ITMO20090093A1 - Sacca per il contenimento ed il congelamento di cellule staminali - Google Patents

Description

Descrizione di Breveto per Invenzione Industriale avente per titolo:

“SACCA PER IL CONTENIMENTO ED IL CONGELAMENTO DI CELLULE STAMINALI”.

DESCRIZIONE

La presente invenzione si riferisce ad una sacca per il contenimento ed il congelamento di cellule staminali.

Come noto, le cellule staminali sono cellule primitive non specializzate dotate della singolare capacità di trasformarsi in qualunque altro tipo di cellula del corpo. Le cellule staminali possono essere di vario tipo e sono generalmente classificate in cellule cordonali, ovvero le cellule prelevate dal cordone ombelicale di un neonato, o periferiche, ovvero le cellule prelevate con aferesi selettiva dal sistema venoso periferico o da midollo osseo.

Le cellule staminali, successivamente al prelievo dal cordone ombelicale o dal donatore, vengono sottoposte ad alcuni trattamenti e/o aggiunte di adeguati additivi e soluzioni (plasma, soluzione salina, DMSO e altro ancora) e successivamente raccolte all’ interno di apposite sacche per essere poi criopreservate, ovvero conservate in azoto liquido ad una temperatura approssimativamente compresa tra -130°C e -190 C.

Le sacche utilizzate comprendono un involucro che definisce una camera di contenimento delle cellule staminali e che è associabile a mezzi di immissione e prelievo.

Secondo una legge di recente istituzione, chiamata “legge sangue”, su ciascuna sacca contenente cellule staminali deve poi essere applicata un’etichetta riportante una serie di indicazioni secondo quanto previsto dalle linee guida e normative vigenti (dati identificativi del donatore e delle cellule stesse, lotti di produzione delle sacche, data di prelievo, data di scadenza, data di produzione delle cellule, etc, etc. .

Poiché è indispensabile conservare l’integrità delle cellule staminali contenute nelle sacche ed evitare che esse entrino in contatto con agenti “contaminanti” o mutageni che possano in qualche modo provocare danni, inquinamenti o mutazioni delle cellule staminali stesse, tutti gli elementi che vengono utilizzati per l’etichettatura devono essere opportunamente selezionati e certificati.

Ad oggi esistono in commercio delle tipologie di carte e di inchiostro per etichette certificate, il cui utilizzo è sicuro e non compromette in alcun modo la “qualità” delle cellule contenute nelle sacche.

Allo stesso modo, però, non esiste alcun tipo di colla certificata che possa essere utilizzata con sicurezza per l’etichettatura delle sacche che contengono cellule staminali.

Infatti, le colle ad oggi in commercio contengono dei solventi capaci di attraversare la parete dell’involucro che forma la sacca e sulla quale sono applicate le etichette, e contaminare così le cellule contenute al suo interno. Sebbene la maggiore parte degli istituti di produzione e conservazione delle cellule staminali applichi, nonostante i rischi sopra elencati, le etichette direttamente sull’involucro che contiene le cellule, si possono utilizzare alcuni accorgimenti per evitare rischi di danni o mutazioni o contaminazioni.

In particolare, la soluzione maggiormente impiegata consiste nell’ inserire le sacche contenenti le cellule in appositi coprisacca rimuovibili, prima di posizionarle nell’azoto liquido, e nell’ applicare esternamente le etichette identificative su questi coprisacca dopo averle opportunamente chiuse mediante saldatura.

Questa soluzione presenta però alcuni inconvenienti.

Infatti, le etichette applicate esternamente ai coprisacca possono strapparsi, sfilarsi o staccarsi durante la manipolazione delle sacche e soprattutto durante il loro stoccaggio immerse in azoto liquido. Questo può quindi comportare che la relativa sacca risulti priva dell’etichetta ìdentificativa o che quest’ultima sia danneggiata e quindi non leggibile. Ovviamente, una sacca sprovvista della relativa etichetta di identificazione o con un’etichetta non leggibile è inutilizzabile, in quanto non consente di risalire al donatore ed alle proprietà delle cellule in essa contenute, e deve quindi essere distrutta.

Poiché prima di effettuare un trapianto di cellule staminali è opportuno verificare che il destinatario o ricevente sia compatibile con le cellule contenute all’interno di una sacca, è indispensabile effettuare dei test di compatibilità.

Poiché questi test devono essere eseguiti senza aprire in alcun modo la sacca contenente le cellule, generalmente, al momento dell’immissione delle cellule staminali all’interno della sacca si provvede anche ad aggiungere alcuni campioni separati precedentemente dalla sacca stessa, che vengono poi crioconservati all’ interno dello stesso contenitore metallico contenente anche la corrispondente sacca e relativo coprisacca. Questi campioni di cellule staminali sono indispensabili per eseguire i necessari test di compatibilità con un possibile destinatario.

Accade però frequentemente che i campioni contenuti liberi all’ interno di tali contenitori metallici fuoriescano accidentalmente dagli stessi durante la loro manipolazione. Questo comporta di conseguenza che i campioni non siano più reperibili o comunque che non siano più riconducibili con certezza alla corrispondente sacca.

Nel momento in cui si esaurisce il numero di campioni disponibili, la relativa sacca di cellule staminali deve essere distrutta in quanto non è più utilizzabile, causa la complessa procedura di donazione nota al tecnico del settore, senza averne in precedenza testato la compatibilità con il ricevente. Le sacche di tipo noto, inoltre, possono essere dotate di un’appendice disposta inferiormente rispetto alla camera di contenimento delle cellule staminali, atta ad alloggiare un codice a barre che riferisce ad un sistema gestionale di controllo delle sacche.

Questa appendice, però, oltre a non prevedere lo spazio necessario per l’alloggiamento dell’etichetta riportante tutti i dati sopra indicati, aumenta anche l’ingombro esterno della sacca, complicandone così la manipolazione e lo stoccaggio all’interno dei relativi contenitori metallici. Ne consegue quindi in modo ovvio che l’aumento delle dimensioni di tale appendice per l’applicazione anche delle etichette di identificazione comporterebbe un eccessivo incremento dell’ingombro esterno della sacca, con inevitabili consumi di spazio ed incremento dei costi di gestione e stoccaggio.

Il compito principale della presente invenzione è quello di escogitare una sacca per il contenimento ed il congelamento di cellule staminali che consenta di applicare in modo agevole e sicuro Γ etichetta identificativa alla sacca stessa, come previsto dalle normative della materia, senza che ciò possa in alcun modo contaminare o danneggiare le cellule contenute al suo interno.

Uno scopo del presente trovato è quello di escogitare una sacca per il contenimento ed il congelamento di cellule staminali che consenta di applicare in modo sicuro l’etichetta di identificazione direttamente alla sacca e di evitare che essa si possa accidentalmente staccare o danneggiare durante la movimentazione della sacca stessa o durante la conservazione in azoto liquido.

Un altro scopo del presente trovato è quello di evitare che i campioni utilizzati per i test di compatibilità possano fuoriuscire dal relativo contenitore al momento dell’ estrazione di quest’ultimo o durante la sua movimentazione.

Un altro scopo ancora del presente trovato è quello di escogitare una sacca per il contenimento ed il congelamento di cellule staminali che consenta di applicare in modo sicuro l’etichetta di identificazione e che al contempo mantenga sostanzialmente l’ingombro esterno delle sacche fino ad oggi utilizzate, in modo tale da poter essere crioconservata all’ interno dei medesimi contenitori ad oggi in uso per tale fine.

Altro scopo del presente trovato è quello di escogitare una sacca per il contenimento ed il congelamento di cellule staminali che consenta di superare i menzionati inconvenienti della tecnica nota nell’ambito di una soluzione semplice, razionale, di facile ed efficace impiego e dal costo contenuto.

Non ultimo scopo del presente trovato è quello di escogitare una sacca per il contenimento ed il congelamento di cellule staminali che, a parità di volume della camera di contenimento abbia un ingombro esterno ridotto rispetto alle sacche di tipo noto, rispettando al contempo tutti i requisiti previsti dalle normative vigenti e consentendo una facile gestione delle sacche stesse.

Gli scopi sopra esposti sono raggiunti dalla presente sacca per il contenimento ed il congelamento di cellule staminali, comprendente un involucro definente una camera di contenimento delle cellule staminali e associabile a mezzi di immissione/prelievo, caratterizzata dal fatto di comprendere mezzi di protezione associati solidalmente a detto involucro ed atti a supportare almeno un’etichetta identificativa delle caratteristiche delle cellule staminali contenute in detta camera di contenimento.

Altre caratteristiche e vantaggi della presente invenzione risulteranno maggiormente evidenti dalla descrizione di una forma di esecuzione preferita, ma non esclusiva, di una sacca per il contenimento ed il congelamento di cellule staminali, illustrata a titolo indicativo, ma non limitativo, nelle unite tavole di disegni in cui:

la figura 1 è una vista in frontale di una sacca con rispettivo coprisacca secondo il trovato;

la figura 2 è una vista prospettica di una sacca secondo il trovato in una prima forma di realizzazione;

la figura 3 è una vista prospettica di una sacca secondo il trovato in una seconda forma di realizzazione.

Con particolare riferimento a tali figure, si è indicato globalmente con il numero di riferimento 1 una sacca per il contenimento ed il congelamento di cellule staminali.

La sacca 1 comprende un involucro 2 definente una camera di contenimento 3 delle cellule staminali ed associabile a mezzi di immissione/prelievo non rappresentati nelle figure. Più particolarmente, la camera di contenimento 3 è provvista di una luce di ingresso 4 associabile a mezzi di immissione non rappresentati nelle figure e chiudibile, ad esempio mediante saldatura, per isolare dall’esterno la camera di contenimento stessa e non permettere l’uscita delle celle. Inoltre, la sacca 1 è provvista di uno o più raccordi 5 apribili, ad esempio a strappo, ed associabili a relativi mezzi di prelievo o reinfusione.

Secondo il trovato, la sacca 1 comprende mezzi di protezione associati solidalmente all’ involucro 2 ed atti a supportare almeno un’etichetta 6 di identificazione delle caratteristiche delle cellule staminali contenute nella camera di contenimento 3. Più particolarmente, le informazioni riportate sull’etichetta 6 comprendono tutte le informazioni richieste dalla normativa vigente, come, ad esempio, il nome e cognome del donatore, la sua data di nascita, la data di raccolta delle cellule ed un codice a barre che riporta ad un sistema gestionale.

Vantaggiosamente, i mezzi di protezione comprendono almeno un elemento di protezione 7 sostanzialmente lastriforme associato solidalmente all’involucro 2, esternamente ad esso.

Più particolarmente, l’elemento di protezione 7 è sovrapponibile all’involucro 2 in corrispondenza della camera di contenimento 3.

Preferibilmente, l’elemento di protezione 7 è realizzato in materiale trasparente, in modo tale da consentire la lettura dell’etichetta 6 anche dall’ esterno. Opportunamente, ma non necessariamente, il materiale che costituisce l’elemento di protezione 7 è il medesimo che costituisce l’involucro 2. Un esempio di materiale adatto per la realizzazione dell’involucro 2 e/o dell’elemento di protezione 7 è l’etavinilacetato (EVA).

In una prima forma di realizzazione, rappresentata in figura 2, i mezzi di protezione sono costituiti da un unico elemento di protezione 7 associato all’involucro 2.

In questa forma di realizzazione, l’elemento di protezione 7 è associato all’involucro 2 con almeno un suo lato 7a. Il lato opposto 7b può essere anch’esso associato all’involucro 2 oppure, in un’alternativa forma di realizzazione, svincolato rispetto all’involucro 2 e quindi libero di motare, per un angolo limitato, attorno al lato 7a saldato all’involucro stesso.

L’elemento di protezione 7 definisce due facce 8 tra loro opposte, di cui una faccia rivolta verso l’esterno, sulla quale viene applicata l’etichetta 6, e l’altra rivolta verso l’involucro 2.

Opportunamente, l’elemento di protezione 7 è associato all’involucro 2 in corrispondenza del bordo perimetrale 9 di quest’ultimo.

Nella seconda forma di realizzazione, i mezzi di protezione comprendono due elementi di protezione 7 associati tra loro in corrispondenza di due zone di connessione 10a e 10b, di cui una prima zona di connessione 10a ed una seconda zona di connessione 10b, tra loro distinte per definire una tasca 11 di alloggiamento dell’ etichetta 6.

Vantaggiosamente, gli elementi di protezione 7 sono associati all’involucro 2, mediante saldatura o tecniche simili, con almeno una zona di connessione 10a, 10b.

Più particolarmente, nella forma di realizzazione rappresentata in figura 3, gli elementi di connessione 7 sono associati all’involucro 2 con una zona di connessione 10a, 10b mentre l’altra zona di connessione 10b, 10a è libera e svincolata rispetto all’involucro 2.

Gli elementi di protezione 7 sono quindi liberi di ruotare rispetto all’involucro 2, per un angolo di rotazione limitato, attorno alla zona di connessione 10a, 10b saldata all’involucro stesso.

Preferibilmente, le zone di connessione 10a e 10b sono definite in corrispondenza di due lati opposti degli elementi di protezione 7.

Più particolarmente, gli elementi di protezione 7 sono associati all’involucro 2 in corrispondenza del bordo perimetrale 9 di quest’ultimo. Non si esclude tuttavia una forma di realizzazione alternativa che prevede il fissaggio di entrambe le zone di connessione 10a e 10b all’involucro 2. Opportunamente, in questa seconda forma di realizzazione, gli elementi di protezione 7 possono essere associati tra loro anche in corrispondenza di almeno una terza zona di connessione, non rappresentata nelle figure e disposta sostanzialmente trasversale rispetto alle zone di connessione 10a e 10b. Più particolarmente, la terza zona di connessione può essere definita in corrispondenza di uno dei lati degli elementi di protezione 7 contigui ai lati in corrispondenza dei quali sono definite le zone di connessione 10a e 10b.

Vantaggiosamente, la sacca 1 comprende almeno un campione 12, preferibilmente una pluralità, per l’esecuzione di test di compatibilità associati solidalmente all’involucro 2 e separabili da esso.

I campioni 12 comprendono mezzi di aspirazione 13 comunicanti con la camera di contenimento 3 delle cellule staminali e chiudibili, mediante saldatura o tecniche simili, per isolare i campioni stessi dalla camera di contenimento 3. Più particolarmente, i mezzi di aspirazione 13 sono costituiti ad esempio da una parete comprimibile atta a variare il volume del relativo campione 12 creando una depressione che aspiri la sospensione cellulare contenuta nella camera di contenimento 3.

Il funzionamento del presente trovato è il seguente.

Dopo aver immesso le cellule staminali ed eventuali additivi e/o soluzioni all’interno della camera di contenimento 3 attraverso la luce di ingresso 4, quest’ultima viene chiusa mediante saldatura. Allo stesso modo, dopo aver aspirato, mediante i mezzi di aspirazione 13, una parte della sospensione cellulare contenuta nella camera di contenimento 3 all’interno dei campioni 12, ed aver fatto uscire l’aria contenuta al loro interno, questi ultimi vengono isolati dalla camera di contenimento stessa. La camera di contenimento 3 risulta quindi isolata dall’esterno.

L’etichetta 6 può essere applicata alla sacca 1, sfruttando i mezzi di protezione secondo il trovato, prima o dopo il riempimento della stessa con la sospensione cellulare. Generalmente, l’etichetta 6 viene applicata alla sacca 1 prima di immettere le cellule staminali all’interno della camera di contenimento 3.

Più particolarmente, nella prima forma di realizzazione rappresentata in figura 2, l’etichetta 6 può essere applicata, utilizzando un qualunque tipo di collante o di mezzo adesivo in commercio, sulla faccia 8 esterna definita dall’ elemento di protezione 7.

In questo modo, la colla applicata all’etichetta 6 non è a contatto diretto con l’involucro 2 bensì con l’elemento di protezione 7, che funge quindi da barriera tra la colla e l involucro 2.

Applicata quindi l’etichetta 6, l’elemento di protezione 7 viene fatto aderire all’involucro 2 in modo tale che la sacca 1 possa essere riposta all’interno di un coprisacca 14, successivamente saldato ermeticamente ed atto ad essere riposto all’interno di un contenitore metallico non rappresentato nelle figure per la conservazione in azoto liquido.

Nella seconda forma di realizzazione rappresentata in figura 3, l’etichetta 6 può esser applicata su una delle facce esterne definite dagli elementi di protezione 7 oppure, preferibilmente, posizionata all’interno della tasca 1 1 di alloggiamento, con o senza colla o mezzi adesivi.

Per facilitare l’inserimento dell’etichetta 6 all’intemo della tasca 11 si può, anche in questo caso, fare ruotare gli elementi di protezione 7 attorno alla zona di connessione 10a, 10b associata all’involucro 2, facilitando così l’apertura della tasca stessa, e poi fare aderire nuovamente gli elementi di protezione 7 all’involucro 2 per il successivo posizionamento all’interno del relativo coprisacca 14.

In questa seconda forma di realizzazione, quindi, l’etichetta 6 viene trattenuta dagli elementi di protezione 7, sia nella variante che prevede le sole zone di connessione 10a e 10b che in quella con anche la terza zona di connessione, per cui si può omettere l’utilizzo della colla o di mezzi adesivi per assicurare l’eticheta 6 alla sacca 1. Preferibilmente, si ricorre alla saldatura della/e apertura/e della tasca 11 così da evitare accidentali fuoriuscite dell’eticheta stessa.

Inoltre, nel caso in cui si debbano eseguire dei test di compatibilità con un potenziale ricevente, una volta prelevato e aperto il coprisacca 14 che contiene la sacca 1 è necessario staccare, tagliandolo, uno dei campioni 12. La separazione dei campioni 12 mantiene comunque integro l’involucro 2 e quindi chiusa ermeticamente la camera di contenimento 3.

Si è in pratica constatato come l’invenzione descrita raggiunga gli scopi proposti e in particolare si sottolinea il fatto che consente di evitare che i solventi, gli additivi, etc... contenuti nei mezzi di fissaggio dell’etichetta identificativa alla sacca possano penetrare all’interno della camera di contenimento delle cellule staminali, danneggiandole, contaminadole o provocando delle mutazioni.

La sacca secondo il trovato risulta quindi sensibilmente più sicura delle sacche attualmente utilizzate per la conservazione ed il congelamento delle cellule staminali in quanto definisce una sorta di barriera di protezione interposta tra l’etichetta e l’involucro all’interno del quale sono contenute le cellule staminali.

Inoltre, nella forma di realizzazione che prevede l’inserimento dell’eticheta di identificazione all’interno della tasca di alloggiamento separata dall’involucro che contiene le cellule staminali, è addirittura possibile evitare l’applicazione della colla o di mezzi adesivi all’eticheta. Ancora, le sacche per il contenimento ed il congelamento di cellule staminali secondo il trovato garantiscono la tracciabilità ed il collegamento delle sacche ai relativi campioni per i test di compatibilità. Tali campioni, infatti, essendo associati solidalmente all’ involucro che definisce la camera di contenimento delle cellule, non possono più fuoriuscire accidentalmente dal contenitore metallico durante l estrazione, la movimentazione e l’apertura del contenitore stesso. Inoltre, le sacche secondo il trovato garantiscono che il contenuto dei campioni è il medesimo della sacca alloggiata nello stesso contenitore.

La sacca secondo il trovato consente in questo modo anche di rispettare i requisiti previsti dalla legge sangue, secondo la quale i campioni che vengono utilizzati per i testi di compatibilità devono essere collegati in modo solidale all’ involucro che contiene le cellule staminali.

Non ultimo, la sacca secondo il trovato, pur rispettando tutti i requisiti previsti dalla legge sangue in merito all’ utilizzo ed all’applicazione delle etichette di identificazione, risulta essere di ingombro contenuto rispetto alle sacche di tipo noto, facilitandone così la movimentazione e lo stoccaggio nei relativi contenitori.

Claims (14)

1. RIVENDICAZIONI 1) Sacca (1) per il contenimento ed il congelamento di cellule staminali, comprendente un involucro (2) definente una camera di contenimento (3) delle cellule staminali e associabile a mezzi di immissione/prelievo, caratterizzata dal fatto di comprendere mezzi di protezione (7) associati solidalmente a detto involucro (2) ed atti a supportare almeno un’etichetta (6) identificativa delle caratteristiche delle cellule staminali contenute in detta camera di contenimento (3).
2. 2) Sacca (1) secondo la rivendicazione 1, caratterizzata dal fatto che detti mezzi di protezione comprendono almeno un elemento di protezione (7) sostanzialmente lastriforme associato solidalmente a detto involucro (2), esternamente ad esso.
3. 3) Sacca (1) secondo la rivendicazione 2, caratterizzata dal fatto che detto elemento di protezione (7) è realizzato in materiale trasparente.
4. 4) Sacca (1) secondo la rivendicazione 2 o 3, caratterizzato dal fatto che detto elemento di protezione (7) è sovrapponibile a detto involucro (2) in corrispondenza di detta camera di contenimento (3).
5. 5) Sacca (1) secondo una o più delle rivendicazioni da 2 a 4, caratterizzata dal fatto che detto elemento di protezione (7) è associato con almeno un suo lato (7a) a detto involucro.
6. 6) Sacca (1) secondo una o più delle rivendicazioni da 2 a 5, caratterizzata dal fatto che detto elemento di protezione (7) è associato a detto involucro (2) in corrispondenza del bordo perimetrale (9) di quest’ultimo.
7. 7) Sacca (1) secondo la rivendicazione 2 o 4, caratterizzata dal fatto che detti mezzi di protezione comprendono due di detti elementi di protezione (7) associati tra loro in corrispondenza di almeno due zone di connessione (10a, 10b) distinte per definire una tasca (11) di alloggiamento di detta etichetta.
8. 8) Sacca (1) secondo la rivendicazione 7, caratterizzata dal fatto che detti elementi di protezione (7) sono associati a detto involucro (2) con almeno una di dette due zone di connessione (10a, 10b).
9. 9) Sacca (1) secondo una o più delle rivendicazioni da 7 a 8, caratterizzata dal fatto che detti elementi di protezione (7) sono associati a detto involucro (2) in corrispondenza del suo bordo perimetrale (9).
10. 10) Sacca (1) secondo una o più delle rivendicazioni da 7 a 9, caratterizzata dal fatto che detti elementi di protezione (7) sono associati tra loro anche in corrispondenza di una terza zona di connessione.
11. 11) Sacca (1) secondo una o più delle rivendicazioni precedenti, caratterizzata dal fatto di comprendere almeno un campione (12) per l’esecuzione dei test di compatibilità associato a detto involucro (2) e separabile da esso.
12. 12) Sacca (1) secondo la rivendicazione 11, caratterizzata dal fatto che detto campione (12) comprende mezzi di aspirazione (13) comunicanti con detta camera di contenimento (3) e chiudibili per isolare il campione stesso da detta camera di contenimento (3).
13. 13) Sacca (1) secondo la rivendicazione 12, caratterizzata dal fatto che detti mezzi di aspirazione (13) comprendono almeno una parete comprimibile atta a variare il volume di detto campione (12).
14. 14) Sacca (1) secondo una o più delle rivendicazioni da 11 a 13, caratterizzata dal fatto di comprendere ima pluralità di detti campioni