ES3055488T3 - Tegavivint for use in the treatment of pulmonary fibrosis - Google Patents

Abstract

Métodos para el tratamiento de enfermedades fibróticas que utilizan compuestos de fórmula I en donde RA es hidrógeno, R7 y R8 se seleccionan independientemente entre H y SO2NR3R4, uno de R7 y R8 es hidrógeno, y R1, R2, R3 y R4 se seleccionan cada uno independientemente entre H, alquilo, heteroalquilo, cicloalquilo, arilcicloalquilo, arilo, heteroarilo, heterocicloalquilo, y cada uno de NR1 R2 y NR3R4 puede combinarse independientemente para formar un heterocicloalquilo, y en donde dicho alquilo, heteroalquilo, cicloalquilo, arilcicloalquilo, arilo, heteroarilo o heterocicloalquilo puede estar opcionalmente sustituido, o una sal, éster, amida, estereoisómero, isómero geométrico o profármaco farmacéuticamente aceptable del mismo. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

[0001] DESCRIPCIÓN

[0002] Tegavivint para su uso en el tratamiento de la fibrosis pulmonar

[0003] Campo de la invención

[0004] La presente invención se refiere a Tegavivint para su uso en el tratamiento de la fibrosis pulmonar.

[0005] Antecedentes de la invención

[0006] Las enfermedades fibróticas, incluidas la fibrosis pulmonar, la contractura de Dupuytren, la esclerodermia, la esclerosis sistémica, los trastornos similares a la esclerodermia, la esclerodermia sine, la cirrosis hepática, la fibrosis pulmonar intersticial, los queloides, la enfermedad renal crónica, el rechazo crónico de injertos y otras anomalías de cicatrización/curación de heridas, las adherencias postoperatorias, la fibrosis reactiva y los tumores desmoides, son afecciones importantes que a menudo causan morbilidad y mortalidad y pueden afectar a todos los tejidos y sistemas de órganos.

[0007] La fibrosis pulmonar es una afección en la que el tejido pulmonar se engrosa, se vuelve rígido y presenta cicatrices. Si bien a veces se puede determinar la causa de la fibrosis (cicatrización), con frecuencia la etiología de esta afección sigue siendo desconocida. Cuando no se conoce la causa del desarrollo de la fibrosis pulmonar (y se cumplen determinados criterios radiográficos y/o patológicos para la fibrosis pulmonar), la enfermedad se denomina fibrosis pulmonar idiopática (IPF).

[0008] La IPF no tiene un perfil demográfico específico y puede encontrarse tanto en entornos urbanos como rurales. Entre los factores de riesgo de la IPF se incluyen el tabaquismo y determinados factores genéticos. La IPF afecta a más hombres que mujeres y suele aparecer entre los 50 y los 70 años.

[0009] La contractura de Dupuytren, que se conoce alternativamente como fibromatosis palmar (o "enfermedad de Dupuytren"), es una enfermedad asociada a la acumulación de materiales de la matriz extracelular, tales como el colágeno, en el tejido conectivo de la mano (la fascia palmar), lo que provoca su engrosamiento y acortamiento, con el efecto físico de que los dedos se curven, más comúnmente el anular y el meñique. La contractura de Dupuytren se manifiesta a través de una contractura en flexión progresiva de los dedos de la mano, lo que resulta en una función significativamente comprometida. Afecta tanto a hombres como a mujeres, pero la incidencia es mayor en los hombres.

[0010] Las causas de la enfermedad de Dupuytren no se comprenden bien y la enfermedad subyacente no tiene cura actualmente.

[0011] El documento US 2013/123281 se refiere a composiciones y métodos que modulan enfermedades y trastornos relacionados con la actividad de la proteína 1 similar a la transducina beta (TBL1), incluyendo, pero no limitados a, el cáncer, la inflamación y las enfermedades relacionadas con los huesos.

[0012] El documento WO 2017/019875 se refiere a agentes químicos, tales como derivados de disulfonamida de fluoreno, antraceno, xanteno, dibenzosuberona y acridina, y estructuras de anillos heterocíclicos similares; incluyendo sales de los mismos que actúan como agentes anticancerígenos y agentes antitumorales, junto con métodos para preparar tales agentes, así como composiciones farmacéuticas que contienen tales agentes como principios activos y métodos de uso de estos como agentes terapéuticos.

[0013] El documento WO 2013/067547 se refiere al uso del compuesto antraceno-9,10-diona dioxima: 2-((3R,5S)-3,5-dimetilpiperidin-1-ilsulfonil)-7-((3S,5R)-3,5-dimetilpiperidin-1-ilsulfonil)antraceno-9,10-diona dioxima para el tratamiento del cáncer, incluyendo neoplasia mieloproliferativa, leucemia mieloide crónica y leucemia mieloide aguda. Dicho compuesto de antraceno-9,10-diona dioxima interrumpe la ruta Wnt/beta-catenina e inhibe la actividad desregulada de esta ruta para el tratamiento, diagnóstico y prevención de trastornos relacionados con la ruta beta-catenina, además de interrumpir la interacción de la proteína 1 similar a la transducina beta (TBL1) con la molécula coactivadora beta-catenina.

[0014] W. Fiskus et al, Leukemia 2015, 29, 1267-1278, DOI: 10.1038/leu.2014.340 se refiere a la eficacia preclínica de la terapia combinada con el nuevo antagonista de β-catenina BC2059 y el inhibidor de la histona desacetilasa contra las células de AML.

[0015] R. Soldi et al, J. Med. Chem.2015, 58, 5854-5862, DOI: 10.1021/acs/jmedchem.5b00460 se refiere al diseño, síntesis y evaluación biológica de una serie de inhibidores de la ruta de la β-catenina de antraceno-9,10-diona dioxima.

[0016] El documento US 2013/143920 se refiere a métodos para el tratamiento de enfermedades y trastornos relacionados con la actividad de la proteína 1 similar a la transducina beta (TBL1), incluidas la neoplasia mieloproliferativa, la leucemia mieloide crónica y la leucemia mieloide aguda.

[0017] De acuerdo con lo anterior, existe la necesidad de nuevos métodos para su uso en el tratamiento de las enfermedades fibróticas.

[0018] Sumario de la invención

[0019] La presente invención se define mediante las reivindicaciones independientes. Las reivindicaciones dependientes describen otras realizaciones de la invención. Cualquier realización que no esté comprendida dentro del alcance de las reivindicaciones adjuntas no forma parte de la invención. La presente invención se refiere a Tegavivint para su uso en el tratamiento de la fibrosis pulmonar.

[0020] La invención incluye todos los métodos de administración posibles, incluyendo la administración intravenosa, parenteral, oral, por inhalación (incluida la administración en aerosol), bucal, intranasal, rectal, intralesional, intraperitoneal, intradérmica, transdérmica, subcutánea, intraarterial, intracardíaca, intraventricular, intracraneal, intratraqueal, intratecal, inyección intramuscular, inyección intravítrea y aplicación tópica.

[0021] En una realización, la invención está dirigida a la administración por aerosol de tales compuestos, en particular para el tratamiento de afecciones pulmonares. En otra realización, la invención proporciona inyección intravenosa para el tratamiento de la contractura de Dupuytren. En otra realización más, la invención proporciona una aplicación tópica para el tratamiento de queloides.

[0022] De acuerdo con lo anterior, la presente invención proporciona un compuesto de fórmula I

[0025]

[0027] o una sal, éster, amida, estereoisómero o isómero geométrico farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en un método de tratamiento y/o prevención de la fibrosis pulmonar, comprendiendo el método administrar a un paciente que lo necesite una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto de fórmula I o una sal, éster, amida, estereoisómero o isómero geométrico farmacéuticamente aceptable.

[0028] El documento U.S. Patent No.8,129,519 describe métodos para fabricar el compuesto de la invención.

[0029] En la presente invención, el compuesto de fórmula I tiene la siguiente estructura:

[0032]

[0034] o una sal, éster, amida, estereoisómero o isómero geométrico farmacéuticamente aceptable del mismo. Este compuesto también se conoce como BC-2059 o Tegavivint. El documento U.S. Patent 8,129,519 describe los métodos para fabricar este compuesto.

[0035] En la presente invención, la enfermedad fibrótica es la fibrosis pulmonar.

[0036] En una realización, la invención proporciona un compuesto de fórmula I para su uso en un método de tratamiento de la fibrosis pulmonar que comprende una administración sistémica o una administración en aerosol de Tegavivint a un paciente que lo necesite.

[0037] Breve descripción de los dibujos

[0038] La Figura 1A muestra un gráfico de la inhibición del crecimiento celular de fibroblastos primarios de la fascia palmar derivados de las células de la fascia palmar fibrótica de un paciente con la enfermedad de Dupuytren (DD) (células DD249), en relación con la tasa de crecimiento.

[0039] La Figura 1B muestra un gráfico de inhibición del crecimiento celular de DD249 a 25 pM de absorbancia. La Figura 1C muestra un gráfico de inhibición del crecimiento celular de DD249 a 50 pM de absorbancia. La Figura 1D muestra un gráfico de la inhibición del crecimiento celular de fibroblastos primarios singénicos de la fascia palmar derivados de la fascia palmar (PF) visiblemente no fibrótica de pacientes con enfermedad de Dupuytren (células PF249), en relación con la tasa de crecimiento.

[0040] La Figura 1E muestra un gráfico de inhibición del crecimiento celular de PF249 a 25 pM de absorbancia. La Figura 1F muestra un gráfico de inhibición del crecimiento celular de PF249 a 50 pM de absorbancia. La Figura 2A muestra la inhibición del crecimiento celular de fibroblastos primarios de la fascia palmar derivados de las células de la fascia palmar fibrótica de un paciente con enfermedad de Dupuytren (DD) (células DD77). La Figura 2B muestra la inhibición del crecimiento celular de fibroblastos primarios singénicos de la fascia palmar derivados de la fascia palmar (PF) visiblemente no fibrótica de un paciente con enfermedad de Dupuytren (células PF77).

[0041] La Figura 3A muestra el análisis de expresión genética del gen CTNNB1 en células DD singénicas cultivadas a partir de los tejidos explantados de un paciente con enfermedad de Dupuytren (células DD180); células PF singénicas cultivadas a partir de los tejidos explantados de este paciente con enfermedad de Dupuytren (células PF180); y células DD singénicas cultivadas a partir de los tejidos explantados de un paciente sin antecedentes de enfermedad de Dupuytren (células CT38).

[0042] La Figura 3B muestra el análisis de expresión génica del gen EGR1 en las células DD180, PF180 y CT38. La Figura 3C muestra el análisis de expresión génica del gen NRG1 en las células DD180, PF180 y CT38. La Figura 3D muestra el análisis de expresión génica del gen WISP1 en las células DD180, PF180 y CT38. La Figura 4A muestra ensayos de contracción de la red de colágeno poblada por fibroblastos (FPCL) de células DD1804.5 horas después de la liberación de la red.

[0043] La Figura 4B muestra los ensayos de contracción de FPCL de células DD18024 horas después de la liberación de la red.

[0044] La Figura 5A muestra el análisis de la distensibilidad pulmonar en un modelo de ratón con fibrosis pulmonar inducida por bleomicina con o sin tratamiento intravenoso con Tegavivint.

[0045] La Figura 5B muestra los resultados del ensayo de colágeno Sircol en un modelo de ratón con fibrosis pulmonar inducida por bleomicina con o sin tratamiento intravenoso con Tegavivint.

[0046] La Figura 6A muestra el análisis de la distensibilidad pulmonar en un modelo de ratón con fibrosis pulmonar inducida por bleomicina con o sin tratamiento intranasal con Tegavivint.

[0047] La Figura 6B muestra los resultados del ensayo de colágeno Sircol en un modelo de ratón con fibrosis pulmonar inducida por bleomicina con o sin tratamiento intranasal con Tegavivint.

[0048] Descripción detallada de la invención

[0049] Definiciones

[0050] Se usan las siguientes definiciones, a menos que se indique lo contrario.

[0051] El término "sujeto" incluye a los mamíferos, incluidos los seres humanos. Los términos "paciente" y "sujeto" se usan indistintamente.

[0052] El término "cantidad terapéuticamente eficaz" se refiere a la cantidad de un compuesto que, cuando se administra a un sujeto para tratar una enfermedad o trastorno, es suficiente para afectar la enfermedad o trastorno. La "cantidad terapéuticamente eficaz" puede variar dependiendo de diversos factores, incluyendo el compuesto, el trastorno que se está tratando y la gravedad del trastorno; la actividad del compuesto específico empleado; la composición específica empleada; la edad, el peso corporal, la salud general, el sexo y la dieta del paciente; el momento de la administración, la vía de administración y la tasa de excreción del compuesto específico empleado; la duración del tratamiento; los fármacos usados en combinación o concomitantemente con el compuesto específico empleado; y otros factores similares bien conocidos en la práctica médica. Por ejemplo, es perfectamente factible, dentro de la técnica, comenzar con dosis del compuesto a niveles inferiores a los necesarios para lograr el efecto terapéutico deseado y aumentar gradualmente la dosificación hasta alcanzar el efecto deseado.

[0053] En una realización, los términos "tratar" o "tratamiento" se refieren a mejorar la enfermedad o el trastorno (es decir, detener o reducir el desarrollo de la enfermedad o al menos uno de los síntomas clínicos de la misma). En otra realización, "tratar" o "tratamiento" se refiere a mejorar al menos un parámetro físico, que puede no ser perceptible para el sujeto. En otra realización más, "tratar" o "tratamiento" se refiere a modular la enfermedad o el trastorno, ya sea físicamente (por ejemplo, la estabilización de un síntoma perceptible), fisiológicamente (por ejemplo, la estabilización de un parámetro físico) o ambas. En otra realización más, "tratar" o "tratamiento" se refiere a retrasar la aparición de la enfermedad o trastorno, o incluso prevenir el mismo.

[0054] La frase "sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a aquellas sales que, dentro del marco del buen criterio médico, son adecuadas para su uso en contacto con los tejidos de seres humanos y animales inferiores sin toxicidad excesiva, irritación, respuesta alérgica y similares, y son proporcionales a una proporción beneficio/riesgo razonable. Las sales farmacéuticamente aceptables son bien conocidas en la técnica. Por ejemplo, S. M. Berge et al. describen en detalle las sales farmacéuticamente aceptables en J. Pharmaceutical Sciences, 1977, 66: 1et seq.

[0055] Las sales farmacéuticamente aceptables incluyen, pero no se limitan a, las sales de adición de ácido. Por ejemplo, los átomos de nitrógeno pueden formar sales con ácidos. Entre las sales de adición de ácido representativas se incluyen, pero no se limitan a, acetato, adipato, alginato, citrato, aspartato, benzoato, bencenosulfonato, bisulfato, butirato, alcanforato, canforsulfonato, digluconato, glicerofosfato, hemisulfato, heptanoato, hexanoato, fumarato, clorhidrato, bromhidrato, yodhidrato, 2-hidroxietanosulfonato (isotionato), lactato, maleato, metanosulfonato, nicotinato, 2-naftalensulfonato, oxalato, palmitoato, pectinato, persulfato, 3-fenilpropionato, picrato, pivalato, propionato, succinato, tartrato, tiocianato, fosfato, glutamato, bicarbonato, ptoluenosulfonato y undecanoato. Además, los grupos básicos que contienen nitrógeno pueden cuaternizarse con agentes como haluros de alquilo inferiores, tales como cloruros, bromuros y yoduros de metilo, etilo, propilo y butilo; sulfatos de dialquilo, como sulfatos de dimetilo, dietilo, dibutilo y diamilo; haluros de cadena larga, tales como cloruros, bromuros y yoduros de decilo, laurilo, miristilo y estearilo; haluros de arilalquilo, como bromuros de bencilo y fenetilo, entre otros. De este modo se obtienen productos solubles en agua o en aceite, o dispersables. Entre los ejemplos de ácidos que pueden emplearse para formar sales de adición ácida farmacéuticamente aceptables se incluyen ácidos inorgánicos como el ácido clorhídrico, el ácido bromhídrico, el ácido sulfúrico y el ácido fosfórico, y ácidos orgánicos como el ácido oxálico, el ácido maleico, el ácido succínico y el ácido cítrico.

[0056] Las sales farmacéuticamente aceptables incluyen, pero no se limitan a, cationes basados en metales alcalinos o metales alcalinotérreos tales como sales de litio, sodio, potasio, calcio, magnesio y aluminio y similares, y cationes de amonio cuaternario y amina no tóxicos, incluidos amonio, tetrametilamonio, tetraetilamonio, metilamonio, dimetilamonio, trimetilamonio, trietilamonio, dietilamonio y etilamonio, entre otros. Otras aminas orgánicas representativas útiles para la formación de sales de adición de bases incluyen etilendiamina, etanolamina, dietanolamina, piperidina, piperazina y similares.

[0057] Los compuestos útiles para los fines de la invención pueden contener uno o más enlaces dobles y, de esta manera, potencialmente dar lugar a isómeros cis/trans (E/Z), así como a otros isómeros conformacionales. Salvo que se indique lo contrario, la invención incluye todos los isómeros posibles, así como mezclas de tales isómeros.

[0058] A menos que se indique lo contrario, una fórmula con enlaces químicos representados únicamente con líneas continuas y no con cuñas o líneas discontinuas contempla cada isómero posible, por ejemplo, cada enantiómero y diastereómero, y una mezcla de isómeros, tales como una mezcla racémica o escalémica. Los compuestos descritos en el presente documento pueden contener uno o más centros asimétricos y, de esta manera, potencialmente dar lugar a diastereómeros e isómeros ópticos. A menos que se indique lo contrario, la presente invención incluye todos los diastereómeros posibles, así como sus mezclas racémicas, sus enantiómeros resueltos sustancialmente puros, todos los isómeros geométricos posibles y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. También se incluyen mezclas de estereoisómeros, así como estereoisómeros específicos aislados. Durante los procedimientos sintéticos usados para preparar tales compuestos, o al usar procedimientos de racemización o epimerización conocidos por los expertos en la materia, los productos de tales procedimientos pueden ser una mezcla de estereoisómeros.

[0059] Muchos compuestos orgánicos existen en formas ópticamente activas que tienen la capacidad de rotar el plano de la luz polarizada plana. Al describir un compuesto ópticamente activo, se usan los prefijos D y L o R y S para indicar la configuración absoluta de la molécula alrededor de su(s) centro(s) quiral(es). Los prefijos d y / o (+) y (-) se emplean para designar el signo de rotación de la luz polarizada plana por el compuesto, donde (-) o / significa que el compuesto es levógiro. Un compuesto prefijado con (+) o d es dextrógiro. Para una estructura química dada, estos compuestos, llamados estereoisómeros, son idénticos excepto que son imágenes especulares no superponibles entre sí. Un estereoisómero específico también puede denominarse enantiómero, y una mezcla de tales isómeros suele llamarse mezcla enantiomérica. Una mezcla 50:50 de enantiómeros se denomina mezcla racémica.

[0061] Muchos de los compuestos descritos en el presente documento pueden tener uno o más centros quirales y, por lo tanto, pueden existir en diferentes formas enantioméricas. Si se desea, un carbono quiral puede designarse con un asterisco (*). Cuando los enlaces al carbono quiral se representan como líneas rectas en las fórmulas divulgadas, se entiende que tanto las configuraciones (R) como (S) del carbono quiral, y por consiguiente ambos enantiómeros y mezclas de los mismos, están comprendidos dentro de la fórmula. Como se usa en la técnica, cuando se desea especificar la configuración absoluta alrededor de un carbono quiral, uno de los enlaces al carbono quiral se puede representar como una cuña (enlaces a átomos por encima del plano) y el otro se puede representar como una serie o cuña de líneas paralelas cortas (enlaces a átomos por debajo del plano). El sistema Cahn-Inglod-Prelog se puede usar para asignar la configuración (R) o (S) a un carbono quiral.

[0063] Los compuestos útiles para los fines de la invención pueden comprender átomos tanto en su abundancia isotópica natural como en abundancia no natural. Los compuestos divulgados pueden ser compuestos marcados isotópicamente o sustituidos isotópicamente idénticos a los descritos, salvo por el hecho de que uno o más átomos son reemplazados por un átomo que tiene una masa atómica o número de masa diferente de la masa atómica o número de masa que se encuentra por lo general en la naturaleza. Entre los ejemplos de isótopos que pueden incorporarse a los compuestos de la invención se incluyen isótopos de hidrógeno, carbono, nitrógeno, oxígeno, fósforo, flúor y cloro, tales como<2>H,<3>H,<13>C,<14>C,<15>N,<18>O,<17>O,<35>S,<18>F y<36>Cl, respectivamente.

[0065] Los compuestos pueden comprender además sales farmacéuticamente aceptables de dichos compuestos que contienen los isótopos antes mencionados y/u otros isótopos de otros átomos que se encuentran dentro del alcance de esta invención. Determinados compuestos marcados isotópicamente de la presente invención, por ejemplo aquellos en los que se incorporan isótopos radiactivos tales como<3>H y<14>C se incorporan, son útiles en ensayos de distribución tisular de fármacos y/o sustratos. Tritiado, es decir,<3>H y carbono-14, es decir, isótopos<14>C, son particularmente preferidos por su facilidad de preparación y detectabilidad. Además, la sustitución por isótopos más pesados tales como el deuterio, es decir,<2>H, puede ofrecer determinadas ventajas terapéuticas derivadas de una mayor estabilidad metabólica, por ejemplo, una mayor semivida in vivo o menores necesidades de dosificación y, por lo tanto, puede ser preferible en algunas circunstancias. Los compuestos marcados isotópicamente de la presente invención y los profármacos de los mismos generalmente se pueden preparar llevando a cabo los procedimientos que se describen a continuación, sustituyendo un reactivo marcado isotópicamente fácilmente disponible por un reactivo no marcado isotópicamente.

[0067] Los compuestos útiles para los fines de la invención pueden estar presentes como solvato. En algunos casos, el disolvente usado para preparar el solvato es una solución acuosa, y en ese caso al solvato se le suele denominar hidrato. Los compuestos pueden presentarse en forma de hidrato, que puede obtenerse, por ejemplo, por cristalización a partir de un disolvente o de una solución acuosa. En este sentido, uno, dos, tres o cualquier número arbitrario de moléculas de solvato o agua pueden combinarse con los compuestos según la invención para formar solvatos e hidratos. A menos que se indique lo contrario, la invención incluye todos esos solvatos posibles.

[0069] También se reconoce que determinados compuestos descritos en el presente documento pueden presentarse como un equilibrio de tautómeros. Por ejemplo, las cetonas con un hidrógeno α pueden existir en un equilibrio entre la forma ceto y la forma enol.

[0071] Como se usa en el presente documento, el término "sustituido" se contempla que incluye todos los sustituyentes permitidos de los compuestos orgánicos. En términos generales, los sustituyentes permitidos incluyen sustituyentes acíclicos y cíclicos, ramificados y no ramificados, carbocíclicos y heterocíclicos, y aromáticos y no aromáticos de los compuestos orgánicos. Algunos ejemplos de sustituyentes ilustrativos son los que se describen a continuación. Los sustituyentes permitidos pueden ser uno o más, e iguales o diferentes para los compuestos orgánicos apropiados. Para los fines de esta divulgación, los heteroátomos, tales como el nitrógeno, pueden tener sustituyentes de hidrógeno y/o cualquier sustituyente permitido de los compuestos orgánicos descritos en el presente documento que satisfagan las valencias de los heteroátomos. Esta divulgación no pretende estar limitada de ninguna manera por los sustituyentes permitidos de los compuestos orgánicos. Asimismo, los términos "sustitución" o "sustituido con" incluyen la condición implícita de que dicha sustitución se realice de acuerdo con la valencia permitida del átomo sustituido y del sustituyente, y que la sustitución dé como resultado un compuesto estable, por ejemplo, un compuesto que no sufra transformaciones espontáneas tales como reordenamiento, ciclación, eliminación, etc. También se contempla que, en determinados aspectos, a menos que se indique expresamente lo contrario, los sustituyentes individuales pueden ser sustituidos adicionalmente de forma opcional (es decir, sustituidos adicionalmente o no sustituidos).

[0072] Al definir diversos términos, "A<1>,"A<2>,"A<3>," y "A<4>" se usan en el presente documento como símbolos genéricos para representar diversos sustituyentes específicos. Estos símbolos pueden ser cualquier sustituyente, no limitado a los divulgados en el presente documento, y cuando se definen como determinados sustituyentes en un caso, pueden, en otro caso, definirse como otros sustituyentes.

[0074] El término "alquilo" como se usa en el presente documento se refiere a un grupo hidrocarburo saturado, ramificado o no ramificado, de 1 a 24 átomos de carbono, tal como metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, s-butilo, t-butilo, n-pentilo, isopentilo, s-pentilo, neopentilo, hexilo, heptilo, octilo, nonilo, decilo, dodecilo, tetradecilo, hexadecilo, eicosilo, tetracosilo y similares. El grupo alquilo puede ser cíclico o acíclico. El grupo alquilo puede ser ramificado o no ramificado. El grupo alquilo también puede estar sustituido o no sustituido. Por ejemplo, el grupo alquilo puede sustituirse por uno o más grupos, incluidos, pero no limitados a, alquilo, cicloalquilo, alcoxi, amino, éter, haluro, hidroxi, nitro, sililo, sulfo-oxo o tiol, como se describe en el presente documento. Un grupo "alquilo inferior" es un grupo alquilo que contiene de uno a seis (por ejemplo, de uno a cuatro) átomos de carbono.

[0076] Por ejemplo, se puede seleccionar un grupo "alquilo C1-C3" entre metilo, etilo, n-propilo, i-propilo y ciclopropilo, o entre un subconjunto de los mismos. En determinados aspectos, el grupo "alquilo C1-C3" puede sustituirse adicionalmente de forma opcional. Como un ejemplo adicional, se puede seleccionar un grupo "alquilo C1-C4" entre metilo, etilo, n-propilo, i-propilo, ciclopropilo, n-butilo, i-butilo, s-butilo, t-butilo y ciclobutilo, o entre un subconjunto de los mismos. En determinados aspectos, el grupo "alquilo C1-C4" puede sustituirse opcionalmente de forma adicional. Como un ejemplo adicional, se puede seleccionar un grupo "alquilo C1-C6" de entre metilo, etilo, n-propilo, i-propilo, ciclopropilo, n-butilo, i-butilo, s-butilo, t-butilo, ciclobutilo, n-pentilo, ipentilo, s-pentilo, t-pentilo, neopentilo, ciclopentilo, n-hexilo, i-hexilo, 3-metilpentano, 2,3-dimetilbutano, neohexano y ciclohexano, o de un subconjunto de los mismos. En determinados aspectos, el grupo "alquilo C1-C6" puede sustituirse opcionalmente de forma adicional. Como un ejemplo adicional, se puede seleccionar un grupo "alquilo C1-C8" de entre metilo, etilo, n-propilo, i-propilo, ciclopropilo, n-butilo, i-butilo, s-butilo, t-butilo, ciclobutilo, n-pentilo, i-pentilo, s-pentilo, t-pentilo, neopentilo, ciclopentilo, n-hexilo, i-hexilo, 3-metilpentano, 2,3-dimetilbutano, neohexano, ciclohexano, heptano, cicloheptano, octano y ciclooctano, o de un subconjunto de los mismos. En determinados aspectos, el grupo "alquilo C1-C8" puede sustituirse adicionalmente de forma opcional. Como un ejemplo adicional, se puede seleccionar un grupo "alquilo C1-C12" de entre metilo, etilo, npropilo, i-propilo, ciclopropilo, n-butilo, i-butilo, s-butilo, t-butilo, ciclobutilo, n-pentilo, i-pentilo, s-pentilo, t-pentilo, neopentilo, ciclopentilo, n-hexilo, i-hexilo, 3-metilpentano, 2,3-dimetilbutano, neohexano, ciclohexano, heptano, cicloheptano, octano, ciclooctano, nonano, ciclononano, decano, ciclodecano, undecano, cicloundecano, dodecano y ciclododecano, o de un subconjunto de los mismos. En determinados aspectos, el grupo "alquilo C1-C12" puede sustituirse opcionalmente de forma adicional.

[0078] A lo largo de la presente memoria descriptiva "alquilo" se usa generalmente para referirse tanto a grupos alquilo no sustituidos como a grupos alquilo sustituidos; sin embargo, los grupos alquilo sustituidos también se mencionan específicamente en el presente documento identificando el(los) sustituyente(s) específico(s) del grupo alquilo. Por ejemplo, el término "alquilo halogenado" o "haloalquilo" se refiere específicamente a un grupo alquilo que está sustituido con uno o más haluros, por ejemplo, flúor, cloro, bromo o yodo. El término "alcoxialquilo" se refiere específicamente a un grupo alquilo que está sustituido por uno o más grupos alcoxi, como se describe a continuación. El término "alquilamino" se refiere específicamente a un grupo alquilo que está sustituido por uno o más grupos amino, como se describe a continuación, y similares. Cuando en un caso se usa "alquilo" y en otro se usa un término específico tal como "alcohol alquílico", no se pretende implicar que el término "alquilo" no se refiera también a términos específicos tal como "alcohol alquílico" y similares.

[0080] Esta práctica también se usa para otros grupos descritos en el presente documento. Es decir, si bien un término tal como "cicloalquilo" se refiere tanto a unidades estructurales de cicloalquilo no sustituidos como sustituidos, las unidades estructurales sustituidas también pueden identificarse específicamente en el presente documento; por ejemplo, un cicloalquilo sustituido en particular puede denominarse, por ejemplo, "alquilcicloalquilo". De manera similar, un alcoxi sustituido puede denominarse específicamente como, por ejemplo, un "alcoxi halogenado", un alquenilo sustituido en particular puede ser, por ejemplo, un "alquenilalcohol", y similares. Asimismo, la práctica de usar un término general, tal como "cicloalquilo", y un término específico, tal como "alquilcicloalquilo", no implica que el término general no incluya también el término específico.

[0082] El término "cicloalquilo", como se usa en el presente documento, se refiere a un anillo de carbono no aromático compuesto por al menos tres átomos de carbono. Ejemplos de grupos cicloalquilo incluyen, pero no se limitan a, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, norbornilo y similares. El término "heterocicloalquilo" es un tipo de grupo cicloalquilo según la definición anterior, y está incluido dentro del significado del término "cicloalquilo", donde al menos uno de los átomos de carbono del anillo se reemplaza con un heteroátomo tal como, pero sin limitarse a, nitrógeno, oxígeno, azufre o fósforo. El grupo cicloalquilo y el grupo heterocicloalquilo pueden estar sustituidos o no sustituidos. El grupo cicloalquilo y el grupo heterocicloalquilo pueden sustituirse con uno o más grupos, incluidos, pero no limitados a, alquilo, cicloalquilo, alcoxi, amino, éter, haluro, hidroxi, nitro, sililo, sulfo-oxo, nitrilo, sulfonamida o tiol, como se describe en el presente documento.

[0083] El término "arilo", como se usa en el presente documento, es un grupo que contiene cualquier grupo aromático a base de carbono, incluidos, pero no se limitan a, el benceno, el naftaleno, el fenilo, el bifenilo, el fenoxibenceno y similares. El término "arilo" también incluye "heteroarilo", que se define como un grupo que contiene un grupo aromático que tiene al menos un heteroátomo incorporado dentro del anillo del grupo aromático. Entre los ejemplos de heteroátomos se incluyen, pero no se limitan a, nitrógeno, oxígeno, azufre y fósforo. Asimismo, el término "no heteroarilo", que también está incluido en el término "arilo", define un grupo que contiene un grupo aromático que no contiene un heteroátomo. El grupo arilo puede estar sustituido o no sustituido. El grupo arilo puede sustituirse por uno o más grupos, incluidos, pero no se limitan a, alquilo, cicloalquilo, alcoxi, alquenilo, cicloalquenilo, alquinilo, cicloalquinilo, arilo, heteroarilo, aldehído, amino, ácido carboxílico, éster, éter, haluro, hidroxi, cetona, azida, nitro, sililo, sulfo-oxo, nitrilo, sulfonamida o tiol, como se describe en el presente documento. El término "biarilo" es un tipo específico de grupo arilo y está incluido en la definición de "arilo". Biarilo se refiere a dos grupos arilo unidos entre sí mediante una estructura de anillo fusionado, como en el naftaleno, o están unidos mediante uno o más enlaces carbono-carbono, como en el bifenilo.

[0084] Los términos "halógeno", "haluro" y "halo", tal como se usan en el presente documento, se refieren a los halógenos flúor, cloro, bromo y yodo. También se contempla que, en diversos aspectos, el halógeno puede seleccionarse entre flúor, cloro, bromo y yodo. Por ejemplo, se puede seleccionar un halógeno entre flúor, cloro y bromo. Como un ejemplo adicional, se puede seleccionar un halógeno entre flúor y cloro. Como un ejemplo adicional, se puede seleccionar un halógeno entre cloro y bromo. Como un ejemplo adicional, se puede seleccionar un halógeno entre bromo y yodo. Como un ejemplo adicional, se puede seleccionar un halógeno entre cloro, bromo y yodo. En un aspecto, el halógeno puede ser flúor. En un aspecto adicional, el halógeno puede ser cloro. En un aspecto adicional más, el halógeno es bromo. En otro aspecto adicional más, el halógeno es yodo.

[0085] También se contempla que, en determinados aspectos, se pueden usar pseudohalógenos (por ejemplo, triflato, mesilato, tosilato, brosilato, etc.) en lugar de halógenos. Por ejemplo, en determinados aspectos, el halógeno puede ser reemplazado por pseudohalógeno. Como un ejemplo adicional, se puede seleccionar un pseudohalógeno entre triflato, mesilato, tosilato y brosilato. En un aspecto, el pseudohalógeno es triflato. En un aspecto adicional, el pseudohalógeno es el mesilato. En un aspecto adicional, el pseudohalógeno es el tosilato. En un aspecto adicional, el pseudohalógeno es brosilato.

[0086] El término "heterociclo", como se usa en el presente documento, se refiere a sistemas de anillos aromáticos o no aromáticos simples y multicíclicos en los que al menos uno de los miembros del anillo es distinto del carbono. El heterociclo incluye azetidina, dioxano, furano, imidazol, isotiazol, isoxazol, morfolina, oxazol, oxazol, incluyendo 1,2,3-oxadiazol, 1,2,5-oxadiazol y 1,3,4-oxadiazol, piperazina, piperidina, pirazina, pirazol, piridazina, piridina, pirimidina, pirrol, pirrolidina, tetrahidrofurano, tetrahidropirano, tetrazina, incluyendo 1,2,4,5-tetrazina, tetrazol, incluyendo 1,2,3,4-tetrazol y 1,2,4,5-tetrazol, tiadiazol, incluyendo 1,2,3-tiadiazol, 1,2,5-tiadiazol y 1,3,4-tiadiazol, tiazol, tiofeno, triazina, incluyendo 1,3,5-triazina y 1,2,4-triazina, triazol, incluyendo 1,2,3-triazol, 1,3,4-triazol y similares.

[0087] El término "hidroxilo" como se usa en el presente documento está representado por la fórmula -OH.

[0088] "R<1>", R<2>", R<3>", R<n>", donde n es un número entero, como se usa en el presente documento, puede poseer, de forma independiente, uno o más de los grupos enumerados anteriormente. Por ejemplo, si R<1>es un grupo alquilo de cadena lineal, uno de los átomos de hidrógeno del grupo alquilo puede sustituirse opcionalmente por un grupo hidroxilo, un grupo alcoxi, un grupo alquilo, un haluro, y similares. Dependiendo de los grupos que se seleccionen, un primer grupo puede incorporarse dentro de un segundo grupo o, alternativamente, el primer grupo puede estar vinculado (es decir, unido) al segundo grupo. Por ejemplo, con la frase "un grupo alquilo que comprende un grupo amino", el grupo amino puede incorporarse dentro de la estructura del grupo alquilo. Alternativamente, el grupo amino puede unirse a la cadena principal del grupo alquilo. La naturaleza del(los) grupo(s) que se selecciona(n) determinará si el primer grupo está integrado o adjunto al segundo grupo. Como se describe en el presente documento, los compuestos adecuados para los fines de la invención pueden contener unidades estructurales "opcionalmente sustituidos". En general, el término "sustituido", ya sea precedido o no por el término "opcionalmente", significa que uno o más hidrógenos de la unidad estructural designada se reemplazan con un sustituyente adecuado. A menos que se indique lo contrario, un grupo "opcionalmente sustituido" puede tener un sustituyente adecuado en cada posición sustituible del grupo, y cuando más de una posición en una estructura dada puede ser sustituida con más de un sustituyente seleccionado de un grupo específico, el sustituyente puede ser ya sea el mismo o diferente en cada posición. Las combinaciones de sustituyentes previstas en esta invención son preferiblemente aquellas que dan como resultado la formación de compuestos estables o químicamente viables. También se contempla que, en determinados aspectos, a menos que se indique expresamente lo contrario, los sustituyentes individuales pueden ser sustituidos opcionalmente (es decir, sustituidos o no sustituidos).

[0089] A menos que la presente memoria descriptiva use una definición diferente, se entienden todas las definiciones y otras divulgaciones del documento U.S. Patent No.8,129,519.

[0090] Descripción detallada de la invención

[0091] La presente invención se refiere a la observación de que la señalización WNT/beta catenina es un mediador importante de las enfermedades fibróticas y que la inhibición de esta ruta de señalización mejora la fibrosis y los estados de enfermedad fibrótica. Los inhibidores de la ruta de señalización Wnt/beta-catenina pueden usarse para el tratamiento y/o la prevención de enfermedades fibróticas, incluidas, pero no limitadas a, la fibrosis pulmonar, la contractura de Dupuytren, la esclerodermia, la esclerosis sistémica, los trastornos similares a la esclerodermia, la esclerodermia sine, la cirrosis hepática, la fibrosis pulmonar intersticial, los queloides, la enfermedad renal crónica, el rechazo crónico de injertos y otras anomalías de cicatrización/curación de heridas, adherencias postoperatorias, fibrosis reactiva y tumores desmoides.

[0092] De acuerdo con lo anterior, la presente invención proporciona un compuesto de fórmula I

[0095]

[0097] o una sal, éster, amida, estereoisómero o isómero geométrico farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en un método de tratamiento y/o prevención de enfermedades fibróticas que comprende administrar a un paciente que lo necesite una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de fórmula I o una sal, éster, amida, estereoisómero o isómero geométrico farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0098] El documento U.S. Patent 8,129,519 describe métodos de fabricación del compuesto de la invención.

[0099] En la presente invención, el compuesto de fórmula I tiene la siguiente estructura:

[0102]

[0104] o una sal, éster, amida, estereoisómero o isómero geométrico farmacéuticamente aceptable del mismo. El compuesto también se conoce como BC-2059 o Tegavivint. El documento U.S. Patent 8,129,519 describe métodos de fabricación de este compuesto.

[0105] En la presente invención, la enfermedad fibrótica es la fibrosis pulmonar.

[0106] El BC-2059 se identificó originalmente en un cribado basado en células por su capacidad para inhibir la activación transcripcional de la ruta de señalización WNT/beta catenina. La caracterización de esta serie de compuestos condujo al descubrimiento de que los miembros de esta serie eran capaces de inducir la degradación de la beta-catenina, interferir con el complejo de activación transcripcional de la beta-catenina y tenían características de un modulador de la ruta de señalización del receptor nuclear. Se descubrió que BC-2059 interactúa con TBL1 e impide que la beta-catenina se asocie con TBL1 y conduce a la degradación de la beta-catenina.

[0107] Se descubrió que esta actividad del BC-2059 inhibe la ruta de la beta catenina en las células cancerosas y provoca que esas células sufran apoptosis. Específicamente, las líneas celulares derivadas de pacientes con leucemia mieloide crónica (CML) y las líneas celulares y células primarias derivadas de pacientes con neoplasia mieloproliferativa (MPN) experimentan apoptosis e inhibición del crecimiento en presencia de BC-2059.

[0108] Además, la actividad de BC-2059 es sinérgica con compuestos que afectan rutas de señalización terapéuticamente importantes en estas enfermedades (tales como los inhibidores de la quinasa Janus 2 (JAK2), el grupo de puntos de ruptura Abelson (BCR-ABL) y la histona desacetilasa (HDAC) y se pueden usar en combinación con estos agentes para mejorar estas enfermedades en individuos que las padecen.

[0109] De esta manera, en algunas realizaciones, los agentes proporcionados pueden usarse en combinación con otros agentes terapéuticos, incluidos, pero no limitados a, inhibidores de la tirosina quinasa (incluido, pero no limitado a, nilotinib), inhibidores de la histona desacetilasa (incluido, pero no limitado a, panobinostat), otros agentes anticancerígenos y otros agentes terapéuticos.

[0110] Cuando se use en los tratamientos mencionados anteriormente u otros, se puede emplear una cantidad terapéuticamente eficaz de uno de los compuestos de la presente invención en forma pura o, cuando existan tales formas, en forma de sal, éster o profármaco farmacéuticamente aceptable. Alternativamente, el compuesto puede administrarse como una composición farmacéutica que contenga el compuesto de interés en combinación con uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables.

[0111] La dosis diaria total de los compuestos de esta invención administrada a un ser humano o animal inferior puede oscilar entre aproximadamente 0.0001 y aproximadamente 1000 mg/kg/día. Si se desea, la dosis diaria eficaz puede dividirse en dosis múltiples para fines de administración; por consiguiente, las composiciones de dosis única pueden contener dichas cantidades o submúltiplos de las mismas para completar la dosis diaria.

[0112] Ejemplos

[0113] Ejemplo de referencia 1

[0114] Efectos de Tegavivint en modelos de células primarias de fascia palmar fibrótica (enfermedad de Dupuytren) y no fibrótica

[0115] Condiciones experimentales

[0116] El polvo de Tegavivint (BC-2059) se reconstituyó en dimetilsulfóxido (DMSO) al 100 % hasta obtener una solución madre de 10 mM. La solución madre se diluyó a 100 nM en medio libre de suero (medio esencial mínimo α, αMEM) y posteriormente se diluyó a 100 pM en αMEM libre de suero inmediatamente antes de realizar los análisis. Se evaluaron diluciones seriadas desde 100 pM hasta 0.78 pM en diversos ensayos. En un subconjunto de análisis, se usó DMSO al 0.001 % en αMEM como control del vehículo y αMEM solo se usó como control no tratado.

[0117] Se realizaron análisis de proliferación/viabilidad por triplicado en fibroblastos primarios de la fascia palmar derivados de la fascia palmar fibrótica (células DD) de 2 pacientes con enfermedad de Dupuytren (DD249, DD77) y fibroblastos primarios singénicos de la fascia palmar derivados de la fascia palmar visiblemente no fibrótica (células PF) de estos pacientes (PF249, PF77). Para estos análisis, las células se cultivaron en placas de 96 pocillos recubiertas con colágeno tipo 1 para replicar mejor las interacciones del sustratoin vivo.Para estos análisis se usaron dos ensayos independientes: Ensayos con Alamar Blue para análisis de hasta 72 h en células derivadas de 1 paciente y ensayos de tetrazolio soluble en agua (WST-1) para análisis de hasta 24 h en células derivadas de los otros pacientes. Mediante un análisis de varianza (ANOVA) de medidas repetidas se detectaron efectos significativos del tratamiento sobre la proliferación a lo largo del tiempo.

[0118] Los análisis de expresión génica se evaluaron por triplicado en un PCR en tiempo real ABI Prism 7500. Las muestras de ARN total se derivaron de células singénicas DD y PF cultivadas a partir de los tejidos explantados de un paciente con enfermedad de Dupuytren (DD180 y PF 180) y 1 paciente sin antecedentes de enfermedad de Dupuytren (CT38) como control alogénico normal. La calidad del ARN se evaluó en un bioanalizador Agilent 2100 y 2 µg de ARN total de alta calidad se transcribieron inversamente a la primera cadena de ADNc usando el kit High-Capacity cDNA Archive (Applied Biosystems) de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Se usaron ensayos de expresión génica TaqMan para medir niveles de ARNm de CTNNB1, EGR1 y NRG1. y WISP1 después de 48 h de tratamiento en células cultivadas en placas de 6 pocillos recubiertas con colágeno tipo 1. El método ΔΔCT se usó después de la confirmación de las eficiencias de amplificación por PCR paralelas de los genes diana y de mantenimiento. Las reacciones de PCR se llevaron a cabo en las siguientes condiciones: Desnaturalización inicial a 95 °C durante 5 min seguida de ciclos de desnaturalización (95 °C durante 15 s), hibridación del cebador (60 °C durante 1 min) y extensión del transcrito (50 °C durante 2 min) durante 40 ciclos.

[0119] Se realizaron ensayos de reticulación de colágeno poblados por fibroblastos en fibroblastos primarios de la fascia palmar derivados de la fascia palmar fibrótica de un paciente con enfermedad de Dupuytren (DD180) usando el protocolo descrito en Raykha, C., Crawford, J., Gan, B. S., Fu, P., Bach, L. A., and O’Gorman, D. B. (2013) IGF-II and IGFBP-6 regulate cellular contractility and proliferation in Dupuytren’s disease. Biochimica et biophysica acta.1832, 1511-9.

[0120] Resultados experimentales

[0121] Basándonos en los resultados de los ensayos de proliferación/viabilidad usados y en la inspección visual de las células en cultivo, el BC-2059 fue citotóxico tanto para los fibroblastos derivados de fibrosis como para los fibroblastos singénicos derivados de la fascia palmar visiblemente no afectada a concentraciones >100 pM. Se observaron diferencias consistentes y estadísticamente significativas en la sensibilidad a BC-2059 en los ensayos de proliferación/viabilidad de las células DD y PF (N=2 pacientes) que se evaluaron. Como se muestra en las Figuras 1A a 1C, las células DD249 fueron viables y capaces de proliferar en cantidades de células significativamente mayores en 25 pM de BC-2059 durante 48 y 72 h en comparación con las células tratadas durante 24 h, pero no pudieron proliferar en 50 pM de BC-2059 durante 48 y 72 h en comparación con las células tratadas durante 24 h.

[0122] En cambio, las células singénicas PF249 proliferaron hasta alcanzar un número significativamente mayor en concentraciones de 25 pM y 50 pM de BC-2059 durante 48 y 72 h, en comparación con las células tratadas durante 24 h. Véanse las Figuras 1D a 1F.

[0123] Estos hallazgos se replicaron usando un ensayo diferente, WST-1, en células derivadas de un paciente diferente, DD77 y PF 77, durante 24 h, como se muestra en las Figuras 2A y 2B.

[0124] No se identificaron efectos discernibles en la expresión de genes que se asocian con la β-catenina nuclear en los análisis ChIP-seq de células DD en células tratadas con ≤25 pM de BC-2059.

[0125] Conclusión

[0126] Los análisis preliminares han identificado una ventana terapéutica para concentraciones de BC-2059 de aproximadamente 50 pM, donde se inhibe la proliferación de células derivadas de fibrosis, pero no de células derivadas de la fascia palmar singénica. En ninguno de los análisis se identificaron efectos consistentes sobre la proliferación/viabilidad celular, la expresión génica o la contractilidad a concentraciones ≤25 pM de BC-2059, lo que confirma aún más la existencia de una ventana terapéutica superior a 25 pM de BC-2059.

[0127] El BC-2059 inhibe la localización nuclear de la beta-catenina, pero no su transcripción; sin embargo, valía la pena determinar si existía alguna evidencia de un aumento compensatorio en CTNNB1. Niveles de ARNm en células tratadas con BC-2059. Como muestra la Figura 3A, no se detectó evidencia de un aumento compensatorio en expresión de CTNNB1 en células tratadas con ≤25 pM de BC-2059. Los datos previos indican que la beta-catenina se asocia con factores de transcripción en los promotores de EGR1 y NRG1 en células CT, pero no en células DD o PF, y que la β-catenina se asocia con factores de transcripción en el WISP1 promotor en células DD, pero no en células PF o CT. Mientras que los niveles de expresión de EGR1 y NRG1 fueron más altos en las células CT y la expresión de WISP1 fue mayor en las células DD, como se esperaba; no se observó ninguna evidencia de cambios inducidos por BC-2059 en los niveles de expresión de EGR1, NRG1 o WISP1 en células tratadas con ≤25 pM de BC-2059. Véanse, las Figuras 3B-3D.

[0128] Para compensar la variabilidad genética entre las células derivadas de diferentes pacientes, se recomienda realizar análisisin vitroadicionales, más detallados de BC-2059 en el intervalo de 25-100 pM en células derivadas de la fascia palmar fibrótica y visiblemente no fibrótica (es decir, células DD y PF) de al menos 6 individuos adicionales. Se ha calculado que 6 pacientes/grupo (DD y PF) son suficientes para detectar significación a p<0.05 con una potencia del 80 %.

[0129] Ejemplo 2

[0130] Método de tratamiento de la fibrosis pulmonar con Tegavivint

[0131] En un estudio piloto, se administró Tegavivint a 50 mg/kg biw (dos veces por semana) mediante inyección en la vena de la cola a ratones C57BL/6 de tipo salvaje. Se administró bleomicina a los ratones por vía intratraqueal el día 0 para inducir fibrosis pulmonar, y se administró Tegavivint o el vehículo (5 % de dextrosa en agua) los días 6, 10, 14, 18 y 21.

[0132] El objetivo de este experimento fue evaluar el efecto de la administración sistémica de Tegavivint sobre la fibrosis pulmonar inducida por bleomicina in vivo.

[0133] La Figura 5A muestra el efecto sobre la distensibilidad pulmonar, que es una medida funcional de la capacidad del pulmón para estirarse y expandirse. La fibrosis pulmonar suele asociarse a una disminución de la distensibilidad pulmonar, es decir, a un pulmón rígido. Como se muestra en la Figura 5A, los animales tratados solo con bleomicina (segundo grupo) mostraron una disminución significativa de la distensibilidad en comparación con los animales tratados solo con el vehículo (primer grupo), lo que indica la inducción de fibrosis pulmonar después del tratamiento con bleomicina; el tratamiento con Tegavivint solo (tercer grupo) no tuvo ningún efecto sobre la distensibilidad; y el tratamiento con Tegavivint después de la bleomicina (cuarto grupo) restauró parcialmente las mediciones de distensibilidad. Los asteriscos indican significación estadística en ** p<0.01 y ***p<0.001.

[0134] La Figura 5B demuestra el efecto sobre el contenido total de colágeno soluble en el tejido pulmonar usando el ensayo Sircol, que es una medida cuantitativa de la fibrosis pulmonar, ya que la inducción de la fibrosis está asociada con un aumento de la síntesis de colágeno nuevo y una mayor concentración de colágeno soluble. Como se muestra en la Figura 5B, los animales tratados solo con bleomicina (segundo grupo) mostraron una concentración de colágeno soluble significativamente mayor en comparación con los animales tratados solo con vehículo (primer grupo), lo que indica la inducción de fibrosis pulmonar después del tratamiento con bleomicina; el tratamiento con Tegavivint solo (tercer grupo) no tuvo ningún efecto; y el tratamiento con Tegavivint después de la bleomicina (cuarto grupo) restauró completamente el nivel de colágeno al mismo nivel que los controles tratados solo con vehículo. Los asteriscos indican significación estadística en ***p<0.005. Este experimento ha demostrado que el tratamiento con Tegavivint atenuó eficazmente la fibrosis pulmonar inducida por bleomicinain vivovía administración sistémica.

[0135] En otro estudio piloto, se administró Tegavivint a 5 mg/kg biw (dos veces por semana) mediante administración intranasal a ratones C57BL/6 de tipo salvaje. Se administró bleomicina a los ratones por vía intratraqueal el día 0 para inducir fibrosis pulmonar, y se administró Tegavivint o el vehículo (5 % de dextrosa en agua) los días 6, 10, 14, 18 y 21.

[0136] El objetivo de este experimento fue evaluar el efecto de la administración tópica de Tegavivint sobre la fibrosis pulmonar inducida por bleomicinain vivo.

[0137] La Figura 6A demuestra el efecto de la aplicación tópica de Tegavivint sobre la distensibilidad pulmonar en el modelo de bleomicina. Como se muestra en la Figura 6A, los animales tratados solo con bleomicina (segundo grupo) mostraron una disminución significativa de la distensibilidad pulmonar en comparación con los animales tratados solo con el vehículo (primer grupo), lo que indica la inducción de fibrosis pulmonar después del tratamiento con bleomicina; el tratamiento tópico con Tegavivint solo (tercer grupo) causó un aumento de la distensibilidad; y el tratamiento con Tegavivint después de la bleomicina (cuarto grupo) mostró una tendencia hacia una mayor distensibilidad en comparación con el grupo tratado solo con bleomicina (segundo grupo), aunque puede que se necesiten más animales para demostrar significación estadística. Los asteriscos indican significación estadística con * p<0.05 y **p<0.01.

[0138] La Figura 6B demuestra el efecto de la aplicación tópica de Tegavivint sobre el contenido de colágeno soluble en el modelo de bleomicina. Como se muestra en la Figura 6B, los animales tratados solo con bleomicina (segundo grupo) mostraron una concentración de colágeno soluble significativamente mayor en comparación con los animales tratados solo con el vehículo (primer grupo), lo que indica la inducción de fibrosis pulmonar después del tratamiento con bleomicina; el tratamiento tópico con Tegavivint solo (tercer grupo) mostró un ligero aumento en el colágeno, que podría deberse a una respuesta inflamatoria leve del tejido pulmonar al fármaco tópico; y el tratamiento con Tegavivint después de la bleomicina (cuarto grupo) disminuyó significativamente el nivel de colágeno en comparación con el grupo tratado solo con bleomicina (segundo grupo). Los asteriscos indican significación estadística en **p<0.01, ****p<0.0001.

[0139] Este experimento ha demostrado que la administración tópica de Tegavivint también atenuó eficazmente la fibrosis pulmonar inducida por bleomicinain vivo.

[0140] Ejemplo 3

[0141] Administración por nebulización de formulaciones de Tegavivint

[0142] Se usaron partículas de Tegavivint suspendidas en Poloxamer 188/sorbitol a una concentración de 25 mg/mL. Estas formulaciones se aplicaron a los ratones en forma de aerosoles, mediante el método de exposición de cuerpo entero. Los ratones fueron colocados dentro de una caja de plástico. Esta caja estaba sellada y conectada por uno de sus lados a la salida del dispositivo nebulizador, y por el otro lado a un sistema cerrado de agua. Todo el procedimiento se llevó a cabo dentro de la campana extractora de la sala de animales. Para el primer experimento se usó el kit nebulizador de SATER LABS. Este dispositivo usa el sistema de chorro. El dispositivo se preparó con 5 ml del fármaco, es decir, 125 mg de tegavivint (BC2059), para cada grupo de 5 ratones, y luego el dispositivo se conectó a la fuente de alimentación para la nebulización. La energía fue suministrada por un compresor DeVilbiss modelo 646, que permite una presión de 5-7 libras y un flujo de 6-8 litros por minuto. Para el segundo experimento, el dispositivo usado fue el nebulizador ultrasónico Altera. Para los dos experimentos, se usaron 10 ratones bcat-Ex3 machos para cada grupo. Estos ratones fueron separados en 2 grupos de 5 ratones cada uno. El primer grupo recibió el fármaco diariamente, durante 5 días consecutivos. El segundo grupo recibió el fármaco solo una vez (el quinto día). Al quinto día se sacrificaron todos los ratones, se extrajeron los pulmones y las muestras se almacenaron a -30 grados en dos bolsas de nailon etiquetadas, cada una conteniendo las 5 muestras de cada grupo.

[0143] Resultados:

[0144]

[0145]

[0148] Ejemplo 4

[0149] Eficacia del Tegavivinit nebulizado en un modelo de ratón de fibrosis pulmonar idiopática

[0150] El objetivo de este experimento fue investigar la nanosuspensión de tegavivint en un modelo de ratón con fibrosis pulmonar idiopática (IPF) inducida por bleomicina. Los artículos de prueba fueron los siguientes: Tegavivint (BC2059) en una suspensión nanomolida 25 mg/mL en 0.625 % de poloxamer 188 y 10 % de sorbitol. El compuesto se refrigeró a aproximadamente 4 °C.

[0151] El equipo de nebulización era el nebulizador ultrasónico de máquina Altera eRapid (modelo # 678G1002). Los animales eran ratones macho C57BL/6 de 8-12 semanas de edad (Jackson Lab, Bar Harbor, ME).

[0152] Procedimiento experimental

[0154]

[0157] Se indujo un modelo murino de fibrosis pulmonar mediante la inyección intratraqueal (IT) de bleomicina (APP Pharmaceuticals, Schaumburg, IL). El día 0 se administró a cada animal una dosis de 0.025 U de bleomicina disuelta en 50 microlitros de solución salina al 0.9 %, o PBS como control.

[0158] La nanosuspensión de Tegavivint se aplicó al Grupo 3 en forma de aerosoles, mediante el método de exposición de cuerpo entero. Los ratones fueron colocados dentro de una caja de plástico. Esta caja estaba sellada y conectada por uno de sus lados a la salida del dispositivo nebulizador, y por el otro lado a un sistema cerrado de agua. Todo el procedimiento se llevó a cabo dentro de la campana extractora de la sala de animales. En cada sesión de tratamiento, se nebulizaron 5 ml de Tegavivint de 25 mg/ml (125 mg) durante 15 minutos a cada grupo de 4-5 ratones en la cámara. Para aumentar la exposición de los ratones al aerosol, el Tegavivint que precipitó en la cámara de aerosol se recogió con una jeringa y se volvió a nebulizar una segunda y una tercera vez. Los ratones fueron nebulizados dos veces al día entre el día 5 y el día 21 después de la administración de bleomicina. Los grupos 1 y 2 recibieron 5 ml de vehículo nebulizado de la misma manera.

[0159] El peso corporal de los animales se registró en los días 0, 5, 8, 12, 16, 19 y 21.

[0160] Las mediciones de la mecánica pulmonar se realizaron el día 21 como se describió anteriormente (Morales-Nebreda L, et al. AJRCMB 2015) el día 21 usando un ventilador para ratones FlexiVent (Scireq, Montreal, PQ, Canadá) según los protocolos establecidos por Scireq. Se obtuvo un historial de ventilación estándar para cada ratón con tres maniobras de capacidad pulmonar total antes de los protocolos de oscilación forzada y curva presión-volumen cuasiestática que se usaron para calcular la resistencia de las vías respiratorias, la distensibilidad tisular dinámica y cuasiestática y la elastancia.

[0161] El día 21 se sacrificaron todos los animales y se extrajeron los pulmones. El contenido total de colágeno pulmonar se evaluó usando el ensayo de hidroxiprolina como se describió anteriormente (Morales-Nebreda L, et al. AJRCMB 2015). En resumen, se extrajeron los pulmones de ratón y se suspendieron en 1 ml de ácido acético 0.5 M y luego se homogeneizaron, primero con un homogeneizador de tejidos (60 s en hielo) y luego usando 15 golpes en un homogeneizador Dounce (en hielo). El homogeneizado resultante se centrifugó (12,000 × g) durante 10 minutos y el sobrenadante se usó para análisis posteriores. Los estándares de colágeno se prepararon en ácido acético 0.5 M usando colágeno de cola de rata (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO). El colorante rojo picrosirius se preparó mezclando 0.2 g de Sirius red F3B (Sigma-Aldrich) con 200 ml de agua; se agregó 1 ml del colorante rojo picrosirius a 100 µl del estándar de colágeno o de los homogeneizados de pulmón y luego se mezcló continuamente a temperatura ambiente en un agitador orbital durante 30 minutos. A continuación, el colágeno precipitado se peletizó y se lavó una vez con ácido acético 0.5 M (12,000 × g durante 15 min cada vez). Las pellas resultantes se volvieron a suspender en 1 ml de NaOH 0.5 M y la tinción con rojo Sirius se cuantificó espectrofotométricamente (540 nm) usando un lector de placas colorimétrico (Bio-Rad, Hercules, CA).

[0162] Resultados

[0163] El grupo 2 mostró una reducción de peso corporal estadísticamente significativa después del tratamiento con bleomicina, que es uno de los indicadores de la inducción de IPF. Por el contrario, el tratamiento con tegavivint inhalado en el grupo 3 revirtió la pérdida de peso corporal causada por la lesión pulmonar inducida por bleomicina.

[0166]

[0169] Además, la bleomicina indujo una disminución de la distensibilidad pulmonar en el grupo 2, lo que indica la inducción de fibrosis. El tratamiento con tegavivint inhalado después de la lesión por bleomicina en el grupo 3 revirtió los valores de distensibilidad hasta niveles cercanos a los de los controles tratados con placebo en el grupo 1.

[0172]

[0173]

[0176] Además, el contenido total de colágeno pulmonar, medido mediante el ensayo de hidroxiprolina, mostró un marcado aumento en el grupo 2, lo que indica fibrosis activa después de la lesión por bleomicina; por el contrario, el tratamiento con tegavivint inhalado después de la lesión por bleomicina en el grupo 3 revirtió este cambio y los niveles de colágeno son similares a los de los controles tratados con placebo en el grupo 1.

[0179]

Claims (3)

1. REIVINDICACIONES

1. Un compuesto de fórmula I

o una sal, éster, amida, estereoisómero o isómero geométrico farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en un método de tratamiento y/o prevención de la fibrosis pulmonar, comprendiendo el método administrar a un paciente que lo necesite una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto de fórmula I o una sal, éster, amida, estereoisómero o isómero geométrico farmacéuticamente aceptable del mismo.

2. Un compuesto de fórmula I

o una sal, éster, amida, estereoisómero o isómero geométrico farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en un método de tratamiento de la fibrosis pulmonar, comprendiendo el método la administración intranasal del compuesto de fórmula I o una sal, éster, amida, estereoisómero o isómero geométrico farmacéuticamente aceptable del mismo,

a un paciente que lo necesite.

3. El compuesto de fórmula 1 para su uso según la reivindicación 1, en el que dicha administración se realiza a través de uno o más métodos de administración intravenosa, parenteral, oral, por inhalación (incluida la administración en aerosol), bucal, intranasal, rectal, intralesional, intraperitoneal, intradérmica, transdérmica, subcutánea, intraarterial, intracardíaca, intraventricular, intracraneal, intratraqueal, intratecal, inyección intramuscular, inyección intravítrea y aplicación tópica.