HUT65982A - Reagent mixtures composition for blood-test, process for production of the composition, and process for examination blood-samples of glucose-content - Google Patents
Reagent mixtures composition for blood-test, process for production of the composition, and process for examination blood-samples of glucose-content Download PDFInfo
- Publication number
- HUT65982A HUT65982A HU9303638A HU9303638A HUT65982A HU T65982 A HUT65982 A HU T65982A HU 9303638 A HU9303638 A HU 9303638A HU 9303638 A HU9303638 A HU 9303638A HU T65982 A HUT65982 A HU T65982A
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- reagent mixture
- glucose oxidase
- blood
- international units
- present
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 80
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 title claims abstract description 76
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 9
- 238000009534 blood test Methods 0.000 title claims description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 title claims description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 3
- 108010015776 Glucose oxidase Proteins 0.000 claims abstract description 30
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims abstract description 28
- 239000004366 Glucose oxidase Substances 0.000 claims abstract description 26
- 229940116332 glucose oxidase Drugs 0.000 claims abstract description 26
- 235000019420 glucose oxidase Nutrition 0.000 claims abstract description 26
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims abstract description 24
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract description 22
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims abstract description 22
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 claims abstract description 16
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 claims abstract description 15
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 claims abstract description 15
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 claims abstract description 15
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 claims abstract description 15
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 claims abstract description 15
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims abstract description 12
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 claims abstract description 10
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims abstract description 8
- 108010046301 glucose peroxidase Proteins 0.000 claims abstract description 6
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 claims abstract description 3
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 claims abstract description 3
- 239000000499 gel Substances 0.000 claims description 22
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims description 7
- 238000003556 assay Methods 0.000 claims description 5
- 239000012982 microporous membrane Substances 0.000 claims description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 3
- ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N Tin Chemical compound [Sn] ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 20
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 14
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 14
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 14
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 12
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 10
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 9
- NUIURNJTPRWVAP-UHFFFAOYSA-N 3,3'-Dimethylbenzidine Chemical group C1=C(N)C(C)=CC(C=2C=C(C)C(N)=CC=2)=C1 NUIURNJTPRWVAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N D-gluconic acid Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 2
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 2
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 2
- 239000012064 sodium phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- 229920001059 synthetic polymer Polymers 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XNWFRZJHXBZDAG-UHFFFAOYSA-N 2-METHOXYETHANOL Chemical compound COCCO XNWFRZJHXBZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YRSOHTBCCGDLSN-UHFFFAOYSA-N 4-(4-amino-3-methylphenyl)-2-methylaniline;hydron;chloride Chemical compound Cl.C1=C(N)C(C)=CC(C=2C=C(C)C(N)=CC=2)=C1 YRSOHTBCCGDLSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N D-gluconic acid Natural products OCC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000043261 Hevea brasiliensis Species 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- UPBDXRPQPOWRKR-UHFFFAOYSA-N furan-2,5-dione;methoxyethene Chemical compound COC=C.O=C1OC(=O)C=C1 UPBDXRPQPOWRKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003349 gelling agent Substances 0.000 description 1
- 239000000174 gluconic acid Substances 0.000 description 1
- 235000012208 gluconic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 235000015110 jellies Nutrition 0.000 description 1
- 239000008274 jelly Substances 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 229920003052 natural elastomer Polymers 0.000 description 1
- 229920001194 natural rubber Polymers 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000006069 physical mixture Substances 0.000 description 1
- 229920002492 poly(sulfone) Polymers 0.000 description 1
- 229920000915 polyvinyl chloride Polymers 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 239000011253 protective coating Substances 0.000 description 1
- 239000011241 protective layer Substances 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 230000002123 temporal effect Effects 0.000 description 1
- 230000009974 thixotropic effect Effects 0.000 description 1
- 238000009736 wetting Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/54—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving glucose or galactose
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Immunology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Paper (AREA)
Abstract
Description
A találmány tárgya vérvizsgálati reagenskeverék készítmény, eljárás a készítmény előállítására, valamint eljárás vérminták vizsgálatára. Közelebbről a találmány egy hordozó gélben lévő analitikai reagenskeverékre vonatkozik, amely a kifejlődött szín nagyobb időbeli állandóságát eredményezi .FIELD OF THE INVENTION The present invention relates to a blood test reagent mixture composition, a process for preparing the composition, and a method for testing blood samples. More particularly, the present invention relates to an analytical reagent mixture in a carrier gel, which results in a greater temporal stability of the developed color.
A vérmintákat a bennük lévő glükóz és más komponensek mennyiségi meghatározása céljából gyakran vizsgálják olyan eljárással, amelynek során a vért egy próbatest vagy próbaréteg által hordozott egy vagy több reagenssel reagáltatják, s az ennek eredményeképpen kifejlődő színt a vizsgálatot végző személy megfigyeli, illetve leolvassa. Például a reagensréteg tartalmazhat glükóz-oxidáz és peroxidáz enzimet, valamint kromogénként o-tolidint (3,3’-dimetil-4,4’-diamino-bifenilt), amely utóbbi megkékül, amikor a glükóz-oxidáz a vérmintában lévő glükózt glükonsavvá és hidrogén-peroxiddá oxidálja. A hidrogén-peroxid a peroxidáz jelenlétében reagál az o-tolidinnel és kék színt eredményez, amelynek az intenzitása a felszabaduló hidrogén-peroxid mennyiségétől, s ezen keresztül a vérben lévő glükóz mennyiségétől függ. A reagenseket általában egy gél mátrixban helyezik el, például egy természetes gélben, így egy zselatinban vagy egy szintetikus polimerben, amilyen például a poli(vinil-pirrolidon).Blood samples are often tested for quantitative determination of glucose and other components in the blood by reacting with one or more reagents carried by a specimen or sample, and the resulting color is observed or read by the test person. For example, the reagent layer may contain glucose oxidase and peroxidase enzymes, and o-tholidine (3,3'-dimethyl-4,4'-diaminobiphenyl) as a chromogen, which becomes blue when glucose oxidase in the blood sample is converted to gluconic acid and hydrogen. oxidizes to peroxide. Hydrogen peroxide reacts with o-tolidine in the presence of peroxidase to produce a blue color, the intensity of which depends on the amount of hydrogen peroxide released and hence the amount of glucose in the blood. The reagents are usually placed in a gel matrix, such as a natural gel such as gelatin or a synthetic polymer such as polyvinylpyrrolidone.
Ugyanakkor gyakran problémát okoz, hogy a kifejlődő szín változik a vérminta és a reagensek érintkezési idejének a függvényében, illetve a reagensekkel érintkező vér mennyisége is befolyásolja az észlelt színt. Az ilyen tesz4 44 kHowever, it is often a problem that the color that develops varies with the blood sample and the contact time of the reagents, and that the amount of blood contacting the reagents also affects the color that is detected. Such a test4 44 k
• 4• 4
4 • 44 · tek végrehajtása esetén ezért szokásos előírás, hogy a leolvasást egy nagyon szigorúan meghatározott időskála figyelembevételével kell elvégezni. A tényleges megfigyelési időpontok eltérési miatt az így nyert eredmények gyakran kétséges értékűek.Therefore, it is a standard rule when carrying out scans that the reading should be done with a very strict time scale. Due to differences in actual observation times, the results obtained are often of doubtful value.
Meglepő módon azt találtuk, hogy a mátrixban lévő reagensek egymáshoz viszonyított aránya befolyásolja azt az időtartamot, ami alatt a vér és a reagens kölcsönhatásából származó szín állandó marad. Amennyiben a keverékben lévő arányok bizonyos határok között vannak, a kifejlődő szín kellőképpen állandó ahhoz, hogy az előírt leolvasási időskála szigorúságán enyhíteni lehessen.Surprisingly, it has been found that the ratio of reagents in the matrix affects the amount of time that the color resulting from the interaction of blood and reagent remains constant. If the proportions in the mixture are within certain limits, the color that develops is sufficiently stable to be attenuated by the rigor of the prescribed reading time scale.
A találmány tárgya egy vérvizsgálati reagenskeverék készítmény, amely glükóz-oxidáz és peroxidáz enzimet, valamint egy kromogént tartalmaz, s amely utóbbi kölcsönhatásba lép a vér glükóztartalmának a glükóz-oxidáz enzim hatására történő oxidációjából származó hidrogén-peroxiddal, és a készítményt az jellemzi, hogy a készítményben a glükózoxidáz 300-700 nemzetközi egység (NE) mennyiségben és a peroxidáz legalább 20 nemzetközi egység (NE) mennyiségben van jelen, valamint a jelen lévő kromogén mennyisége 500 000 nemzetközi egységnyi glükóz-oxidázra vonatkoztatva 12-20 gramm aktív kromogénnek felel meg. Előnyösen a glükóz-oxidáz a peroxidáz 27,5-32,5 nemzetközi egységnyi mennyiségére vonatkoztatva 400-550 nemzetközi egység mennyiségben van jelen, míg a kromogén az o-tolidin, amelynek mennyisége aThe present invention relates to a blood test reagent mixture composition comprising the enzyme glucose oxidase and peroxidase and a chromogen which interacts with hydrogen peroxide resulting from the oxidation of glucose in the blood by the enzyme glucose oxidase. glucose oxidase is present in an amount of 300-700 International Units (IU) and peroxidase in an amount of at least 20 International Units (IU), and the amount of chromogen present is 12-20 grams of active chromogen per 500,000 International Units of glucose oxidase. Preferably, glucose oxidase is present in an amount of 400-550 international units per 27.5-32.5 international units of peroxidase, while the chromogen is present in the amount of
- 4 glükóz-oxidáz 500 000 nemzetközi egységnyi mennyiségére vonatkoztatva 12-15 gramm.- 12-15 grams of glucose oxidase per 500,000 international units.
Előnyösen a reagenskeverék egy gél mátrixban kerül elhelyezésre, közelebbről egy zselatin mátrixban, mégpedig a glükóz-oxidáz 500 000 nemzetközi egységnyi mennyiségére vonatkoztatva 200-400 gramm száraz tömegű mátrixban.Preferably, the reagent mixture is contained in a gel matrix, more particularly in a gelatin matrix of about 200-400 grams dry weight matrix, based on 500,000 international units of glucose oxidase.
Egy különösen előnyös megoldás értelmében a reagenskeverék/mátrix elegyet egy mikroporózus membránhordozóban abszorbeáltatjuk.In a particularly preferred embodiment, the reagent mixture / matrix mixture is absorbed in a microporous membrane carrier.
A találmány szerinti megoldás során alkalmazott enzim jellegű reagensek bármely olyan, alkalmas formában felhasználhatók, például szárazon elporított aktív enzimként, prekurzorként, illetve ezek addíciós termékeként, amely formák a végrehajtandó vizsgálat körülményei között egy aktív enzimet eredményeznek a reagenskeverékben. Ily módon tehát az enzim jellegű reagens lehet egy aktív enzim, például glükóz-oxidáz vagy peroxidáz, illetve ennek egy olyan stabilizált formája, amilyen például az aktív enzim acetátja valamilyen sója vagy adduktja, amely stabilizált forma a reagenskeverék megnedvesedésekor felszabadítja az aktív enzimet.The enzyme reagents used in the present invention can be used in any suitable form, for example, as a dry powdered active enzyme, precursor or addition product thereof, which results in an active enzyme in the reagent mixture under the conditions of the assay being performed. Thus, the enzyme-like reagent may be an active enzyme, such as glucose oxidase or peroxidase, or a stabilized form thereof, such as a salt or adduct of the active enzyme acetate, which releases the active enzyme upon wetting of the reagent mixture.
A leírás további részében a vérmintákban lévő glükóz meghatározása során szokásosan alkalmazott reagenskeverékeket — kényelmi szempontból — a glükóz-oxidáz és a peroxidáz keverék kifejezés alkalmazásával helyettesítjük.In the remainder of the specification, mixtures of reagents commonly used in the determination of glucose in blood samples are conveniently replaced by the term glucose oxidase and peroxidase mixtures.
A találmány ismertetése során alkalmazott kromogén anyag meghatározás valamennyi olyan anyagra vonatkozik, ♦ · 9The definition of chromogenic material used in the description of the present invention applies to all materials that are ♦ · 9
- 5 amely a vizsgálandó vérminta és az enzim jellegű reagens reakciója során képződő egy vagy több termékkel kölcsönhatásba lépve valamilyen sajátos tulajdonságot mutat. Ennek megfelelően a kromogén anyag meghatározás magában foglalja például az olyan anyagokat, amelyek ultraibolya fluoreszcenciát vagy más detektálható, de nem látható tulajdonságot gerjesztenek. Előnyösen a kromogén anyagok azonban olyanok, amelyek a látható hullámhossztartományba eső szint fejlesztenek ki, például amikor dianizidin vagy o-tolidin a vérben lévő glükóz és a reagenskeverékben lévő glükóz-oxidáz kölcsönhatása során felszabaduló hidrogén-peroxiddal reagál. A kromogén anyagot alkalmazhatjuk az aktív anyag formájában, illetve egy olyan prekurzor vagy az aktív anyag olyan adduktjának, nevezetesen szervetlen savadduktjának, például hidrokloridjának vagy szulfátjának formájában, amelyből a vizsgálat ideje alatt felszabadul az aktív anyag.- 5 which exhibits a specific property by interacting with one or more products formed during the reaction of the blood sample to be tested and the enzyme-like reagent. Accordingly, the definition of chromogenic material includes, for example, substances that generate ultraviolet fluorescence or other detectable but invisible properties. Preferably, however, the chromogenic materials are those which develop at levels within the visible wavelength range, for example when dianizidine or o-tolidine reacts with hydrogen peroxide released by interaction of glucose in the blood with glucose oxidase in the reagent mixture. The chromogenic material may be used in the form of the active substance or in the form of a precursor or adduct of the active substance, in particular an inorganic acid adduct such as hydrochloride or sulfate, which releases the active substance during the test.
A találmány szerinti megoldás további ismertetése során az egyszerűség kedvéért az o-tolidint hivatkozzuk konkrétan a kromogén anyagok közül.In the further description of the present invention, for the sake of simplicity, o-tolidine is specifically referred to as a chromogenic substance.
Az enzim jellegű reagens és a kromogén anyag operatív módon kapcsolódik egymáshoz, ami azt jelenti, hogy a vizsgálati eljárás körülményei között egymással kölcsönhatásba tudnak lépni. Jellegzetesen a reagenst és a kromogén anyagot egymással alkotott fizikai keverékük formájában alkalmazzuk. Azonban a találmány oltalmi körébe tartozik az a megoldás is, amelynek során a reagenst és a kromogén anyagot két külön részben alkalmazzuk, amelyeket csak közvetlenül a • ·The enzyme-like reagent and the chromogenic substance are operatively linked, which means that they can interact with each other under the conditions of the assay procedure. Typically, the reagent and chromogenic material are used in the form of a physical mixture thereof. However, it is within the scope of the invention to apply the reagent and chromogenic material in two separate portions which are only directly applied to the · ·
- 6 felhasználást megelőzően keverünk össze, illetve a találmány részét képezi az a megoldás is, amelynek során az enzim reagens és a vérmintában lévő glükóz kölcsönhatásának reakciótermékei diffúzió útján jutnak be egy olyan zónába, amely a kromogén anyagot tartalmazza, s ahol a szín kifejlődik, miáltal a kromogén anyag térben elkülönül az enzimreakció zónájától. Ennek megfelelően például az enzim jellegű reagens a reagensréteg egyik végén vagy egyik oldalán koncentrálódik, míg a kromogén anyag a másik végen vagy a másik oldalon helyezkedik el.- mixing prior to 6 uses, or part of the invention, in which the reaction products of the interaction between the enzyme reagent and glucose in the blood sample are diffused into a zone containing the chromogenic material and where the color develops, the chromogenic material is separated in space from the zone of enzyme reaction. Accordingly, for example, the enzyme-like reagent is concentrated at one end or one side of the reagent layer while the chromogenic material is located at the other end or at the other.
A találmány ismertetése során a továbbiakban az egyszerűség kedvéért azt a reagenskeverék réteget tárgyaljuk, amelyben az enzim jellegű reagens és a kromogén anyag a rétegen belül egyenletes eloszlásban van jelen.For the sake of simplicity, the present invention will now be described, for the sake of simplicity, in a reagent mixture layer in which the enzyme-like reagent and the chromogenic material are evenly distributed throughout the layer.
A reagenskeverék más, szokásos anyagokat is tartalmazhat, például foszfát pufferelő ágenseket, tartósítószereket, kicsapódás elleni szereket vagy felületaktív anyagokat. Az ilyen egyéb anyagok jellemzően inért módon viselkednek a vizsgálandó anyaggal, a reagenskeverék további alkotórészeivel, valamint a vizsgálati eljárás ideje alatt történő reakciók és kölcsönhatások termékeivel szemben. Ezek az egyéb anyagok az ilyen jellegű reagenskeverékekben szokásosan alkalmazott mennyiségben lehetnek jelen a találmány szerinti készítményben is.The reagent mixture may also contain other conventional substances, such as phosphate buffering agents, preservatives, anti-precipitants or surfactants. Such other materials typically exhibit inert behavior with the test substance, other components of the reagent mixture, and products of reactions and interactions during the assay. These other substances may also be present in the amounts customarily used in such reagent mixtures in the composition of the invention.
Amint azt a fentiekben már említettük, vizsgálataink során azt találtuk, hogy ha a reagenskeverékben jelenlévő enzim jellegű reagens és kromogén anyag egymáshoz viszo« ΛAs noted above, our studies have found that when an enzyme-like reagent and chromogenic material present in the reagent mixture
nyitott aránya meghatározott határok között van, a vizsgálandó anyag és a keverék különféle komponensei közötti kölcsönhatás eredményeképpen kifejlődő szín meglepően stabil, és az eddigiekben rendelkezésre álló időtartamnál lényegesen hosszabb ideig megfigyelhető. Ennek megfelelően a keverékben jellegzetesen 400-600 nemzetközi egységnyi mennyiségű, előnyösen 450-550 nemzetközi egységnyi mennyiségű glükóz-oxidáz és legalább 20 nemzetközi egységnyi mennyiségű, előnyösen körülbelül 27,5-35 nemzetközi egységnyi mennyiségű peroxidáz van jelen. A kromogén anyag a glükóz-oxidáz 500 000 nemzetközi egységnyi mennyiségére vonatkoztatva jellegzetesen 1217 gramm, előnyösen 13-16 gramm mennyiségben van jelen a keverékben. A fenti határokon belüli tartományokban az egyes komponensek egymáshoz viszonyított optimális arányait az adott esetnek megfelelő egyszerű próbavizsgálatokkal könnyen meg lehet határozni.its open ratio is within defined limits, the color developed as a result of the interaction between the test substance and the various components of the mixture is surprisingly stable and can be observed for a significantly longer time than hitherto available. Accordingly, the mixture will typically contain from 400 to 600 International Units, preferably from 450 to 550 International Units, of glucose oxidase and at least 20 International Units, preferably from about 27.5 to 35 International Units peroxidase. The chromogenic substance is typically present in the mixture in an amount of 1217 grams, preferably 13-16 grams, per 500,000 international units of glucose oxidase. Within these ranges, the optimal proportions of each component relative to one another can be easily determined by simple test tests appropriate to the particular case.
Amint azt a fentiekben már ugyancsak említettük, a reagenskeveréket egy mátrix hordozóközegben alkalmazzuk, s így a vizsgálandó anyag be tud hatolni az enzim reagenshez és a kromogén anyaghoz. A mátrix lehet egy természetes gumi, kocsonya (jelly) vagy gél, amilyen például egy zselatin, az agar-agar, aszpik vagy a szilikagél; illetve lehet egy szintetikus polimer gél, például egy cellulóz jellegű gél vagy egy polivinilgyanta gél.As mentioned above, the reagent mixture is used in a matrix support medium to allow the test substance to penetrate the enzyme reagent and the chromogenic material. The matrix may be a natural rubber, jelly or gel such as gelatin, agar, aspirate or silica gel; or a synthetic polymer gel such as a cellulosic gel or a polyvinyl resin gel.
A találmány szerinti megoldás ismertetése során a továbbiakban az egyszerűség kedvéért a zselatin gél kifejezést említjük hordozó mátrixként.In the description of the present invention, for the sake of simplicity, the term gelatin gel will hereinafter be referred to as a carrier matrix.
• ·• ·
- 8 Az enzim jellegű reagenst és a kromogén anyagot a gél mátrix lényegében egyenletes eloszlásban tartalmazhatja. Ez a legegyszerűbben úgy érhető el, hogy az enzim reagenseket belekeverjük a gélképző ágens és a kromogén anyag előkeverékébe, majd a keveréket állni hagyjuk, hogy a kívánt formává dermedjen meg. Alternatív módon úgy is eljárhatunk, hogy az enzim reagenst és a kromogén anyagot egy kevertetett tixotróp gélhordozóval keverjük össze úgy, hogy a kevertetés ideje folyadékállapotban tartjuk a keveréket, amelyet viszont ezt követően a felhasználás előtti tárolás és szállítás céljából hagyunk megdermedni.The enzyme-like reagent and chromogenic material may be substantially uniformly distributed in the gel matrix. This is most easily achieved by mixing the enzyme reagents in a premix of the gelling agent and the chromogenic material, and then allowing the mixture to freeze to the desired form. Alternatively, the enzyme reagent and the chromogenic material may be mixed with a stirred thixotropic gel carrier so that the mixture is maintained in a liquid state during mixing, which is subsequently allowed to freeze for storage and transport before use.
Alternatív módon a mátrix nemegyenletes eloszlásban is tartalmazhatja az enzim jellegű reagenst, például amikor egy olyan gélréteg alakul ki, amelynek felső rétegei nagy koncentrációban tartalmazzák a gél mátrixot, s ezáltal egy védőréteget vagy bevonatot képeznek a reagensben dús alsó rétegek számára; vagy ahol az enzimreagens a mátrixnak egy a kromogén anyagot tartalmazó részétől elkülönült zónájában található. Ebben az esetben a vizsgálandó anyag és az egy vagy több enzim jellegű reagens kölcsönhatásából származó termék az enzimzónából átdiffundál a kromogén anyagot tartalmazó zónába, s ez utóbbi zónában elkülönült rétegként fejleszti ki a színt.Alternatively, the matrix may also contain an enzyme-like reagent in an uneven distribution, for example when a gel layer is formed which has a high concentration of the gel matrix in a high concentration to form a protective layer or coating for the reagent-rich lower layers; or wherein the enzyme reagent is located in a zone separate from the chromogenic material portion of the matrix. In this case, the product resulting from the interaction of the test substance with one or more enzyme-like reagents diffuses from the enzyme zone to the chromogenic zone and develops the color as a separate layer in the latter zone.
A találmány további ismertetése során alkalmazott reagenskeverék kifejezés alatt a zselatin mátrixban egyenletes eloszlásban lévő reagenskeveréket értjük.In the further description of the invention, the term "reagent mixture" is intended to mean a reagent mixture uniformly distributed in the gelatin matrix.
A reagenskeveréket hordozó mátrixot többféle fizikai formában fel lehet vinni, például tesztcsíkok vagy korongok esetén, ahol a mátrixréteget a csík vagy a korong egyik oldalára visszük fel, majd a vizsgálat alatt álló anyag és a reagensek, valamint a mátrixban lévő anyagok kölcsönhatásából származó színt vizuálisan figyeljük meg, összehasonlítva a kialakult színt a hordozó csík vagy korong fehér hátterével vagy egy szeparált referenciaháttérrel. Alternatív módon a mátrix felvihető zónák sorozataként is, amelyekben a reagenskeverék eloszlása olyan, hogy a vizsgálandó anyag és az enzim kölcsönhatása az egyik zónában történik meg, majd a kölcsönhatás terméke átdiffundál egy olyan második zónába, amelyben a színreakció zajlik. Még egy további változat értelmében a reagenskeveréket tartalmazó mátrixot a porózus hordozó ugyanazon oldalon lévő pórusaiba abszorbeálhatjuk vagy impregnáljuk, mint ahol a vizsgálandó anyag felvitele történik, majd a mátrixon belül kifejlődő színt a hordozó ellentétes oldaláról figyeljük meg.The matrix carrying the reagent mixture may be applied in a variety of physical forms, such as test strips or disks, where the matrix layer is applied to one side of the strip or disc, and the color resulting from interaction between the test substance and reagents and materials in the matrix by comparing the resulting color with the white background of the carrier strip or disc or with a separate reference background. Alternatively, the matrix can be applied as a series of zones in which the reagent mixture is distributed such that the substance to be tested and the enzyme interact in one zone and the product of the interaction diffuses into a second zone in which the color reaction occurs. Alternatively, the matrix containing the reagent mixture may be absorbed or impregnated into pores of the porous support on the same side as the material to be tested, and the color within the matrix observed on the opposite side of the support.
A találmány ismertetésének további részében a mikroporózus membrán rétege vagy korongja kifejezés alatt a reagenskeveréket tartalmazó mátrixszal impregnált réteget vagy korongot értjük.In the remainder of the present invention, the term "microporous membrane layer or disk" refers to a layer or disk impregnated with a matrix containing a reagent mixture.
A hagyományos vérvizsgálati reagenskeverékekben a gél mátrixot egy körülbelül 4 tömeg% (száraz tömeg) mennyiségben jelenlévő, nagy molekulatömegű zselatin jelenti. Ugyanakkor azokban az esetekben, ahol a reagenskeveréket abszorbeálhatni kívánjuk egy mikroporózus membránba, előnyö-In conventional blood test reagent mixtures, the gel matrix is a high molecular weight gelatin present in an amount of about 4% by weight (dry weight). However, in cases where the reagent mixture is to be absorbed into a microporous membrane,
sebbnek tartjuk egy alacsonyabb molekulatömegű zselatin alkalmazását, jellegzetesen egy olyan zselatinét, amelynek a molekulatömege a 20 000 és 50 000 közötti molekulatömeg-tartományban van. Azt is megfigyeltük, hogy ha a zselatint a korábbiakban alkalmazott mennyiségben van jelen, ez egy olyan gél mátrixot eredményez, amelyet nem lehet megfelelőképpen a membránpórusain belül tartani. Másrészt azt is tapasztaltuk, hogy ha reagenskeverék készítmény géltartalma meghaladja a száraz tömegre vonatkoztatott körülbelül 20 %os értéket, a gél gátolja a reakciótermékeknek a membránon keresztül történő diffúzióját, s ezáltal a lezajlott kölcsönhatások valódi mértékét tükröző szín kifejlődését. Az előbbiek miatt mi az olyan gél mátrix alkalmazását részesítjük előnyben, ahol a reagenskeverékben lévő glükóz-oxidáz 500 000 nemzetközi egységnyi mennyiségére vonatkoztatva egy alacsony molekulatömegű zselatin 250-325 gramm száraz tömegnek megfelelő mennyiségben van jelen.we prefer the use of a lower molecular weight gelatin, typically a gelatin having a molecular weight in the range of 20,000 to 50,000. It has also been observed that the presence of gelatin in the amount previously used results in a gel matrix which cannot be properly contained within the membrane pores. On the other hand, it has also been found that when the gel content of the reagent mixture composition exceeds about 20% by weight on dry weight, the gel inhibits the diffusion of the reaction products through the membrane, thereby reflecting the true degree of interaction. For this reason, we prefer to use a gel matrix wherein the low molecular weight gelatin is present in an amount of 250-325 grams dry weight per 500,000 international units of glucose oxidase in the reagent mixture.
A következő, a találmányt illusztratív jelleggel bemutató Példában — hacsak más jelölést nem alkalmazunk — valamennyi rész vagy % érték tömegre vonatkozik.In the following Example illustrating the invention, unless otherwise noted, all parts or percentages are by weight.
PéldaExample
Egy első oldatot készítettünk oly módon, hogy szobahőmérsékleten összekevertük ionmentesitett víz 300 ml-ét, egy pH 7 értéket biztosító 0,5 M nátrium-foszfát-puffer 200 • · · • · ·A first solution was prepared by mixing 300 ml of deionized water at room temperature with 0.5 M sodium phosphate buffer at pH 7 for 200 ml.
- 11 ml-ét, a Gantrez felületaktív anyag 20 tömeg/térfogat%-os oldatának 100 ml-ét és egy 25 000 és 40 000 közötti tartományba eső molekulatömegű, szárazon elporitott zselatin 300 grammját.- 11 ml, 100 ml of a 20% w / v solution of Gantrez surfactant and 300 grams of dry powdered gelatin in the molecular weight range of 25,000 to 40,000.
Készítettünk egy második oldatot is, amelynek előállítása során 60 °C hőmérsékleten egy órán keresztül kevertettük ionmentesített víz 300 ml-ének, metoxi-etanol 300 ml-ének és o-tolidin-hidroklorid vagy dianizidin-hidroklorid 15 grammjának a keverékét.A second solution was prepared by stirring a mixture of 300 mL of deionized water, 300 mL of methoxyethanol and 15 grams of o-tolidine hydrochloride or dianizidine hydrochloride at 60 ° C for one hour.
A második oldatot kevertetés közben hozzácsepegtettük az első oldathoz, majd a keveréket egy órán keresztül 60 °C hőmérsékleten állni hagytuk.The second solution was added dropwise to the first solution with stirring and the mixture was allowed to stand at 60 ° C for one hour.
Összeállítottunk egy harmadik oldatot is, amelynek elkészítését úgy végeztük, hogy 500 000 nemzetközi egység glükóz-oxidázt összekevertünk 30 000 nemzetközi egység menynyiségű, 0,1 M nátrium-foszfát-pufferben lévő peroxidázzal. Ezt az oldatot kevertetés közben összekevertük az előbbi, összetett oldattal, majd az így nyert keveréket átszűrtük egy 0,1 mikrométeres nyílású szűrőn.A third solution was also prepared by mixing 500,000 international units of glucose oxidase with 30,000 international units of peroxidase in 0.1M sodium phosphate buffer. This solution was mixed with the former compound solution while stirring, and the resulting mixture was filtered through a 0.1 micron filter.
A szűrletként kapott oldattal egy poliszulfongyanta lapot impregnáltunk. A membrán 0,2-0,4 mm vastagságú volt, 0,2 mikrométeres pórusátmérővel rendelkezett és légpermeabilitása 68,95 kPa (10 psig) nyomás mellett 3 liter/perc/négyzetcentiméter értékű volt. Ily módon egy olyan membránt nyertünk, amely négyzetcentiméterenként 5 nemzetközi egység glükóz-oxidázt, 3 nemzetközi egység peroxidázt, • · · • · · · · · · • · · · ··· ··· ··A solution of the filtrate was impregnated with a sheet of polysulfone resin. The membrane was 0.2-0.4 mm thick, had a pore diameter of 0.2 micrometers, and had an air permeability of 3 liters / minute / square centimeter at 68.95 kPa (10 psig). In this way, a membrane was obtained which contained 5 international units of glucose oxidase, 3 international units of peroxidase per square centimeter, ··· ······································································································
- 12 0,2 milligramm o-tolidint és 4 milligramm zselatint tartalmazott .- 12 contained 0.2 milligrams of o-tolidine and 4 milligrams of gelatin.
Összehasonlítási céllal ugyanezt a membránt egy hagyományos reagenskeverékkel impregnáltuk, azaz a membrán négyzetcentiméterenként a szokásos mennyiségű enzimet és kromogént tartalmazta.For comparison purposes, the same membrane was impregnated with a conventional reagent mixture, i.e., the membrane contained the usual amount of enzyme and chromogen per square centimeter.
Mindkét fajta membránból több darab 6 mm átmérőjű korongot vágtunk ki, majd a korongok egyik oldalára vérmintát vittünk fel. A találmány szerinti reagenskeverék készítmény esetén már 10 másodperc elteltével kék szín alakult ki. A szín intenzitása és árnyalata körülbelül 30-40 másodperc elteltével stabilizálódott, majd egy további 30-40 másodperces időtartamig állandó maradt, miáltal a szín megfigyelésére figyelemre méltóan hosszú idő állt rendelkezésre. Az öszszehasonlitás során azt tapasztaltuk, hogy a hagyományos készítmény esetén a kapott szín intenzitása és színárnyalata a vérminta felvitelét követő 10-30 másodpercen keresztül mélyül, azonban további 15 másodperc elteltével a színintenzitás, illetve a színárnyalat hátrányosan változik (degenerálódik) , s így a valódi szín megfigyelése csak igen rövid időtartamon belül végezhető el, illetve szélsőséges esetben még egy rövid időtartamra sem alakul ki értékelhetően leolvasható, stabil szín.Several disks of 6 mm diameter were cut from both membranes and blood samples were applied to one side of the disks. The reagent mixture composition of the present invention had a blue color after 10 seconds. The color intensity and hue stabilized after about 30-40 seconds and then remained constant for an additional 30-40 seconds, giving a remarkably long time to observe the color. Comparison has shown that the intensity and color tone of the conventional formulation deepens for 10-30 seconds after application of the blood sample, but after another 15 seconds the color intensity and hue change (degenerate), resulting in a true color it can only be observed within a very short period of time, or, in extreme cases, no appreciable readable color develops even for a short period of time.
A találmány további részét képezi a találmány szerinti vizsgálati reagenskeverék előállítási eljárása, amely• · ·A further aspect of the present invention is a process for the preparation of a test reagent mixture according to the invention which:
- 13 nek során a keverék egyes komponenseit összekeverjük, s az összetevők egyenletes eloszlású keverékét állítjuk elő.In this step, the individual components of the mixture are mixed to form a uniform mixture of the components.
A találmány oltalmi körébe tartozik egy mikroporózus hordozóközeg által hordozott vizsgálati reagenskeverék előállítási eljárása is, amelynek során a találmány szerinti folyadék reagenskeveréket felvisszük a hordozóközegre. Előnyösen a keverékkel impregnáljuk a közeget, például úgy, hogy a hordozó lapját áthúzzuk (padding) a reagenskeverék fürdőjén, majd a hordozó pórusaiban lévő keveréket hagyjuk gélesedni. Előnyösen a gélesedett keverék eltörni a hordozó pórusjáratait, s ezáltal lecsökken a vér- vagy más sejteknek a pórusok által okozott kapilláris hatással kapcsolatos roncsolódása. Az impregnált hordozóból kivágott korongokat vagy más alakzatokat elhelyezhetjük nyílással rendelkező próbatesteken vagy pedig mintatartó edények végfalaként, s így a hordozóban kifejlődő szín a vér felvitelével ellentétes oldalról figyelhető meg.The invention also relates to a process for the preparation of a test reagent mixture carried by a microporous support, comprising applying the liquid reagent mixture of the invention to the support medium. Preferably, the mixture is impregnated with the medium, for example, by padding the carrier plate through the bath of the reagent mixture and then allowing the mixture in the pores of the carrier to gel. Preferably, the gelled mixture will break the pores of the carrier, thereby reducing the destruction of blood or other cells related to the capillary action caused by the pores. Discs or other shapes cut from the impregnated substrate may be placed on test specimens with an opening or as the end wall of a sample container so that the color developing in the substrate is observed from the side opposite to the application of blood.
Claims (11)
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB919113212A GB9113212D0 (en) | 1991-06-19 | 1991-06-19 | Reagent mixture |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HU9303638D0 HU9303638D0 (en) | 1994-04-28 |
| HUT65982A true HUT65982A (en) | 1994-08-29 |
Family
ID=10696932
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU9303638A HUT65982A (en) | 1991-06-19 | 1992-06-19 | Reagent mixtures composition for blood-test, process for production of the composition, and process for examination blood-samples of glucose-content |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0591322A1 (en) |
| JP (1) | JPH06510426A (en) |
| AU (1) | AU661492B2 (en) |
| CA (1) | CA2110908A1 (en) |
| GB (1) | GB9113212D0 (en) |
| HU (1) | HUT65982A (en) |
| WO (1) | WO1992022669A1 (en) |
Families Citing this family (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5750357A (en) * | 1994-05-18 | 1998-05-12 | Microquest Diagnostics, Inc. | Method of rapid analyte detection |
| US7494816B2 (en) | 1997-12-22 | 2009-02-24 | Roche Diagnostic Operations, Inc. | System and method for determining a temperature during analyte measurement |
| US7407811B2 (en) | 1997-12-22 | 2008-08-05 | Roche Diagnostics Operations, Inc. | System and method for analyte measurement using AC excitation |
| US7390667B2 (en) | 1997-12-22 | 2008-06-24 | Roche Diagnostics Operations, Inc. | System and method for analyte measurement using AC phase angle measurements |
| JP2000125994A (en) * | 1998-10-28 | 2000-05-09 | Aisin Seiki Co Ltd | Resin cushion element |
| US7597793B2 (en) | 2003-06-20 | 2009-10-06 | Roche Operations Ltd. | System and method for analyte measurement employing maximum dosing time delay |
| US7604721B2 (en) | 2003-06-20 | 2009-10-20 | Roche Diagnostics Operations, Inc. | System and method for coding information on a biosensor test strip |
| US7452457B2 (en) | 2003-06-20 | 2008-11-18 | Roche Diagnostics Operations, Inc. | System and method for analyte measurement using dose sufficiency electrodes |
| US7488601B2 (en) | 2003-06-20 | 2009-02-10 | Roche Diagnostic Operations, Inc. | System and method for determining an abused sensor during analyte measurement |
| BRPI0507376A (en) | 2004-02-06 | 2007-07-10 | Bayer Healthcare Llc | oxidizable species as an internal reference for biosensors and method of use |
| US7569126B2 (en) | 2004-06-18 | 2009-08-04 | Roche Diagnostics Operations, Inc. | System and method for quality assurance of a biosensor test strip |
| US7556723B2 (en) | 2004-06-18 | 2009-07-07 | Roche Diagnostics Operations, Inc. | Electrode design for biosensor |
| JP5385607B2 (en) | 2005-07-20 | 2014-01-08 | バイエル・ヘルスケア・エルエルシー | Gated current measuring instrument |
| KR20130100022A (en) | 2005-09-30 | 2013-09-06 | 바이엘 헬스케어 엘엘씨 | Gated voltammetry analyte determination |
| WO2009076302A1 (en) | 2007-12-10 | 2009-06-18 | Bayer Healthcare Llc | Control markers for auto-detection of control solution and methods of use |
| US20140083869A1 (en) * | 2011-02-09 | 2014-03-27 | University Of Massachusetts | Detection Of Endotoxins |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3012976A (en) * | 1959-11-02 | 1961-12-12 | Miles Lab | Specific test composition for occult blood |
| DE2460903C3 (en) * | 1974-12-21 | 1981-12-24 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | New 3,3 ', 5,5'-Tetraalkylbenzidines |
| DE2913553C2 (en) * | 1979-04-04 | 1981-09-17 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Method and reagent for the enzymatic determination of enzyme substrates |
| US4340669A (en) * | 1981-02-12 | 1982-07-20 | Miles Laboratories, Inc. | System for the determination of glucose in fluids |
-
1991
- 1991-06-19 GB GB919113212A patent/GB9113212D0/en active Pending
-
1992
- 1992-06-19 AU AU20211/92A patent/AU661492B2/en not_active Ceased
- 1992-06-19 CA CA 2110908 patent/CA2110908A1/en not_active Abandoned
- 1992-06-19 WO PCT/GB1992/001116 patent/WO1992022669A1/en not_active Ceased
- 1992-06-19 HU HU9303638A patent/HUT65982A/en unknown
- 1992-06-19 JP JP5500799A patent/JPH06510426A/en not_active Withdrawn
- 1992-06-19 EP EP92913166A patent/EP0591322A1/en not_active Withdrawn
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO1992022669A1 (en) | 1992-12-23 |
| EP0591322A1 (en) | 1994-04-13 |
| AU661492B2 (en) | 1995-07-27 |
| HU9303638D0 (en) | 1994-04-28 |
| CA2110908A1 (en) | 1992-12-23 |
| JPH06510426A (en) | 1994-11-24 |
| AU2021192A (en) | 1993-01-12 |
| GB9113212D0 (en) | 1991-08-07 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| HUT65982A (en) | Reagent mixtures composition for blood-test, process for production of the composition, and process for examination blood-samples of glucose-content | |
| US4438067A (en) | Test strips for analyzing dissolved substances | |
| RU2288273C2 (en) | Composition of reagents, reagent test-band, system, method and set for detecting or assay of analyte presence in physiological sample | |
| EP0230229B1 (en) | Stable composition for the determination of peroxidatively active substances | |
| US5494638A (en) | Support membrane | |
| US5418143A (en) | Test article and method for performing blood coagulation assays | |
| US4427770A (en) | High glucose-determining analytical element | |
| US6998248B2 (en) | Reagent test strip for analyte determination having a hemolyzing agent | |
| JPS60209174A (en) | Test apparatus and method for detecting component of liquid sample | |
| JP2004503760A (en) | Compositions containing urea derivative dyes for detecting analytes | |
| JPS6267442A (en) | Enzyme electrode type sensor | |
| EP0164008A2 (en) | Enzymatic ethanol test | |
| JP2003232789A (en) | Stabilized tetrazolium dye reagent composition and method for use thereof | |
| CA2412198A1 (en) | Stabilized tetrazolium-phenazine reagent compositions and methods for using the same | |
| EP0121192A2 (en) | Analytical test composition, device, method for its preparation and method for the determination of peroxidatively active substance | |
| EP0322669A1 (en) | Dry liquid analysis element | |
| JPS584555B2 (en) | Ascorbic acid detection composition, detection method, and detection element | |
| US5160436A (en) | Asymmetric sandwich membrane system having reduced ascorbate interference | |
| US5063153A (en) | Integral multilayer analytical element | |
| JPS5810655A (en) | Reagent and method for detecting hydrogen peroxide or hydrogen peroxide forming substrate | |
| US5776779A (en) | Integral multi-layer element for analyzing bile acid sulfate | |
| JPH05260994A (en) | Detection of analyte in saliva using peroxide-peroxidase test system | |
| US3410757A (en) | Galactose test composition and method | |
| JPH10215896A (en) | Glucose detection ink composition | |
| EP0121191A2 (en) | Analytical test composition, device, method for its preparation and method for the determination of peroxidatively active substances |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| DFD9 | Temporary prot. cancelled due to non-payment of fee |