JP2000221189A

JP2000221189A - 血液成分の分析方法

Info

Publication number: JP2000221189A
Application number: JP11024479A
Authority: JP
Inventors: Takayoshi Arai; 貴喜新井; Kenichiro Yazawa; 建一郎矢沢; Osamu Seshimoto; 修瀬志本
Original assignee: Fuji Photo Film Co Ltd
Current assignee: Fujifilm Holdings Corp
Priority date: 1999-02-02
Filing date: 1999-02-02
Publication date: 2000-08-11
Anticipated expiration: 2019-02-02
Also published as: JP3990505B2; US6383818B1

Abstract

(57)【要約】【課題】ガラス繊維フィルターを用いて血液を濾
過してもそれによって生じる誤差を除去でき、もって血
液成分を簡便に測定できる分析方法を提供する。【解決手段】上記課題は、血液をガラス繊維フィルタ
ーで濾過して得られた血漿検体または血清検体を分析す
る際に、予め当該ガラス繊維フィルターを用いて濾過し
て得られた血漿または血清の分析値Ｘと標準となる血液
分離方法で得られた血漿または血清の分析値Ｙとの関係
式Ｙ＝ａＸ＋ｂにおけるａとｂを求めておき、当該血漿検体または血清
検体の分析値Ｘ_tから上記式により補正された分析値Ｙ_t
を算出することを特徴とする血液成分の分析方法によっ
て解決される。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、血液をガラス繊維
フィルターで濾過して得られた血漿または血清検料を分
析する際に、ガラス繊維フィルターによって生じる誤差
を補正する方法に関するものである。

【０００２】

【従来の技術】血液中の構成成分例えば代謝産物、蛋白
質、脂質、電解質、酵素、抗原、抗体などの種類や濃度
の測定は通常全血を遠心分離して得られる血漿または血
清を検体として行われている。ところが、遠心分離は手
間と時間がかかる。特に少数の検体を急いで処理したい
ときや、現場検査などには、電気を動力とし、遠心分離
機を必要とする遠心法は不向きである。そこで、濾過に
より全血から血漿や血清を分離する方法が検討されてき
た。

【０００３】この濾過方法には、ガラス繊維濾紙をカラ
ムに充填し、カラムの一方から全血を注入し、加圧や減
圧を行なって他方から血漿や血清を得るいくつかの方法
が公知化されている（特公昭４４−１４６７３号公報、
特開平２−２０８５６５号公報、特開平４−２０８８５
６号公報、特公平５−５２４６３号公報等）。

【０００４】しかし、全血から濾過により自動分析等に
よる測定に必要な量の血漿または血清を得る方法に関し
ては血糖など一部の項目を除いては、いまだ試行の段階
にあり、広く実用化されるに至っていない。

【０００５】そこで、本発明者らは先に、微量な血液で
あっても血漿や血清を効率よく分離しうる血液濾過ユニ
ットとして、濾材にガラス繊維濾紙と微多孔性膜を組み
合わせるとともに濾材の血漿等の出口側にシール部材を
設けて濾過材料の開口面積を狭めた血液濾過ユニットを
完成した（特開平９−１９６９１１号公報）。

【０００６】また、その吸引側に血漿受槽を設けたもの
も既に開発した（特開平９−２７６６３１号公報）。

【０００７】

【発明が解決しようとする課題】臨床分析される血液中
の電解質には、カルシウム、ナトリウム、カリウム等も
対象に含まれている。ところが、本発明者らが市販のガ
ラス繊維フィルターを調べたところ、その中にはこれら
が血液中に溶出して分析誤差を与えるものが複数存在す
ることを見出した。

【０００８】さらに、蛋白、アンモニア態窒素、アルカ
リホスファターゼ等の酵素等も影響を受けることを見出
した。

【０００９】本発明の目的は、ガラス繊維フィルターを
用いて血液を濾過してもそれによって生じる誤差を除去
でき、もって血液成分を簡便に測定できる分析方法を提
供することにある。

【００１０】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記課題
を解決するべく鋭意検討の結果、ガラス繊維フィルター
による電解質、蛋白、アンモニア態窒素、酵素等の誤差
は一次方程式で表されること、および同種のガラス繊維
フィルターであれば現れる誤差が同じになることを見出
した。従って、測定しようとする分析項目についてこの
ガラス繊維フィルターの一次方程式で表される誤差の２
つの係数を予め求めておけば、この一次方程式によって
誤差を補正することができる。

【００１１】本発明は、これらの知見に基づいてなされ
たものであり、血液をガラス繊維フィルターで濾過して
得られた血漿検体または血清検体を分析する際に、予め
当該ガラス繊維フィルターを用いて濾過して得られた血
漿または血清の分析値Ｘと標準となる血液分離方法で得
られた血漿または血清の分析値Ｙとの関係式Ｙ＝ａＸ＋ｂにおけるａとｂを求めておき、当該血漿検体または血清
検体の分析値Ｘ_tから上記式により補正された分析値Ｙ_t
を算出することを特徴とする血液成分の分析方法に関す
るものである。

【００１２】

【発明の実施の形態】ガラス繊維フィルターは密度が
０．０２〜０．５程度、好ましくは０．０３〜０．２程
度、特に好ましくは０.０５〜０.１３程度で、保留粒子
径が０．６〜９μｍ程度、特に１〜５μｍ程度のものが
好ましい。ガラス繊維の表面を、特開平２−２０８５６
５号公報、同４−２０８８５６号公報に記載された様な
方法で、親水性高分子で処理することによって濾過をよ
り速やかに円滑に行なうことができる。また、ガラス繊
維の表面をレクチンで処理することもできる。ガラス繊
維濾紙は複数枚を積層して用いることができる。

【００１３】空間体積あるいは血漿または血清濾過量に
対応する指標として、透水速度が有効である。透水速度
は、入口と出口をチューブに接続できるように絞った濾
過ユニット中に一定面積のガラス繊維フィルターを密閉
保持し、一定量の水を加えて一定圧力で加圧または減圧
したときの、単位面積あたりの濾過量を速度で表したも
のであり、ｍｌ／ｓｅｃ等の単位を持つ。

【００１４】具体例としては、濾過ユニット中に直径２
０ｍｍのガラス繊維フィルターをセットし、その上に１
００ｍｌの注射筒をたてて６０ｍｌの水を入れて自然流
下させ、開始後１０秒と４０秒の間の３０秒間にガラス
繊維フィルター中を通り抜けた水の量をもって透水量と
し、これから単位面積あたりの透水速度を算出する。

【００１５】血漿または血清の濾過に特に適しているの
は透水速度が１．０〜１．３ｍｌ／ｓｅｃ程度のもの
で、例えば、ワットマン社ＧＦ／Ｄ、東洋濾紙ＧＡ−１
００、同ＧＡ−２００等がある。さらに、市販のガラス
繊維濾紙を熱水中で再分散してナイロンネット上で再抄
紙して低密度濾紙（密度約０．０３）を作成することも
でき、これは良好な血漿または血清濾過特性を示す。

【００１６】本発明で使用される血液濾過材料は、ガラ
ス繊維フィルターのみからなるものでもよく、ガラス繊
維フィルターに他の血液濾過材料を組み合わせたもので
あってもよい。ガラス繊維濾紙に組み合わせる他の血液
濾過材料の例として微多孔性膜がある。

【００１７】表面を親水化されており血球分離能を有す
る微多孔性膜は、実質的に分析値に影響を与える程には
溶血することなく、全血から血球と血漿を特異的に分離
するものである。この微多孔性膜は孔径がガラス繊維濾
紙の保留粒子径より小さくかつ０．２μｍ以上、好まし
くは０．３〜５μｍ程度、より好ましくは０．５〜３μ
ｍ程度のものが適当である。また、空隙率は高いものが
好ましく、具体的には、空隙率が約４０％から約９５
％、好ましくは約５０％から約９５％、さらに好ましく
は約７０％から約９５％の範囲のものが適当である。微
多孔性膜の例としてはポリスルホン膜、弗素含有ポリマ
ー膜等がある。

【００１８】好ましい微多孔性膜はポリスルホン膜、酢
酸セルローズ膜等であり、特に好ましいのはポリスルホ
ン膜である。本発明の血液濾過材料においてはガラス繊
維濾紙が血液供給側に配置され、微多孔性膜が吸引側に
配置される。最も好ましい材料は血液供給側からガラス
繊維濾紙、ポリスルホン膜をこの順に積層した積層体で
ある。

【００１９】本発明で用いられる濾過材料は特開昭６２
−１３８７５６〜８号公報、特開平２−１０５０４３号
公報、特開平３−１６６５１号公報等に開示された方法
に従って各層を部分的に配置された接着剤で接着して一
体化することができる。

【００２０】ガラス繊維フィルター層の厚さは、回収す
べき血漿や血清の量とガラス繊維フィルターの密度（空
隙率）及び面積から定められる。分析を乾式分析素子を
用いて複数項目行なう場合の血漿や血清の必要量は１０
０〜５００μｌであり、ガラス繊維フィルターの密度が
０.０２〜０．２程度、面積が１〜５ｃｍ²程度が実用的
である。この場合ガラス繊維フィルター層の厚さは１〜
１０ｍｍ程度、好ましくは２〜８ｍｍ程度である。この
ガラス繊維濾紙は複数枚、例えば２〜１０枚程度、好ま
しくは３〜８枚程度を積層して上記厚さとすることがで
きる。

【００２１】微多孔性膜の厚さは０．０５〜０．５ｍｍ
程度、特に０．１〜０．３ｍｍ程度でよく、通常は１枚
の微多孔性膜を用いればよい。しかしながら、必要によ
り複数枚を用いることもできる。

【００２２】いずれにしても、本発明が適用される血液
濾過材料はガラス繊維フィルター層が容積％で４０％以
上、通常６０％以上のものである。

【００２３】血液濾過が乾式分析用検体の調製として行
われる場合には、本発明者らが先に開発した血液濾過ユ
ニットの形で使用することが好ましい。

【００２４】血液濾過材料はホルダーに入れられる。こ
のホルダーは一般に血液濾過材料を収容する本体と、蓋
体に分けた態様で作製される。通常は、いずれにも少な
くとも１個の開口が設けられていて、一方は血液入口と
して、他方は濾過液出口として、場合により更に吸引口
として使用される。吸引口を別に設けることもできる。
ホルダーが四角形で蓋体を側面に設けた場合には血液入
口と濾過液出口の両方を本体に設けることができる。

【００２５】その場合、血液濾過材料収納部すなわち血
液濾過室の容積は、収納すべき濾過材料の乾燥状態およ
び検体(全血)を吸収し膨潤した時の総体積より大きい必
要がある。濾過材料の総体積に対して収納部の容積が小
さいと、濾過が効率良く進行しなかったり、溶血を起こ
したりする。収納部の容積の濾過材料の乾燥時の総体積
に対する比率は濾過材料の膨潤の程度にもよるが、通常
１０１％〜４００％、好ましくは１１０％〜１５０％、
更に好ましくは１２０％〜１４０％である。具体的には
血漿や血清の必要量との関係で定まるが０．５〜２．５
ｍｌ程度、通常０．６〜２．２ｍｌ程度である。

【００２６】また、体積濾過材料と収納部の壁面との間
は、全血を吸引した時に体積濾過材料を経由しない流路
が出来ないように構成されていることが好ましい。但
し、微多孔性膜で止めうる程度の血球が漏れてきても支
障はない。

【００２７】濾過ユニットは、上記本体に蓋体が取付け
られると、これらの血液入口と吸引口としても使用され
る濾過液出口を除いて全体が密閉構造になる。

【００２８】ホルダーの材料はプラスチックが好まし
い。例えば、ポリスチレン、ポリメタアクリル酸エステ
ル、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリエステル、ナ
イロン、ポリカーボネート等の透明あるいは不透明の樹
脂が用いられる。

【００２９】上記本体と蓋体の取付方法は、接着剤を用
いた接合、融着等如何なる手段によってもよい。この
際、上記本体と蓋体のいずれの周縁が内側に位置しても
よく、あるいは突き合わせ状態であってもよい。また、
上記本体と蓋体をネジ等の手段で組立分解ができる構造
とすることもできる。

【００３０】血液濾過材料の形状に特に制限はないが、
製造が容易なように、円形とすることが望ましい。この
際、円の直径をホルダー本体の内径よりやや大きめと
し、濾過材料の側面から血漿が漏れることを防ぐことが
できる。一方、四角形にすれば作製した血液濾過材料の
切断ロスがなくなるので好ましい。

【００３１】濾過液受槽は濾過液出口から吐出される濾
過液である血漿や血清を受けるものであり、しかも濾過
液出口が濾過液受槽の液面より上に配置されているもの
である。濾過液出口はこの受槽の側壁の上部に設けられ
ていてもよく、あるいは受槽内に起立する管等であって
もよい。濾過液受槽の形状は他の要因、例えばそこから
の分析試料の吸引位置との関係、血液濾過室との関係、
任意に設けられる他部品との関係、等を考慮して種々の
形状とされるが、特段の事情がなければ円筒形、方形等
でよい。底面は平底、擂鉢状、丸底等でよい。受槽の容
積は、乾式分析用試料の調製の場合には、１００〜９０
０μｌ程度、通常２００〜６００μｌ程度、深さは３〜
１２ｍｍ程度、横幅は(直径または辺)５〜１１ｍｍ程度
のものである。受槽における濾過液出口の位置は該出口
の下縁が受槽の設計液面より０．５〜５ｍｍ程度、通常
１〜２ｍｍ程度上方に位置している。濾過液量は血液の
ヘマトクリット値によって変わるがこの設計液面はヘマ
トクリット値が２０〜６０％の血液を濾過したときの液
面である。この濾過液受槽はホルダーと一体であっても
よく、あるいは別体であってもよい。

【００３２】予め関係式Ｙ＝ａＸ＋ｂの係数を求めるた
めに使用されるガラス繊維フィルターは測定しようとす
る血液を濾過する際に使用されるものと同種のものであ
る。上記関係式の係数はガラス繊維フィルターの種類、
銘柄、製造業者、原料、製造方法、構造、物性等によっ
て変化する可能性がある。一方、同一銘柄であれば、特
に原料、製造方法、製造装置が同一であればほぼ同一の
係数となり、特に同一ロット品であれば同一係数とな
る。そこで、要求される分析精度に従い、通常は同一銘
柄品について、特に精度が要求される場合には同一ロッ
ト品について予め係数ａ，ｂを求めておき、血漿検体あ
るいは血清検体の分析値の補正はこのａ，ｂを用いて行
えばよい。多くの場合ａは１であるので、実際にはｂだ
けを求めておいても足りる場合が多い。血液濾過材料が
ガラス繊維フィルターと他の濾過材料との組合せからな
っている場合には、上記の関係式のａとｂはこの組合せ
からなる濾過材料について測定することが好ましい。

【００３３】ａとｂの決定に必要な標準となる血液分離
方法は、血漿または血清の分析対象物の濃度が分離の際
に実質的に影響を受けない、つまり分析対象物の変質や
濃度変化が実質的に無視できる程度のものであり、具体
的には遠心分離法などが利用される。

【００３４】ａとｂの決定は、分析対象物の濃度が異な
る血液について、ガラス繊維フィルターを用いて得られ
た血漿または血清とこの標準となる分離方法で得られた
血漿または血清の分析対象物濃度を測定することによっ
て行うことができる。濃度は測定範囲のなるべく全範囲
をカバーするよう血液を選択することが好ましいが、実
用的観点から選択すればよく、例えば測定範囲の５０％
以上、好ましくは８０％以上カバーできればよい。測定
する血液の数は最少で２点でよいわけであるが、実用的
に許される範囲で数が多いほうがよいことはいうまでも
なく、実際には５〜１０点程度が現実的である。測定点
が３点以上の場合のａ，ｂの決定方法は周知であり、例
えば、測定範囲内の測定下限に近い試料(全血)、測定中
心に近い試料、測定上限に近い試料を準備し、それぞれ
半分を遠心分離して測定値Ｙ₁，Ｙ₂，Ｙ₃を得る。別に
本発明に記載のガラスフィルターにより濾過した血漿
（あるいは血清）を測定し、Ｘ，Ｘ₂，Ｘ₃を得る。以上
の値を用いて最小二乗法によりＹ＝ａＸ＋ｂのａ，ｂ値
を得る。

【００３５】本発明の方法は乾式分析、湿式分析を問わ
ず適用できるが、乾式分析素子を用いた乾式分析法が特
に好ましい。

【００３６】乾式分析素子の基本構成は、水不透過性支
持体の上に、親水性ポリマー層および多孔性展開層が、
この順に積層されて成る。

【００３７】多孔性展開層は、水性の検体に含有されて
いる成分を実質的に偏在させることなしに平面的に拡
げ、単位面積当りほぼ一定量の割合で親水性ポリマー層
に供給する機能を有する層であり、これまでドライケミ
ストリー分析要素に使われている展開層として、公知の
非繊維質及び繊維質の全ての多孔性材料を用いることが
できる。具体的には特開昭４９−５３８８８に開示され
ているメンブランフィルター（ブラッシュドポリマー）
に代表される非繊維性等方的微多孔質媒体層、特開昭５
５−９０８５９等に開示されたポリマーミクロビーズが
水不膨潤性の接着剤で点接触状に接着されて成る連続空
隙含有三次元格子粒状構造物層に代表される非繊維性多
孔性層、特開昭５５−１６４３５６、同５７−６６３５
９等に開示された織物布地からなる多孔性層、同６０−
２２２７６９等に開示された編物布地からなる層等を挙
げることができるが、これらに限定されるものではな
い。

【００３８】例えば、セルロース誘導体（ＤＡＣ，ＴＡ
Ｃ，ＮＣ，ＨＭＣ（ヒドロキシメチルセルロース），Ｈ
ＥＣ（ヒドロキシエチルセルロース））の多孔質膜、ポ
リエチレン、ポリプロピレン、ポリスチレン、塩化ビニ
ール等のエチレン重合体または共重合体で作られた多孔
質膜、ポリエチレンテレフタレート、ポリカーボネー
ト、ポリスルホン等で作られた多孔質膜、アクリル酸や
メタクリル酸、これらのエステルのビニル重合体または
共重合体から成る多孔質膜、ナイロン、ポリアミド、ポ
リウレタン等の縮合重合体の多孔膜、ガラス粒子、けい
藻土等の無機材料微粒子を少量のポリマーで結合させて
作られた多孔性膜、ポリテトラフルオロエチレンで作ら
れた多孔性膜、濾紙、ガラス繊維濾紙等がある。

【００３９】展開層は、１層だけに限定する必要はな
く、特開昭６１−４９５９、同６２−１３８７５６、同
６２−１３５７５７、同６２−１３８７５８等に開示さ
れている様に、２層以上の層を重ねて用いることができ
る。

【００４０】展開層中には、検体の展開を促進するため
に、ノニオン、アニオン、カチオンもしくは両性の界面
活性剤を含ませることができる。

【００４１】また、展開性をコントロールする目的で、
親水性のポリマー等の展開制御剤を含ませることができ
る。

【００４２】更に、目的とする検出反応を促進する為
の、あるいは干渉、妨害反応を低減、阻止する為の各種
試薬、もしくは試薬の１部を含ませることができる。

【００４３】展開層の厚さは、２０〜２００μｍ、好ま
しくは５０〜１７０μｍ、更に好ましくは８０〜１５０
μｍである。

【００４４】親水性ポリマー層は通常分析に必要な試薬
の少なくとも１部を含んでおり、その場合、この層は試
薬層と称される。この層には、これにはこれまで乾式分
析素子に使われている公知の水に可溶性、膨潤性、親水
性の各種ポリマーを用いることができる。水吸収時の膨
潤率が３０℃で約１５０％から約２０００％、好ましく
は約２５０％から約１５００％の範囲の天然又は合成親
水性ポリマーを使用することができ、具体的には、特開
昭５９−１７１８６４、同６０−１０８７５３等に開示
されたゼラチン（例えば、酸処理ゼラチン、脱イオンゼ
ラチン等）、ゼラチン誘導体（例えば、フタル化ゼラチ
ン、ヒドロキシアクリレートグラフトゼラチン等）、ア
ガロース、プルラン、プルラン誘導体、ポリアクリルア
ミド、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン等
を挙げることができるが、これらに限定されるものでは
ない。

【００４５】親水性ポリマー層に代えて、ポリマー多孔
質膜等を用いることもできる。

【００４６】親水性ポリマー層の厚さは、乾燥時に約１
μｍ〜約１００μｍ、好ましくは約３μｍ〜約５０μ
ｍ、特に好ましくは約５μｍ〜約３０μｍであり、実質
的に透明であることが好ましい。

【００４７】親水性ポリマー層中には、目的とする反応
を促進する、もしくは干渉、妨害反応を防止、低減する
ための各種試薬もしくは試薬の１部を含ませることがで
きる。

【００４８】水不透過性支持体としては、これまで乾式
分析素子に使われている公知の水不透過性の支持体を用
いることができる。具体的には、ポリエチレンテレフタ
レート、ビスフェノールＡのポリカーボネート、ポリス
チレン、セルロースエステル（例えば、セルロースジア
セテート、セルローストリアセテート、セルロースアセ
テートプロピオネート等）等から成る厚さ約５０μｍ〜
１ｍｍ、好ましくは約８０μｍ〜約３００μｍの透明フ
イルムを用いることができる。

【００４９】支持体は、通常光透過性のものを用いる
が、展開層側から測定をする場合には、着色されていて
も、もしくは光不透過性であっても良い。

【００５０】支持体の表面には、必要により公知の下塗
層もしくは接着層を設けて、親水性ポリマー層との接着
を強固にすることができる。

【００５１】乾式分析素子には分析項目等に応じて各種
の層が組込まれる。例えば、検出層、吸水層、光反射
層、光遮蔽層等である。

【００５２】乾式分析素子は分析に必要な試薬の全てを
予め含むものであるが、本発明者らが先に開発した、試
薬の１部または全部を分析時に添加するものであっても
よい。

【００５３】検体を分析するにあたって、上記の係数
ａ，ｂを予めアナライザーにキーボード入力しておいた
り、バーコード記録してバーコード読取り機で読取らせ
補正したり、あるいはカード発行機により磁気記録して
おいて、アナライザーのカード読取装置で読取らせて補
正させることが好ましい。

【００５４】

【実施例】［実施例１］図１〜３に示す血液濾過ユニッ
トを作製した。図１は血液濾過ユニットを組み立てた状
態の縦断面図、図２は血液濾過ユニットを構成する蓋体
の平面図、図３は血液濾過ユニットを構成する蓋体の底
面図である。

【００５５】この血液濾過ユニットは、図１に示すよう
に、ホルダー１を有し、このホルダー１は、ホルダー本
体１０と、その上部に密着固定された蓋体２０とからな
っている。

【００５６】このホルダー本体１０はハイインパクトポ
リスチレン樹脂で形成されたもので、血液濾過材料を構
成するガラス繊維濾紙３０を収容するガラス繊維濾紙収
容室１１が形成されるとともに、このガラス繊維濾紙収
容室１１の上部において、血液濾過材料を構成する微多
孔性膜としてのポリスルホン多孔性膜４０を収容する微
多孔性膜収容室１２が形成されている。この微多孔性膜
収容室１２は、下端においてガラス繊維濾紙収容室１１
より大きい径の段部１９が形成されており、この段部１
９にポリスルホン多孔性膜４０が載置された状態で収容
される。また、この段部１９の外周縁から、上方に斜め
に立ち上がった傾斜部１３が形成されており、傾斜部１
３の上縁から外方にフランジ１４が形成されている。

【００５７】一方、ホルダー本体１０の底部には、周縁
よりやや内側にガラス繊維濾紙載置部１５を設けてそこ
から浅いロート状円板部１６が連接され、このロート状
円板部１６の中心から下方にノズル状血液入口１７が延
設されている。このノズル状血液入口１７には、血液濾
過の際、吸引チップ（図示せず）が装着される。上記ガ
ラス繊維濾紙載置部１５は、ガラス繊維濾紙３０の下面
をホルダー本体１０のロート状円板部１６から隔離させ
て空間１８を形成するスぺーサとしても機能している。

【００５８】前記蓋体２０は、外側から、同心円の円筒
状をした外壁２１、内壁２２及び濾過した血漿を貯溜す
るためのカップ２３が形成されている。前記外壁２１
は、上方へ行くに従って外側へ広がるテーパー状に形成
されており、この外壁２１の傾斜角は前記傾斜部１３の
傾斜角と同一であり、また、外径が傾斜部１３の内径と
同一となっている。すなわち、外壁２１が傾斜部１３に
密着状態で嵌合するようになっている。また、外壁２１
の周縁部には外方に突出するフランジ２４が形成され、
このフランジ２４がホルダー本体１０のフランジ１４と
超音波で接着されている。このフランジ２４の底面(フ
ランジ１４と接着する面)には、図３に示すように、接
着以前の段階において、接着の際超音波エネルギーをそ
こに集めて液密性を充分に確保した状態で接着できるよ
うに、リブ２５が形成されている（なお、接着後は溶融
消滅している）。

【００５９】また、蓋体２０の底面には、図３に示すよ
うに、１２個の突起２６が略均等な間隔で形成されてお
り、この突起２６により、ポリスルホン多孔性膜４０が
密着するのを防止している。

【００６０】蓋体２０の内壁２２とカップ２３との間に
は、煙突状の血漿通路２７が蓋体２０を貫通して上方に
突設されており、この血漿通路２７の上方には、血漿の
噴出を阻止する庇２８が水平方向に形成されている。こ
の庇２８は、図２に示されるように、大小２つの半円を
組み合わせた形状をしており、内側の半円は血漿通路２
７の外壁と一致している。また、血漿通路２７の上端内
側部分は、カップ２３方向へ斜めになった流入部２９が
形成され、濾過されて来た血漿２７がカップ２３内に容
易に流れ込むようにようになっていた。

【００６１】なお、以上のような血液濾過ユニットにお
いて、ガラス繊維濾紙収容室１１の直径は２０．１ｍ
ｍ、同深さ５．９ｍｍ、微多孔性膜収容室１２の下端に
おける直径２３．０ｍｍ、同上端における直径２２．５
ｍｍ、同深さ２．１０ｍｍ、外壁２１の外周面下端の直
径２０．９８ｍｍ、同下面からフランジ２４までの高さ
２ｍｍ、内壁２２の内径１５．０ｍｍ、カップ２３の内
径７．５ｍｍ、ガラス繊維濾紙３０の直径２０．０ｍ
ｍ、同厚さ０．９１ｍｍのものを６枚、ポリスルホン多
孔性膜４０の直径２０．９ｍｍ、同厚さ１５０μｍであ
る。

【００６２】以上の血液濾過ユニットを用いて、試験を
行った。

【００６３】テルモ社ベノジェクトII真空採血管ＶＰ−
Ｈ０５０（ヘパリンＮａ）で血液を５ｍｌ採血した。

【００６４】被検体を男女計５人について用意し、各々
の血液５ｍｌを４〜５回静かに転倒混和し均一にした。

【００６５】市販２ｍｌスポイトを用いて、２ｍｌを２
ｍｌの遠心用サンプルチューブに分注した。その２ｍｌ
血液を遠心機（ＣＦＭ−２００，岩城硝子Ｋ.Ｋ.）で３
分、１２０００ｒｐｍ血漿を分離し、すみやかに、Ａ／
Ｔ（ＥＡ−０６Ｔ）のサンプル容器に２００μｌを採取
した。

【００６６】Ａ／Ｔ測定器にてＮａ及びＣｌの測定値
（Ｙ_Na，Ｙ_Cl）を得た。

【００６７】一方、残りの３ｍｌの血液を前記の血液濾
過ユニットを用いて濾過し、３５０μｌの血漿を採取し
た。この血漿をＡ／Ｔ測定器にて、Ｎａ及びＣｌの測定
値（Ｘ_Na，Ｘ_Cl）を得た。

【００６８】各被験者について下記表１の結果を得た。

【００６９】

【表１】

【００７０】上記乖離値の最下欄の数字は関係式Ｙ＝ａ
Ｘ＋ｂの係数ｂ（ａ≒１）に相当するものであり、これ
が下記の式で示される補正値になる。Ｎａの補正値：Ｘ_Na−Ｙ_Na＝Ｎａ補正値（ｍｅｑ／Ｌ）Ｃｌの補正値：Ｘ_Cl−Ｙ_Cl＝Ｃｌ補正値（ｍｅｑ／Ｌ）

【００７１】次に、この補正後の確認を行った。ヘパリ
ン採血血液５ｍｌを３検体用意した。

【００７２】前記の血液濾過ユニットを用いて３ｍｌの
血液を濾過し、３５０μｌの血漿を得た。

【００７３】富士ドライケムシステムＦＤＣ−８００と
電解質分析素子（Ｎａ−Ｋ−ＣＬ，富士写真フィルム
(株)）を用いて比較測定をした。未補正測定値：内蔵演算式の変更はせずに、測定値（Ａ
_Na（ｍＥｑ／Ｌ））を得た。補正処理測定値：内蔵演算式に前記の補正値を導入し
て、その後に測定値（Ｂ_Na(ｍＥｑ／Ｌ)）を得た。

【００７４】得られた結果を表２に示す。

【００７５】

【表２】

【００７６】確認された補正量は、であった。

【００７７】［実施例２］実施例１と同じ血液濾過ユニ
ットおよび遠心機を用いて病院外来患者血５０検体の血
液を分離し、各血漿を得た。

【００７８】この血漿を富士ドライケムシステムＦＤＣ
−５０００と総蛋白分析スライド（ＴＰ−Ｐ）を用いて
測定した。

【００７９】得られた結果を表３に示す。

【００８０】

【表３】

【００８１】また、表３より、生化学分析項目ＴＰの平
均補正値として−０．２２３が得られた。５０検体より
得たそれぞれの遠心測定値に補正値を加算して得た値と
ＰＦ値とから補正式を作成した。未知全血検体のＴＰ測
定に対する補正式Ｙ＝０．９８３９Ｘ＋０．３４７５を
得た。有効な結果を得ることが出来た。複数検体を用い
てこの補正値が有効であることが確認できた（図４参
照）。

【００８２】

【発明の効果】本発明により、血液をガラス繊維フィル
ターで濾過して目的成分項目を簡便かつ正確に測定する
ことができる。

【図面の簡単な説明】

【図１】本発明の実施例で使用した血液濾過ユニット
の縦断面図である。

【図２】上記血液濾過ユニットを構成する蓋体の組み
立てる前の状態の平面図である。

【図３】上記血液濾過ユニットを構成する蓋体の組み
立てる前の状態の底面図である。

【図４】補正値が単体の相関係数を示すグラフであ
る。

【符号の説明】１０…ホルダー本体１１…ガラス繊維濾紙収容室１２…微多孔性膜収容室１３…傾斜部１４…フランジ１５…ガラス繊維濾紙載置部１６…ロート状円板部１７…ノズル状血液入口１９…段部２０…蓋体２１…外壁２２…内壁２３…カップ２４…フランジ２５…リブ２６…突起２７…血漿通路２８…庇２９…流入部３０…ガラス繊維濾紙４０…ポリスルホン多孔性膜（微多孔性膜）

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者瀬志本修埼玉県朝霞市泉水三丁目11番46号富士写真フイルム株式会社内Ｆターム(参考） 2G045 AA01 AA11 BA13 BB05 BB10 CA26 DB09 DB16 HA12 JA02

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】血液をガラス繊維フィルターで濾過して
得られた血漿検体または血清検体を分析する際に、予め
当該ガラス繊維フィルターを用いて濾過して得られた血
漿または血清の分析値Ｘと標準となる血液分離方法で得
られた血漿または血清の分析値Ｙとの関係式Ｙ＝ａＸ＋ｂにおけるａとｂを求めておき、当該血漿検体または血清
検体の分析値Ｘ_tから上記式により補正された分析値Ｙ_t
を算出することを特徴とする血液成分の分析方法