JP2000236869A - 細胞培養用マルチウェルプレート - Google Patents
細胞培養用マルチウェルプレートInfo
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M23/00—Constructional details, e.g. recesses, hinges
- C12M23/02—Form or structure of the vessel
- C12M23/12—Well or multiwell plates
-
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 細胞培養用のマルチウェルプレート上で細胞
培養する際に、培養中に培養液に生じる液の蒸発を少な
くし、実験の精度を高めることを目的とする。 【解決手段】 培養用のウェルの並びの外周部に蒸発調
節用の液体を入れるための区画を持つ細胞培養用プレー
ト。
培養する際に、培養中に培養液に生じる液の蒸発を少な
くし、実験の精度を高めることを目的とする。 【解決手段】 培養用のウェルの並びの外周部に蒸発調
節用の液体を入れるための区画を持つ細胞培養用プレー
ト。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明はバイオテクノロジー
等の分野で使用される細胞培養用の容器で、特に一つの
容器内に多数の独立した細胞を培養するための区画を有
するマルチウェルプレートに関するものである。
等の分野で使用される細胞培養用の容器で、特に一つの
容器内に多数の独立した細胞を培養するための区画を有
するマルチウェルプレートに関するものである。
【０００２】
【従来の技術】細胞培養用マルチウェルプレートは、通
常、溶液ｐＨの調製のためのガス交換が可能な用に、培
養器本体と、蓋とは密着せず、隙間が作られている。こ
の隙間の存在はｐＨを安定させるために必要なものであ
るが、当然、目的外の水分蒸発を誘起させる。この種の
細胞培養は、通常、３７℃のインキュベーター中で何日
間も培養される場合が多く、培養液などの溶液の水分の
蒸発が生じるため、それを防ぐために多くの場合、培養
用インキュベーターは、培養器を収める棚の最下層に、
蒸留水などを多量に入れられるようになっており、常
時、水蒸気を発生させる工夫がされている。
常、溶液ｐＨの調製のためのガス交換が可能な用に、培
養器本体と、蓋とは密着せず、隙間が作られている。こ
の隙間の存在はｐＨを安定させるために必要なものであ
るが、当然、目的外の水分蒸発を誘起させる。この種の
細胞培養は、通常、３７℃のインキュベーター中で何日
間も培養される場合が多く、培養液などの溶液の水分の
蒸発が生じるため、それを防ぐために多くの場合、培養
用インキュベーターは、培養器を収める棚の最下層に、
蒸留水などを多量に入れられるようになっており、常
時、水蒸気を発生させる工夫がされている。
【０００３】こうした水分の蒸発はマルチウェルプレー
トに限ったことではなく、細胞培養用のシャーレやフラ
スコにおいても常に発生していることであるが、シャー
レやフラスコは培養器本体に培養区画は通常一つしか存
在せず、シャーレやフラスコの培養液の表面上で蒸発が
発生する部分は存在するが、培養器全体として見た場合
は均一化されていることになる。これに対してマルチウ
ェルプレートは一つの容器内に複数の培養区画が存在す
るため、水分蒸発の容器内のバラツキがシャーレやフラ
スコのように均一化されずそのままウェルごとの差とな
る。従って、シャーレやフラスコではさほど問題になら
なかった表面からの水分の蒸発は、マルチウェルプレー
トにおいては大きな問題となる。
トに限ったことではなく、細胞培養用のシャーレやフラ
スコにおいても常に発生していることであるが、シャー
レやフラスコは培養器本体に培養区画は通常一つしか存
在せず、シャーレやフラスコの培養液の表面上で蒸発が
発生する部分は存在するが、培養器全体として見た場合
は均一化されていることになる。これに対してマルチウ
ェルプレートは一つの容器内に複数の培養区画が存在す
るため、水分蒸発の容器内のバラツキがシャーレやフラ
スコのように均一化されずそのままウェルごとの差とな
る。従って、シャーレやフラスコではさほど問題になら
なかった表面からの水分の蒸発は、マルチウェルプレー
トにおいては大きな問題となる。
【０００４】実際にマルチウェルプレートで培養する上
においては、一番外側のウェルの乾燥が最も大きくなっ
ており、特にウェルが６×８列並んでいる４８ウェル、
８×１２列並んでいる９６ウェルの形状では元々のウェ
ルに入る溶液の量が少ないので、少量の蒸発でも全体の
ウェル容量に対する影響は大きいものとなっている。ま
た４８ウェルや９６ウェルのプレートは、中心部はウェ
ルが多数存在するので蒸発した水分がプレートの外に逃
げにくく、端とは逆に内容物が蒸発しにくくなってお
り、そのためにプレート全体として内容量の差が大きく
なる傾向にある。こうした溶液量の誤差は、細胞培養の
後、ある種の薬品を加えて細胞の動態を観察する等の操
作を行う際、試薬濃度の誤差を生ずる形になり、実験結
果に重大な疑義を生ずることとなる。従って、厳密な実
験者においては、培養は通常通りすべてのウェルを用
い、実際の測定には最外周にある３６ウェルを除外し、
９６ウェルプレートを６０ウェルプレートとみなして使
用する研究者も多数存在する。
においては、一番外側のウェルの乾燥が最も大きくなっ
ており、特にウェルが６×８列並んでいる４８ウェル、
８×１２列並んでいる９６ウェルの形状では元々のウェ
ルに入る溶液の量が少ないので、少量の蒸発でも全体の
ウェル容量に対する影響は大きいものとなっている。ま
た４８ウェルや９６ウェルのプレートは、中心部はウェ
ルが多数存在するので蒸発した水分がプレートの外に逃
げにくく、端とは逆に内容物が蒸発しにくくなってお
り、そのためにプレート全体として内容量の差が大きく
なる傾向にある。こうした溶液量の誤差は、細胞培養の
後、ある種の薬品を加えて細胞の動態を観察する等の操
作を行う際、試薬濃度の誤差を生ずる形になり、実験結
果に重大な疑義を生ずることとなる。従って、厳密な実
験者においては、培養は通常通りすべてのウェルを用
い、実際の測定には最外周にある３６ウェルを除外し、
９６ウェルプレートを６０ウェルプレートとみなして使
用する研究者も多数存在する。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、マルチウェ
ルプレート上で細胞培養する際に、培養中に培養液に生
じる液の蒸発を少なくすることを目的とし、種々の検討
を加えた結果、本発明に至った。
ルプレート上で細胞培養する際に、培養中に培養液に生
じる液の蒸発を少なくすることを目的とし、種々の検討
を加えた結果、本発明に至った。
【０００６】
【課題を解決するための方法】すなわち本発明は、細胞
培養用の区画を多数持つ細胞培養用のマルチウェルプレ
ートで培養用のウェルの並びの外周部に蒸発調節用の液
体を入れるための区画を持つことを特徴とする細胞培養
用マルチウェルプレートである。
培養用の区画を多数持つ細胞培養用のマルチウェルプレ
ートで培養用のウェルの並びの外周部に蒸発調節用の液
体を入れるための区画を持つことを特徴とする細胞培養
用マルチウェルプレートである。
【０００７】
【発明の実施の形態】マルチウェルプレートにおいて細
胞培養区画である各ウェルからの蒸発を制御するため
に、細胞を培養する区画の外側に水を入れる区画を用意
し（図１）、培養区画であるウェルの外側に蒸発調節用
の水がある状態にすることで、外周ウェルからの水分蒸
発の程度を抑える。培養区画の外側部分に供給する水
は、細胞培養に取って有害なものであってはならない。
即ち、雑菌等が繁殖してはならず、更に水が培養ウェル
に混入するようなことが起こらないことが重要である。
そのような条件を満足するためには、ウェルの外周部に
水分が存在し、かつ、その水分が液状でなければ可能と
なる。
胞培養区画である各ウェルからの蒸発を制御するため
に、細胞を培養する区画の外側に水を入れる区画を用意
し（図１）、培養区画であるウェルの外側に蒸発調節用
の水がある状態にすることで、外周ウェルからの水分蒸
発の程度を抑える。培養区画の外側部分に供給する水
は、細胞培養に取って有害なものであってはならない。
即ち、雑菌等が繁殖してはならず、更に水が培養ウェル
に混入するようなことが起こらないことが重要である。
そのような条件を満足するためには、ウェルの外周部に
水分が存在し、かつ、その水分が液状でなければ可能と
なる。
【０００８】そのような状況を生み出すためには、ウェ
ルの最外周に配する水分がゲル状であれば可能となる。
ゲルであれば、水分蒸発に関しては、液状で存在するよ
りは若干蒸発量が低くなるが、プレートの移動や、炭酸
ガス培養器からの出し入れの際にこぼれたり、他の肝心
のウェルに混入して汚染を引き起こすことが無くなる。
さらにゲルに個体の抗菌成分を混ぜたりすることにより
ゲル自体の汚染を防ぐことが可能となるばかりでなく、
長期培養時に発生しがちな、プレート外側から、プレー
ト面を伝っての雑菌のプレート培養区画への浸入を防ぐ
ことが可能となる。
ルの最外周に配する水分がゲル状であれば可能となる。
ゲルであれば、水分蒸発に関しては、液状で存在するよ
りは若干蒸発量が低くなるが、プレートの移動や、炭酸
ガス培養器からの出し入れの際にこぼれたり、他の肝心
のウェルに混入して汚染を引き起こすことが無くなる。
さらにゲルに個体の抗菌成分を混ぜたりすることにより
ゲル自体の汚染を防ぐことが可能となるばかりでなく、
長期培養時に発生しがちな、プレート外側から、プレー
ト面を伝っての雑菌のプレート培養区画への浸入を防ぐ
ことが可能となる。
【０００９】
【実施例】以下の実施例で本発明の効果を示す。 （実施例１）細胞培養用の９６ウェルのマルチウェルプ
レートの最外周のウェルの外側に溝を作り、その中に滅
菌済みの蒸留水をを満たす。このプレートに１０％ウシ
胎児血清含有ダルベッコ改変イーグル培地を４００μＬ
入れ、炭酸ガスインキュベーターで１週間保存。１週間
後各ウェルの培地量を計測した。 （実施例２）実施例１で用いたマルチウェルプレートの
ウェルの外側に設けた溝にゼラチンを蒸留水に溶かした
ものをいれ、冷蔵庫で冷却することにでゲル化させた。
実施例１と同じように１０％ウシ胎児血清含有ダルベッ
コ改変イーグル培地を４００μＬ入れ、炭酸ガスインキ
ュベーターで１週間保存。１週間後各ウェルの培地量を
計測した。
レートの最外周のウェルの外側に溝を作り、その中に滅
菌済みの蒸留水をを満たす。このプレートに１０％ウシ
胎児血清含有ダルベッコ改変イーグル培地を４００μＬ
入れ、炭酸ガスインキュベーターで１週間保存。１週間
後各ウェルの培地量を計測した。 （実施例２）実施例１で用いたマルチウェルプレートの
ウェルの外側に設けた溝にゼラチンを蒸留水に溶かした
ものをいれ、冷蔵庫で冷却することにでゲル化させた。
実施例１と同じように１０％ウシ胎児血清含有ダルベッ
コ改変イーグル培地を４００μＬ入れ、炭酸ガスインキ
ュベーターで１週間保存。１週間後各ウェルの培地量を
計測した。
【００１０】（比較例）市販の細胞培養用９６ウェルの
マルチプレート（住友ベークライト製、ＭＳ−３０９６
Ｆ）の各ウェルに１０％ウシ胎児血清含有ダルベッコ改
変イーグル培地を４００μＬ入れ、実施例同様に炭酸ガ
スインキュベーターで保存、１週間後各ウェルの培地量
を計測した。
マルチプレート（住友ベークライト製、ＭＳ−３０９６
Ｆ）の各ウェルに１０％ウシ胎児血清含有ダルベッコ改
変イーグル培地を４００μＬ入れ、実施例同様に炭酸ガ
スインキュベーターで保存、１週間後各ウェルの培地量
を計測した。
【００１１】 中央部 外周部 外周部／中央部 実施例１ ３７７ ３３１ ８７．８％ 実施例２ ３７６ ３０７ ８１．６％ 比較例 ３７６ ２５２ ６７．１％ 以上の結果のように、比較例で３０％以上の容量の水分
が失われていたものが１５〜２０％の改善が見られる。
現実問題としては、培養液は２〜３日毎に交換されるた
め、１週間も 放置されることは少なく、外周部／中央
部の比率は更に１００％に近づくものとなる。
が失われていたものが１５〜２０％の改善が見られる。
現実問題としては、培養液は２〜３日毎に交換されるた
め、１週間も 放置されることは少なく、外周部／中央
部の比率は更に１００％に近づくものとなる。
【００１２】
【発明の効果】本発明の、培養用のウェルの並びの外周
部に蒸発調節用の液体を入れるための区画を持つ細胞培
養用マルチウェルプレートでもって細胞培養を実施する
と、最外周の培養ウェルからの水分蒸発の軽減が可能と
なり、培養区画全体の溶液量の均一性を高くすることが
可能となった。
部に蒸発調節用の液体を入れるための区画を持つ細胞培
養用マルチウェルプレートでもって細胞培養を実施する
と、最外周の培養ウェルからの水分蒸発の軽減が可能と
なり、培養区画全体の溶液量の均一性を高くすることが
可能となった。
【図１】蒸発調整用の区画を持つマルチウェルプレート
の斜視図
の斜視図
【図２】蒸発調整用の区画を持つマルチウェルプレート
の断面図
の断面図
１．培養用期 ２．培養区画、ウェル ３．蒸発調整用区画
Claims (2)
- 【請求項１】 細胞培養用の区画を多数持つマルチウェ
ルプレートで培養用のウェルの並びの外側部に蒸発調節
用の液体を入れるための区画を持つことを特徴とする細
胞培養用マルチウェルプレート。 - 【請求項２】 蒸発調整用の液体がゲル状になっている
請求項１記載の細胞培養用マルチウェルプレート。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3963199A JP2000236869A (ja) | 1999-02-18 | 1999-02-18 | 細胞培養用マルチウェルプレート |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3963199A JP2000236869A (ja) | 1999-02-18 | 1999-02-18 | 細胞培養用マルチウェルプレート |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2000236869A true JP2000236869A (ja) | 2000-09-05 |
Family
ID=12558455
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3963199A Pending JP2000236869A (ja) | 1999-02-18 | 1999-02-18 | 細胞培養用マルチウェルプレート |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2000236869A (ja) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2008111035A3 (en) * | 2007-03-13 | 2008-11-06 | Trinity College Dublin | A substance and a device |
| JP2013517809A (ja) * | 2010-01-28 | 2013-05-20 | ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ ミシガン | 懸滴装置、懸滴システム、および／または懸滴方法 |
| KR101434037B1 (ko) * | 2012-10-18 | 2014-08-25 | 삼성전기주식회사 | 세포 칩 및 세포 칩 보관 용기 |
| JP2017517000A (ja) * | 2014-06-02 | 2017-06-22 | シーホース バイオサイエンス インコーポレイテッド | 生物試料分析用の単一列マイクロプレートシステム及び搬送体 |
| EP3878937A1 (en) | 2020-03-12 | 2021-09-15 | Ricoh Company, Ltd. | Drying suppression device and cell culture kit |
-
1999
- 1999-02-18 JP JP3963199A patent/JP2000236869A/ja active Pending
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2008111035A3 (en) * | 2007-03-13 | 2008-11-06 | Trinity College Dublin | A substance and a device |
| JP2010521148A (ja) * | 2007-03-13 | 2010-06-24 | プロウボウスト・フェロウズ・アンド・スカラーズ・オブ・ザ・カレッジ・オブ・ザ・ホリー・アンド・アンデバイデッド・トリニティ・オブ・クイーン・エリザベス・ニア・ダブリン | 物質及び器具 |
| US8337785B2 (en) | 2007-03-13 | 2012-12-25 | The Provost, Fellows And Scholars Of The College Of The Holy And Undivided Trinity Of Queen Elizabeth, Near Dublin | Substance and a device |
| JP2013517809A (ja) * | 2010-01-28 | 2013-05-20 | ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ ミシガン | 懸滴装置、懸滴システム、および／または懸滴方法 |
| KR101434037B1 (ko) * | 2012-10-18 | 2014-08-25 | 삼성전기주식회사 | 세포 칩 및 세포 칩 보관 용기 |
| JP2017517000A (ja) * | 2014-06-02 | 2017-06-22 | シーホース バイオサイエンス インコーポレイテッド | 生物試料分析用の単一列マイクロプレートシステム及び搬送体 |
| EP3878937A1 (en) | 2020-03-12 | 2021-09-15 | Ricoh Company, Ltd. | Drying suppression device and cell culture kit |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20040305 |