HUT61896A - Process for producing orally administrable pharmaceutical compositions comprising autoantigenes, suitable for improving down-control of autoimmune diseases - Google Patents
Process for producing orally administrable pharmaceutical compositions comprising autoantigenes, suitable for improving down-control of autoimmune diseases Download PDFInfo
- Publication number
- HUT61896A HUT61896A HU9202808A HU280892A HUT61896A HU T61896 A HUT61896 A HU T61896A HU 9202808 A HU9202808 A HU 9202808A HU 280892 A HU280892 A HU 280892A HU T61896 A HUT61896 A HU T61896A
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- suppressive
- compound
- disease
- administered
- autoantigens
- Prior art date
Links
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 title claims abstract description 93
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 35
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 title claims description 8
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract description 39
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 37
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims abstract description 22
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 19
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 claims abstract description 12
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 claims abstract description 4
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 claims description 55
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 claims description 54
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 49
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 47
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 25
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 23
- GZQKNULLWNGMCW-PWQABINMSA-N lipid A (E. coli) Chemical compound O1[C@H](CO)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@H](OC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC)[C@@H](NC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCC)[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](OC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H](NC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H](OP(O)(O)=O)O1 GZQKNULLWNGMCW-PWQABINMSA-N 0.000 claims description 23
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 22
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 20
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 claims description 19
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 claims description 13
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 claims description 12
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 12
- 102000006386 Myelin Proteins Human genes 0.000 claims description 11
- 108010083674 Myelin Proteins Proteins 0.000 claims description 11
- 210000005012 myelin Anatomy 0.000 claims description 10
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 9
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 claims description 8
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 5
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 4
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 3
- 210000002490 intestinal epithelial cell Anatomy 0.000 claims description 2
- 239000006186 oral dosage form Substances 0.000 claims description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 abstract description 7
- 201000002491 encephalomyelitis Diseases 0.000 description 29
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 20
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 18
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 17
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 description 16
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 16
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 15
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 15
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 11
- 210000002435 tendon Anatomy 0.000 description 11
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 10
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 9
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 9
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 9
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 9
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 9
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 9
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 9
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 8
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 description 7
- 206010033799 Paralysis Diseases 0.000 description 7
- 241000700199 Cavia porcellus Species 0.000 description 6
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 6
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 6
- 238000011694 lewis rat Methods 0.000 description 6
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 6
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 5
- 230000004044 response Effects 0.000 description 5
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 4
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 4
- 208000009386 Experimental Arthritis Diseases 0.000 description 4
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 4
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 101710137302 Surface antigen S Proteins 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 4
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 4
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 4
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 4
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 4
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 4
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 4
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 4
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 4
- 208000032116 Autoimmune Experimental Encephalomyelitis Diseases 0.000 description 3
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 3
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 3
- 102000000503 Collagen Type II Human genes 0.000 description 3
- 108010041390 Collagen Type II Proteins 0.000 description 3
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 3
- 206010021639 Incontinence Diseases 0.000 description 3
- 241000187479 Mycobacterium tuberculosis Species 0.000 description 3
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 3
- 238000011260 co-administration Methods 0.000 description 3
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 3
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 3
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 3
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 3
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 3
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 3
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 101100310222 Caenorhabditis briggsae she-1 gene Proteins 0.000 description 2
- 239000012981 Hank's balanced salt solution Substances 0.000 description 2
- 208000030836 Hashimoto thyroiditis Diseases 0.000 description 2
- 206010062016 Immunosuppression Diseases 0.000 description 2
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 2
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 101001018322 Sus scrofa Myelin basic protein Proteins 0.000 description 2
- 102000009843 Thyroglobulin Human genes 0.000 description 2
- 108010034949 Thyroglobulin Proteins 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 210000004100 adrenal gland Anatomy 0.000 description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 239000012050 conventional carrier Substances 0.000 description 2
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 150000004676 glycans Polymers 0.000 description 2
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 2
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 2
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 2
- 210000004347 intestinal mucosa Anatomy 0.000 description 2
- 206010023332 keratitis Diseases 0.000 description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 2
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 2
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 2
- 150000004804 polysaccharides Polymers 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 2
- 239000004575 stone Substances 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 229960002175 thyroglobulin Drugs 0.000 description 2
- HJRJRUMKQCMYDL-UHFFFAOYSA-N 1-chloro-2,4,6-trinitrobenzene Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+]([O-])=O)=C(Cl)C([N+]([O-])=O)=C1 HJRJRUMKQCMYDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010062269 Adrenalitis Diseases 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010008909 Chronic Hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 241000557626 Corvus corax Species 0.000 description 1
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930105110 Cyclosporin A Natural products 0.000 description 1
- PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N Cyclosporin A Chemical compound CC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N 0.000 description 1
- 108010036949 Cyclosporine Proteins 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010014025 Ear swelling Diseases 0.000 description 1
- 206010017577 Gait disturbance Diseases 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 206010019755 Hepatitis chronic active Diseases 0.000 description 1
- 102000018713 Histocompatibility Antigens Class II Human genes 0.000 description 1
- 108010027412 Histocompatibility Antigens Class II Proteins 0.000 description 1
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- FQISKWAFAHGMGT-SGJOWKDISA-M Methylprednisolone sodium succinate Chemical compound [Na+].C([C@@]12C)=CC(=O)C=C1[C@@H](C)C[C@@H]1[C@@H]2[C@@H](O)C[C@]2(C)[C@@](O)(C(=O)COC(=O)CCC([O-])=O)CC[C@H]21 FQISKWAFAHGMGT-SGJOWKDISA-M 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 241000186359 Mycobacterium Species 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 206010037714 Quadriplegia Diseases 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 1
- 241001222774 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Minnesota Species 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- LEBBDRXHHNYZIA-LDUWYPJVSA-N [(2s,3r,4s,5r,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl] n-[(z)-1,3-dihydroxyoctadec-4-en-2-yl]carbamate Chemical compound CCCCCCCCCCCCC\C=C/C(O)C(CO)NC(=O)O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O LEBBDRXHHNYZIA-LDUWYPJVSA-N 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- VREFGVBLTWBCJP-UHFFFAOYSA-N alprazolam Chemical compound C12=CC(Cl)=CC=C2N2C(C)=NN=C2CN=C1C1=CC=CC=C1 VREFGVBLTWBCJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 230000002579 anti-swelling effect Effects 0.000 description 1
- 230000030741 antigen processing and presentation Effects 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 125000000613 asparagine group Chemical group N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)* 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N azathioprine Chemical compound CN1C=NC([N+]([O-])=O)=C1SC1=NC=NC2=C1NC=N2 LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000440 bentonite Substances 0.000 description 1
- 229910000278 bentonite Inorganic materials 0.000 description 1
- SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N bentoquatam Chemical compound O.O=[Si]=O.O=[Al]O[Al]=O SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 210000005013 brain tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N chloroform;methanol Chemical compound OC.ClC(Cl)Cl WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001265 ciclosporin Drugs 0.000 description 1
- 208000010247 contact dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 1
- 208000031513 cyst Diseases 0.000 description 1
- 230000001934 delay Effects 0.000 description 1
- 230000003210 demyelinating effect Effects 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 210000001198 duodenum Anatomy 0.000 description 1
- 230000000816 effect on animals Effects 0.000 description 1
- 206010014599 encephalitis Diseases 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 239000002702 enteric coating Substances 0.000 description 1
- 238000009505 enteric coating Methods 0.000 description 1
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 1
- 239000002095 exotoxin Substances 0.000 description 1
- 231100000776 exotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 210000003414 extremity Anatomy 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000000185 hemagglutinin Substances 0.000 description 1
- 208000010726 hind limb paralysis Diseases 0.000 description 1
- 230000009610 hypersensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000005965 immune activity Effects 0.000 description 1
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 1
- 230000004957 immunoregulator effect Effects 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 229940073062 imuran Drugs 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000018276 interleukin-1 production Effects 0.000 description 1
- 210000005024 intraepithelial lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 210000001630 jejunum Anatomy 0.000 description 1
- 210000000867 larynx Anatomy 0.000 description 1
- 231100001231 less toxic Toxicity 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229940040511 liver extract Drugs 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- 210000005075 mammary gland Anatomy 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 1
- 229960004584 methylprednisolone Drugs 0.000 description 1
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 1
- 239000013586 microbial product Substances 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 210000004789 organ system Anatomy 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 208000005987 polymyositis Diseases 0.000 description 1
- 229960004618 prednisone Drugs 0.000 description 1
- XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N prednisone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 238000012453 sprague-dawley rat model Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 description 1
- 206010043778 thyroiditis Diseases 0.000 description 1
- 230000020192 tolerance induction in gut-associated lymphoid tissue Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002627 tracheal intubation Methods 0.000 description 1
- 230000001960 triggered effect Effects 0.000 description 1
- 208000027930 type IV hypersensitivity disease Diseases 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0008—Antigens related to auto-immune diseases; Preparations to induce self-tolerance
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/1703—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- A61K38/1709—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/39—Connective tissue peptides, e.g. collagen, elastin, laminin, fibronectin, vitronectin, cold insoluble globulin [CIG]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Marine Sciences & Fisheries (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
Description
A nemzetközi bejelentés napga-: 1^9i.-03. 04.' N'i | oiÁC. (
A nemzetközi közzététel napja: 1991. 09. 05. <(WO 91/12816);
A találmány tárgya autoimmun betegségek, különösen a T-sejt-függő autoimmun betegségek kezelésének javítása. A találmány tárgya közelebbről szinergista gyógyszerek alkalmazása az autoimmun betegségek megelőzése és kezelése céljára orálisan vagy enterálisan beadott auto-antigének vagy ezek szuppresszív (betegség-gátló) fragmentumai vagy analógjai által kiváltott hatás fokozására .
Az autoimmun betegségeket a normál autológ (a szervezetből eredő) szövetekre irányuló abnormális immun-válasz (beleértve a sejteket és az antitesteket is) jellemzi.
Az autoimmun betegségek gátlására sokféle stratégiát alkalmaztak illetve javasoltak, elsősorban gyógyszereket, mlnt pl. cyklofosfamidé, cyclosporin A, methotrexate,
Imuran (azothiorine).
Sok esetben szteroidokat alkalmaznak, mint pl. prednison vagy metilprednisolon. E gyógyszerek tartós hatása mind a sejtek mind pedig az antitestek által közvetített autoimmun betegségekkel szemben korlátozott. Alkalmazásukat korlátozzák egyrészt a más szervrendszerekre kifejtett toxikus mellékhatásaik, másrészt az a tény, hogy az ilyen gyógyszerekkel hosszú időn át kezelt betegben globális immun-szuppressziót indítanak meg, ami azt jelenti, hogy a kórokozó mikroorganizmusokkal szemben kifejtett normális védekezési immunreakció csökken, s ezáltal növekszik az ilyen mikroorganizmusok által okozott fertőzések veszélye. További hátrányt jelent, hogy a hosszútávú globális immunszuppresszió növeli a rosszindulatú megbetegedések kockázatát.
Az autoimmun betegségek kezelésére más terápiákat is javasoltak.
Az 1987. június 24-i 65
794 számú (megszüntetett)
USA-beli szabadalmi bejelentés és az 1988.
június 24-i
PCT/US88/021139 számú függő nemzetközi szabadalmi bejelentés sze azok betegséget indukáló és nem indukáló fragmentumainak vagy analógjainak orális vagy enterális beadása hatásosan gátolja az akut monofáziás kísérleti allergiás encephalomielitist (EAE, agy- és gerincvelőgyulladás) , ami egy, a T-sejtek által közvetített és a bázisos mielin-protelnek (MBP) ellen irányuló autoimmun betegség. Az EAE-t az emberi sclerosis multiplex (MS) állati modellálására fedezték fel, és széleskörűen használják. A fenti bejelentések azt is leírják, hogy Mycobacterium tuberculosis orális vagy enterális beadása hatásos kezelés az adjuváns arthritisre, és a fentemlített eredményeket más autoimmun betegségek kezelésére is extrapolálják.
-beli lását
Az 1989. július 14-i szabadalmi bejelentés S-antigén írja le autoimmun uveoretinitis
379
778 számú függő USAorális és enterális adago(szaruhártyagyulladás) kezelésére .
Az 1989.
december 20-i 454
806 számú függő
USA-beli szabadalmi bejelentés auto-antigének aeroszolos alkalmazását ismerteti sejtek és antitestek által közvetített autoimmun betegségek kezelésére.
Nagler-Anderson és munkatársai [Proc. Natl. Acad.
Sci. (USA) 83. 7443-7446, (1986) ] kollagén orális alkalmazását írják le egér modellállatokban a kollagén által okozott arthritis (izületi gyulladás) kezelésére.
Az EAE antigén-specifikus szuppressziójának előidézésére különböző módszereket alkalmaznak, így például immunizálás inkomplett Freund-féle adjuvánsban emulgeált MBP-vel [Lando és munkatársai: J. Immunoi., 12 6. 1526 (1981)], vagy MBP-vel konjugált limfoid sejtek intravénás beinjektálása [Sriram, S. és munkatársai, Cell. Immunoi. , 75, 378 (1983)].
Traugott és munkatársai [J. Neurol. Sci..56. 6573 (1982)] valamint Raine és munkatársai [Láb. Investigation 48. 275-84 (1983)] leírják, hogy egy krónikusan kiújuló EAE-ben szenvedő tengerimalac törzset tiszta MBP-vel önmagában vagy inkomplett Freund-féle adjuvánsban, vagy galaktocerebroziddal - a mielin egy lipid hapténjével (félantigén) - kombináltan, parenterálisan beadva kezeltek, így elnyomták az EAE klinikai tüneteit.
McKenna és munkatársai [Cell. Immun., 81. 391-402 (1983)] azt találták, hogy ha patkányokba előzetesen szingeneikus (genetikailag azonos egyedekből származó) lép-leukocitákhoz vagy szingeneikus vörösvérsejtekhez kapcsolt tengerimalac-MBP-t injektálnak, akkor (a dózistól függő mértékben) el tudják hárítani az inkomplett Freund-féle adjuvánsban alkalmazott tengerimalac-MBP-vel előidézhető EAE fellépését.
Belik és munkatársai [Vopr. Med. Khim., 24., 372-377 (1978), angol nyelvű kivonat alapján] EAE-ben szenvedő tengerimalacoknak alkalikus mielin-protein fragmentum-ot (AMPF) és agyvelőgyulladást okozó szintetikus peptid-et (SEP) adtak be parenterálisan. Az állatok, melyeket előzetesen szarvasmarha AMPF-fel vagy SEP-pel szenzibillzáltak, az AMPF beadása után meg gyógyultak.
Braley-Mullen és munkatársai [Cell. Immun. 51.
408 (1980)], valamint a fentemlített Nagler-Anderson és munka társai két másik, kísérletileg - autoantigén-limfocita konjugátok beinjektálásásval - előidézett autoimmun betegség tüneteinek elnyomásáról számolnak be. Braley-Mullen és munkatársai tengeri malacokban IFA-ban oldott tiroglobulin antigén beinjektálásával előidézett kísérleti autoimmun thiroiditis (pajzsmirigy-gyulla dás) tüneteinek elnyomását írják le. Nagler-Anderson és munkatársai egérben II típusú kollagénnel előidézett izületi gyulladás szuppresszióját ismertetik, amit úgy végeztek, hogy oldható, de nem denaturált II típusú kollagént adtak be gyomron át, majd az állatot adjuvánsban alkalmazott II típusú kollagén beadásával immunizálták .
| Newby, | T.J. és munkatársai [Local Immuné Respon- |
| ses in the Gut, 1191. | oldal, CRC Press, Boca Raton, FL, 1984; |
| Immunoi. 4 1 . 617-621, | (1980)] leírják, hogy ha egérnek bakte- |
| riális LPS-t adnak be, | ez növelheti az orálisan beadott antigén- |
nel (pikril-klorid) előidézett kontakt-hiperszenzitivitásal szembeni toleranciát. Ha azonban az LPS-t és a pikril-kloridot egyidejűleg adják be orálisan, akkor az nem gyakorol statisztikusan szignifikáns hatást az antigénnel szemben fellépő késői túlérzékenységi reakcióra.
Michalek és munkatársai [J. Immunoi. 128. 1992 —1998 (1982)] leíják, hogy juhok vörösvérsejtjeinek (SBRC) gyomorba történő prolongált intubálása (vagyis enterális beadása) majd azt követően az SBRC rendszeres adagolása LPS-re nem reagáló egerekben fokozta a lép immunreakcióit, LPS-re reagáló egerekben pedig fokozta az orális toleranciát (válaszképtelenség) . LPS-t nem adtak be a vörösvérsejtekkel egyidejűleg.
Mowat, A.M. és munkatársai [Immunoi. 58. 677-683 (1986)] leírják, hogy ha a normál egértáp részét képező tojásalbuminnal egyidejűleg intravénásán LPS-t adtak be, ez meggátolta az orális tolerancia fellépését, de a megetetett tojásalbuminnal szemben fellépő késői túlérzékenységi reakciót (DTH) nem változtatta meg.
Hamada, T. és munkatársai [Autoimmunity, 2., 275-284 (1989)] Lewis patkányok MBP-vel szenzitivizált nyirok-sejtjeit in vitro LPS-sel kezelve az EAE adoptív transz-ferének növekedését tapasztalták.
A technika állásában ismerteknél jobb módszerek szükségesek a fokozatosan előretörő autoimmun betegségek kezeléséhez .
A találmány tárgya javított módszerek autoimmun betegségben szenevedő emlősök kezelésére.
A találmány további tárgya gyógyszerkészítmények autoimmun betegségekben szenvedő emlősök kezelésére.
Tehát a találmány tárgya a T-sejtek által közvetített vagy T-sejt-függő autoimmun betegségek (AD) kezelésére vagy megelőzésére szolgáló javított módszer, mely a következőkből áll:
a) a kezelésre szoruló emlősnek orálisan vagy enterállsan beadunk legalább egy - az alábbi csoportokból kiválasztott - AD-szuppressziv hatóanyagot: (i) e betegség specifikus antigénjei; (ii) ezen antigének AD-szuppresszív fragmentumai és/vagy (iii) ezen antigének vagy fragmentumaik AD-szuppresszív analógjai; és
b) emellett az emlősnek beadunk legalább egy, a fenti hatóanyagok AD-szuppresszív hatását fokozó vegyületet.
A hatásfokozó vegyületet olyan mennyiségben kell alkalmazni, hogy az AD-szuppresszív anyagot hatásossá tegye, és megnövelje a szuppresszív hatását, ha az AD-szuppresszív anyagot az AD-tünetek elnyomásához elegendő mennyiségben adagoljuk.
A találmány további tárgyát képezik az autoimmun betegségek kezelésében használható szinergista készítmények és egységdózisformák.
A hatásfokozó vegyületeket (melyeket sok esetben szinergista vegyület-ként fogunk említeni), nem feltétlenül orálisan vagy enterálisan kell beadni, bár az ilyen beadási mód előnyös. Továbbá: a szuppresszív hatóanyag és a szinergista bármely beadási sorrendje a találmány oltalmi körébe tartozik, bár általában az egyidejű beadás az előnyös.
A találmány további ismertetéséhez felhasználjuk a mellékelt rajzokat.
Az 1. ábrán látható oszlopdiagram az MBP-LPS beadásának a patkányok késői túlérzékenységi reakciójára (DTH) gyakorolt hatását mutatja.
A 2. ábrán látható oszlopdiagram az MBP + Lipid A beadásának a patkányok DTH-jára gyakorolt hatását mutatja.
A 3 (a-c) . ábra oszlopdiagram-sorozatán MBP + LPS hatása látható tengerimalacok krónikus allergiás encephalomielitis-ére (EAE).
Tehát a találmány tárgya a T-sejtek által • · közvetített vagy T-sejt-függő autoimmun betegségek kezelése a) egy AD-szuppresszív anyag orális vagy enterális és b) egy vagy több, az AD-szuppresszív anyag hatását fokozó vegyület beadásával .
A ”kezelés” kifejezés magába foglalja mind a profilaktikus kezelést, mely az autoimmun betegségek (vagy a klinikai tünetek kifejlődésének) megelőzésére irányul, mind pedig a tünetek elnyomására vagy enyhítésére szolgáló kezelést az autoimmun betegség kitörése után.
Az emlős kifejezésen az élet minden olyan formáját értjük, melynek az immuntevékenységet szabályozó rendszere van, s így ki van téve az autoimmun megbetegedé-seknek.
Az autoimmun betegség az emlősök (beleértve az embert is) immunrendszerének hibás működése, ami abban áll, hogy az immunrendszer képtelen megkülönböztetni az emlős testében lévő idegen anyagot az autolőg (saját eredetű) szövetektől és anyagoktól, s ezért az autológ szöveteket és anyagokat úgy kezeli, mintha idegenek volnának.
Autoantigén bármely olyan, az emlős szerveze tében normálisan előforduló anyag, melyet abnormális körülmények között az emlős limfocitái vagy antitestjei már nem ismernek fel az emlős testének saját részeként, s ezért az immunrendszer éppúgy megtámadja, mintha idegen anyag lenne. Ez a kifejezés továbbá azokat az antigén anyagokat is jelenti, melyek emlősöknek beadva egy autoimmun betegség tüneteit idézik elő.
Ezen autoantigének AD-szuppresszív fragmentumai-n olyan aminosavakat, peptideket vagy más vegyületeket értünk, melyek az autoantigének egyes aminosav-szekvenciáit vagy • « egyéb részeit tartalmazzák, és orálisan vagy enterálisan beadva képesek elhárítani vagy elnyomni a T-sejt által közvetített vagy T-sejt-függő autoimmun reakciót. Megjegyezzük, hogy az ilyen fragmentumnak nem kell a teljes autoantigén ilyen jellegű tulajdonságit mutatnia. Például az MBP esetében - mely egy adjuvánssal együtt parenterálisan beadva EAE-t idéz elő az arra hajlamos emlősökben - felismerték, hogy az MBP egyes olyan fragmentumai is AD-szuppresszív hatásúak, amelyek nem okoznak betegséget [65,794 és 454,806 sz. USA szabadalmi bejelentés).
Az autoantigének vagy fragmentumaik analóg-jain olyan vegyületeket értünk, amelyek szerkezetileg oly mértékben hasonlóak ezen autoantigénekhez vagy AD-szuppresszív fragmentumaikhoz, hogy velük azonos biológiai hatást mutatnak, vagyis orálisan vagy enterálisan beadva képesek megszüntetni vagy elnyomni a T-sejt által közvetített vagy T-sejt-függő autoimmun reakciót. Ide tartoznak például az olyan peptidek, melyek egy vagy több aminosav-maradék tekintetében eltérnek az autoantigén aminosav-szekvenciájától, de AD-szuppresszív hatásukat megtartják, valamint az olyan vegyületek és kompozíciók, amelyek utánozzák az autoantigének AD-szuppresszív hatását, vagyis képesek elfojtani vagy enyhíteni a betegség tüneteit. Ilyen kompozíció például egy autoimmun betegség által megtámadott szervből származó szövet.
Az autoimmun betegséget elnyomó hatóanyag vagy AD-szuppresszív hatóanyag olyan vegyület vagy készítmény, mely egy emlősnek orálisan vagy enterálisan beadva elhárítja, elnyomja vagy késlelteti egy meghatározott autoimmun betegség klinikai manifesztálódását. A kifejezés magába foglalja egy autoimmun ·« betegség specifikus autoantigénjeit valamint annak a fentiekben meghatározott AD-szuppresszív fragmentumait és analógjait.
A szinergista olyan anyagot jelent, mely az AD-szuppresszív anyagokkal együtt orálisan beadva fokozza ezen anyagoknak az autoimmun betegségek klinikai manifesztálódását elfojtó hatását. Az előbbi mondatban az együtt kifejezés az
AD-szuppresszív anyagok előtt, azokkal egyidejűleg vagy utánuk szinergista és el annyi idő,
Tehát anyag vagy enterális beadást az AD-szuppresszív anyag jelent.
beadása hogy a korábban beadott anyag a találmány szerinti szinergisták és az beadása között legfeljebb 24 óra
Természetesen a között nem telhet hatása elmúljon.
AD-szuppresszív telhet el.
A találmány szerinti szinergisfákként használhatók például de nem kizárólag - a gram-negatív baktériumok széles körétől, pl. a különféle E.coli vagy Salmonella-alfajóktól (mint például az LPS, /Sigma Chemical
Co. St. Louis,
MO, Difco,
Detroit, MI BIOMOL Rés. Labs, Plymouth Meeting, PA/, a Lipid A /Sigma Chemical Co., ICN Biochemical s, Clevelandi
OH, Polysciences Inc., Warrington, PA/) származó bakteriális liposzacharidok, valamint immunszabályozó lipoprteinek, így pl.
a tripalmikovalensen kötött peptidek, melyek a Deres,
K. és munkatársai [Natúré, 342.
561-564, 1989] által leírt módon, továbbá az E.coli-ból származó
Braun-féle lipoprotein, amely
Acta, 435,
335-337, 1976] által ismertetett módon állítható elő.
Ezek közül előnyösen alkalmazható az LPS, még előnyösebben a
Lipid A. A
Lipid A azért használható különösen előnyösen a találmány céljaira, mert kevésbé toxikus, mint a teljes LPS «
molekula. A találmány céljára az LPS-t gram-negatív baktériumokból történő kinyeréssel és tisztítással is előállíthatjuk a Galanes, C. és munkatársai [Eur. J. Biochem, 2, 245, 1969] valamint a Skelly és munkatársai [Infect. Immun., 23. 287, 1979] által leírt módszerrel.
A találmány céljára szinergistaként használható biológiailag aktív vegyületek közös vonása, hogy az interleukin-1 (IL-1) termelését és/vagy kiválasztását indukálják.
Az IL-1 proteint sokféle normál és transzformált sejt termeli, elsősorban a makrofágok, monociták és keritanociták. A monocitákban mikrobiális termékek, pl. endotoxinok, exotoxinok, élesztősejt-fal vagy vírus-eredtű hemagglutininok indukálják az IL-1 termelését. Az IL-1 széleskörű biológiai hatást gyakorol az immunrendszer sejtjeire valamint az immunrendszeren kívüli sejtekre, és a gyulladást okozó anyagok között is számontartják.
Ha egy AD-szuppresszív hatóanyag orális vagy enterális beadásával egyidejűleg egy szinergistát is beadunk, ez jelentősen megnöveli a hatóanyag tünetelfojtó hatását azon autoimmun betegségre nézve, melyre a hatóanyag specifikus. Másszóval: az autoimmun betegség kezelésének hatékonysága a szinergista egyidejű adagolásának hatására megnövekszik (az egymagában alkalmazott AD-szuppresszív anyag hatásához képest).
Ha a találmány szerinti módszer követésekor orálisan vagy enterálisan (közvetlenül a gyomorba) beadunk egy AD-szuppresszív anyagot, az bejut a vékonybélbe, ahol érintkezébe lép a Peyer-plakk sejtjeivel - ez a bélfal altt elhelyezkedő ímmunociták együttese. Ezek a sejtek valamint a bélhám alatt • · • »«···*· • · « a ·« ·« ···· A * «· « • *·····» ·« ·· ’ - 12 elhelyezkedő intraepiteliális limfociták összeköttetésben vannak az immunrendszerrel, beleértve a lépet és a nyirokcsomókat is. Ennek eredményeként létrejön az AD-szuppresszív anyaggal szembeni tolerancia, és az emlős saját szövetei ellen irányuló immunreakció legyengül vagy teljesen elfojtódik. Az így kialakított tolerancia specifikusan az autoimmun betegségekre érvényes: a kezelt emlősnek a kórokozókra adott immunválaszában semmiféle változást nem észleltünk. Továbbá: egy irreleváns (vagyis autoimmun betegségekkel nem kapcsolatos) antigén, pl. marhaszérumalbumin orálisan vagy enterálisan beadva semmiféle hatást nem gyakorolt az autoimmun betegség klinikai tüneteire, sem pedig az emlősnek olyan betegségekre való hajlamára, mint pl. az EAE vagy az adjuváns arthriris (AA), amelyek az autoimmun betegségek modelljeiként szolgálnak.
Az AD-szuppresszív anyaggal kialakított tolerancia dózisfüggő: a betegség klinikai vagy szövettani tüneteinek elfojtása (vagy enyhítése) széles orális illetve enterális dózistartományon belül növekszik az AD-szuppresszív anyagból beadott dózis növelésével.
A szinergistának az a hatása, hogy fokozza az orálisan beadott autoantigén által előidézett toleranciát, ugyancsak dózisfüggő, vagyis a szinergista dózisának növelésével növekszik. De minthogy a szinergistának az orálisan előidézett toleranciát fokozó hatása valóban szinergetikus, a szinergista várhatóan az AD-szuppresszív anyag viszonylag nagy orális vagy enterális dózisaival létrehozott toleranciát is tovább növeli. Vagy megfordítva: a szinergista egyidejű alkalmazása várhatóan lehetővé teszi a klinikai tünetek azonos mértékű elnyomásához az
AD-szuppresszív anyagból felhasználandó dózis csökkentését.
A szinergistának az orálisan előidézett toleranciát fokozó hatása az AD-szuppresszív anyagra nézve nem specifikus. A specifikus autoantigén és a találmány szerinti szinergista együttes adagolásának hatására mind az EAE-re mind pedig a DHT-re adott immunválaszok gyengültek. Tehát a szinergistának az a hatása, amit egy adott autoantigénnel szemben orálisan előidézett specifikus tolerancia növelésében kifejt, kiterjeszthető bármely más, a találmány körébe tartozó AD-szuppresszív anyagra. Ha viszont a szinergistát önmagában adtuk be, ez csak minimális mértékben vagy egyáltalán nem gyengítette az emlősnek egy meghatározott autoantigénre adott immunválaszát, sem pedig az emlősnek egy exoantigénre (vagyis egy valódi idegen antigén anyagra) kialakuló immunreakcióját. Tehát a találmány szerinti szinergista kétszeresen is előnyös: növeli az autoantigénnel szembeni specifikus immunválasz elfojtását, és ugyanakkor lényegében semmiféle hatást nem gyakorol a kezelt paciensnek a támadó kórokozókkal szemben kifejtett immunreakciójára.
Az autoimmun betegségek tanulmányozására többféle modellt dolgoztak ki. A sclerosis multiplex modelljeként a kísérletileg előidézett allergiás encefalomielitist (EAE) tanulmányozták egereken és más emlősökön. A betegséget MBP és egy hatásfokozó adalék (pl. a Freund-féle komplett adjuváns) parenterális beadásával váltják ki. Ez a kezelés (a kezelt fajtól és az adagolás részleteitől függően) a demielizácó (myelinvesztés, elvelőtlenedés) monofáziás vagy egy váltakozva súlyosbodó/enyhülő formáját idézi elő. A betegség jellemzői azonosak a sclerosis multiplex jellemzőivel. Ha a hátsó ideggyökbe parenterálisan • · · · · ♦ ·« ···« 4 · · « · • »···««· ·4 *«
- 14 Mycobacterium tuberculosis-t adunk be Freund-féle komplett adjuváns olajjal együtt, ez az emberi reumás izületi gyulladás tüneteivel járó betegséget idéz elő az arra hajlamos állatban. Továbbá: Lewis patkányokban S-antigén és egy adjuváns beadásával szaruhártyagyulladást idézhetünk elő, míg a NŐD egerekben és a BB patkányokban a diabetes spontán fejlődik ki.
Sejt-közvetítésű autoimmun betegségek például a sclerosis multiplex, a reumás arthritis, az autoimmun uveoretinitis (szaruhártyagyulladás), a diabetes (különösen a fiatal korban fellépő) valamint az autoimmun thlroiditis (pajzsmirigygyulladás). Az alábbi 1. táblázatban példaként felsorolunk néhány betegséget és azokat az antigéneket, melyek orálisan vagy enterálisan beadva hatásosak ezen betegségek kezelésére.
1. Táblázat
Betegség_________________Specifikus antigén sclerosis multiplex reumás arthritis autoimmun thiroiditis autoimmun uveoretinitis diabetes krónikus aktív hepatitis adrenalitis (mellékvesegyulladás) polymiositis (sokizomMBP kollagén tiroglobulin
S-antigén
Isiét (sziget-) sejtkivonat májkivonat mellékvesekivonat gyulladás) izomkivonat «
·« ♦ · • « * ····* ·« ·*
Bármely autoimmun betegség kezléséhez szövetkionatok valamint a fenti specifikus antigének használhatók.
További autoimmun betegségek és ezek specifikus autoantigénjei és/vagy a kezelésükhöz használható célszövetek leírása taláható Schwartz, R.S. és munkatársai Fundamental Immunology [Second edition; Paul W.E., Ed., 819-859. oldal, Raven Press, NY, 1989] című művében.
A találmány céljára szolgáló autoantigéneket az adott autoimmun betegség célszövetéből nyerhetjük ki. Például a sclerosis multiplex kezelésére szolgáló mielin-bázisú proteint munkatársai (ld. alább) által alkalmazott módszerrel nyerjük ki emlősökből, majd tisztítjuk, amint az alábbi 1. példában látható.
A reumás arthritis tüneteit mutató betegség kezelésére a kollagént Trentham és munkatársai [J. Exp.
Med., 146.
857, 1977] módszerével nyerjük ki és tisztítjuk.
A tisztított S-antigént az uveoretinitis kezeléséhez a 379,778 sz. USA függő szabadalmi bejelentés szerinti módon állíthatjuk elő.
A találmány céljára szolgáló autoantigének fragmentumait és analógjait a szakmában ismert szilárd fázisú eljárásokkal szintetizálhatjuk. Ilyenek leírása található például az alábbi helyeken: Merrifield, R.B.
21,
A.R.
Tam,
Ex. Bioi.,
| 412, 1962 és J. Am. | Chem | . Soc | 85, 2149, 1963] és | Mitchel, |
| és munkatársai [J. | Am. | Chem. | Soc., 98, 7357, 1976] | valamint |
| J. és munkatársai | [J. | Am. | Chem. Soc., 105, 6442 | , 1983]. |
Analógokat úgy építhetünk fel, hogy meghatározunk egy ekvivalens aminosavszekvenciát, majd a fent ismertetett peptid-szintetizá• · · · ·· ·« • · · · · « « · * • ····«·· ·· ·« lási módszereket alkalmazzuk.
Például az ismert GB-MBP aminosav-szekvencia felhasználásával a fenti módszereket alkalmazó G. Hashim [Myelin: ChemistRy and Biology, Alán R. lisa, N.Y., 1980] vagy Eyler, E.H. [Advances in Experimental Medicine and Biology, 98. 259-281, 1978] álltai ismertetett módszerekkel állíthatunk elő analógokat. így például egy, a tengerimalac MBP (GP-MBP) 72-85. aminosav-szakaszának megfelelő szekvenciájú peptidet - melyet Hashim ír le - a fent ismertetett módszerekkel kémiai úton szintetizálhatunk oly módon, hogy a terminális aszparagint glutaminra cseréljük (aminosav-szubsztitúció). A peptid betegség-elfojtó hatását orális vagy enterális beadás esetén az alábbi 2. példában leírt módszerekkel vizsgálhatjuk.
A betegséget elfojtó analógok és fragmentumok a szakmában ismert rekombinációs DNS technikákkal is előállíthatok .
A találmány további tárgya autoimmun betegségekben szenvedő emlősök kezelésére szolgáló gyógyszerkészítmények, melyek egy szinergistából az AD-szuppresszív anyag hatásának fokozásához elegendő mennyiséget és egy gyógyászatilag elfogadható hordozó- vagy hígító anyagot tartalmaznak. A készítmény tartalmazhat továbbá egy, az autoimmun betegségre nézve specifikus AD-szuppresszív anyagot olyan mennyiségben, amely (az anyagot önmagában vagy a szinergista adott mennyiségével együtt alkalmazva) hatásosan gátolja az autoimmun betegség klinikai tüneteinek kifejlődését. A találmány szerinti kezelést követkően az autoimmun betegség akár egyetlen tünetének statisztikusan szignifikáns mértékű csökkenése a találmány oltalmi körébe tartozik.
··
A találmány szerinti készítmények mindegyike tartalmazhat a szakmában ismert inért komponenseket, így gyógyászatilag elfogadható hordozó-, hígító-, bilizáló vagy emulgeálószerekett sókat.
hagyományos eljárásokkal, a szakmában töltőanyagokat, szoluPéldául tablettákat a ismert hordozóanyagok alkalmazásával formulálhatunk. A találmány szerinti eljárásban alkalmazott kapszulákat bármely gyógyászatilag elfogadható anyagból előállíthatjuk, így például zselatinból vagy cellulózszármazékokból. Alkalmazhatunk továbbá a hatóanyagot késleltetten leadó rendszereket és/vagy az orálisan beadott dózisformákhoz enterális bevonatokat, melyeknek leírása megtalálható például a
4,704,295 (1987. november 3.), a 4,309,404 (1982. január 5.) valamint a 4,306,406 (1982. január 5.) számú USA-beli szabadalmi leírásban.
Szilárd hordozóanyagként használhatunk keményítőt, cukrot, bentonitot, szilikagélt vagy más szokásosan alkalmazott hordozóanyagot. A találmány szerinti készítményekben alkalmazható hordozó- és hígítóanyagokra további példaként említjük a sóoldatot (nátrium-klorid), szirupot, dextrózt és vizet.
Megjegyezzük, hogy az egyes dózisformák hatóanyag-tartalma önmagában nem képez hatásos mennyiséget, hiszen azt több dózisegység (pl. kapszula vagy tabletta vagy ezek kombinációi) beadása révén érhetjük el.
A találmány szerinti szinergistát előnyösen orálisan vagy enterálisan adjuk be. Az előnyös orális vagy enterális gyógyszerforma lehet pl. egy tabletta vagy kapszula, mely az adott autoimmun betegségre nézve specifikus AD-szuppresszív anyag hatásos mennyiségével együtt vagy anélkül körülbelül 1 és • ·
300 mg közötti mennyiségben egy vagy több, a találmány szerinti szinergistát tartalmaz.
Az autoantigént, annak fragmentumát vagy analógját általában orálisan vagy enterálisan adjuk be az emlősnek, körülbelül napi 15 mikrogramm/testtömegkg és 15 mg/testtömegkg közötti, előnyösen körülbelül napi 300 mikrogramm/testtömegkg és 12 mg/testtömegkg közötti mennyiség-ben, egyszeri vagy többszöri dózis alakjában.
A szinergistát előnyösen orálisan vagy enterálisan adjuk be az emlősnek, széles határok - körülbelül napi 15 mikrogramm/testtömegkg és 15 mg/testtömegkg, előnyösen körülbelül napi 300 mikrogramm/testtömegkg és 12 mg/testtömegkg - között változtatható mennyiségben, egyszeri vagy többszöri dózis alakjában. A szinergistát orálisan vagy enterálisan beadhatjuk az adott autoimmun betegségre nézve specifikus autoantigén, annak fragmentumának vagy analógjának beadása előtt (legfeljebb 24 órával), azzal egyidejűleg vagy utána (legfeljebb 24 óra múlva). Amint azt a szakmában jártasak tudják, a pontos dózis és beadási gyakoriság az AD-szuppresszív anyag és a szinergista hatásosságának, a kezelendő beteg korának, nemének, testtömegének és fizikai erőnlétének valamint az adott esetben együttesen alkalmazott egyéb kezeléseknek függvénye. Tehát a dózist és a beadási időrendet ezen tényezők alapján kísérletileg kell meghatározni. Ez a meghatározás azonban csak rutin-kísérleteket igényel, amilyeket az EAE-re vonatkozóan pl. Higgins és Weiner ír le [J. Immunoi., 140. 440-445, 1988].
Mint az alábbi 8. példában látható, az IL-1 szubkután adagolása megnövelte az orálisan beadott MBP AD-szupp• · resszív hatását. Ez annyiban nagyon meglepő, hogy az IL-l-ről kimutatták, hogy a helper (az immunválaszt elősegítő) T-sejtekre - melyek az EAE közvetítői - immunstimuláló hatást gyakorol, így inkább azt várnánk tőle, hogy súlyosbítja a betegség tüneteit. Tehát, bár az IL-1 termelését és/vagy kiválasztását indukáló szinergistát előnyösen orálisan vagy enterálisan adjuk be, az IL-1 parenterális, előnyösen szubkután beadása egy emlősnek körülbelül 0,2 mg és körülbelül 60 mg/testtömegkg közötti koncentrációban, az AD-szuppresszív anyag (fenti dózisokban) történő orális vagy enterális beadásával kombinálva, ugyancsak a találmány oltalmi körébe tartozik. A találmány alkalmazásához használható IL-1 sokféle kereskedelmi forrásból beszerezhető, így pl. Boehringer Mannheim (Indianapolis, IN), Amgen Biologicals (Thousan Oaks, CA) vagy ICN Biochemicals (Cleveland, OH).
Ha az AD-szuppresszív anyagot és a szinergistát orálisan adjuk be, akkor bekeverhetjük különböző táplálékokba, és megetethetjük szilárd, félig szilárd, szuszpenziós vagy emulziós formában, továbbá bekeverhetünk gyógyászatilag elfogadható hordozó- és ízesítőanyagokat, valamint egyéb adalékokat is.
Ha az AD-szuppresszív anyagot és a szinergistát enterálisan adjuk be, akkor ezt megtehetjük szilárd, félig szilárd, szuszpenziós vagy emulziós alakban, továbbá belekeverhe tünk bármely jól ismert, gyógyászatilag elfogadható hordozóanyagot, mint pl. víz továbbá szuszpendáló- vagy emulgeálószereket.
Az AD-szuppresszív anyagot és a szinergistát beadhatjuk együtt, ugyanazon dózisformán belül, vagy egyidejűleg, de külön dózísformában, vagy egymás után, külön dózisformában.
A 2.-8. példában egy szinergistának és egy AD » · szuppresszív anyagnak a találmány szerinti együttes alkalmazását és ennek az együttes alkalmazásnak a specifikus toleranciát fokozó hatását mutatjuk be.
E példák szerint, ha Lewis patkányoknak bakteriális lipopoliszacharidot (LPS) vagy a Lipid A részből és egy pollszacharid részből álló LPS Lipid A részét szinergistaként beadjuk, ez növeli az orálisan beadott MBP védőhatását az EAE-vel szemben. Az AD-szuppresszív anyagnak orálisan egymagában történő alkalmazásához képest a betegség indukciója, súlyossága és a betegségi index egyaránt csökkent, mikor az AD-szuppresszív anyagot egy szinergistával együtt alkalmaztuk. A találmány szerinti szinergisták akkor is hatásosan elnyomták a betegség tüneteit, ha azokat a betegség aktív fázisában az autoantigénnel együtt alkalmaztuk, amint a 6. példából látható, melyben tengerimalacok krónikus EAE-jét használtuk modellként.
Az MBP + LPS vagy MBP + Lipid A beadása a kezelt állatok késői túlérzékenységi reakcióit (DTH) is jelentős mértékben csökkentette. Mind az EAE-t mind pedig a DTH-t CD4 + T-sejtek által közvetített jelenségnek tartjuk. Tehát a DTH csökkenése igazolja a találmány szerinti szinergista hatását. A Lipid A vagy az LPS önmagában, az autoantigén MBP nélkül adagolva mind az EAE mind pedig a DTH esetében kicsi vagy semmiféle hatást nem fejt ki. Tehát a szinergistának a toleranciát fokozó hatása nem tekinthető nonspecifikusnak.
Feltételezhető, hogy a találmány szerinti szinergisták más autoimmun betegségek - így pl. arthritis, diabetes valamint az 1. táblázatban felsorolt betegségek - kezelése során is javítják, vagyis növelik az orálisan vagy enterálisan beadott
- 21 AD-szuppresszív anyag hatását.
« «
• fi
Ezen kívül, amint a 7. példából látható, az orálisan beadott MBP + LPS a kezelt állatok bélhámjából izolált sejtekben csökkentette a II.
osztályú hisztokompatibilitási molekulák expresszióját (termelését) az MBP-vel kezelt patkányok I osztályú hisztokompatibilitási molekuláinak expressziójához képest. Anélkül, hogy egy elmélet mellett köteleznénk el magunkat, feltételezzük, hogy a II. osztályú expresszió megkülönböztetett csökkentésével az LPS csökkentheti a CD4+ T-sejtek (az indukáló helper T-sejtek) ellen irányuló antigén prezentációt. A tolerancia orális előidézése feltehetően egy másféle mechanizmus szerint - a szuppresszor T-sejtek indukciója útján - működik, ezért az LPS és MBP együttes adagolásakor szinergetikus hatás észlelhető.
Az alábbi példák a találmány további szemléltetésére szolgálnak, annak oltalmi körét nem befolyásolják.
1. Példa:
A találmány szerinti módszer alkalmazásához használt autoantigéneket az alábbi módszerekkel állítottuk elő:
A GP-MBP-t tengerimalac agyszövetből a Diebler, G.E. és munkatársai [Prep. Biochem., 2., 139, 1972] által leírt tisztítási módszerrel állítottuk elő vagy Pel Freeze-től (Rogers, Arkansas) szereztük be. Röviden: a központi idegrendszer szöveteit izoláltuk és kloroform-metanol elegyben homogenizáltuk, acetonnal extraháltuk, leszűrtük, majd ugyanazon oldószerben reszuszpendáltuk. Az oldatot acetonnal extraháltuk, leszűrtük, vízben reszuszpendáltuk, a pH-ját 3,0-ra állítottuk be, majd 1 órán át inkubáltuk. Ezután az oldatot lecentrifugáltuk, 8 M karbamid oldattal extraháltuk, CM-5-öt adtunk hozzá, a pH-ját 11-re állítottuk be, az oldatot leszűrtük, és karbamidban kétszer reszuszpendáltuk. Ezután az oldatot ismét leszűrtük, vízben kétszer reszuszpendáltuk, leszűrtük, 0,121 N sósav-oldatban reszuszpendáltuk, ismét leszűrtük, 10-szeres térfogatú desztillált vízzel szemben dializáltuk, és felhasználás előtt liofilizáltuk.
2. Példa: LPS beadása növeli az orálisan beadott MBP védőhatását az EAE-vel szemben
Egy kísérlet-sorozatban 6-8 hetes Lewis patkányok (Harlan-Sprague Dawley, Indianapolis, IN) gyomrába 18-as méretű rozsdamentes betápláló tűvel (Thomas Scientific, Swedesboro, NJ) PBS-ben 1 mg MBP-t vagy (ugyancsak PBS-ben) 1 mg LPS-t intubáltunk külön-külön vagy kombinációban 1 mg MBP-t + 1 mg LPS-t. Ezt a műveletet az immunizálás előtt 5-ször végeztük el (összes dózis: 5 mg). Az LPS (Sigma Chemlcal Co.z St. Louis, MO) a 0127:B8 E.colí törzstől származott. Az utolsó inkubálás után 2 nappal a patkányokat mindegyik talpi zsírpárnájukon immunizáltuk azonos térfogatú komplett Freund-féle adjuvánsban (CFA) 25 mikrogramm MBP-t és 4 mikrogramm Mycobacterium tuberculosis-t (Difco, Detroit, MI) tartalmazó keverékkel, és a következő 2-3 héten figyeltük őket az EAE betegség szempontjából. A betegség paralízís alakjában jelentkezett. Súlyosságát a következő pontrendszerrel értékeltük: 0 - normál, 1 = petyhüdt farok, 2 = a hátsó láb bénulása, 3 = inkontinencia (visszatartási képtelenség), 4 = • ·£ * · 44 4 • 4 4 4 ···4
HM 4 · ··« • 44« «··· ·*··
- 23 tetraplegia (a négy végtag együttes bénulása) és 5 = haldokló. Az EAE súlyossága a kísérlettől függően 2 és 5 között változott. A betegség súlyosságát az ú.n. betegségi index-szel is értékeltük. Ezt úgy számítottuk az egyes állatokra, hogy a betegség időtartamát (napokban) szoroztuk az elért legmagasabb betegségi pontszámmal. A pontozás klinikai úton, a minták titkosításával történt. Az eredmények az alábbi 2. táblázatban láthatók:
• *♦ • ·»··«·· • · · * ·« ·* ···· · · » · 9 • ··· ··· ·· V·
Az orálisan beadott LPS növeli az MBP orálisan indukált EAE-elnvomó hatását
| 1 1 X 1 | co o | aj co | o co rH | o 03 r- | 05 | |
| H | ω i | X | X | X | X | |
| 0 | Q 1 | CM | t—< | 1 | o | in |
| 'tó | X 1 | o | ||||
| 0 | Η 1 | + 1 | +1 | +1 | +1 | X |
| o | 1 | o | ||||
| w | 1 | o | in | co | CM | V |
| H | 1 | kO | r-1 | co | Γ-- | a |
| ω | 1 | X | X | X | X | |
| CQ | 1 | co | in | CM |
| H 0 1 | ||||||
| tó '< 1 | ||||||
| '<! co i | 05 | o | o | |||
| X 0 1 | co | m | co | 0 | aJ | |
| Η Ο 1 | co | co | r-H | Ό | ω | |
| X ίχ 1 | X | X | X | X | '05 | |
| <1 tó 1 | o | o | O | o | uo | -P |
| XO 1 | o | Ή | ||||
| 0 1 | +1 | + 1 | +1 | +1 | r—I | |
| 0 1 | o | a | ||||
| O 1 | co | 03 | o | co | V | o |
| 0 1 | 03 | 00 | 4—< | in | d | ω |
| < 1 | X | s | X | X | 03 | |
| J 1 | cm | r-H | rH | o | X5 |
| — 1 | X | O | o | ω | ω | ω | X | d | ||||
| X | Cl 1 | 03 | co | o | 0 | Φ | Φ | Φ | Φ | ω | ||
| < | oj i | co | in | in | 0 | d | d | d | β | N | ||
| Eh | β I | s | X | X | V | •Φ | 'Φ | 'Φ | Ή | •p | ||
| tó | — I | o | o | o | o | aj | X | X | X | Φ | ·> | |
| < | I | X | ||||||||||
| Eh | I | +1 | +1 | +1 | +1 | • | N | N | N | 'φ | ||
| :O | I | ω | O | O | O | X | -P | |||||
| Q | I | in | co | Γ- | X | X | X | ín | ||||
| H | I | 00 | in | CM | CTi | 'fű | '03 | >05 | 'Φ | -P | Ή | |
| I | X | ·. | X | X | X | X | X | a | o | |||
| I | kD | co | X | β | β | β | d | Φ | r-» | |||
| I I | •H ε | •H ε | H ε | tó | Oj r—< | <x fű | ||||||
| H | I | r—1 | ·—1 | X | CQ | <—> | ||||||
| 0 | >H | | aj | Ή | •—1 | >—1 | X | -P | |||||
| 'tó | X 1 | o | o | o | ω | |||||||
| Q | '<í 1 | X) | X | in | Sn | P | u | N | ||||
| ω | tó 1 | CM | xr | 03 | σ> | o | X | X | X | fű | 05 | |
| 0 | < 1 | cm | CM | CM | 0 | X | β | β | β | |||
| w | 1 | \ | \ | \ | o | o | o | o | V) | -p | ||
| Eh | 1 | CM | o | •s—1 | 0 | V | X | X | X | 'Φ | Φ | |
| tó | 1 | CM | CM | CM | ^H | Λ | ||||||
| tó | 1 | fű | ro | <Ű | tó | Pí | ||||||
| 0 | 1 | <Ű | CQ | Φ | X | |||||||
| tó | 1 | ^-x | ω | X | Λΐ | >1 | ||||||
| X | 1 | Ή | '05 | i£> | τ—1 | o | + | 'Φ | rj | |||
| 1 | <—1 | X | O | o | o | 0 | -P | |||||
| 1 | Ο | Π5 | tó | p | '05 | |||||||
| 1 | P | Φ | o | o | o | tó | 'Φ | P | ||||
| 1 | -P | CÜ | <0 | X | fű | |||||||
| 0 | 1 | d | ω | ω | V | V | V | N | a | |||
| tó | 1 | o | 'fű | ><ű | 0 | 03 | ||||||
| tó | 1 | x | X | tó | d | d | d | |||||
| tó | 1 | -— | 03 | <n | tó | 05 | ||||||
| co | 1 | Φ | Φ | tű | X | o | X | —. | ||||
| w | 1 | H | X) | X | + | |||||||
| tó | 1 | £ | ||||||||||
| 1 | £ | 0 | tó | tó | ||||||||
| 1 | Φ | tó | CQ | CQ | ||||||||
| 1 | ω | tó | X | X |
• · · · ·· ·· ···· « « · · · • ··· ···· ·· ··
- 25 A fenti kísérletek azt mutatják, hogy az LPS és MBP együttes adagolásával kezelt állatokban a betegséggel szembeni védettség jelentős mértékben javult azokhoz képest, amelyeket csak MBP-vel kezeltünk. Az LPS és MBP együttes adagolása csökkentette a megbetegedési arányt (29 közül 12 állat betegedett meg, szemben a kontrollminta 22-ből 22-es és az MBP-vel kezelt minta 29-ből 21-es arányával), továbbá a betegség időtartamát, az átlagos maximális súlyosságot és a betegségi index értékét. Figyelemre méltó, hogy az LPS önmagában kisebb hatást gyakorolt az állatok EAE-re való hajlamára, mint az MBP akár önmagában, akár az LPS-sel együtt. Az eredmények világosan mutatják az AD-szuppresszív anyag (MBP) és egy szinergista (LPS) együttes alkalmazásának szuperadditív, vagyis szinergetikus hatását a betegség elfojtásában .
3. Példa: Az LPS Lipid A része ugyanolyan hatásos
Az LPS egy lipid részből és egy poliszacharid láncból álló szerkezet [Chiller, J.M. és munkatársai, Proc. Nat. Acad. Sci USA 70: 2129-2133, 1973]. Kísérleteink során azt tapasztaltuk, hogy a Lipid A az EAE-vel szembeni védelemben ugyanolyan jó vagy még jobb szinergistaként működik, mint az LPS. Patkányoknak 9-10 fős csoportokban fejenként 75 mikrogramm, Salmonella minnesota Re 595-től származó, a Sigma Chemical Co.-tól beszerzett Lipid A-t adtunk be a fenti 2. példában leírt eljárást követve. Az EAE-t ugyancsak a 2. példa szerinti módon indukáltuk. Az eredmények a 3. táblázatban láthatók.
- 26 co
Lipid A az LPS molekula aktív része
| X | |||||||||
| ω | |||||||||
| Q | <3 | τί | |||||||
| tó | Ό | ||||||||
| Η 1 | X | Γ- | σ> | τ—1 | Φ | ||||
| H | 1 | X | X | X | |||||
| 0 | 1 | τ—I | r~I | CQ | m | ||||
| 'W | 1 | + 1 | o | ||||||
| ω | 1 | +1 | +1 | +1 | X | ||||
| 0 | 1 | ο | o | ||||||
| ω | 1 | CQ | co | σ | o | V | |||
| Eh | 0 1 | χ | C0 | r- | m | Q< | |||
| W < 1 | X | X | |||||||
| CQ | ω ι | CQ | *—1 | c£> | |||||
| ω ι | CQ | r—1 | |||||||
| Ο ι | |||||||||
| >Η | | |||||||||
| J ι | |||||||||
| ο ι | (ΰ | o | ΤΣ) | ||||||
| ω | ω ι | Ο | co | σ | |||||
| H | ι | «—i | CQ | CQ | CM | Φ | |||
| j | ι | X | X | X | X | ||||
| ι | ο | ο | O | o | <— | ||||
| ι | o | ||||||||
| H | ι | +1 | +1 | +1 | +1 | X | |||
| X | ι | o | |||||||
| ι | ο | CO | V | co | |||||
| ι | τ—( | σ> | o | a | '<XJ | ||||
| ι | X | X | X | +J | |||||
| ι | CO | co | r—| | o | Ή | ||||
| ι | <—1 | ||||||||
| ι | Cl | ||||||||
| — ι | o | ||||||||
| a I | co | ||||||||
| ω ι | Φ | ||||||||
| C I | n | o | XO | ||||||
| — 1 | <0 | in | LŰ | <D | |||||
| 1 | CQ | co | r—1 | Φ | N | ||||
| £ | 1 | X | X | X | X | co | |||
| < | 1 | ο | ο | o | r—( | in | co | ||
| Eh | 1 | o | O | ||||||
| tó | 1 | +1 | +1 | +1 | +1 | X | |||
| 1 | o | Λ! | |||||||
| Eh | 1 | ο | kO | o | V | Φ | |||
| Ό | 1 | Γ~ | LO | Λ | C | ||||
| Q | 1 | X | X | X | X | —' | •H | ||
| H | 1 | Γ- | o | <0 | CO | .tó | |||
| >Η 1 | 'Φ | ||||||||
| tó 1 | -P | ||||||||
| '< 1 | |||||||||
| H | tó 1 | 'Φ | |||||||
| ω | < 1 | ||||||||
| 'W | 1 | a | |||||||
| Q | 1 | ||||||||
| w | 1 | .__ | |||||||
| 0 | 1 | < | |||||||
| M | 1 | ||||||||
| Eh | 1 | Ό | |||||||
| W | 1 | •H | |||||||
| CQ | 1 | ο | o | a | |||||
| 0 | 1 | I | σ> | s—1 | σ' | m | •H | ||
| ω | 1 | \ | \ | \ | íQ | J | |||
| £ | 1 | ο | ω | o | CO | cö | + | ||
| 1 | <—< | r—1 | Λί | O, | |||||
| 1 | Ή | CQ | |||||||
| 1 | +4 | £ | |||||||
| 1 | •Η | -—' | |||||||
| 1 | —| | C | |||||||
| 1 | ι—] | t? | N | ||||||
| 1 | 0 | < | •H | ω | |||||
| 1 | Μ | N | |||||||
| 1 | -Ρ | Ό | co | vH CO | |||||
| 1 | α | H | LŰ | rH | Ο 'Φ | ||||
| 1 | ο | a | e o | o | o | ||||
| 1 | Λί | •H | φ - | - ÍX | |||||
| ω | 1 | — | < | J | α o | o | O CQ | ||
| 1 | £ | ||||||||
| j | 1 | •Η | + | V V | V | V | |||
| ω | 1 | H | N | ||||||
| Ν | 1 | ε | Λ | CU | CX, | a a | a | a Φ | |
| ω | 1 | ο | •H | CQ | CQ | ||||
| tó | 1 | ω | £ | £ | η λ | o | Ό Φ |
I I I
Amint a fenti 3. táblázaton szereplő eredmények mutatják, a Lipid A 74 mikrogrammos orális dózisban az MBP-vel együtt beadva jelentősen növeli az EAE-vel szembeni védelmet, ugyanakkor a kontrollcsoportnál mért 12,12-ről illetve az MBP-vel kezelt csoportnál mért 11,6-ról 0,06-ra csökkenti a betegségi indexet. Ráadásul, az (MBP+Lipid A) val kezelt patkányok megbetegedési aránya kisebb (az összes többi csoport 100 %-os értékével szemben csak 33 %), betegségük időtartama rövidebb és súlyossága is alacsonyabb fokozatú, mint a csak MBP-vel vagy Lipid A-val kezelt állatoké .
4, Példa: Késői túlérzékenységi reakció
A fenti 2. és 3. példa szerinti kísérletekben a betegség kifejlődését a paralízis mérése útján vizsgáltuk. Egy sor kísérletet hajtottunk végre annak eldöntésére, hogy hogy más immunológiai mérésekkel is kimutatható-e szuperadditív hatás a szinergisták használatakor. Minthogy az EAE-t CD4+ T-sejt-függő betegségnek tartják, és ez a sejttípus elsődleges szerepet játszik a késői túlérzékenységi (DTH) reakciókban, LPS-sel kezelt állatok DTH reakcióit mértük, hogy megállapítsuk: észlelhető-e a betegség elfojtása. E DTH reakciókat a szokásos módon hoztuk létre: előzetesen MBP-vel nem kezelt, MBP 200-zal szenzitivizált és/vagy 1 mg MBP-vel és/vagy 1 mg LPS-sel kezelt patkányok fúlkagylójába 50 míkroliter autoantigént (MBP, 200 mikrogramm/ml) fecskendeztünk be, majd 48 óra elteltével mértük a fúl duzzadását. Kontrollként az MBP-vel szenzitivizált
- 28 patkányoknak 50 mikroliter Micobacterium tubercolosis-t (Mt) adtunk be 200 mikrogramm/ml koncentrációban. A méréseket a J. Immunoi., 125. 483, 1980 alapján végeztük, a fülduzzadás átlagértékét mm-ben fejeztük ki. Az eredmények az 1. és 2. ábrán láthatók, ahol az ordináta a patkányfül vastagságának az MBP beinjektálása előtt mért és a 48 múlva mért értéke közötti különbséget mutatja. Az 1. ábrán az LPS-sel, a 2. ábrán pedig a Lipid A-val kezelt patkányok DTH eredményei láthatók.
Azoknál az állatoknál, melyeket MBP és Lipid A vagy LPS kombinációjával kezeltünk, a DTH reakciók határozott és szignifikáns (45 %-os) csökkenése észlelhető. Önmagában alkalmazva sem a Lipid A, sem pedig az LPS nem fejt ki semmiféle, a fülduzzadást gátló hatást (lásd az 1. illetve 2. ábrán). A DTH-nak az MBP és Lipid A vagy LPS kombinációjának beadását követő elnyomása antigén-specifikus, mert az Mt-re adott DTH reakciókat nem érintette.
5. Példa: A beadás módia befolyásolna a szineroista hatást
A találmány szerinti szinergista hatásmechanizmusának vizsgálatára a 2. példában leírt kísérletet ezúttal úgy hajtottuk végre, hogy az 5 alkalommal orálisan (PO) vagy szubkután (SQ) beadott 1-1 mg MBP-vel együtt mindig beadtunk 1 mg szinergistát (LPS). A kontrollmintákat csak MBP-vel injektáltuk be. Az eredmények az alábbi 4. táblázatban láthatók.
• ·
- 29 i i I I I I I I I I I
Kz. LPS orálisan beadva lobban növeli a toleranciát mint más úton beadva
| X 1 | ||||||||
| ω i | ||||||||
| Q 1 | Ό | |||||||
| X 1 | 00 | ιη | fÚ | υ | ||||
| Η Η 1 | Γ* | ν | co | 00 | Ο | |||
| 0 1 | X | X | 03 | 03 | ||||
| «ω i | CO | CN | X | ΙΓ) | X | X | ||
| ω i | 03 | ο | co | ιη | ||||
| 0 1 | + 1 | +1 | X | Φ | ||||
| ω i | +1 | ο | +1 | +1 | ΙΛ | |||
| H 1 | 00 | ο | V | 03 | ιη | 'Φ | ||
| ω i | X | X | <Ώ | Λ | ιη | ο | Χ> | |
| X 0 1 | ο | X | X | X | Ή | |||
| '< 1 | 03 | 1 | co | ιη | 03 | '—1 | ||
| ω i | Τ—< | 03 | α | |||||
| ω ω ι | ο | |||||||
| Η ο I | ω | |||||||
| X >< I | Φ | |||||||
| X | | Λ | Λ | ||||||
| SO I | ο* | θ' | Ά | υ | Λ | Φ | ||
| η ω ι | co | co | TJ | ιη | ιη | Ν | ||
| X ι | X | X | 03 | 03 | ω | |||
| rf 1 | ο | ο | X | ιη | X | X | <Ό | |
| £ 1 | ο | ο | ο | ο | Ο | |||
| 1 | + | | +1 | X | |||||
| ω ι | +1 | ο | +| | +1 | ΛΙ | |||
| ο ι | 03 | 00 | V | ιη | φ | |||
| 0 ι | X | X | C0 | Λ | θ' | Ο- | α | |
| < — ι | CO | τ—1 | X | '—' | X | χ | Η | |
| X ο. ι | ο | 03 | χτ | Φ | ||||
| Η <Ö 1 | ||||||||
| α ι | 'Φ | |||||||
| — I | -Ρ | |||||||
| 1 | Φ | Ρ | ||||||
| X 1 | 1 | Ο | Λ | Ο | υ | 'Φ | ||
| < ι | ιη | V | 5—1 | Ό | s—1 | ο- | ||
| Η 1 | X | X | <—1 | Λ | ||||
| ι | ο | ο | X | ιη | X | X | ||
| < 1 | ο | ο | ο | ο | Ο | |||
| eh 1 | +1 | + 1 | X | ω | ||||
| Ό 1 | +1 | ο | +1 | +1 | ||||
| Q 1 | ιΏ | V | ν | ω | ||||
| Η I | χ | X | 00 | (X | ο | ο | X | |
| tx 1 | Ο | ιη | X | — | X | X | χ | |
| Η X I | «Η | ιΏ | ιη | + | ||||
| ω <; ι | X | |||||||
| « χ ι | X | |||||||
| Q < 1 | X | |||||||
| ω ι | ||||||||
| 0 ι | Ν | |||||||
| Μ I | ιη | ιη | ιη | V | ν | Φ | ||
| Eh 1 | \ | \ | \ | \ | ||||
| ω ι | ιη | ιη | (Ν | ν | ν | ω | ||
| X ι | 'Φ | |||||||
| 0 ι | ||||||||
| ω ι | ||||||||
| X ι | —χ | Ο | ||||||
| ι | —ι | X | ||||||
| ι | <—ι | |||||||
| I | Ο | ω | ||||||
| 1 | Ρ | Ο | Ο | X | ||||
| 1 | -Ρ | Φ | IX | ω | χ | |||
| 1 | α | W | 1 | ιη + | ||||
| 1 | ο | 'Φ | ω | ω | Ο | ο X | ||
| 1 | λ: | Ό | IX | X | X | χ X | ||
| ω ι | —- | Φ | χ | χ | ο | ο s | ||
| Ή 1 | Φ | Ο | ||||||
| X 1 | Η | Ό | + | + | ω | V | V Ν | |
| Μ 1 | ε | ω Φ | ||||||
| Ν 1 | £ | X | X | X | ω | ΡΡ-Ζ | ||
| « 1 | φ | CQ | X | ω | X | |||
| X 1 | ω | X | X | X | χ | rö | Λ UO |
• · · · · • « · • ······· ·· ··
- 30 Az orálisan beadott LPS a betegségi indexet a kontrollcsoport 23,04-es illetve az MBP-vel kezelt csoport 8,0-as értékéről 0,26-ra csökkentette. A szubkután beadott LPS viszont megszüntette az MBP beadása után kialakult toleranciát, a betegségi index az önmagában adagolt MBP esetén mért 8,0-ról 16,5-re növekedett (4. táblázat). Ezekben a patkányokban mértük az MBP-re adott DTH reakciókat az eredmények megfelelnek azoknak, melyeket a klinikai betegség vizsgálatánál kaptunk. Ha az MBP mellett LPS-t is adtunk be orálisan, ez jobban elnyomta a DTH reakciókat, mint az MBP magában (ezeket az adatokat itt nem közöljük).
6, Példa: Szinercista beadása az EAE kiváltása után
A találmány szerinti szinergista egy aktív, fokozódó autoimmun betegségre gyakorolt hatásának vizsgálata céljából egy krónikus EAE-modellt tanulmányoztunk. A 13-as törzsből származó tengerimalacokat (Associated Rabbit Industries, East Bridgewater, MA) tengerimalac-mielin (beszerzési forrás: Pel-Freez, Rogers, AR) és steril fiziológiai sóoldat valamint vele azonos térfogatú, 4 mikrogramm - hővel elpusztított - Mycobactérium tűbercu1osis-t (Difco, Detroit, MI) tartalmazó inkomplett Freund-féle adjuváns 1:1 arányú elegyével szenzitivizáltunk oly módon, hogy a nyakszirti terület különböző helyeire a fenti reagensből 0,4 mlt injektáltunk be.
Az EAE első támadása az immunizálást követő 32. napon lépett fel. Ettől kezdve az állatok hetenként háromszor 10 mg szarvasmarha-mielin készítményt (Biopure,
- 31 Boston, MA) kaptak 150 mikrogramm Lipid A-val vagy anélkül, a 2. példa szerinti módon. Az állatokat 120 napon át minden másnap vizsgáltuk a betegség fellépése szempontjából. A vizsgálók a csoportok összetételét nem ismerték. A betegséget a hátsó láb bénulásával és az inkontinenciával jellemeztük. A betegség klinikai súlyosságát a következőképpen osztályoztuk: 0 = semmi abnormalitás; 1 = gyengeség, sántítás, az aktivitás csökkenése; 2 = enyhe bénulás; 3 = részleges bénulás; 4 = súlyos bénulás; 5 = halál. A klinikai pontszámokat úgy számítottuk, hogy a tényleges pontszámokat az észlelt esetek számával szoroztuk, majd osztottuk a teljes lehetséges maximális kockázati pontszámmal (ez azt az esetet jelenti, mikor mindegyik állat a 4-es klinikai súlyossági állapotban van), és a kapott értéket szoroztuk 100-zal. Az eredmények a 3. ábrán láthatók.
A 3c ábra a kontrollcsoport eredményeit mutatja. Itt az állatok klinikai pontszáma 61 és 87 közötti érték, átlagosan 73 (a 3a - 3c ábrán mindegyik oszlop egy-egy állatot jelent). A szarvasmarha-mielin orális beadása a klinikai pontszámot 19 és 72 közötti (átlagosan 53, 3b ábra), a szarvasmarha-mielin + Lipid A orális beadása pedig 19 és 26 közötti (átlagosan 22, 3a ábra) értékre csökkentette. Ez azt mutatja, hogy az AD-szuppresszív anyaggal együtt orálisan beadott szinergista hatásosan alkalmazható egy fokozódó autoimmun betegség kezelésére.
7. Példa: Az MBP + LPS-sel kezelt állatok bélhámseltlei eltérő mennyiségben exoresszáliák az I. és II, osztályú molekulákat
Ezekben a kísérletekben a bélhámsejteket
6-8-hetes nőstény Lewis patkányokból izoláltuk, melyeket előzőleg MBP-vel vagy MBP + LPS-sel kezeltünk. A bélnyálkahártya-hámsejteket normál Lewis patkányokból nyertük a Bland, P.W. és munkatársai [Immunoi., 58 , 1, 1986] által leírt módon. A vékonybelet (beleértve a nyombelet és a jejunum [éhbél] közeli szakaszát is) hosszirányban megnyitottuk, Hank-féle kiegyenlített sóoldattal (HBSS) alaposan átmostuk, majd 5 percen át 0,5 mM EDTA-t tartalmazó HBSS-ben szobahőmérsékleten inkubáltuk. A bolyhos epitheliumot és a nyálkát úgy távolítottuk el, hogy a nyálkahártyát egy gumizászlócskával borított üvegrúddal dörzsöltük.
A kapott csomókat Pasteur pipetta alkalmazásával oszlattuk szét egysejtes szuszpenzióvá.
Ezután a sejteket 10 % magzati borjúszérumot (FCS) tartalmazó közegben
1640/perc fordulatszámon mostuk, majd hemo-citométerben (vérsejtszámláló) számláltuk.
Ezután a sejteket az I. vagy II.
osztályú determinánsok antitestjeivel megfestettük, és a Santos, L.M. és munkatársai [Cellular Immunoi (nyomtatás alatt)] által leírt módszer alkalmazásával, ímmunfluoreszcenciás sejtosztályozó (FACS) készülékkel megszámoltuk.
A beadott mennyiség 1 mikrogramm MBP volt 1 mikrogramm LPS-sel együtt vagy anélkül.
A sejtek az alábbi arányban expresszálta II.
osztályú antigént: a kontrollcsoport tagjaiból származó hámsejtek
53,8 az MBP-vel kezelt patkányok 65,9 %-a, az MBP + LPS-sel kezelt patkányok 61 %-a. Ezek az eredmények azt mutatják, hogy az MBP + LPS adagolása eltérő módon hat a hámsejtek II. osztályú hisztokompatibilitási antigén-termelésére. Ezek alapján feltételezhető, hogy az LPS egyik lehetséges hatásmechanizmusa magába foglalja a hámsejtek II. osztályú expressziójának differenciált csökkentését (az I. osztályúhoz képest). Tehát ezek a sejtek nem prezentálják preferenciálisan az a antigént a CD4 + sejtekkel szemben, melyek a szuppresszor sejtekkel ellentétben indukáló (vagyis helper) sejtek.
8. Példa:
A találmány szerinti készítmények szinergísta hatásmechanizmusának vizsgálatára Lewis patkányokat, melyekben EAE-t idéztünk elő a 2. példa szerinti módon, 5 fős csoportokba osztva a következőképpen kezeltünk: a) 1 mg GP-MBP beadása egymagában orálisan; b) 1 mg GP-MBP + 1 mg LPS beadása orálisan; c) 200 mikrogramm IL-1 intraperítoneálisan; vagy d) 1 mg GP-MBP bevezetése a gyomorba, majd 2-3 nappal az utolsó adag után 200 mikrogramm IL-1 intraperitoneálisan beinjektálva; és mértük a betegségi indexet. Az eredmények az alábbi 5. táblázatban láthatók.
5. Táblázat
| Kezelés | Beteosécri |
| semmi (kontroll) | 23 |
| GP-MBP | 19 |
| GP-MBP + LPS | 17 |
| IL-1 | 28 |
| GP-MBP + IL-1 | 4 |
Az 5. táblázaban feltüntetett eredmények azt mutatják, hogy 1 mg GP-MBP orális beadására a betegségi index 23-ról 19-re csökkent, és az LPS hozzáadásával ez az érték tovább csökkent 17-re. 200 mikrogramm IL-l-et magában beinjektálva (intraperitoneálisan) az index 28-ra emelkedett. Ha viszont orálisan beadunk 1 mg GP-MBP-t és így injektálunk be 200 mikrogramm IL-l-et, akkor a betegségi index értéke 4-re csökken.
Tehát a fenti eredmények azt mutatják, hogy a parenterálisan beadott IL-1 és az orálisan beadott MBP között szinergetikus hatás léphet fel.
Claims (16)
- SZABADALMI IGÉNYPONTOK1. Eljárás emlősökben a sclerosis multiplex tüneteit kiváltó autoimmun betegség (AD) kezelésére vagy megelőzésére, azzal jellemezve, hogya) a kezelendő emlősnek orálisan vagy parenterálisan beadunk legalább egy, az alábbi csoportokból választott AD-szuppresszív hatóanyagot:(i) az adott autoimmun betegségre nézve specifikus autoantigének, (ii) ezen autoantigének AD-szuppresszív fragmentumai vagy (iii) a mondott autoantigének vagy fragmentumok ADszuppressziv analógjai; ésb) legalább egy olyan vegyületet, mely a fenti hatóanyag AD-szuppresszív hatását növelni képes, a fenti a) és b) pont szerinti anyagokat olyan mennyiségben alkalmazva, hogy együttesen képesek legyenek a mondott tünetek elnyomására.
- 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy autoantigénként mielinbázisú proteint alkalmazunk .
- 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a b) pont szerinti vegyületként bakteriális lipo-poliszacharidot alkalmazunk.
- 4. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal « i tjellemezve, hogy ab) pont szerinti vegyületkéntLipid A-t alkalmazunk.
- 5.igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy ab) pont szerinti vegyületet orálisan vagy enterálisan adjuk be.
- 6.Az 5.igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy aza) pont szerinti hatóanyagot és a b) pont szerinti vegyületet egyidejűleg adjuk be.Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az emlősnek a hatóanyagból olyan mennyiséget adunk be, amely önmagában elegendő a mondott betegség klinikai tüneteinek elnyomására vagy megelőzésére.Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az emlősnek a hatóanyagból és ab) pont szerinti vegyületből olyan mennyiséget adunk be amely együttesen elegendő a mondott tünetek elnyomásához.
- 9. Eljárás T-sejt álttal közvetített vagy Tsejt-függő autoimmun betegség (AD) kezelésére vagy megelőzésére, azzal jellemezve, hogy a kezelendő emlősnek a mondott betegség elfojtásához hatásos mennyiségben beadunka) orálisan vagy parenterálisan legalább egy, az alábbi csoportokból választott AD-szuppresszív hatóanyagot: (i) az adott autoimmun betegségre nézve specifikus autoantigének5 ** 1 • · Λ 9 ·· · · «··· · · · · * • ··»···· ·1 · ·- 37 resszív fragmentumai vagy (iii) a mondott autoantigének vagy fragmentumok AD-szuppresszív analógjai; ésb) legalább egy olyan vegyületet, mely a fenti hatóanyag AD-szuppresszív hatását növelni képes.
- 10. A 9. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a b) pont szerinti vegyületként bakteriális lipo-poliszacharidot alkalmazunk.
- 11. A 9. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a b) pont szerinti vegyületként Lipid A-t alkalmazunk.
- 12. A 9. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a b) pont szerinti vegyületet a hatóanyag beadását megelőzően adjuk be.
- 13. A 9. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a b) pont szerinti vegyületet az a) pont szerinti hatóanyaggal lényegében egyidejűleg adjuk be.
- 14. A 9. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a b) pont szerinti vegyületet orálisan vagy enterálisan adjuk be.
- 15. A 9. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a b) pont szerinti vegyületet parenteráli• · » · * · ·· «»·« · · «V · • ·<·»··· *· · ··- 38 san adjuk be.
- 16. Eljárás T-sejt álttal közvetített vagy T-sejt-függő autoimmun betegség (AD) kezelésére vagy megelőzésére, azzal jellemezve, hogy a kezelendő emlősneka) orálisan vagy parenterálisan beadunk legalább egy, az alábbi csoportokból választott ADszuppresszív hatóanyagot: (i) az adott autoimmun betegségre nézve specifikus autoantigének, (ii) ezen autoantigének ADszuppresszív fragmentumai vagy (iii) a mondott autoantigének vagy fragmentumok AD-szuppresszív analógjai; továbbáb) az emlősnek beadunk legalább egy olyan vegyületet, mely a fenti hatóanyag AD-szuppresszív hatását növelni képes, a fenti a) és b) pont szerinti anyagokat olyan mennyiségben alkalmazva, hogy képesek legyenek a II. osztályú hisztokompatibilitási autoantigének expresszióját differenciáltan csökkenteni az emlős bélhámsejtjeinek I osztályú hisztokompatibilitási autoantigén-termeléséhez képest.
- 17. Gyógyszerkészítmény autoimmun betegségek klinikai tüneteinek megelőzésére vagy elfojtására, azzal jellemezve, hogy hatásos mennyiségben tartalmaza) legalább egy, az alábbi csoportokból választott AD-szuppresszív hatóanyagot: (i) az adott autoimmun betegségre nézve specifikus autoantigének, (ii) ezen autoantigének AD-szuppresszív fragmentumai vagy (iii) a to ·« V « · · · »« t · ·· ·*9 · · · « · · · 4 ··· ···· ·* *· r* ’- 39 mondott autoantigének vagy fragmentumok AD-szuppresszív analógjai; ésb) legalább egy olyan vegyületet, mely a fenti hatóanyag AD-szuppresszív hatását növelni képes; továbbá tartalmazc) egy gyógyászatilag elfogadható hordozó- vagy hígítóanyagot.
- 18. AD-szuppresszív anyag hatásának növelésére szolgáló gyógyszerkészítmény orális dózisformában, azzal jellemezve, hogy legalább egy, az AD-szuppresszív anyag hatását növelni képes vegyületből hatásos mennyiséget és egy fiziológiailag elfogadható hordozóanyagot tartalmaz.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US48773290A | 1990-03-02 | 1990-03-02 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HU9202808D0 HU9202808D0 (en) | 1992-12-28 |
| HUT61896A true HUT61896A (en) | 1993-03-29 |
Family
ID=23936898
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU9202808A HUT61896A (en) | 1990-03-02 | 1991-03-04 | Process for producing orally administrable pharmaceutical compositions comprising autoantigenes, suitable for improving down-control of autoimmune diseases |
| HU95P/P00088P HU210813A9 (en) | 1990-03-02 | 1995-03-07 | Enhancement of the down-regulation of autoimmune diseases by oral administration of autoantigens |
Family Applications After (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU95P/P00088P HU210813A9 (en) | 1990-03-02 | 1995-03-07 | Enhancement of the down-regulation of autoimmune diseases by oral administration of autoantigens |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (2) | EP0782859A1 (hu) |
| JP (1) | JPH05508621A (hu) |
| AT (1) | ATE157257T1 (hu) |
| AU (1) | AU651097B2 (hu) |
| BR (1) | BR9106114A (hu) |
| CA (1) | CA2077340A1 (hu) |
| DE (1) | DE69127470T2 (hu) |
| DK (1) | DK0594607T3 (hu) |
| ES (1) | ES2107459T3 (hu) |
| HU (2) | HUT61896A (hu) |
| IL (1) | IL97446A (hu) |
| NO (1) | NO923395L (hu) |
| WO (1) | WO1991012816A1 (hu) |
Families Citing this family (48)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6645504B1 (en) | 1987-06-24 | 2003-11-11 | Autoimmune Inc. | Bystander suppression of type I diabetes by oral administration of glucagon |
| US5268454A (en) | 1991-02-08 | 1993-12-07 | La Jolla Pharmaceutical Company | Composition for inducing humoral anergy to an immunogen comprising a t cell epitope-deficient analog of the immunogen conjugated to a nonimmunogenic carrier |
| IL99699A (en) | 1990-10-10 | 2002-04-21 | Autoimmune Inc | Drug with the option of oral, intra-intestinal, or inhaled dosing for suppression of autoimmune response associated with type I diabetes |
| EP0553291B1 (en) * | 1990-10-15 | 2006-03-08 | Autoimmune, Inc. | Treatment of autoimmune diseases by oral administration of autoantigens |
| ES2190784T3 (es) * | 1992-02-28 | 2003-08-16 | Autoimmune Inc | Supresion de enfermedades autoinmunes por antigenos espectadores. |
| US5891435A (en) * | 1993-04-16 | 1999-04-06 | Research Corporation Technologies, Inc. | Methods and compositions for delaying or preventing the onset of autoimmune disease |
| WO1994027634A1 (en) * | 1993-06-02 | 1994-12-08 | Institute For Child Health Research | Cryptic peptides for use in inducing immunologic tolerance |
| GB9319429D0 (en) | 1993-09-21 | 1993-11-03 | London Health Ass | Methods and products for controlling immune responses in mammals |
| BR9509438A (pt) * | 1994-10-25 | 1997-12-23 | Immulogic Pharma Corp | Composições e tratamento para a esclerose múltipla |
| US6251396B1 (en) | 1994-11-18 | 2001-06-26 | Neurocrine Biosciences, Inc. | Methods for treatment of multiple sclerosis using peptide analogs of human myelin basic protein |
| DE69525544T2 (de) | 1994-11-18 | 2002-08-22 | Neurocrine Biosciences, Inc. | Peptidanaloga des menschlichen myelinbasischen proteins mit substitution in position 91 zur behandlung von multipler sklerose |
| US6379670B1 (en) | 1994-11-18 | 2002-04-30 | Neurocrine Biosciences, Inc. | Methods for treatment of multiple sclerosis using peptide analogs of human myelin basic protein |
| US6329499B1 (en) | 1994-11-18 | 2001-12-11 | Neurocrine Biosciences, Inc. | Methods for treatment of multiple sclerosis using peptide analogues of human myelin basic protein |
| DK0831877T3 (da) * | 1995-06-07 | 2005-02-14 | Telik Inc | Metabolske virkninger af visse glutathionanaloge |
| US6488933B2 (en) | 1995-07-05 | 2002-12-03 | Yeda Research And Development Co. Ltd. | Preparations for the treatment of T cell mediated diseases |
| KR19990071782A (ko) * | 1996-01-05 | 1999-09-27 | 왈리스 조 앤 | 유형ⅱ 콜라겐의 제조방법 |
| US5849886A (en) * | 1996-07-10 | 1998-12-15 | Oy Aboatech Ab | Extraction of myelin basic protein |
| US6211160B1 (en) * | 1996-09-06 | 2001-04-03 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Method for tolerizing a mammalian patient to administration of gene therapy virus vectors |
| JP4086928B2 (ja) * | 1997-02-13 | 2008-05-14 | 大日本住友製薬株式会社 | タイプ２ヘルパーｔ細胞型サイトカイン産生選択的抑制剤 |
| US7097845B2 (en) | 1997-04-23 | 2006-08-29 | Jacob Sten Petersen | Combinations of antigen and mucosal binding component for inducing specific immunological tolerance |
| US6710226B1 (en) | 1997-12-02 | 2004-03-23 | Neuralab Limited | Transgenic mouse assay to determine the effect of Aβ antibodies and Aβ Fragments on alzheimer's disease characteristics |
| US6761888B1 (en) | 2000-05-26 | 2004-07-13 | Neuralab Limited | Passive immunization treatment of Alzheimer's disease |
| US6787523B1 (en) | 1997-12-02 | 2004-09-07 | Neuralab Limited | Prevention and treatment of amyloidogenic disease |
| US6750324B1 (en) | 1997-12-02 | 2004-06-15 | Neuralab Limited | Humanized and chimeric N-terminal amyloid beta-antibodies |
| US6905686B1 (en) | 1997-12-02 | 2005-06-14 | Neuralab Limited | Active immunization for treatment of alzheimer's disease |
| US7588766B1 (en) | 2000-05-26 | 2009-09-15 | Elan Pharma International Limited | Treatment of amyloidogenic disease |
| US7790856B2 (en) | 1998-04-07 | 2010-09-07 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
| US6923964B1 (en) | 1997-12-02 | 2005-08-02 | Neuralab Limited | Active immunization of AScr for prion disorders |
| US6913745B1 (en) | 1997-12-02 | 2005-07-05 | Neuralab Limited | Passive immunization of Alzheimer's disease |
| US7179892B2 (en) | 2000-12-06 | 2007-02-20 | Neuralab Limited | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
| TWI239847B (en) | 1997-12-02 | 2005-09-21 | Elan Pharm Inc | N-terminal fragment of Abeta peptide and an adjuvant for preventing and treating amyloidogenic disease |
| US20080050367A1 (en) | 1998-04-07 | 2008-02-28 | Guriq Basi | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
| US20030147882A1 (en) | 1998-05-21 | 2003-08-07 | Alan Solomon | Methods for amyloid removal using anti-amyloid antibodies |
| US6787637B1 (en) | 1999-05-28 | 2004-09-07 | Neuralab Limited | N-Terminal amyloid-β antibodies |
| UA81216C2 (en) | 1999-06-01 | 2007-12-25 | Prevention and treatment of amyloid disease | |
| WO2001089557A2 (en) | 2000-05-24 | 2001-11-29 | The United States Of America, As Represented By Secretary Of The Department Of Health & Human Services | Methods for preventing strokes by inducing tolerance to e-selectin |
| US7897575B2 (en) | 2000-05-24 | 2011-03-01 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Treatment and prevention of vascular dementia |
| US7700751B2 (en) | 2000-12-06 | 2010-04-20 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Humanized antibodies that recognize β-amyloid peptide |
| TWI255272B (en) | 2000-12-06 | 2006-05-21 | Guriq Basi | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
| MY139983A (en) | 2002-03-12 | 2009-11-30 | Janssen Alzheimer Immunotherap | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
| PE20050627A1 (es) | 2003-05-30 | 2005-08-10 | Wyeth Corp | Anticuerpos humanizados que reconocen el peptido beta amiloideo |
| ES2396555T3 (es) | 2004-12-15 | 2013-02-22 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Anticuerpos que reconocen péptido beta amiloide |
| PE20061329A1 (es) | 2004-12-15 | 2006-12-08 | Neuralab Ltd | Anticuerpos ab humanizados para mejorar la cognicion |
| US8784810B2 (en) | 2006-04-18 | 2014-07-22 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Treatment of amyloidogenic diseases |
| US8003097B2 (en) | 2007-04-18 | 2011-08-23 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Treatment of cerebral amyloid angiopathy |
| SI2182983T1 (sl) | 2007-07-27 | 2014-09-30 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Zdravljenje amiloidogenih bolezni s humaniziranimi protitelesi proti abeta |
| JO3076B1 (ar) | 2007-10-17 | 2017-03-15 | Janssen Alzheimer Immunotherap | نظم العلاج المناعي المعتمد على حالة apoe |
| US9067981B1 (en) | 2008-10-30 | 2015-06-30 | Janssen Sciences Ireland Uc | Hybrid amyloid-beta antibodies |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4309406A (en) | 1979-07-10 | 1982-01-05 | American Home Products Corporation | Sustained release pharmaceutical compositions |
| US4309404A (en) | 1979-08-09 | 1982-01-05 | American Home Products Corporation | Sustained release pharmaceutical compositions |
| US4704295A (en) | 1983-09-19 | 1987-11-03 | Colorcon, Inc. | Enteric film-coating compositions |
| US4556552A (en) | 1983-09-19 | 1985-12-03 | Colorcon, Inc. | Enteric film-coating compositions |
| JPS60149386A (ja) * | 1984-01-17 | 1985-08-06 | Dainippon Pharmaceut Co Ltd | インタ−ロイキン１をコ−ドする伝令リボ核酸及びその調製法 |
| US4695459A (en) * | 1984-12-26 | 1987-09-22 | The Board Of Trustees Of Leland Stanford Junior University | Method of treating autoimmune diseases that are mediated by Leu3/CD4 phenotype T cells |
| DE19848246A1 (de) | 1998-10-20 | 2000-04-27 | Krauss Maffei Kunststofftech | Thermoplastteil mit eingespritzter Elastomerdichtung |
| EP2112920B1 (en) | 2003-06-26 | 2018-07-25 | Intellipharmaceutics Corp. | Proton pump-inhibitor-containing capsules which comprise subunits differently structured for a delayed release of the active ingredient |
-
1991
- 1991-03-04 DE DE69127470T patent/DE69127470T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1991-03-04 CA CA002077340A patent/CA2077340A1/en not_active Abandoned
- 1991-03-04 AT AT91906685T patent/ATE157257T1/de not_active IP Right Cessation
- 1991-03-04 DK DK91906685.2T patent/DK0594607T3/da active
- 1991-03-04 WO PCT/US1991/001466 patent/WO1991012816A1/en not_active Ceased
- 1991-03-04 EP EP97100981A patent/EP0782859A1/en not_active Withdrawn
- 1991-03-04 HU HU9202808A patent/HUT61896A/hu unknown
- 1991-03-04 BR BR919106114A patent/BR9106114A/pt not_active Application Discontinuation
- 1991-03-04 ES ES91906685T patent/ES2107459T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1991-03-04 AU AU75789/91A patent/AU651097B2/en not_active Ceased
- 1991-03-04 EP EP91906685A patent/EP0594607B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1991-03-04 JP JP91507166A patent/JPH05508621A/ja active Pending
- 1991-03-05 IL IL9744691A patent/IL97446A/en not_active IP Right Cessation
-
1992
- 1992-08-31 NO NO92923395A patent/NO923395L/no unknown
-
1995
- 1995-03-07 HU HU95P/P00088P patent/HU210813A9/hu unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH05508621A (ja) | 1993-12-02 |
| BR9106114A (pt) | 1993-03-09 |
| ES2107459T3 (es) | 1997-12-01 |
| DE69127470T2 (de) | 1998-02-19 |
| NO923395D0 (no) | 1992-08-31 |
| EP0782859A1 (en) | 1997-07-09 |
| WO1991012816A1 (en) | 1991-09-05 |
| EP0594607A4 (en) | 1993-04-20 |
| AU7578991A (en) | 1991-09-18 |
| NO923395L (no) | 1992-08-31 |
| HU210813A9 (en) | 1995-08-28 |
| AU651097B2 (en) | 1994-07-14 |
| EP0594607A1 (en) | 1994-05-04 |
| DK0594607T3 (da) | 1998-04-14 |
| EP0594607B1 (en) | 1997-08-27 |
| IL97446A0 (en) | 1992-06-21 |
| CA2077340A1 (en) | 1991-09-03 |
| ATE157257T1 (de) | 1997-09-15 |
| IL97446A (en) | 1996-03-31 |
| DE69127470D1 (de) | 1997-10-02 |
| HU9202808D0 (en) | 1992-12-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0594607B1 (en) | Enhancement of the down-regulation of autoimmune diseases by oral or enteral administration of autoantigens | |
| EP0553291B1 (en) | Treatment of autoimmune diseases by oral administration of autoantigens | |
| EP0359783B2 (en) | Treatment of autoimmune diseases by oral administration of autoantigens | |
| Ridge et al. | Suppression of experimental allergic encephalomyelitis by mitoxantrone | |
| JP3712260B2 (ja) | 自己免疫疾患のバイスタンダー抑制 | |
| Khoury et al. | Suppression of experimental autoimmune encephalomyelitis by oral administration of myelin basic protein: III. Synergistic effect of lipopolysaccharide | |
| HUT61487A (en) | Process for producing aerosol pharmaceutical composition comprising autoantigens | |
| US5961977A (en) | Method of treating or preventing autoimmune uveoretinitis in mammals | |
| HUP0001960A2 (hu) | Metotrexát kombináció autoimmun tünetek befolyásolására | |
| EP0977586B1 (en) | Combinations of antigen and mucosal binding component for inducing specific immunological tolerance | |
| JPH09511990A (ja) | 経口寛容および／またはＴｈ２増強サイトカインを用いた自己免疫疾患の治療 | |
| HUT74900A (en) | Treatment of autoimmune disease using oral tolerization and/or type i interferon | |
| Barbeau et al. | Putting the pieces of the puzzle together–a series of hypotheses on the etiology and pathogenesis of type 1 diabetes | |
| WO2014200345A1 (en) | Method for antigen-specific tolerance induction in humans using the small heat shock protein alpha b-crystallin. | |
| KR100263164B1 (ko) | Ii형 콜라겐의 펩티드를 유효성분으로 함유하는 콜라겐 관절염 치료제 | |
| JPH08500823A (ja) | レトロウィルス関連神経疾患のバイスタンダー抑制 | |
| JP3595852B2 (ja) | 経口慢性関節リウマチ治療剤及び機能性食品 | |
| JP3845447B2 (ja) | タイプ▲ｉｉ▼コラーゲンによるリウマチ性関節炎治療方法 | |
| Virella et al. | Organ-specific autoimmune diseases | |
| EP0385373A2 (en) | Treatment of autoimmune diseases |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| DFD9 | Temporary protection cancelled due to non-payment of fee |