ES3073754T3 - Combination therapy of c-c chemokine receptor-9 (ccr9) inhibitors and anti-alpha4beta7 integrin blocking antibodies for the treatment of inflammatory bowel disease - Google Patents

Abstract

Aquí se describen composiciones, métodos y kits para el tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal (EII), como la enfermedad de Crohn y la colitis ulcerosa, en mamíferos que la requieran. El método consiste en administrar a un paciente con EII una terapia combinada que contiene una cantidad terapéuticamente eficaz de un inhibidor del receptor de quimiocinas 9 (CCR9) y una cantidad terapéuticamente eficaz de un anticuerpo anti-integrina α4p7, como vedolizumab. También se proporciona un kit que contiene el inhibidor de CCR9 y el anticuerpo anti-integrina α4p7. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

[0001] DESCRIPCIÓN

[0002] Terapia combinada de inhibidores del receptor 9 de quimiocina C-C (CCR9) y anticuerpos bloqueadores antiintegrina alfa4beta7 para el tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal

[0003] ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

[0004] La enfermedad inflamatoria intestinal (EII) es un grupo de afecciones inflamatorias crónicas que afectan parte o la totalidad del tubo digestivo (GI), tal como la boca, el esófago, el estómago, el intestino delgado, el intestino grueso (colon), el recto, y el ano. La EII incluye la enfermedad de Crohn (EC), la colitis ulcerosa (CU) y la colitis indeterminada. La EC y la CU se pueden distinguir por características clínicas, endoscópicas y patológicas. La EC es una enfermedad de inflamación crónica que puede afectar cualquier parte del tubo digestivo. Los síntomas característicos de la enfermedad incluyen dolor abdominal intenso, diarrea frecuente, rectorragia, tenesmo rectal, e hinchazón de la parte inferior derecha del abdomen.

[0005] La CU es una enfermedad inflamatoria crónica remitente intermitente del colon. La enfermedad se caracteriza por episodios recurrentes de inflamación que implican principalmente lesiones mucosales superficiales que se extienden a través del recto y hacia arriba a través del colon. Los episodios agudos se caracterizan por diarrea crónica o estreñimiento, rectorragia, calambres y dolor abdominal.

[0006] La EII se caracteriza por inflamación e infiltración de leucocitos tales como linfocitos, granulocitos, monocitos y macrófagos desde la sangre hacia el revestimiento mucosal o epitelial de los intestinos. Múltiples tipos de células inflamatorias, incluyendo linfocitos, neutrófilos, macrófagos y células dendríticas, contribuyen a la EII. Los linfocitos T, por ejemplo, se infiltran en la mucosa del tubo digestivo a través de interacciones coordinadas entre las moléculas de adhesión en la superficie del linfocito T y su ligando afín en el endotelio. Por ejemplo, la integrina α4β7, que se expresa en la superficie de algunos linfocitos T y B, dirige la migración de estas células uniéndose a uno de sus ligandos, la molécula 1 de adhesión celular adresina mucosal (MAdCAM-1) en las células endoteliales del tubo digestivo. Los receptores y ligandos de quimiocinas, por ejemplo el receptor CCR9 y su ligando CCL25, también desempeñan un papel en la migración de células inflamatorias, por ejemplo células T auxiliares de memoria efectoras hacia el epitelio intestinal en la EII.

[0007] Las terapias actuales para tratar la EII incluyen cirugía o uso de anticuerpos antifactor de necrosis tumoral (anti-TNFα), por ejemplo infliximab y adalimumab, aminosalicilatos, corticosteroides sistémicos, inmunosupresores, por ejemplo tiopurinas y metotrexato, y combinaciones de los mismos. Desafortunadamente, algunos pacientes con EII no responden o no pueden tolerar tales tratamientos farmacológicos.

[0008] En vista de lo anterior, es evidente que los regímenes de tratamiento eficaces para la EII que sean capaces de bloquear múltiples rutas y/o múltiples tipos celulares asociadas con la infiltración de linfocitos pueden ser útiles para tratar la enfermedad. La presente invención se refiere al uso en tales terapias junto con composiciones farmacéuticas y métodos de tratamiento relacionados.

[0009] El documento US 2012/0282249 se refiere a formulaciones de anticuerpos que comprenden una mezcla de un azúcar no reductor, un anticuerpo anti-α4β7 y al menos un aminoácido. El documento US 2013/0225580 proporciona compuestos que actúan como antagonistas del receptor CCR9.

[0010] BREVE SUMARIO DE LA INVENCIÓN

[0011] En un aspecto, la presente descripción proporciona un método para tratar o reducir el desarrollo de la enfermedad inflamatoria intestinal en un mamífero, comprendiendo dicho método administrar una cantidad adecuada de un inhibidor del receptor de quimiocina CCR9 con un anticuerpo bloqueador anti-integrina α4β7. En algunas realizaciones, la enfermedad inflamatoria intestinal es la enfermedad de Crohn (EC) o la colitis ulcerosa (CU).

[0012] La presente invención proporciona un inhibidor del receptor de quimiocina CCR9 para uso en un método para tratar o reducir el desarrollo de la enfermedad inflamatoria intestinal en un mamífero, comprendiendo dicho método administrar una cantidad adecuada de un inhibidor del receptor de quimiocina CCR9 con un anticuerpo bloqueador anti-integrina α4β7,

[0013] en el que el inhibidor del receptor de quimiocina CCR9 es

[0014]

[0016] o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo;

[0017] y en el que el método comprende además administrar un antagonista biológico de TNFα. El inhibidor del receptor de quimiocina CCR9 es un inhibidor del receptor de tipo molécula pequeña que tiene un peso molecular menor que 1500.

[0018] En algunas realizaciones, el anticuerpo bloqueador anti-integrina α4β7 es vedolizumab (ENYVIO<®>), o un biosimilar, biomejor o bioequivalente del mismo. En otras realizaciones, el anticuerpo bloqueador anti-integrina α4β7 es vedolizumab (ENYVIO<®>).

[0019] En algunas realizaciones, el inhibidor del receptor de quimiocina CCR9 y el anticuerpo bloqueador anti-integrina α4β7 se administran en una formulación combinada. En otras realizaciones, el inhibidor del receptor de quimiocina CCR9 y el anticuerpo bloqueador anti-integrina α4β7 son para administración secuencial. En aún otras realizaciones, el inhibidor del receptor de quimiocina CCR9 se administra antes del anticuerpo bloqueador anti-integrina α4β7. En otra realización, el inhibidor del receptor de quimiocina CCR9 es para administración después de la administración del anticuerpo bloqueador anti-integrina α4β7.

[0020] En algunas realizaciones, el inhibidor del receptor de quimiocina CCR9 es un compuesto que tiene la fórmula:

[0023]

[0025] En otro aspecto, la presente descripción proporciona una composición para tratar o reducir el desarrollo de la enfermedad inflamatoria intestinal en un mamífero, comprendiendo dicha composición:

[0026] (i) una cantidad terapéuticamente eficaz de un inhibidor del receptor de quimiocina CCR9 que tiene la fórmula

[0029]

[0031] o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo;

[0032] (ii) una cantidad terapéuticamente eficaz de un anticuerpo bloqueador anti-integrina α4β7;

[0033] (iii) un antagonista biológico de TNFα; y

[0034] (iv) un vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptable.

[0035] En algunas realizaciones, la enfermedad inflamatoria intestinal es la enfermedad de Crohn (EC) o la colitis ulcerosa (CU).

[0036] En algunas realizaciones, el anticuerpo bloqueador anti-integrina α4β7 es vedolizumab (ENYVIO<®>), o un biosimilar, biomejor o bioequivalente del mismo. En otras realizaciones, el anticuerpo bloqueador anti-integrina α4β7 es vedolizumab (ENYVIO<®>).

[0037] En aún otro aspecto, la presente descripción proporciona un kit para tratar o reducir el desarrollo de la enfermedad inflamatoria intestinal en un mamífero, comprendiendo dicho kit:

[0038] (i) una cantidad terapéuticamente eficaz de un inhibidor del receptor de quimiocina CCR9 que tiene la fórmula

[0041]

[0043] o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo;

[0044] (ii) una cantidad terapéuticamente eficaz de un anticuerpo bloqueador anti-integrina α4β7; y

[0045] (iii) un antagonista biológico de TNFα; y

[0046] (iv) instrucciones para la administración eficaz.

[0047] En algunas realizaciones, el inhibidor del receptor de quimiocina CCR9 y el anticuerpo bloqueador anti-integrina α4β7 se formulan para administración secuencial. En otras realizaciones, el inhibidor del receptor de quimiocina CCR9 y el anticuerpo bloqueador anti-integrina α4β7 se formulan para administración concomitante.

[0048] En algunas realizaciones, el anticuerpo bloqueador anti-integrina α4β7 es vedolizumab (ENYVIO<®>), o un biosimilar, biomejor o bioequivalente del mismo. En otras realizaciones, el anticuerpo bloqueador anti-integrina α4β7 es vedolizumab (ENYVIO<®>).

[0049] Otros objetos, características y ventajas de la presente invención serán evidentes para un experto en la técnica a partir de la siguiente descripción detallada y figuras.

[0050] BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS

[0051] Las FIGS 1A y 1B muestran que un inhibidor de CCR9 de tipo molécula pequeña (CCX507) limita la unión de células T humanas diferenciadas con ácido retinoico a MAdCAM-1. La FIG. 1A muestra que las PBMC humanas se activaron con CD3ε y CD28 en presencia de ácido retinoico e IL-12. La expresión de los factores trópicos intestinales, CCR9 y α4β7, se representan como un diagrama de puntos de dos parámetros. Se muestra el porcentaje de células CCR9<+>α4β7<+>. La FIG. 1B muestra datos de un ensayo de unión estática de células T CCR9<+>α4β7<+>humanas diferenciadas in vitro. Brevemente, se mezclaron células CCR9<+>α4β7<+>con 500 nM de hCCL25 en presencia o ausencia de CCX507 1 µM, y se añadieron a placas revestidas con MAdCAM-1-Fc. El número de células que se adhieren a MAdCAM-1 en cada condición se cuantificó usando CyQUANT®, y se representó como unidad de fluorescencia relativa (UFR).

[0052] Las FIGS. 2A, 2B y 2C ilustran la eficacia farmacodinámica in vivo de CCX507 en un modelo de ratón de una transferencia adoptiva de células T. La FIG. 2A muestra el diseño experimental usado para determinar el intervalo farmacodinámico in vivo de CCX507 en un modelo de tráfico de células T a corto plazo. El número de linfocitos intraepiteliales (IEL) CD8<+>derivados de OT-I en presencia de 5-30 mg/kg de CCX507 se muestra en la FIG. 2B, y en presencia de un anticuerpo bloqueador anti-integrina α4β7 se muestra en la FIG.2C, como gráficos de barras.

[0053] La FIG. 3 muestra una asociación de la expresión del gen CCR9 humano en el íleon y el colon. Se obtuvieron muestras de biopsia de pacientes con enfermedad de Crohn. La expresión génica normalizada se derivó a partir de muestras de íleon terminal y colon. La FIG. 3 representa un mapa de calor que representa los niveles de expresión de genes seleccionados en comparación con el nivel de expresión de CCR9.

[0054] Las FIGS. 4A, 4B, 4C y 4D muestran que la combinación de CCX507 y un anticuerpo bloqueador antiintegrina α4β7 confirió una mayor protección contra la colitis en comparación con los regímenes monoterapéuticos. La FIG.4A muestra los regímenes de dosificación para los anticuerpos bloqueadores anti-integrina α4β7 y los anticuerpos anti-TNFα. La FIG. 4B proporciona fotografías representativas que representan el colon de ratones de tipo salvaje (FVB) y ratones que recibieron control de vehículo (1% de HPMC), control de isotipo IgG2a de rata, CCX507, anticuerpo bloqueador anti-integrina α4β7, y una combinación de CCX507 y anticuerpo bloqueador anti-integrina α4β7. Las relaciones cuantitativas de colon frente al peso para CCX507/anticuerpo bloqueador anti-integrina α4β7 (FIG. 4C) y CCX507/anticuerpo bloqueador anti-TNFα (FIG.4D) se muestran como diagramas de dispersión.

[0055] Las FIGS.5A y 5B muestran resultados del análisis histológico de tejido de colon de ratones. La FIG.5A muestra imágenes representativas del colon tanto proximal como distal de ratones individuales, representativas de la puntuación histopatológica media para cada grupo. La combinación de CCX507 además del anticuerpo anti-α4β7 se muestra en el panel derecho. La FIG. 5B proporciona la puntuación histológica suma para todos los ratones en el estudio.

[0056] DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN

[0057] I. Introducción

[0058] La presente descripción se basa, en parte, en el descubrimiento inesperado de que una terapia combinada de un inhibidor de CCR9 de tipo molécula pequeña y un anticuerpo contra integrina α4β7 puede actuar sinérgicamente en el tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal tal como la enfermedad de Crohn, la colitis ulcerosa y la colitis indeterminada. Se describen aquí métodos, composiciones y kits para tratar la EII en un sujeto, por ejemplo un sujeto humano o animal, que lo necesite. En algunas realizaciones, el método descrito incluye administrar cantidades terapéuticamente eficaces de CCX507 (o vercirnon) y vedolizumab a un sujeto con EII para provocar una respuesta clínica o mantener la remisión clínica en el sujeto.

[0059] II. Definiciones

[0060] Cuando se describen los compuestos, composiciones, métodos y procedimientos de esta invención, los siguientes términos tienen los siguientes significados, a menos que se indique lo contrario.

[0061] Los términos "un", "una" o "el/la", como se usan aquí, no sólo incluyen aspectos con un miembro, sino que también incluyen aspectos con más de un miembro. Por ejemplo, las formas singulares "un", "una" y "el/la" incluyen referentes en plural a menos que el contexto indique claramente lo contrario. Así, por ejemplo, la referencia a "una célula" incluye una pluralidad de tales células, y la referencia a "el agente" incluye la referencia a uno o más agentes conocidos por los expertos en la técnica, y así sucesivamente.

[0062] Los términos "alrededor de" y "aproximadamente" generalmente significarán un grado aceptable de error para la cantidad medida dada la naturaleza o precisión de las medidas. Los grados de error típicos y ejemplares están dentro del 20 por ciento (%), preferiblemente dentro del 10 %, y más preferiblemente dentro del 5 % de un valor o intervalo de valores dado. Alternativamente, y particularmente en sistemas biológicos, los términos "alrededor de" y "aproximadamente" pueden significar valores que están dentro de un orden de magnitud, preferiblemente dentro de 5 veces, y más preferiblemente dentro de 2 veces de un valor dado. Las cantidades numéricas proporcionadas aquí son aproximadas a menos que se indique lo contrario, lo que significa que el término "alrededor de" o "aproximadamente" puede inferirse cuando no se indica expresamente.

[0063] La expresión "enfermedad inflamatoria intestinal" o "EII" incluye trastornos gastrointestinales tales como, por ejemplo, enfermedad de Crohn (EC), colitis ulcerosa (CU), colitis indeterminada (CI), y EII que no es concluyente para EC frente a CU ("No concluyente"). Las enfermedades inflamatorias intestinales (por ejemplo, EC, CU, CI, y No concluyente) se distinguen de todos los demás trastornos, síndromes y anomalías del tubo digestivo, incluido el síndrome del intestino irritable (SII). Ejemplos de enfermedades relacionadas con la EII incluyen la colitis colagenosa y la colitis linfocítica.

[0064] La expresión "colitis ulcerosa" o "CU" se refiere a una enfermedad inflamatoria intestinal (EII) crónica intermitente y recurrente del colon o del intestino grueso caracterizada por lesiones mucosales superficiales que se extienden a través del recto y progresan hacia arriba. Los diferentes tipos de colitis ulcerosa se clasifican según la ubicación y el grado de inflamación. Los ejemplos de CU incluyen, pero no se limitan a, proctitis ulcerosa, proctosigmoiditis, colitis del lado izquierdo, y colitis panulcerosa (total).

[0065] La expresión "enfermedad de Crohn" o "EC" se refiere a una enfermedad de inflamación crónica que puede afectar cualquier parte del tubo digestivo. Normalmente se ven afectados la porción distal del intestino delgado, es decir, el íleon, y el ciego. En otros casos, la enfermedad se limita al intestino delgado, el colon, o la región anorrectal. En ocasiones, la EC afecta al duodeno y al estómago, y más raramente, al esófago y la boca. Los ejemplos de CU incluyen, pero no se limitan a, ileocolitis, ileítis, enfermedad de Crohn gastroduodenal, yeyunoileítis, y colitis (granulomatosa) de Crohn.

[0066] El término "sujeto", "individuo" o "paciente" se refiere a un animal tal como un mamífero, incluyendo, pero no se limita a, primates (por ejemplo, seres humanos), vacas, ovejas, cabras, caballos, perros, gatos, conejos, ratas, ratones, y similares.

[0067] La expresión "receptor de quimiocina C-C tipo 9", "CCR9" o "receptor de quimiocina CCR9" se refiere a un receptor para la quimiocina CCL25 que también se conoce como TECK y SCYA25. La secuencia polipeptídica de CCR9 humano se expone, por ejemplo, en los números de acceso de GenBank NP_001243298, NP_006632, NP_112477, y XP_011531614. La secuencia de ARNm (codificante) de CCR9 humano se expone, por ejemplo, en los números de acceso de GenBank NM_001256369, NM_006641, NM_031200, y XM_011533312.

[0068] La expresión "inhibidor del receptor 9 de quimiocina C-C", "inhibidor de CCR9" o "inhibidor del receptor de quimiocina CCR9" se refiere a un inhibidor o antagonista de un polipéptido del receptor CCR9, variantes del mismo, o fragmentos del mismo.

[0069] La expresión "inhibidor de tipo molécula pequeña" se refiere a una molécula pequeña o un compuesto orgánico de bajo peso molecular que inactiva, inhibe o antagoniza una molécula, biomolécula, proteína u otro producto biológico diana.

[0070] La expresión "integrina α4β7" se refiere a una molécula de integrina heterodimérica que contiene dos cadenas distintas, tales como una cadena α4 y una cadena β7. La secuencia polipeptídica de la cadena alfa 4 de la integrina humana se expone, por ejemplo, en el número de acceso de GenBank NP_000876. La secuencia de ARNm (codificante) de la cadena alfa 4 de integrina humana se expone, por ejemplo, en el número de acceso de GenBank NM_000885. La secuencia polipeptídica de la cadena beta 7 de la integrina humana se expone, por ejemplo, en los números de acceso de GenBank NP_000880, XP_005268908, y XP_005268909. La secuencia de ARNm (codificante) de la cadena beta 7 de la integrina humana se expone, por ejemplo, en los números de acceso de GenBank NM_000889, XM_05268851, y XM_05268852. También se conoce como LPAM.

[0071] La expresión "anticuerpo bloqueador anti-integrina α4β7" o "anticuerpo neutralizante de anti-integrina α4β7" se refiere a un anticuerpo o un fragmento del mismo que se une específicamente a un polipéptido de integrina α4β7 (el heterodímero de integrina α4β7) o un fragmento del mismo. En algunos casos, un anticuerpo bloqueador antiintegrina α4β7 bloquea la interacción de la integrina α4β7 con cualquiera de sus ligandos.

[0072] El término "biosimilar" se refiere a un producto biológico que es muy similar a un producto biológico aprobado por la FDA (producto de referencia), y no tiene diferencias clínicamente significativas en términos de farmacocinética, seguridad y eficacia con respecto al producto de referencia.

[0073] El término "bioequivalente" se refiere a un producto biológico que es farmacéuticamente equivalente y tiene una biodisponibilidad similar a un producto biológico aprobado por la FDA (producto de referencia). Por ejemplo, según la FDA, el término bioequivalencia se define como "la ausencia de una diferencia significativa en la velocidad y grado en que el ingrediente activo o resto activo en equivalentes farmacéuticos o alternativas farmacéuticas se vuelve disponible en el sitio de acción del fármaco cuando se administra a la misma dosis molar en condiciones similares en un estudio diseñado apropiadamente" (United States Food and Drug Administration, "Guidance for Industry:Bioavailability and Bioequicalence Studies for Orally Administered Drug Products -General Considerations", 2003, Center for Drug Evaluación and Research).

[0074] El término "biomejor" se refiere a un producto biológico que pertenece a la misma clase que un producto biológico aprobado por la FDA (producto de referencia), pero que no es idéntico y mejora en términos de seguridad, eficacia, estabilidad, etc., con respecto al producto de referencia.

[0075] La expresión "cantidad terapéuticamente eficaz" se refiere a esa cantidad del agente terapéutico suficiente para mejorar la afección o los síntomas a los que va dirigida. Por ejemplo, para el parámetro dado, una cantidad terapéuticamente eficaz mostrará un aumento o disminución de al menos 5 %, 10 %, 15 %, 20 %, 25 %, 40 %, 50 %, 60 %, 75 %, 80 %, 90 %, o al menos 100 %. La eficacia terapéutica también se puede expresar como un aumento o disminución de "veces". Por ejemplo, una cantidad terapéuticamente eficaz puede tener al menos un efecto de 1,2 veces, 1,5 veces, 2 veces, 5 veces o más con respecto a un control.

[0076] El término "administrar" o "administración", y sus derivados, se refiere a los métodos que pueden usarse para permitir la administración de agentes o composiciones al sitio deseado de acción biológica. Estos métodos incluyen, pero no se limitan a, administración parenteral (por ejemplo, intravenosa, subcutánea, intraperitoneal, intramuscular, intravascular, intratecal, intranasal, intravítrea, infusión e inyección local), inyección transmucosal, administración oral, administración como supositorio, y administración tópica.. Un experto en la técnica conocerá métodos adicionales para administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención para prevenir o aliviar uno o más síntomas asociados con una enfermedad.

[0077] El término "tratar" o "tratamiento" se refiere a tratar o al tratamiento de una enfermedad o afección médica (tal como inflamación) en un paciente, tal como un mamífero (particularmente un ser humano o un animal). que incluye: mejorar la enfermedad o afección médica, es decir, eliminar o provocar la regresión de la enfermedad o afección médica en un paciente; suprimir la enfermedad o afección médica, es decir, retardar o detener el desarrollo de la enfermedad o afección médica en un paciente; o aliviar los síntomas de la enfermedad o afección médica en un paciente. El término abarca el tratamiento profiláctico de una enfermedad para prevenir o reducir el riesgo de adquirir o desarrollar una enfermedad específica, o para prevenir o reducir el riesgo de recurrencia de la enfermedad.

[0078] "Alquilo", por sí mismo o como parte de otro sustituyente, se refiere a un grupo hidrocarbonado que puede ser lineal, cíclico o ramificado, o una combinación de los mismos, que tiene el número de átomos de carbono designado (es decir, C<1-8>significa uno a ocho átomos de carbono). El término "cicloalquilo", por sí mismo o como parte de otro sustituyente, se refiere a un grupo alquilo cíclico que tiene el número de carbonos designado, y es un subconjunto del término "alquilo". Otros subconjuntos del término "alquilo" incluyen grupos alquilo "lineales" y "ramificados", que se refieren a dos tipos diferentes de grupos alquilo acíclicos. Ejemplos de grupos alquilo incluyen metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, t-butilo, isobutilo, sec-butilo, ciclohexilo, ciclopentilo, (ciclohexil)metilo, ciclopropilmetilo, biciclo[2.2.1]heptano, biciclo[ 2.2.2]octano, etc. En esta lista de ejemplos, los ejemplos de alquilo metilo, etilo, n-propilo, y n-butilalquilo también son ejemplos de grupos "alquilo lineal". De manera similar, isopropilo y t-butilo también son ejemplos de grupos "alquilo ramificado". Ciclopentilo, ciclohexilo, (ciclohexil)metilo, ciclopropilmetilo, biciclo[2.2.1]heptano, biciclo[2.2.2]octano son ejemplos de grupos "cicloalquilo". En algunas realizaciones, se puede usar ciclopropilo como grupo puente entre otros dos restos, y se representa como -CH(CH<2>)CH-. "Los grupos alquilo pueden estar sustituidos o no sustituidos, a menos que se indique lo contrario. Ejemplos de alquilo sustituido incluyen haloalquilo, tioalquilo, aminoalquilo, y similares. Ejemplos adicionales de alquilo sustituido adecuado incluyen, pero no se limitan a, hidroxi-isopropilo, -C(CH<3>)<2>-OH, aminometilo, 2-nitroetilo, 4-cianobutilo, 2,3-dicloropentilo, y 3-hidroxi-5-carboxihexilo, 2-aminoetilo, pentacloroetilo, trifluorometilo, 2-dietilaminoetilo, 2-dimetilaminopropilo, etoxicarbonilmetilo, metanilsulfanilmetilo, metoximetilo, 3-hidroxipentilo, 2-carboxibutilo, 4-clorobutilo, y pentafluoroetilo. Los sustituyentes adecuados para alquilo sustituido incluyen halógeno,-CN, - CO<2>R', -C(O)R', -C(O)NR'R", oxo (=O o -O-), -OR', -OC(O)R', -OC(O)NR'R" -NO2, -NR'C(O)R", -NR‴C(O)NR'R", -NR'R", -NR'CO<2>R", -NR'S(O)R", -NR'S(O)<2>R‴, - NR‴S(O)NR'R", -NR‴S(O)<2>NR'R", -SR',-S(O)R', -S(O)<2>R', -S(O)2NR'R", -NR'-C(NHR")=NR‴, -SiR'R"R‴, -OSiR'R"R‴, -N<3>, arilo de C<6-10>sustituido o no sustituido, heteroarilo de 5 a 10 miembros sustituido o no sustituido, y heterociclilo de 3 a 10 miembros sustituido o no sustituido. El número de sustituyentes posibles varía de cero a (2m'+1), en el que m' es el número total de átomos de carbono en tal radical. Con respecto a alquilo sustituido, R', R" y R'" se refieren cada uno independientemente a una variedad de grupos que incluyen hidrógeno, alquilo de C<1-8>sustituido o no sustituido, alquenilo de C<2-8>sustituido o no sustituido, alquinilo de C<2-8>sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, heteroarilo sustituido o no sustituido, heterociclilo sustituido o no sustituido, arilalquilo sustituido o no sustituido, ariloxialquilo sustituido o no sustituido. Cuando R' y R" están unidos al mismo átomo de nitrógeno, se pueden combinar con el átomo de nitrógeno para formar un anillo de 3, 4, 5, 6, o 7 miembros (por ejemplo, -NR'R" incluye 1-pirrolidinilo y 4-morfolinilo). Además, R' y R", R" y R"', o R' y R‴ pueden formar, junto con el o los átomos a los que están unidos, un anillo de 5, 6, o 7 miembros sustituido o no sustituido.

[0079] "Alcoxi" se refiere a -O-alquilo. Ejemplos de un grupo alcoxi incluyen metoxi, etoxi, n-propoxi, etc.

[0080] "Alquenilo" se refiere a un grupo hidrocarbonado insaturado que puede ser lineal, cíclico o ramificado, o una combinación de los mismos. Se prefieren los grupos alquenilo con 2-8 átomos de carbono. El grupo alquenilo puede contener 1, 2 o 3 dobles enlaces carbono-carbono. Ejemplos de grupos alquenilo incluyen etenilo, npropenilo, isopropenilo, n-but-2-enilo, n-hex-3-enilo, ciclohexenilo, ciclopentenilo, y similares. Los grupos alquenilo pueden estar sustituidos o no sustituidos, a menos que se indique lo contrario.

[0081] "Alquinilo" se refiere a un grupo hidrocarbonado insaturado que puede ser lineal, cíclico o ramificado, o una combinación de los mismos. Se prefieren los grupos alquinilo con 2-8 átomos de carbono. El grupo alquinilo puede contener 1, 2 o 3 triples enlaces carbono-carbono. Ejemplos de grupos alquinilo incluyen etinilo, npropinilo, n-but-2-inilo, n-hex-3-inilo, y similares. Los grupos alquinilo pueden estar sustituidos o no sustituidos, a menos que se indique lo contrario.

[0082] "Alquilamino" se refiere a -N(alquilo)<2>o -NH(alquilo). Cuando el grupo alquilamino contiene dos grupos alquilo, los grupos alquilo se pueden combinar entre sí para formar un anillo carbocíclico o heterocíclico. Debe entenderse que los grupos alquilo del grupo alquilamino pueden estar sustituidos o no sustituidos. Ejemplos de un grupo alquilamino incluyen metilamino, terc-butilamino, dimetilamino, diisopropilamino, morfolino, y similares. "Aminoalquilo", como grupo alquilo sustituido, se refiere a un grupo monoaminoalquilo o poliaminoalquilo; lo más típico, sustituido con 1-2 grupos amino. Los ejemplos incluyen aminometilo, 2-aminoetilo, 2-dietilaminoetilo, y similares.

[0083] "Arilo" se refiere a un grupo hidrocarbonado aromático poliinsaturado que tiene un único anillo (bicíclico) o múltiples anillos (preferiblemente bicíclico) que pueden condensarse o unirse covalentemente. Se prefieren los grupos arilo con 6-10 átomos de carbono, designándose este número de átomos de carbono, por ejemplo, mediante C<6-10>. Ejemplos de grupos arilo incluyen fenilo y naftaleno-1-ilo, naftaleno-2-ilo, bifenilo, y similares. Los grupos arilo pueden estar sustituidos o no sustituidos, a menos que se indique lo contrario. El arilo sustituido puede estar sustituido con uno o más sustituyentes. Los sustituyentes adecuados para arilo incluyen alquilo de C<1-8>sustituido o no sustituido, y aquellos sustituyentes discutidos anteriormente para alquilo sustituido.

[0084] "Halo" o "halógeno", por sí mismo o como parte de un sustituyente, se refiere a un átomo de cloro, bromo, yodo, o flúor.

[0085] "Haloalquilo", como grupo alquilo sustituido, se refiere a un grupo monohaloalquilo o polihaloalquilo; lo más típico, sustituido con 1-3 átomos de halógeno. Los ejemplos incluyen 1-cloroetilo, 3-bromopropilo, trifluorometilo, y similares.

[0086] "Heterociclilo" se refiere a un grupo no aromático saturado o insaturado que contiene al menos un heteroátomo (típicamente 1 a 5 heteroátomos) seleccionado de nitrógeno, oxígeno o azufre. Preferiblemente, estos grupos contienen 0-5 átomos de nitrógeno, 0-2 átomos de azufre, y 0-2 átomos de oxígeno. Más preferiblemente, estos grupos contienen 0-3 átomos de nitrógeno, 0-1 átomos de azufre, y 0-1 átomos de oxígeno. Ejemplos de grupos heterociclo incluyen pirrolidina, piperidina, imidazolidina, pirazolidina, butirolactama, valerolactama, imidazolidinona, hidantoína, dioxolano, ftalimida, piperidina, 1,4-dioxano, morfolina, tiomorfolina, tiomorfolina-S-óxido, tiomorfolina-S,S-dióxido, piperazina, pirano, piridona, 3-pirrolina, tiopirano, pirona, tetrahidrofurano, tetrahidrotiofeno, quinuclidina, y similares. Los grupos heterocíclicos preferidos son monocíclicos, aunque pueden estar condensados o unidos covalentemente a un sistema anular arílico o heteroarílico.

[0087] Los grupos heterocíclicos ejemplares pueden representarse mediante la fórmula (AA) a continuación:

[0090]

[0092] en la que la fórmula (AA) está unida mediante una valencia libre en M<1>o M<2>; M<1>representa O, NR<e>, o S(O)<1>; M<2>representa CR<f>R<g>, O, S(O)<1>, o NR<e>; en la que puede ser necesario omitir un R<f>, R<g>, o R<e>para crear una valencia libre en M<1>o M<2>, tal como, por ejemplo, CR<f>, CR<g>, o N; 1 es 0, 1 o 2; j es 1, 2 o 3, y k es 1, 2 o 3, con la condición de que j k sea 3, 4, o 5; y R<a>, R<b>, R<c>, R<d>, R<e>, R<f>, y R<g>se seleccionan independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, alquilo de C<1-8>no sustituido o sustituido, alquenilo de C<2-8>no sustituido o sustituido, alquinilo de C<2-8>no sustituido o sustituido, -COR<h>, -CO<2>R<h>, -CONR<h>R<i>,-NR<h>COR<i>, -SO<2>R<h>-SO<2>NR<h>R<i>, -NR<h>SO<2>R<i>-NR<h>R<i>, -OR<h>, -SiR<h>R<i>R<j>, -OSiR<h>R<i>R<j>, - Q<1>COR<h>, -Q<1>CO2R<h>, -Q<1>CONR<h>R<i>, -Q<1>NR<h>COR<i>, -Q<1>SO<2>R<h>, -Q<1>SO<2>NR<h>R<i>, - Q<1>NR<h>SO<2>R<i>, -Q<1>NR<h>R<i>, -Q<1>OR<h>, en los que Q<1>es un miembro seleccionado del grupo que consiste en alquileno de C<1-4>, alquenileno de C<2-4>y alquinileno de C<2-4>, y R<h>, R<i>y R<j>se seleccionan independientemente del grupo que consiste en hidrógeno y alquilo de C<1-8>, y en la que las porciones alifáticas de cada uno de los sustituyentes R<a>, R<b>, R<c>, R<d>, R<e>, R<f>, R<g>, R<h>, R<i>y R están opcionalmente sustituidas con de uno a tres miembros seleccionados del grupo que consiste en halógeno, -OH, -OR<n>, -OC(O)NHR<n>, -OC(O)NR<n>R<o>, -SH, -SR<n>, -S(O)R<n>,-S(O)<2>R<n>-S(O)<2>NHR<n>, -S(O)<2>NR<n>R<o>, -NHS(O)<2>R<n>, -NR<n>S(O)<2>R<o>, -C(O)NH<2>,-C(O)NHR<n>, -C(O)NR<n>R<o>, -C(O)R<n>, -NHC(O)R<o>, -NR<n>C(O)R<o>, -NHC(O)NH<2>,-NR<n>C(O)NH<2>, -NR<n>C(O)NHR<o>, -NHC(O)NHR<n>, -NR<n>C(O)NR<o>R<p>, -NHC(O)NR<n>R<o>, -CO<2>H, -CO<2>R<n>, -NHCO<2>R<n>, -NR<n>CO<2>R<o>, —CN, -NO<2>, -NH<2>, -NHR<n>, -NR<n>R<o>, -NR<n>S(O)NH<2>y -NR<n>S(O)<2>NHR<o>, en los que R<n>, R<o>y R<p>son independientemente un alquilo de C<1-8>no sustituido. Además, dos cualesquiera de R<a>, R<b>, R<c>, R<d>, R<e>, R<f>, y R<g>pueden combinarse para formar un sistema anular puenteado o espirocíclico.

[0093] Preferiblemente, el número de grupos R<a>+ R<b>+ R<c>+ R<d>que son distintos de hidrógeno es 0, 1 o 2. Más preferiblemente, R<a>, R<b>, R<c>, R<d>, R<e>, R<f>, y R<g>se seleccionan independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, alquilo de C<1-8>sustituido o no sustituido, -C(O)R<h>,-CO<2>R<h>, -C(O)NR<h>R<h>, -NR<h>COR<i>, -SO<2>R<h>, -SO<2>NR<h>R<i>, -NSO<2>R<h>R<i>, -NR<h>R<i>, y -OR<h>, en los que R<h>y R<i>se seleccionan independientemente del grupo que consiste en hidrógeno y alquilo de C<1-8>no sustituido; y en los que las porciones alifáticas de cada uno de los sustituyentes R<a>, R<b>, R<c>, R<d>, R<e>, R<f>, y R<g>están opcionalmente sustituidas con de uno a tres miembros seleccionados del grupo que consiste en halógeno, -OH, -OR<n>, -OC(O)NHR<n>, -OC(O)NR<n>R<o>, -SH,-SR<n>, -S(O)R<o>, -SO<2>R<n>, -SO<2>NH<2>, -SO<2>NHR<n>, -SO<2>NR<n>OR<o>, -NHSO<2>R<n>, - NR<n>SO<2>R<o>, -C(O)NH<2>, -C(O)NHR<n>, -C(O)NR<n>R<o>, -C(O)R<n>, -NHC(O)R<n>,-NR<n>C(O)R<o>, -NHC(O)NH<2>, -NR<n>C(O)NH<2>, -NR<n>C(O)NHR<o>, -NHC(O)NHR<n>,-NR<n>C(O)NR<n>R<o>, -NHC(O)NR<n>R<o>, -CO<2>H, -CO<2>R<n>, -NHCO<2>R<n>, -NR<n>CO<2>R<o>, —CN, -NO<2>, -NH<2>, -NHR<n>, -NR<n>R<o>, -NR<n>S(O)NH<2>y -NR<n>S(O)<2>NHR<o>, en los que R<n>, R<o>y R<p>son independientemente un alquilo de C<1-8>no sustituido.

[0095] Más preferiblemente, R<a>, R<b>, R<c>, R<d>, R<e>, R<f>, y R<g>son independientemente hidrógeno o alquilo de C<1-4>. En otra realización preferida, al menos tres de R<a>, R<b>, R<c>, R<d>, R<e>, R<f>, y R<g>son hidrógeno.

[0097] "Heteroarilo" se refiere a un grupo aromático que contiene al menos un heteroátomo. Los ejemplos incluyen piridilo, piridazinilo, pirazinilo, pirimidinilo, triazinilo, quinolinilo, quinoxalinilo, quinazolinilo, cinolinilo, ftalazinilo, benzotriazinilo, purinilo, bencimidazolilo, benzopirazolilo, benzotriazolilo, bencisoxazolilo, isobenzofurilo, isoindolilo, indolizinilo, benzotriazinilo, tienopiridinilo, tienopirimidinilo, pirazolopirimidinilo, imidazopiridinas, benzotiazolilo, benzofuranilo, benzotienilo, indolilo, quinolilo, isoquinolilo, isotiazolilo, pirazolilo, indazolilo, pteridinilo, imidazolilo, triazolilo, tetrazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, pirrolilo, tiazolilo, furilo o tienilo. Los grupos heteroarilo preferidos son aquellos que tienen al menos un átomo de nitrógeno en el anillo de arilo, tales como quinolinilo, quinoxalinilo, purinilo, bencimidazolilo, benzopirazolilo, benzotriazolilo, benzotiazolilo, indolilo, quinolilo, isoquinolilo y similares. Los sistemas heteroarílicos de anillos de 6 preferidos incluyen piridilo, piridazinilo, pirazinilo, pirimidinilo, triazinilo y similares. Los sistemas heteroarílicos de anillos de 5 preferidos incluyen isotiazolilo, pirazolilo, imidazolilo, tienilo, furilo, triazolilo, tetrazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, pirrolilo, tiazolilo y similares.

[0099] El heterociclilo y el heteroarilo pueden unirse a cualquier carbono o heteroátomo disponible del anillo. Cada heterociclilo y heteroarilo puede tener uno o más anillos. Cuando hay múltiples anillos, pueden condensarse o unirse covalentemente. Cada heterociclilo y heteroarilo debe contener al menos un heteroátomo (típicamente 1 a 5 heteroátomos) seleccionado de nitrógeno, oxígeno o azufre. Preferiblemente, estos grupos contienen 0-5 átomos de nitrógeno, 0-2 átomos de azufre, y 0-2 átomos de oxígeno. Más preferiblemente, estos grupos contienen 0-3 átomos de nitrógeno, 0-1 átomos de azufre, y 0-1 átomos de oxígeno. Los grupos heterociclilo y heteroarilo pueden estar sustituidos o no sustituidos, a menos que se indique lo contrario. Para grupos sustituidos, la sustitución puede estar en un carbono o heteroátomo. Por ejemplo, cuando la sustitución es oxo (=O u O-), el grupo resultante puede tener un carbonilo (-C(O)-) o un N-óxido (-N<+>-O-) o —S(O)— o-S(O)<2>-.

[0101] Los sustituyentes adecuados para alquilo sustituido, alquenilo sustituido y alquinilo sustituido incluyen halógeno, —CN, -CO<2>R', -C(O)R', -C(O)NR'R", oxo (=O or -O-),-OR', -OC(O)R', -OC(O)NR'R"-NO<2>, -NR'C(O)R", -NR‴C(O)NR'R", -NR'R",-NR'CO<2>R", -NR'S(O)<2>R‴, -SR', -S(O)R', -S(O)<2>R', -S(O)<2>NR'R", -SiR'R"R‴,-N<3>, arilo de C<6-10>sustituido o no sustituido, heteroarilo de 5 a 10 miembros sustituido o no sustituido, y heterociclilo de 3 a 10 miembros sustituido o no sustituido, en un número que oscila de cero a (2m'+1), en el que m' es el número total de átomos de carbono en tal radical.

[0103] Los sustituyentes adecuados para arilo sustituido, heteroarilo sustituido y heterociclilo sustituido incluyen halógeno, —CN, -CO<2>R', -C(O)R', -C(O)NR'R", oxo (=O or -O-), -OR', -OC(O)R', -OC(O)NR'R", -NO<2>, -NR'C(O)R", -NR'C(O)NR"R‴, -NR'R", -NR'CO<2>R", -NR'S(O)<2>R", -SR', -S(O)R', -S(O)<2>R', -S(O)<2>NR'R", -NR'-C(NHR")=NR‴, -SiR'R"R‴, -N<3>, alquilo de C<1-8>sustituido o no sustituido, alquenilo de C<2-8>sustituido o no sustituido, alquinilo de C<2-8>sustituido o no sustituido, arilo de C<6-10>sustituido o no sustituido, heteroarilo de 5 a 10 miembros sustituido o no sustituido, y heterociclilo de 3 a 10 miembros sustituido o no sustituido. El número de posibles sustituyentes oscila de cero hasta el número total de valencias abiertas en el sistema anular aromático.

[0105] Como se usó anteriormente, R', R" y R‴ se refieren cada uno independientemente a una variedad de grupos que incluyen hidrógeno, alquilo de C<1-8>sustituido o no sustituido, alquenilo de C<2-8>sustituido o no sustituido, alquinilo de C<2-8>sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, heteroarilo sustituido o no sustituido, heterociclilo sustituido o no sustituido, arilalquilo sustituido o no sustituido, y ariloxialquilo sustituido o no sustituido. Cuando R' y R" están unidos al mismo átomo de nitrógeno, se pueden combinar con el átomo de nitrógeno para formar un anillo de 3, 4, 5, 6, o 7 miembros (por ejemplo, -NR'R" incluye 1-pirrolidinilo y 4-morfolinilo). Además, R' y R", R" y R‴, o R' y R‴ pueden formar, junto con el o los átomos a los que están unidos, un anillo de 5, 6, o 7 miembros sustituido o no sustituido.

[0107] Dos de los sustituyentes en átomos adyacentes de un anillo arílico o heteroarílico se pueden reemplazar opcionalmente por un sustituyente de fórmula -T-C(O)-(CH<2>)<q>-U-, en la que T y U son independientemente -NR""-, -O- , -CH<2>- o un enlace sencillo, y q es un número entero de 0 a 2. Alternativamente, dos de los sustituyentes en átomos adyacentes del anillo arílico o heteroarílico se pueden reemplazar opcionalmente por un sustituyente de fórmula -A'-(CH<2>)<r>-B'-, en la que A' y B' son independientemente -CH<2>-, -O -, -NR""-, -S-, -S(O)-, -S(O)<2>-, -S(O)<2>NRʺʺ- o un enlace sencillo, y r es un número entero de 1 a 3. Opcionalmente, uno de los enlaces sencillos del nuevo anillo así formado puede sustituirse por un doble enlace. Alternativamente, dos de los sustituyentes en átomos adyacentes del anillo arílico o heteroarílico se pueden reemplazar opcionalmente por un sustituyente de fórmula -(CH<2>)<s>-X-(CH<2>)<t>-, en la que s y t son independientemente números enteros de 0 a 3, y X es —O—, — NR""—, -S-, —S(O)—, -S(O)<2>-, o -S(O)<2>NR'-. El sustituyente Rʺʺ en -NR""- y -S(O)<2>NRʺʺ- es hidrógeno o alquilo de C<1-8>no sustituido.

[0108] Se entiende que "heteroátomo" incluye oxígeno (O), nitrógeno (N), azufre (S) y silicio (Si).

[0109] Un vehículo, diluyente o excipiente "farmacéuticamente aceptable" es un vehículo, diluyente o excipiente compatible con los demás ingredientes de la formulación, y no es perjudicial para el receptor de la misma.

[0110] "Sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a una sal que es aceptable para administración a un paciente, tal como un mamífero (por ejemplo, sales que tienen una seguridad aceptable para los mamíferos para un régimen de dosificación dado). Tales sales pueden derivar de bases inorgánicas u orgánicas farmacéuticamente aceptables y de ácidos inorgánicos u orgánicos farmacéuticamente aceptables, dependiendo de los sustituyentes particulares que se encuentran en los compuestos descritos aquí. Cuando los compuestos descritos aquí contienen funcionalidades relativamente ácidas, las sales de adición de bases se pueden obtener poniendo en contacto la forma neutra de tales compuestos con una cantidad suficiente de la base deseada, ya sea pura o en un disolvente inerte adecuado. Las sales derivadas de bases inorgánicas farmacéuticamente aceptables incluyen de aluminio, amonio, calcio, cobre, férrica, ferrosa, de litio, magnesio, mangánica, manganosa, de potasio, sodio, zinc y similares. Las sales derivadas de bases orgánicas farmacéuticamente aceptables incluyen sales de aminas primarias, secundarias, terciarias y cuaternarias, incluidas aminas sustituidas, aminas cíclicas, aminas naturales, y similares, tales como arginina, betaína, cafeína, colina, N,N'-dibenciletilendiamina, dietilamina, 2-dietilaminoetanol, 2-dimetilaminoetanol, etanolamina, etilendiamina, N-etilmorfolina, N-etilpiperidina, glucamina, glucosamina, histidina, hidrabamina, isopropilamina, lisina, metilglucamina, morfolina, piperazina, piperidina, resinas de poliamina, procaína, purinas, teobromina, trietilamina, trimetilamina, tripropilamina, trometamina, y similares. Cuando los compuestos descritos aquí contienen funcionalidades relativamente básicas, las sales de adición de ácidos se pueden obtener poniendo en contacto la forma neutra de tales compuestos con una cantidad suficiente del ácido deseado, ya sea pura o en un disolvente inerte adecuado. Las sales derivadas de ácidos farmacéuticamente aceptables incluyen acético, ascórbico, bencenosulfónico, benzoico, canfosulfónico, cítrico, etanosulfónico, fumárico, glucónico, glucurónico, glutámico, hipúrico, bromhídrico, clorhídrico, isetiónico, láctico, lactobiónico, maleico, málico, mandélico, metanosulfónico, múcico, naftalenosulfónico, nicotínico, nítrico, pamoico, pantoténico, fosfórico, succínico, sulfúrico, tartárico, p-toluenosulfónico, y similares.

[0111] También se incluyen sales de aminoácidos tales como arginato y similares, y sales de ácidos orgánicos como ácidos glucurónico o galactunórico y similares (véase, por ejemplo, Berge, SM, et al, "Pharmaceutical Salts", J. Pharmaceutical Science, 1977, 66:1-19). Ciertos compuestos específicos descritos aquí contienen funcionalidades tanto básicas como ácidas que permiten que los compuestos se conviertan en sales de adición ya sea de bases o de ácidos.

[0112] Las formas neutras de los compuestos se pueden regenerar poniendo en contacto la sal con una base o ácido y aislando el compuesto original de la manera convencional. La forma original del compuesto difiere de las diversas formas de sal en ciertas propiedades físicas, tales como la solubilidad en disolventes polares, pero por lo demás las sales son equivalentes a la forma original del compuesto para los fines de la presente invención. "Sal del mismo" se refiere a un compuesto formado cuando el hidrógeno de un ácido se reemplaza por un catión, tal como un catión metálico o un catión orgánico y similares. Preferiblemente, la sal es una sal farmacéuticamente aceptable, aunque esto no es necesario para las sales de compuestos intermedios que no están destinadas a la administración a un paciente.

[0113] Además de las formas salinas, se describen aquí compuestos que se encuentran en forma de profármaco. Los profármacos suelen ser útiles porque, en algunas situaciones, pueden ser más fáciles de administrar que el fármaco original. Por ejemplo, pueden estar biodisponibles mediante administración oral, mientras que el fármaco original no lo está. El profármaco también puede tener una solubilidad mejorada en composiciones farmacéuticas con respecto al fármaco original. En la técnica se conoce una amplia variedad de derivados de profármaco, tales como aquellos que dependen de la escisión hidrolítica o la activación oxidativa del profármaco. Un ejemplo, sin limitación, de un profármaco sería un compuesto que se administra como un éster (el "profármaco"), pero luego se hidroliza metabólicamente al ácido carboxílico, la entidad activa. Ejemplos adicionales incluyen derivados peptidílicos de un compuesto descrito aquí.

[0114] Los profármacos de los compuestos descritos aquí son aquellos compuestos que sufren fácilmente cambios químicos en condiciones fisiológicas para proporcionar los compuestos de la presente invención. Además, los profármacos se pueden convertir en los compuestos descritos aquí mediante métodos químicos o bioquímicos en un entorno ex vivo. Por ejemplo, los profármacos se pueden convertir lentamente en los compuestos descritos aquí cuando se colocan en un depósito de parche transdérmico con una enzima o reactivo químico adecuado. Los profármacos se pueden preparar modificando grupos funcionales presentes en los compuestos de tal manera que las modificaciones se escindan, ya sea en manipulación habitual o in vivo, en los compuestos originales. Los profármacos incluyen compuestos en los que grupos hidroxilo, amino, sulfhidrilo o carboxilo están enlazados a cualquier grupo que, cuando se administra a un sujeto mamífero, se escinde para formar un grupo hidroxilo, amino, sulfhidrilo o carboxilo libre, respectivamente. Los ejemplos de profármacos incluyen, pero no se limitan a, derivados de acetato, formiato y benzoato de grupos funcionales amina y alcohol en los compuestos de la invención. La preparación, selección y uso de profármacos se analiza en T. Higuchi y V. Stella, "Pro-drugs as Novel Delivery Systems", vol.14 de la ACS Symposium Series; "Design of Prodrugs", ed. H. Bundgaard, Elsevier, 1985; y en Bioreversible Carriers in Drug Design, ed. Edward B. Roche, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987.

[0116] Los compuestos descritos aquí pueden estar presentes en forma de sus metabolitos farmacéuticamente aceptables. El término "metabolito" se refiere a una forma farmacéuticamente aceptable de un derivado metabólico de un compuesto (o una sal del mismo). En algunos aspectos, el metabolito puede ser un derivado funcional de un compuesto que es fácilmente convertible in vivo en un compuesto activo. En otros aspectos, el metabolito puede ser un compuesto activo.

[0118] La expresión "isósteros de ácido" se refiere, a menos que se indique lo contrario, a un grupo que puede reemplazar un ácido carboxílico, que tiene una funcionalidad ácida y características estéricas y electrónicas que proporcionan un nivel de actividad (u otra característica del compuesto tal como solubilidad) similar a un ácido carboxílico. Los isósteros de ácido representativos incluyen: ácidos hidroxámicos, ácidos sulfónicos, ácidos sulfínicos, sulfonamidas, acilsulfonamidas, ácidos fosfónicos, ácidos fosfínicos, ácidos fosfóricos, tetrazol, y oxooxadiazoles.

[0120] Ciertos compuestos descritos aquí pueden existir en formas no solvatadas así como en formas solvatadas, incluidas las formas hidratadas. En general, se pretende que tanto las formas solvatadas como las formas no solvatadas estén abarcadas dentro del alcance de la presente invención. Ciertos compuestos de la presente invención pueden existir en múltiples formas cristalinas o amorfas (es decir, como polimorfos). En general, todas las formas físicas son equivalentes para los usos contemplados por la presente invención, y están destinadas a estar dentro del alcance de la presente invención.

[0122] Ciertos compuestos descritos aquí poseen átomos de carbono asimétricos (centros ópticos) o dobles enlaces; se pretende que todos los racematos, diastereómeros, isómeros geométricos e isómeros individuales (por ejemplo, enantiómeros separados) estén abarcados dentro del alcance de la presente invención. Los compuestos también pueden contener proporciones no naturales de isótopos atómicos en uno o más de los átomos que constituyen tales compuestos. Por ejemplo, los compuestos pueden estar radiomarcados con isótopos radiactivos, tal como por ejemplo tritio (<3>H), yodo-125 (<125>I) o carbono-14 (<14>C). Se describen todas las variaciones isotópicas de los compuestos, ya sean radiactivas o no.

[0124] Los compuestos descritos aquí pueden incluir una marcador detectable. Un marcador detectable es un grupo que es detectable en concentraciones bajas, generalmente menores que micromolar, probablemente menores que nanomolar, y posiblemente menores que picomolar, y que puede distinguirse fácilmente de otras moléculas debido a diferencias en una propiedad molecular (por ejemplo, peso molecular, relación masa-carga, radiactividad, potencial redox, luminiscencia, fluorescencia, propiedades electromagnéticas, propiedades de unión, y similares). Los marcadores detectables pueden detectarse por medios espectroscópicos, fotoquímicos, bioquímicos, inmunoquímicos, eléctricos, magnéticos, electromagnéticos, ópticos o químicos, y similares.

[0126] Una amplia variedad de marcadores detectables están dentro del alcance de la presente descripción, incluidos marcadores de hapteno (por ejemplo, biotina o marcadores usados junto con anticuerpos detectables tales como anticuerpos de peroxidasa de rábano picante); marcadores de etiquetas de masa (por ejemplo, marcadores de isótopos estables); marcadores radioisotópicos (incluidos<3>H,<125>I,<35>S,<14>C, or<32>P); marcadores de quelatos metálicos; marcadores luminiscentes que incluyen marcadores fluorescentes (tales como fluoresceína, isotiocianato, rojo Texas, rodamina, proteína fluorescente verde, y similares), marcadores fosforescentes, y marcadores quimioluminiscentes, que normalmente tienen un rendimiento cuántico mayor que 0,1; marcadores electroactivos y de transferencia de electrones; marcadores moduladores de enzimas, incluyendo coenzimas, catalizadores organometálicos, peroxidasa de rábano picante, fosfatasa alcalina y otros usados comúnmente en un ELISA; marcadores fotosensibilizadores; marcadores de perlas magnéticas, incluidos Dynabeads; marcadores colorimétricos tales como oro coloidal, plata, selenio, u otros metales, y marcadores de sol metálico (véase la patente de EE. UU.5.120.643), o marcadores de perlas de vidrio o plástico coloreadas (por ejemplo, poliestireno, polipropileno, látex, etc.); y marcadores de negro de humo. Las patentes que enseñan el uso de tales marcadores detectables incluyen las patentes de EE. UU. núms. 3.817.837; 3.850.752; 3.939.350; 3.996.345; 4.277.437; 4.275.149; 4.366.241; 6.312.914; 5.990.479; 6.207.392; 6.423.551; 6.251.303; 6.306.610; 6.322.901; 6.319.426; 6.326.144; y 6.444.143.

[0128] Los marcadores detectables están disponibles comercialmente, o se pueden preparar como sabe un experto en la técnica. Los marcadores detectables pueden unirse covalentemente a los compuestos usando un grupo funcional reactivo, que puede ubicarse en cualquier posición apropiada. Los expertos en la técnica conocen métodos para unir un marcador detectable. Cuando el grupo reactivo está unido a un alquilo, o a una cadena de alquilo sustituida unida a un núcleo de arilo, el grupo reactivo puede estar ubicado en una posición terminal de una cadena de alquilo.

[0129] III. Descripciones detalladas de realizaciones

[0130] A. Tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal con una terapia combinada

[0131] La presente descripción proporciona métodos, composiciones y kits basados en una terapia combinada que incluye un inhibidor de CCR9 y un anticuerpo anti-integrina α4β7. Esta terapia es útil para tratar la EII tal como la enfermedad de Crohn (EC) y la colitis ulcerosa (CU) en un sujeto. La presente invención se basa, en parte, en el descubrimiento inesperado de que la combinación sinérgica de un inhibidor de CCR9 y un anticuerpo antiintegrina α4β7 es eficaz en el tratamiento de la EII.

[0132] 1. Enfermedad de Crohn

[0133] Las composiciones, métodos y kits se pueden usar en un sujeto con EC, incluidos todos los tipos de EC. La terapia combinada de un inhibidor de CCR9 y un anticuerpo anti-integrina α4β7 se puede administrar en una cantidad eficaz para inducir una respuesta clínica o mantener la remisión clínica en un sujeto con EC. En algunas realizaciones, la terapia combinada mitiga, reduce o minimiza la gravedad de uno o más síntomas de EC.

[0134] Los síntomas de la EC incluyen diarrea, fiebre, fatiga, dolor o calambres abdominales, sangre en las heces, llagas en la boca, reducción del apetito, pérdida de peso, y enfermedad perianal. Los síntomas o características adicionales de la EC pueden evaluarse mediante endoscopia, por ejemplo esofagogastroduodenoscopia, colonoscopia, sigmoidoscopia, colangiopancreatografía retrógrada endoscópica, ecografía endoscópica, y endoscopia con balón, e histología de biopsias del tubo digestivo. La gravedad de la enfermedad se puede clasificar en enfermedad leve a moderada, moderada a grave, y grave/fulminante. Descripciones adicionales sobre la EC se encuentran, por ejemplo, en Lichtenstein et al., Am J Gastroenterol, 2009, 104(2):2465-83.

[0135] La gravedad de la EC, así como la respuesta clínica a la terapia combinada, se pueden determinar usando un índice clínico, tal como el Índice de Actividad de la Enfermedad de Crohn o CDAI (Best et al., Gastroenterology, 1976, 70:439-44). El índice se usa para cuantificar los síntomas de los pacientes con EC. El CDAI se puede usar para definir la respuesta clínica o la remisión de la EC. El CDAI consiste en ocho factores, cada uno de los cuales se suma (suma) después del ajuste con un factor de ponderación o multiplicador. Los ocho factores incluyen el número de deposiciones líquidas, dolor abdominal, bienestar general, complicaciones extraintestinales, fármacos antidiarreicos, masa abdominal, hematocrito, y peso corporal. La remisión de la enfermedad de Crohn se define generalmente como una caída o disminución del CDAI de menos de 150 puntos. La enfermedad grave generalmente se define como un valor mayor que 450 puntos. En ciertos aspectos, la respuesta a un medicamento particular en un paciente con enfermedad de Crohn se define como una caída del CDAI de más de 70 puntos desde el inicio (semana 0 de tratamiento).

[0136] Se puede usar un índice clínico, tal como el CDAI, para determinar si la terapia combinada descrita aquí induce una respuesta clínica o una remisión clínica en un paciente con enfermedad de Crohn. En algunas realizaciones, si la puntuación de CDAI del paciente disminuye en 70 puntos o más desde el inicio al recibir la terapia combinada, el paciente está teniendo una respuesta clínica. Si la puntuación de CDAI del paciente disminuye a menos de 150 puntos al final de la fase de inducción de la terapia, el paciente se encuentra en remisión clínica de la EC.

[0137] 2. Colitis ulcerosa

[0138] Las composiciones, métodos y kits se pueden usar en un sujeto con CU, incluidos todos los tipos de CU. La terapia combinada de un inhibidor de CCR9 y un anticuerpo anti-integrina α4β7 se puede administrar en una cantidad eficaz para inducir una respuesta clínica o mantener la remisión clínica en un sujeto con CU. En algunas realizaciones, la terapia combinada mitiga, reduce o minimiza la gravedad de uno o más síntomas de CU.

[0139] Los síntomas de la CU incluyen, pero no se limitan a, diarrea, dolor y calambres abdominales, dolor rectal, rectorragia, tenesmo rectal, incapacidad para defecar, pérdida de peso, fatiga, fiebre, o anemia. La gravedad de la enfermedad se puede clasificar en enfermedad leve a moderada, moderada a grave, y grave/fulminante. Véase, por ejemplo, Kornbluth et al., Am J Gastroenterol, 2004, 99(7):1371-85.

[0140] La actividad de la enfermedad de la CU y la respuesta al tratamiento se pueden evaluar mediante análisis cuantitativo usando un sistema de puntuación de índice compuesto. Generalmente, los médicos consideran al menos cuatro factores o variables al evaluar la actividad de la enfermedad de la CU: síntomas clínicos, calidad de vida, evaluación endoscópica, y evaluación histológica. Por ejemplo, el índice de actividad de la colitis (CAI) es una medida cuantitativa que incorpora los siguientes síntomas de la enfermedad: inflamación del colon según la colonoscopia, diarrea, dolor y calambres abdominales, y sangre en las heces. Los sistemas de puntuación endoscópica estandarizados, tal como el índice de gravedad endoscópico de la CU (UCEIS), son útiles para establecer una puntuación del índice de enfermedad de un paciente. Otros índices útiles de actividad de la enfermedad incluyen la Puntuación de la Clínica Mayo (véase, por ejemplo, Rutgeert et al., N Eng J Med, 2005, 353(23):2462-76) y el Índice de Actividad de la Enfermedad de Mayo modificado (MMDAI; véase, por ejemplo, Schroeder et al., N Eng J Med, 1987, 317(26):1625-9). Los cuatro factores usados en el sistema de puntuación de la Clínica Mayo incluyen la frecuencia de las deposiciones, la rectorragia, los hallazgos endoscópicos, y la evaluación global por parte del médico de la gravedad de la enfermedad (por ejemplo, malestar abdominal diario y sensación general de bienestar).

[0141] En comparación con la Puntuación de la Clínica Mayo, el MMDAI incluye la eliminación de la "friabilidad" de la puntuación de endoscopia de 1. Por tanto, la presencia de friabilidad refleja una puntuación endoscópica de 2 o 3. El MMDAI evalúa 4 subpuntuaciones (frecuencia intestinal, rectorragia, aspecto endoscópico, y evaluación global del médico), cada una en una escala de 0 a 3, con una puntuación total máxima de 12.

[0142] En algunas realizaciones, la respuesta clínica de un sujeto con CU a una terapia combinada proporcionada aquí corresponde a una disminución de 2 puntos o más desde el valor inicial en la puntuación de MMDAI y una disminución del 25 % o más desde el valor inicial, y/o una disminución de 1 punto o más desde el inicio en la subpuntuación de la rectorragia. En otras realizaciones, la respuesta clínica corresponde a una disminución de 3 puntos o más en la puntuación de la Clínica Mayo y del 30 % con respecto al valor inicial.

[0143] La remisión clínica de un sujeto con CU al que se le administró la terapia combinada puede corresponder a una puntuación de 0 para rectorragia y una puntuación combinada de 2 puntos o menos para la frecuencia intestinal y la evaluación del médico usando la subescala de MMDAI. En otras realizaciones, la remisión clínica en un sujeto con CU se refiere a tener una Puntuación de la Clínica Mayo de 2 puntos o menos y ninguna subpuntuación individual (frecuencia intestinal, rectorragia, aspecto endoscópico, y evaluación global del médico) de más de 1 punto.

[0144] B. Terapia combinada de inhibidores de CCR9 y anticuerpos anti-integrina α4β7

[0145] Se describen aquí métodos, composiciones y kits que aprovechan el efecto sinérgico de los inhibidores de CCR9 y los anticuerpos anti-integrina α4β7 para reducir la inflamación en sujetos con EII. Un tratamiento combinado que incluye tanto un inhibidor de CCR9 como un anticuerpo anti-integrina α4β7 es más eficaz para tratar uno o más síntomas de EII en comparación con cualquier compuesto/anticuerpo solo.

[0146] 1. Inhibidores del tipo de receptor de quimiocinas (CCR9)

[0147] La presente descripción proporciona compuestos que modulan la actividad de CCR9, tales como CCX507 y vercirnon. Específicamente, la descripción proporciona compuestos que tienen actividad antiinflamatoria o inmunorreguladora. Se cree que los compuestos interfieren con el tráfico inadecuado de células T al modular o inhibir específicamente la función del receptor de quimiocinas. Los receptores de quimiocinas son proteínas integrales de membrana que interactúan con un ligando extracelular, tal como una quimiocina, y median una respuesta celular al ligando, por ejemplo quimiotaxis, aumento de la concentración de iones de calcio intracelular, etc. Por lo tanto, la modulación de una función de un receptor de quimiocina, por ejemplo la interferencia con una interacción receptor-ligando de quimiocina, puede inhibir o reducir una respuesta mediada por el receptor de quimiocina, así como tratar o prevenir una afección o enfermedad mediada por el receptor de quimiocina.

[0148] Sin estar sujetos a ninguna teoría particular, se cree que los compuestos descritos aquí interfieren con la interacción entre CCR9 y su ligando CCL25. Por ejemplo, los compuestos actúan como potentes antagonistas de CCR9, y esta actividad antagonista se ha confirmado aún más en pruebas con animales para detectar inflamación, uno de los estados patológicos característicos de CCR9. Los compuestos contemplados en la descripción incluyen, pero no se limitan a, los compuestos ejemplares descritos aquí y sus sales.

[0149] Por ejemplo, los compuestos útiles actúan como potentes antagonistas de CCR9, y esta actividad antagonista se ha confirmado aún más en pruebas con animales para detectar inflamación, uno de los estados patológicos característicos de CCR9. Por consiguiente, los compuestos descritos aquí son útiles en composiciones farmacéuticas y métodos para el tratamiento de enfermedades inflamatorias del intestino, por ejemplo colitis ulcerosa y enfermedad de Crohn.

[0150] En algunas realizaciones, los inhibidores de CCR9, por ejemplo inhibidores de CCR9 de tipo molécula pequeña de la presente descripción, están representados por la fórmula (I), o sus sales:

[0151]

[0153] en la que R<1>se selecciona del grupo que consiste en alquilo de C<2-8>sustituido o no sustituido, alcoxi de C<1-8>sustituido o no sustituido, alquilamino de C<1-8>sustituido o no sustituido, y heterociclilo C<3-10>sustituido o no sustituido, y;

[0154] R<2>es H, F, Cl, o alcoxi de C<1-8>sustituido o no sustituido; o

[0155] R<1>y R<2>, junto con los átomos de carbono a los que están unidos, forman un anillo carbocíclico no aromático o un anillo heterocíclico;

[0156] R<3>es H, alquilo de C<1-8>sustituido o no sustituido, alcoxi de C<1-8>sustituido o no sustituido, o halo;

[0157] R<4>es H o F;

[0158] R<5>es H, F, Cl, o -CH<3>;

[0159] R<6>es H, halo, -CN, -CO<2>R<a>, -CONH<2>, -NH<2>, alquilo de C<1-8>sustituido o no sustituido, alcoxi de C<1-8>sustituido o no sustituido, o aminoalquilo de C<1-8>sustituido o no sustituido;

[0160] R<a>es H o alquilo de C<1-8>sustituido o no sustituido;

[0161] en la que R<5>y R<6>pueden formar juntos un anillo carbocíclico;

[0162] L es un enlace, -CH<2>-, o -CH(CH<3>)-;

[0163] cada uno de A<1>, A<2>, A<3>, A<4>, A<5>, A<6>, A<7>, y A<8>se seleccionan independientemente del grupo que consiste en N,N-O y -CR<8>-; en la que al menos uno y no más de dos de A<1>, A<2>, A<3>, A<4>, A<5>, A<6>, A<7>, y A<8>son N o N-O;

[0164] R<8>se selecciona, cada uno independientemente, del grupo que consiste en H, halo, -CN,-OH, oxo, alquilo de C<1-8>sustituido o no sustituido, alcoxi de C<1-8>sustituido o no sustituido, y -NR<20>R<21>, arilo sustituido o no sustituido, heteroarilo sustituido o no sustituido, y heterociclilo sustituido o no sustituido; y R<20>y R<21>son, cada uno independientemente, H, o alquilo de C<1-8>sustituido o no sustituido.

[0165] En algunas realizaciones, el compuesto inhibidor de CCR9 de tipo molécula pequeña de la presente invención es

[0168]

[0170] Las descripciones detalladas de los compuestos inhibidores de CCR9 descritos aquí, y los métodos para preparar dichos compuestos, se encuentran, por ejemplo, en la patente de EE. UU. núm. 8.916.601 y en las publicaciones de solicitudes de patente de EE. UU. núms. 2013/0267492, 2013/0059893, 2012/0245138, 2012/0165303, 2011/0021523, 2010/0331302, 2010/0227902, 2010/0190762, 2010/0152186, 2010/0056509, 2009/0163498 y 2009/0005410.

[0171] Los compuestos descritos aquí pueden sintetizarse usando una variedad de transformaciones de química orgánica estándar. En los ejemplos se resumen ciertos tipos de reacciones generales ampliamente empleados para sintetizar compuestos diana. Específicamente, se describen los procedimientos genéricos para la formación de sulfonamida y la formación de N-óxido de aza-arilo, y se emplearon de forma rutinaria.

[0172] Aunque no se pretende ser exhaustivo, se incluyen aquí transformaciones orgánicas sintéticas representativas que pueden usarse para preparar compuestos de la descripción. Estas transformaciones representativas incluyen; manipulaciones estándar de grupos funcionales; reducciones tales como nitro a amino; oxidaciones de grupos funcionales que incluyen alcoholes y azaarilos; sustituciones de arilo mediante IPSO u otros mecanismos para la introducción de una variedad de grupos que incluyen nitrilo, metilo y halógeno; proteger las introducciones y eliminaciones de grupos; formación de Grignard y reacción con un electrófilo; acoplamientos cruzados mediados por metales, que incluyen, pero no se limitan a, reacciones de Buckwald, Suzuki y Sonigashira; halogenaciones y otras reacciones de sustitución aromática electrofílica; formaciones de sales de diazonio y reacciones de estas especies; eterificaciones; condensaciones ciclativas, deshidrataciones, oxidaciones y reducciones que conducen a grupos heteroarílicos; metalaciones y transmetalaciones de arilo y reacción de las especies de aril-metal resultantes con un electrófilo tal como un cloruro de ácido o amida de Weinreb; amidaciones; esterificaciones; reacciones de sustitución nucleofílica; alquilaciones; acilaciones; formación de sulfonamidas; clorosulfonilaciones; éster e hidrólisis relacionadas, y similares.

[0173] Ciertas moléculas descritas aquí pueden existir en diferentes formas enantioméricas y diastereoméricas, y todas esas variantes de estos compuestos están dentro del alcance de la descripción. En particular, cuando R<8>es OH y está en orto con respecto a un nitrógeno, aunque se ilustra mediante la fórmula -N=C(OH)-, debe entenderse que la forma tautomérica -NH-C(O)- también está dentro del alcance de la fórmula.

[0174] En las descripciones de las síntesis que siguen, algunos precursores se obtuvieron de fuentes comerciales. Estas fuentes comerciales incluyen Aldrich Chemical Co., Acros Organics, Ryan Scientific Incorporated, Oakwood Products Incorporated, Lancaster Chemicals, Sigma Chemical Co., Lancaster Chemical Co., TCI-America, Alfa Aesar, Davos Chemicals, y GFS Chemicals.

[0175] 2. Formulaciones farmacéuticas de inhibidores de CCR9

[0176] En otro aspecto, la presente descripción proporciona composiciones o formulaciones que modulan la actividad de CCR9. Generalmente, las composiciones o formulaciones para modular la actividad del receptor de quimiocinas en un sujeto tal como un ser humano o un animal comprenderán un compuesto descrito aquí y un excipiente o diluyente farmacéuticamente aceptable.

[0177] El término "composición", como se usa aquí, pretende abarcar un producto que comprende los ingredientes especificados en las cantidades especificadas, así como cualquier producto que resulte, directa o indirectamente, de la combinación de los ingredientes especificados en las cantidades especificadas. Por "farmacéuticamente aceptable" se entiende que el vehículo, diluyente o excipiente debe ser compatible con los demás ingredientes de la formulación y no perjudicial para el receptor de la misma.

[0178] Las composiciones farmacéuticas para la administración de los compuestos descritos pueden presentarse convenientemente en forma farmacéutica unitaria, y pueden prepararse mediante cualquiera de los métodos bien conocidos en la técnica farmacéutica. Todos los métodos incluyen la etapa de asociar el ingrediente activo con el vehículo, que constituye uno o más ingredientes accesorios. En general, las composiciones farmacéuticas se preparan asociando de manera uniforme e íntima el ingrediente activo con un vehículo líquido o un vehículo sólido finamente dividido, o ambos, y después, si es necesario, dando forma al producto en la formulación deseada. En la composición farmacéutica, el compuesto objeto activo se incluye en una cantidad suficiente para producir el efecto deseado sobre el proceso o condición de las enfermedades.

[0179] En algunas realizaciones, el inhibidor de CCR9 de la presente descripción es un compuesto farmacéutico que tiene una forma cristalina. Un ejemplo no limitativo de tal forma cristalina de un inhibidor de CCR9 se describe, por ejemplo, en la patente de EE. UU. núm.9.133.124.

[0180] Las composiciones farmacéuticas que contienen el ingrediente activo pueden estar en una forma adecuada para uso oral, por ejemplo como comprimidos, trociscos, pastillas para chupar, suspensiones acuosas u oleosas, polvos o gránulos dispersables, emulsiones y autoemulsiones como se describe en la patente de EE. UU. núm.

[0181] 6.451.399, cápsulas duras o blandas, o jarabes o elixires. Las composiciones destinadas al uso oral pueden prepararse según cualquier método conocido en la técnica para la fabricación de composiciones farmacéuticas. Tales composiciones pueden contener uno o más agentes seleccionados entre agentes edulcorantes, agentes aromatizantes, agentes colorantes y agentes conservantes, para proporcionar preparaciones farmacéuticamente elegantes y sabrosas. Los comprimidos contienen el ingrediente activo mezclado con otros excipientes no tóxicos farmacéuticamente aceptables que son adecuados para la fabricación de comprimidos. Estos excipientes pueden ser, por ejemplo, diluyentes inertes tales como celulosa, dióxido de silicio, óxido de aluminio, carbonato cálcico, carbonato sódico, glucosa, manitol, sorbitol, lactosa, fosfato cálcico o fosfato sódico; agentes granulantes y disgregantes, por ejemplo almidón de maíz o ácido algínico; agentes aglutinantes, por ejemplo PVP, celulosa, PEG, almidón, gelatina o goma arábiga, y agentes lubricantes, por ejemplo estearato de magnesio, ácido esteárico o talco. Los comprimidos pueden estar sin revestir o pueden estar revestidos entéricamente o de otro modo mediante técnicas conocidas para retrasar la disgregación y absorción en el tubo digestivo y proporcionar así una acción sostenida durante un período más largo. Por ejemplo, se puede emplear un material retardador, tal como monoestearato de glicerilo o diestearato de glicerilo. También se pueden revestir mediante las técnicas descritas en las patentes de EE. UU. núms. 4.256.108; 4.166.452; y 4.265.874 para formar comprimidos terapéuticos osmóticos para liberación controlada.

[0183] Las formulaciones para uso oral también se pueden presentar como cápsulas de gelatina duras en las que el ingrediente activo se mezcla con un diluyente sólido inerte, por ejemplo carbonato de calcio, fosfato de calcio, o caolín, o como cápsulas de gelatina blandas en las que el ingrediente activo se mezcla con agua o un medio oleoso, por ejemplo aceite de cacahuete, parafina líquida, o aceite de oliva. Además, las emulsiones se pueden preparar con un ingrediente no miscible con agua, tales como aceites, y estabilizarse con tensioactivos, tales como monodiglicéridos, ésteres de PEG, y similares.

[0185] Las suspensiones acuosas contienen los materiales activos mezclados con excipientes adecuados para la fabricación de suspensiones acuosas. Tales excipientes son agentes de suspensión, por ejemplo carboximetilcelulosa sódica, metilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, alginato sódico, polivinilpirrolidona, goma tragacanto, y goma arábiga; los agentes dispersantes o humectantes pueden ser un fosfátido natural, por ejemplo lecitina, o productos de condensación de un óxido de alquileno con ácidos grasos, por ejemplo estearato de polioxietileno, o productos de condensación de óxido de etileno con alcoholes alifáticos de cadena larga, por ejemplo heptadecaetilenoxicetanol, o productos de condensación de óxido de etileno con ésteres parciales derivados de ácidos grasos y un hexitol tal como monooleato de polioxietilensorbitol, o productos de condensación de óxido de etileno con ésteres parciales derivados de ácidos grasos y anhídridos de hexitol, por ejemplo monooleato de polietilensorbitán. Las suspensiones acuosas también pueden contener uno o más conservantes, por ejemplo p-hidroxibenzoato de etilo o n-propilo, uno o más agentes colorantes, uno o más agentes saborizantes, y uno o más agentes edulcorantes, tales como sacarosa o sacarina.

[0187] Las suspensiones oleosas se pueden formular suspendiendo el ingrediente activo en un aceite vegetal, por ejemplo aceite de cacahuete, aceite de oliva, aceite de sésamo o aceite de coco, o en un aceite mineral tal como parafina líquida. Las suspensiones oleosas pueden contener un agente espesante, por ejemplo cera de abejas, parafina dura o alcohol cetílico. Se pueden añadir agentes edulcorantes, tales como los expuestos anteriormente, y agentes saborizantes, para proporcionar una preparación oral sabrosa. Estas composiciones pueden conservarse mediante adición de un antioxidante tal como ácido ascórbico.

[0189] Los polvos y gránulos dispersables adecuados para la preparación de una suspensión acuosa mediante adición de agua proporcionan el ingrediente activo mezclado con un agente dispersante o humectante, un agente de suspensión y uno o más conservantes. Los agentes dispersantes o humectantes y agentes de suspensión adecuados son, por ejemplo, los ya mencionados anteriormente. También pueden estar presentes excipientes adicionales, por ejemplo agentes edulcorantes, saborizantes y colorantes.

[0191] Las composiciones farmacéuticas de la invención también pueden estar en forma de emulsiones de aceite en agua. La fase oleosa puede ser un aceite vegetal, por ejemplo aceite de oliva o aceite de cacahuete, o un aceite mineral, por ejemplo parafina líquida, o mezclas de estos. Agentes emulsionantes adecuados pueden ser gomas naturales, por ejemplo goma arábiga o goma tragacanto, fosfátidos naturales, por ejemplo soja, lecitina, así como ésteres o ésteres parciales derivados de ácidos grasos y anhídridos de hexitol, por ejemplo monooleato de sorbitán, y productos de condensación de los mencionados ésteres parciales con óxido de etileno, por ejemplo monooleato de polioxietilensorbitán. Las emulsiones también pueden contener agentes edulcorantes y saborizantes.

[0193] Los jarabes y elixires se pueden formular con agentes edulcorantes, por ejemplo glicerol, propilenglicol, sorbitol o sacarosa. Estas formulaciones también pueden contener un emulgente, un conservante, y agentes saborizantes y colorantes. Las disoluciones orales se pueden preparar en combinación con, por ejemplo, ciclodextrina, PEG y tensioactivos.

[0195] Las composiciones farmacéuticas pueden estar en forma de una suspensión acuosa u oleaginosa inyectable estéril. Esta suspensión se puede formular según la técnica conocida usando aquellos agentes dispersantes o humectantes y agentes de suspensión adecuados que se han mencionado anteriormente. La preparación inyectable estéril también puede ser una disolución o suspensión inyectable estéril en un diluyente o disolvente no tóxico parenteralmente aceptable, por ejemplo como una disolución en 1,3-butanodiol. Entre los vehículos y disolventes aceptables que se pueden emplear, se encuentran agua, disolución de Ringer y disolución isotónica de cloruro de sodio. Además, convencionalmente se emplean aceites fijos estériles como disolvente o medio de suspensión. Para este fin, se puede emplear cualquier aceite fijo blando, incluyendo monoglicéridos o diglicéridos sintéticos. Además, los ácidos grasos tal como el ácido oleico encuentran uso en la preparación de inyectables. Los compuestos descritos aquí también se pueden administrar en forma de supositorios para la administración rectal del fármaco. Estas composiciones se pueden preparar mezclando el fármaco con un excipiente no irritante adecuado que sea sólido a temperaturas normales pero líquido a la temperatura rectal y que, por lo tanto, se derretirá en el recto para liberar el fármaco. Dichos materiales son manteca de cacao y polietilenglicoles. Además, los compuestos se pueden administrar vía administración ocular mediante disoluciones o ungüentos. Además, la administración transdérmica de los compuestos en cuestión se puede lograr por medio de parches iontoforéticos y similares.

[0196] Para uso tópico, se emplean cremas, ungüentos, jaleas, disoluciones o suspensiones que contienen los compuestos de la presente invención. Como se usa aquí, la aplicación tópica también pretende incluir el uso de colutorios y gárgaras.

[0197] Las composiciones farmacéuticas y métodos descritos aquí pueden comprender además otros compuestos terapéuticamente activos como se indica aquí, tales como los aplicados en el tratamiento de las afecciones patológicas mencionadas anteriormente.

[0198] 3. Anticuerpos bloqueadores anti-integrina α4β7

[0199] Los anticuerpos anti-integrina α4β7 adecuados para uso en el tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal, por ejemplo enfermedad de Crohn y colitis ulcerosa, incluyen anticuerpos procedentes de cualquier fuente deseada que inhiba la unión de la integrina α4β7 a cualquiera de sus ligandos, tales como la adresina mucosal (MadCAM-1), la fibronectina, la molécula de adhesión de células vasculares (VCAM), y similares. Los anticuerpos anti-integrina α4β7 pueden ser anticuerpos humanos, anticuerpos de ratón, anticuerpos de conejo, anticuerpos diseñados por ingeniería, tales como anticuerpos quiméricos, anticuerpos humanizados, y fragmentos de anticuerpos de unión a antígeno, tales como fragmentos Fab, Fv, scFv, Fab' y F(ab')<2>.

[0200] En algunas realizaciones, el anticuerpo anti-integrina α4β7 se une a un epítopo en la cadena α4, un epítopo en la cadena β7, o un epítopo compuesto formado por la asociación de la cadena α4 y la cadena β7. En algunos casos, el anticuerpo anti-integrina α4β7 se une a un epítopo formado por la asociación de las cadenas α4 y β7, y no se une a un epítopo en la cadena α4 o en la cadena β7 si las cadenas α4 y β7 no están asociadas o complejadas juntas.

[0201] Los ejemplos no limitativos de un anticuerpo anti-integrina α4β7 para uso en el método descrito aquí incluyen vedolizumab (ENTYVIO<®>), natalizumab (Tysabri<®>), AMG 181 (Amgen), y los descritos, por ejemplo, en la publicación de patente internacional núm. WO 2012/151248, las patentes de EE. UU. núms. 7.147.851; 7.402.410; 8.444.981; 8.454,961; 8.454.962; 8.871.490; y la publicación de solicitud de patente de EE. UU. núm.

[0202] 2015/0086563. Los anticuerpos anti-integrina α4β7 útiles adicionales incluyen bioequivalentes, biosimilares y biomejores de cualquiera de los anticuerpos anti-integrina α4β7 descritos aquí.

[0203] En algunas realizaciones, el anticuerpo anti-integrina α4β7 de la presente descripción es un anticuerpo con una secuencia de aminoácidos que tiene al menos 70 %, al menos 80 %, al menos 90 %, al menos 95 % o más de identidad de secuencia con un anticuerpo anti-integrina α4β7 de referencia tal como vedolizumab, AMG 181 u otro anticuerpo anti-integrina α4β7 que sea conocido por un experto en la técnica. En algunos casos, la variante de anticuerpo tiene una o más sustituciones, eliminaciones y/o adiciones de aminoácidos en ciertas posiciones de aminoácidos del anticuerpo de referencia, pero conserva la actividad de unión al antígeno.

[0204] Un experto en la técnica reconoce que el "porcentaje de identidad de secuencia" puede determinarse comparando dos secuencias óptimamente alineadas a lo largo de una ventana de comparación o región designada de la secuencia, en la que la porción de la secuencia polipeptídica en la ventana de comparación puede comprender adiciones o eliminaciones (es decir, espacios) en comparación con la secuencia de referencia (que no comprende adiciones ni eliminaciones) para una alineación óptima de las dos secuencias. El porcentaje se puede calcular determinando el número de posiciones en las que aparece la base de ácido nucleico o el resto de aminoácido idéntico en ambas secuencias para producir el número de posiciones coincidentes, dividiendo el número de posiciones coincidentes entre el número total de posiciones en la ventana de comparación, y multiplicando el resultado por 100 para obtener el porcentaje de identidad de secuencia. El porcentaje de identidad de secuencia se puede medir usando algoritmos de comparación de secuencias BLAST o BLAST 2.0, con parámetros predeterminados, o mediante alineación manual e inspección visual.

[0205] Los anticuerpos, sus fragmentos, sus variantes y sus derivados pueden generarse usando una variedad de métodos estándar reconocidos por los expertos en la técnica. Véase, por ejemplo, Harlow, E. y Lane DP. Antibodies: A Laboratory Manual. Cold Spring Harbor : Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1988. Los fragmentos de unión a antígeno, tales como los fragmentos Fab y F(ab')<2>, se pueden producir mediante ingeniería genética. Los procedimientos para la producción de anticuerpos monoclonales quiméricos y de otros mediante ingeniería incluyen los descritos en Riechmann et al., Nature, 1988,332:323, Liu et al., Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1987, 84:3439, Larrick et al., Bio/Technology, 1989, 7:934, y Winter et al., TIPS, 1993, 14:139. Ejemplos de técnicas para la producción y uso de animales transgénicos para la producción de anticuerpos humanos o parcialmente humanos se describen, por ejemplo, en Davis et al., 2003, Production of human antibodies from transgenic mice in Lo, ed. Antibody Engineering Methods and Protocols, Humana Press, NJ:191-200.

[0206] 4. Formulaciones farmacéuticas de anticuerpos anti-integrina α4β7

[0207] Se proporcionan aquí formulaciones del anticuerpo anti-integrina α4β7 que pueden estabilizar el anticuerpo, reducir la formación de agregados de anticuerpos, retrasar la degradación del anticuerpo, y/o minimizar la inmunogenicidad del anticuerpo. La formulación puede incluir un antioxidante o quelante, al menos un aminoácido libre, un tensioactivo, un azúcar no reductor, y/o un agente amortiguador.

[0208] El antioxidante o quelante puede ser citrato, ácido etilendiaminotetraacético (EDTA), ácido etilenglicoltetraacético (EGTA), dimercaprol, ácido dietilentriaminopentaacético, o N,N-bis(carboximetil)glicina; preferiblemente citrato o EDTA. El aminoácido libre puede ser histidina, alanina, arginina, glicina, ácido glutámico, y combinaciones de los mismos. El tensioactivo puede ser polisorbatos 20; polisorbato 80; TRITON (t-octilfenoxipolietoxietanol, detergente no iónico; dodecilsulfato de sodio (SDS); laurilsulfato de sodio; octilglucósido de sodio; lauril-, miristil-, linoleil- o estearil-sulfobetaína; lauril-, miristil-, linoleil- o estearil-sarcosina; linoleil-, miristil- o cetil-betaína; lauroamidopropil-, cocamidopropil-, linoleamidopropil-, miristamidopropil-, palmidopropil- o isoestearamidopropilbetaína (por ejemplo, lauroamidopropil); miristamidopropil-, palmidopropil- o isoestearamidopropil-dimetilamina; metil cocoil-taurato sódico, o metil oleil-taurato disódico; monopalmitato de sorbitán; polietilglicol (PEG), polipropilenglicol (PPG), y copolímeros de poloxietileno y poloxipropilenglicol; preferiblemente polisorbatos 80. El agente amortiguador puede ser un amortiguador que puede ajustar el pH de la formulación a alrededor de 5,0 a alrededor de 7,5, a alrededor de pH 5,5 a alrededor de 7,5, a alrededor de pH 6,0 a alrededor de 7,0, o a un pH de alrededor de 6,3 a alrededor de 6,5. Los ejemplos no limitativos de un agente amortiguador incluyen acetato, succinato, gluconato, histidina, citrato, fosfato, maleato, cacodilato, ácido 2-[N-morfolino]etanosulfónico (MES), bis(2-hidroxietil)iminotris[hidroximetil]metano (Bis-Tris), ácido N-[2-acetamido]-2-iminodiacético (ADA), glicilglicina, y otros amortiguadores de ácidos orgánicos, preferiblemente histidina o citrato.

[0209] En algunas realizaciones, el anticuerpo anti-integrina α4β7 está en una formulación liofilizada, por ejemplo en forma seca. En algunos casos, la formulación liofilizada incluye el anticuerpo anti-integrina α4β7 y uno o más excipientes, tales como un azúcar no reductor, un agente amortiguador, un aminoácido libre, y/o un tensioactivo. En algunos casos, la formulación liofilizada contiene al menos alrededor de 50 mg, al menos alrededor de 60 mg, al menos alrededor de 70 mg, al menos alrededor de 80 mg, al menos alrededor de 90 mg, al menos alrededor de 100 mg, al menos alrededor de 120 mg, al menos alrededor de 140 mg, al menos alrededor de 180 mg, al menos alrededor de 200 mg, al menos alrededor de 220 mg, al menos alrededor de 240 mg, al menos alrededor de 280 mg, al menos alrededor de 300 mg, al menos alrededor de 400 mg, al menos alrededor de 500 mg, al menos alrededor de 600 mg, al menos alrededor de 700 mg, al menos alrededor de 800 mg, al menos alrededor de 900 mg de anticuerpo anti-integrina α4β7. En algunos casos, la formulación liofilizada se almacena como una dosis única en un vial.

[0210] En algunas realizaciones, el anticuerpo anti-integrina α4β7 es una formulación líquida. Tal formulación puede incluir el anticuerpo anti-integrina α4β7, un agente amortiguador, un azúcar no reductor, y/o un aminoácido libre. La cantidad de anticuerpo presente en una formulación líquida puede ser al menos de alrededor de 25 mg/ml a alrededor de 200 mg/ml de anticuerpo anti-integrina α4β7, por ejemplo 25 mg/ml a alrededor de 200 mg/ml, 25 mg/ml a alrededor de 150 mg/ml, 25 mg/ml a alrededor de 100 mg/ml, 50 mg/ml a alrededor de 200 mg/ml, 50 mg/ml a alrededor de 150 mg/ml, 50 mg/ml a alrededor de 100 mg/ml, 100 mg/ml a alrededor de 200 mg/ml, o 150 mg/ml a alrededor de 200 mg/ml de anticuerpo anti-integrina α4β7.

[0211] El azúcar no reductor puede ser, pero no se limita a, manitol, sorbitol, sacarosa, trehalosa, rafinosa, estaquiosa, melecitosa, dextrano, maltitol, lactitol, isomaltulosa, palatinit, y combinaciones de los mismos. En algunas realizaciones, la relación del azúcar no reductor al anticuerpo anti-integrina α4β7 es al menos 400:1 (mol:mol), al menos 400:1 (mol:mol), al menos 400:1 (mol:mol), al menos 600:1 (mol:mol), al menos 625:1 (mol:mol), al menos 650:1 (mol:mol), al menos 700:1 (mol:mol), al menos 750:1 (mol:mol), al menos 800:1 (mol:mol), al menos 1000:1 (mol:mol), al menos 1100:1 (mol:mol), al menos 1200:1 (mol:mol), al menos 1300:1 (mol:mol), al menos 1400:1 (mol:mol), al menos 1500:1 (mol:mol), al menos 1600:1 (mol:mol), al menos 1700:1 (mol:mol), al menos 1800:1 (mol:mol), al menos 1900:1 (mol:mol), o al menos 2000:1 (mol:mol).

[0212] Las formulaciones ejemplares del anticuerpo anti-integrina α4β7 incluyen, pero no se limitan a, las descritas, por ejemplo, en las publicaciones de solicitudes de patente de EE. UU. núms. 2012/0282249, 2014/0377251; y 2014/0341885.

[0213] C. Métodos de administración de la terapia combinada

[0214] En otro aspecto, la presente descripción proporciona una terapia combinada para el tratamiento de la EII, por ejemplo la EC y CU. La terapia combinada incluye una cantidad terapéuticamente eficaz de un inhibidor de CCR9 y una cantidad terapéuticamente eficaz de un anticuerpo bloqueador anti-integrina α4β7. La combinación de agentes terapéuticos puede actuar sinérgicamente para efectuar el tratamiento o la prevención de los diversos trastornos. Con este enfoque, la eficacia terapéutica se puede lograr usando dosis más bajas de cada agente, reduciendo así el potencial de efectos secundarios adversos.

[0215] La expresión "cantidad terapéuticamente eficaz" significa la cantidad del compuesto en cuestión que provocará la respuesta biológica o médica de una célula, tejido, sistema o animal, tal como un ser humano, que está siendo buscada por el investigador, veterinario, médico, u otro proveedor de tratamiento.

[0216] Dependiendo del estado de la enfermedad y la condición del sujeto, los compuestos, anticuerpos y formulaciones de la presente descripción pueden administrarse por vías de administración oral, parenteral (por ejemplo, intramuscular, intraperitoneal, intravenosa, ICV, inyección o infusión intracisternal, inyección subcutánea, o implante), inhalación, nasal, vaginal, rectal, sublingual, o tópica. Además, los compuestos y anticuerpos se pueden formular, solos o juntos, en formulaciones unitarias de dosificación adecuadas que contienen portadores, adyuvantes y vehículos farmacéuticamente aceptables no tóxicos apropiados para cada forma de administración. La presente descripción también contempla la administración de los compuestos y anticuerpos de la presente descripción en una formulación de depósito.

[0217] En el tratamiento de la EII, tal como enfermedad de Crohn y CU, un nivel de dosificación apropiado de un inhibidor de CCR9 será generalmente alrededor de 0,001 a 100 mg por kg de peso corporal del paciente por día, que se puede administrar en dosis únicas o múltiples. Preferiblemente, el nivel de dosificación será alrededor de 0,01 a alrededor de 50 mg/kg por día; más preferiblemente alrededor de 0,05 a alrededor de 10 mg/kg por día. Un nivel de dosificación adecuado puede ser alrededor de 0,01 a 50 mg/kg por día, alrededor de 0,05 a 10 mg/kg por día, o alrededor de 0,1 a 5 mg/kg por día. Dentro de este intervalo, la dosis puede ser 0,005 a 0,05 mg/kg por día, 0,05 a 0,5 mg/kg por día, 0,5 a 5,0 mg/kg por día, o 5,0 a 50 mg/kg por día.

[0218] Para la administración oral, el inhibidor de CCR9 se proporciona preferiblemente en forma de comprimidos que contienen 1,0 a 1000 miligramos del ingrediente activo, particularmente 1,0 mg, 5,0 mg, 10,0 mg, 15,0 mg, 20,0 mg, 25,0 mg, 50,0 mg, 75,0 mg, 100,0 mg, 150,0 mg, 200,0 mg, 250,0 mg, 300,0 mg, 400,0 mg, 500,0 mg, 600,0 mg, 750,0 mg, 800,0 mg, 900,0 mg, y 1000,0 mg del ingrediente activo para el ajuste sintomático de la dosis al paciente a tratar.

[0219] El inhibidor de CCR9 se puede administrar en un régimen de 1 a 4 veces por día, preferiblemente una o dos veces por día.

[0220] En el tratamiento de la EII, tal como la enfermedad de Crohn y la CU, un nivel de dosificación apropiado de un anticuerpo anti-integrina α4β7 proporciona una cantidad eficaz del anticuerpo o una formulación del mismo para inducir la remisión de la EII en un paciente humano. En algunas realizaciones, la cantidad terapéuticamente eficaz de anticuerpo anti-integrina α4β7 es suficiente para alcanzar una concentración sérica mínima media de alrededor de 5 µg/ml a alrededor de 60 µg/ml de anticuerpo anti-integrina α4β7 al final de la fase de inducción, por ejemplo una concentración sérica mínima media de alrededor de 5 µg/ml a alrededor de 60 µg/ml, de alrededor de 10 µg/ml a alrededor de 50 µg/ml, de alrededor de 15 µg/ml a alrededor de 45 µg/ml, de alrededor de 20 µg/ml a alrededor de 30 µg/ml, de alrededor de 25 µg/ml ml a alrededor de 35 µg/ml, o de alrededor de 30 µg/ml a alrededor de 60 µg/ml de anticuerpo anti-integrina α4β7 al final de la fase de inducción.

[0221] Se pueden administrar dosis adecuadas de anticuerpo desde alrededor de 0,1 mg/kg, alrededor de 0,3 mg/kg, alrededor de 0,5 mg/kg, alrededor de 1 mg/kg, alrededor de 2 mg/kg, alrededor de 3 mg/kg, alrededor de 4 mg/kg. , alrededor de 5 mg/kg, alrededor de 6 mg/kg, alrededor de 7 mg/kg, alrededor de 8 mg/kg, alrededor de 9 mg/kg, o alrededor de 10 mg/kg.

[0222] En algunas realizaciones, la cantidad de dosis total es alrededor de 6 mg, alrededor de 10 mg, alrededor de 20 mg, alrededor de 30 mg, alrededor de 40 mg, alrededor de 50 mg, alrededor de 60 mg, alrededor de 70 mg, alrededor de 80 mg, alrededor de 90 mg, alrededor de 100 mg, alrededor de 125 mg, alrededor de 150 mg, alrededor de 175 mg, alrededor de 200 mg, alrededor de 225 mg, alrededor de 250 mg, alrededor de 275 mg, alrededor de 300 mg, alrededor de 325 mg, alrededor de 350 mg, alrededor de 375 mg, alrededor de 400 mg , alrededor de 425 mg, alrededor de 450 mg, alrededor de 475 mg, alrededor de 500 mg, alrededor de 525 mg, alrededor de 550 mg, alrededor de 575 mg, alrededor de 650 mg, o más.

[0223] En algunas realizaciones, la fase de inducción es durante al menos alrededor de 2 semanas, al menos alrededor de 3 semanas, al menos alrededor de 4 semanas, al menos alrededor de 5 semanas, al menos alrededor de 6 semanas, al menos alrededor de 7 semanas, al menos alrededor de 8 semanas, al menos alrededor de 9 semanas, o al menos alrededor de 10 semanas de tratamiento.

[0224] El régimen de tratamiento durante la fase de inducción puede incluir la administración de una dosis alta, administraciones frecuentes, o una combinación de una dosis alta y administraciones frecuentes del anticuerpo anti-integrina α4β7 o una formulación del mismo. En algunos casos, durante la fase de inducción, una dosis se administra una vez al día, en días alternos, cada dos días, cada tres días, una vez por semana, cada 10 días, una vez cada dos semanas, una vez cada tres semanas, o una vez al mes.

[0225] En algunas realizaciones, la dosificación de inducción se proporciona una vez al inicio del tratamiento (día 0) y una vez aproximadamente dos semanas después del inicio del tratamiento. La duración de la fase de inducción puede ser de seis semanas. En otras realizaciones, la duración de la fase de inducción es de seis semanas, y se administra una pluralidad de dosis de inducción durante las dos primeras semanas. En los casos en los que el paciente humano tiene EII grave o no responde a la terapia anti-TNFα, la fase de inducción tiene una duración más larga que la de un paciente con EII leve a moderada.

[0226] Además, en el tratamiento de la EII, un nivel de dosificación apropiado de un anticuerpo anti-α47β integrina proporciona una cantidad eficaz del anticuerpo o una formulación del mismo para mantener la remisión de la EII en un paciente humano. Como tal, durante la fase de mantenimiento del tratamiento, la cantidad terapéuticamente eficaz de anticuerpo anti-integrina α4β7 es suficiente para alcanzar una concentración sérica mínima media en estado estacionario de alrededor de 1 µg/ml a alrededor de 25 µg/ml de anticuerpo antiintegrina α4β7 durante la fase de mantenimiento, por ejemplo una concentración sérica mínima media en estado estacionario de alrededor de 1 µg/ml a alrededor de 25 µg/ml, alrededor de 1 µg/ml a alrededor de 20 µg/ml, alrededor de 1 µg/ml a alrededor de 15 µg/ml, alrededor de 1 µg/ml a alrededor de 10 µg/ml, alrededor de 1 µg/ml a alrededor de 5 µg/ml, alrededor de 5 µg/ml a alrededor de 25 µg/ml, alrededor de 5 µg/ml a alrededor de 20 µg/ml, alrededor de 5 µg/ml a alrededor de 15 µg/ml, alrededor de 5 µg/ml a alrededor de 10 µg/ml, alrededor de 15 µg/ml a alrededor de 25 µg/ml, alrededor de 15 µg/ml a alrededor de 20 µg/ml, alrededor de 10 µg/ml a alrededor de 25 µg/ml, alrededor de 10 µg/ml a alrededor de 20 µg/ml, alrededor de 10 µg/ml a alrededor de 15 µg/ml, o alrededor de 20 µg/ml a alrededor de 25 µg/ml de anticuerpo anti-integrina α4β7 al final de la fase de inducción.

[0227] La dosis de mantenimiento se puede administrar una vez a la semana, una vez cada dos semanas, una vez cada tres semanas, una vez cada 4 semanas, una vez cada 5 semanas, una vez cada 6 semanas, una vez cada 7 semanas, una vez cada 8 semanas, una vez cada 9 semanas, o una vez cada 10 semanas. En algunas realizaciones, durante la fase de mantenimiento, se administra la misma cantidad de dosificación. En otras realizaciones, durante la fase de mantenimiento, se administran una o más cantidades de dosificación diferentes durante la fase de mantenimiento. Además, dependiendo del curso de la enfermedad, se puede aumentar la frecuencia de dosificación.

[0228] El anticuerpo anti-integrina α4β7 o su formulación se puede administrar mediante inyección, por ejemplo inyección intravenosa, inyección intramuscular, inyección subcutánea, inyección intraarterial, inyección intraperitoneal, inyección intravítrea, y similar. Si la formulación está en forma sólida o liofilizada, el procedimiento de administración del anticuerpo puede incluir la reconstitución de la formulación seca en una formulación líquida. En algunas realizaciones, el anticuerpo o su formulación se puede administrar por vía tópica, por ejemplo en un parche, crema, aerosol o supositorio. En otras realizaciones, las vías de administración tópicas incluyen administración nasal, por inhalación, o transdérmica.

[0229] Se entenderá, sin embargo, que el nivel de dosis específico y la frecuencia de dosificación para cualquier paciente en particular se pueden variar, y dependerán de una variedad de factores que incluyen la actividad del compuesto específico empleado, la estabilidad metabólica y la duración de la acción de ese compuesto, de la edad, el peso corporal, las características hereditarias, la salud general, el sexo, la dieta, el modo y momento de administración, la tasa de excreción, la combinación de fármacos, la gravedad de la afección particular, y del hospedante sometido a terapia.

[0230] La relación en peso del inhibidor de CCR9 descrito aquí con respecto al anticuerpo anti-integrina α4β7 de la presente descripción puede variarse, y dependerá de la dosis eficaz de cada ingrediente. Generalmente, se usará una dosis eficaz de cada uno. Así, por ejemplo, cuando un inhibidor de CCR9 se combina con un anticuerpo anti-integrina α4β7, la relación en peso del inhibidor de CCR9 al anticuerpo anti-integrina α4β7 generalmente oscilará de alrededor de 1000:1 a alrededor de 1: 1000, preferiblemente alrededor de 200:1 a alrededor de 1:200.

[0231] La terapia combinada incluye la coadministración del inhibidor de CCR9 y el anticuerpo anti-integrina α4β7, la administración secuencial del inhibidor de CCR9 y el anticuerpo anti-integrina α4β7, la administración de una composición que contiene el inhibidor de CCR9 y el anticuerpo anti-integrina α4β7, o la administración simultánea de composiciones separadas de modo que una composición contenga el inhibidor de CCR9 y otra composición contenga el anticuerpo anti-integrina α4β7.

[0232] La coadministración incluye la administración del inhibidor de CCR9 de la presente invención dentro de las 0,5, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12, 16, 20 o 24 horas posteriores al anticuerpo anti-integrina α4β7 de la presente invención. La coadministración también incluye la administración simultánea, aproximadamente simultánea (por ejemplo, dentro de alrededor de 1, 5, 10, 15, 20 o 30 minutos entre sí), o secuencialmente en cualquier orden. Además, el inhibidor de CCR9 y el anticuerpo anti-integrina α4β7 se pueden administrar cada uno una vez al día, o dos, tres o más veces al día, para proporcionar el nivel de dosificación preferido por día.

[0233] La terapia combinada se puede administrar en una fase de inducción o en una fase de mantenimiento del régimen de tratamiento. En la fase de inducción, la terapia combinada se puede administrar en una cantidad eficaz para inducir tolerancia inmune al anticuerpo de la terapia, inducir una respuesta clínica, y/o mejorar uno o más síntomas de la EII. Además, si durante la fase de mantenimiento, hay una reaparición de uno o más síntomas de la EII, o si hay una recaída de la remisión de la enfermedad, se puede administrar a un paciente una cantidad correspondiente a un tratamiento de la fase de inducción. Durante la fase de mantenimiento, la terapia combinada se puede administrar en una cantidad eficaz para continuar la respuesta lograda durante la terapia de inducción, y/o prevenir la reaparición de los síntomas o la recaída de la EII.

[0234] En algunas realizaciones, se pueden administrar, junto con la terapia de combinación descrita aquí, uno o más ingredientes activos adicionales, tales como un compuesto antiinflamatorio, por ejemplo antiinflamatorios que contienen sulfasalazina, azatioprina, 6-mercaptopurina, ácido 5-aminosalicílico, un compuesto antiinflamatorio no esteroideo, y un compuesto antiinflamatorio esteroideo; antibióticos comúnmente administrados para el control de la EII, por ejemplo ciprofloxacina y metronidazol; u otro agente biológico.

[0235] D. Kits

[0236] En algunos aspectos, se proporcionan aquí kits que contienen (i) un inhibidor de CCR9 que tiene la fórmula

[0239]

[0241] o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; (ii) un anticuerpo anti-integrina α4β7 descrito aquí; (iii) un antagonista biológico de TNFα; y (iv) instrucciones para la administración eficaz, que son útiles para tratar una enfermedad o trastorno caracterizado por inflamación del tubo digestivo, tal como EII, incluyendo EC, CU y colitis indeterminada. Un kit puede contener una composición farmacéutica que contiene un compuesto inhibidor de CCR9 y una composición farmacéutica que contiene un anticuerpo anti-integrina α4β7. Los kits de la invención comprenden además un antagonista biológico de TNFα. En algunas realizaciones, el anticuerpo anti-integrina α4β7 es vedolizumab. El kit incluye materiales escritos, por ejemplo instrucciones de uso del compuesto, anticuerpo o composiciones farmacéuticas del mismo. Sin limitación, el kit puede incluir amortiguadores, diluyentes, filtros, agujas, jeringas, y prospectos con instrucciones para llevar a cabo cualquier método descrito aquí.

[0242] IV. Ejemplos

[0243] Ejemplo 1: Uso de una terapia combinada de un inhibidor de CCR9 y un anticuerpo anti-integrina α4β7 para tratar la enfermedad inflamatoria intestinal

[0244] A. Introducción

[0245] La localización de células circulantes en diversos tejidos es un proceso altamente coordinado que implica receptores de quimiocinas específicos y moléculas de adhesión celular. El tráfico de células hacia el intestino requiere quimiotaxis mediada por el receptor de quimiocina CCR9 hacia la quimiocina conocida como CCL25. La activación de CCR9 por CCL25 también desencadena la unión de alta afinidad de la integrina α4β7 de la superficie celular con el endotelio microvascular intestinal que expresa MAdCAM, lo que da como resultado una detención firme y diapédesis en los tejidos intestinales.

[0246] El análisis de biopsias de colon humano obtenidas de pacientes con enfermedad de Crohn colónica mostró una fuerte correlación positiva entre la expresión del gen CCR9 y la de los genes para TNF-α, así como las integrinas α4 y β7. Estos resultados mostraron que la regulación de los genes implicados en la inflamación intestinal está altamente asociada y estrechamente regulada en el colon. Vedolizumab, un anticuerpo humanizado contra la integrina α4β7, fue aprobado recientemente para tratar a pacientes con colitis ulcerosa moderada a grave y enfermedad de Crohn. Sin embargo, no se han explorado sus efectos en combinación con un antagonista del receptor de quimiocina intestinal CCR9.

[0247] B. Métodos

[0248] Los ensayos de adhesión se realizaron como sigue. Se aislaron linfocitos humanos a partir de PBMC totales, y se activaron con α-CD3ε/α-CD28 (1 µg/ml; R&D Systems) en presencia de ácido retinoico 1 µM (Sigma) e IL12 humana 1 ng/ml (R&D Systems). Las células T activadasin vitrose expandieron aún más durante 5 días en presencia de ácido retinoico (RA) 1 µM e IL12 humana 1 ng/ml. Las células expandidas se tiñeron con un anticuerpo anti-CCR9 conjugado con APC (n.º de cat. 248621; R&D Systems) y un anticuerpo conjugado antiintegrina α4β7 (Act-1). Las células teñidas se analizaron mediante citometría de flujo. La expresión de CCR9 e integrina α4β7 en las células T expandidas se representó como un diagrama de dispersión de 2 parámetros en la FIG.1A.

[0249] Se añadieron células T activadasin vitroa una placa de 96 pocillos revestida durante la noche con 0,3 µg/ml de proteína de fusión MAdCAM-1-Fc (R&D Systems) en presencia de las siguientes condiciones: DMSO únicamente, 500 ng de CCL25 humano (hCCL25; un ligando de CCR9) únicamente, CCX5071 µM (un inhibidor de CCR9 de tipo molécula pequeña) únicamente, o 500 ng de hCCL25 y CCX507 1 µM. Las células adherentes se cuantificaron usando ensayos de proliferación celular CyQUANT<®>(Thermo Fisher). Los resultados se proporcionan en la FIG. 1B. Los datos muestran que CCX507 limita la unión de células T humanas diferenciadas con ácido retinoico (AR) a MAdCAM-1, que puede unirse a la integrina α4β7 y ayuda a dirigir el tráfico de linfocitos.

[0250] Los ensayos farmacodinámicosin vivose realizaron de la siguiente manera. La FIG. 2A representa el modelo adoptivo de transferencia de células T usado en el experimento. En Tubo et al., PLOS One, 2012, 7(11):e50498, por ejemplo, se encuentra una descripción detallada del método. Brevemente, se aislaron células T CD8<+>de ratones transgénicos OT-1 TCR donantes (B6.CD45.2). Se aislaron leucocitos del bazo y de los ganglios linfáticos. Las células T CD8<+>aisladas se transfirieron adoptivamente a ratones de tipo salvaje (B6. CD45.1). Se inyectaron por vía intraperitoneal en el ratón receptor 1×10<6>-1×10<7>células T CD8<+>sin tratamiento previo.

[0251] 24 horas después de la transferencia, los ratones CD45.1 receptores se expusieron por vía oral a la toxina del cólera sola, o a la toxina del cólera y ovoalbúmina. Los ratones expuestos a la toxina del cólera se usaron como modelo murino de inflamación intestinal. Después de 96 horas, se aislaron leucocitos del bazo, ganglios linfáticos, intestino delgado, colon, sangre e hígado. La cantidad de células T CD8<+>derivadas de donantes en el intestino delgado se determinó mediante citometría de flujo 96 horas después de la exposición. En Tubo et al., PLOS One, 2012, 7(11):e50498, por ejemplo, se encuentra una descripción detallada del método.

[0252] Además, a los ratones expuestos a la toxina del cólera se les administró 5-30 mg/kg de CCX507 o una dosis de un anticuerpo anti-integrina α4β7. Se contó el número de linfocitos intraepiteliales (IEL) CD8<+>derivados de donantes (derivados de OT-1). Los resultados se proporcionan en la FIG.2B.

[0253] Los ensayos QuantiGene<®>Plex (Affymetrix) se realizaron de la siguiente manera. Biopsias de íleon y colon coincidentes de pacientes con enfermedad de Crohn se congelaron instantáneamente en nitrógeno líquido. Las muestras se homogeneizaron según los protocolos del fabricante. La expresión de los genes se analizó usando un panel 37-plex personalizado (Affymetrix), y su expresión se normalizó con respecto al gen constitutivo ciclofilina. La FIG. 3 proporciona una comparación de los niveles de expresión de genes seleccionados en comparación con el nivel de expresión de CCR9.

[0254] Se generó un modelo de ratón de colitis acelerada por piroxicam (colitis inducida químicamente) de la siguiente manera. A ratones Mdr1a<-/->de 7 semanas y a una raza de control FVB se les proporcionaron 200 ppm de piroxicam (Sigma) mezclado con comida en polvo (alimento) en frascos de alimentación dietética en polvo (Dyets, Inc.) durante 10-12 días. La comida normal se colocó en tapas de barras de alambre durante todo el experimento. El anticuerpo bloqueador anti-integrina α4β7 (DATK32) se administró IP, cada 2 días (mediante inyección intraperitoneal en días alternos) a 100 µg por ratón. El anticuerpo anti-TNFα (XT3.11) se administró IP, una vez al día (mediante inyección intraperitoneal todos los días) a 300 µg por ratón durante los primeros 11 días cuando se añadió piroxicam a la comida en polvo. El anticuerpo anti-TNFα (XT3.11) se administró IP cada 2 días a 300 µg por ratón después de eliminar el piroxicam. CCX507 (un inhibidor de CCR9 de tipo molécula pequeña) se administró SC, una vez al día (mediante inyección subcutánea todos los días) a 30 mg/kg durante todo el estudio. Los ratones del estudio se observaron y manipularon según lo aprobado por IACUC. La FIG. 4A representa el diseño experimental.

[0255] La FIG. 4B muestra imágenes representativas del colon de ratones que reciben un control de vehículo (1% HPMC) o un control de isotipo IgG2A de rata, CCX507 (un inhibidor de CCR9 de tipo pequeña molécula) solo, un anticuerpo bloqueador anti-integrina α4β7 solo, o CCX507 además de un anticuerpo bloqueador anti-integrina α4β7. Las relaciones cuantitativas de colon frente a peso para las diferentes condiciones de tratamiento se representan en las FIGS. 4C y 4D. La terapia combinada de CCX507 y anticuerpos bloqueadores anti-integrina α4β7 se muestra en la FIG. 4C. La terapia combinada de CCX507 y anticuerpos bloqueadores anti-TNFα se muestra en la FIG. 4D. El análisis estadístico se realizó usando GraphPad Prism<®>(GraphPad Software), con los valores de p representados de la siguiente manera: *p<0,05; **p<0,01; ***p<0,001; ****p<0,0001.

[0256] Un patólogo independiente y desconocedor del experimento evaluó la histopatología del tejido del colon, fijado con formalina en el momento de la necropsia. Se obtuvo una puntuación histológica total a partir de las puntuaciones histológicas combinadas de inflamación, pérdida epitelial glandular y erosión. Estas puntuaciones se basaron en el porcentaje de tejido afectado en cada sección, con un total de 6 secciones cortadas por ratón. La FIG. 5A muestra imágenes representativas del colon tanto proximal como distal de ratones individuales, representativas de la puntuación histopatológica media para cada grupo. La combinación de CCX507 además del anticuerpo anti-α4β7 se muestra en el panel derecho.

[0257] La puntuación histológica sumada para todos los ratones en el estudio se representa en la FIG. 5B. El análisis estadístico se realizó mediante GraphPad Prism con los valores de p representados como *p<0,05, ****p<0,0001.

Claims (11)

1. REIVINDICACIONES

1. Un inhibidor del receptor de quimiocina CCR9 para uso en un método para tratar o reducir el desarrollo de la enfermedad inflamatoria intestinal en un mamífero, comprendiendo dicho método administrar una cantidad adecuada de un inhibidor del receptor de quimiocina CCR9 con un anticuerpo bloqueador anti-integrina α4β7, en el que el inhibidor del receptor de quimiocina CCR9 es

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo;

y en el que el método comprende además administrar un antagonista biológico de TNFα.

2. El inhibidor del receptor de quimiocina CCR9 para uso según la reivindicación 1, en el que la enfermedad inflamatoria intestinal es la enfermedad de Crohn (EC) o la colitis ulcerosa (CU).

3. El inhibidor del receptor de quimiocina CCR9 para uso según la reivindicación 1, en el que el anticuerpo bloqueador anti-integrina α4β7 es vedolizumab (ENYVIO<®>).

4. El inhibidor del receptor de quimiocina CCR9 para uso según la reivindicación 1, en el que el inhibidor del receptor de quimiocina CCR9 y el anticuerpo bloqueador anti-integrina α4β7 se administran en una formulación combinada.

5. El inhibidor del receptor de quimiocina CCR9 para uso según la reivindicación 1, en el que el inhibidor del receptor de quimiocina CCR9 se administra antes del anticuerpo bloqueador anti-integrina α4β7.

6. El inhibidor del receptor de quimiocina CCR9 para uso según la reivindicación 1, en el que el inhibidor del receptor de quimiocina CCR9 se administra después de la administración del anticuerpo bloqueador antiintegrina α4β7.

7. Una composición farmacéutica para tratar o reducir el desarrollo de la enfermedad inflamatoria intestinal en un mamífero, comprendiendo dicha composición:

(i) una cantidad terapéuticamente eficaz de un inhibidor del receptor de quimiocina CCR9 que tiene la fórmula

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo;

(ii) una cantidad terapéuticamente eficaz de un anticuerpo bloqueador anti-integrina α4β7;

(iii) un antagonista biológico de TNFα; y

(iv) un vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptable.

8. Un kit para tratar o reducir el desarrollo de la enfermedad inflamatoria intestinal en un mamífero, comprendiendo dicho kit:

(i) una cantidad terapéuticamente eficaz de un inhibidor del receptor de quimiocina CCR9 que tiene la fórmula

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo;

(ii) una cantidad terapéuticamente eficaz de un anticuerpo bloqueador anti-integrina α4β7;

(iii) un antagonista biológico de TNFα; y

(iv) instrucciones para la administración eficaz.

9. La composición farmacéutica de la reivindicación 7, o el kit de la reivindicación 8, en el que el anticuerpo bloqueador anti-integrina α4β7 es vedolizumab (ENYVIO).

10. El kit de la reivindicación 8, en el que el inhibidor del receptor de quimiocina CCR9 y el anticuerpo bloqueador anti-integrina α4β7 se formulan para administración secuencial.

11. El kit de la reivindicación 8, en el que el inhibidor del receptor de quimiocina CCR9 y el anticuerpo bloqueador anti-integrina α4β7 se formulan para administración concomitante.