FR2860976A1 - Nouvelles compositions synergiques pour ameliorer la biodisponibilite et l'efficacite des acides gras polyinsatures pour le traitement des troubles du fonctionnement cerebral. - Google Patents
Nouvelles compositions synergiques pour ameliorer la biodisponibilite et l'efficacite des acides gras polyinsatures pour le traitement des troubles du fonctionnement cerebral. Download PDFInfo
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Abstract
Il est maintenant bien établi que les acides gras polyinsaturés omega-3 sont indispensables pour le fonctionnement des cellules nerveuses de notre cerveau. Comme ces acides gras essentiels ne sont pas synthétisés dans notre corps, il est nécessaire de consommer au moins 500 à 1000 mg d'omega-3 par jour. Malheureusement, notre alimentation couvre seulement 5 à 10% de nos besoins. De plus, les omega-3 sont très rapidement oxydés dans notre corps et faiblement assimilés par les cellules neuronales dont les fonctions métaboliques sont ralenties. Nous avons découvert que l'association des omega-3 avec des antioxydants et des éléments vitaux spécifiques qui stimulent les fonctions métaboliques cellulaires des cellules neuronales produit un effet synergique qui améliore fortement la biodisponibilité et l'efficacité des omega-3. Cela permet de diminuer les doses journalières à utiliser pour optimiser le fonctionnement cérébral. Ces compositions synergiques peuvent être utilisées pour le traitement des maladies liées au mauvais fonctionnement cérébral.
Description
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Notre alimentation contient différentes catégories de nutriments: les hydrates de carbone, les protéines, les graisses, les vitamines, les minéraux et les oligo-éléments. Ces nutriments apportent de l'énergie pour entretenir l'ensemble des activités cellulaires de l'organisme. Les cellules ont besoin d'énergie pour fonctionner mais elles ont également besoin de ces nutriments pour synthétiser les composants cellulaires, maintenir l'activité des membranes cellulaires, synthétiser des substances spécifiques comme les hormones et les neurotransmetteurs, pour permettre la croissance et la multiplication cellulaire.
Lorsque notre alimentation apporte tous les éléments nécessaires dans les bonnes proportions, les cellules fonctionnent normalement et nous sommes en bonne santé. Un fonctionnement cellulaire inapproprié ou diminué se traduit par un trouble ou une maladie.
Par exemple, lorsque les cellules nerveuses ne reçoivent pas les quantités adéquates de nutriments essentiels, l'activité des membranes cellulaires, la synthèse des neurotransmetteurs sont perturbées et cela se manifeste sous forme de troubles mineurs comme une diminution de la mémoire, de la dépression, ou par des troubles psychologiques dans les cas les plus sévères.
Comme tous les organes de notre corps, le cerveau humain est composé de cellules spécialisées appelées neurones. Du point de vue morphologique, le cerveau peut être divisé en deux parties distinctes: la partie la plus profonde, de petite taille et la plus ancestrale, est appelée région limbique. La partie la plus externe, volumineuse et très structurée est appelée néocortex. La région limbique du cerveau humain qui contrôle les activités émotionnelles se retrouve chez de nombreux Mammifères tandis que le néocortex s'est développée au cours des différentes phases de l'évolution des Mammifères. Le néocortex constitue le siège de la pensée, du raisonnement et de la prise de décision qui sont particulièrement développés chez l'être humain. Il est désormais clairement établi que la plupart des troubles émotionnels, psychiatriques ou psychologiques comme la dépression sont liés à des perturbations du fonctionnement de la région limbique.
Environ 70% des tissus de notre cerveau sont composés d'acides gras. Ces acides gras sont issus des graisses de notre alimentation. Du point de vue chimique, les molécules de graisse, insolubles dans l'eau, résultent de l'association d'un alcool, le glycérol, avec des acides gras constitués de chaînes de 4 à 22 atomes de carbones liés à des atomes d'hydrogènes. Lorsque tous les atomes de carbone sont reliés par une liaison simple C-C, cela signifie que toutes les autres liaisons sont occupées par des atomes d'hydrogène.
Comme ces atomes de carbones ne peuvent accepter de nouveaux atomes d'hydrogène, les acides gras correspondants sont dits saturés. Les acides gras saturés sont généralement d'origine animale (beurre, lait, viande). Lorsque les atomes de carbones des acides gras sont reliés par des doubles liaisons C=C qui peuvent accepter de nouveaux atomes d'hydrogène, ceux-ci sont appelés acides gras insaturés. Si l'acide gras ne comporte qu'une seule double liaison, il est dit monoinsaturé (exemple: acide oléique) et lorsqu'il présente plus d'une double liaison, il est dit polyinsaturé. Les acides gras polyinsaturés s'oxydent très facilement dans l'organisme car ils sont fortement instables et nécessitent la présence d'antioxydants pour empêcher leur rapide dégradation par oxydation dans le corps. La position de la première double liaison (appelé omega) permet de distinguer les acides gras polyinsaturés omega-3 (exemple: acide alpha linolénique) et les acides gras polyinsaturés omega- 6 (exemple: acide linoléique). Ces types d'acides gras sont dits essentiels car ils ne peuvent pas être synthétisés par l'organisme et doivent être apportés par l'alimentation. Les omega-6 sont présents dans l'huile de maïs, de tournesol et de sésame qui sont très largement utilisés. Les omega-3 sont présents dans l'huile de lin, les noix, l'huile de moutarde, le soja, le blé et dans la chair des poissons d'eau froide et sont peu ou pas du tout consommés dans nos sociétés modernes.
Les acides gras permettent la formation des phospholipides des membranes biologiques. La fluidité membranaire qui est cruciale pour son fonctionnement dépend de sa composition lipidique. Les acides gras omega3 augmentent la fluidité membranaire parce que les doubles liaisons empêchent le compactage des membranes.
Les membranes des cellules de la région limbique du cerveau présentent une teneur très élevée en acides gras polyinsaturés omega-3. Comme ces acides gras sont apportés par l'alimentation, toute déficience alimentaire a des conséquences immédiates sur le développement des membranes neuronales, les activités enzymatiques cellulaires, les activités synthétiques des cellules et la neurotransmission. Comme la région limbique contrôle les émotions, elle a une grande influence sur les fonctions cardiaques (les émotions peuvent accélérer le rythme cardiaque). Ainsi, la déficience en acides gras omega-3 qui touche le fonctionnement du cerveau peut également affecter les fonctions cardiaques.
La raison qui explique pourquoi la région limbique du cerveau est riche en acides gras polyinsaturés n'est pas clairement établie. Il est généralement admis que le cerveau limbique s'est développé au tout début de l'évolution, lorsque les premiers êtres vivants évoluaient en milieu aquatique et avaient un régime d'origine marine riche en acides gras polyinsaturés omega-3. Malheureusement, la plupart des produits alimentaires consommés par les hommes dans les pays développés sont pauvres en acides gras polyinsaturés, particulièrement en omega-3. Dans des conditions idéales, notre nourriture devrait contenir des acides gras omega-3 et omega-6 dans un rapport de 1:1. Ce ratio est généralement de 1:10 dans les aliments courants.
La fréquence de la dépression, de l'anxiété, du stress et des problèmes psychiatriques semble augmenter continuellement depuis le début du 20ème siècle. Bien que différents facteurs aient pu contribuer à cette évolution, de nombreuses études scientifiques et épidémiologiques montrent que ces troubles sont liés aux habitudes alimentaires du monde occidental, alimentation dans laquelle les acides gras polyinsaturés omega-3 contenus dans les produits de la mer, les huiles de poisson (obtenues à partir de la graisse de peau de poisson) ou l'huile de lin ont été largement remplacé par les huiles oléagineuses riches en acides gras saturés ou en acides gras polyinsaturés omega-6. De nombreuses études cliniques récentes (Kalminj et al. Annals of Neurology, vol 42, 1997; Peet M. et al. Arch. Gen. Psychiatry, vol 59, 2002; Stoll A.L. et al. Arch. Gen. Psychiatry, vol 56, 1999; Tanskanene A et al. Arch. Gen. Psychiatr, vol 29 2003; Colin A. et al. Encephale, vol 29, 2003; Maes et al. Psychyatry Res., vol 85, 1999) montrent clairement le lien direct entre la déficience des omega-3 dans l'alimentation et de nombreux troubles psychiques.
Malgré l'existence de ce lien direct entre la déficience en omega-3 et l'augmentation de la fréquence des troubles psychiques et des maladies cardio-vasculaires, l'utilisation des omega-3 pour restaurer les fonctions cellulaires normales ne s'est pas généralisée. Ce manque d'intérêt pour les omega-3 est dû à trois causes principales: 1. Il est nécessaire de consommer de grandes quantités 20 d'aliments riches en omega-3 comme les poissons gras (saumon. . . ) ou l'huile de lin, ce qui n'est pas pratique, 2. Même si les meilleures sources d'omega-3 comme les capsules d'huile de poisson sont concentrées en omega-3, il est nécessaire de prendre au moins 4 à 6 capsules de grande taille par jour, ce qui n'est pas facile, 3. Les résultats obtenus avec des qualités variables d'huiles riches en omega-3 sont souvent peu encourageants.
C'est pour cette raison qu'une grande partie de la population des pays développés occidentaux souffre de problèmes psychiques mineurs et renonce à utiliser régulièrement des omega-3.
Il maintenant clairement établi qu'un minimum de vitamines, de minéraux et d'oligo-éléments sont indispensables pour assurer des fonctions métaboliques cellulaires optimales. De nombreuses vitamines, minéraux et oligo-éléments agissent comme co-enzymes ou catalyseur dans de nombreuses réactions biochimiques intracellulaires. Comme ces éléments sont indispensables à un métabolisme cellulaire optimal, ils sont appelés éléments vitaux . Comme ils ne sont ni synthétisés, ni stockés de façon adéquate dans l'organisme, nous avons besoin de prendre chaque jour un minimum d'Apports Journaliers Recommandés (AJR) de ces éléments. Une cellule fonctionnant normalement transforme les différentes substances d'origine alimentaire en énergie, en hormones, en enzymes ou en neurotransmetteurs grâce à l'action des éléments vitaux qui agissent comme catalyseurs ou co-enzymes dans les chaînes des réactions biochimiques intracellulaires. Le manque de seulement l'un d'entre eux vitaux perturbe l'ensemble des chaînes de réaction et diminue le métabolisme cellulaire. Cette diminution des fonctions cellulaires est responsable de l'apparition de différents problèmes de santé comme la dépression, lorsque ce sont les cellules nerveuses qui sont affectées, le manque de vitalité, lorsqu'il s'agit des cellules musculaires, de problèmes sexuels lorsqu'il s'agit des cellules hormonales. . . etc. De nombreuses études épidémiologiques montrent que les problèmes psychiques et les maladies psychiatriques augmentent continuellement depuis le début du 20ème siècle et que la richesse en éléments vitaux de notre alimentation ne cesse de diminuer. Il a également été montré que 7 personnes sur 10 dans les pays développés ne reçoivent pas les AJR (Apports Journaliers Recommandés) minimum d'un ou plusieurs éléments vitaux. La corrélation entre cette déficience en éléments vitaux chez 7 personnes sur 10 et la fréquence des troubles psychiques mineurs ou majeurs dans environ 70% de la population des pays développés n'a jamais été clairement établie.
L'objet de notre travail de recherche était de trouver les éléments qui stimulent l'activité métabolique cellulaire des cellules nerveuses pour améliorer la biodisponibilité et l'activité des acides gras polyinsaturés omega-3 (ou omega-3) Nous avons développé des modèles cellulaires in vitro dans lesquels les activités métaboliques cellulaires sont artificiellement réduites en diminuant les quantités d'éléments vitaux dans les milieux de culture. Différents éléments vitaux ont ensuite été ajoutés aux milieux de culture, seuls ou en association les uns avec les autres, afin d'étudier l'effet sur les fonctions métaboliques cellulaires. De façon surprenante, nous avons ainsi observé que les vitamines, les minéraux et les oligo-éléments ne stimulent pas le métabolisme cellulaire lorsqu'ils sont apportés dans des proportions identiques (équivalentes à 50% des AJR) dans le milieu de culture mais que seulement certains d'entre eux, dans des proportions particulières, stimulent les fonctions métaboliques cellulaires. Cette association spécifique contient au moins deux vitamines choisies parmi les vitamines A, B2, B9 et E avec au moins deux minéraux ou oligo-élément choisis parmi le magnésium, le zinc, le cuivre et le sélénium. Les meilleurs résultats ont été obtenus lorsque les 8 éléments ont été apportés ensemble (voir tableau n 1). L'addition supplémentaire d'autres éléments vitaux peut ralentir le métabolisme cellulaire.
Nous avons observé que l'apport d'omega-3 seuls augmentent la croissance des cellules nerveuses in vitro de +7,8% par rapport aux cultures témoins. L'association des omega-3 avec les éléments vitaux qui stimulent le métabolisme cellulaire augmente le taux de croissance des cellules nerveuses de +38.7% (voir tableau n 2).
Les études pharmacologiques in vitro sur les cellules neuronales montrent également que les omega-3 seuls augmentent la durée de vie des cellules de 15 à 20% et que l'association des omega-3 avec éléments vitaux stimulateurs du métabolisme cellulaire augmente fortement la durée de vie des cellules neuronales (+62%).
Les résultats pharmacologiques in vivo confirment également une diminution significative de l'anxiété, une augmentation de la mémoire et des paramètres de condition physique.
Ces résultats montrent clairement que l'association en justes proportions de vitamines, minéraux et oligo-éléments, activateurs spécifiques du métabolisme cellulaire, avec des acides gras polyinsaturés omega-3, augmente de façon marquée la biodisponibilité des acides gras, restaurant ainsi les fonctions des membranes et l'activité synthétique des cellules nerveuses. Les symptômes des troubles liés au fonctionnement neuronal diminuent.
Bien que le mode d'action de cette association synergique ne soit pas clairement défini, on peut raisonnablement imaginer que la vitamine E et le sélénium agissent comme antioxydants spécifiques pour protéger les acides gras polyinsaturés et diminuent leur oxydation et leur dégradation dans l'organisme. De même, les vitamines A, B2, B9, le magnésium et le cuivre agissent comme catalyseurs ou coenzymes spécifiques dans le métabolisme cellulaire neuronal, contribuant à la régénération des membranes cellulaires neuronales et à la synthèse correcte des neurotransmetteurs en rétablissant des fonctions cellulaires normales. La juste association des éléments vitaux cités ci-dessus est très spécifique, parce que l'excès d'un des éléments peut saturer certains sites des récepteurs cellulaires par des liaisons non spécifiques, ce qui peut conduire à la sous utilisation d'un autre élément. Cela ralentit alors les fonctions du métabolisme cellulaire. Il est donc indispensable d'apporter non seulement une quantité suffisante d'omega-3 mais également de stopper leur oxydation et leur dégradation dans l'organisme tout en stimulant les fonctions du métabolisme cellulaire qui va permettre d'optimiser l'activité des omega-3.
Les acides gras polyinsaturés selon l'invention peuvent êtres obtenus à partir de n'importe quelle source naturelle ou synthétique comme l'huile de poisson, l'huile de lin, des micro-organismes, des plantes ou des animaux génétiquement modifiés ou non, les ufs, le beurre, le lait concentré, particulièrement les huiles de poisson des eaux froides.
Les sources d'acides gras polyinsaturés peuvent être concentrées en omega3 par chromatographie de partage centrifuge ou par tout autre technique pour diminuer la proportion d'omega-6.
2860976 8 Dans des conditions préférentielles selon l'invention, le rapport entre les omega-3 et les omega-6 est de 1:1 à 1:7.
Dans des conditions préférentielles d'utilisation selon l'invention, la source d'omega-3 est une huile de poissons concentrée en omega-3 administrée par voie orale sous forme de capsules molles à base de gélatine.
Les doses journalières d'omega-3 dépendent de leur destination et peuvent varier entre 100 mg et 1.5 g d'omega-3 par jour, les quantités apportées étant préférentiellement entre 500 et 1000 mg d'omega-3 par jour, en une ou plusieurs prises.
Les éléments vitaux spécifiques selon l'invention peuvent être obtenus à partir de n'importe quelle source naturelle ou synthétique de vitamines, de minéraux et d'oligo-éléments, sous forme liquide ou sous forme de poudre.
Les éléments vitaux spécifiques peuvent être associés avec les sources d'acides gras polyinsaturés omega-3 soit en mélangeant les différentes sources ensemble, soit en apportant séparément des vitamines et/ou des minéraux et/ou des oligo-éléments avec des gélules, des capsules, des comprimés, des poudres ou des sirops avec une source enrichie en omega-3.
Le complexe spécifique d'éléments vitaux activateurs du métabolisme cellulaire peut être apporté en même temps que les omega-3 ou peut être apporté à tout autre moment de la journée. Il est également possible d'administrer les omega-3 et le complexe d'éléments vitaux en alternant les jours.
Selon l'invention, l'association synergique des omega-3 avec le complexe d'éléments vitaux activateurs du métabolisme cellulaire peut être utilisée en tant que traitement préventif ou curatif pour les troubles du fonctionnement cérébral comme la dépression, l'anxiété, les pertes de mémoire, la démence, la maladie d'Alzheimer, l'insomnie, la fatigue, pour lutter contre le vieillissement et les troubles du fonctionnement cérébral liés à l'âge, pour traiter l'obésité ou pour stimuler la vitalité chez l'homme et chez la femme.
D'autres vitamines (comme la vitamine C, la vitamine D), des minéraux (comme le calcium) ou des oligo-éléments (comme l'iode, le fer) peuvent être intégrés dans le complexe d'éléments vitaux spécifiques stimulant les fonctions cellulaires car ils n'interfèrent pas avec l'activité du complexe.
Cette association peut être présentée sous forme de produit diététique, de complément alimentaire, de produit de phytothérapie, de médicament ou de produit cosmétique.
La dose usuelle de vitamines, minéraux et oligo-éléments, variable selon la composition choisie peut être par exemple administrée quotidiennement pendant une période au moins égale à 14 jours, 30 jours de préférence, à des doses comprises entre 15 et 200 pour cent des Apports Journaliers Recommandés (AJR) de chacun des éléments, plus particulièrement 50% des AJR. Par AJR, on entend la quantité de micronutriments effectivement disponible pour une utilisation par l'organisme et non pas le poids brut de la forme d'apport utilisée. Il est conseillé d'utiliser l'association d'omega-3 avec le complexe spécifique de vitamines, de minéraux et d'oligo-éléments tous les jours et pendant toute la vie sauf dans le cas où l'alimentation apporte 100% des AJR de chacun de ces éléments.
Dans des conditions préférentielles selon l'invention, les quantités de chacun de ces éléments mises en oeuvre sont, par exemple, de 62,5% des AJR en vitamine A, de 35,6% des AJR en vitamine B2, de 82,5% des AJR en vitamine B9, de 67,5% des AJR en vitamine E, de 50.3% des AJR en magnésium, de 56.3% des AJR en zinc, de 49.9% des AJR en cuivre, de 40% des AJR en sélénium.
Les exemples qui suivent illustrent la présente demande. Ces exemples de compositions pour améliorer la biodisponibilité des omega-3 ont été développés sur la base des résultats obtenus au cours des études pharmacologiques.
Certaines compositions ont ensuite été soumises à des expérimentations cliniques.
EXEMPLE 1:
On a préparé des capsules molles à base d'une huile enrichie en omega-3, de vitamines, de minéraux et d'oligo-éléments 5 répondant à la formule pondérale suivante: Huile de poissons concentrée à 60% en omega-3 (rapport omega-3/omega-6 = 2.5) 500 mg Vitamine A (bêta carotène) 3.330 mg Vitamine B2 (riboflavine) 0.574 mg Vitamine B9 (acide folique) 0.166 mg Vitamine E (d-alpha-tocophérol) 10.058 mg Magnésium (oxyde de magnésium) 143.500 mg Zinc (sulfate de zinc) 12.800 mg Cuivre (gluconate de cuivre) 6.470 mg Sélénium (levures enrichies 2000 pg/g) 16.750 mg Excipient pour les capsules molles qsp 1000 mg Posologie: 1 capsule chaque jour avec un verre d'eau, le matin de préférence.
EXEMPLE 2:
On a préparé des capsules molles à base d'une huile enrichie en omega-3, de vitamines, de minéraux et d'oligo-éléments 25 répondant à la formule pondérale suivante: Huile de poissons concentrée à 60% en omega-3 (rapport omega-3/omega-6 = 2.5) 500 mg Vitamine A (bêta carotène) 3.330 mg Vitamine B2 (riboflavine) 0.574 mg Vitamine B9 (acide folique) 0.166 mg Vitamine C (acide ascorbique) 45.000 mg Vitamine E (d-alpha-tocophérol) 10.058 mg Magnésium (oxyde de magnésium) 143.500 mg Zinc (sulfate de zinc) 12.800 mg Cuivre (gluconate de cuivre) 6.470 mg Sélénium (levures enrichies 2000 pg/g) 16.750 mg Iode (iodure de potassium) 0.090 mg Fer (sulfate de fer) 19.810 mg Excipient pour les capsules molles qsp 1000 mg Posologie: 1 capsule chaque jour avec un verre d'eau, 5 le matin de préférence.
EXEMPLE 3:
On a préparé des capsules molles à base d'une huile enrichie en 10 omega3, de vitamines, de minéraux et d'oligo-éléments répondant à la formule pondérale suivante: Huile de lin concentrée en omega-3 500.000 mg Vitamine A (bêta carotène) 3.330 mg Vitamine B2 (riboflavine) 0.574 mg Vitamine B9 (acide folique) 0.166 mg Vitamine E (d-alpha-tocophérol) 10. 058 mg Magnésium (oxyde de magnésium) 143.500 mg Zinc (sulfate de zinc) 12.800 mg Cuivre (gluconate de cuivre) 6.470 mg Sélénium (levures enrichies 2000 pg/g) 16.750 mg Excipient pour les capsules molles qsp 1000 mg Posologie: 1 capsule chaque jour avec un verre d'eau, 25 le matin de préférence.
EXEMPLE 4:
On a préparé des capsules molles à base d'une huile enrichie en omega-3 utilisées en combinaison avec un sirop enrichi en vitamines, minéraux et oligo-éléments et répondants à la formule pondérale suivante: Capsules molles enrichies en omega-3: Huile de poissons concentrée à 60% en omega-3 (rapport omega-3/omega-6 = 2.5) 500 mg Excipient pour les capsules molles qsp 669 mg Sirop enrichi en vitamines, minéraux et oligo-éléments: Quantité d'élément par dose journalière Vitamine A (bêta carotène) 3.3300 mg Vitamine B2 (riboflavine) 0.8000 mg Vitamine B9 (acide folique) 0.1000 mg Vitamine E (source à 50% de vitamine E) 10.0000 mg Magnésium (oxyde de magnésium) 248.7000 mg Zinc (oxyde de zinc) 9.3350 mg Cuivre {oxyde de cuivre) 1.2520 mg Sélénium (sélénate de sodium) 0.0822 mg Excipient qsp une dose (environ 7g) Posologie: 1 capsule molle par jour avec un verre d'eau, le matin de préférence utilisé avec une dose par jour du sirop enrichi en vitamines, minéraux et oligo-éléments.
EXEMPLE 5:
On a préparé des capsules molles à base d'une huile enrichie en omega-3, utilisées en combinaison avec des capsules molles enrichies en vitamines et des capsules molles enrichies en minéraux et répondant aux formules pondérales suivantes: Capsules molles enrichies en omega-3: Huile de poissons concentrée à 60% en omega-3 (rapport omega-3/omega-6 = 2.5) 500 mg Excipient pour les capsules molles qsp 669 mg Capsules molles de vitamines: Vitamine A (bêta carotène) 3.3300 mg Vitamine B1 (chlorhydrate de Thiamine) 0.7060 mg Vitamine B2 (riboflavine) 0.5740 mg Vitamine B3 (nicotinamide) 9.0330 mg Vitamine B5 (D-pantothénate de calcium) 2.7100 mg Vitamine B6 (chlorhydrate de pyridoxine) 1.0060 mg Vitamine B9 (acide folique) 0.1660 mg Vitamine E (d- alpha-tocophérol) 10.0580 mg Vitamine C (acide L-ascorbique) 45.0000 mg Excipient pour les capsules molles qsp 399 mg Capsules molles de minéraux: Magnésium (oxyde de magnésium) 143.500 mg Fer (sulfate de fer) 19.810 mg Zinc (sulfate de zinc) 12.800 mg Cuivre (gluconate de cuivre) 1.252 mg Sélénium (levures enrichies 2000 pg/g) 16.750 mg Iode (iodure de potassium) 0.090 mg Excipient pour les capsules molles qsp 631 mg Posologie: 2 capsules molles enrichies en omega-3, 1 15 capsule molle de vitamines et 1 capsule molle de minéraux, avec un verre d'eau, le matin de préférence.
ETUDES PHARMACOLOGIQUES: Etude in vitro du rôle des omega-3 seuls ou en association avec des vitamines, des minéraux et des oliqo-éléments sur les fonctions des cellules neuronales.
La lignée de cellules neuronales PC2 a été utilisée comme modèle du fonctionnement neuronal. Les cellules ont été cultivées selon la méthode décrite par Greene L. et al. (Adv.
Cell Neurobiol., vol 3, 373, 1982). Les cellules ont été ensemencées dans des microplaques de culture tissulaire à 6 puits contenant du milieu RPMI 164 enrichi avec 10% de sérum de cheval inactivé à chaud, du sérum foetal de veau (5%), de la pénicilline (50 UI/ml), de la streptomycine (50pg/ml) et de la L-glutamine (2 pl/ml). Les cultures témoins et les cultures testées ont été incubées à 95% d'air et 5% de CO2.
Les sous cultures ont été préparées en recouvrant les puits avec des miniinserts de culture de 30 mm de diamètre en cellulose (de type milicell) avec de la poly-D-lysine et un matrigel en disposant ces inserts dans des boites de Petri de mm de diamètre contenant le milieu de culture. Les cellules ont été ensemencées avec une densité de 3000 cellules par cm2 et ont été finalement différenciées par addition de S-NGF (50 pg/ml) dans un milieu sans sérum pendant 7 jours. Les cellules nerveuses avec des axones et des dendrites se développent à 95% de confluence en 7 jours.
Les cellules ont été trypsinées et multipliées dans des conditions de culture identique pour les différents traitements Pour les différentes expériences, une huile riche en omega-3 dérivée de peaux de poisson (rapport omega-3 / omega-6 = 2,5:1) a été utilisée. L'huile a été répartie de façon uniforme sur une face des inserts en cellulose tandis que les cellules PC2 étaient cultivées sur l'autre face. Les concentrations maximum non cytotoxiques en omega-3 ont été déterminées préalablement aux différentes expériences.
Les vitamines et les minéraux ont été préalablement dissous dans des solutions mères de milieu de culture et les dilutions appropriées ont ensuite été introduites dans les cultures des cellules neuronales. Les cellules ont ainsi été incubées pendant 3 à 10 jours selon le type d'expérience. A la fin de la période expérimentale, les mini-inserts des plaques de culture ont été retirés pour l'étude des paramètres cellulaires. Les résultats ont été comparés aux témoins correspondants. Toutes les expériences ont été réalisées en triplicata (n=6) avec le même nombre de cultures témoin.
a) effet des omeqa-3 sur la croissance cellulaire.
Dans les cultures de départ, une culture monocouche à 80-90% est obtenue en 7 jours. Les cellules témoin ont été cultivées dans les mini-inserts sans omega-3 tandis que les autres mini-inserts ont été traités avec les omega-3. Les vitamines et les minéraux ont été ajoutés dans les milieux de culture (à hauteur d'1/10 des concentrations maximums non cytotoxiques) . Le nombre de cellules a été déterminé après trypsination au jour 7. Seuls les résultats les plus pertinents avec les vitamines (A, B2, B9, E), les minéraux (magnésium) et les oligo-éléments (cuivre, zinc, sélénium) choisis sont présentés. Les résultats suivants ont été obtenus.
Tableau n 1:
Expérience Nombre moyen de Pourcentage cellules/cm2 au jour 7 (n=18) Cellules neuronales témoins 7800 100 Cellules avec 50% des AJR en vitamine A, B1, B2, B3, B5, B6, B8, B9, B12, C, E, magnésium, zinc, cuivre, 7914 101.46 sélénium, iode, fer, cobalt, manganèse Cellules avec 50% des AJR en vitamines A, B2, B9, 8642 110.80 E + magnésium, zinc, cuivre et sélénium seuls Cellules avec omega-3 seuls 8420 107.81 Cellules avec omega-3 + 8918 114.19 vitamines A, B2, B9, E Cellules avec omega-3 + magnésium, zinc, cuivre et 8778 112.39 sélénium Cellules avec vitamines A, B2, B9, E + magnésium, zinc, cuivre et sélénium seuls 9438 121.00 Cellules avec omega-3 + vitamines A, B2, B9, E + magnésium, zinc, cuivre et sélénium 10832 138.69 Ces résultats montrent que les omega-3 augmentent la croissance des cellules neuronales (+7.81% par rapport aux témoins). L'addition des vitamines, minéraux et oligo- éléments à hauteur de 50% des AJR n'a aucune influence sur la croissance cellulaire tandis que les éléments vitaux sélectionnés stimule encore plus la croissance cellulaire. L'association d'omega-3 avec des éléments vitaux spécifiques stimule très fortement la croissance des cellules neuronales (+38.7%). b) Effet anti-vieillissement La procédure expérimentale était identique à
15 l'expérience précédente sur la croissance cellulaire mis à part qu'après la confluence cellulaire (monocouche à 10% de confluence), le milieu de culture n'a pas été renouvelé et la mortalité cellulaire a été déterminée à intervalles réguliers jusqu'au 24ème jour en utilisant une coloration au rouge 20 neutre, colorant vital des cellules vivantes (incolores), et des cellules mortes (rouge). Les résultats suivants ont été obtenus. 30
Tableau n 2:
Nombre moyen de cellules/cm2 Pourcentage de survie Jour 7 Jour 14 Jour 21 Jour 14 Jour 21 Cellules neuronales témoins 4310 5108 5292 4936 5 652 6142 0,00 15,52 22,00 16,44 25,66 62,33 7618 7420 7318 7822 7740 7598 Cellules avec omega-3 10 seuls Cellules avec omega-3 15 + vitamines A, B2, B9, E Cellules avec omega-3 + magnésium, zinc, cuivre et sélénium Cellules avec 25 vitamines A, B2, B9, E + magnésium, zinc, cuivre et sélénium seuls Cellules avec omega-3 + vitamines A, 35 B2, B9, E + magnésium, zinc, cuivre et sélénium 56,57 68,84 72,31 63,10 73,02 80,84 Ces résultats montrent que la durée de vie maximum des cellules en conditions standard est inférieure à 21 jours mais que cette durée de vie peut être augmentée de 15 à 20% en apportant des omega-3 avec des éléments vitaux spécifiques. L'apport d'omega-3 avec les vitamines, minéraux et oligo-éléments sélectionnés réduit fortement la mort des cellules neuronales et augmente significativement le taux de survie cellulaire (+62%).
Pharmacologie in vivo: Les rats ont été divisés en deux groupes. Le groupe 1 composé de rats adultes Wistar mâles pesant environ 200 g ont reçu une alimentation supplémentée avec une huile riche en omega-3 (10 mg/jour) avec des vitamines A, B2, B9 et E, du magnésium, du zinc, du cuivre et du sélénium (40-50% des apports journaliers recommandés) pendant 30 jours. Les animaux du groupe 2 recevant seulement une alimentation riche en omega-3 (10 mg/j) constituaient les témoins. Les tests comportementaux usuels et les tests classiques de la mémoire ont été conduits aux jours 28-30.
Dans le test d'exploration à deux compartiments, le groupe 1 a montré une anxiété moindre. Dans le test de la nage forcée, le temps d'immobilité était raccourci indiquant une meilleure condition physique dans le groupe 1. Dans le test de Maze, le temps d'alimentation était raccourci démontrant une amélioration de la mémoire dans le groupe 1. Enfin, dans le test à la scopolamine, la durée de perte de mémoire induite par la scopolamine a été diminuée dans le groupe recevant des omega-3 et des éléments vitaux spécifiques. Ces résultats prouvent que l'association des omega-3 avec des vitamines, des minéraux et des oligo-éléments testés présente une activité d'amélioration de la mémoire mais également un effet restaurateur de la mémoire.
L'administration par voie orale d'omega-3 aide à améliorer les fonctions neurologiques du cerveau. L'association des omega-3 avec les vitamines A, B2, B9, E, du magnésium, du sélénium, du zinc et du cuivre présente un effet synergique sur les fonction neuronales et augmente significativement l'effet des ingrédients pris séparément.
Le complexe d'éléments vitaux, les huiles de poisson enrichies en omega-3 et les combinaisons de ces deux produits ont été testées pendant un mois chez des volontaires sains et n'ont pas montré d'effets secondaires.
Ces associations peuvent être utilisées pour le traitement des troubles psychiques mineurs comme la dépression, l'anxiété, les pertes de mémoire, pour améliorer la forme physique et dans des produits anti-vieillissement ou pour allonger la durée de la vie. Les propriétés antioxydantes du complexe de vitamines, de minéraux et d'oligo-éléments stimulateur du métabolisme cellulaire et les propriétés constitutives des omega-3 sur les membranes neuronales sont certainement à l'origine de cette activité synergique.
Claims (5)
1. Utilisation d'une composition synergique par voie orale pour améliorer la biodisponibilité et l'efficacité des acides gras polyinsaturés omega-3 caractérisée en ce qu'elle associe des omega-3 avec un complexe activateur du métabolisme cellulaire contenant au moins deux vitamines choisies parmi la vitamine A, la vitamine B2, la vitamine B9, la vitamine E avec au moins deux minéraux ou oligo-éléments choisis parmi le magnésium, le zinc, le cuivre et le sélénium pour stimuler les fonctions neuronales.
2. Utilisation d'une composition synergique par voie orale pour améliorer l'efficacité des acides gras polyinsaturés omega-3 caractérisée en ce qu'elle comprend un complexe activateur des fonctions métaboliques cellulaires pour améliorer la biodisponibilité des omega-3.
3. Utilisation d'une composition synergique par voie orale pour améliorer l'efficacité des acides gras polyinsaturés omega-3 caractérisée en ce qu'elle comprend une source d'origine naturelle riche en omega-3 comme l'huile de poissons des mers froides enrichie en omega-3 avec au moins deux vitamines choisies parmi la vitamine A, la vitamine B2, la vitamine B9, la vitamine E avec au moins deux minéraux ou oligo-éléments choisis parmi le magnésium, le zinc, le cuivre et le sélénium par voie orale pour le traitement des maladies ayant pour origine des dysfonctionnements d'origine cérébrale ou cardiaque.
4. Utilisation par voie orale d'acides gras polyinsaturés avec des vitamines, des minéraux et des oligo-éléments antioxydants pour le traitement des troubles psychiatriques et des troubles cardio-vasculaires.
5. Utilisation par voie orale ou par voie locale d'acides gras polyinsaturés avec au moins deux vitamines choisies parmi la vitamine A, la vitamine B2, la vitamine B9, la vitamine E avec au moins deux minéraux ou oligo-éléments choisis parmi le magnésium, le zinc, le cuivre et le sélénium à titre de produit diététique, nutritionnel, pharmaceutique ou cosmétique.
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