FR2952640A1 - Procede de fabrication d'une preparation de facteur h - Google Patents
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Abstract
L'invention concerne un procédé de fabrication d'une préparation de Facteur H à usage thérapeutique comprenant les étapes consistant à : (i) obtenir une fraction de plasma sanguin contenant du Facteur H ; (ii) soumettre la fraction obtenue à l'étape (i) à une unique chromatographie d'affinité de type héparine; (iii) soumettre la fraction enrichie en Facteur H obtenue à l'étape (ii) à une chromatographie échangeuse de cations ; (iv) soumettre la fraction enrichie en Facteur H obtenue à l'étape (iii) à une chromatographie échangeuse d'anions, ledit procédé ne comprenant pas d'étape supplémentaire de chromatographie d'affinité de type héparine.
Description
L'invention concerne un procédé de fabrication d'une préparation de Facteur H à usage thérapeutique, à partir de plasma sanguin humain.
Arrière-plan technologique de l'invention : Le complément joue un rôle essentiel dans la défense de l'organisme contre des agents infectieux et dans le processus inflammatoire. Il représente un système auxiliaire de l'immunité, en particulier de la réponse humorale et de la réponse innée.
Le complément comprend un ensemble d'environ 30 protéines plasmatiques et parfois membranaires, synthétisées essentiellement par le foie et les macrophages et qui peuvent être activées par des cascades protéolytiques. Il comprend à la fois des protéines plasmatiques, de nombreux récepteurs cellulaires de surface différents, certains présents sur les cellules inflammatoires et d'autres sur les cellules du système immunitaire, ainsi que des protéines membranaires de régulation qui protègent les cellules hôte d'une auto-attaque. Les protéines plasmatiques du complément fonctionnent soit comme des enzymes, soit comme des protéines de liaison, soit comme des régulateurs (inhibiteurs ou activateurs).
Il existe 3 voies de déclenchement de la cascade du complément : la voie classique déclenchée par les anticorps, la voie alterne déclenchée par des substances bactériennes en absence d'anticorps, la voie dépendante des lectines qui reconnaissent certains polysaccharides bactériens. Ces deux dernières voies sont mises en jeu dans la réponse innée et sont extrêmement importantes dans la défense de l'hôte contre les infections bactériennes.
Le Facteur H est le principal régulateur de la voie alterne du complément. Il agit en phase liquide comme à la surface des cellules. Initialement désignée « bêta 1 H globuline », cette glycoprotéine sérique de 155 kDa est également appelée Facteur H 1, FH, CFH, ou HF1. Le Facteur H est synthétisé dans le foie, les macrophages, les fibroblastes, les cellules endothéliales et les plaquettes. La forme sécrétée de la protéine est composée de 20 unités répétitives (ou « short consensus repeats », SCR) de 60 acides aminés.
L'activité anti-complémentaire du Facteur H se traduit par la régulation du taux de complexes immuns dans le sang, il participe par conséquent à l'équilibre entre les processus résultant en leur génération ou en leur dégradation. Le facteur H réduit la demi-vie de la C3 convertase (C3bBb) alterne en liant le C3b et en dissociant le Bb et sert de cofacteur au Facteur I dans la protéolyse du C3b, libre ou lié à la surface des cellules, en C3bi. Ainsi, les complexes immuns composés d'un complexe antigène-anticorps associé au composant du complément C3b ne peuvent plus activer la cascade subséquente du complément (composants C5-C9). Le Facteur H a été proposé dans le traitement du Syndrome Hémolytique et Urémique atypique (SHUa) associé à une anomalie héréditaire du système du complément (demande de brevet FR2894145). Par ailleurs, le Facteur H est indiqué pour le traitement de néphropathies chroniques (WO2007/038995). 10 Une source appropriée pour la préparation d'une préparation de Facteur H à usage thérapeutique est du plasma sanguin. Le plasma sanguin est utilisé depuis longtemps pour la préparation de produits dérivés du sang de type albumine, préparations d'immunoglobulines, concentrés de facteur de la coagulation (Facteur VIII, Facteur IX 15 etc.), etc. Des méthodes de fractionnement du plasma sont connues, permettant d'enrichir certaines fractions en produits désirés. Des schémas simplifiés du fractionnement plasmatique industriel Cohn/Oncley modifié, et du fractionnement plasmatique industriel Kistler/Nitschmann sont présentés dans la demande de brevet WO2008/113589, qui concerne une préparation d'une formulation de facteur H à partir d'une fraction 20 éthanolique.
La demande de brevet WO2007/066017 décrit un procédé de purification du Facteur H comprenant une chromatographie par échange d'anions, suivie par deux étapes de chromatographie d'affinité de type héparine, puis, dans l'ordre, une chromatographie par 25 échange de cations, et une chromatographie par échange d'anions.
La demande de brevet WO2008/113589 décrit l'obtention d'un Facteur H purifié par une chromatographie d'affinité avec héparine à partir d'une fraction éthanolique de plasma sanguin, suivie d'une chromatographie par échange d'anions, et une chromatographie par 30 échange de cations.
Ces procédés restent imparfaits, soit parce qu'ils consomment trop d'héparine, qui est un produit cher (WO2007/066017), soit parce qu'ils ne parviennent pas à un niveau de pureté du Facteur totalement satisfaisant pour un usage thérapeutique 35 (WO2008/113589).
L'invention vise à résoudre ces problèmes.5 Résumé de l'invention : L'invention fournit un procédé de fabrication d'une préparation de Facteur H à usage thérapeutique comprenant les étapes consistant à : (i) obtenir une fraction de plasma sanguin contenant du Facteur H ; (ii) soumettre la fraction obtenue à l'étape (i) à une unique chromatographie d'affinité de type héparine; (iii) soumettre la fraction enrichie en Facteur H obtenue à l'étape (ii) à une chromatographie échangeuse de cations ; (iv) soumettre la fraction enrichie en Facteur H obtenue à l'étape (iii) à une chromatographie échangeuse d'anions, ledit procédé ne comprenant pas d'étape supplémentaire de chromatographie d'affinité de type héparine.
De manière préférentielle, ladite fraction soumise à la chromatographie de type héparine est ajustée à un pH de 6.
Le procédé peut comprendre en outre au moins un traitement d'inactivation virale, de préférence par l'action de solvant et détergent, et/ou au moins un traitement d'élimination virale, de préférence par nanofiltration.
Le procédé de l'invention présente de nombreux avantages : il est industrialisable, permet de purifier du Facteur H à partir de divers intermédiaires de production, et avec un degré de pureté élevé, à savoir avec très peu de composant C3 du complément, dont la présence pourrait diminuer l'efficacité de la formulation, très peu ou pas de Facteur B, qui est un compétiteur de Facteur H. Le Facteur H obtenu est faiblement protéolysé, conserve son activité fonctionnelle, et cela sans nécessité d'ajouter des inhibiteurs de protéase en cours de purification.
L'invention a également pour objet une préparation de Facteur H susceptible d'être obtenue par le procédé décrit ici. De préférence, ladite préparation est sous forme lyophilisée.
Légende de la Figure : La Fiqure 1 montre un schéma représentant les étapes du procédé de purification suivies dans l'exemple 1.
Description détaillée de l'invention : Par « Facteur H » on entend toute protéine ayant la séquence en acides aminés du Facteur H natif humain. Le terme « Facteur H » comprend en outre les variations alléliques naturelles et/ou les isoformes du Facteur H trouvées naturellement, et toute forme ou degré de glycosylation ou autre modification post-traductionnelle. Sont aussi compris les homologues ou dérivés du Facteur H qui présentent la même ou une activité biologique supérieure par rapport à l'activité de la forme sauvage et/ou qui présentent une identité de séquence d'au moins 80%, de préférence au moins 85%, de préférence encore d'au moins 90%.
Le terme « activité biologique » du Facteur H inclut la capacité à inhiber la C3 convertase et/ou à servir de co-facteur du Facteur I, résultant à l'inhibition de l'activation de la cascade du complément. L'activité du Facteur H peut être mesurée de différentes manières, bien connues de l'homme du métier.
De manière générale, une chromatographie consiste à mettre en contact le Facteur H en solution - avec une matrice à laquelle le Facteur H se lie, éventuellement laver la matrice dans des conditions appropriées pour que le Facteur H reste lié, puis appliquer à la matrice une solution qui provoque l'élution du Facteur H de la matrice, - ou de manière alternative avec une matrice qui lie les impuretés mais pas le Facteur H
Etape (i) obtention d'une fraction de plasma sanguin contenant du Facteur H : De préférence on utilise comme matériau de départ le surnageant d'un cryoprécipité de plasma sanguin éventuellement mélangé avec une fraction plasmatique non retenue sur une chromatographie échangeuse d'anions, type DEAE-Séphadex ou encore une fraction non retenue sur une chromatographie échangeuse d'anions , type DEAE-Séphadex. On peut encore utiliser le surnageant issu d'une précipitation éthanolique.
Etape (ii) chromatographie d'affinité de type héparine : La chromatographie d'affinité de type héparine met en oeuvre une matrice ou un support, qui est le plus souvent un gel d'agarose, sur lequel est greffé de l'héparine ou des dérivés ou mimétiques de l'héparine. Parmi les ligands de type héparine on peut citer notamment les ligands suivants : chondroitin sulfate, heparan sulfate, dermatan sulfate, keratan sulfate, ou des oligomères synthétiques, par exemple le cellubiose sulfate ester (MatrexTM Cellufine Sulfate), ou des analogues thérapeutiques de l'héparine, par exemple des oligosaccharides sulfatés. De préférence le pH est ajusté à une valeur de 6, par exemple en équilibrant la colonne avec une solution tampon de phosphate de sodium à 20 mM, avec une osmolalité de 60±5 mOsm/kg, et un pH 6,0±0,1. Un exemple de protocole particulier est présenté dans l'exemple 1. Cette étape permet de fixer le Facteur H et l'antithrombine III (AT III), et de les éluer séparément.
Etape (iii) chromatographie échangeuse de cations : Une chromatographie échangeuse de cations met en oeuvre une matrice, le plus souvent de type agarose ou polymérique, sur laquelle sont greffés des ligands tels que carboxymethyl (CM), sulfopropyl (SP) ou methyl sulfonate (S). Des supports échangeurs de cations sont disponibles dans le commerce: on peut citer par exemple des supports CM-Sepharose, SP-Sepharose et S-Sepharose (GE Healthcare), Toyopearl CM-650, Toyopearl SP-650 (Tosoh Biosciences), Fractogel EMD SO3", Fractogel EMD COO" (Merck KGaA), Macro-Prep CM Support, Macro-Prep High S Support (BioRad), CM HyperD, S HyperD, CM Trisacryl, SP Trisacryl, SP Sperodex (ail Pall). De préférence, on utilise la SP-Sepharose FF.
Un exemple de protocole particulier est présenté dans l'exemple 1. Cette étape permet d'éliminer essentiellement le composant C3 du complément (C3), les immunoglobulines M (IgM), et l'apolipoprotéine B (Apo B).
Etape (iv) chromatographie échangeuse d'anions : Le Facteur H peut dans certaines conditions se lier à des résines échangeuses d'anions, et en être désorbé par des systèmes tampons à force ionique élevée. Une chromatographie échangeuse d'anions met en oeuvre une matrice, le plus souvent de type agarose ou polymérique, sur laquelle sont greffés des ligands tels que diethylaminoethyle (DEAE), aminoethyle quaternaire (QAE) ou ammonium quaternaire (Q). Des supports échangeurs d'anions sont disponibles dans le commerce: on peut citer par exemple des supports DEAE-Sepharose, Q- Sepharose (GE Healthcare), Toyopearl DEAE-650, Toyopearl Super Q-650 (Tosoh Biosciences), Fractogel EMD DEAE, Fractogel EMD TMAE (Merck KGaA), Macro- Prep DEAE Support, Macro-Prep High Q Support (BioRad), DEAE HyperD, Q HyperD, DEAE Trisacryl, DEAE Sperodex (ail Pall).
De préférence, on utilise la Q-Sepharose FF. Un exemple de protocole particulier est présenté dans l'exemple 1. Cette étape permet d'éliminer essentiellement le Facteur B et le Facteur I.
Avantageusement, le pH de la fraction de plasma sanguin contenant du Facteur H et obtenue à l'étape (i) est ajusté pour être compris dans la gamme allant de pH 5,5 à pH 6,5 et de préférence pour être égal à pH 6,0. Avantageusement, le pH de la fraction éluée de l'étape (ii) puis diluée avant l'étape (iii) est ajusté pour être compris dans la gamme allant de pH 6,0 à pH 7,5, de préférence de 6,0 à 7,0 de préférence pour être égal à pH 6,5 environ. Avantageusement encore, le pH de la fraction éluée de l'étape (iii) puis diluée avant l'étape (iv) est ajusté pour être compris dans la gamme allant de 6,0 à 7,0 et de préférence pour être égal à 6,5.
Selon un mode de réalisation préféré de l'invention, la purification comprend les étapes consistant à : (i) obtenir une fraction de plasma contenant du Facteur H, par exemple (a) le surnageant d'un cryoprécipité de plasma sanguin éventuellement mélangé avec une fraction plasmatique non retenue sur une chromatographie échangeuse d'anions ou (b) une fraction plasmatique non retenue sur une chromatographie échangeuse d'anions ; (ii) soumettre ledit surnageant ou ladite fraction non retenue sur chromatographie échangeuse d'anions à une chromatographie d'affinité de type héparine, par exemple sur gel de sépharose sur lequel est greffée de l'héparine, par ce en quoi on obtient une fraction enrichie en Facteur H; (iii) (a) soumettre la fraction obtenue à l'étape (ii) à une chromatographie échangeuse de cations, par exemple sur SP-Sépharose ; (iii) (b) suivie le cas échéant par un traitement par solvant et détergent ; (iv) soumettre la fraction enrichie en facteur H obtenue à l'étape (iii) (a) ou (b) à une chromatographie échangeuse d'anions, par exemple sur Q-Sépharose.
Le procédé se poursuit généralement par des étapes de formulation, concentration, puis filtration du concentré de Facteur H.
Plus précisément, le procédé de fabrication d'une préparation de Facteur H selon l'invention peut comprendre les étapes suivantes : (i) obtenir une fraction de plasma contenant du Facteur H, par exemple (a) le surnageant d'un cryoprécipité de plasma sanguin éventuellement mélangé avec une fraction plasmatique non retenue sur une chromatographie échangeuse d'anions ou (b) une fraction plasmatique non retenue sur une chromatographie échangeuse d'anions ; (ii) soumettre ledit surnageant ou ladite fraction non retenue sur chromatographie échangeuse d'anions à une chromatographie d'affinité de type héparine, par exemple sur gel de sépharose sur lequel est greffée de l'héparine, par ce en quoi on obtient une fraction enrichie en Facteur H; laver puis éluer le facteur H par un tampon de force ionique supérieure à celle du tampon d'équilibrage de la chromatrographie d'affinité de type héparine, diluer la fraction éluée, puis (iii) (a) la soumettre à une chromatographie échangeuse de cations, par exemple sur SPSépharose ; laver puis éluer le facteur H par un tampon de force ionique supérieure à celle du tampon d'équilibrage de la chromatrographie échangeuse de cations, diluer la fraction éluée, puis (iii) (b) le cas échéant la soumettre à un traitement par solvant et détergent ; (iv) puis la soumettre à une chromatographie échangeuse d'anions, par exemple sur QSépharose ; (v) laver et éluer le Facteur H, généralement par un tampon de force ionique supérieure à celle du tampon d'équilibrage de la chromatographie échangeuse d'anions ; (vi) préparer un concentré de Facteur H.
De préférence le procédé comprend en outre une étape de nanofiltration, de préférence sur un filtre de 20-15nm.
Autres étapes possibles : Dans un mode de réalisation préféré, le procédé de l'invention ne contient aucune autre chromatographie que celles prévues aux étapes (ii) à (iv) définies plus haut.
Toutefois, le procédé de l'invention peut éventuellement comprendre des étapes supplémentaires, par exemple d'autres chromatographies d'échanges d'anions ou de cations, mais aussi le cas échéant une ou plusieurs chromatographies par interaction hydrophobe. Le Facteur H peut dans certaines conditions se lier à des résines de chromatographie par interaction hydrophobe, et en être désorbé par des systèmes tampons à force ionique faible. Une telle chromatographie met en oeuvre une matrice, le plus souvent de type agarose ou polymérique, sur laquelle sont greffés des ligands tels que phenyl, octyl, butyl, methyl, ou encore hexylamine, phenylpropylamine, 4-mercapto-ethyl-pyridine. Des supports pour ce type de chromatographie sont disponibles dans le commerce: on peut citer par exemple des supports phenyl sepharose, octyl sepharose, butyl sepharose, CaptoTM MMC (ail GE Healthcare), Toyopearl Phenyl-650, Toyopearl Butyl-650, Toyopearl Hexyl- 650 (ail Tosoh Biosciences), Macro-Prep Methyl HIC Support, Macro-Prep t-Butyl HIC Support (Bio-Rad), HEA HyperCel; PPA HyperCel, MEP HyperCel (ail Pall).
Le procédé de l'invention peut aussi comprendre une chromatographie de type Hydroxyapatite. En effet, le Facteur H peut être purifié en utilisant des composites de phosphate de calcium, fluoroapatite, hydroxyapatite comme phase solide. Parmi les supports disponibles commercialement, on peut citer par exemple Bio-Gel Hydroxyapatite HT (Bio- Rad), Ceramic Fluoroapatite, Ceramic Hydroxyapatite (Bio-Rad), HA Ultrogel (Pall).
Le procédé de l'invention peut encore comprendre une chromatographie par immunoaffinité, qui met en oeuvre par exemple des anticorps ou des aptamères immobilisés sur une matrice de chromatographie. Les matrices sont généralement des résines pré-activées, par exemple par époxy (Sepharose 6B1 EAH Sepharose 4B, Amino Sepharose 6 FF, 6-AKS Sepharose 4FF, Toyopearl AF Epoxy, Toyopearl AF Amino, Toyopearl AF Tresyl). Les impuretés non liées sont lavées en utilisant des systèmes tampon adaptés (tampon citrate, tampon phosphate, ou HEPES par exemple), et le Facteur H est ensuite élué en utilisant par exemple de fortes concentrations en sels chaotropiques (de type thiocyanate, bromure de lithium), des systèmes tampons à faible pH (glycine pH 2-3) ou à pH élevé (TRIS pH 9).
Le procédé de l'invention peut également inclure d'autres traitements, tels qu'une délipidation. La délipidation consiste à éliminer, de préférence en amont ou le plus tôt possible dans le procédé, des impuretés lipidiques des solutions de protéines au moyen par exemple d'une précipitation ou d'une adsorption. Des agents précipitants adaptés incluent par exemple des polyéthylèneglycols (PEG) ou du sulfate d'ammonium, tandis que des poudres de silice ("silice fumée"; Aerosil 200, Aerosil 380), dextran sulfates ou fluorocarbones (Freon-113) sont des adsorbants adaptés. Il peut aussi être avantageux d'éliminer ou inhiber les impuretés protéolytiques, à savoir les enzymes, par exemple les protéases ou glycosydases, qui seraient capables de cliver la molécule de Facteur H en des formes tronquées inactives. Cette élimination ou inhibition est de préférence réalisée le plus tôt possible, de préférence encore en amont du procédé de purification. Pour cela on peut utiliser une méthode chromatographique dans laquelle des inhibiteurs de protéases sont immobilisés sur des matrices de type agarose ou matrice polymérique. On peut aussi utiliser un filtre qui retient une partie des impuretés protéolytiques (type filtre Sartoclear®). De tels inhibiteurs de protéase peuvent être par exemple benzamidine, 4-aminobenzamidine, benzamidine chlorhydrate et ses dérivés, lysine et ses dérivés, acide 6-aminohexanoïque (acide E-aminocaproïque) et ses dérivés, acide trans-4-aminomethylcyclohexanecarboxylique (acide tranexamique) et ses dérivés, 4-(2-Aminoéthyl)benzènesulfonylfluorure (AEBSF) et ses dérivés, (4-Amidino-Phenyl)-Methane-Sulfonyl Fluorure (APMSF) et ses dérivés, 3,4-dichloroisocoumarine (DCI) et ses dérivés, Acétyl- leucyl-leucyl-arginal (Leupeptine) et ses dérivés, aprotinine et ses dérivés, inhibiteur trypsique du soja, et ses dérivés, a2-antiplasmine et ses dérivés, inhibiteurs de la thrombine (notamment antithrombine III) et ses dérivés. Des supports de chromatographie disponibles commercialement sont par exemple ECH Lysine Sepharose 4 B, Benzamidine Sepharose 6B (GE Healthcare), p-Aminobenzamidine Agarose 6XL (Prometic). Plutôt que de les éliminer, les impuretés protéolytiques peuvent être inhibées en ajoutant un ou plusieurs inhibiteurs de protéases du groupe mentionné ci-dessus, en particulier de l'antithrombine III et du Cl-inhibiteur, puis en éliminant le complexe enzyme/inhibiteur au moyen des étapes subséquentes de purification.
Une autre approche pour éliminer les impuretés protéolytiques est d'utiliser des colorants immobilisés tels que Cibacron Blue F3GA ou ses derivés, d'autres colorants triazines tels que Procion Red HE-3B et ses dérivés, ou Procion Green H-4G et ses dérivés, Reactive Red 120 et ses dérivés, Reactive Green 19 et ses dérivés, Reactive Yellow 86 et ses dérivés, Reactive Orange 14 et ses dérivés, immobilisés sur des matrices de type agarose ou matrice polymérique.
Inactivation des virus La préparation de Facteur H utile dans l'invention a généralement subi au moins une étape d'élimination ou d'inactivation d'au moins un agent infectieux. Parmi les agents infectieux, on peut citer les virus et les ATNC (agents transmissibles non conventionnels) comme le prion. Une inactivation virale comprend souvent un traitement avec des produits chimiques, par exemple par solvant, détergent et/ou par la chaleur, par exemple par UVC, irradiation Gamma, et/ou pasteurisation. Une nanofiltration est aussi utile pour éliminer un agent infectieux, notamment les virus. De préférence le procédé comprend au moins un traitement par solvant et détergent, et une nanofiltration. La pasteurisation se réfère à des méthodes exposant les compositions liquides de Facteur H à une température de 60°C pendant au moins 10h. Le traitement par solvant et/ou détergent (appelé généralement traitement solvant/détergent) comprend notamment le traitement par tri-n-butylphosphate et/ou un détergent qui est choisi parmi le Triton X-100, Tween (de préférence Tween 80) et cholate sodium.
La nanofiltration se réfère généralement à la filtration d'une solution de Facteur H à travers un filtre avec une taille de pores inférieure à 80 nm. Des filtres disponibles sont par exemple BioEx, Planova TM 75 nm, Planova TM 35 nm, Planova TM 20 nm ou Planova TM 15 nm (Asahi corporation), Ultipor DV 50 or DV 20 (Pall corporation), Virosart CPV (Sartorius), Viresolve NFR ou NFP (Millipore). De préférence une nanofiltration est réalisée après l'étape (iv) de chromatographie échangeuse d'anions. Dans un mode de réalisation particulier, la fraction de Facteur H purifiée est filtrée sur une séquence de filtres avec une taille de pores de 20nm et 15nm.
Formulation De manière à obtenir des préparations de Facteur H à usage thérapeutique, qui soient stables, la préparation de Facteur H obtenue est formulée avec des excipients et agents stabilisants appropriés. Il peut s'agir de diluants, d'agents, cryoprotecteurs, lyoprotecteurs, etc.
Parmi les lyoprotecteurs classiques, on peut citer les sucres (saccharose, tréhalose, glucose, lactose etc.), les polyols (mannitol, sorbitol) et les acides aminés (glycine, arginine, histidine, alanine) qui peuvent être utilisés à une concentration entre 0 et 10%. Des tensio-actifs de type polysorbate (Tween 20 ou Tween 80 par exemple), polyoxamer (par exemple poloxamer 188), polyéthylèneglycol peuvent être ajoutés également.
On peut encore ajouter des antioxydants (par exemple méthionine, monothioglycérol, glutathion, acide citrique, acide ascorbique, sodium métabisulfite, et sodium sulfite).
Des substances tampon peuvent être encore utilisées, par exemple sous forme de carbonate, phosphate, citrate, acétate, borate, triméthamine [(2-amino-2-hydroxyméthyl-1,-3- propanediol),TRIS], glycine et lysine.
Selon un mode de réalisation préféré, la formulation liquide de Facteur H avant lyophilisation comprend de l'arginine, de préférence sous forme de son chlorhydrate, du citrate de sodium dihydraté, ainsi qu'éventuellement aussi de l'isoleucine, de la glycine, et de la lysine ou l'un de ses sels.
Dessication La formulation liquide de Facteur H peut subir une dessiccation si nécessaire, pour l'obtention d'une forme solide. La dessiccation est un procédé d'élimination de l'eau à un stade poussé. Il s'agit d'une déshydratation visant à éliminer autant d'eau que possible. Ce phénomène peut être naturel ou forcé. Cette dessiccation peut être réalisée à l'aide des techniques de lyophilisation, d'atomisation et de cryoatomisation. Le mode préféré d'obtention de la forme solide de la composition à usage pharmaceutique selon l'invention est la lyophilisation.
Les méthodes de lyophilisation sont bien connues de l'homme du métier, voir par exemple Wang et al, Lyophilization and development of solid protein pharmaceuticals, International Journal of Pharmaceutics, Vol 203, p 1-60, 2000. D'autres procédés appropriés pour réduire le degré d'humidité ou la teneur en eau de la composition sont envisageables. De préférence le degré d'humidité est inférieur ou égal à 3% en poids, de préférence inférieur ou égal à 2,5%, de préférence inférieur ou égal à 2%, de préférence inférieur ou égal à 1,5%. La composition solide peut être dissoute dans de l'eau pour préparations injectables (ou « water for injection ou WFI ») ou dans un solvant de reconstitution, pour obtenir une formulation à usage thérapeutique.
La figure et les exemples illustrent l'invention sans en limiter la portée.
Exemples : Exemple 1 : Purification du Facteur H Un concentré de Facteur H est préparé en suivant les étapes représentées à la Figure jointe.
Ajustement du matériau de départ 25 On a utilisé comme matériau de départ une solution A, obtenue de la manière suivante : Du plasma décongelé a subi une cryoprécipitation. Après centrifugation, une partie du cryosurnageant a été soumis à une chromatographie sur DEAE Sephadex, qui fixe les facteurs vitamine K-dépendants. La fraction non retenue sur DEAE-Sephadex est 30 mélangée avec le cryosurnageant restant pour constituer la Solution A. Celle-ci a été ajustée à un pH de 6.0 ± 0,1 avec une solution de HCI à 0,5N. Plusieurs lots ont été préparés à partir de la Solution A.
Chromatographie sur colonne Héparine ûSépharose FF 35 La solution A ajustée est soumise à une chromatographie sur colonne BP 113 contenant 1500 mL de gel Héparine-Sépharose Fast Flow (FF) (15cm x 10 cm) équilibrée dans un tampon de phosphate de sodium à 20 mM, une osmolalité de 60±5 mOsm/kg, pH 6,0±0,1.
La même solution tampon a été utilisée pour laver le gel jusqu'au retour à la densité optique (DO) basale mesurée à 280nm. La charge protéique appliquée était de 320mg, 560 et 720 mg de protéines/mL de gel pour les lots 1, 2, et 3, respectivement. Une solution tampon de phosphate de sodium 20mM, chlorure de sodium 60mM, osmolalité de 165±10 mOsm/kg, pH 7,4±0,1 a été injectée dans la colonne pour éluer les protéines qui étaient adsorbées faiblement sur le gel. Le gel a été ré-équilibré par passage de 2 à 3 volumes de solution tampon d'équilibrage ajustée à pH 6,5. Le Facteur H a ensuite été élué par l'injection d'une solution tampon contenant du phosphate de sodium 20mM, chlorure de sodium 250mM, 4,5g/L arginine-HCI, osmolalité de 550±10 mOsm/kg, pH 6,5±0,1. Un lavage final de la colonne a été réalisé en injectant une solution de chlorure de sodium 2M pour éluer les protéines qui étaient fortement adsorbés au gel, en particulier l'Antithrombine III. Le débit linéaire était de 50cm/h pour toutes les étapes de chromatographie. La fraction de Facteur H éluée a été congelée à -80°C jusqu'à l'étape suivante.
Chromatographie sur colonne SP ûSépharose FF La fraction contenant le Facteur H éluée à partir de la colonne Héparine-Sepharos FF a été décongelée dans un bain marie régulé à 30°C et ensuite ajustée aux conditions d'équilibrage de la colonne SP-Sépharose FF par dilution par de l'eau purifiée pour atteindre une osmolalité de 95±5 mOsm/kg, et si nécessaire ajout d'une solution d'HCI à 0,5N pour obtenir un pH de 6,5±0,1.
La fraction ajustée a été soumise à une chromatographie sur deux colonnes K50 montées en parallèle, chacune contenant 137mL de gel SP-Sépharose FF (7cm x 5cm) et équilibrée avec une solution tampon contenant du phosphate de sodium 20mM, 4,5g/L arginine-HCI, osmolalité de 95±5 mOsm/kg, pH 6,5±0,1. La même solution tampon a été utilisée pour laver le gel jusqu'au retour à la densité optique (DO) basale mesurée à 280nm. Une solution contenant du phosphate de sodium 20mM, chlorure de sodium 60mM, 4,5g/L arginine-HCI, osmolalité de 200±10mOsm/kg, pH 6,5±0,1, a ensuite été injectée dans chaque colonne pour éluer les protéines qui étaient adsorbées faiblement au gel. Le Facteur H a ensuite été élué par injection d'une solution tampon contenant du phosphate de sodium 20mM, chlorure de sodium 165mM, 4,5g/L arginine-HCI, osmolalité de 400±5 mOsm/kg, pH 6,5±0,1. Un lavage final de la colonne a été réalisé en injectant une solution de chlorure de sodium 2M pour éluer les protéines qui étaient fortement adsorbées sur le gel. Le débit linéaire de chromatographie était de 100cm/h pour toutes les étapes de chromatographie. La fraction de Facteur H éluée a été congelée à -80°C jusqu'à l'étape suivante.
Traitement par Solvant- Détergent La fraction de Facteur H éluée de la colonne de SP-Sépharose FF a été décongelée dans un bain marie régulé 30°C. Elle a été ensuite soumise à un traitement par Solvant-Détergent en présence de 1% polysorbate 80 (Tween 80) (p/v) et 0,3% de tri-n-butyl phosphate (TnBP) (v/v) à 25±1 °C.
Chromatographie sur colonne Q-Sépharose FF La fraction de Facteur H traitée par Solvant-Détergent a été ajustée aux conditions d'équilibrage pour la colonne Q-Sépharose FF par dilution avec de l'eau purifiée pour atteindre une osmolalité de 140±10 mOsm/kg, et ajout d'une solution de NaOH à 1 N pour obtenir un pH de 7,5±0,1 pour les lots 1 et 2 et en utilisant une solution HCI à 0,5M si nécessaire pour obtenir un pH de 6,5±0,1 pour le lot 3. La fraction ajustée a été soumise à une chromatographie sur une colonne K50 contenant 190mL de gel Q-Sépharose FF (9,5cm x 5cm) et équilibrée avec une solution tampon contenant du phosphate de sodium 20mM, chlorure de sodium 25mM, 4,5g/L arginine-HCI, osmolalité de 140±10 mOsm/kg, pH 7,5±0,1 pour les lots 1 et 2, et pH de 6,5±0,1 pour le lot 3. La même solution tampon a été utilisée pour laver le gel jusqu'au retour à la densité optique (DO) basale mesurée à 280nm. Le gel a été lavé pour éliminer les protéines non adsorbées sur le gel et le TnBP et Tween 80. Une solution tampon contenant du phosphate de sodium 20mM, chlorure de sodium 55mM, 4,5g/L arginine-HCI, osmolalité de 200±10 mOsm/kg, pH 7,5±0,1 pour les lots 1 et 2, et pH 6,5±0,1 pour le lot 3 a ensuite été injectée dans la colonne pour éluer les protéines qui étaient adsorbées faiblement au gel. Le Facteur H a ensuite été élué par injection d'une solution tampon contenant du phosphate de sodium 20mM, chlorure de sodium 165mM, 4,5g/L arginine-HCI, osmolalité de 390±10mOsm/kg, pH 7,5±0,1 pour les lots 1 et 2, et pH 6,5±0,1 pour le lot 3. Un lavage final de la colonne a été réalisé en injectant une solution de chlorure de sodium 2M pour éluer les protéines qui étaient fortement adsorbées sur le gel. Le débit linéaire de chromatographie était de 150cm/h pour toutes les étapes de chromatographie. La fraction de Facteur H éluée a été congelée à -80°C jusqu'à l'étape suivante.
Filtration à 20-15nm La fraction éluée e la colonne de Q-Sépharose FF a été ajustée à un pH de 6,5±0,1 pour les lots 1 et 3, et pH 7,5±0,1 pour le lot 2, et a ensuite été clarifiée-sur un filtre avec une taille de pores de 0,1 pm et conservée une nuit à 4°C. La fraction clarifiée a été filtrée sur une séquence de filtres PLANOVA 20N et 15N au préalable équilibrée avec une solution tampon contenant du phosphate de sodium 20mM, chlorure de sodium 165mM, 4,5g/L arginine-HCI, osmolalité de 390±10mOsm/kg, pH 7,5 pour le lot 2, et pH 6,5 pour les lots 1 et 3. La pression de filtration à l'entrée, appliquée au filtre de 15nm était de 300±50mbar et était maintenue constante. La filtration a été réalisée à la température du laboratoire.
Concentration/Formulation La fraction de Facteur H filtrée a été concentrée et formulée par diafiltration sur un module d'ultrafiltration équipé d'une membrane avec un seuil de coupure de poids moléculaire de 100kD. Selon un exemple de formulation, pour les lots 2 et 3, on a utilisé une solution tampon composée de 12g/L arginine HCI, 3g/L isoleucine, 0,6g/L glycine, 0,6g/L, lysine HCI, 0,75 g/IL trisodium citrate, osmolalité 150±10mOsm/kg, pH 7,5±0,1. La concentration protéique finale en Facteur H était de 5g/L.
Filtration 0,22pm Le produit concentré et formulé a été filtré sur un filtre de 0,22pm Millipak 20 sous hotte à flux laminaire et conditionné. Exemple 2 : Tests de pureté Des échantillons des fractions de Facteur H en cours de purification ont été prélevés à la fin de chacune des étapes indiquées à l'exemple 1.
25 Tests de purification Le dosage du Facteur H est réalisé classiquement par méthode immunoenzymatique (ELISA) avec des réactifs commerciaux (Diagnostica Stago). Brièvement, le Facteur H à doser est capté par un anticorps anti-Facteur H humain immobilisé sur une phase solide. Le Facteur H fixé est ensuite reconnu par un immuno-conjugué à la peroxydase. Le taux 30 de peroxydase liée est mesuré par son activité sur le substrat ortho-phénylènediamine en présence d'eau oxygénée. L'intensité de la coloration, après arrêt de la réaction par un acide fort, est fonction de la quantité de facteur H présente initialement dans l'échantillon. Le Facteur H ainsi dosé est appelé « Facteur H antigène » ou « Ag ».
35 Les résultats de purification à partir de solution A sont indiqués dans les tableaux ci-dessous.20 Tableau 1A : Pureté du Facteur H pour le Lot 1 Etape Facteur H Facteur H Concentration Pureté en (pg/mL) (mg) protéique totale Facteur H (mg/mL) (Ag/protéines totales) Matériau de 430 4340 48,5 0,009 départ Après l'élution de 860 731 0,77 1,12 la colonne Q- Sépharose FF Tableau 1 B : Pureté du Facteur H pour le Lot 2 Etape Facteur H Facteur H Concentration Pureté en (pg/mL) (mg) protéique totale Facteur H (mg/mL) (Ag/protéines totales) Matériau de 360 3870 51,9 0,007 départ Après l'élution de 1800 1080 1,2 1,5 la colonne Q- Sépharose FF Après la 8100 972 5,2 1,56 concentration et la formulation Après la filtration 8500 810 5,7 1,49 à 0,22pm (produit fini) Tableau 1C : Pureté du Facteur H pour le Lot 3 Etape Facteur H Facteur H Concentration Pureté en (pg/mL) (mg) protéique totale Facteur H (mg/mL) (Ag/protéines totales) Matériau de 360 5436 53,7 0,006 départ Après l'élution de 1500 1125 1,1 1,36 la colonne Q- Sepharose FF Après la 9000 1080 6 1,5 concentration et la formulation Après la filtration 7300 905 5,5 1,33 à 0,22pm (produit fini) Ces résultats montrent que les trois lots sont reproductibles.
Les valeurs de pureté supérieures à 1,0 sont données à titre indicatif seulement. 5 Evaluation des impuretés protéiques La chromatographie sur Héparine-Sepharose FF élimine efficacement Albumine, Immunoglobulines G, Facteur I, Apolipoprotéines A, Cl-inhibiteur, Immunoglobulines A Alpha 1-antitrypsine, Fibrinogène et Antithrombine III. 10 La chromatographie sur SP-Sépharose FF réduit les quantités de protéines de haut poids moléculaire telles que C3, Immunoglobulines M, et Apolipoprotéines B présentes dans l'éluat issu de la chromatographie sur Héparine-Sepharose FF. La chromatographie sur Q-Sépharose FF élimine préférentiellement les protéines de bas poids moléculaire, telles que le Facteur B et le Facteur I résiduel, tout en réduisant encore 15 les quantités dans les autres protéines. Il a en outre été montré que le procédé de l'invention permettait la purification de Facteur H pas ou peu protéolysé.
Dosage de l'activité anti-convertase du facteur H. 20 Le taux calculé correspond à la quantité de facteur H qui permet de dissocier 50% de la C3 convertase préformée, on l'appelle aussi EC 50 (concentration effective pour avoir 50% de l'activité). Un échantillon de pool de plasma est passé à chaque analyse pour servir de référence. Plus le pourcentage est élevé, plus il faut de facteur H pour dissocier la même quantité de C3 convertase donc moins le facteur H est actif. Toute augmentation 25 du taux traduit une dénaturation de la protéine.
Tableau 2 : Activité fonctionnelle du Facteur H en cours de purification Etape de purification Activité (Dissociation C3 convertase) (pg/mL) Lot 1 Lot 2 Surnageant de cryoprécipitation 0,034 0,033 Eluat Héparine-Sepharose FF ND 0,043 Eluat SP-Sepharose FF 0,033 0,045 Eluat Q-Sepharose FF 0,024 0,054 Formulé filtré 0,22pm 0,025 0,023 Plasma seul (référence) 0,039 0,050 Dans cet exemple, les lots 1 et 2 ci-dessus ont été produits à partir de surnageants de cryoprécipitation. Les résultats montrent qu'il n'y a pas de perte d'activité fonctionnelle du Facteur H en cours de purification et que celle-ci reste comparable à celle d'un plasma pris en référence.
Claims (10)
- Revendications1. Procédé de fabrication d'une préparation de Facteur H à usage thérapeutique comprenant les étapes consistant à : (i) obtenir une fraction de plasma sanguin contenant du Facteur H ; (ii) soumettre la fraction obtenue à l'étape (i) à une unique chromatographie d'affinité de type héparine; (iii) soumettre la fraction enrichie en Facteur H obtenue à l'étape (ii) à une chromatographie échangeuse de cations ; (iv) soumettre la fraction enrichie en Facteur H obtenue à l'étape (iii) à une chromatographie échangeuse d'anions, ledit procédé ne comprenant pas d'étape supplémentaire de chromatographie d'affinité de type héparine.
- 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que ladite fraction soumise à la chromatographie de type héparine est ajustée à un pH de 6.
- 3. Procédé selon l'une des revendications 1 ou 2, caractérisé en ce qu'il comprend au moins un traitement d'inactivation virale, de préférence par l'action de solvant et détergent.
- 4. Procédé selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisé en ce qu'il comprend au moins un traitement d'élimination virale, de préférence par nanofiltration.
- 5. Procédé selon l'une des revendications 1 à 4, comprenant les étapes consistant à : (i) obtenir (a) le surnageant d'un cryoprécipité de plasma sanguin éventuellement mélangé avec une fraction plasmatique non retenue sur une chromatographie échangeuse d'anions ou (b) une fraction plasmatique non retenue sur une chromatographie échangeuse d'anions; (ii) soumettre ledit surnageant ou ladite fraction plasmatique non retenue sur une chromatographie échangeuse d'anions, à une chromatographie d'affinité sur gel de sépharose sur lequel est greffée de l'héparine, par ce en quoi on obtient une fraction enrichie en facteur H ; (iii) (a) soumettre la fraction enrichie en Facteur H obtenue à l'étape (ii) à une chromatographie échangeuse de cations sur SP-Sépharose ;(iii) (b) soumettre la fraction enrichie en Facteur H obtenue à l'étape (iii) (a) à un traitement par solvant et détergent ; (iv) soumettre la fraction enrichie en Facteur H obtenue à l'étape (iii) (b) à une chromatographie échangeuse d'anions sur Q-Sépharose.
- 6. Procédé selon la revendication 5, comprenant en outre des étapes de formulation, concentration, puis filtration du concentré de Facteur H.
- 7. Procédé selon l'une des revendications 1 à 6, comprenant les étapes consistant à : 10 (i) obtenir une fraction de plasma contenant du Facteur H, par exemple a) le surnageant d'un cryoprécipité de plasma sanguin éventuellement mélangé avec une fraction plasmatique non retenue sur une chromatographie échangeuse d'anions ou (b) une fraction plasmatique non retenue sur une chromatographie échangeuse d'anions; (ii) soumettre ledit surnageant ou ladite fraction plasmatique non retenue sur une 15 chromatographie échangeuse d'anions, à une chromatographie d'affinité de type héparine, par exemple sur gel de sépharose sur lequel est greffée de l'héparine; laver puis éluer le facteur H par un tampon de force ionique supérieure à celle du tampon d'équilibrage de la chromatrographie d'affinité de type héparine, diluer la fraction éluée, puis 20 (iii) (a) la soumettre à une chromatographie échangeuse de cations, par exemple sur SPSépharose ; laver puis éluer le facteur H par un tampon de force ionique supérieure à celle du tampon d'équilibrage de la chromatrographie échangeuse de cations, diluer la fraction éluée, puis (iii) (b) le cas échéant la soumettre à un traitement par solvant et détergent ; 25 (iv) puis la soumettre à une chromatographie échangeuse d'anions, par exemple sur QSépharose ; (v) laver et éluer le Facteur H, généralement par un tampon de force ionique supérieure à celle du tampon d'équilibrage de la chromatographie échangeuse d'anions ; (vi) préparer un concentré de Facteur H. 30
- 8. Procédé selon l'une des revendications 1 à 7, comprenant en outre une étape de nanofiltration, de préférence sur un filtre de 20-15nm.
- 9. Préparation de Facteur H susceptible d'être obtenue par le procédé de l'une des 35 revendications 1 à 8.5
- 10. Préparation selon la revendication 9, caractérisée en ce que ladite préparation est sous forme lyophilisée.
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| MHATRE A ET AL: "Isolation of bovine complement factor H", VETERINARY IMMUNOLOGY AND IMMUNOPATHOLOGY, AMSTERDAM, NL LNKD- DOI:10.1016/0165-2427(87)90038-9, vol. 14, no. 4, 1 April 1987 (1987-04-01), pages 357 - 375, XP023686969, ISSN: 0165-2427, [retrieved on 19870401] * |
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