ITTO20131085A1 - Prodotto fitosanitario e metodo per l'ottenimento di detto prodotto fitosanitario - Google Patents
Prodotto fitosanitario e metodo per l'ottenimento di detto prodotto fitosanitario Download PDFInfo
- Publication number
- ITTO20131085A1 ITTO20131085A1 IT001085A ITTO20131085A ITTO20131085A1 IT TO20131085 A1 ITTO20131085 A1 IT TO20131085A1 IT 001085 A IT001085 A IT 001085A IT TO20131085 A ITTO20131085 A IT TO20131085A IT TO20131085 A1 ITTO20131085 A1 IT TO20131085A1
- Authority
- IT
- Italy
- Prior art keywords
- punica granatum
- extract
- extraction process
- epicarp
- plant
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 16
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 73
- 244000294611 Punica granatum Species 0.000 claims description 71
- 235000014360 Punica granatum Nutrition 0.000 claims description 71
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 22
- 239000004476 plant protection product Substances 0.000 claims description 20
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 16
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 15
- 244000052769 pathogen Species 0.000 claims description 14
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 8
- 229920000241 Punicalagin Polymers 0.000 claims description 7
- ZJVUMAFASBFUBG-OGJBWQGYSA-N punicalagin Chemical compound C([C@H]1O[C@@H]([C@@H]2OC(=O)C3=CC(O)=C(O)C(O)=C3C3=C(O)C(O)=C(O)C=C3C(=O)O[C@H]2[C@@H]1OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C11)O)OC(=O)C2=CC(O)=C(O)C(O)=C2C2=C(O)C(O)=C(OC3=O)C4=C2C(=O)OC2=C4C3=C1C(O)=C2O ZJVUMAFASBFUBG-OGJBWQGYSA-N 0.000 claims description 7
- LMIBIMUSUFYFJN-RSVYENFWSA-N punicalagin Natural products O[C@@H]1O[C@@H]2COC(=O)c3cc(O)c(O)c(O)c3c4c(O)cc5OC(=O)c6c(c(O)c(O)c7OC(=O)c4c5c67)c8c(O)c(O)c(O)cc8C(=O)O[C@H]2[C@@H]9OC(=O)c%10cc(O)c(O)c(O)c%10c%11c(O)c(O)c(O)cc%11C(=O)O[C@@H]19 LMIBIMUSUFYFJN-RSVYENFWSA-N 0.000 claims description 7
- ZRKSVMFLACVUIU-UHFFFAOYSA-N punicalagin isomer Natural products OC1=C(O)C(=C2C3=4)OC(=O)C=4C4=C(O)C(O)=C3OC(=O)C2=C1C1=C(O)C(O)=C(O)C=C1C(=O)OC1C2OC(=O)C3=CC(O)=C(O)C(O)=C3C3=C(O)C(O)=C(O)C=C3C(=O)OC2C(O)OC1COC(=O)C1=CC4=C(O)C(O)=C1O ZRKSVMFLACVUIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 3
- 238000002414 normal-phase solid-phase extraction Methods 0.000 claims description 3
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 claims description 3
- 238000007710 freezing Methods 0.000 claims description 2
- 230000008014 freezing Effects 0.000 claims description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 2
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 19
- 241000223221 Fusarium oxysporum Species 0.000 description 15
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 9
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 8
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 7
- 235000005156 Brassica carinata Nutrition 0.000 description 6
- 244000257790 Brassica carinata Species 0.000 description 6
- 239000003124 biologic agent Substances 0.000 description 6
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 6
- 239000001965 potato dextrose agar Substances 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 5
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N methanol Natural products OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 4
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 description 4
- 240000003768 Solanum lycopersicum Species 0.000 description 4
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 4
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 4
- 241000219198 Brassica Species 0.000 description 3
- 235000011331 Brassica Nutrition 0.000 description 3
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 3
- 239000006137 Luria-Bertani broth Substances 0.000 description 2
- 238000009933 burial Methods 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 235000015203 fruit juice Nutrition 0.000 description 2
- 230000035784 germination Effects 0.000 description 2
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 2
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 230000002688 persistence Effects 0.000 description 2
- 239000000575 pesticide Substances 0.000 description 2
- 230000000885 phytotoxic effect Effects 0.000 description 2
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 2
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 2
- UHPMCKVQTMMPCG-UHFFFAOYSA-N 5,8-dihydroxy-2-methoxy-6-methyl-7-(2-oxopropyl)naphthalene-1,4-dione Chemical compound CC1=C(CC(C)=O)C(O)=C2C(=O)C(OC)=CC(=O)C2=C1O UHPMCKVQTMMPCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000219068 Actinidia Species 0.000 description 1
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 description 1
- 240000006108 Allium ampeloprasum Species 0.000 description 1
- 235000005254 Allium ampeloprasum Nutrition 0.000 description 1
- 235000006463 Brassica alba Nutrition 0.000 description 1
- 244000140786 Brassica hirta Species 0.000 description 1
- 244000178993 Brassica juncea Species 0.000 description 1
- 235000011332 Brassica juncea Nutrition 0.000 description 1
- 235000014700 Brassica juncea var napiformis Nutrition 0.000 description 1
- 241001136168 Clavibacter michiganensis Species 0.000 description 1
- 244000000626 Daucus carota Species 0.000 description 1
- 235000002767 Daucus carota Nutrition 0.000 description 1
- 229920002079 Ellagic acid Polymers 0.000 description 1
- ATJXMQHAMYVHRX-CPCISQLKSA-N Ellagic acid Natural products OC1=C(O)[C@H]2OC(=O)c3cc(O)c(O)c4OC(=O)C(=C1)[C@H]2c34 ATJXMQHAMYVHRX-CPCISQLKSA-N 0.000 description 1
- AFSDNFLWKVMVRB-UHFFFAOYSA-N Ellagic acid Chemical compound OC1=C(O)C(OC2=O)=C3C4=C2C=C(O)C(O)=C4OC(=O)C3=C1 AFSDNFLWKVMVRB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000024675 Eruca sativa Species 0.000 description 1
- 235000014755 Eruca sativa Nutrition 0.000 description 1
- 241000223218 Fusarium Species 0.000 description 1
- 240000007817 Olea europaea Species 0.000 description 1
- 235000002725 Olea europaea Nutrition 0.000 description 1
- 241001395385 Pseudomonas savastanoi pv. savastanoi Species 0.000 description 1
- 241000589615 Pseudomonas syringae Species 0.000 description 1
- 241000232299 Ralstonia Species 0.000 description 1
- 235000019057 Raphanus caudatus Nutrition 0.000 description 1
- 244000088415 Raphanus sativus Species 0.000 description 1
- 235000011380 Raphanus sativus Nutrition 0.000 description 1
- 241000873910 Rhizoctonia fragariae Species 0.000 description 1
- 241000813090 Rhizoctonia solani Species 0.000 description 1
- 241001518705 Sclerotinia minor Species 0.000 description 1
- 241000221696 Sclerotinia sclerotiorum Species 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 230000009418 agronomic effect Effects 0.000 description 1
- 229930014669 anthocyanidin Natural products 0.000 description 1
- 235000008758 anthocyanidins Nutrition 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 230000008094 contradictory effect Effects 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000249 desinfective effect Effects 0.000 description 1
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 229960002852 ellagic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000004132 ellagic acid Nutrition 0.000 description 1
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 1
- NWKFECICNXDNOQ-UHFFFAOYSA-N flavylium Chemical compound C1=CC=CC=C1C1=CC=C(C=CC=C2)C2=[O+]1 NWKFECICNXDNOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 125000004383 glucosinolate group Chemical group 0.000 description 1
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 150000002540 isothiocyanates Chemical class 0.000 description 1
- 231100001231 less toxic Toxicity 0.000 description 1
- 239000010871 livestock manure Substances 0.000 description 1
- 238000009332 manuring Methods 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- FAARLWTXUUQFSN-UHFFFAOYSA-N methylellagic acid Natural products O1C(=O)C2=CC(O)=C(O)C3=C2C2=C1C(OC)=C(O)C=C2C(=O)O3 FAARLWTXUUQFSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 239000006272 natural pesticide Substances 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 230000003071 parasitic effect Effects 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 150000008442 polyphenolic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000001718 repressive effect Effects 0.000 description 1
- 230000007226 seed germination Effects 0.000 description 1
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 229920001864 tannin Polymers 0.000 description 1
- 235000018553 tannin Nutrition 0.000 description 1
- 239000001648 tannin Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N43/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds
- A01N43/90—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having two or more relevant hetero rings, condensed among themselves or with a common carbocyclic ring system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N65/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing material from algae, lichens, bryophyta, multi-cellular fungi or plants, or extracts thereof
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Dentistry (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Agronomy & Crop Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Pest Control & Pesticides (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
Description
"Prodotto fitosanitario e metodo per l'ottenimento di detto prodotto fitosanitario "
DESCRIZIONE
Settore tecnico dell'invenzione
La presente invenzione si riferisce ad un prodotto fitosanitario.
In particolare essa si riferisce ad un prodotto fitosanitario per la cura e/o la prevenzione di attacchi da parte di agenti biologici a colture e altre specie vegetali. La presente invenzione si riferisce anche ad un metodo per l'ottenimento di detto prodotto fitosanitario.
Arte nota
La presente invenzione si inquadra nel settore concernente la lotta agli agenti biologici infettanti e si riferisce ad un prodotto fitosanitario per la cura e/o la prevenzione di attacchi da parte di agenti biologici a colture e altre specie vegetali, in particolare per prevenire o eliminare malattie telluriche provocate da batteri e/o funghi.
Negli ultimi decenni, la difesa delle colture agrarie ha richiesto un crescente uso di prodotti fitosanitari (o agrofarmaci) di sintesi, molto spesso con contenimento solo parziale dei fitopatogeni a causa dell'insorgenza di biotipi resistenti. Ciò ha comportato un incremento del numero dei trattamenti con conseguenze dannose per l'ambiente, i consumatori e gli operatori del settore.
Tale consapevolezza ha provocato un maggiore interesse ad utilizzare prodotti fitosanitari meno tossici e più rispettosi per l'ambiente.
I sistemi di difesa da attacchi da parte di agenti biologici per ridurre l'uso dei prodotti fitosanitari di sintesi sono essenzialmente quattro:
1) contenimento dei patogeni col minor numero di interventi possibile (cosiddetta "difesa guidata");
2) integrazione della lotta con prodotti di sintesi con altri mezzi fisici ed agronomici (cosiddetta "difesa integrata");
3) sostituzione della lotta con prodotti di sintesi con agenti quali virus, batteri e funghi parassiti (cosiddetta "difesa biologica"); e
4) sostituzione della lotta con prodotti di sintesi con prodotti di origine vegetale (cosiddetta "difesa con prodotti naturali").
Con particolare riferimento alla lotta contro i patogeni tellurici, tecniche per disinfettare i terreni con prodotti di origine vegetali come sovescio e interramento di ammendanti e residui vegetali a base di brassicacee sono da tempo usati contro detti patogeni.
Esempi di piante bioattive usate per il contenimento delle malattie provocate da patogeni tellurici comprendono Brassica carinata, Eruca sativa e Brassica verna (in particolare per il contenimento di Sclerotinia sclerotiorum e Sclerotinia minor, due fitopatogeni della rizosfera); Brassica juncea (in particolare per contenere le infezione del batterio del pomodoro Ralstonia solancearum); Sinapis alba, Raphanus sativus, Sorgum sudanese e Allium ampeloprasum (per contenere le infezioni delle carote da Rhizoctonia solani e Rhizoctonia fragariae).
Tuttavia, i risultati nel terreno del sovescio o dell'interramento di prodotti vegetali ricchi di sostanze bioattive derivanti dalle specie sopra descritte, sono stati spesso contradditori e di limitata efficacia.
Secondo quanto rilevato dagli studi del Richiedente, il principale problema dell'interramento di matrici vegetali in generale ed in particolar modo di quelle derivanti dalle brassicacee sta nella rapida degradazione delle sostanze bioattive presenti in dette piante (isotiocianati).
Tali sostanze sono in grado di inibire i patogeni presenti nella rizosfera nel breve periodo, ma successivamente, una volta degradati, la loro azione si esaurisce permettendo così ai patogeni sopravvissuti di moltiplicarsi rapidamente, anche grazie alla notevole sostanza organica immessa con la matrice vegetale (farina pellettizata, parti di piante triturate, e così via.).
Scopo principale della presente invenzione è quello di superare gli inconvenienti della tecnica nota, fornendo un prodotto fitosanitario in grado di agire efficacemente e per un tempo prolungato per la prevenzione e/o la cura di attacchi alle colture e ad altre specie vegetali da parte di agenti biologici.
In particolare, scopo della presente invenzione è quello di fornire un prodotto fitosanitario in grado di prevenire e/o contenere efficacemente e per un tempo prolungato le malattie provocate dai patogeni della rizosfera, cioè della porzione di suolo che circonda le radici delle piante.
Scopo ulteriore della presente invenzione è quello di fornire un prodotto fitosanitario a impatto ambientale basso o nullo e innocuo per uomini ed animali domestici.
Questi ed altri scopi sono raggiunti dal prodotto fitosanitario come rivendicato nelle unite rivendicazioni. Esposizione sintetica dell'invenzione
Nello stato dell'arte, l'utilizzo di estratti di Punica granatum (melograno) è noto con riferimento ai settori della cosmesi, degli integratori alimentari e della medicina. In tali settori l'attenzione è principalmente incentrata su estratti dal succo di Punica granatum.
Non sono note dello stato dell'arte applicazioni di estratti di Punica granatum al settore dei fitosanitari.
Ora, il Richiedente ha sorprendentemente constatato che estratti di Punica granatum si rivelano estremamente efficaci nella cura e nella prevenzione di attacchi da parte di agenti biologici a colture e altre specie vegetali.
In particolare, il Richiedente ha riscontrato che un prodotto fitosanitario contenente un estratto di Punica granatum è efficace per inibire l'azione di numerosi patogeni tellurici, fra i quali ad esempio il Fusarium oxysporum, responsabile della fusariosi, una delle principali malattie telluriche.
Vantaggiosamente, l'estratto della presente invenzione è un prodotto innocuo per uomini ed animali domestici, facilmente confezionabile e trasportabile ed a basso o nullo impatto ambientale.
In una forma preferita di realizzazione della presente invenzione, il prodotto fitosanitario secondo l'invenzione contiene un estratto di epicarpo (buccia) di Punica granatum.
In una forma particolarmente preferita di realizzazione della presente invenzione, il prodotto fitosanitario secondo l'invenzione contiene un estratto di epicarpo di Punica granatum fino a 3 mm di spessore.
Infatti, ancora più sorprendentemente, il Richiedente ha trovato che estratti dell'epicarpo di Punica granatum si rivelano particolarmente efficaci nella lotta ai patogeni tellurici.
Tale sorprendente efficacia è da imputarsi all'elevata concentrazione nell'epicarpo di Punica granatum di polifenoli come antocianidine, tannini, acido ellagico e, soprattutto, punicalagina, che si è rivelata la molecola di gran lunga più interessante per la sua intensa attività citotossica.
In questa forma preferita di realizzazione dell'invenzione il contenuto medio di punicalagina è compreso tra 100 e 500 mg per grammo di buccia di Punica granatum.
Vantaggiosamente, in questa forma preferita di realizzazione la materia prima per il prodotto fitosanitario secondo l'invenzione - cioè le bucce di melograno - è ottenibile dagli scarti di lavorazione delle industrie produttrici di succhi di frutta, il che rende i costi di produzione del prodotto secondo l'invenzione particolarmente ridotti.
Ulteriori studi del Richiedente hanno dimostrato che l'efficacia del suddetto estratto di Punica granatum o di epicarpo di Punica granatum è sensibilmente incrementata quando tale estratto è ottenuto mediante uno specifico processo di estrazione che combina l'uso di uno o più solventi e un trattamento a ultrasuoni e che consente in tal modo di concentrare maggiormente le sostanze bioattive.
Lista delle Figure
Figura 1 è un grafico che mostra l'efficacia dell'estratto di Punica granatum nella inibizione di Fusarium oxysporum in funzione della concentrazione di detto estratto.
Figura 2 è un grafico che mostra l'efficacia dell'estratto di Punica granatum nella inibizione di Fusarium oxysporum in funzione del solvente utilizzato per la sua estrazione.
Figura 3 è un grafico che mostra l'efficacia dell'estratto di Punica granatum nella inibizione di Fusarium oxysporum in funzione del processo utilizzato per la sua estrazione.
Figura 4 è un grafico che mette a confronto l'efficacia dell'estratto di Punica granatum e della farina di Brassica carinata nella inibizione di Fusarium oxysporum.
Descrizione dettagliata dell'invenzione
La presente invenzione riguarda un prodotto fitosanitario contenente un estratto di Punica granatum.
In una forma particolarmente preferita dell'invenzione detto prodotto fitosanitario contiene un estratto di epicarpo di Punica granatum.
La presente invenzione riguarda anche un metodo per l'ottenimento di detto prodotto fitosanitario che prevede un particolare processo di estrazione per l'ottenimento del suddetto estratto di Punica granatum.
Nel seguito vengono forniti, a titolo di esempio non limitativo, risultati di prove sperimentali ed esempi di applicazione dell'invenzione, al fine di evidenziarne l'efficacia nella lotta ad agenti biologici, ed in particolare a patogeni tellurici.
1. Efficacia dell'estratto di Punica granatum nell'inibizione di Fusarium oxysporum
Con riferimento alla Figura 1, è illustrata l'efficacia di un estratto di Punica granatum nell'inibire la crescita del fungo tellurico Fusarium oxysporum.
L'estratto di Punica granatum è stato messo su piastre Petri in un substrato PDA (Potato - Dextrose - Agar) a diverse concentrazioni: 0,5%, 1%, 1,5% e 2%.
Una ulteriore piastra Petri conteneva unicamente PDA, senza alcun estratto di Punica granatum (controllo).
Un tassello di 5mm di diametro di inoculo è stato preso da una colonia di Fusarium oxysporum in crescita attiva e posto al centro di ogni piastra. A partire dal terzo giorno è stata misurata la crescita radiale del fungo.
I risultati ottenuti mostrano che anche a basse concentrazioni (0,5%) la crescita radiale del fungo risultava significativamente ridotta.
Tali risultati hanno inoltre mostrato un chiaro "effetto dose" dell'estratto, in quanto l'effetto di inibizione della crescita radiale del fungo cresceva sensibilmente al crescere della concentrazione di estratto ed era massimo alla concentrazione del 2%.
2. Metodo per l'ottenimento dell'estratto di Punica granatum Il metodo innovativo di ottenimento dell'estratto di Punica granatum è stato messo a punto a seguito di prove sperimentali che hanno riguardato:
- l'efficacia di diversi tipi di solvente testati;
- l'effetto degli ultrasuoni sulla concentrazione delle molecole bioattive nell'estratto suddetto.
Nella prima prova, si è andati ad analizzare se i solventi usati per l'estrazione potevano influire sull'efficacia dell'estratto stesso.
L'estratto di Punica granatum alla medesima concentrazione ma ottenuto utilizzando solventi diversi - metanolo, etanolo, acqua, miscela acqua / metanolo / etanolo, propanolo - è stato messo su piastre Petri in un substrato PDA (Potato - Dextrose - Agar).
Una ulteriore piastra Petri conteneva unicamente PDA, senza alcun estratto di Punica granatum (controllo).
Un tassello di 5mm di diametro di inoculo è stato preso da una colonia di
Fusarium oxysporum in crescita attiva e posto al centro di ogni piastra. A partire dal terzo giorno è stata misurata la crescita radiale del fungo.
I risultati ottenuti sono illustrati in Figura 2. Tali risultati mostrano che gli estratti ottenuti utilizzando solventi diversi non mostrano differenze significative. Solo il propanolo sembra essere leggermente meno efficace.
Nella seconda prova si è verificato l'effetto degli ultrasuoni sulle molecole bioattive, ed in particolare sulla concentrazione della punicalagina, ritenuta la molecola maggiormente responsabile della bioattività dell'estratto di Punica granatum. Questa prova era basata sull'idea che un sonicatore fosse in grado di rompere le cellule del tessuto vegetale e far liberare i soluti nell'estratto.
Un estratto di Punica granatum trattato con un sonicatore e un estratto di pari caratteristiche non trattato con il sonicatore sono stati sottoposti ad analisi cromatografica. I risultati hanno mostrato che il rapporto tra l'area dei picchi della punicalagina nell'estratto trattato col sonicatore e quella nell'estratto non trattato col sonicatore e superiore a 2, il che fa presupporre che nell'estratto trattato con il sonicatore, la punicalagina sia presente in una concentrazione maggiore
Sulla base degli esiti delle prove summenzionate, nelle sue linee più generali il processo di estrazione di Punica granatum del metodo per l'ottenimento di un prodotto fitosanitario secondo l'invenzione comprende almeno le fasi di:
- miscelare Punica granatum con un solvente;
- eseguire un trattamento con ultrasuoni;
- eliminare i residui vegetali;
- eliminare il solvente.
L'estratto così ottenuto può essere congelato e poi liofilizzato per il successivo utilizzo.
In una forma preferita di realizzazione dell'invenzione, in cui si intende ottenere un estratto di epicarpo di Punica granatum, il processo prevede una fase preliminare in cui i frutti di Punica granatum sono sbucciati e l'epicarpo (buccia) è selezionata e triturata in piccoli pezzi.
Detto processo può inoltre comprendere opzionalmente prima della congelamento:
- una fase di sterilizzazione;
- una fase di purificazione mediante estrazione in fase solida.
Una ulteriore prova su piastre Petri è stata effettuata per testare l'efficacia del processo di estrazione sopra descritto.
Per effettuare tale prova, detto processo di estrazione è stato realizzato utilizzando i seguenti parametri:
- il frutto di Punica granatum è stato sbucciato e l'epicarpo è stato selezionato e triturato in piccoli pezzi; - sono stati aggiunti alcol etilico nella proporzione di 0,5/1 e acqua nella proporzione di 5/1 dell'epicarpo di Punica granatum;
- solventi ed epicarpo sono stati mescolati per 24 ore con un agitatore a piastra riscaldata (temperatura di circa 30-40 °C);
- è stato eseguito un trattamento con ultrasuoni per 10 minuti a 60 ampere;
- il prodotto è stato nuovamente mescolato in agitatore per circa 2 ore;
- i residui vegetali sono stati eliminati con centrifugazione a 4000 - 5000 giri/min per 10 min;
- il solvente è stato eliminato con un evaporatore a rotazione;
- l'estratto è stato poi sterilizzato con un filtro a 0,45 µm;
- l'estratto è stato purificato mediante estrazione in fase solida eluendo con acetonitrile;
- l'acetonitrile è stato eliminato con un evaporatore centrifugo;
- l'estratto ottenuto è stato congelato a -80 °C;
- il prodotto congelato è stato poi liofilizzato con un liofilizzatore.
I risultati ottenuti sulle piastre Petri e illustrati in Figura 3 mostrano che l'estratto di Punica granatum ottenuto con il processo di estrazione secondo l'invenzione è in grado di ridurre la crescita fungina dell'80%, molto superiore al 39% dell'effetto inibitorio ottenuto senza utilizzare il suddetto processo estrattivo.
3. Efficacia dell'estratto di Punica granatum su semi di pomodoro
È stato valutato l'effetto fitotossico dell'estratto di Punica granatum su semi di pomodoro adagiati su carta bibula in contenitori Petri.
La Tabella 1 mostra la variazione della lunghezza della radichetta neoformata in funzione della concentrazione di detto estratto dopo 8 giorni di osservazione.
La Tabella 2 mostra la percentuale di germinazione dei semi in funzione della concentrazione di detto estratto dopo 8 giorni di osservazione.
Tabella 1
Concentrazione dell'estratto Lunghezza della radichetta di Punica granatum (mm)
0 (controllo) 6,41
0,25% 3,05
0,75% 1,51
1,5% 0,55
2,5% 0,24
Tabella2
Concentrazione dell'estratto Germinazione dei semi (%) di Punica granatum
0 (controllo) 90
0,25% 100
0,75% 100
1,5% 75
2,5% 45
I dati ottenuti hanno evidenziato l' effetto fitotossico dell'estratto di Punica granatum.
I dati ottenuti hanno anche evidenziato che a basse dosi l'estratto di Punica granatum potrebbe avere un effetto stimolante sulla germinazione, che poi diventa reprimente a dosi più elevate.
4. Efficacia dell'estratto di Punica granatum sui batteri Clavibacter michiganensis subsp michiganensis (Cmm) del pomodoro, Pseudomonas syringae pv. aclinidiae (Psa) dell'actinidia e Pseudomonas savastanoi pv. savastanoi (Pss) dell'olivo.
Le prove sono state condotte in vitro su piastre Petri, utilizzando estratto di Punica granatum a concentrazioni di 0,5% e 1%.
Una sospensione di batteri e acqua sterile (1 ml) è stata miscelata a 45 °C con 3 ml di LB (Luria Broth) e sovrapposta a LB medium. Dopo aver raffreddato le piastre sono stati praticati dei buchi (diametro 5 mm) i quali sono poi stati riempiti con estratto di Punica granatum e con acqua (controllo). Le piastre sono state poi incubate e dopo 24 h è stato misurato il diametro di inibizione.
Anche in questo caso i risultati hanno dimostrato che l'estratto di Punica granatum ha avuto una buona attività antibatterica. Ad esempio, in Cmm l'estratto di Punica granatum ha fatto registrare una zona di inibizione che in alcuni casi ha superato i 40 mm.
5. Prova comparativa fra l'estratto di Punica granatum e la farina di Brassica Carinata nell'inibizione di Fusarium oxysporum
La Figura 4 mostra un confronto fra l'efficacia dell'estratto di Punica granatum e quella della farina di Brassica carinata (ricca di glucosinolati), attualmente usata per la "biofumigazioni" dei terreni: nei rilievi eseguiti al 3°, 6° e 9° giorno la crescita micellare in entrambi i casi è stata statisticamente più bassa di quella osservata nel controllo; al 3° e 6° giorno i valori di efficacia dei due agrofarmaci nei confronti di Fusarium oxysporum non erano statisticamente differenti; tuttavia al 9° giorno la crescita micellare nel caso dell'estratto di Punica granatum è stata di 19,83 mm, statisticamente più bassa di quella osservata nel caso di Brassica carinata (27 mm).
Questa prova comparativa dimostra la minore degradabilità dell'estratto di Punica granatum rispetto a Brassica carinata.
Una bassa degradabilità delle sostanze bioattive utilizzate è molto importante perché permette una maggiore persistenza nel terreno e una azione inibente nei confronti dei patogeni presenti nel suolo più prolungata nel tempo, proteggendo così la pianta da rapidi ripopolamenti dei patogeni tellurici.
Questo si spiega per il fatto che rispetto ad altre sostanze biologicamente attive, la punicalagina contenuta nell'estratto di Punica granatum ha un peso molecolare più elevato, quindi maggiore stabilità e più efficacia nel contenimento dei patogeni.
6. Prova in vivo in serra su vasetti contenenti terreno precedentemente infettato con Fusarium oxysporum.
Nella prova in vivo è stata utilizzata una dose di estratto di Punica granatum pari a 0,5%somministrata con trattamenti ogni 7 giorni.
I risultati di questa prova in vivo sono riportati nella Tabella 3.
Tabella 3
Tesi Dose Altezza Lunghezza Peso fresco pianta (cm) radice (cm) pianta (g) Piante non inoculate == 22,0a 17,25a 3,9a non trattate
Piante inoculate == 7,7b 5,0b 0,8b non trattate
Piante inoculate 0,5% 17,0a 16,0a 3,2a trattate
Tali risultati evidenziano come nelle piantine non inoculate con Fusarium oxysporum si sono registrati valori statisticamente simili a quelli delle piantine inoculate con Fusarium oxysporum e trattate con l’estratto di Punica granatum.
Al contrario, i valori relativi alle piantine inoculate con Fusarium oxysporum e non trattate con l’estratto di Punica granatum i valori sono statisticamente diversi, e in misura sensibile.
7. Applicabilità industriale
Il prodotto fitosanitario oggetto della presente invenzione si inserisce nel settore degli agrofarmaci naturali.
Nel caso di utilizzo del solo epicarpo di Punica granatum i costi di produzione possono essere particolarmente contenuti poiché le bucce di melograno potrebbero essere ottenute dagli scarti di lavorazione delle industrie che producono succhi di frutta.
Il prodotto fitosanitario secondo l'invenzione può essere costituito unicamente da estratto di Punica granatum (o di epicarpo di Punica granatum), oppure contenere anche altri componenti adiuvanti.
Esso può essere realizzato in capsule rivestite da una pellicola idrosolubile. Vantaggiosamente è possibile ipotizzare pellicole idrosolubili con spessori differenziati, in modo che il rilascio delle sostanze bioattive sia graduale.
In alternativa, il prodotto secondo l'invenzione può essere sciolto in acqua prima dell'uso e poi versato nel terreno. Esso può essere somministrato prima della semina o dopo la messa in atto della coltura, distribuendo il prodotto attorno alle piante.
È evidente da quanto sopra descritto che l'invenzione raggiunge gli scopi sopra prefissati, in quanto fornisce un prodotto fitosanitario che presenta una maggior efficacia, una minore degradabilità ed una maggiore persistenza nel terreno rispetto ad agrofarmaci di origine naturale di tipo noto.
È inoltre evidente che quanto sopra è stato descritto a titolo esemplificativo e non limitativo e che numerose modifiche e varianti che rientrano nell'ambito della presente invenzione come definito dalle unite rivendicazioni sono alla portata del tecnico del settore.
Claims (10)
- RIVENDICAZIONI 1. Prodotto fitosanitario di origine naturale caratterizzato dal fatto di comprendere almeno un estratto di Punica granatum.
- 2. Prodotto fitosanitario secondo la rivendicazione 1, in cui detto estratto di Punica granatum è un estratto di epicarpo di Punica granatum.
- 3. Prodotto fitosanitario secondo la rivendicazione 2, in cui il contenuto di punicalagina in detto estratto è compreso fra 100 e 500 mg per grammo di epicarpo di Punica granatum.
- 4. Prodotto fitosanitario secondo una qualsiasi delle rivendicazioni precedenti, in cui detto estratto è racchiuso in una pellicola idrosolubile.
- 5. Metodo per l'ottenimento di un prodotto fitosanitario, comprendente un processo di estrazione per ottenere un estratto di Punica granatum, caratterizzato dal fatto che detto processo di estrazione comprende almeno le fasi di: - predisporre Punica granatum; - miscelare detto Punica granatum con uno o più solventi; - sottoporre la miscela così ottenuta a un trattamento a ultrasuoni; - rimuovere i residui vegetali; - rimuovere il solvente.
- 6. Metodo secondo la rivendicazione 5, in cui detto processo di estrazione prevede inoltre, prima della fase di miscelazione con detto solvente, le fasi di: - sbucciare Punica granatum; - selezionare l'epicarpo di Punica granatum; - triturare detto epicarpo di Punica granatum in piccoli pezzi.
- 7. Metodo secondo la rivendicazione 5 o 6, in cui detto processo di estrazione prevede inoltre una fase finale di congelamento e successiva liofilizzazione.
- 8. Metodo secondo una qualsiasi rivendicazione da 5 a 7, in cui detto processo di estrazione comprende inoltre, successivamente alla fase di rimozione di detto solvente, una fase di sterilizzazione.
- 9. Metodo secondo una qualsiasi rivendicazione da 5 a 8, in cui detto processo di estrazione comprende inoltre, successivamente alla fase di rimozione di detto solvente, una fase di purificazione mediante estrazione in fase solida.
- 10. Uso di un prodotto fitosanitario secondo una qualsiasi delle rivendicazioni da 1 a 4 o di un prodotto fitosanitario secondo una qualsiasi delle rivendicazioni da 5 a 9 per la cura e/o la prevenzione da attacchi a colture o altre specie vegetali da parte di agenti biologici, in particolare da parte di patogeni tellurici.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IT001085A ITTO20131085A1 (it) | 2013-12-30 | 2013-12-30 | Prodotto fitosanitario e metodo per l'ottenimento di detto prodotto fitosanitario |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IT001085A ITTO20131085A1 (it) | 2013-12-30 | 2013-12-30 | Prodotto fitosanitario e metodo per l'ottenimento di detto prodotto fitosanitario |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ITTO20131085A1 true ITTO20131085A1 (it) | 2015-07-01 |
Family
ID=50033717
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| IT001085A ITTO20131085A1 (it) | 2013-12-30 | 2013-12-30 | Prodotto fitosanitario e metodo per l'ottenimento di detto prodotto fitosanitario |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| IT (1) | ITTO20131085A1 (it) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IT202000007993A1 (it) * | 2020-04-15 | 2021-10-15 | Domenico Rongai | Impianto per l’ottenimento di un estratto ricco in sostanze bioattive da materiale vegetale e/o scarti vegetali |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005097106A1 (en) * | 2004-03-24 | 2005-10-20 | The Regents Of The University Of California | Purifications of ellagitannins |
| WO2006127832A2 (en) * | 2005-05-24 | 2006-11-30 | Pom Wonderful, Llc | Processes for extracting phytochemicals from pomegranate solids and compositions and methods of use thereof |
| KR20060124927A (ko) * | 2005-06-01 | 2006-12-06 | 주식회사 제닉 | 피부미용 및 상처치료용 수용성 필름 및 그 제조방법 |
| US20080175812A1 (en) * | 2005-07-08 | 2008-07-24 | Seabrook Samuel G | Polymer coatings containing phytochemical agents and methods for making and using same |
| WO2012023134A1 (en) * | 2010-08-15 | 2012-02-23 | Gan Shmuel Foods Ltd. | Compositions comprising natural components for protecting plant products and crops |
-
2013
- 2013-12-30 IT IT001085A patent/ITTO20131085A1/it unknown
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005097106A1 (en) * | 2004-03-24 | 2005-10-20 | The Regents Of The University Of California | Purifications of ellagitannins |
| WO2006127832A2 (en) * | 2005-05-24 | 2006-11-30 | Pom Wonderful, Llc | Processes for extracting phytochemicals from pomegranate solids and compositions and methods of use thereof |
| KR20060124927A (ko) * | 2005-06-01 | 2006-12-06 | 주식회사 제닉 | 피부미용 및 상처치료용 수용성 필름 및 그 제조방법 |
| US20080175812A1 (en) * | 2005-07-08 | 2008-07-24 | Seabrook Samuel G | Polymer coatings containing phytochemical agents and methods for making and using same |
| WO2012023134A1 (en) * | 2010-08-15 | 2012-02-23 | Gan Shmuel Foods Ltd. | Compositions comprising natural components for protecting plant products and crops |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| ALI TEHRANIFAR ET AL: "High potential of agro-industrial by-products of pomegranate (L.) as the powerful antifungal and antioxidant substances", INDUSTRIAL CROPS AND PRODUCTS, ELSEVIER, NL, vol. 34, no. 3, 10 May 2011 (2011-05-10), pages 1523 - 1527, XP028381733, ISSN: 0926-6690, [retrieved on 20110516], DOI: 10.1016/J.INDCROP.2011.05.007 * |
| JINGJING LU ET AL: "Determination of Punicalagin Isomers in Pomegranate Husk", CHROMATOGRAPHIA; AN INTERNATIONAL JOURNAL FOR RAPID COMMUNICATION IN CHROMATOGRAPHY, ELECTROPHORESIS AND ASSOCIATED TECHNIQUES, VIEWEG VERLAG, WI, vol. 68, no. 3-4, 25 June 2008 (2008-06-25), pages 303 - 306, XP019597022, ISSN: 1612-1112 * |
| OSORIO E ET AL: "Biological efficiency of polyphenolic extracts from pecan nuts shell (Carya Illinoensis), pomegranate husk (Punica granatum) and creosote bush leaves (Larrea tridentata Cov.) against plant pathogenic fungi", INDUSTRIAL CROPS AND PRODUCTS, ELSEVIER, NL, vol. 31, no. 1, 1 January 2010 (2010-01-01), pages 153 - 157, XP026777160, ISSN: 0926-6690, [retrieved on 20091103], DOI: 10.1016/J.INDCROP.2009.09.017 * |
| SINGH R P ET AL: "Studies on the Antioxidant Activity of Pomegranate (Punica granatum) Peel and Seed Extracts Using in Vitro Models", JOURNAL OF AGRICULTURAL AND FOOD CHEMISTRY, AMERICAN CHEMICAL SOCIETY, US, vol. 50, no. 1, 17 November 2001 (2001-11-17), pages 81 - 86, XP002251850, ISSN: 0021-8561, DOI: 10.1021/JF010865B * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IT202000007993A1 (it) * | 2020-04-15 | 2021-10-15 | Domenico Rongai | Impianto per l’ottenimento di un estratto ricco in sostanze bioattive da materiale vegetale e/o scarti vegetali |
| WO2021209889A1 (en) * | 2020-04-15 | 2021-10-21 | Domenico Rongai | Method and plant for obtaining an extract rich in bioactive substances from vegetable material and/or vegetal wastes |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP3297432B1 (en) | Use of hydroxyapatite as a carrier of bioactive sustances for treating vascular diseases in plants | |
| CN104381321B (zh) | 一种植物源生物组合物、其制备方法及其在防治葱蛆中的应用 | |
| AU2014255311A1 (en) | A package for plant antimicrobial treatment | |
| Kekuda et al. | Antifungal effect of cow urine extracts of selected plants against Colletotrichum capsici isolated from anthracnose of chilli | |
| CN103444759B (zh) | 一种异硫氰酸酯和苦参碱的复配剂及其应用 | |
| ES2737419T3 (es) | Nueva cepa de Pseudomonas fluorescens y usos de la misma en el control biológico de enfermedades bacterianas o fúngicas | |
| WO2017113029A1 (es) | Composición bactericida en base a una mezcla de bacteriófagos para el control de peste negra en plantas o partes de las mismas, preferentemente nogal, producida por xanthomonas arborícola pv. juglandis; método de preparación y aplicación | |
| KR20140058423A (ko) | 항균 활성을 갖는 펩티드, 동물의 치료 및 예방을 위한 약물 조성물, 식물의 치료 및 예방을 위한 조성물, 상기 펩티드의 용도, 및 패니바실러스 엘기이 오우로피넨시스 추출물의 용도 | |
| KR101627829B1 (ko) | 식선충 진균의 분아포자를 함유하는 소나무 재선충 방제용 조성물 | |
| Elhalag et al. | Efficacy of plant extracts and bio-fertilizers for the control of bacterial wilt and soft rot agents in potato | |
| Abid Mehmood et al. | The multifaceted biocontrol mechanisms of endophytic fungi | |
| KR20090037158A (ko) | 식물 추출물을 포함하는 소나무 재선충 방제제 | |
| ITTO20131085A1 (it) | Prodotto fitosanitario e metodo per l'ottenimento di detto prodotto fitosanitario | |
| Manyi-Loh et al. | Inhibitory and bactericidal activity of selected South African honeys and their solvent extracts against clinical isolates of Helicobacter pylori | |
| EP3357340B1 (en) | An ecological agricultural soil disinfectant composition comprising a mixture of capsicum extract, marigold extract and garlic extract | |
| CN106234480A (zh) | 一种茉莉花白绢病的中草药防治剂及其制备方法 | |
| JP4932737B2 (ja) | 蛇床子の抽出物を含む胞子型微生物の胞子殺菌用組成物 | |
| Janakiraman et al. | Anti–bacterial studies on Peristrophe bicalyculata (Retz.) Nees | |
| Phuong et al. | Nanoemulsion from Piper aduncum, Cymbopogon nardus, and Bacillus thuringiensis to Control Xanthomonas axonopodis pv. allii | |
| RANI et al. | Ecofriendly management of late blight of potato caused by Phytophthora infestans (L) | |
| Irani et al. | Evaluation of in vitro antibacterial and antioxidant activity of nanoemulsions synthesized by Artemisia aucheri Boiss essential oil. | |
| Saikia et al. | Efficacy of organic amendments in combination with the nematicide for management of Meloidogyne incognita in brinjal | |
| KR20090105484A (ko) | 솔잎혹파리 유충 방제용 제제 및 그 제조방법 | |
| Uribe-Lorío et al. | Effect of vermicompost on pepper plants inoculated with Phytophthora capcisi | |
| Chadli et al. | Bactericidal effect of aqueous extracts of the bark of the pomegranate (Punica granatum L.) on bacteria |