hidrólisis enzimáticas sucesivas realizadas por dos proteasas diferentes.

[0038] El extracto según la invención comprende entonces preferiblemente al menos el 80 % de péptidos en peso de materia seca del extracto. Según una realización particularmente preferida, los péptidos representan el 98 % en peso de materia seca del extracto. Dichos péptidos tienen un tamaño, expresado en masa molar, inferior o igual a 2000 Da. Preferiblemente, dichos péptidos tienen un tamaño comprendido entre 243 Da y 2000 Da.

[0039] La distribución y la cantidad de los péptidos puede determinarse mediante una valoración espectrofotométrica según el método de Lowry (Lowry et al., Protein measurement with the Folin reagent, J. Biol. Chem., 193, 265-275, 1951). La caracterización y la cuantificación de los aminoácidos presentes en el extracto, y por tanto en el principio activo según la invención, pueden realizarse mediante cromatografía de líquidos tras la hidrólisis total de la muestra.

[0040] Por tanto, el extracto según la invención está compuesto de manera preferible y mayoritaria por péptidos que comprenden entre 4 y 6 aminoácidos, estando dichos péptidos enriquecidos en aminoácidos básicos, preferiblemente al menos el 20 %, más preferiblemente al menos el 25 %, aún más preferiblemente el 27,9 %, particularmente en arginina, preferiblemente al menos el 15 %, más preferiblemente el 19,6 %.

[0041] Por tanto, el extracto según la invención presenta un nivel de péptidos catiónicos, estando dichos péptidos formados principalmente por aminoácidos básicos, superior al 20 %.

[0042] El inventor también ha determinado el contenido en materia seca, el contenido en cenizas y el contenido en azúcares totales del extracto.

[0043] El contenido en materia seca puede determinarse mediante el pesaje de los residuos procedentes del secado de las muestras del extracto según la invención a 105 °C en una estufa hasta la obtención de un peso constante.

[0044] El contenido en cenizas minerales puede determinarse mediante el pesaje de los residuos procedentes de la incineración de las muestras del principio activo según la invención a 550 °C en un horno de mufla eléctrico.

[0045] El contenido en azúcares totales (hidratos de carbono) en el principio activo que comprende dicho extracto puede determinarse mediante el método de DUBOIS (Dubois M. et al., Analytical chemistry, 28, 3, 350-356, 1956). El contenido en azúcares totales en el principio activo se expresa en porcentaje con respecto a la materia seca.

[0046] La valoración del nitrógeno total en el extracto según la invención puede realizarse concretamente mediante el método de KJELDHAL (referencia: Official method of analysis of the A.O.C., 12ª ed. W Horwitz, E.D., Nueva York, 15-60, 1975). El contenido se expresa en porcentaje con respecto al contenido en materias secas.

[0047] El extracto según la invención comprende preferiblemente el 95 % de fracción nitrogenada (es decir, los péptidos) y el 5 % de cenizas, en peso con respecto a la materia seca. Por tanto, no comprende azúcares.

[0048] El principio activo según la invención comprende el extracto solo o con otros constituyentes.

[0049] El principio activo cosmético según la invención puede presentarse en forma líquida o en forma sólida o en forma de película.

[0050] Cuando se presenta en forma líquida, el principio activo según la invención está preferiblemente constituido de manera exclusiva por el extracto de tortas deVaccinium macrocarponacompañado por estabilizantes y/o por conservantes. El extracto en forma líquida se presenta preferiblemente en forma de una disolución acuosa líquida límpida, con un bajo olor y un color amarillo muy claro. No obstante, puede tener más color.

[0051] Preferiblemente, el extracto según la invención en forma líquida tiene un contenido en materias secas de: 5 g/l a 30 g/l, aún más preferiblemente de 9 g/l a 14 g/l.

[0052] Cuando el principio activo según la invención se presenta en forma sólida, está preferiblemente en forma de polvo con o sin vehículo. El vehículo puede elegirse, por ejemplo, de las maltodextrinas. En este caso, preferiblemente, el extracto representa al menos el 5 % en peso y el vehículo como máximo el 95 % en peso.

[0053] El principio activo según la invención también puede presentarse en forma de una película. En este caso, el extracto de tortas deVaccinium macrocarponrepresenta preferiblemente al menos el 0,1 % en peso de la película.

[0054] Cuando se presenta en forma de película, el principio activo comprende:

[0055] - al menos el hidrolizado de tortas deVaccinium macrocarponsegún la invención,

[0056] - al menos una carga mineral, y

[0057] - al menos un polímero de origen natural, y

[0058] - al menos un plastificante, y

[0059] - al menos un tensioactivo, y

[0060] El polímero de origen natural puede elegirse de: pectina, goma tamarindo, alginato, pululano, ispágula, goma xantana, goma guar, goma tara, algarroba, agar, goma arábiga, goma gellan, dextrano, carragenanos, celulosa, konjac y quitosano.

[0061] El plastificante puede elegirse de: glicerol, sorbitol, sacarosa, eritritol, urea, propilenglicol y butilenglicol.

[0062] La carga mineral puede elegirse de: carbonato de calcio, arcilla verde, caolín, perlita, talco, silicato de magnesio, mica, sericita y diatomeas, sílice, sulfato de calcio, cloruro de calcio, cloruro de potasio, óxido de hierro y óxido de cinc. El principio activo puede comprender además un pigmento para dar color a la película.

[0063] Según una realización preferida, el extracto del principio activo cosmético según la invención es susceptible de obtenerse mediante un procedimiento de extracción que comprende al menos una hidrólisis enzimática de tortas deVaccinium macrocarpon,habiéndose solubilizado previamente las tortas en agua.

[0064] Según una realización particularmente preferida, el extracto del principio activo cosmético según la invención es susceptible de obtenerse mediante un procedimiento de extracción que comprende al menos dos hidrólisis enzimáticas de tortas deVaccinium macrocarpon,habiéndose solubilizado previamente las tortas en agua.

[0065] Preferiblemente las dos hidrólisis enzimáticas, sucesivas, se realizan con dos proteasas diferentes. A continuación, el procedimiento comprende preferiblemente una clasificación de las moléculas presentes en la fase soluble seleccionada tras la hidrólisis, para purificar la fracción peptídica y particularmente los péptidos de tamaños inferiores a 2000 Da.

[0066] Por tanto, el extracto del principio activo cosmético según la invención es susceptible de obtenerse mediante el siguiente procedimiento:

[0067] - solubilización de al menos 100 g/l de tortas deVaccinium macrocarponen agua,

[0068] - hidrólisis enzimática,

[0069] - purificación de la fracción peptídica.

[0070] Según una realización particularmente preferida, el extracto del principio activo según la invención es susceptible de obtenerse mediante un procedimiento tal como se describe a continuación.

[0071] Procedimiento de obtención del extracto según la invención

[0072] El extracto según la invención puede obtenerse mediante cualquier medio.

[0073] Según una realización particularmente adecuada, el extracto según la invención se obtiene mediante la aplicación de las siguientes etapas:

[0074] - solubilización de los frutos deVaccinium macrocarponen agua, preferiblemente de las tortas deVaccinium macrocarpon,preferiblemente a razón de al menos 100 g de las tortas deVaccinium macrocarponpor litro de agua, - al menos dos hidrólisis enzimáticas, sucesivas, preferiblemente al menos dos hidrólisis enzimáticas realizadas con la ayuda de al menos dos proteasas diferentes,

[0075] - separación de las fases soluble e insoluble, mediante cualquier medio que permita separar una fase insoluble de la fase soluble, por ejemplo mediante centrifugación, filtración o decantación,

[0076] - recuperación de la fase soluble,

[0077] - inactivación enzimática mediante cualquier medio que permita la inactivación de las actividades enzimáticas, por ejemplo mediante tratamiento térmico,

[0078] - clasificación molecular de las moléculas de la fase soluble para recuperar las moléculas de tamaños inferiores a 2000 Da y concretamente de los péptidos de tamaños inferiores a 2000 Da, preferiblemente de tamaño comprendido entre 243 Da y 2000 Da, mediante cualquier medio que permita la clasificación molecular, por ejemplo mediante ultrafiltración o cromatografía iónica,

[0079] - eventualmente desodorización o decoloración,

[0080] - preferiblemente filtración y esterilización por filtración.

[0081] Al extraer el jugo de arándano quedan las semillas y la pulpa de los frutos. En un segundo momento, al extraer el aceite por presión en frío, sólo quedan las tortas. Este proceso es habitual en el sector de la industria agroalimentaria. A continuación se reducen estos subproductos en polvo. Por tanto, sólo las moléculas de los frutos, preferiblemente de las tortas, constituyen la materia prima de partida.

[0082] La clasificación molecular puede realizarse por ultrafiltración, preferiblemente la clasificación molecular se realiza por cromatografía iónica.

[0083] Puede añadirse una etapa complementaria para secar el hidrolizado de manera que se presente en forma sólida, preferiblemente en forma de polvo. Puede tratarse de una etapa de atomización o de liofilización, por ejemplo. En este caso, puede usarse un vehículo tal como, por ejemplo, una maltodextrina.

[0084] Las etapas de los procedimientos descritos anteriormente, tomadas de manera individual, son habituales en el sector de las extracciones de compuestos activos a partir de materias primas naturales y el experto en la técnica puede ajustar sus parámetros de reacción basándose en sus conocimientos generales, y de manera que se obtengan las características del principio activo objeto de la invención.

[0085] Composición cosmética

[0086] El principio activo según la invención se usa preferiblemente en composiciones cosméticas que comprenden un medio fisiológicamente aceptable, preferiblemente un medio cosméticamente aceptable. Se trata de composiciones de diferentes formas galénicas, adaptadas a una aplicación por vía tópica sobre la piel.

[0087] Estas composiciones pueden presentarse concretamente en forma de emulsiones de aceite en agua, emulsiones de agua en aceite, emulsiones múltiples (agua/aceite/agua o aceite/agua/aceite) que pueden ser eventualmente microemulsiones o nanoemulsiones, o en forma de disoluciones, suspensiones, hidrodispersiones, geles acuosos, polvos o base de maquillaje. Pueden ser más o menos fluidas y tener el aspecto de cremas, emulsiones, geles, máscaras o cualquier otro aspecto de los productos cosméticos para el cuidado de la piel sana.

[0088] Puede tratarse de composiciones que comprendan al menos el 0,1 % del principio activo líquido según la invención (es decir, aproximadamente 7,2 ppm de péptidos), preferiblemente entre el 0,5 y el 10 % o que comprendan al menos el 0,01 % de un principio activo en polvo según la invención.

[0089] Estas composiciones comprenden, además del principio activo, un medio fisiológicamente aceptable y de manera preferible cosméticamente aceptable, es decir que no provoque sensaciones de molestia para el usuario tales como enrojecimiento, tirantez o picores.

[0090] Las composiciones según la invención pueden contener como adyuvante al menos un compuesto seleccionado entre: - aceites, que pueden elegirse concretamente de aceites de silicona, lineales o cíclicos, volátiles o no volátiles, - ceras, como la ozoquerita, la cera de polietileno, la cera de abejas o la cera de carnauba,

[0091] - elastómeros de silicona,

[0092] -tensioactivos, preferiblemente emulsionantes, ya sean no iónicos, aniónicos, catiónicos o anfóteros,

[0093] - cotensioactivos, tales como los alcoholes grasos lineales,

[0094] - espesantes y/o gelificantes,

[0095] - humectantes, como los polioles, tal como la glicerina,

[0096] - colorantes, conservantes, cargas,

[0097] - tensores,

[0098] - secuestrantes,

[0099] - perfumes,

[0100] - y sus mezclas, sin que esta lista sea limitativa.

[0101] Ejemplos de tales adyuvantes se citan en particular en el Diccionario de la CTFA (International Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook, publicado por el Personal Care Product Council).

[0102] Por supuesto, el experto en la técnica se asegurará de elegir los posibles compuestos complementarios, activos o no activos, y su cantidad, de modo que las propiedades ventajosas de la mezcla no sean alteradas, o no lo sean sustancialmente, por la adición prevista.

[0103] Estas composiciones están destinadas a usarse en pieles sanas, concretamente pieles maduras, en particular para un efecto antiedad global, preferiblemente un efecto antiarrugas y/o para mejorar el brillo de la tez y/o mejorar la calidad de la unión dermoepidérmica, y/o mejorar la homeostasis cutánea.

[0104] Por tanto, la invención también tiene por objeto un procedimiento cosmético de tratamiento de la piel para un efecto antiarrugas y/o para mejorar el brillo de la tez y/o mejorar la calidad de la unión dermoepidérmica, y/o mejorar la homeostasis cutánea que consiste en la aplicación tópica sobre la piel de una persona sana de un extracto de este tipo según la invención o de una composición de este tipo según la invención.

[0105] Uso

[0106] Por tanto, el principio activo según la invención presenta características que permiten su uso en cosmética y en particular para limitar los efectos naturales asociados al envejecimiento y obtener de ese modo un efecto antiedad global, preferiblemente un efecto antiarrugas y/o para mejorar el brillo de la tez y/o mejorar la calidad de la unión dermoepidérmica, y/o mejorar la homeostasis cutánea.

[0107] Por tanto, permite mejorar la homeostasis de la piel y con ello la función de barrera en sujetos sanos de edad avanzada, lo cual se traduce directamente en una reducción de las pérdidas insensibles de agua en un 15 %. El aspecto radiante también se aumenta en un 14 %, lo cual se traduce en un brillo de la tez reavivado. Por tanto, se refuerza la función de barrera epidérmica de las pieles envejecidas.

[0108] El extracto según la invención también favorece la expresión de los principales biomarcadores estructurales de la dermis tales como los colágenos I y III; la periostina; la tropoelastina; los proteoglicanos (decorina, perlecano, biglicano, agrecano); el ácido hialurónico.

[0109] El extracto según la invención también permite reducir la expresión de los marcadores de degradación de la dermis tales como los MMP-1.

[0110] Por tanto, la calidad de las fibras de la dermis se mejora en un 17 %, lo cual se traduce en una reducción de las arrugas de las patas de gallo en voluntarios caucásicos y asiáticos.

[0111] Actuando sobre estos diferentes marcadores, el principio activo según la invención tiene una acción antiedad global. Por consiguiente, se resaltan la belleza y la calidad de la piel, se reducen significativamente las arrugas, la piel está más firme y se reaviva el brillo de la tez. Está particularmente adaptado para las pieles sanas maduras.

[0112] Por tanto, el principio activo que comprende al menos un extracto de las tortas deVaccinium macrocarponpuede usarse para usos cosméticos y, por tanto, por definición no terapéuticos, antiedad en aplicación tópica sobre la piel sana.

[0113] El principio activo se diferencia de los extractos de arándano habitualmente conocidos por su efecto antioxidante porque no contiene polifenoles que le confieran esta eficacia.

[0114] La invención se ilustra ahora mediante ejemplos no limitativos de composiciones según la invención y mediante resultados de ensayos.

[0115] Ejemplos

[0116] Ejemplo 1: extracto deVaccinium macrocarponsin procedimiento de extracción según la invención (no incluido en la invención).

[0117] La caracterización y la cuantificación de los aminoácidos constituyentes de una torta de arándano se realizaron mediante cromatografía de líquidos.

[0118] [Tabla 1]

[0121]

[0123] La torta de arándano presenta un nivel de aminoácidos básicos (arginina, histidina, lisina) del 17,3 % y un nivel de aminoácidos ácidos (ácido aspártico, ácido glutámico) del 33,1 %.

[0124] Ejemplo 2: extracto según la invención

[0125] El principio activo se obtiene mediante la implementación de las siguientes etapas:

[0126] - solubilización en agua de las tortas deVaccinium macrocarpona razón de 100 g/l,

[0127] - hidrólisis enzimática,

[0128] - inactivación enzimática mediante tratamiento térmico,

[0129] - una etapa de clasificación molecular mediante cromatografía iónica, destinada a seleccionar las moléculas, concretamente los péptidos, de tamaños inferiores a 2000 Da,

[0130] - desodorización,

[0131] - filtraciones y esterilización por filtración.

[0132] El principio activo obtenido presenta las siguientes características analíticas:

[0133] - nivel de materia seca: 12,2 g/l

[0134] - contenido en proteína: 10,2 g/l (83,6 %)

[0135] - pH: 3,0 - 4,0

[0136] - nivel de cenizas: 0,6 g/l (4,9 %).

[0137] La caracterización y la cuantificación de los aminoácidos constituyentes del extracto según la invención se realizaron mediante cromatografía de líquidos tras la hidrólisis de la muestra.

[0138] La distribución de los diferentes aminoácidos se presenta en la tabla 2

[0139] [Tabla 2]

[0142]

[0144] El extracto según la invención presenta un nivel de aminoácidos básicos superior (27,9 %) con respecto a la torta de arándano del ejemplo 1 debido a un contenido en arginina importante y un nivel de aminoácidos ácidos más baja (30,9 %) debida a una disminución del nivel de ácido aspártico. Las etapas del procedimiento según la invención permiten seleccionar los péptidos catiónicos (ricos en aminoácidos básicos arginina, histidina, lisina).

[0145] El principio activo según la invención no presenta la característica que suele atribuirse a los extractos de arándano, a saber el principio activo según la invención no presenta un efecto antirradicales.

[0146] En efecto, el extracto según la invención no presenta actividad antirradicales según la prueba de DPPH tal como se presenta en la tabla 3 a continuación.

[0147] El hidrato de difenil-picrilhidrazilo (DPPH) es un radical libre que absorbe en la región del violeta a 517 nm. Un producto antirradicales conlleva una desaparición de la coloración violeta. La actividad antirradicales de una sustancia se expresa en porcentaje de inhibición de la absorbancia del DPPH.

[0148] [Tabla 3]

[0151]

[0152] A la dosis máxima recomendada, es decir el 10 % de principio activo, el porcentaje de inhibición de la absorbancia del DPPH es bajo. Por tanto, el extracto según la invención no presenta actividad antirradicales.

[0153] Ejemplo 3: ejemplo comparativo con extractos no incluidos en la invención (HI)

[0154] Los siguientes productos se obtienen a partir de las tortas deVaccinium macrocarponcon un procedimiento diferente del del ejemplo 2.

[0155] El producto HI 1 se obtiene con un procedimiento que difiere del del ejemplo 2 en que no contiene ninguna etapa de hidrólisis.

[0156] El producto obtenido presenta las siguientes características analíticas:

[0157] - Un contenido en materia seca de 26,7 g/l

[0158] - Un contenido en proteína de 1,6 g/l (6 %)

[0159] - Un contenido en azúcar de 11,4 g/l (57 %)

[0160] Por tanto, el producto presenta un contenido en proteína del 6 % con respecto al contenido en materia seca y, por tanto, muy inferior al nivel mínimo del 80 % reivindicado en el contexto de la invención.

[0161] El producto HI 2 se obtiene con un procedimiento que difiere del del ejemplo 2 en que no contiene las etapas de clasificación molecular.

[0162] El producto obtenido presenta las siguientes características analíticas:

[0163] - Un contenido en materia seca de 53,8 g/l

[0164] - Un contenido en proteína de 19 g/l (35 %)

[0165] - Un contenido en azúcar de 17,3 g/l (32 %)

[0166] El producto presenta un contenido en proteína del 35 % con respecto al contenido en materia seca y, por tanto, inferior al nivel mínimo del 80 % reivindicado en el contexto de la invención.

[0167] Se estudió la eficacia del extracto HI 2 y del de la presente invención siguiendo la expresión de genes asociados a la función de barrera y a la dinámica de la matriz, según el protocolo descrito a continuación. Los resultados comparativos entre el extracto no incluido en la invención y el de la presente invención se presentan en la tabla 4 a continuación.

[0168] [Tabla 4]

[0171]

[0173] Se desprende claramente que el extracto HI 2 procedente de un procedimiento diferente y que contiene menos del 80 % de péptidos no presenta una eficacia similar a la del extracto según la invención para la expresión de los genes estudiados.

[0174] Ejemplo 4: ejemplo de composición según la invención

[0175] Un ejemplo de formulación que comprende el principio activo según la invención en forma de gel de crema se presenta en la tabla 5 a continuación:

[0176] [Tabla 5]

[0177]

[0179] La composición del ejemplo 4 puede obtenerse concretamente mediante el siguiente procedimiento:

[0180] - Dispersar B en A con agitación suave.

[0181] - Neutralizar previamente con C.

[0182] - Con fuerte agitación, añadir D y después E.

[0183] - Mantener la agitación durante 20 min.

[0184] - Con agitación moderada, añadir F y G.

[0185] - Ajustar el pH con H.

[0186] La composición está entonces en forma de un gel crema espeso y brillante, de color blanco roto, que presenta un pH a 1 mes igual a 7,3, una viscosidad (C/5 rpm) igual a 44200 cP.

[0187] Ejemplo 5: ejemplo de composición según la invención

[0188] Un ejemplo de formulación que comprende un principio activo según la invención en forma de una crema untuosa se presenta en la tabla 6 a continuación:

[0189] [Tabla 6]

[0192]

[0193]

[0195] La composición del ejemplo 5 puede obtenerse concretamente mediante el siguiente procedimiento:

[0196] - Añadir A2 en A1 con agitación moderada, agitar hasta la obtención de un gel homogéneo y calentar a 80 °C.

[0197] - Someter B a agitación magnética y calentar a 80 °C.

[0198] - Emulsionar B en A con un rotor-estator durante 10 min.

[0199] - A 50 °C, con agitación moderada, añadir C, después D y E.

[0200] - Enfriar hasta temperatura ambiente con agitación suave, después ajustar el pH con F.

[0201] La composición está entonces en forma de una emulsión espesa blanca y brillante, que presenta un pH a 1 mes igual a 6,0, una viscosidad (C/5 rpm) igual a 57000 cP.

[0202] Ejemplo 6: ejemplo de composición según la invención

[0203] Un ejemplo de formulación que comprende un principio activo según la invención en forma de una crema de noche se presenta en la tabla 7 a continuación:

[0204] [Tabla 7]

[0206]

[0208] La composición del ejemplo 6 puede obtenerse concretamente mediante el siguiente procedimiento:

[0209] - Añadir A2 en A1 con agitación moderada, agitar hasta la obtención de un gel homogéneo y calentar a 80 °C.

[0210] - Someter B a agitación magnética y calentar a 80 °C.

[0211] - Emulsionar B en A con agitación cortante durante 10 min.

[0212] - A 40-50 °C, con agitación moderada, añadir C, después D.

[0213] La composición está entonces en forma de una emulsión espesa blanca y brillante.

[0214] Ejemplo 7: ejemplo de composición según la invención

[0215] Un ejemplo de formulación que comprende un principio activo según la invención en forma de una base de maquillaje se presenta en la tabla 8 a continuación:

[0216] [Tabla 8]

[0219]

[0221] La composición del ejemplo 7 puede obtenerse concretamente mediante el siguiente procedimiento:

[0222] - Calentar A a 85 °C y homogeneizar con agitación intensa.

[0223] - Triturar B con dispositivo de tres cilindros y transferir a A. Agitar hasta la homogeneidad.

[0224] - Colocar C con agitación magnética y calentar a 80 °C.

[0225] - Añadir C en AB muy lentamente con agitación intensa.

[0226] - Homogeneizar durante 10 min con agitación cortante.

[0227] - A 30 °C, añadir D y homogeneizar durante 2 min con agitación cortante.

[0228] La composición está entonces en forma de una emulsión suave y brillante.

[0229] Ensayos de eficacia

[0230] Ensayo 1: Evaluación del potencial de actividad del principio activo según la invención sobre los genes principales de la homeostasis cutánea

[0231] El objetivo de este estudio es evaluar el potencial de actividad del principio activo según la invención sobre los genes principales implicados en el equilibrio cutáneo.

[0232] Este estudio se realizó con 34 genes implicados en los diferentes procesos asociados al establecimiento de: - la función de barrera epidérmica: proliferación, hidratación, cohesión, diferenciación, descamación, inmunidad innata, sistema antioxidante e inflamación (véase la tabla 9: proliferación, hidratación, cohesión, diferenciación, efecto antirradicales e inflamación).

[0233] - la unión dermoepidérmica UDE;

[0234] - la matriz dérmica: organización y degradación de las fibras, hidratación e inflamación (véase la tabla 9: organización de la matriz, degradación de la matriz, hidratación, proteoglicano, factores de crecimiento e inflamación).

[0235] La expresión de los diferentes genes diana se evaluó mediante PCR cuantitativa en queratinocitos humanos procedentes de donantes jóvenes (≤ 30 años) y de avanzada edad (≥ 60 años) o fibroblastos humanos jóvenes (< P5) y envejecidos mediante replicaciones sucesivas (más de 20 replicaciones).

[0236] El protocolo operativo del estudio se describe a continuación. Se siembran las células humanas jóvenes y envejecidas y se incuban a 37 °C. Después, se tratan las células durante 48 h con el principio activo según la invención o una disolución de retinol a 0,5.10-5 M.

[0237] Después de varios días, se recuperan las células y se extraen los ARN totales. Se sometieron los ARN a transcripción inversa y se analizaron los ADN complementarios obtenidos mediante la técnica de PCR cuantitativa. Se analizaron los ARNm de controles internos de referencia en paralelo con los ARNm de los marcadores implicados en la función de barrera de la epidermis, en la UDE y en la matriz dérmica.

[0238] La incorporación de fluorescencia se mide de manera continua con la ayuda de un termociclador. El análisis de los Ct (cuantificación relativa) se realiza con la ayuda de un software.

[0239] Los resultados se presentan en la tabla 9.

[0240] [Tabla 9]

[0242]

[0243]

[0245] En los 34 genes evaluados, el 76 % presentan una expresión modificada a lo largo del envejecimiento que se traduce en un impacto principal sobre la función de barrera, la unión dermoepidérmica y la matriz dérmica.

[0246] Sometido a prueba al 0,5 % en queratinocitos envejecidos, el principio activo según la invención restaura significativamente la expresión de los genes clave de:

[0247] - la proliferación (Ki67: 41 %);

[0248] - la diferenciación (loricrina: 75 % y filagrina: 47 %);

[0249] - la cohesión (claudina 1: 30 %);

[0250] - la defensa antirradicales (SOD1: 12 %).

[0251] Sometido a prueba al 0,5 % en fibroblastos envejecidos, el principio según la invención actúa significativamente sobre la expresión de los genes asociados a la organización de la matriz (colágeno 1: 24 % y elastina: 28 %) y a su degradación (MMP1: -37 %). En los dos tipos celulares, se demostró una acción significativa sobre los marcadores asociados a la hidratación y la inflamación. El principio activo según la invención y el retinol presentan efectos similares sobre los genes asociados a la matriz.

[0252] Ensayo 2: Eficacia biológica del principio activo según la invención sobre la función de barrera de la epidermis y la hidratación.

[0253] El objetivo de este estudio es evaluar la capacidad del principio activo según la invención para mantener una función de barrera funcional estimulando la síntesis de Ki 67, de loricrina, de claudina 1 y de acuaporina 3.

[0254] Una de las estrategias principales de la piel para protegerse es mantener una barrera intacta. Esta barrera procedente del proceso de proliferación y diferenciación de los queratinocitos, resulta de la estructura particular del estrato córneo y de la cohesión de las capas superiores de la epidermis garantizada por las uniones apretadas. Varios componentes proteicos son indispensables para el establecimiento de esta función de barrera tales como:

[0255] - El Ki-67, que es un marcador clave de la proliferación de las células de la capa basal de la epidermis.

[0256] - La loricrina, que desempeña un papel principal en la diferenciación terminal.

[0257] - La claudina 1, que es uno de los constituyentes principales de las uniones apretadas, estructuras complejas que establecen una verdadera cohesión entre células.

[0258] - La acuaporina 3, que forma parte de las proteínas de membrana esenciales para el transporte del agua y permite mantener la hidratación de la capa córnea.

[0259] Por tanto, la proliferación, la cohesión y el nivel de hidratación están directamente asociados al proceso de diferenciación epidérmica y al estado de la función de barrera.

[0260] Este estudio se realizó en epidermis reconstruidas normales y envejecidas. La construcción epidérmica se evaluó con la ayuda de una coloración con hematoxilina-eosina (HE) y la síntesis de los marcadores de la función de barrera mediante inmunohistofluorescencia.

[0261] El protocolo operativo del estudio se describe a continuación. Se sembraron los queratinocitos humanos jóvenes y envejecidos en insertos y después se incubaron a 37 °C en una atmósfera que contenía el 5 % de CO2 y se cultivaron durante varios días.

[0262] Se tratan las epidermis reconstruidas durante 48 horas de manera sistémica con:

[0263] - El principio activo según la invención al 0,1 % y al 0,5 % (V/V)

[0264] - Una disolución de retinol a 10 µM.

[0265] Se recuperan las epidermis reconstruidas, se fijan, se deshidratan y se incluyen en parafina. A continuación se realizan secciones (4 µm) con la ayuda de un microtomo.

[0266] El análisis del espesor de las epidermis reconstruidas se realiza mediante coloración con hematoxilina-eosina (HE). El análisis de la síntesis de Ki67, claudina 1, acuaporina 3 y loricrina se realiza mediante inmunohistofluorescencia. La visualización se realiza con la ayuda de un microscopio acoplado a un sistema de análisis de imágenes. El espesor de las epidermis obtenidas se midió en las secciones histológicas realizadas.

[0267] El nivel de los diferentes marcadores sintetizados es proporcional a la intensidad de fluorescencia verde presente en las epidermis reconstruidas. Se realizó un análisis cuantitativo de las imágenes gracias a un script de análisis de imágenes. Los resultados se expresan en unidades arbitrarias (UA).

[0268] Los resultados referentes a la capacidad del principio activo según la invención y del retinol para restaurar el espesor de la epidermis se presentan en la tabla 10.

[0269] [Tabla 10]

[0271]

[0273] Los resultados referentes a la capacidad del principio activo según la invención para restaurar la síntesis de Ki-67 se presentan en la tabla 11.

[0274] [Tabla 11]

[0276]

[0277]

[0279] Los resultados referentes a la capacidad del principio activo según la invención para restaurar la síntesis de loricrina se presentan en la tabla 12.

[0280] [Tabla 12]

[0282]

[0284] Los resultados referentes a la capacidad del principio activo según la invención para restaurar la síntesis de claudina 1 se presentan en la tabla 13.

[0285] [Tabla 13]

[0287]

[0289] Los resultados referentes a la capacidad del principio activo según la invención para restaurar la síntesis de acuaporina 3 se presentan en la tabla 14.

[0290] [Tabla 14]

[0292]

[0294] Las epidermis reconstruidas envejecidas presentan una función de barrera alterada, caracterizada por una disminución significativa del espesor de la epidermis, de la síntesis de Ki-67, de loricrina, de claudina 1, y de acuaporina 3. Sometido a prueba al 0,50 % en epidermis reconstruidas envejecidas, el principio activo según la invención restaura significativamente el espesor de la epidermis y la síntesis de:

[0295] - Ki-67 en 86 %;

[0296] - loricrina en 49 %;

[0297] - claudine-1 en 70 %;

[0298] - acuaporina 3 en 74 %.

[0299] El principio activo según la invención permite de este modo mantener una barrera funcional e hidratada.

[0300] Ensayo 3: Eficacia biológica del principio activo según la invención sobre la dinámica de la matriz.

[0301] El objetivo de este estudio es evaluar la capacidad del principio activo según la invención para favorecer la producción de una red de matriz funcional.

[0302] La matriz extracelular dérmica está constituida principalmente por una red densa de fibras de colágeno I. Este colágeno desempeña un papel clave en todas las fases de remodelado tisular. A partir de los 50 años, la calidad de la dermis se deteriora progresivamente. La red de fibras de colágeno cada vez es menos densa y cada vez está más fragmentada. Este efecto puede atribuirse concretamente al aumento de la metaloproteinasa de la matriz MMP-1 que degrada las fibras de colágeno I y III. Por otro lado, el ácido hialurónico es esencial para el mantenimiento de la estructura de las capas de la piel. Se combina con el agua y rellena los espacios intercelulares, lo cual contribuye a su poder altamente hidratante. La cantidad y la calidad de ácido hialurónico, principal glicosaminoglicano en la dermis, disminuye progresivamente con la edad.

[0303] El efecto del principio activo según la invención sobre:

[0304] - la red de colágeno I se estudió mediante inmunocitología, en fibroblastos humanos jóvenes (P5) y envejecidos (P22) obtenidos mediante replicaciones sucesivas;

[0305] - el nivel de MMP 1 se midió mediante valoración por ELISA en fibroblastos humanos procedentes de donantes de más de 60 años de edad y sometidos a una exposición a radiación UVA;

[0306] - la síntesis de ácido hialurónico se evaluó mediante valoración por ELISA en fibroblastos humanos procedentes de donantes de más de 60 años de edad.

[0307] Estudio de la red de colágeno I

[0308] Se siembran los fibroblastos humanos y se incuban a 37 °C en una atmósfera que contiene el 5 % de CO2.

[0309] Se tratan las células cada dos días con:

[0310] - El principio activo según la invención al 0,05 % y al 0,10 % (V/V)

[0311] - una disolución de retinol a 0,1 µM

[0312] A continuación se incuban en una atmósfera que contiene el 5 % de CO2 a 37 °C.

[0313] El marcado inmunocitológico del colágeno I se realiza mediante fijación y permeabilización con la ayuda de anticuerpo primario I y de anticuerpo secundario acoplado a un fluoróforo.

[0314] Se realizó un análisis cuantitativo mediante lectura de la fluorescencia de las diferentes condiciones sometidas a prueba con la ayuda de un fluorímetro. La intensidad de la red de colágeno I es proporcional a la intensidad de fluorescencia verde presente. Los resultados se expresan en valor de fluorescencia (UA).

[0315] Estudio del nivel de MMP-1

[0316] Se siembran los fibroblastos humanos envejecidos y se incuban a 37 °C en una atmósfera que contiene el 5 % de CO2. Se realizan las irradiaciones con la ayuda de una lámpara UV con intensidades UVA de 10 J/cm2.

[0317] Se sustituye el medio de cultivo por medio que contiene:

[0318] - El principio activo según la invención al 0,5 % y al 1 % (V/V)

[0319] - Una disolución de retinol a 1 µM

[0320] A continuación se incuban las células a 37 °C en una atmósfera que contiene el 5 % de CO2 durante 48 horas. Estudio del nivel de ácido hialurónico

[0321] Se siembran los fibroblastos humanos envejecidos y se incuban a 37 °C en una atmósfera que contiene el 5 % de CO2.

[0322] Se sustituye el medio de cultivo por medio que contiene:

[0323] - El principio activo según la invención al 0,5 % y al 1 % (V/V)

[0324] - una disolución de retinol a 1 µM

[0325] A continuación se incuban las células a 37 °C en una atmósfera que contiene el 5 % de CO2 durante 48 horas. Los resultados referentes a la capacidad del principio activo según la invención y del retinol para restaurar la síntesis de la red de colágeno I en fibroblastos envejecidos se presentan en la tabla 15.

[0326] [Tabla 15]

[0328]

[0330] Los resultados referentes al efecto del principio activo según la invención sobre la síntesis de los MMP-1 por los fibroblastos humanos envejecidos sometidos a una irradiación UVA se presentan en la tabla 16.

[0331] [Tabla 16]

[0333]

[0335] Los resultados referentes al efecto del principio activo según la invención sobre la síntesis del ácido hialurónico por fibroblastos humanos envejecidos sometidos a una irradiación UVA se presentan en la tabla 17.

[0336] [Tabla 17]

[0338]

[0339] Los fibroblastos envejecidos presentan una red de matriz alterada, caracterizada por una disminución significativa de la red de colágeno I y de la síntesis de ácido hialurónico. En respuesta a irradiaciones UVA, producen MMP-1 de manera significativa.

[0340] Sometido a prueba al 0,1 %, el principio activo según la invención:

[0341] - aumenta significativamente la producción de la red de colágeno I en un 54 %.

[0342] Sometido a prueba al 1 %, el principio activo según la invención:

[0343] - reduce significativamente la síntesis de los MMP-1 por fibroblastos envejecidos irradiados en un 45 %.

[0344] - aumenta significativamente la síntesis de ácido hialurónico en un 33 %.

[0345] Por tanto, el principio activo según la invención mantiene una organización funcional de las fibras de la matriz y contribuye a la hidratación en la dermis.

[0346] Ensayo 4: Eficacia cosmética del principio activo según la invención evaluada en voluntarios sanos caucásicos y asiáticos (pruebain vivo).

[0347] El objetivo de este estudio es evaluarin vivolos beneficios cosméticos del principio activo según la invención formulado al 2 % en emulsión, en comparación con una fórmula de placebo, en voluntarios caucásicos y asiáticos.

[0348] El panel caucásico está compuesto por 2 grupos de voluntarios sanos, de sexo femenino, de 45 a 66 años de edad que presentan arrugas a nivel de las patas de gallo y que aplicaron el placebo y el principio activo según la invención al 2 % en la mitad de la cara de manera aleatorizada y dos veces al día durante 42 días.

[0349] Los beneficios cosméticos del principio activo según la invención se evaluaron en el panel caucásico a nivel de la cara, después de 21 y 42 días de aplicación dos veces al día, según los siguientes métodos:

[0350] - Estudio del brillo de la tez mediante puntuación visual por expertos (aspecto radiante, color rosa, color cetrino, estado de fatiga de los ojos)

[0351] - Estudio del efecto antiarrugas mediante proyección de franjas.

[0352] El panel asiático está compuesto por 2 grupos de voluntarios sanos, de sexo femenino, que presentan arrugas a nivel de las patas de gallo y una tez apagada, que aplicaron o bien el principio activo de la invención al 2 %, o bien el placebo, en toda la cara, dos veces al día durante 42 días.

[0353] Los beneficios cosméticos del principio activo de la invención se evaluaron en el panel asiático a nivel de la cara, después de 21 y 42 días de aplicación dos veces al día, según los siguientes métodos:

[0354] - Estudio del brillo de la tez mediante puntuación clínica.

[0355] - Estudio del efecto antiarrugas mediante puntuación clínica.

[0356] A) Efecto del principio activo según la invención sobre el brillo de la tez

[0357] El principio activo según la invención formulado al 2 % en emulsión mejora los parámetros característicos del brillo de la tez en sujetos caucásicos. Este efecto aparece de manera importante y significativa a partir de los 21 días.

[0358] En efecto, en comparación con el placebo, el principio activo según la invención:

[0359] - proporciona una tez más luminosa y más fresca aumentando significativamente el aspecto radiante de la piel en un 12 %. Este efecto se observó en el 89 % de los voluntarios y aumenta después de 42 días de tratamiento (+14 %) en el 88 % de los voluntarios.

[0360] - también aumenta el color rosa de manera significativa en un 17 %. Este efecto se observó en el 61 % de los voluntarios y aumenta después de 42 días de tratamiento (+22 %) en el 82 % de los voluntarios.

[0361] - reduce significativamente el color cetrino en un 8 %. Este efecto se observó en el 61 % de los voluntarios y se intensifica después de 42 días de tratamiento (-12 %) en el 88 % de los voluntarios.

[0362] - también reduce el estado de fatiga de los ojos en un 8 %. Este efecto se observó en el 72 % de los voluntarios y se intensifica después de 42 días de tratamiento (-10 %) en el 82 % de los sujetos.

[0363] El principio activo según la invención formulado al 2 % en emulsión también mejora los parámetros característicos del brillo de la tez en sujetos asiáticos. Este efecto aparece de manera significativa a partir de los 21 días y se intensifica después de 42 días de tratamiento.

[0364] En efecto, en comparación con el placebo, el principio activo según la invención:

[0365] - aumenta significativamente el aspecto brillante de la piel en un 5 %, este efecto se mejora adicionalmente después de 42 días de tratamiento (+10 %)

[0366] - aumenta la luminosidad en un 6 %, este efecto se mejora adicionalmente después de 42 días de tratamiento (+8 %), - aumenta el color rosa, asociado al frescor de la tez en un 9 %, este efecto aumenta después de 42 días de tratamiento en un 18 %.

[0367] - conlleva una reducción del color cetrino (-5 %), este parámetro disminuye adicionalmente después de 42 días de tratamiento en un 12 %.

[0368] Estos efectos se observaron en el 97 % de los voluntarios.

[0369] B) Efecto antiarrugas del principio activo según la invención

[0370] El principio activo según la invención formulado al 2 % presenta un efecto antiarrugas rápido y significativo en sujetos caucásicos a partir de los 21 días de uso dos veces al día.

[0371] En efecto, en comparación con el placebo, el principio activo según la invención:

[0372] - alisa el relieve cutáneo de las patas de gallo reduciendo significativamente, a partir de los 21 días, la rugosidad de la piel (parámetro Sa =-6 %). Este efecto se mantiene después de 42 días de uso (Sa = -7 %).

[0373] - reduce las arrugas permitiendo una disminución del parámetro de volumen negativo (-22 % después de 21 días de tratamiento y -19 % después de 42 días).

[0374] El estudio de la distribución de los resultados muestra una mejora de estos parámetros en el 83 % de los sujetos. Asimismo, el principio activo según la invención formulado al 2 % presenta un efecto antiarrugas rápido y significativo en sujetos asiáticos a partir de los 21 días de uso dos veces al día.

[0375] En efecto, en comparación con el placebo, el principio activo según la invención reduce el estado de arrugas de las patas de gallo en un 10 % a partir de los 21 días de tratamiento. Este efecto se intensifica después de 42 días de uso (reducción del estado de arrugas en un 20 %). Este efecto se observó respectivamente en el 53 % y el 84 % de los voluntarios.

[0376] Ensayo 5: Eficacia del principio activo según la invención sobre la barrera cutánea en voluntarios sanos caucásicos y asiáticos.

[0377] El objetivo de este estudio es evaluarin vivoel efecto del principio activo según la invención, formulado al 2,5 % en emulsión, sobre la calidad de la barrera cutánea, en comparación con una fórmula de placebo, en voluntarios caucásicos y asiáticos.

[0378] El panel caucásico está compuesto por dos grupos de 18 voluntarios sanos, de sexo femenino, de 45 a 66 años de edad, que presentan arrugas a nivel de las patas de gallo y que aplicaron por la mañana y por la noche el principio activo según la invención y el placebo en la mitad de la cara de manera aleatorizada y dos veces al día durante 42 días.

[0379] El panel asiático está compuesto por dos grupos de 32 voluntarios sanos, de sexo femenino, de edad comprendida entre 41 y 64 años, que aplicaron por la mañana y por la noche o bien el principio activo según la invención o bien el placebo en toda la cara durante 42 días.

[0380] Se realizaron mediciones de pérdida transepidérmica de agua (PTA) a nivel de las mejillas con la ayuda de un dispositivo Tewameter<®>antes y después de 21 y 42 días de aplicación dos veces al día.

[0381] A partir de los 21 días de aplicación dos veces al día y en comparación con el grupo de placebo, el principio activo según la invención formulado al 2 % en emulsión mejora significativamente la calidad de la barrera cutánea de voluntarios caucásicos (reducción de las pérdidas de agua en un 17 %). Esta reducción se observó en el 94 % de los voluntarios.

[0382] Este efecto se mantiene después de 42 días de tratamiento con una reducción de la PTA igual al 15 % y se observa en el 82 % de los sujetos.

[0383] A partir de los 21 días de aplicación dos veces al día en toda la cara y en comparación con el grupo de placebo, el principio activo según la invención formulado al 2 % en emulsión mejora significativamente la calidad de la barrera cutánea de voluntarios asiáticos reduciendo las pérdidas insensibles de agua en un 13 %. Esta reducción se observó en el 55 % de los voluntarios.

[0384] Este efecto se intensifica después de 42 días de tratamiento con una reducción de la PTA igual al 15 % y se observa en el 71 % de los sujetos.

[0385] Reduciendo las pérdidas de agua, el principio activo según la invención sometido a prueba al 2 % favorece el refuerzo de la barrera cutánea de los voluntarios caucásicos y asiáticos.

[0386] Ensayo 6: Eficacia del principio activo según la invención sobre la calidad de la unión dermoepidérmica en voluntarios sanos caucásicos.

[0387] El objetivo de este estudio es evaluarin vivoel efecto del principio activo según la invención formulado al 2 % en emulsión, sobre la calidad de la zona de la UDE, zona esencial para los intercambios entre la dermis y la epidermis, en comparación con una fórmula de placebo, en voluntarios caucásicos.

[0388] El panel caucásico está compuesto por 2 grupos de 18 voluntarios sanos, de sexo femenino, de 45 a 66 años de edad que presentan arrugas a nivel de las patas de gallo y que aplicaron el placebo y el principio activo según la invención al 2 % en la mitad de la cara de manera aleatorizada y dos veces al día durante 42 días.

[0389] El efecto del principio activo según la invención sobre la calidad de la zona de la unión dermoepidérmica (UDE) se evaluó a nivel de las mejillas, en comparación con el placebo, después de 21 y 42 días de aplicación dos veces al día, mediante el estudio de la estructura de la unión dermoepidérmica (LC-OCT).

[0390] En comparación con el placebo, el principio activo según la invención formulado al 2 % en emulsión favorece el aspecto sinusoidal de la UDE. Este efecto aparece a partir de los 21 días de aplicación dos veces al día (+3 %, efecto observado en el 78 % de los voluntarios) y se intensifica de manera significativa después de 42 días de tratamiento (+4 %, efecto observado en el 88 % de los voluntarios).

[0391] Mejorando la sinuosidad de la UDE, el principio activo según la invención aumenta la superficie de la UDE y favorece de este modo los intercambios entre la epidermis y la dermis y su implicación en la resistencia a las tensiones mecánicas.

[0392] Eficacia del principio activo según la invención sobre la calidad de la matriz dérmica en voluntarios sanos caucásicos. El objetivo de este estudio es evaluarin vivoel efecto del principio activo según la invención formulado al 2 % en emulsión sobre la calidad de la matriz dérmica, en comparación con una fórmula de placebo, en voluntarios caucásicos. El panel caucásico está compuesto por 2 grupos de 18 voluntarios sanos, de sexo femenino, de 45 a 66 años de edad que presentan arrugas en las patas de gallo y que aplicaron el placebo y el principio activo según la invención al 2 % en la mitad de la cara de manera aleatorizada y dos veces al día durante 42 días.

[0393] El efecto del principio activo según la invención sobre la calidad de la matriz dérmica se evaluó a nivel de las mejillas, en comparación con el placebo, después de 21 y 42 días de aplicación dos veces al día, mediante el estudio de la calidad de las fibras (LC-OCT).

[0394] A partir de los 21 días de aplicación dos veces al día y en comparación con el grupo de placebo, el principio activo según la invención formulado al 2 % en emulsión mejora la calidad de las fibras para el conjunto de los voluntarios caucásicos en un 15 %. Este efecto se mantiene después de 42 días de tratamiento (+11 %) y se observó en el 94 % de los voluntarios.

[0395] Reforzando el tejido de soporte, el principio activo según la invención limita de ese modo la distensión de la piel. Ensayo 7: Ensayo comparativo entre el principio activo según la invención y una molécula de referencia: el retinol. El objetivo de este estudio es evaluarin vivolos beneficios cosméticos del principio activo según la invención formulado al 2 % en emulsión en voluntarios caucásicos en comparación con una molécula de referencia, el retinol formulado al 0,075 %.

[0396] Este estudio se llevó a cabo en 3 grupos de 18 voluntarios sanos, de sexo femenino, de 45 a 66 años de edad que presentan arrugas a nivel de las patas de gallo. Cada uno de los voluntarios aplicó dos de las tres fórmulas en la mitad de la cara de manera aleatorizada y dos veces al día durante 42 días.

[0397] El estudio de los beneficios cosméticos se realizó después de 21 y 42 días de tratamiento según los siguientes métodos:

[0398] - Estudio del brillo de la tez mediante puntuación visual por expertos.

[0399] - Estudio de la acción antiarrugas mediante proyección de franjas.

[0400] Estudio del brillo de la tez

[0401] El brillo de la tez se evaluó por expertos según los siguientes parámetros, aspecto radiante, color rosa, color cetrino y el estado de fatiga de los ojos.

[0402] Los resultados se presentan en la tabla 17.

[0403] [Tabla 18]

[0405]

[0407] El principio activo según la invención presenta un efecto más rápido que el retinol sobre los parámetros de aspecto radiante, color rosa y fatiga de los ojos que el retinol solo a partir de los D21. Este efecto se intensifica después de 42 días de uso.

[0408] Estudio del efecto antiarrugas

[0409] El efecto antiarrugas se evalúa según el parámetro de la rugosidad Sa, evaluado en la zona de las patas de gallo mediante proyección de franjas y en el volumen negativo, evaluado en la misma zona.

[0410] Los resultados se presentan en la tabla 19.

[0411] [Tabla 19]

[0413]

[0415] En comparación con el placebo, el retinol formulado al 0,075 % tiende a reducir las arrugas de las patas de gallo después de 21 días de tratamiento (diferencia no significativa). Tan sólo después de 42 días de tratamiento el retinol comienza a presentar un efecto antiarrugas significativo (-20 %).

[0416] En las mismas condiciones, el principio activo según la invención presenta un efecto antiarrugas significativo más importante a partir de los 21 días (respectivamente, -22 %). Este efecto se mantiene después de 42 días de aplicación (-19 %).

[0417] El principio activo según la invención presenta un efecto antiarrugas rápido, permite obtener un efecto comparable al retinol solo.

[0418] Ensayo 8: Estudio de la calidad de la unión dermoepidérmica.

[0419] El objetivo de este estudio es evaluarin vivoel efecto del principio activo según la invención formulado al 2 % en emulsión sobre la calidad de la zona de la UDE, zona esencial para los intercambios entre la dermis y la epidermis en voluntarios caucásicos en comparación con una molécula de referencia, el retinol formulado al 0,075 %.

[0420] Este estudio se llevó a cabo en 3 grupos de 18 voluntarios sanos, de sexo femenino, de 45 a 66 años de edad que presentan arrugas a nivel de las patas de gallo. Cada uno de los voluntarios aplicó dos de las tres fórmulas en estudio en la mitad de la cara de manera aleatorizada y dos veces al día durante 42 días.

[0421] La obtención de imágenes realizadas mediante LC-OCT después de 21 y 42 días de tratamiento a nivel de las mejillas permitieron evaluar la estructura de la unión dermoepidérmica.

[0422] En la tabla 20 se presenta un resumen de los resultados correspondientes al efecto de las diferentes fórmulas en el estudio sobre la sinuosidad de la UDE, estudiada mediante LC-OCT.

[0423] [Tabla 20]

[0425]

[0427] El principio activo según la invención formulado al 2 % o el retinol al 0,075 % presentan resultados similares en comparación con el placebo.

[0428] A partir de los 21 días de aplicación, la sinuosidad de la UDE se intensifica (principio activo según la invención: 3 %; retinol: 2 %). Este efecto se vuelve significativo después de 42 días de aplicación (principio activo según la invención: 4 %; retinol: 3 %).

[0429] Ensayo 9: Estudio de la calidad de la matriz dérmica

[0430] El objetivo de este estudio es evaluarin vivoel efecto del principio activo según la invención formulado al 2 % en emulsión sobre la calidad de la matriz dérmica en voluntarios caucásicos en comparación con una molécula de referencia, el retinol formulado al 0,075 %.

[0431] Este estudio se llevó a cabo en 3 grupos de 18 voluntarios sanos, de sexo femenino, de 45 a 66 años de edad que presentan arrugas a nivel de las patas de gallo. Cada uno de los voluntarios aplicó dos de las tres fórmulas en estudio en la mitad de la cara de manera aleatorizada y dos veces al día durante 42 días.

[0432] La obtención de imágenes realizadas mediante LC-OCT después de 21 y 42 días de tratamiento a nivel de las mejillas permitieron evaluar la estructura de la calidad de las fibras.

[0433] En la tabla 21 se presentan los resultados correspondientes al efecto de las diferentes fórmulas en el estudio sobre la calidad de las fibras, estudiada mediante LC-OCT.

[0434] [Tabla 21]

[0436]

[0438] A partir de los 21 días, en comparación con el placebo, el principio activo según la invención al 2 % mejora significativamente la calidad de las fibras (+15 %). En ese momento, esta mejora no es visible en el grupo que se ha aplicado retinol al 0,075 % (+3 %, no significativo).

[0439] Después de 42 días de tratamiento, el principio activo según la invención y el retinol presentan mejoras comparables. Por tanto, el principio activo según la invención mejora la calidad de las fibras y de manera significativamente más rápida que el retinol (diferencia significativa a los 21 días, p=0,0020).

[0440] Ensayo 10: Estudio de los efectos adversos.

[0441] El uso del retinol conlleva efectos adversos tales como una alteración de la calidad de la función de barrera y fenómenos de irritaciones cutáneas.

[0442] El objetivo de este estudio es evaluarin vivola capacidad del principio activo según la invención formulado al 2 % en emulsión y del retinol formulado al 0,075 % sobre los efectos adversos del retinol en voluntarios caucásicos.

[0443] Este estudio se llevó a cabo en 3 grupos de 18 voluntarios sanos, de sexo femenino, de 45 a 66 años de edad que presentan arrugas en las patas de gallo. Cada uno de los voluntarios aplicó dos de las tres fórmulas, en la mitad de la cara, de manera aleatorizada y dos veces al día durante 42 días.

[0444] Los efectos del principio activo según la invención y del retinol se observaron según los siguientes métodos:

[0445] - Estudio de la función de barrera (Tewameter<®>)

[0446] - Estudio de las irritaciones cutáneas (C-Cube)

[0447] - Registro de las reacciones cutáneas que se producen a lo largo del estudio

[0448] En la tabla 22 se presentan los resultados correspondientes al efecto de las diferentes fórmulas sobre la función de barrera y sobre las irritaciones cutáneas.

[0449] [Tabla 22]

[0451]

[0453] En comparación con el placebo, la fórmula que contiene el retinol formulado al 0,075 % conlleva una reducción de las pérdidas de agua conservando de ese modo la calidad de la barrera cutánea. Por el contrario, el retinol formulado al 0,075 % provoca un aumento de las pérdidas de agua (+24 % en D21 y 15 % en D42).

[0454] A partir de los 21 días de tratamiento, la aplicación de la fórmula que contiene el 0,075 % de retinol aumenta de manera significativa el parámetro a*, produciendo de ese modo la aparición de enrojecimientos cutáneos. En comparación con el retinol, el principio activo según la invención al 2 % no provoca ninguna aparición de enrojecimientos después de 42 días de uso.

[0455] Finalmente, en el grupo de placebo (18 voluntarios incluidos) y en el grupo del principio activo según la invención (18 voluntarios incluidos) ningún sujeto manifestó ningún efecto adverso. En el grupo de retinol (18 voluntarios incluidos), tres sujetos manifestaron efectos adversos con una causalidad “posible” al producto en estudio. El nivel de incidencia en este grupo representa el 17 %.

[0456] En las condiciones de este estudio, a partir de los 21 días de tratamiento, la fórmula que contiene retinol conllevó efectos adversos.

[0457] No se detectó ningún efecto adverso con la fórmula que contiene el principio activo según la invención al 2 %.

Claims (15)

1. REIVINDICACIONES

1. Principio activo cosmético que comprende al menos un extracto deVaccinium macrocarponcaracterizado por que

dicho extracto comprende al menos el 80 % de péptidos en peso de materias secas del extracto.

2. Principio activo cosmético según la reivindicación anterior,caracterizado por quedicho extracto se obtiene a partir del fruto deVaccinium macrocarpon.

3. Principio activo cosmético según una de las reivindicaciones anteriores,caracterizado por quedicho extracto se obtiene a partir de las tortas de prensaVaccinium macrocarpon.

4. Principio activo cosmético según una de las reivindicaciones anteriores,caracterizado por queel extracto es un hidrolizado deVaccinium macrocarpon.

5. Principio activo cosmético según la reivindicación anterior,caracterizado por queel hidrolizado es un hidrolizado enzimático.

6. Principio activo cosmético según una de las reivindicaciones 4 o 5,caracterizado por queel hidrolizado comprende al menos el 80 % de péptidos, en peso de materias secas del extracto, teniendo dichos péptidos un tamaño inferior o igual a 2000 Da.

7. Principio activo cosmético según la reivindicación anterior,caracterizado por queel tamaño está comprendido entre 243 y 2000 Da.

8. Principio activo cosmético según una de las reivindicaciones anteriores,caracterizado por quelos péptidos presentes en el hidrolizado comprenden de media entre 4 y 6 aminoácidos.

9. Principio activo cosmético según la reivindicación anterior,caracterizado por quedicho extracto presenta un nivel de péptidos catiónicos ricos en aminoácidos básicos superior al 20 %.

10. Principio activo cosmético según una de las reivindicaciones anteriores,caracterizado por quedicho extracto puede obtenerse mediante un procedimiento que comprende las siguientes etapas:

- solubilización de al menos 100 g/l de tortas de prensa deVaccinium macrocarponen agua, - hidrólisis enzimática,

- purificación de la fracción peptídica.

11. Principio activo cosmético según una de las reivindicaciones anteriores,caracterizado por quedicho extracto es susceptible de obtenerse mediante un procedimiento de extracción que comprende dos hidrólisis enzimáticas de tortas de prensa deVaccinium macrocarpon.

12. Composición cosmética para una aplicación tópica que comprende al menos un principio activo según una de las reivindicaciones anteriores y un medio fisiológicamente aceptable.

13. Composición cosmética según la reivindicación anterior, en la que el principio activo representa al menos el 0,1 % en peso del peso total de la composición.

14. Uso cosmético de un principio activo según una de las reivindicaciones 1 a 11 o de una composición cosmética según una de las reivindicaciones 12 o 13, para un efecto antiedad.

15. Uso cosmético según la reivindicación anterior para un efecto antiarrugas y/o mejorar el brillo de la tez y/o mejorar la calidad de la unión dermoepidérmica y/o mejorar la homeostasis cutánea.