IT8248809A1 - Procedimento e dispositivo per l'accertamento di contaminanti nella industria alimentare e simili - Google Patents

Procedimento e dispositivo per l'accertamento di contaminanti nella industria alimentare e simili

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IT8248809A1 ITRM1982A048809A IT4880982A IT8248809A1 IT 8248809 A1 IT8248809 A1 IT 8248809A1 IT RM1982A048809 A ITRM1982A048809 A IT RM1982A048809A IT 4880982 A IT4880982 A IT 4880982A IT 8248809 A1 IT8248809 A1 IT 8248809A1
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Description

DOCUMENTAZIONE
RILEGATA
SIB 83499
5000/16797 DESCMZIO?^^e?r^invenzione industriale dal titolo:
"Procedimento e dispositivo per 1*aoeertamento di contaminanti nell?industria alimentare e simili<11 >della ditta tedesca VEB Pharmaglaswerk Neuhaus
con sede in NEUHAUS/Rwg. (EEP.DEM.TEDESCA)
RIASSUMO
L?invenzione riguarda un procedimento ed un di spositivo per l?accertamento di contaminanti nella industria alimentare mediante prelievo diretto di campi? pioe coltivazione di microrganismi contenuti nei cam pioni. Scopo dell?invenzione ? di ridurre il dispendio di lavoro e tecnico di apparecchiature senza diminu? re la sicurezza del risultato. A base dell?invenzione sta il compito d? sviluppare un procedimento secondo di quale la durata di trattamento del campione ed il numero degli stadi di lavoro vengono diminuiti con ci? che in un medesimo dispositivo sono riuniti il sistema di prelievo e quello di coltivazione.
Il procedimento ? caratterizzato da ci? che il campione dn esame giunge, con l?ausilio di una presta bilita depressione oppure mediante pistone, nel reci piente di coltivazione, viene mescolato con unterreno nutritivo es. durante la coltivazione con formazione di gas attraverso gli organismi in esame,effluiscono quantit? equivalenti misurabili di sospensione di ter reno nutritivo/germi, Contemporaneamente, una accanto all?altra sono valutabili crescita, formazione di aci, do e formazione di.gas degli organismi contaminanti.
La cannala del recipiente combinato di prelievo di campioni e di coltivazione ? formata a tale scopo come raccordo di aspirazione ed efflusso. In un sepa rato recipiente di vetro al di fuori del recipiente di coltivazione sono sistemati uno o pi? terreni nutriti, vi solidi, separatamente dal terreno nutritivo liquido.
^PESCRXZIOHE,,
Campo di applicazione dell*invenzione.
Il procedimento e il dispositivo secondo 1?in versione per l'accertamento di contaminanti servono sia al prelievo di campioni dal liquido sia anche al la coltivazione dei microrganismi contenuti nei campici ni per il controllo microbiologico-igienico in azien de dell'industria alimentare e simili rami industria li,
C aratteristica delle gote^ s o lujdoni_ t e, epiche ? Per l'accertamento di contaminanti sono noti va ri metodi che consentono una indicazione sulla carat. teristica della infestazione da germi,di un prodotto o di una parte di apparecchiatura o di impianto. Fon damentalmente,tuttavia, l'accertamento ha luogo in parecchie stadi di lavoro.
Il prelievo di un determinato volume di campione di un liquido o di una sospensione nel laboratorio ha luogo da un recipiente per mezzo di un attrezzo sterile (per esempio pipetta), per iniziare con corri spondenti aliquote del campione colture su adatti terreni nutritivi solidi e, oppure liquidi. Questo recipiente pu? essere per esempio una bottiglia da bevan de od un recipiente da trasporto in cui viene infero dotto in condizioni sterili un campione al di fuori del laboratorio. Una valutazione per mezzo dell*imma gine microscopica ? possibile solo nel caso di pi? elevata concentrazione. In ragione del numero degli attrezzi necessari e del contatto con l*aria ambiente sussiste il rischio di una contaminazione secondaria.
Per il controllo di conservabilit?, per esempio di bevande, ? importante 1*accertamento di contaminar, ti anche in numero molto esiguo. A tale scopo un ma? giore volume di campione viene filtrato attraverso una membrana e questa viene portata su un terreno nu tritivo solido.
In metodi di coltura,tuttavia, un risultato sod disfacente pu? venire determinato al piu presto dopo incubazione per 3 fino a 4-giorni, poich? germi sensi, bili crescono su terreno nutritivo solido pi? lenta mente che in colture liquide. Ci? vale anche per il -Ti?
noto processo & piastre secondo ?yoeh.
Una colorazione d?i microrganismi trattenuti da filtri a membrana ed il loro successivo conteggio nonch? caratterizzazione per mezzo del<'>microscopio sono possibili solo in luoghi di lavoro ben attrezza ti e richiedono una corrispondente qualificazione.* Inoltret in un conteggio diretto si pu? distinguere s?lo limitatamente -fra germi vitali e fiorili Un note vele inconveniente di metodi tradizionali consiste inoltre in ci? che al di l? del grado di eontaainazio ne non possono venire determinate contemporaneamente anche propriet? caratteristiche degli organismi conta minanti (formazione di gas, attivit? fermentativa, formazione di acido, crescita in condizioni anaerobi che).
Por germi che posseggono importanza nell?ind? stria alimentare ed in simili rami industriali, ? paxticGi&r-nente importante il contemporaneo accerta mento di una capacit? di formare gas ed acido in condi z?oni aer?biche nonch? di poter crescere in condizio ni anaerobiche. Secondo un metodo convenzionale di pr? cedere, la formazione di gas viene dimostrata quali tativsmente oppure diventa necessaria una separata &? parseehiatura di coltivazione (per-esempio tubicini di fermentazione). I metodi convenzionali caricano gli addetti al laboratorio con la preparazione di apparec, chi sterilizzati e 1*approntamento di terreni nutriti vi. Con ci? vengono pi? altamente gravati piccoli p_o sti di lavoro.
Inoltre-, dalla medicina sono noti determinati metodi e,sistemi per il prelievo di sangue ed ulteriore trat mento dei campioni di sangue. Secondo 1e domande di brevetto tedesco esposte 3536 061 e 2835 101 sussi, ste la possibilit? di collegare a sistemi a cannula, che sono stati infissi nella vena dei pazienti, tubi, cini di campionaturapreevacuati i quali servono come recipienti per il trasporto di campioni oppure possono venire utilizzati come recipienti per reazioni bio, chimiche o rispettivamente recipienti di coltivazione. Secondo la domanda di brevetto tedesco esposta 24-11651, all?interno del sistema di prelievo di sangue, una formazione di gas viene indicata per mezzo di uno sbarramento sensibile a pressione, impermeabile a
gas, il che ? ima possibilit? della connessione al l'analisi di gas.
Un sistema combinato di prelievo di sangue e di coltura per l'esame di batteriemie secondo la do manda di brevetto tedesco esposta 3012056 consente la contemporanea coltivazione su terreni nutritivi solidi e liquidi, nel qual caso il sangue, dosato
quantitativamente attraverso un sistema di prelievo, viene aspirato in un recipiente di un sistema di col_ tura di sangue,munito di vuoto o di u? riempimento con gas, e con ci? inocula sia il terremo nutritivo liquido sia anche il terreno nutritivo solido* Un in dicatore dipendente dal pH rende visitile la formazi? ne di acido legata alla crescita*
La incubazione ha luogo in posizione inclinata del sistema, nel qual caso la cannula di prelievo rima ne chiusa con un tappo sterile di plastomero* Questi sistemi non sono per? applicabili al campo dell*ind? stria alimentare.
Obiettivo dell<1>invenzione*
Obiettivo dell *invenzione ? di elaborare un pr?, cedimento ed un dispositivo per l?esame microbiolp^ gico di prodotti ed attrezzature dell*industria alimen tare e di rami affini, i quali non presentino gli in convenienti delle soluzioni antecenti e per mezzo dei quali sia possibile quantitativamente un accertamento rapido, combinato, del grado di contaminazione e di propriet? essenziali dei contaminanti, anche nel caso di impiego di recipienti a perdere.
Fresentazione dell<fl>essenza dell*invenzione* A base dell*invenzione sta il compito di svilujj pare un procedimento che renda pi? sicuro il controllo microbiologico con contemporaneo abbassamento del dispen dio di lavoro e di tempo, nonch? fornire un dispositi, vo che unisca tutte le funzioni necessarie del prelievo di campioni e della coltivazione cos? che , adoperaa do adatti terreni nutritivi liquidi e, oppure solidi5 sia possibile un accertamento di contaminanti in li, guidi o rispettivamente di microrganismi sospesi in liquidi mediante metodi noti*
Il procedimento secondo 1*invenzione ? adatto preferibilmente per l?accertamento di batteri9 fermen ti emuffe, nel qual caso il campione liquido, dosato quantitativamente, viene aspirato in un recipiente combinato di prelievo di campioni/coltivazione,munito di depressione o, oppure d? uno speciale riempimento di gas (per esempio COg, Ng),ed ivi viene mescolato con il terreno nutritivo liquido.
In un settore separato del dispositivo possono essere introdotti uno o pi? terreni nutritivi solidi, per cui ? possibile che il campione mescolato con il terreno nutritivo liquido inoculi contemporaneamente il terreno nutritivo liquido e quello,o rispettivamen te quelli solidi*-Ad una determinata temperatura e pc> sizione verticale del recipiente ha luogo la coltiva zione dei microrganismi la cui crescita ? riconoscib:L le per effetto di intorbidamento del terreno nutritivo liquido o rispettivamente pei'effetto di crescita a colonie od a prato su terreni nutritivi solidi?
Il potere di formazione di gas dei mierorgani ani contaminanti diventa visibile mediante cambiameli to di colore di un sistema indicatore? dipendente dal pli?preferibilmente veide bromocresolo (3%?' tetrabromo-m-cresolsulfoitaleina) oppure blu bromo fenolo (tetrabromofenolsulf?ftaleina). Secondo l'in venzione il procedimento ? caratterizzato da ci? ?he una formazione di gas dei microrganismi viene accer tata in quanto il.recipiente viene fissato in un adat, to sostegno in posizione verticale con la cannula aperta verso il basso cos? ohe urivolume, adeguato al la formazione di gas, della sospensione di mierorgani smi nel terreno di coltura venga scacciato dal reci piente, il quale volume viene determinato in un tubici, no calibrato, preferibilmente sterile, chiuso con un tappo sterile di ovatta*
Secondo l'invenzione, il procedimento ? inoltre caratterizzato da ci? che eontemporaneamente vengono determinate una accanto all?altra propriet? caratteri etiche degli organismi contaminanti, come ad esempio contenuto di germi, formazione di gas,attivit? fermen tativa oppure formazione di acido. Con ci?,per mezzo del procedimento ? possibile anche un esame dell?atti.
vita fermentativa dei fermenti di produzione impiegati? Per ricerche separate viene prelevato un campio ne sia dal tubiciono di raccolta sia anche,dopo la coltivazione,dal terreno nutritivo liquido e, oppure solido.
Il dispositivo secondo l'invenzione ? carette rizzato da ci? che la cannula del recipiente di prelie vo di campione/coltivazione ? eseguita contemporanea mente comeraccordo di aspirazione per il liquido da esaminare e come raccordo di efflusso per la sospensio ne di germi in terreno nutritivo, scacciata nella for mazione di gas, possiede preferibilmente un diametro < 3 mia e viene mantenuta eretta, per mezzo di un ta? po sterile,<'>in un recipiente misuratore graduato. Inol tre il dispositivo ? caratterizzato da ci? che il re cipiente ? predisposto per uno o pi? terreni nutritivi solidi* all'esterno del recipiente per il terreno nutr? tivo liquido, preferibilmente carnerecipiente suddiviso o
accanto al vano di vuoto/riempito con gas, ed ? munito di un fermo per il terreno nutritivo solido.
I vantaggi del procedimento e del dispositivo secondo l'invenzione consistono in.ci? che l'invenzio^ ne consente di presentare un accertamento contempora neo d? microrganismi formanti gas e formanti acido. Rispetto al noto metodo proposto, essi vengono impie gati con vantaggio nell<1>industria della fermentazione e delle bevande nonch? simili ra?i industriali.
In contrapposto a noti apparecchi, non ? nece?3 sari? l?applicazione di un apposito dispositivo di prelievo di gas, poich? la formazione di gas vita? in dicata in ragione della fuoriuscita del terreno nutria tivo attraverso il raccordo di prelievo di campioni.
Rispetto a metodi noti , nel caso della presenza di fermenti attivi nella fermentazione, gi? durante -l?incubazione possono venire prelevati campioni per l?ulteriore esame.
l? sistema ? adatto non solo per 1*accertamento di germi contaminanti, ma anche per la determinazione dell?attivit? fermentativa di fermenti di produzione.
Il corpo per il terreno nutritivo solido ? appijL caro all?esterno del r?cipiente. Dopo corrispondente inoculazione del terreno nutritivo solido, il terreno nutritivo viene incubato fermo. E<f >quindi immediatemen te riconosc?bile una formazione di colonie? Un ulterio re vantaggio di questo apparecchio ? che, in confron to a procedure e metodi convenzionali,pu? intervenire difficilmente una contaminazione del materiale di camplo ne poich? i terreni da esaminare vengono prelevati me d?ante asportazione diretta, per esempio trapugendo mem brame a scopo di prelievo di campioni.
Esempio di esecuzione
Il procedimento ed il dispositivo secondo l'in venzione vengono presentati ed illustrati in appresso con esempi di esecuzione?
Nei disegni annessi mostrano:
la figura 1 un grafico riguardo alla formazione di gas da parte dei germi in una bibita rinfrescante;
la figura 2 un grafico riguardo alla formazione di gas da parte di germi in un materiale di base per limonate;
la figura 3 il dispositivo secondo l'invenzione per diverse possibilit? di impiego:
a) sistemaarecipiente aperto con pistone per terreno nutritivo liquido,
b)sistema a recipiente aperto con pistone per sistema nutritivo liquido e solido; e
la figura 4:a)sistema a recipiente chiuso per terreno nutritivo liquido;
b)sistema a recipiente chiuso per terreno nutr? tivo liquido e solido?
Nel caso di contemporaneo accertamento di orga nismi fermentanti e formanti acido in una bibita rin frescante 8 prima dell'esame riguardo a contaminanti la bibita deve venire privata di acido carbonico come ? usuale in generale in esami microbiologici.
II campione in esame viene addizionato di solu zione indicatrice sterile* nel ?mal caso trova impie go .1*indicatole usato anche nel.terreno nutritivo del sistema di.prelievo e di coltivazione? Al campio ne viene.aggiunta tanta soluzione sterile normale di idrossido di sodio finch? il colore dell*indicatore ? ? virate,poich? 1'acido presente ? stato ampiamente neu tral?zzato* .?
Il raccordo di aspirazione del recipiente di pre li.evo e di coltivazione viene immerso nel campione da esaminare e viene stabilita,la comunicazione con il recipiente del terreno nutritivo,per cui la depressi^ ne che si trova in esso provoca un.afflusso del liqui do in esame nel terreno nutritivo?
L'apparecchio inoculato viene cautamente fatto oscillare per assicurare un intimo mescolamento di cam pione e terreno.nutritivo* Successivamente l'apparec, chic inoculato viene portato in posizione verticale e, dopo aver lasciato gocciolare eventuali gocce re sidue,,viene posto con il raccordo aspiratore aperto verso il basso su un recipiente misuratore calibrato vuoto, sterile., chiuso con un tappo sterile di ovatta, nel.qual caso il raccordo passa attraverso il tappo di,ovatta.
Il dispositivo completo viene incubato a 30?C po sto verticalmente in un sostegno.
Come sistema di prelievo di campione e di col. tivazione serve la forma di esecuzione del dispositi, vo secondo l?invenzione, rappresentata nella figu ra 3? nel qual caso il raccordo d.<1>efflusso ? modifica to e sussiste la possibilit? dell?attacco di un reci. piente misuratore graduato, calibrato, per la sospen sione effluente di germi in terreno nutritivo. Giornai, mente vengono controllati l?intorbidamento del terreno nutritivo liquido, il volume della sospensione di germi in terreno nutritivo, scacciata dall?apparecchio di prelievo di campioni/coltivazione, nonch? il cambiamen to della tonalit? di colore dell'indicatore.
La figura 1 mostra un risultato di esame.
Nel caso di contemporaneo accertamento di organi smi fermentanti e formanti acido in un materiale di base per limonate, prima dell?esame il materiale di base viene diluito conacqua sterile,addizionato di soluzione di indicatore sterile analogamente al modo di procedere <1 >sopra nominato, e si regola il vaio, re pH per mezzo di soluzione sterile normale di idros. sido di sodio. Gli stadi di procedimento successivi hanno luogo come sopra indicato. Nella determinazione del carico con germi, occorre tener conto del "fattore di diluizione.
La figura 2 mostra un risultato di esame? Nell?accertamento di germi conformi, il siste ma di prelievo dalla coltivazione ? riempito con uno speciale terreno nutritivo, per esempio soluzio ne di genziana-fiele-lattosio. La preparazione dei campioni nonch? l'introduzione del liquido da esami nare e la successiva incubazione dei germi hanno luo go parimenti come descritto?
Per mezzo d? un pistone o per mezzo della depres. sione nel sistema, una quantit? esattamente fissata di campione viene aspirata nell'apparecchio di prelie vo di campioni/coltivazione, per esempio 1 mi oppure 5 mi* Dopo l'incubazione e la valutazione del campio nej il risultato., con assente formazione di gas,mo stra una coliformentite r-negativa in volumi di campic) ne da 1 mi o da 5 mi.
Il dispositivo per l'accertamento di contaminai! ti ? costituito notoriamente dal recipiente 1 di eoi. tivazione con una punta 2 di vetro, rompibile tramite un anello 7 di rottura,e cannula 5? Questa cannula 3 ? conformata contemporaneamente come !raccordo di aspi, razione per il campione di liquido da esaminare e come raccordo di efflusso per la sospensione di germi in terreno nutritivo, scacciata durante la formazione di gas? Essa possiede preferibilmente un diametro <3 am

Claims (3)

  1. RIVENDICAZIONI
    1* Procedimento per l'accertamento di contaminali ti nell'industria alimentare, nel qual caso liquidi contenenti germi oppure liquidi,nei quali vengono in trodotti germi allo scopo dell'esame mediante metodi noti, vengono mescolati con una quantit? scelta di ter reno nutritivo in un apparecchio combinato di preli vo di campioni/coltivazione9il quale procedimento ? caratterizzato da ci? che la successiva coltivazione della sospensione di germi nell?ambiente nutritivo ha luogo attraverso un raccordo di efflusso, aperto verso il <">basso,dell?<1>apparecchio di prelievo di camp?oni/cojL tivazione, durante la coltivazione in caso di formazio ne di gas attraverso gli organismi in esame effluiscono quantit? misurabili equivalenti di sospensione di germi in terreno nutritivo e? in combinazione con cam bramenti di torbidezza e di colore del terreno nutr? tivo contenente indicatore,vengono ricavate contempo raneamente invalori analogici indicazioni quantitative riguardo al contenuto di germi* alla formazione di gas, all*attivit? fermentativa ed alla formazione di acido degli organismi contaminanti*
  2. 2. Procedimento secondo la rivendicazione 1, caratterizzato da ci? che in una parte separata del recipiente di coltivazione sono immessi addizionalmente uno o pi? terreni nutritivi,solidi* dopo l?introduzio ne del liquido da.esaminare ha luogo una crescita ? colonie od a prato dei germi in esame su questi terre ni nutritivi solidi e, dopo la coltivazione* vengono prelevati campioni per il controllo microscopico e*, oppure per 1?ulteriore esame nonch? per 1<8>ulteriore coltivazione di organismi.
  3. 3. Bispositivo per 1*accertamento di contaminali ti,costituito da un apparecchio combinato di prelievo campioni e di coltivazione con recipiente di coiti vazione , punta di vetro rompibile, cannula e anello di rottura nonch? terreno nutritivo liquido e eoli, do, il quale dispositivo ? caratterizzato da ci? che la cannula (3) ? conformata contemporaneamente come raccordo di aspirazione per il liquido da esaminare e come raccordo di efflusso per la sospensione di germi in terreno nutritivo, scacciata durante la for mazione di gas, possiede preferibilmente un diametro; 4L 3 sua ed ? trattenuta verticalmente tramite un ta? po sterile (13) in un recipiente misuratore graduato
    (*> -4, Dispositivo secondo la rivendicazione 3, caratterizzato da ci? chetai di fuori del recipiente (1) di coltivazione per il terreno nutritivo liqui do (5), ? sistemato un recipiente di vetro (10) per uno o pi? terreni nutritivi solidi (6), preferlbll mente sotto forma di recipiente separato accanto al vano (9) sotto vuoto o riempito di gas, ed ? munito di un fermo (11) per il terreno nutritivo solido (6)? p*p. VEB Pharmaglaswerk Heuhaus
    SOCIETA ??8.???? EDITTI s.p.A.
    INU
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    * O M *?
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