JP2000314696A - 試料観察用プレートおよび観察装置 - Google Patents

試料観察用プレートおよび観察装置

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JP2000314696A
JP2000314696A JP11295842A JP29584299A JP2000314696A JP 2000314696 A JP2000314696 A JP 2000314696A JP 11295842 A JP11295842 A JP 11295842A JP 29584299 A JP29584299 A JP 29584299A JP 2000314696 A JP2000314696 A JP 2000314696A
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plate
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Hiroshi Muramatsu
宏 村松
Katsunori Honma
克則 本間
Akira Egawa
明 江川
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Seiko Instruments Inc
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Seiko Instruments Inc
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    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01QSCANNING-PROBE TECHNIQUES OR APPARATUS; APPLICATIONS OF SCANNING-PROBE TECHNIQUES, e.g. SCANNING PROBE MICROSCOPY [SPM]
    • G01Q30/00Auxiliary means serving to assist or improve the scanning probe techniques or apparatus, e.g. display or data processing devices
    • G01Q30/02Non-SPM analysing devices, e.g. SEM [Scanning Electron Microscope], spectrometer or optical microscope
    • G01Q30/025Optical microscopes coupled with SPM

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  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
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  • Radiology & Medical Imaging (AREA)
  • Sampling And Sample Adjustment (AREA)

Abstract

(57)【要約】 【課題】 表面が原子レベルで平滑で、安価な試料観察
プレートを提供することで、分子レベルの形状観察と光
学観察を可能にする。 【解決手段】 分子レベルの形状及び光学情報の観察を
行う機器で使用する試料観察用プレートにおいて、ガラ
ス板11に結晶状薄膜13を接着することによって、試
料観察用プレート20を構成した。さらに、この試料観
察用プレート20を用いて観察装置を構成した。

Description

【発明の詳細な説明】
【0001】
【発明の属する技術分野】本発明は、生物試料、有機試
料の分子レベルでの観察・分析に使用される試料観察用
プレートおよび観察装置に関する。
【0002】
【従来の技術】DNAなどの分子レベルの試料の観察を
プローブ顕微鏡によって行う場合には、マイカ、HOP
G、ガラス板などが用いられてきた。このうち、マイ
カ、HOPGは、きわめて平滑な表面を有するが、同時
に光学的な透過観察を行おうとすると光透過性が悪く困
難であった。また、ガラス板は、平滑性が不十分である
という問題があった。また、サファイア基板を用いる方
法もあるが、効果であるという問題がある。
【0003】
【発明が解決しようとする課題】表面が原子レベルで平
滑で、透過型の光学観察が可能で、安価な試料観察プレ
ートおよびこの試料観察用プレートを用いた観察装置を
提供することで、分子レベルの形状観察と光学観察を可
能にすることが本発明の課題である。
【0004】
【課題を解決するための手段】上記課題を解決するた
め、マイカなどの結晶性薄膜をガラス板などの透明基板
に接着した試料観察プレートを考案した。これは、きわ
めて薄い結晶性薄膜が、光透過性や散乱などの問題を起
こしにくいことを利用し、この薄膜をガラス板によって
支持することによって課題を解決したものである。さら
に、複数の試料を同時に観察できるようにするため、マ
イカ表面に枠を印刷した試料観察プレートを考案した。
【0005】
【発明の実施の形態】以下図面に基づいて、本発明の試
料観察用プレートの説明を行う。図1は、本発明の試料
観察プレートの構造を示したもので、透明基板としての
ガラス板11、接着剤12、マイカ薄膜などの結晶性薄
膜13から構成されている。結晶性薄膜の裏面とガラス
を接着剤で密着させることにより、ガラスを通して、結
晶性薄膜表面を顕微鏡観察できるようになる。この場合
の接着剤は、蛍光観察の際に蛍光を発しない材料が望ま
しく、シアノアクリレート系接着剤が適している。
【0006】この試料観察プレートは、図2に示すよう
に、走査型近接場光学顕微鏡に使用することができる。
図2において、走査型近接場光学顕微鏡は、試料観察プ
レート20の他、光プローブ21、対物レンズ22、光
検出器23、光源24、変位検出器25、走査機構2
6、制御・データ処理ユニット27などから構成されて
いる。
【0007】図3において、原子間力顕微鏡−共焦点顕
微鏡結合型観察装置は、試料観察プレート20の他、プ
ローブ31、対物レンズ32、光検出器33、光源3
4、ガルバノミラー35、ダイクロイックミラー36、
ピンホール37、変位検出器38、走査機構39、制御
・データ処理ユニット40などから構成されている。こ
れらの観察装置では、DNAや蛋白質などの分子レベル
での形状観察と光学的な観察に適している。
【0008】なお、透明基板としては、硼珪酸ガラス、
石英ガラスなどの各種ガラス基板や水晶板など種々の材
料を用いることができる。ただし、蛍光観察を行う場合
には、蛍光の発生の少ない基板が望ましい。通常使用さ
れているカバーガラスは、厚さ0.17mm程度であ
り、マイカ板では、0.01mm程度のものは、簡単に
準備できる。
【0009】したがって、この試料観察用プレートで
は、ガラス板および前記結晶状薄膜の合計の厚さを0.
25mm以下にすることが可能であり、これによって、
倒立型顕微鏡の油浸式または水浸式の対物レンズを使用
することができる。複数の試料を同時に観察できるよう
にするため、マイカ表面に枠を印刷した試料観察プレー
トを構成することができる。図4は、枠の印刷例を示し
たものであり、格子状の枠41、リング状の枠42を形
成した例を示している。この枠に試料を含む液をたらし
た場合、枠51の材質を疎水性にした場合は、図5
(a)、マイカを疎水処理して、枠52の材質を親水性
にした場合は、図5(b)のようにして、液53、54
が保持される。試料観察は、液を乾燥させて行うか、試
料物質がマイカ表面に吸着あるいは結合した段階で、液
を除去して観察を行う。
【0010】ここで、親水性の枠としては、ポリビニル
アルコール、酢酸セルロース、ポリアミドなどの材料を
用いることができる。疎水性の枠としては、ポリエチレ
ン、ポリプロピレン、フッ素系樹脂、シリコン系樹脂を
用いることができる。印刷後重合させるか、溶媒に溶か
して印刷を行う。印刷後加熱することによって、密着性
を向上させることもできる。また、マイカ表面の疎水処
理を行う場合は、シランカップリング剤を用いることが
できる。
【0011】このような枠を複数個設けるによって、マ
イクロセルを多数構成できることになる。例えば、個々
の枠に種々のDNAプローブをあらかじめ吸着させてお
き、被検査DNA試料を添加することで、被検査DNA
中にDNAプローブに対応する配列があるかどうかを形
状的および光学的な手法で、1つの試料観察用プレート
状で同時に調べることができる。また、染色体をあらか
じめ、吸着させておき、そこにDNAプローブを作用さ
せることで、染色体中の種々のDNA配列の有無と位置
を形状的および光学的な手法を組み合わせることで同定
することができる。複数の枠を構成することで、試料観
察用プレートを交換することなく、観察位置をわずかに
ずらすだけですむため、観察の効率を大幅に向上させる
ことができる。
【0012】また、枠の幅は、例えば、200μm程度
にすることができ、この場合には、2mm四方の中に、
100個のセルを構成することができる。当然、これよ
り小さいセルや大きいセルを構成することも可能であ
る。一方、図6に示すように、ガラス板と結晶状薄膜の
外周を実質的に同一にすることによって、試料観察用プ
レートの取り扱いをしやすくすることができる。また、
接着以外の接合方法も用いることが可能であり、例え
ば、加熱圧着や陽極接合法などの界面接合法により、よ
り強固な接合を行うこともできる。この場合は、図7に
示すように、接着剤は不要となる。この他、真空下で、
ガラス基板と結晶性薄膜を密着させ、外周の部分を接着
等で封止する真空封止法を用いることもできる。
【0013】このように、接着剤を使用しないで接合を
行うことで、蛍光観察におけるバックグランド蛍光を低
減する効果を得ることができる。さらに、液体による処
理を行う場合や液体中で観察を行う場合には、図8に示
すような縁61を設けることによって、結晶性薄膜上に
液体を保持することができる。このように、外周が同一
の本発明の試料観察プレートの外周部に縁を設けること
で、接合部に液体が浸透することを防止することができ
る。この縁に耐薬品性の材料を使用することで、結晶性
薄膜表面を有機溶媒や酸・アルカリなどで処理すること
も可能である。
【0014】なお、結晶性薄膜にマイカを用いた場合に
は、粘着テープなどにより、最外層を除去することで、
再度使用することが可能である。
【0015】
【発明の効果】本発明の試料観察プレートによって、表
面が原子レベルで平滑で、透過型の光学観察が可能で、
安価な試料観察プレートを実現することができ、観察装
置によって、分子レベルの試料の形状と光学特性の観察
を同時に行えるようになった。
【図面の簡単な説明】
【図1】本発明の試料観察プレートの構造を示す図であ
る。
【図2】本発明の観察装置の走査型近接場光学顕微鏡を
示す模式図である。
【図3】本発明の原子間力顕微鏡−共焦点顕微鏡結合型
観察装置を示す模式図である。
【図4】本発明のマイカ表面に枠を印刷した試料観察プ
レートを示す模式図である。
【図5】本発明の枠構造に液体が保持される様子を示す
模式図である。
【図6】本発明の試料観察プレートの構造を示す図であ
る。
【図7】本発明の試料観察プレートの構造を示す図であ
る。
【図8】本発明の試料観察プレートの構造を示す図であ
る。
【符号の説明】
11 透明基板 12 接着剤 13 結晶性薄膜 20 試料観察プレート 21 光プローブ 22 対物レンズ 23 光検出器 24 光源 25 変位検出器 26 走査機構 27 制御・データ処理ユニット 31 プローブ 32 対物レンズ 33 光検出器 34 光源 35 ガルバノミラー 36 ダイクロイックミラー 37 ピンホール 38 変位検出器 39 走査機構 40 制御・データ処理ユニット 41 格子状の枠 42 リング状の枠 51 疎水性の枠 52 親水性の枠 53 試料液 61 縁 62 液体

Claims (19)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項1】 分子レベルの形状及び光学情報の観察を
    行う機器で使用する試料観察用プレートにおいて、透明
    基板に結晶状薄膜が接着されることによって構成されて
    いることを特徴とする試料観察用プレート。
  2. 【請求項2】 前記透明基板が、ガラス板であることを
    特徴とする請求項1記載の試料観察用プレート。
  3. 【請求項3】 前記結晶状薄膜の厚さが、0.05mm
    以下であることを特徴とする請求項1記載の試料観察用
    プレート。
  4. 【請求項4】 前記結晶状薄膜が、マイカであることを
    特徴とする請求項1記載の試料観察用プレート。
  5. 【請求項5】 前記ガラス板および前記結晶状薄膜の合
    計の厚さが、0.25mm以下であることを特徴とする
    請求項1記載の試料観察用プレート。
  6. 【請求項6】 前記結晶状薄膜の表面に、枠形状が形成
    されていることを特徴とする請求項1記載の試料観察用
    プレート。
  7. 【請求項7】 前記枠形状が、格子状に複数形成されて
    いることを特徴とする請求項5記載の試料観察用プレー
    ト。
  8. 【請求項8】 前記枠形状が、リング上で、複数形成さ
    れていることを特徴とする請求項5記載の試料観察用プ
    レート。
  9. 【請求項9】 前記枠が、親水性であることを特徴とす
    る請求項5記載の試料観察用プレート。
  10. 【請求項10】 前記枠が、疎水性であることを特徴と
    する請求項5記載の試料観察用プレート。
  11. 【請求項11】 前記接着が、シアノアクリレート系接
    着剤で行われていることを特徴とする請求項1記載の試
    料観察用プレート。
  12. 【請求項12】 前記接着が、界面接合法によって行わ
    れていることを特徴とする請求項1記載の試料観察用プ
    レート。
  13. 【請求項13】 前記界面接合法が、加熱圧着であるこ
    とを特徴とする請求項11記載の試料観察用プレート。
  14. 【請求項14】 前記界面接合法が、陽極接合であるこ
    とを特徴とする請求項11記載の試料観察用プレート。
  15. 【請求項15】 前記接着が、真空封止法によって行わ
    れていることを特徴とする請求項1記載の試料観察用プ
    レート。
  16. 【請求項16】 前記ガラス板と前記結晶状薄膜の外周
    が実質的に同一であることを特徴とする請求項1記載の
    試料観察用プレート。
  17. 【請求項17】 請求項14記載の試料観察プレートの
    前記外周部分に縁を構成することによって、前記結晶性
    薄膜上に液体が保持できる構造としたことを特徴とする
    試料観察用プレート。
  18. 【請求項18】 分子レベルの形状及び光学情報の観察
    を行う機器において、 少なくとも、請求項1記載のガラス板に結晶状薄膜を接
    着することによって構成されている試料観察用プレー
    ト、光プローブ、対物レンズ、光検出器、光源、変位検
    出器、走査機構、制御・データ処理ユニットから構成さ
    れている観察装置。
  19. 【請求項19】 分子レベルの形状及び光学情報の観察
    を行う機器において、 少なくとも、請求項1記載のガラス板に結晶状薄膜を接
    着することによって構成されている試料観察用プレー
    ト、 プローブ、対物レンズ、光検出器、光源、ガルバ
    ノミラー、ダイクロイックミラー、ピンホール、変位検
    出器、走査機構、制御・データ処理ユニットから構成さ
    れている観察装置。
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Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2006132075A1 (ja) * 2005-06-10 2006-12-14 Olympus Corporation 走査型プローブ顕微鏡用の試料台配列
JP2007003309A (ja) * 2005-06-23 2007-01-11 Seiko Instruments Inc 開口作製装置及び開口作製方法
JP2007132781A (ja) * 2005-11-10 2007-05-31 Sii Nanotechnology Inc 液中用カンチレバーホルダ及び走査型プローブ顕微鏡
JP2007205964A (ja) * 2006-02-03 2007-08-16 Seiko Instruments Inc 特定物質観察装置及び特定物質観察方法

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