ES3062607T3 - Cannabinoid composition and application thereof in preparation of drug for treating neurodegenerative diseases such as parkinson's disease and alzheimer's disease - Google Patents

Description

[0001] DESCRIPCIÓN

[0002] Composición de cannabinoides y aplicación de la misma en la preparación de fármacos para el tratamiento de enfermedades neurodegenerativas tales como la enfermedad de Parkinson y la enfermedad de Alzheimer Campo

[0003] Esta invención se refiere al campo de los medicamentos, y más específicamente se refiere a una composición de cannabinoides y una aplicación de la misma en la preparación de un medicamento para tratar enfermedades neurodegenerativas que incluyen la enfermedad de Parkinson y la enfermedad de Alzheimer.

[0004] Antecedentes

[0005] Las enfermedades neurodegenerativas, que incluyen la enfermedad de Parkinson (PD), la enfermedad de Alzheimer (AD) y la demencia con cuerpos de Lewy (DLB), son una carga para la salud cada vez mayor de las poblaciones de edad avanzada. Entre las personas de 80 años o más, una de cada dos padece de AD, cuya tasa de mortalidad solo es superada por los ataques al corazón, los tumores y los accidentes cerebrovasculares. La tasa de prevalencia de la PD es de 1 % ~ 2 % entre las personas de 65 años o más, y alrededor de 4 % entre las personas de 85 años o más.

[0006] A través de la investigación a largo plazo, se revela gradualmente que tales enfermedades neurodegenerativas están relacionadas con trastornos del metabolismo de la dopamina y la disminución inducida por la liberación de células nerviosas secretoras de dopamina. Las placas neuríticas fuera de las neuronas y los enredos fibrilares dentro de las neuronas son cambios patológicos típicos de la AD. Actualmente, la AD se trata principalmente con inhibidor de la colinesterasa. Sin embargo, se ha descubierto que la dopamina como neurotransmisor también participa en el curso de la AD. Los niveles disminuidos de dopamina, L-DOPA y metabolitos en partes tales como el estriado, la amígdala y la sustancia negra pueden verse en la autopsia de pacientes con AD.

[0007] Los cambios patológicos característicos de la PD incluyen la degeneración y muerte de neuronas dopaminérgicas (DA) masivas en la sustancia negra mesencefálica y la formación de cuerpos de Lewy en el citoplasma neuronal residual. Actualmente, las terapias de PD convencionales incluyen principalmente terapias médicas y terapias quirúrgicas. Las terapias médicas incluyen terapia de reemplazo de dopamina, agentes anticolinérgicos, agonistas del receptor de dopamina, inhibidores de la monoaminooxidasa, inhibidores de la catecol-o-metiltransferasa, antagonistas del receptor de glutamato, etc., en donde la levodopa es un medicamento común para la PD. Se cree que la levodopa es el medicamento más eficaz para tratar la EP. Sin embargo, después de un uso a largo plazo, muchos medicamentos, que incluyen la levodopa, no solo provocan una disminución de la eficacia, sino que también conducen a diversas complicaciones tales como el fenómeno de encendido-apagado, el fenómeno de desgaste y la discinesia.

[0008] Por lo tanto, es conveniente un medicamento con una eficacia notable y duradera, y pocos efectos secundarios. Algunas publicaciones describen el CBD y el CBG usados en el tratamiento de enfermedades neurodegenerativas. Una publicación no patentada, titulada "Could the Combination of Two Non-Psychotropic Cannabinoids Counteract Neuroinflammation? Effectiveness of Cannabidiol Associated with Cannabigerol", publicado en Medicina, 2019, describe la combinación CBG-CBD para el uso en el tratamiento de la neuroinflamación. El CBD administrado solo fue más eficaz a una dosis de 5 µM. El CBG en su lugar, dado solo a dosis de 2,5 y 5 µM, no fue eficaz pero en coadministración con CBD, mejoró sus propiedades antiinflamatorias. En particular, el tratamiento combinado previno la activación y translocación de NF-kB, de esta manera inhibió la respuesta inflamatoria con una reducción del TNF-α y el aumento de las citocinas antiinflamatorias IL-10 e IL-37. Los beneficios compartidos por CBD y CBG se mejoran cuando se combinan, lo que hace que el compuesto general sea más eficaz a la dosis de 2,5 µM ya. Además, las combinaciones fueron capaces de regular al alza los marcadores antiapoptóticos tales como Bcl2. Una solicitud de patente CN núm.109963595 A describe una mezcla compleja de cannabinoides adecuados para el uso como ingredientes farmacéuticos activos. La mezcla compleja incluye al menos el primer cannabinoide principal, al menos el primer cannabinoide menor y, opcionalmente, al menos el primer terpeno seleccionado. La solicitud también describe un método para preparar una mezcla compuesta, una composición farmacéutica que comprende la mezcla compuesta, y un método para usar la composición farmacéutica para el tratamiento de enfermedades neurodegenerativas, que incluyen la enfermedad de Alzheimer, la enfermedad de Parkinson, la demencia con cuerpos de Lewy o la enfermedad de Huntington.

[0009] Resumen

[0010] Las modalidades de la presente descripción proporcionan una composición de cannabinoide y una aplicación de la misma en la preparación de un medicamento para tratar enfermedades neurodegenerativas para resolver los problemas anteriores y otros de los medicamentos convencionales para tratar enfermedades neurodegenerativas tales como efectos secundarios graves y disminución de la eficacia después de un uso a largo plazo. La invención se expone en el conjunto de reivindicaciones adjunto. Cualquier referencia en la descripción a métodos de tratamiento se refiere a los compuestos, composiciones farmacéuticas y medicamentos de la presente invención para el uso en un método para el tratamiento del cuerpo humano (o animal) mediante terapia.

[0011] El cannabidiol, o CBD, es un compuesto fenólico no tóxico extraído de flores y hojas de cannabis, que tiene un alto valor añadido y puede aplicarse en productos medicinales, cosméticos y alimentos saludables. Ahora, el CBD se ha usado como un ingrediente farmacéutico activo y se ha desarrollado una pluralidad de medicamentos especializados relacionados con el CBD en los Estados Unidos y el Reino Unido. El CBD, como un ingrediente no adictivo que se encuentra en el cannabis, puede inhibir la influencia del THC en el sistema nervioso humano y tiene actividades farmacológicas tales como antiespasticidad, artritis antirreumática y antia ansiedad. También se ha informado sobre su aplicación para tratar la PD; sin embargo, el efecto terapéutico de usar el CBD solo no es satisfactorio. Aunque también se han estudiado composiciones cannabinoides compuestas, la mayoría de las composiciones incluyen una sustancia adictiva THC. Teniendo en cuenta que los controles sobre el THC se imponen más o menos en varios países, es más importante desarrollar un medicamento terapéutico sin THC novedoso que tenga un buen efecto terapéutico y efectos secundarios menores.

[0012] El cannabinol, o CBN, es un cannabinoide derivado de la oxidación y descomposición del THC, con una psicoactividad significativamente reducida.

[0013] El cannabigerol, o CBG, es un precursor de otros cannabinoides (tales como CBD y THC), caracterizado por un alto efecto terapéutico, sin psicotoxicidad ni otros efectos secundarios. Actualmente, aunque se ha realizado una extensa investigación sobre las aplicaciones de CBD y THC en el tratamiento de enfermedades neurodegenerativas, hay pocos informes y estudios sobre los efectos terapéuticos de CBG.

[0014] En vista de lo anterior, un primer objetivo de la presente descripción es proporcionar una composición de cannabinoide, que comprende: cannabidiol y cannabigerol, en donde una relación en masa del cannabidiol al cannabigerol varía de 1:1 a 1:10, o de 1: 0,3 a 1:0,5, o de 1:0,5 a 1:0,7, o de 1:07 a 1:1.

[0015] Preferentemente, la relación en masa del cannabidiol al cannabigerol varía de 1:1 a 1:3, o de 1:3 a 1:5, o de 1:5 a 1:7.

[0016] Preferentemente, la composición de cannabinoides comprende además cannabinol.

[0017] Preferentemente, la relación en masa del cannabidiol al cannabinol varía de 1:0,05 a 1:1.

[0018] Preferentemente, la relación en masa del cannabidiol al cannabinol varía de 1:0,1 a 1:0,5.

[0019] Preferentemente, una relación en masa entre el cannabidiol, el cannabigerol y el cannabinol es 1:3:0,3. Otro objetivo de la presente descripción es proporcionar una aplicación de la composición de cannabinoide en la preparación de un medicamento para tratar enfermedades neurodegenerativas.

[0020] preferentemente, las enfermedades neurodegenerativas incluyen la enfermedad de Parkinson, la enfermedad de Alzheimer y la demencia con cuerpos de Lewy;

[0021] la composición de cannabinoide se aplica para promover el desarrollo y la madurez de las células neuronales dopaminérgicas, lo que evita la pérdida de las células neuronales dopaminérgicas y mejora la viabilidad de las células neuronales dopaminérgicas;

[0022] la composición de cannabinoide se aplica para mejorar la capacidad de secreción de dopamina de las células neuronales dopaminérgicas.

[0023] Un objetivo adicional de la presente descripción es proporcionar una composición farmacéutica para tratar enfermedades neurodegenerativas, la composición farmacéutica comprende: la composición de cannabinoide, y un portador farmacéuticamente aceptable.

[0024] Una forma de dosificación de la composición farmacéutica incluye: agente oleoso, gránulo, comprimido, polvo, cápsula, pastilla, polvo, líquido oral, gel, pulverización y aerosol.

[0025] Un objetivo aún más de la presente descripción es proporcionar un kit farmacéutico para tratar enfermedades neurodegenerativas, el kit farmacéutico comprende: la composición de cannabinoide.

[0026] En comparación con el estado de la técnica, la presente descripción ofrece los siguientes efectos beneficiosos: (1) La presente descripción adopta el método experimental de inducir la diferenciación de fibroblastos a neuronas dopaminérgicas, en donde al observar la morfología celular, la cantidad y el nivel de expresión relativo del factor relacionado con DA de los fibroblastos inducidos a la diferenciación y cultivados, y al examinar varias combinaciones de cannabinoides comunes y diferentes de estos en base a sus impactos en la inducción de la diferenciación de los fibroblastos en neuronas dopaminérgicas, se encontró que la combinación de CBD+CBG ofreció un efecto óptimo en la mejora de la viabilidad y la capacidad de secreción de dopamina de las células neuronales dopaminérgicas, que puede aplicarse para preparar medicamentos para tratar enfermedades neurodegenerativas, por ejemplo, la enfermedad de Parkinson. Al diseñar experimentos adicionales sobre combinaciones de diferentes proporciones de CBD y CBG, se encontró que cuando la combinación de CBD+CBG ofrece un mejor efecto y seguridad cuando la relación en masa de CBD a CBG varía de 1:1 a 1:5, en donde la relación en masa óptima es 1:3.

[0027] (2) La combinación de CBD+CBG ofrece el efecto óptimo y está libre de la sustancia adictiva THC, lo que reduce así significativamente los efectos secundarios después de usarla como ingrediente medicinal; dado que el abuso de medicamentos no es una preocupación, se elimina una barrera importante en la aplicación. (3) La composición de CBD+CBG proporcionada por la presente descripción puede mejorar significativamente los niveles de expresión relativa de Pitx3 y TH-2, es decir, mejorar la viabilidad de las células neuronales dopaminérgicas y la capacidad de secretar dopamina. Este mecanismo de acción es mejor que las opciones de tratamiento de PD convencionales (por ejemplo, levodopa oral). La administración a largo plazo de la composición de CBD+CBG no produce los efectos secundarios similares a los de la levodopa, y el efecto terapéutico no se degrada. Mientras tanto, debido a diferentes mecanismos de acción, la composición de CBD+CBG puede administrarse teóricamente junto con medicamentos tales como levodopa, lo que logra un mejor efecto terapéutico o retrasa significativamente los efectos secundarios de la administración a largo plazo de levodopa.

[0028] (4) La presente descripción diseña además experimentos sobre combinaciones de diferentes proporciones de CBD+CBG+CBN, y encuentra que la adición de CBN mejora aún más el efecto de la composición de cannabinoides en la activación de la vitalidad de las células neuronales dopaminérgicas, en donde el efecto de activar la vitalidad de las células neuronales dopaminérgicas es el óptimo cuando CBD: CBG: CBN (relación en masa) de es 1:3:0,3.

[0029] Breve descripción de las figuras

[0030] La Figura 1 es una micrografía en lugar de un dibujo, que muestra la morfología celular de los fibroblastos HDF38 diferenciados y cultivados en el 13<er>día en el primer ejemplo de la presente descripción.

[0031] La Figura 2 muestra los niveles de expresión relativa de factores relacionados con DA de grupos celulares respectivos en el primer ejemplo de la presente descripción, en donde:

[0032] A denota el resultado de detección de la expresión de Nurrl;

[0033] B denota el resultado de detección de la expresión de TH-2;

[0034] C denota el resultado de detección de la expresión de Pitx3.

[0035] En las Figuras 1~2, Cont indica el grupo no diferenciado; 6CD indica el grupo de control diferenciado; 6CD+d indica el grupo diferenciado CBD; 6CD+g indica el grupo diferenciado CBG; 6CD t indica el grupo diferenciado THC; 6CD+dg indica el grupo diferenciado CBD CBG; 6CD+dt indica el grupo diferenciado CBD THC.

[0036] La Figura 3 es una micrografía en lugar de un dibujo, que muestra la morfología celular de los fibroblastos HDF38 diferenciados y cultivados en el segundo ejemplo de la presente descripción, en donde:

[0037] A es la imagen de la morfología celular en el 4<to>día de inducción y cultivo;

[0038] B es la imagen de la morfología celular en el 7<mo>día de inducción y cultivo;

[0039] C es la imagen de la morfología celular en el 13<er>día de inducción y cultivo.

[0040] La Figura 4 ilustra los niveles de expresión relativa de factores relacionados con DA de grupos celulares respectivos en el segundo ejemplo de la presente descripción, en donde:

[0041] A denota el resultado de detección de la expresión de Nurrl;

[0042] B denota el resultado de detección de la expresión de TH-2;

[0043] C denota el resultado de detección de la expresión de Pitx3.

[0044] En las Figuras 3~4, Cont indica el grupo no diferenciado; 6CD indica el grupo de control diferenciado; 6CD+dg0,1 indica añadir CBD y CBG con una relación en masa de 1:0,1; 6CD+dg0,3 indica añadir CBD+CBG con una relación en masa de 1:0,3; CBD+dg0,5 indica añadir el CBD y CBG con una relación en masa de 1:0,5; 6CD+dg0,7 indica añadir el CBD y CBG con una relación en masa de 1:0,7; 6CD+dg1 indica añadir el CBD y CBG con una relación en masa de 1:1; 6CD+dg3 indica añadir el CBD y CBG con una relación en masa de 1:3; 6CD+dg5 indica añadir el CBD y CBG con una relación en masa de 1:5; 6CD+dg7 indica añadir el CBD y CBG con una relación en masa de 1:7; 6CD+dg10 indica añadir el CBD+CBG con una relación en masa de 1:10; y 6CD+dt indica el grupo diferenciado CBD+THC.

[0045] La Figura 5 ilustra los niveles de expresión relativa de factores relacionados con DA de grupos celulares respectivos en el tercer ejemplo de la presente descripción, en donde:

[0046] A denota el resultado de detección de la expresión de Nurrl;

[0047] B denota el resultado de detección de la expresión de TH-2;

[0048] C denota el resultado de detección de la expresión de Pitx3.

[0049] En la Figura 5, Cont indica grupo no diferenciado; 6CD indica el grupo de control diferenciado; 6CD+dg1 indica añadir CBD y CBG con una relación en masa de 1:1; 6CD+dg1+n0,1 indica añadir CBD, CBG y CBN con una relación en masa de 1:1:0,1; 6CD+dg1+n0,3 indica añadir el CBD, CBG y CBN con una relación en masa de 1:1:0,3; 6CD+dg1 n0,5 indica añadir el CBD, CBG y CBN con una relación en masa de 1:1:0,5; 6CD+dg3 indica añadir el CBD y CBG con una relación en masa de 1:3; 6CD+dg3+n0,1 indica añadir el CBD, CBG y CBN con una relación en masa de 1:3:0,1; 6CD+dg3+n0,3 indica añadir el CBD, CBG y CBN con una relación en masa de 1:3:0,3; 6CD+dg3+n0,5 indica añadir el CBD, CBG y CBN con una relación en masa de 1:3:0,5.

[0050] Descripción detallada

[0051] En lo sucesivo, la solución técnica de la presente descripción se ilustrará además a través de modalidades con referencia a las figuras adjuntas.

[0052] Las modalidades de la presente descripción proporcionan una composición de cannabinoide, que comprende: cannabidiol y cannabigerol, una relación en masa del cannabidiol al cannabigerol que varía de 1:1 a 1:10; preferentemente, la relación en masa del cannabidiol al cannabigerol varía de 1:1 a 1:3, o de 1:3 a 1:5, o de 1:5 a 1:7; con mayor preferencia, la relación en masa del cannabidiol al cannabigerol es 1:3.

[0053] La composición de cannabinoides comprende además cannabinol, una relación en masa del cannabidiol al cannabinol que varía de 1:0,05 a 1:1; preferentemente, la relación en masa del cannabidiol al cannabinol varía de 1: 0,1 a 1:0,5; con mayor preferencia, la relación en masa entre el cannabidiol, el cannabigerol y el cannabinol es 1:3:0,3.

[0054] Los experimentos revelaron que la composición de cannabinoides proporcionada por la presente descripción podría, por un lado, promover el desarrollo y la madurez de las células neuronales dopaminérgicas, prevenir la pérdida de las células neuronales dopaminérgicas y mejorar la viabilidad de las células neuronales dopaminérgicas; y por otro lado, puede mejorar la capacidad de secreción de dopamina de las células neuronales dopaminérgicas. Por lo tanto, la composición de cannabinoides puede aplicarse para preparar medicamentos para el tratamiento de enfermedades neurodegenerativas, en donde las enfermedades neurodegenerativas incluyen la enfermedad de Parkinson, la enfermedad de Alzheimer y la demencia con cuerpos de Lewy.

[0055] Las modalidades de la presente descripción proporcionan además una composición farmacéutica para tratar enfermedades neurodegenerativas, la composición farmacéutica comprende: la composición de cannabinoide de acuerdo con la presente descripción, y un portador farmacéuticamente aceptable.

[0056] Los portadores farmacéuticamente aceptables apropiados son conocidos por los expertos en la técnica. Las introducciones detalladas sobre los portadores farmacéuticamente aceptables pueden encontrarse en Remington's Pharmaceutical Sciences. Los portadores farmacéuticamente aceptables para las composiciones pueden incluir líquido tal como agua, tampón de fosfato, solución de Ringer, solución salina fisiológica, solución salina equilibrada, glicerina o sorbitol, etc. Adicionalmente, los portadores pueden incluir además sustancias auxiliares, tales como lubricantes, deslizantes, agentes humectantes o emulsionantes, sustancias tampón de pH y estabilizadores, por ejemplo, albúmina. Durante el uso, se aplica una cantidad segura y eficaz de la composición de cannabinoide a mamíferos (tales como seres humanos). Por supuesto, la dosis específica también tendrá en cuenta factores tales como la vía de administración y el estado de salud del paciente, que son conocidos técnicamente por los médicos expertos. Una dosis eficaz precisa para un sujeto depende de la forma del cuerpo y el estado de salud del sujeto, la naturaleza y el grado de la enfermedad, y el agente terapéutico y/o la combinación de agentes terapéuticos seleccionados para la administración. Para una afección dada, la dosis eficaz puede determinarse a través de experimentos de rutina y puede ser determinada por los clínicos.

[0057] Una forma de dosificación de la composición farmacéutica incluye: agente oleoso, gránulo, comprimido, polvo, cápsula, pastilla, polvo, líquido oral, gel, pulverización y aerosol.

[0058] Las modalidades de la presente descripción proporcionan además un kit farmacéutico para tratar enfermedades neurodegenerativas, el kit farmacéutico comprende: la composición de cannabinoide o la composición farmacéutica de acuerdo con la presente descripción.

[0059] Para facilitar la aplicación clínica, la composición farmacéutica de la presente descripción puede incluirse en un aplicador de inyección (tal como una aguja de inyección), y el aplicador de inyección puede incluir una dosis única de la composición farmacéutica. El aplicador de inyección puede incluirse en un kit farmacéutico para facilitar el almacenamiento y el uso. El kit farmacéutico de la presente descripción también puede incluir una instrucción de uso para facilitar el uso adecuado de los expertos en la técnica.

[0060] En lo sucesivo, los procesos experimentales y los resultados experimentales de la presente descripción se ilustrarán en detalle a través de las modalidades con referencia a las figuras adjuntas, que describen en detalle la activación de la composición de cannabinoides de la presente descripción con respecto a las células neuronales dopaminérgicas, y los medicamentos aplicables para preparar enfermedades neurodegenerativas que incluyen la enfermedad de Parkinson, la enfermedad de Alzheimer y la demencia con cuerpos de Lewy. Proteínas de prueba relacionadas en los ejemplos:

[0061] Nurrl: proteína relacionada con el receptor nuclear1, que es un miembro de la superfamilia de receptores nucleares de factores de transcripción intracelular y es fundamental para el mantenimiento del sistema dopaminérgico cerebral. La mutación de este gen está relacionada con disfunciones dopaminérgicas, que incluyen la enfermedad de Parkinson, la esquizofrenia y la psicosis maníaco-depresiva. Se cree que la proteína Nurrl es esencial en el desarrollo del fenotipo dopaminérgico mesencefálico.

[0062] Pitx3: una proteína transcrita del gen PITX3. Pitx3 se expresa específicamente en las neuronas dopaminérgicas cerebrales, que desempeña un papel fundamental en la diferenciación y maduración de las neuronas dopaminérgicas cerebrales, y se cree que es un factor de transcripción esencial para el desarrollo específico de las neuronas dopaminérgicas mesencefálicas.

[0063] TH: La tirosina hidroxilasa, que es la enzima clave en la biosíntesis de dopamina. La PD es una enfermedad neurodegenerativa causada por una deficiencia grave de dopamina en la sustancia negra y el estriado. La regulación de la expresión de TH desempeña un papel importante en el desarrollo y tratamiento de la PD. En el proceso de diferenciación en células neuronales dopaminérgicas, primero, después de que la expresión de Nurrl se mantiene a un cierto nivel, se expresan TH y Pitx3. Como solo la expresión de Nurrl puede inducir la expresión de los genes marcadores TH y Pitx3 para promover una diferenciación y maduración adicional de las células. Por lo tanto, en cierta medida, la expresión de TH y Pitx3 es más importante, porque su capacidad de expresión puede reflejar mejor la vitalidad de las células neuronales dopaminérgicas.

[0064] Ejemplo 1

[0065] Proceso experimental

[0066] 1. Preparación de medios de cultivo

[0067] Medio basal 1: Medio DMEM, que incluye 10 % de FBS y 1 % de penicilina estreptomicina.

[0068] Medio basal 2: Medio neurobasal, que incluye suplemento N-2 al 1 % y penicilina estreptomicina glutamina al 1 %.

[0069] Medio de inducción 1: Medio neurobasal, que incluye suplemento N-2 al 1 %, penicilina estreptomicina glutamina al 1 %, glutamina al 5 %, B27 al 1 %, bFGF a 10 ng/ml, EFG a 20 ng/ml, GDNF a 50 ng/ml, RA a 2 µM; SB431542 a 10 µM; Noggin a 200 ng/ml.

[0070] Medio de inducción 2: Medio neurobasal, que incluye suplemento N-2 al 1 %, penicilina estreptomicina glutamina al 1 %, B27 al 1 %, bFGF a 10 ng/ml, EFG a 20 ng/ml, GDNF a 50 ng/ml, RA a 2 µM; SHH a 100 ng/ml; FGF8b a 100 ng/ml.

[0071] Los medios de cultivo se prepararon de acuerdo con las fórmulas anteriores; los medios de cultivo preparados se esterilizaron después a través de filtros de membrana para su uso posterior.

[0072] 2. Cultivo de fibroblastos HDF38

[0073] Después de que los fibroblastos HDF38 adquiridos se resucitaron y cultivaron, se sometieron a subcultivo en siete platos de cultivo de 6 cm que incluían medio basal 1, en donde cada plato de cultivo incluía 80 000 fibroblastos HDF38, que se cultivaron en una incubadora con 5 % CO<2>a 37 °C. Después de 3 días de cultivo, se realizó la diferenciación inducida de las células.

[0074] 3. Inducción de la diferenciación de fibroblastos HDF38

[0075] Método de experimento: las células se retiraron del medio basal 1 y se lavaron con PBS 3 veces para lavar el medio residual. Después, las células se indujeron a diferenciarse y se cultivaron: en primer lugar, se aplicaron los medios de inducción 1 que incluían los medicamentos a evaluar respectivos, en donde los líquidos se reemplazaron completamente cada 2,5 días; el cultivo en esta etapa duró 7 días; 7 días después, los medios de cultivo se cambiaron a medios de inducción 2 que incluían los medicamentos a evaluar respectivos, en donde los líquidos se cambiaron completamente cada 3 días; el cultivo en esta etapa duró 6 días.

[0076] Durante el proceso de diferenciación inducida, los cambios morfológicos de las células se observaron con un microscopio (ZEISS AXIO observer) todos los días y se fotografiaron para los registros. Los números de serie de los 7 experimentos y los ingredientes de los medios de cultivo se muestran en la Tabla 1 más abajo.

[0077] Tabla 1: Diseño ex erimental de diferentes cannabinoides sus combinaciones

[0079]

[0081] Nota: la solución de CBG y la solución de CBD se adquirieron de SIGMA-ALDRICH, y Δ 9-THC se adquirió de FUJIFILM.

[0082] 4. Detección del nivel de expresión relativa de factores relacionados con DA.

[0083] Después de 13 días de diferenciación y cultivo inducidos, las células se recogieron y el ARN total se extrajo de las células mediante el uso del reactivo general de TRIzol (Tiangen Biotech, Beijing, China), y el ARN total se sintetizó en ADN complementario (ADNc). Los niveles de expresión relativa de los factores relacionados con DA Nurrl, TH-2 y Pitx3 en las células se detectaron mediante PCR cuantitativa en tiempo real con el colorante fluorescente SYBR Green.

[0084] Se usan los siguientes segmentos amplificados con cebadores:

[0085] Secuencia de cebador del gen Nurrl:

[0086] F: 5'- ACTGCCGATTTCAGAAGTGC-3'(SEQ ID NO:1),

[0087] R: 5'- CCGGCCTTTTAAACTGTCTGTG-3'(SEQ ID NO:2);

[0088] Secuencia de cebador del gen TH:

[0089] F: 5'- GAGTACACCGCCGAGGAGATTG-3'(SEQ ID NO:3),

[0090] R: 5'- GCGGATATACTGGGTGCACTGG-3'(SEQ ID NO:4);

[0091] Secuencia de cebador del gen Pitx3:

[0092] F: 5'- AGCACAGCGACTCAGAAAAG-3'(SEQ ID NO:5),

[0093] R: 5'- TTTTTCAGCGAACCGTCCTC-3'(SEQ ID NO:6).

[0094] Las condiciones de la reacción de qRT-PCR incluyeron: 95 °C, 10 minutos; 95 °C, 15 segundos; 30 °C, 1 minuto; 40 ciclos. Tras la terminación de la reacción, se analizaron los ARNm del gen de interés y el gen de referencia.

[0095] (2) Resultados del experimento:

[0096] 1. Influencia de la composición de cannabinoides en la diferenciación inducida por células

[0097] Las morfologías de las células en los respectivos grupos de cultivo se observaron al microscopio. Los resultados se muestran en la Figura 1: los fibroblastos HDF38 se diferenciaron con éxito en neuronas dopaminérgicas, y las células inducidas y cultivadas con la adición de los medicamentos a base de cannabinoides se diferenciaron en un mayor número de neuronas dopaminérgicas. Los resultados anteriores indican que los medicamentos a base de cannabinoides pueden promover la diferenciación de los fibroblastos HDF38 a neuronas dopaminérgicas, en donde el grupo CBD+CBG tiene el mayor número de neuronas dopaminérgicas, lo que indica que la composición de CBD+CBG tiene el efecto más fuerte en la promoción de la diferenciación de fibroblastos a neuronas dopaminérgicas.

[0098] 2. Influencia de la composición de cannabinoides sobre la expresión de factores relacionados con DA Como se muestra en la Figura 2, todos los seis grupos de células diferenciadas y cultivadas habían expresado con éxito los genes marcadores de neuronas dopaminérgicas Nurrl, TH-2 y Pitx3, entre los cuales, los niveles de expresión de Nurrl de los seis grupos de células inducidas fueron todos marcadamente más altos que el grupo de control, lo que indica que en el experimento, los fibroblastos HDF38 se habían inducido con éxito a diferenciarse en neuronas dopaminérgicas (ver A en la Figura 2).

[0099] Después de que Nurrl se expresó con éxito, se expresaron los genes marcadores TH-2 y Pitx3. Las capacidades de expresión de los dos genes pueden reflejar mejor la viabilidad y vitalidad de las neuronas dopaminérgicas. Los resultados mostraron que los niveles de expresión de TH-2 y Pitx3 en el grupo CBD+CBG y el grupo CBD+THC fueron evidentemente superiores a otros grupos, lo que indicó que en comparación con una formulación de un solo medicamento, los ingredientes en cada una de las dos combinaciones de medicamentos tenían un efecto sinérgico entre sí y, por lo tanto, pueden desempeñar un mejor papel en la promoción del desarrollo, la madurez y la capacidad de secreción de las neuronas dopaminérgicas, en donde el nivel de expresión de TH-2 del grupo CBD+CBG es aproximadamente 3 veces mayor que el del grupo CBD+THC, y el nivel de expresión de Pitx3 del primero es aproximadamente 2 veces mayor que el del segundo, lo que muestra que en comparación con el grupo CBD+THC, el grupo CBD+CBG puede mejorar mejor la vitalidad de las células neuronales dopaminérgicas (ver B y C en la Figura 2); además, dado que el CBG no tiene psicoactividad y adicción, el efecto secundario del grupo CBD+CBG se reduce en gran medida.

[0100] Ejemplo 2: Influencia de las composiciones de proporciones diferentes de CBD+CBG en la diferenciación inducida por células

[0101] El Ejemplo 1 reveló que la combinación de CBD CBG tenía el efecto óptimo en la promoción de la viabilidad y la capacidad de secreción de las neuronas dopaminérgicas; sin embargo, el Ejemplo 1 solo ilustró el efecto de la combinación de CBD CBG con una relación en masa de 1:1. Por lo tanto, los experimentos sobre las composiciones de diferentes proporciones de CBD+CBG se diseñaron además para buscar la combinación proporcional que tuviera el efecto óptimo en la activación de las neuronas dopaminérgicas.

[0102] (1) Proceso experimental

[0103] 1. Preparación de medios de cultivo

[0104] El medio basal 1, el medio basal 2, el medio de inducción 1 y el medio de inducción 2 se prepararon de acuerdo con las fórmulas del Ejemplo 1, respectivamente; y después, los medios preparados se esterilizaron a través de filtros de membrana para su uso posterior.

[0105] 2. Cultivo de fibroblastos HDF38

[0106] Después de que los fibroblastos HDF38 adquiridos se resucitaron y cultivaron, se sometieron a subcultivo en doce platos de cultivo de 6 cm que incluían medio basal 1, en donde cada plato de cultivo incluía 80 000 fibroblastos HDF38, que se cultivaron en una incubadora con 5 % CO<2>a 37 °C. Después de 3 días de cultivo, se realizó la diferenciación inducida de las células.

[0107] 3. Inducción de la diferenciación de fibroblastos HDF38

[0108] Las células anteriores se dividieron en 12 grupos para someterse a diferenciación inducida. El método experimental fue el mismo que las operaciones relevantes en el Ejemplo 1. Los diseños de diferentes proporciones de CBD y CBG se mostraron en la Tabla 2 más abajo, en la que se añadió CBD como 1 µg/10 ml de medio.

[0109] Tabla 2: Diseños ex erimentales de diferentes ro orciones de combinaciones de CBD+CBG

[0111]

[0113] Durante el proceso de diferenciación inducida, los cambios celulares se observaron al microscopio (observador ZEISS AXIO) todos los días y se registraron mediante fotos.

[0114] 4. Detección del nivel de expresión relativa de factores relacionados con DA.

[0115] Después de 13 días de diferenciación y cultivo inducidos, las células se recogieron y el ARN total se extrajo de las células mediante el uso del reactivo general de TRIzol (Tiangen Biotech, Beijing, China), y el ARN total se sintetizó en ADN complementario (ADNc). Los niveles de expresión relativa de los factores relacionados con DA Nurrl, TH-2 y Pitx3 en las células se detectaron mediante PCR cuantitativa en tiempo real con el colorante fluorescente SYBR Green.

[0116] (2) Resultados del experimento:

[0117] En la Figura 3, A~C muestran la morfología celular de cada grupo en el 4<to>, 7<mo>y 13<er>día de cultivo inducido, respectivamente. Los resultados muestran que en el 4<to>día de cultivo inducido, la producción de neuronas podría observarse en las células de cada grupo de cultivo, y el número de neuronas aumentó con el aumento de CBG añadido en el medicamento, lo que indica que una alta concentración de CBG puede aumentar la velocidad de inducción de los fibroblastos a diferenciarse en neuronas (Figura 3 A). Sin embargo, después de una semana de cultivo inducido, las células de dos grupos (con una relación en masa de 1: 7 y 1: 10, respectivamente) con una alta concentración de CBG murieron en diferentes grados, mientras que las células de otros grupos de diferenciación inducida no murieron, lo que indica que una alta concentración de CBG causaría toxicidad del medicamento y después conduciría a la muerte celular. Por lo tanto, bajo la concentración de CBD en este experimento, una relación en masa segura de CBD a CBG en una composición de cannabinoide no es superior a 1: 5 (B y C en la Figura 3).

[0118] La Figura 4 es un gráfico comparativo de los niveles de expresión de factores relacionados con DA en grupos de células respectivas. Como se muestra en la Figura 4, cuando las relaciones de masa de CBD y CBG son 1: 1, 1: 3 y 1: 5, respectivamente, los niveles de expresión de TH-2 y Pitx3 son marcadamente más altos que en el grupo de control y en otros grupos experimentales, en donde los niveles de expresión de TH-2 y Pitx3 son los más altos cuando la relación es 1: 3.

[0119] Ejemplo 3: Influencias de diferentes proporciones de composiciones de CBD+CBD+CBN en la diferenciación celular

[0120] El Ejemplo 2 muestra que cuando la relación en masa de CBD a CBG es 1: 1 y 1: 3, se logra un mejor efecto en la activación de las neuronas dopaminérgicas. Por lo tanto, en base a las dos relaciones, se diseñaron además experimentos en diferentes porciones de combinaciones de CBD, CBG y CBN para buscar la combinación y relación óptimas en la activación de neuronas dopaminérgicas.

[0121] (1) Proceso experimental

[0122] 1. Preparación de medios de cultivo

[0123] El medio basal 1, el medio basal 2, el medio de inducción 1 y el medio de inducción 2 se prepararon de acuerdo con las fórmulas del Ejemplo 1, respectivamente; los medios preparados se esterilizaron a través de filtros de membrana para su uso posterior.

[0124] 2. Cultivo de fibroblastos HDF38

[0125] Después de que los fibroblastos HDF38 adquiridos se resucitaron y cultivaron, se sometieron a subcultivo en diez platos de cultivo de 6 cm que incluían medio basal 1, en donde cada plato de cultivo incluía 80 000 fibroblastos HDF38, que se cultivaron en una incubadora con 5 % CO<2>a 37 °C. Después de 3 días de cultivo, se realizó la diferenciación inducida de las células.

[0126] 3. Inducción de la diferenciación de fibroblastos HDF38

[0127] Las células anteriores se dividieron en 10 grupos para someterse a diferenciación inducida. El método experimental fue el mismo que las operaciones relevantes en el Ejemplo 1. Los diseños de diferentes proporciones de CBD y CBG se mostraron en la Tabla 3 más abajo, en la que se añadió CBD como 1 µg/10 ml de medio.

[0128] Tabla 3: Diseños ex erimentales de diferentes ro orciones de combinación de CBD+CBG+CBN

[0130]

[0132] Durante el proceso de diferenciación inducida, los cambios de células se observaron al microscopio (ZEISS AXIO observer) todos los días y se registraron mediante fotos.

[0133] 4. Detección de los niveles de expresión relativa de factores relacionados con DA.

[0134] Después de 13 días de diferenciación y cultivo inducidos, las células se recogieron y el ARN total se extrajo de las células mediante el uso del reactivo general de TRIzol (Tiangen Biotech, Beijing, China), y el ARN total se sintetizó en ADN complementario (ADNc). Los niveles de expresión relativa de los factores relacionados con DA Nurrl, TH-2 y Pitx3 en las células se detectaron mediante PCR cuantitativa en tiempo real con el colorante fluorescente SYBR Green.

[0135] (2) Resultados del experimento

[0136] La Figura 5 es un gráfico comparativo de los niveles de expresión de los factores relacionados con DA en grupos celulares respectivos. Los resultados muestran que la adición de CBN a CBD y CBG podría promover aún más la vitalidad de la composición de cannabinoides en la activación de células neuronales dopaminérgicas. Cuando la relación en masa de CBD a CBG en la composición de CBD+CBG+CBN es 1: 3, los niveles de expresión de TH-2 y Pitx3 son mayores que los de la relación en masa de CBD a CBG es 1: 1, lo que demuestra nuevamente la conclusión del Ejemplo 2. Además, cuando CBD: CBG: La relación de CBN (relación en masa) es 1: 3: 0,3, los niveles de expresión de TH-2 y Pitx3 fueron los más altos, con la vitalidad óptima en la activación de las células neuronales dopaminérgicas.

[0137] La composición 8# del Ejemplo 2 de la presente descripción se probó clínicamente y se observó clínicamente. Los resultados específicos se muestran más abajo:

[0138] 1. Datos clínicos

[0139] Se probaron a 14 pacientes, en donde el paciente más joven tenía 55 años y el paciente más anciano tenía 93 años. Entre los pacientes, había 5 pacientes varones y 9 pacientes hembras; la patogenia más corta fue de 1 año y la más larga fue de aproximadamente 15 años.10 de los pacientes padecieron PD y 4 padecieron AD. Examen clínico: Todos los casos se diagnosticaron de acuerdo con los criterios relevantes de las asociaciones estatales e industriales.

[0140] El medicamento (gota sublingual, 2 ml por botella, cada botella que contiene ingredientes activos de 10 mg de CBD+30 mg de CBG) preparado a partir de la composición de cannabinoide núm. 8 en el Ejemplo 2 de la presente descripción se administró una o dos veces al día, una vez cada 0,5-1 hora antes de acostarse, o una vez respectivamente al mediodía y antes de acostarse. El medicamento se administró por vía sublingual, es decir, se aplicó debajo de la lengua durante aproximadamente 60 segundos y después se tragó. Cuatro semanas constituyen un curso de tratamiento, pero la dosis usada durante el curso varía con las condiciones.

[0141] 3. Criterios de evaluación de los efectos terapéuticos

[0142] Mejora: el paciente, transeúntes o exámenes médicos muestran que los síntomas del paciente se han aliviado y/o sus comportamientos y conciencia autónomos se han mejorado.

[0143] Mejora notable: el paciente, los transeúntes o los exámenes médicos muestran que los síntomas del paciente se alivian notablemente, y/o sus comportamientos y conciencia autónomos se mejoran notablemente (por ejemplo, los síntomas de la enfermedad de Parkinson se mejoran de la etapa 4 a la etapa 3).

[0144] Imperceptible: El paciente, el testigo o los exámenes médicos niegan que los síntomas se hayan aliviado o que sus comportamientos y conciencia autónomos se hayan mejorado después de tomar el medicamento.

[0145] 5. Resultado del tratamiento

[0146] Aproximadamente el 29 % de los pacientes (4 pacientes) experimentaron una mejora inicial de los síntomas dentro de la primera semana de tomar el medicamento, el 64 % de los pacientes (9 pacientes) experimentaron una mejora de los síntomas dentro de las 2 semanas, y el 79 % de los pacientes (11 pacientes) experimentaron una mejora notable de los síntomas dentro del primer ciclo de tratamiento. Hasta ahora, aproximadamente el 14 % de los pacientes (2 pacientes) no tienen un efecto de mejora notable, de los cuales 1 paciente lo administró durante 2 semanas y el otro lo administró durante 5 semanas. La tasa de mejora fue de aproximadamente 86 %.

[0147] No se encontraron efectos secundarios evidentes en todos los pacientes, y aproximadamente el 43 % de los pacientes (6 pacientes) informaron síntomas de somnolencia parcial.

[0148] Los casos enumerados en la presente descripción se proporcionaron todos para probar preliminarmente el efecto de la presente descripción en la etapa actual, y los pacientes se ofrecieron como voluntarios para tomar el medicamento. Debido a las características de las enfermedades neurodegenerativas tales como la enfermedad de Parkinson y la enfermedad de Alzheimer, la descripción de la historia clínica y su efecto se basó en la descripción de los pacientes o sus familias, que podrían ser subjetivas o no lo suficientemente rigurosas, pero los casos y los efectos terapéuticos son todos reales. Como los efectos del caso no fueron descritos por los profesionales en el campo médico, los efectos técnicos de varios aspectos de los casos no representan resultados de diagnóstico médico autorizados.

[0149] Caso 1

[0150] GAO: Un hombre de 85 años de edad, un médico jubilado de Rizhao, Shandong, fue diagnosticado con la enfermedad de Parkinson en 2017.

[0151] Antecedentes médicos: comenzó en 2012, movimiento lento, expresión facial y después el síntoma se volvió cada vez más grave. Se encontró con dificultades en el movimiento fino, y sus extremidades rígidas y dobladas. Solo puede dar pasos pequeños y rotos al caminar. También sufrió de estreñimiento, cabeza y cara grasosas, etc. En 2017, el examen de hospitalización: cara enmascarada, marcha agitada, temblor estático de las manos, tensión muscular excesiva de las extremidades, fuerza muscular de las extremidades de grado 5. Se le diagnosticó la enfermedad de Parkinson. Después de tomar el medicamento de acuerdo con el consejo del médico durante 4 años, el temblor ha disminuido, pero la expresión facial no mejoró y se volvió gradualmente grave, con salivación grave, caminar lento y difícil, incapaz de caminar sin muletas, e incapacidad autoinformada para caminar.

[0152] Tratamiento: Desde julio de 2021, tomar el medicamento preparado por la composición núm.8 en el Ejemplo 2 de la presente descripción, una botella a la vez antes de irse a la cama. Él había tomado el medicamento de forma continua durante 5 semanas.

[0153] Resultados: Después de tomar el medicamento durante una semana, los ojos apagados del paciente mejoraron, sus expresiones faciales fueron más ricas. A veces puede caminar sin muletas. El síntoma de sus extremidades y movimientos finos mejoró evidentemente, y recuperó su capacidad de autocuidado de cortar las uñas y pelar las pastillas después de aproximadamente dos años de interrupción. El paciente está somnoliento después de tomar el medicamento. Bebe té para aliviar la somnolencia.

[0154] Caso 2

[0155] XU: Una mujer de 83 años de edad, de Zhengzhou, provincia de Henan, fue diagnosticada con la enfermedad de Parkinson en 2019.

[0156] Antecedentes médicos: Desde 2014, el movimiento de la paciente se ha ralentizado gradualmente, sus extremidades se han vuelto rígidas, su tiempo de sueño ha disminuido y experimentó trastornos del sueño y otros fenómenos. Desde 2018, su situación había empeorado, y le resultaba difícil caminar, enunciar y pronunciar palabras, y la lengua no era fácil de controlar. En 2019, le diagnosticaron la enfermedad de Parkinson.

[0157] Tratamiento: Desde julio de 2021, tomar el medicamento preparado por la composición núm.8 en el Ejemplo 2 de la presente descripción, una botella a la vez antes de irse a la cama. Ella había tomado el medicamento de forma continua durante 3 semanas.

[0158] Resultados: La capacidad de autocontrol del paciente comenzó a mejorar en la segunda semana después de tomar el medicamento. Los síntomas de la salivación y la lengua incontroladas han mejorado, y el tiempo de caminar de pie se ha incrementado. El tiempo de caminar solo ha aumentado de menos de 10 minutos a más de 20 minutos. Su tiempo de sueño se ha incrementado y la emoción es estable.

[0159] Caso 3

[0160] JI: Una mujer de 93 años, de Heilongjiang, fue diagnosticada con la enfermedad de Parkinson a principios de 2021.

[0161] Antecedentes médicos: Desde 2015, aparecieron la rigidez de las extremidades y el temblor involuntario. En 2020, la enfermedad se agravó evidentemente. No pudo caminar de forma independiente, permaneció en la cama durante mucho tiempo, a menudo con las extremidades encogidas, básicamente incapaz de realizar movimientos finos tales como comer y tomar medicamentos, emocionalmente inestable e irritable. A principios de 2021, le diagnosticaron la enfermedad de Parkinson.

[0162] Tratamiento: Desde mayo de 2021, tomar el medicamento preparado por la composición núm.8 en el Ejemplo 2 de la presente descripción, una botella a la vez antes de irse a la cama. Ella había tomado el medicamento de forma continua durante 11 semanas.

[0163] Resultados: En la segunda semana después de tomar el medicamento, la rigidez de las extremidades se alivió, la frecuencia y amplitud del temblor involuntario se redujeron y se redujo el espasmo de las extremidades. Después de 11 semanas de administración, el paciente pudo permanecer de pie autónomamente contra la pared durante casi 5 minutos. Articular claramente, pronunciar correctamente y hablar con las personas tiende a ser lo normal. El tiempo de sueño aumentó y la emoción fue estable.

[0164] Caso 4

[0165] DAI: Mujer, 81 años de edad, malaya, diagnosticada con enfermedad de Alzheimer en 2017.

[0166] Antecedentes médicos: Desde 2014, el paciente ha experimentado un deterioro grave de la memoria, no puede abrir la puerta con una llave, le gusta esconder cosas y es desconfiado. Desde 2017, la enfermedad ha empeorado, con deterioro cognitivo. No puede reconocer a sus familiares y amigos, y no puede recordar lo que acaba de hacer. Se le trató con tratamientos no farmacológicos tales como tratamiento dietético y tratamiento de estilo de vida, complementado con Donepezilo (Aricept). Después de un año sin mejoras evidentes, se adoptaron en su lugar la medicina herbal y la dietoterapia, pero el efecto seguía siendo insatisfactorio.

[0167] Tratamiento: Desde mayo de 2021, tomar el medicamento preparado por la composición núm.8 en el Ejemplo 2 de la presente descripción, una botella a la vez antes de irse a la cama. Ella había tomado el medicamento de forma continua durante 11 semanas.

[0168] Resultados: Después de tomarlo durante una semana, la memoria a corto plazo de la paciente comenzó a mejorar y ella pudo charlar con la enfermera normalmente. Después de aproximadamente 3-4 semanas de uso, su memoria comenzó a recuperarse y puede reconocer a su familia y amigos. El medicamento se había administrado durante 11 semanas, y la recuperación fue buena, y se puede recordar su memoria de hace un año. No se informó ninguna reacción adversa.

[0169] Caso 5

[0170] SHEN: mujer, de 68 años, de Guangdong, fue diagnosticada con la enfermedad de Alzheimer a principios de 2021.

[0171] Antecedentes médicos: El paciente fue ingresado en el hospital a principios de 2021 debido a "pérdida de memoria durante más de 3 años, el síntoma se agravó durante uno y medio años". No se encontraron anomalías evidentes en el examen de orina y sangre de rutina, el examen de siete marcadores tumorales y la lesión miocárdica cuádruple. TC cráneo-cerebral: Infarto lacunar múltiple en ganglios basales bilaterales y corona radiata; Degeneración de la sustancia blanca; Atrofia cerebral. Resonancia magnética cerebral: infarto lacunar, degeneración de la sustancia blanca, atrofia cerebral. No hubo anomalía evidente en otras inspecciones. Después de ser diagnosticado con la enfermedad de Alzheimer, el paciente usó medicamentos tales como cápsula de Rivastigmina y Memantina durante aproximadamente 4 meses, sin mejora evidente. Tratamiento: Desde mayo de 2021, tomar el medicamento preparado por la composición núm.8 en el Ejemplo 2 de la presente descripción, una botella a la vez antes de irse a la cama.

[0172] Resultados: En la 3<ra>semana después de tomar el medicamento, la memoria instantánea de los pacientes se mejoró evidentemente, y ella podía recordar los eventos en los últimos 3 días y los eventos principales en la última 1 semana. Después de tomarlo durante 11 semanas, su memoria mejoró evidentemente y los obstáculos de la conversación y la memoria diaria se redujeron evidentemente. Ella comenzó a dormir durante el día, con somnolencia leve.

[0173] Caso 6

[0174] WANG: Hombre, 87 años, malayo, diagnosticado con enfermedad de Alzheimer en 2013.

[0175] Antecedentes médicos: Desde 2007, el paciente ha experimentado pérdida de memoria y otros fenómenos. En 2013, al paciente se le diagnosticó la enfermedad de Alzheimer y se inició el tratamiento. En los dos primeros años de tratamiento, el deterioro cognitivo, como el deterioro de la memoria, se alivió, pero el efecto disminuyó rápidamente y la afección continuó deteriorándose. Durante aproximadamente diez años, el tratamiento ha desempeñado un cierto papel en el retraso del deterioro de los síntomas de los pacientes, pero nunca ha mejorado las condiciones de los pacientes.

[0176] Cuando se conoció al paciente por primera vez, no respondió a nuestros saludos y no pudo comprender la mayoría de la semántica del lenguaje, como "ponlo debajo de la lengua y mantenlo" y otras instrucciones de medicamentos. Normalmente, cuando estaba en la cama o en una silla de ruedas, podía ponerse de pie, pero tenía poca capacidad de autocontrol y básicamente ninguna capacidad de autocuidado. Poca capacidad de identificación, incapaz de reconocer a sus seres queridos.

[0177] Tratamiento: Desde junio de 2021, tomar el medicamento preparado por la composición núm.8 en el Ejemplo 2 de la presente descripción, una botella a la vez antes de irse a la cama.

[0178] Resultados: Después de tomarlo durante una semana, el paciente se volvió sobrio y comprendió el idioma, como las instrucciones de medicación. Después de tomarlo durante 9 semanas, la recuperación es buena. Podía charlar libremente con sus vecinos de abajo y presentar su ropa y compras. Comenzó a recordar el número de teléfono móvil de su nieto, y la mayoría de las comunicaciones comunes se han vuelto normales. En resumen, la presente descripción aplica el método experimental de inducir la diferenciación de fibroblastos a neuronas dopaminérgicas para detectar las influencias de CBD, CBG, THC y varias de sus combinaciones en la diferenciación inducida de fibroblastos a neuronas dopaminérgicas, y se encuentra que una composición de CBD+CBG es óptima para promover la diferenciación inducida a neuronas dopaminérgicas, puede mejorar significativamente la viabilidad y la capacidad de secreción de dopamina de las neuronas dopaminérgicas, y por lo tanto puede aplicarse a medicamentos para tratar enfermedades neurodegenerativas, tales como la enfermedad de Parkinson; además, debido a que está libre de la sustancia adictiva THC, los efectos secundarios se reducen significativamente. Se diseñaron experimentos adicionales sobre diferentes proporciones de combinación de CBD CBG, y se encontró que cuando la relación en masa de CBD y CBG fue 1: 1 ~ 1: 5, la composición de cannabinoides podría mejorar significativamente la vitalidad de las células neuronales dopaminérgicas, y cuando la relación fue 1: 3, el efecto fue el mejor. Se diseñaron además experimentos en diferentes porciones de la combinación de CBD CBG CBN, y se descubrió que la adición de CBN podría mejorar aún más el efecto de la composición de cannabinoides en la activación de la vitalidad de las células neuronales dopaminérgicas. Cuando CBD: CBG: CBN (relación en masa) de es 1: 3: 0,3, el efecto de activar la vitalidad de las células neuronales dopaminérgicas es el óptimo.

[0180] Aunque el contenido de la presente descripción se ha descrito en detalle a través de las modalidades preferidas anteriores, debe entenderse que las representaciones anteriores no se considerarán limitaciones de la presente descripción. Por lo tanto, el alcance de protección de la presente descripción debe limitarse por las reivindicaciones adjuntas.

Claims (12)

1. REIVINDICACIONES

1. Una composición de cannabinoide para el uso en el tratamiento de enfermedades neurodegenerativas, que comprende: cannabidiol y cannabigerol, en donde una relación en masa del cannabidiol al cannabigerol varía de 1:1 a 1:10;

en donde las enfermedades neurodegenerativas se seleccionan del grupo que consiste en la enfermedad de Parkinson, la enfermedad de Alzheimer y la demencia con cuerpos de Lewy.

2. La composición de cannabinoide para el uso de acuerdo con la reivindicación 1, en donde la relación en masa del cannabidiol al cannabigerol varía de 1:1 a 1:3, o de 1:3 a 1:5, o de 1:5 a 1:7 o de 1:7 a 1:10.

3. La composición de cannabinoide para el uso de acuerdo con la reivindicación 1, en donde la relación en masa del cannabidiol al cannabigerol es 1:3.

4. La composición de cannabinoide para el uso de acuerdo con la reivindicación 1, en donde la composición de cannabinoide comprende además cannabinol.

5. La composición de cannabinoide para el uso de acuerdo con la reivindicación 4, en donde la relación en masa del cannabidiol al cannabinol varía de 1:0,05 a 1: 1.

6. La composición de cannabinoide para el uso de acuerdo con la reivindicación 4, en donde la relación en masa del cannabidiol al cannabinol varía de 1:0,1 a 1:0,5.

7. La composición de cannabinoide para el uso de acuerdo con la reivindicación 4, en donde una relación en masa entre el cannabidiol, el cannabigerol y el cannabinol es 1:3:0,3.

8. Una composición de cannabinoides, que comprende: cannabidiol y cannabigerol, en donde una relación en masa del cannabidiol al cannabigerol varía de 1:7 a 1:10 y no es 1:7.

9. Una composición de cannabinoide, que comprende: cannabidiol, cannabigerol y cannabinol, en donde una relación en masa del cannabidiol al cannabinol varía de 1:0,05 a 1:1, o 1:0,1 a 1:0,5, o 1:0,3; en donde una relación en masa entre el cannabidiol, el cannabigerol y el cannabinol es 1:3:0,3.

10. Una composición farmacéutica para el uso en el tratamiento de enfermedades neurodegenerativas, en donde la composición farmacéutica que comprende: la composición de cannabinoide de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, y un portador farmacéuticamente aceptable;

en donde las enfermedades neurodegenerativas se seleccionan del grupo que consiste en la enfermedad de Parkinson, la enfermedad de Alzheimer y la demencia con cuerpos de Lewy.

11. La composición farmacéutica para el uso de acuerdo con la reivindicación 10, en donde una forma de dosificación de la composición farmacéutica incluye: agente oleoso, gránulo, comprimido, polvo, cápsula, pastilla, polvo, líquido oral, gel, pulverización y aerosol.

12. Un kit farmacéutico para el uso en el tratamiento de enfermedades neurodegenerativas, el kit farmacéutico comprende: la composición de cannabinoide de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7;

en donde las enfermedades neurodegenerativas se seleccionan del grupo que consiste en la enfermedad de Parkinson, la enfermedad de Alzheimer y la demencia con cuerpos de Lewy.