JP2003210136A - 保健栄養食品の製造方法 - Google Patents
保健栄養食品の製造方法Info
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 発酵性菌類として効率よく基材を資化する菌
株を採用し、これによって保健作用をより確実に発揮す
る液状の保健栄養食品の生産効率を改善することであ
る。 【解決手段】 コーンスターチを含む澱粉をアミラーゼ
で加水分解した糖化物を培地用基材とし、これに野菜汁
および窒素源としてイーストを添加して発酵用培地を調
整し、この培地に納豆菌であるバチルス ズブチリス
ＡＫ（ＦＥＲＭ Ｐ−１８２９１）および乳酸菌を含む
発酵菌を接種し、発酵および熟成させた後、生成した液
状成分を分取して食品用原液とすることからなる保健栄
養食品の製造方法としたのである。所定の発酵用培地で
所定の納豆菌が効率よく糖および窒素源を資化し、発酵
生産物として各種の活性を有するアミノ酸、リポ蛋白、
リポ多糖（リポポリサッカライド）、リピッドなどを生
成する。
株を採用し、これによって保健作用をより確実に発揮す
る液状の保健栄養食品の生産効率を改善することであ
る。 【解決手段】 コーンスターチを含む澱粉をアミラーゼ
で加水分解した糖化物を培地用基材とし、これに野菜汁
および窒素源としてイーストを添加して発酵用培地を調
整し、この培地に納豆菌であるバチルス ズブチリス
ＡＫ（ＦＥＲＭ Ｐ−１８２９１）および乳酸菌を含む
発酵菌を接種し、発酵および熟成させた後、生成した液
状成分を分取して食品用原液とすることからなる保健栄
養食品の製造方法としたのである。所定の発酵用培地で
所定の納豆菌が効率よく糖および窒素源を資化し、発酵
生産物として各種の活性を有するアミノ酸、リポ蛋白、
リポ多糖（リポポリサッカライド）、リピッドなどを生
成する。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】この発明は、健康増進に良い
影響をもたらす食品である保健栄養食品の製造方法に関
する。
影響をもたらす食品である保健栄養食品の製造方法に関
する。
【０００２】
【従来の技術】ヒトの健康を増進させる保健栄養食品と
して、生体に必要な諸成分を体内で効率よく生成するよ
うに代謝活性を高めると共に、Ｔリンパ球を幼若化させ
て免疫機能を増強する作用があると考えられている発酵
代謝物エキスとしてエンザミン（商品名）が周知であ
り、その製造方法が特開昭５４−１６０７８７号公報に
開示されている。
して、生体に必要な諸成分を体内で効率よく生成するよ
うに代謝活性を高めると共に、Ｔリンパ球を幼若化させ
て免疫機能を増強する作用があると考えられている発酵
代謝物エキスとしてエンザミン（商品名）が周知であ
り、その製造方法が特開昭５４−１６０７８７号公報に
開示されている。
【０００３】同公報によると、生体内代謝調節活性因子
を含む飲料原液は、イエローコンスターチをアミラーゼ
で充分に消化させた後、パン酵母と野菜の圧搾汁を混ぜ
て高圧殺菌し、冷却した培地を用い、この培地に、訓化
した納豆菌や、麹菌、乳酸菌などの発酵菌を接種して恒
温状態で２ヶ月以上発酵させ、さらに６ヶ月以上熟成さ
せて、透明化した濾液を分取することにより製造するこ
とができる。
を含む飲料原液は、イエローコンスターチをアミラーゼ
で充分に消化させた後、パン酵母と野菜の圧搾汁を混ぜ
て高圧殺菌し、冷却した培地を用い、この培地に、訓化
した納豆菌や、麹菌、乳酸菌などの発酵菌を接種して恒
温状態で２ヶ月以上発酵させ、さらに６ヶ月以上熟成さ
せて、透明化した濾液を分取することにより製造するこ
とができる。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】しかし、上記した従来
の保健栄養食品の製造方法では、発酵性菌類として基材
を効率よく資化するものが開示されていないために、生
産効率が充分に高くなく、保健作用が確実に発揮される
栄養食品が効率よく製造できないという問題点がある。
の保健栄養食品の製造方法では、発酵性菌類として基材
を効率よく資化するものが開示されていないために、生
産効率が充分に高くなく、保健作用が確実に発揮される
栄養食品が効率よく製造できないという問題点がある。
【０００５】そこで、この発明の課題は、上記した問題
点を解決して、発酵性菌類として効率よく基材を資化す
る菌株を採用し、また保健作用をより確実に発揮する保
健栄養食品の製造方法にすることである。
点を解決して、発酵性菌類として効率よく基材を資化す
る菌株を採用し、また保健作用をより確実に発揮する保
健栄養食品の製造方法にすることである。
【０００６】
【課題を解決するための手段】上記の課題を解決するた
め、この発明では、コーンスターチを含む澱粉をアミラ
ーゼで加水分解した糖化物を培地用基材とし、これに野
菜汁および窒素源としてイーストを添加して発酵用培地
を調整し、この培地に納豆菌であるバチルスズブチリス
ＡＫ（ＦＥＲＭ Ｐ−１８２９１）および乳酸菌を含
む発酵菌を接種し、発酵および熟成させた後、生成した
液状成分を分取して食品用原液とすることからなる保健
栄養食品の製造方法としたのである。
め、この発明では、コーンスターチを含む澱粉をアミラ
ーゼで加水分解した糖化物を培地用基材とし、これに野
菜汁および窒素源としてイーストを添加して発酵用培地
を調整し、この培地に納豆菌であるバチルスズブチリス
ＡＫ（ＦＥＲＭ Ｐ−１８２９１）および乳酸菌を含
む発酵菌を接種し、発酵および熟成させた後、生成した
液状成分を分取して食品用原液とすることからなる保健
栄養食品の製造方法としたのである。
【０００７】上記したように構成されるこの発明の製造
方法によると、所定の発酵用培地で所定の納豆菌が効率
よく糖および窒素源を資化し、発酵生産物として各種の
活性を有するアミノ酸、リポ蛋白、リポ多糖（リポポリ
サッカライド）、リピッドなどを生成する。このように
して得られるアミノ酸（ショートペプチド）等は、生体
内細胞調整のために活性を有する因子となるものを多く
含んでいると考えられ、後述の実験結果からも明らかな
ように、抗糖尿病性（インシュリン分泌促進性）、高血
圧抑制性（アンギオテンシン変換酵素の阻害性）、免疫
向上性（ムコ多糖類によるＴリンパ球の活性化）、ダイ
エット効果（糖吸収抑制と脂質代謝促進性）、抗菌性が
確実に発揮されるものと認められる。
方法によると、所定の発酵用培地で所定の納豆菌が効率
よく糖および窒素源を資化し、発酵生産物として各種の
活性を有するアミノ酸、リポ蛋白、リポ多糖（リポポリ
サッカライド）、リピッドなどを生成する。このように
して得られるアミノ酸（ショートペプチド）等は、生体
内細胞調整のために活性を有する因子となるものを多く
含んでいると考えられ、後述の実験結果からも明らかな
ように、抗糖尿病性（インシュリン分泌促進性）、高血
圧抑制性（アンギオテンシン変換酵素の阻害性）、免疫
向上性（ムコ多糖類によるＴリンパ球の活性化）、ダイ
エット効果（糖吸収抑制と脂質代謝促進性）、抗菌性が
確実に発揮されるものと認められる。
【０００８】そして、バチルス ズブチリス ＡＫは、
コーンスターチを含む澱粉をアミラーゼで加水分解した
糖化物を基材とし、これに野菜汁および窒素源としてイ
ーストを添加した発酵用培地で効率よく増殖するもので
あり、通常の納豆菌に比べて紫外線やＸ線が照射された
り、競合する乳酸菌が存在したり、高・低温環境などの
過酷な環境や条件下でも生育する耐性を備えており、変
異株または亜種と見られる性質がある。
コーンスターチを含む澱粉をアミラーゼで加水分解した
糖化物を基材とし、これに野菜汁および窒素源としてイ
ーストを添加した発酵用培地で効率よく増殖するもので
あり、通常の納豆菌に比べて紫外線やＸ線が照射された
り、競合する乳酸菌が存在したり、高・低温環境などの
過酷な環境や条件下でも生育する耐性を備えており、変
異株または亜種と見られる性質がある。
【０００９】保健作用をより確実に発揮する保健栄養食
品を製造するためには、バチルスズブチリス ＡＫ及び
乳酸菌を含む発酵菌による発酵条件は、ｐＨ４．５〜
６．５、２８〜３２℃の条件で２ヶ月以上発酵させるこ
とが好ましく、熟成条件は、ｐＨ４．０〜６．０、１３
〜１７℃の条件で４ヶ月以上熟成させることが好まし
い。
品を製造するためには、バチルスズブチリス ＡＫ及び
乳酸菌を含む発酵菌による発酵条件は、ｐＨ４．５〜
６．５、２８〜３２℃の条件で２ヶ月以上発酵させるこ
とが好ましく、熟成条件は、ｐＨ４．０〜６．０、１３
〜１７℃の条件で４ヶ月以上熟成させることが好まし
い。
【００１０】
【発明の実施の形態】培地用基材として用いる糖化物
は、コーンスターチを含む澱粉をアミラーゼで加水分解
したものであり、コーンスターチはとうもろこし（子
実）から蛋白質を分離し、精製したものであるが、粗精
製のイエローコーンスターチを使用することがより好ま
しい。コーンスターチ以外の澱粉としては、大豆、米糠
などを採用することができる。
は、コーンスターチを含む澱粉をアミラーゼで加水分解
したものであり、コーンスターチはとうもろこし（子
実）から蛋白質を分離し、精製したものであるが、粗精
製のイエローコーンスターチを使用することがより好ま
しい。コーンスターチ以外の澱粉としては、大豆、米糠
などを採用することができる。
【００１１】この発明に用いる野菜汁は、野菜の種類を
特に限定したものではないが、できればサポニンまたは
Ｓ−アリル−Ｌ−システインを含む野菜であることが好
ましい。このような野菜の具体例としては、白菜、キャ
ベツ、ニンジン、薬用ニンジン、パセリ、セロリ、玉ね
ぎなどである。野菜汁は、これらの野菜を圧搾すること
により、絞り出された水分を主成分とする汁であり、こ
れを例えば約１２０℃で２０分程度の高圧滅菌処理を行
なってから培地用基材に添加する。
特に限定したものではないが、できればサポニンまたは
Ｓ−アリル−Ｌ−システインを含む野菜であることが好
ましい。このような野菜の具体例としては、白菜、キャ
ベツ、ニンジン、薬用ニンジン、パセリ、セロリ、玉ね
ぎなどである。野菜汁は、これらの野菜を圧搾すること
により、絞り出された水分を主成分とする汁であり、こ
れを例えば約１２０℃で２０分程度の高圧滅菌処理を行
なってから培地用基材に添加する。
【００１２】窒素源として用いるイースト（酵母）は、
食品の発酵や醸造に用いることのできる単細胞（真核）
微生物であり、サッカロミセス属などが代表例となるも
のである。窒素源として利用するためのイーストは、死
菌体であってもよく、イーストエキスや乾燥粉末であっ
てもよい。
食品の発酵や醸造に用いることのできる単細胞（真核）
微生物であり、サッカロミセス属などが代表例となるも
のである。窒素源として利用するためのイーストは、死
菌体であってもよく、イーストエキスや乾燥粉末であっ
てもよい。
【００１３】上記のように澱粉をアミラーゼで加水分解
した糖化物、野菜汁およびイースト以外にも培地用基材
には、必要に応じて蛋白質や無機塩類などを配合しても
よい。そのような無機塩類としては、塩化カルシウム、
塩化ナトリウム、リン酸ナトリウムなどが挙げられる。
蛋白質としては、大豆蛋白その他の植物性蛋白質などが
挙げられる。
した糖化物、野菜汁およびイースト以外にも培地用基材
には、必要に応じて蛋白質や無機塩類などを配合しても
よい。そのような無機塩類としては、塩化カルシウム、
塩化ナトリウム、リン酸ナトリウムなどが挙げられる。
蛋白質としては、大豆蛋白その他の植物性蛋白質などが
挙げられる。
【００１４】また、澱粉をアミラーゼで加水分解した糖
化物に対して、さらに糖分を添加することも好ましいこ
とであり、例えばショ糖（グラニュー糖）、グルコース
（ブドウ糖）、水飴などを添加する。
化物に対して、さらに糖分を添加することも好ましいこ
とであり、例えばショ糖（グラニュー糖）、グルコース
（ブドウ糖）、水飴などを添加する。
【００１５】このようにして調整された発酵用培地に接
種する発酵菌は、納豆菌であるバチルス ズブチリス
ＡＫおよび乳酸菌を含む発酵菌である。
種する発酵菌は、納豆菌であるバチルス ズブチリス
ＡＫおよび乳酸菌を含む発酵菌である。
【００１６】バチルス ズブチリス ＡＫは、通常の納
豆菌であるバチルス ズブチリスに対して、紫外線、Ｘ
線、高・低温環境（１００℃、０℃）、乳酸菌との競
合、芽胞を作りやすい培地［肉エキス５．０、ペプトン
１０．０、塩化ナトリウム５．０、寒天１５．０、野菜
（キャベツ、ニンジン、セロリ、パセリ）の圧搾汁、配
合割合は全て重量部］などの諸条件を設定し、これらの
過酷な環境や条件下でも死なずに生育する耐性菌を発見
し、その経代培養を繰り返して選抜して得たものであ
る。
豆菌であるバチルス ズブチリスに対して、紫外線、Ｘ
線、高・低温環境（１００℃、０℃）、乳酸菌との競
合、芽胞を作りやすい培地［肉エキス５．０、ペプトン
１０．０、塩化ナトリウム５．０、寒天１５．０、野菜
（キャベツ、ニンジン、セロリ、パセリ）の圧搾汁、配
合割合は全て重量部］などの諸条件を設定し、これらの
過酷な環境や条件下でも死なずに生育する耐性菌を発見
し、その経代培養を繰り返して選抜して得たものであ
る。
【００１７】上記菌株の菌学的性状は、以下の通りであ
る。 (a) 形態学的性質 細胞の形及び大きさ 棹菌 1.0〜1.2×3.0〜50μｍ 細胞の多形性の有無 無し 運動性の有無 有り （周毛性の鞭毛） 芽胞の有無 有り 楕円 菌体のほぼ中央 (b) 培養的性質 肉汁寒天平板培養 円形集落 白濁 肉汁液体培養 上部又は下部 菌凝体 (c) 生化学的性質 グラム染色 陽性 硝酸塩の還元 陽性 ＭＲテスト 陰性 ＶＰテスト 陽性 インドールの生成 陰性 硫化水素の生成 陰性 クエン酸の利用 陽性 カタラーゼ 陽性 生育の範囲 ｐＨ 5.5〜7.0 温度 25℃〜40℃ この菌株は、独立行政法人産業技術総合研究所に「（受
託番号）ＦＥＲＭ Ｐ−１８２９１」として寄託されて
いる。
る。 (a) 形態学的性質 細胞の形及び大きさ 棹菌 1.0〜1.2×3.0〜50μｍ 細胞の多形性の有無 無し 運動性の有無 有り （周毛性の鞭毛） 芽胞の有無 有り 楕円 菌体のほぼ中央 (b) 培養的性質 肉汁寒天平板培養 円形集落 白濁 肉汁液体培養 上部又は下部 菌凝体 (c) 生化学的性質 グラム染色 陽性 硝酸塩の還元 陽性 ＭＲテスト 陰性 ＶＰテスト 陽性 インドールの生成 陰性 硫化水素の生成 陰性 クエン酸の利用 陽性 カタラーゼ 陽性 生育の範囲 ｐＨ 5.5〜7.0 温度 25℃〜40℃ この菌株は、独立行政法人産業技術総合研究所に「（受
託番号）ＦＥＲＭ Ｐ−１８２９１」として寄託されて
いる。
【００１８】この発明に用いる乳酸菌は、乳酸棹菌であ
るラクトバチルス（Lactobacillus）、乳酸球菌である
ストレプトコッカス（Streptococcus）などであり、病
原性のない菌類に限るのは勿論である。
るラクトバチルス（Lactobacillus）、乳酸球菌である
ストレプトコッカス（Streptococcus）などであり、病
原性のない菌類に限るのは勿論である。
【００１９】この発明で採用することが好ましい発酵条
件は、ｐＨ４．５〜６．５、２８〜３２℃の条件で２ヶ
月以上である。上記より強い酸性域で所定温度未満の条
件では、２ヶ月以上発酵させても、この発明に用いる所
定の納豆菌が効率よく糖および窒素源を資化しないと推
定され、得られた食品に所期した効果が充分得られな
い。上記の酸性域を越えて中性またはアルカリ性の条件
で所定温度を超えて高温では発酵不充分で所定の納豆菌
が効率よく糖および窒素源を資化せず、得られた保健栄
養食品は上記同様に所期した効果が充分得られないもの
になる。
件は、ｐＨ４．５〜６．５、２８〜３２℃の条件で２ヶ
月以上である。上記より強い酸性域で所定温度未満の条
件では、２ヶ月以上発酵させても、この発明に用いる所
定の納豆菌が効率よく糖および窒素源を資化しないと推
定され、得られた食品に所期した効果が充分得られな
い。上記の酸性域を越えて中性またはアルカリ性の条件
で所定温度を超えて高温では発酵不充分で所定の納豆菌
が効率よく糖および窒素源を資化せず、得られた保健栄
養食品は上記同様に所期した効果が充分得られないもの
になる。
【００２０】この発明で採用することが好ましい熟成条
件は、ｐＨ４．０〜６．０、１３〜１７℃で４ヶ月以上
である。上記より強い酸性域で所定温度未満の条件で
は、４ヶ月以上熟成させても、発酵生産物として各種の
活性を有するアミノ酸、リポ蛋白、リポ多糖（リポポリ
サッカライド）、リピッドなどが充分に低分子量化しな
いと推定され、得られた食品に所期した効果が充分得ら
れない。上記の酸性域を越えて中性またはアルカリ性の
条件で所定温度を超えて高温で熟成させても、活性が低
下すると推定され、得られた保健栄養食品は上記同様に
所期した効果が充分得られないものになる。
件は、ｐＨ４．０〜６．０、１３〜１７℃で４ヶ月以上
である。上記より強い酸性域で所定温度未満の条件で
は、４ヶ月以上熟成させても、発酵生産物として各種の
活性を有するアミノ酸、リポ蛋白、リポ多糖（リポポリ
サッカライド）、リピッドなどが充分に低分子量化しな
いと推定され、得られた食品に所期した効果が充分得ら
れない。上記の酸性域を越えて中性またはアルカリ性の
条件で所定温度を超えて高温で熟成させても、活性が低
下すると推定され、得られた保健栄養食品は上記同様に
所期した効果が充分得られないものになる。
【００２１】生成した液状成分を分取するには、ろ過ま
たは遠心分離などの周知の分離手段を採用すればよく、
得られた食品用原液は、そのまま利用できるが、必要に
応じて濃縮するか、または希釈して利用することもでき
る。
たは遠心分離などの周知の分離手段を採用すればよく、
得られた食品用原液は、そのまま利用できるが、必要に
応じて濃縮するか、または希釈して利用することもでき
る。
【００２２】因みに、この発明の製造方法で得られる健
康食品は、生命現象を刺激して生体内の諸機能を強化促
進させ、生体の恒常性（Homeostasis）を強固に維持
し、健康の増進を図ることを目的としたものであり、そ
の構成成分としては、生体内酵素合成を容易にするため
の物質、すなわち発酵によって得られる酵素を可逆的に
切断して活性アミノ酸残基としたフラグメントを含み、
その他にビオシチン、メバロン酸、リポ酸、アデニン、
グアニン、シトシン、チミン、ウラシル、エルゴステリ
ン、マンナン（酵母マンナン）のような生体内で活用で
きる有用物質を含有する。このような有用物質は、ベス
レッカ（Besredka）の提唱したアンチビールスの組織活
性因子、フィラトフ（Filatov）の説明する生命源刺激
素を含み、これらを生物化学的反応によって組み合わ
せ、安全かつ有効に作用するように処理した培養濾液で
あると考えられる。
康食品は、生命現象を刺激して生体内の諸機能を強化促
進させ、生体の恒常性（Homeostasis）を強固に維持
し、健康の増進を図ることを目的としたものであり、そ
の構成成分としては、生体内酵素合成を容易にするため
の物質、すなわち発酵によって得られる酵素を可逆的に
切断して活性アミノ酸残基としたフラグメントを含み、
その他にビオシチン、メバロン酸、リポ酸、アデニン、
グアニン、シトシン、チミン、ウラシル、エルゴステリ
ン、マンナン（酵母マンナン）のような生体内で活用で
きる有用物質を含有する。このような有用物質は、ベス
レッカ（Besredka）の提唱したアンチビールスの組織活
性因子、フィラトフ（Filatov）の説明する生命源刺激
素を含み、これらを生物化学的反応によって組み合わ
せ、安全かつ有効に作用するように処理した培養濾液で
あると考えられる。
【００２３】また、培養濾液が発酵過程によって産生す
る酵素を種類毎に以下に例示列挙する。 酸化還元酵素：グルコースオキシダーゼ、カタラー
ゼ、パーオキシダーゼ、チトクロームオキシダーゼ 加水分解酵素：ペクチナーゼ、ペクチンエステラー
ゼ、タンナーゼ、ホスファターゼ、ラクターゼ、インベ
ルターゼ、α−アミラーゼ、β−アミラーゼ、セルラー
ゼ、ヘミセルラーゼ 転移酵素：ヘキソナーゼ、アミノトランスフェラー
ゼ、トランスアルドラーゼ ペプチド加水分解酵素：エキソペプチダーゼ、エン
ドペプチダーゼ、アスペルギロペプチダーゼ、その他の
プロテアーゼ 異性化酵素：ホスホトリオースイソメラーゼ、ホス
ホリボイソメラーゼ、ブドウ糖イソメラーゼ 合成酵素：アセチルＣｏＡリガーゼ リアーゼ：ピルビン酸デカルボキシラーゼ、フマラ
ーゼ、アスパルターゼ
る酵素を種類毎に以下に例示列挙する。 酸化還元酵素：グルコースオキシダーゼ、カタラー
ゼ、パーオキシダーゼ、チトクロームオキシダーゼ 加水分解酵素：ペクチナーゼ、ペクチンエステラー
ゼ、タンナーゼ、ホスファターゼ、ラクターゼ、インベ
ルターゼ、α−アミラーゼ、β−アミラーゼ、セルラー
ゼ、ヘミセルラーゼ 転移酵素：ヘキソナーゼ、アミノトランスフェラー
ゼ、トランスアルドラーゼ ペプチド加水分解酵素：エキソペプチダーゼ、エン
ドペプチダーゼ、アスペルギロペプチダーゼ、その他の
プロテアーゼ 異性化酵素：ホスホトリオースイソメラーゼ、ホス
ホリボイソメラーゼ、ブドウ糖イソメラーゼ 合成酵素：アセチルＣｏＡリガーゼ リアーゼ：ピルビン酸デカルボキシラーゼ、フマラ
ーゼ、アスパルターゼ
【００２４】
【実施例】まず、イエローコーンスターチ２．３ｋｇ、
大豆ペプトン０．５ｋｇ、米糠汁０．５ｋｇ、塩化カル
シウム８０ｇ、食塩１５０ｇに精製水５０ｋｇを加え、
加熱して溶解した。次いでこれを冷却し、アミラーゼ４
０ｇを加えて充分に糖化させた。糖化終了後、グラニュ
ー糖１．５ｋｇ、グルコース（ブドウ糖）１．５ｋｇ、
酵母エキス４５０ｇ、水飴１．５ｋｇ、リン酸ナトリウ
ム８０ｇ、野菜の圧搾汁（キャベツ、ニンジン、セロ
リ、パセリの合計）5ｋｇ、および精製水を加えて全量
を１５０ｋｇにした。
大豆ペプトン０．５ｋｇ、米糠汁０．５ｋｇ、塩化カル
シウム８０ｇ、食塩１５０ｇに精製水５０ｋｇを加え、
加熱して溶解した。次いでこれを冷却し、アミラーゼ４
０ｇを加えて充分に糖化させた。糖化終了後、グラニュ
ー糖１．５ｋｇ、グルコース（ブドウ糖）１．５ｋｇ、
酵母エキス４５０ｇ、水飴１．５ｋｇ、リン酸ナトリウ
ム８０ｇ、野菜の圧搾汁（キャベツ、ニンジン、セロ
リ、パセリの合計）5ｋｇ、および精製水を加えて全量
を１５０ｋｇにした。
【００２５】そして、水酸化ナトリウムを添加してｐＨ
を７．３〜７．８の範囲内に調整し、これを培養缶に入
れて１２０℃で２０分間高圧滅菌した。これを冷却した
後、バチルス ズブチリス ＡＫ株を接種し、温度３０
±２℃の恒温室でｐＨ４．５〜６．５で６０日間発酵さ
せ、次いで温度１５±２℃の恒温室でｐＨ４．０〜６．
０の条件下で１８０日間熟成させて培養液を透明化させ
た。これをフィルターによってろ過し、１２５リットル
の液状の保健栄養食品の原液（以下、培養濾液と称す
る。）を得た。
を７．３〜７．８の範囲内に調整し、これを培養缶に入
れて１２０℃で２０分間高圧滅菌した。これを冷却した
後、バチルス ズブチリス ＡＫ株を接種し、温度３０
±２℃の恒温室でｐＨ４．５〜６．５で６０日間発酵さ
せ、次いで温度１５±２℃の恒温室でｐＨ４．０〜６．
０の条件下で１８０日間熟成させて培養液を透明化させ
た。これをフィルターによってろ過し、１２５リットル
の液状の保健栄養食品の原液（以下、培養濾液と称す
る。）を得た。
【００２６】得られた保健栄養食品原液１００ｇ中の一
般分析結果を以下の表１中に示す。なお、表中の記号φ
は、検出限界以下の微量を示している。
般分析結果を以下の表１中に示す。なお、表中の記号φ
は、検出限界以下の微量を示している。
【００２７】
【表１】
【００２８】また、上記の培養濾液について、東ソー社
製カラム（ＴＳＫgel G2500PWXL）を用い、移動相を
水、アセトニトリルおよびトリフルオロ酢酸の55:45:0.
1混合液とする液体高速クロマトグラム（Shodex社製：
GPC SYSTEM-21）でサイズ排除クロマトグラフィー（SE
C）を測定し、そのときの検出器感度(紫外分光光度計：
ｍＶ)を分子量既知の標準品の溶出時間と比較して分析
した分子量分布の図表を図１に示し、この図表における
分子量画分の面積が全体に占める割合（百分率）を表２
に示した。
製カラム（ＴＳＫgel G2500PWXL）を用い、移動相を
水、アセトニトリルおよびトリフルオロ酢酸の55:45:0.
1混合液とする液体高速クロマトグラム（Shodex社製：
GPC SYSTEM-21）でサイズ排除クロマトグラフィー（SE
C）を測定し、そのときの検出器感度(紫外分光光度計：
ｍＶ)を分子量既知の標準品の溶出時間と比較して分析
した分子量分布の図表を図１に示し、この図表における
分子量画分の面積が全体に占める割合（百分率）を表２
に示した。
【００２９】
【表２】
【００３０】さらにまた、得られた培養濾液の安全性を
確かめるため、ウィスター系ラットを用いて経口による
急性毒性試験を行なった。その結果については、以下の
通りである。
確かめるため、ウィスター系ラットを用いて経口による
急性毒性試験を行なった。その結果については、以下の
通りである。
【００３１】４倍濃縮液を給与量換算で雄１４．０、４
２ｍｌ／ｋｇ、雌１４．０、４２ｍｌ／ｋｇ（通常量の
１０倍または３０倍量）を投与しても雄、雌共に死亡例
が認められず、中毒症状もなく、また体重の推移も一般
状態も試験期間中清浄な状態で推移し、血液検査域も正
常域にあった。１０ｍｌ／ｋｇの投与量は、ラットに対
する投与量としては最高投与量と考えられ、供試品を通
常投与量に換算すると経口ＬＤ５０値は、雄雌共に４
２．０ｍｌ／ｋｇ以上と推測された。
２ｍｌ／ｋｇ、雌１４．０、４２ｍｌ／ｋｇ（通常量の
１０倍または３０倍量）を投与しても雄、雌共に死亡例
が認められず、中毒症状もなく、また体重の推移も一般
状態も試験期間中清浄な状態で推移し、血液検査域も正
常域にあった。１０ｍｌ／ｋｇの投与量は、ラットに対
する投与量としては最高投与量と考えられ、供試品を通
常投与量に換算すると経口ＬＤ５０値は、雄雌共に４
２．０ｍｌ／ｋｇ以上と推測された。
【００３２】次に、上記のようにして得られた培養濾液
の抗菌性、高血圧ラットに対する投与の影響、人為的に
誘発した糖尿病ラットに対する投与の影響を調べた。こ
れらの試験方法と結果を以下に示す。
の抗菌性、高血圧ラットに対する投与の影響、人為的に
誘発した糖尿病ラットに対する投与の影響を調べた。こ
れらの試験方法と結果を以下に示す。
【００３３】［培養濾液の抗菌性］使用菌株およびその
測定用培地は以下の通りである。 （１）エシェリヒア コリ（ATCC25922）:DHL寒天培地 （２）サルモネラ エンテリティディス(ATCC25923):DH
L寒天培地 （３）クレブシェラ ニューモニエ（ATCC13883）:BTB
培地 菌液調整：トリプトブイヨン３０ｍｌに前培養液１００
μｌを加える。３５℃で振とう培養し、適当な吸光度で
培養を止め、１０5CFU/mlの菌懸濁液１０mlとなるよう
にリン酸緩衝液で希釈する。 除菌操作：調製した菌液を３０００rpm,１５分遠心し、
上清を被検物質と等量で置換後、３５℃、２時間振とう
反応させる。また、対照として何も入れていない菌懸濁
液を同じ条件下に置く。 試料の塗布・培養・計数：リン酸緩衝液で段階希釈した
試料１００μｌをそれぞれの測定用培地２枚にコンラー
ジ棒で塗布し、３５℃、４８時間培養し、発育したコロ
ニーを計数した。これらの結果は、下記の表３に示し
た。
測定用培地は以下の通りである。 （１）エシェリヒア コリ（ATCC25922）:DHL寒天培地 （２）サルモネラ エンテリティディス(ATCC25923):DH
L寒天培地 （３）クレブシェラ ニューモニエ（ATCC13883）:BTB
培地 菌液調整：トリプトブイヨン３０ｍｌに前培養液１００
μｌを加える。３５℃で振とう培養し、適当な吸光度で
培養を止め、１０5CFU/mlの菌懸濁液１０mlとなるよう
にリン酸緩衝液で希釈する。 除菌操作：調製した菌液を３０００rpm,１５分遠心し、
上清を被検物質と等量で置換後、３５℃、２時間振とう
反応させる。また、対照として何も入れていない菌懸濁
液を同じ条件下に置く。 試料の塗布・培養・計数：リン酸緩衝液で段階希釈した
試料１００μｌをそれぞれの測定用培地２枚にコンラー
ジ棒で塗布し、３５℃、４８時間培養し、発育したコロ
ニーを計数した。これらの結果は、下記の表３に示し
た。
【００３４】
【表３】
【００３５】［高血圧ラットに対する投与の影響］５日
間の検疫・訓化期間を置き、健常と判断された雄性の自
然発症高血圧ラット（ＳＨＲ）、６週令を１群７匹とし
て３群に分け、試験群−１には培養濾液を等倍量、試験
群−２には１０倍量、対照群には蒸留水を給水瓶に入
れ、２８日間連続して所定の餌と共に自由に摂取させ
た。血圧測定は、週（７日）間隔で同時に行ない、この
結果を表４に示した。
間の検疫・訓化期間を置き、健常と判断された雄性の自
然発症高血圧ラット（ＳＨＲ）、６週令を１群７匹とし
て３群に分け、試験群−１には培養濾液を等倍量、試験
群−２には１０倍量、対照群には蒸留水を給水瓶に入
れ、２８日間連続して所定の餌と共に自由に摂取させ
た。血圧測定は、週（７日）間隔で同時に行ない、この
結果を表４に示した。
【００３６】
【表４】
【００３７】表４の結果からも明らかなように、対照群
に比べて培養濾液投与群は、２週間後から上昇抑制を示
した。
に比べて培養濾液投与群は、２週間後から上昇抑制を示
した。
【００３８】［人為的に誘発した糖尿病ラットに対する
投与の影響］７日間の検疫・訓化期間を置き、健常と判
断された雄性のウィスターＳＴ系ラット（６週令）に対
し、ストレプトゾトシンを体重１ｋｇ当たり４０ｍｇを
尾静脈内に注入し、翌日から血糖値を測定し、血糖値が
ほぼ一定になるように１群５匹を２群に分け、試験群
（ａ）に１４日間培養濾液をヒトの投与量の約１０倍量
を給水瓶に入れて経口連続投与した。
投与の影響］７日間の検疫・訓化期間を置き、健常と判
断された雄性のウィスターＳＴ系ラット（６週令）に対
し、ストレプトゾトシンを体重１ｋｇ当たり４０ｍｇを
尾静脈内に注入し、翌日から血糖値を測定し、血糖値が
ほぼ一定になるように１群５匹を２群に分け、試験群
（ａ）に１４日間培養濾液をヒトの投与量の約１０倍量
を給水瓶に入れて経口連続投与した。
【００３９】
【表５】
【００４０】表５の結果からも明らかなように、培養濾
液投与群は６日目から僅かな上昇抑制傾向を示した。一
方、対照群（ｂ）は、１５日後に約３．５倍の上昇率で
あり、培養濾液投与群より約８０％も高い上昇率を示し
た。これらの傾向から、培養濾液投与群は、血糖値上昇
抑制傾向を示し、糖尿病の予防や進行抑制などに良い影
響を与えていることが示唆された。
液投与群は６日目から僅かな上昇抑制傾向を示した。一
方、対照群（ｂ）は、１５日後に約３．５倍の上昇率で
あり、培養濾液投与群より約８０％も高い上昇率を示し
た。これらの傾向から、培養濾液投与群は、血糖値上昇
抑制傾向を示し、糖尿病の予防や進行抑制などに良い影
響を与えていることが示唆された。
【００４１】以下に得られた保健栄養食品原液を利用し
て製造した健康飲料、カプセル状健康食品、化粧水、動
植物用栄養剤の配合例を表６〜９に示した。
て製造した健康飲料、カプセル状健康食品、化粧水、動
植物用栄養剤の配合例を表６〜９に示した。
【００４２】健康飲料は、培養濾液８〜１６％に表６に
示すような他の原料を配合して調製した。
示すような他の原料を配合して調製した。
【００４３】
【表６】
【００４４】カプセル状健康食品は、培養濾液を２０倍
に濃縮し、表７に示すような他の原料を配合して調製し
た。
に濃縮し、表７に示すような他の原料を配合して調製し
た。
【００４５】
【表７】
【００４６】化粧水は、培養濾液８％に表８に示すよう
な他の原料を配合して調整した。
な他の原料を配合して調整した。
【００４７】
【表８】
【００４８】動植物用栄養剤は、培養濾液２０％に、表
９に示すその他の原料を配合して調製した。
９に示すその他の原料を配合して調製した。
【００４９】
【表９】
【００５０】
【発明の効果】この発明は、以上説明したように、所定
の発酵用培地で所定の納豆菌で効率よく糖および窒素源
を資化させ、さらに所定条件で発酵および熟成させて保
健栄養食品を効率よく製造することができ、特に発酵性
菌類として所定の菌株を採用し、これによって保健作用
をより確実に効率よく液状の保健栄養食品を提供できる
という利点がある。
の発酵用培地で所定の納豆菌で効率よく糖および窒素源
を資化させ、さらに所定条件で発酵および熟成させて保
健栄養食品を効率よく製造することができ、特に発酵性
菌類として所定の菌株を採用し、これによって保健作用
をより確実に効率よく液状の保健栄養食品を提供できる
という利点がある。
【図１】サイズ排除クロマトグラフィーにおける検出器
感度(ｍＶ)と溶出時間（分）の関係、およびこれから分
析された培養濾液の分子量分布を示す図表
感度(ｍＶ)と溶出時間（分）の関係、およびこれから分
析された培養濾液の分子量分布を示す図表
Claims (3)
- 【請求項１】 コーンスターチを含む澱粉をアミラーゼ
で加水分解した糖化物を培地用基材とし、これに野菜汁
および窒素源としてイーストを添加して発酵用培地を調
整し、この培地に納豆菌であるバチルス ズブチリス
ＡＫ（ＦＥＲＭ Ｐ−１８２９１）および乳酸菌を含む
発酵菌を接種し、発酵および熟成させた後、生成した液
状成分を分取して食品用原液とすることからなる保健栄
養食品の製造方法。 - 【請求項２】 発酵が、ｐＨ４．５〜６．５、２８〜３
２℃の条件で２ヶ月以上行なう発酵である請求項１記載
の保健栄養食品の製造方法。 - 【請求項３】 熟成が、ｐＨ４．０〜６．０、１３〜１
７℃の条件で４ヶ月以上行なう熟成である請求項１また
は２に記載の保健栄養食品の製造方法。
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| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2002014512A JP3902015B2 (ja) | 2002-01-23 | 2002-01-23 | 保健栄養食品の製造方法 |
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|---|---|---|---|
| JP2002014512A JP3902015B2 (ja) | 2002-01-23 | 2002-01-23 | 保健栄養食品の製造方法 |
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| JP2003210136A true JP2003210136A (ja) | 2003-07-29 |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2006213688A (ja) * | 2005-02-07 | 2006-08-17 | Toshio Oshiro | Ｎｋ活性増強剤 |
| WO2008088033A1 (ja) * | 2007-01-19 | 2008-07-24 | Sueo Wada | Ｈｉｖ－プロテアーゼ阻害剤及びその製造方法 |
| JP2009159853A (ja) * | 2007-12-28 | 2009-07-23 | Echigo Seika Co Ltd | 低耐圧性酵母の作出方法並びに発酵食品の製造方法並びに発酵食品並びに発酵食品の殺菌方法 |
| CN102578584A (zh) * | 2011-01-12 | 2012-07-18 | 松尾理 | 血栓性疾病预防食品 |
| JP2012175979A (ja) * | 2012-05-15 | 2012-09-13 | Echigo Seika Co Ltd | 低耐圧性酵母の作出方法並びに発酵食品の製造方法並びに発酵食品の非加熱殺菌による発酵停止方法並びに発酵食品 |
| JP2014079264A (ja) * | 2014-02-13 | 2014-05-08 | Echigo Seika Co Ltd | 発酵食品の非加熱殺菌による発酵停止方法 |
| CN103815413A (zh) * | 2014-03-19 | 2014-05-28 | 苏州科大微龙信息技术有限公司 | 一种调理气虚体质酵素及其制备方法 |
| JP2015017070A (ja) * | 2013-07-12 | 2015-01-29 | 株式会社エンザミン研究所 | インスリン抵抗性改善剤およびインスリン抵抗性疾患予防用の健康補助食品 |
| WO2016067360A1 (ja) * | 2014-10-28 | 2016-05-06 | 株式会社エンザミン研究所 | インスリン抵抗性改善剤およびインスリン抵抗性疾患予防用の健康補助食品 |
| CN109965218A (zh) * | 2019-03-24 | 2019-07-05 | 张学海 | 一种果蔬纳豆的发酵工艺 |
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|---|---|---|---|---|
| JP7828634B2 (ja) * | 2021-12-28 | 2026-03-12 | 株式会社エンザミン研究所 | 健康食品素材 |
-
2002
- 2002-01-23 JP JP2002014512A patent/JP3902015B2/ja not_active Expired - Fee Related
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| JP2009159853A (ja) * | 2007-12-28 | 2009-07-23 | Echigo Seika Co Ltd | 低耐圧性酵母の作出方法並びに発酵食品の製造方法並びに発酵食品並びに発酵食品の殺菌方法 |
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| JP2012143187A (ja) * | 2011-01-12 | 2012-08-02 | Osamu Matsuo | 血栓性疾患予防食品 |
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| JP2015017070A (ja) * | 2013-07-12 | 2015-01-29 | 株式会社エンザミン研究所 | インスリン抵抗性改善剤およびインスリン抵抗性疾患予防用の健康補助食品 |
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| WO2016067360A1 (ja) * | 2014-10-28 | 2016-05-06 | 株式会社エンザミン研究所 | インスリン抵抗性改善剤およびインスリン抵抗性疾患予防用の健康補助食品 |
| KR20170071510A (ko) * | 2014-10-28 | 2017-06-23 | 가부시키가이샤 엔자민겡큐쇼 | 인슐린 저항성 개선제 및 인슐린 저항성 질환 예방용의 건강 보조 식품 |
| CN107073047A (zh) * | 2014-10-28 | 2017-08-18 | 株式会社恩基美研究所 | 胰岛素抵抗改善剂以及用于预防胰岛素抵抗疾病的健康辅助食品 |
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