ES3055912T3 - Efficient process for making 6-carboxy benzoxazole derivatives - Google Patents

Abstract

La presente invención está dirigida a un proceso eficiente para preparar derivados de benzoxazol que comprende el paso de hacer reaccionar un compuesto de ácido 4-amino-3-hidroxibenzoico de Fórmula III con un compuesto de ortoéster de 3,5-diclorofenilo de Fórmula II para proporcionar el compuesto de Fórmula I en donde R1, R2a, R2b y R2c son como se describe en este documento. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

[0001] DESCRIPCIÓN

[0002] Procedimiento eficaz para la elaboración de derivados de benzoxazol de 6 carbonos

[0003] Campo de la invención

[0004] La presente invención se refiere a un procedimiento para fabricar un estabilizador de transtiretina derivado del benzoxazol o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En particular, la presente invención se refiere a un procedimiento de fabricación del ácido 2-(3,5-diclorofenil)-1,3- benzoxazol-6-carboxílico o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo mediante la reacción del ácido 4-amino-3-hidroxibenzoico con un compuesto ortoéster 3,5-diclorofenil apropiado. Los procedimientos de la invención son útiles para preparar ácido 2-(3,5-diclorofenil)-1,3-benzoxazol-6-carboxílico o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo que sea útil para estabilizar la transtiretina, inhibir el mal plegamiento de la transtiretina, la proteólisis y tratar las enfermedades amiloides asociadas a la misma.

[0005] Antecedentes de la invención

[0006] La transtiretina (TTR) es una proteína homotetramérica de 55 kDa presente en el suero y el líquido cefalorraquídeo que funciona como transportador de L-tiroxina (T4) y proteína de unión al holo-retinol (RBP). Se ha descubierto que la TTR es una proteína amiloidógena que, en determinadas condiciones, puede transformarse en fibrillas y otros agregados que pueden dar lugar a patologías tales como la polineuropatía o la cardiomiopatía en humanos.

[0007] Las patentes de EE.UU. No 7.214.695; 7.214.696; 7.560.488; 8.168.683; y 8.653.119 divulgan derivados de benzoxazol que actúan como estabilizadores de la transtiretina y son de fórmula

[0010]

[0012] o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; en el que Ar es 3,5-difluorofenilo, 2,6- difluorofenilo, 3,5-diclorofenilo, 2,6-diclorofenilo, 2-(trifluorometil)fenilo o 3-(trifluorometil)fenilo y procedimientos para hacer estos compuestos. En particular, el ácido 2-(3,5-diclorofenil)-1,3-benzoxazol-6-carboxílico (tafamidis) de fórmula

[0015]

[0017] y los procedimientos para fabricarlo. Tafamidis es un estabilizador de la transtiretina activo por vía oral que inhibe la disociación del tetrámero y la proteólisis que ha sido aprobado en ciertas jurisdicciones para el tratamiento de la polineuropatía por transtiretina (TTR- PN) y para el tratamiento de la cardiomiopatía por transtiretina (TTR-CM). No de patente de EE.UU. 9.249.112 y publicación de solicitud de patente estadounidense No US 2019/0119226 divulga formas polimórficas de la sal meglumina del ácido 2-(3,5-diclorofenil)-1,3-benzoxazol-6-carboxílico (tafamidis meglumina). La patente estadounidense No 9.770.441 divulga formas polimórficas del ácido libre del ácido 2-(3,5-diclorofenil)-1,3-benzoxazol-6-carboxílico (tafamidis) Existe una necesidad continua de proporcionar procedimientos sintéticos eficientes para fabricar derivados del ácido 2-(3,5-diclorofenil)-1,3-benzoxazol-6-carboxílico, sales farmacéuticamente aceptables de los mismos y formas polimórficas de los derivados del ácido 2-(3,5-diclorofenil)-1,3-benzoxazol-6-carboxílico y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

[0018] Se conocen varios procedimientos para preparar tafamidis en el documento WO 2004/056315, Tet. Lett.2019, 60 (40), 151082 y WO 2013/168014.

[0019] Sumario de la invención

[0020] La presente invención se dirige a un procedimiento para preparar 6-carboxi-2-(3,5-diclorofenil)benzoxazol de Fórmula Ia

[0023]

[0025] el procedimiento comprende hacer reaccionar ácido 4-amino-3-hidroxibenzoico de Fórmula Illa con un compuesto 3,5-diclorofenil-ortoéster de Fórmula II en presencia de un catalizador ácido para proporcionar 6-carboxi-2-(3,5-diclorofenil)benzoxazol de Fórmula la

[0028]

[0030] en la que R<2a>, R<2b>y R<2c>son cada uno independientemente C<1>-C<6>alquilo o dos cualesquiera de R<2a>, R<2b>y R<2c>tomados conjuntamente son un C<1>-C<6>alcanodiilo o R<2a>, R<2b>y R<2c>tomados conjuntamente son un C<3>-C<10>alcanetriilo; y en el que el catalizador ácido se selecciona del grupo que consiste en ácido trifluoroacético, ácido clorhídrico y ácido metanosulfónico.

[0031] El procedimiento de la invención para hacer los compuestos de Fórmula la puede ser llevado a cabo en un solvente apropiado o en ciertos casos donde el compuesto de Fórmula II es un aceite ningún solvente adicional puede ser requerido. El procedimiento de la invención puede llevarse a cabo desde 0 °C hasta la temperatura de reflujo del disolvente utilizado, llevándose a cabo el procedimiento durante un periodo de 15 minutos a varios días. Los procedimientos de la invención comprenden también otras etapas, tal como el aislamiento del compuesto de Fórmula la y la preparación de formas polimórficas del compuesto de Fórmula la.

[0032] Breve descripción de los dibujos

[0033] Figura 1: Espectro PXRD del 1-(3,5-diclorofenil)-4-metil-2, 6, 7- trioxabiciclo[2.2.2]octano cristalinoDescripción detallada de la invención

[0034] Una primera realización de la presente invención, designada E19 es un procedimiento para preparar 6-Carboxi-2-(3,5-diclorofenil)benzoxazol de Fórmula la

[0037]

[0040] el procedimiento comprende hacer reaccionar ácido 4-amino-3-hidroxibenzoico de Fórmula Illa con un compuesto 3,5-diclorofenil-ortoéster de Fórmula II en presencia de un catalizador ácido para proporcionar 6-carboxi-2-(3,5-diclorofenil)benzoxazol de Fórmula la

[0043]

[0045] en la que R<2a>, R<2b>y R<2c>son cada uno independientemente C<1>-C<6>alquilo o dos cualesquiera de R<2a>, R<2b>y R<2c>tomados conjuntamente son un C<1>-C<6>alcanodiilo o R<2a>, R<2b>y R<2c>tomados conjuntamente son un C<3>-C<10>alcanetriilo; y en el que el catalizador ácido se selecciona del grupo que consiste en ácido trifluoroacético, ácido clorhídrico y ácido metanosulfónico.

[0046] E20 es el procedimiento de E19 en el que la reacción del compuesto de Fórmula Illa con el compuesto de Fórmula II para proporcionar el compuesto de Fórmula la se lleva a cabo en un disolvente.

[0047] E21 es el procedimiento de E20, en el que el disolvente se selecciona del grupo que consiste en metanol, etanol, isopropanol, n-butanol, acetona, metiletilcetona, tetrahidrofurano, 1,4-dioxano, t-butilmetiléter, anisol, acetato de etilo, cloroformo, clorobenceno, heptano, ciclohexano, tolueno, acetonitrilo y 1,2-dimetoxietano. E22 es el procedimiento de E21 en el que el disolvente se selecciona del grupo que consiste en metanol, isopropanol, acetonitrilo, acetato de etilo, 1,2-dimetoxietano, tetrahidrofurano, t-butil metil éter y 1,4-dioxano. E23 es el procedimiento de uno cualquiera de E19 a E22, en el que el catalizador ácido es ácido trifluoroacético. E24 es el procedimiento de uno cualquiera de E19 a E23 en el que la reacción del compuesto de Fórmula III con el compuesto de Fórmula II para proporcionar el compuesto de Fórmula la se lleva a cabo a una temperatura de aproximadamente temperatura ambiente a aproximadamente 100 °C.

[0048] E25 es el procedimiento de E24 en el que la temperatura es de aproximadamente temperatura ambiente a aproximadamente 65 °C.

[0049] E26 es el procedimiento de uno cualquiera de E19 a E25 en el que la reacción del compuesto de Fórmula III con el compuesto de Fórmula II para proporcionar el compuesto de Fórmula la se lleva a cabo durante un periodo de aproximadamente 0,25 horas a aproximadamente 40 horas.

[0050] E27 es el procedimiento de uno cualquiera de E19 a E26 en el que R<2a>, R<2b>y R<2c>son cada uno independientemente C<1>-C<6>alquilo.

[0051] E28 es el procedimiento de E27 en el que R<2a>, R<2b>y R<2c>son cada uno metilo.

[0052] E29 es el procedimiento de uno cualquiera de E19 a E26 en el que R<2a>, R<2b>y R<2c>tomados conjuntamente son un C<3>- C<10>alcanetriilo.

[0053] E30 es el procedimiento de E29 en el que el compuesto de Fórmula II es

[0056]

[0059] E31 es el procedimiento de uno cualquiera de E19 a E30 que comprende además la etapa de aislar el compuesto de Fórmula la.

[0060] E32 es el procedimiento de E31 en el que el compuesto de Fórmula la se aísla por filtración.

[0061] E33 es el procedimiento de uno cualquiera de E19 a E32 que comprende además la etapa de hacer reaccionar el 6-carboxi-2-(3,5-diclorofenil)benzoxazol de Fórmula la con una base farmacéuticamente aceptable para proporcionar una sal farmacéuticamente aceptable de 6-carboxi-2-(3,5-diclorofenil)benzoxazol.

[0062] E34 es el procedimiento de E33 en el que el 6-carboxi-2-(3,5-diclorofenil)benzoxazol se hace reaccionar con meglumina en un disolvente apropiado para proporcionar la sal de meglumina de 6-carboxi-2-(3,5-diclorofenil)benzoxazol.

[0063] E35 es el procedimiento de E34 en el que 6-carboxi-2-(3,5-diclorofenil)benzoxazol se hace reaccionar a temperatura ambiente con meglumina en un disolvente seleccionado entre metil isobutil cetona, MTBE y EtOAc y el sólido resultante se aísla y se seca para proporcionar el polimorfo de forma E de la sal meglumina de 6-carboxi-2-(3,5-diclorofenil)benzoxazol.

[0064] E36 es el procedimiento de E34 en el que el 6-carboxi-2-(3,5-diclorofenil) benzoxazol se hace reaccionar con meglumina en una mezcla de IPA y agua y el sólido resultante se aísla y se seca para proporcionar el polimorfo de forma M de la sal meglumina de 6-carboxi-2-(3,5-diclorofenil) benzoxazol.

[0065] E37 es el procedimiento de E31 que comprende además la etapa de agitar el compuesto de Fórmula la en una mezcla de agua e IPA y después aislar y secar el sólido resultante para proporcionar el polimorfo de Forma 1 de 6-carboxi-2-(3,5-diclorofenil)benzoxazol.

[0066] E38 es un procedimiento para preparar 6-carboxi-2-(3,5-diclorofenil)benzoxazol de Fórmula la

[0069]

[0071] el procedimiento comprende hacer reaccionar aproximadamente un equivalente molar del ácido 4-amino-3-hidroxibenzoico de Fórmula Illa con aproximadamente un equivalente molar del compuesto 3,5-diclorofenilortoéster de Fórmula Ila en presencia de un catalizador ácido y en un disolvente apropiado para proporcionar 6-carboxi-2-(3,5-diclorofenil)benzoxazol de Fórmula la

[0074]

[0077] en el que el catalizador ácido se selecciona del grupo que consiste en ácido trifluoroacético, ácido clorhídrico y ácido metanosulfónico.

[0078] E39 es el procedimiento de E38, en el que el disolvente se selecciona del grupo que consiste en metanol, etanol, isopropanol, n-butanol, acetona, metiletilcetona, tetrahidrofurano, 1,4-dioxano, t-butilmetiléter, anisol, acetato de etilo, cloroformo, clorobenceno, heptano, ciclohexano, tolueno, acetonitrilo y 1,2-dimetoxietano. E40 es el procedimiento de E39 en el que el disolvente se selecciona del grupo que consiste en metanol, isopropanol, acetonitrilo, acetato de etilo, 1,2-dimetoxietano, tetrahidrofurano, t-butil metil éter y 1,4-dioxano. E41 es el procedimiento de E40 en el que el catalizador ácido es ácido trifluoroacético y el disolvente es isopropanol.

[0079] E58 es un procedimiento de preparación de un compuesto de Fórmula lla-2

[0082]

[0084] en la que R<3>se selecciona del grupo que consiste en isopropilo, terc-butilo y neopentilo, que comprende hacer reaccionar un compuesto de fórmula IV con ácido 3,5-diclorobenzoico.

[0087]

[0089] en un disolvente apropiado en presencia de un catalizador ácido apropiado.

[0090] E59 es el procedimiento de E58 en el que R<3>es isopropilo o terc-butilo.

[0091] E60 es el procedimiento de E59 en el que el disolvente es tolueno y el catalizador ácido es ácido metanosulfónico.

[0092] Los ortoésteres y compuestos ortoésteres cíclicos tales como los de Fórmula II utilizados en los procedimientos instantáneos pueden prepararse según procedimientos análogos a los descritos por E. J. Corey y N. Raju, Tetrahedron Letters, 1983, 24(50), 5571-5574; P. Wipf et. al. Pure Appl. Chern.1999, 71(3), 415-421; S. Tange et. al. Synthesis, 2008, 3219-3222; M. Noe et. al. Green Chern.2013, 15, 2252; la solicitud de patente europea No 0279698 y la patente japonesa 5419545 que se derivó de la solicitud de patente japonesa No 2010-270091. El compuesto de Fórmula la, ácido 6-carboxi-1-(3,5-diclorofenil)benzoxazol o 2-(3,5-diclorofenil)-1,3-benzoxazol-6-carboxílico, también conocido por su nombre USAN tafamidis, lleva una fracción de ácido carboxílico en la posición 6 de su anillo benzoxazol. Esta fracción de ácido carboxílico puede formar fácilmente sales con bases adecuadas, tales como la meglumina, para proporcionar sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de Fórmula la.

[0093] Los procedimientos de esta invención incluyen la preparación de compuestos de Fórmula en la forma de una sal derivada de una base inorgánica u orgánica. Una sal particular del compuesto de Fórmula la puede ser ventajosa debido a una o más de las propiedades físicas de la sal, tales como una estabilidad farmacéutica mejorada en diferentes temperaturas y humedades, o una solubilidad deseable en agua o aceite. En algunos casos, una sal de un compuesto también puede utilizarse como ayuda en el aislamiento, purificación y/o resolución del compuesto en los procedimientos de esta invención.

[0094] Cuando una sal está destinada a ser administrada a un paciente (en contraposición a, por ejemplo, ser utilizada en un contexto in vitro), la sal es preferiblemente farmacéuticamente aceptable. El término "sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a una sal preparada mediante la combinación de un compuesto de Fórmula la con una base cuyo catión, en general, se considera adecuado para el consumo humano. Las sales farmacéuticamente aceptables son particularmente útiles como productos de los procedimientos de la presente invención debido a su mayor solubilidad acuosa en relación con el compuesto original. Para su uso en medicina, las sales de los compuestos preparados por los procedimientos de esta invención son "sales farmacéuticamente aceptables" no tóxicas. Las sales englobadas dentro del término "sales farmacéuticamente aceptables" se refieren a sales no tóxicas del compuesto de Fórmula la que generalmente se preparan haciendo reaccionar el ácido libre del compuesto de Fórmula la con una base orgánica o inorgánica adecuada.

[0095] Dado que los compuestos preparados por los procedimientos de la invención llevan una fracción ácida, las sales farmacéuticamente aceptables adecuadas de los mismos pueden incluir las sales de metales alcalinos más ligeros, es decir, sales de sodio o potasio; sales de metales alcalinotérreos, por ejemplo, sales de calcio o magnesio; y sales formadas con ligandos orgánicos adecuados, por ejemplo, sales de amonio cuaternario. En otra realización, las sales de base se forman a partir de bases que forman sales no tóxicas, incluyendo aluminio, arginina, benzatina, colina, dietilamina, diolamina, glicina, lisina, meglumina, olamina, trometamina y sales de zinc.

[0096] Las sales orgánicas pueden fabricarse a partir de aminas secundarias, terciarias o cuaternarias, tales como la trometamina, dietilamina,N,N'-dibenziletilendiamina, cloroprocaína, colina, dietanolamina, etilendiamina, meglumina (A/metilglucamina) y procaína. Los grupos básicos que contienen nitrógeno pueden cuaternizarse con agentes tales como haluros de alquilo inferior (C<1>-C<6>) (por ejemplo, cloruros, bromuros y yoduros de metilo, etilo, propilo y butilo), sulfatos de dialquilo (por ejemplo, dimetil, dietil, dibutil y diamil sulfatos), haluros de cadena larga (por ejemplo, cloruros, bromuros y yoduros de decilo, laurilo, miristilo y estearilo), haluros de arilalquilo (por ejemplo, bromuros de bencilo y fenetilo) y otros. Una sal preferida preparada mediante los procedimientos de la presente invención es la sal meglumina de tafamidis.

[0097] También pueden formarse hemisales de ácidos (es decir, el compuesto de Fórmula la) mediante los procedimientos de la presente invención, por ejemplo, hemisulfato y sales hemicálcicas de tafamidis.

[0098] El experto apreciará que las sales mencionadas incluyen aquellas en las que el contraión es ópticamente activo, por ejemplo bases amínicas quirales tales como la meglumina, también conocida como (2R,3R,4R,5S)-6-(Metilamino)hexano-1,2,3,4,5-pentol o N-metil-D-glucamina.

[0099] Para una revisión de las sales adecuadas, véase "Handbook of Pharmaceutical Salts": Properties, Selection, and Use" de Stahl y Wermuth (Wiley-VCH, Weinheim, Alemania, 2002).

[0100] Las sales farmacéuticamente aceptables del compuesto de Fórmula la pueden prepararse por uno o más de tres procedimientos:

[0101] (i) haciendo reaccionar el compuesto de Fórmula la con la base deseada;

[0102] (ii) eliminando un grupo protector lábil a la base de un precursor adecuado del compuesto de Fórmula la utilizando la base deseada; o bien

[0103] (iii) convirtiendo una sal del compuesto de Fórmula en la otra por reacción con una base apropiada o mediante una columna de intercambio iónico adecuada.

[0104] Las tres reacciones suelen llevarse a cabo en solución. La sal resultante puede precipitarse y recogerse por filtración o recuperarse por evaporación del disolvente. El grado de ionización de la sal resultante puede variar de completamente ionizada a casi no ionizada. Una sal preferida de tafamidis que puede prepararse es la tafamidis meglumina.

[0105] El compuesto de Fórmula la o las sales farmacéuticamente aceptables del mismo preparadas mediante los procedimientos de esta invención pueden existir en formas solvatadas y no solvatadas. El término "solvato" se utiliza en el presente documento para describir un complejo molecular que comprende un compuesto de Fórmula la o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y una o más moléculas disolventes farmacéuticamente aceptables, por ejemplo, etanol. El término "hidrato" se emplea cuando dicho disolvente es agua. Los solvatos farmacéuticamente aceptables de acuerdo con la invención incluyen aquellos en los que el disolvente de cristalización puede estar isotópicamente sustituido, por ejemplo, D<2>O, d<6>-acetona y d<6>-DMSO. Un sistema de clasificación actualmente aceptado para los hidratos orgánicos es el que define los hidratos de sitio aislado, de canal o coordinados por iones metálicos - véase Polymorphism in Pharmaceutical Solids de K. R. Morris (Ed. H. G. Brittain, Marcel Dekker, 1995), incorporado en el presente documento por referencia. Los hidratos de sitio aislado son aquellos en los que las moléculas de agua están aisladas del contacto directo entre sí por moléculas orgánicas intermedias. En los hidratos de canal, las moléculas de agua se encuentran en canales reticulares junto a otras moléculas de agua. En los hidratos coordinados con iones metálicos, las moléculas de agua están unidas al ion metálico.

[0106] Cuando el disolvente o el agua están fuertemente ligados, el complejo tendrá una estequiometría bien definida e independiente de la humedad. Sin embargo, cuando el disolvente o el agua están débilmente ligados, como en los solvatos de canal y los compuestos higroscópicos, el contenido de agua/disolvente dependerá de la humedad y de las condiciones de secado. En tales casos, la no estequiometría será la norma.

[0107] Pueden prepararse complejos multicomponentes (distintos de sales y solvatos) de un compuesto de Fórmula la o sales farmacéuticamente aceptables del mismo, en los que el fármaco (es decir, el compuesto de Fórmula la (tafamidis)) y al menos otro componente están presentes en cantidades estequiométricas o no estequiométricas. Los complejos de este tipo incluyen los clatratos (complejos de inclusión fármacohospedador) y los cocristales. Estos últimos suelen definirse como complejos cristalinos de constituyentes moleculares neutros unidos mediante interacciones no covalentes, pero también podrían ser complejos de una molécula neutra con una sal. Los cocristales que contienen el compuesto de Fórmula la pueden prepararse por cristalización en fusión, por recristalización a partir de disolventes o por molienda física de los componentes juntos - véase Chern Commun, 17, 1889-1896, de O. Almarsson y M. J. Zaworotko (2004). Para una revisión general de los complejos multicomponentes, véase J Pharm Sci, 64 (8), 1269-1288, de Haleblian (agosto de 1975).

[0108] Los compuestos preparados por los procedimientos de la invención pueden existir en un continuo de estados sólidos que van desde totalmente amorfos a totalmente cristalinos. El término "amorfo" se refiere a un estado en el que el material carece de orden de largo alcance a nivel molecular y, dependiendo de la temperatura, puede presentar las propiedades físicas de un sólido o un líquido. Normalmente, estos materiales no presentan patrones de difracción de rayos X característicos y, aunque muestran las propiedades de un sólido, se describen más formalmente como un líquido. Al calentarse, se produce un cambio de propiedades de sólido a líquido que se caracteriza por un cambio de estado, normalmente de segundo orden ("transición vítrea"). El término "cristalino" se refiere a una fase sólida en la que el material tiene una estructura interna ordenada regular a nivel molecular y da un patrón de difracción de rayos X distintivo con picos definidos. Estos materiales, cuando se calientan lo suficiente, también muestran las propiedades de un líquido, pero el cambio de sólido a líquido no se produce líquido se caracteriza por un cambio de fase, normalmente de primer orden ("punto de fusión"). Formas preferidas del compuesto de Fórmula la, tafamidis (ácido libre), preparado por los procedimientos de esta invención, incluyen las formas polimórficas como se describe en la Patente de EE.UU. No.9,770,441 y particularmente la Forma 1 polimorfa del ácido libre de tafamidis como se describe en la misma. Las formas preferidas del compuesto de Fórmula la, tafamidis meglumina (la sal meglumina de tafamidis) preparadas mediante los procedimientos de la presente invención incluyen las formas polimórficas de tafamidis meglumina descritas en la Patente de los Estados Unidos No 9.249.112 y en la Publicación de Solicitud de Patente de los Estados Unidos No US 2019/0119226. Una forma particularmente preferida de tafamidis meglumina preparada por los procedimientos de esta invención es el polimorfo de la forma M según lo descrito en la patente de los E.E.U.U. No.9.249.112. Otra forma de tafamidis meglumina que puede prepararse usando los procedimientos de la presente invención es el polimorfo de Forma E de tafamidis meglumina como se describe en la Publicación de Solicitud de Patente de los Estados Unidos No US 2019/0119226.

[0109] El compuesto de Fórmula la preparado por el procedimiento de la invención también puede existir en un estado mesomórfico (mesofase o cristal líquido) cuando se somete a condiciones adecuadas. El estado mesomórfico es intermedio entre el verdadero estado cristalino y el verdadero estado líquido (fusión o solución). El mesomorfismo que surge como resultado de un cambio de temperatura se describe como "termotrópico" y el que resulta de la adición de un segundo componente, tal como agua u otro disolvente, se describe como "lipotrópico". Los compuestos que tienen el potencial de formar mesofases liotrópicas se describen como "anfifílicos" y consisten en moléculas que poseen un grupo de cabeza polar (tal como -COO-Na<+>, -COO-K<+>, o -COO<->meglumina<+>") como es el caso de las tafamidis. Para más información, véase Crystals and the Polarizing Microscope de N. H. Hartshorne y A. Stuart, 4<ª>Edición (Edward Arnold, 1970).

[0110] Abreviaturas

[0111] Se utilizaron las siguientes abreviaturas:

[0112] AcOH = ácido acético

[0113] AHBA = ácido 4-amino-3-hidroxibenzoico

[0114] BF<3>-Et<2>O = trifluoruro de boro eterato

[0115] 13C = carbono 13

[0116] °C = grados centígrados

[0117] CDCl<3>= cloroformo deutero

[0118] cm<-1>= centímetro recíproco

[0119] d = doblete

[0120] dd = doblete de dobletes

[0121] DCM = diclorometano

[0122] 1,2-DME = 1,2-dimetoxietano

[0123] DMSO-d<6>= deutero dimetilsulfóxido

[0124] EtOAc = acetato de etilo

[0125] EtOH = etanol

[0127] eq. = equivalentes

[0128] g = gramo

[0129] h = hora

[0130] H = átomo de hidrógeno

[0131] HCI = ácido clorhídrico

[0132] HPLC = cromatografía líquida de alta presión

[0133] Hz = hertz

[0134] IPA = alcohol isopropílico

[0135] iPrOAC = acetato de isopropilo

[0136] J = constante de acoplamiento

[0137] KOH = hidróxido de potasio

[0138] L = litro

[0139] m = multiplete

[0140] mm = milímetro

[0141] M = molar

[0143] mbar = milibar

[0144] MEK = metiletilcetona

[0145] MeOH = metanol

[0146] mg = miligramo

[0147] MHz = megahercios

[0148] µL = microlitro

[0149] mL = mililitro

[0150] mmol = milimol

[0151] mol = mol

[0152] MSA o MSOH= ácido metanosulfónico

[0153] MTBE = metil t-butil éter

[0154] NaOMe = metóxido de sodio

[0155] n-BuOH = n-butanol

[0156] NMR = resonancia magnética nuclear

[0157] PTSA = ácido para-tolueno sulfónico

[0158] TA = temperatura ambiente

[0159] s = singlete

[0160] t = triplete

[0161] TEA = trietilamina

[0162] THF = tetrahidrofurano

[0163] TFA = ácido trifluoroacético

[0165] Preparativos

[0167] Preparación 1: 1,3-dicloro-5-(trimetoximetil)benceno

[0168] El 1,3-dicloro-5-(trimetoximetil)benceno se preparó según el procedimiento descrito en el Esquema de Reacción P1 y como se describe a continuación.

[0169] Esquema de reacción P1

[0170]

[0172] Primer paso: Preparación de (E)-[(3,5-diclorofenil)-metoxi-metileno]-metil-fenilamonio; sulfonato de triflurometano

[0173] A una solución agitada de N-metilanilina (150 g, 1399,9 mmol) en DCM (1200 ml, 1590 g) se añadió TEA (141,7 g, 1400 mmol) y la solución resultante se enfrió a 0 °C durante 30 minutos. A esta disolución se añadió una disolución de cloruro de 3,5-diclorobenzoilo (308 g, 1470,4 mmol, 1,05 eq.) en DCM (300 mL, 398 g) durante un periodo de 60 minutos mientras se mantenía la temperatura a < 5 °C. La mezcla de reacción se agitó durante 30 minutos a 0 °C y después se filtró para eliminar el clorhidrato de trietilamina. El filtrado resultante se enfrió a 0 °C y se le añadió trifluorometano sulfonato de metilo (288,3 g, 1687 mmol, 1,205 eq.) durante 60 minutos. La mezcla de reacción se calentó a 52 °C y se agitó durante 12 h, después se concentró por destilación hasta un volumen de 900 mL. La mezcla se enfrió a 20 °C durante 20 minutos y se le añadió MTBE (1500 mL, 1113g) durante 60 minutos. La mezcla se enfrió a 0 °C durante 30 minutos y se agitó a 0 °C durante 30 minutos. La mezcla de reacción se filtró y la torta de filtración se lavó con MTBE (300 mL, 223 g). El sólido resultante se secó durante la noche al vacío para proporcionar 450 g de (E)-[(3,5-diclorofenil)-metoxi-metileno]-metilfenilamonio; sulfonato de triflurometano (72 % de rendimiento).

[0174] Segundo paso: Preparación de 1,3-dicloro-5-(trimetoximetil)benceno

[0175] A una disolución de metóxido sódico en metanol (25 % en peso de metanol, 364,9 g, 386,1 mL, 1520 mmol, 1,5 eq.) a 0 °C se añadió una disolución de (E)-[(3,5-diclorofenil)-metoxi-metilen]-metil-fenil-amonio; sulfonato de trifluorometano (450 g, 1013 mmol) en MeOH (3000 mL) durante un periodo de 60 minutos mientras se mantenía la temperatura a < 5 °C. La mezcla de reacción se agitó durante 30 minutos y después se añadió AcOH (206,4 mL, 216,3 g, 3,2 eq.) durante 30 minutos mientras se mantenía la temperatura a < 5 °C. Esta mezcla de reacción se añadió a continuación durante un periodo de 60 minutos mientras se mantenía la temperatura a < 5 °C. A continuación, se añadió esta mezcla de reacción durante un periodo de 60 minutos a un reactor que contenía hidróxido potásico acuoso 4M (1317 g, 1126 mL, 4 eq.) mientras se mantenía la temperatura a 20 °C. La mezcla de reacción se calentó y se concentró por destilación hasta un volumen de 1500 mL. La mezcla de reacción se ajustó a 20 °C y se le añadió agua (1250 mL) y DCM (1250 mL). Se interrumpió la agitación de la mezcla, se dejó que las capas se separaran y se recogió la capa orgánica inferior. A la capa acuosa restante se añadió DCM (1250 mL) y la mezcla se agitó durante 10 minutos, se detuvo la agitación y se dejó que las capas se separaran y se recogió la capa orgánica inferior. A continuación, las capas orgánicas combinadas se destilaron, primero a presión atmosférica, desechando la fracción que hervía hasta 100 °C, seguido de destilación al vacío a 5-10 mbar mientras se aumentaba la temperatura del reactor de 95 °C a 160 °C durante un periodo de 2 h. El ortoéster deseado, 1,3-dicloro-5-(trimetoximetil)benceno se recogió como un aceite amarillo pálido (201,9 g, 803,4 mmol, 79,3 % de rendimiento).1H NMR (500 MHz, CDCI<3>) δ 7,48

[0176] (d, J = 1,9 Hz, 2H), 7,36 (t, J = 1,9 Hz, 1H), 3,15 (s, 9H).13C NMR (126 MHz, CDCI<3>) δ 140,4, 134,9, 129,0, 126,2, 113,7, 49,9. FTIR (puro): 1568,2, 1418,8, 1256,3, 1094,5, 987,2, 862,7, 796,0, 656,6, 517,3 cm<-1>. Preparación 2: 1 -(3,5-diclorofenil)-4-metil-2,6,7-trioxabiciclo[2.2.2]octano

[0177] Se preparó 1 -(3,5-diclorofenil)-4-metil-2,6,7-trioxabiciclo[2.2.2]octano según el procedimiento descrito en el Esquema de Reacción P2 y como se describe a continuación.

[0178] Esquema de reacción P2

[0181]

[0184] Primer paso: Síntesis de (3-metiloxetan-3-il)metil 3,5-diclorobenzoato

[0185] A una solución de 3-metil-3-oxetanometanol (54,3 g, 0,53 mol) en DCM (400 mL) a ~0 °C se añadió una solución de cloruro de 3,5-diclorobenzoilo (111,4 g, 0,53 mol) en DCM (100 mL) durante 45 minutos. La mezcla se agitó a ~0 °C durante 1,5 h y luego se lavó con agua (3 x 200 mL). A continuación, la capa orgánica se concentró para eliminar el DCM. Se obtuvieron 143,7 g (98,6 % de rendimiento bruto) de un aceite viscoso incoloro que cristalizó al reposar. La mitad de este material se llevó al siguiente paso mientras que la otra mitad se recristalizó de IPA (250 mL) para proporcionar 55,0 g de (3-metiloxetan-3-il)metil 3,5-diclorobenzoato como sólido cristalino incoloro.1H NMR (44 MHz, CDCI<3>) δ 7,85 (d, 2H), 7,55 (t, 1H), 4,75-4,28 (m, 6H), 1,45 (s, 3H).

[0186] Segundo paso: Síntesis de 1-(3,5-diclorofenil)-4-metil-2, 6, 7- trioxabiciclo[2.2.2]octano

[0187] Una disolución de (3-metiloxetan-3-il)metil 3,5-diclorobenzoato (71,85 g, 0,261 mol) en DCM (435 mL) se enfrió a -5 °C en un baño de acetona/hielo. A esta solución se añadió trifluoruro de boro eterato (BF<3>*

Et<2>O, 9,4 g, 66,25 mmol) y la solución se agitó durante la noche mientras se calentaba a TEMPERATURA AMBIENTE para proporcionar una solución amarilla. A esta solución se le añadió TEA (25,0 g, 0,247 mol) y la mezcla se agitó durante 1h a TEMPERATURA AMBIENTE, después se le añadió MTBE (520 mL). Como no se formó ningún precipitado, la mezcla se concentró para eliminar el disolvente, lo que dio lugar a un sólido amarillo anaranjado (peso bruto ~85 g) que se recristalizó en IPA (250 mL) para proporcionar 41,6 g (57 % de rendimiento) del producto deseado. Se obtuvieron otras dos cosechas concentrando el licor madre y sembrando con material de la 1<ra>cosecha para proporcionar 5,0 g y 3,46 g adicionales, respectivamente, del producto deseado 1-(3,5-diclorofenil)-4-metil-2, 6, 7-trioxabiciclo[2.2.2]octano. El rendimiento total obtenido fue de 50,06 g (68 %). El tiempo de retención en HPLC fue de 5,062 minutos; 1H NMR (44 MHz, CDCl<3>) δ 7,83-7,13 (m, 3H), 4,15 (s, 6H), 0,97 (s, 3H).

[0188] El 1-(3,5-diclorofenil)-4-metil-2, 6, 7-trioxabiciclo[2.2.2]octano cristalino se evaluó mediante PXRD y el espectro de picos se muestra en la Fig.1. Los valores 2-theta se proporcionan en la Tabla 1 de PXRD, más abajo, y son ± 0,22-theta. La forma cristalina de 1-(3,5-diclorofenil)-4-metil-2,6,7-trioxabiciclo[2.2.2]octano se caracteriza por picos PXRD a 21,2 y 19,72-theta, cada uno ±0,22-theta; 21,2, 19,7 y 14,42- theta, cada uno ±0,22-theta; 21,2, 19,7, 14,4 y 23,72-theta, cada uno ±0,22-theta; 21,2, 19,7,14,4, 23,7 y 24,22-theta, cada uno ±0,22-theta; 21,2,19,7, 14,4, 23,7, 24,2 y 30,62-theta, cada uno ±0,222-theta.

[0189] Tabla 1 PXRD

[0190]

[0191]

[0194] Preparación 3: 1 -(3,5-Diclorofenil)-4-etil-2,6,7-trioxabiciclo[2.2.2]octano

[0197]

[0199] A una disolución de 1,3-dicloro-5-(trimetoximetil)benceno (10,04 g, 40,0 mmol) en DCM anhidro (40 mL) se añadió 2-etil-2-(hidroximetil)-1,3-propanodiol (5,375 g, 40,0 mmol) seguido de TFA (0,3 mL, 3,9 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 65 h. Se añadió K<2>CO<3>anhidro (2,2 g), la mezcla se agitó durante 3 h y después se filtró. El filtrado se concentró en un rotavapor y el residuo se disolvió en tolueno caliente (70 mL), se enfrió a temperatura ambiente y se filtró a través de una membrana de PTFE, después se concentró in vacua para obtener un residuo (12,40 g) que solidificó. El residuo se cristalizó a partir de heptanos: se añadió heptano (50 mL), el sólido se disolvió a reflujo y la solución se mantuvo a -5°C durante 3 h. El precipitado sólido se filtró, se enjuagó con heptanos enfriados y se secó al aire; se obtuvo una primera cosecha de producto bruto (6,12 g). El filtrado combinado se evaporó hasta la mitad del volumen original y se dejó a -5°C durante la noche; se recogió por filtración una segunda cosecha (1,45 g) de la sustancia. Ambas porciones contenían el deseado 2,6,7-trioxabiciclo[2.2.2]octano mezclado con un subproducto, 2,2-bis(hidroximetil)butil 3,5-diclorobenzoato. El primer cultivo en proporción molar de producto deseado: subproducto de 1 : 0,25, y la segunda cosecha en proporción de 1 : 0,37.

[0200] Ambas porciones de material bruto obtenido se combinaron con otro lote que se había preparado de manera similar (7,58 g, relación producto deseado: subproducto 1 : 0,18).

[0201] El producto bruto combinado (15,15 g) se recristalizó dei-PrOAc (35 mL). El sólido se disolvió calentándolo por debajo de la temperatura de reflujo y la solución se dejó a temperatura ambiente durante 2 h. El sólido precipitado se filtró, se enjuagó coni-PrOAc frío y se secó al aire; así, el material que tenía una relación producto/subproducto 1 : 5,2 (0,77 g).

[0202] El filtrado se dejó a -5°C durante la noche, se separó el sólido precipitado y el filtrado se evaporó/enfrió por etapas. Estas manipulaciones dieron lugar a cuatro lotes del producto de pureza insuficiente. Se combinaron en un lote (11,02 g, relación producto/subproducto 1 : 0,11) y se cristalizó repetidamente: el lote se disolvió eni-PrOAc (25 mL) se mantuvo a temperatura ambiente durante 1 h y después se enfrió a -5°C y se sometió a brevesonificación.Esto provocó una cristalización espontánea. La filtración inmediata proporcionó un producto cristalino en cantidad de 2,46 g tras secado al vacío, lote 1, con una concentración del 97,4 % (qNMR). El filtrado proporcionó muchas cosechas cristalinas de calidad insuficiente; las cosechas cristalinas se volvieron a combinar.

[0203] La materia prima recogida (8,50 g) se recristalizó a partir de isopropanol: la muestra se disolvió en 45 mL dei-PrOH por calentamiento, se añadieron 45 mL adicionales dei-PrOH, la solución se enfrió a temperatura ambiente y se mantuvo a esta temperatura durante 1 h, después se metió en el frigorífico a -5 °C durante 10 minutos. Los primeros cristales aparecieron en este tiempo. Además, la solución se mantuvo a 0 °C durante 1 h y, a continuación, la sustancia cristalina se recogió por filtración, se enjuagó coni-PrOH enfriado y se secó al vacío. El compuesto del título se obtuvo en cantidad de 6,67 g, lote 2, ensayo 95,4 % (qNMR).

[0204] El filtrado se evaporó hasta la mitad de su volumen original y se dejó a 0 °C durante toda la noche. La siguiente cosecha de cristales se recogió por filtración y se enjuagó coni-PrOH enfriado y se secó al vacío. La sustancia diana se obtuvo en cantidad de 1,81 g, lote 3, ensayo 97,2 % (qNMR).

[0205] Para los lotes 1-3: cada lote tenía p.m.76 °C; cada lote tenía<1>H NMR y<13>C NMR como sigue:

[0206] <1>H RNM (400 MHz, CDCI<3>), δ, ppm: 7,52 (dJ= 2,0 Hz, 2H), 7,33 (tJ= 2,0 Hz, 1H), 4,09 (s, 6H), 1,32 (qJ=7,7 Hz, 2H), 0,88 (tJ=7,7 Hz).

[0207] <13>C NMR (101 MHz, CDCI<3>), δ, ppm: 140,7, 134,8, 129,3, 124,9, 106,7, 72,0, 33,7, 22,5, 7,7.

[0208] HRMS: ES+ m/z,( %): calculado para C<13>H<15>CI<2>O<3>[M+1]<+>289,0398; lote 1 hallado 289,0410; lote 2 hallado 289,0407; y lote 3 hallado 289,0404.

[0209] Preparación 4: 1 -(3,5-Diclorofenil)-4-fenil-2,6,7-trioxabiciclo[2.2.2]octano

[0212]

[0214] Primer paso: Preparación de 1,1,1-Tris(hidroximetil)fenilmetano

[0215] Se añadieron fenilacetaldehído (12,4 mL, 0,11 mol) y Ca(OH)<2>(31,5 g, 0,43 mol) a una suspensión de paraformaldehído (12,8 g, 0,43 mol) en THF anhidro (160 mL). La mezcla de reacción se agitó a 60-65 °C (temperatura del baño) durante 4 días.

[0216] Tras enfriar a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se filtró a través de Celite y la almohadilla filtrante se enjuagó con DCM. Los filtrados combinados se concentraron en un evaporador rotatorio. El aceite residual se trató con acetato de etilo, se sembró (con sólido de experimentos anteriores, aislado por cromatografía) y se dejó en el frigorífico toda la noche.

[0217] El sólido cristalino formado se recogió por filtración y se lavó con EtOAc enfriado, y se secó para proporcionar el compuesto triol diana (9,8 g, 49 % de rendimiento).

[0218] Segundo paso: Preparación de 1-(3,5-Diclorofenil)-4-fenil-2,6,7-trioxabiciclo[2.2.2]octano

[0219] Al 1,3-dicloro-5-(trimetoximetil)benceno (6,3 g, 0,025 mol) y 1,1,1-tris(hidroximetil)fenilmetano (4,6 g, 0,025 mol) suspendidos en DCM anhidro (40 mL) se añadieron 0,19 mL (0,0025 mol) de TFA. La suspensión se convirtió en una solución clara y se dejó a temperatura ambiente durante 48 h, después se añadió K<2>CO<3>y la mezcla se agitó durante 3 h. La mezcla se filtró y el disolvente se evaporó. Un intento de disolver el residuo (~9 g) en tolueno hirviendo (25 mL) condujo a una disolución incompleta. Tras enfriar a temperatura ambiente, la solución se decantó y se enfrió. El sólido resultante que se formó se recogió por filtración y se cristalizó a partir de n heptano para obtener una sustancia blanda blanca (5,2 g).

[0220] Otro experimento realizado a la misma escala dio 5,0 g del producto.

[0221] Los lotes combinados se cristalizaron a partir de acetato de isopropilo para proporcionar 5,78 g de 2,6,7-trioxabiciclo[2.2.2]octano; Lote 1, ensayo 99,6 % (qNMR); El filtrado del Lote 1 se enfrió y se almacenó a 0°C durante la noche. A continuación, se recogieron por filtración 1,85 g adicionales de 2,6,7-trioxabiciclo[2.2.2]octano. Lote 2, ensayo 98,0 % (qNMR). El rendimiento total del producto recristalizado fue del 45 %.

[0222] El lote 1 tuvo una p.m. de 139 °C; el lote 2 tuvo una p.m. de 138 °C.

[0223] Los lotes 1 y 2 tenían cada uno

[0224] <1>H RNM (400 MHz, CDCI<3>), δ, ppm: 7,59 (dJ= 2,0 Hz, 2H), 7,39- 7,45 (m, 2H), 7,33, 7,39 (m, 2H), 7,17- 7,23 (m, 2H), 4,15 (s, 6H).

[0225] Espectro de<13>C NMR (101 MHz, CDCI<3>), δ, ppm: 140,4, 135,6, 134,9, 129,5, 129,4, 128,4, 125,4, 125,0, 107,2, 72,4, 37,1.

[0226] HRMS ES+ m/z, (%): calculado para C<17>H<15>CI<2>O<3>[M+1]<+>337,0398; encontrado 337,0406.

[0227] Preparación 5: 2-(3,5-diclorofenil) -2-metoxi-1,3-dioxolano

[0230]

[0232] A una solución de 1,3-dicloro-5-(trimetoximetil)benceno (10,04 g, 40,0 mmol) en DCM anhidro (40 mL) se añadió etilenglicol (2,7 mL, 48,3 mmol, 1,2 eq) seguido de TFA (0,3 mL, 3,9 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 72 h. Se añadió K<2>CO<3>anhidro (1,5 g), la mezcla se agitó durante 2 h y después se filtró. El filtrado se evaporó hasta sequedad y dio lugar a un aceite amarillo (10,76 g). El aceite obtenido se sometió a destilación al vacío, recogiendo la fracción que hervía a 160-185°C/16 mbar. La fracción recogida (aceite verdoso turbio) se purificó aún más por destilación repetida recogiendo el destilado a 180-183°C/16 mbar. Por destilación se obtuvo el producto deseado (5,63 g) en forma de aceite amarillo, con una concentración del 96,2 % (qNMR).

[0233] Espectro de<1>H NMR (400 MHz, CDCI<3>), δ, ppm: 7,47 (dJ=1,9 Hz, 2H), 7,34 (t,J=1,9 Hz, 1H), 4,19-4,30 (m, 2H), 4,03-4,13 (m, 2H), 3,28 (s, 3H).

[0234] Espectro de<13>C NMR (101 MHz, CDCI<3>), δ, ppm: 141,4, 135,0, 129,1, 125,0, 120,1,65,6, 50,4.

[0235] GCMS m/z, (%): 217 (100) [M-0Me]<+>, 173 (71) [C<7>H<3>CI<2>O]<+>, 145 (30) [C<6>H<3>CI<2>]+

[0236] Preparación 6: 1 -(3,5-Diclorofenil)-2,7,8-trioxabiciclo[3.2.1 ]octano

[0239]

[0241] A una disolución de 1,3-dicloro-5-(trimetoximetil)benceno (10,04 g, 40,0 mmol) en DCM anhidro (50 mL) se añadió 1,2,4-butanetriol (3,57 mL, 40,0 mmol) seguido de la adición de TFA (0,3 mL, 3,9 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. Se añadió K<2>CO<3>anhidro (1,5 g), la mezcla se agitó durante 2 h y después se filtró. El filtrado se evaporó hasta sequedad y dio un aceite amarillo (10,6 g) que solidificó lentamente.

[0242] El material crudo se disolvió en tolueno (30 mL), se filtró a través de una membrana de PTFE y se evaporó a presión reducida. Se añadió heptano (80 mL) al residuo, se reflujo, se enfrió y se decantó la capa superior (solución de hexano). La capa inferior (un aceite) se trató con heptano caliente repetidamente. Se combinaron las soluciones de heptano, se redujo el volumen hasta ~25 mL y se mantuvo a 4°C durante 3 h. Se filtró el precipitado blanco, se enjuagó con heptano frío y se dejó secar al aire durante la noche.

[0243] El 2,7,8-trioxabiciclo[3.2.1]octano aislado (4,27 g) contenía aproximadamente un 11 mol- % de subproductos de cadena abierta (dihidroxibutil 3,5-diclorobenzoatos). Este producto se combinó con otra muestra obtenida de forma similar (4,03 g, contaminación por benzoatos de cadena abierta de aproximadamente 7 mol- %) para su posterior purificación.

[0244] El lote combinado (8,30 g en total) se disolvió en heptano (30 mL) por calentamiento, la solución se filtró en caliente y se mantuvo a temperatura ambiente durante 5 h. El sólido precipitado se recogió por filtración y se secó al aire. Se obtuvieron 6,78 g de producto cristalino. El filtrado se evaporó parcialmente (hasta aproximadamente la mitad del volumen original) y se almacenó a -5°C durante la noche. Así se obtuvo una cantidad adicional (segunda cosecha) del sólido en cantidad de 1,03 g y una calidad similar a la de la cosecha principal. La segunda cosecha contenía aproximadamente un 6 mol- % de benzoatos de dihidroxibutilo. Ambas muestras se combinaron y recristalizaron a partir dei-PrOAc como sigue. La muestra combinada (7,84 g) se disolvió en acetato de isopropilo caliente (10 mL), se enfrió la solución y se dejó a -5°C durante la noche. La sustancia cristalina blanca formada se recogió por filtración, se enjuagó coni-PrOAc enfriado y se secó al vacío a temperatura ambiente para proporcionar el compuesto del título (5,30 g). ensayo 96,2 % (qNMR), m.p.81-84 °C.

[0245] Espectro de<1>H NMR (400 MHz, CDCI<3>), δ, ppm: 7,53 (dJ= 2,0 Hz, 2H), 7,36 (tJ= 2,0 Hz, 1H), 4,83 (tdJ=3,4, 1,6 Hz, 1H), 4,27 (dtJ=11,7, 4,2 Hz, 1H), 4,24 (dJ=7,2 Hz, 1H), 4,12 (ddd J= 7,3, 4,8, 1,6 Hz, 1H), 4,03 (ddd J= 11,7, 6,7, 1,0 Hz, 1H), 2,41 (dddJ=13,8, 12,2, 6,7, 3,4, 1,8 Hz, 1H), 1,51 (ddddJ=13,8, 4,2, 2,0, 0,5 Hz, 1H).

[0246] Espectro de<13>C NMR (101 MHz, CDCI<3>), δ, ppm: 139,7, 134,9, 129,6, 125.0, 117,2, 73,9, 69,6, 59,5, 28,2. HRMS ES+ m/z,( %): calculado para C<11>H<11>CI<2>O<3>[M+1]<+>261,0085; encontrado 261,0094.

[0247] Preparación 7: 3-(3,5-Diclorofenil)-2,4,10-trioxaadamantano

[0250]

[0252] A una solución de 1,3-dicloro-5-(trimetoximetil)benceno (6,42 g, 25,57 mmol) en DCM anhidro (50 mL) se añadió cis-floroglucitol (2,92 g, 22,16 mmol) seguido de la adición gota a gota de BF<3>. OEt<2>(0,28 mL, 2,21 mmol, ~0,1 eq) a la suspensión agitada. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 34 h, después se filtró el floroglucitol residual (0,14 g) y la solución se evaporó a presión reducida. Al residuo se le añadió TBME (40 mL) y la mezcla se reflujo brevemente, no se consiguió la disolución completa. La mezcla se enfrió, se mantuvo a 0°C 1 h y después se filtró recogiendo el blanco del precipitado (5,03 g).

[0253] La evaporación del valorado hasta una cuarta parte del volumen original dio un cultivo adicional del sólido (0,50 g).

[0254] Un experimento similar iniciado con 1,61 g (6,41 mmol) de 1,3-dicloro-5-(trimetoximetil)-benceno y 0,85 g (6,44 mmol) de cis-floroglucitol permitió obtener 1,27 g de sólido bruto.

[0255] Se combinaron todos los sólidos y se disolvieron en MEK (30 mL) calentando a reflujo. La solución se filtró en caliente y se almacenó toda la noche a temperatura ambiente, después se filtró el sólido cristalino, se lavó con un pequeño volumen de MEK frío y se secó al vacío a temperatura ambiente; se obtuvo el compuesto del título en cantidad de 5,586 g (rendimiento 61 %*), ensayo 99,8 % (qNMR), m.p.188°C.

[0256] El filtrado evaporado a 1/3 volúmenes y almacenado a -5 °C durante 4 h dio una cosecha adicional de cristales de la misma calidad, 0,79 g (rendimiento 9 %*), ensayo 99,8 % (qNMR), p.m.188°C.

[0257] * rendimiento calculado sobre la cantidad total de ortoéster de partida en ambas ejecuciones

[0258] <1>H RNM (400 MHz, CDCI<3>), δ, ppm: 7,57 (d,J= 1,9 Hz, 2H), 7,33 (t,J= 1,9 Hz, 1H), 4,56 (m, 3H), 3,11-2,49 (m, 3H), 1,81 (ddt,J=12,9, 2,1, 1,2 Hz, 2H)

[0259] <13>C NMR (101 MHz, CDCI<3>), δ, ppm: 142,5, 134,8, 129,3, 124,4, 108,1,69,3, 33,0.

[0260] HRMS ES+ m/z,( %): calculado para C<13>H<13>CI<2>O<3>[M+1]<+>287,0242; encontrado 287,0253.

[0261] Preparación 8: 1 -(3,5-diclorofenil)-4-isopropil-2,6,7-trioxabiciclo[2.2.2]octano

[0264]

[0266] Primer paso: Síntesis de 2-isopropil-2-hidroximetil-1,3-propanodiol

[0267] Se añadió isovaleraldehído (83 g, 1,0 mol) durante 0,5 h a TA a una solución de hidróxido sódico (60 g, 1,5 mol) en agua (1200 mL) que contenía solución de formaldehído al 37 % (324 g, 4,0 mol). A continuación, la solución se agitó a 50-55 °C durante 3 h y se dejó reposar toda la noche a temperatura ambiente. Se filtró una pequeña cantidad (2,7 g) de sólido cristalino y se pesó la solución (1725 g). De éste, se tomó el 15 % (259 g) y se extrajo 4 veces con DCM (200 mL); los extractos se concentraron para obtener 7,0 g de aceite que cristalizó. Mediante NMR 1H se demostró que el sólido resultante era el dímero de éter, es decir, (2,2'-(oxibis(metileno))bis(2-isopropilpropano-1,3-diol)).

[0268] La solución acuosa restante de la extracción anterior con DCM se trató con cloruro sódico sólido (40 g) y se extrajo con acetato isopropílico (4 x 200 mL). Los extractos combinados de acetato de isopropilo se concentraron in vacua para obtener 14,5 g (97,8 mmol) del deseado 2-isopropil-2-hidroximetil-1,3-propanodiol (puro pero contiene una pequeña cantidad de acetato de isopropilo por 1H NMR).

[0269] Segundo paso: Síntesis de 1-(3,5-diclorofenil)-4-isopropil-2,6,7-trioxabiciclo[2.2.2]octano

[0270] Se cargó tolueno (150 mL), seguido de ácido 3,5-diclorobenzoico (DCBA, 17,0 g, 89 mmol) y ácido metanosulfónico (MSA, 0,8 g). La mezcla se sometió a reflujo bajo Dean- Stark durante 6 h; se recogieron 1,9 g de agua (la cantidad teórica es de 3,2 g) y se dejó reposar toda la noche. La mezcla se extrajo con solución de KOH al 10 % (100 mL y 20 mL) a 60-70 °C, seguido de un lavado con agua a la misma temperatura. La acidificación del extracto acuoso, seguida de filtración y secado del sólido blanco resultante, dio 8,8 g (53 % de la inicial) de DCBA.

[0271] La solución de tolueno se concentró para obtener 14,5 de aceite, que por NMR contenía aproximadamente un 30 % del ortoéster deseado. Tras la disolución en metanol (100 mL) y el tratamiento con KOH sólido (5,0 g, 89 mmol), se obtuvo una solución que depositó cristales en reposo. La filtración y el lavado (metanol) proporcionaron 1-(3,5-diclorofenil)-4-isopropil-2,6,7-trioxabiciclo[2.2.2]octano puro (1,6 g, 13 % ex DCBA reaccionado);<1>H NMR: δ 7,4 m (2H); 4,0 (s, 6H); 1,4 m (1H) y 0,8 d (6H).

[0272] Alternativamente, cuando la etapa 2 se llevó a cabo utilizando ácido para-tolueno sulfónico (PTSA) como catalizador en lugar de MSA, se produjo una conversión muy pobre al éster orto deseado (se recuperó el 90 % de DCBA y se generó el 30 % de la cantidad teórica de agua).

[0273] Se obtuvo un lote adicional del ortoéster deseado de la siguiente manera. Se tomaron 388 g de la solución de 1725 g (de la etapa 1 anterior) (22,5 % del total) y se elaboraron del mismo modo que se ha descrito anteriormente: 4 extracciones con DCM (250 mL) para eliminar el dímero tetra-ol, seguido de adición de NaCI (60 g) y 4 extracciones con acetato de isopropilo (200 mL) para obtener 17,5 g (118,2 mmol) de (2-(hidroximetil)-2- isopropilpropano-1,3-diol) puro como semisólido. A este semisólido se le cargó ácido 3,5- diclorobenzoico (16,5 g, 86,39 mmol), seguido de tolueno (200 mL) y MSA (1,2 g, 12,5 mmol). La solución se sometió a reflujo bajo Dean-Stark durante 6 h y se enfrió a temperatura ambiente. Había 2,3 g de agua en la trampa. Se añadió MSA extra (1,2 g) y se reanudó el reflujo durante otras 6 h, obteniéndose 0,5 mL extra de agua. El lote se dejó enfriar a temperatura ambiente, se trató con 100 mL de solución de KOH al 6 % a 40-50 °C, seguido de un lavado con 100 mL de agua a la misma temperatura. Se eliminó el tolueno para dejar 28 g de un aceite. Este aceite se disolvió en metanol (150 mL) y agua (10 mL) y se trató con hidróxido potásico (6 g, 107 mmol) a temperatura ambiente (esto convierte el éster normal en triol soluble y 3,5- diclorobenzoato potásico). A continuación, el ortoéster empezó a cristalizar rápidamente; la suspensión se enfrió a 0-10 °C durante 0,5 h y se filtró, se lavó con metanol y se secó para obtener 1-(3,5-diclorofenil)-4-isopropil-2,6,7-trioxabiciclo[2.2.2]octano (5,6 g, 21,5 %) como polvo cristalino blanco.

[0274] Preparación 9: 4-(fe/Y-butil)-1 -(3,5-diclorofenil)-2,6,7-trioxabiciclo[2.2.2]octano

[0277]

[0279] El 4-(tert-butil)-1-(3,5-diclorofenil)-2,6,7-trioxabiciclo[2.2.2]octano puede prepararse de forma análoga al compuesto de la Preparación 8 partiendo de 3,3- dimetilbutanaldehído (1,0 mol) que se añade durante 0,5 h a TA a una solución de hidróxido sódico (60 g, 1,5 mol) en agua (1200 mL) que contiene solución de formaldehído al 37 % (324 g, 4,0 mol). A continuación, la secuencia de reacción se lleva a cabo de forma análoga a la Preparación 8 para proporcionar el 4-(tert-butil)-1-(3,5-diclorofenil)- 2,6,7-trioxabiciclo[2.2.2]octano deseado. En el paso 2 de la síntesis, además del uso de ácido metanosulfónico, puede emplearse de forma similar trifluoruro de boro eterato como catalizador ácido alternativo.

[0280] Ejemplos

[0281] Los Ejemplos 1-47 se llevaron a cabo para explorar el impacto de varios parámetros como se describe a continuación en la reacción del ácido 4-amino-3-hidroxibenzoico con 1,3-dicloro-5-(trimetoximetil)benceno para proporcionar 6-carboxi-1-(3,5-diclorofenil)benzoxazol (tafamidis) que se representa a continuación.

[0284]

[0287] Ejemplo 1

[0288] El ácido 4-amino-3-hidroxibenzoico (0,500 g, 3,26 mmol, 1,0 eq) se disolvió en 8,00 mL de MeOH y a él se añadió 1,3-dicloro-5-(trimetoximetil)benceno (0,86 g, 3,4 mmol, 1,05 eq) en 2,00 mL de MeOH. La mezcla de reacción se agitó a TA durante 6 h y después se calentó a 60 °C y se agitó durante toda la noche. La mezcla de reacción se convirtió en un lodo espeso. A las 23 h, el análisis por HPLC de la mezcla de reacción indicó un 77,29 % de área del producto deseado. La mezcla de reacción se dejó enfriar y se filtró. Los sólidos resultantes se lavaron con MeOH (10 mL) y se secaron al vacío (65 °C, ~50 mbar) para proporcionar 0,531 g (52,8 % de rendimiento aislado) del producto deseado tafamidis como un sólido amarillo rosado.

[0289] Ejemplo 2

[0290] El ácido 4-amino-3-hidroxibenzoico (0,500 g, 3,26 mmol, 1,0 eq) se disolvió en 8,00 mL de MeOH y se le añadió TFA (25,0 µL, 0,33 mmol, 0,1 eq) seguido de 1,3-dicloro-5-(trimetoximetil)benceno (0,86 g, 3,4 mmol, 1,05 eq) en 2,00 mL de MeOH. La mezcla de reacción se agitó a TA durante 6 h y después se calentó a 60 °C y se agitó durante toda la noche. La mezcla de reacción se convirtió en un lodo espeso. A las 23 h, el análisis por HPLC de la mezcla de reacción indicó un 92,19 % de área del producto deseado. La mezcla de reacción se dejó enfriar y se filtró. Los sólidos resultantes se lavaron con MeOH (10 mL) y se secaron al vacío (65 °C, ~50 mbar) para proporcionar 0,834 g (82,9 % de rendimiento aislado) del producto deseadotafamidis como sólido rosa. Ejemplo 3

[0291] El ácido 4-amino-3-hidroxibenzoico (0,500 g, 3,26 mmol, 1,0 eq) se disolvió en 8,00 mL de MeOH y se le añadió TFA (63,0 µL, 0,82 mmol, 0,25 eq) seguido de 1,3-dicloro-5-(trimetoximetil)benceno (0,86 g, 3,4 mmol, 1,05 eq) en 2,00 mL de MeOH. La mezcla de reacción se agitó a TEMPERATURA AMBIENTE durante 6 h y después se calentó a 60 °C y se agitó durante toda la noche. La mezcla de reacción se convirtió en un lodo espeso. A las 23 h, el análisis por HPLC de la mezcla de reacción indicó un 91,29 % de área del producto deseado. La mezcla de reacción se dejó enfriar y se filtró. Los sólidos resultantes se lavaron con MeOH (10 mL) y se secaron al vacío (65 °C, ~50 mbar) para proporcionar 0,818 g (81,3 % de rendimiento aislado) del producto deseado tafamidis como sólido rosa.

[0292] Ejemplo 4

[0293] El ácido 4-amino-3-hidroxibenzoico (0,500 g, 3,26 mmol, 1,0 eq) se disolvió en 8,00 mL de MeOH y se le añadió TFA (63,0 µL, 0,82 mmol, 0,25 eq) seguido de 1,3-dicloro-5-(trimetoximetil)benceno (0,86 g, 3,4 mmol, 1,05 eq) en 2,00 mL de MeOH. La mezcla de reacción se sembró añadiendo tafamidis (50 mg, 0,16 mmol, 0,05 eq). La mezcla de reacción se agitó a TA durante 6 h y después se calentó a 60 °C y se agitó durante toda la noche. La mezcla de reacción se convirtió en una papilla que se agitaba más fácilmente que la papilla obtenida en los Ejemplos 1-3. A las 23 h, el análisis por HPLC de la mezcla de reacción indicó un 92,36 % de área del producto deseado. La mezcla de reacción se dejó enfriar y se filtró. Los sólidos resultantes se lavaron con MeOH (10 mL) y se secaron al vacío (65 °C, ~50 mbar) para proporcionar 0,831 g (82,7 % de rendimiento aislado) del producto deseado como sólido rosa.

[0294] Las reacciones para los Ejemplos 1-3 se monitorizaron a 1h, 2h, 4h, 7h y 23h utilizando cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) con detección UV. Se tomaron muestras de 25 mL de la mezcla de reacción y se diluyeron con 975 mL de DMSO.

[0295] Las condiciones cromatográficas de HPLC (procedimiento A) utilizadas para controlar la reacción son las siguientes:

[0296] Columna: Agilent Zorbax SB-C18, 1,8 mm, 3,0 x 50 mm; Temperatura de columna: 50 °C; Fase móvil A (MPA): 0,05 % TFA en agua; Fase móvil B (MPB): Acetonitrilo;

[0297] Gradiente [Tiempo (min), ( %MPA / %MPB)]: 0 (95,0/5,0); 1 (95,0/5,0); 9 (0/100); 11,5 (0/100); 11,6 (95,0/5,0); 12,0 (95,0/5,0);

[0298] Detección UV; Volumen de inyección: 1 mL; Tiempo de adquisición: 12 min con 2 min post adquisición. Los resultados cromatográficos indican que las reacciones catalizadas por TFA proceden mucho más rápido que la reacción no catalizada y son esencialmente completas después de 4 h mientras que la reacción no catalizada no es completa a las 23 h (ver Tabla 1 abajo). La siembra de la reacción catalizada con tafamidis proporcionó una suspensión de la mezcla de reacción que se agitó más fácilmente que las mezclas de reacción no sembradas.

[0299] Tabla 1:

[0301]

[0304] El material obtenido en el procedimiento se analizó por 1H NMR, 13C y por LCMS. Los resultados obtenidos indican que se obtuvo el producto deseado tafamidis.

[0305] <1>H NMR (500 MHz, DMSO-d<6>) δ<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d<6>) δ 13,20 (s, 1H), 8,18 (dd,J= 1,5, 0,6 Hz, 1H), 8,02 (dd,J= 1,9 Hz, 2H), 7,97 (dd,J =8,4, 1,5 Hz, 1H), 7,86 – 7,81 (m, 2H).

[0306] <13>C NMR (126 MHz, DMSO-d<6>) δ 167,07, 162,35, 150,42, 145,05, 135,58, 132,06, 129,47, 129,16, 126,89, 126,23, 120,36, 112,59.

[0307] El análisis SQ-LCMS del producto obtenido del procedimiento instantáneo se comparó con una muestra estándar de ácido libre de tafamidis y el tiempo de retención, el ion molecular observado (m/z 308,10 (M+H)) y la fragmentación para el producto de este procedimiento fueron consistentes para el ácido libre de tafamidis. Ejemplos 5-23

[0308] Se evaluó la reacción del ácido 4-amino-3-hidroxibenzoico (AHBA) con 1,3-dicloro-5-(trimetoximetil)benceno (Ortoéster = “OE”) en presencia de 0,25 eq TFA como catalizador en varios disolventes según el siguiente procedimiento general.

[0309] AHBA (0,100 g, 0,653 mmol, 1,0 eq) se mezcló en 1,50 mL de disolvente durante aproximadamente 1h y a ello se añadió TFA (12,6 µL, 0,163 mmol, 0,25 eq) y esta mezcla se agitó durante 10 minutos. A continuación, se añadió OE (0,18 g, 0,718 mmol, 1,1 eq) en 0,50 mL de disolvente a la mezcla de AHBA. La mezcla de reacción se calentó a 60 °C. Se tomaron muestras de la mezcla de reacción a 1 h, 5 h y 21,5 h y se analizó por HPLC usando el procedimiento A de HPLC descrito anteriormente y se determinó el % de área del producto deseado tafamidis (véase la Tabla 2 a continuación).

[0310] Tabla 2:

[0313]

[0314]

[0317] Se comprobó que la reacción progresaba rápidamente en varios disolventes. En MeOH, EtOH, IPA, n-BuOH, acetonitrilo, acetona, MEK, EtOAc y 1,2-DME la reacción parecía completarse en una hora o menos. Sin embargo, se observaron impurezas en las reacciones realizadas en EtOH, IPA, n-BuOH, acetona y MEK. Las impurezas en las reacciones en las que EtOH, IPA o n-BuOH son los disolventes pueden ser los correspondientes ésteres etílicos, isopropílicos o n-butílicos del ácido 3,5-diclorobenzoico, respectivamente. Se observó que la reacción procedía más lentamente en los disolventes éter THF, 1,4-dioxano o MTBE, pero no se observaron niveles significativos de impurezas. En los disolventes menos polares anisol, cloroformo, clorobenceno, heptano, ciclohexano y tolueno la reacción procedió mucho más lentamente y en cada una de estas reacciones se observó una cantidad significativa de una impureza con un tiempo de retención de 6,1 minutos. El agua no es un disolvente ideal, ya que el 1,3-dicloro-5-(trimetoximetil)benceno es insoluble en agua y puede hidrolizarse fácilmente.

[0318] Ejemplos 24-28

[0319] En los Ejemplos 24-28 se evaluó el efecto de cantidades variables del ortoéster, 1,3-dicloro-5-(trimetoximetil)-benceno (1,0, 1,5, 2,0, 5,0 o 10,0 equivalentes), sobre la reacción para formar tafamidis.

[0320] Procedimiento general

[0321] A una solución de TFA (0,0050 mL, 0,065 mmol) en MeOH (4 mL) se añadió ácido 4-amino-3-hidroxibenzoico, AHBA (0,200 g, 1,31 mmol) seguido de la adición de 1,3-dicloro- 5-(trimetoximetil)-benceno (el ortoéster). La mezcla de reacción se agitó y se calentó a 60 °C. Se tomaron muestras de la mezcla de reacción a 1 h, 2 h, 5 h y 22 h 40 min y se analizaron por HPLC usando el procedimiento A de HPLC descrito anteriormente y se determinó el % de área del producto deseado tafamidis. Todas las reacciones se produjeron rápidamente y el precipitado se formó en 15 minutos. La progresión de la reacción se siguió controlando la desaparición del pico de AHBA. Cuanto más ortoéster se utilizaba, más rápidamente se completaba la reacción. El ejemplo 24, en el que se utilizó 1,0 eq. del éster orto, no se completó completamente, probablemente como resultado de la hidrólisis de una pequeña cantidad del éster orto a éster metílico del ácido 3,5-diclorobenzoico durante la reacción. Las mezclas de reacción de los Ejemplos 27 y 28, en las que se utilizaron 5,0 y 10,0 eq. de ortoéster, adquirieron un color púrpura. El producto deseado, tafamidis, se aisló por filtración y la torta de filtración se lavó con metanol. El producto aislado obtenido de los Ejemplos 27 y 28 era ligeramente rosado.

[0322] Ejemplo 24: La cantidad de 1,3-dicloro-5-(trimetoximetil)-benceno utilizada fue de 0,260 mL, 1,31 mmol, 1,0 eq. Ejemplo 25: La cantidad de 1,3-dicloro-5-(trimetoximetil)-benceno utilizada fue de 0,390 mL, 1,96 mmol, 1,5 eq. Ejemplo 26: La cantidad de 1,3-dicloro-5-(trimetoximetil)-benceno utilizada fue de 0,521 mL, 2,61 mmol, 2,0 eq. Ejemplo 27: La cantidad de 1,3-dicloro-5-(trimetoximetil)-benceno utilizada fue de 1,30 mL, 6,52 mmol, 5,0 eq. Ejemplo 28: La cantidad de 1,3-dicloro-5-(trimetoximetil)-benceno utilizada fue de 2,60 mL, 13,1 mmol, 10,0 eq. Los resultados de los Ejemplos 24-28 se muestran en la Tabla 3.

[0324] Tabla 3:

[0326]

[0327] Ejemplos 29-33

[0328] Los ejemplos 29-33 se llevaron a cabo para determinar el efecto de cantidades variables (5, 10, 25, 50 y 100 mol % en relación con el AHBA) de ácido trifluoroacético (TFA) en la reacción del AHBA con 1,3-dicloro-5-(trimetoximetil)-benceno.

[0329] Procedimiento general: Se preparó una solución madre de TFA (1,263 mL) en MeOH (50 mL). Se añadió MeOH a 0,200 g de AHBA (1,31 mmol) seguido de la adición de la solución madre de TFA en MeOH para proporcionar un volumen total de 4,0 mL. A esta solución se añadió 1,3-dicloro-5-(trimetoximetil)benceno (0,286 mL, 1,44 mmol, 1,10 eq.). La mezcla de reacción se calentó a 60 °C y se mantuvo a esta temperatura durante toda la noche. La mezcla de reacción se muestreó a las 0,5 h, 1,0 h, 2,0 h, 5,0 h y 21,25 h y se analizó por HPLC procedimiento A y se determinó el área % del producto deseado tafamidis, (ver Tabla 4).

[0330] Tabla 4:

[0332]

[0335] Las reacciones de los ejemplos 29 a 33 procedieron rápidamente con formación de precipitado mientras se calentaban las mezclas de reacción, dando lugar finalmente a mezclas de reacción que se convirtieron en lodos no agitables. Las reacciones de los Ejemplos 29 y 30 procedieron inicialmente a una velocidad más lenta que los Ejemplos 31-33, pero se completaron esencialmente, mientras que las reacciones de los Ejemplos 31-33 tuvieron inicialmente una velocidad de reacción más rápida que los Ejemplos 29-30, pero en todos los Ejemplos 31-33 había AHBA sin reaccionar a las 21,25 horas.

[0336] EJEMPLOS 34-46

[0337] Los ejemplos 34-46 se llevaron a cabo para determinar el efecto de ningún ácido, 10 mol % o 25 mol % de diferentes ácidos (en relación con el AHBA) o 0,75, 1,00 o 1,25 equivalentes de trietilamina en la reacción del AHBA con 1,3-dicloro-5-(trimetoximetil)-benceno.

[0338] Procedimiento general: A 150 mg de AHBA (0,979 mmol, 1,0 eq) se añadieron 2,50 mL de MeOH. A esto se añadió ningún ácido, 10 mol % de ácido, 25 mol % de ácido, o 0,75, 1,0 o 1,25 equivalentes de TEA (véanse más adelante los Ejemplos). A esto se añadió 1,3-dicloro-5- trimetoximetilbenceno (0,246 g, 0,980 mmol, 1,00 equivalentes) en 0,50 mL de MeOH. Las reacciones de los Ejemplos 34-43 se agitaron a TA y las reacciones de los Ejemplos 44- 47 se agitaron a TA durante 6 h y luego se calentaron a 60 °C durante la noche. Se tomaron muestras de la mezcla de reacción a 1 h, 6 h y como se especifica en la Tabla 5 y se analizaron por el procedimiento A de HPLC y se determinó el % de área del producto deseado tafamidis, (véase la Tabla 5 a continuación). Las mezclas de reacción de los Ejemplos 34-39 y 42-43 se filtraron después de 24,25 h y los sólidos se lavaron con MeOH (3 mL) y se secaron al vacío (65 °C, ~50 mbar) para proporcionar tafamidis como un sólido rosa (el rendimiento se indica en la Tabla 5).

[0339] Ejemplo 34: Ácido: TFA, 0,0075 mL, 0,098 mmol, 10 mol %.

[0340] Ejemplo 35: Ácido: TFA, 0,0188 mL, 0,246 mmol, 25 mol %.

[0341] Ejemplo 36: Ácido: HCI en agua (12,2 M) 0,0080 mL, 0,098 mmol, 10 mol %.

[0342] Ejemplo 37: Ácido: HCI en agua (12,2 M) 0,0201 mL, 0,245 mmol, 25 mol %.

[0343] Ejemplo 38: Ácido: HCI en MeOH (1,0 M) 0,098 mL, 0,098 mmol, 10 mol %.

[0344] Ejemplo 39: Ácido: HCI en MeOH (1,0 M) 0,24 mL, 0,24 mmol, 25 mol %.

[0345] Ejemplo 40: Ácido: AcOH, 0,0056 mL, 0,098 mmol, 10 mol %.

[0346] Ejemplo 41: Ácido: AcOH, 0,0140 mL, 0,244 mmol, 25 mol %.

[0347] Ejemplo 42: Ácido: MsOH, 0,0064 mL, 0,098 mmol, 10 mol %.

[0348] Ejemplo 43: Ácido: MsOH, 0,0161 mL, 0,246 mmol, 25 mol %.

[0349] Ejemplo 44: Base: TEA, 0,102 mL, 0,732 mmol, 75 mol %.

[0350] Ejemplo 45: Base: TEA, 0,137 mL, 0,983 mmol, 100 mol %.

[0351] Ejemplo 46: Base: TEA, 0,171 mL, 1,23 mmol, 125 mol %.

[0352] Ejemplo 47: sin ácido ni base añadidos.

[0353] Tabla 5:

[0355]

[0356]

[0360] EJEMPLOS 48-51

[0363]

[0366] Procedimiento: Se prepararon soluciones de TFA (316,25 µL) en MeOH (50 mL) y TFA (316,25 µL) en IPA (50 mL). En el Ejemplo 48, se añadieron 3,20 mL de MeOH al AHBA (0,200 g, 1,31 mmol, 1,0 eq.) seguido de la adición de 0,80 mL de la solución de TFA en MeOH (0,065 mmol, 5 mol %) preparada anteriormente. En el Ejemplo 49, se añadieron 4,0 mL de la solución de TFA en MeOH (0,327 mmol, 25 mol %) al AHBA (0,200 g, 1,31 mmol, 1,0 eq.). En el Ejemplo 50, se añadieron 3,20 mL de IPA al AHBA (0,200 g, 1,31 mmol, 1,0 eq.) seguido de la adición de 0,80 mL de la solución de TFA en IPA (0,065 mmol, 5 mol %) preparada anteriormente. En el Ejemplo 51, se añadieron 4,0 mL de la solución de TFA en IPA (0,327 mmol, 25 mol %) al AHBA (0,200 g, 1,31 mmol, 1,0 eq.). A cada una de las mezclas de los Ejemplos 48-51 se añadió el ortoéster cíclico, 1-(3,5-Diclorofenil)-4-metil- 2,6,7-trioxabiciclo[2.2.2]octano (0,395 g, 1,44 mmol, 1,10 eq.). Las mezclas de reacción se calentaron a 60 °C y se tomaron muestras a las 1, 2, 4 y 19,75 h, y el Área % tafamidis se determinó por HPLC (véase la Tabla 6 a continuación). En el Ejemplo 51, la mezcla de reacción se filtró y los sólidos se lavaron con IPA (4 mL) y se secaron en una estufa de vacío (65 °C, ~50 mbar) durante la noche para proporcionar el producto deseado tafamidis (0,298 g, 74,1 % de rendimiento) como un sólido ligeramente rosado.1H NMR y HPLC del sólido obtenido de la reacción son consistentes para tafamidis.

[0368] Tabla 6:

[0370]

[0371]

[0374] Las reacciones en IPA progresaron más rápidamente que las reacciones en MeOH, y las reacciones en IPA casi se completaron a las 19,75 h.

[0376]

[0378] A 8 mL de IPA a 20 °C con agitación se añadió ácido 4-amino-3-hidroxibenzoico (401 mg, 2,62 mmol) y 1-(3,5-diclorofenil)-4-metil-2,6,7-trioxabiciclo[2.2.2]octano (795 mg, 2,89 mmol) seguido de TFA (30 µL, 0,388 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 85 °C y se agitó a esa temperatura durante 12 h. A continuación, la mezcla se enfrió a 20 °C y se granuló por lotes a 20 °C durante 2 h. El sólido resultante se recogió por filtración y se enjuagó con IPA que se utilizó para lavar el recipiente de reacción (2x4 mL). El sólido rosado resultante se secó al vacío (50 mbar) a 60 °C durante 12 h para proporcionar tafamidis (637 mg, 2,068 mmol, 79 % de rendimiento). Se obtuvieron los resultados de 1H NMR, LC-MS y LC-MS/MS en comparación con el estándar y fueron consistentes para el producto deseado tafamidis. La LC-MS utilizada para monitorizar la finalización de la reacción mostró un 76,7 % de área de pico de tafamidis antes del aislamiento.

[0380]

[0382] A 8 mL de IPA a 20 °C con agitación se añadió ácido 4-amino-3-hidroxibenzoico (402 mg, 2,62 mmol) y 1-(3,5-diclorofenil)-4-etil-2,6,7-trioxabiciclo[2.2.2]octano (832 mg, 2,88 mmol) seguido de TFA (30 µL, 0,388 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 85 °C y se agitó a esa temperatura durante 12 h. A continuación, la mezcla se enfrió a 20 °C y se granuló por lotes a 20 °C durante 2 h. El sólido resultante se recogió por filtración y se enjuagó con IPA que se utilizó para lavar el recipiente de reacción (2x4 mL). El sólido rosado resultante se secó al vacío (50 mbar) a 60 °C durante 12 h para proporcionar tafamidis (564 mg, 1,83 mmol, 69,9 % de rendimiento). 1H NMR, LC-MS y LC-MS/MS en comparación con el estándar fueron consistentes para el producto deseado tafamidis. La LC-MS utilizada para monitorizar la finalización de la reacción mostró un 65,4 % de área de pico de tafamidis antes del aislamiento.

[0384]

[0385] A 8 mL de IPA a 20 °C con agitación se añadió ácido 4-amino-3-hidroxibenzoico (405 mg, 2,65 mmol) y 1-(3,5-diclorofenil)-4-fenil-2,6,7-trioxabiciclo[2.2.2]octano (974 mg, 2,89 mmol) seguido de TFA (30 µL, 0,388 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 85 °C y se agitó a esa temperatura durante 12 h. A continuación, la mezcla se enfrió a 20 °C y se granuló por lotes a 20 °C durante 2 h. El sólido resultante se recogió por filtración y se enjuagó con IPA que se utilizó para lavar el recipiente de reacción (2x4 mL). El sólido rosado resultante se secó al vacío (50 mbar) a 60 °C durante 12 h para proporcionar tafamidis (591 mg, 1,92 mmol, rendimiento del 72,5 %). 1H NMR, LC-MS y LC-MS/MS en comparación con el estándar fueron consistentes para el producto deseado tafamidis. La LC-MS utilizada para monitorizar la finalización de la reacción mostró un 65,5 % de área de pico de tafamidis antes del aislamiento.

[0386] EJEMPLO 55

[0389]

[0392] A 8 mL de IPA a 20 °C con agitación se añadió ácido 4-amino-3-hidroxibenzoico (402 mg, 2,62 mmol) y 2-(3,5-diclorofenil)-2-metoxi-1,3-dioxolano (735 mg, 2,95 mmol) seguido de TFA (30 µL, 0,388 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 85 °C y se agitó a esa temperatura durante 12 h. A continuación, la mezcla se enfrió a 20 °C y se granuló por lotes a 20 °C durante 2 h. El sólido resultante se recogió por filtración y se enjuagó con IPA que se utilizó para lavar el recipiente de reacción (2x4 mL). El sólido rosado resultante se secó al vacío (50 mbar) a 60 °C durante 12 h para proporcionar tafamidis (701 mg, 2,28 mmol, 86,7 % de rendimiento).1H NMR, LC-MS y LC-MS/MS en comparación con el estándar fueron consistentes para el producto deseado tafamidis. La LC-MS utilizada para controlar la finalización de la reacción mostró un 88,9 % de área de pico de tafamidis antes del aislamiento.

[0393] EJEMPLO 56

[0395]

[0397] A 8 mL de IPA a 20 °C con agitación se añadió ácido 4-amino-3-hidroxibenzoico (402 mg, 2,65 mmol) y 1-(3,5-diclorofenil)-2,7,8-trioxabiciclo[3.2.1]octano (761 mg, 2,91 mmol) seguido de TFA (30 µL, 0,388 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 85 °C y se agitó a esa temperatura durante 12 h. A continuación, la mezcla se enfrió a 20 °C y se granuló por lotes a 20 °C durante 2 h. El sólido resultante se recogió por filtración y se enjuagó con IPA que se utilizó para lavar el recipiente de reacción (2x4 mL). El sólido rosado resultante se secó al vacío (50 mbar) a 60 °C durante 12 h para proporcionar tafamidis (679 mg, 2,20 mmol, 84,0 % de rendimiento). 1H NMR, LC-MS y LC-MS/MS en comparación con el estándar fueron consistentes para el producto deseado tafamidis. La LC-MS utilizada para controlar la finalización de la reacción mostró un 78,5 % de área de pico de tafamidis antes del aislamiento.

[0398] EJEMPLO 57

[0399]

[0402] A 8 mL de I PA a 20 °C con agitación se añadió ácido 4-amino-3-hidroxibenzoico (400 mg, 2,61 mmol) y 3-(3,5-diclorofenil)-2,4,10-trioxaadamantano (842 mg, 2,93 mmol) seguido de TFA (30 µL, 0,388 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 85 °C y se agitó a esa temperatura durante 12 h. A continuación, la mezcla se enfrió a 20 °C y se granuló por lotes a 20 °C durante 2 h. El sólido resultante se recogió por filtración y se enjuagó con IPA que se utilizó para lavar el recipiente de reacción (2x4 mL). El sólido resultante se secó al vacío (50 mbar) a 60 °C durante 12 h para proporcionar un sólido (692 mg). El análisis de este sólido mediante 1H NMR y LC-MS indicó que era principalmente 3-(3,5-Diclorofenil)-2,4,10-trioxaadamantano abierto en anillo descrito anteriormente como componente principal y el análisis LC-MS/MS indicó que el producto deseado tafamidis estaba presente como componente menor. Presumiblemente, la tensión de anillo del 3-(3,5-Dichlorophenil)-2,4,10-trioxaadamantane que empieza resulta en la hidrólisis de este material que es favorable a la reacción que lleva a la formación de tafamidis.

[0404]

[0407] A 8 mL de IPA a 20 °C con agitación se añade ácido 4-amino-3-hidroxibenzoico (402 mg, 2,62 mmol) y 1-(3,5-diclorofenil)-4-isopropil-2,6,7-trioxabiciclo[2.2.2]octano (2,88 mmol) seguido de TFA (30 µL, 0,388 mmol). La mezcla de reacción se calienta a 85 °C y se agita a esa temperatura durante 12 h. La mezcla se enfría a 20 °C y se granula por lotes a 20 °C durante 2 h. El sólido resultante se recoge por filtración y se enjuaga con IPA que se utiliza para lavar el recipiente de reacción (2x4 mL). El sólido resultante se seca al vacío (50 mbar) a 60 °C durante 12 h para obtener tafamidis.1H NMR, LC-MS y LC-MS/MS se compara con una muestra estándar de tafamidis.

[0409]

[0412] A 8 mL de IPA a 20 °C con agitación se añade ácido 4-amino-3-hidroxibenzoico (402 mg, 2,62 mmol) y 4-(te/Y-butil)-1-(3,5-diclorofenil)-2,6,7-trioxabiciclo[2.2.2]octano (2,88 mmol) seguido de TFA (30 µL, 0,388 mmol). La mezcla de reacción se calienta a 85 °C y se agita a esa temperatura durante 12 h. La mezcla se enfría a 20 °C y se granula por lotes a 20 °C durante 2 h. El sólido resultante se recoge por filtración y se enjuaga con IPA que se utiliza para lavar el recipiente de reacción (2x4 mL). El sólido resultante se seca al vacío (50 mbar) a 60 °C durante 12 h para obtener tafamidis.1H NMR, LC-MS y LC-MS/MS se compara con una muestra estándar de tafamidis.

Claims (17)

1. REIVINDICACIONES

1. Un procedimiento para preparar 6-carboxi-2-(3,5-diclorofenil)benzoxazol de Fórmula la

el procedimiento comprende hacer reaccionar ácido 4-amino-3-hidroxibenzoico de Fórmula Illa con un compuesto 3,5-diclorofenil-ortoéster de Fórmula II en presencia de un catalizador ácido para proporcionar 6-carboxi-2-(3,5-diclorofenil)benzoxazol de Fórmula la

en la que R<2a>, R<2b>y R<2c>son cada uno independientemente C<1>-C<6>alquil o dos cualesquiera de R<2a>, R<2b>y R<2c>tomados conjuntamente son un C<1>-C<6>alcanodiilo o R<2a>, R<2b>y R<2c>tomados conjuntamente son un C<3>-C<10>alkanetriilo;

y en el que el catalizador ácido se selecciona del grupo que consiste en ácido trifluoroacético, ácido clorhídrico y ácido metanosulfónico.

2. El procedimiento de la reivindicación 1, en el que la reacción del compuesto de Fórmula Illa con el compuesto de Fórmula II para proporcionar el compuesto de Fórmula la se lleva a cabo en un disolvente.

3. El procedimiento de la reivindicación 2, en el que el disolvente se selecciona del grupo que consiste en metanol, etanol, isopropanol, n-butanol, acetona, metiletilcetona, tetrahidrofurano, 1,4-dioxano, t-butilmetiléter, anisol, acetato de etilo, cloroformo, clorobenceno, heptano, ciclohexano, tolueno, acetonitrilo y 1,2-dimetoxietano.

4. El procedimiento de la reivindicación 3, en el que el disolvente se selecciona del grupo que consiste en metanol, isopropanol, acetonitrilo, acetato de etilo, 1,2-dimetoxietano, tetrahidrofurano, t-butil metil éter y 1,4-dioxano.

5. El procedimiento de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que el catalizador ácido es ácido trifluoroacético.

6. El procedimiento de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que la reacción del compuesto de Fórmula Illa con el compuesto de Fórmula II para proporcionar el compuesto de Fórmula la se lleva a cabo durante un periodo de 0,25 horas a 40 horas.

7. El procedimiento de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en el que R<2a>, R<2b>y R<2c>son cada uno de ellos independientemente C<1>-C<6>alquil.

8. El procedimiento de la reivindicación 7, en el que R<2a>, R<2b>y R<2c>son cada uno metilo.

9. El procedimiento de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en el que R<2a>, R<2b>y R<2c>tomados juntos son un C<3>-C<10>alcanetriilo.

10. El procedimiento de la reivindicación 9, en el que el compuesto de Fórmula II es

11. El procedimiento de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10 comprende además la etapa de aislar el compuesto de Fórmula la.

12. El procedimiento de la reivindicación 11, en el que el compuesto de Fórmula la se aísla por filtración.

13. El procedimiento de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12 comprende además el paso de hacer reaccionar el 6-carboxi-2-(3,5-diclorofenil)benzoxazol de Fórmula la con una base farmacéuticamente aceptable para proporcionar una sal farmacéuticamente aceptable de 6-carboxi-2-(3,5-diclorofenil)benzoxazol.

14. El procedimiento de la reivindicación 13, en el que el 6-carboxi-2-(3,5-diclorofenil)benzoxazol se hace reaccionar con meglumina en un disolvente apropiado para proporcionar la sal de 6-carboxi-2-(3,5-diclorofenil)benzoxazol meglumina.

15. Un procedimiento de preparación de un compuesto de fórmula lla-2

en el que R<3>se selecciona del grupo formado por isopropilo, terc-butilo y neo-pentilo que comprende hacer reaccionar un compuesto de fórmula IV con ácido 3,5-diclorobenzoico

en un disolvente apropiado en presencia de un catalizador ácido apropiado.

16. El procedimiento de la reivindicación 15, en el que R<3>es isopropilo o terc-butilo.

17. El procedimiento de la reivindicación 16, en el que el disolvente es tolueno y el catalizador ácido es ácido metanosulfónico.