ES3064943T3

ES3064943T3 - Combination of a pd-1 antagonist, a vegfr/fgfr/ret tyrosine kinase inhibitor and a cbp/beta-catenin inhibitor for treating cancer

Info

Publication number: ES3064943T3
Application number: ES20811814T
Authority: ES
Inventors: Yoichi Ozawa; Yasuhiro Funahashi; Yu Kato
Original assignee: MSD International Holdings GmbH; Eisai R&D Management Co Ltd; Merck Sharp and Dohme LLC
Current assignee: MSD International Holdings GmbH; Eisai R&D Management Co Ltd; Merck Sharp and Dohme LLC
Priority date: 2019-10-29
Filing date: 2020-10-28
Publication date: 2026-04-30
Anticipated expiration: 2040-10-28
Also published as: CN115023227A; US20220409724A1; MX2022005056A; BR112022007971A8; EP4051278B1; KR20220092540A; CA3155672A1; EP4051278A1; AU2020374883A1; JP2023500575A; WO2021086909A1; BR112022007971A2; TW202137984A; CN115023227B; JP7691418B2

Abstract

La presente divulgación describe una terapia combinada que comprende un antagonista del receptor de muerte programada 1 (PD-1), un lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y (6S,9aS)-N-bencil-8-({6-[3-(4-etilpiperazin-1-il)azetidin-1-il]piridin-2-il}metil)-6-(2-fluoro-4-hidroxibencil)-4,7-dioxo-2-(prop-2-en-1-il)hexahidro-2H-pirazino[2,lc][1,2,4]triazina-1(6H)-carboxamida (E7386) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y el uso de las terapias combinadas para el tratamiento de un cáncer. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

[0001] DESCRIPCIÓN

[0002] Combinación de un antagonista de PD-1, un inhibidor de la tirosina cinasa VEGFR/FGFR/RET y un inhibidor de la CBP/β-catenina para el tratamiento del cáncer

[0003] Campo técnico

[0004] Se divulgan terapias combinadas útiles para el tratamiento del cáncer. Se divulga una terapia combinada que comprende un antagonista de una proteína de muerte programada 1 (PD-1), lenvatinib, un inhibidor de la tirosina cinasa multireceptor (multi-RTK), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y E7386, un inhibidor de CBP/β-catenina que inhibe una interacción entre CBP y β-catenina, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En realizaciones de la invención el antagonista de PD-1 no es atezolizumab. También se divulga un agente terapéutico tumoral que contiene una combinación de un anticuerpo anti-PD-1, lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y E7386 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. La invención se describe en las reivindicaciones adjuntas.

[0005] Antecedentes de la invención

[0006] La PD-1 está reconocida como un actor importante en la regulación inmunitaria y el mantenimiento de la tolerancia periférica. El PD-1 se expresa moderadamente en las células T, B y T natural killer (NKT) sin tratamiento previo y se regula de forma ascendente mediante la señalización del receptor de células T/B en linfocitos, monocitos y células mieloides (1).

[0007] Dos ligandos conocidos de la PD-1, la PD-L1 (B7-H1) y la PD-L2 (B7-DC), se expresan en los cánceres humanos que surgen en diversos tejidos. En grandes conjuntos de muestras de, por ejemplo, cáncer de ovario, renal, colorrectal, de páncreas, de hígado y melanoma, se demostró que la expresión de PD-L1 se correlacionaba con un mal pronóstico y una menor supervivencia global independientemente del tratamiento posterior (2-13). Del mismo modo, se descubrió que la expresión de PD-1 en los linfocitos infiltrantes del tumor marcaba células T disfuncionales en el cáncer de mama y el melanoma (14-15) y se correlacionaba con un mal pronóstico en el cáncer renal (16). Se ha propuesto que las células tumorales que expresan PD-L1 interactúan con las células T que expresan PD-1 para atenuar la activación de las células T y la evasión de la vigilancia inmunitaria, contribuyendo así a una respuesta inmunitaria deficiente contra el tumor. Por lo tanto, un anticuerpo dirigido contra el receptor PD-1 o contra el ligando PD-L1 puede inhibir la unión entre ambos, dando lugar a un aumento de la acción inmunitaria sobre las células tumorales (23).

[0008] Varios anticuerpos monoclonales que inhiben la interacción entre PD-1 y uno o ambos de sus ligandos PD-L1 y PD-L2 han sido aprobados para su uso por la FDA y otros adicionales están en desarrollo clínico para el tratamiento del cáncer. Se ha propuesto que la eficacia de dichos anticuerpos podría potenciarse si se administraran en combinación con otras terapias contra el cáncer aprobadas o experimentales, por ejemplo, radiación, cirugía, agentes quimioterapéuticos, terapias dirigidas, agentes que inhiben otras vías de señalización que se encuentran desreguladas en los tumores y otros agentes potenciadores del sistema inmunitario.

[0009] El pembrolizumab es un anticuerpo anti-PD-1, que está aprobado en los Estados Unidos como monoterapia o en combinación con otros agentes determinados, para el tratamiento de varios tipos de tumores, como el melanoma, el cáncer de pulmón no microcítico (CPNM), el cáncer de pulmón microcítico (CPM), el cáncer de células escamosas de cabeza y cuello (CCECC), linfoma de Hodgkin clásico (cHL), linfoma mediastínico primario de células B grandes (PMBCL), carcinoma urotelial, cáncer de alta inestabilidad de microsatélites, cáncer gástrico, cáncer de esófago, cáncer de cuello uterino, carcinoma hepatocelular (CHC), carcinoma de células de Merkel (CCM), carcinoma de células renales (CCR) y carcinoma de endometrio.

[0010] Las tirosina cinasas intervienen en la modulación de la señalización de los factores de crecimiento, por lo que son un objetivo importante de las terapias contra el cáncer. El lenvatinib es un inhibidor oral de los receptores tirosina cinasa (RTK) que inhibe selectivamente las actividades cinasas de los receptores del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) (VEGFR1 (FLT1), VEGFR2 (KDR) y VEGFR3 (FLT4)), y los receptores del factor de crecimiento de fibroblastos (FGF) FGFR1, 2, 3 y 4, además de otros RTK relacionados con la vía proangiogénica y oncogénica (incluido el receptor del factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF) PDGFRα; KIT; y el protooncogen (RET) implicados en la proliferación tumoral. En particular, el lenvatinib posee un nuevo modo de unión (tipo V) al VEGFR2, como se ha confirmado mediante el análisis estructural de cristales de rayos X, y presenta una inhibición rápida y potente de la actividad cinasa, de acuerdo con el análisis cinético.

[0011] El nombre químico del lenvatinib es 4-[3-cloro-4-(ciclopropilaminocarbonil) aminofenoxi]-7-metoxi-6-quinolincarboxamida, que tiene la estructura:

[0012]

[0014] El mesilato de lenvatinib está aprobado en Estados Unidos como mínimo (a) para el tratamiento de pacientes con cáncer de tiroides diferenciado localmente recidivante o metastásico, progresivo y refractario al yodo radiactivo, (b) en combinación con everolimus, para el tratamiento de pacientes con carcinoma de células renales (CCR) avanzado tras una terapia antiangiogénica previa, (c) para el tratamiento de primera línea de pacientes con carcinoma hepatocelular (CHC) irresecable y (d) en combinación con pembrolizumab, para el tratamiento de pacientes con carcinoma de endometrio avanzado que no presente inestabilidad de microsatélites alta (MSI-H) o deficiencia de la reparación de apareamientos erróneos (dMMR, por sus siglas en inglés), que tengan progresión de la enfermedad tras una terapia sistémica previa y no sean candidatas a cirugía curativa o radiación. El mesilato de lenvatinib se encuentra en fase de investigación clínica para su uso como monoterapia o terapia combinada con anticuerpos anti-PD-1 para otros tipos de tumores, entre los que se incluyen el cáncer de vejiga, el melanoma, el cáncer de células escamosas de cabeza y cuello, el carcinoma urotelial, el cáncer de mama, el cáncer gástrico, el cáncer de ovario, el cáncer colorrectal (CRC), el glioblastoma y el cáncer del tracto biliar.

[0015] Se ha observado que algunas células cancerosas tienen β-catenina activada por la señal Wnt. Los inhibidores de la vía de señales Wnt se han estudiado como agentes anticancerígenos; sin embargo, ninguno se ha puesto en práctica.

[0016] Un inhibidor de CBP/β-catenina en desarrollo clínico como agente anticanceroso, es menos tóxico en humanos que los inhibidores convencionales de Wnt que tienen otros mecanismos (J. Clin. Oncol. 31, 2013 (suppl; abstr 2501)). Como mecanismo de la misma, se considera que, tras la inhibición de la unión entre la CBP (proteína de unión a CREB) y la β-catenina, la P300 con alta similitud a la CBP se une a la β-catenina en lugar de a la CBP, y dicho cambio suprime la proliferación del cáncer e induce la diferenciación (The EMBO Journal 2013, 32:. 1977-1989).

[0017] Se ha demostrado que la principal vía del cáncer de conductos biliares puede ser la proliferación tumoral por la vía Wnt-β-catenina; un inhibidor de CBP/β-catenina, ICG-001, puede suprimir la proliferación tumoral (J. Clin. Invest.

[0018] 2015 Mar.2; 125(3): 1269-85. doi: 10.1172/JC176452).

[0019] Los inhibidores Wnt convencionales bloquean las señales basándose en mecanismos de inhibición de la producción del ligando Wnt, bloquean la función del receptor, promueven la degradación de la β-catenina y similares. Debido a estos mecanismos, se producen problemas de toxicidad en los estudios preclínicos y en los ensayos clínicos, y el desarrollo se ha interrumpido en su mayor parte. Las vías de señalización Wnt son vías muy conservadas y están asociadas a trastornos e implican a la β-catenina. La vía Wnt/β-catenina es importante para el desarrollo normal. Sin restringirse a la teoría, se cree que la unión CBP/β-catenina reduce la señalización Wnt, mientras que se cree que p300/β-catenina activa la señalización Wnt.

[0020] Además, también se sabe que la β-catenina suprime la activación de las células T al suprimir su diferenciación (J. Immunol. 2011; 186:784-790). Por lo tanto, se considera que un inhibidor de CBP/β-catenina promueve la diferenciación de las células T y su activación.

[0021] El E7386, cuyo nombre químico es (6S,9aS)-N-bencil-8-({6-[3-(4-etilpiperazin-1-il)azetidin-1-il]piridin-2-il}metil)-6-(2-fluoro-4-hidroxibencil)-4,7-dioxo -2-(prop-2-en-1-il)hexahidro-2H-pirazino[2,1-c][1,2,4]triazina-1(6H)-carboxamida, es un inhibidor potencial de CBP/β-catenina que tiene la estructura:

[0024]

[0026] El E7386 puede exhibir un efecto antitumoral por sí solo (Pat. de EE.UU.).10.259.817 y 9.174.998) o en una terapia combinada con un anticuerpo anti-PD-1 (Pub. de patente de EE.UU.).2018/0185395) o con lenvatinib (Pub. de patente canadiense 3044658).

[0027] El documento WO2016141218 divulga el uso de un antagonista de PD-1 y un inhibidor multi-RTK para su uso en el tratamiento del cáncer. Cancer Res. 2017; 77:5172 divulga el uso de E7386 y lenvatinib para su uso en el tratamiento del cáncer.

[0028] En general, los agentes terapéuticos tumorales no suelen ser eficaces para todos los pacientes cuando se administran individualmente. Por ello, se ha intentado aumentar la tasa de curación de dichos agentes terapéuticos combinándolos (22).

[0029] Breve descripción de la invención

[0030] El alcance de la invención se define en el conjunto de reivindicaciones adjunto y la descripción puede contener divulgación técnica adicional, que aunque no forma parte de la invención reivindicada, se proporciona para situar la invención en un contexto técnico más amplio y para ilustrar posibles desarrollos técnicos relacionados.

[0031] Las referencias a métodos de tratamiento mediante terapia en esta descripción deben interpretarse como referencias a compuestos, composiciones farmacéuticas y medicamentos de la presente invención para su uso en dichos métodos.

[0032] Según lo divulgado en la presente, la administración de una combinación de (i) un antagonista de PD-1, que no es atezolizumab, (ii) lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y (iii) E7386 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo logra un efecto antitumoral inesperadamente excelente.

[0033] Se proporciona un método para tratar un cáncer en un individuo, que incluye administrar al individuo una terapia combinada que comprende un antagonista de PD-1, que no es atezolizumab, lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y E7386 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunos ejemplos, el individuo es un humano. El cáncer puede ser un tumor sólido, como un carcinoma de células renales (CCR), un cáncer colorrectal (CRC), un carcinoma hepatocelular (CHC), un melanoma, un cáncer de vejiga, un cáncer de mama, un cáncer de pulmón no microcítico (CPNM), un cáncer de endometrio, un cáncer urotelial y un carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello. El cáncer puede ser un cáncer avanzado o metastásico. El antagonista de PD-1 del método puede ser un anticuerpo monoclonal o un fragmento de unión a antígeno del mismo. En algunos ejemplos, el antagonista es un anticuerpo anti-PD-1. El antagonista puede ser pembrolizumab o nivolumab.

[0034] En algunos ejemplos, el antagonista de PD-1 del método es pembrolizumab, cemiplimab o nivolumab, preferiblemente pembrolizumab. La administración de pembrolizumab puede tener lugar tras la administración de lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y/o E7386 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en algunos regímenes de tratamiento. En algunos ejemplos, lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo se administra después de pembrolizumab y/o E7386 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0035] Se proporciona un método para tratar a un individuo humano diagnosticado de un cáncer, que comprende administrar al individuo una terapia combinada durante al menos 24 semanas. La terapia combinada incluye pembrolizumab, lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y E7386 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. El lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo puede administrarse a una dosis diaria de 24 mg, 20 mg, 18 mg, 12 mg u 8 mg, cada uno como lenvatinib, y el pembrolizumab puede administrarse a una dosis de 200 mg Q3W o 400 mg Q6W. El E7386 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo puede administrarse en una dosis que oscila entre aproximadamente 0.01 y 1000 mg/kg de peso corporal del individuo al día.

[0036] Se proporciona un medicamento que comprende un antagonista de PD-1 para su uso en combinación con lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y E7386 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para el tratamiento de un cáncer.

[0037] También se proporciona un medicamento que comprende lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para su uso en combinación con un antagonista de PD-1 y E7386 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para tratar un cáncer.

[0038] También se proporciona un medicamento que comprende E7386 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para ser utilizado en combinación con un antagonista de PD-1 y lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para tratar un cáncer.

[0039] También se proporcionan usos de una combinación terapéutica para tratar el cáncer y la combinación terapéutica incluye un antagonista de PD-1, lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y E7386 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Dichos medicamentos pueden comprender un kit, y el kit también puede comprender un prospecto con instrucciones para utilizar el antagonista de PD-1 en combinación con lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y E7386 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para tratar un cáncer en un individuo.

[0041] En todos los métodos de tratamiento, medicamentos y usos, el antagonista de PD-1 inhibe la unión de PD-L1 a PD-1, y preferiblemente también inhibe la unión de PD-L2 a PD-1. En algunos de los métodos de tratamiento, medicamentos y usos mencionados anteriormente, el antagonista de PD-1 es un anticuerpo monoclonal, o un fragmento de unión a antígeno del mismo, que se une específicamente a PD-1 o a PD-L1 y bloquea la unión de PD-L1 a PD-1. Por ejemplo, el antagonista de PD-1 puede ser un anticuerpo anti-PD-1 que comprende una cadena pesada y una cadena ligera, y en donde las cadenas pesada y ligera comprenden las secuencias de aminoácidos mostradas en la Figura 6 (N° de ID SEC: 21 y N° de ID SEC: 22). También se proporciona un método de tratamiento de un tumor que puede incluir el uso combinado de un anticuerpo anti-PD-1, lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y E7386 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0043] En algunas de las terapias combinadas, métodos de tratamiento, medicamentos y usos, el individuo es un humano y el cáncer es un tumor sólido y, en algunos casos, el tumor sólido es un carcinoma de células renales (CCR), un cáncer colorrectal (CRC), un carcinoma hepatocelular (CHC), un melanoma, un cáncer de vejiga, un cáncer urotelial, un cáncer de mama, un cáncer de pulmón no microcítico (CPNM), un cáncer de endometrio y un carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello, o cualquier cáncer divulgado en la presente.

[0045] Asimismo, cualquiera de las terapias combinadas, métodos de tratamiento, medicamentos y usos pueden utilizarse si el cáncer da positivo en las pruebas de expresión de uno o ambos PD-L1 y PD-L2. En otros casos, el cáncer tiene una expresión elevada de PD-L1.

[0047] En algunas de las terapias combinadas, métodos de tratamiento, medicamentos y usos, el individuo puede ser un humano, el cáncer da positivo para PD-L1 humano y se selecciona del grupo que consiste en un carcinoma de células renales (CCR), un cáncer colorrectal (CRC), un carcinoma hepatocelular (CHC), un melanoma, un cáncer de vejiga, un cáncer de mama, un cáncer de pulmón no microcítico (CPNM), un cáncer de endometrio y un carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello. En una realización, el cáncer de vejiga es un cáncer urotelial.

[0048] Breve descripción de los dibujos

[0050] La FIGURA 1 muestra las secuencias de aminoácidos de las CDR de la cadena ligera y de la cadena pesada de un anticuerpo monoclonal anti-PD-1 ejemplar (Números de ID SEC: 1-6).

[0051] La FIGURA 2 muestra las secuencias de aminoácidos de las CDR de la cadena ligera y de la cadena pesada de otro anticuerpo monoclonal anti-PD-1 ejemplar (Números de ID SEC: 7-12).

[0052] La FIGURA 3 muestra secuencias de aminoácidos de la región variable de la cadena pesada y de la cadena pesada de longitud completa para un anticuerpo monoclonal anti-PD-1 ejemplar (N° de ID SEC: 13 y N° de ID SEC: 14). La FIGURA 4 muestra secuencias de aminoácidos de regiones variables de cadena ligera alternativas para un anticuerpo monoclonal anti-PD-1 ejemplar (Números de ID SEC: 15-17).

[0053] La FIGURA 5A y la FIGURA 5B muestran secuencias de aminoácidos de cadenas ligeras alternativas para un anticuerpo monoclonal anti-PD-1 ejemplar, con la FIG. 5A que muestra las secuencias de aminoácidos de las cadenas ligeras K09A-L-11 y K09A-L-16 (Números de ID SEC: 18 y 19, respectivamente) y FIG.5B que muestra la secuencia de aminoácidos de la cadena ligera K09A-L-17 (N° de ID SEC: 20).

[0054] La FIGURA 6 muestra las secuencias de aminoácidos de las cadenas pesada y ligera del pembrolizumab (Números de ID SEC: 21 y 22, respectivamente).

[0055] La FIGURA 7 muestra las secuencias de aminoácidos de las cadenas pesada y ligera del nivolumab (Números de ID SEC: 23 y 24, respectivamente).

[0056] La FIGURA 8 muestra datos de la terapiain vivoen ratones de una monoterapia de cada una de las combinaciones de fármacos de la terapia triple, de la terapia de dos fármacos (lenvatinib E7386 y pembrolizumab lenvatinib) y de una terapia de un fármaco triple (E7386 lenvatinib pembrolizumab). Se representa como media ± SE. *: P< 0.05, *: P<0,0001 en comparación con la combinación triple mediante comparación múltiple de Dunnet de medidas repetidas utilizando valores transformados logarítmicamente. El lenvatinib es mesilato de lenvatinib. La FIGURA 9 muestra el volumen tumoral relativo de cada grupo, tal como se muestra en la Figura 8, en el día 29. Los datos se muestran como medias ± SE.

[0057] En las FIGURAS 10A a la 10C se resumen las líneas celulares de ratón, los medios de cultivo, las cepas animales y las condiciones empleadas en el estudio descrito en el Ejemplo 2.

[0058] La FIGURA 11 representa los datos obtenidos en el estudio descrito en el Ejemplo 2. LEN = lenvatinib. PD-1Ab y PD-1=anticuerpo anti-PD-1. LEN/PD-1 = lenvatinib y anticuerpo anti-=PD-1. E78386 =(6S,9aS)-N-bencil-8-({6-[3-(4-etilpiperazin-1-il)azetidin-1-il]piridin-2-il}metil)-6-(2-fluoro-4-hidroxibencil)-4,7-dioxo-2-(prop-2-en-1-il)hexahidro-2H-pirazino[2,1-c][1,2,4]triazina-1(6H)-carboxamida. E7386/LEN= E7386 y lenvatinib. E7386/LENPD-1= E7386, lenvatinib y anticuerpo anti-PD-1.

[0059] Las FIGURAS 12A a la 12G muestran gráficos en cascada que muestran la mejor respuesta media (%), que se define como se describe en el Ejemplo 2. La FIG.12A representa datos sin tratamiento. La FIG.12B representa los datos del anticuerpo (Ab) anti PD-1. La FIG. 12C representa los datos del E7386 a 25 mg/kg. La FIG. 12D representa los datos para lenvatinib a 10 mg/kg. La FIG.12E representa los datos de la combinación de E7386 y lenvatinib. La FIG.12F representa los datos de la combinación de lenvatinib y anticuerpo anti-PD-1. La FIG.12G representa los datos de la combinación de E7386, lenvatinib y anticuerpo anti-PD-1. En cada figura se indican las líneas celulares de los datos. Las líneas negras punteadas horizontales indican EE y RP (líneas superior e inferior, respectivamente) EE = Enfermedad estable. RP = Respuesta Parcial.

[0061] Descripción detallada de la invención

[0063] Abreviaturas. A lo largo de la descripción detallada y los ejemplos se utilizarán las siguientes abreviaturas:

[0064] MRG Mejor respuesta global

[0065] BID Una dosis dos veces al día

[0066] CBP Proteína de unión a CREB

[0067] TBC Tasa de beneficio clínico

[0068] CDR Región determinante de complementariedad (por sus siglas en inglés)

[0069] OHC Ovario de hámster chino

[0070] RC Respuesta completa

[0071] CRC Cáncer colorrectal

[0072] TCE Tasa de control de la enfermedad

[0073] SLE Supervivencia libre de enfermedad

[0074] TLD Toxicidad limitante de la dosis

[0075] DDR Duración de la respuesta

[0076] TEED Tasa de enfermedad estable duradera

[0077] FFIP Fijados con formol, incluidos en parafina

[0078] FR Región marco (por sus siglas en inglés)

[0079] CHC Carcinoma hepatocelular

[0080] IgG Inmunoglobulina G

[0081] IHQ Inmunohistoquímica o inmunohistoquímico

[0082] CRri Criterios de respuesta relacionados con la inmunidad

[0083] IV Por vía intravenosa

[0084] CCM Carcinoma de células de Merkel

[0085] DMT Dosis máxima tolerada

[0086] NCBI Centro Nacional de Información Biotecnológica (por sus siglas en inglés)

[0087] INC Instituto nacional de cáncer

[0088] NKT Célula T Natural killer

[0089] CPNM Cáncer de pulmón no microcítico

[0090] TRO Tasa de respuesta objetiva

[0091] SG Supervivencia global

[0092] EP Enfermedad progresiva

[0093] PD-1 Muerte celular programada 1

[0094] PD-L1 Ligando 1 de la Muerte Celular Programada, también conocido como B7-H1

[0095] PD-L2 Ligando 2 de la Muerte Celular Programada 1, también conocido como B7-DC

[0096] SLP Supervivencia libre de progresión

[0097] RP Respuesta parcial

[0098] Q2W Una dosis cada dos semanas

[0099] Q3W Una dosis cada tres semanas

[0100] QD Una dosis al día

[0101] CCR Carcinoma de células renales

[0102] RECIST Criterios de evaluación de la respuesta en tumores sólidos (por sus siglas en inglés)

[0103] RTK Receptor tirosina cinasa

[0104] CPM cáncer de pulmón microcítico

[0105] EE Enfermedad estable

[0106] VEGF Factor de crecimiento endotelial vascular (por sus siglas en inglés)

[0107] VH Región variable de la cadena pesada de la inmunoglobulina

[0108] VK Región variable de la cadena ligera de la inmunoglobulina kappa

[0110] Definiciones. Para que los métodos, composiciones y usos puedan comprenderse más fácilmente, a continuación se definen específicamente ciertos términos técnicos y científicos. A menos que se defina específicamente en otra parte de este documento, todos los demás términos técnicos y científicos utilizados en la presente tienen el significado comúnmente entendido por un experto en la técnica.

[0112] "Aproximadamente" cuando se utiliza para modificar un parámetro definido numéricamente (por ejemplo, la dosis de un antagonista de PD-1, (6S,9aS)-N-bencil-8-({6-[3-(4-etilpiperazin-1-il)azetidin-1-il]piridin-2-il}metil)-6-(2-fluoro-4-hidroxibencil)-4,7-dioxo -2-(prop-2-en-1-il)hexahidro-2H-pirazino[2,1-c][1,2,4]triazina-1(6H)-carboxamida (E7386) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o la duración del tiempo de tratamiento con una terapia combinada descrita en la presente) significa que el parámetro puede variar hasta un 10% por debajo o por encima del valor numérico indicado para ese parámetro. Por ejemplo, una dosis de unos 20 mg puede variar entre 18 mg y 22 mg.

[0114] "Preferiblemente" significa una opción más deseable. Por ejemplo, cuando se utiliza para modificar un parámetro definido numéricamente indica que el parámetro preferido proporciona un resultado mejorado respecto a otro valor para el parámetro. Este significado de "preferiblemente" sólo se aplica fuera de Estados Unidos. Para Estados Unidos, cualquier frase que utilice "preferiblemente" debe leerse como si el término no estuviera presente.

[0115] Como se utiliza en la presente, incluyendo las reivindicaciones adjuntas, las formas singulares de palabras tales como “un”, “una” y “el/la” incluyen sus referencias en plural a menos que el contexto dicte claramente lo contrario. Los términos “administración” y “tratamiento”, en lo que se refiere a un animal, humano, sujeto experimental, célula, tejido, órgano o fluido biológico, se refieren al contacto de un agente farmacéutico, terapéutico o diagnóstico exógeno, o una composición con el animal, humano, sujeto, célula, tejido, órgano o fluido biológico. El tratamiento de una célula comprende el contacto de un reactivo con la célula, así como el contacto de un reactivo con un fluido, en donde el fluido está en contacto con la célula. Los términos “administración” y “tratamiento” también se refiere a los tratamientosin vitroyex vivo, por ejemplo, de una célula, mediante un reactivo, diagnóstico, compuesto de unión, o por otra célula. El término “sujeto” incluye cualquier organismo, preferiblemente un animal, más preferiblemente un mamífero (por ejemplo, rata, ratón, perro, gato y conejo) y más preferiblemente un ser humano. Tal y como se utiliza en la presente, el término "anticuerpo" hace referencia a cualquier forma de anticuerpo que presente la actividad biológica o de unión deseada. Por lo tanto, se utiliza en el sentido más amplio y abarca específicamente, aunque sin limitarse a ellos, los anticuerpos monoclonales (incluidos los anticuerpos monoclonales de longitud completa), los anticuerpos policlonales, los anticuerpos multiespecíficos (por ejemplo, anticuerpos biespecíficos), los anticuerpos humanizados, totalmente humanos, los anticuerpos quiméricos y los anticuerpos de dominio único camelizados. "Anticuerpos parentales" son anticuerpos obtenidos por exposición de un sistema inmunitario a un antígeno antes de la modificación de los anticuerpos para un uso previsto, como la humanización de un anticuerpo para su uso como terapéutica humana.

[0116] En general, la unidad estructural del anticuerpo básico comprende un tetrámero. Cada tetrámero incluye dos pares idénticos de cadenas polipeptídicas, teniendo cada par una “cadena ligera” (aproximadamente 25 kDa) y una “cadena pesada” (aproximadamente 50-70 kDa). La porción amino-terminal de cada cadena incluye una región variable de aproximadamente 100 a 110 o más aminoácidos principalmente responsables del reconocimiento de antígenos. La porción carboxi-terminal de la cadena pesada puede definir una región constante principalmente responsable de la función efectora. Típicamente, las cadenas ligeras humanas se clasifican como cadenas ligeras kappa y lambda. Además, las cadenas pesadas humanas suelen clasificarse como mu, delta, gamma, alfa o épsilon, y definen el isotipo del anticuerpo como IgM, IgD, IgG, IgA e IgE, respectivamente. Dentro de las cadenas ligeras y pesadas, las regiones variables y constantes normalmente están unidas por una región “J” de aproximadamente 12 o más aminoácidos, incluyendo la cadena pesada también una región “D” de aproximadamente 10 aminoácidos más. Véase, en general, FUNDAMENTAL IMMUNOLOGY Ch.7 (Paul, W., ed., 2nd ed. Raven Press, N.Y. (1989).

[0117] Las regiones variables de cada par de cadenas ligeras/pesadas forman el sitio de unión al anticuerpo. Por lo tanto, en general, un anticuerpo intacto tiene dos sitios de unión. Excepto en anticuerpos bifuncionales o biespecíficos, los dos sitios de unión son, en general, los mismos.

[0118] Normalmente, los dominios variables tanto de las cadenas pesadas y ligeras comprenden tres regiones hipervariables, también denominadas regiones determinantes de complementariedad (CDR), que se encuentran dentro de regiones marco (FR) relativamente conservadas. Las CDR suelen estar alineadas por las regiones marco, lo que permite la unión a un epítopo específico. En general, desde el extremo N-terminal hasta el extremo C-terminal, los dominios variables de las cadenas ligeras y pesadas comprenden FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3 y FR4. La asignación de aminoácidos a cada dominio se realiza, en general, de acuerdo con las definiciones de SEQUENCES OF PROTEINS OF IMMUNOLOGICAL INTEREST, Kabat, et al.; National Institutes of Health, Bethesda, Md.. ; 5th ed.; NIH Publ. No. 91-3242 (1991); Kabat (1978) Adv. Prot. Chem. 32: 1-75; Kabat, et al., (1977) J. Biol. Chem. 252: 6609-6616; Chothia, et al., (1987) J Mol. Biol. 196: 901-917 or Chothia, et al., (1989) Nature 342: 878-883.

[0119] Tal y como se utiliza en la presente, el término “región hipervariable” se refiere a los residuos de aminoácidos de un anticuerpo que son responsables de la unión al antígeno. La región hipervariable comprende residuos de aminoácidos de una “región determinante de complementariedad” o “CDR” (es decir, CDRL1, CDRL2 y CDRL3 en el dominio variable de la cadena ligera y CDRH1, CDRH2 y CDRH3 en el dominio variable de la cadena pesada). Véase Kabat et al. (1991) SEQUENCES OF PROTEINS OF IMMUNOLOGICAL INTEREST, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md. (definición de las regiones CDR de un anticuerpo por secuencia); véase también Chothia and Lesk (1987) J. Mol. Biol.196: 901-917 (definición de las regiones CDR de un anticuerpo por estructura). Según se utiliza en la presente, el término residuos “marco” o “FR” se refiere a aquellos residuos del dominio variable distintos de los residuos de la región hipervariable definidos en el presente como residuos CDR.

[0120] "Regiones variables" o "región V", tal y como se utilizan en la presente, se refieren al segmento de las cadenas IgG cuya secuencia varía entre los diferentes anticuerpos. Se extiende hasta el residuo Kabat 109 en la cadena ligera y 113 en la cadena pesada.

[0121] Tal y como se utiliza en la presente, salvo que se indique lo contrario, “fragmento de anticuerpo” o “fragmento de unión al antígeno” se refiere a fragmentos de unión al antígeno de anticuerpos, es decir, fragmentos de anticuerpos que conservan la capacidad de unirse específicamente al antígeno al que se une el anticuerpo completo, por ejemplo, fragmentos que conservan una o más regiones CDR. Ejemplos de fragmentos de unión de anticuerpos incluyen, entre otros, fragmentos Fab, Fab', F(ab')<2>y Fv; diacuerpos; anticuerpos lineales; moléculas de anticuerpos de cadena única, por ejemplo, sc-Fv; nanocuerpos y anticuerpos multiespecíficos formados a partir de fragmentos de anticuerpos.

[0122] Un anticuerpo que “se une específicamente” a una proteína objetivo determinada es un anticuerpo que muestra una unión preferencial a ese objetivo en comparación con otras proteínas, pero esta especificidad no requiere una especificidad de unión absoluta. Un anticuerpo se considera "específico" para su objetivo previsto si su unión es determinante de la presencia de la proteína objetivo en una muestra, por ejemplo, sin producir resultados no deseados como falsos positivos. Los anticuerpos, o sus fragmentos de unión, se unirán a la proteína objetivo con una afinidad que es de al menos dos veces mayor, preferiblemente al menos diez veces mayor, más preferiblemente al menos 20 veces mayor, y lo más preferiblemente al menos 100 veces mayor que la afinidad con proteínas no objetivo. Tal como se utiliza en la presente, se dice que un anticuerpo se une específicamente a un polipéptido que comprende una secuencia de aminoácidos determinada, por ejemplo, la secuencia de aminoácidos de una molécula PD-1 humana madura o PD-L1 humana, si se une a polipéptidos que comprenden esa secuencia pero no se une a proteínas que carecen de esa secuencia.

[0123] El término “anticuerpo quimérico” se refiere a un anticuerpo en el que una parte de la cadena pesada y/o ligera es idéntica u homóloga a secuencias correspondientes en un anticuerpo derivado de una especie particular (por ejemplo, humano) o que pertenecen a una clase o subclase de anticuerpos concreta, mientras que el resto de la cadena o cadenas es idéntico o homólogo a secuencias correspondientes en un anticuerpo derivado de otra especie (por ejemplo, ratón) o que pertenece a otra clase o subclase de anticuerpos, así como fragmentos de dichos anticuerpos, siempre que muestren la actividad biológica deseada.

[0124] "Anticuerpo humano" se refiere a un anticuerpo que comprende únicamente secuencias de proteínas de inmunoglobulina humana. Un anticuerpo humano puede contener cadenas de carbohidratos murinos si se produce en un ratón, en una célula de ratón o en un hibridoma derivado de una célula de ratón. Del mismo modo, “anticuerpo de ratón” o “anticuerpo de rata” se refiere a un anticuerpo que comprende sólo secuencias de inmunoglobulina de ratón o rata, respectivamente.

[0125] “Anticuerpo humanizado” se refiere a formas de anticuerpos que contienen secuencias de anticuerpos no humanos (por ejemplo, murinos), así como anticuerpos humanos. Tales anticuerpos contienen una secuencia mínima derivada de inmunoglobulina no humana. En general, el anticuerpo humanizado comprenderá sustancialmente la totalidad de al menos uno, y normalmente dos, dominios variables, en los cuales todas o sustancialmente todos los bucles hipervariables corresponden a aquellas de una inmunoglobulina no humana y todas o sustancialmente todas las regiones FR son aquellas de una secuencia de inmunoglobulina humana. El anticuerpo humanizado también comprenderá opcionalmente al menos una porción de una región constante (Fc) de inmunoglobulina, normalmente la de una inmunoglobulina humana. El prefijo “hum”, “hu”, “hu” o “h” se añade a las designaciones de clones de anticuerpos cuando es necesario para distinguir los anticuerpos humanizados de los anticuerpos parentales de roedores. Las formas humanizadas de anticuerpos de roedores generalmente comprenderán las mismas secuencias de CDR de los anticuerpos parentales de roedores, aunque se pueden incluir ciertas sustituciones de aminoácidos para aumentar la afinidad, aumentar la estabilidad del anticuerpo humanizado, o por otras razones.

[0126] "Anticuerpo aislado" y "fragmento de anticuerpo aislado" se refiere al estado de purificación y en dicho contexto significa que la molécula nombrada está sustancialmente libre de otras moléculas biológicas como ácidos nucleicos, proteínas, lípidos, carbohidratos u otros materiales como restos celulares y medios de crecimiento. En general, el término "aislado" no pretende referirse a una ausencia completa de dicho material o a una ausencia de agua, disoluciones amortiguadoras o sales, a menos que estén presentes en cantidades que interfieran sustancialmente con el uso experimental o terapéutico del compuesto de unión tal como se describe en la presente. "Kabat", tal como se utiliza en la presente, significa un sistema de alineamiento y numeración de inmunoglobulinas del que fue pionero Elvin A. Kabat ((1991) SEQUENCES OF PROTEINS OF IMMUNOLOGICAL INTEREST, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md.).

[0127] “Anticuerpo monoclonal” o “mAb” o “Mab”, tal y como se utiliza en la presente, se refiere a una población de anticuerpos sustancialmente homogéneos, es decir, las moléculas de anticuerpo que componen la población son idénticas en su secuencia de aminoácidos, salvo por posibles mutaciones naturales que pueden estar presentes en cantidades menores. Por el contrario, las preparaciones de anticuerpos convencionales (policlonales) suelen incluir una multitud de anticuerpos diferentes que tienen diferentes secuencias de aminoácidos en sus dominios variables, particularmente sus CDR, que a menudo son específicas para diferentes epítopos. El modificador “monoclonal” indica el carácter del anticuerpo como que se obtiene de una población sustancialmente homogénea de anticuerpos y no se va a considerar como que requiere la producción del anticuerpo por cualquier método particular. Por ejemplo, los anticuerpos monoclonales que se utilizarán de acuerdo con los métodos de tratamiento, los medicamentos y los usos divulgados pueden fabricarse mediante el método del hibridoma descrito por primera vez por Kohler et al.. (1975) Nature 256: 495, o puede realizarse mediante métodos de ácido desoxirribonucleico (ADN) recombinante (véase, por ejemplo, Pat. de EE.UU. No.4,816,567). Los "anticuerpos monoclonales" también pueden aislarse a partir de bibliotecas de anticuerpos fago utilizando las técnicas descritas en Clackson et al.. (1991) Nature 352: 624-628 y Marks et al. (1991) J. Mol. Biol.222: 581-597, por ejemplo. Véase también Presta (2005) J. Allergy Clin. Immunol.116: 731.

[0128] "CDR" o "CDRs", tal como se utilizan en la presente, significa región o regiones determinante(s) de complementariedad en una región variable de inmunoglobulina, definida(s) utilizando el sistema de numeración de Kabat, a menos que se indique lo contrario.

[0129] "Respuesta antitumoral" cuando se refiere a un paciente con cáncer tratado con un régimen terapéutico, como una terapia combinada descrita en la presente, significa al menos un efecto terapéutico positivo, como por ejemplo, reducción del número de células cancerosas, reducción del tamaño del tumor, reducción de la tasa de infiltración de células cancerosas en órganos periféricos, reducción de la tasa de metástasis o crecimiento del tumor, o supervivencia libre de progresión. Los efectos terapéuticos positivos en el cáncer pueden medirse de varias formas (véase, W. A. Weber, J. Null. Med. 50: 1S-10S (2009); Eisenhauer et al.,supra). En algunos casos, la respuesta antitumoral a una terapia combinada descrita en la presente se valora mediante los criterios RECIST 1.1 (criterios de evaluación de la respuesta en tumores sólidos, por sus siglas en inglés), los CRri bidimensionales (criterios de respuesta relacionados con el sistema inmunitario) o los CRri unidimensionales. En algunos casos, una respuesta antitumoral es cualquiera de EE, RP, RC, SLP o SLE.

[0130] "CRri bidimensional" se refiere al conjunto de criterios descritos en Wolchok JD, et al.. "Guidelines for the evaluation of immune therapy activity in solid tumors: immune-related response criteria," Clin Cancer Res.15(23): 7412-7420 (2009). Estos criterios utilizan mediciones tumorales bidimensionales de las lesiones objetivo, que se obtienen multiplicando el diámetro más largo y el diámetro perpendicular más largo (cm<2>) de cada lesión.

[0131] "Agente bioterapéutico" significa una molécula biológica, como un anticuerpo o una proteína de fusión, que bloquea la señalización del ligando/receptor en cualquier vía biológica que favorezca el mantenimiento y/o el crecimiento del tumor o que suprima la respuesta inmunitaria antitumoral. Las clases de agentes bioterapéuticos incluyen, entre otros, anticuerpos contra el VEGF, el receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR, por sus siglas en inglés), Her2/neu, otros receptores del factor de crecimiento, CD20, CD40, CD-40L, CTLA-4, OX-40, 4-1BB e ICOS. Los términos "cáncer", "canceroso", "tumor" o "maligno" se refieren o describen la afección fisiológica en los mamíferos que se caracteriza típicamente por un crecimiento celular no regulado. Algunos ejemplos de cáncer son, entre otros, el carcinoma de células renales (CCR), el cáncer colorrectal (CRC), el carcinoma hepatocelular (CHC), el melanoma, el cáncer de vejiga como el cáncer urotelial, el cáncer de mama, el cáncer de pulmón no microcítico (CPNM), el cáncer de endometrio y el carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello. Otro ejemplo particular de cáncer incluye el carcinoma de células renales (CCR). Otro ejemplo particular de cáncer incluye el cáncer de riñón de células claras. Puede tratarse de un cáncer primario, pero es más probable que se trate de un cáncer en estadio avanzado que incluya enfermedad metastásica (por ejemplo, afectación linfática o de otros órganos). Los cánceres que pueden tratarse de acuerdo con los métodos de tratamiento, medicamentos y usos divulgados incluyen los caracterizados por una expresión elevada de uno o ambos PD-L1 y PD-L2 en las muestras de tejido probadas.

[0132] "TBC" o "Tasa de Beneficio Clínico" significa RC RP DE duradera.

[0133] Un “agente quimioterapéutico” es un compuesto químico útil en el tratamiento de un cáncer. Las clases de agentes quimioterapéuticos que pueden utilizarse en combinación con la combinación terapéutica y sus métodos y usos descritos en la presente incluyen, entre otros: agentes alquilantes, antimetabolitos, inhibidores de la cinasa, alcaloides de plantas tóxicas para el huso, antibióticos citotóxicos/antitumorales, inhibidores de la topoisomerasa, fotosensibilizadores, antiestrógenos y moduladores selectivos de los receptores de estrógenos (SERM, por sus siglas en inglés), antiprogesteronas, reguladores negativos de los receptores de estrógenos (ERD, por sus siglas en inglés), antagonistas de los receptores de estrógenos, agonistas de la hormona liberadora de la hormona luteinizante, antiandrógenos, inhibidores de la aromatasa, inhibidores del EGFR (receptor del factor de crecimiento epidérmico, por sus siglas en inglés), inhibidores del VEGF (factor de crecimiento endotelial vascular, por sus siglas en inglés), inhibidores del VEGFR (receptor del factor de crecimiento endotelial vascular, por sus siglas en inglés) y oligonucleótidos antisentido que inhiben la expresión de genes implicados en la proliferación celular anormal o el crecimiento tumoral. Los agentes quimioterapéuticos útiles en los métodos de tratamiento divulgados en la presente incluyen agentes citostáticos y/o citotóxicos.

[0134] "Chothia", tal como se utiliza en la presente, significa un sistema de numeración de anticuerpos descrito en Al-Lazikani et al., JMB 273:.927-948 (1997).

[0135] "Que comprende" o variantes como "comprenden", "comprende" o "compuesto de" se utilizan en toda la memoria descriptiva y las reivindicaciones en un sentido inclusivo, es decir, para especificar la presencia de las características indicadas pero no para excluir la presencia o adición de otras características que puedan potenciar materialmente el funcionamiento o la utilidad de cualquiera de los métodos de tratamiento, medicamentos y usos divulgados, a menos que el contexto exija lo contrario debido al lenguaje expreso o a una implicación necesaria. "Variantes modificadas de forma conservadora" o "sustitución conservadora" se refiere a sustituciones de aminoácidos en una proteína por otros aminoácidos que tengan características similares (por ejemplo, carga, tamaño de la cadena lateral, hidrofobicidad/hidrofilicidad, conformación y rigidez de la cadena principal, etc.), de tal forma que los cambios puedan realizarse frecuentemente sin alterar la actividad biológica u otra propiedad deseada de la proteína, como la afinidad y/o especificidad del antígeno. Los expertos en la materia reconocen que, en general, las sustituciones de un solo aminoácido en regiones no esenciales de un polipéptido no alteran sustancialmente la actividad biológica (véase, por ejemplo,Watson et al. (1987) Molecular Biology of the Gene, The Benjamin/Cummings Pub. Co., p. 224 (4th Ed.)). Además, es menos probable que las sustituciones de aminoácidos estructural o funcionalmente similares alteren la actividad biológica. Las sustituciones conservadoras ejemplares se exponen en la Tabla 1 a continuación.

[0136] TABLA 1. Sustituciones conservadoras eem lares de aminoácidos

[0138]

[0140] "Consiste esencialmente en" y variaciones como "consisten esencialmente en" o "que consiste(n)/consista(n) esencialmente en", tal y como se utilizan a lo largo de la memoria descriptiva y las reivindicaciones, indican la inclusión de cualquier elemento o grupo de elementos recitados, y la inclusión opcional de otros elementos, de naturaleza similar o diferente a los elementos recitados, que no cambien materialmente las propiedades básicas o novedosas del régimen de dosificación, método o composición especificados. Como ejemplo no limitativo, un antagonista de PD-1 que consista esencialmente en una secuencia de aminoácidos recitada también puede incluir uno o más aminoácidos, incluyendo sustituciones de uno o más residuos de aminoácidos, que no afecten materialmente a las propiedades del compuesto de unión.

[0141] "TCE" o "Tasa de control de la enfermedad" significa RC RP EE.

[0142] "Anticuerpo monoclonal anti-PD-L de diagnóstico" significa un mAb que se une específicamente a la forma madura del PD-L designado (PD-L1 o PDL2) que se expresa en la superficie de ciertas células de mamífero. Una PD-L madura carece de la secuencia líder presecretoria, también denominada péptido líder. Los términos "PD-L" y "PD-L madura" se utilizan indistintamente en la presente, y se entenderá que significan la misma molécula a menos que se indique lo contrario o resulte fácilmente evidente por el contexto.

[0143] Tal como se utiliza en la presente, un mAb anti-PD-L1 humana de diagnóstico o un mAb anti-PD-L1 se refiere a un anticuerpo monoclonal que se une específicamente a la PD-L1 humana madura. Una molécula de PD-L1 humana madura consta de los aminoácidos 19-290 de la siguiente secuencia:

[0145]

[0147] Ejemplos específicos de mAbs anti-PD-L1 humana de diagnóstico útiles como mAbs de diagnóstico para la detección por IHQ de la expresión de PD-L1 en secciones de tejido tumoral FFIP son el anticuerpo 20C3 y el anticuerpo 22C3, que se describen en la solicitud internacional PCT/US13/075932, presentada el 18 de diciembre de 2013 y publicada como WO2014/100079 el 26 de junio de 2014. Otro mAb anti-PD-L1 humana del que se ha informado que es útil para la detección por IHQ de la expresión de PD-L1 en secciones de tejido FFIP (Chen, B.J. et al., Clin. Cancer Res.19: 3462-3473 (2013)) es un mAb de conejo anti PD-L1 humana disponible públicamente en Sino Biological, Inc. (Beijing, R.P. China; número de catálogo 10084-R015).

[0148] "TEED" o "tasa de enfermedad estable duradera" significa EE durante ≥ 23 semanas.

[0149] "Región marco" o "FR", tal como se utiliza en la presente, significa las regiones variables de la inmunoglobulina, excluyendo las regiones CDR.

[0150] "Homología" se refiere a la similitud de secuencia entre dos secuencias polipeptídicas cuando se alinean de forma óptima. Cuando una posición en las dos secuencias comparadas está ocupada por la misma subunidad monomérica de aminoácidos, por ejemplo, si una posición en una CDR de cadena ligera de dos Abs diferentes está ocupada por alanina, entonces los dos Abs son homólogos en esa posición. El porcentaje de homología es el número de posiciones homólogas compartidas por las dos secuencias dividido por el número total de posiciones comparadas ×100. Por ejemplo, si 8 de 10 de las posiciones de dos secuencias coinciden o son homólogas cuando las secuencias se alinean de forma óptima, entonces las dos secuencias son homólogas en un 80%. Generalmente, la comparación se realiza cuando se alinean dos secuencias para obtener el máximo porcentaje de homología. Por ejemplo, la comparación puede realizarse mediante un algoritmo de la Herramienta Básica de Búsqueda de Alineamiento Local (BLAST<®>, por sus siglas en inglés), que es una marca registrada de la Biblioteca Nacional de Medicina, en donde los parámetros del algoritmo se seleccionan para dar la mayor coincidencia entre las respectivas secuencias a lo largo de toda la longitud de las respectivas secuencias de referencia.

[0151] Las siguientes referencias representativas se refieren a los algoritmos BLAST<®>utilizados a menudo para el análisis de secuencias: ALGORITMOS DE BLAST: Altschul, S.F., et al., (1990) J. Mol. Biol.215: 403-410; Gish, W., et al., (1993) Nature Genet.3: 266-272; Madden, T.L., et al., (1996) Meth.. Enzymol.266: 131-141; Altschul, S.F., et al., (1997) Nucleic Acids Res.25:3389-3402; Zhang, J., et al., (1997) Genome Res.7: 649-656; Wootton, J.C., et al., (1993) Comput. Chem. 17: 149-163; Hancock, J.M. et al., (1994) Comput. Appl. Biosci. 10: 67-70; ALIGNMENT SCORING SYSTEMS: Dayhoff, M.O., et al., "A model of evolutionary change in proteins." IN ATLAS OF PROTEIN SEQUENCE AND STRUCTURE, (1978) vol. 5, suppl. 3. M.O. Dayhoff (ed.), pp. 345-352, Natl. Biomed. Res. Found., Washington, DC; Schwartz, R.M., et al., "Matrices for detecting distant relationships." IN ATLAS OF PROTEIN SEQUENCE AND STRUCTURE, (1978) vol.5, suppl.3." M.O. Dayhoff (ed.), pp.353-358, Natl. Biomed. Res. Found., Washington, DC; Altschul, S.F., (1991) J. Mol. Biol.219: 555-565; States, D.J., et al., (1991) Methods 3: 66-70; Henikoff, S., et al., (1992) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89: 10915-10919; Altschul, S.F., et al., (1993) J. Mol. Evol. 36: 290-300; ALIGNMENT STATISTICS: Karlin, S., et al., (1990) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87: 2264-2268; Karlin, S., et al., (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 5873-5877; Dembo, A., et al., (1994) Ann. Prob.22: 2022-2039; and Altschul, S.F. "Evaluating the statistical significance of multiple distinct local alignments." IN THEORETICAL AND COMPUTATIONAL METHODS IN GENOME RESEARCH (S. Suhai, ed.), (1997) pp. 1-14, Plenum, New York.

[0152] "Paciente no respondedor", cuando se refiere a una respuesta antitumoral específica al tratamiento con una terapia combinada descrita en la presente, significa que el paciente no mostró la respuesta antitumoral.

[0153] "TRO" o "tasa de respuesta objetiva" se refiere en algunos casos a RC RP, y TRO<(semana 24)>se refiere a RC y RP medidos mediante irRECIST en cada paciente de una cohorte tras 24 semanas de tratamiento con mesilato de lenvatinib en combinación con pembrolizumab.

[0154] "Paciente" o "sujeto" o "individuo" se refiere a cualquier sujeto único para el que se desee una terapia o que participe en un ensayo clínico, estudio epidemiológico o se utilice como un control, incluidos los seres humanos y los pacientes veterinarios mamíferos como el ganado vacuno, los caballos, los perros y los gatos.

[0155] Antagonistas de PD-1 Entre los antagonistas anti-PD1 se incluyen los siguientes. Por "antagonista de PD-1" se entiende cualquier compuesto químico o molécula biológica que bloquee la unión de la PD-L1 expresada en una célula cancerosa a la PD-1 expresada en una célula inmunitaria (célula T, célula B o célula NKT) y, preferiblemente, que también bloquee la unión de la PD-L2 expresada en una célula cancerosa a la PD-1 expresada en la célula inmunitaria. Los nombres alternativos o sinónimos de PD-1 y sus ligandos incluyen: PDCD1, PD1, CD279 y SLEB2 para PD-1; PDCD1L1, PDL1, B7H1, B7-4, CD274 y B7-H para PD-L1; y PDCD1L2, PDL2, B7-DC, Btdc y CD273 para PD-L2. En cualquiera de los métodos de tratamiento, medicamentos y usos divulgados en los que se esté tratando a un individuo humano, el antagonista de PD-1 bloquea la unión de la PD-L1 humana a la PD-1 humana, y preferiblemente bloquea la unión tanto de la PD-L1 humana como de la PD-L2 a la PD-1 humana. Las secuencias de aminoácidos de la PD-1 humana se pueden encontrar en NCBI Locus No: NP_005009. Las secuencias de aminoácidos de PD-L1 y PD-L2 humanas se encuentran en NCBI Locus No: NP_054862 y NP_079515, respectivamente. El antagonista de PD-1 no es el anticuerpo monoclonal anti-PD-L1 atezolizumab.

[0156] Los antagonistas de PD-1 útiles en cualquiera de los métodos de tratamiento, medicamentos y usos divulgados incluyen un anticuerpo monoclonal (mAb), o fragmento de unión a antígeno del mismo, que se une específicamente a PD-1 o PD-L1, y preferiblemente se une específicamente a PD-1 humano o PD-L1 humano. El mAb puede ser un anticuerpo humano, un anticuerpo humanizado o un anticuerpo quimérico, y puede incluir una región constante humana. La región constante humana se selecciona del grupo formado por las regiones constantes IgG1, IgG2, IgG3 e IgG4, y preferiblemente la región constante humana es una región constante IgG1 o IgG4. En algunos casos, el fragmento de unión al antígeno se selecciona del grupo formado por Fab, Fab'-SH, F(ab')<2>, scFv y fragmentos Fv.

[0157] Puede utilizarse cualquier anticuerpo monoclonal que se una a un polipéptido PD-1, un fragmento del polipéptido 10 PD-1, un péptido PD-1 o un epítopo PD-1 y bloquee la interacción entre PD-1 y su ligando PD-L1 o PD-L2. En algunas realizaciones, el anticuerpo monoclonal anti PD-1 humana se une a un polipéptido PD-1, un fragmento de polipéptido PD-1, un péptido PD-1 o un epítopo PD-1 y bloquea la interacción entre PD-1 y PD-L1. En otras realizaciones, el anticuerpo monoclonal anti PD-1 humana se une a un polipéptido PD-1, un fragmento de polipéptido PD-1, un péptido PD-1 o un epítopo PD-1 y bloquea la interacción entre PD-1 y PD-L2. En otras realizaciones, el anticuerpo monoclonal anti-PD-1 humana se une a un polipéptido PD-1, un fragmento de polipéptido PD-1, un péptido PD-1 o un epítopo PD-1 y bloquea la interacción entre PD-1 y PD-L1 y la interacción entre PD-1 y PD-L2.

[0158] También se pueden utilizar cualquier anticuerpo monoclonal que se una a un polipéptido PD-L1, un fragmento de polipéptido PD-L120, un péptido PD-L1 o un epítopo PD-L1 y bloquee la interacción entre PD-L1 y PD-1.

[0159] En ciertas realizaciones, el anticuerpo monoclonal anti-PD-1 humana se selecciona del grupo que consiste en pembrolizumab, nivolumab, cemiplimab, pidilizumab (Pat. de EE.UU.. Nº 7.332.582), AMP-514 (MedImmune LLC, Gaithersburg, MD), PDR001 (Pat. de EE.UU. Nº 25 9.683.048), BGB-A317 (Pat. de EE.UU. Nº 8.735.553), y MGA012 (MacroGenics, Rockville, MD).

[0160] En una realización, el anticuerpo monoclonal anti-PD-1 humana es pembrolizumab. En otra realización, el anticuerpo monoclonal anti-PD-1 humana es nivolumab. En otra realización, el anticuerpo monoclonal anti-PD-1 humana es cemiplimab. En otra realización, el anticuerpo monoclonal anti-PD-1 humana es pidilizumab. En una realización, el anticuerpo monoclonal anti PD-1 humana es el AMP-514. En otra realización, el anticuerpo monoclonal anti PD-1 humana es el PDR001. En otra realización, el anticuerpo monoclonal anti PD-1 humana es el BGB-A317. En otra realización, el anticuerpo monoclonal anti PD-1 humana es el MGA012.

[0161] Ejemplos de mAbs que se unen a PD-1 humana, y útiles en los métodos de tratamiento, medicamentos y usos divulgados, se describen en Pat de EE.UU. Números 7488802, 7521051, 8008449, 8354509, y 8168757; en publicaciones internacionales de patentes WO2004/004771, WO2004/072286, y WO2004/056875, y en Pub. De EE.UU. No. 2011/0271358. Los mAb anti PD-1 humana específicos útiles como antagonista de PD-1 en los métodos de tratamiento, medicamentos y usos divulgados incluyen: pembrolizumab (también conocido como MK-3475), un mAb IgG4 humanizado con la estructura descrita en Información sobre medicamentos de la OMS, Vol.

[0162] 27, N° 2, páginas 161-162 (2013) y que comprende las secuencias de aminoácidos de las cadenas pesada y ligera que se muestran en la Figura 6, nivolumab (BMS-936558), un mAb IgG4 humano con la estructura descrita en WHO Drug Information, Vol.27, No.1, páginas 68-69 (2013) y que comprende las secuencias de aminoácidos de las cadenas pesada y ligera que se muestran en la Figura 7, pidilizumab, un anticuerpo monoclonal humanizado, AMP-224 y AMP-514; los anticuerpos humanizados h409A11, h409A16 y h409A17, que se describen en WO2008/156712, y AMP-514, que está desarrollando MedImmune.

[0163] Ejemplos de mAbs que se unen a PD-L1 humana, y útiles en los métodos de tratamiento, medicamentos y usos divulgados, se describen en WO2013/019906, WO2010/077634 A1 y Pat. de EE.UU. No.8383796. Los mAbs anti-PD-L1 humanos específicos útiles como antagonistas de PD-1 en los métodos de tratamiento, medicamentos y usos divulgados incluyen BMS-936559, cemiplimab, MEDI4736, MSB0010718C y un anticuerpo que comprende las regiones variables de cadena pesada y cadena ligera de N° de ID SEC: 24 y N° de ID SEC: 21, respectivamente, de WO2013/019906.

[0164] Otros antagonistas de PD-1 útiles en cualquiera de los métodos de tratamiento, medicamentos y usos divulgados incluyen una inmunoadhesina que se une específicamente a PD-1 o PD-L1, y preferiblemente se une específicamente a PD-1 humana o PD-L1 humana, por ejemplo, una proteína de fusión que contiene la porción extracelular o de unión a PD-1 de PD-L1 o PD-L2 fusionada a una región constante como una región Fc de una molécula de inmunoglobulina. Ejemplos de moléculas de inmunoadhesina que se unen específicamente a PD-1 se describen en WO2010/027827 y WO2011/066342. Entre las proteínas de fusión específicas útiles como antagonistas de PD-1 en los métodos de tratamiento, medicamentos y usos descritos en la presente se incluye la AMP-224 (también conocida como B7-DCIg), que es una proteína de fusión PD-L2-FC y se une a la PD-1 humana. Los métodos de tratamiento, los medicamentos y los usos divulgados prevén que el antagonista de PD-1 sea un anticuerpo monoclonal, o un fragmento de unión a antígeno del mismo, que comprende: (a) Números de ID SEC de CDR de la cadena ligera: 1, 2 y 3, y números ID SEC de CDR de la cadena pesada: Números de ID SEC de CDR 4, 5 y 6; o (b) de cadena ligera: 4, 5 y 6; o (b) números ID SEC de CDR de la cadena ligera: 10, 11 y 12. Los métodos de tratamiento, medicamentos y usos divulgados prevén que el antagonista de PD-1 sea un anticuerpo monoclonal, o fragmento de unión a antígeno del mismo, que se une específicamente a PD-1 humana y comprende (a) una región variable de cadena pesada que comprende N° de ID SEC:13 o una variante de la misma, y (b) una región variable de cadena ligera que comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada del grupo que consiste en N° de ID SEC: 15 o una variante de la misma; N° de ID SEC: 16 o una variante de la misma; y N° de ID SEC: 17 o una variante de la misma. Una variante de una secuencia de región variable de cadena pesada es idéntica a la secuencia de referencia excepto en que tiene hasta 17 sustituciones conservadoras de aminoácidos en la región marco (es decir, fuera de las CDR), y preferiblemente tiene menos de diez, nueve, ocho, siete, seis o cinco sustituciones conservadoras de aminoácidos en la región marco. Una variante de una secuencia de región variable de cadena ligera es idéntica a la secuencia de referencia excepto en que tiene hasta cinco sustituciones conservadoras de aminoácidos en la región marco (es decir, fuera de las CDR), y preferiblemente tiene menos de cuatro, tres o dos sustituciones conservadoras de aminoácidos en la región marco.

[0165] El antagonista de PD-1 para cualquiera de los métodos de tratamiento, medicamentos y usos divulgados, puede ser un anticuerpo monoclonal que se une específicamente a PD-1 humana y comprende (a) una cadena pesada que comprende N° de ID SEC: 14 y b) una cadena ligera que comprende el N° de ID SEC: 18, el N° de ID SEC: 19 o el N° de ID SEC: 20.

[0166] Los métodos de tratamiento, medicamentos y usos divulgados prevén que el antagonista de PD-1 sea un anticuerpo monoclonal que se une específicamente a PD-1 humana y comprende (a) una cadena pesada que comprende el N° de ID SEC: 14 y b) una cadena ligera que comprende el N° de ID SEC:18

[0167] La Tabla 2 siguiente proporciona una lista de las secuencias de aminoácidos de mAbs anti-PD-1 ejemplares para su uso en los métodos de tratamiento, medicamentos y usos divulgados, y las secuencias se muestran en las Figuras 1-5B.

[0168] TABLA 2. ANTICUERPOS MONOCLONALES ANTI-PD-1 HUMANA EJEMPLARES

[0170]

[0171]

[0173] Expresión de "PD-L1" o "PD-L2", tal como se utiliza en la presente, significa cualquier nivel de expresión detectable de la proteína PD-L designada en la superficie celular o del ARNm de PD-L designado dentro de una célula o tejido. La expresión de la proteína PD-L puede detectarse con un anticuerpo PD-L de diagnóstico en un ensayo de IHQ de una sección de tejido tumoral o por citometría de flujo. Alternativamente, la expresión de la proteína PD-L por las células tumorales puede detectarse mediante imágenes de tomografía por emisión de positrones (PET), utilizando un agente de unión (por ejemplo, fragmento de anticuerpo, aficuerpo y similares) que se una específicamente al objetivo de PD-L deseado, por ejemplo, PD-L1 o PD-L2. Las técnicas para detectar y medir la expresión del ARNm de PD-L incluyen la RT-PCR y la RT-PCR cuantitativa en tiempo real.

[0174] Se han descrito varios enfoques para cuantificar la expresión de la proteína PD-L1 en ensayos de IHQ de secciones de tejido tumoral.Véase,por ejemplo, Thompson, R. H., et al., PNAS 101 (49): 17174-17179 (2004); Thompson, R. H. et al., Cancer Res..66: 3381-3385 (2006); Gadiot, J., et al., Cancer 117: 2192-2201 (2011); Taube, J. M. et al., Sci Transl Med 4: 127-37 (2012); y Toplian, S. L. et al., New Eng. J Med.366(26): 2443-2454 (2012).

[0175] Un enfoque emplea una simple variable de resultado binario de positivo o negativo para la expresión de PD-L1, con un resultado positivo definido en términos del porcentaje de células tumorales que muestran evidencia histológica de tinción de la membrana de la superficie celular. Una sección de tejido tumoral se cuenta como positiva para la expresión de PD-L1 es al menos el 1%, y preferiblemente el 5% del total de células tumorales. En otro enfoque, la expresión de PD-L1 en la sección de tejido tumoral se cuantifica en las células tumorales, así como en las células inmunitarias infiltrantes, que comprenden predominantemente linfocitos. El porcentaje de células tumorales y de células inmunitarias infiltrantes que muestran tinción de membrana se cuantifica por separado como < 5%, 5 a 9%, y luego en incrementos del 10% hasta el 100%. En el caso de las células tumorales, la expresión de PD-L1 se considera negativa si el puntaje es < 5% y positiva si el puntaje es ≥ 5%. La expresión de PD-L1 en el infiltrado inmunitario se notifica como una medida semicuantitativa denominada puntaje de inflamación ajustada (PIA), que se determina multiplicando el porcentaje de células que tiñen la membrana por la intensidad del infiltrado, que se clasifica como nulo (0), leve (puntaje de 1, linfocitos escasos), moderado (puntaje de 2, infiltración focal del tumor por agregados linfohistiocíticos) o grave (puntaje de 3, infiltración difusa). Una sección de tejido tumoral se cuenta como positiva para la expresión de PD-L1 por infiltrados inmunitarios si el PIA es ≥ 5.

[0176] El nivel de expresión de ARNm de PD-L puede compararse con los niveles de expresión de ARNm de uno o más genes de referencia que se utilizan frecuentemente en la RT-PCR cuantitativa, como la ubiquitina C.

[0177] En algunos casos, se determina que un nivel de expresión de PD-L1 (proteína y/o ARNm) por células malignas y/o por células inmunitarias infiltrantes dentro de un tumor está "sobreexpresado" o "elevado" con base en la comparación con el nivel de expresión de PD-L1 (proteína y/o ARNm) por un control apropiado. Por ejemplo, un nivel de expresión de proteína PD-L1 o ARNm de control puede ser el nivel cuantificado en células no malignas del mismo tipo o en una sección de un tejido normal emparejado (es decir, tejido no maligno). Preferiblemente, se determina que la expresión de PD-L1 en una muestra tumoral es elevada si la proteína PD-L1 (y/o el ARNm de PD-L1) en la muestra es al menos un 10%, 20% o 30% mayor que en el control.

[0178] Un “bioequivalente de pembrolizumab” es un producto biológico fabricado por una entidad distinta de Merck & Co., Inc. d.b.a. Merck Sharp and Dohme (MSD) y que esté aprobado por una agencia regulatoria de cualquier país para su comercialización como bioequivalente del pembrolizumab. Un bioequivalente del pembrolizumab puede incluir como principio activo una variante del pembrolizumab o un anticuerpo con la misma secuencia de aminoácidos que el pembrolizumab.

[0179] Tal como se utiliza en la presente, una "variante de pembrolizumab" significa un anticuerpo monoclonal que comprende secuencias de cadena pesada y cadena ligera que son idénticas a las del pembrolizumab, excepto por tener tres, dos o una sustituciones conservadoras de aminoácidos en posiciones que están situadas fuera de las CDR de la cadena ligera y seis, cinco, cuatro, tres, dos o una sustituciones conservadoras de aminoácidos que están situadas fuera de las CDR de la cadena pesada, por ejemplo, las posiciones variantes están situadas en las regiones FR y/o en la región constante. En otras palabras, el pembrolizumab y una variante del pembrolizumab comprenden secuencias CDR idénticas, pero difieren entre sí por tener una sustitución conservadora de aminoácidos en no más de otras tres o seis posiciones en sus secuencias de cadena ligera y pesada de longitud completa, respectivamente. Una variante del pembrolizumab es sustancialmente igual al pembrolizumab con respecto a las siguientes propiedades: afinidad de unión a la PD-1 y capacidad de bloquear la unión de cada una de las PD-L1 y PD-L2 a la PD-1.

[0181] Paciente / Cáncer / Definiciones de respuesta. "Criterios de respuesta RECIST 1.1", tal como se utilizan en la presente, significa las definiciones establecidas en Eisenhauer et al., E.A. et al., Eur.. J. Cancer 45: 228-247 (2009) para lesiones objetivo o no objetivo, según proceda en función del contexto en el que se esté midiendo la respuesta.

[0182] "Paciente respondedor" cuando se refiere a una respuesta antitumoral específica al tratamiento con una terapia combinada descrita en la presente, significa que el paciente presentó la respuesta antitumoral.

[0184] "Respuesta sostenida" significa un efecto terapéutico sostenido tras el cese del tratamiento con un agente terapéutico, o una terapia combinada descrita en la presente. En algunos casos, la respuesta sostenida tiene una duración que es al menos igual a la duración del tratamiento, o al menos 1,5, 2,0, 2,5 o 3 veces mayor que la duración del tratamiento.

[0186] "Sección de tejido" se refiere a una sola parte o pieza de una muestra de tejido, por ejemplo, un delgado corte de tejido cortado de una muestra de un tejido normal o de un tumor.

[0188] "Tratar" o "tratando" un cáncer, tal como se utiliza en la presente, significa administrar una terapia combinada de un antagonista de PD-1, lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y E7386 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo a un sujeto que tenga un cáncer, o al que se le haya diagnosticado un cáncer, para lograr al menos un efecto terapéutico positivo, como por ejemplo, la reducción del número de células cancerosas, la reducción del tamaño del tumor, la reducción de la tasa de infiltración de células cancerosas en órganos periféricos, o la reducción de la tasa de metástasis o crecimiento del tumor. Los efectos terapéuticos positivos en el cáncer pueden medirse de varias maneras (véase,W. A. Weber, J. Nucl. Med.50:1S-10S (2009)). Por ejemplo, con respecto a la inhibición del crecimiento tumoral, de acuerdo con las normas del INC, un T/C ≦42% es el nivel mínimo de actividad antitumoral. Un T/C < 10% se considera un nivel de actividad antitumoral alto, siendo T/C (%) = Volumen tumoral mediano del tratado/Volumen tumoral mediano del control × 100. En algunos casos, la respuesta a una terapia de combinación descrita en la presente se valora utilizando los criterios RECIST 1.1 o CRri (bidimensional o unidimensional) y el tratamiento conseguido mediante una combinación de lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, (6S,9aS)-N-bencil-8-({6-[3-(4-etilpiperazin-1-il)azetidin-1-il]piridin-2-il}metil)-6-(2-fluoro-4-hidroxibencil)-4,7-dioxo-2-(prop-2-en-1-il)hexahidro-2H-pirazino[2,1-c][1,2,4]triazina-1(6H)-carboxamida (E7386) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un antagonista de PD-1 es cualquiera de RP, RC, OR, SLP, SLE y SG. La SLP, también denominada "Tiempo hasta la progresión del tumor", indica el tiempo durante y después del tratamiento en que el cáncer no crece, e incluye el tiempo en que los pacientes han experimentado una RC o una RP, así como el tiempo en que los pacientes han experimentado una DS. La SSE se refiere al tiempo durante y después del tratamiento que el paciente permanece libre de la enfermedad. La SG se refiere a una prolongación de la esperanza de vida en comparación con individuos o pacientes sin tratamiento o no tratados. En algunos casos, la respuesta a una combinación de lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, (6S,9aS)-N-bencil-8-({6-[3-(4-etilpiperazin-1-il)azetidin-1-il]piridin-2-il}metil)-6-(2-fluoro-4-hidroxibencil)-4,7-dioxo -2-(prop-2-en-1-il)hexahidro-2H-pirazino[2,1-c][1,2,4]triazina-1(6H)-carboxamida (E7386) o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, y un antagonista de PD-1 es cualquiera de RP, RC, SLP, SLE, OR y SG que se valora utilizando los criterios de respuesta RECIST 1.1. El régimen de tratamiento de la combinación divulgada que es eficaz para tratar a un paciente con cáncer puede variar en función de factores como el estado de la enfermedad, la edad y el peso del paciente, y la capacidad de la terapia para provocar una respuesta anticancerígena en el sujeto. Los métodos de tratamiento, los medicamentos y los usos divulgados pueden no ser eficaces para lograr un efecto terapéutico positivo en todos los sujetos, deben hacerlo en un número estadísticamente significativo de sujetos según lo determine cualquier prueba estadística conocida en la técnica como la prueba t de Student, la prueba chi<2>, la prueba U según Mann y Whitney, la prueba Kruskal-Wallis (prueba H), la prueba Jonckheere-Terpstra y la prueba Wilcoxon.

[0190] Los términos "régimen de tratamiento", "protocolo de dosificación" y "régimen de dosificación" se utilizan indistintamente para referirse a la dosis y el momento de administración de cada agente terapéutico en una combinación de un lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, (6S,9aS)-N-bencil-8-({6-[3-(4-etilpiperazin-1-il)azetidin-1-il]piridin-2-il}metil)-6-(2-fluoro-4-hidroxibencil)-4,7-dioxo -2-(prop-2-en-1-il)hexahidro-2H-pirazino[2,1-c][1,2,4]triazina-1(6H)-carboxamida (E7386) o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, y un antagonista de PD-1.

[0191] "Tumor", tal y como se aplica a un sujeto diagnosticado o sospechoso de padecer un cáncer, se refiere a una neoplasia maligna o potencialmente maligna o a una masa tisular de cualquier tamaño, e incluye tumores primarios y neoplasias secundarias. Un tumor sólido es un crecimiento o masa anormal de tejido que no suele contener quistes ni zonas líquidas. Los distintos tipos de tumores sólidos reciben su nombre del tipo de células que los forman. Ejemplos de tumores sólidos son los sarcomas, los carcinomas y los linfomas.

[0192] "Carga tumoral” (Tumor burdenotumor load, en inglés), se refiere a la cantidad total de material tumoral distribuido por todo el cuerpo. La carga tumoral se refiere al número total de células cancerosas o al tamaño total del tumor o tumores, en todo el cuerpo, incluidos los ganglios linfáticos y el estrecho óseo. La carga tumoral puede determinarse por una variedad de métodos conocidos en la técnica, como, por ejemplo, midiendo las dimensiones del tumor o tumores al extraerlos del sujeto, por ejemplo, utilizando calibradores, o mientras se encuentran en el cuerpo mediante técnicas de imagenología, por ejemplo, ultrasonidos, gammagrafía ósea, tomografía computarizada (TC) o resonancia magnética (RM).

[0193] El término "tamaño del tumor" se refiere al tamaño total del tumor que puede medirse como la longitud y la anchura de un tumor. El tamaño del tumor puede determinarse mediante diversos métodos conocidos en la técnica, como, por ejemplo, midiendo las dimensiones del tumor o tumores al extraerlos del sujeto, por ejemplo, utilizando calibradores, o mientras se encuentran en el cuerpo mediante técnicas de imagenología, por ejemplo, gammagrafía ósea, ultrasonidos, tomografía computarizada o resonancia magnética.

[0194] "El CRri unidimensional se refiere al conjunto de criterios descritos en Nishino M, Giobbie-Hurder A, Gargano M, Suda M, Ramaiya NH, Hodi FS.. "Developing a Common Language for Tumor Response to Immunotherapy: Immune-related Response Criteria using Unidimensional measurements," Clin. Cancer Res.2013, 19(14): 3936-3943). Estos criterios utilizan el diámetro más largo (cm) de cada lesión.

[0195] Por "inhibidor multi-RTK" se entiende un compuesto de molécula pequeña que inhibe las actividades del receptor tirocinasa (RTK) de al menos cada uno de los siguientes RTK: (i) VEGFR2, y (ii) al menos un FGFR seleccionado del grupo formado por FGFR1, 2, 3 y 4. Un inhibidor multi-RTK ejemplar es el lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0196] La β-catenina funciona como mediador de la transducción de señales Wnt, se une a un factor de transcripción Tcf/Lef (factor de células T/factor potenciador de linfocitos), promueve la expresión de diversos genes (ciclina D1, c-Myc, etc.) implicados en la transducción de señales Wnt y controla la proliferación y diferenciación de las células (He et al., 1998 Science 281: 1509-1512; Kolligs et al., Mol. Cell. Biol. 19: 5696-5706, 1999; Crawford et al., Oncogene 18: 2883-2891, 1999; Shtutman et al., Proc. Natl. Acad. Sci. EE.UU., 11: 5522-5527, 1999; Tetsu and McCormick, 1999 Nature, 398: 422-426).

[0197] CBP (la proteína de unión al elemento de respuesta al AMP cíclico (proteína de unión a CREB) interactúa directamente con la β-catenina en el dominio de unión a CREB y promueve la activación de la transcripción de Tcf/Lef (Ken-Ichi Takemaru y Randall T. Moon, 2000, J. Cell.. Biol.149(2): 249-254). Un inhibidor de CBP/β-catenina no está particularmente limitado siempre que inhiba la interacción entre CBP y catenina, particularmente βcatenina, y es preferible una realización en la que se inhiba la unión de β-catenina y CBP, como resultado de lo cual se suprima la expresión génica por el complejo β-catenina.

[0198] La inhibición de CBP/β-catenina puede medirse mediante un ensayo de unión (ensayo de unión por radio, etc.) conocidoper se,un método de ensayo reportero, y otros ensayosin vitroein vivosimilares. La inhibición puede confirmarse midiendo la expresión génica de la transducción de la señal Wnt mediante el método de ensayo reportero descrito en WO 2009/148192.

[0199] El inhibidor de CBP/β-catenina de la presente divulgación no está particularmente limitado siempre que sea como se ha definido anteriormente. Se trata preferiblemente de un compuesto mimético de α-hélice que tiene una actividad inhibidora de CBP/β-catenina, y ejemplos de los mismos incluyen compuestos miméticos de α-hélice, sales farmacéuticamente aceptables de los mismos y similares descritos en WO 2003/031448, WO 2004/093828, WO 2005/116032, WO 2009/148192, WO 2010/044485, WO 2010/128685, WO 2012/115286, y similares. Un inhibidor ejemplar de CBP/β-catenina incluye (6S,9aS)-N-bencil-8-({6-[3-(4-etilpiperazin-1-il)azetidin-1-il]piridin-2-il}metil)-6-(2-fluoro-4-hidroxibencil)-4,7-dioxo -2-(prop-2-en-1-il)hexahidro-2H-pirazino[2,1-c][1,2,4]triazina-1(6H)-carboxamida (E7386).

[0200] Cada uno de los antagonistas de PD-1, lenvatinib y E7386 en la terapia de combinación divulgada en la presente puede administrarse solo o en un medicamento/formulación (también denominado en la presente composición farmacéutica) que comprenda el agente terapéutico y uno o más portadores, excipientes y diluyentes farmacéuticamente aceptables, según la práctica farmacéutica habitual. Cada agente terapéutico puede prepararse formulando lenvatinib o su sal farmacéuticamente aceptable, un anticuerpo anti-PD-1 y/o un E7386 o su sal farmacéuticamente aceptable, pueden administrarse al mismo tiempo o por separado. Además, las formulaciones pueden colocarse en un único envase, para proporcionar la denominada formulación en kit.

[0201] El lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable puede producirse por el método descrito en la referencia 17. Los ejemplos de sal farmacéuticamente aceptable incluyen sales con ácidos inorgánicos, sales con ácidos orgánicos, sales con bases inorgánicas, sales con bases orgánicas y sales con aminoácidos ácidos o básicos. Entre los ejemplos preferidos de sales con ácidos inorgánicos se incluyen las sales con ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico y similares. Entre los ejemplos preferidos de sales con ácidos orgánicos se incluyen las sales con ácido acético, ácido succínico, ácido fumárico, ácido maleico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido láctico, ácido esteárico, ácido benzoico, ácido metanosulfónico, ácido etanosulfónico, ácido p-toluenosulfónico y similares. Los ejemplos preferidos de las sales con bases inorgánicas incluyen sales de metales alcalinos como una sal de sodio y una sal de potasio; sales de metales alcalinotérreos como una sal de calcio y una sal de magnesio; una sal de aluminio; y una sal de amonio. Entre los ejemplos preferidos de sales con bases orgánicas se incluyen las sales con dietilamina, dietanolamina, meglumina, N,N-dibenciletilendiamina y similares. Entre los ejemplos preferidos de sales con aminoácidos ácidos se incluyen las sales con ácido aspártico, ácido glutámico y similares. Entre los ejemplos preferidos de sales con aminoácidos básicos se incluyen las sales con arginina, lisina, ornitina y similares. Las sales farmacéuticamente aceptables más preferidas son las sales con ácidos orgánicos y las sales farmacéuticamente aceptables especialmente preferidas son las sales con ácido metanosulfónico.

[0202] El antagonista de PD-1, el lenvatinib o su sal farmacéuticamente aceptable y el E7386 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en una terapia combinada divulgada en la presente pueden administrarse simultáneamente (es decir, en el mismo medicamento), concurrentemente (es decir, en medicamentos separados administrados uno justo después del otro en cualquier orden) o secuencialmente en cualquier orden. La administración secuencial es especialmente útil cuando los agentes terapéuticos de la terapia combinada están en formas de dosificación diferentes (un agente es un comprimido o una cápsula y otro es un líquido estéril) y/o se administran con diferentes esquemas de dosificación, por ejemplo, un quimioterapéutico que se administra al menos a diario y un bioterapéutico que se administra con menos frecuencia, como una vez a la semana, una vez cada dos semanas o una vez cada tres semanas.

[0203] En algunos casos, el lenvatinib o su sal farmacéuticamente aceptable se administra antes de la administración del antagonista de PD-1 y/o el inhibidor de CBP/β-catenina, mientras que en otros casos, el inhibidor multi-RTK se administra después de la administración del antagonista de PD-1 y/o el E7386 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0204] En algunos casos, al menos uno de los agentes terapéuticos de la terapia combinada se administra utilizando el mismo régimen de dosificación (dosis, frecuencia y duración del tratamiento) que se emplea habitualmente cuando el agente se utiliza como monoterapia para tratar el mismo cáncer. En otros casos, el paciente recibe una cantidad total menor de al menos uno de los agentes terapéuticos en la terapia combinada que cuando el agente se utiliza como monoterapia, por ejemplo, dosis más pequeñas, dosis menos frecuentes y/o una duración más corta del tratamiento.

[0205] Cada agente terapéutico de molécula pequeña en una terapia combinada divulgada en la presente puede administrarse por vía oral en forma de una formulación sólida como un comprimido, gránulo, gránulo fino, polvo o cápsula, o en forma de líquido, gelatina, jarabe o similar. Cada agente terapéutico de molécula pequeña en una terapia combinada divulgada en la presente puede administrarse por vía parenteral, incluidas las vías de administración intravenosa, intramuscular, intraperitoneal, subcutánea, rectal, tópica y transdérmica.

[0206] Una terapia combinada divulgada en la presente puede utilizarse antes o después de la cirugía para extirpar un tumor y puede utilizarse antes, durante o después de la radioterapia.

[0207] En algunos casos, una terapia combinada divulgada en la presente se administra a un paciente que no ha sido tratado previamente con un agente bioterapéutico o quimioterapéutico, es decir, que no ha recibido tratamiento. En otros casos, la terapia combinada se administra a un paciente que no ha logrado una respuesta sostenida tras una terapia previa con un agente bioterapéutico o quimioterapéutico, es decir, que tiene experiencia en el tratamiento.

[0208] Una terapia combinada divulgada en la presente se utiliza normalmente para tratar un tumor que es lo suficientemente grande como para ser detectado por palpación o por técnicas de imagen bien conocidas en la técnica, como la resonancia magnética (RM), el ultrasonido o la tomografía axial computarizada (TAC).

[0209] Una terapia combinada divulgada en la presente se administra preferiblemente a un paciente humano que tiene un cáncer que da positivo en las pruebas de expresión de PD-L1. La expresión de PD-L1 se detecta preferiblemente utilizando un anticuerpo de diagnóstico anti PD-L1 humana, o un fragmento de unión a antígeno del mismo, en un ensayo de IHQ en una sección de tejido FFIP o congelado de una muestra tumoral extraída del paciente. Normalmente, el médico del paciente ordenaría una prueba diagnóstica para determinar la expresión de PD-L1 en una muestra de tejido tumoral extraída del paciente antes de iniciar el tratamiento con el antagonista de PD-1, el E7386 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y el lenvatinib o su sal farmacéuticamente aceptable, pero se prevé que el médico podría ordenar la primera o las siguientes pruebas diagnósticas en cualquier momento después de iniciar el tratamiento, como por ejemplo después de completar un ciclo de tratamiento.

[0210] La selección de un régimen de dosificación (también denominado en la presente como régimen de administración) para una terapia combinada divulgada en la presente depende de varios factores, como la tasa de recambio sérico o tisular de la entidad, el nivel de los síntomas, la inmunogenicidad de la entidad y la accesibilidad de las células, tejidos u órganos objetivo en el individuo tratado. Preferiblemente, un régimen de dosificación maximiza la cantidad de cada agente terapéutico administrado al paciente de forma coherente con un nivel aceptable de efectos secundarios. En consecuencia, la cantidad de dosis y la frecuencia de dosificación de cada agente bioterapéutico y quimioterapéutico de la combinación depende en parte del agente terapéutico concreto, de la gravedad del cáncer que se esté tratando y de las características del paciente. Se dispone de orientación para seleccionar las dosis adecuadas de anticuerpos, citocinas y moléculas pequeñas. Véase, por ejemplo, Wawrzynczak (1996) ANTIBODY THERAPY, Bios Scientific Pub.. Ltd, Oxfordshire, UK; Kresina (ed.) (1991) MONOCLONAL ANTIBODIES, CYTOKINES AND ARTHRITIS, Marcel Dekker, New York, NY; Bach (ed.) (1993) MONOCLONAL ANTIBODIES AND PEPTIDE THERAPY IN AUTOIMMUNE DISEASES, Marcel Dekker, New York, NY; Baert et al. (2003) New Engl. J. Med. 348: 601-608; Milgrom et al. (1999) New Engl. J. Med. 341: 1966-1973; Slamon et al. (2001) New Engl. J. Med.344: 783-792; Beniaminovitz et al. (2000) New Engl. J. Med.342: 613-619; Ghosh et al. (2003) New Engl. J. Med. 348: 24-32; Lipsky et al. (2000) New Engl. J. Med. 343: 1594-1602; PHYSICIANS' DESK REFERENCE 2003 (Physicians' Desk Reference, 57th Ed.); Medical Economics Company; ISBN: 1563634457; 57th edition (November 2002). La determinación del régimen de dosificación adecuado puede realizarla el clínico, por ejemplo, utilizando parámetros o factores conocidos o sospechados en la técnica que afecten al tratamiento o que se prevea que puedan afectarlo, y dependerá, por ejemplo, del historial clínico del paciente (por ejemplo, la terapia previa), el tipo y la etapa del cáncer a tratar y los biomarcadores de respuesta a uno o más de los agentes terapéuticos de la terapia combinada.

[0211] Los agentes bioterapéuticos en una terapia combinada divulgados en la presente (es decir, el antagonista de PD-1, lenvatinib o su sal farmacéuticamente aceptable, y E7386 o su sal farmacéuticamente aceptable) pueden administrarse mediante perfusión continua, o mediante dosis a intervalos de, por ejemplo, diariamente, cada dos días, tres veces por semana, o una vez cada semana, dos semanas, tres semanas, mensualmente, bimensualmente, etc. Una dosis semanal total es generalmente de al menos 0,05 µg/kg, 0,2 µg/kg, 0,5 µg/kg, 1 µg/kg, 10 µg/kg, 100 µg/kg, 0,2 mg/kg, 1,0 mg/kg, 2,0 mg/kg, 10 mg/kg, 25 mg/kg, 50 mg/kg de peso corporal o más. Véase, por ejemplo, Yang et al. (2003) New Engl. J. Med. 349: 427-434; Herold et al. (2002) New Engl. J. Med. 346: 1692-1698; Liu et al. (1999) J. Neurol. Neurosurg. Psych. 67: 451-456; Portielji et al. (2003) Cancer Immunol. Immunother. 52: 133-144. El cemiplimab-rwlc (LIBTAYO®) es otro antagonista de PD-1. Puede administrarse por vía intravenosa en donde se administran 350 mg en 30 minutos una vez cada 3 semanas (Q3W). La dosis de lenvatinib o de su sal farmacéuticamente aceptable puede seleccionarse adecuadamente en función de los grados de los síntomas, la edad, el sexo y el peso corporal del paciente, la diferencia de sensibilidad, la vía, el tiempo de administración y el intervalo de administración, el tipo de formulación farmacéutica y/o similares. Típicamente, en los casos en que la administración oral se lleva a cabo para un adulto (60 kg de peso corporal), la dosis es de 1 a 600 mg, preferiblemente de 5 a 400 mg, más preferiblemente de 5 a 200 mg al día. La dosis puede administrarse de una sola vez o dividirse en dosis más pequeñas suministradas de 2 a 3 veces al día.

[0212] En algunos casos en los que se emplea un mAb anti PD-1 humana como antagonista de PD-1 en la terapia combinada, el régimen de dosificación comprenderá la administración del mAb anti PD-1 humana a una dosis de 1, 2, 3, 5 o 10 mg/kg a intervalos de unos 14 días (± 2 días) o unos 21 días (± 2 días) o unos 30 días (± 2 días) a lo largo del curso del tratamiento. La dosificación de un anticuerpo anti-PD-1 puede seleccionarse adecuadamente de la misma manera que en el caso anterior. Típicamente, en los casos en que la administración intravenosa se lleva a cabo para un adulto (60 kg de peso corporal), la dosis puede ser de 2 mg/kg en un esquema de una vez cada 3 semanas en un ciclo de 6 semanas (un total de 2 dosis). El anticuerpo puede administrarse durante 1 a 10 ciclos con un intervalo adecuado.

[0213] En otros casos en los que se emplea un mAb anti PD-1 humana como antagonista de PD-1 en la terapia combinada, el régimen de dosificación comprenderá la administración del mAb anti PD-1 humana a una dosis de aproximadamente 0,005 mg/kg a aproximadamente 10 mg/kg, con escalado de dosis intrapaciente. El intervalo entre dosis puede acortarse progresivamente, por ejemplo, unos 30 días (± 2 días) entre la primera y la segunda dosis, unos 14 días (± 2 días) entre la segunda y la tercera dosis. En ciertas realizaciones, el intervalo de dosificación será de unos 14 días (± 2 días), para las dosis posteriores a la segunda dosis.

[0214] En casos específicos, se puede administrar a un sujeto una infusión intravenosa (IV) de un medicamento que comprenda cualquiera de los antagonistas de PD-1 descritos en la presente.

[0215] El antagonista de PD-1 en la terapia combinada es preferiblemente nivolumab en algunos casos, que se administra por vía intravenosa a una dosis seleccionada del grupo que consiste en: 1 mg/kg Q2W, 2 mg/kg Q2W, 3 mg/kg Q2W, 5 mg/kg Q2W, 10 mg Q2W, 1 mg/kg Q3W, 2 mg/kg Q3W, 3 mg/kg Q3W, 5 mg/kg Q3W, y 10 mg Q3W. El antagonista de PD-1 también puede ser cemiplimab-rwlc administrado por vía intravenosa a una dosis de 350 mg una vez cada tres semanas.

[0216] El antagonista de PD-1 en la terapia combinada es preferiblemente pembrolizumab, una variante de pembrolizumab o un bioequivalente de pembrolizumab en algunos casos, que se administra en un medicamento líquido a una dosis seleccionada del grupo que consiste en 1 mg/kg Q2W, 2 mg/kg Q2W, 3 mg/kg Q2W, 5 mg/kg Q2W, 10 mg Q2W, 1 mg/kg Q3W, 2 mg/kg Q3W, 3 mg/kg Q3W, 5 mg/kg Q3W, 10 mg Q3W y dosis planas equivalentes de cualquiera de estas dosis, es decir, como 200 mg Q3W y 400 mg Q6W. En algunos casos, el pembrolizumab se suministra como un medicamento líquido que comprende 25 mg/ml de pembrolizumab, 7% (p/v) de sacarosa, 0,02% (p/v) de polisorbato 80 en disolución amortiguadora de histidina 10 mM, pH 5,5.

[0217] En algunos casos, la dosis seleccionada de pembrolizumab se administra mediante infusión intravenosa durante un periodo de tiempo de entre 25 y 40 minutos, o de unos 30 minutos.

[0218] La dosis óptima de pembrolizumab en combinación con lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo (por ejemplo, mesilato de lenvatinib) y un inhibidor de CBP/β-catenina (por ejemplo, E7386) puede identificarse mediante el aumento o la reducción de la dosis de uno o ambos agentes. En algunos casos, la terapia combinada comprende un ciclo de tratamiento de 21 días en el que se administra pembrolizumab a 200 mg Q3W por vía IV (o 400 mg Q6W por vía IV), un inhibidor de CBP/catenina, el mesilato de lenvatinib a (a) 24 mg al día por vía oral, (b) 20 mg al día por vía oral o (c) 14 mg al día por vía oral, cada uno como lenvatinib.

[0219] Un paciente puede tratarse primero con una cantidad diaria de un inhibidor de CBP/β-catenina, 200 mg de pembrolizumab Q3W por vía IV (o 400 mg Q6W por vía IV) y 24 mg (como lenvatinib) de mesilato de lenvatinib al día por vía oral hasta que se observe al menos un TLD y, entonces, la dosificación de mesilato de lenvatinib puede reducirse a 20 o 14 mg (cada uno como lenvatinib) al día, mientras que la dosis de pembrolizumab puede continuarse a 200 mg de pembrolizumab Q3W (o 400 mg Q6W por vía IV) y el inhibidor de CBP/β-catenina puede continuarse a la misma dosis diaria o reducirse.

[0220] Como ejemplo de régimen de dosificación, el lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo puede administrarse con agua por vía oral una vez al día, con o sin alimentos, en ciclos de 21 días aproximadamente a la misma hora cada día. El lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo puede suministrarse como cápsulas de 4 mg y 10 mg (cada una como lenvatinib). El día uno (D1) de cada ciclo, puede administrarse lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo aproximadamente 1 hora después de finalizar la administración de pembrolizumab y/o E7386 o su sal farmacéuticamente aceptable. El pembrolizumab puede suministrarse como polvo liofilizado estéril, sin conservantes, de color blanco a blanquecino, en viales de un solo uso. Cada vial puede reconstituirse y diluirse para infusión intravenosa. Cada 2 mL de disolución reconstituida puede contener aproximadamente 50 mg de pembrolizumab. En algunos casos, el pembrolizumab puede suministrarse como una solución estéril, sin conservantes, transparente a ligeramente opalescente, incolora a ligeramente amarilla, que requiere dilución para perfusión intravenosa. Cada vial puede contener 100 mg de pembrolizumab en 4 mL de disolución. Cada 1 mL de disolución puede contener 25 mg de pembrolizumab. El pembrolizumab puede administrarse en dosis de 200 mg en infusión intravenosa de 30 minutos, Q3W (de 25 a 40 minutos, por ejemplo). En los casos en que se prepara una formulación sólida oral, se puede añadir al componente principal, es decir, un compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo representado por la Fórmula (I), un vehículo farmacéuticamente aceptable y, según sea necesario, un aglutinante, desintegrante, lubricante, colorante, aromatizante y/o similares, un inhibidor de CBP/β-catenina y/o un anticuerpo anti-PD-1, para preparar, a continuación, un comprimido, gránulo, gránulo fino, polvo, cápsula o similar de acuerdo con un método convencional. Algunos ejemplos de vehículo son la lactosa, el almidón de maíz, el azúcar blanco blando, la glucosa, el sorbitol, la celulosa cristalina y el dióxido de silicio. Algunos ejemplos del aglutinante son el alcohol polivinílico, la etilcelulosa, la metilcelulosa, la goma arábiga, la hidroxipropilcelulosa y la hidroxipropilmetilcelulosa. Algunos ejemplos de lubricante son el estearato de magnesio, el talco y la sílice. Algunos ejemplos de colorantes son el óxido de titanio, el sesquióxido de hierro, el sesquióxido de hierro amarillo, la cochinilla, el carmín y la riboflavina. Algunos ejemplos de agentes aromatizantes son el cacao en polvo, el ácido ascórbico, el ácido tartárico, el aceite de menta, el borneol y la canela en polvo. Estos comprimidos y gránulos pueden estar recubiertos según las necesidades.

[0221] En algunos casos, el paciente es tratado con la terapia combinada durante al menos 24 semanas, por ejemplo, ocho ciclos de 3 semanas. En algunos casos, el tratamiento con la terapia combinada continúa hasta que el paciente muestra evidencias de EP o una RC.

[0222] En algunos casos, el paciente seleccionado para el tratamiento con la terapia de combinación divulgada en la presente si el paciente ha sido diagnosticado con un carcinoma de células renales (CCR), un cáncer colorrectal (CRC), un carcinoma hepatocelular (CHC), un melanoma, un cáncer de vejiga, un cáncer urotelial, un cáncer de mama, un cáncer de pulmón no microcítico (CPNM), un cáncer de endometrio, o un carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello.

[0223] Un "fármaco terapéutico" o "terapia combinada para un cáncer comprende un antagonista de PD-1 (por ejemplo, un anticuerpo anti-PD-1), lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y E7386 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. El fármaco puede formularse de forma que cada uno de los 3 fármacos esté separado y se administre por separado o en una combinación de dos de los tres fármacos, o en conjunto mediante un método apropiado para la administración deseada, por ejemplo, administración oral, transnasal, mucosa, rectal, vaginal, tópica, intravenosa, intraperitoneal, intradérmica, subcutánea e intramuscular y similares. La determinación de la dosis y, por tanto, del momento de administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de una terapia combinada contra el cáncer que contenga una combinación de un antagonista de PD-1, lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y E7386 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo está suficientemente al alcance de los expertos en la materia. Por ejemplo, la cantidad eficaz inicial puede suponerse a partir del cultivo celular u otro ensayoin vitro. La dosis puede establecerse para crear una concentración circulatoria o tisular, como la concentración IC<50>y similares, determinada mediante un ensayo de cultivo celular y/o en un modelo animal.

[0224] Se selecciona un método de administración en función de la condición en tratamiento y del fármaco terapéutico. El antagonista de PD-1, el lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y el E7386 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo pueden administrarse por diversos métodos. Por ejemplo, uno o varios de los componentes pueden administrarse a un sujeto por cualquiera de las siguientes vías: subcutánea, intravenosa, intraperitoneal, intramuscular y sistémica y, en algunos casos, inyección directa en un órgano o tumor concreto y similares. Un antagonista de PD-1, lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y E7386 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo pueden administrarse a través de una sola vía, o simultáneamente varias vías al mismo tiempo o secuencialmente como se describe en la presente.

[0225] El E7386 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo puede administrarse una vez al día, dos veces al día, varias veces al día o incluso más veces al día, dependiendo, entre otras cosas, de la indicación del tratamiento y del criterio del médico que lo prescribe.

[0226] Las cantidades de un antagonista de PD-1, lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y E7386 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo necesarias para proporcionar un efecto de tratamiento pueden determinarse empíricamente de acuerdo con los procedimientos convencionales para un objetivo particular. Por lo general, las células se administran en una dosis farmacológicamente eficaz cuando se administran para el objeto del tratamiento. La "cantidad farmacológicamente eficaz" o "dosis farmacológicamente eficaz" se refiere a una cantidad suficiente para producir un efecto fisiológico deseado o capaz de lograr un resultado deseado, como reducir o eliminar uno o más síntomas o indicios de un trastorno o enfermedad y similares, para tratar un trastorno o estado de enfermedad concreto.

[0227] La terapia combinada puede ser una combinación de un antagonista de PD-1, lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y E7386 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo que puede combinarse además con otros tratamientos contra el cáncer, por ejemplo, resección quirúrgica, radioterapia, quimioterapia, inmunoterapia y terapia de apoyo (por ejemplo, analgésicos, diuréticos, antidiuréticos, fármacos antivirales, antibióticos, suplementos nutricionales, tratamiento de la anemia, tratamiento de la coagulación sanguínea, tratamiento óseo y tratamientos psicopatológicos y psicológicos) y similares.

[0228] Métodos generales. Los métodos estándar en biología molecular se describen en Sambrook, Fritsch and Maniatis (1982 & 19892nd Edition, 20013rd Edition) MOLECULAR CLONING, A LABORATORY MANUAL, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY; Sambrook and Russell (2001) MOLECULAR CLONING, 3rd ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY; Wu (1993) RECOMBINANT DNA, Vol. 217, Academic Press, San Diego, CA). Los métodos estándar también aparecen en Ausbel, et al.. (2001) Current Protocols in Molecular Biology, Vols.1-4, John Wiley and Sons, Inc. Nueva York, NY, que describe la clonación en células bacterianas y la mutagénesis del ADN (Vol. 1), la clonación en células de mamíferos y levaduras (Vol.

[0229] 2), glucoconjugados y expresión de proteínas (Vol.3), y bioinformática (Vol.4).

[0230] Se describen métodos para la purificación de proteínas que incluyen inmunoprecipitación, cromatografía, electroforesis, centrifugación y cristalización (Coligan, et al.. (2000) CURRENT PROTOCOLS IN PROTEIN SCIENCE, Vol.1, John Wiley and Sons, Inc., New York). Se describen el análisis químico, la modificación química, la modificación postraduccional, la producción de proteínas de fusión, la glucosilación de proteínas (véase, por ejemplo, Coligan, et al.. (2000) Current PROTOCOLS IN PROTEIN SCIENCE, Vol.2, John Wiley and Sons, Inc., Nueva York; Ausubel, et al.. (2001) CURRENT PROTOCOLS IN MOLECULAR BIOLOGY, Vol.3, John Wiley and Sons, Inc., NY, NY, pp.16.0.5-16.22.17; Sigma-Aldrich, Co. (2001) PRODUCTS FOR LIFE SCIENCE RESEARCH, St. Louis, MO; pp.45-89; Amersham Pharmacia Biotech (2001) BioDirectory, Piscataway, N.J., pp.384-391). Se describe la producción, purificación y fragmentación de anticuerpos policlonales y monoclonales (Coligan, et al. (2001) CURRENT PROTCOLS IN IMMUNOLOGY, Vol.1, John Wiley and Sons, Inc., New York; Harlow and Lane (1999) USING ANTIBODIES, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY; Harlow and Lane, supra). Existen técnicas estándar para caracterizar las interacciones ligando/receptor (véase, por ejemplo, Coligan, et al. (2001) CURRENT PROTOCOLS IN IMMUNOLOGY, Vol.4, John Wiley, Inc., New York).

[0231] Se pueden preparar anticuerpos monoclonales, policlonales y humanizados (véase, por ejemplo, Sheperd y Dean (eds.) (2000) Monoclonal Antibodies, Oxford Univ. Press, New York, NY; Kontermann and Dubel (eds.) (2001)Antibody Engineering, Springer-Verlag, New York; Harlow and Lane (1988) Antibodies A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, pp.139-243; Carpenter, et al. (2000) J. Immunol.

[0232] 165:6205; He, et al. (1998) J. Immunol.160:1029; Tang et al. (1999) J. Biol. Chem.274:27371-27378; Baca et al. (1997) J. Biol. Chem.272:10678-10684; Chothia et al. (1989) Nature 342:877-883; Foote and Winter (1992) J. Mol. Biol.224:487-499; Pat. de EE.UU. No.6,329,511).

[0233] Una alternativa a la humanización de anticuerpos es utilizar bibliotecas de anticuerpos humanos desplegados en fagos o bibliotecas de anticuerpos humanos en ratones transgénicos (Vaughan et al. (1996) Nature Biotechnol.14: 309-314; Barbas (1995) Nature Medicine 1: 837-839; Mendez et al. (1997) Nature Genetics 15: 146-156; Hoogenboom and Chames (2000) Immunol. Today 21: 371-377; Barbas et al. (2001) Despliegue en fagos: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York; Kay et al. (1996) Despliegue en fagos de péptidos y proteínas: A Laboratory Manual, Academic Press, San Diego, CA; de Bruin et al. (1999) Nature Biotechnol.17: 397-399).

[0234] La purificación del antígeno no es necesaria para la generación de anticuerpos. Los animales pueden ser inmunizados con células portadoras del antígeno de interés. Los esplenocitos pueden aislarse entonces de los animales inmunizados, y los esplenocitos pueden fusionarse con una línea celular de mieloma para producir un hibridoma (véase, por ejemplo, Meyaard et al. (1997) Immunity 7: 283-290; Wright et al. (2000) Immunity 13: 233-242; Preston et al., supra; Kaithamana et al. (1999) J. Immunol.163:5157-5164).

[0235] Los anticuerpos pueden conjugarse, por ejemplo, con pequeñas moléculas de fármacos, enzimas, liposomas, polietilenglicol (PEG). Los anticuerpos son útiles para fines terapéuticos, diagnósticos, de kit u otros, e incluyen anticuerpos acoplados, por ejemplo, a tintes, radioisótopos, enzimas o metales, por ejemplo, oro coloidal (véase, por ejemplo, Le Doussal et al. (1991) J. Immunol. 146: 169-175; Gibellini et al. (1998) J. Immunol.

[0236] 160:3891-3898; Hsing and Bishop (1999) J. Immunol.162: 2804-2811; Everts et al. (2002) J. Immunol.168: 883-889).

[0237] Se dispone de métodos de citometría de flujo, incluida la clasificación celular activada por fluorescencia (FACS, por sus siglas en inglés) (véase, por ejemplo, Owens, et al.). (1994) Flow Cytometry Principles for Clinical Laboratory Practice, John Wiley and Sons, Hoboken, NJ; Givan (2001) Flow Cytometry, 2nd ed.; Wiley-Liss, Hoboken, NJ; Shapiro (2003) Practical Flow Cytometry, John Wiley and Sons, Hoboken, NJ). Existen reactivos fluorescentes adecuados para modificar ácidos nucleicos, incluidos cebadores y sondas de ácidos nucleicos, polipéptidos y anticuerpos, para su uso, por ejemplo, como reactivos de diagnóstico (Catálogo de Molecular Probes y (2003), Molecular Probes, Inc., Eugene, O; Catálogo de Sigma-Aldrich (2003), St. Louis, MO).

[0238] Se describen métodos estándar de histología del sistema inmunitario (véase, por ejemplo, Muller-Harmelink (ed.) (1986) Human Thymus:. Histopathology and Pathology, Springer Verlag, New York, NY; Hiatt, et al. (2000) Color Atlas of Histology, Lippincott, Williams, and Wilkins, Phila, PA; Louis, et al. (2002) Basic Histology: Text and Atlas, McGraw-Hill, New York, NY).

[0239] Existen paquetes de software y bases de datos para determinar, por ejemplo, fragmentos antigénicos, secuencias líder, plegamiento de proteínas, dominios funcionales, sitios de glicosilación y alineamientos de secuencias (véase, por ejemplo, GenBank, Vector NTI® Suite (Informax, Inc, Bethesda, MD); GCG Wisconsin Package (Accelrys, Inc., San Diego, CA); DeCypher® (TimeLogic Corp., Crystal Bay, Nevada); Menne, et al. (2000) Bioinformatics 16: 741-742; Menne, et al. (2000) Bioinformatics Applications Note 16: 741-742; Wren, et al. (2002) Comput. Métodos Programas Biomed. 68: 177-181; von Heijne (1983) Eur. J. Biochem. 133: 17-21; von Heijne (1986) Nucleic Acids Res..14: 4683-4690).

[0240] La tabla 3 ofrece una breve descripción de las secuencias del listado de secuencias.

[0241] TABLA 3

[0243]

[0244]

[0247] Ejemplos

[0249] Ejemplo 1:

[0251] Efecto antitumoral de la triple combinación de E7386, lenvatinib y anticuerpo anti-PD-1

[0253] Se utilizó un medio esencial mínimo de Eagle (E-MEM) que contenía un 10% de suero fetal bovino (FBS) y penicilina/estreptomicina (100 unidades/mL cada uno) para cultivar una línea celular de carcinoma de células renales de ratón RAG (número ATCC: CCL-142). Las células en crecimiento logarítmico se recolectaron de los matraces utilizando tripsina-EDTA. La suspensión de células se centrifugó para eliminar el sobrenadante. A continuación, se utilizó solución salina equilibrada de Hanks (HBSS) para preparar una suspensión celular con una concentración de 2,5 x 10<7>células/mL. La suspensión celular se transplantó por vía subcutánea a una dosis de 0,1 ml en el lado lateral derecho del cuerpo de cada uno de los ratones, hembras, de 7 semanas de edad (BALB/cAnNCrlCrlj, Charles River Laboratories Japan Inc.). Ocho (8) días después del trasplante, se utilizó un calibrador digital electrónico (Digimatic (TM) Caliper; Mitutoyo Corporation) para medir los diámetros corto y largo de un tumor de interés. Se utilizaron las siguientes ecuaciones para calcular el volumen tumoral VT y VTR.

[0256]

[0258] Con base en los volúmenes tumorales del primer día de administración, se realizó una agrupación tal que los valores medios de los volúmenes tumorales fueran casi iguales. Se preparó una disolución de lenvatinib de 1 mg/mL utilizando HCl 3 mM y se administró por vía oral a una dosis de 0,2 mL/20 g de peso corporal de ratón una vez al día durante 28 días.0,2 mL de una muestra de administración que contenga 1,0 mg/mL de un anticuerpo anti-PD-1 de ratón (Clona: RMP1-14, BioXCell, N° de catálogo: BE0146), que se había diluido con PBS, se administró por vía intraperitoneal (a una dosificación de 200 µg/ratón) dos veces por semana un total de 8 veces (día 1, día 4, día 8, día 11, día 15, día 18, día 22 y día 25, con el día de la agrupación establecido en el día 1). Se preparó una disolución de 2,5 mg/mL de E7386 utilizando HCl 0,1 M y se administró por vía oral a una dosis de 0,2 mL/20 g de peso corporal de ratón una vez al día durante 28 días. Al grupo de control no se le administró nada. Se utilizaron 8 ratones por grupo para realizar el experimento. Dos veces por semana (día 1, día 4, día 8, día 11, día 15, día 18, día 22, día 25 y día 29), se determinaron los volúmenes tumorales (VT) respectivos del grupo de control, el grupo de administración de lenvatinib, el grupo de administración de anticuerpos anti-PD-1 de ratón, el grupo de administración de lenvatinib anticuerpos anti-PD-1 de ratón, el grupo de administración de E7386 lenvatinib y el grupo de triple combinación. Los valores obtenidos mediante la transformación logarítmica de los volúmenes tumorales se utilizaron para realizar el análisis estadístico por comparación múltiple de Dunnet de medidas repetidas. E7386 es (6S,9aS)-N-bencil-8-({6-[3-(4-etilpiperazin-1-il)azetidin-1-il]piridin-2-il}metil)-6-(2-fluoro-4-hidroxibencil)-4,7-dioxo -2-(prop-2-en-1-il)hexahidro-2H-pirazino[2,1-c][1,2,4]triazina-1(6H)-carboxamida. En el modelo de trasplante RAG subcutáneo (s.c.), la combinación triple de E7386, lenvatinib y el anticuerpo anti-PD-1 de ratón exhibió un efecto antitumoral significativamente mayor que cualquiera de las combinaciones duales (es decir,combinación de lenvatinib anticuerpo anti PD-1 o la combinación de lenvatinib E7386 ) o cada agente cuando se administró solo como monoterapia. Por ejemplo, en el día 29, el grupo de la combinación triple tenía un volumen tumoral 200 veces menor en comparación con el grupo de control y el grupo E7386. La combinación triple tuvo más de 30 veces menos y 120 veces menos volumen tumoral en comparación con el grupo de lenvatinib y el grupo de anticuerpos anti PD-1, respectivamente. Además, el grupo de la combinación triple tenía un volumen tumoral 9 veces menor y 17 veces menor en comparación con el grupo de la combinación lenvatinib anticuerpo anti PD-1 y el grupo de la combinación E7386 lenvatinib, respectivamente.

[0259] En el aspecto de la tasa de RC, la tasa observada con el grupo de combinación triple (lenvatinib, pembrolizumab y E7386) fue superior a las tasas observadas con los otros grupos de tratamiento (tasa de RC: 0, 0, 2, 1, 4, 1 y 7 de 8 ratones en el grupo de control, el grupo de lenvatinib, el grupo de anticuerpos anti-PD-1, el grupo de E7386, el grupo de lenvatinib anticuerpos anti PD-1, el grupo de E7386 lenvatinib y el grupo de triple combinación, respectivamente).

[0260] El cambio diario del volumen tumoral se muestra en la Tabla 4. Además, el curso temporal del cambio de los volúmenes tumorales durante la administración y el volumen tumoral relativo en el día 29 de cada grupo se muestran en la Figura 8 y la Figura 9, respectivamente.

[0261] TABLA 4

[0263]

[0265] Ejemplo 2:

[0266] Efecto antitumoral de la triple combinación de E7386, lenvatinib y anticuerpo anti-PD-1

[0267] Se utilizaron varios medios de cultivo para cultivar líneas celulares de ratón (véaseFiguras 10A-10C, columna A). Las células en crecimiento logarítmico se recolectaron de los matraces utilizando tripsina-EDTA. La suspensión de células se centrifugó para eliminar el sobrenadante. A continuación, se utilizó solución salina equilibrada de Hanks (HBSS) para preparar una suspensión celular que tuviera una determinada concentración de células (véase las Figuras 10A-10C, columna B). La suspensión celular se transplantó por vía subcutánea a una dosis de 0,1 mL en el lado lateral derecho del cuerpo de cada uno de los ratones inmunocompetentes de 7 semanas de edad (véanse las Figuras 10A-10C, columna C).

[0268] Varios días después del trasplante (véanse las Figuras 10A-10C, columna D), se utilizó un calibrador digital electrónico (Digimatic (TM) Caliper; Mitutoyo Corporation) para medir los diámetros corto y largo de un tumor en el animal. Se utilizaron las siguientes ecuaciones para calcular el volumen tumoral VT y VTR.

[0271]

[0273] Con base en los volúmenes tumorales del primer día de administración, se realizó una agrupación tal que los valores medios de los volúmenes tumorales fueran casi iguales. Se preparó una disolución de lenvatinib de 1 mg/mL utilizando HCl 3 mM y se administró por vía oral a una dosis de 0,2 mL/20 g de peso corporal de ratón una vez al día durante 28 días.0,2 mL de una muestra de administración que contiene 1,0 mg/mL de un anticuerpo anti-PD-1 de ratón (Clona: RMP1-14, BioXCell, N° de catálogo: BE0146), que se había diluido con PBS, se administró por vía intraperitoneal (a una dosificación de 200 µg/ratón) dos veces por semana durante 3 o 4 semanas (véase las Figuras 10A-10C, columna E). Se preparó una disolución de 2,5 mg/mL de E7386 utilizando HCl 0,1 M y se administró por vía oral a una dosis de 0,2 mL/20 g de peso corporal de ratón una vez al día durante 3 o 4 semanas (véase las Figuras 10A-10C, columna E). Al grupo de control no se le administró nada. Se utilizaron 8 ratones por grupo para realizar el experimento. Dos veces por semana durante 3 o 4 semanas (véanse las Figuras 10A-10C, columna E), se determinaron los volúmenes tumorales (VT) respectivos del grupo de control, el grupo de administración de lenvatinib, el grupo de administración de anticuerpos anti-PD-1 de ratón, el grupo de administración de lenvatinib anticuerpos anti-PD-1 de ratón, el grupo de administración de E7386 lenvatinib y el grupo de terapia combinada triple. Los valores obtenidos mediante la transformación logarítmica de los volúmenes tumorales se utilizaron para realizar el análisis estadístico por comparación múltiple de Dunnet de medidas repetidas. E7386 es (6S,9aS)-N-bencil-8-({6-[3-(4-etilpiperazin-1-il)azetidin-1-il]piridin-2-il}metil)-6-(2-fluoro-4-hidroxibencil)-4,7-dioxo -2-(prop-2-en-1-il)hexahidro-2H-pirazino[2,1-c][1,2,4]triazina-1(6H)-carboxamida.

[0274] Como se muestra en la Figura 11 y en las Figuras 12A-12G, la terapia de combinación triple de E7386, lenvatinib y el anticuerpo anti-PD-1 de ratón mostró un efecto antitumoral mayor que cualquiera de las combinaciones duales (es decir, la combinación de lenvatinib anticuerpo anti PD-1 o la combinación de lenvatinib E7386 ) o cada agente cuando se administró solo como monoterapia.

[0276] El volumen tumoral relativo (VTR) en el tiempo t se calculó mediante la fórmula:

[0278] Definimos la mejor respuesta media (MejorRespuestaMedia) como el valor mínimo del promedio de (VTR-100%) parat≥ 8 d (EC.4). Esta métrica captura una combinación de velocidad, fuerza y durabilidad de la respuesta en un único valor. Los criterios de respuesta (mRECIST) se adaptaron a partir de los criterios RECIST y se definieron como sigue (aplicados en este orden): mRC, MejorRespuestaMedia < -95%; mRP, MejorRespuestaMedia < -50%; mEE, MejorRespuestaMedia < 30%; mEP, no categorizado de otro modo.

[0280] Referencias

[0282] 1. Sharpe, A.H, Wherry, E.J., Ahmed R., and Freeman G.J. The function of programmed cell death 1 and its ligands in regulating autoimmunity and infection. Nature Immunology (2007); 8:239-245.

[0283] 2. Dong H et al. Tumor-associated B7-H1 promotes T-cell apoptosis: a potential mechanism of immune evasion. Nat Med.2002 Aug;8(8):793-800.

[0284] 3. Yang et al. PD-1 interaction contributes to the functional suppression of T-cell responses to human uveal melanoma cells in vitro. Invest Ophthalmol Vis Sci.2008 Jun;49(6 (2008): 49: 2518-2525.

[0285] 4. Ghebeh et al. The B7-H1 (PD-L1) T lymphocyte-inhibitory molecule is expressed in breast cancer patients with infiltrating ductal carcinoma: correlation with important high-risk prognostic factors. Neoplasia (2006) 8: 190-198.

[0286] 5. Hamanishi J et al. Programmed cell death 1 ligand 1 and tumor-infiltrating CD8+ T lymphocytes are prognostic factors of human ovarian cancer. Proceeding of the National Academy of Sciences (2007): 104: 3360-3365. 6. Thompson RH et al. Significance of B7-H1 overexpression in kidney cancer. Clinical genitourin Cancer (2006): 5: 206-211.

[0287] 7. Nomi, T. Sho, M., Akahori, T., et al. Clinical significance and therapeutic potential of the programmed death- 1 ligand/programmed death-1 pathway in human pancreatic cancer. Clinical Cancer Research (2007);13:2151-2157.

[0288] 8. Ohigashi Y et al. Clinical significance of programmed death-1 ligand-1 and programmed death-1 ligand 2 expression in human esophageal cancer. Clin. Cancer Research (2005): 11: 2947-2953.

[0289] 9. Inman et al. PD-L1 (B7-H1) expression by urothelial carcinoma of the bladder and BCG-induced granulomata: associations with localized stage progression. Cancer (2007): 109: 1499-1505.

[0290] 10. Shimauchi T et al. Augmented expression of programmed death-1 in both neoplasmatic and nonneoplastic CD4+ T-cells in adult T-cell Leukemia/ Lymphoma. Int. J. Cancer (2007): 121:2585-2590.

[0291] 11. Gao et al. Overexpression of PD-L1 significantly associates with tumor aggressiveness and postoperative recurrence in human hepatocellular carcinoma. Clinical Cancer Research (2009) 15: 971-979.

[0292] 12. Nakanishi J. Overexpression of B7-H1 (PD-L1) significantly associates with tumor grade and postoperative prognosis in human urothelial cancers. Cancer Immunol Immunother. (2007) 56: 1173-1182.

[0293] 13. Hino et al. Tumor cell expression of programmed cell death-1 is a prognostic factor for malignant melanoma. Cancer (2010): 00: 1-9.

[0294] 14. Ghebeh H. Foxp3+ tregs and B7-H1+/PD-1+ T lymphocytes co-infiltrate the tumor tissues of high-risk breast cancer patients: implication for immunotherapy. BMC Cancer.2008 Feb 23; 8: 57.

[0295] 15. Ahmadzadeh M et al. Tumor antigen-specific CD8 T cells infiltrating the tumor express high levels of PD-1 and are functionally impaired. Blood (2009) 114: 1537-1544.

[0296] 16. Thompson RH et al. PD-1 is expressed by tumor infiltrating cells and is associated with poor outcome for patients with renal carcinoma. Clinical Cancer Research (2007) 15: 1757-1761.

[0297] 17. Nº de publicación de la solicitud de patente de EE.UU.2018-0185395.

[0298] 18. Canadian Application No.3044658.

[0299] 19. Patente de EE.UU.9,174,998.

[0300] 20. Patente de EE.UU.10,259,817.

[0301] 21. Keiichi Tamai, et al., "Suppressive expression of CD274 increases tumorigenesis and cancer stem cell phenotypes in cholangiocarcinoma," Cancer Sci.105(6): 667-674, 2014. Anthony B. El-Khoueiry, et al., "A phase I first-in-human study of PRI-724 in patients (pts) with advanced solid tumors," J. Clin. Oncol. 31(15_supple(May 20,2013)): abstr 2501.

[0302] 22. Renée van Amerongen, et al., "Break the loop, escape the cycle?" The EMBO Journal 2013, 32: 1977-1989.

[0303] La cita de las referencias en la presente no pretende ser una admisión de que la referencia es el estado de la técnica pertinente, ni constituye ninguna admisión en cuanto al contenido o la fecha de estas publicaciones o documentos.

Claims

1. REIVINDICACIONES

1. Una terapia combinada para su uso en un método para tratar un cáncer en un sujeto humano, en donde la terapia combinada comprende:

(i) un antagonista de una proteína de muerte programada 1 (PD-1);

(ii) lenvatinib con la estructura:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; y

(iii) (6S,9aS)-N-bencil-8-({6-[3-(4-etilpiperazin-1-il)azetidin-1-il]piridin-2-il}metil)-6-(2-fluoro-4-hidroxibencil)-4,7-dioxo -2-(prop-2-en-1-il)hexahidro-2H-pirazino[2,1-c][1,2,4]triazina-1(6H)-carboxamida (E7386) que tiene la

estructura:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo,

en donde el antagonista de PD-1 no es atezolizumab.

2. La terapia combinada para su uso de conformidad con la reivindicación 1, en donde el cáncer es:

a) un tumor sólido;

b) seleccionado del grupo que consiste en: un carcinoma de células renales (CCR), un cáncer colorrectal (CRC), un carcinoma hepatocelular (CHC), un melanoma, un cáncer de vejiga, un cáncer urotelial, un cáncer de mama, un cáncer de pulmón no microcítico (CPNM), un cáncer de endometrio y un carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello; o bien

c) un CCR.

3. La terapia combinada para su uso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 2, en donde el antagonista de PD-1 es un anticuerpo monoclonal, o un fragmento de unión a antígeno del mismo, opcionalmente en donde el antagonista de PD-1 es un anticuerpo anti-PD-1, opcionalmente en donde el antagonista de PD-1 es pembrolizumab o nivolumab.

4. La terapia combinada para su uso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en donde el antagonista de PD-1 es pembrolizumab.

5. La terapia combinada para su uso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en donde lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo se administra diariamente; y pembrolizumab se administra una vez cada tres semanas, opcionalmente en donde lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo se administra a una dosis diaria de 24 mg, 20 mg, 18 mg, 12 mg u 8 mg; y el pembrolizumab se administra a una dosis de 200 mg para un sujeto adulto o de 2 mg/kg (hasta 200 mg) para un sujeto pediátrico una vez cada tres semanas, opcionalmente en donde el lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo es el mesilato de lenvatinib; y el E7386 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo es el E7386.

6. Una composición farmacéutica para su uso en un método de tratamiento del cáncer, que comprende (6S,9aS)-N-bencil-8-({6-[3-(4-etilpiperazin-1-il)azetidin-1-il]piridin-2-il}metil)-6-(2-fluoro-4-hidroxibencil)-4,7-dioxo -2-(prop-2-en-1-il)hexahidro-2H-pirazino[2,1-c] [1,2,4]triazina-1(6H)-carboxamida (E7386) o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, en donde el E7386 o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma se administra en combinación con (a) lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; y (b) un anticuerpo anti-PD-1.

7. Una composición farmacéutica para su uso en un método de tratamiento de un cáncer, que comprende un anticuerpo anti-PD-1, en donde el anticuerpo anti-PD-1 se administra en combinación con (a) lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; y (6S,9aS)-N-bencil-8-({6-[3-(4-etilpiperazin-1-il)azetidin-1-il]piridin-2-il}metil)-6-(2-fluoro-4-hidroxibencil)-4,7-dioxo -2-(prop-2-en-1-il)hexahidro-2H-pirazino[2,1-c] [1,2,4]triazina-1(6H)-carboxamida (E7386) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

8. Una composición farmacéutica para su uso en un método de tratamiento de un cáncer, que comprende lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en donde lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo se administra en combinación con (a) (6S,9aS)-N-bencil-8-({6-[3-(4-etilpiperazin-1-il)azetidin-1-il]piridin-2

il}metil)-6-(2-fluoro-4-hidroxibencil)-4,7-dioxo -2-(prop-2-en-1-il)hexahidro-2H-pirazino[2,1-c] [1,2,4]triazina-1(6H)-carboxamida (E7386) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; y (b) un anticuerpo anti-PD-1.

9. La composición farmacéutica para su uso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 6 a 8, en donde el lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo es el mesilato de lenvatinib; y el E7386 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo es el E7386.

10. La composición farmacéutica para su uso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 6 a 9, en donde el cáncer es:

a) un tumor sólido;

c) un CCR.

11. La composición farmacéutica para su uso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 6 a 10, en donde el anticuerpo anti-PD-1 es un anticuerpo monoclonal, o un fragmento de unión a antígeno del mismo, opcionalmente en donde el anticuerpo anti-PD-1 es pembrolizumab o nivolumab.

12. La composición farmacéutica para su uso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 6 a 11, en donde el anticuerpo anti-PD-1 es pembrolizumab.

13. La composición farmacéutica para su uso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 6 a 12, en donde lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo se administra diariamente; y el anticuerpo anti-PD-1 es pembrolizumab y se administra una vez cada tres semanas, opcionalmente en donde lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo se administra a una dosis diaria de 24 mg, 20 mg, 18 mg, 12 mg u 8 mg; y pembrolizumab se administra a una dosis de 200 mg para un sujeto adulto o de 2 mg/kg (hasta 200 mg) para un sujeto pediátrico una vez cada tres semanas, opcionalmente en donde lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo es mesilato de lenvatinib; y E7386 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo es E7386.

14. La composición farmacéutica para su uso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 6 a 12, en donde lenvatinib o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo se administra diariamente; y el anticuerpo anti-PD-1 es pembrolizumab y se administra una vez cada seis semanas.