JP2000500110A - 低温リン酸カルシウムアパタイト及びその製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 低結晶度リン酸カルシウムアパタイトを製造する方法において、低結晶度リン酸カルシウムを、カルシウム及びホスフェートイオンを含む水溶液から沈殿させ；溶液から捕集し；及び結晶成長を最小にしかつリン酸カルシウムアパタイトへの転化を助成するように選ぶ相対湿度及び温度において脱水する又は結晶成長を最小にしかつリン酸カルシウムアパタイトへの転化を助成するように凍結乾燥させる。生成するリン酸カルシウムアパタイトは、それぞれ、強さ、多孔度及び生物吸収性の増大したブロック固体又は粉末である。

Description

【発明の詳細な説明】 低温リン酸カルシウムアパタイト及びその製造方法 発明の分野 本発明は、人又は動物の移植物質としてを含む種々の用途を有する合成リン酸 カルシウムアパタイトに関する。発明は、更に、高い機械的強度及び多孔度のリ ン酸カルシウムアパタイトに関する。 発明の背景 リン酸カルシウムは、硬組織（硬骨、軟骨、歯エナメル質及び象牙質）の主成 分である。自然発生の骨ミネラルは、ヒドロキシアパタイト構造を有するナノメ ートルサイズの結晶性不良なリン酸カルシウムで造られている。しかし、骨ミネ ラルの組成は、Ｃａ／Ｐ原子比１．６７を有する理想的な化学量論的結晶性ヒド ロキシアパタイトであるＣａ₁₀（ＰＯ₄）₆（ＯＨ）₂と違って、相当に異なって いて、下記式によって表わされ得る： Ｃａ_8.3（ＰＯ₄）_4.3（ＨＰＯ₄，ＣＯ₃）_1.7（ＯＨ，ＣＯ₃）_0.3。 骨ミネラルの非化学量論は、主に、三価のＰＯ₄ ^3-イオンに代わられるＣＯ₃ ^2- やＨＰＯ₄ ^3-のような二価イオンが存在することによる。ＨＰＯ₄ ^3-やＣＯ₃ ^2-イ オンによる置換は、Ｃａ／Ｐ比の変化を生じ、Ｃａ／Ｐ比は年齢や骨の場所に大 きく依存して１．５０〜１．７０の範囲になり得る。Ｃａ／Ｐ比は、骨の加齢の 間に増大するのが普通であり、このことは、骨が古くなる程、カーボネート種の 量が増大するのが典型的であることを示唆する。 骨ミネラルの特定の溶解度特性を生じるのは、ナノ結晶サイズ及び低い結晶度 性と共にＣａ／Ｐ比である。そして、骨組織は、ミネラル吸収性細胞（破骨細胞 ）やミネラル産生性細胞（骨芽細胞）によって支配される一定の組織修復を受け ることから、ミネラルの溶解度挙動は、これらの細胞活性の間の微妙な代謝バラ ンスを保つのに重要である。 自然の骨ミネラルに精密に似せて造られる合成の骨移植物質は、自然の骨に代 わる有用な代替え品になることができる。許容される合成の骨は、自生の骨（患 者の自身の骨）の入手可能性や採取の問題並びにウイルス性感染の危険のような 異系移植骨（死体からの骨）に伴う危険や合併症の問題を回避することができる 。従って、移植片として用いるために自然の骨に精密に似たセラミック物質を合 成しようとする試みが相当にあった。ヒドロキシアパタイトは、それが化学量論 的であるとはいえ、一般に一層大きな結晶サイズを有する結晶形態が、骨中の自 然発生ミネラルに化学的に最も近いことから、好適な選択である。 理想的な合成の骨移植片は、下記の性質を保持するのが望ましい：（１）ヒド ロキシアパタイトのように化学的に生物学的適合し得るべきである；（２）移植 片を、患者の自身の骨がその回りに癒着するまで、同じ場所にかつ完全にして置 くために、構造上の保全性をある程度備えるべきである；（３）患者の自身の骨 が外来の骨移植片に取って代わるように、吸収を可能にするために、可溶性形態 にすべきである：及び（４）骨形成用骨芽細胞を刺激することができる骨増殖タ ンパク質のような生体分子を合成の骨物質中に組み込むことが必要になり得るこ とから、その物質を形成するのに用いられるプロセスを低い温度で行うことが望 ましい。（Ｂｏｎｅ Ｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃ Ｐｒｏｔｅｉｎｓのような ）骨増殖タンパク質のほとんどは熱過敏性であり、体温を越える温度においてそ れらの生物活性を失う。 これらの要件の達成は、Ｃａ／Ｐ比、結晶サイズ、結晶度、多孔度、密度、熱 安定性及び物質純度のようなパラメーターが制御されるリン酸カルシウムアパタ イト物質によって満足され得る。 Ｃａｌｃｉｕｍ Ｐｈｏｓｐｈａｔｅｓ ｉｎ Ｏｒａｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ（ニューヨーク、Ｋａｒｇｅｒ Ｐｕｂ．Ｃｏ．、１ ９９１）においてＬｅＧｅｒｏｓ Ｒ．Ｚ．は、ヒドロキシアパタイトの高結晶 性形態が、溶液沈殿の後に高い温度（８００°〜１２００℃）で焼結することに よって製造されることを教示している。高温処理は、結晶サイズが数ミクロン程 度で、Ｃａ／Ｐ１．６７を有する極めて化学量論的なヒドロキシアパタイトを生 じる。そのような高結晶性ヒドロキシアパタイトは、宿主組織に本質的に不溶性 にさせる極めて小さい溶解度を有する。従って、それは生骨組織によって取って 代わられず、患者内に望ましくない程に長い期間の間残る。 ヒドロキシアパタイトは、また、初晶性リン酸カルシウム反応体の固体状態酸 −塩基反応によっても生成される。そのようなアプローチは、時には反応不良で 、均質でなくかつ結晶性ヒドロキシアパタイトを有意の含量で有する物質を生じ る。 Ｃｏｎｓｔａｎｔｚは、米国特許第４，８８０，６１０号において、高濃厚な 濃リン酸とカルシウム源とを塩基及びヒドロキシアパタイト結晶の存在において 反応させることによってリン酸カルシウムミネラルを製造することについて報告 している。生成した生成物は、結晶形態のヒドロキシアパタイトミネラルを含有 する多結晶質の物質である。同様に、Ｃｏｎｓｔａｎｔｚ等に係る米国特許第５ ，０５３，２１２号は、酸／塩基混合物の作業性及び混合性を向上させるために 粉末酸源を使用することを開示しているが、米国特許第４，８８０，６１０号と 同様の混合相リン酸カルシウム物質が報告されている。最近になって、Ｃｏｎｓ ｔａｎｔｚ等は、Ｓｃｉｅｎｃｅ（２６７巻、１７９６〜９頁（１９９５年３月 ２４日））において、リン酸一カルシウム１水和物、β−トリカルシウムホスフ ェート、α−トリカルシウムホスフェート、及び炭酸カルシウムをリン酸ナトリ ウム溶液中で反応させてリン酸カルシウム物質をもたらすことから炭酸塩化され たアパタイトを形成することを報告したが、得られたリン酸カルシウム物質は、 依然、自然発生の骨ミネラルに比べて、性質が実質的に一層結晶性である。同様 に、Ｂｒｏｗｎ等は、米国再発行特許第３３，２２１号において、結晶性テトラ カルシウムホスフェート（Ｃａ／Ｐ比２．０）と酸性リン酸カルシウムとを反応 させることについて報告している。Ｌｉｕ等は、米国特許第５，１４９，３６８ 号において、結晶性リン酸カルシウム塩と酸性クエン酸塩とを反応させることを 開示している。 これらの参考文献は、すべてリン酸カルシウムの結晶性固体の反応が結晶性形 態のヒドロキシアパタイト固体を生じることを開示している。非晶質又は低結晶 度のヒドロキシアパタイトブロック固体を製造することについては、ほとんど報 告されていていない、というのは、そのような製造において用いられる非晶質の リン酸カルシウムは、リン酸カルシウムの中で最も考えられない固体でありかつ 慣用の非晶質のリン酸カルシウムは、大部分は不活性でありかつ非反応性の固体 であると考えられるからである。 従来技術における低結結晶度のリン酸カルシウム物質の唯一の言及は、非晶質 のリン酸カルシウムを、高結晶性ヒドロキシアパタイト化合物を通常高い温度条 件下で形成する直接のプリカーサーとして用いることに焦点を合わせてきた。そ のような高結晶性物質は、生理学的条件下で極めて不溶性であることから、合成 骨用には不適当である。 例えば、Ｐａｌｍｅｒ等は、米国特許第４，８４９，１９３号において、酸性 リン酸カルシウム溶液を水酸化カルシウム溶液と、両方の溶液を飽和に近くして 、非晶質ヒドロキシアパタイト沈殿粉末を形成するように反応させることによっ て結晶性ヒドロキシアパタイト粉末を形成することを報告している。次いで、非 晶質粉末を直ぐに乾燥させかつ７００°〜１１００℃の高い温度で焼結して極め て高い結晶性のヒドロキシアパタイトを得ている。Ｂｒｏｗｎ等は、米国再発行 特許第３３，２２１号において、特にリン酸四カルシウム（Ｃａ／Ｐ比２．０） の非晶質相と一層酸性（結晶性）のリン酸カルシウムの内の少なくとも一種とを 反応させることによって歯科用セメント用の結晶性ヒドロキシアパタイトを形成 することについて報告している。Ｔｕｎｇは、米国特許第５，０３７，６３９号 において、標準の非晶質リン酸カルシウムペーストを、歯を再ミネラル化するた めに使用及び適用することを開示している。Ｔｕｎｇは、標準の不活性な非晶質 リン酸カルシウムを、チューインガム、口すすぎ用水又は練り歯磨きに混合しか つそれらとして送達させるのに使用することを提案しており、該非晶質リン酸カ ルシウムは、口液に入る際に、結晶性フルオリド含有ヒドロキシアパタイトに転 化し、これは歯エナメルを再ミネラル化するのに有用である。Ｓｉｍｋｉｓｓは 、ＰＣＴ／ＧＢ９３／０１５１９において、Ｍｇ²⁺イオン又はピロホスフェート のようなインヒビターを、非晶質のリン酸カルシウムに混合して、生組織中に移 植するのに用いることを記載している。非晶質のカルシウム−マグネシウムホス フェートは、インヒビター、例えばＭｇ²⁺イオンを周囲の身体液中に浸出させる 際に、転化して結晶性ヒドロキシアパタイトになる。 自然の骨の性質によく似た低結晶度リン酸カルシウムを提供するのに加えて、 また、その物質を高力セラミックブロックの形態で得ることが望ましくなり得る 。そのようなブロックは、造形し又は機械加工して所望の幾何学的形状にするこ とができる。該ブロックヒドロキシアパタイトを得る方法は、粉末にした物質を 熱や圧力下でプレスして稠密化したブロックにすることを伴うのが典型的である 。そのようなプレスした粉末ブロックは高力でなく、その物質の機械的性質を改 良するために熱を加えると、その物質の化学的組成、結晶度を変え得及び／又は 特にタンパク質又はその他の熱感応性成分が存在する場合には、その他の悪影響 を及ぼし得る。本明細書中上に記載した手順の中で、そのようなヒドロキシアパ タイト物質を調製工程から直接にかつ更なるプレシング工程なしで提供すること ができるものはない。 骨中の自然発生ミネラルの性質に一層よく似た新規な合成の骨物質を開発する 必要が依然ある。特に、低い温度で形成することができる、完全に生物吸収可能 な、低い結晶度の、ナノメートルサイズの結晶である合成の骨物質を提供する必 要が依然ある。更に、製造プロセスからブロック形態で得ることができかつ所望 の形状に形成することができる高力かつ多孔度のセラミックヒドロキシアパタイ トを提供する必要が依然ある。 発明の要約 本発明の目的は、容易に生物吸収可能でありかつ低い結晶度のリン酸カルシウ ムアパタイト物質を提供するにある。本発明のそれ以上の目的は、そのようなリ ン酸カルシウムアパタイトを粉末又はブロック形態で提供するにある。 本発明の目的は、自然発生骨物質の表面反応性によく似た表面を有する低結晶 度リン酸カルシウムアパタイト固体を提供するにある。 本発明の別の目的は、低結晶度リン酸カルシウムアパタイト物質及びそれを容 易に機械加工して所望の幾何学的形状にすることができる高力ブロックとして製 造する方法を提供するにある。 発明の一態様では、低結晶度リン酸カルシウムアパタイトは、カルシウム及び ホスフェートイオンを含む水溶液から低い結晶度のリン酸カルシウムを沈殿させ ；低結晶度リン酸カルシウムを溶液から捕集し；及び低結晶度リン酸カルシウム を、結晶成長を最小にしかつリン酸カルシウムアパタイトへの転化を助成するよ うに選ぶ相対湿度及び温度において脱水することによって調製する。 本発明のリン酸カルシウムアパタイトは、アパタイト構造を保有しかつ構造及 び組成がヒドロキシアパタイトに関係される。しかし、本発明のリン酸カルシウ ムアパタイトは、自然発生骨に一層よく似たカーボネート及びピロホスフェート リガンドを含むのが好ましい。更に、リン酸カルシウムアパタイト中のヒドロキ シ含量は、ヒドロキシアパタイトにおいて認められる割合から実質的に存在しな いまでに変わり得る。 「低結晶度」物質とは、広範囲の秩序をほとんど又は何ら持たない非晶質性物 質及び／又はナノメートル又はオングストロームのオーダーの結晶性領域を示す ナノ結晶性の物質を意味する。 好適な実施態様では、低結晶度リン酸カルシウムを金型中にキャストした後に 脱水する。その他の好適な実施態様では、水溶液を、カルシウム対ホスフェート 比約１．３〜１．７の範囲、好ましくは１．５〜１．６８の範囲をもたらすよう に選ぶ。沈殿は、更にカーボネートイオンを含む水溶液で実施してもよい。更に 別の好適な実施態様では、水溶液は、ｐＨ約６．０〜約８．５の範囲、好ましく は約７．３〜約７．５の範囲である。カルシウム及びホスフェートイオンを、速 い添加、例として滴定によって水溶液中に導入してもよい。別の好適な実施態様 では、捕集の工程は、ろ過、遠心分離及び沈降からなる群より選ぶ。 更に別の好適な実施態様では、水溶液は、加えて結晶化インヒビターを含む。 インヒビターは、カルシウム及びホスフェートイオン源の合計の乾燥重量の約０ ．５重量％〜約３０重量％の範囲で存在させてよい。インヒビターは、カーボネ ートイオン、マグネシウムイオン、及びピロホスフェートイオンからなる群より 選ぶ。 本発明の更に別の実施態様では、低結晶度リン酸カルシウムを溶けた状態で熟 成した後に捕集する。熟成は、実質的に子供の骨、成人の骨又は年配者の骨と同 様な組成を有するリン酸カルシウムを所望の通りに得る程の時間実施する。好適 な実施態様では、熟成時間は、約１時間〜約１年の範囲、好ましくは約２週間〜 約６カ月の範囲である。 本明細書中で用いる通りの「熟成」なる用語は、プリカーサーリン酸カルシウ ムを水溶液に、反応性、組成、結晶度及び結晶領域サイズを含み、これらに限定 されないリン酸カルシウムの数多くの特性の内のいずれかに影響を与える時間接 触させたままにするプロセスを意味する。 更に別の好適な実施態様では、脱水の工程を、温度約１°〜約５０℃の範囲、 好ましくは約４°〜約３７℃の範囲で実施する。脱水は、選定した温度において ＲＨ約５５％〜約９９％の範囲内、好ましくは２５℃においてＲＨ約６０％〜約 ７０％の範囲内に調節した湿度において実施するのが好ましい。脱水は、約１週 間〜約１年の範囲の時間、好ましくは約２週間〜約６カ月の範囲の時間、一層好 ましくは約３週間〜約４週間の範囲の時間実施する。 発明の更に別の実施態様では、骨再生タンパク質又は抗生物質のような生活性 な分子をリン酸カルシウムアパタイト中に加入してよい。生活性な分子を水溶液 中に又は捕集した沈殿中に導入した後に脱水してよい。 発明の更に別の態様では、低結晶度リン酸カルシウムアパタイトは、カルシウ ム及びホスフェートイオンを含む水溶液から低結晶度リン酸カルシウムを沈殿さ せ；低結晶度リン酸カルシウムを溶液から捕集し；及び捕集した沈殿を凍結乾燥 させて結晶成長を最小にしかつリン酸カルシウムアパタイトへの転化を助成する ことによって調製する。 発明の更に別の態様では、低結晶度リン酸カルシウムを、多孔度約３０Å〜約 １００Åの範囲及び硬度約２０ＶＨＮ〜約４０ＶＨＮの範囲を有する固体のブロ ック物質として提供する。 本明細書中で用いる通りの「ブロック固体」なる用語は、生成物を、粉末にし た又は粒状固体に比べて、単一のケーク又は片として得ることを意味する。 図面の簡単な説明 発明の説明を、図面を参照して行う。図面において、 図１は、発明の方法を例示するブロックダイヤグラムであり； 図２は、（ａ）発明に従って調製したリン酸カルシウムアパタイト固体及び（ ｂ）ヒトの骨のｘ線回折図であり；並びに 図３は、発明の別の方法を例示するブロックダイヤグラムである。 発明の詳細な説明 本発明は、極めて生物吸収可能な低結晶度リン酸カルシウムアパタイト物質の 新規な調製方法を提供する。リン酸カルシウムアパタイトは、微細な粉末として 又は機械的強さの大きいブロック固体として調製することができる。本発明のプ ロセスは、低結晶度リン酸カルシウムを低結晶度リン酸カルシウムアパタイトブ ロック固体に、細孔サイズ、多孔度、組成及び結晶度を注意深く調節して転化す る。その方法は、低結晶度リン酸カルシウムを沈殿及び捕集した後に、生成する リン酸カルシウムアパタイトセラミック固体の細孔サイズ、強さ及びマイクロ多 孔度を調節するために管理した反応及び脱水を行うことを含む。その方法は、ま た、低結晶度リン酸カルシウムを沈殿及び捕集した後に、生成するリン酸カルシ ウムアパタイト粉末の粒径、結晶度及びマイクロ多孔度を調節するために凍結乾 燥することも含む。重要なことは、そのプロセスは、周囲温度及び周囲以下の温 度を含む低い温度で実施し得ることである。 本発明の方法は、また、化学組成の変更を可能にし、それにより生成物ナノ結 晶性リン酸カルシウムアパタイトの生活性を調節するそれ以上のモードも提供す る。本発明の合成の骨移植物質の生活性は、標準の結晶性リン酸カルシウムアパ タイトに比べて、患者への溶解度が調節されることにより、増進される。望まし いことに、低結晶度リン酸カルシウムアパタイトの骨移植片は、骨が中で成長し てそれに代わる最適な速度で再吸収することができる。低結晶度リン酸カルシウ ムアパタイトの溶解度は、Ｃａ／Ｐ化学組成及び／又はナノサイズの結晶ミクロ 構造を改質することによって変えることができ、これらは本明細書中に記載する 通りにして調節することができる。低結晶度固体は、大概、匹敵し得る結晶性固 体に比べて一層溶解性である。骨移植物質として用いる最終生成物の溶解度を調 節することが可能であることにより、その物質の組成を、一層若い、一層高齢の 又は異なる骨の部位用途用に生物相応するようにデザインすることができる。 発明の方法を、図１のフローダイヤグラムを参照しながら説明する。リン酸カ ルシウムの沈殿は、図１の工程１０に示す通りに低い温度（０°〜４０℃）の水 溶液におけるカルシウム塩及びホスフェート塩の間の複分解によって行う。反応 は、急速な反応及びリン酸カルシウムの沈殿を促進するｐＨにおいて行う。典型 的なｐＨ値は、約６．５〜約８．５の範囲、一層好ましくは約７．３〜約７．５ の範囲である。沈殿は、加えてカーボネートイオン源を含んでよい。カーボネー トイオンは、それが無ければホスフェートイオンが居住する部位を占め、それに より沈殿物のホスフェート含量を減少させるので、種々のＣａ／Ｐ比を有するリ ン酸カルシウムを調製するのに有用である。カーボネートリガンドをアパタイト 構造中に組み込むことは、自然の骨に一層よく似た物質を調製する際に有用であ る。カーボネートイオンは、また、結晶化インヒビターとしても働くことができ る（下記を参照）。これより、沈殿溶液中のカルシウム、ホスフェート及びカー ボネートの相対量を調製することによって、物質の最終の組成を調製することが できる。カルシウム対ホスフェート比は、１．３〜約１．７の範囲が好適である 。Ｃａ／Ｐ比約１．６７の化学量論性ヒドロキシアパタイトを有するのが、特に 好適である。 沈殿物における低結晶度は、沈殿プロセスの速度及び期間を調製することによ って得ることができる。低結晶度は、非晶質及びナノ結晶性の両方の構造を含む 。低結晶度リン酸カルシウムは、溶液から、初期の沈殿が急速な条件下で沈殿さ せる。急速な沈殿は、多くの極端に小さいリン酸カルシウム核を形成することに なる。加えて、急速な結晶又は結晶粒成長は、各々の結晶粒内に一層多くの欠陥 を生じることになり、それによりまた溶解度を増す。急速に形成する沈殿物はナ ノ結晶性でありかつ変化しやすいホスフェート（及びカーボネート）環境に非常 に富み、かかる環境はそれらに非常に高い表面反応性を与える。スペクトルの極 端部において、結晶又は結晶粒成長は非常に急速であり欠陥密度は非常に有意で あるので非晶質リン酸カルシウムが生じる。これらの物質は広範囲の構造を持た ないが、オングストロームスケールで測定する場合に、均質である。ナノ結晶性 及び非晶質沈殿物の組成は非常に類似しているように見えかつ沈殿条件が異なる ことによって強く変化しない。 本明細書中で用いる通りの「変化しやすい表面」なる用語は、物質又は粒子の 表面が反応性でありかつ隣接する表面又は物質と反応して物質の化学組成、結晶 度及び結晶領域サイズを変えることができることを意味する。 リン酸カルシウムアパタイトの熱力学的に好都合な結晶性形態は、反応速度を 低下させることによって増進される。従って、確実に非晶質又はナノ結晶性沈殿 物を得るために、反応速度を増大させる工程を採用することができる。カルシウ ム源とホスフェート源とを急速に混合することは、不安定な相を生成物として形 成するのに好都合である。各々のイオンが正しく並列して固体を形成するために 反応時間を一層与えると、一層熱力学的に好都合な結晶性及び安定性の構造を生 じることになる。更に、核形成されたアパタイトが結晶化するのを防ぐために、 カルシウムイオン及びホスフェートイオンを別々に溶液中に調節した方式で導入 するのが好適になり得る。例えば、カルシウムイオン及びホスフェートイオンを 適当な温度及びｐＨの溶液中に滴定によって導入し、それにより形成されるリン 酸カルシウムの量を制限することができる。極めて濃厚な又は飽和に近い溶液を 使用することもまた一層急速な反応を確実にする。好適なカルシウムイオン源は 、Ｃａ（ＮＯ₃）₂、ＣａＣＯ₃、ＣａＣｌ₂及び酢酸カルシウム（Ｃａ（ＣＨ₃Ｃ ＯＯ）₂）を含む。好適なホスフェートイオン源は、Ｎａ₂ＨＰＯ₄、ＫＨ₂ＰＯ₄ 、ＮａＨ₂ＰＯ₄、Ｋ₂ＨＰＯ₄、ＮＨ₄Ｈ₂ＰＯ₄及び（ＮＨ₄）₂ＨＰＯ₄を含む。反 応は、周囲温度又は周囲以下の温度で実施することができるが、一反応体の濃度 を増大させる近沸点の温度が、反応速度を増大させることの可能な手段である。 一旦沈殿物が形成されたら、沈殿物を図１の工程１２に示す通りに母液から捕 集する。捕集は、ろ過、遠心分離及び沈降を含み、これらに限定しない任意の慣 用方法によって実施してよい。好適な捕集方法はろ過であり、これはケーク様非 晶質ゲルをもたらす。捕集工程の後に又は捕集工程と同時に、ゲルを図１の工程 １４に例示する通りに未反応の溶液イオンを含む微量の母液を除くために洗浄し てよい。その物質は、好ましくはろ液にイオンが無くなるまで蒸留水で洗浄して よい。 本発明のブロック固体リン酸カルシウムアパタイトを調製するためには、捕集 したゲルを、次いで図１の工程１６に例示する通りに疎水性金型の中にキャスト する。金型充填工程を容易にするために、更なる水（５〜８０重量％）をケーク 様リン酸カルシウムゲルに撹拌又は混合しながら加えて注型可能なコンシステン シーを得てもよい。金型に充填し、閉じ込められたガス（気泡）を除くのが好ま しい。これは、超音波により又は減圧することによって行ってもよい。金型は、 ゲルに非付着性であるのが好ましい。金型は、ポリテトラフルオロエチレン（Ｐ ＴＦＥ）で造ることができる。ゲルを金型から容易に剥離することは、クラッキ ングや乾燥する間に内部応力が形成するのを防ぐのを助ける。キャスチングにお ける応力及びクラッキングの低減は、高力の固体ブロック生成物を形成する場合 に、望ましいことである。生成物物質を粉砕して粒状形態にする場合には、クラ ッキングを防ぐための更なる工程は必要としないかもしれない。また、金型の幾 何学的形状及びサイズは、乾燥する間のクラッキングを最少にするのに役割を果 たすことが観察された。金型が大きい程かつ高剥離塗料を持たない金型は、クラ ックしかつ生成するリン酸カルシウムアパタイトブロック固体の機械的強さを減 少させる傾向にある。 セラミック様リン酸カルシウムアパタイトブロック固体物質は、表面が強く相 互作用している成形したリン酸カルシウムゲルの脱水及び反応性会合によって得 られる。リン酸カルシウムゲルは、この段階で依然反応性でありかつ反応してリ ン酸カルシウムアパタイト固体を形成することになる。この趣意で、ゲルを、図 １の工程１７に例示する通りに、０°〜５０℃、好ましくは４°〜３７℃の範囲 の低い温度でかつ調節した湿度においてゆっくり脱水する。湿度を選定した温度 においてＲＨ約５５％〜約９９％の範囲に保つ。湿度は、慣用の技術及び市販さ れている湿度チャンバーを使用して調節する。また、周囲条件を、周囲湿度及び ／又は温度が有意に変動しない環境において用いるのがよいことも観察された。 脱水及び反応の速度は、この点で大規模の結晶化を防ぐように制御するのが望 ましい。そのプロセスは、数週間〜約１年までの期間かけて実施する。反応／脱 水時間が長い程、付随してリン酸カルシウムアパタイトブロック固体の密度及び 機械的強さが増大する。これより、温度が低い程かつ相対湿度が高い程、大概そ のプロセスに好都合になる、というのはそれらが乾燥、故に反応時間を長引かせ るからである。乾燥は、１〜３日かけて行うことができるが、生成物は、クラッ クして機械的強さを弱めるために、大概不満足である。乾燥時間は、１週間より も長くするのが好適である。 生成するリン酸カルシウムアパタイトブロック固体は、極めて反応性、高力の 物質である。その物質を機械加工して所望の形状にし、こうしてその物質を移植 手段として用いるために容易に適応可能にさせることができる。反応性が高いこ とは、生物再吸収が高いことを示唆する。本発明のリン酸カルシウムアパタイト ブロック固体は、移植物質用に許容し得るのが認められる慣用の範囲に匹敵し得 る硬度及びミクロ多孔度を保有する。平均多孔度は、約３０〜１００Åの範囲で ある。硬度は、約２０〜４０ＶＨＮの範囲である。ブロック固体は、プレスした 粉末コンパクトに比べて、強さ及び硬度が大きい。更に、慣用のプレスした粉末 コンパクトは、高温処理しなければそれらの強さを保たず、高温処理は、コンパ クトの組成及び結晶度を変える。 所望ならば、固体ブロックを粉砕して低結晶度リン酸カルシウムアパタイト粉 末を得てもよい。粒径が約２５０μｍ〜約０．５ｍｍの範囲の粉末を意図する。 生成するリン酸カルシウムアパタイトブロック固体は、自然の骨の組成及び結 晶度の両方にごく近づく。図２は、（ａ）自然発生のヒトの骨及び（ｂ）発明に 従って調製したリン酸カルシウムアパタイト固体のｘ線回折図（ＸＲＤ）を示す 。ＸＲＤ図形を比較することにより、リン酸カルシウムアパタイトが、ヒトの骨 に、結晶度（ＸＲＤピークの鋭さによって示す通り）及び組成（ピーク位置及び 強さによって示す通り）の両方において良く似ていることが明らかである。 発明の好適な実施態様では、沈殿物を、図１の随意の工程１８に示す通りに、 必要に応じて熟成した後に、ゆっくり脱水する。熟成は、沈殿物を水溶液に管理 した条件下である期間接触させることを伴う。溶液は、蒸留水が典型的であるが 、カルシウム−、カーボネート−、ホスフェート−含有溶液のようなイオン性溶 液を用いてもよい。熟成は、終局的に要求される多孔度及び組成を有するセラミ ックを得るために、ゲルナノ結晶をバルク及び表面変換し並びにそれらのサイズ を調整することを目指す。熟成は、骨のエージングと同様のプロセスである。カ ーボネートが母溶液中に存在する場合に沈殿及び熟成する間に、カーボネートが アパタイト構造に入ることができ、若い又は老齢の骨物質に相当する異なるアパ タイト組成を得ることができる。これより、熟成は、リン酸カルシウムゲルの反 応性及び組成に影響を与える。 熟成には、結晶度の増大、変化しやすいホスフェート環境の減少及びカーボネ ート環境の増大が伴う。通常、熟成時間が長くなる程、結晶サイズの増大は大き くなりかつリン酸カルシウム物質の表面反応性の低下は大きくなる。また、熟成 が進行するにつれて、物質のカーボネート含量は増大しかつ物質のＨＰＯ₄ ^2-含 量は減少する。 熟成は、約１時間〜約１年までの範囲の時間行うことができる。熟成の時間は 、特定のエージの骨の組成に近いリン酸カルシウムアパタイトを得るように選定 することができる。例えば、約２〜３日間熟成すると、子供の骨と同様の組成を 有するリン酸カルシウムアパタイトを生じることが観測された。同様に、１〜６ カ月及び６〜１２カ月熟成すると、組成がそれぞれ成人の骨及び年配者の骨と同 様の生成物を生じる。インヒビター（下記に示す）の存在又は不存在もまた好適 な熟成時間に影響を与えることになる。本発明の別の好適な実施態様では、初期 の核形成の後の結晶成長を抑制する方法を提供する。アパタイト結晶の連続して いる成長を抑制する添加剤を、図１の随意の工程１９に示す通りに、沈殿溶液に 加える。発明の方法において有用な典型的なインヒビターは、Ｍｇ²⁺、カーボネ ート及びピロホスフェートイオンを含み、これらにいささかも制限しない。マグ ネシウムイオンを、望ましくはカルシウム溶液に加えてよく及び／又はピロホス フェート又はカーボネートイオンをホスフェート溶液に加えてもよい。インヒビ ターは、単一で用いても或は互いに組み合わせて用いてもよい。リン酸カルシウ ム系において結晶化を抑制するのが知られているその他の添加剤は、本発明の意 図の範囲内である。インヒビターは、リン酸カルシウムアパタイトの結晶成長を 抑制するのに有効な量で加える。典型的な量は、カルシウム及びホスフェート源 の合計の乾燥重量の約０．５重量％〜約３０重量％の範囲である。インヒビター の有効な量は、使用する特定のインヒビターに応じて変わることになる。例えば 、炭酸水素ナトリウム（ＮａＨＣＯ₃）は多量（３０重量％）に加えるのがよい のに対し、有効になるのに要求し得るマグネシウムイオンの量は、一層少なくて よい。 発明の別の方法では、リン酸カルシウムアパタイトを微細粉末として得ること ができる。その方法を図３を参照しながら説明する。工程１０の通りのリン酸カ ルシウム固体の沈殿、工程１２の通りの母液からの沈殿物の収集及び工程１４の 通りの固体の洗浄を上記した通りに実施する。微細な粉末は、工程３０に示す通 りのプロセスにおいてこの点で沈殿物を凍結乾燥することによって得ることがで きる。凍結乾燥は、結晶化又はそれ以上の反応が起きないように、沈殿物の乾燥 を低い温度で可能にすることから、用いられる。これより、凍結乾燥された粉末 は、沈殿物の反応性部位及び非晶質結晶状態を保留する。 発明の方法に従えば、リン酸カルシウム沈殿物を直ぐに収集してろ過する。こ の工程を、収集した沈殿の低結晶度状態状態を保存するように、冷蔵庫中で又は 周囲以下の温度で行うのが好適である。収集は、典型的には、重力ろ過、真空ろ 過、沈降又は遠心分離を含み、これらにいささかも限定しない任意の慣用の手段 によって行うことができる。収集した沈殿はゼラチン状であり上記した通りに蒸 留水で１回以上洗浄する。 洗浄した沈殿を、次いで直ぐに、例えば液体窒素中に浸すことによって凍結さ せるが、これに限定しない。凍結する際に、沈殿物は凍結させたまま、乾燥させ て同伴される液の大部分を除く。この手順は、凍結された沈殿を真空チャンバー の中に所定の時間入れることによって行ってもよい。凍結−乾燥は、液体窒素温 度で１２〜７８時間の範囲の時間、好ましくは約２４時間かつ１０^-3〜１０^-5ト ルの範囲の真空下で行われるのが典型的である。凍結乾燥において典型的に用い られる極低温は、物質のそれ以上の結晶化を抑制することから、好適な方法は凍 結乾燥を含む。その結果、それによって得られるリン酸カルシウムアパタイト粉 末は、極めて微細な自由流動性の粉末である。 別の実施態様では、生活性分子を、図１の随意の工程２０に示す通りに、ゲル に加えてもよい。骨再生用タンパク質（ＢＲＰ）をリン酸カルシウムアパタイト 粉末又はブロック固体中に加入することを意図する。ＢＲＰは、骨成長の速度を 増大させかつ骨治癒を促進するのが立証された。結晶性不良なリン酸カルシウム アパタイト及びＢＲＰを含む骨移植片は、本発明のリン酸カルシウムアパタイト を単独で用いる骨移植片に比べて、骨治癒を更に一層速く促進することが期待さ れる。ＢＲＰの効能は、結晶性不良なリン酸カルシウムアパタイトの溶解度を、 それがＢＲＰ、カルシウム、及びリンを骨成長について最適な用量で送達する速 度で溶解するように調節することによって、更に増進される。そのようなＢＲＰ を加入する方法は、蒸留水の代わりに、ＢＲＰを含有する工程１０におけるリン 酸カルシウムイオンを分解するための緩衝溶液をタンパク質活性を維持するその 最適なｐＨで混合することを含み、これに限定されない。ＢＲＰの例は、下記を 含み、これらにいささかも限定されない：Ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇ Ｇｒｏｗ ｔｈ Ｆａｃｔｏｒ−Ｂｅｔａ、Ｃｅｌｌ−Ａｔｔａｃｈｍｅｎｔ Ｆａｃｔｏ ｒｓ、Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒｓ、及びＢｏｎｅ Ｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ。そのようなＢＲＰは、現在 、マサチューセッツ、ケンブリッジ在のＧｅｎｅｔｉｃｓ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ；カリホルニア、パロアルト在のＧｅｎｅｎｔｅｃｈ；及びマサチューセッツ、 ホプキントン在のＣｒｅａｔｉｖｅ Ｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓによって開発さ れている。別法として、ＢＲＰを、ろ過工程１２の後にリン酸カルシウムゲルと 混合してもよい。 また、抗生物質又はそれらの助剤をリン酸カルシウムアパタイト粉末又は固体 中に加入することも意図する。臨床の点から、骨移植外科学から起きる主要な関 係の一つは、術後の炎症又は感染を制御したい要求である。結晶性不良なリン酸 カルシウムアパタイト及び抗生物質を含む骨移植片は、手術部位における局部感 染の機会を減少させ、感染のない、これより一層速い骨治癒プロセスに寄与する ことが期待される。抗生物質の効能は、結晶性不良なリン酸カルシウムアパタイ トの放出を、それが抗生物質ペプチド又はその活性な成分を最も有効な用量で組 織修復部位に送達する速度で溶解するように調節することによって、更に増進さ れる。抗生物質の例は、下記を含み、これらにいささかも限定されない：ペニシ リン、クロルテトラサイクリン塩酸塩（オーレオマイシン）、クロラムフェニコ ール及びオキシテトラサイクリン（テラマイシン）。骨組織修復について最適な 条件を助成する際に必要な成分の全部又はほとんどを局所送達するために、抗生 物質、大概ポリペプチド及び骨再生用タンパク質の両方を、本発明の結晶性不良 なリン酸カルシウムアパタイト物質と混ぜ合わせてもよい。 例は、発明の例示として挙げるものであり、いささかも発明を制限するものと して解釈されることを意図しない。例１．本例は、発明の方法に従うリン酸カルシウムアパタイトブロック固体の 典型的な形成を例示する。 沈殿．オルトリン酸水素ジナトリウム（Ｎａ₂ＨＰＯ₄、１２Ｈ₂Ｏ）２１８ｇ を蒸留水１２００ｍｌに溶解した溶液及び硝酸カルシウム［Ｃａ（ＮＯ₃）₂、４ Ｈ₂Ｏ｝７０ｇを蒸留水５００ｍｌに溶解した溶液を調製した。カルシウム溶液 をホスフェート溶液中に室温でかつ撹拌しながら急速に流し込んだ。沈殿は即座 でありかつ実質的に完全であった。沈殿物のｐＨを、酸性リン酸カルシウムの形 成を避けるために、水酸化ナトリウムを加えることによって調整して７．４にす る。沈殿物を直ぐにそれの母液からＢｕｃｈｎｅｒフィルター（全表面約０．１ 平方ｍを有する）を通してろ過することによって分離し、かつ蒸留水約３リット ルで洗浄した。低結晶度リン酸カルシウムのゲルケークがろ紙上に得られる。 低い温度におけるセラミック様ブロック固体の形成．ろ過及び洗浄した後に、 適当な量の蒸留水（５〜８０重量％）をゲル沈殿物に加えた。ゲルを数分間力強 く高速撹拌することによって均質化した。それを、次いでポリテトラフルオロエ チレン（ＰＴＦＥ）金型（直径６０ｍｍ；高さ２２ｍｍ）中にキャストし、かつ ゲル中に閉じ込められた気泡を解放するために数分間超音波処理した。 金型を、チャンバー内で調節した温度（５°〜３７℃）及び湿度（ＲＨ１０〜 ９５％）において乾燥させた。サンプルは、乾燥しかつそれらの水のほとんどを 解放する際にゆっくり縮んだ。サンプルの乾燥及び収縮速度は、初めの水含量に 依存する。その物質は、乾燥時に硬化しかつガラス状になった。それは、残留水 約１０％を含有した。稠密なペレット（アパタイトの理論密度の６０％）を得る ことができた。 ペレットの二軸曲げ応力値は約４ＭＰａであり、かつ微小硬度テスティングに ついて約２０ＶＨＮであった。サンプルのミクロ細孔のサイズは、平均３０〜１ ００Åであった。これらの性質は、骨移植片移植用に許容し得ることが知られて いる範囲に匹敵し得る。細孔サイズ３０〜１００Åが、タンパク質吸収、セル固 定及び増殖について有用である。例２〜４．これらの例は、例１に記載する通りにして実施しかつ異なる脱水時 間が生成するリン酸カルシウムアパタイトブロック固体の硬度に与える作用を例 示する。 脱水時間を一層急速にすると、ブロック固体の機械的性質の悪化を生じたことが 認められるものと思う。 例５．本例は、インヒビターを用いたリン酸カルシウムアパタイトブロック固 体の典型的な形成を例示する。 例１の調製方法に従い、かつ物質の粒径、これより細孔サイズを小さくするた めに、いくつかの結晶成長インヒビターを沈殿及び熟成溶液（ＣＯ₃ ^2-イオン、 Ｍｇ²⁺イオン、及びＰ₂Ｏ₇ ^4-イオン）に別々に又は同時に加入することができる 。 ＣＯ₃ ^2-イオンを加える場合には、典型的には炭酸水素ナトリウム（ＮａＨＣ Ｏ₃）８０ｇをホスフェート溶液に加えた。Ｍｇ²⁺イオンを加える場合には、典 型的には塩化マグネシウム（ＭｇＣｌ₂、６Ｈ₂Ｏ）１．２５ｇをカルシウムイオ ン溶液に加えた。Ｐ₂Ｏ₇ ^4-イオンを加える場合には、典型的にはピロリン酸ナト リウム（Ｎａ₄Ｐ₂Ｏ₇、１０Ｈ₂Ｏ）１ｇをホスフェート溶液に加えた。 これらの結晶成長インヒビターの影響は、ｘ線回折図上で明らかであった。バ ンドは、例１において得られたサンプルよりも広くかつ結晶度が極めて不良の特 性を示した。 ＩＲ分光測定は、ＣＯ₃ ^2-バンドを示した。これより、カーボネートは、リン 酸カルシウムアパタイト生成物中に加入されていた。カーボネート位置は、骨物 質において認められるものに類似していた。２つのカーボネートバンド８７３及 び８７９ｃｍ^-1を、それぞれタイプＡ及びタイプＢカーボネートに割り当てた。 ８６６ｃｍ^-1における第三のカーボネートバンドを、主に粉末の表面上にある変 化しやすいカーボネート種に割り当てた。凍結乾燥された結晶の比表面積は、１ ２０ｍ ｇ^-1に達した。 セラミック様物質を、例１に記載する方法によって得た。ミクロ細孔サイズは １１０Åであり、曲げ応力値は３．５ＭＰａでありかつ微小硬度は３５ＶＨＮで あった。一般に、インヒビターを使用すると、インヒビター無しで得られた固体 に勝る機械的強さの増大した固体ブロック生成物を生成することが観測された。 例６〜８．これらの例は、例５に記載する通りにして実施しかつ異なるインヒ ビターが生成するリン酸カルシウムアパタイトブロック固体の性質に与える作用 を例示する。 インヒビターを使用すると、硬度の増大を生じたことは容易に明らかである。更 に、種々のインヒビターを選定することは、所望の硬度、カーボネート含量、結 晶サイズ及び比表面積を選定することを可能にする。これらのサンプルには熟成 を施さなかったことを注記する。 例９〜１２．これらの例は、例５に記載する通りにして実施しかつ異なるイン ヒビターが生成するリン酸カルシウムアパタイトブロック固体の性質に与える作 用を例示する。 熟成が生成するリン酸カルシウムアパタイトブロック固体のカーボネート含量を 有意に増大させることは容易に明らかである。これらの結果は、更に、カルシウ ム／ホスフェート比を所望の通りに変えることができることを立証する。 例１２．本例は、発明の方法に従うリン酸カルシウムアパタイトの微細粉末の 形成を例示する。 カルシウム及びホスフェートイオン溶液を例１の通りにして調製しかつ一緒に した。沈殿を例１の通りにして捕集しかつ洗浄した。 捕集した後にかつ乾燥する前に、回収された固体を凍結乾燥して自由流動性固 体になり、粒径及び化学組成を調べた。化学分析して、Ｃａ／Ｐ＝１．４５であ り、これは非化学量論性アパタイト相を特性表示するものであった。 凍結乾燥された粉末をｘ線回折して、結晶性不良を示し、骨物質に見られるの に類似した広いピークの外観を有する。アパタイト構造のピーク２１１、００２ 、３１０、２２２、及び２１３を識別することができる。透過電子鏡検法によっ て観測される粒子は、細長いプレート様結晶で、不規則な形状（平均の長さ約３ ００Å）を有していた。 ＩＲ分光測定は、合成アパタイト及び骨ミネラルのスペクトルが類似しており 、アパタイト性環境におけるＰＯ₄ ^3-による吸収バンドを有する。加えて、骨ミ ネラルに見られるのに類似した非アパタイト性の変わりやすい環境が、６１０及 び５３０ｃｍ^-1において観測される。この最後のバンドは、ＨＰＯ₄イオンによ るものである。 比表面積は、１００ｍ²ｇ^-1であり、骨ミネラル結晶について推定される比表 面積と同様であった。水銀多孔度測定法（ｐｏｒｏｓｉｍｅｔｒｙ）は、均一な ミクロ細孔分布を示し、平均細孔直径約３０〜１００Åを有していた。この微孔 質は、タンパク質を加入するのに好都合であると思われる（下記を参照）。 例１３．本例は、骨物質に向かい合って近いカーボネートアパタイトを得るた めに、沈殿を熟成することを例示する。 カーボネートイオンは、骨ミネラルの第三の主要な構成成分である。熟成は、 骨物質の特性に一層近い特性を有するカーボネート化されたアパタイトを調製す ることを可能にした。 例２に従って得られた沈殿を母溶液中に１時間〜１年の範囲の種々の期間熟成 させたままにした。沈殿直後に吸収されたカーボネートイオンの量は非常に少な く（１〜２％）、カーボネートイオンのほとんどは、沈殿を母溶液中で熟成する 間に加入された（１カ月でカーボネート６％）。カーボネートイオンは、骨ミネ ラルにおけるのと同じ部位を占めていた。カーボネートイオンの加入は、ＨＰＯ₄ ^2- 含量の減少、アパタイトの結晶度の増大及び変わりやすい非アパタイト性環 境の量の減少に関係付けられた。１カ月熟成した後に得られたサンプルは、ヒト の骨ミネラルと同様であった。 これらのサンプルは、例１に記載するプロセスに従う固体物質を与えた。それ らは、曲げ強さ２．５ＭＰａ、微小硬度２５ＶＨＮ及び平均１０５Åのミクロ細 孔サイズを特徴とした（インヒビター３及び熟成時間１００日）。 例１４．本例は、タンパク質をリン酸カルシウムアパタイトブロック固体中に 加入することを例示する。 例１の調製方法に従って、牛血清アルブミンを種々の量でアパタイトゲル中に 、アルブミン／（アルブミン＋アパタイト）の比０．５〜５０重量％の範囲で加 入した。 高速撹拌した後に、セラミックを例１の方法に従って調製した。最も高いアル ブミン濃度（５０％）を有するサンプルに関し、ペレットを水中に浸漬した後５ ０時間以内に約８％が放出された。残り（４２％）は、セラミックを酸性媒体中 に完全に溶解することによって放出させることができたにすぎなかった。 発明のその他の実施態様は、当業者にとり、本明細書を検討しかつ本明細書中 に開示する発明を実施することから明らかになるものと思う。明細書及び例は、 単に例示にすぎないと考えるべきであり、発明の真の範囲及び精神は下記の請求 の範囲に示すものであることを意図する。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，Ｌ Ｕ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ， ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，Ｓ Ｚ，ＵＧ)，ＵＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，Ｉ Ｌ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ， ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，Ｒ Ｕ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者 アイオロバ，マライア アメリカ合衆国 02146 マサチューセッ ツ，ブルックライン，シーウォール アベ ニュー 123 (72)発明者 トフィギ，アリ アメリカ合衆国 02178 マサチューセッ ツ，ベルモント，ウェイバリー ストリー ト 204 【要約の続き】

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．下記： カルシウム及びホスフェートイオンを含む水溶液から低結晶度リン酸カルシウ ムを沈殿させ； 低結晶度リン酸カルシウムを溶液から捕集し；及び 低結晶度リン酸カルシウムを、結晶成長を最小にしかつリン酸カルシウムアパ タイトへの転化を助成するように選ぶ相対湿度及び温度において脱水する ことを含む低結晶度リン酸カルシウムアパタイトの製造方法。 ２．更に低結晶度リン酸カルシウムを金型中にキャストした後に脱水すること を含む請求項１の方法。 ３．水溶液を、カルシウム対ホスフェート比約１．３〜１．７の範囲をもたら すように選ぶ請求項１の方法。 ４．水溶液を、カルシウム対ホスフェート比約１．５〜１．６８の範囲をもた らすように選ぶ請求項１の方法。 ５．沈殿を、更にカーボネートイオンを含む水溶液で実施する請求項１の方法 。 ６．水溶液が、ｐＨ約６．０〜約８．５の範囲である請求項１の方法。 ７．水溶液が、ｐＨ約７．３〜約７．５の範囲である請求項１の方法。 ８．カルシウム及びホスフェートイオンを、速い添加によって水溶液中に導入 する請求項１の方法。 ９．カルシウム及びホスフェートイオンを、滴定によって水溶液中に導入する 請求項１の方法。 １０．捕集の工程を、ろ過、遠心分離及び沈降からなる群より選ぶ請求項１の 方法。 １１．水溶液が、更に結晶化インヒビターを含む請求項１の方法。 １２．インヒビターが、カルシウム及びホスフェートイオン源の合計の乾燥重 量の約０．５重量％〜約３０重量％の範囲で存在する請求項１１の方法。 １３．インヒビターを、カーボネートイオン、マグネシウムイオン、及びピロ ホスフェートイオンからなる群より選ぶ請求項１１の方法。 １４．更に、下記： 低結晶度リン酸カルシウムを水曜液中で熟成した後に捕集する ことを含む請求項１又は１１の方法。 １５．熟成を、実質的に子供の骨と同様な組成を有するリン酸カルシウムゲル 得る程の時間実施する請求項１４の方法。 １６．熟成を、実質的に成人の骨と同様な組成を有するリン酸カルシウムゲル 得る程の時間実施する請求項１４の方法。 １７．熟成を、実質的に年配者の骨と同様な組成を有するリン酸カルシウムゲ ル得る程の時間実施する請求項１４の方法。 １８．リン酸カルシウムアパタイトを約１時間〜約１年の範囲の時間熟成する 請求項１４の方法。 １９．リン酸カルシウムアパタイトを約２週間〜約６カ月の範囲の時間熟成す る請求項１４の方法。 ２０．脱水の工程を、温度約１°〜約５０℃の範囲で実施する請求項１又は１ １の方法。 ２１．脱水の工程を、温度約１°〜約５０℃の範囲で実施する請求項１４の方 法。 ２２．脱水の工程を、温度約４°〜約３７℃の範囲で実施する請求項１の方法 。 ２３．低結晶度リン酸カルシウムを脱水する工程が、温度約１°〜約５０℃の 範囲でＲＨ約５５％〜約９９％の範囲内に調節した湿度において脱水することを 含む請求項１又は１１の方法。 ２４．低結晶度リン酸カルシウムを脱水する工程が、温度約１°〜約５０℃の 範囲でＲＨ約５５％〜約９９％の範囲内に調節した湿度において脱水することを 含む請求項１４の方法。 ２５．低結晶度リン酸カルシウムを脱水する工程が、２５℃においてＲＨ約６ ０％〜約７０％の範囲内に調節した湿度において脱水することを含む請求項１又 は１１の方法。 ２６．脱水の工程を、約１週間〜約１年の範囲の時間実施する請求項１又は１ １の方法。 ２７．脱水の工程を、約１週間〜約１年の範囲の時間実施する請求項１４の方 法。 ２８．脱水の工程を、約２週間〜約６カ月の範囲の時間実施する請求項１又は １１の方法。 ２９．脱水の工程を、約３週間〜約４週間の範囲の時間実施する請求項１又は １１の方法。 ３０．脱水の工程を、リン酸カルシウムアパタイトをブロック固体の形態でも たらすように選ぶ請求項１又は１１の方法。 ３１．更に生活性な分子をリン酸カルシウムアパタイト中に入れる工程を含む 請求項１の方法。 ３２．生活性な分子を、捕集した沈殿に加えた後に脱水する請求項３１の方法 。 ３３．生活性な分子を水溶液に加える請求項３１の方法。 ３４．生活性な分子を骨再生タンパク質、及び抗生物質及びその助剤からなる 群より選ぶ請求項３１の方法。 ３５．下記： カルシウム及びホスフェートイオンを含む水溶液から低結晶度リン酸カルシウ ムを沈殿させ； 低結晶度リン酸カルシウムを溶液から捕集し；及び 捕集した低結晶度リン酸カルシウムを、結晶成長を最小にしかつリン酸カルシ ウムアパタイトへの転化を助成するように凍結乾燥させる ことを含む低結晶度リン酸カルシウムアパタイトの製造方法。 ３６．請求項１、１１又は３１の方法に従って製造される低結晶度リン酸カル シウムアパタイト。 ３７．請求項１４の方法に従って製造される低結晶度リン酸カルシウムアパタ イト。 ３８．多孔度約３０Å〜約１００Åの範囲及び硬度約２０ＶＨＮ〜約４０ＶＨ Ｎの範囲を有する固体ブロック物質として特性表示される低結晶度リン酸カルシ ウムアパタイト。 ３９．更に、多孔度約３０Å〜約１００Åの範囲を有することを特徴とする請 求項３６の低結晶度リン酸カルシウムアパタイト。 ４０．更に、硬度約２０ＶＨＮ〜約４０ＶＨＮの範囲を有することを特徴とす る請求項３６の低結晶度リン酸カルシウムアパタイト。 ４１．更に、多孔度約３０Å〜約１００Åの範囲を有することを特徴とする請 求項３７の低結晶度リン酸カルシウムアパタイト。 ４２．更に、硬度約２０ＶＨＮ〜約４０ＶＨＮの範囲を有することを特徴とす る請求項３７の低結晶度リン酸カルシウムアパタイト。