ITMI20131147A1

ITMI20131147A1 - Nuova via di somministrazione del ferro, e nuove formulazioni adatte a tale scopo.

Info

Publication number: ITMI20131147A1
Application number: IT001147A
Authority: IT
Inventors: Dario Bosi; Sacchetti Alessandro Lapini; Egidio Marchi; Cristina Padula; Patrizia Santi
Original assignee: Biofer Spa
Priority date: 2013-07-09
Filing date: 2013-07-09
Publication date: 2015-01-10
Also published as: CN105377370A; JP2016523954A; CA2917456A1; EP3019239B1; MX361663B; US10543216B2; ES2659830T3; RU2016103912A; MX2016000304A; RU2016103912A3; US20160151384A1; CN105377370B; EP3019239A1; WO2015004519A1; JP6347832B2

Description

“NUOVA VIA DI SOMMINISTRAZIONE DEL FERRO, E NUOVE FORMULAZIONI ADATTE A TALE SCOPO”

D E S C R I Z I O N E

Campo dell'invenzione.

La presente invenzione si riferisce ad una nuova via ed ad un nuovo regime di somministrazione del ferro bivalente per la terapia della iposideremia, ed a nuove formulazioni contenenti composti di ferro bivalente atte a rilasciare il ferro per l'assorbimento intra-buccale, preferibilmente per l'assorbimento sublinguale.

Arte nota.

Il metabolismo del ferro ha la particolarità di essere controllato dall’assorbimento piuttosto che dall’escrezione: il ferro viene eliminato principalmente attraverso la perdita di cellule delle mucose e della cute (intorno a 1 mg ogni giorno). Il pool totale del ferro nel nostro organismo si aggira intorno ai 4.000 mg, di cui poco più di 2.000 si trova negli eritrociti e nei loro precursori e 1.600-1.800 mg sono sotto forma di deposito, mentre la quantità di ferro riscontrabile nel siero è di circa 4 mg.

La carenza di ferro o iposideremia, dovuta spesso ma non solo al suo malassorbimento a livello intestinale, è una delle cause maggiori delle forme di anemia che si sviluppano nel bambino o nell’adulto. Si calcola che circa 750 milioni di persone nel mondo (Umbreit J., Am. J. Hematol. 2005; 78:225-231; Killip S., Bennet J.M., Chambers M.D., Am. Fam. Physician 2007; 75:671-678) siano colpite da questo deficit nutrizionale, in particolare bambini, in cui la carenza di ferro può provocare gravi deficit cognitivi, oppure nelle donne fertili o gravide, in cui la carenza di ferro può provocare prematurità e mortalità prenatale. Tale carenza è di norma curata attraverso la somministrazione di ferro bivalente o trivalente. Il ferro bivalente, sotto forma di sali o complessi, è somministrato in genere per via orale (ossia per assorbimento a livello gastro-intestinale), mentre il ferro trivalente è somministrato solo sotto forma di complesso sia per via orale (ossia per assorbimento a livello gastro-intestinale) che per via parenterale.

Terapia con ferro bivalente.

La terapia anti-iposideremica orale (ossia per assorbimento a livello gastro-intestinale) con sali o complessi di ferro bivalente, pur essendo normalmente efficace, è caratterizzata da alcuni effetti collaterali che ne possono limitare molto l’impiego. Infatti, la somministrazione orale di solfato ferroso, ascorbato ferroso o altri sali/complessi come il citrato o il gluconato ferroso, hanno come primo effetto negativo l’intolleranza a livello gastrico che provoca nausea, vomito, dolori epigastrici tali da incontrare spesso il rifiuto alla terapia da parte del paziente. In aggiunta, la suscettibilità all’ossidazione nel tratto intestinale del duodeno-digiuno del ferro bivalente (in ambiente neutro-basico lo stato di ossidazione più stabile del ferro è quello trivalente), provoca una drastica diminuzione dell’assorbimento che viene compensata da un aumento dei dosaggi, i quali, a loro volta, aumentano gli effetti negativi a livello gastrico e non solo. Infatti, da qui deriva un altro inconveniente, ancora più grave, cioè la tossicità a livello sistemico. La massima dose di ferro bivalente somministrabile oralmente nell'ambito della terapia dell'anemia sideropenica, in particolare dell'anemia sideropenica cronica, sopratutto se applicata per un intervallo temporale esteso, ad esempio da due settimane fino a 6 mesi, oscilla tra 150 e 450 mg al giorno per un paziente umano, a seconda della severità del disturbo e del tipo di preparazione utilizzata. Il ferro assorbito è di norma trasportato e depositato nelle cellule carenti di ferro da proteine (la transferrina è uno dei principali trasportatori del ferro), però se la quantità di ferro assorbita è tale da saturare la transferrina (o se l'assorbimento è più rapido della velocità di complessazione della transferrina) e da circolare ionizzato nel sangue sotto forma di ferro trivalente, possono presentarsi condizioni di tossicità. Tale eccesso non legato alla transferrina (c.d. ferro libero o “NTBI” - non transferrin bound iron), esplica la sua tossicità provocando la formazione di composti a base di ossigeno reattivo, quali l’anione superossido (O2--), il perossido di idrogeno (H2O2) o il radicale ossidrile (OH•), tutti in grado di danneggiare le cellule ossidando proteine, lipidi e lo stesso DNA (Gutteridge J.M. Lipid peroxidation and antioxidants as biomarkers of tissuedamage. Clin. Chem. 1995; 41:1819-1828; Stadtman E.R., Berlett B.S. Reactive oxygenmediated protein oxidation in aging and disease. Chem. Res. Toxicol. 1997; 10:485-494; Dean R.T., Fu S., Stocker R. et al. Biochemistry and pathology of radical-mediated protein oxidation. Biochem. J. 1997; 324(Pt 1): 1-18; Henle E.S., Linn S. Formation, prevention, and repair of DNA damage by iron/hydrogen peroxide. J. Biol. Chem.

1997; 272:19095-19098; Toyokuni S. Iron and carcinogenesis: from Fenton reaction to target genes. Redox Rep. 2002; 7: 189-197).

Tale tossicità del ferro bivalente si può manifestare sia nell’adulto che nel bambino, nel quale spesso gli esiti possono arrivare ad essere fatali.

In questi casi quindi il paziente raggiunge velocemente un livello di ferro sierico più elevato di quello desiderato, trovandosi in uno stato di ipersideremia; in queste condizioni il paziente viene esposto ad uno stress ossidativo dovuto agli alti livelli ematici di ferro [Al-Rashid, Rashid A, (1971) Clinical Toxicology, 4:4, 571-578; Witzleben C.L. and Buck B.E. (1971) Clinical Toxicology 4:4, 579-583; K.R. Reissmann and T.J. Coleman, (1955)10: 46-51]. In tutti questi anni si è assistito ad un numero importante di decessi per ipersideremia nei bambini dopo somministrazione orale di ferro solfato o altri sali di ferro bivalente. Purtroppo questi decessi hanno dimostrato che la definizione della finestra terapeutica per la somministrazione orale di ferro bivalente comporta notevoli difficoltà (Reissmann K.R, Coleman T.J, Budai B.S. and L.R. Moriarty, (1955) 10:35-45; Editorial: Acute iron poisoning in children. Canad. M. A. J. 66: 278, 1952.; Swift, S.C., Cefalu, V., and Rubell, E.B.: Ferrous sulfate poisoning. J. Pediat. 40: 6, 1952; Duffy, T.L., and Diehl, A.M.: Ferrous sulfate poisoning. J. Pediat. 40: 1, 1952). Una parte della tossicità del Fe++ somministrato oralmente viene attribuita, in molte pubblicazioni, alla sua azione diretta sulla mucosa intestinale, che viene necrotizzata con gravi fenomeni emorragici (Spencer, I.O.B.: Ferrous sulfate poisoning in children. Brit. M. J.

2: 1112, 1951).

Terapia con ferro trivalente.

Il ferro trivalente, a differenza di quello ridotto, può essere assorbito solo a pH estremamente acidi, nettamente inferiori a 2.0, in quanto solo in tali condizioni è stabile come catione e non precipita. Per questo motivo la somministrazione orale (ossia per assorbimento a livello gastro-intestinale) di sali di ferro trivalente non trova nessuna applicazione in quanto, il pH vicino alla neutralità del tratto intestinale duodeno-digiuno, che è il tratto deputato all’assorbimento del ferro, ne provoca la precipitazione rendendone impossibile l’assorbimento stesso. La somministrazione orale di Fe trivalente è stata invece resa possibile impiegando agenti complessanti come anioni citrato, EDTA ed altri - oppure mono e di saccaridi che riescono, sempre tramite complessazione, a rendere solubile anche il Fe sotto forma di ossido idrossido (FeOOH). Pertanto in queste condizioni il Ferro trivalente contenuto nei complessi sopraindicati, non precipitando a livello del tratto duodeno-digiuno, rimane biodisponibile per l’assorbimento gastrointestinale e dunque utilizzabile per la somministrazione orale.

Inoltre, tali complessi di Fe+++, somministrati per via orale non provocano gli effetti collaterali dei sali di Fe++.

L’inconveniente che si riscontra però nello sviluppo di questi complessi è associato alla difficoltà dello studio della loro farmacocinetica in volontari sani. Infatti sembrerebbe che l’entità dell’assorbimento di questi composti sia dipendente dalla necessità che l’individuo stesso ha di incrementare i livelli di Ferro. (W. Forth and S.G. Schäfer, Arzneim.-Forsch./Drug. Res.37(I), Nr 1a: 96-99 (1987); P. Geisser and A. Müller, Arzneim.-Forsch./Drug. Res.37(I), Nr 1a: 100-104 (1987); P. Geisser and A. Müller, Arzneim.-Forsch./Drug. Res.34(II), Nr 11: 1560-1569 (1984); W. Schneider, Arzneim.-Forsch./Drug. Res.37(I), Nr 1a: 92-95 (1987); P. Jacobs, Arzneim.-Forsch./Drug. Res.37(I), Nr 1a: 113-116 (1987); E. Werner and J.P. Kaltwasser, Arzneim.-Forsch./Drug. Res.37(I), Nr 1a: 116-121 (1987)).

Dai risultati ottenuti con studi condotti su pazienti anemici, sembrerebbe che i livelli sierici di ferro riscontrati inseguito a somministrazione orale di solfato ferroso o di ferroossidoidrossido complessato (ad esempio con una maltodestrina) siano del tutto paragonabili. L’argomento comunque è sempre al centro di un dibattito perché le varie farmacocinetiche effettuate con complessi di ferro trivalente non marcato, assunti per via orale, hanno fornito risultati ambigui. Ciò potrebbe essere dovuto anche al fatto che, complessi di ferromaltodestrina (cd. Ferropolimaltosio) ottenuti con metodi sintetici diversi, hanno mostrato stabilità e caratteristiche chimico-fisiche diverse; i dati ottenuti negli studi di farmacocinetica pertanto non sono spesso confrontabili. Dei complessi di Fe+++, studiati per un loro impiego nella terapia orale, solo il Ferropolimaltosio è correntemente sul mercato.

Valutati quindi gli aspetti negativi associati alla somministrazione orale di composti a base di Fe bivalente e trivalente si è ipotizzato di utilizzare un’altra via di somministrazione in grado di bypassare l’apparato digerente, senza ricorrere però alla via parenterale. Questo per consentire un agevole terapia anti-anemica anche a pazienti afflitti ad esempio da malattie infiammatorie intestinali (ad esempio IBD oppure celiachia), senza dover ricorrere però alla via endovenosa, più costosa e caratterizzata da importanti effetti collaterali.

In bibliografia sono riportati numerosi tentativi per consentire la somministrazione di svariate sostanze, tra cui il ferro, mediante una via diversa da quella gastrointestinale o parenterale.

Ad esempio, GB 2285921 descrive un metodo per la somministrazione di sostanze comprendenti farmaci, vitamine, minerali, sostanze nutritive, estratti da piante naturali ed erbe, per il trattamento di sindromi generici di carenza e/o malassorbimento. La via di somministrazione suggerita da GB 2285921 è quella sublinguale, tuttavia vengono trattati microelementi in genere, senza descrivere concretamente nessuna formulazione del ferro effettivamente adatta per la terapia dell'iposideremia o dei suoi stati più gravi.

EP 159917, pubblicato a metà degli anni ottanta, descrive composizioni farmaceutiche di composti del ferro per la terapia antianemica con assorbimento associato alle membrane della cavità orale o nasale. I composti del ferro utilizzati da EP159917 a questo scopo sono esclusivamente complessi del ferro trivalente, in particolare trattasi di complessi tra idrossipirone (ad esempio maltolo) e ferro III in rapporto molare 3:1 (c.d. trimaltolo ferrico). Tuttavia, come emerge dalla letteratura scientifica sul trimaltolo ferrico apparsa poi nei decenni successivi alla pubblicazione di EP 159917, la via transmucosale orale e nasale per la somministrazione di questo nuovo principio attivo è stata in seguito abbandonata, e le ricerche sul trimaltolo ferrico si sono concentrate invece sulla sua più classica somministrazione orale (ossia per assorbimento gastro-intestinale) e considerato -come altri complessi del ferro trivalente- come alternativa del ferro bivalente. Va rilevato che, nonostante questi ulteriori sviluppi, ad oggi, il trimaltolo ferrico non è disponibile sul mercato in nessuna forma di somministrazione. (Barrand et al., “Evidence for regulatory control of iron uptake from ferric maltol across the small intestine of the rat.”, Br. J. Pharmacol. (1991) 102 408-414; Kelsey et al. “Absorption of low and therapeutic doses of ferric maltose, a novel ferric iron compound in iron deficient subjects using a single dose iron absorption test.”, J. Clin. Pharm. Therap. (1991) 16, 117-122; Maxton et al. “Absorption of iron from hydroxypyrone complexes”, Br. J. Of Nutrition (1994) 71, 203-207; Harvey et al. “Ferric trimaltol corrects iron deficiency anemia in patients intolerant of iron.” Aliment Pharmacol. Ther. (1998) 12, 845-848; Reffitt et al. “Assessment of iron absorption from ferric trimaltol.” Ann. Clin. Biochem. (2000) 37, 457-466.)

WO 2006/096084 rivendica che l'utilizzo di acqua a composizione isotopica modificata (nella specie, arricchita in isotopi leggeri, c.d. acqua leggera) favorisce l’assorbimento di sostanze attive in genere (ossia di un ampio spettro di sostanze, che possono andare da farmaci veri e propri fino a principi nutraceutici) nella somministrazione transdermale o transmucosale. Tra i possibili candidati per la preparazione di composizioni basate su acqua leggera quale “enhancer” figurano, tra l'altro, sia composti di ferro bivalente, sia di ferro trivalente, come ad esempio il fumarato ferroso, solfato ferroso, citrato ferroso e ferro destrano. Tuttavia, in WO 2006/096084 non vengono descritte né concrete formulazioni dei principi attivi sopra elencati, e tanto meno vengono indicati regimi di dosaggio.

Alla luce di quanto sopra descritto, appare dunque evidente che ad oggi non esistono formulazioni del ferro per il trattamento, preferibilmente prolungato, dell'iposideremia o dei suoi stati più gravi come lo sono il malassorbimento del ferro dovuto a celiachia o malattie infiammatorie croniche intestinali oppure l'anemia sideropenica cronica dovuta a perdite ematiche, che siano di facile gestione e che non associati a importanti effetti indesiderati.

Uno scopo della presente invenzione è quindi la messa a disposizione di composti del ferro e di nuove formulazioni del ferro non parenterali, che consentano una alternativa alla somministrazione classica per via orale, ossia gastro-intestinale, nella terapia dell'iposideremia o dei suoi stati più gravi, evitando vantaggiosamente gli inconvenienti associati alla somministrazione per via gastro-intestinale di sali di Fe bivalente oppure di complessi di ferro trivalente. Attraverso lo sviluppo di queste formulazioni si renderà anche possibile il trattamento agevolato di stati anemici in pazienti che non tollerano la terapia orale (ossia per assorbimento a livello gastro-intestinale), come ad esempio pazienti sofferenti di malattie infiammatorie croniche intestinali (“MICI” o, in inglese IBD “inflammatory bowel disease”) o di celiachia, evitando in tal modo la terapia parenterale.

Un ulteriore scopo della presente invenzione è la messa a disposizione di nuove formulazioni del ferro non parenterali, che esibiscono una tossicità ridotta rispetto alle classiche formulazioni di ferro bivalente somministrate per via orale.

Un ulteriore scopo della presente invenzione è la messa a disposizione di nuove formulazioni del ferro bivalente, che siano efficaci per la terapia di stati anemici dovuti a malassorbimento del ferro dovuto a celiachia o malattie infiammatorie croniche intestinali oppure all'anemia sideropenica cronica dovuta a perdite ematiche a regimi di dosaggio più bassi delle preparazioni orali (ossia ad assorbimento gastro-intestinale) attualmente sul mercato, abbassando cosi favorevolmente la relazione rischio/beneficio della terapia.

Sommario dell'invenzione.

Da una serie di studi condotti ora dagli inventori della presente domanda, è emerso che la via di somministrazione adatta agli scopi menzionati è quella associata all’assorbimento di sali di ferro bivalente per via intra-buccale, più preferibilmente sublinguale. Difatti dagli studi in vitro ed in vivo condotti per la prima volta dagli inventori della presente domanda è emerso che l'assorbimento di composti di ferro bivalente tramite le mucose della bocca (cd. via intrabuccale), in particolare le mucose sublinguali non solo risulta effettivo a livello fisiologico, ma che questo assorbimento intra-buccale o sublinguale risulta addirittura essere più efficace del classico assorbimento gastrointestinale, che, a parità di incremento di saturazione della transferrina, risulta invece più suscettibile all'insorgere di tossicità correlata a ferro libero. Pertanto, alla luce di questa scoperta e con l'obiettivo di adempiere gli scopi summenzionati - ed ulteriori scopi che appariranno nel seguito - la presente invenzione, in una sua forma di esecuzione non-esclusiva, mette a disposizione composti di ferro bivalente per l'uso nella terapia della iposideremia tramite somministrazione ad assorbimento intra-buccale, preferibilmente ad assorbimento sublinguale in un paziente, il quale uso prevede la somministrazione di ferro bivalente in dosaggi compresi in un intervallo andante da 1-90 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, preferibilmente da 1 a 60 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, più preferibilmente andante da 4 a 40 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, ancora più preferibilmente andante da 5 a 30 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, preferibilmente per ridurre, a parità di incremento della saturazione della transferrina, l'insorgere di ferro libero non legato alla transferrina rispetto alla somministrazione gastro-intestinale.

Questo perché, come si vedrà più sotto, gli inventori della presente domanda hanno trovato che la somministrazione ad assorbimento intra-buccale, preferibilmente sublinguale di un composto di ferro bivalente secondo la presente invenzione permette l'ottenimento nel paziente di un incremento della saturazione della trasferrina paragonabile a quella risultante dalla somministrazione gastro-intestinale (i) ad una dose ridotta almeno del 50%, e (ii) con un insorgere di ferro non legato a trasferrina ridotto almeno del 75% rispetto alla somministrazione gastro-intestinale.

Nell'ambito della forma di esecuzione suddetta, l'uso nella terapia dei stati più gravi dell'iposideremia, come del malassorbimento di ferro dovuto a celiachia o a malattie infiammatorie croniche intestinali oppure dell'anemia sideropenica cronica dovuta a perdite ematiche avviene mediante la somministrazione ad assorbimento intra-buccale, preferibilmente ad assorbimento sublinguale in un paziente, il quale uso prevede la somministrazione di ferro bivalente in dosaggi compresi in un intervallo andante da 10 a 90 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, preferibilmente da 30 a 90 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, più preferibilmente da 40 a 90 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, ancora più preferibilmente da 45 a 90 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano. Le dosi anzidette sono inferiori alle dosi (a somministrazione gastro-intestinale) normalmente prescritte per gli stati di iposideremia gravi sopra indicati, e pertanto la messa a disposizione di questi dosaggi ridotti è oggetto a se stante della presente invenzione. Inoltre, secondo un ulteriore aspetto della presente invenzione, tali dosaggi servono preferibilmente per ridurre, a parità di incremento della saturazione della transferrina, l'insorgere di ferro libero non legato alla transferrina rispetto alla somministrazione gastro-intestinale.

In una ulteriore forma di esecuzione, la presente invenzione mette a disposizione composti di ferro bivalente per uso nella terapia di stati anemici recidivi, i quali stati anemici recidivi sono stati trattati previamente con terapia gastro-intestinale con composti di ferro bivalente o trivalente, oppure sono stati trattati previamente con terapia parenterale con composti di ferro trivalente, il quale uso prevede la somministrazione ad assorbimento intra-buccale, preferibilmente ad assorbimento sublinguale del composto di ferro bivalente al paziente.

In una ulteriore forma di esecuzione, la presente invenzione mette a disposizione una formulazione di ferro bivalente a rilascio per l'assorbimento intra-buccale, preferibilmente per l'assorbimento sublinguale, predisposta in dosi singole comprese in un intervallo andante da 0,5 a 30 mg di Fe bivalente, preferibilmente andante da 3 a 20 mg di Fe bivalente, più preferibilmente andante da 3 a 10 mg di Fe bivalente per uso nella terapia dell'iposideremia in un paziente, preferibilmente per ridurre, a parità di incremento della saturazione della transferrina, l'insorgere di ferro libero non legato alla transferrina rispetto alla somministrazione gastro-intestinale.

In una ulteriore forma di esecuzione, la presente invenzione mette a disposizione una composizione medicinale anti-iposideremica a rilascio per l'assorbimento intra-buccale, preferibilmente per l'assorbimento sublinguale, comprendente ferro bivalente per l’uso nella terapia con dosaggi compresi in un intervallo andante da 1-90 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, preferibilmente da 1 a 60 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, più preferibilmente andante da 4 a 40 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, ancora più preferibilmente andante da 5 a 30 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano.

Tutti gli intervalli di dosaggi descritti nella presente domanda valgono per il paziente umano adulto, tuttavia l'esperto del ramo, in base alle indicazioni qui riportate, potrà adattare i dosaggi concretamente utilizzati al fabbisogno di bambini e/o alla gravità del caso, scegliendo, a secondo delle circostanze, valori vicini al limite inferiore o superiore degli intervalli indicati.

Preferibilmente anzidetta composizione medicinale anti-iposideremica a base di ferro bivalente per assorbimento intra-buccale, preferibilmente per assorbimento sublinguale è predisposta in dosi singole comprese in un intervallo andante 0,5 a 30 mg di Fe bivalente, preferibilmente andante da 3 a 20 mg di Fe bivalente, più preferibilmente andante da 3 a 10 mg di Fe bivalente. Ulteriori forme di esecuzione e loro varianti preferite sono descritte in seguito.

Descrizione delle Figure.

Fig. 1: Rappresentazione schematica della cella di Franz come utilizzata negli sperimenti in vitro qui descritti.

Fig. 2: Diagrammi di permeazione di soluzioni di Fe++ ascorbato con e senza acido ascorbico ottenuti nella cella di Franz. Sull'asse verticale è rappresentato il Fe bivalente permeato (in microgrammi per cm quadrato di membrana), mentre sull'asse orizzontale è rappresentato il tempo (in ore).

- La curva registrata con 50 mg/ml di Fe bivalente ascorbato ed in presenza di acido ascorbico raggiunge un valore più alto di 150 microgrammi/cm quadrato dopo 3 ore, ed un valore di ca. 200 microgrammi/cm quadrato dopo 4 ore (vedi quadrati azzurri).

- La curva registrata con 350 mg/ml di Fe bivalente ascorbato ed in presenza di acido ascorbico raggiunge un valore appena al disotto di 150 microgrammi/cm quadrato dopo 3 ore, ed un valore di ca. 200 microgrammi/cm quadrato dopo 4 ore (vedi quadrati viola).

- La curva registrata con 400 mg/ml di Fe bivalente ascorbato ed in assenza di acido ascorbico raggiunge un valore appena al disopra di 100 microgrammi/cm quadrato dopo 3 ore, ed un valore di ca. 150 microgrammi/cm quadrato dopo 6 ore (vedi rombi viola).

- La curva registrata con 600 mg/ml di Fe bivalente ascorbato ed in assenza di acido ascorbico raggiunge un valore appena al disopra di 100 microgrammi/cm quadrato dopo 3 ore, ed un valore di ca. 125 microgrammi/cm quadrato dopo 6 ore (vedi quadrati rossi).

- La curva registrata con 1000 mg/ml di Fe bivalente ascorbato ed in assenza di acido ascorbico raggiunge un valore di ca. 50 microgrammi/cm quadrato dopo 3 ore, ed un valore di ca. 100 microgrammi/cm quadrato dopo 5 ore (vedi triangoli verdi).

Fig. 3: Diagramma di permeazione di soluzione di citrato ferrico (Fe+++) ottenuto nella cella di Franz. Sull'asse verticale è rappresentato il Fe trivalente permeato (in microgrammi per cm quadrato di membrana), mentre sull'asse orizzontale è rappresentato il tempo (in ore). Dopo 4 ore sono permeati poco meno di 11 microgrammi di ferro trivalente per cm quadrato.

Fig. 4: Saturazione della transferrina (in %, sull'asse verticale a sinistra) e ferro libero non legato a trasferrina (NTBI) (in micromoli/litro sull'asse verticale a destra) nel tempo (min) dopo somministrazione sublinguale di 30 mg Fe bivalente secondo la presente invenzione.

Fig. 5: Saturazione della transferrina (in %, sull'asse verticale a destra) e ferro libero non legato a trasferrina (NTBI) (in micromoli/litro sull'asse verticale a sinistra) nel tempo (ore) dopo somministrazione orale (gastro-intestinale) di 100 mg Fe bivalente secondo Dresow et al., Biometals (2008), 21, 273-276.

Descrizione dettagliata dell'invenzione.

Come riportato nel sommario, gli inventori della presente domanda hanno sorprendentemente trovato che gli scopi dell'invenzione menzionati vengono raggiunti tramite la messa a disposizione di nuove formulazioni ad assorbimento intrabuccale, preferibilmente ad assorbimento sublinguale, di composti del ferro bivalente.

La somministrazione intra-buccale o preferibilmente sublinguale secondo la presente invenzione avviene tramite somministrazione di una apposita formulazione applicata nel cavo orale, preferibilmente sotto la lingua del paziente, con l'indicazione al paziente di evitare la deglutizione della formulazione contenente il composto di ferro bivalente e/o della saliva per un periodo di tempo di almeno 30 secondi, preferibilmente di almeno un minuto, più preferibilmente di almeno due minuti, ancora più preferibilmente di almeno quattro minuti dopo il posizionamento della formulazione contenente il composto di ferro bivalente nel cavo intrabuccale, preferibilmente sotto la lingua.

Come composti di ferro bivalente utilizzabili ai fini della presente invenzione, si intendono tutti i composti, inclusi sali e complessi, con anioni farmaceuticamente accettabili, del ferro bivalente solubili al pH fisiologico del sito di somministrazione, ossia al pH intra-buccale di un paziente umano, oppure a valori di pH tollerabili nel sito di somministrazione intra-buccale, come ad esempio pH 2.0-8.0, preferibilmente pH 2.0-6.5, più preferibilmente pH 2.5-4.5. Esempi preferiti ma non esclusivi, di composti del ferro bivalente sono quindi i sali e complessi di ferro bivalente già correntemente impiegati nella terapia classica orale, tra i quali, ad esempio, il gruppo consistente di solfato ferroso, citrato ferroso, ascorbato ferroso, fumarato ferroso, glicinato ferroso, gluconato ferroso ed altri. Tra i composti bivalenti contemplati dalla presente invenzione, è preferito il Fe++ ascorbato.

Come formulazioni intra-buccali si intendono tutte le formulazioni predisposte ed indicate a rilasciare il principio attivo in modo da consentire il suo assorbimento attraverso la mucosa intra-buccale, preferibilmente attraverso la mucosa sublinguale, quali a mero titolo di esempio: compresse intra-buccali, compresse sublinguali, c.d. “oral drug strips” (ossia pellicole intra-buccali o sublinguali), c.d. “wafers” (ossia piastrine intra-buccali o sublinguali), granulato o polvere, spray, schiume, gel o pasta intra-buccali. Preferibilmente, compresse, “strips” (pellicole) e “wafers” (piastrine) vengono predisposti in forma pellicolare.

“Forma pellicolare” significa che le compresse, pellicole o piastrine secondo l'invenzione, a differenza da ad es. compresse tradizionali, sono caratterizzate da uno spessore ridotto, e sono preferibilmente flessibili. Inoltre sono preferibilmente predisposte per adattarsi, dopo assorbimento di umidità, alla mucosa orale, quali ad esempio palato, o la zona sublinguale o gengivale. Lo spessore complessivo delle forme pellicolari (prima dell'applicazione) ammonta preferibilmente da 0,05 a 3 mm, più preferibilmente a da 0,1 a 1 mm, e ancora più preferibilmente a da 0,1 a 0,5 mm. Le forme pellicolari possono avere forma areale rotonda, ovale, tri- quadri- o multiangolare. La loro estensione areale ammonta preferibilmente da 0,5 a 20 cm2, preferibilmente da 1 a 10 cm2.

Inoltre le forme pellicolari (ma non solo esse) potranno possedere caratteristiche di mucoadesività proprio per consentire il corretto assorbimento nel distretto sublinguale o del palato e potranno rilasciare il ferro bivalente completamente con tempi che possono variare da pochi secondi fino a qualche minuto. Preferibilmente, le formulazioni solide secondo la presente invenzione sono caratterizzate dal fatto di decomporsi rapidamente in ambienti acquosi, preferibilmente in saliva, preferibilmente entro 10 secondi a 5 minuti, più preferibilmente entro 30 secondi a 3 minuti, ancora più preferibilmente entro 1 minuto e due minuti, rilasciando l'intero composto di ferro bivalente. É vantaggioso che le forme pellicolari da applicare/incollare al palato o alla zona sublinguale, che possono comprendere sia compresse a rapida decomposizione (c.d. compresse “fast-melt”) sia pellicole o piastrine a rilascio immediato o ritardato, possono essere somministrate in maniera semplice, poco vistosa e sicura, senza ulteriore apporto di liquidi (come invece per le compresse da inghiottire), ottenendo in tal modo una ottima “patient compliance”.

Date le caratteristiche di assorbimento tramite le mucose buccali dei composti di ferro bivalente scoperte dagli inventori della presente domanda, le formulazioni suddette di ferro bivalente sono difatti ritenute adatte per garantire un assorbimento intra-buccale, preferibilmente sublingale dei composti di ferro bivalente ripetibile, regolare nella quantità e nei tempi richiesti, senza ricorrere ad alti dosaggi.

L’elevato assorbimento dei composti di ferro II a livello intra-buccale, più preferibilemente sublinguale, rende cosi possibile la messa a disposizione di nuove composizioni medicinali anti-sideremiche a rilascio per l'assorbimento intra-buccale, preferibilmente sublinguale comprendenti ferro bivalente, che si prestano alla terapia delle carenze patologiche di ferro e/o emoglobina di vari gradi di severità.

In alcuni casi, l'iposideremia è determinata da deficienza di ferro come l'anemia associata a perdita di sangue cronica od acuta, stato di gravidanza, parto, sviluppo infantile, sviluppo psicomotorico, gravi emorragie uterine, mestruazioni, emoptisi cronica ricorrente, infezioni parassite, malattie croniche renali e dialisi, interventi chirurgici o traumi acuti, ingestione cronica di alcol, o steroidi, ingestione cronica di NSA (non-steroidal antiinflammatory agents) o ingestione cronica di agenti stimolanti l'eritropoiesi. In altri casi l'iposideremia può essere un anemia associata ad altre malattie, quali artrite reumatoide, cancro, leucemia di Hodgkins, leucemia non-Hodgkins, chemioterapia anti-cancro, infiammazione dell'intestino (IBD), colite ulcerose, tiroidite, epatite, lupus eritematosus sistemico, polimialgia reumatica, scleroderma, malattie del tessuto connettivo, sindrome di Sojgren, collasso cardiaco congestivo/cardiomiopatia, o anemia idiopatica geriatrica. In altri casi ancora, l'iposideremia può essere dovuta a disturbi dell'assorbimento del ferro, come ad esempio anemie associate con malattia di Crohn, chirurgia gastrica, ingestioni di farmaci inibenti l'assorbimento di ferro o all'ingestione cronica di calcio.

Le composizioni medicinali anti-iposidermiche secondo la presente invenzione sono preferibilmente indicate per la somministrazione ad assorbimento intra-buccale, preferibilmente sublinguale di ferro bivalente con dosaggi compresi in un intervallo andante da 1-90 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, preferibilmente da 1 a 60 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, più preferibilmente andante da 4 a 40 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, ancora più preferibilmente andante da 5 a 30 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, con lo scopo di ripristinare i livelli biologici nel paziente affetto da iposideremia, per ridurre, a parità di incremento della saturazione della transferrina, l'insorgere di ferro libero non legato alla transferrina rispetto alla somministrazione gastro-intestinale.

Secondo la presente invenzione, i dosaggi sopraindicati possono venire preferibilmente modificati in casi gravi di iposideremia come (i) il malassorbimento di ferro dovuto a celiachia o a malattie infiammatorie croniche intestinali o (ii) della anemia sideropenica cronica dovuta a perdite ematiche. L'anemia sideropenica cronica dovuta a perdite ematiche è legata ai seguenti fenomeni:

• Perdite ematiche eccessive durante i cicli mestruali. Inoltre, nella donna in età fertile un'ulteriore esigenza è costituita dalla gravidanza e dal puerperio.

• Perdite ematiche a livello del tubo digerente. Normalmente, attraverso tale via si perde meno di 1 ml di sangue al giorno, ma alcune condizioni patologiche comportano perdite giornaliere di 10-20 ml o più. Nei paesi occidentali, le cause più comuni di queste perdite sono, in ordine di importanza, le emorroidi, l'ulcera peptica, l'utilizzo cronico di acido acetilsalicilico e di altri tipi di FANS, l'ernia iatale, i diverticoli del colon e i tumori intestinali. Nei paesi in via di sviluppo la causa principale è rappresentata dalle parassitosi intestinali. Nei casi gravi di iposideremia (i) e (ii), i dosaggi sono preferibilmente compresi in un intervallo andante da 10 a 90 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, preferibilmente da 30 a 90 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, più preferibilmente da 40 a 90 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, ancora più preferibilmente da 45 a 90 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano. É particolarmente preferito un intervallo andante da 45 a 65 mg di Fe bivalente al giorno per un paziente umano. E da sottolineare che la messa a disposizione dei dosaggi come sopra per le patologie gravi è nuova e deriva dalla maggiore efficienza delle composizioni qui descritte nel saturare la trasferrina.

Date le facoltà delle nuove composizioni qui descritte, le composizioni medicinali antiiposideremiche secondo la presente invenzione sono anche indicate nella terapia di stati anemici recidivi, i quali stati anemici recidivi sono stati trattati previamente con terapia gastrointestinale con composti di ferro bivalente o trivalente, oppure sono stati trattati previamente con terapia parenterale con composti di ferro trivalente. In questi casi, i dosaggi possono essere ridotti rispetto alla terapia antecedente. La terapia degli stati anemici recidivi può avvenire preferibilmente in dosaggi compresi in un intervallo andante da 1-90 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, preferibilmente da 1 a 60 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, più preferibilmente andante da 4 a 40 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, ancora più preferibilmente andante da 5 a 30 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, con lo scopo di ripristinare i livelli biologici nel paziente affetto da stati anemici recidivi.

In casi gravi di anemia recidiva dovuta (i) al malassorbimento di ferro dovuto a celiachia o a malattie infiammatorie croniche intestinali o (ii) ad anemia sideropenica cronica dovuta a perdite ematiche, i dosaggi applicati saranno generalmente più elevati, preferibilmente compresi in un intervallo andante da 10 a 90 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, preferibilmente da 30 a 90 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, più preferibilmente da 40 a 90 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, ancora più preferibilmente da 45 a 90 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano. Sempre nell'ambito della terapia sublinguale nei casi (i) ed (ii) è particolarmente preferito un dosaggio compreso in un intervallo andante da 45 a 65 mg di Fe bivalente al giorno per un paziente umano.

I dosaggi riportati come sopra scaturiscono da uno studio condotto dagli inventori della presente domanda, rivolto alla valutazione dell’assorbimento intra-buccale/sublinguale del ferro bivalente. Sorprendentemente si è trovato che i composti di ferro bivalente testati, messi in contatto con l’epitelio esofageo di maiale (modello riconosciuto scientificamente per lo studio in vitro dell’assorbimento tramite il tessuto mucoso intra-buccale e/o sublinguale), riuscivano a penetrare attraverso l’epitelio, dimostrando così di poter essere assorbiti. Al contrario, il complesso del Ferroossidoidrossido con maltodestrine già utilizzato nella terapia orale tradizionale, posto nelle stesse condizioni operative, non viene assorbito. Per il Fe+++ citrato, invece, l’assorbimento rimane minore ed è risultato apprezzabile unicamente a valori di pH molto bassi. Secondo una forma di esecuzione preferita, le formulazioni anti-iposideremiche ad assorbimento intra-buccale, preferibilmente ad assorbimento sublinguale, scoperte dagli inventori possono essere preparate mediante l'inclusione di eccipienti tamponanti e/o di eccipienti riducenti con lo scopo di garantire la solubilità dei composti di ferro bivalente somministrati, preferibilmente nella zona sublinguale. In tal modo non è necessario somministrare alti dosaggi di farmaco per apprezzarne un assorbimento efficace al contrario di quello che può accadere nella terapia orale classica.

In particolare, variando alcuni parametri operativi, quali concentrazione del sale di ferro nella soluzione in esame, il pH della soluzione stessa, ecc. si è potuto notare negli studi in vitro condotti dagli inventori che, nel modello sperimentale usato, la concentrazione sembrerebbe influire sull’assorbimento sublinguale del ferro bivalente in alcuni casi in modo inversamente proporzionale, mentre il pH della soluzione in esame, preferibilmente mantenuto tramite presenza di agenti tamponanti e/o la presenza di agenti riducenti (antiossidanti) hanno influenza soprattutto sulla stabilità dello ione ferroso.

Per i sali di ferro trivalente vi è invece un assorbimento intra-buccale, preferibilmente sublinguale nel modello in vitro solo se il pH della soluzione che li contiene risulta nettamente inferiore a 2,0, preferibilmente inferiore a 1,5, presumibilmente perché solo sotto tale soglia di pH il Fe+++ risulta in quantità apprezzabili sotto forma cationica solubile. Unicamente in queste condizioni di pH estreme l'assorbimento dei sali trivalenti risulta apprezzabile. È anche da considerare che anzidette condizioni di pH estreme dovrebbero venire mantenute, in una ipotetica somministrazione intra-buccale di sali ferrici (Fe+++), per l'arco di tempo intero dell'assorbimento - il che renderebbe necessaria l'inclusione nella formulazione intra-buccale di un sistema di tamponamento con capacità tamponante sufficiente a garantire il pH nettamente inferiore a 2.0, preferibilmente inferiore a 1.5 nel cavo buccale malgrado la salivazione (il pH della saliva umana si aggira tra 6.5 e 6.9 e può salire fino a 7.2 dopo stimolazione della secrezione).

Mentre invece per i complessi del Fe+++ solubili a tutti i pH compresi tra 1.5 e 10, come ad esempio il ferro polimaltosio, è stato trovato che il peso molecolare troppo alto inibisce il passaggio attraverso la mucosa buccale, come rappresentata nel modello sperimentale impiegato.

Viceversa, i composti di Fe++ utilizzati nelle formulazioni secondo la presente invenzione, in particolare i sali/complessi ferrosi preferiti dall'invenzione, sono composti in cui il ferro si trova nella sua forma ionica, solubile praticamente a tutti i pH compresi tra 2.0 e 8.0, e quindi risultano più facilmente assorbibili e formulabili per la via intra-buccale, preferibilmente sublinguale.

Gli inventori ritengono che in tal modo, la somministrazione intra-buccale consenta di evitare gli effetti collaterali dovuti al contatto del ferro bivalente con la mucosa gastrica; inoltre, utilizzando dosaggi giornalieri relativamente bassi, somministrabili preferibilmente mediante dosi singole ridotte di ferro bivalente nel contesto della terapia anti-iposideremica, si evitano elevati picchi di assorbimento, a cui è spesso correlata una tossicità imputabile alla saturazione della transferrina circolante. Vi è da notare che il ferro bivalente, una volta assorbito per via sublinguale, entra velocemente in contatto con le proteine ematiche, tra cui la ceruloplasmina o feroxidasi (Osaki, S., Kinetic Studies of Ferrous Ion Oxidation with Crystalline Human Ferroxidase (Ceruloplasmin). J. Biol. Chem, 241, 5053(1966); Osaki, S., Johnson, D.A., and Ieden, E., J. Biol. Chem., 241, 2746(1966)), venendo ossidato immediatamente a ferro trivalente (Fe+++), il quale è catturato dalla transferrina e trasportato nei siti di utilizzo o nei depositi.

Studi clinici condotti dagli inventori della presente domanda hanno difatti dimostrato che la somministrazione sublinguale di Fe bivalente secondo la presente invenzione permette di ottenere un opportuno incremento della percentuale di saturazione della transferrina (paragonabile a quella ottenuta per via gastro-intestinale) avvalendosi di dosaggi ridotti (ad esempio dosaggi ridotti almeno del 50%, preferibilmente almeno del 60% rispetto alla classica somministrazione orale del medesimo composto di ferro bivalente) conseguendo, ad esempio a due ore dopo la somministrazione, sostanziale parità di incremento di saturazione accompagnata al contempo da riduzione del rischio correlato (il ferro libero non legato a trasferrina risulta ridotto almeno del 75%, preferibilmente almeno del 80%, più preferibilmente almeno del 90% rispetto alla classica somministrazione orale del medesimo composto di ferro bivalente), migliorando cosi sensibilmente la relazione rischio/beneficio legato alla terapia della iposideremia.

Inoltre, nell'ambito della somministrazione intra-buccale, preferibilmente sublinguale è possibile somministrare il ferro bivalente preferibilmente al pH ottimale per l’assorbimento con l’aggiunta di opportuni sistemi tampone. Questo può avvenire includendo nella formulazione sistemi di tampone farmacologicamente accettabili in quantità adeguata da ottenere un pH tra 2.0 e 6.5, preferibilmente tra 2.5 e 4.5 nella cavità orale del paziente durante la fase iniziale dopo il posizionamento della formulazione nel cavo orale, preferibilmente durante da 10 secondi a 5 minuti, più preferibilmente da 15 secondi a 3 minuti, ancora più preferibilmente da 20 secondi a due minuti.

Affinché le caratteristiche appena descritte, siano presenti nei formulati secondo la presente invenzione, saranno ottenute formulazioni ad assorbimento intra-buccale o preferibilmente ad assorbimento sublinguale, predisposte in dosi singole andanti da 0,5 a 30 mg di Fe bivalente, preferibilmente andante da 3 a 20 mg di Fe bivalente, più preferibilmente andante da 3 a 10 mg di Fe bivalente per uso nella terapia dell'iposideremia in un paziente.

Oltre al composto di ferro bivalente, le formulazioni secondo la presente invenzione possono anche comprendere ulteriori principi attivi come ad esempio acido folico.

L'invenzione è di seguito maggiormente illustrata a scopo non-limitativo nei seguenti esempi.

Esempio 1

L’assorbimento sublinguale dei composti di Fe++ viene valutato attraverso esperimenti di permeazione in vitro utilizzando la cella di Franz esemplificata nella Fig. 1. Come membrana è stato utilizzato epitelio esofageo di maiale. Tale modello sperimentale viene riconosciuto come valido e attendibile nella valutazione dell’assorbimento sublinguale di farmaci [I. Diaz Del Consuelo, G.P. Pizzolato, F. Falsom, R.H. Guy, and Y. Jacques.: Evaluation of pig esophageal mucosa as a permeabilità barrier model for buccosal tissue. J. Pharm. Sci. 94: 2777-88(2005); I. Diaz Del Consuelo, Y. Jacques, G.P. Pizzolato, R.H. Guy, and F. Falsom: Comparison of the lipid composition of porcine buccal and esophageal permeabilità barriers. Arch. Oral Biol. 50: 981-7 (2005); I. Diaz Del Consuelo, F. Folsom, R.H. Guy, and Y. Jacques: Transport of fentanyl through pig buccal and esophageal epithelia in vitro: influence of concentration and vehicle pH. Pharm. Res. 22: 1525-9 (2005)]. La preparazione della membrana è avvenuta seguendo il procedimento qui descritto. Gli esofagi sono stati prelevati dagli animali entro 1 ora dal sacrificio. La mucosa è stata separata dal tessuto muscolare con un bisturi. Per la separazione dell'epitelio, la mucosa è stata immersa in acqua distillata a 60°C per 2 minuti e quindi l'epitelio è stato allontanato dal tessuto sottostante con l'aiuto di una spatola. I tessuti così preparati sono stati conservati a -20°C fino al momento dell'uso, quando sono stati scongelati a temperatura ambiente prima di essere montati sulle celle di diffusione verticali tipo Franz di cui una rappresentazione schematica è riportata in Figura 1. L’epitelio esofageo è stato posizionato su un filtro di cellulosa rigenerata (diametro dei pori 0,45 µm), con il lato luminale rivolto verso l’alto, e montato tra i compartimenti, donor e ricevente, delle celle di Franz. Il filtro ha solo funzione di supporto e non interferisce con la permeazione del principio attivo. La superficie esposta era di 0,6 cm2. Il compartimento ricevente è stato riempito con circa 4 ml di soluzione fisiologica (NaCl 0,9%, p/v) e mantenuto sotto costante agitazione magnetica per tutta la durata dell'esperimento. L'intero sistema è stato termostatato a 37°C. Il campionamento dal compartimento ricevente è effettuato tramite prelievo di 200 µl di soluzione ricevente che sono rimpiazzati immediatamente con un eguale volume di soluzione fisiologica fresca. I prelievi sono effettuati ad intervalli di tempo prestabiliti; nello specifico a 0, 1, 2, 3, 4, 5, e 6 ore.

Esempio 2

Sono state preparate soluzioni di Fe++ Ascorbato a diversa concentrazione, con e senza aggiunta di acido ascorbico, che sono state misurate nella cella di Fanz come da esempio 1:

• Soluzione 400 mg/ml.

4 g di polvere sono stati sospesi in 10 ml di soluzione fisiologica, e lasciati in agitazione per 15 minuti, quindi la soluzione viene filtrata con filtri di cellulosa rigenerata (diametro dei pori 0,45 µm). La concentrazione di Fe++ ascorbato è risultata essere di 397,92±25,78 mg/ml. Il pH é stato uguale a 4.4.

• Soluzione 600 mg/ml.

6 g di polvere sono stati sospesi in 10 ml di soluzione fisiologica. La sospensione è stata lasciata sotto agitazione magnetica per 25 minuti, quindi la soluzione viene filtrata con filtri di cellulosa rigenerata (diametro dei pori 0,45 µm). La concentrazione di Fe++ ascorbato è risultata essere di 638,84 mg/ml. Il pH é stato uguale a 4.4.

• Soluzione 1000 mg/ml.

7 g di polvere sono stati sospesi in 6 ml di soluzione fisiologica. La sospensione è stata lasciata sotto agitazione magnetica per 1 ora, al termine è stata filtrata con filtri di cellulosa rigenerata (diametro dei pori 0,45 µm). La concentrazione di Fe++ ascorbato, corrispondente alla solubilità, è risultata essere di 984,72±74,47 mg/ml. Il pH é stato uguale a 4.4.

• Soluzione 50 mg/ml con aggiunta di Acido Ascorbico, pH 2.6.

250 mg di Fe++ ascorbato sono stati sciolti in 5 ml di soluzione fisiologica. Alla soluzione è stato aggiunto un eccesso di Acido Ascorbico (2 g). La sospensione è stata lasciata sotto agitazione magnetica per 30 minuti e dopo filtrazione attraverso filtri di cellulosa rigenerata (diametro pori 0,45 µm) è stata usata come tale. Il pH della soluzione era di 2.6.

• Soluzione di 350 mg/ml con aggiunta di acido ascorbico.

1,05 g di Fe++ ascorbato sono stati sciolti in 3 ml di soluzione fisiologica. Alla soluzione è stato aggiunto un eccesso di Acido Ascorbico (525 mg) ed il pH della soluzione è stato riportato al valore iniziale di 4.4 con NaOH 5 N. Il titolo della soluzione è risultato essere 350,89 mg/ml.

Tali soluzioni sottoposte alle prove di assorbimento tramite celle di diffusione di cui all’esempio 1 hanno fornito i dati riportati nella Fig. 2.

Esempio 3

Come Fe<+++>è stato utilizzato il complesso del FeOOH con una maltodestrina (Fe-polimaltosio con P.M. 300.000 Da), misurato nella cella di Franz come da esempio 1. 4 g di polvere sono stati sospesi in 10 ml di soluzione fisiologica. La sospensione è stata lasciata sotto agitazione magnetica per 15 ore al termine delle quali è stata filtrata con filtri di cellulosa rigenerata (diametro dei pori 0,45 µm). La concentrazione di

Fe<+++>Polimaltosio, corrispondente alla solubilità è risultata essere di 270,23±14,47 mg/ml. Utilizzando il disegno sperimentale, di cui all’esempio 1, il ferro polimaltosio non ha fornito alcun livello di permeazione, dimostrando che, malgrado la sua solubilità, non è biodisponibile se somministrato per via sublinguale.

Esempio 4

Un altro composto di Fe<+++>utilizzato nelle prove di assorbimento come da esempio 1 è stato il citrato ferrico. Un eccesso di polvere è stato sospeso in 10 ml di soluzione fisiologica. La sospensione è stata lasciata sotto agitazione magnetica per 15 ore al termine delle quali è stata filtrata con filtri di cellulosa rigenerata (diametro dei pori 0,45 µm). La concentrazione di

Fe<+++>citrato, corrispondente alla solubilità è risultata essere di 280 mg/ml. Il pH della soluzione era 1.2. Il grafico dell’assorbimento è riportato nella Fig. 3.

L’assorbimento del Fe+++ avviene unicamente a pH inferiori a 2; infatti a pH superiori il Fe+++ non è più disponibile perché precipita.

Esempio 5

- Compresse sublinguali:

In un miscelatore conico vengono aggiunti Kg 36,35 di Ferro ascorbato (pari a Kg 5 di Fe++), Kg 60,00 di maltodestrina, Kg 20,00 di acido ascorbico. Dopo 15 min di miscelazione vengono aggiunti in sequenza Kg 1,50 di magnesio stearato, Kg 25,00 di polivinilpirrolidone e Kg 3,00 di aroma limone. Dopo altri 15 min di miscelazione la polvere viene compressa con punzone bombato da diametro 7,0 mm ottenendo compresso con peso medio di 145,85 mg (pari a 5 mg di Fe++ a compressa).

- Polvere sublinguale:

In un miscelatore conico vengono aggiunti Kg 36,35 di Ferro ascorbato (pari a Kg 5 di Fe++), Kg 60,00 di maltodestrina, Kg 20,00 di acido ascorbico. Dopo 15 min di miscelazione vengono aggiunti in sequenza Kg 47,39 di fruttosio e Kg 3,00 di aroma limone. Dopo altri 15 min di miscelazione la polvere viene ripartita in bustine da mg 40,75 mg (pari a 5 mg di Fe++ a bustina).

Esempio 6

Polvere sublinguale alternativa (contenuto di 1 bustina con miscela di polvere):

Fe(II) ascorbato 40 mg (pari a 5 mg di Fe); fruttosio 60 mg; acido ascorbico 10 mg; aroma di limone 5 mg.

Esempio 7

Somministrazione sublinguale di 30 mg Fe2+ come Fe2+ ascorbato.

Per esplorare la biodisponibilità in vivo delle nuove composizioni secondo la presente invenzione, è stato condotto uno studio clinico randomizzato in pazienti sani volontari (n=2), ai quali è stata somministrata una dose giornaliera di 30 mg di Fe2+ sotto forma delle composizioni qui descritte (6 bustine da 40 mg di Fe2+ ascorbato secondo esempio 6 sopra).

Più in particolare, ai pazienti partecipanti allo studio clinico (volontari sani di sesso maschile; età 18-55 anni; indice di massa corporea tra 18,5-30 kg/m2, è stata somministrata a digiuno una quantità di 30 mg di Fe2+ in formulazione sublinguale, suddivisa in 6 bustine, assunte immediatamente uno dopo l'altra con l'indicazione di evitare il deglutimento della formulazione e/o della saliva per almeno 4 minuti.

I partecipanti erano stati ospitalizzati per i due giorni antecedenti alla somministrazione fino al giorno susseguente, ed erano sotto osservazione medica.

Campioni di sangue sono stati prelevati 24 e 22 ore prima della somministrazione, nonché alla somministrazione (tempo 0,0); e susseguentemente ai tempi 0,033 (2 min.), 0,10 (6 min.); 0,20 (12 min.); 0,33 (20 min.); 0,50 (30 min.); 0,75 (45 min.) 1,00 (60 min.); 1,25 (1h 15 min.); 1,50 (1h 30 min.); 1,75 (1h 45 min.) e 2,00 (2h).

I campioni sono poi stati analizzati in

rispetto all'andamento delle concentrazioni

(medie) di vari indicatori nel tempo.

Valori rilevati:

Ferro totale misurato in microgrammi/dl (ICP-MS)

Ferro libero tramite ultrafiltrazione misurato in

micromoli/l (=NTBI) (ICP-MS)

Capacità totale di legare ferro (TIBC) misurato in

microgrammi/dl (separazione su colonna, Vitros

analyzer)

Saturazione transferrina (PTS) misurato in %

Ferro sierico (SI), misurato in microgrammi/dl,

metodo colorimetrico (Vitros analyzer)

Risultati:

Sviluppo del ferro sierico nel tempo:

tempo Fe sierico (μg/dl)

0 0

0,033 5,5

0,100 7

0,200 6

0,330 10

0,500 24

0,750 51,5

1,000 72

1,250 91

1,500 110,5

1,750 118,5

2,000 129

Sviluppo del ferro totale nel tempo

tempo Ferro totale (μg/dl)

0,00 0

0,03 -7,4

0,10 6,2

0,20 -13,54

0,33 5,95

0,50 6,37

0,75 41,58

1,00 51,01

1,25 80,17

1,50 90,15

1,75 95,7

2,00 110,94

Sviluppo della capacità totale di legare ferro nel tempo:

tempo TIBC(μg/dl)

0,000 0

0,033 -30,5

0,100 -22

0,200 -25

0,330 -1

0,500 -52,5

0,750 -21,5

1,000 -46,5

1,250 -20,5

1,500 -42,5

1,750 -28

2,000 -44,5

Sviluppo della saturazione della transferrina e del ferro libero nel tempo:

Tempo (min) NTBI (µM/l)

Transferrina (%)

0 24 0,000

2 28 -0,306

6 28 -0,215

12 28,5 0,029

20 26,5 0,067

30 36 0,106

45 40,5 0,448

60 50 0,311

75 51,5 1,191

90 60 0,084

105 49,5 0,806

120 66,5 0,339

I risultati riportati nell'ultima tabella come

sopra sono illustrati graficamente in Fig. 4, dove

sull'asse orizzontale è riportato il tempo, mentre

sull'asse verticale a sinistra è riportato NTBI,

mentre sull'asse verticale a destra è riportata la

saturazione.

Dalla tabella come sopra e da Fig. 4 appare

che, dopo la somministrazione di 30 mg Fe2+ (come

ascorbato) per via sublinguale come contemplato

dalla presente invenzione, l'incremento di saturazione della transferrina (“PTS”, ca. al 24% al momento della somministrazione) dopo 2 ore raggiunge il 42,5% (66,5% di saturazione assoluta), mentre il ferro libero (NTBI) passa da 0 a 0,34 micromoli/litro.

Viceversa, come appare dalla Figura 1 di Dresow et al., Biometals (2008), 21, 273-276 come riprodotta in Fig. 5, la classica somministrazione orale di 100 mg Fe2+ (come ascorbato) per via orale a volontari sani porta ad un incremento di saturazione della transferrina dopo 2 ore del 45% ca. (ossia da ca. 30% al momento della somministrazione seguiti da ca. 75% di saturazione assoluta dopo due ore – vedi quadrati bianchi) mentre il ferro libero (NTBI) passa nelle medesime due ore da 0 a 6,7 micromoli/litro - vedi quadrati neri.

Il paragone dei risultati ottenuti con le formulazioni e con i dosaggi secondo la presente invenzione con dati recentemente pubblicati in letteratura (Dresow et al.) evidenzia dunque la particolare efficacia della somministrazione sublinguale rispetto alla classica terapia orale (gastrointestinale), sopratutto in chiave del raggiungimento di un buon grado di saturazione della transferrina dopo somministrazione di una dose relativamente modesta (30 mg di Fe2+ giornalieri costituiscono poco meno di un terzo della dose giornaliera orale classica di 100 mg) correlata al contempo ad una basso indice di ferro libero (“NTBI”, non-transferrin bound iron), che rappresenta invece il maggiore fattore di rischio associato alla somministrazione del ferro.

La somministrazione intra-buccale, preferibilmente sublinguale di Fe2+ secondo la presente invenzione permette dunque di saturare la transferrina avvalendosi di dosaggi ridotti (rispetto alla classica somministrazione orale) conseguendo parità di efficacia di saturazione accompagnata al contempo da una marcata riduzione del rischio correlato, migliorando cosi sensibilmente la relazione rischio/beneficio della somministrazione del ferro bivalente paragonato alla sua classica somministrazione orale (gastro-intestinale).

Claims

R I V E N D I C A Z I O N I 1. Composto di ferro bivalente per l'uso nella terapia della iposideremia tramite somministrazione ad assorbimento intra-buccale, preferibilmente ad assorbimento sublinguale in un paziente, il quale uso prevede la somministrazione di ferro bivalente in dosaggi compresi in un intervallo andante da 1-90 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, preferibilmente da 1 a 60 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, più preferibilmente andante da 4 a 40 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, ancora più preferibilmente andante da 5 a 30 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano per ridurre, a parità di incremento della saturazione della transferrina, l'insorgere di ferro libero non legato alla transferrina rispetto alla somministrazione gastro-intestinale.
2. Composto di ferro bivalente, preferibilmente secondo la rivendicazione 1, per l'uso nella terapia del malassorbimento di ferro dovuto a celiachia o a malattie infiammatorie croniche intestinali tramite somministrazione ad assorbimento intra-buccale, preferibilmente ad assorbimento sublinguale in un paziente, il quale uso prevede la somministrazione di ferro bivalente in dosaggi compresi in un intervallo andante da 10 a 90 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, preferibilmente da 30 a 90 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, più preferibilmente da 40 a 90 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, ancora più preferibilmente da 45 a 90 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano.
3. Composto di ferro bivalente secondo la rivendicazione 2 per l'uso nella terapia del malassorbimento di ferro dovuto a celiachia o a malattie infiammatorie croniche intestinali tramite somministrazione ad assorbimento intrabuccale, preferibilmente ad assorbimento sublinguale in un paziente, il quale uso prevede la somministrazione di ferro bivalente in dosaggi compresi in un intervallo andante da 45 a 65 mg di Fe bivalente al giorno per un paziente umano.
4. Composto di ferro bivalente, preferibilmente secondo la rivendicazione 1, per l'uso nella terapia della anemia sideropenica cronica dovuta a perdite ematiche tramite somministrazione ad assorbimento intra-buccale, preferibilmente ad assorbimento sublinguale in un paziente, il quale uso prevede la somministrazione di ferro bivalente in dosaggi compresi in un intervallo andante da 10 a 90 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, preferibilmente da 30 a 90 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, più preferibilmente da 40 a 90 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, ancora più preferibilmente da 45 a 90 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano.
5. Composto di ferro bivalente secondo la rivendicazione 4 per l'uso nella terapia della anemia sideropenica cronica dovuta a perdite ematiche tramite somministrazione ad assorbimento intra-buccale, preferibilmente ad assorbimento sublinguale in un paziente, il quale uso prevede la somministrazione di ferro bivalente in dosaggi compresi in un intervallo andante da 45 a 65 mg di ferro bivalente al giorno per un paziente umano.
6. Composto di ferro bivalente per uso nella terapia di stati anemici recidivi, i quali stati anemici recidivi sono stati trattati previamente con terapia gastro-intestinale con composti di ferro bivalente o trivalente, oppure sono stati trattati previamente con terapia parenterale con composti di ferro trivalente, il quale uso prevede la somministrazione ad assorbimento intra-buccale, preferibilmente ad assorbimento sublinguale del composto di ferro bivalente al paziente per ridurre, a parità di incremento di saturazione della transferrina, l'insorgere di ferro libero non legato alla transferrina rispetto alla somministrazione gastro-intestinale.
7. Composto di ferro bivalente secondo la rivendicazione 6, per l'uso nella terapia degli stati anemici recidivi, i quali stati anemici recidivi sono stati trattati previamente con terapia gastro-intestinale con composti di ferro bivalente o trivalente oppure sono stati trattati previamente con terapia parenterale con composti di ferro trivalente, il quale uso prevede la somministrazione ad assorbimento intra-buccale, preferibilmente ad assorbimento sublinguale al paziente di ferro bivalente in dosaggi compresi in un intervallo andante da 1-90 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, preferibilmente da 1 a 60 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, più preferibilmente andante da 4 a 40 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, ancora più preferibilmente andante da 5 a 30 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano.
8. Composto di ferro bivalente, preferibilmente secondo la rivendicazione 7, per l'uso nella terapia degli stati anemici recidivi dovuti ad anemia sideropenica cronica dovuta a perdite ematiche o degli stadi anemici recidivi dovuti a malassorbimento di ferro dovuto a celiachia o a malattie infiammatorie croniche intestinali, i quali stati anemici recidivi sono stati trattati previamente con terapia gastrointestinale con composti di ferro bivalente o trivalente oppure sono stati trattati previamente con terapia parenterale con composti di ferro trivalente, il quale uso prevede la somministrazione ad assorbimento intra-buccale, preferibilmente ad assorbimento sublinguale al paziente di ferro bivalente in dosaggi compresi in un intervallo andante da 10 a 90 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, preferibilmente da 30 a 90 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, più preferibilmente da 40 a 90 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, ancora più preferibilmente da 45 a 90 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano.
9. Composto di ferro bivalente secondo la rivendicazione 8 per l'uso nella terapia degli stati anemici recidivi dovuti ad anemia sideropenica cronica dovuta a perdite ematiche o degli stadi anemici recidivi dovuti a malassorbimento di ferro dovuto a celiachia o a malattie infiammatorie croniche intestinali, i quali stati anemici recidivi sono stati trattati previamente con terapia gastro-intestinale con composti di ferro bivalente o trivalente oppure sono stati trattati previamente con terapia parenterale con composti di ferro trivalente, il quale uso prevede la somministrazione ad assorbimento intra-buccale, preferibilmente ad assorbimento sublinguale al paziente di ferro bivalente in dosaggi compresi in un intervallo andante da 45 a 65 mg di Fe bivalente al giorno per un paziente umano.
10. Composto di ferro bivalente come da una o più delle rivendicazioni 1-9, l'uso del quale prevede un regime terapeutico di 1-6, preferibilmente 1-3 somministrazioni singole al giorno a dare i dosaggi giornalieri secondo rivendicazioni 1-9.
11. Composto di ferro bivalente come da una o più delle rivendicazioni 1-10 per l'uso come da una o più delle rivendicazioni 1-10, la cui somministrazione avviene ad assorbimento sublinguale.
12. Composto di ferro bivalente come da rivendicazione 11 per l'uso come da una o più delle rivendicazioni 1-11 in cui la somministrazione avviene con l'indicazione al paziente di evitare la deglutizione della formulazione contenente il composto di ferro bivalente e/o della saliva per un periodo di tempo di almeno 30 secondi, preferibilmente di almeno un minuto, più preferibilmente di almeno due minuti, ancora più preferibilmente di almeno quattro minuti dopo il posizionamento della formulazione contenente il composto di ferro bivalente nel cavo intra-buccale, preferibilmente sotto la lingua.
13. Formulazione di ferro bivalente ad assorbimento intra-buccale, preferibilmente ad assorbimento sublinguale, predisposta in dosi singole comprese in un intervallo andante da 0,5 a 30 mg di Fe bivalente, preferibilmente andante da 3 a 20 mg di Fe bivalente, più preferibilmente andante da 3 a 10 mg di Fe bivalente per uso nella terapia dell'iposideremia in un paziente, per ridurre, a parità di incremento della saturazione della transferrina, l'insorgere di ferro libero non legato alla transferrina rispetto alla somministrazione gastro-intestinale.
14. Formulazione di ferro bivalente come da rivendicazione 13 per l'uso nella terapia del malassorbimento di ferro dovuto a celiachia o a malattie infiammatorie croniche intestinali, della anemia sideropenica cronica dovuta a perdite ematiche oppure di stati anemici recidivi, i quali stati anemici recidivi sono stati trattati previamente con terapia gastro-intestinale con composti di ferro bivalente o trivalente oppure sono stati trattati previamente con terapia parenterale con composti di ferro trivalente.
15. Formulazione come da rivendicazione 13 o 14 in forma di somministrazione scelta dal gruppo costituito da compresse intra-buccali, compresse sublinguali, “oral drug strips” (ossia pellicole intra-buccali o sublinguali), “wafers” (ossia piastrine intra-buccali o sublinguali), granulato o polvere, spray, schiume, gel o pasta intra-buccale.
16. Formulazione come da rivendicazione 15 in cui le compresse intra-buccali, le compresse sublinguali, gli “oral drug strips” (ossia le pellicole intra-buccali o sublinguali) o i “wafers” (ossia le piastrine intra-buccali o sublinguali) esibiscono una forma pellicolare, in particolare esibiscono uno spessore complessivo da 0,05 a 3 mm, preferibilmente da 0,1 a 1 mm, ancora più preferibilmente da 0,1 a 0,5 mm ed una estensione areale ammontante preferibilmente a da 0,5 a 20 cm2, preferibilmente da 1 a 10 cm2.
17. Formulazione come da rivendicazione 13-16 ad assorbimento sublinguale.
18. Formulazione come da una o più delle rivendicazioni 13-17, per uso nella terapia della iposideremia tramite somministrazione ad assorbimento intra-buccale, preferibilmente ad assorbimento sublinguale in un paziente, il quale uso prevede la somministrazione di ferro bivalente in dosaggi compresi in un intervallo andante da 1-90 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, preferibilmente da 1 a 60 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, più preferibilmente andante da 4 a 40 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano, ancora più preferibilmente andante da 5 a 30 mg Fe bivalente al giorno per un paziente umano.
19. Formulazione di ferro bivalente come da una o più delle rivendicazioni 13-18, o composto di ferro bivalente come da una o più delle rivendicazioni 1-12, in cui il composto di ferro bivalente è costituito da un sale o da un complesso di ferro bivalente, solubile a valori di pH farmaceuticamente accettabili per la somministrazione ad assorbimento intra-buccale.
20. Formulazione o composto come da rivendicazione 19 in cui il composto di ferro bivalente è scelto dal gruppo consistente di solfato ferroso, citrato ferroso, ascorbato ferroso, fumarato ferroso, glicinato ferroso e gluconato ferroso, preferibilmente il composto è ascorbato ferroso.
21. Formulazione come da una o più delle rivendicazioni 13-20 comprendente eccipienti tamponanti e/o riducenti, preferibilmente acido ascorbico/ascorbato, in quantità adeguata da ottenere un pH tra 2.0 e 6.5, preferibilmente tra 2.5 e 4.5 nella cavità orale del paziente.
22. Formulazione come da una o più delle rivendicazioni 13-21, comprendente almeno una fase polimerica che rappresenta il 10-90% (p/p), preferibilmente 20-70% (p/p), più preferibilmente 20-50% (p/p) della formulazione intera.
23. Formulazione come da una o più delle rivendicazioni 13-22, caratterizzata dal fatto di essere mucoadesiva o esibente almeno una superficie mucoadesiva.
24. Formulazione solida come da una o più delle rivendicazioni 13-23, caratterizzata dal fatto di decomporsi rapidamente in ambienti acquosi, preferibilmente in saliva, preferibilmente entro 10 secondi a 5 minuti, più preferibilmente entro 30 secondi a 3 minuti, ancora più preferibilmente entro 1 minuto e due minuti, rilasciando l'intero composto di ferro bivalente.
25. Formulazione come da una o più delle rivendicazioni 13-24, caratterizzata dal fatto che la formulazione comprende un ulteriore principio attivo, ad esempio acido folico.