IT8149046A1 - Metodo per la depilazione o tosatura di animali - Google Patents

Description

: Descrizione dell invenzicne avente per titolo:

! "METODO PER LA DEPILAZICNE 0 TOSATURA DI ANIMALI"

-Rt-IASSU-NTO

Metodo per la depilazione o tosatura di animali,per esenpio 1.

p1ecore, che c-ompr:ende -la somninistrazion "e a tali ammali di unat sostanza polipeptidica, che ? nota come fattore di crescita.epi

I

dermico, o di composti ad essa analoghi. _ _

j

-D-E-SCRIZIONE _ _

J - - - - - - -La presente invenzione concerne un metodo e dei nezzi-chimici, -j | per la_.depilazione_O-tosatura.degli_animali.- { I I

Altre,note .pubblicazioni descrivono-1-hmpiego di-ccmposti-quali-L--; ; | la mimosma e vari ftalimidinopentani per-effettuare la-tosatura - --1 . ? delle pecore..La loro.azione.?.quella di ritardare la crescita--

della lana in.maniera che,.a.seconda-della dose, viene a crearsi ---

.una zona di debolezza.nelle-fibre della lana, ovvero il manto 0 --

vello delle pecore viene.mutato.Entrambe queste condizioni posr

sono facilitare la raccolta-meccanica della lana da parte di? .personale non esperto.L?inpiego su vasta scala di questi agen?1 ^ti non sarebbe tuttavia-privo-di problemi,poich? 1 livelli miniini di dosaggio per -la-tosatura-sono-molto-vicini-ai livelli .a .cui si possono verificare-disturbi metabolici seri.---.

la presente invenzione si basa sulla scoperta che alcune sostani?

ze di origine animale-esercitano un?influenza sulla lana ovvero sulle fibre pelose in maniera-simile-a quella dei-composti sum?I menzionati,ma-possono essere somministrate con-sicurezza in un !

campo di_dosaggi molto pi?-esteso.-Una delle sostanze tipiche in questione ?.costituita da un materiale-isolabile dalle gjiiani

.dole salivari-dei.topi maschi, che-?-noto cane -fattore di crescita-epidermico?EGP,T.-Si-? ritenuto-per molti anni che tale -fattore potesse inibire_la velocita-di-cres??ta-del corpo-e quel la dei.peli .quando iniettato nei topi-appena natijtuttavia la i

sIua capacit.?di cont.ro.llar.e-la cr.escita-della-lana-non era-stata, riscontrata precedentemente_ _ _ :__ I 1 .

Il_fattore.di.crescita-epidermico ?-un-polipeptide di 53 anminoj acidi..('?EGF".1-53)..-Sebbene-la-presente-invenzione--venga-descrit? ta con particolare.rife-rime-nto-a tale--fattore-yEGF'-?.le sostanz7e -II ? .. ... , che possono essere definite'fenaloghe all?EGF" presentano propriet? simili e possano essereinpiegate.al posto-dellTEGF con? -ager?ti della tosatura. Cos? come_il fattore di crescita epidermico umano, il termine "sostanza-analoga all?EGF", adottato nella presente descrizione, abbraccia le seguenti-sostanze della specie 1

umana,di quella delle pecore e di altre specie:urogastrone (URO) _ e frairmenti di esso,tipicamente URO 1-47,URO 1-52,.EGF,1 _EGF 8 e_.EGF_1-51.Nel_senao^ampio.,..il..termine,abbraccia.tutti j

_i_derivati sintetici_e_natur?li_della_fanri.glia._dei_polipeptidi . del fattore di crescita epidermico, che.contengono.una.sequenza^ di amminoacidi (o di sostitutidegli..airminoacidi) efficaci..nella Tre-golazione della crescita dei peli.

ili,conseguenza nel_suo aspetto,pi? ampio la presente invenzione ' : "v . ; ' ' ' " i descrive un metodo,perula,depilazione o tosatura degli animalif._ _ jche conpre-nde la somministr.azione-ad e-ssi del fattore di cresci! ta epidermico oppure di una sostanza ad esso analoga.Nella pr?-_ sente descrizione "depilazione" significa l'asportazione dellaj lana o dei peli dagli animali che si trovano in una fase meta-j nolica in cui la lana o le fibre pelose stanno per essere prodotte attivamente. _ _ _ _ _ Gli agenti della depilazione secondo la presente invenzione pos-_ spno essere sorrministrati in varie maniere,ma preferibilmentej per via sottocutanea, ed i regimi,di dosaggio possono essere_ Dilanciati allo scopo di soddisfare i requisiti dei mezzi di raccolta specifici.Sebbene applicabile a numerose specie di ^animali,quali le pecore, le capre e i conigli, la presente in yenzione verr?,principalmente descritta con riferimento alle pecore- - ?- - - :-Jna^maniera.per-definire il-Tyalore di debolezza-delle--fibre-di ? lana ? quella-di fare-riferimento alla-forza-di strappo (Newtcns/ ftex, o.N/Ktex)richiesta per.rimuovere il-vello.Metodi per -in?

_4effettuare questa misura sono stati descritti da A.J.Gordon,i

!jAust.J._of Exp.Agrlc.Anim.Husb.20,40-49.e Moore e altrTi,

|SEARCH.12, 128-129.E1stato trovato che per la maggior parte

. _ 1

di^tecniche di raccolta che possono essere considerate.se un | fiocco pu? essere rimosso con una forza di strappo compresa tra

2 e 6 N/Ktex,allora la tosatura pu? essere attuata senza danneggiare o causare tensioni inaccettabili all'animale. I .. Un altro aspetto della presente invenzione risiede in un metodo per la tosatura delle pecore che comprende la somministrazione ad esse del fattore di crescita epidermico o di una_sostanza

ad esso analoga in quantit?,sufficiente a ridurre la forza media di strappo dei fiocchi ad almeno 6 N/Ktex.

te1stato trovato che l'infusione sottocutanea rappresenta un

1mezzo particolarmente soddisfacente per la somministrazione del [fattore di crescita epidermico ai livelli di dosaggio efficaci1.

?Per esempio,negli esperimenti di ricerca riportati pi? avanti[

l'infusione del fattore di..crescita epidermico in-quantit? pari-?

0.75

_ .a 0,l6mg EGF/Kg 0.75 (kg ? ?..peso-del.corpo metabolico)ha permesso la.facile rimozione dei..fiocchi dagli.animali sottoporr sti_ai.trattamento..

Jl3n__qpes,ti_esperimenti_la sonmnistrazione.?.stata,attuata.at-_ tpayerso un_catetere inserito al di.sottodella pelle.-Tecniche t^alte'rn?ative conprendono,per.esempio, l?infusione lenta da.una_ capsula impiantata.0 simile,_i'.iniezione.sottocutanea.oppureper via orale.

La.presente_inyenzione...verr?._adesso..descritta-in-dettaglio-ccru .riferimento agli esperimenti-in-cui-un-certo-numero di-montonii~ MERINO adulti_sono_stati_sottoposii-a-vari-trattamenti PREPARAZIONE DEI'MATERIALI :_ _ __ _ ? E^^stato^preparato^j^Lfattore.,di.crescita-epidermco-dalle? T ghiandole,sottomascellari_di..topi.maschi-adulti.con-il-metodo-l? ___<3i Savage e Cohen_(J._Biol_Chem...247_,_J_609?76ll).._ __

} ' - -I derivati del fattore di.crescita epidermicoJL-^5-sono-statigreparati_nKdiante bollitura tripticajdella_peptide_intatta_ 1 . . . .

nella maniera seguente:circa 25.mg_di.fattore di crescita-. -epidermico sono stati bolliti in un piccolo yolume...di.una_solu-

zipne tampone di fosfato,;0,05?M,.pH 1,..contripsina..(50yMg,? 1Worthington, trattamento TPCK)_per j4_ore_a_3.70C.._.Successivarnen-? te sono stati addizionati altri5Qfe e l?incubazione ?_stata_.ri-i ftuta.

I prodotti di bollitura sono stati dializzati per tutta la not-; tie a_10?C.in una memibrana_Spe^ctro-Por 6,,ved?il p.rodotto dia "ii'z-?? zato ? stato essiccato e gelato per essere,jrrrnagazzjnato fino. aIlia sua richi~esta~ . '

t i ANIMALI

Montoni MEMNO adulti sono stati radunati al coperto in singoli recinti o gabbie metaboliche.Agli armrali ?_stata_propinata__.-._

\

una razione di mantenimento di 600 g di ura miscela.granulare _jjl 60% di erba medica e al_40$ di avena come pasto giornaliere. Acqua da bere ? stata somministrata a piacere._

1 _ ;ISOMMENISTRAZKMI_DE3X 'INFUSIONE SOTTOCUTANEA-_

I.montoni,sono-stati preparati_per_gli esperimenti-di-infusione mediante.1?inseriment.o_di_un_catetere-di.politene_al-di_sotto

-rdella pelle,..in maniera che.1?orifizio_si_trovasse_.in_pross?mi?-;t? del coltro,di..una zona..marcata_10.x.IO sulla parte_mediana. ^destra del corpo. agente.di..depilazione.?_stato..disciolto.in una soluzione salina,sterile ed.infuso,.utilizzando_una_poirpa ) -Harvard atta a fornire un volume di 0,050 ml/min..Gli_animali _controllati sono stati infusi soltanto con la soluzione salina, I risultati sono stati elencati.in.dettaglio.nella Tab..l.._Tut. tavia e stato osservato che l'infusione di quantit?,maggiori di 0.75 i circa,0,25 mg EGF/Kg * ha dato origine.alla raccolta,dell.'in-, i

I

tero vello.in circa 7.giorni..Con.infusioni_m?nori_di._0,25_mg-_.

1 075

EGF/Kg.' i manti o velli erano.trattenuti_ma_i_fiocchi..poteya~ no essere facilmente rimossila mano._ _ ! .

_ la quantit? di lana raccolte.dalle__aree marcate di..alcuni ani-\

_ ngji sono state rappresentate nella Eie.l._A livelli di dosag?? _ 'gio di O,74 e.J-,86_mg EC 0.75la produzione,di lana declina fino a raggiungere lo 0_duesettimane dopo 1*inizio dell'infusione.Il ripristino allivelli di crescita di preinfusione ?_ stato osservato due settimane pi?.tardi.A livelli di dosaggio inferiori l?inibizione alla crescita della lana era notevolmenjIte minore,in cui iljnassimo effetto registrato si notava all*i?ncirca attorno all'80$ dell'inibizione della crescita della lana. ICi? si vVerificava??circ-a--4 se.ttimane-dopo l'infusione,-ma_la_nor1male crescita della lana si otteneva circa 2 settimane pi? tardi. E* stato trovato che le infusioni della peptide EGF 1-45 davano[ risultati praticamente simili.

Nel corso dei suddetti esperimenti di ricerca sono stati prele?? vati carpioni di sangue dagli animali selezionati approssimatiy vanente ad intervalli di ora dall?inizio del trattamento Una correlazione tra le determinazioni radiolirrnunologlche delle concentrazioni di plasm del fattore di crescita epidermico o. "EGE" e le forze successivamente richieste per strappare la lana dalla pelle delle pecore ha messo in evidenza la necessit? rii stabili?? una concentrazione di plasma di EGF di almeno 10 ng/inl per un periodo di almeno 15 ore, allo scopo di modificate la crescita della lana in maniera sufficiente da consentire^facilmente la rimozione del vello a mano,

INFUSIONE SOTTOCUTANEA DEL FATTORE DI;CRESCITA EPIDERMICO "EGF", DI EGF 1-450 SALINO

Pecora Trattamento Pesjo E(p. Dose, Periodo j_ Forza di Risultato'

No. corporeo totale mg/Kg J75 di infusione strappoiN/Ktex) '

U?); I ?'(ore); . j gi?rno 1 giorno 9

I 1.

1 EGF 36.3 1.86 ;66 I 12.2 9,1 mutamento nel manto 2 Salino ? 37.0 !27*?

1 "" :66 '! 10.4 9.0 nessun'effetto

3 EGF 41.0 j11.7 0,74 ,28 : 8.9 0 ? mutamento nel manto 4 EGF I11.7 ?28 : 3.4 0.3(giorno 7) I! tt

5 EGf 10.0 :28 ; 4.1 0.2(giorno 7) It IT

6 Salino i 41.0 : 28 ; 14.3 ' nessun effetto

7 EOF 49.0 , !.548 0.32 ?28 ? 7.5 6.4 mutamento nel manto 8 EGF 47.6 ; j 4.7 0.26 28. 21.3 2.1 II TI II 00 9 EGF 47.4 ; ! 4.? 0.26 28 12.5 1.4 II Il 11 10 EGF 1 42.0 ; i 4.7 0.28 ;26.5 7.6 ; 0.1 TI Il IT 11 Salino 48.0 | '?28 ' 6.0 ?7.5 nessun effetto

12 EGF ' 45.0 i 2.9 0i:17 28 ' 6.6 : 0,6 fibra indebolita 13 EGF 30.6 ! 2.4 0.19 :25 ? 11.3 2.1

14 EGF 29.41 2.6 0.16 :26.5 9.3 1.5

15 Salino ; 40.1 : rf

16 1 28 3.1 i 5.8 nessun-effettg EGF ' ; 1.6 '28 ! ?5.5 3.6 fibra indebolita 17 EGF i 40.8 1.6. 0.06 ;28 10.6 8.7 nessun,effetto

18 Salino i 38,6 .28 8.5 1 '6.6 TI IT ?

19 EGF ' 31.8 5.0 0,37 ;;7 7.0 j 0.4 mutamento del manto 20 EGF 41.0 5.0 0.31 7 ! 17.9 : 1.0 II Il II 21. EGF 4i.9 5-6 0.?30 ' 7 '! 11.4 0.8 11 Il 11 '22 45T0 5:6 0729. t 1 I 9T? 1.0 "fi" "?? 11 23 EGF 50.6 5.6 0.26. 7 12.7 2.8 1! Il II 24 EGF i 28.6 2 4 0.20 :48 14.8 3.2 fibra indebolita 25 EGF ;. 28.4 2.4 0.19 ;48 l?.7 2,4 IT? ' 1!

i ?- ??

26 EGF 1-45 42.0 4.9 0.30 '26.5' 5.6 Q.3 mutamento del manto 27 EGF 1-45 1.0 ?28' ?4.1 3.1 fibra indebolita JRIVENDIGAZICNI

il.Metodo per la depilazione o tosatura di animali, cine comprende ! ' ' ' : ' . . | jla somministrazione agli,animali del fattore di crescita^epidermico cosiddetto "EGF" o di un conposto di tipo analogo.

2, Metodo secondo la rivendicazione 1,in cui il conposto di T

Itipo anal'ogo.al fattore "d "i'cres.cita epidermi-co- o-nEG-F"-?---liurogastrone.

1<3.Metodo secondo una qualsiasi delle rivendicazioni precedenti, in cui il fattore di crescita epidermico o "EGF" o il composto j- / '' '? .

?di tipo ad esso analogo ? sonministrato in un dosaggio sufficiente a ridurre la forza di depilazione ad almeno 6N/Ktex Metodo secondo.la rivendicazione 1 o 2.in cui il fattore di ? ; ? ? ? ??? . . i crescita epidermico o r,EGF" o il conposto di tipo ad esso analp-_ go viene somministrato in un dosaggio sufficiente a stabilire una concentrazione di plasma di ,?CEF,,_di almeno 10 ng/njlper almeno 15 ore? _

5.Metodo secondo una qualsiasi delle rivendicazioni precedenti,in cui il dosaggio del fattore di crescita_epidernd.co_o "EGF" ^ " ' Q y|-? del conposto di tipo ad esso analogo ? di almeno 0,25 ? /T,~ *n

.6.....Metodo-secondo una qualsiasi-delle rivendicazioni precedenti-^ in cui il fattore di crescita epidermico o "EGF1?o il composto di .tipo ad esso analogo-viene somministrato per-via-sottocutanea.

7.-Metodo secondo una-qualsiasi delle rivendicazioni precedenti! 1 ? ?

in cui l?animale ? una pecora.

8.Metodo secondo una-qualsiasi delle rivendicazioni precedenti cane ? stato-sostanzialmente-descritto con riferimento al-test? ed agli esenpi. - -9.Uso del fattore di-crescita epidermico o "EGF" o di un-eorpo---!sto ad esso analogo per la depilazione o tosatura-degli ammali1