IT8448656A1

IT8448656A1 - Procedimento per preparare estere i-acetossietilico di cefurossima e prodotto ottenuto

Info

Publication number: IT8448656A1
Application number: ITRM1984A048656A
Authority: IT
Original assignee: Glaxo Group Ltd
Priority date: 1983-07-27
Filing date: 1984-07-27
Publication date: 1986-01-27
Also published as: IT1181809B; IT8448656A0; GB2144035A; GB8320251D0; GB8419413D0

Description

DOCUMENTAZIONE

RILEGATA

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DESCRIZIONE

La presente invenzione si riferisce a perfezio__ namenti in o relativi a cefalosporine. Pi? partico_ larmente, essa si riferisce a perfezionamenti nella produzione di estere 1-acetossietilico di cefurossi_ ma (cefurossima axetil).

Il composto acido (6R,7R)-3-carbammoilossimetil-7-/?(Z)-2-(fur-2-il)-2-?etossiimminoacetammidq/-cef-3-em-4-carbossilico ha il nome approvato di "cefuros_ sima". Questo composto ? un pregevole antibiotico ca_ ratterizzato da elevata attivit? di ampio spettro con_ tro microorganismi gram-positivi e gram-negativi, la quale propriet? ? esaltata dalla stabilit? molto ele_ vata del composto a p-lattamasi prodotte da un campo di microorganismi gram-negativi. Esso ? ben tollerato dall'organismo di mammiferi e viene usato ampiamente coem antibiotico nella pratica clinica. Cefurossima e suoi sali sono principalmente pregevoli come antibioti_ ci iniettabili poich? essi vengono scarsamente assorbi_ tii dal tratto gastrointestinale e sono pertanto presen_ ti in sieri ed urina soltanto in basse concentrazioni do po la somministrazione orale. Si ? sentita pertanto la necessit? di una forma di cefurossima che sia capace di venire assorbita dal tratto gastro-intestinale dopo la somministrazione orale.

E' stato trovato che una appropriata esterifica_ zione del gruppo carbossilico di cefurossima migliora la efficacia per somministrazione orale. La presenza di un tale gruppo esterificante appropriato d? come ri_ sultato notevole assorbimento del composto dal tratto gastro-intestinale per cui il gruppo esterificante viene idrolizzato da enzimi presenti per esempio in siero e tessuti corporei per fornire l'acido orginario antibio_ ticamente attivo. Per essere efficace per somministrazio ne orale, l'estere deve essere stabile abbastanza da raggiungere il sito di assorbimento senza notevole de_ gradazione, deve venire sufficientemente assorbito quan_ do ha raggiunto il sito appropriato e deve essere suf_ ficientemente sensibile ad idrolisi da esterasi sistemi_ che perch? l'acido originario venga messo in libert? entro un tempo breve dall'estere che viene assorbito. Il brevetto inglese n. 1571683 illustra e rivendica un certo numero di esteri di cefurossima aventi propriet? che li rendono di valore potenziale significativo co_ me antibiotici somministrabili per via orale.

Degli esteri descritti nel brevetto inglese n.1571683 ? stato trovato che ? particolarmente interes_ sante cefurossima axetil. Questo prodotto possiede un atomo di carbonio asimmetrico nella posizione 1 del gruppo 1-acetossietilico e pu? pertanto esistere nella forma di isomeri R ed S o miscugli di essi. I procedi_ menti per la preparazione dell'estere di cui sopra esemplificati nel brevetto inglese n. 1571683produco_ no il materiale in forma amorfa relativamente impura oppure in forma di un materiale cristallino. Inoltre/ il materiale cristallino prodotto mediante i metodi de_ scritti in questobrevetto contiene in generale una pre_ valenza di isomero R oppure S mentre inceve per la som_ ministrazione ? vantaggioso un rapporto approssimativa_ mente 1:1. Il prodotto cristallino non ? pertanto idel_ mente adatto per la somministrazione.

Si ? ora in grado di sviluppare un procedimento perrcui cefurossima axetil pu? venire ottenuto in for_ ma cristallina molto pura ed in resa elevata. Un tale prodotto ? non soltanto utile dal punto di vista di essere una forma altamente pura del composto attivo e quindi pi? adatto per la somministrazione biologica ma, pi? particolarmente, ? anche molto utile come materia_ le di partenza per la preparazione di una forma sostan_ zialmente amorfa, molto pura, di cefurossima axetil, la quale forma ? stata sorprendentemente trovato possie_ de elevata biodisponibilit? per somministrazione orale ed un migliore equilibrio di propriet? per l'impiego commerciale che il prodotto cristallino. Il cefurossima axetil amorfo che possiede queste propriet? ? desidera^ bilmente un rapporto approssimativamente 1:1 di isome_ ri R ad S, poich? ? stato trovato che questo ? prege_ vole nel rendere massima la solubilit? in ambienti acquosi del prodotto amorfo ed il procedimento che ? stato sviluppato pu? fornire cefurossima axetil cristal_ lino avente questo rapporto approssimato-' di isomeri.

Quindi, viene fornito un procedimento per la pre_ parazione di cefurossima axetil cristallino molto puro in rese elevate il quale comprende l'operazione di cri_ stallizzare cefurossima axetil da una soluzione in un sol_ vente organico oppure acquoso ori un miscuglio di essi, iso_ lare ed essiccare il prodotto.

La scelta del solvente di cristallizzazione ? sta_ ta trovata importante se la resa deve essere massima ed il rapporto di isomero R ad S del prodotto deve essere, come desiderabile,approssimativamente 1:1, per esempio nel campo 0,9:1 fino ad 1,1:1. E' stato trovato che gli j.so meri differenti di cefurossima axetil hanno differenti solubilit?, uno di essi essendo costantemente pi? so_ lubile dell'altro. I livelli di solubilit? variano a seconda del solvente e pertanto verr? scelto desidera_ bilmente un sistema solvente che permette un recupero praticamente quantitativo del cefurossima axetil che ? presente prima della cristallizzazione assicurando cos? un rapporto approssimato 1:1 di isomeri.

Il sistema solvente dal quale il prodotto pu? venire cristallizzato verr? scelto desiderabilmente fra un estere, per esempio metil oppure etilacetato,od un idrocarburo alogenato quale cloruro di metilene, facoltativamente ma preferibilmente in miscuglio con un etere, per esempio etere diisopropilico oppure un idrocarburo alifatico od aromatico, per esempio etere di petrolio oppure toluene; oppure un alcool,per esem_ pio etanolo od isopropanolo facoltativamente ma prefe_ ribilmente in miscuglio con acqua come in spirito me_ tilato industriale acquoso; oppure una ammide quale dimetilformammide oppure dimetilacetamraide, oppure un chetone quale acetone, in miscuglio con acqua.

Lo stadio di cristallizzazione verr? desiderabil_ mente effettuato a temperatura ambiente, per esempio a circa 10 fino a 30?C e la concentrazione del cefuros_ sima axetil nella soluzione dal quale la cristallizza_ zione verr? eseguita verr? generalmente regolata per esempio mediante evaporazionedel solvente oppure median_ te diluizione in modo da non essere n? troppo diluita n? troppo concentrata, rispettivamente. La cristallizza_ zione pu? comprendere l'ultimo stadio o stadi di una reazione in cui il cefurossima axetil viene formato. In un tal caso, lo stadio iniziale della cristallizza_ zione pu? avvenire ad una temperatura molto elevata, per esempio fino a circa 65?C ma per rendere massima la resina ed ottenere un rapporto adatto di isomeri nel prodotto, viene preferito per l'isolamento finale un campo di temperature da 10 a 30?.

La reazione in cui il cefurossima axetil viene formato sar? preferibilmente una reazione di esterifi_ cazione effettuata nella maniera descritta nel brevet_ to inglese n. 1.571.683 ed impiegando un materiale di partenza di sodio cefurossima molto puro. Un reagente preferito per la esterificazione ? 1-acetossietilbromuro e per produrre un rapporto approssimativamente 1:1 di isomeri R ed S prima della ricristallizzazione, si pre_ ferisce chiaramente che un tale reagente sia racemico.

Il materiale di partenza sodio cefurossima prefe_ rito sar? generalmente esso stesso molto puro. Un tale materiale pu? venire ottenuto fra 11altro mediante rea_ zione di acido (6R,7R)-3-idrossimetil-7-/Z-2-(fur-2-il)-2-metossiimminoacetammidq/cef-3-em-4-carbossilico con cloro-solfonilisocianato in un alchilacetato come solvente ad una temperatura da -25? a 10?C con suc_ cessiva idrolisi in sito ad una temperatura di 10 fino a 30?C e cristallizzazione dopo l'aggiunta di sodio 2-etilesanoato in acetone oppure metilacetato come sol_ vente. Un tale materiale avr? generalmente un livello di purezza di 90% massa/massa (m/m) oppure pi?.

Il cefurossima axetil prodotto mediante il pro_ cedimento della presente invenzione ha un rapporto in mole di isomeri R ad S approssimativamente'1:1 ed ? in generale non inferiore a 95 % m/m di purezza (non corretto per solventi residui).

Nella sua forma cristallina molto pura il cefuros sima axetil che pu? venire prodotto mediante procedi^ mento della presente invenzione ? una forma nuova di ma feriale e costituisce un altro aspetto di questa inven_ zione. Un campione di questo materiale ha lo spettro IR in Nujol mostrato nell'unica figura del disegno an_ nesso .

La presente invenzione verr? ora illustrata dai seguenti preparazione ed esempi non limitanti.

Gli isomeri R ed S singoli di cefurossima l-ace_ tossietilestere vengono denominati per convenienza con le lettere A e B, queste lettere venendo usate per in_ dicare rispettivi isomeri come nel brevetto inglese n. 1571683. Le identit? di isomeri A e B non sono state assegnate. I rapporti di isomeri dati negli esempi che seguono sono espressi come A:B. Tutte le temperature so no date in ?C.

Preparazione 1

Sodio cefurossima

Clorosolfonilisocianato (226 mi) ? stato aggiunto ad una soluzione di trietilammina (10 ml)iu metil_ acetato (3,8 litri). La soluzione limpida risultante ? stata raffreddata fino a -15? ed entro 10 minuti ? stata aggiunta una sospensione di acido (6R,7R)-3-idrossimetil-7-/?-2- (fur-2-il)-2-metossiimminoacetammi_ dq7-cef-3-em-4-carbossilico (763 g) in metilacetato (2,3 litri) preraffreddata fino a-15?. Il solido resi_ duo ? stato sciacquato con metilacetato (700 mi). Il miscuglio ? stato agitato a -5? per 30 minuti con otte_ nimento dopo 10 minuti di una soluzione limpida. Acqua (1,2 litri) a 18? ? stata aggiunta rapidamente al mi_ scuglio di reazione e la temperatura ? salita rapida_ mente fino a 10? e poi lentamente fino a 17?. Il mi_ scuglio ? stato agitato per 60 minuti a 15? per dare una sospensione bianca densa. E* stato aggiunto metil_ acetato (3,6 litri) seguito da una aggiunta costante di una soluzione di idrossido di sodio (288 g) in acqua (5,2 litri). Questo ha dato un miscuglio a due fasi lim pida a 26? con un pH di 2,35. Gli strati sono stati se_ parati e lo strato organico superiore ? stato lavato con una soluzione di cloruro di sodio (600 g) in acqua (2 litri). I due strati acquosi sono stati lavati in successione con metilacetato (2 litri). Gli strati or_ ganici sono stati riuniti, agitati con carbone di le_ gna Norit SX Plus (76 g) per 30 minuti e filtrati attra_ verso un letto di Hyflo Supercel, il letto venendo lavato con metilacetato (1,5 litri). Il filtrato e l'acqua di lavaggio sono stati riuniti ed agitati a

20? mentre veniva aggiunta entro 20 minuti una soluzio_ ne di sodio 2-etilesanoato (338 g) in un miscuglio di metilacetato (2 litri) ed acqua (40 mi) per dare una so_ spensione bianca con un pH di 5,5. La sospensione ? stata agitata per 10 minuti e filtrata ed il panello ? stato lavato con metilacetato (5 x 1 litro), essicca_ to con aspirazione ed essiccato a 30? nel vuotoper

24 ore per dare sodio cefurossima (851,9 g); /?/^? 60?, (c 0,5; tampone 0,1M pH 4,5);Amax (H2O) 273 nm

(E!% 387); impurezze mediante HPLC 2,0%. Saggio (HPLC) lem

92% m/m; contenuto in acqua (Karl Fisher) 2,8% m/m; solventi (g.l.c.) 0,5% m/m.

Esempio 1

Cefurossima axetil

(RS )-1-acetossietilbromuro (12,5 g) ? stato aggiun_ to ad un miscuglio agitato di sodio cefurossima (20 g7 (preparato mediante un metodo simile a quello nella pre_ parazione 1) in dimetilacetammide (110 mi) a 0?C. Il miscuglio ? stato agitato a 1? per 90 minuti ed ? sta_ to aggiunto carbonato di potassio (0,5 g). L'agitamento ? stato continuato per altre 2 ore a 1-3? poi il miscuglio di reazione ? stato aggiunto ad un miscuglio rapidamen_ te agitato di etilacetato (200 mi) e bicarbonato di sodio al 3 % acquoso (200 mi) per distruggere qualsia_ si eccesso di 1-acetossietil-bromuro. Dopo 1 ora lo strato organico (1/5 %) di isomero mediante HPLC) ? stato separato, lavato con acido cloridrico M (100 mi) e cloruro di sodio al 20% acquoso contenente 2% di bi_ carbonato di sodio (30 mi). Tutte e tre le fasi acquo_ se sono state lavate in successione con etilacetato (100 mi). Gli estratti organici riuniti sono stati agi_ tati per 30 minuti con carbone di legna (Norit SX Plus; 2 g), filtrati attraverso un letto di farina fossi_ le che ? era stata lavata con etilacetato (2 x 25 mi). Il filtrato e le acqua di lavaggio riuniti sono stati evaporati nel vuoto fino a 150 g ed agitati a tempera_ tura ambiente per 1 ora finch? era ben stabilita la cri_ stallizzazione . E' stato aggiunto etere di-isopropili_ co (250 mi) entro 45 minuti per completare la cristalli^ zazione e l'agitamento ? stato continuato per un'altra ora. Il prodotto ? stato raccolto mediante filtrazione, lavato con etere di-isopropilico/etilacetato 2:1 (150 mi) ed essiccato per un fine settimana nel vuoto a 50? per dare cefurossima axetil cristallino (19,3 g) con uno spettro infrarosso in Nujol come mostrato nella unica figura del disegno annesso che ? tipica di un miscuglio di isomeri cristallini.

Contenuto in solvente (GLC) 0,2% m/m. Impurez_ ze mediante HPLC 1,8% compreso isomero 0,3 % m/m; E-isomero 0,6% m/m. Rapporto di isomeri (HPLC) 1,09:1 (1% in diossano) 37?; E**m (278 mm, MeOH) 389. Saggio mediante HPLC 99% m/m (non corretto).

Esempio 2

Cefurossima axetil

Una sospensione agitata di sodio cefurossima (20 g) in dimetilacetammide (110 mi) ? stata raffred_ data fino a 15? ed ? stato aggiunto (RS)-l-acetossietilbromuro (12,5 g). L'agitamento alla precedente tem_ peratura ? stato continuato per 45 minuti ed ? stato aggiunto carbonato di potassio (0,5 g). Dopo agitamento del miscuglio per altri 45 minuti a 15? esso ? stato versato in un miscuglio rapidamente agitato di etilace_ tato (200 mi) e bicarboanto di sodio acquoso al 3 % (200 mi). Dopo 1 ora gli strati si sono separati e la fase organica (HPLC mostr? 1,6 % di A2 isomero) venne lavata con acido cloridrico 1 M (100 mi) e cloruro di sodio al 20 % acquoso contenente 2 % di bicarbonato di sodio (30 mi). Tutte le fasi acquose vennero lavate in successione con etilacetato (30 mi). Gli estratti organici riuniti vennero agitati per 30 minuti con car_ bone di legna (Norit SX Plus; 2 g), filtrati attraver_ so un letto di farina fossile che era stata lavata con etilacetato (2 x 25 mi). Dopo evaporazione del filtra_ to ed acqua di lavaggio riunita fino a 120 g, il con_ centrato venne agitato per 20 minuti per permettere che la cristallizzazione diventasse stabilita.Spirito mutilato industriale (120 mi) venne aggiunto rapidamen_ te seguito entro 15 minuti da acqua distillata (240 mi). La poltiglia risultante venne concentrata nel vuoto fino a 310 g ed agitata a temperatura ambiente per 45 minuti. Il prodotto venne raccolto ,,lavato con acqua distilla_ ta (200 mi) ed essiccato per 67 ore nel vuoto a 50 g per dare cefurossima axetil cristallino (20,01 g). Il contenuto ih solvente (GLC) 0,2 % m/m; impurezze

(HPLC) 1,5 % m/m compreso ?2 isomero 0,5% m/m ed

E-isomero 0,6% m/m; rapporto di isomeri 1,01:1;

/?</D (1* in diossano) 40?; E-^ (278 nm, metanolo)

lem

388; saggio mediante HPLC 98% m/m (non corretto).

Esempio 3

Cefurossima axetil

Sodio cefurossima (20 g) venne agitato con dime_ tilacetammide (100 mi) a circa 25? per 15 minuti, il miscuglio venne raffreddato fino a 15? e venne aggiun_ to (RS)-1-acetossietilbromuro (9,8 mi). Il miscuglio venne agitato per altri 90 minuti a 14-16? aggiungen_ do carbonato di potassio da 60 mesh (0,5 g) in un pun_ to medio di questo periodo. Il miscuglio bruno-rosso venne poi diluito con etilacetato (200 mi) ed idroge_ no-carbonato di sodio acquoso al 3% (200 mi) ed agi_ tato per 1 ora a temperatura ambiente (circa 25?).

Gli strati vennero poi separati e lo strato acquoso venne riestratto con etilacetato (200 mi) e scartato ( a , 0,21?/dm). Le soluzioni organiche vennero lavate in successione con acido cloridrico 1 M (100 mi), poi con cloruro di sodio al 20 % (30 mi) contenente idroge_ no-carbonato di sodio al 2% e vennero poi riunite e trat tate con carbone Norit SX Plus(2 g) per 25 minuti. Il carbone venne filtrato via attraverso un tampone di Standard Supercel, il filtro venne lavato con etilace_ tato (50 mi) ed i filtrati combinati vennero evaporati nel vuoto fino a 120 g. La soluzione residuaivenne semi_ nata, agitata a 22? per 1 ora dopo di che toluene (250 mi) venne fatto scorrere nella poltiglia agitata per 30 minuti e il miscuglio venne agitato per altri 30 minuti. La sospensione venne poi rievaporata nel vuo_ to fino a 182 g, raffreddata fino a circa 25? ed agita_ ta per 30 minuti. Il prodotto venne raccolto, lavato con toluene (100 mi), essiccato mediante aspirazione per 15 minuti e poi essiccato nel vuoto a 45? durante la notte per dare cefurossima axetil cristallino (19,8 g). Solventi mediante GLC, 0,fl% (EtAc 0,7%; toluene 0,15%); impurezze mediante HPLC, 0,9% saggio HPLC 100%, rappor_ to di isomeri 1,03:1 <0,1% m/m. Acqua (mediante Karl Fisher) 0,4 % m/m.

Esempio 4

Cefurossima axetil

La soluzione in etilacetato (circa 125 g) lava_ ta ed evaporata di cefurossima axetil ottenuto da una reazione simile a quella descritta nell'esempio 1 ven_ ne agitata a temperatura ambiente finch? si era ben stabilita la cristallizzazione. (Jtere di petrolio leggero (punto di ebollizione 100-120?; 188 mi) venne ag giunta a gocce durante 1 ora dopo di che la sospensio_ ne venne agitata a temperatura ambiente per altre due ore. Il precipitato cristallino venne raccolto median_ te filtrazione, lavato a spostamento con miscuglio di etere di petrolio leggero (punto di ebollizione 100-120?)-etilacetato 2:1 (75 mi) ed essiccato durante la notte a 40? neivuoto per dare il composto del titolo (19,2 g). Acqua (Karl Fisher) 0,4% m/m, solventi (glc) 0,4% m/m. Saggio mediante HPLC 100 % ra/m. Impurezze mediante HPLC 1,1% m/m (di cui 0,1 % e 0,6 % m/m era_ no A2 ed antiisomero rispettivamente); il rapporto di isomeri era 0,98:1.

Esempio 5

Cefurossima axetil

Una soluzione lavata e concentrata (circa 125 g) Hel richiesto cef?rossima axetil in etilacetato come pre_ prato nell'esempio 1 venne agitata per 1 ora a 33? fin_ ch? si era ben stabilita la cristallizzazione. Dopo immagazzinamento della sospensione durante la notte a temperatura ambiente, venne aggiunto IMS (62,5 mi) entro 5 minuti cona gitamento seguito, entro la succes_ siva ora, da etere di petrolio leggero (punto di ebol_ lizione 100-120?); 250 mi. Dopo agitamento della sospen_ sione cristallina per altre 1,5 ore essa venne raccolta, con

lavata a spostamento/miscuglio etere di petrolio legge_ ro (punto ebollizione 100-120?)-etilacetato 2:1 (75 mi) ed essiccate durante la notte nel vuoto a 45? per dare il composto del titolo,19,2 g. Acqua (Karl Fisher) 0,2% m/m; solventi glc 0,8 m/m. Impurezze mediante HPLC 0,8% m/m (di cui 0,1% m/m e 0,7 m/m erano ed antiisomeri rispettivamente; il rapporto di isomeri era 1,05:1. Saggio mediante HPLC 96% m/m.

Esempio 6

Cef?rossima axetil

Un concentrato lavato e trattato con carbone (cir_ ca 100 g) di cef?rossima axetil in etilacetato, conte_

2

nente circa 2 % di ? isomero ottenuto in maniera si_ mile a quella dell'esempiojljvenne seminato ed agitato per 30 minuti finch? la cristallizzazione era ben sta_ bilita. Venne aggiunta a gocce isopropanolo (100 mi) entro 30 minuti seguito per 50 minuti da acqua distil_ lata (170 mi). La poltiglia risultante venne conceri_ trata nel vuoto fino a 250 g e raffreddata fino a 12? entro un periodo di 1 ora. Il prodotto cristallino venne raccolto mediante filtrazione, lavato a sposta_ mento con soluzione ghiacciapi isopropanolo al 20% in acqua distillata (100 mi) ed essiccato per fine settima na nel vuoto a 40?. Il composto del titolo ammont? a 20,1 g. Acqua (Karl Fisher) 0,4 % m/m, solventi (glc) 0,03 % m/ra. Impurezze mediante HPLC 1,5 % (di cui 0,4 % m/m e circa 0,6% m/m erano ?? ed antiisomeri rispettiva mente); rapporto di isomeri 1,05:1.

RIVENDICAZIONI

1. Procedimento per la preparazione di estere 1-acetossietilico dicefurossima cristallino molto puro il quale comprende l'operazione di cristallizzare cefurossima 1-acetossietilestere da una sua soluzione in un solvente organico oppure acquoso od: un raiscu_ glio di essi, isolare ed essiccare il prodotto.

2. Procedimento secondo la rivendicazione 1, in cui il cefurossima 1-acetossietilestere cristallizza in un rapporto di isomeri R ad S approssimativamente di 1:1.

3. Procedimento secondo la rivendicazione 1, op_ pure la rivendicazione 2 in cui il solvente compren_ de un estere.

4. Procedimento, secondo la rivendicazione 3, in cui il solvente comprende un estere od idrocarburo alo_ genato facoltativamente in miscuglio con un etere op_ pure un idrocarburo alifatico od aromatico; oppure un chetone od ammide in miscuglio con acqua.

5. Procedimento secondo la rivendicazione 1 op_ pure la rivendicazione 2, in cui il solvente comprende un alcool in miscuglio con acqua.

6. Procedimento secondo la rivendicazione 4, in cui il solvente ? scelto fra metil od etilacetato, fa_ coltativamente in miscuglio con etere diisopropilico, etere di petrolio oppure toluene.

7. Procedimento come rivendicato in qualsiasi delle rivendicazioni precedenti, in cui almeno una par_ te posteriore dello stadio di cristallizzazione vie_ ne effettuata a 10 fino a 30?C.

8. Procedimento sostanzialmente come qui in pre_ cedenza descritto con riferimento agli esempi.

9.Cefurossima 1-acetossietilestere cristallino avente un livello di purezza di almeno 95% massa/massa.

10. Cefurossima 1-acetossietilestere cristalli_ no avente lo spettro IR in Nujol come mostrato nel di_ segno annesso.

p.p. GLAXO GROUP\LIMITED

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h & 6se UFFICIO BREVETTI

25 SOUTHAMPTON BUILDINGS,

LONDON

Io sottoscritto, essendo un funzionario debitamente autorizzato secondo la Sezione 62(3) della Legge sui Brev?tti e Modelli l907r per firmare e rilasciare certificati;d?.;parte del:Controllore Generale, con dio -certifico che Annessa -alla presente ? una copiartiedel.e-dei documenti cose originariaaente depositati in relazione alla domanda di brevetto qui identificata:.

Second? le regole 1952 sui Brevetti (Re-registrazione di Societ?) se una societ? nominata in

questo certificato e in documenti annessi qualsiasi ? stata ri?registrata sotto la legge delle Societ?

i960 con il medesimo nome con il quale ? stata registrata immediatamente prima della,ri-registrazione, salvo per la sostituzione o la inclusione, come ultima,parte del nome, delle .parole Mpublic limited company" o loro equivalenti in gallese, i riferimenti al nome della societ? nel presente certificato

e in documenti annessi qualsiasi saranno trattati

come riferimenti al nome con il quale essa ? ?tata

ri -registrata.

Conformemente alle regole., le parole "public limited company" possono venire sostituite da p.l.c., pie, P.L.C. oppure PLC.

La riregistrazione s?tto la clausola delle Cornea gnie con costituisce una nuova entit? legale ma assoggetta semplicemente la Compagnia ad alcune ulteriori norme di legge della Compagnia.

Testimonio di mio pugno questo 14? giorno di Agosto 1984

Russell

*

29 Luglio 1983 LEGGE SUI BREVETTI, 1977

1983

Formulario dei brevetti n? 1/77 20521

6 , 16 , 19)

Il verificatore

Ufficio 'Brevetti

25 Southaimpton? B?ildings

London WC2A LAY

RICHIESTA; 'PER VI-II^VR?IASC IO/DI? f UN , BREVETTO

11 rilascio div;un viene dal sotto

scritto rin baser ai;! a; present e domanda

I Riferimento del richiedente o

dell ' agente (inserire se disponibile) 60. X. 141-280

II Titolo dell 'invenzione

"Procedimento chimico"

Richiederite(i) (vedasi nota 2)

Nome (primo -o solo Richiedente) GLAXO GROUP LIMITEDL,

Indirizzo: Clarges House, 6-12 Clarges Street, London, W1Y 8DH.

Nazionalit? Regno Unito

Nome (del secondo Richiedente, se pi? di uno)

Indirizzo

Nazionalit?

IV- Inventore (vedasi nota 5)

(b) una affermazione ? fornita sul formulario per

brevetti n? 7/77

V Autorizzazione di agente (vedasi nota 4)

Frank B. Dehn & Co.,

VX Indirizzo di servizio (vedasi nota 3)

? ?'. ,?

Imperiai House, 15-19 Kingsway,

*' London, WC2B 6UZ.

\iXX Dichiarazione di priorit? (vedasi nota 6)

Paese data di deposito n? di deposito

???? La domanda rivendica una data precedente in base

alla sezione 8(3), 12(6), 15^ ) oppure 37(4")

(vedasi nota 7)

n? di domanda:o di brevetto * e data di

precedente deposito

,IX .Lista di controllo (da riempire da parte del Richiedente o dell'agente)

A. La comanda contiene il seguente La domanda come deP??ita ? accompagnata da:

n? di foglio(i):

1 Richiesta 1 foglio 1 Documento priorit?

2 descrizione lo " 2 traduzione documento di priorit?

3-rivendicazione " 3 Richiesta di ricerca 4 disegno " 1 " 4 Indicazione di inventore e diritto di applicarla

5 Est..ra.tto.- - " 5 Aduitorizzazione separata

X Si suggerisce che la figura n? dei disegni (se vi sonc accompagni l'estratto quando pubblicato.

'.? ???'

XI Firma (vedasi nota 8)

Per Frank B. Dehn & Co., Agenti per il Richiedente .

F.to (illeggibile)

Firmatario autorizzato

NOTE

1. Questo formulario, quando completato, dovrebbe venire portato od inviato all'Ufficio Brevetti insieme con la tassa prescritta e due copie della descrizione della invenzione.

2. Il 'nome, l'indirizzo e la nazionalit? di'ci?scun Ri_ chiedente debbono verire indicati negli spazi fom iti

in III. Nomi di persone naturali devono venire indi_

cati interamente. Societ? debbono venire designate

dalla .loro ragione sociale. Se vi sono,pi? di due Richiedenti?, i'.informazione.conc?m ente i'1 .K?rr?o;;(ed ? ulteriori); Richiedente deve venire data su un foglio separato. .. . .. '

5. Quando il richiedente od i Richiedenti ?/sono 1'unico invent?re, o.gli?inventori congiunti, la dichiarazione ?

^r(a) a tale effetto,in IY deve venire completata e la

*

indicazione alternativa (b) deve venire cancellata, .

? ? ? ? ? ?? ?? ?

Se tuttavia ci? non si verifica la dichiarazione "(a)

deve venire cancellata e allora sar? richiesto di d? -p? sitare.una indicazione sul formulario per brevetti'

n.? 7/77-

4. Se II richiedente desidera incaricare un agente, il

suo nome e l'indirizzo'della sua sede di affari dehv

bono venire.indicati negli spazi disponibili in V,p VI; tale indicazione verr??,considerata essere un?autorizza_ zione per V agente a far-prosegujre la domanda fino al

' ? ** ? * ? - ??' rilasci? di un brevetto ed a provvedere pei? qualsiasi brevetto cos? rilasciato.

5- Se non viene incaricato alcun agente autorizzato, de_ ? ve venire indicato in VI un indirizzo di s?rvizio nel Regno Unito, al quale possono venire inviati tutti i documenti e comunicati. Si raccomanda che venga forni

to un numero telefonico, se disponibile.

6. La dichiarazione di priorit? in VII deve indicare la data dal deposito precedente ed il paese in cui esso ? stato fatto, ed indicare il numero di deposito, se disponibile.

7* Quando viene eseguito un deposito in virt? della Se_ z?one 8(3),12(6), 15(4) oppure 37(4), l?appropriata sezione deve venire identificata in Vili e deve veni^ re identificato il numero della domanda antecedente o di qualsiasi brevetto rilasciato per essa.

8. Un agente pu? firmare solo se precedentemente autoriz zato. Un'autorizzazione espressa, firmata dal Richi denteii) deve venire ricevuta dall'Ufficio Brevetti prima dello scadere di tre mesi dalla data del depa_ sito.

9* Viene richiamata l?attenzione dei Richiedenti sulla opportunit? di evitare una pubblicazione delle inven^ zioni riguardanti qualsiasi articolo, materiale o di^ spositivo destinato od atto all?impiego in guerra (leggi dei segreti ufficiali, 1911, e 1920). Inoltre, dopo che all'Ufficio Brevetti ? stata depositata una domanda d? brevetto, il verificatore considerer? se una pubblicazione o comunicazione dell'invenzione de_ ve venire proibita o limitata in base alla sezione 22 della Legge ed informer? il Richiedente se ? neces, saria una tale proibizione.

10. Ai Richiedenti residenti n?l Regno Unito s? ricorda inoltre che, in base alle disposizioni della sezione 23, non possono venire depositate domande all'estero senza un permesso scritto od a meno Ohe una domanda sia stata depositata non meno di 6 settimane prima nel Regno Unito per un brevetto della medesima inven^ sione e non sia stata data alcuna istruzione che proi__ bisca la pubblicazione o la comunicazione, o sia stata ricevuta una qualsiasi istruzione del genere.

t? PfjX&zti iril?*) /t> cJn *yP_ CD

-BESCRIZIONE-

La presente invenzione si riferisce a perfezio_ namenti in o relativi a cefalosporine. Pi? partico_ larmente, essa si riferisce a perfezionamenti nella produzione di estere 1-acetossietilico di cefurossi_ ma (cefurossima axetil).

Il composto acido (6R,7R)-3-carbammoilossiinetil-7-/*(Z)-2-(fur-2-il)-2-Tnetossiimminoacetammido./-cef-3-em-4-carbossilico ha il nome approvato di "cefuros_ sima1'. Questo composto ? un pregevole antibiotico ca_ ratterizzato da elevata attivit? di ampio spettro con_ tro microorganismi gram-positivi e gram-negativi, la quale propriet? ? esaltata dalla stabilit? molto ele_ vata del composto a p-lattamasi prodotte da un campo di microorganismi gram-negativi. Esso ? ben tollerato dall'organismo di mammiferi e viene usato ampiamente coem antibiotico nella pratica clinica. Cefurossima e suoi sali sono principalmente pregevoli come antibioti_ ci iniettabili poich? essi vengono scarsamente assorbi_ tii dal tratto gastrointestinale e sono pertanto presen_ ti in sieri ed urina soltanto in basse concentrazioni do po la somministrazione orale. Si ? sentita pertanto la necessit? di una forma di cefurossima che sia capace di venire assorbita dal tratto gastro-intestinale dopo la somministrazione orale

/????

-B-!? sta-to trovato che una appropriata esterifica_ zione del gruppo carbossilico di cefurossima migliora la efficacia per somministrazione orale. La presenza di un tale gruppo esterificante appropriato d? come ri_ sultato notevole assorbimento del composto dal tratto gastro-intestinale per cui il gruppo esterificante viene idrolizzato da enzimi presenti per esempio in siero e tessuti corporei per fornire l'acido orginario antibio_ ticamente attivo. Per essere efficace per somministrazio ne orale, l'estere deve essere stabile abbastanza da raggiungere il sito di assorbimento senza notevole de__ gradazione, deve venire sufficientemente assorbito quan_ do ha raggiunto il sito appropriato e deve essere suf_ ficientemente sensibile ad idrolisi da esterasi sistemi^ che perch? l'acido originario venga messo in libert? entro un tempo breve dall'estere che viene assorbito. La. zj/' f

?/brevetto inglese n. 1571683 illustra e rivendica un certo numero di esteri di cefurossima aventi propriet? che li rendono di valore potenziale significativo co_ me antibiotici somministrabili per via orale.

! /nSfa. ,

Degli esteri descrittiV?el brevetto inglese n. 1571683 e-state trovato che ? particolarmente interes_ sante cefurossima axetil. Questo prodotto possiede un atomo di carbonio asimmetrico nella posizione 1 del gruppo 1-acetossietilico e pu? pertanto esistere nella forma di isomeri R ed S o miscugli di essi. I procedi_ menti per la preparazione dell'estere di cui sopra esemplificatiVEfel brevetto inglese n. 1571683produco_ no il materiale in forma amorfa relativamente impura h/u nvrooppure in forma di un materiale cristallino,'Inol-tro-y i-1 materiale oristallino prodotto mediante-i-metod-i^?e^_ scritti in questobrevetto contiene in generale una pre_ valenza di isomero R oppure S mentre inceve per la som_ ministrazione ? vantaggioso un rapporto approssimativa_ mente 1:1,?ri prodotto cristallino non ? pertanto.idel_ arante adatto por la somministrazione*?

S/?rno

Si & ora in grado di sviluppare un procedimento perrcui cefurossima axetil pu? venire ottenuto in for_ ma cristallina molto pura ed in resa elevata. Un tale prodotto ? non soltanto utile dal punto di vista di essere una forma altamente pura del composto attivo e quindiXpi? adatto per la somministrazione biologica ma, pi?.particolarmente, ? anche molto utile come materia_ le di partenza per la preparazione di una forma sostan_ zialmente amorfa, molto pura, di cefurossima axetil, la <obbit)/n<D

quale forma ? stata sorprendentemente trovato possie_ de elevata biodisponibilit? per somministrazione orale ed un migliore equilibrio di propriet? per l'impiego commerciale che il prodotto cristallino. Il cefurossima axetil amorfo che possiede queste propriet? ? desidera_ bilmente un rapporto approssimativamente 1:1 di isome_ ri R ad S, poich? ? stato trovato che questo ? prege_ vole nel rendere massima la solubilit? in ambienti acquosi del prodotto amorfo ed il procedimento che-?stato sviluppato pu? fornire cefurossima axetil cristal_ lino avente questo rapporto approssimater di isomeri.

Lormamo

Quindi, v-ia?na for-arto?un procedimento per la pre_ parazione di cefurossima axetil cristallino molto puro in rese elevate il quale comprende l'opera-zione?d-i-cr-i-_ ot-alliggaro cefurossima axetil da una soluzione in un sol_ vente organico oppure acquoso od un miscuglio di essi^ iso_ lare ed essiccare il prodotto.

La scelta del solvente di cristallizzazione ? sta_ ta trovata importante se la resa deve essere massima ed il rapporto di isomero R ad S del prodotto deve essere, come desiderabile,approssimativamente 1:1,?per esempiof? ii/amc? /

nel campo 0,9il fino ad 1,1?li B1? stato trovato che gli j.so meri differenti di cefurossima axetil hanno differenti solubilit?, uno di essi essendo costantemente pi? so_ lubile dell'altro. I livelli di solubilit? variano a seconda del solvente e pertanto verr? scelto desidera_ bilmente un sistema solvente che permette un recupero praticamente quantitativo del cefurossima axetil che ? presente prima della cristallizzazione assicurando cos? un rapporto approssimato 1:1 di isomeri.

Il sistema solvente dal quale il prodotto pu? venire cristallizzato verr? scelto desiderabilmente fra un estere, per esempio metil oppure etilacetato,-?^-un id-rooarbu-ro alegcnato quale cloruro di motil-eno/ facoltativamente ma preferibilmente in miscuglio con un etere, per esempio etere diisopropilico oppure un idrocarburo alifatico od aromatico, per esempio etere di petrolio oppure toluene; oppure un alcool,per esem_ pio etanolo od isopropanolo facoltativamente ma prefe_ ribilmente in miscuglio con acqua come in spirito me_ tilato industriale acquoso# oppure una ammide qua-le dimetilf ormammide -eppure-dimetilacetanunide-;?oppure?un -e-hetono quale acetone, -in miscuglio oon acqua-.-Lo stadio di cristallizzazione verr? desiderabil_ mente effettuato a temperatura ambiente, per esempio a circa 10 fino a 30?C e la concentrazione del cefuros_ sima axetil nella soluzione dal quale la cristallizza_ zione verr? eseguita verr? generalmente regolata per esempio mediante evaporazionedel solvente oppure median_ te diluizione in modo da non essere n? troppo diluita n? troppo concentrata, rispettivamente. La cristallizza_ zione pu? comprendere l'ultimo stadio o stadi di una reazione in cui il cefurossima axetil viene formato. In un tal caso, lo stadio iniziale della cristallizza^ zione pu? avvenire ad una temperatura molto elevata, per esempio fino a circa 65?C ma per rendere massima la resina ed ottenere un rapporto adatto di isomeri nel prodotto, viene preferito per l'isolamento finale un campo di temperature da 10 a 30?.

La reazione in cui il cefurossima axetil viene formato sar? preferibilmente una reazione di esterifi_ cazione effettuata nella maniera descri115?jie1 Brevet_ to inglese n. 1.571.683 ed impiegando un materiale di partenza di sodio cefurossima molto puro. Un reagente preferito per la esterificazione ? 1-acetossietilbromuro e per produrre un rapporto approssimativamente 1:1 di isomeri R ed S prima della ricristallizzazione, si pre_ ferisce chiaramente che un tale reagente sia racemico.

Il materiale di partenza sodio cefurossima prefe_ rito sar? generalmente esso stesso molto puro. Un tale materiale pu? venire ottenuto fra l'altro mediante rea_ zione di acido (6R,7R)-3-idrossimetil-7-/?-2-(fur-2-il)-2-metossiimminoacetammidq/cef-3-em-4-carbossilico con cloro-solionilisocianato in un alchilacetato come solvente ad una temperatura da -25? a 10?C con suc_ cessiva idrolisi in sito ad una temperatura di 10 fino a 30?C e cristallizzazione dopo l'aggiunta di sodio 2-etilesanoato in acetone oppure metilacetato come sol_ vente. Un tale materiale avr? generalmente un livello di purezza di 90% massa/massa (m/m) oppure pi?.

Nella sua forma cristallina molto pura il cefuros sima axetil che pu? venire prodotto mediante procedi_ mento della presente invenzione ? una forma nuova di ma teriale e costituisce un altro aspetto di questa inven_ zione. Un campione di questo materiale ha lo spettro IR in Nujol mostrato nellAuniea figura i del* ' disegni an_ /

riessa.

La presente??invenzione verr? ora illustrata dai seguenti preparazione ed esempi non limitanti.

Gli isomeri R ed S singoli di cefurossima l-ace_ tossietiiestere vengono denominati per convenienza con le lettere A e B, queste lettere venendo usate per in_ dicare rispettivi isomeri come nel brevetto inglese n. 1571683. Le identit? di isomeri A e B non sono state assegnate. I rapporti di isomeri dati negli esempi che seguono sono espressi come A:B. Tutte le temperature so no date in ?C.

Preparazione 1

Sodio cefurossima

Clorosolfonilisocianato (226 mi) ? stato aggiunto ad una soluzione di trietilammina (10 mi)ir?metil acetato (3,8 litri). La soluzione limpida risultante ? stata raffreddata fino a -15? ed entro 10 minuti ? stata aggiunta una sospensione di acido (6R,7R)-3-idrossimetil-7-/?-2- (fur-2-il)-2-metossiimminoacetammi_ dq7-cef-3-em-4-carbossilico (763 g) in metilacetato (2,3 litri) preraffreddata fino a-15?. Il solido resi_ duo ? stato sciacquato con metilacetato (700 mi). Il miscuglio ? stato agitato a -5? per 30 minuti con otte_ nimento dopo 10 minuti di una soluzione limpida. Acqua (1,2 litri) a 18? ? stata aggiunta rapidamente al mi_ scuglio di reazione e la temperatura ? salita rapida_ mente fino a 10? e poi lentamente fino a 17?. Il mi_ scuglio ? stato agitato per 60 minuti a 15? per dare una sospensione bianca densa. E' stato aggiunto metil_ acetato (3,6 litri) seguito da una aggiunta costante di una soluzione di idrossido di sodio (288 g) in acqua (5,2 litri). Questo ha dato un miscuglio a due fasi lim pido a 26? con un pH di 2,35. Gli strati sono stati se_ parati e lo strato organico superiore ? stato lavato con una soluzione di cloruro di sodio (600 g) in acqua (2 litri). I due strati acquosi sono stati lavati in successione con metilacetato (2 litri). Gli strati or_ ganici sono stati riuniti, agitati con carbone di le_ gna Norit SX Plus (76 g) per 30 minuti e filtrati attra_ verso un letto di Hyflo Supercel, il letto venendo lavato con metilacetato (1,5 litri). Il filtrato e l'acqua di lavaggio sono stati riuniti ed agitati a

24 ore per dare sodio cefurossima (851,9 g); /?/20 60?, (c 0,5; tampone 0,1M pH 4,5);Xmax (H2O) 273 nra

(E!% 387); impurezze mediante HPLC 2,0%. Saggio (HPLC) lem

92% m/m; contenuto in acqua (Karl Fisher) 2,8% ra/m; solventi (g.l.c.) 0,5% m/m.

Esempio 1

Cefurossima axetil

(RS)-1-acetossietilbromuro (12,5 g) ? stato aggiun_ to ad un miscuglio agitato di sodio cefurossima (20 g) (preparato mediante un metodo simile a quello nella pre_ parazione 1) in dimetilacetammide (110 mi) a O?C. Il miscuglio ? stato agitato a 1? per 90 minuti ed ? sta_ to aggiunto carbonato di potassio (0,5 g). L'agitamento ? stato continuato per altre 2 ore a 1-3? poi il miscuglio di reazione ? stato aggiunto ad un miscuglio rapidamen_ te agitato di etilacetato (200 mi) e bicarbonato di sodio al 3 % acquoso (200 mi) per distruggere qualsia_ si eccesso di 1-acetossietil-bromuro. Dopo 1 ora lo strato organico (1/5 %) di isomero mediante HPLC) ? stato separato, lavato con acido cloridrico M (100 mi) e cloruro di sodio al 20% acquoso contenente 2% di bi_ carbonato di sodio (30 mi). Tutte e tre le fasi acquo_ se sono state lavate in successione con etilacetato (100 mi). Gli estratti organici riuniti sono stati agi_ tati per 30 minuti con carbone di legna (Norit SX Plus; 2 g), filtrati attraverso un letto di farina fossi_ le che ? era stata lavata con etilacetato (2 x 25 mi). Il filtrato e le acqua di lavaggio riuniti sono stati evaporati nel vuoto fino a 150 g ed agitati a tempera^ tura ambiente per 1 ora finch? era ben stabilita la cri_ stallizzazione. E' stato aggiunto etere di-isopropili_ co (250 mi) entro 45 minuti per completare la cristalli^ zazione e l'agitamento ? stato continuato per un'altra ora. Il prodotto ? stato raccolto mediante filtrazione, lavato con etere di-isopropilico./etilacetato 2:1 (150 mi) ed essiccato per un fine settimana nel vuoto a 50? per dare cefurossima axetil cristallino (19,3 g) con uno spettro infrarosso in Nujol come mostrato nella

i" , '

unica figura1'del disegno annesso che ? tipica di un miscuglio di isomeri cristallini.

-li?

Contenuto in solvente (GLC) 0,2% m/m. Impurez_ ze mediante HPLC 1,8% compreso isomero 0,3 % m/m; E-isomero 0,6% m/m. Rapporto di isomeri (HPLC) 1,09:1 ftjD <1% in diossano) 37?; EJJ (278 mm, MeOH) 389. Saggio mediante HPLC 99% m/m (non corretto).

Esempio 2

Cefurossima axetil

Una sospensione agitata di sodio cefurossima (20 g) in dimetilacetammide (110 mi) ? stata raffred_ data fino a 15? ed ? stato aggiunto (RS)-l-acetossietilbromuro (12,5 g). L'agitamento alla precedente tem_ peratura ? stato continuato per 45 minuti ed ? stato aggiunto carbonato di potassio (0,5 g). Dopo agitamento del miscuglio per altri 45 minuti a 15? esso ? stato versato in un miscuglio rapidamente agitato di etilace_ tato (200 mi) e bicarboanto di sodio acquoso al 3 % (200 mi). Dopo 1 ora gli strati si sono separati e la fase organica (HPLC mostr? 1,6 % di ?2 isomero) venne lavata con acido cloridrico 1 M (100 mi) e cloruro di sodio al 20 % acquoso contenente 2 % di bicarbonato di sodio (30 mi). Tutte le fasi acquose vennero lavate in successione con etilacetato (30 mi). Gli estratti organici riuniti vennero agitati per 30 minuti con car_ bone di legna (Norit SX Plus; 2 g), filtrati attraver_ so un letto di farina fossile che era stata lavata con etilacetato (2 x 25 mi). Dopo evaporazione del filtra to ed acqua di lavaggio riunita fino a 120 g, il con centrato venne agitato per 20 minuti per permettere che la cristallizzazione diventasse stabilita.Spirito metilato industriale (120 mi) venne aggiunto rapidamen_ te seguito entro 15 minuti da acqua distillata (240 mi). La poltiglia risultante venne concentrata nel vuoto fino a 310 g ed agitata a temperatura ambiente per 45 minuti. Il prodotto venne raccolto , lavato con acqua distilla__ ta (200 mi) ed essiccato per 67 ore nel vuoto a 50 g per dare cefurossima axetil cristallino (20,01 g). Il contenuto ih solvente (GLC) 0,2 % m/m; impurezze

(HPLC ) 1,5 % m/m compreso isomero 0,5% m/m ed

E-isomero 0,6% m/m; rapporto di isomeri 1,01:1;

/k/n (1% in diossano) 40?; E^ (278 nm, metanolo)

lem

388; 'saggio mediante HPLC 98% m/m (non corretto).

Esempio 3

Cefurossima axetil

Sodio cefurossima (20 g) venne agitato con dime_ tilacetammide (100 mi) a oiroa-25? per 15 minuti, il miscuglio venne raffreddato fino a 2.5? e venne aggiun_ to (RS)-1-acetossietilbromuro (9,8 mi). Il miscuglio venne agitato per altri 90 minuti a 14-16? aggiungen_ do carbonato di potassio da 60 mesh (0,5 g) in un pun_ to medio di questo periodo. Il miscuglio bruno-rosso venne poi diluito con etilacetato (200 mi) ed idroge_ no-carbonato di sodio acquoso al 3% (200 mi) ed agi_ tato per 1 ora a temperatura ambiente (circa 25?).

Gli strati vennero poi separati e lo strato acquoso venne riestratto con etilacetato (200 mi) e scartato ( ??, 0,21?/dm). Le soluzioni organiche vennero lavate in successione con acido cloridrico 1 M (100 mi), poi con cloruro di sodio al 20 % (30 mi) contenente idroge_ no-carbonato di sodio al 2% e vennero poi riunite e trat tate con carbone Norit SX Plus(2 g) per 25 minuti. Il carbone venne filtrato via attraverso un tampone di Standard Supercel, il filtro venne lavato con etilace_ tato (50 mi) ed i filtrati combinati vennero evaporati nel vuoto fino a 120 g. La soluzione residue,venne semi_ nata, agitata a 22? per 1 ora dopo di che toluene (250 mi) venne fatto scorrere nella poltiglia agitata per 30 minuti e il miscuglio venne agitato per altri 30 minuti. La sospensione venne poi rievaporata nel vuo_ to fino a 182 g, raffreddata fino a circa 25? ed agita_ ta per 30 minuti. Il prodotto venne raccolto, lavato con toluene (100 mi), essiccato mediante aspirazione per 15 minuti e poi essiccato nel vuoto a 45? durante la notte per dare cefurossima axetil cristallino (19,8 g). Solventi mediante GLC, 0,t?% (EtAc 0,7%; toluene 0,15%); impurezze mediante HPLC, 0,9% saggio HPLC 100%, rappor_ to di isomeri 1,03:1 A2 <0,1% m/m. Acqua (mediante Karl Fisher) 0,4 % m/m.

Esempio 4

Cefurossima axetil

La soluzione in etilacetato (circa 125 g) lava_ ta ed evaporata di cefurossima axetil ottenuto da una reazione simile a quella descritta nell'esempio 1 ven__ ne agitata a temperatura ambiente finch? si era ben stabilita la cristallizzazione. gtere di petrolio leggero (punto di ebollizione 100-120?; 188 mi) venne ag giunta a gocce durante 1 ora dopo di che la sospensio_ ne venne agitata a temperatura ambiente per altre due ore. Il precipitato cristallino venne raccolto median_ te filtrazione, lavato a spostamento con miscuglio di etere di petrolio leggero (punto di ebollizione 100-120?)-etilacetato 2:1 (75 mi) ed essiccato durante la notte a 40? neivuoto per dare il composto del titolo (19,2 g). Acqua (Karl Fisher) 0,4% m/m, solventi (glc) 0,4% m/m. Saggio mediante HPLC 100 % m/m. Impurezze mediante HPLC 1,1% m/m (di cui 0,1 % e 0,6 % m/iriera_ no ?2 ed antiisomero rispettivamente); il rapporto di isomeri era 0,98:1.

Esempio 5

Cefurossima axetil

Una soluzione lavata e concentrata (circa 125 g) -la?

V

? ^el richiesto cefUrossima axetil in etilacetato come pre_ prato nell'esempio 1 venne agitata per 1 ora a 33? fin__ ch? si era ben stabilita la cristallizzazione. Dopo immagazzinamento della sospensione durante la notte a temperatura ambiente, venne aggiunto IMS (62,5 mi) entro 5 minuti cona gitamento seguito, entro la succes_ siva ora, da etere di petrolio leggero (punto di ebol_ lizione 100-120?); 250 mi. Dopo agitamento della sospen_ sione cristallina per altre 1,5 ore essa venne raccolta, con

lavata a spostamento/miscuglio etere di petrolio legge_ ro (punto ebollizione 100-120?)-etilacetato 2:1 (75 mi) ed essiccate durante la notte nel vuoto a 45? per dare il composto del titolo,19,2 g. Acqua (Karl Fisher) 0,2% m/m; solventi glc 0,8 m/m. Impurezze mediante HPLC 0,8% m/m (di cui 0,1% m/m e 0,7 m/m erano ?2 e<? antiisomeri rispettivamente; il rapporto di isomeri era 1,05:1. Saggio mediante HPLC 96% m/m.

Esempio 6

Cefurossima axetil

Un concentrato lavato e trattato con carbone (cir_ ; aeiJoijn eJ?'J?t? ' j

ca 100 g) diVcefurossima axet-ii in etilacetato, conte_ nente circa 2 % di ? isomero ottenuto in maniera si_ mile a quella dell'esempicjljvenne seminato ed agitato per 30 minuti finch? la cristallizzazione era ben sta bilit?. Venne aggiunta a gocce isopropanolo (100 mi)

Claims

entro 30 minuti seguito per 50 minuti da acqua distil

lata (170 mi). La poltiglia risultante venne conceri_

trata nel vuoto fino a 250 g e raffreddata fino a

12 entro un periodo di 1 ora. Il prodotto cristallino

venne raccolto mediante filtrazione, lavato a sposta_

mento con soluzione ghiacciajdi isopropanolo al 20% in

acqua distillata (100 mi) ed essiccato per fine settima

na nel vuoto a 40?. Il composto del titolo ammont? a

20,1 g. Acqua (Karl Fisher) 0,4 % m/m, solventi (glc)

0,03 % m/m. Impurezze mediante HPLC 1,5 % (di cui 0,4 %

Somaro), arca Oj?/Cfrfft),

-m/m?e-oir-oa 0-,6% m/m-erano -?tu antn somerei negestiva monto) t rapporto di isomeri 1,05:?L.

?RIVENDICAg?ON?-

uro

ne

glio di essi isolare ed es ccare il prodotto
2 . Procedimento condo la rivendicazione 1

cui il cefurossima. acetossietilestere cristallizza

in un rapportp^ai isomeri R ad S approssimativamente ?? di 1:1
3. Procedimento secondo la rivendicazione 1, ?p

?e-rc la rivond-ieaaione- 2 in oui il? ? solvente -cpmpren?

(per traduzione conforme) C - < H rwV w

Gom.te/Ola?gio Omodeo Sali

(s?* iSt? italiana Brevetti S.p. A4