HU213908B - Process for producing glycogen polysaccharides - Google Patents
Process for producing glycogen polysaccharides Download PDFInfo
- Publication number
- HU213908B HU213908B HU9500317A HU9500317A HU213908B HU 213908 B HU213908 B HU 213908B HU 9500317 A HU9500317 A HU 9500317A HU 9500317 A HU9500317 A HU 9500317A HU 213908 B HU213908 B HU 213908B
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- glycogen
- cationic resin
- process according
- precipitate
- water
- Prior art date
Links
- 229920002527 Glycogen Polymers 0.000 title claims abstract description 57
- 229940096919 glycogen Drugs 0.000 title claims abstract description 56
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 title claims abstract description 32
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 title claims abstract description 31
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 title claims abstract description 31
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 26
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 21
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims abstract description 19
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims abstract description 19
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 claims abstract description 18
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 claims abstract description 16
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 14
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims abstract description 13
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims abstract description 13
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 11
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 10
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims abstract description 10
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 10
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 claims abstract description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 6
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims abstract description 5
- 238000007696 Kjeldahl method Methods 0.000 claims abstract description 4
- 238000009835 boiling Methods 0.000 claims abstract description 4
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims abstract description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 14
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Natural products CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 claims description 11
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 claims description 7
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 claims description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 3
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 claims description 2
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 claims description 2
- 125000005909 ethyl alcohol group Chemical group 0.000 claims 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 abstract description 6
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 9
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 8
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241000287826 Gallus Species 0.000 description 5
- 241000237524 Mytilus Species 0.000 description 5
- 241000237536 Mytilus edulis Species 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 102000016611 Proteoglycans Human genes 0.000 description 3
- 108010067787 Proteoglycans Proteins 0.000 description 3
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 2
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- -1 glucose polysaccharide Chemical class 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 2
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 2
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N Chromium Chemical compound [Cr] VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 241000237852 Mollusca Species 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 241000237502 Ostreidae Species 0.000 description 1
- 229910000831 Steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 238000010306 acid treatment Methods 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 239000003974 emollient agent Substances 0.000 description 1
- 239000003344 environmental pollutant Substances 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 1
- 102000011054 glycogenin Human genes 0.000 description 1
- 108010062764 glycogenin Proteins 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 1
- 230000009610 hypersensitivity Effects 0.000 description 1
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000003020 moisturizing effect Effects 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 235000020638 mussel Nutrition 0.000 description 1
- 229920005615 natural polymer Polymers 0.000 description 1
- 150000002829 nitrogen Chemical class 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 235000020636 oyster Nutrition 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 231100000719 pollutant Toxicity 0.000 description 1
- 150000004804 polysaccharides Polymers 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000009759 skin aging Effects 0.000 description 1
- 239000010959 steel Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 125000001493 tyrosinyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/0006—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid
- C08B37/0009—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid alpha-D-Glucans, e.g. polydextrose, alternan, glycogen; (alpha-1,4)(alpha-1,6)-D-Glucans; (alpha-1,3)(alpha-1,4)-D-Glucans, e.g. isolichenan or nigeran; (alpha-1,4)-D-Glucans; (alpha-1,3)-D-Glucans, e.g. pseudonigeran; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/0003—General processes for their isolation or fractionation, e.g. purification or extraction from biomass
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
(57) KIVONAT A találmány glikőgén-pőliszacharidők előállításieljárására vőnatkőzik, amelyek nitrőgéntartalma a Kjeldahl-módszerrelmérve 60 ppm-nél kisebb és redűkáló cűkőr tartalma F.D. S ell és Snellmódszerével mérve 0,25-t%-nál kisebb, glikőgénben gazdag állati szövetegy erős bázis vizes őldatában végzett főrralásával, a kapőtt főzetlehűtésével, majd nem savas, illékőny, vízzel e egyedő őldószerhőzzáadásával, a képződött csapadék szűréssel végzett elválasztásávalés vízben való felőldásával. A találmány értelmében úgy járnak el,hőgy a csapadék vizes őldatának pH-ját semlegesre állítják be, és azőldatőt egy katiőnős gyantával kezelik, a katiőnős gyantát szűrésselelválasztják, az őldatő nem savas, illékőny, vízzel elegyedőőldószerrel kezelve a nitrőgéntartalmú vegyületektől és redűkálócűkrőktól mentes pőliszacharidőt kicsapják, és a csapadékőt szűrésselelkülönítik. ŕ
Description
A találmány glikogén-poliszacharidok előállítási eljárására vonatkozik, amelyek nitrogéntartalma a Kjeldahlmódszerrel mérve 60 ppm-nél kisebb és redukáló cukor tartalma F.D. Snell és Snell módszerével mérve 0,25t%-nál kisebb, glikogénben gazdag állati szövet egy erős bázis vizes oldatában végzett forralásával, a kapott főzet lehűtésével, majd nem savas, illékony, vízzel elegyedő oldószer hozzáadásával, a képződött csapadék szűréssel végzett elválasztásával és vízben való feloldásával.
A találmány értelmében úgy járnak el, hogy a csapadék vizes oldatának pH-ját semlegesre állítják be, és az oldatot egy kationos gyantával kezelik, a kationos gyantát szűréssel elválasztják, az oldatot nem savas, illékony, vízzel elegyedő oldószerrel kezelve a nitrogéntartalmú vegyületektől és redukáló cukroktól mentes poliszacharidot kicsapják, és a csapadékot szűréssel elkülönítik.
A leírás terjedelme: 4 oldal
HU 213 908 B
HU 213 908 Β
A találmány tárgya eljárás új glikogén-poliszacharidok előállítására. Az új glikogén-poliszacharidok lényegében mentesek a nitrogéntartalmú vegyületektől és a redukáló cukroktól.
A „glikogén” meghatározást általában az állatvilágban elterjedten előforduló, hasonló, de nem azonos proteoglikánok csoportjának megjelölésére alkalmazzák.
A legtöbbet vizsgált glikogén a nyúlmájból extrahált glikogén, amelyről úgy vélik, hogy egy körülbelül 37000 Dalton molekulatömegü proteint (glikogenint) tartalmaz, amely egy tirozincsoportj ának glikozidos kötésével kapcsolódik egy nagymértékben elágazó, 10 000 000 Dalton molekulatömegű glükóz poliszacharidhoz (brész). Számos b-rész (egészen 50-ig terjedő számú) összekapcsolódhat egy olyan vegyületté (a-részek), amelynek molekulatömege 500 000 000 Dalton, ami a természetes glikogén egysége [D.J. Manners: Carbohydrate Polymers, 16, 37-82, (1991)].
A különböző állatfajok eltérő glikogénjei az eddigi ismeretek szerint a poliszacharid elágazó voltának mértékében térnek el. így például Stuart A.S. Craig és munkatársai [Carbohydrate Research, 179, 327-340., (1988)] jelentős különbségekről számoltak be emlősökből és gerinctelenekből extrahált glikogénminták poliszacharidjainak elágazásaiban.
Bár számos különböző eljárást közölnek az irodalomban glikogén extrahálására állati szövetből, valójában ezeknek főleg két eltérő célja van:
i) glikogén kvantitatív kiextrahálása analitikai módszerekkel biokémiai célra, azaz egy olyan extrahálás, amelynek célja a glikogén szintjének meghatározása az extrahálást követően bizonyos szövetekben, ii) glikogénminták kiextrahálása a természetes polimer lehető legkisebb mértékű denaturálásával, az extrahálást követő biokémiai és konformációs vizsgálatok céljára.
Ebből következik, hogy a kereskedelemben kapható valamennyi glikogénfajtában eredetétől függetlenül mindig van némi nitrogén (500-600 ppm), ami megfelel legalább a proteoglikánra számított mennyiségnek [D.J. Manners és munkatársai fentemlített közleménye].
Az irodalom tanulmányozásakor figyelemreméltó eltérést találunk a különböző szerzők nézőpontjában; egyesek nyomokban jelenlevő szennyezésnek tekintik az említett nitrogénmennyiséget, mások a glikogén kis mennyiségben jelenlevő alkotórészének. A különböző kereskedelmi források másrészt nem tesznek különbséget a proteoglikán glikogénje és annak poliszacharidja között.
Míg a glikogén extrahálását alaposan vizsgálták, ez idáig kevés figyelmet szenteltek a glikogénpoliszacharid extrahálásának. Csak egy régi közlemény írja le „nitrogénmentes” glikogénminták előállítási eljárását patkánymájból [M. Somogyi: J. Bioi. Chem., 104, 245, (1934)]. Meg kell azonban jegyezni, hogy ennek az eljárásnak a során a glikogént egy éjszakán át savas kezelésnek vetik alá, azaz a glikogén-poliszacharid szempontjából hidrolizáló körülmények között tartják. Nem ismeretes továbbá annak az analitikai módszernek az érzékenysége, amit a szerző a nitrogéntartalom vizsgálatára használt.
Amikor megpróbáltuk ezt az ismert módszert a gyakorlatba átültetni, gyengén reprodukálhatónak találtuk és a termék kis, de változó mennyiségben nitrogént és/vagy jelentősebb mennyiségű redukáló cukrot (több mint 0,15 %-ot) tartalmazott a hidrolítikus bomlás következtében.
A glikogénnek különböző javasolt gyógyászati felhasználásai ismeretesek, különösen bőrpuhító szerként (JP-A-87-178 505) és excipiensként hidratáló tulaj donságai alapján (JP-A-88-290 809), és a bőr öregedése elleni bőrgyógyászati készítményekben (US-5 093 109).
Javasolták továbbá alkalmazását tej savtermelő bacillu sok tápközegeként, a hüvely pH-jának szabályozására szolgáló gyógyszerkészítményekben (EP-A-0 257 007). Stabilitása azonban nem megfelelő és valószínű, hogy a proteinek, nukleinsavak és fragmentumaik nyomnyi mennyiségei túlérzékenységet okoznak. Még élő szennyezőanyagok is jelen lehetnek.
Célkitűzésűnk ezért olyan vegyület előállítása volt, ami megtartj a a glikogén-poliszacharid szerkezet túlnyomó részét, és a lehető legnagyobb mértékben ártalmatlan és biztonságos; azaz olyan anyag, ami mentes a nitrogéntartalmú vegyületektől és a redukáló cukroktól.
Számos eredménytelen kísérlet után meglepő módon azt találtuk, hogy nyers glikogén vizes oldatát elegendően hosszú ideig kezelve egy kationos gyantával az oldatban a kívánt poliszacharid marad vissza. A poliszacharidot azután könnyen kicsaphatjuk vízzel elegydő oldószer hozzáadásával.
Találmányunk tárgya tehát nitrogéntartalmú vegyületektől és redukáló cukroktól lényegében mentes glikogén-poliszacharid előállítása.
Leírásunkban és igénypontjainkban „nitrogéntartalmú vegyületektől és redukáló cukroktól lényegében mentes” alatt olyan anyagot értünk, amelynek nitrogéntartalma a Kjeldahl-módszerrel meghatározva 60 ppm-nél kisebb és redukáló cukor tartalma 0,25 t%-nál kisebb F.D. Snell és Snell módszerével mérve [Colorimetric Methods of Analysis, New York, 1954, III. kötet, 204. oldal],
A Mytilus Edulis és a Mytilus Gallus Provinciális különösen érdekes glikogénforrások; ezek a kagylók nagy mennyiségben hozzáférhetők viszonylag alacsony áron és glikogéntartalmuk viszonylag magas. A találmányunk szerinti glikogén-poliszacharid tehát előnyösen Mytilus Edulis-ból vagy Mytilus Gallus Provincialis-ból nyerhető.
Találmányunk azonban nem korlátozódik a Mytilus Edulis-ból vagy Mytilus Gallus Provincialis-ból nyerhető glikogén-poliszacharid alkalmazására. Más megfelelő glikogénforrások a találmány szerinti poliszacharidok előállítására például egyéb kagylók, úgymint osztrigák vagy Credipula Fomicata, vagy gerinces állatok glikogénben gazdag szervei, úgymint májuk vagy izomzatúk.
A találmány szerint előállítható glikogénpoliszacharidokra az is jellemző, hogy széntartalmuk körülbelül 44-45 %, molekulatömegük körülbelül (2,5 ± 0,1) x 106 Dalton és forgatóképességük [oc]d20 = 197 ± 2,0 (c = 1, vízben).
HU 213 908 Β helyettesíteni képes a glikogént annak valamennyi ismert felhasználási területén és kiküszöböli azt a hátrányt, amit a proteinek, nukleinsavak, ffagmenseik és/vagy a redukáló cukrok jelenléte okoz.
A találmány szerinti megoldást a következő nem korlátozó példákkal szemléltetjük közelebbről.
A találmány szerinti glikogén-poliszacharidok előállítása során az első lépést ismert módszerek szerint hajtjuk végre; ennek során a kiválasztott szöveteket egy erős bázis vizes oldatában forraljuk, az így kapott főzetet lehűtjük, majd a glikogént kicsapjuk egy nem savas, illékony oldószer hozzáadásával, mely oldószer vízzel elegyedik.
Amint az már jól ismert, a különböző szövetekben levő glikogén mennyisége tág határok között változik, nem csak a szövettől és az állatfajtól függően, hanem egy azonos fajú állat azonos szövete esetében is számos más tényező függvényében, úgymint a tápláltság foka és az évszak.
A fenti kezeléssel kiextrahált glikogén mennyisége tehát nagy mértékben függ attól, hogy mennyi glikogént tartalmaz a kezelt állati szövet.
A találmányunk szerinti eljárás új lépésének lényege az, hogy a kapott csapadék vízben való feloldásával nyert oldat pH-ját semlegesre állítjuk be, majd az oldatot egy kationos gyantával kezeljük.
Találmányunk tárgya tehát eljárás nitrogéntartalmú anyagoktól és redukáló cukroktól lényegében mentes glikogén-poliszacharidok előállítására glikogénben gazdag állati szövet egy erős bázis vizes oldatában végzett forralásával, a kapott főzet lehűtésével, majd nem savas, illékony, vízzel elegyedő oldószer hozzáadásával, a képződött csapadék szűréssel végzett elválasztásával és vízben való feloldásával; a találmány szerinti eljárást az jellemzi, hogy a csapadék vizes oldatának pH-ját semlegesre állítjuk be, és az oldatot egy kationos gyantával kezeljük, a kationos gyantát szűréssel elválasztjuk, az oldatot nem savas, illékony, vízzel elegyedő oldószerrel kezelve a nitrogéntartalmú vegyületektől és redukáló cukroktól mentes poliszacharidot kicsapjuk, és a csapadékot szűréssel elkülönítjük.
A semlegesítési lépést előnyösen egy vízben oldható gyenge szerves savval végezzük; ilyen például az ecetsav.
A kationos gyantával való kezelést előnyösen 8—4-8 órát folytatjuk keverés közben, szobahőmérsékleten.
Kationos gyantaként alkalmazhatunk például Amberlite™ IR-120-at (Rohm u. Haas, Philadelphia, USA) savas formában; más, hasonló tulajdonságú gyantákat is használhatunk.
A kationos gyantát azután szűréssel elválasztjuk és az oldathoz vízzel elegyedő oldószert adunk.
Előnyösen alkalmazható oldószerek például a rövidszénláncú alkoholok vagy ketonok, úgymint etilalkohol vagy aceton.
Az így képződő csapadék, amit azután szűréssel elválasztunk, nitrogéntartalmú anyagoktól és redukáló cukroktól mentes glikogén-poliszacharid. Az oldószer eltávolításán kívül további tisztítás nem szükséges.
A főzetből kicsapott glikogénre számított kitermelés körülbelül kvantitatív.
Ezáltal atalálmány szerinti eljárás egy további előnye az, hogy a poliszacharid előállítási költségei lényegében megegyeznek a glikogén extrahálásának költségeivel. Más szavakkal, a találmányunk szerinti eljárás lényegében azonos költséggel olyan terméket eredményez, ami
1. példa
A) Glikogén extrahálása
1000 g Mytilus Gallus Provinciális masszát egy acéledénybe helyezünk, amely 1,0 1 30 t%-os kálium-hidroxidot tartalmaz, és 100 °C-ra hevítjük 1 óra hosszat.
A kapott oldatot szobahőmérsékletre hütjük és hozzáadunk 1,5 1 95 t%-os etil-alkoholt. A képződött szilárd csapadékot (62 g) szűréssel elkülönítjük.
Szárítás után a termékjellemzői a következők: széntartalom: 44,41%;
nitrogéntartalom: 0,18 - 0,34 t%.
B) Glikogén-poliszacharid előállítása
Az A) lépésben elkülönített szilárd anyagot feloldjuk 1 1 vízben, a kapott oldat pH-ját jégecettel semlegesre állítjuk be, majd teljesen átlátszóra szűrjük.
Az így kapott oldathoz hozzáadunk 60 g savas formában levő Amberlite™ IR-120-at, és a kapott keveréket24 órát szobahőmérsékleten tartjuk keverés közben.
A gyantát szűréssel elválasztjuk az oldattól, a glikogén-poliszacharidot azonos térfogatú 95 t%-os etil-alkohol hozzáadásával kicsapjuk, majd szűréssel elválasztjuk.
Szárítás után az így előállított glikogén-poliszacharid (61 g) a következő fiziko-kémiai tulajdonságokat mutatja:
44,44 t%; nincsen*; nincsen**;
(2,5 ± 0,1) x 106*** széntartalom: nitrogéntartalom: redukáló cukor: molekulatömeg:
[a]D 20: 199 ± 1,0 (c = 1, vízben).
Az 1 n kénsavoldattal végzett hidrolízis (3 óra 100 “’Con) csak glükózt eredményez/gázkromatográfiásán vizsgáltuk M. Ochiai módszere szerint [J. Chrom., 194, 224, (1980)]/.
* /a módszer érzékenysége 60 ppm/ ** /F.D. Snell és Snell módszere szerint vizsgáltuk [Colorimetric Methods of Analysis, Necv York, 1954, III. kötet, 204. oldal, a módszer érzékenysége 0, 25 %] / *** /az (eta) értékből számítva a Flory-egyenlet alkalmazásával, a következő értékekkel: k = 1,80 * 10-4, a = 0,70, amelyeket L.P. Yu és J.E. Rolling kaptak glikogénre [J. Applied Pol. Sci., 33, 1909, (1987)]/.
2. példa
Mytilus Gallus Provincialis-ból készítünk glikogénpoliszacharidot az 1. példa B) részében leírt módon, azzal az eltéréssel, hogy a kicsapási lépést etil-alkohol helyett acetonnal végezzük.
Kitermelés: 60,5 g;
[cc]d20: 196 ± 1,0 (c = 1, vízben) ;
redukáló cukor: nincsen.
HU 213 908 Β
3. példa g glikogént, amit sertésmájból extraháltunk Bell és munkatársai módszere szerint [Biochem. J., 28, 882, (1934)] feloldunk 85 ml vízben, 5 g Amberlite™ IR120-szal kezeljük, majd az 1. példa B) részében leírt módon kicsapjuk 85 ml 95 t%-os etil-alkohollal.
Nitrogén és redukáló cukor nincsen a termékben; a forgatóképesség hasonló az 1. és 2. példákban kapott glikogén-poliszacharidokéhoz.
Claims (7)
- SZABADALMI IGÉNYPONTOK1. Eljárás glikogén-poliszacharidok előállítására, 15 amelyek nitrogéntartalma a Kjeldahl-módszerrel mérve 60 ppm-nél kisebb és redukáló cukortartalma F.D. Snell és Snell módszerével mérve 0,25 t%-nál kisebb, glikogénben gazdag állati szövet egy erős bázis vizes oldatában végzett forralásával, a kapott főzet lehűtésével, majd 20 nem savas, illékony, vízzel elegyedő oldószer hozzáadásával, a képződött csapadék szűréssel végzett elválasztásával és vízben való feloldásával, azzaljellemezve, hogy a csapadék vizes oldatának pH-ját semlegesre állítjuk be, és az oldatot egy kationos gyantával kezeljük, a kationos gyantát szűréssel elválasztjuk, az oldatot nem savas, illékony, vízzel elegyedő oldószerrel kezelve a nitrogéntartalmú vegyületektől és redukáló cukroktól mentes5 poliszacharidot kicsapjuk, és a csapadékot szűréssel elkülönítjük.
- 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a semlegesítési lépést egy gyenge szerves savval végezzük.10
- 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a kationos gyantával való kezelést szobahőmérsékleten végezzük.
- 4. Az 1-3. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzaljellemezve,hogy a kationos gyantával való kezelést 8—48 órát folytatjuk.
- 5. A 4. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve,hogy a kationos gyantával való kezelést 24 órát folytatjuk.
- 6. Az 1-5. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzaljellemezve, hogy kationos gyantaként savas formában levő Amberlite ™ IR-120-at alkalmazunk.
- 7. Az 1-6. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy oldószerként etil-alkoholt vagy acetont alkalmazunk.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| ITMI921927A IT1255488B (it) | 1992-08-04 | 1992-08-04 | Polisaccaridi del glicogeno |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HU9500317D0 HU9500317D0 (en) | 1995-03-28 |
| HUT71961A HUT71961A (en) | 1996-02-28 |
| HU213908B true HU213908B (en) | 1997-11-28 |
Family
ID=11363836
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU9500317A HU213908B (en) | 1992-08-04 | 1993-07-28 | Process for producing glycogen polysaccharides |
Country Status (25)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US5597913A (hu) |
| EP (1) | EP0654048B1 (hu) |
| JP (1) | JP3204321B2 (hu) |
| KR (1) | KR100277301B1 (hu) |
| AT (1) | ATE148471T1 (hu) |
| AU (1) | AU680200B2 (hu) |
| BG (1) | BG62259B1 (hu) |
| BR (1) | BR9306833A (hu) |
| CA (1) | CA2141040C (hu) |
| CZ (1) | CZ282276B6 (hu) |
| DE (1) | DE69307897T2 (hu) |
| DK (1) | DK0654048T3 (hu) |
| ES (1) | ES2100552T3 (hu) |
| FI (1) | FI104974B (hu) |
| GE (1) | GEP20001941B (hu) |
| GR (1) | GR3023249T3 (hu) |
| HU (1) | HU213908B (hu) |
| IT (1) | IT1255488B (hu) |
| MX (1) | MX9304731A (hu) |
| NO (1) | NO307788B1 (hu) |
| NZ (1) | NZ254777A (hu) |
| RO (1) | RO117970B1 (hu) |
| RU (1) | RU2104287C1 (hu) |
| SK (1) | SK280066B6 (hu) |
| WO (1) | WO1994003502A1 (hu) |
Families Citing this family (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IT1255488B (it) * | 1992-08-04 | 1995-11-06 | Angelini Francesco Ist Ricerca | Polisaccaridi del glicogeno |
| WO1999026636A1 (fr) * | 1997-11-24 | 1999-06-03 | Zhongming Zeng | Formulation pharmaceutique de stimulation de la croissance de bacilles gram positifs et d'augmentation de l'acidite du vagin et leur utilisation |
| IT1298758B1 (it) * | 1998-03-19 | 2000-02-02 | Angelini Ricerche Spa | Soluzione umettante e lubrificante per uso oftalmico |
| US6964949B2 (en) | 2000-05-24 | 2005-11-15 | Shanghai Jiao Da Onlly Co., Ltd. | Pharmaceutical compositions for promoting the growth of gram-positive bacilli and increasing the acidity in the vagina and the use thereof |
| TWI250166B (en) * | 2001-12-07 | 2006-03-01 | Bizen Chemical Co Ltd | Method of physicochemically producing glycogen and glycogen obtained by the same |
| US20050271746A1 (en) * | 2004-05-18 | 2005-12-08 | Abbott Chun L | Topical treatments for abnormal biological conditions and method of topically treating such conditions |
| AR069960A1 (es) | 2007-12-28 | 2010-03-03 | Acraf | Formulacion farmaceutica de liberacion controlada y procedimiento para su preparacion |
| US20100273736A1 (en) * | 2008-02-01 | 2010-10-28 | Aziende Chim. Riun. Ang. Franc. A.C.R.A.F. S.P.A. | Cosmetic composition comprising glycogen for skin application with velvet effect |
| SG171444A1 (en) * | 2009-01-23 | 2011-07-28 | Acraf | Controlled release pharmaceutical or food formulation and process for its preparation |
| JP5639649B2 (ja) | 2009-08-03 | 2014-12-10 | アジェンデ・キミケ・リウニテ・アンジェリニ・フランチェスコ・ア・チ・エレ・ア・エフェ・ソシエタ・ペル・アチオニＡｚｉｅｎｄｅ Ｃｈｉｍｉｃｈｅ Ｒｉｕｎｉｔｅ Ａｎｇｅｌｉｎｉ Ｆｒａｎｃｅｓｃｏ Ａ．Ｃ．Ｒ．Ａ．Ｆ．Ｓｏｃｉｅｔａ Ｐｅｒ Ａｚｉｏｎｉ | グリコーゲンを含む食品製剤 |
| JP2011037790A (ja) * | 2009-08-13 | 2011-02-24 | Central Res Inst Of Electric Power Ind | 肝機能亢進剤及び機能性食品 |
| RS58985B1 (sr) | 2012-03-15 | 2019-08-30 | Acraf | Katjonski polimeri na bazi glikogena |
| AR095937A1 (es) | 2013-04-05 | 2015-11-25 | Acraf | Potenciador de la solubilidad en agua a base de glucógeno |
| KR102214865B1 (ko) | 2013-04-26 | 2021-02-15 | 마이렉서스 바이오테크놀로지스 인코퍼레이티드 | 파이토글리코겐 나노입자와 이를 제조하는 방법 |
| AR108280A1 (es) | 2016-05-05 | 2018-08-08 | Acraf | Composición oftálmica que comprende una combinación sinérgica de glucógeno y ácido hialurónico o sal del mismo |
| WO2022000205A1 (zh) * | 2020-06-29 | 2022-01-06 | 肇庆大华农生物药品有限公司 | 一种禽流感疫苗佐剂及其应用 |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3592168A (en) * | 1969-05-02 | 1971-07-13 | Offshore Sea Dev Corp | Method of raising bivalves in a controlled environment |
| FR2477416A1 (fr) * | 1980-03-10 | 1981-09-11 | Unicler | Utilisation de hansenula ou d'extraits de hansenula, comme medicament |
| JPS6427454A (en) * | 1987-07-22 | 1989-01-30 | Mizusawa Industrial Chem | Concentrated shellfishes and production thereof |
| IT1255488B (it) * | 1992-08-04 | 1995-11-06 | Angelini Francesco Ist Ricerca | Polisaccaridi del glicogeno |
-
1992
- 1992-08-04 IT ITMI921927A patent/IT1255488B/it active IP Right Grant
-
1993
- 1993-07-28 HU HU9500317A patent/HU213908B/hu unknown
- 1993-07-28 AU AU47034/93A patent/AU680200B2/en not_active Expired
- 1993-07-28 CZ CZ95254A patent/CZ282276B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1993-07-28 KR KR1019950700391A patent/KR100277301B1/ko not_active Expired - Lifetime
- 1993-07-28 RO RO95-00184A patent/RO117970B1/ro unknown
- 1993-07-28 DK DK93917674.9T patent/DK0654048T3/da active
- 1993-07-28 CA CA002141040A patent/CA2141040C/en not_active Expired - Lifetime
- 1993-07-28 JP JP50497494A patent/JP3204321B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1993-07-28 AT AT93917674T patent/ATE148471T1/de active
- 1993-07-28 BR BR9306833A patent/BR9306833A/pt not_active IP Right Cessation
- 1993-07-28 NZ NZ254777A patent/NZ254777A/en not_active IP Right Cessation
- 1993-07-28 ES ES93917674T patent/ES2100552T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1993-07-28 RU RU95106640A patent/RU2104287C1/ru active
- 1993-07-28 WO PCT/EP1993/002006 patent/WO1994003502A1/en not_active Ceased
- 1993-07-28 DE DE69307897T patent/DE69307897T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1993-07-28 GE GEAP19932647A patent/GEP20001941B/en unknown
- 1993-07-28 EP EP93917674A patent/EP0654048B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1993-07-28 SK SK114-95A patent/SK280066B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1993-08-04 MX MX9304731A patent/MX9304731A/es active IP Right Grant
-
1995
- 1995-01-26 US US08/373,266 patent/US5597913A/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-02-01 FI FI950436A patent/FI104974B/fi not_active IP Right Cessation
- 1995-02-03 NO NO950405A patent/NO307788B1/no not_active IP Right Cessation
- 1995-02-13 BG BG99421A patent/BG62259B1/bg unknown
-
1996
- 1996-10-21 US US08/736,036 patent/US5734045A/en not_active Expired - Lifetime
-
1997
- 1997-04-22 GR GR970400914T patent/GR3023249T3/el unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0654048B1 (en) | Glycogen polysaccharides | |
| Trelstad et al. | Isolation of two distinct collagens from chick cartilage | |
| JP2882171B2 (ja) | 水溶性多糖類及びその製造方法 | |
| Cifonelli et al. | The Reaction between Concanavalin-A and Glycogen1 | |
| FR2478646A2 (fr) | Composition mucopolysaccharidique ayant une activite regulatrice de la coagulation, medicament la contenant et procede pour l'obtenir | |
| US4870166A (en) | Process for preparing high-purity dematan sulphate, and pharmaceutical compositions which contain it | |
| US4421746A (en) | Process for producing interferon inducers | |
| EP1999159B1 (en) | Process for the isolation and stabilization of low molecular weight aminoglycans from waste egg shells | |
| Ding et al. | Investigation of the fingerprint-activity relationship of Tremella fuciformis polysaccharides and its mitigating effect on radiation-induced intestinal injury | |
| Spencer et al. | The occurrence in the host plant of physiologically active gums produced by Corynebacterium insidiosum and Corynebacterium sepedonicum | |
| US4952399A (en) | Pharmaceutical composition which inhibits the growth of a tumor | |
| US5268366A (en) | Polysaccharide composition or polysaccharide having heparinoid activity, process for producing the same, and anticoagulant containing the same as active ingredient | |
| EP0027514B1 (en) | Antitumor substance and its production | |
| EP1087780B1 (en) | Extraction method of a compound from vegetable material | |
| Olennikov et al. | biologically active substances from cacalia hastate leaves. 1. carbohydrates from leaves and their hypoglycemic activity | |
| CN121699030B (zh) | 一种富集结合态唾液酸的抗病毒燕窝多糖活性组分、制备方法及其应用 | |
| CN118749663B (zh) | 一种抗衰老功能性肽组合物及其制备方法 | |
| US4041022A (en) | Process for the manufacture of thyrocalcitonin | |
| JPH06279255A (ja) | ヒアルロニダーゼ阻害剤 | |
| KR840001511B1 (ko) | 제암(制癌)물질의 제조방법 | |
| KR20000016714A (ko) | 식물성 추출물, 그의 제조 방법 및 사람 및 수의용 의약에서의그의 응용 | |
| Tiba | Hexosamine Compounds in Human Gastric Juice Fourth Communication: On the O Gastric Juice and the Digestibility of the Different Group-specific Carbohydrates | |
| JPH06116282A (ja) | ピノレジノール配糖体、これを含有する胡麻抽出物及びこれらの分離方法並びにこれらを用いる脂質の酸化防止方法 | |
| Leach | Organic constituents of gelatins and animal glues. II. Analytical study on the turbidity factor from a bone glue |