GR1011003B - Συμπληρωμα διατροφης για την αντιμετωπιση της απωλειας της οστικης πυκνοτητας (οστεοπενια) - Google Patents

Abstract

Η παρούσα εφεύρεση αναφέρεται σε φαρμακευτική σύνθεση ή σύνθεση συμπληρώματος διατροφής ή σύνθεση διατροφοφαρμάκου (nutraceuticals) για την αντιμετώπιση της απώλειας της οστικής πυκνότητας γενικά, και συγκεκριμένα η παρούσα εφεύρεση αναφέρεται σε φαρμακευτική σύνθεση ή συμπλήρωμα διατροφής που περιλαμβάνει μια θεραπευτικά αποτελεσματική ποσότητα κερσετίνης ή ένα φαρμακευτικά αποδεκτό παράγωγο αυτής σε συνδυασμό με μια θεραπευτικά αποτελεσματική ποσότητα ναρινγίνης ή ένα φαρμακευτικά αποδεκτό παράγωγο αυτής σε συνδυασμό με μια θεραπευτικά αποτελεσματική ποσότητα εσπεριδίνης ή ένα φαρμακευτικά αποδεκτό παράγωγο αυτής και τουλάχιστον μια άλλη ουσία όπως κιτρικό ασβέστιο και βιταμίνη D3 (χοληκαλσιφερόλη) ή ένα φαρμακευτικά αποδεκτό παράγωγο αυτού σε συνδυασμό με φρουκτο-ολιγοσακχαρίτες ή γαλακτο-ολιγοσακχαρίτες ή ινουλίνη για χρήση για την αντιμετώπιση της οστεοπόρωσης και μια διαδικασία για την παρασκευή της εν λόγω σύνθεσης.

Description

[0001] ΣΥΜΠΛΗΡΩΜΑ ΔΙΑΤΡΟΦΗΣ

[0003] ΓΙΑ ΤΗΝ ΑΝΤΙΜΕΤΩΠΙΣΗ ΤΗΣ ΑΠΩΛΕΙΑΣ ΤΗΣ ΟΣΤΙΚΗΣ

[0004] ΠΥΚΝΟΤΗΤΑΣ (ΟΣΤΕΟΠΕΝΙΑ)

[0006] ΠΕΡΙΓΡΑΦΗ

[0007] ΤΕΧΝΙΚΟ ΠΕΔΙΟ ΤΗΣ ΕΦΕΥΡΕΣΗΣ

[0009] Η παρούσα εφεύρεση αναφέρεται σε φαρμακευτική σύνθεση ή σύνθεση συμπληρώματος διατροφής ή σύνθεση διατροφοφαρμάκου (nutraceutical) για την αντιμετώπιση της οστεοπόρωσης γενικά, και συγκεκριμένα η παρούσα εφεύρεση αναφέρεται σε φαρμακευτική σύνθεση ή συμπλήρωμα διατροφής ή διατροφοφάρμακο (nutraceutical) που περιλαμβάνει μια θεραπευτικά αποτελεσματική ποσότητα κερσετίνης ή ένα φαρμακευτικά αποδεκτό παράγωγο αυτής σε συνδυασμό με μια θεραπευτικά αποτελεσματική ποσότητα εσπεριδίνης ή ένα φαρμακευτικά αποδεκτό παράγωγο αυτής σε συνδυασμό με μια θεραπευτικά αποτελεσματική ποσότητα ναρινγίνης ή ένα φαρμακευτικά αποδεκτό παράγωγο αυτής σε συνδυασμό με μια θεραπευτικά αποτελεσματική ποσότητα κιτρικού ασβεστίου ή ένα φαρμακευτικά αποδεκτό παράγωγο αυτού σε συνδυασμό με μια θεραπευτικά αποτελεσματική ποσότητα βιταμίνης D3 (χοληκαλσιφερόλη) ή ένα φαρμακευτικά αποδεκτό παράγωγο αυτού σε συνδυασμό με φρουκτο-ολιγοσακχαρίτες ή γαλακτο-ολιγοσακχαρίτες ή ινουλίνη για χρήση για την αντιμετώπιση της απώλειας της οστικής πυκνότητας, και μια διαδικασία για την παρασκευή της εν λόγω σύνθεσης.

[0011] ΠΡΟΗΓΟΥΜΕΝΗ ΣΤΑΘΜΗ ΤΗΣ ΤΕΧΝΙΚΗΣ

[0013] Η οστεοπόρωση αποτελεί μια σοβαρή μεταβολική νόσο του μυοσκελετικού συστήματος που χαρακτηρίζεται από την προοδευτική απώλεια της οστικής πυκνότητας και την αλλοίωση της μικροαρχιτεκτονικής των οστών. Η πάθηση αυτή αποτελεί μια σοβαρή απειλή για την παραγωγικότητα και την ποιότητα ζωής των ατόμων, καθώς συνδέεται με αυξημένο κίνδυνο οστεοπορωτικών καταγμάτων, νοσηρότητας και θνησιμότητας.

[0015] Τα συμπτώματα της οστεοπόρωσης συνήθως εμφανίζονται μετά από κάποιο κάταγμα, όπως πόνος στην οσφυϊκή μοίρα, απώλεια του ύψους του ατόμου, και αλλαγές στη στάση του σώματος. Συχνά, επηρεάζει μετεμμηνοπαυσιακές γυναίκες και άτομα μεγαλύτερης ηλικίας (άνω των 50 ετών), αλλά μπορεί να επηρεάσει και άλλες ηλικιακές ομάδες.

[0017] Η πρόληψη και η θεραπεία της οστεοπόρωσης είναι δυνατή, αλλά δεν υπάρχουν αρκετοί βιοδείκτες και δεν γίνονται συχνοί προληπτικοί έλεγχοι.

[0018] Στην Ελλάδα το 2019, διαγνώστηκε από οστεοπόρωση ένα σύνολο 684.000 ατόμων, εκ των οποίων το 78,9% ήταν γυναίκες, ενώ για την ίδια χρονιά καταγράφτηκαν περίπου 99.000 νέα κατάγματα. Στην Ευρώπη, καταγράφονται ετησίως περισσότερα από 4,3 εκατομμύρια κατάγματα ενώ οι δαπάνες υγείας υπερβαίνουν τα 56 δισεκατομμύρια ευρώ. Η πιθανότητα κατάγματος σε άτομα άνω των 50 ετών για το υπόλοιπο της ζωής τους έχει υπολογισθεί ότι είναι 8,0% στους άντρες και 15,8% στις γυναίκες. Τα κατάγματα αυτά οδηγούν σε ένα πενταετές ποσοστό θνησιμότητας της τάξης του 25%, το οποίο αυξάνεται έως και 50% σε περίπτωση επανακατάγματος. Ο εκτιμώμενος ετήσιος αριθμός θανάτων που σχετίζονται με ένα περιστατικό κατάγματος είναι 130 ανά 100.000 άτομα άνω των 50 ετών. Ωστόσο, η οστεοπόρωση παραμένει σε μεγάλο βαθμό μία νόσος υποδιαγνωσμένη και υποθεραπευμένη, με εκτιμώμενο ποσοστό 71% των γυναικών στην Ευρώπη που βρίσκονται σε υψηλό κίνδυνο να μη λαμβάνουν προληπτική αγωγή.

[0020] Οι μηχανισμοί που εμπλέκονται στην οστεοπόρωση αλληλοεπικαλύπτονται μεταξύ τους, καθώς αρκετές ουσίες δρουν ως σηματοδοτικά μόρια που εμπλέκονται σε περισσότερα από ένα μονοπάτι. Συνοπτικά οι μηχανισμοί είναι οι ακόλουθοι:

[0021] 1. Το κομβικό κυτταρικό μονοπάτι RANK/RANKL/ OPG για το μεταβολισμό των οστών. Ο υποδοχέας ενεργοποίησης του πυρηνικού παράγοντα-κΒ (receptor activator for nuclear factor κ-Β ligand - RANKL) και η οστεοπροτεγερίνη (osteoprotegerin - OPG) είναι πρωτεΐνες που ανήκουν στην οικογένεια TNF (Tumor Necrosis Factor) και εκκρίνονται από τους οστεοβλάστες για τη ρύθμιση της οστικής απορρόφησης.

[0022] 2. Ένα δεύτερο μονοπάτι που είναι απαραίτητο για τη ρύθμιση της διαφοροποίησης και του πολλαπλασιασμού των οστεοκλαστών και την αναδόμηση των οστών είναι αυτό της πρωτεϊνικής κινάσης ενεργοποιημένης από μιτογόνο (mitogen activated protein kinase - ΜΑΡΚ).

[0023] 3. Οι Οστικές Μορφογενετικές Πρωτεΐνες (Bone morphogenetic proteins - BMPs) αποτελούν ένα κρίσιμο κυτταρικό μονοπάτι για τη ρύθμιση της ομοιόστασης των οστών. Οι BMPs είναι κυτοκίνες που ανήκουν στην υπεροικογένεια του αυξητικού παράγοντα μετασχηματισμού β (Transforming growth factor-β -TGF-β) και συντονίζουν τις αναβολικές και καταβολικές διεργασίες που επηρεάζουν τη διαφοροποίηση και τη δραστηριότητα των οστεοβλαστών και των οστεοκλαστών.

[0024] 4. Ουσίες που είναι επίσης σημαντικές για τη διατήρηση της οστική πυκνότητας αποτελούν τα οιστρογόνα. Όταν οι γυναίκες περνούν από την εμμηνόπαυση, τα επίπεδα των οιστρογόνων μειώνονται με αποτέλεσμα να μειώνεται η οστική πυκνότητα.

[0025] 5. Ένας άλλος παράγοντας που έχει συνδεθεί με την οστεοπόρωση είναι το οξειδωτικό στρες που προκαλείται από την υπερπαραγωγή δραστικών μορφών οξυγόνου (reactive oxygen species - ROS) που δεν εξισορροπείται από επαρκές επίπεδο αντιοξειδωτικών. Αλλαγές στις ROS ή/και στα αντιοξειδωτικά συστήματα εμπλέκονται στην παθογένεση της οστικής απώλειας.

[0026] 6. Η παραγωγή οστεοβλαστών ελέγχεται επίσης από ορμονικούς και τοπικούς παράγοντες του κυτταρικού μονοπατιού Wnt/b-catenin που παίζει κρίσιμο ρόλο στη συγκέντρωση, τη συντήρηση και τη ρύθμιση της οστικής μάζας.

[0028] Φαρμακευτική θεραπεία για την οστεοπόρωση ακολουθούν όσα άτομα πληρούν κάποια συγκεκριμένα διαγνωστικά κριτήρια (σπονδυλικό ή ισχιακό κάταγμα, διαγνωστικές μετρήσεις οστικής πυκνότητας, κ.α.). Τα πρώτης γραμμής χρησιμοποιούμενα φάρμακα που χορηγούνται για τη θεραπεία της οστεοπόρωσης (συνήθως με συγχορήγηση βιταμίνης D και ασβεστίου) είναι τα διφωσφονικά (αλενδρονάτη, ρισεδρονάτη, ζολεδρονικό οξύ) και η δενοσουμάμπη. Στην περίπτωση που οι ασθενείς δεν ανταποκρίνονται, χρησιμοποιούνται η ραλοξιφένη, η τεριπαρατίδη και η ρομοσοζουμάμπη. Η αποτελεσματικότητα όμως αυτών των θεραπευτικών προσεγγίσεων και η ανταπόκριση των ασθενών διαφέρουν ανάλογα με τον κάθε ασθενή, δημιουργώντας την ανάγκη για πιο εξατομικευμένες προσεγγίσεις.

[0030] Μεταξύ των διαθέσιμων μορφών ασβεστίου, το κιτρικό ασβέστιο απορροφάται κατά 25% περισσότερο σε σχέση με το ανθρακικό ασβέστιο, ανεξάρτητα ως προς τη λήψη γεύματος, αποτελώντας την ιδανική μορφή για λήψη σε οποιασδήποτε στιγμή. Η συγχορήγηση της βιταμίνης D3 βοηθά στην αποτελεσματικότερη απορρόφηση του ασβεστίου, ενώ έχει και άμεση δράση στους οστεοβλάστες και τους οστεοκλάστες, διατηρώντας την ισορροπία μεταξύ τους, επηρεάζοντας θετικά την οστική πυκνότητα και ποιότητα και μειώνοντας τον κίνδυνο των σπονδυλικών καταγμάτων και των πτώσεων στους ηλικιωμένους.

[0032] Πρόσφατες ερευνητικές εξελίξεις δείχνουν ότι η εντερική μικροχλωρίδα μπορεί να αποτελέσει σημαντικό παράγοντα στρατηγικής αντιμετώπισης της οστεοπόρωσης καθώς επηρεάζει τον οστικό μεταβολισμό μέσω διάφορων οδών, συμβάλλοντας έτσι ενεργά στην πρόληψη και θεραπευτική διαχείριση της οστεοπόρωσης.

[0034] Η δυσβίωση του εντερικού μικροβιώματος και η απορρέουσα φλεγμονή οδηγεί στην παραγωγή προ-φλεγμονωδών κυτταροκινών, προάγοντας την ενεργοποίηση των οστεοκλασιών κι έτσι, την οστική απορρόφηση, αλλά και την αναστολή της οστικής ανακατασκευής, ευνοώντας την καταστροφή της οστικής μάζας και την οστεοπόρωση.

[0035] Κατά την εμμηνόπαυση, η ελάττωση της παραγωγής των οιστρογόνων οδηγεί σε φλεγμονώδεις καταστάσεις που είναι εν μέρει υπεύθυνες για την οστεοπόρωση. Συγκεκριμένα, μειωμένα επίπεδα οιστρογόνων οδηγούν σε συσσώρευση ελεύθερων ριζών (ROS) στα κύτταρα του μυελού των οστών, με αποτέλεσμα την ελαττωμένη οστεοβλαστογέννεση και την ταυτόχρονη ενεργοποίηση της οστεοκλαστογένεσης.

[0036] Συνεπώς η ανθρώπινη εντερική μικροχλωρίδα έχει προταθεί ως ο νέος θεραπευτικός στόχος για την οστεοπόρωση, καθώς:

[0037] • Επιδρά στον μεταβολισμό των οστών μέσω της λήψης πρε- και προβιοτικών • Μαζί με επαρκή επίπεδα οιστρογόνων, συμβάλλει στην ακεραιότητα του εντερικού επιθηλιακού φραγμού έναντι παθογόνων μικροβίων και διατηρεί την ισορροπία των οστεοβλαστών/οστεοκλαστών

[0038] • Ρυθμίζει την οστική παραγωγή και την οστική μάζα, επηρεάζοντας την διαφοροποίηση των οστεοκλασιών, καταστέλλοντας την οστεοκλαστογένεση και συμβάλλοντας ταυτόχρονα στην απόπτωση των οστεοκλαστών

[0039] • Διαδραματίζει σημαντικό ρόλο στην παραγωγή της περιφερικής σεροτονίνης, που επηρεάζει την υγεία των οστών

[0041] Τα πρεβιοτικά αποτελούν ένα υπόστρωμα που χρησιμοποιείται επιλεκτικά από τους μικροοργανισμούς του οργανισμού-ξενιστή, προάγοντας την υγεία του. Πιο συγκεκριμένα, πρόκειται για άπεπτες χημικές ενώσεις, οι οποίες μεταβολίζονται επιλεκτικά από την εντερική μικροχλωρίδα και ρυθμίζουν τη σύσταση, αλλά και τη δραστηριότητα των ωφέλιμων εντερικών βακτηρίων, ενισχύοντας τη συνολική υγεία του οργανισμού. Συνοπτικά, τα πρεβιοτικά, όντας ανθεκτικά της πέψης (στον στόμαχο και το ανώτερο τμήμα λεπτού εντέρου), υφίστανται μικροβιακή ζύμωση και υδρόλυση (στο κατώτερο τμήμα λεπτού εντέρου και το παχύ έντερο), ευνοώντας την ανάπτυξη ωφέλιμων εντερικών μικροβίων.

[0043] Η λήψη πρεβιοτικών οδηγεί στην παραγωγή λιπαρών οξέων βραχείας αλυσίδας (SCFAs) ως προϊόντα της μικροβιακής ζύμωσης. Τα SCFAs, όπως το βουτυρικό και το οξικό οξύ, συντελούν στην αυξημένη απορρόφηση των ιόντων του ασβεστίου και κατά συνέπεια, στην αυξημένη βιοδιαθεσιμότητά τους, μέσω των ακόλουθων μηχανισμών:

[0045] • Ελαττώνουν το pH στο περιβάλλον του εντέρου, με αποτέλεσμα την αυξημένη διαλυτοποίηση του ασβεστίου

[0047] • Επιδρούν σε σηματοδοτικά μονοπάτια, που επάγουν δομικές αλλαγές στο επιθήλιο του εντέρου, οδηγώντας σε μεγαλύτερη επιφάνεια επαφής και κατά συνάπεια αυξημένη απορρόφηση ασβεστίου

[0049] Χαρακτηριστικά παραδείγματα τέτοιων πρεβιοτικών αποτελούν οι φρουκτοολιγοσακχαρίτες (FOS) που έχουν χαρακτηριστεί ως οι πλέον υποσχόμενοι ολιγοσακχαρίτες, μαζί με τους γαλακτο-ολιγοσακχαρίτες (GOS), και την ινουλίνη, όσον αφορά την καλύτερη απορρόφηση του ασβεστίου και την υγεία των οστών.

[0050] Οι FOS εντοπίζονται σε πολλά φρούτα και λαχανικά, οι GOS, απομονώνονται από το γάλα και η ινουλίνη αποτελεί μια διαλυτή φυτική ίνα και προέρχεται κυρίως από ένα είδος ραδικιού αλλά περιέχεται επίσης σε φρούτα και λαχανικά.

[0052] Τις περισσότερες φορές, ωστόσο, η προσλαμβανόμενη ποσότητα μέσω της τροφής δεν επαρκεί, καθώς τα περισσότερα πρεβιοτικά συνίσταται να λαμβάνονται σε μεγαλύτερες ποσότητες (τουλάχιστον 2-3 g την ημέρα για να επιφέρουν θετικά αποτελέσματα).

[0054] Η κερσετίνη είναι ένα φλαβονοειδές το οποίο απαντάται κυρίως σε φρούτα και λαχανικά. Διαθέτει ένα ευρύ φάσμα βιολογικών δραστηριοτήτων, και αποτελεί μία από τις σημαντικότερες πολυφαινόλες με ευεργετική δράση στην ανθρώπινη υγεία, ενώ έχει διαπιστωθεί μέσω in vivo μελετών σε ζώα ότι ασκεί προστατευτικό ρόλο στην οστεοπόρωση. Η κερσετίνη αναστέλλει την οστεοκλαστογένεση μέσω του RANKL μονοπατιού, την απόπτωση των οστεοβλάστων και το οξειδωτικό στρες, ενώ παράλληλα προωθεί την οστεογένεση, την αγγειογένεση, την απόπτωση των λιποκυττάρων και των οστεοκλάστων. Επιπλέον η κερσετίνη εμπλέκεται στο ΜΑΡΚ μονοπάτι μέσω του μεταβολισμού των οστών, συνεισφέροντας εν τέλει σημαντικά στην προστασία των οστών.

[0056] Στην κατηγορία των φλαβονοειδών ανήκει και ο γλυκοζίτης ναρινγίνη, και απαντάται μαζί με τον άγλυκο μεταβολίτη ναρινγενίνη στους καρπούς των φυτών του γένους Citrus. Στη βιοδραστικότητα της ναρινγίνης, προστίθεται και η ικανότητα της ναρινγίνης να προάγει την οστική ανακατασκευή μέσω της αγγειογένεσης, καθώς εμπλέκεται στο VEGF/VEGFR-2 μονοπάτι. Επιπλέον μελέτες έχουν δείξει ότι η ναρινγίνη προάγει τη διαφοροποίηση και τον πολλαπλασιασμό διαφόρων τύπων κυττάρων ενισχύοντας έτσι την οστική πυκνότητα. Η ναρινγίνη προάγει επίσης την απόπτωση των οστεοκλαστών μέσω της αποπτωτικής οδού και των μιτοχονδρίων, αναστέλλοντας έτσι την οστική απώλεια, επιδεικνύοντας σημαντική αντιοστεοπορωτική φαρμακολογική ιδιότητα.

[0058] Η ναρινγίνη έχει αποδειχθεί ότι μπορεί επίσης να επηρεάσει το εντερικό μικροβίωμα καθώς αλληλοεπιδρά με τη μικροχλωρίδα του εντέρου και να συμβάλλει στη λειτουργία του εντερικού φραγμού και στην εντερική φλεγμονή, επιδρώντας εν τέλει προστατευτικά στην οστεοπόρωση.

[0060] Σύμφωνα με κλινικές μελέτες σε ασθενείς με οστεοπόρωση και άλλα προβλήματα σκελετικής υγείας, στο εντερικό τους μικροβίωμα βρέθηκαν αυξημένοι βακτηριακοί πληθυσμοί οι οποίοι σχετίζονται με την οστεοπόρωση. Η ναρινγίνη, ανήκει στα φλαβονοειδή, στα οποία μέσω κλινικών δοκιμών απέδειξε την προστατευτική δράση της έναντι στην οστεοπόρωση σε μετεμμηνοπαυσιακές γυναίκες.

[0062] Ένα επιπλέον γλυκοζίτης που ανήκει στην οικογένεια των φλαβονοειδών είναι το βιοφλαβονοειδές εσπεριδίνη. Μελέτες έχουν δείξει ότι η εσπεριδίνη συνδέεται με την οστεογένεση και την ποιότητα της μήτρας του κολλαγόνου. Αυτό το φυσικό συστατικό έχει ρόλο στη ρύθμιση του σχηματισμού ανοργανοποιημένου ιστού, επηρεάζοντας τόσο τη διαφοροποίηση των οστεοβλαστικών κυττάρων όσο και την οργάνωση της οστικής μήτρας. Ως εκ τούτου, η εσπεριδίνη αναδεικνύεται ως πιθανό συμπλήρωμα σε αναγεννητικές θεραπείες οστών.

[0063] Στην παγκόσμια αγορά, κυκλοφορούν πολλά συμπληρώματα διατροφής βασισμένα σε φυτοχημικά για διάφορες χρήσεις στις αγορές της Ευρώπης και των Ηνωμένων Πολιτειών, ενώ μόνο το 4% αυτών χρησιμοποιούνται σε συμπληρώματα διατροφής που εστιάζουν στην υγεία των οστών.

[0065] Επομένως, παρά την πρόοδο στην κατανόηση της παθοφυσιολογίας της οστεοπόρωσης, και την ανάπτυξη νέων θεραπευτικών πρωτοκόλλων, υπάρχει ανάγκη για ένα νέο συμπλήρωμα διατροφής που να είναι αποτελεσματικό και καλά ανεκτό χωρίς ανεπιθύμητες παρενέργειες.

[0067] ΠΕΡΙΛΗΨΗ ΤΗΣ ΕΦΕΥΡΕΣΗΣ

[0069] Επομένως, αντικείμενο της παρούσας εφεύρεσης είναι η παροχή μιας φαρμακευτικής σύνθεσης ή συμπληρώματος διατροφής ή διατροφοφαρμάκου (nutraceutical) για την αύξηση της οστικής πυκνότητας, η οποία ξεπερνά τα προβλήματα της προηγούμενης στάθμης της τεχνικής.

[0071] Ένα άλλο αντικείμενο της παρούσας εφεύρεσης είναι η παροχή μιας φαρμακευτικής σύνθεσης ή συμπληρώματος διατροφής ή διατροφοφαρμάκου (nutraceutical) για τη διατήρηση της οστικής πυκνότητας, η οποία είναι ασφαλής και αποτελεσματική χωρίς παρενέργειες και με καλές φαρμακοτεχνικές ιδιότητες.

[0073] Σύμφωνα με τα ανωτέρω αντικείμενα της παρούσας εφεύρεσης, παρέχεται μια φαρμακευτική σύνθεση ή σύνθεση συμπληρώματος διατροφής ή σύνθεση διατροφοφαρμάκου (nutraceutical) που περιλαμβάνει μια θεραπευτικά αποτελεσματική ποσότητα κερσετίνης ή ένα φαρμακευτικά αποδεκτό παράγωγο αυτής σε συνδυασμό με μια θεραπευτικά αποτελεσματική ποσότητα ναρινγίνης ή ένα φαρμακευτικά αποδεκτό παράγωγο αυτής σε συνδυασμό με μια θεραπευτικά αποτελεσματική ποσότητα εσπεριδίνης ή ένα φαρμακευτικά αποδεκτό παράγωγο αυτής σε συνδυασμό με μια θεραπευτικά αποτελεσματική ποσότητα κιτρικού ασβεστίου ή ένα φαρμακευτικά αποδεκτό παράγωγο αυτού σε συνδυασμό με μια θεραπευτικά αποτελεσματική ποσότητα βιταμίνης D3 (χοληκαλσιφερόλη) ή ένα φαρμακευτικά αποδεκτό παράγωγο αυτού σε συνδυασμό με φρουκτο-ολιγοσακχαρίτες ή γαλακτο-ολιγοσακχαρίτες ή ινουλίνη για χρήση για την αντιμετώπιση της απώλειας της οστικής πυκνότητας, και μια διαδικασία για την παρασκευή της εν λόγω σύνθεσης.

[0075] Άλλα αντικείμενα και πλεονεκτήματα της παρούσας εφεύρεσης θα αποκαλυφθούν στους ειδικούς εν όψει της ακόλουθης λεπτομερούς περιγραφής.

[0077] ΑΝΑΛΥΤΙΚΗ ΠΕΡΙΓΡΑΦΗ ΤΗΣ ΕΦΕΥΡΕΣΗΣ

[0079] Ανακαλύφθηκε απροσδόκητα ότι το αντικείμενο της παρούσας εφεύρεσης επιτυγχάνεται με τη χρήση κερσετίνης ή ένα φαρμακευτικά αποδεκτό παράγωγο αυτής, σε συνδυασμό με τη ναρινγίνη ή ένα φαρμακευτικά αποδεκτό παράγωγο αυτής, σε συνδυασμό με τη εσπεριδίνη ή ένα φαρμακευτικά αποδεκτό παράγωγο αυτής, λόγω του προστατευτικού ρόλου τους στην οστεοπόρωση, με στόχο την αντιμετώπιση της απώλειας της οστικής μάζας.

[0081] Η κερσετίνη, η ναρινγίνη και η εσπεριδίνη που επιλέχθηκαν έχουν προστατευτικό ρόλο στην οστεοπόρωση. Ως εκ τούτου, υποστηρίζουν αντιμετώπιση της απώλειας της οστικής μάζας.

[0083] Η κερσετίνη είναι μια χημική ένωση φυτικής προέλευσης που ανήκει στα φλαβονοειδή και βρίσκεται σε υψηλές συγκεντρώσεις σε πολλά λαχανικά και φρούτα.

[0085] Υπάρχουν διάφοροι μηχανισμοί, οι οποίοι εξηγούν τη δράση της κερσετίνης στην οστεοπόρωση.

[0087] Η σύνθεση της παρούσας εφεύρεσης περαιτέρω περιλαμβάνει ναρινγίνη η οποία είναι ένας γλυκοζίτης και απαντάται μαζί με τον μεταβολίτη ναρινγενίνη στους καρπούς των φυτών του γένους Citrus.

[0089] Η σύνθεση της παρούσας εφεύρεσης περαιτέρω περιλαμβάνει έναν επιπλέον γλυκοζίτη, την εσπεριδίνη η οποία συνδέεται με την οστεογένεση και την ποιότητα της μήτρας του κολλαγόνου.

[0091] Σε μία πραγματοποίηση, η σύνθεση σύμφωνα με την παρούσα εφεύρεση περιλαμβάνει, εκτός από τα δραστικά συστατικά κερσετίνη, εσπεριδίνη και ναρινγίνη στη μορφή εκχυλισμάτων τους, βιταμίνες του συμπλέγματος D, κιτρικό ασβέστιο και πρεβιοτικά. Η προσθήκη του κιτρικού ασβεστίου επιλέχθηκε σε περιεκτικότητα μεγαλύτερη του 50% της συνιστώμενης ημερήσιας πρόσληψης ασβεστίου για ενήλικες.

[0093] Επιπλέον, η σύνθεση της παρούσας εφεύρεσης μπορεί να περιέχει περισσότερες από μία βιταμίνες. Για παράδειγμα, η σύνθεση μπορεί να περιέχει δύο διαφορετικές βιταμίνες. Παρομοίως, η σύνθεση της παρούσας εφεύρεσης μπορεί να περιέχει περισσότερα από ένα ανόργανα άλατα. Για παράδειγμα, η σύνθεση της παρούσας εφεύρεσης μπορεί να περιέχει δύο διαφορετικά μέταλλα, όπως ψευδάργυρο και μαγνήσιο.

[0095] Στη σύνθεση σύμφωνα με την παρούσα εφεύρεση, το κιτρικό ασβέστιο περιλαμβάνεται σε μια ποσότητα κατά βάρος μεταξύ 4% και 15% του συνολικού βάρους της σύνθεσης, κατά προτίμηση μεταξύ 6% και 13%, η βιταμίνη D περιλαμβάνεται σε μια ποσότητα κατά βάρος μεταξύ 0,001% και 0,008% του συνολικού βάρους της σύνθεσης, κατά προτίμηση μεταξύ 0,002% και 0,006%, η κερσετίνη περιλαμβάνεται σε μια ποσότητα κατά βάρος μεταξύ 1% και 10% του συνολικού βάρους της σύνθεσης, κατά προτίμηση μεταξύ 4% και 8%, η ναρινγίνη υπάρχει σε μια ποσότητα κατά βάρος που περιλαμβάνεται μεταξύ 1% και 10% του συνολικού βάρους της σύνθεσης, κατά προτίμηση μεταξύ 2% και 6%, η εσπεριδίνη υπάρχει σε μια ποσότητα κατά βάρος που περιλαμβάνεται μεταξύ 1% και 10% του συνολικού βάρους της σύνθεσης, κατά προτίμηση μεταξύ 2% και 6%, οι φρουκτο-ολιγοσακχαρίτες ή οι γαλακτο-σακχαρίτες ή η ινουλίνη περιλαμβάνεται σε μια ποσότητα κατά βάρος μεταξύ 60% και 90% του συνολικού βάρους της σύνθεσης, κατά προτίμηση μεταξύ 75% και 85%. Η σύνθεση της παρούσας εφεύρεσης μπορεί να περιέχει οποιαδήποτε ποσότητα βιταμινών και μετάλλων σύμφωνα με τη συνιστώμενη ημερήσια δόση (RDA).

[0097] Οι φαρμακευτικές συνθέσεις της παρούσας εφεύρεσης μπορεί επίσης να περιέχουν ένα ή περισσότερα πρόσθετα συστατικά που επιλέγονται από μια ευρεία ποικιλία εκδοχών. Σύμφωνα με τις επιθυμητές ιδιότητες της σύνθεσης, οποιοσδήποτε αριθμός συστατικών μπορεί να επιλεγεί, μόνος ή σε συνδυασμό, με βάση τις γνωστές χρήσεις τους στην παρασκευή συνθέσεων συμπληρωμάτων διατροφής.

[0099] Επιπλέον, οποιοδήποτε έκδοχο μπορεί προαιρετικά να προστεθεί στην παραπάνω σύνθεση, υπό την προϋπόθεση ότι είναι συμβατό με τα δραστικά συστατικά της σύνθεσης, προκειμένου να ξεπεραστούν προβλήματα που σχετίζονται με δυσμενή φαρμακοτεχνικά χαρακτηριστικά αυτών των ουσιών και προκειμένου να αυξηθεί η σταθερότητα του φαρμάκου και η διάρκεια ζωής του φαρμακευτικού προϊόντος.

[0101] Σε ορισμένες περιπτώσεις, η σύνθεση συμπληρώματος διατροφής της παρούσας εφεύρεσης μπορεί ουσιαστικά να είναι απαλλαγμένη από τεχνητά χρώματα, τεχνητές γεύσεις και χημικά συντηρητικά.

[0103] Η φαρμακευτική σύνθεση ή σύνθεση συμπληρώματος διατροφής ή σύνθεση διατροφοφαρμάκου (nutraceuticals) της παρούσας εφεύρεσης θα παρασκευαστεί με συμβατικές μεθόδους για τη λήψη φακελιδίων με άμεση απελευθέρωση που είναι πολύ γνωστά στο έμπειρο άτομο στη φαρμακευτική τεχνολογία. Τα φακελίδια της παρούσας εφεύρεσης μπορούν να παρασκευαστούν με ανάμιξη των δραστικών ουσιών με ένα ή περισσότερα φαρμακευτικά αποδεκτά συστατικά.

[0105] Όλα τα ποσοστά που αναφέρονται εδώ είναι ποσοστά βάρους με βάση το συνολικό βάρος της σύνθεσης, εκτός εάν αναφέρεται διαφορετικά.

[0107] Τα ακόλουθα παραδείγματα απεικονίζουν προτιμώμενες ενσωματώσεις σύμφωνα με την παρούσα εφεύρεση χωρίς να περιορίζουν το πεδίο ή το πνεύμα της εφεύρεσης: ΠΑΡΑΔΕΙΓΜΑΤΑ

[0109] Παράδειγμα 1: Σύνθεση Συμπληρώματος Διατροφής 1 της παρούσας εφεύρεσης Η προτιμώμενη σύνθεση φαρμακευτικού ή συμπληρώματος διατροφής 1 σύμφωνα με την παρούσα εφεύρεση απεικονίζεται στον Πίνακα 1.

[0111] ΠΙΝΑΚΑΣ 1:Τιμές καθαρών βαρών των συστατικών

[0113]

[0116] Παράδειγμα 2: Σύνθεση Συμπληρώματος Διατροφής 2 της παρούσας εφεύρεσης Η προτιμώμενη σύνθεση φαρμακευτικού ή συμπληρώματος διατροφής 2 σύμφωνα με την παρούσα εφεύρεση απεικονίζεται στον Πίνακα 2.

[0118] ΠΙΝΑΚΑΣ 2:Τιμές καθαρών βαρών των συστατικών

[0120]

[0123] Παράδειγμα 3: Σύνθεση Συμπληρώματος Διατροφής 3 της παρούσας εφεύρεσης Η προτιμώμενη σύνθεση φαρμακευτικού ή συμπληρώματος διατροφής 3 σύμφωνα με την παρούσα εφεύρεση απεικονίζεται στον Πίνακα 3.

[0124] ΠΙΝΑΚΑΣ 3:Τιμές καθαρών βαρών των συστατικών

[0126]

[0129] Τα φακελίδια της παρούσας εφεύρεσης έχουν χωρητικότητα 5g. Τα βιοφλαβονοειδή κερσεντίνη, ναρινγίνη και εσπεριδίνη αφορούν τιτλοδοτημένα εκχυλίσματά τους.

[0131] Η κερσετίνη υποβλήθηκε σε in vitro πειράματα για να διαπιστωθεί η πρόσδεση της σε πρωτεΐνες του μονοπατιού ΜΑΡΚ. Η ενεργοποίηση αυτών των πρωτεϊνών προκαλείται από οστεοκλαστικούς παράγοντες, με τη φωσφωρυλίωσή τους να παίζει σημαντικό ρόλο στις διαδικασίες οστεοκλαστογένεσης, παραγωγής και διαφοροποίησης οστεοκλασιών, καθώς και στην απορρόφησή τους από το οστό. Λόγω αυτών των λειτουργιών, έχουν αναφερθεί πολλοί αναστολείς αυτών των κινασών στη βιβλιογραφία που μπορούν να αντιμετωπίσουν την οστεοπόρωση αλλά και κάποιους τύπους καρκίνου. Για τον πειραματικό προσδιορισμό της πρόσδεσης της κερσετίνης σε 5 πρωτεΐνες του μονοπατιού ΜΑΡΚ (p38b, p38d, ERK1, JNK2 και JNK3) εφαρμόστηκε η τεχνική KdELECT, που βασίζεται σε ένα πείραμα ανταγωνιστικής πρόσδεσης. Συγκεκριμένα το πείραμα μετρά ποσοτικά την ικανότητα μιας ένωσης να ανταγωνίζεται με ένα ακινητοποιημένο προσδέτη αναφοράς που συνδέεται στην εξεταζόμενη πρωτεΐνη, η οποία είναι επισημασμένη με DNA. Η ικανότητα της ένωσης να ανταγωνίζεται στη σύνδεση τον ακινητοποιημένο προσδέτη μετριέται μέσω ποσοτικής PCR εκμεταλλεύοντας την επισήμανση της πρωτεΐνης με DNA. Τα πειραματικά αποτελέσματα διενεργήθηκαν δύο φορές και με βάση αυτά η κερσετίνη φαίνεται να συνδέεται ισχυρά με τις πρωτεΐνες ERK1 (70 μΜ), JNK2 (11 μΜ) και JNK3 (3.6 μΜ). Τα αποτελέσματα από τη KdELECT για τη πρόσδεση του εξεταζόμενου φυτοχημικού με τις τρεις πρωτεΐνες-στόχους απεικονίζονται στην εικόνα 1. Αντίθετα, το φυτοχημικό δεν έδειξε δράση στις πρωτεΐνες p38b (>100 μΜ) και p38d (>100 μΜ) κάτι που αποδεικνύει ότι έχει μια μορφή εκλεκτικότητας για συγκεκριμένες πρωτεΐνες του μονοπατιού ΜΑΡΚ.

[0133] Εικόνα 1

[0135] Για την επιβεβαίωση της πρόσδεσης της κερσετίνης στις τρεις πρωτεΐνες, χρησιμοποιήθηκαν εργαλεία μοριακής μοντελοποίησης και χημειοπληροφορικής. Αρχικά αναζητήθηκαν οι κατάλληλες κρυσταλλικές δομές των ERK1 (4QTB), JNK2 (3NPC) και JNK3 (7KSI) και πραγματοποιήθηκαν σε αυτές προσομοιώσεις μοριακής πρόσδεσης με την κερσετίνη. Χρησιμοποιώντας ως αρχική δομή την πόζα κερσετίνης/πρωτεϊνών με τη χαμηλότερη ενέργεια πρόσδεσης, πραγματοποιήθηκαν 100 ns προσομοιώσεις Μοριακής Δυναμικής (ΜΔ) σε 3 επαναλήψεις με το λογισμικό GROMACS 2021. Μετά τις προσομοιώσεις ΜΔ, πραγματοποιήθηκε υπολογισμός της απόκλισης της μέσης τετραγωνικής τιμής (Root Mean Square Deviation - RMSD) της απόστασης του ατόμων του προσδέτη ως προς την αρχική τους διαμόρφωσή κατά τη διάρκεια της προσομοίωσης. Η κερσετίνη παρέμεινε σταθερά προοδεμένη στις 3 ΜΑΡΚ πρωτεΐνες καθ' όλη τη διάρκεια των προσομοιώσεων, όπως φαίνεται από τις τιμές RMSD του προσδέτη για την ERK1 (3.12 ± 0.53 A), JNK2 (3.42 ± 1.36 Α) και JNK3 (5.06 ± 0.59 Α). Τέλος, χρησιμοποιήθηκε το πρόγραμμα GetContacts (https://getcontacts.github.io/), το οποίο υπολογίζει τις αλληλεπιδράσεις πρωτεΐνηςμορίου σε κάθε στιγμιότυπο της προσομοίωσης και έπειτα υπολογίζει και την συχνότητά τους. Η κερσετίνη αλληλεπιδρά με συχνότητα μεγαλύτερη του 50% του χρόνου της προσομοίωσης με αρκετά αμινοξέα του κέντρου πρόσδεσης στις πρωτεΐνες ERK 1 , JNK2 και JNK3. Οι πιο συχνές αλληλεπιδράσεις της κερσετίνης με τα αμινοξέα των τριών πρωτεϊνών αναφέρονται στον Πίνακα 4, Πίνακα 5 και Πίνακα 6 για τις ERK1, JNK2 και JNK3 αντίστοιχα.

[0137] Πίνακας 4: Συχνότητα αλληλεπιδράσεων κερσετίνης με τα αμινοξέα της ERK1

[0140]

[0141]

[0143] Πίνακας 5: Συχνότητα αλληλεπιδράσεων κερσετίνης με τα αμινοξέα της JNK2

[0145]

[0147] Πίνακας 6: Συχνότητα αλληλεπιδράσεων κερσετίνης με τα αμινοξέα της JNK3

[0148]

[0149]

[0152] Παρόμοια υπολογιστική διαδικασία πραγματοποιήθηκε και για τη διερεύνηση του μηχανισμού δράσης της ναρινγίνης στην πρωτεΐνη p38b. Επιλέξαμε την κρυσταλλική δομή 3GP0 και πραγματοποιήσαμε υπολογισμούς μοριακής πρόσδεσης της πρωτεΐνης με τη ναρινγίνη για την εύρεση της χαμηλότερης ενεργειακής πόζας συμπλόκου πρωτεΐνης-προσδέτη. Στη συνέχεια, χρησιμοποιώντας ως αρχική δομή αυτήν την πόζα, πραγματοποιήθηκαν 100 ns προσομοιώσεις ΜΔ σε 3 επαναλήψεις. Η ναρινγίνη παρέμεινε σταθερά συνδεδεμένη στην p38b κατά τη διάρκεια των ΜΔ (RMSD = 2.40 ± 0.20 Α) και πραγματοποίησε αρκετές αλληλεπιδράσεις με τα αμινοξέα του κέντρου πρόσδεσης της πρωτεΐνης (Πίνακας 7).

[0154] Πίνακας 7: Συχνότητα αλληλεπιδράσεων ναρινγίνης με τα αμινοξέα της p38b

[0157]

[0158]

[0161] Τέλος, και για τα δύο μόρια εφαρμόστηκε ένας αλγόριθμος Μηχανικής Μάθησης που προβλέπει αν ένα φάρμακο επηρεάζει την ανάπτυξη 40 στελεχών του εντερικού μικροβιώματος. Το μοντέλο πρόβλεψης παίρνει σαν είσοδο την χημική δομή ενός φαρμάκου και σαν έξοδο δίνει μια πρόβλεψη απουσίας ή παρουσίας αλληλεπίδρασης του φαρμάκου με καθένα από τα 40 στελέχη του εντερικού μικροβιώματος. Η ακρίβεια πρόβλεψης του συγκεκριμένου μοντέλου είναι 80%. Από τα αποτελέσματα του μοντέλου πρόβλεψης (Πίνακας 8) φαίνεται ότι η κερσετίνη και ναρινγίνη αναστέλλουν τη δράση 22 και 16 βακτηριακών στελεχών αντίστοιχα εκ των οποίων τα 8 και 4 αντίστοιχα έχει φανεί βιβλιογραφικά ότι ενισχύουν την οστεοπόρωση.

[0163] Πίνακας 8: Συνολικός αριθμός των βακτηριακών στελεχών που επηρεάζουν κερσετίνη και ναρινγίνη καθώς και αριθμός στελεχών που έχουν αρνητική επίδραση στην οστεοπόρωση.

[0166]

[0169] Η φαρμακευτική σύνθεση ή σύνθεση συμπληρώματος διατροφής ή σύνθεση διατροφοφαρμάκου (nutraceuticals) της παρούσας εφεύρεσης παρασκευάστηκε σύμφωνα με την ακόλουθη διαδικασία παρασκευής:

[0171] Όλα τα συστατικά ζυγίστηκαν και οι μεμονωμένες δραστικές ουσίες και εκχυλίσματα τοποθετήθηκαν σε δοχείο ανάδευσης μαζί με τα έκδοχα όπως συνδετικό, πληρωτικό κ.λπ. μέχρι πλήρους ομογενοποίησης. Το μίγμα χρησιμοποιήθηκε για πλήρωση των φακελιδίων. Τα φακελίδια στη συνέχεια συσκευάζονται ενώ πραγματοποιείται και ποιοτικός έλεγχος.

[0173] Όλες οι δοκιμές πραγματοποιήθηκαν σύμφωνα με την Ευρωπαϊκή Φαρμακοποιία και ήταν εντός των προδιαγραφών.

[0174] Ένα άλλο αντικείμενο της παρούσας εφεύρεσης ήταν η παρασκευή μιας φαρμακευτικής σύνθεσης που είναι σταθερή για μεγάλο χρονικό διάστημα αποθήκευσης.

[0176] Η φαρμακευτική ή σύνθεση συμπληρώματος διατροφής ή σύνθεση διατροφοφαρμάκου (nutraceuticals) της παρούσας εφεύρεσης είναι ειδικά σχεδιασμένη για να υποστηρίζει ασθενείς που πάσχουν από οστεοπόρωση και βρίσκονται σε αρχικά ή προχωρημένα στάδια, σε συνδυασμό ή μη με άλλη φαρμακευτική αγωγή.

[0178] Το πλεονέκτημα της παρούσας εφεύρεσης έγκειται στη δράση των φυσικών συστατικών και συγκεκριμένα (α) της κερσετίνης, της ναρινγίνης και της εσπεριδίνης που δρουν συνεργιστικά - συμπληρωματικά στους μηχανισμούς της οστικής ανακατασκευής, (β) της βιταμίνης D3 του κιτρικού ασβεστίου και των πρεβιοτικών που δρουν συνεργιστικά - συμπληρωματικά στην απορρόφηση του ασβεστίου και την οστική ανακατασκευή.

[0180] Το προϊόν της παρούσας εφεύρεσης, με το συνδυασμό των συστατικών του, δεν έχει άμεσο ανταγωνισμό στη αγορά. Τα περισσότερα διατροφικά συμπληρώματα για την οστεοπόρωση περιέχουν ως βάση τα συστατικά ασβέστιο και βιταμίνη D3, μέταλλα και ιχνοστοιχεία και συνδυασμό αυτών.

[0182] Ενώ η παρούσα εφεύρεση έχει περιγράφει σε σχέση με τις συγκεκριμένες υλοποιήσεις, θα είναι προφανές στους έμπειρους της τέχνης ότι μπορούν να γίνουν διάφορες αλλαγές και τροποποιήσεις στην εφεύρεση χωρίς απόκλιση από το πνεύμα και το πεδίο αυτής, όπως ορίζεται στις συνημμένες αξιώσεις.

Claims (11)

1. ΑΞΙΩΣΕΙΣ

1. Φαρμακευτική σύνθεση ή σύνθεση συμπληρώματος διατροφής ή σύνθεση διατροφοφαρμάκου (nutraceuticals) που περιλαμβάνει μία θεραπευτικώς αποτελεσματική ποσότητα κερσετίνης ή φαρμακευτικώς αποδεκτό παράγωγο αυτής, και μία θεραπευτικώς αποτελεσματική ποσότητα ναρινγίνης ή φαρμακευτικώς αποδεκτό παράγωγο αυτής, και μία θεραπευτικώς αποτελεσματική ποσότητα εσπεριδίνης ή φαρμακευτικώς αποδεκτό παράγωγο αυτής, και τουλάχιστον μία πρόσθετη ουσία, όπως βιταμίνη D ή και φρουκτοολιγοσακχαρίτες (FOS) & γαλακτο-ολιγοσακχαρίτες (GOS) και ινουλίνη για την ενίσχυση της απορρόφησης του ασβεστίου αντιμετώπιση της απώλειας οστικής μάζας.

2. Η φαρμακευτική σύνθεση ή σύνθεση συμπληρώματος διατροφής ή σύνθεση διατροφοφαρμάκου σύμφωνα με την αξίωση 1, όπου η αναλογία κερσετίνης προς ναρινγίνης και προς εσπεριδίνης είναι από 1: 0.5 έως 1: 1.5, κατά προτίμηση από 1 : 1 έως 1 : 3 και πιο προτιμότερο 1: 1.

3. Η φαρμακευτική σύνθεση ή σύνθεση συμπληρώματος διατροφής ή σύνθεση διατροφοφαρμάκου σύμφωνα με την αξίωση 1 ή 2, όπου η εν λόγω τουλάχιστον μία πρόσθετη ουσία είναι κιτρικό ασβέστιο.

4. Η φαρμακευτική σύνθεση ή σύνθεση συμπληρώματος διατροφής σύμφωνα με την αξίωση 1, 2 ή 3, όπου περιλαμβάνει περαιτέρω βιταμίνες όπως βιταμίνη D.

5. Η φαρμακευτική σύνθεση ή σύνθεση συμπληρώματος διατροφής ή σύνθεση διατροφοφαρμάκου σύμφωνα με την αξίωση 1, η οποία προκαλεί ουρολιθίαση λόγω μείωσης οξαλικού ασβεστίου λόγω δέσμευσης των κιτρικών ιόντων από το κιτρικό ασβέστιο.

6. Η φαρμακευτική σύνθεση ή σύνθεση συμπληρώματος διατροφής ή σύνθεση διατροφοφαρμάκου σύμφωνα με την αξίωση 1, η οποία επιδρά ευεργετικά στο εντερικό μικροβίωμα κυρίως λόγω των βιοφλαβονοειδών ναρινγίνης και εσπεριδίνης.

7. Η φαρμακευτική σύνθεση ή σύνθεση συμπληρώματος διατροφής ή σύνθεση διατροφοφαρμάκου σύμφωνα με την αξίωση 1, όπου η κερσετίνη ή ανάλογο αυτής, ενισχύει την απορρόφηση του ασβεστίου για την αντιμετώπιση της απώλειας οστικής μάζας.

8. Η φαρμακευτική σύνθεση ή σύνθεση συμπληρώματος διατροφής ή σύνθεση διατροφοφαρμάκου σύμφωνα με οποιαδήποτε προηγούμενη αξίωση, όπου η ποσότητα του κιτρικού οξέος στην εν λόγω σύνθεση κυμαίνεται από 10 - 40% κατά ποσοστό βάρους % του συνολικού βάρους της σύνθεσης, και η ποσότητα της βιταμίνης D στην εν λόγω σύνθεση κυμαίνεται από 0,001 - 0,008% κατά ποσοστό βάρους % του συνολικού βάρους της σύνθεσης και η ποσότητα της κερσετίνης στην εν λόγω σύνθεση κυμαίνεται από 5 - 45% κατά ποσοστό βάρους % του συνολικού βάρους της σύνθεσης, και η ποσότητα της ναρινγίνης στην εν λόγω σύνθεση κυμαίνεται από 5 - 45% κατά ποσοστό βάρους % του συνολικού βάρους της σύνθεσης

9. Η φαρμακευτική σύνθεση ή σύνθεση συμπληρώματος διατροφής ή σύνθεση διατροφοφαρμάκου σύμφωνα με την αξίωση 4, όπου περιλαμβάνει περαιτέρω βιταμίνες του συμπλέγματος D, και μέταλλα, όπως μαγνήσιο και ψευδάργυρο.

10. Η φαρμακευτική σύνθεση ή σύνθεση συμπλήρωματος διατροφής ή σύνθεση διατροφοφαρμάκου σύμφωνα με οποιαδήποτε προηγούμενη αξίωση, όπου περιλαμβάνει περαιτέρω φαρμακευτικώς αποδεκτά έκδοχα που επιλέγονται από μια ομάδα που αποτελείται από απορροφητικά, ολισθητικά, αραιωτικά, συνδετικά, χηλικούς παράγοντες, παράγοντες επικάλυψης, χρωστικές ουσίες, συμπλοκοποίηση παράγοντες, διαλυτοποιητές, μαλακτικά, γαλακτωματοποιητές, πληρωτικά, πηκτωματοποιητικά, λιπαντικά, ενυδατικά, επιβραδυντικά, σταθεροποιητές, παράγοντες εναιώρησης, γλυκαντικά, πυκνωτικά, επιφανειοδραστικά, αδιαφανοποιητές, χρωστικές ουσίες, αντιπηκτικά, παράγοντες ελέγχου ρεολογίας και συνδυασμοί αυτών.

11. Μια διαδικασία για την παρασκευή μιας φαρμακευτικής σύνθεσης ή σύνθεσης συμπληρώματος διατροφής ή σύνθεσης διατροφοφαρμάκου που περιλαμβάνει μια θεραπευτικώς αποτελεσματική ποσότητα κερσετίνης ή ένα φαρμακευτικά αποδεκτό παράγωγο αυτής σε συνδυασμό με μια θεραπευτικά αποτελεσματική ποσότητα ναρινγίνης ή ένα φαρμακευτικά αποδεκτό παράγωγο αυτής, σε συνδυασμό με μια θεραπευτικά αποτελεσματική ποσότητα επσεριδίνης ή ένα φαρμακευτικά αποδεκτό παράγωγο αυτής σε συνδυασμό με μια θεραπευτικά αποτελεσματική ποσότητα κιτρικού ασβεστίου ή ένα φαρμακευτικά αποδεκτό παράγωγο αυτού σε συνδυασμό με μια θεραπευτικά αποτελεσματική ποσότητα βιταμίνης D ή ένα φαρμακευτικά αποδεκτό παράγωγο αυτού σε συνδυασμό με φρουκτο-ολιγοσακχαρίτες ή γαλακτο-ολιγοσακχαρίτες ή ινουλίνη για χρήση για την αντιμετώπιση της απώλειας της οστικής πυκνότητας.