JP2002201372A

JP2002201372A - 植物色素化合物及びその利用

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Publication number: JP2002201372A
Application number: JP2001301565A
Authority: JP
Inventors: Yuko Fukui; 祐子福井; Takaaki Kusumi; 高章久住; Takashi Iwashita; 孝岩下; Katsuyoshi Masuda; 勝吉益田; Kyosuke Nomoto; 享資野本
Original assignee: Suntory Ltd
Current assignee: Suntory Ltd
Priority date: 2000-09-29
Filing date: 2001-09-28
Publication date: 2002-07-19
Anticipated expiration: 2021-09-28
Also published as: JP4877695B2

Abstract

(57)【要約】（修正有）【課題】バラの花の新規な色素の提供。【解決手段】一般式Ｉ、例えば式２０の新規な色素化合物、並びにこの色素が増強されたバラ
植物。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、植物、特にバラの
色素、例えば青色色素、及びその製造方法、並びにこれ
らの色素が増強された新規なバラ植物に関する。

【０００２】

【従来の技術】バラは切り花として重要な植物であり、
その色素は詳細に調べられている。例えばアントシアニ
ン系色素としては、シアニジン３，５−ジグルコシ
ド、ペラルゴニジン３，５−ジグルコシド、シアニジ
ン３−グルコシド、ペラルゴニジン３−グルコシ
ド、ペオニジン３，５−ジグルコシド、ペオニジン
３−グルコシドが知られている。また、黄色を呈する多
くのカロテノイド化合物も知られている。これらの色素
が一緒になって赤色〜橙色を呈し、このため青や紫の花
を咲かせるバラは知られていない。また、バラ科植物の
交配を繰り返すことによる育種が試みられているが、青
や紫色を呈する花を咲かせるバラの育種には成功してい
ない。

【０００３】青色の花を咲かせるバラを育種するために
はバラの花に青色色素を増加させる必要があり、そのた
めの手段の１つとして、青色色素を生合成する酵素系を
コードする遺伝子系をバラ植物に導入してトランスジェ
ニック植物を作出することが考えられるが、このために
は、バラにおいて効果的な青色色素の構造を解明してそ
の生合成系に関与する酵素を特定する必要がある。しか
しながら、バラに青色色素が存在することは知られてい
たものの、その色素が単離されたことはなく、その構造
が調べられたこともない。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】従って本発明は、バラ
に由来する新規な色素化合物及びそれらから誘導される
色素化合物を提供しようとするものである。本発明はさ
らに、変異処理により作出した、青色色素が増加したバ
ラ植物を提供する。

【０００５】

【課題を解決するための手段】上記の課題を解決するた
め、本発明は、次の一般式（Ｉ）：

【化１３】〔式中、Ｒ₁及びＲ₂は一緒になって−Ｏ−を形成する
か；あるいはＲ₁は、下記の基（ａ）：

【化１４】

【０００６】または、下記の基（ｂ）：

【化１５】

【０００７】または、下記の基（ｃ）：

【化１６】

【０００８】または、下記の基（ｄ）：

【化１７】

【０００９】または、下記の基（ｅ）：

【化１８】であり、そしてＲ₂は−ＯＨである〕により表わされる
化合物を提供する。

【００１０】本発明はまた、上記の化合物の製造方法を
提供する。本発明はさらに、青色色素が増強されたバラ
植物の製造方法において、バラ植物の組織もしくは器官
を変異原により処理し、又はバラ植物から誘導されたカ
ルスを変異原により処理し、変異原処理されたカルスの
場合はバラ植物を再生し、そして青色色素が増強された
バラ植物を選択する、ことを特徴とする方法を提供す
る。本発明はまた、上記の方法により製造されたバラ植
物を提供する。

【００１１】

【発明の実施の形態】本発明の色素化合物の内、一般式
（Ｉ）においてＲ₁とＲ₂が一緒になって−Ｏ−を構成す
る化合物（化合物VIと称する）、一般式（Ｉ）において
Ｒ₁が上記式（ａ）により表わされ、そしてＲ₂が−ＯＨ
である化合物（化合物IIと称する）、及び一般式（Ｉ）
においてＲ₁が上記式（ｅ）により表わされ、そしてＲ₂
が−ＯＨである化合物（化合物VIIと称する）は、バラ
の花弁の抽出により得られる。具体的な抽出方法は実施
例１，２及び４に示す。

【００１２】また、式（Ｉ）において、Ｒ₁が基（ｂ）
であり、そしてＲ₂が−ＯＨである化合物（化合物IIIと
称する）；Ｒ₁が基（ｃ）であり、そしてＲ₂が−ＯＨで
ある化合物（化合物IVと称する）；及びＲ₁が（ｄ）で
あり、そしてＲ₂が−ＯＨである化合物（化合物Ｖと称
する）は、化合物IIを部分加水分解（穏和な条件下での
加水分解）することにより得られる。具体的な方法を実
施例３に記載する。

【００１３】本発明の化合物（III），（IV）及び
（Ｖ）はまた、化合物（VI）に、最終化合物に対応する
置換基（ｂ），（ｃ）又は（ｄ）を縮合させることによ
っても製造することができる。また、本発明の化合物
（III）及び（IV）は、化合物（Ｖ）に１個又は２個の
没食子酸を結合させることによっても製造することがで
きる。本発明によればさらに、化合物（Ｖ）又は（Ｖ）
に種々の没食子酸誘導体を縮合せしめることにより、対
応する種々の色素化合物を得ることができる。

【００１４】本発明はさらに、変異処理により青色色素
が増強されたバラ植物を提供する。この方法は、バラ植
物の組織、例えば葉、茎頂、根等から常法に従ってカル
スを形成し、このカルスを、あるいはバラ植物の組織又
は器官自体を、常用の変異原、例えば、窒素イオンビー
ム、ネオンイオンビーム等の重イオンビーム、γ−線、
Ｘ−線、放射線などの物理的変異原、あるいはＥＭＳ
（エチルメタンスルホン酸）やＥＩ（エチレンイミ
ン）、ＮＭＵ（ニトロソメチルウレア）、ＭＮＮＧ（メ
チルニトロソグアニジン）アジ化ナトリウムなどの化学
的変異原等により処理する。

【００１５】次に、変異処理した組織、器官又はカルス
を常法に従って培養して、再生を行い、再生した植物あ
るいは変異処理した植物自体から色素を抽出し、変異処
理前の親植物からの抽出物に比べて色素、例えば青色色
素が増加している植物を選択すればよい。この具体例を
実施例５に記載する。

【００１６】一般に、色調呈色の程度は、可視紫外吸収
スペクトルの極大吸収値λｍａｘの数値で表現すること
ができる。凡その目安として、４８０nmであれば橙色、
５２０nmであれば赤、５４０nmであれば紫、５６０nmで
あれば青いとされるが、天然に青色の花が極めてまれで
あることから花卉業界においては花色の場合紫ががった
色は青色と称する慣習があり、このため青色の範囲はλ
ｍａｘが５４０nm以上、さらに好ましくは５５０nmから
６２０nmの範囲であり、本発明により得られた色素はこ
の範囲であることを、実施例に記載する。また、色調呈
色の程度は、測色計を用いて色相角度を測定することに
より簡便に知ることもできる。色調をＬ^*ａ^*ｂ^*表色系
で表した場合の色相角度で表現すると４０〜６５°が橙
色、０〜４０°が赤色、３２０〜３６０（０）°が紫、
３００〜３３０°がすみれ色、２８０〜３００°が青
紫、２４０〜２８０°が青色に分類されるが、花卉業界
においては紫やすみれ色の花は慣例的に青花と呼ばれ
る。本発明により得られたバラ植物の花弁はいわゆる青
花、すなわち紫の範囲の色相角度を呈することを、実施
例に記載する。種々の既知のバラについて、花弁中の青
色色素（II）の含量を測定したところ、実施例６の表４
に示すごとく、最も含量の高いパープルレインにおいて
0.036mg/g花弁であり、他のバラの花弁におけるこの色
素の含量はいずれもこの量より少なかった。これに対し
て、実施例５の表３の下表に示すごとく、本発明によ
り、花弁中の青色色素（II）がおよそ0.05〜0.08mg/g花
弁にまで増加しており、花弁の青色色素が増大している
バラが初めて得られた。

【００１７】従って、本発明はまた、式（II）、（IV）
または（VII）により示される色素の含量が、花弁中
で、従来種よりも増大しているすなわち0.036mg/g以上
である新規なバラを提供する。本発明は特に、花弁中
で、式（II）で示される色素が0.036mg/g以上である新
規なバラを提供する。好ましくは、式（II）、（IV）ま
たは（VII）で示される色素、特に式（II）で示される
色素の含量は、0.04mg/g花弁以上、例えば0.047mg/g花
弁以上、より好ましくは0.05mg/g花弁以上、更に好まし
くは0.055mg/g花弁以上、さらに好ましくは0.06mg/g花
弁以上、さらに好ましくは0.07mg/g花弁以上、更に好ま
しくは、表３のN10-28により示されるごとく、0.08mg/g
花弁以上である。

【００１８】

【実施例】次に、本発明を実施例によりさらに具体的に
記載する。実施例１．色素化合物（II）の単離バラ品種「マダムビオレ」の花弁7.9kgをホモジナイザ
ーを用いて液体窒素中で凍結粉砕し、得られたパウダー
に0.1%TFAを含む80%アセトニトリル15Lを加え一晩浸漬
した。珪藻土ろ過し、残査は0.1%TFAを含む50%アセトニ
トリル14Lに再び一晩浸漬し、珪藻土ろ過した。2回のろ
液を合せてロータリーエバポレーターで約2/5の体積ま
で濃縮した。

【００１９】この濃縮した抽出液を0.1%TFAを含む30%ア
セトニトリルで平衡化したSephadexLH-20カラム（ファ
ルマシア）(9L)に負荷した。0.1%TFAを含む30%アセトニ
トリル45Lでアントシアニンを含む画分を溶出した後、6
0%アセトニトリルで青色色素（化合物II及びVII）を含
む画分（35L）を溶出した。さらに80%アセトンで化合物
VIを含む画分（8L）を溶出した。60%アセトニトリル溶
出画分はロータリーエバポレーターで約1/3に濃縮した
後、吸着樹脂HP-20（三菱化成）1.5Lに負荷した。2Lの
水洗後3Lの0.1%TFAを含む10%アセトニトリル、0.1%TFA
を含む50%アセトニトリルでステップワイズに溶出し
た。50%画分に青色色素（化合物II）が溶出した。

【００２０】この画分を凍結乾燥後、分取HPLCで精製し
た。カラムはC8のDYNAMAX-60A（レイニン社製）4cmφ×
30cm、移動相はA:水、B:50%アセトニトリル0.5%TFA、20
ml/min.、以下のグラジエントで行った。B40%(30min保
持）B40→B100%のリニアグラジエント（50min）検出はA
260nm−AUFS:2.56。50-60minに溶出した化合物IIを集め
凍結乾燥した。クロマトは17回にわけて繰り返し行った
（化合物（II）の純度約1%）。

【００２１】C8で得られた青色色素画分をODSカラムで
再度クロマトを行った。カラムはDeverosil-ODS（野村
化学社製）5cmφ＊30cm、移動相はA:水、B:50%アセトニ
トリル0.5%TFA、32ml/min.、以下のグラジエントで行っ
た。B45%(20min保持）B45→B70%のリニアグラジエント
（50min）検出はA260nm−AUFS:1.0。55-62minに溶出し
た化合物IIを集め凍結乾燥した。クロマトは6回にわけ
て繰り返し行った（化合物（II）の純度約15%）。

【００２２】ODSで得られた青色色素をさらに精製し
た。カラムはAsahipak-ODP50（昭和電工社製）2.15cmφ
＊30cm、移動相はA:水、B:50%アセトニトリル0.5%TFA、
6ml/min.、以下のグラジエントで行った。B65%(35min保
持）B65→B75%のリニアグラジエント（15min）検出はA2
60nm−AUFS:0.64。47-68minに溶出した化合物IIを集め
凍結乾燥した。クロマトは16回にわけて繰り返し行った
（化合物IIの純度約70-95%）。

【００２３】この化合物の構造をNMR、FAB-MSなどによ
り決定したところ、下記の式（II）(Ｃ₅₆Ｈ₃₇Ｏ₃₁）：

【化１９】により表わされることが明らかになった。

【００２４】この化合物（II）の理化学的性質は、次の
通りであった。１．可視紫外吸収スペクトル 82μg の化合物（II）を5mlのメタノールに溶解し、700
-200nmの吸収スペクトルを測定した（島津分光光度計UV
-265）。この結果を図１及び下記表１に示す。

【００２５】

【表１】

【００２６】２．FAB-MSーネガティブ、ポジティブ及び
高分解能質量分析の測定を行った。 1203(M-2H)^- 、1205 (M)⁺ 分子式は高分解能質量分析により求めた。Ｃ₅₆Ｈ₃₇Ｏ₃₁、MW=1205.1319、Err +0.2ppm/+0.2mmu U.
S.:38.5 ３．NMRスペクトル 20mgの化合物（II）を用いて0.5%TFA-d/DMSO-d6、0.6ml
中でBruker DMX-750で測定した。測定項目は¹H、¹³C、D
QF-COSY、HSQC、HMBC(65ms、300ms)、NOESY(100ms、200
ms、500ms、1sec) であった。¹H NMR及び¹³C NMRの結果
を図５に示す。

【００２７】また、単離した化合物（II）のＨＰＬＣの
クロマトグラムを図２に示す。分析条件は、次の通りで
あった。分析条件はカラム：昭和電工Asahipack ODP-50 4.6mm*2
50mm、移動相：35%CH3CN,0.5%TFA、検出：A560nm及び25
0-650nm（Photodiode array検出器島津SPD-M10A）溶出時間17分及び20分のピークの合計面積を化合物（I
I）として計算。この化合物はメタノール、エタノー
ル、アセトニトリル、DMSO又はアセトン溶液においてλ
max 580nm付近の青色を呈し、水溶液においてλmax 560
nmの青紫色を呈する。

【００２８】実施例２色素化合物（VI）の単離実施例１において、Sephadex LH-20から80％アセトンに
より溶出した画分を吸着樹脂HP-20（三菱化成）1.5Lに
負荷した。2Lの水洗後2Lの0.1%TFAを含む15%アセトニト
リル、0.1%TFAを含む20%アセトニトリル、0.1%TFAを含3
0%アセトニトリルでステップワイズに溶出した。30%画
分に化合物VIが溶出した。

【００２９】30%アセトニトリル画分を凍結乾燥しその
粉末を7回に分けて分取HPLCにかけた。カラムはDeveros
il-ODS（野村化学社製）5cmφ＊50cm、移動相はA:水、
B:50%アセトニトリル0.5%TFA、32ml/min.、以下のグラ
ジエントで行った。B30%(30min保持）B30→B100%のリニ
アグラジエント（30min）の後B100%で50min保持した。
検出はA260nm−AUFS:1.28。90-92minに溶出した化合物V
I画分を集め凍結乾燥した（化合物（VI）の純度約5
%）。

【００３０】5cmの分取HPLCで得られた色素画分をセミ
分取HPLCで再度精製した。カラムはD-ODS-5（野村化
学）2 cmφ＊30cm、移動相はA:水、B:50%アセトニトリ
ル0.1%HCl、6ml/min.、以下のグラジエントで行った。B
70%(30min保持）B70→B100%のリニアグラジエント（20m
in）B100%を30min保持。検出はA260nm−AUFS:0.32。50-
53minに溶出した化合物VI画分を集め凍結乾燥した（化
合物VIの純度約30-60%）。得られた色素を少量のエタノ
ールに溶かし徐々に水を加えて静置した。沈殿した赤色
色素を遠心分離により補集した（化合物（VI）の純度約
90%）。

【００３１】この化合物の構造は、NMR、FAB-MSなどに
より、次の式（VI）(Ｃ₂₂Ｈ₁₁Ｏ₉）：

【化２０】であることが決定された。

【００３２】化合物（VI）の理化学的性質は次の通りで
あった。１．可視紫外吸収スペクトル λmax＝529nm（0.5%TFA、35%アセトニトリル中）であっ
た。この結果を図３に示す。２．マススペクトル及び高分解能質量分析 FAB-MSはJEOL-DX-300/DA-5000でポジティブの測定を行
った。 M+＝419 高分解能質量分析により求めた分子式：Ｃ₂₂Ｈ₁₁Ｏ₉、M
W=419.0409

【００３３】３．NMRスペクトル 2mgの化合物（VI）を用いて0.5%DCl/DMSO-d6、0.6ml中
でBruker DMX-750で測定した。測定項目は¹H、¹³C、DQF
-COSY、HSQC、HMBC、NOESYであった。¹H NMRの結果を図
６に示す。この化合物はメタノール又はエタノール溶液
において赤色を呈する。

【００３４】実施例３．化合物（II）の加水分解によ
る化合物（III）,（IV）及び（Ｖ）の製造化合物（II） 20mgを5%EtOHを含む0.1Mリン酸緩衝液
（pH5.5）に溶解しTannase（フナコシ株式会社）10mgを
加え室温で16時間攪拌した。セップパックC18（ウォー
ターズ株式会社）に反応液を負荷し水洗後、0.1%TFAを
含む50%CH3CN／H2Oで反応物を溶出した。この反応物を
分取HPLCでクロマトし化合物（II）から没食子酸が1個
または2個外れた色素を得た。

【００３５】分取HPLCの条件カラム：YMC-polymerC18、 2cmｘ30cm 移動相：0.5%TFAを含むCH3CN25%から50%のグラジエント
溶出を50分の後50%CH3CNを30分保持した。このクロマト
で53〜55分に溶出した物が化合物（Ｖ）である。また65
〜67分溶出した物が化合物（III）及び化合物（IV）で
あった。これらの化合物は35%CH3CN、0.5%TFA中で化合
物IIと同様に580nmに極大吸収をもつ青色色素であっ
た。

【００３６】上記の方法により得た分解生成物を、NM
R、FAB-MSなどにより構造決定したところ、各化合物の
構造は次の通り、決定された。化合物（III)の構造：

【化２１】

【００３７】化合物（IV）の構造：

【化２２】

【００３８】化合物（Ｖ）の構造：

【化２３】

【００３９】化合物（III）,（IV）及び（Ｖ）の理化学
的性質は次の通りであった。化合物（III）（Ｃ₄₉Ｈ₃₃Ｏ₂₇） λｍａｘ（３５％ＣＨ₃ＣＮ／Ｈ₂Ｏ、0.5％ TFA）580
nm FAB-MS [M]⁺＝1053化合物（IV）（Ｃ₄₉Ｈ₃₃Ｏ₂₇） λｍａｘ（３５％ＣＨ₃ＣＮ／Ｈ₂Ｏ、0.5％ TFA）580
nm FAB-MS [M]⁺＝1053

【００４０】化合物（Ｖ）（Ｃ₄₂Ｈ₂₄Ｏ₂₃） λｍａｘ（３５％ＣＨ₃ＣＮ／Ｈ₂Ｏ、0.5％ TFA）578
nm FAB-MS [M]⁺＝901 化合物（III）,（IV）及び（Ｖ）は、メタノール、エタ
ノール、アセトニトリル又はアセトン溶液においてλma
x 580nm付近の青色を呈し、水溶液においてλmax 560nm
の青紫色を呈する。

【００４１】実施例４．色素化合物（VII ）の単離バラ品種「マダムビオレ」（月本バラ園（京都）より購
入）の花弁7.9kgをホモジナイザーを用いて液体窒素中
で凍結粉砕し得られたパウダーに0.1%TFAを含む80%アセ
トニトリル15Lを加え一晩浸漬した。珪藻土ろ過し、残
査は0.1%TFAを含む50%アセトニトリル14Lに再び一晩浸
漬し、珪藻土ろ過した。2回のろ液を合せてロータリー
エバポレーターで約2/5の体積まで濃縮した。

【００４２】この濃縮した抽出液を0.1%TFAを含む30%ア
セトニトリルで平衡化したsephadexLH-20カラム（ファ
ルマシア）(9L)に負荷した。0.1%TFAを含む30%アセトニ
トリル45Lでアントシアニンを含む画分を溶出した後、6
0%アセトニトリルで青色色素（化合物II及びVII）を含
む画分（35L）を溶出した。さらに80%アセトンで化合物
（VI）を含む画分（8L）を溶出した。

【００４３】60%アセトニトリル溶出画分はロータリー
エバポレーターで約1/3に濃縮した後、吸着樹脂HP-20
（三菱化成）1.5Lに負荷した。2Lの水洗後3Lの0.1%TFA
を含む10%アセトニトリル、0.1%TFAを含む50%アセトニ
トリルでステップワイズに溶出した。50%画分に青色色
素（化合物II及びVII）が溶出した。この画分を凍結乾
燥後、分取HPLCで精製した。

【００４４】カラムはDeverosil-ODS（野村化学社製）5
cmφ＊50cm、移動相はA:水、B:50%アセトニトリル0.5%T
FA、32ml/min.、以下のグラジエントで行った。B45%(20
min保持）B45→B70%のリニアグラジエント（50min）検
出はA260nm−AUFS:1.0。51-54minに溶出した青色色素を
集め凍結乾燥した。ODSで得られた青色色素をさらに精
製した。カラムはYMC-polynerC18（YMC社製）2cmφ＊30
cm、移動相はA:水、B:50%アセトニトリル0.5%TFA、6ml/
min.、以下のグラジエントで行った。B75%(30min保持）
B75→B100%のリニアグラジエント（20min）の後B100%30
分保持。検出はA560nm−AUFS:0.06、52-62minに溶出し
た青色色素を集め凍結乾燥した。（化合物VIIの純度約2
0%）。

【００４５】olynerC18で得られた青色色素をさらに精
製した。カラムはDeverosil C30-UG（野村化学社製）2c
mφ＊30cm、移動相はA:水、B:50%アセトニトリル0.5%TF
A、6ml/min.、以下のグラジエントで行った。B52%(30mi
n保持）B52→B100%のリニアグラジエント（20min）の後
B100%、20分保持。検出はA560nm−AUFS:0.06、44-55min
に溶出した青色色素を集め凍結乾燥した。（化合物VII
の純度約90%）

【００４６】化合物VIIの理化学的性質（１）可視紫外吸収スペクトル Shimadzu Photodiodearray検出器で650-250nmの吸収ス
ペクトルを測定した。けっかを図７に示す。（２）FAB-MSで高分解能MSの測定を行った。その結果分
子量は1357.1510で、分子式はC₆₃H⁴¹O₃₅であった。（３）NMRスペクトル 4mgのRBEを用いて1%DC/DMSO-d6、0.5ml中でBruker DMX-
750で測定した。測定項目は¹H、DQF-COSY、TOCSY、HSQ
C、HMBC、NOESY 結果を図８に示す。（４）色素化合物（VII）の構造は次の通りである。

【００４７】

【化２４】

【００４８】（５）分子量など 1357.98（C₆₃H₄₁O₃₅ ⁺）；C55.72；H3.04；O41.24実施例５．青色色素が増強されたバラの作出カルスの形成マダムビオレの茎頂を、ＭＳ培地にベンジルアデニン
（BA）2.25mg／Ｌ、ジベレリン（GA）3.46mg／Ｌ、ショ
糖30ｇ／Ｌ及びジェランガム２ｇ／Ｌ加えた固体培地で
培養し、カルスを誘導した。

【００４９】変異処理リングサイクロトロン施設において、窒素イオンビーム
（135MeV/u)及びネオンイオンビーム（135Me/u)をそれ
ぞれ０〜50Gyの線量で照射した。植物の再成各照射につき50個づつ（計900個）のカルスを用い、次
のようにして植物の再生を行った。ベンジルアデニン
（BA）１mg／Ｌ及びナフタレン酢酸（NAA）0.005mg／Ｌ
を添加したＭＳ改変培地にカルスを移植し、再生シュー
トを得た。再生シュートを発根処理した後、馴化し、鉢
上げし、温室で栽培して開花させた。上記の方法におい
て、900個のカルスから378の再生個体を得て、色調又は
形状の変化した個体47株を得た。結果を次の表２に示
す。

【００５０】

【表２】

【００５１】色素の分析上記の方法により再生した植物を温室で栽培し、開化さ
せた後、花弁に含まれる化合物II及びシアニジンを次の
ようにして測定した。花弁を約0.5ｇ秤量し、凍結乾燥
した後、５０％ＣＨ₃ＣＮ／0.1％ TFA溶液４mlで抽
出を行った。化合物（II）は実施例１に記載した方法に
よりＨＰＬＣを行った。

【００５２】一方、シアニジンは、抽出液を0.2ml乾固
し、0.2mlの6N-HCl中で100℃で20分加水分解した後、HP
LCで分析した。分折条件はカラム：YMC ODS-A312 6mm*1
50mm、移動相：CH₃COOH：CH₃OH：H₂O＝15:20:65、検
出：A520nm及び400-600nm（Photodiode array検出器島
津SPD-M10A）とした。結果を次の表３に示す。

【００５３】

【表３】

【００５４】上記の通り、花弁の色が、親植物のそれに
比べて赤方向に変化したバラ植物が10個体、青方向に変
化したバラ植物が６個体得られた。なお、色素をＨＰＬ
Ｃにより分析した結果の１例を図４に示す。

【００５５】実施例６．各バラ品種の花弁中の化合物
（II）の含量実施例１及び５に記載した方法により、各バラ品種の花
弁中の化合物IIの含量を測定し、次の表４に示す。

【００５６】

【表４】藤色系のバラにはどれも化合物（II）が含まれているこ
とが確認された。

【００５７】

【発明の効果】本発明により、バラの花弁中の青色系色
素の幾つかが抽出、単離され、またその誘導体が得ら
れ、それらの構造が解明された。これにより、バラの色
を遺伝子工学的に改変した新規なバラ植物の作出の基礎
が与えられたのみならず、本発明の色素は、例えばバラ
などの切花に吸収させることにより切花の色を改良する
のに使用できる可能性があり、さらにはより一般に植物
性天然色素として、例えば飲食物の加色などへの利用も
期待される。

【図面の簡単な説明】

【図１】図１は、本発明の化合物（II）のメタノール中
での可視〜紫外線吸収スペクトルを示す図である。

【図２】図２は本発明の化合物（II）をＨＰＬＣにより
分析した際のクロマトグラムで、化合物（II）は糖の１
位がαとβの互変異性を示すため２本のピークが認めら
れる。

【図３】図３は、本発明の化合物（VI）の溶剤３５％Ｃ
Ｈ₃ＣＮ／0.5％ TFA中での可視〜紫外線吸収スペクト
ルを示す図である。

【図４】図４は実施例４においてバラ品種マダムビオレ
を重イオン照射した物と同様にカルスから再生した非照
射の株の花弁から抽出した色素をＨＰＬＣにより分析し
た結果を示すクロマトグラムであり、クロマトグラム中
の１８．８５分及び２２．５２分のピークが、互変異性
体からなる混合物である化合物（II）を構成する図２に
おける１７．０６分と１９．８７分のピークに相当す
る。

【図５】図５は、化合物（II）の⁺ＨＮＭＲスペクト
ル及び¹³ＣＮＭＲスペクトルを示す。

【図６】図６は、化合物（VI）の⁺ＨＮＭＲスペクト
ルを示す。

【図７】図７は、色素化合物（VII ）の650-250nm吸収
スペクトルを示す。

【図８】図８は、色素化合物（VII ）の⁺H NMRスペクト
ルを示す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ｃ１２Ｎ 5/04 Ｃ１２Ｎ 15/00 Ｘ 15/01 5/00 Ｆ (72)発明者岩下孝大阪府三島郡島本町若山台１丁目１番１号財団法人サントリー生物有機科学研究所内 (72)発明者益田勝吉大阪府三島郡島本町若山台１丁目１番１号財団法人サントリー生物有機科学研究所内 (72)発明者野本享資大阪府茨木市若園町15番９Ｆターム(参考） 2B030 AB03 AD08 CA08 CA10 CD17 4B065 AA89X AC14 BA16 CA53 4C057 BB02 DD01 HH04 4C071 AA02 BB02 BB06 CC13 EE07 FF17 GG03 HH09 JJ01 KK17 LL04

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】次の一般式（Ｉ）【化１】〔式中、Ｒ₁及びＲ₂は一緒になって−Ｏ−を形成する
か；あるいは、Ｒ₁は、下記の基（ａ）：【化２】または、下記の基（ｂ）：【化３】または、下記の基（ｃ）：【化４】または、下記の基（ｄ）：【化５】または、下記の基（ｅ）：【化６】であり、そしてＲ₂は−ＯＨである〕により表わされる
化合物。
【請求項２】次の式（II）：【化７】により表わされる化合物。
【請求項３】次の式（III)：【化８】により表わされる化合物。
【請求項４】次の式（IV)：【化９】により表わされる化合物。
【請求項５】次の式（Ｖ）：【化１０】により表わされる化合物。
【請求項６】次の式（VI）：【化１１】により表わされる化合物。
【請求項７】次の式（VII）：【化１２】により表わされる化合物。
【請求項８】請求項１，２，４又は７に記載の化合物
の製造方法において、バラ植物から、上記化合物を採取
することを特徴とする方法。
【請求項９】前記バラ植物が、マダムビオレ、パープ
ルレイン、ラバンデ、マンハッタンブルー、シャンテリ
ーレース、ブルームーン、タソガレ、シャルルドゴー
ル、バイオレットドリー、ブルーリボン、アオゾラ、レ
ディエックス、ブルーバユー、またはスターリングシル
バーである、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】請求項３〜５のいずれか１項に記載の
化合物の製造方法において、請求項２に記載の化合物を
部分加水分解することを特徴とする方法。
【請求項１１】花弁の色素の含量が変化したバラ植物
の製造方法において、バラ植物の組織、器官またはカル
スを変異原により処理し、処理した組織、器官またはカ
ルスから個体を再生し、そして、色素の量の変化を指標
としてバラ植物を選択することを特徴とする方法。
【請求項１２】バラ植物のカルスを変異原により処理
して突然変異を誘発させることを特徴とする、請求項１
１に記載の方法。
【請求項１３】重イオンビーム照射により突然変異を
誘発させて花弁の色素の含量を変化させることを特徴と
する、請求項１１または１２に記載の方法。
【請求項１４】選択の指標とする前記色素が、請求項
１に記載の一般式（I）で表される色素である、請求項
１１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】選択の指標とする前記色素が、請求項
２に記載一般式（II）で表される色素である、請求項１
１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】一般式（I）で表される色素の濃度が
0.033mg/g花弁以上であることを選択の指標とする、請
求項１４に記載の方法。
【請求項１７】一般式（II）で表された色素の濃度が
0.033mg/g花弁以上であることを選択の指標とする、請
求項１５に記載の方法。
【請求項１８】花弁の色素の含量の変化を、色相角度
で測定することを特徴とする、請求項１１〜１５のいず
れか１項に記載の方法。
【請求項１９】色相角度が343以下であることを選択
の指標とする、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】請求項１１〜１８のいずれか１項に記
載の方法により得られる、花弁の色素含量が変化したバ
ラ植物。
【請求項２１】花弁中の、式（II）、（VI）または
（VII）により示される色素の含量が、0.036mg/g花弁以
上である、バラ植物。
【請求項２２】花弁中の、式（II）により示される色
素の含量が0.036mg/g花弁以上である、請求項２１また
は２２に記載のバラ植物。