JP2004105145A - 心血管疾患、肥満および生活習慣病の遺伝的リスクを簡便に判定する方法 - Google Patents

Abstract

【課題】多数の遺伝子変異を同時に解析することで、心血管疾患、肥満および生活習慣病に関連する複数の遺伝子変異を検出し、その結果に基づいた疾病治療と予防が可能な方法及びキットを提供する。
【解決手段】支持体に固定化された複数種のキャプチャーオリゴヌクレオチドと、被検者由来の核酸とのハイブリダイゼーションを行うことで、遺伝性の心血管系疾患、肥満および生活習慣病の遺伝的リスクを判別する方法であって、複数種のキャプチャーオリゴヌクレオチドは、それぞれの疾患の発症と相関する少なくとも一つの遺伝子の多型の有無を検出し得る、野生型遺伝子、及び多型を含む遺伝子のそれぞれの配列に由来するオリゴヌクレオチド対を含む。前記キャプチャーオリゴヌクレオチドは、対応する疾患毎にグループ分けされて支持体上に配置され、ハイブリダイゼーションにより、被検者由来の核酸と完全に一致する塩基配列を有するオリゴヌクレオチドを同定する。
【選択図】　図１

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は心血管疾患、肥満および生活習慣病の遺伝的リスク又は予測を行うためのキットに関し、詳しくは、心血管疾患、肥満および生活習慣病の臨床検査、とりわけ心血管疾患、肥満および生活習慣病の予防のための適切な予防指針を講じるための情報を取得するために用いられるもので、心血管疾患、肥満および生活習慣病の遺伝的リスクを迅速に判定できるキットに関する。さらに、このキットに用いられるオリゴヌクレオチド及び核酸プローブ及びそれらの製造法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
心血管疾患、肥満および生活習慣病は多因子遺伝性疾患であり、個人のもつ複数の遺伝子変異に環境因子が加わったときに発症する。心血管疾患、肥満および生活習慣病の発症や進展に関与する遺伝子変異は、未知のものも含めると多数存在する。これらの疾患に関与する遺伝子変異の組み合わせは、各個人によって異なるため、一次検診において遺伝子変異を検出することが、疾患予防および治療方針決定に重要である。
【０００３】
現在、臨床の現場での肥満の判定は、体格指数（ＢＭＩ）によって行なわれている。ＢＭＩが２５以上のとき、肥満と判定される。肥満に何らかの合併症を伴うとき、肥満症と診断される。肥満の合併症として、高血圧、２型糖尿病、高脂血症、痛風などの生活習慣病がある。
【０００４】
一方、心血管疾患の中でも心筋梗塞症の約半数は突然発症であり、約２５％で発症時に突然死が見られる。このことは、病院で受診するヒトだけを対象としていては、心筋梗塞症や突然死の予防にならない。検診受診者を対象とした、高リスク群の早期スクリーニングと一次予防が重要である。
【０００５】
心血管疾患、又は肥満と診断されたときの治療は、食事療法、運動療法、行動療法が組み合わせて行なわれている。また、少数の例では、薬物療法も行なわれる。外科療法が行なわれるのは、本邦ではまれである。現在用いられているこれらの治療法では、個人の遺伝子変異は考慮されていない。現実には、心血管疾患、肥満の原因となる遺伝子変異の組み合わせは個人によって異なっており、その遺伝子変異によっては、食事療法や運動療法、薬物療法の内容を変更したほうが効果的である。たとえば、炭水化物を好む肥満者や脂肪を好む肥満者、基礎代謝が低い肥満者など、それぞれの遺伝子変異が異なった嗜好や体質を形成している。これらの行動や嗜好、体質の差異は、従来までは行動修正療法によって推測するしか方法がなかったが、それらに関連する遺伝子変異を検出することで診断が容易に正確になされることになる。
【０００６】
心血管疾患、肥満や生活習慣病における遺伝子変異の意義に関しては、近年、さまざまな知見が集積されている。しかし、肥満や生活習慣病は、ヒトの場合は通常、単一遺伝子によって発症することはまれであり、多因子遺伝性疾患である。そのため、個々の遺伝子変異が肥満や生活習慣病と一対一の対応関係を示すわけではない。しかし、複数の遺伝子変異をあわせ持つ個体は、肥満や生活習慣病を発症するリスクが高い。したがって、それらの疾患発症に関連する遺伝子変異を検出することは、肥満や生活習慣病の予防や成因解明のために有意義である。
【０００７】
現時点で臨床応用されている肥満関連遺伝子変異の検査は、アドレナリン・レセプターβ３の６４番目のアミノ酸置換をもたらす遺伝子多型である（非特許文献１）。この遺伝子の変異を検出することで、一部には、「肥満遺伝子検査」を受託しているところも存在する。しかし、多因子遺伝性疾患である肥満の予防には、アドレナリン・レセプターβ３の６４番目の変異の有無だけでは不十分、不適切である。
【０００８】
【非特許文献１】
Ｎ　Ｅｎｇｌ　Ｊ　Ｍｅｄ　１９９５　Ａｕｇ　１０；３３３（６）：３５２−４；　Ｇｅｎｅｔｉｃ　ｖａｒｉａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｂｅｔａ　３−ａｄｒｅｎｅｒｇｉｃ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ａｎｄ　ａｎ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｃａｐａｃｉｔｙ　ｔｏ　ｇａｉｎ　ｗｅｉｇｈｔ　ｉｎ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｍｏｒｂｉｄ　ｏｂｅｓｉｔｙ．；　Ｃｌｅｍｅｎｔ　Ｋ，　Ｖａｉｓｓｅ　Ｃ，　Ｍａｎｎｉｎｇ　ＢＳ，　Ｂａｓｄｅｖａｎｔ　Ａ，　Ｇｕｙ−Ｇｒａｎｄ　Ｂ，　Ｒｕｉｚ　Ｊ，　Ｓｉｌｖｅｒ　ＫＤ，　Ｓｈｕｌｄｉｎｅｒ　ＡＲ，　Ｆｒｏｇｕｅｌ　Ｐ，　Ｓｔｒｏｓｂｅｒｇ　ＡＤ．
【０００９】
【発明が解決しようとする課題】
心血管疾患、肥満および生活習慣病への対応を考える上で、最も重要視されるのが、予防および生活環境によって左右される体質を明らかにさせ、有効な予防策の立案ができる事前情報の提供を可能にすることである。
【００１０】
さらに、上述したように、多因子遺伝性疾患としての心血管疾患、肥満には、多数の遺伝子変異が関与している。心血管疾患、肥満および生活習慣病の診断と発症予防には、それらの遺伝子変異の有意な組み合わせを見出す必要がある。従来からのＰＣＲ−ＲＬＦＰ法などでは費用や時間が膨大になり、多因子遺伝性疾患に対しての臨床応用は困難である。
【００１１】
本発明は、多数の遺伝子変異を同時に解析することにより、心血管疾患、肥満および生活習慣病に関連する複数の遺伝子変異を容易に検出することができ、その判定結果に基づいた疾病治療と予防が可能な方法及びキットを提供することを課題とする。
【００１２】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意検討を行った結果、心血管疾患、肥満および生活習慣病に関連する遺伝子変異を検出することができるオリゴヌクレオチドを支持体に固定化することにより、前記変異を同時に解析することができ、それによって前記疾患の遺伝的リスクを判別することができることを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１３】
すなわち本発明は、支持体に固定化された複数種のキャプチャーオリゴヌクレオチドを含み、これらのキャプチャーオリゴヌクレオチドと被検者由来の核酸とのハイブリダイゼーションにより、遺伝性の心血管系疾患、肥満および生活習慣病の遺伝的リスクを判別するためのキットであって、
前記遺伝性の心血管系疾患、肥満および生活習慣病は、それぞれの疾患に関与する遺伝子の多型が発症と相関し、
前記複数種のキャプチャーオリゴヌクレオチドは、前記のそれぞれの疾患毎に選ばれる少なくとも一つの遺伝子の多型の有無を検出し得る、野生型遺伝子及び多型を含む遺伝子のそれぞれの配列に由来するオリゴヌクレオチド対を含み、
前記キャプチャーオリゴヌクレオチドは、対応する疾患毎にグループ分けされて支持体上に配置されたことを特徴とするキットである。
【００１４】
また、本発明は、支持体に固定化された複数種のキャプチャーオリゴヌクレオチドと被検者由来の核酸とのハイブリダイゼーションにより、遺伝性の心血管系疾患、肥満および生活習慣病の遺伝的リスクを判別するために用いられる、被検者由来の核酸を増幅するためのプライマーセットであって、アドレナリン・レセプターβ３、アドレナリン・レセプターβ２、ペルオキシソーム・プロリファレーター・アクチベーティッド・レセプターγ２、レプチン・レセプター、レプチン、プラスミノーゲン・アクチベーター・インヒビター１、ヘパティック・ニュークレアー・ファクター１α、ヘパティック・ニュークレアー・ファクター１β、ニューロ・ペプチド・Ｙ、アンカップリング・プロテイン１、アンカップリング・プロテイン２、アンカップリング・プロテイン３、ＧＴＰ・バインディング・プロテイン３、ファティー・アシッド・バインディング・プロテイン２、プロ・オピオメラノコルチン、コカイン・アンド・アンフェタミン・レギュレイティッド・トランスクリプト、プロテイン・フォスファターゼ１・グリコーゲン・レギュレイティッド・Ｇサブユニット、インスリン・レセプター・サブストレイト１、インスリン・レセプター、メラノコルチン−４・レセプター、コレシストキニン−Ａ・レセプターアンジオテンシノーゲン、アンギジオテンシンＩＩレセプター、内皮型ヒトＮＯ合成酵素、パラオキソナーゼ、ＣＤ３６、ケモカインレセプター２、細胞接着因子１（ＩＣＡＭ１）、マトリックスメタロプロテアーゼ３、ＣＤ４０リガンド、肝細胞増殖因子、アクチン結合蛋白（ＳＭ２２）、メチレンテトラヒドロ葉酸還元酵素、及び組織メタロプロテアーゼインヒビター−１の各々の遺伝子配列の一部に相当する配列番号１から７８から選択される塩基配列を有するオリゴヌクレオチド対からなるプライマーセットを提供する。
【００１５】
本発明はさらに、支持体に固定化された複数種のキャプチャーオリゴヌクレオチドと、被検者由来の核酸とのハイブリダイゼーションを行うことにより、遺伝性の心血管系疾患、肥満および生活習慣病の遺伝的リスクを判別する方法であって、
前記遺伝性の心血管系疾患、肥満および生活習慣病は、それぞれの疾患に関与する遺伝子の多型が発症と相関し、
前記複数種のキャプチャーオリゴヌクレオチドは、前記のそれぞれの疾患毎に選ばれる少なくとも一つの遺伝子の多型の有無を検出し得る、野生型遺伝子及び多型を含む遺伝子のそれぞれの配列に由来するオリゴヌクレオチド対を含み、
前記キャプチャーオリゴヌクレオチドは、対応する疾患毎にグループ分けされて支持体上に配置され、
前記ハイブリダイゼーションにより、被検者由来の核酸と完全に一致する塩基配列を有するオリゴヌクレオチドを同定することを特徴とする方法を提供する。
【００１６】
【発明の実施の形態】
以下、本発明を詳細に説明する。
本発明のキットは、心血管疾患、肥満および生活習慣病に関連する遺伝子変異を同時に解析するために用いられるキットである。そのため、単一の遺伝子変異を個別に検出する従来の方法に比べて、効率的な遺伝子変異の判定が可能となる。本キットを用いれば費用や時間が大きく節約できるので、心血管疾患、肥満および生活習慣病予防のための遺伝子変異検出が臨床応用できるようになる。
【００１７】
本発明のキットは、支持体に固定化された複数種のキャプチャーオリゴヌクレオチドを含む。また、本発明のキットは、後述するプローブを増幅するためのプライマーセットを含んでいてもよい。本発明のキットは、さらに、キャプチャーオリゴヌクレオチドとプローブとで形成されるハイブリッドを可視化するための試薬セットを含んでいてもよい。ハプテン等で標識されたプローブを調製するための試薬、緩衝液、ハプテンを認識する酵素コンジュゲートなどのハイブリダイゼーション用の試薬などを含むことができる。
以下、各々について説明する。
【００１８】
＜１＞被検体由来の核酸を増幅するためのプライマーセット
本発明のプライマーセットは、支持体に固定化された複数種のキャプチャーオリゴヌクレオチドと被検者由来の核酸とのハイブリダイゼーションにより、遺伝性の心血管系疾患、肥満および生活習慣病の遺伝的リスクを判別するために用いられる、被検者由来の核酸を増幅するためのオリゴヌクレオチド対からなる。
【００１９】
上記オリゴヌクレオチド対は、遺伝性の心血管系疾患、肥満又は生活習慣病に関与する遺伝子の多型部位を含む領域を増幅するためのものであり、増幅される遺伝子断片は、対応するキャプチャーオリゴヌクレオチドと多型部位を除いて相補的な配列を有する。
【００２０】
プライマーは、前記遺伝子の塩基配列の一部に相当する配列を有する。具体的には、１単位のプライマーセットは、多型部位を挟む５’側及び３’側の各々の配列の一方と相同な配列を有するオリゴヌクレオチドと、他方の配列と相補的な配列を有するオリゴヌクレオチド対からなる。プライマーは、通常、１０〜３０塩基の長さである。
【００２１】
遺伝性の心血管系疾患、肥満又は生活習慣病に関与する遺伝子としては、アドレナリン・レセプターβ３、アドレナリン・レセプターβ２、ペルオキシソーム・プロリファレーター・アクチベーティッド・レセプターγ２、レプチン・レセプター、レプチン、プラスミノーゲン・アクチベーター・インヒビター１、ヘパティック・ニュークレアー・ファクター１α、ヘパティック・ニュークレアー・ファクター１β、ニューロ・ペプチド・Ｙ、アンカップリング・プロテイン１、アンカップリング・プロテイン２、アンカップリング・プロテイン３、ＧＴＰ・バインディング・プロテイン３、ファティー・アシッド・バインディング・プロテイン２、プロ・オピオメラノコルチン、コカイン・アンド・アンフェタミン・レギュレイティッド・トランスクリプト、プロテイン・フォスファターゼ１・グリコーゲン・レギュレイティッド・Ｇサブユニット、インスリン・レセプター・サブストレイト１、メラノコルチン−４・レセプター、コレシストキニン−Ａ・レセプター、ニューロ・ペプチド・Ｙ・レセプター、ドーパミンＤ２・レセプター、ドーパミンＤ４・レセプター、アンジオテンシン変換酵素、腫瘍壊死因子α、インスリン・レセプター、セロトニン・レセプター、アディポネクチン、低比重リポプロテイン・レセプター、グルココルチコイド・レセプター、リポプロテイン・リパーゼ、脂肪酸輸送タンパク１、アルデヒド脱水素酵素、アポリポプロテインＡ、アポリポプロテインＢ、コレステリル・エステル・トランスファー・プロテイン、ボンベシン・レセプター、メラノコルチン・レセプター３型、メラノコルチン・レセプター４型、メラノコルチン・レセプター５型、インスリン様成長因子、ヘパティック・リパーゼ、アポリポプロテインＥ、アポリポプロテインＣ、アポリポプロテインＤ、アポリポプロテインＢ、アドレナリン・レセプターα２Ｂ、エンドセリン、グルカゴン様ペプチド・レセプター、アグーチ・シグナリング・プロテイン、ガラニン、グルカゴン・レセプター、プロホルモン・コンバーターゼ１、プロホルモン・コンバーターゼ２、プロホルモン・コンバーターゼ３、カルボキシペプチダーゼＥ、ホルモン感受性リパーゼ、アンジオテンシノーゲン、アンジオテンシンＩＩレセプター、内皮型ヒトＮＯ合成酵素、パラオキソナーゼ、ＣＤ３６、ケモカインレセプター２、細胞接着因子１（ＩＣＡＭ１）、マトリックスメタロプロテアーゼ３、ＣＤ４０リガンド、肝細胞増殖因子、アクチン結合蛋白（ＳＭ２２）、メチレンテトラヒドロ葉酸還元酵素、又は組織メタロプロテアーゼインヒビター−１をコードする遺伝子が挙げられる。
【００２２】
上記の各遺伝子の変異（多型）として、アドレナリン・レセプターβ３遺伝子の変異としては、Ｔｒｐ６４Ａｒｇ（ＴＧＧ／ＣＧＧ）、アドレナリン・レセプターβ２遺伝子の変異としては、−１４２９Ｔ／Ｇ、−１３４３Ａ／Ｇ、−１０２３Ｇ／Ａ、−６５４Ｇ／Ａ、−４６８Ｃ／Ｇ、−３６７Ｔ／Ｃ、−４７Ｔ／Ｃ、−２０Ｔ／Ｃ、Ａｒｇ１６Ｇｌｙ（ＡＧＡ／ＧＧＡ）、Ｇｌｎ２７Ｇｌｕ（ＣＡＡ／ＧＡＡ）、Ｖａｌ１３４Ｍｅｔ（ＧＴＧ／ＡＴＧ）、Ｔｈｒ１６４Ｉｌｅ（ＡＣＣ／ＡＴＣ）、ペルオキシソーム・プロリファレーター・アクチベーティッド・レセプターγ２遺伝子の変異としては、−２０８Ｔ／Ｇ、Ｐｒｏ１２Ａｌａ（ＣＣＡ／ＧＣＡ）、Ｐｒｏ１１５Ｇｌｎ（ＣＣＡ／ＣＡＡ）、Ａｒｇ３１６Ｃｙｓ（ＣＧＣ／ＴＧＣ）Ｈｉｓ４７１Ｈｉｓ（ＣＡＣ／ＣＡＴ）、レプチン・レセプター遺伝子の変異としては、Ｌｙｓ１０９Ａｒｇ（ＡＡＧ／ＡＧＧ）、Ｌｙｓ２０４Ａｒｇ（ＡＡＡ／ＡＧＡ）、Ｇｌｎ２２３Ａｒｇ（ＣＡＧ／ＣＧＧ）、Ｇｌｎ２６９Ｐｒｏ（ＣＡＡ／ＣＣＡ）、Ｓｅｒ３４３Ｓｅｒ（ＡＧＴ／ＡＧＣ）、Ｓｅｒ４９２Ｔｈｒ（ＡＧＴ／ＡＣＴ）、Ｌｙｓ６５６Ａｓｎ（ＡＡＧ／ＡＡＣ）、Ａｌａ９７６Ａｓｐ（ＧＣＣ／ＧＡＣ）、Ｔｙｒ９８６Ｔｙｒ（ＴＡＣ／ＴＡＴ）、Ｐｒｏ１０１９Ｐｒｏ（ＣＣＧ／ＣＣＡ）、レプチン遺伝子の変異としては、−２７９３Ｔ／Ｃ、−２５７５Ｔ／Ｇ、−２５７０Ｔ／Ｇ、−２５４９Ｃ／Ａ、−２５４８Ｇ／Ａ、−２４３７Ｔ／Ｇ、−２０９４Ｔ／Ｃ、−１９６３Ｃ／Ｔ、−１８８７Ｃ／Ｔ、−１８２３Ｃ／Ｔ、−１４４７Ｔ／Ｇ、−１３８７Ｇ／Ａ、−６３３Ｃ／Ｔ、−５７０Ｃ／Ｔ、−４７７Ｇ／Ｔ、−４７６Ｃ／Ｔ、−１８８Ｃ／Ａ、１９Ａ／Ｇ、Ｐｈｅ１７Ｌｅｕ（ＴＴＣ／ＣＴＣ）、Ｔｈｒ４８Ｔｈｒ（ＡＣＧ／ＡＣＡ）、Ｓｅｒ９１Ｓｅｒ（ＴＣＣ／ＴＣＴ）、Ａｓｎ１０２Ａｓｎ（ＡＡＣ／ＡＡＴ）、Ｖａｌ１１０Ｍｅｔ（ＧＴＧ／ＡＴＧ）、Ｇｌｕ１２６Ｇｌｎ（ＧＡＧ／ＣＡＧ）、５３８Ｃ／Ｔ、プラスミノーゲン・アクチベーター・インヒビター１遺伝子の変異としては、−８４４Ｇ／Ａ、−６７１〜−６７５に見られるＧの欠失、９７８５Ｇ／Ａ、１１０５３Ｇ／Ｔ、１１３２０〜１１３４５に見られるＣＧＣＧＣＣＣＣＣの挿入または欠失、ヘパティック・ニュークレアー・ファクター１α遺伝子の変異としては、Ｉｌｅ２７Ｌｅｕ（ＡＴＣ／ＣＴＣ）、ヘパティック・ニュークレアー・ファクター１β遺伝子の変異としては、１９６８Ａ／Ｇ、ニューロ・ペプチド・Ｙ遺伝子の変異としては、Ｌｅｕ７Ｐｒｏ（ＣＴＧ／ＣＣＧ）、アンカップリング・プロテイン１遺伝子の変異としては、−３８２６Ａ／Ｇ、アンカップリング・プロテイン２遺伝子の変異としては、１９Ｃ／Ｔ、２７Ｃ／Ｇ、９７Ｃ／Ｔ、Ｇｌｙ８５Ｓｅｒ（ＧＧＣ／ＡＧＣ）、Ａｌａ５５Ｖａｌ（ＧＣＣ／ＧＴＣ）、エクソン８内のくり返し配列（ＣＣＣＴＣＴ）の有無、アンカップリング・プロテイン３遺伝子の変異としては、１５５Ｃ／Ｔ、−５５Ｃ／Ｔ、５Ｇ／Ａ、Ｔｙｒ２００Ｔｙｒ（ＴＡＴ／ＴＡＣ）、Ｇｌｙ８４Ｓｅｒ（ＧＧＣ／ＡＧＣ）、Ｔｙｒ９９Ｔｙｒ（ＴＡＴ／ＴＡＣ）、イントロン４内の変異：−１４３Ａ／Ｇ、−９６Ｃ／Ｔ、−４７Ａ／Ｇ、−４６Ａ／Ｔ、ＧＴＰ・バインディング・プロテイン３遺伝子の変異としては、−３５０Ａ／Ｃ、Ｇｌｙ２７２Ｓｅｒ（ＧＧＣ／ＡＧＣ）、Ｓｅｒ２７５Ｓｅｒ（ＴＣＣ／ＴＣＴ）、１４２９Ｃ／Ｔ、ファティー・アシッド・バインディング・プロテイン２遺伝子の変異としては、Ａｌａ５４Ｔｈｒ（ＧＣＴ／ＡＣＴ）、プロ・オピオメラノコルチン遺伝子の変異としては、Ａｓｐ８０Ａｓｎ（ＧＡＣ／ＡＡＣ）、アミノ酸番号７３に入る挿入（ＧＧＣＧＣＡ／ＡＧＣＡＧＣＧＧＣまたはＣＣＡＧＣＡ／ＧＧＣＣＣＧＧＣ）、Ｇｌｕ１８０Ａｍｂ（ＧＡＧ／ＴＡＧ）、Ｇｌｕ１８８Ｇｌｙ（ＧＡＧ／ＧＧＧ）、コカイン・アンド・アンフェタミン・レギュレイティッド・トランスクリプト遺伝子の変異としては、Ｓｅｒ６６Ｔｈｒ（ＡＧＴ／ＡＣＴ）、１４５７番目のＡの欠失（ＣＡＴ／ＣＴ）、１４７５Ａ／Ｇ、プロテイン・フォスファターゼ１・グリコーゲン・レギュレイティッド・Ｇサブユニット遺伝子の変異としては、Ａｓｐ９０５Ｔｙｒ（ＧＡＣ／ＴＡＣ）、インスリン・レセプター・サブストレイト１遺伝子の変異としては、Ｐｒｏ１７０Ａｒｇ（ＣＣＣ／ＣＧＣ）、Ｍｅｔ２０９Ｔｈｒ（ＡＴＧ／ＡＣＧ）、Ａｌａ５３０Ｐｒｏ（ＧＣＣ／ＣＣＣ）、Ｓｅｒ８０９Ｐｈｅ（ＴＣＴ／ＴＴＴ）、Ｇｌｙ９７２Ａｒｇ（ＧＧＧ／ＡＧＧ）、インスリン・レセプター遺伝子の変異としては、Ａｓｐ５９Ｇｌｙ（ＧＡＴ／ＧＧＴ）、Ｌｅｕ６２Ｐｒｏ（ＣＴＧ／ＣＣＧ）、メラノコルチン−４・レセプター遺伝子の変異としては、Ｓｅｒ３０Ｐｈｅ（ＴＣＣ／ＴＴＣ）、Ｔｙｒ３５ｃｈ（ＴＡＣ／ＴＡＡ）、Ａｓｐ３７Ｖａｌ（ＧＡＴ／ＧＴＴ）、Ｐｒｏ７８Ｌｅｕ（ＣＣＣ／ＣＴＣ）、Ｉｌｅ１０３Ｖａｌ（ＡＴＣ／ＧＴＣ）、Ｔｈｒ１１２Ｍｅｔ（ＡＣＧ／ＡＴＧ）、Ｉｌｅ１３７Ｔｈｒ（ＡＴＴ／ＡＣＴ）、コドン２１１の下流の欠失（ＴＣＴＣＴＣＴ／ＴＣＴ）、Ｉｌｅ２５Ｉｌｅ（ＡＴＴ／ＣＴＴ）、Ｇｌｙ２５２Ｓｅｒ（ＧＧＣ／ＡＧＣ）、Ｉｌｅ３１７Ｔｈｒ（ＡＴＣ／ＡＣＣ）、Ａｒｇ１６５Ｔｒｐ（ＣＧＧ／ＴＧＧ）、コレシストキニン−Ａ・レセプター遺伝子の変異としては、−１２８Ｇ／Ｔ、−８１Ａ／Ｇ、アンジオテンシノーゲンの変異としては、Ｍｅｔ２３５Ｔｈｒ（ＡＴＧ／ＡＣＧ）、アンジオテンシンＩＩレセプターの変異としては、３’ＵＴＲ（＋８６）（Ａ／Ｃ）、内皮型ヒトＮＯ合成酵素の変異としては、Ｇｌｕ２９８Ａｓｐ（ＧＡＧ／ＧＡＴ）、パラオキソナーゼの変異としては、Ｍｅｔ５５Ｌｅｕ（ＡＴＧ／ＴＴＧ）、ＣＤ３６の変異としては、Ｐｒｏ９０Ｓｅｒ（ＣＣＴ／ＴＣＴ）、ケモカインレセプター２の変異としては、Ｖａｌ６４Ｉｌｅ（ＧＴＣ／ＡＴＣ）、細胞接着因子１（ＩＣＡＭ１）の変異としては、Ｌｙｓ２９Ｍｅｔ（ＡＡＧ／ＡＴＧ）、マトリックスメタロプロテアーゼ３の変異としては、５’ＵＴＲ（１１７１）　Ａ　ｉｎｓｅｒｔｉｏｎ、ＣＤ４０リガンドの変異としては、Ｔｒｐ１４０Ｃｙｓ（ＴＧＧ／ＴＧＣ）、Ｓｅｒ１８４Ｔｅｒｍ（ＴＣＧ／ＴＡＧ）、アクチン結合蛋白（ＳＭ２２）の変異としては、Ｌｙｓ４１９Ａｒｇ（ＡＡＧ／ＡＧＧ）、Ａｌａ４４９Ｇｌｕ（ＧＣＧ／ＧＡＧ）、Ｇｌｙ８９２Ａｓｐ（ＧＧＴ／ＧＡＴ）、メチレンテトラヒドロ葉酸還元酵素の変異としては、Ａｌａ２２２Ｖａｌ（ＧＣＣ／ＧＴＣ）、組織メタロプロテアーゼインヒビター−１の変異としては、Ｐｈｅ１２４Ｐｈｅ（ＴＴＣ／ＴＴＴ）が挙げられる。
【００２３】
上記変異の表記のうち、例えば「Ｔｒｐ６４Ａｒｇ（ＴＧＧ／ＣＧＧ）」は、６４位のＴｒｐのコドンＴＧＧがＡｒｇのコドンＣＧＧに置換する変異を表す。また、「−１４２９Ｔ／Ｇ」は、文献記載の配列中の１４２９番目の位置のＴからＧへの置換を表す。
【００２４】
上記遺伝子のうち、好ましいものとしては、アドレナリン・レセプターβ３、アドレナリン・レセプターβ２、ペルオキシソーム・プロリファレーター・アクチベーティッド・レセプターγ２、レプチン・レセプター、レプチン、プラスミノーゲン・アクチベーター・インヒビター１、ヘパティック・ニュークレアー・ファクター１α、ヘパティック・ニュークレアー・ファクター１β、ニューロ・ペプチド・Ｙ、アンカップリング・プロテイン１、アンカップリング・プロテイン２、アンカップリング・プロテイン３、ＧＴＰ・バインディング・プロテイン３、ファティー・アシッド・バインディング・プロテイン２、プロ・オピオメラノコルチン、コカイン・アンド・アンフェタミン・レギュレイティッド・トランスクリプト、プロテイン・フォスファターゼ１・グリコーゲン・レギュレイティッド・Ｇサブユニット、インスリン・レセプター・サブストレイト１、インスリン・レセプター、メラノコルチン−４・レセプター、コレシストキニン−Ａ・レセプターアンジオテンシノーゲン、アンギジオテンシンＩＩレセプター、内皮型ヒトＮＯ合成酵素、パラオキソナーゼ、ＣＤ３６、ケモカインレセプター２、細胞接着因子１（ＩＣＡＭ１）、マトリックスメタロプロテアーゼ３、ＣＤ４０リガンド、肝細胞増殖因子、アクチン結合蛋白（ＳＭ２２）、メチレンテトラヒドロ葉酸還元酵素、及び組織メタロプロテアーゼインヒビター−１をコードする遺伝子が挙げられる。これらの遺伝子を増幅するためのプライマーを、配列番号１〜７８に例示する。
各遺伝子とプライマーとの対応を、表１に示す。
【００２５】
【表１】

【００２６】
【表２】

【００２７】
【表３】

【００２８】
【表４】

【００２９】
【表５】

【００３０】
１．　Ｎ　Ｅｎｇｌ　Ｊ　Ｍｅｄ　１９９５　Ａｕｇ　１０；３３３（６）：３５２−４；　Ｇｅｎｅｔｉｃ　ｖａｒｉａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｂｅｔａ　３−ａｄｒｅｎｅｒｇｉｃ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ａｎｄ　ａｎ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｃａｐａｃｉｔｙ　ｔｏ　ｇａｉｎ　ｗｅｉｇｈｔ　ｉｎ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｍｏｒｂｉｄ　ｏｂｅｓｉｔｙ．；　Ｃｌｅｍｅｎｔ　Ｋ，　Ｖａｉｓｓｅ　Ｃ，　Ｍａｎｎｉｎｇ　ＢＳ，　Ｂａｓｄｅｖａｎｔ　Ａ，Ｇｕｙ−Ｇｒａｎｄ　Ｂ，　Ｒｕｉｚ　Ｊ，　Ｓｉｌｖｅｒ　ＫＤ，　Ｓｈｕｌｄｉｎｅｒ　ＡＲ，　Ｆｒｏｇｕｅｌ　Ｐ，　Ｓｔｒｏｓｂｅｒｇ　ＡＤ．
２．　Ｊ　Ｃｌｉｎ　Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ　Ｍｅｔａｂ　１９９９　Ｍａｙ；８４（５）：１７５４−７　；　Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ　ｉｎ　ｔｈｅ５’−ｌｅａｄｅｒ　ｃｉｓｔｒｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｂｅｔａ２−ａｄｒｅｎｅｒｇｉｃ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ｇｅｎｅ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｗｉｔｈｏｂｅｓｉｔｙ　ａｎｄ　ｔｙｐｅ　２　ｄｉａｂｅｔｅｓ．；　Ｙａｍａｄａ　Ｋ，　Ｉｓｈｉｙａｍａ−Ｓｈｉｇｅｍｏｔｏ　Ｓ，　Ｉｃｈｉｋａｗａ　Ｆ，　Ｙｕａｎ　Ｘ，　Ｋｏｙａｎａｇｉ　Ａ，　Ｋｏｙａｍａ　Ｗ，　Ｎｏｎａｋａ　Ｋ．
３．　Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ　２０００　Ｊｕｌ；３６（１）：３３−４１；　Ｇ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｂｅｔａ　３　ｇｅｎｅ：　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，　ｐｒｏｍｏｔｅｒ，　ａｎｄ　ａｄｄｉｔｉｏｎａｌ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ．；　Ｒｏｓｓｋｏｐｆ　Ｄ，　Ｂｕｓｃｈ　Ｓ，　Ｍａｎｔｈｅｙ　Ｉ，　Ｓｉｆｆｅｒｔ　Ｗ．
４．　Ｎｅｗ　Ｅｎｇ．　Ｊ．　Ｍｅｄ．　３３９：　９５３−９５９，　１９９８；　Ｏｂｅｓｉｔｙ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ａ　ｍｕｔａｔｉｏｎ　ｉｎ　ａ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｒｅｇｕｌａｔｏｒ　ｏｆ　ａｄｉｐｏｃｙｔｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ．　；Ｒｉｓｔｏｗ，　Ｍ．；　Ｍｕｌｌｅｒ−Ｗｉｅｌａｎｄ，　Ｄ．；　Ｐｆｅｉｆｆｅｒ，　Ａ．；　Ｋｒｏｎｅ，　Ｗ．；　Ｋａｈｎ，　Ｃ．　Ｒ．　：
５．　Ｅｒｉｋｓｓｏｎ，　Ｐ．；　Ｋａｌｌｉｎ，　Ｂ．；　ｖａｎ　ｔ’Ｈｏｏｆｔ，　Ｆ．　Ｍ．；　Ｂａｖｈｅｎｏｌｍ．　Ｐ．；　Ｈａｍｓｔｅｎ，　Ａ．　：　Ａｌｌｅｌｉｃ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｉｎｃｒｅａｓｅ　ｉｎ　ｂａｓａｌ　ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎ−ａｃｔｉｖａｔｏｒ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ　１　ｇｅｎｅ　ｉｓ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ　ｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ．Ｐｒｏｃ．　Ｎａｔ．　Ａｃａｄ．　Ｓｃｉ．　９２：　１８５１−１８５５，　１９９５．
６．　Ｂａｉｅｒ，　Ｌ．　Ｊ．；　Ｓａｃｃｈｅｔｔｉｎｉ，　Ｊ．　Ｃ．；　Ｋｎｏｗｌｅｒ，　Ｗ．　Ｃ．；　Ｅａｄｓ，　Ｊ．；　Ｐａｏｌｉｓｓｏ，　Ｇ．；　Ｔａｔａｒａｎｎｉ，　Ｐ．　Ａ．；　Ｍｏｃｈｉｚｕｋｉ，　Ｈ．；　Ｂｅｎｎｅｔｔ，　Ｐ．　Ｈ．；　Ｂｏｇａｒｄｕｓ，　Ｃ．；　Ｐｒｏｃｈａｚｋａ，　Ｍ．　：　Ａｎ　ａｍｉｎｏ　ａｃｉｄ　ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｉｏｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｈｕｍａｎ　ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ　ｆａｔｔｙ　ａｃｉｄ　ｂｉｎｄｉｎｇ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｉｓ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｆａｔｔｙ　ａｃｉｄ　ｂｉｎｄｉｎｇ，　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｆａｔ　ｏｘｉｄａｔｉｏｎ，　ａｎｄ　ｉｎｓｕｌｉｎ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ．　Ｊ．　Ｃｌｉｎ．　Ｉｎｖｅｓｔ．　９５：　１２８１−１２８７，　１９９５
７．　Ｉｎｏｕｅ，　Ｈ．；　Ｉａｎｎｏｔｔｉ，　Ｃ．　Ａ．；　Ｗｅｌｌｉｎｇ，　Ｃ．　Ｍ．；　Ｖｅｉｌｅ，　Ｒ．；　Ｄｏｎｉｓ−Ｋｅｌｌｅｒ，　Ｈ．；　Ｐｅｒｍｕｔｔ，　Ｍ．　Ａ．　：
Ｈｕｍａｎ　ｃｈｏｌｅｃｙｓｔｏｋｉｎｉｎ　ｔｙｐｅ　Ａ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ｇｅｎｅ：　ｃｙｔｏｇｅｎｅｔｉｃ　ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ，　ｐｈｙｓｉｃａｌ　ｍａｐｐｉｎｇ，　ａｎｄ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｗｏ　ｍｉｓｓｅｎｓｅ　ｖａｒｉａｎｔｓ　ｉｎ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｏｂｅｓｉｔｙ　ａｎｄ　ｎｏｎ−ｉｎｓｕｌｉｎ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ｄｉａｂｅｔｅｓ　ｍｅｌｌｉｔｕｓ　（ＮＩＤＤＭ）．　Ｇｅｎｏｍｉｃｓ　４２：　３３１−３３５，　１９９７
８．　Ｃｌａｕｓｅｎ，　Ｊ．　Ｏ．；　Ｈａｎｓｅｎ，　Ｔ．；　Ｂｊｏｒｂａｅｋ，　Ｃ．；　Ｅｃｈｗａｌｄ，　Ｓ．　Ｍ．；　Ｕｒｈａｍｍｅｒ，Ｓ．　Ａ．；　Ｒａｓｍｕｓｓｅｎ，　Ｓ．；　Ａｎｄｅｒｓｅｎ，　Ｃ．　Ｂ．；　Ｈａｎｓｅｎ，　Ｌ．；　Ａｌｍｉｎｄ，　Ｋ．；　Ｗｉｎｔｈｅｒ，Ｋ．；　Ｈａｒａｌｄｓｄｏｔｔｉｒ，　Ｊ．；　Ｂｏｒｃｈ−Ｊｏｈｎｓｅｎ，　Ｋ．；　Ｐｅｄｅｒｓｅｎ，　Ｏ．　：
Ｉｎｓｕｌｉｎ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ：　ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｏｂｅｓｉｔｙ　ａｎｄ　ａ　ｃｏｍｍｏｎ　ｖａｒｉａｎｔ　ｏｆｉｎｓｕｌｉｎ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ｓｕｂｓｔｒａｔｅ−１．　Ｌａｎｃｅｔ　３４６：　３９７−４０２，　１９９５
９．　Ｊｅｕｎｅｍａｉｔｒｅ，　Ｘ．；　Ｓｏｕｂｒｉｅｒ，　Ｆ．；　Ｋｏｔｅｌｅｖｔｓｅｖ，　Ｙ．　Ｖ．；　Ｌｉｆｔｏｎ，　Ｒ．　Ｐ．；　Ｗｉｌｌｉａｍｓ，　Ｃ．　Ｓ．；　Ｃｈａｒｒｕ，　Ａ．；　Ｈｕｎｔ，　Ｓ．　Ｃ．；　Ｈｏｐｋｉｎｓ，　Ｐ．　Ｎ．；　Ｗｉｌｌｉａｍｓ，　Ｒ．　Ｒ．；　Ｌａｌｏｕｅｌ，　Ｊ．−Ｍ．；　Ｃｏｒｖｏｌ，　Ｐ．　：
Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｂａｓｉｓ　ｏｆ　ｈｕｍａｎ　ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ：　ｒｏｌｅ　ｏｆ　ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎｏｇｅｎ．　Ｃｅｌｌ　７１：
７−２０，　１９９２．
【００３１】
１０．　Ｗａｎｇ，　Ｗ．　Ｙ．　Ｓ．；　Ｚｅｅ，　Ｒ．　Ｙ．　Ｌ．；　Ｍｏｒｒｉｓ，　Ｂ．　Ｊ．　：
Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ　ＩＩ　ｔｙｐｅ　１　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ｇｅｎｅ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ　ｗｉｔｈ　ｅｓｓｅｎｔｉａｌ　ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ．　Ｃｌｉｎ．　Ｇｅｎｅｔ．　５１：　３１−３４，　１９９７．
１１．　Ｙｏｓｈｉｍｕｒａ，　Ｍ．；　Ｙａｓｕｅ，　Ｈ．；　Ｎａｋａｙａｍａ，　Ｍ．；　Ｓｈｉｍａｓａｋｉ，　Ｙ．；　Ｓｕｍｉｄａ，　Ｈ．；Ｓｕｇｉｙａｍａ，　Ｓ．；　Ｋｕｇｉｙａｍａ，　Ｋ．；　Ｏｇａｗａ，　Ｈ．；　Ｏｇａｗａ，　Ｙ．；　Ｓａｉｔｏ，　Ｙ．；　Ｍｉｙａｍｏｔｏ，　Ｙ．；　Ｎａｋａｏ，　Ｋ．　：　Ａ　ｍｉｓｓｅｎｓｅ　ｇｌｕ２９８ａｓｐ　ｖａｒｉａｎｔ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　ｎｉｔｒｉｃ　ｏｘｉｄｅ　ｓｙｎｔｈａｓｅ　ｇｅｎｅ　ｉｓ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｃｏｒｏｎａｒｙ　ｓｐａｓｍ　ｉｎ　ｔｈｅ　Ｊａｐａｎｅｓｅ．　Ｈｕｍ．　Ｇｅｎｅｔ．　１０３：　６５−６９，　１９９８
１２．　Ｂｒｏｐｈｙ，　Ｖ．　Ｈ．；　Ｊａｍｐｓａ，　Ｒ．　Ｌ．；　Ｃｌｅｎｄｅｎｎｉｎｇ，　Ｊ．　Ｂ．；　ＭｃＫｉｎｓｔｒｙ，　Ｌ．　Ａ．；　Ｊａｒｖｉｋ，　Ｇ．　Ｐ．；　Ｆｕｒｌｏｎｇ，　Ｃ．　Ｅ．　：　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　５−ｐｒｉｍｅ　ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ−ｒｅｇｉｏｎ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ　ｏｎ　ｐａｒａｏｘｏｎａｓｅ−ｇｅｎｅ　（ＰＯＮ１）　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．　Ａｍ．　Ｊ．　Ｈｕｍ．　Ｇｅｎｅｔ．　６８：　１４２８−１４３６，　２００１．
１３．　Ｋａｓｈｉｗａｇｉ，　Ｈ．；　Ｈｏｎｄａ，　Ｓ．；　Ｔｏｍｉｙａｍａ，　Ｙ．；　Ｍｉｚｕｔａｎｉ，　Ｈ．；　Ｔａｋｅ，　Ｈ．；　Ｈｏｎｄａ，　Ｙ．；　Ｋｏｓｕｇｉ，　Ｓ．；　Ｋａｎａｙａｍａ，　Ｙ．；　Ｋｕｒａｔａ，　Ｙ．；　Ｍａｔｓｕｚａｗａ，　Ｙ．　：Ａ　ｎｏｖｅｌ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ　ｉｎ　ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ　ＩＶ　（ｒｅｐｌａｃｅｍｅｎｔ　ｏｆ　ｐｒｏｌｉｎｅ−９０　ｂｙ　ｓｅｒｉｎｅ）　ｐｒｅｄｏｍｉｎａｔｅｓ　ｉｎ　ｓｕｂｊｅｃｔｓ　ｗｉｔｈ　ｐｌａｔｅｌｅｔ　ＧＰＩＶ　ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ．　Ｔｈｒｏｍｂ．　Ｈａｅｍｏｓｔ．　６９：　４８１−４８４，　１９９３．
１４．　Ｓｍｉｔｈ，　Ｍ．　Ｗ．；　Ｄｅａｎ，　Ｍ．；　Ｃａｒｒｉｎｇｔｏｎ，　Ｍ．；　Ｗｉｎｋｌｅｒ，　Ｃ．；　Ｈｕｔｔｌｅｙ，　Ｇ．　Ａ．；　Ｌｏｍｂ，　Ｄ．　Ａ．；　Ｇｏｅｄｅｒｔ，　Ｊ．　Ｊ．；　Ｏ’Ｂｒｉｅｎ，　Ｔ．　Ｒ．；　Ｊａｃｏｂｓｏｎ，　Ｌ．　Ｐ．；　Ｋａｓｌｏｗ，Ｒ．；　Ｂｕｃｈｂｉｎｄｅｒ，　Ｓ．；　Ｖｉｔｔｉｎｇｈｏｆｆ，　Ｅ．；　Ｖｌａｈｏｖ，　Ｄ．；　Ｈｏｏｔｓ，　Ｋ．；　Ｈｉｌｇａｒｔｎｅｒ，Ｍ．　Ｗ．；　Ｈｅｍｏｐｈｉｌｉａ　Ｇｒｏｗｔｈ　ａｎｄ　Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　Ｓｔｕｄｙ　（ＨＧＤＳ）；　Ｍｕｌｔｉｃｅｎｔｅｒ　ＡＩＤＳＣｏｈｏｒｔ　Ｓｔｕｄｙ　（ＭＡＣＳ）；　Ｍｕｌｔｉｃｅｎｔｅｒ　Ｈｅｍｏｐｈｉｌｉａ　Ｃｏｈｏｒｔ　Ｓｔｕｄｙ　（ＭＨＣＳ）；　Ｓａｎ　Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ　Ｃｉｔｙ　Ｃｏｈｏｒｔ　（ＳＦＣＣ）；　ＡＬＩＶＥ　Ｓｔｕｄｙ；　Ｏ’Ｂｒｉｅｎ，　Ｓ．　Ｊ．　：Ｃｏｎｔｒａｓｔｉｎｇ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｆ　ＣＣＲ２　ａｎｄ　ＣＣＲ５　ｖａｒｉａｎｔｓ　ｏｎ　ＨＩＶ−１　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｄｉｓｅａｓｅ　ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ．　Ｓｃｉｅｎｃｅ　２７７：　９５９−９６５，　１９９７．
１５．　Ｆｅｒｎａｎｄｅｚ−Ｒｅｙｅｓ，　Ｄ．；　Ｃｒａｉｇ，　Ａ．　Ｇ．；　Ｋｙｅｓ，　Ｓ．　Ａ．；　Ｐｅｓｈｕ，　Ｎ．；　Ｓｎｏｗ，　Ｒ．　Ｗ．；　Ｂｅｒｅｎｄｔ，　Ａ．　Ｒ．；　Ｍａｒｓｈ，　Ｋ．；　Ｎｅｗｂｏｌｄ，　Ｃ．　Ｉ．　：Ａ　ｈｉｇｈ　ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ　Ａｆｒｉｃａｎ　ｃｏｄｉｎｇ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ　ｉｎ　ｔｈｅ　Ｎ−ｔｅｒｍｉｎａｌ　ｄｏｍａｉｎ　ｏｆＩＣＡＭ−１　ｐｒｅｄｉｓｐｏｓｉｎｇ　ｔｏ　ｃｅｒｅｂｒａｌ　ｍａｌａｒｉａ　ｉｎ　Ｋｅｎｙａ．　Ｈｕｍ．　Ｍｏｌｅｃ．　Ｇｅｎｅｔ．　６：
１３５７−１３６０，　１９９７．
１６．　Ｙｅ，　Ｓ．；　Ｅｒｉｋｓｓｏｎ，　Ｐ．；　Ｈａｍｓｔｅｎ，　Ａ．；　Ｋｕｒｋｉｎｅｎ，　Ｍ．；　Ｈｕｍｐｈｒｉｅｓ，　Ｓ．　Ｅ．；Ｈｅｎｎｅｙ，　Ａ．　Ｍ．　：　Ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｃｏｒｏｎａｒｙ　ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ　ｉｓ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ａ　ｃｏｍｍｏｎ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｖａｒｉａｎｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｈｕｍａｎ　ｓｔｒｏｍｅｌｙｓｉｎ−１　ｐｒｏｍｏｔｅｒ　ｗｈｉｃｈ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｉｎ　ｒｅｄｕｃｅｄ　ｇｅｎｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．　Ｊ．　Ｂｉｏｌ．　Ｃｈｅｍ．　２７１：　１３０５５−１３０６０，　１９９６．
１７．　Ｋｏｒｔｈａｕｅｒ，　Ｕ．；　Ｇｒａｆ，　Ｄ．；　Ｍａｇｅｓ，　Ｈ．　Ｗ．；　Ｂｒｉｅｒｅ，　Ｆ．；　Ｐａｄａｙａｃｈｅｅ，　Ｍ．；Ｍａｌｃｏｌｍ，　Ｓ．；　Ｕｇａｚｉｏ，　Ａ．　Ｇ．；　Ｎｏｔａｒａｎｇｅｌｏ，　Ｌ．　Ｄ．；　Ｌｅｖｉｎｓｋｙ，　Ｒ．　Ｊ．；　Ｋｒｏｃｚｅｋ，　Ｒ．　Ａ．　：　Ｄｅｆｅｃｔｉｖｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　Ｔ−ｃｅｌｌ　ＣＤ４０　ｌｉｇａｎｄ　ｃａｕｓｅｓ　Ｘ−ｌｉｎｋｅｄ　ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ　ｗｉｔｈ　ｈｙｐｅｒ−ＩｇＭ．　Ｎａｔｕｒｅ　３６１：　５３９−５４１，　１９９３．
１８．　Ｃａｍｏｒｅｔｔｉ−Ｍｅｒｃａｄｏ，　Ｂ．；　Ｆｏｒｓｙｔｈｅ，　Ｓ．　Ｍ．；　ＬｅＢｅａｕ，　Ｍ．　Ｍ．；　Ｅｓｐｉｎｏｓａ，　Ｒ．，　ＩＩＩ；　Ｖｉｅｉｒａ，　Ｊ．　Ｅ．；　Ｈａｌａｙｋｏ，　Ａ．　Ｊ．；　Ｗｉｌｌａｄｓｅｎ，　Ｓ．；　Ｋｕｒｔｚ，　Ｂ．；　Ｏｂｅｒ，　Ｃ．；　Ｅｖａｎｓ，　Ｇ．　Ａ．；　Ｔｈｗｅａｔｔ，　Ｒ．；　Ｓｈａｐｉｒｏ，　Ｓ．；　Ｎｉｕ，　Ｑ．；　Ｑｉｎ，　Ｙ．；　Ｐａｄｒｉｄ，　Ｐ．　Ａ．；　Ｓｏｌｗａｙ，　Ｊ．　：　Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ａｎｄ　ｃｙｔｏｇｅｎｅｔｉｃ　ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｈｕｍａｎ　ＳＭ２２　ｇｅｎｅ　（ＴＡＧＬＮ）．　Ｇｅｎｏｍｉｃｓ　４９：　４５２−４５７，　１９９８．
１９．　Ｇｏｙｅｔｔｅ，　Ｐ．；　Ｓｕｍｎｅｒ，　Ｊ．　Ｓ．；　Ｍｉｌｏｓ，　Ｒ．；　Ｄｕｎｃａｎ，　Ａ．　Ｍ．　Ｖ．；　Ｒｏｓｅｎｂｌａｔｔ，　Ｄ．　Ｓ．；　Ｍａｔｔｈｅｗｓ，　Ｒ．　Ｇ．；　Ｒｏｚｅｎ，　Ｒ．　：　Ｈｕｍａｎ　ｍｅｔｈｙｌｅｎｅｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｆｏｌａｔｅ　ｒｅｄｕｃｔａｓｅ：　ｉｓｏｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃＤＮＡ，　ｍａｐｐｉｎｇ　ａｎｄ　ｍｕｔａｔｉｏｎ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ．　Ｎａｔｕｒｅ
Ｇｅｎｅｔ．　７：　１９５−２００，　１９９４．
２０．　Ｗａｎｇ　（１９９９）　　ｅｔ　ａｌ．　Ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｃｏｄｉｎｇ　ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ　ｆｏｒ　ｔｉｓｓｕｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ　ｏｆ　ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ　１　（ＴＩＭＰ１）　ａｎｄ　２　（ＴＩＭＰ２）　ｉｎ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ａｎｅｕｒｙｓｍｓ．　Ｍａｔｒｉｘ　Ｂｉｏｌ　１８，　１２１
【００３２】
表１に記載されていない遺伝子については、公知の遺伝子配列及び検出すべき多型部位の情報に基づいて、容易にプライマーを設定することができる。
【００３３】
本発明のキットは、前記の遺伝子のうち、アドレナリン・レセプターβ３、アドレナリン・レセプターβ２、ペルオキシソーム・プロリファレーター・アクチベーティッド・レセプターγ２、ＧＴＰ・バインディング・プロテイン３、プラスミノーゲン・アクチベーター・インヒビター１、ファティー・アシッド・バインディング・プロテイン２、インスリン・レセプター・サブストレイト１、コレシストキニン−Ａ・レセプター、アンジオテンシノーゲン、アンジオテンシンＩＩレセプター、内皮型ヒトＮＯ合成酵素、パラオキソナーゼ、ＣＤ３６、ケモカインレセプター２、細胞接着因子１（ＩＣＡＭ１）、マトリックスメタロプロテアーゼ３、ＣＤ４０リガンド、肝細胞増殖因子、アクチン結合蛋白（ＳＭ２２）、メチレンテトラヒドロ葉酸還元酵素、及び組織メタロプロテアーゼインヒビター−１をコードする遺伝子の全ての遺伝子の多型の有無を検出し得ることが好ましい。
【００３４】
プライマーは各々セットで用いられ、これらのプライマーを用いて増幅される被検体由来の核酸断片の塩基配列内には各々の多型（塩基置換・欠失・挿入）が含まれている。
【００３５】
本発明において、プライマーは、ＰＣＲ法、ＮＡＳＢＡ法など、いくつかの増幅法に使用することができる。また、これらのプライマーセットは、単独で使用することも、まとめて一つの反応系で増幅することも可能である。
【００３６】
さらに、これらのプライマーセットのうちいずれか一方の５’末端には、ビオチンまたはジゴキゲニン等のハプテンを化学的に結合させておくと、ハイブリダイゼーションの検出が容易になる。
【００３７】
＜２＞キャプチャーオリゴヌクレオチド
キャプチャーオリゴヌクレオチドは、心血管系疾患、肥満および生活習慣病の各々の疾患に関与する遺伝子の多型を検出するために用いられる。本発明においては、支持体に固定化された複数のキャプチャーオリゴヌクレオチドを含む。また、キャプチャーオリゴヌクレオチドは、前記のそれぞれの疾患毎に選ばれる少なくとも一つの遺伝子の多型の有無を検出し得る、野生型遺伝子及び多型を含む遺伝子のそれぞれの配列に由来するオリゴヌクレオチド対を含む。
【００３８】
本発明においては、キャプチャーオリゴヌクレオチドは、対応する疾患毎にグループ分けされて支持体上に配置される。
支持体は、キャプチャーオリゴヌクレオチドに加えて、プローブとキャプチャーオリゴヌクレオチドとのハイブリダイゼーション反応が正確に行われたかを検定するためのポジティブコントロールおよびネガティブコントロールが固定化されていてもよい。
以下、各オリゴヌクレオチドについて説明する。
【００３９】
（１）多型を検出するためのキャプチャーオリゴヌクレオチド
ヒト由来の染色体は性染色体を除くと２ｎであり、変異型および野生型のどちらかを有しているため、本願では便宜上片方を野生型、もう一方を変異型と呼ぶこととした。配列番号７９〜５７９に示すオリゴヌクレオチドは、心血管疾患、肥満又は生活習慣病に関与する遺伝子の塩基配列内に存在する塩基置換又は数塩基の挿入もしくは欠失を検出するために設計された配列を有しており、各々心血管疾患、肥満又は生活習慣病に関する遺伝子の変異を含むか、又は含まない１０〜４０塩基の長さの合成オリゴヌクレオチドである。
【００４０】
心血管疾患、肥満、及び生活習慣病の各疾患毎に、各々の疾患に関与する遺伝子に対応するキャプチャーオリゴヌクレオチドをグループ分けして支持体上に配置する。また、変異型を検出するためのキャプチャーオリゴヌクレオチド（「変異型オリゴ」ともいう）と、野生型を検出するためのキャプチャーオリゴヌクレオド（「野生型オリゴ」ともいう）、は判定が容易なように並列して支持体に配置されるのが好ましい。
オリゴヌクレオチドの配置の一例を、図１に示す。
【００４１】
（２）ポジティブコントロール
ポジティブコントロールは、ハイブリダイゼーション、及びハイブリダイゼーションの検出反応が正確に行われたかを検定するためのオリゴヌクレオチドである。
【００４２】
支持体に固定化されるオリゴヌクレオチドと被検体由来のＤＮＡ（プローブ）とのハイブリダイゼーションは、各被検体由来のＤＮＡと各々のキャプチャーオリゴヌクレオドとのハイブリダイゼーションの起こりやすさが全て等しいとは限らない。したがって、ハイブリダイゼーション反応そのもののコントロールとして変異型オリゴ又は野生型オリゴ各々単体でもしくは混合物で用いられるべきである。被検体由来のＤＮＡが、変異型と野生型のヘテロ接合体もしくはどちらかのホモ接合体のどちらであるか判らないので、ハイブリダイゼーション反応が進行したポジティブ・コントロールとしては、変異型オリゴと野生型オリゴの混合物が好ましい。
【００４３】
更に、ハイブリダイゼーション後の判定において、ポシティブ・コントロール上に得られたシグナルの強度を測定し、これらの値に対して各野生型オリゴ上と野生型オリゴ上のシグナル強度も測定し、３者を比較してポシティブ・コントロールよりも高いシグナル強度を有するキャプチャーが示す変異型もしくは野生型が、被検体の型であることを明らかにすることが可能になる。
【００４４】
（３）ネガティブコントロール
ネガティブコントロールは、ポジティブコントロールと同様に、ハイブリダイゼーションが正確に行われたかを検定するためのオリゴヌクレオチドである。
【００４５】
前記変異型オリゴおよび野生型オリゴの配列と同一の配列を有するが、１塩基以上で、かつ、前記配列において２０％未満の範囲内で人為的な塩基の置換又は欠失を含む塩基配列を有するオリゴヌクレオチドを、ネガティブコントロールとする。ネガティブコントロールは、適切な条件では、野生型及び変異型のいずれのプローブともハイブリダイズしない。
【００４６】
（４）キャプチャーオリゴヌクレオチドの設計
キャプチャーオリゴヌクレオチド（以下、「キャプチャーオリゴ」と省略することがある）は、心血管疾患、肥満もしくは生活習慣病に関する遺伝子の塩基配列中の１０〜６０塩基からなる塩基配列を有する合成オリゴヌクレオチドとして調製することができる。
【００４７】
キャプチャーオリゴの設計に際し、キャプチャーオリゴ中の変異点に対応する位置は、核酸プローブとハイブリダイズすることがができる限り特に制限されないが、通常、キャプチャーオリゴの中央部に存在することが好ましい。また数塩基程度の欠失やくり返し単位の数が異なる場合も、同様に欠失やくり返し単位をキャプチャーオリゴの中央部に存在させる。キャプチャーオリゴが短すぎると、ハイブリダイゼーションの検出が困難になり、長すぎると変異点によるハイブリダイゼーションの阻害が起こらなくなるため、好ましくは１０〜６０塩基の範囲、より好ましくは１４〜３０塩基の範囲が望ましい。但し、キャプチャーオリゴの長さの最適化は、主として配列の特性（特定の塩基の含有率、同一塩基の繰り返し）に依存するもので、結合性の良いものは短鎖でもよいことが、本発明の実験で確認されている。
【００４８】
キャプチャーオリゴ（野生型、変異型及びネガティブコントロールを含む）の塩基配列の例を、配列番号７９〜５７９に示す。これらのキャプチャーオリゴは、公表文献および発明者自らの試験を通じて得られた心血管疾患、肥満又は生活習慣病に関するデータ解析結果に基づいて設計したものであり、それぞれの生活習慣病もしくは肥満に関連する塩基配列中の変異を広くカバーすることができるレベルにまで引き上げることができる。
【００４９】
配列表に記載したキャプチャーオリゴの長さはおおむね１４〜２１塩基の範囲であるが、数塩基の欠失や挿入の場合はこの限りではない。なお配列番号７９から５５１に示す塩基配列の他に、各塩基配列の５’側もしくは３’側またはその両方において短縮あるいは伸長した塩基配列を有するオリゴヌクレオチドをキャプチャーオリゴヌクレオチドとして用いることもできる。
【００５０】
オリゴヌクレオチドの合成、および後述する染色体ＤＮＡの調製、ハイブリダイゼーション、ＰＣＲなどの技法は、当業者に良く知られた通常の方法（Ｍａｎｉａｔｉｓ，　Ｔ．　ｅｔ　ａｌ．，　”Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｃｌｏｎｉｎｇ　Ａ　ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　Ｍａｎｕａｌ，　Ｔｈｉｒｄ　Ｅｄｉｔｉｏｎ”，　Ｃｏｌｄ　Ｓｐｒｉｎｇ　Ｈａｒｂｏｒ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　Ｐｒｅｓｓ　（２００１）等参照）にしたがって行うことができる。
【００５１】
オリゴヌクレオチドは市販のＤＮＡ合成機を用いて合成することができる。オリゴヌクレオチドがヘアピン構造、ループ構造またはそれ以外の被検体由来の核酸とのハイブリダイゼーションを妨害する立体構造を持つ場合、同オリゴヌクレオチドを構成する１またはそれ以上のヌクレオチドをイノシンまたはいずれのオリゴヌクレオチドとも対合しないヌクレオチドに置換することにより、その立体構造を解除することができる。
【００５２】
配列表に記載したキャプチャーオリゴヌクレオチド及びネガティブコントロールと、各遺伝子及びその変異部位との対応、及びキャプチャーオリゴヌクレオチドの野生型又は変異型の種別を、表２に示す。
【００５３】
【表６】

【００５４】
【表７】

【００５５】
【表８】

【００５６】
【表９】

【００５７】
【表１０】

【００５８】
【表１１】

【００５９】
【表１２】

【００６０】
【表１３】

【００６１】
【表１４】

【００６２】
【表１５】

【００６３】
【表１６】

【００６４】
【表１７】

【００６５】
【表１８】

【００６６】
２１．　Ｗａｕｔｅｒｓ，　Ｍ．；　Ｍｅｒｔｅｎｓ，　Ｉ．；　Ｒａｎｋｉｎｅｎ，　Ｔ．；　Ｃｈａｇｎｏｎ，　Ｍ．；　Ｂｏｕｃｈａｒｄ，　Ｃ．；Ｖａｎ　Ｇａａｌ，　Ｌ．　：　Ｌｅｐｔｉｎ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ｇｅｎｅ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ　ａｒｅ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｉｎｓｕｌｉｎ　ｉｎ　ｏｂｅｓｅ　ｗｏｍｅｎ　ｗｉｔｈ　ｉｍｐａｉｒｅｄ　ｇｌｕｃｏｓｅ　ｔｏｌｅｒａｎｃｅ．　Ｊ．　Ｃｌｉｎ．　Ｅｎｄｏｃｒ．　Ｍｅｔａｂ．　８６：　３２２７−３２３２，　２００１．
２２．　Ｍｏｎｔａｇｕｅ，　Ｃ．　Ｔ．；　Ｆａｒｏｏｑｉ，　Ｉ．　Ｓ．；　Ｗｈｉｔｅｈｅａｄ，　Ｊ．　Ｐ．；　Ｓｏｏｓ，　Ｍ．　Ａ．；　Ｒａｕ，　Ｈ．；　Ｗａｒｅｈａｍ，　Ｎ．　Ｊ．；　Ｓｅｗｔｅｒ，　Ｃ．　Ｐ．；　Ｄｉｇｂｙ，　Ｊ．　Ｅ．；　Ｍｏｈａｍｍｅｄ，　Ｓ．　Ｎ．；　Ｈｕｒｓｔ，　Ｊ．　Ａ．；　Ｃｈｅｅｔｈａｍ，　Ｃ．　Ｈ．；　Ｅａｒｌｅｙ，　Ａ．　Ｒ．；　Ｂａｒｎｅｔｔ，　Ａ．　Ｈ．；　Ｐｒｉｎｓ，　Ｊ．　Ｂ．；Ｏ’Ｒａｈｉｌｌｙ，　Ｓ．　：　Ｃｏｎｇｅｎｉｔａｌ　ｌｅｐｔｉｎ　ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ　ｉｓ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｓｅｖｅｒｅ　ｅａｒｌｙ−ｏｎｓｅｔ　ｏｂｅｓｉｔｙ　ｉｎ　ｈｕｍａｎｓ．　Ｎａｔｕｒｅ　３８７：　９０３−９０８，　１９９７．
２３．　Ｃｈｉｕ，　Ｋ．　Ｃ．；　Ｃｈｕａｎｇ，　Ｌ．−Ｍ．；　Ｒｙｕ，　Ｊ．　Ｍ．；　Ｔｓａｉ，　Ｇ．　Ｐ．；　Ｓａａｄ，　Ｍ．　Ｆ．　：Ｔｈｅ　Ｉ２７Ｌ　ａｍｉｎｏ　ａｃｉｄ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ　ｏｆ　ｈｅｐａｔｉｃ　ｎｕｃｌｅａｒ　ｆａｃｔｏｒ−１−ａｌｐｈａ　ｉｓ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｉｎｓｕｌｉｎ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ．　Ｊ．　Ｃｌｉｎ．　Ｅｎｄｏｃｒ．　Ｍｅｔａｂ．　８５：　２１７８−２１８３，
２０００．
２４．　Ｋａｒｖｏｎｅｎ，　Ｍ．　Ｋ．；　Ｐｅｓｏｎｅｎ，　Ｕ．；　Ｋｏｕｌｕ，　Ｍ．；　Ｎｉｓｋａｎｅｎ，　Ｌ．；　Ｌａａｋｓｏ，　Ｍ．；Ｒｉｓｓａｎｅｎ，　Ａ．；　Ｄｅｋｋｅｒ，　Ｊ．　Ｍ．；　’ｔ　Ｈａｒｔ，　Ｌ．　Ｍ．；　Ｖａｌｖｅ，　Ｒ．；　Ｕｕｓｉｔｕｐａ，　Ｍ．　Ｉ．：Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａ　ｌｅｕｃｉｎｅ（７）−ｔｏ−ｐｒｏｌｉｎｅ（７）　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓｉｇｎａｌ　ｐｅｐｔｉｄｅ　ｏｆ　ｎｅｕｒｏｐｅｐｔｉｄｅ　Ｙ　ｗｉｔｈ　ｈｉｇｈ　ｓｅｒｕｍ　ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ　ａｎｄ　ＬＤＬ　ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｌｅｖｅｌｓ．　Ｎａｔｕｒｅ　Ｍｅｄ．　４：　１４３４−１４３７，　１９９８．
２５．　Ｏｐｐｅｒｔ，　Ｊ．　Ｍ．；　Ｖｏｈｌ，　Ｍ．　Ｃ．；　Ｃｈａｇｎｏｎ，　Ｍ．；　Ｄｉｏｎｎｅ，　Ｆ．　Ｔ．；　Ｃａｓｓａｒｄ−Ｄｏｕｌｃｉｅｒ，　Ａ．　Ｍ．；　Ｒｉｃｑｕｉｅｒ，　Ｄ．；　Ｐｅｒｕｓｓｅ，　Ｌ．；　Ｂｏｕｃｈａｒｄ，　Ｃ．　：　ＤＮＡ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｕｎｃｏｕｐｌｉｎｇ　ｐｒｏｔｅｉｎ　（ＵＣＰ）　ｇｅｎｅ　ａｎｄ　ｈｕｍａｎ　ｂｏｄｙ　ｆａｔ．　Ｉｎｔ．　Ｊ．　Ｏｂｅｓ．Ｒｅｌａｔ．　Ｍｅｔａｂ．　Ｄｉｓｏｒｄ．　１８：　５２６−５３１，　１９９４．
２６．　Ｅｓｔｅｒｂａｕｅｒ，　Ｈ．；　Ｓｃｈｎｅｉｔｌｅｒ，　Ｃ．；　Ｏｂｅｒｋｏｆｌｅｒ，　Ｈ．；　Ｅｂｅｎｂｉｃｈｌｅｒ，　Ｃ．；　Ｐａｕｌｗｅｂｅｒ，　Ｂ．；　Ｓａｎｄｈｏｆｅｒ，　Ｆ．；　Ｌａｄｕｒｎｅｒ，　Ｇ．；　Ｈｅｌｌ，　Ｅ．；　Ｓｔｒｏｓｂｅｒｇ，　Ａ．　Ｄ．；　Ｐａｔｓｃｈ，　Ｊ．　Ｒ．；　Ｋｒｅｍｐｌｅｒ，　Ｆ．；　Ｐａｔｓｃｈ，　Ｗ．　：　Ａ　ｃｏｍｍｏｎ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｐｒｏｍｏｔｅｒ　ｏｆ　ＵＣＰ２　ｉｓ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｄｅｃｒｅａｓｅｄ　ｒｉｓｋ　ｏｆ　ｏｂｅｓｉｔｙ　ｉｎ　ｍｉｄｄｌｅ−ａｇｅｄ　ｈｕｍａｎｓ．　Ｎａｔｕｒｅ　Ｇｅｎｅｔ．　２８：　１７８−１８３，　２００１．
２７．　Ａｒｇｙｒｏｐｏｕｌｏｓ，　Ｇ．；　Ｂｒｏｗｎ，　Ａ．　Ｍ．；　Ｗｉｌｌｉ，　Ｓ．　Ｍ．；　Ｚｈｕ，　Ｊ．；　Ｈｅ，　Ｙ．；　Ｒｅｉｔｍａｎ，　Ｍ．；　Ｇｅｖａｏ，　Ｓ．　Ｍ．；　Ｓｐｒｕｉｌｌ，　Ｉ．；　Ｇａｒｖｅｙ，　Ｗ．　Ｔ．　：Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｍｕｔａｔｉｏｎｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｈｕｍａｎ　ｕｎｃｏｕｐｌｉｎｇ　ｐｒｏｔｅｉｎ　３　ｇｅｎｅ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ　ｑｕｏｔｉｅｎｔ　ａｎｄ　ｆａｔ　ｏｘｉｄａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｓｅｖｅｒｅ　ｏｂｅｓｉｔｙ　ａｎｄ　ｔｙｐｅ　２　ｄｉａｂｅｔｅｓ．Ｊ．　Ｃｌｉｎ．　Ｉｎｖｅｓｔ．　１０２：　１３４５−１３５１，　１９９８．
２８．　Ｋｒｕｄｅ，　Ｈ．；　Ｂｉｅｂｅｒｍａｎｎ，　Ｈ．；　Ｌｕｃｋ，　Ｗ．；　Ｈｏｒｎ，　Ｒ．；　Ｂｒａｂａｎｔ，　Ｇ．；　Ｇｒｕｔｅｒｓ，　Ａ．　：
Ｓｅｖｅｒｅ　ｅａｒｌｙ−ｏｎｓｅｔ　ｏｂｅｓｉｔｙ，　ａｄｒｅｎａｌ　ｉｎｓｕｆｆｉｃｉｅｎｃｙ　ａｎｄ　ｒｅｄ　ｈａｉｒ　ｐｉｇｍｅｎｔａｔｉｏｎ　ｃａｕｓｅｄ　ｂｙ　ＰＯＭＣ　ｍｕｔａｔｉｏｎｓ　ｉｎ　ｈｕｍａｎｓ．　Ｎａｔｕｒｅ　Ｇｅｎｅｔ．　１９：　１５５−１５７，　１９９８．
２９．　Ｋｒｉｓｔｅｎｓｅｎ，　Ｐ．；　Ｊｕｄｇｅ，　Ｍ．　Ｅ．；　Ｔｈｉｍ，　Ｌ．；　Ｒｉｂｅｌ，　Ｕ．；　Ｃｈｒｉｓｔｊａｎｓｅｎ，　Ｋ．　Ｎ．；　Ｗｕｌｆｆ，　Ｂ．　Ｓ．；　Ｃｌａｕｓｅｎ，　Ｊ．　Ｔ．；　Ｊｅｎｓｅｎ，　Ｐ．　Ｂ．；　Ｍａｄｓｅｎ，　Ｏ．　Ｄ．；　Ｖｒａｎｇ，Ｎ．；　Ｌａｒｓｅｎ，　Ｐ．　Ｊ．；　Ｈａｓｔｒｕｐ，　Ｓ．　：　Ｈｙｐｏｔｈａｌａｍｉｃ　ＣＡＲＴ　ｉｓ　ａ　ｎｅｗ　ａｎｏｒｅｃｔｉｃ　ｐｅｐｔｉｄｅ　ｒｅｇｕｌａｔｅｄ　ｂｙ　ｌｅｐｔｉｎ．　Ｎａｔｕｒｅ　３９３：　７２−７６，　１９９８．
【００６７】
３０．　Ｈａｎｓｅｎ，　Ｌ．；　Ｈａｎｓｅｎ，　Ｔ．；　Ｖｅｓｔｅｒｇａａｒｄ，　Ｈ．；　Ｂｊｏｒｂａｅｋ，　Ｃ．；　Ｅｃｈｗａｌｄ，　Ｓ．Ｍ．；　Ｃｌａｕｓｅｎ，　Ｊ．　Ｏ．；　Ｃｈｅｎ，　Ｙ．　Ｈ．；　Ｃｈｅｎ，　Ｍ．　Ｘ．；　Ｃｏｈｅｎ，　Ｐ．　Ｔ．　Ｗ．；　Ｐｅｄｅｒｓｅｎ，　Ｏ．　：　Ａ　ｗｉｄｅｓｐｒｅａｄ　ａｍｉｎｏ　ａｃｉｄ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ　ａｔ　ｃｏｄｏｎ　９０５　ｏｆ　ｔｈｅ　ｇｌｙｃｏｇｅｎ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ　ｓｕｂｕｎｉｔ　ｏｆ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ−１　ｉｓ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｉｎｓｕｌｉｎ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ａｎｄ　ｈｙｐｅｒｓｅｃｒｅｔｉｏｎ　ｏｆ　ｉｎｓｕｌｉｎ．　Ｈｕｍ．　Ｍｏｌｅｃ．　Ｇｅｎｅｔ．　４：　１３１３−１３２０，　１９９５．
３１．　Ｋｌｉｎｋｈａｍｅｒ，　Ｍ．　Ｐ．；　Ｇｒｏｅｎ，　Ｎ．　Ａ．；　ｖａｎ　ｄｅｒ　Ｚｏｎ，　Ｇ．　Ｃ．　Ｍ．；　Ｌｉｎｄｈｏｕｔ，　Ｄ．；　Ｓａｎｄｋｕｙｌ，　Ｌ．　Ａ．；　Ｋｒａｎｓ，　Ｈ．　Ｍ．　Ｊ．；　Ｍｏｌｌｅｒ，　Ｗ．；　Ｍａａｓｓｅｎ，　Ｊ．　Ａ．　：Ａ　ｌｅｕｃｉｎｅ−ｔｏ−ｐｒｏｌｉｎｅ　ｍｕｔａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｉｎｓｕｌｉｎ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ｉｎ　ａ　ｆａｍｉｌｙ　ｗｉｔｈ　ｉｎｓｕｌｉｎ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ．　ＥＭＢＯ　Ｊ．　８：　２５０３−２５０７，　１９８９．
３２．　Ｈｉｎｎｅｙ，　Ａ．；　Ｓｃｈｍｉｄｔ，　Ａ．；　Ｎｏｔｔｅｂｏｍ，　Ｋ．；　Ｈｅｉｂｕｌｔ，　Ｏ．；　Ｂｅｃｋｅｒ，　Ｉ．；　Ｚｉｅｇｌｅｒ，　Ａ．；　Ｇｅｒｂｅｒ，　Ｇ．；　Ｓｉｎａ，　Ｍ．；　Ｇｏｒｇ，　Ｔ．；　Ｍａｙｅｒ，　Ｈ．；　Ｓｉｅｇｆｒｉｅｄ，　Ｗ．；　Ｆｉｃｈｔｅｒ，　Ｍ．；　Ｒｅｍｓｃｈｍｉｄｔ，　Ｈ．；　Ｈｅｂｅｂｒａｎｄ，　Ｊ．　：　Ｓｅｖｅｒａｌ　ｍｕｔａｔｉｏｎｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｍｅｌａｎｏｃｏｒｔｉｎ−４　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ｇｅｎｅ　ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ　ａ　ｎｏｎｓｅｎｓｅ　ａｎｄ　ａ　ｆｒａｍｅｓｈｉｆｔ　ｍｕｔａｔｉｏｎ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｄｏｍｉｎａｎｔｌｙ　ｉｎｈｅｒｉｔｅｄ　ｏｂｅｓｉｔｙ　ｉｎ　ｈｕｍａｎｓ．　Ｊ．　Ｃｌｉｎ．　Ｅｎｄｏｃｒ．　Ｍｅｔａｂ．　８４：　１４８３−１４８６，
【００６８】
＜３＞心血管疾患、肥満および生活習慣病に関連する遺伝子
以下に、本発明の対象となる遺伝性の心血管系疾患、肥満および生活習慣病に関与する遺伝子について説明する。
【００６９】
（１）アドレナリン・レセプターβ３：
アドレナリン・レセプターβ３は、皮下脂肪よりも内臓脂肪組織に多く発現しているアドレナリン受容体の一つであり、熱産生と脂肪分解におもに作用している。アドレナリン・レセプターβ３の機能障害が存在すれば、ヒトでも肥満、特に内臓脂肪型肥満になりやすいと考えられる。
【００７０】
アドレナリン・レセプターβ３遺伝子のミスセンス変異のため、６４番目のトリプトファンがアルギニンになっている肥満者は、基礎代謝量が低く減量が困難である。さらに脂肪分解能も低下している。
以上より、アドレナリン・レセプターβ３遺伝子の変異は、内臓脂肪型肥満とインスリン抵抗性症候群の遺伝的マーカーになりうる。
【００７１】
（２）アドレナリン・レセプターβ２：
アドレナリン・レセプターβ２は、気管支喘息の病型分類や重症度に関連する他、脂肪分解においても重要な役割を果たしているアドレナリン受容体の一つである。
スウェーデン人を対象にした研究において、アドレナリン・レセプターβ２遺伝子のＧｌｎ２７Ｇｌｕ変異が肥満と相関することが示された。また、日本人を対象にした報告でも、肥満や高中性脂肪血症（高脂血症）と関連することが明らかとなった。この変異は、運動習慣のない場合に肥満が生じやすい。
さらに、Ａｒｇ１６Ｇｌｙ変異をもつ肥満者は、脂肪分解能が亢進している。
以上より、アドレナリン・レセプターβ２遺伝子の変異は、肥満と高脂血症の遺伝的マーカーになりうる。
【００７２】
（３）ペルオキシソーム・プロリファレーター・アクチベーティッド・レセプターγ２：
ペルオキシソーム・プロリファレーター・アクチベーティッド・レセプターγは、ヒトでは３つのアイソフォームが存在する。そのうち、ペルオキシソーム・プロリファレーター・アクチベーティッド・レセプターγ２は、脂肪細胞に特異的に発現しており、脂肪細胞の分化および脂肪の蓄積に必要な細胞内分子である。
ペルオキシソーム・プロリファレーター・アクチベーティッド・レセプターγ・ヘテロ欠損マウスは、高脂肪食負荷による脂肪の蓄積やインスリン抵抗性の出現が部分的に抑制されていたことから、ペルオキシソーム・プロリファレーター・アクチベーティッド・レセプターγ遺伝子は、エネルギー倹約遺伝子として作用していると考えられる。
ペルオキシソーム・プロリファレーター・アクチベーティッド・レセプターγ２遺伝子にＰｒｏ１２Ａｌａ変異があれば、ペルオキシソーム・プロリファレーター・アクチベーティッド・レセプターγ２の転写活性能が低下している。さらにこのＰｒｏ１２Ａｌａ変異の頻度は糖尿病患者に比べて非糖尿病患者で多く認められており、糖尿病に対して抵抗性因子として作用していることが示唆されている。
以上より、ペルオキシソーム・プロリファレーター・アクチベーティッド・レセプターγ２遺伝子の変異は、肥満と糖尿病の遺伝的マーカーになりうる。
【００７３】
（４）レプチン・レセプター：
レプチン・レセプターは、おもに視床下部に発現している一回膜貫通型受容体である。レプチンがレプチン・レセプターに結合した後、いくつかのシグナルが伝達され、食欲抑制とエネルギー消費減少がおこり、体脂肪量が減少する。
レプチン・レセプター遺伝子に変異があり肥満になるケースが、実験動物やヒトにおいていくつか報告されてきた。レプチン・レセプター遺伝子の変異は、レプチンのシグナル伝達機構の異常をもたらし、中枢におけるレプチン抵抗性を生じる。
以上より、レプチン・レセプター遺伝子の変異は、肥満と肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【００７４】
（５）レプチン：
レプチンは、通常、脂肪細胞から分泌され、体脂肪量を調節するネガティブフィードバックループにおいて求心性シグナルとして作用している。したがって、レプチン遺伝子の変異によりレプチンの発現が不十分であったり、レプチンの活性が低下していたりすると、レプチン抵抗性から肥満をきたすと考えられる。
また、Ｓｉｂ−ｐａｉｒ解析では、第二染色体上のＤ２Ｓ１７８８座位が、体脂肪量に及ぼす影響が最大である。この座位にある候補遺伝子としては、レプチンとプロ・オピオ　以上より、レプチン遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【００７５】
（６）プラスミノーゲン・アクチベーター・インヒビター１：
プラスミノーゲン・アクチベーター・インヒビター１は、血液凝固系で作用する因子の一つであり、内臓脂肪細胞などから分泌されている。プラスミノーゲン・アクチベーター・インヒビター１活性は、インスリン抵抗性症候群やある種の血栓症発症に関連している。
プラスミノーゲン・アクチベーター・インヒビター１遺伝子の変異は、その活性に影響を及ぼすことで、これらの疾患の発症に関与している。
以上より、プラスミノーゲン・アクチベーター・インヒビター１遺伝子の変異は、内臓脂肪型肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【００７６】
（７）ヘパティック・ニュークレアー・ファクター１α：
ヘパティック・ニュークレアー・ファクター１遺伝子産物は、肝臓においていくつかのタンパク質の発現を制御しており、糖代謝に重要な役割を果たしている。この遺伝子の変異は、糖代謝異常をきたすことにより、肥満や糖尿病などを発症する可能性がある。
若年発症型糖尿病患者において、ヘパティック・ニュークレアー・ファクター１α遺伝子変異が見出されている。この遺伝子変異は、インスリン抵抗性との相関が示唆されている。
以上より、ヘパティック・ニュークレアー・ファクター１α遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【００７７】
（８）ヘパティック・ニュークレアー・ファクター１β：
ヘパティック・ニュークレアー・ファクター１遺伝子産物は、肝臓においていくつかのタンパク質の発現を制御しており、糖代謝に重要な役割を果たしている。この遺伝子の変異は、糖代謝異常をきたすことにより、肥満や糖尿病などを発症する可能性がある。
以上より、ヘパティック・ニュークレアー・ファクター１β遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【００７８】
（９）ニューロ・ペプチド・Ｙ：
ニューロ・ペプチド・Ｙは、視床下部において食欲を亢進する作用を有しており、レプチンによって抑制される。ニューロ・ペプチド・Ｙ遺伝子の変異は、食欲調節の異常をきたし肥満を生じると考えられる。
すでにニューロ・ペプチド・Ｙ遺伝子のいくつかの変異が、肥満や高コレステロール血症と関連していることが報告されている。
以上より、ニューロ・ペプチド・Ｙ遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【００７９】
（１０）アンカップリング・プロテイン１：
アンカップリング・プロテイン１は、褐色脂肪組織に存在する特異的タンパク質であり、酸化的リン酸化の脱共役により酸化基質の化学エネルギーを熱に変換する作用を有している。
アンカップリング・プロテイン１遺伝子に異常があれば、熱産生が低下しエネルギー消費量が少なくなる。アンカップリング・プロテイン１遺伝子のプロモーター領域の変異が、体格指数と相関することが見出されている。
以上より、アンカップリング・プロテイン１遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【００８０】
（１１）アンカップリング・プロテイン２：
アンカップリング・プロテイン２は、全身臓器に広く発現しており、熱産生との関連が指摘されている脱共役タンパク質である。アンカップリング・プロテイン２遺伝子に異常があれば、熱産生が低下しエネルギー消費量が少なくなる。
以上より、アンカップリング・プロテイン２遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【００８１】
（１２）アンカップリング・プロテイン３：
アンカップリング・プロテイン３は、ヒトの骨格筋に大量に発現しており、熱産生との関連が指摘されている脱共役タンパク質である。アンカップリング・プロテイン３遺伝子に異常があれば、熱産生が低下しエネルギー消費量が少なくなる。アンカップリング・プロテイン３遺伝子のプロモーター領域の変異が、体格指数と相関することが見出されている。
以上より、アンカップリング・プロテイン３遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【００８２】
（１３）ＧＴＰ・バインディング・プロテイン３：
ＧＴＰ・バインディング・プロテイン３は、細胞内情報伝達経路においてさまざまなシグナルを媒介する重要な分子の一つである。ＧＴＰ・バインディング・プロテイン３遺伝子の変異が、肥満、本態性高血圧、高カリウム血症、高コレステロール血症などと相関していることが明らかになっている。
以上より、ＧＴＰ・バインディング・プロテイン３遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【００８３】
（１４）ファティー・アシッド・バインディング・プロテイン２：
ファティー・アシッド・バインディング・プロテイン２遺伝子の変異は、腸管におけるファティー・アシッド・バインディング・プロテインの脂肪酸へのアフィニティに影響を及ぼす。したがって、この遺伝子変異は、食後の脂肪代謝を変化させ、肥満を引き起こす可能性がある。
以上より、ファティー・アシッド・バインディング・プロテイン２遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【００８４】
（１５）プロ・オピオメラノコルチン：
プロ・オピオメラノコルチンは、視床下部においてレプチンの下流で作用する分子である。プロ・オピオメラノコルチン遺伝子に異常があり、重度の肥満をきたした症例が既に報告されている。
また、Ｓｉｂ−ｐａｉｒ解析では、第二染色体上のＤ２Ｓ１７８８座位が、体脂肪量に及ぼす影響が最大である。この座位にある候補遺伝子としては、レプチンとプロ・オピオメラノコルチンがある。
以上より、プロ・オピオメラノコルチン遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【００８５】
（１６）コカイン・アンド・アンフェタミン・レギュレイティッド・トランスクリプト：
コカイン・アンド・アンフェタミン・レギュレイティッド・トランスクリプトは、脳に発現している分子であり、摂食量を減少させる作用をもつ。コカイン・アンド・アンフェタミン・レギュレイティッド・トランスクリプト遺伝子の変異が、その機能の異常をもたらせば、肥満を生じると考えられる。これまでのところ、コカイン・アンド・アンフェタミン・レギュレイティッド・トランスクリプト遺伝子の変異が、インスリン抵抗性を主な病態とするシンドロームＸにおいて、脂肪分布に影響を及ぼすことが示唆されている。
以上より、コカイン・アンド・アンフェタミン・レギュレイティッド・トランスクリプト遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【００８６】
（１７）プロテイン・フォスファターゼ１・グリコーゲン・レギュレイティッド・Ｇサブユニット：
プロテイン・ホスファターゼ−１は、グリコーゲン合成などグルコース代謝において作用する分子である。
プロテイン・ホスファターゼ−１遺伝子の変異によりグルコース代謝に異常をきたすと、インスリン抵抗性を生じる。
以上より、プロテイン・ホスファターゼ−１遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【００８７】
（１８）インスリン・レセプター・サブストレイト１：
インスリン・レセプター・サブストレイト１は、細胞質内に存在し、インスリン情報伝達経路で作用する重要な分子の一つである。
インスリン・レセプター・サブストレイト１遺伝子の変異は、２型糖尿病患者に多く認められ、肥満に伴う糖尿病発症の一因になっていると考えられる。
以上より、インスリン・レセプター・サブストレイト１遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【００８８】
（１９）メラノコルチン−４・レセプター：
メラノコルチン−４・レセプター遺伝子の変異による重度の肥満者が報告されている。また、メラノコルチン−４・レセプター遺伝子のノックアウトマウスは、肥満、高インスリン血症、糖尿病を呈し、ヒトの肥満症と類似の表現型を示す。
以上より、メラノコルチン−４・レセプター遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【００８９】
（２０）コレシストキニン−Ａ・レセプター：
コレシストキニンは脳と腸管に発現しているニューロペプチドであり、コレシストキニン−Ａ・レセプターは、コレシストキニンの受容体の一つである。
コレシストキニン−Ａ・レセプター遺伝子のプロモーター領域に変異がある人では、体脂肪率が高く、血中レプチンおよびインスリン値が高値を示す。
以上より、コレシストキニン−Ａ・レセプター遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【００９０】
（２１）ニューロ・ペプチド・Ｙ・レセプター：
ニューロ・ペプチド・Ｙ・レセプターは、ニューロ・ペプチド・Ｙが結合する受容体であり、視床下部において、食欲を亢進するシグナルを伝達している。ニューロ・ペプチド・Ｙ・レセプター遺伝子の変異は、食欲調節機構に異常をきたし肥満を生じる。
以上より、ニューロ・ペプチド・Ｙ・レセプター遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【００９１】
（２２）ドーパミンＤ２・レセプター：
ドーパミンＤ２・レセプター遺伝子の変異が、肥満および肥満に合併する２型糖尿病に関与することが報告されている。（参考文献：Ｉｎｔ　Ｊ　Ｏｂｅｓ　Ｒｅｌａｔ　Ｍｅｔａｂ
Ｄｉｓｏｒｄ　２０００　Ｏｃｔ；２４（１０）：１２３３−８）
以上より、ドーパミンＤ２・レセプター遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【００９２】
（２３）ドーパミンＤ４・レセプター：
ドーパミンＤ４・レセプター遺伝子の変異が、食行動の個人差をもたらし肥満に関与することが報告されている。（参考文献：Ｅａｔ　Ｗｅｉｇｈｔ　Ｄｉｓｏｒｄ　１９９８　Ｊｕｎ；３（２）：７１−７）
以上より、ドーパミンＤ４・レセプター遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【００９３】
（２４）アンジオテンシン変換酵素：
アンジオテンシン変換酵素遺伝子の変異が、肥満に合併する高血圧症や冠動脈疾患に関与することが報告されている。（参考文献：Ｈｕｍ　Ｇｅｎｅｔ　２０００　Ｓｅｐ；１０７（３）：２３９−４２）
以上より、アンジオテンシン変換酵素遺伝子の変異は、肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【００９４】
（２５）腫瘍壊死因子α：
腫瘍壊死因子α遺伝子の変異が、肥満およびインスリン抵抗性に関与することが報告されている。（参考文献：Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ　２０００　Ａｕｇ；４９（８）：１０２１−４）
以上より、腫瘍壊死因子α遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【００９５】
（２６）インスリン・レセプター：
インスリン・レセプター遺伝子の変異が、肥満および肥満に合併する高血圧症などに関与することが報告されている。（参考文献：Ａｍ　Ｊ　Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓ．　２０００　Ｊｕｌ；１３（７）：７４５−５２）
以上より、インスリン・レセプター遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【００９６】
（２７）セロトニン・レセプター：
セロトニンは脳内の神経伝達物質として作用し、摂食行動にも関与する分子である。各種のセロトニン・レセプター遺伝子の変異が、肥満および肥満合併症に関与することが報告されている。セロトニン・レセプター遺伝子の変異は、アルコール消費など摂取エネルギーに影響を及ぼす。（参考文献：Ｉｎｔ　Ｊ　Ｏｂｅｓ　ＲｅｌａｔＭｅｔａｂ　Ｄｉｓｏｒｄ．　２０００　Ｊｕｌ；２４（７）：９２０−４）以上より、セロトニン・レセプター・ファミリーの遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【００９７】
（２８）アディポネクチン：
アディポネクチンは、内臓脂肪から分泌される分子である。アディポネクチン遺伝子の変異が、肥満および肥満合併症に関与することが報告されている。（参考文献：Ｉｎｔ　Ｊ　Ｏｂｅｓ　Ｒｅｌａｔ　Ｍｅｔａｂ　Ｄｉｓｏｒｄ．　２０００　Ｊｕｌ；２４（７）：８６１−８．）
以上より、アディポネクチン遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【００９８】
（２９）低比重リポプロテイン・レセプター：
低比重リポプロテイン・レセプター遺伝子の変異が、肥満および肥満合併症に関与することが報告されている。（参考文献：Ｈｕｍ　Ｇｅｎｅｔ．　２０００　Ｍａｙ；１０６（５）：５４６−５２）
以上より、低比重リポプロテイン・レセプター遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【００９９】
（３０）グルココルチコイド・レセプター：
グルココルチコイドは摂食を促すストレスホルモンとして知られている。グルココルチコイド・レセプター遺伝子が、肥満および肥満合併症に関与することが報告されている。（参考文献：Ｏｂｅｓ　Ｒｅｓ．　２０００　Ｍａｙ；８（３）：２１１−８．）
以上より、グルココルチコイド・レセプター遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【０１００】
（３１）リポプロテイン・リパーゼ：
リポプロテイン・リパーゼは、脂質代謝や糖代謝において重要な役割を果たしている酵素である。リポプロテイン・リパーゼ遺伝子の変異が、肥満における脂質代謝や糖代謝の個人差に関与することが報告されている。（参考文献：Ｈｕｍ　Ｇｅｎｅｔ．　２０００　Ａｐｒ；１０６（４）：４２０−４）
以上より、リポプロテイン・リパーゼ遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【０１０１】
（３２）脂肪酸輸送タンパク１：
脂肪酸輸送タンパク１遺伝子の変異が、高中性脂肪血症をもたらし肥満および肥満合併症に関与することが報告されている。（参考文献：Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ　Ｔｈｒｏｍｂ　Ｖａｓｃ　Ｂｉｏｌ．　２０００　Ｍａｙ；２０（５）：１３３０−４．）以上より、脂肪酸輸送タンパク１遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【０１０２】
（３３）アルデヒド脱水素酵素：
アルデヒド脱水素酵素遺伝子の変異は、アルコール消費量に変化をもたらし摂取カロリーの個人差を生じる。さらにグリセミック係数を変化させることで、糖尿病の進展や四語にも関与することが示されている。（参考文献：Ａｌｃｏｈｏｌ　ＣｌｉｎＥｘｐ　Ｒｅｓ．　２０００　Ａｐｒ；２４（４　Ｓｕｐｐｌ）：５Ｓ−１１Ｓ．）以上より、アルデヒド脱水素酵素遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【０１０３】
（３４）アポリポプロテインＡ：
アポリポプロテインＡ遺伝子の変異が、肥満に合併する虚血性心疾患に関与することが報告されている。（参考文献：Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ　２０００　Ｍａｙ；１５０（１）：１８７−９２）
以上より、アポリポプロテインＡ遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【０１０４】
（３５）アポリポプロテインＢ：
アポリポプロテインＢ遺伝子の変異が、肥満に合併する虚血性心疾患に関与することが報告されている。
【０１０５】
以上より、アポリポプロテインＢ遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【０１０６】
（３６）コレステリル・エステル・トランスファー・プロテイン：
コレステリル・エステル・トランスファー・プロテイン遺伝子の変異が、高コレステロール血症、低ＨＤＬコレステロール血症などをもたらし肥満に関与することが報告されている。（参考文献：Ｉｎｔ　Ｊ　Ｏｂｅｓ　Ｒｅｌａｔ　Ｍｅｔａｂ　Ｄｉｓｏｒｄ．　１９９９　Ｓｅｐ；２３（９）：９１８−２５．）
以上より、コレステリル・エステル・トランスファー・プロテイン遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【０１０７】
（３７）ボンベシン・レセプター：
ボンベシンは食欲に関連する分子の一つである。ボンベシン・レセプター遺伝子欠損動物は肥満を呈する。
以上より、ボンベシン・レセプター遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【０１０８】
（３８）メラノコルチン・レセプター３型：
メラノコルチン・レセプター３型遺伝子の変異が、高度肥満の患者で見出されている。（参考文献：Ｉｎｔ　Ｊ　Ｏｂｅｓ　Ｒｅｌａｔ　Ｍｅｔａｂ　Ｄｉｓｏｒｄ．　２０００　Ｆｅｂ；２４（２）：２０６−１０．）
以上より、メラノコルチン・レセプター３型遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【０１０９】
（３９）メラノコルチン・レセプター４型：
メラノコルチン・レセプター４型遺伝子の変異が、体脂肪率や食行動、成長などに関与することが見出されている。（参考文献：Ｍａｍｍ　Ｇｅｎｏｍｅ．　２０００　Ｆｅｂ；１１（２）：１３１−５．）
以上より、メラノコルチン・レセプター４型遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【０１１０】
（４０）メラノコルチン・レセプター５型：
メラノコルチン・レセプター５型遺伝子は、摂食調節やエネルギー消費に重要である。以上より、メラノコルチン・レセプター５型遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【０１１１】
（４１）インスリン様成長因子：
インスリン様成長因子遺伝子の変異が、肥満者において有意に多く見出されている。（参考文献：Ｅｕｒ　Ｊ　Ｈｕｍ　Ｇｅｎｅｔ　１９９９　Ｏｃｔ−Ｎｏｖ；７（７）：８２１−７）
以上より、インスリン様成長因子遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【０１１２】
（４２）ヘパティック・リパーゼ：
ヘパティック・リパーゼ遺伝子の変異が、リパーゼの活性に変化を生じ、内臓脂肪型肥満に関連することが報告されている。（参考文献：Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ　Ｔｈｒｏｍｂ　Ｖａｓｃ　Ｂｉｏｌ．　１９９９　Ｎｏｖ；１９（１１）：２７０１−７．）
以上より、ヘパティック・リパーゼ遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【０１１３】
（４３）アポリポプロテインＥ：
アポリポプロテインＥ遺伝子の変異が、脂質代謝に変化を生じ、肥満や高脂血症、冠動脈疾患などに関連することが報告されている。（参考文献：Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ．　１９９９　Ａｕｇ　１０；１００（６）：６０８−１３．）
以上より、アポリポプロテインＥ・ファミリーの遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【０１１４】
（４４）アポリポプロテインＣ：
アポリポプロテインＣ遺伝子の変異が、脂質代謝に変化を生じ、肥満や高脂血症、心臓病などに関連することが報告されている。（参考文献：Ｈｕｍ　Ｇｅｎｅｔ　１９９７
Ｓｅｐ；１００（３−４）：３２７−３３）
以上より、アポリポプロテインＣ・ファミリーの遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【０１１５】
（４５）アポリポプロテインＤ：
アポリポプロテインＤ遺伝子の変異が、脂質代謝に変化を生じ、肥満や高脂血症、心臓病などに関連することが報告されている。（参考文献：Ｊ　Ｃｌｉｎ　Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ　Ｍｅｔａｂ　１９９４　Ａｕｇ；７９（２）：５６８−７０）
以上より、アポリポプロテインＤ・ファミリーの遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【０１１６】
（４６）アポリポプロテインＢ：
アポリポプロテインＢ遺伝子の変異が、脂質代謝に変化を生じ、肥満や高脂血症、心臓病などに関連することが報告されている。
以上より、アポリポプロテインＢファミリーの遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【０１１７】
（４７）アドレナリン・レセプターα２Ｂ：
アドレナリン・レセプターα２Ｂ遺伝子の変異が、基礎代謝に個人差を生じさせることで肥満に関与することが報告されている。（参考文献：Ｊ　Ｃｌｉｎ　Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ　Ｍｅｔａｂ．　１９９９　Ｊｕｌ；８４（７）：２４２９−３３．、Ｊ　Ｉｎｔｅｒｎ　Ｍｅｄ　１９９９　Ｊｕｎ；２４５（６）：６６７−７２）
以上より、アドレナリン・レセプターα２Ｂ遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【０１１８】
（４８）エンドセリン：
エンドセリンは血管内皮細胞から分泌され、血圧調節に関係する分子である。エンドセリン遺伝子の変異が、肥満に合併する高血圧に関与することが報告されている。（参考文献：Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ　１９９９　Ｍａｙ；３３（５）：１１６９−７４）
以上より、エンドセリン・ファミリーの遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【０１１９】
（４９）グルカゴン様ペプチド・レセプター：
グルカゴン様ペプチド・レセプターは、糖代謝や脂質代謝に重要な役割を果たしている。
以上より、グルカゴン様ペプチド・レセプター遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【０１２０】
（５０）アグーチ・シグナリング・プロテイン：
アグーチ・シグナリング・プロテインは、糖代謝や脂質代謝に重要な役割を果たしている。
以上より、アグーチ・シグナリング・プロテイン遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【０１２１】
（５１）ガラニン：
ガラニンは、脳内において食欲調節に重要な役割を果たしている。
以上より、ガラニン遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【０１２２】
（５２）グルカゴン・レセプター：
グルカゴン・レセプター遺伝子の変異が、肥満や肥満に合併する高血圧症に関与することが報告されている。（参考文献：Ｃｌｉｎ　Ｅｘｐ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ　Ｐｈｙｓｉｏｌ．　１９９８Ｊｕｌ−Ａｕｇ；２５（７−８）：６２７−９．）
以上より、グルカゴン・レセプター遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【０１２３】
（５３）プロホルモン・コンバーターゼ１：
プロホルモン・コンバーターゼ１は、インスリンの産生に必要な酵素である。この遺伝子に変異があるとき、著明なインスリン抵抗性や肥満を生じると考えられる。
以上より、プロホルモン・コンバーターゼ１遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【０１２４】
（５４）プロホルモン・コンバーターゼ２：
プロホルモン・コンバーターゼ２は、インスリンの産生に必要な酵素である。この遺伝子に変異があるとき、著明なインスリン抵抗性や肥満を生じると考えられる。
以上より、プロホルモン・コンバーターゼ２遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【０１２５】
（５５）プロホルモン・コンバーターゼ３：
プロホルモン・コンバーターゼ３は、インスリンの産生に必要な酵素である。この遺伝子に変異があるとき、著明なインスリン抵抗性や肥満を生じると考えられる。
以上より、プロホルモン・コンバーターゼ３遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【０１２６】
（５６）カルボキシペプチダーゼＥ：
カルボキシペプチダーゼＥは、インスリンの産生に必要な酵素である。この遺伝子に変異があるとき、著明なインスリン抵抗性や肥満を生じると考えられる。
以上より、カルボキシペプチダーゼＥ遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【０１２７】
（５７）ホルモン感受性リパーゼ：
ホルモン感受性リパーゼは、脂質代謝において重要な役割を果たしており、肥満の進展にも関与する酵素である。
以上より、ホルモン感受性リパーゼ遺伝子の変異は、肥満および肥満に合併する生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
【０１２８】
（５８）アンジオテンシノーゲン
アンジオテンシンは、レニン−アンジオテンシン系において重要な役割を果たしており、高血圧や心肥大や動脈硬化にも関与する酵素であり、アンジオテンシノーゲンはその前駆体である。
以上より、アンジオテンシノーゲン遺伝子の変異（Ｍ２３５Ｔ）は、高血圧症や心血管疾患（冠動脈疾患や心筋梗塞症）などの生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
（Ｋａｔｓｕｙａ，　Ｔ．；　Ｋｏｉｋｅ，　Ｇ．；　Ｙｅｅ，　Ｔ．　Ｗ．；　Ｓｈａｒｐｅ，　Ｎ．；　Ｊａｃｋｓｏｎ，　Ｒ．；　Ｎｏｒｔｏｎ，　Ｒ．；　Ｈｏｒｉｕｃｈｉ，　Ｍ．；　Ｐｒａｔｔ，　Ｒ．　Ｅ．；　Ｄｚａｕ，　Ｖ．　Ｊ．；　ＭａｃＭａｈｏｎ，　Ｓ．　：　Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎｏｇｅｎ　ｇｅｎｅ　Ｔ２３５　ｖａｒｉａｎｔ　ｗｉｔｈ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｒｉｓｋ　ｏｆ　ｃｏｒｏｎａｒｙ　ｈｅａｒｔ　ｄｉｓｅａｓｅ．　Ｌａｎｃｅｔ　３４５：　１６００−１６０３，　１９９５．　）
（５９）アンジオテンシンＩＩレセプター
アンギオテンシンＩＩレセプターは、アンジオテンシンＩＩの細胞膜受容体として重要な役割を果たしており、高血圧や心肥大や動脈硬化にも関与する酵素である。
以上より、アンジオテンシンＩＩレセプター遺伝子の変異（Ａ−ｔｏ−Ｃ　ｖａｒｉａｎｔ，　ｌｏｃａｔｅｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　３−ｐｒｉｍｅ　ｕｎｔｒａｎｓｌａｔｅｄ　ｒｅｇｉｏｎ　ａｔ　ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ　１１６６）は、高血圧症や心血管疾患（冠動脈疾患や心筋梗塞症）などの生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
（Ｂｏｎｎａｒｄｅａｕｘ，　Ａ．；　Ｄａｖｉｅｓ，　Ｅ．；　Ｊｅｕｎｅｍａｉｔｒｅ，　Ｘ．；　Ｆｅｒｙ，　Ｉ．；　Ｃｈａｒｒｕ，　Ａ．；　Ｃｌａｕｓｅｒ，　Ｅ．；　Ｔｉｒｅｔ，　Ｌ．；　Ｃａｍｂｉｅｎ，　Ｆ．；　Ｃｏｒｖｏｌ，　Ｐ．；　Ｓｏｕｂｒｉｅｒ，　Ｆ．　：　ＡｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎＩＩ　ｔｙｐｅ　１　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ｇｅｎｅ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ　ｉｎ　ｈｕｍａｎ　ｅｓｓｅｎｔｉａｌ　ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ．　Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ　２４：　６３−６９，　１９９４．）
【０１２９】
（６０）内皮型ヒトＮＯ合成酵素
ＮＯは、内皮型ヒトＮＯ合成酵素により血管内皮で合成され、血管内皮由来拡張因子（ＥＤＲＦ）である。内皮型ヒトＮＯ合成酵素はＮＯ合成に重要な役割を果たしており、血管のトーヌス調節や動脈硬化も関与する酵素である。
以上より、内皮型ヒトＮＯ合成酵素遺伝子の変異（ｇｌｕ２９８ａｓｐ）は、動脈硬化や心血管疾患（冠れん縮性狭心症）などの生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
（Ｙｏｓｈｉｍｕｒａ，　Ｍ．；　Ｙａｓｕｅ，　Ｈ．；　Ｎａｋａｙａｍａ，　Ｍ．；　Ｓｈｉｍａｓａｋｉ，　Ｙ．；　Ｓｕｍｉｄａ，　Ｈ．；　Ｓｕｇｉｙａｍａ，　Ｓ．；　Ｋｕｇｉｙａｍａ，　Ｋ．；　Ｏｇａｗａ，　Ｈ．；　Ｏｇａｗａ，　Ｙ．；　Ｓａｉｔｏ，　Ｙ．；　Ｍｉｙａｍｏｔｏ，　Ｙ．；　Ｎａｋａｏ，　Ｋ．　：　Ａ　ｍｉｓｓｅｎｓｅ　ｇｌｕ２９８ａｓｐ　ｖａｒｉａｎｔ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　ｎｉｔｒｉｃ　ｏｘｉｄｅ　ｓｙｎｔｈａｓｅ　ｇｅｎｅ　ｉｓ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｃｏｒｏｎａｒｙ　ｓｐａｓｍ　ｉｎ　ｔｈｅ　Ｊａｐａｎｅｓｅ．　Ｈｕｍ．　Ｇｅｎｅｔ．　１０３：　６５−６９，　１９９８．）
【０１３０】
（６１）パラオキソナーゼ　（ＰＯＮ１）
パラオキソナーゼはｈｉｇｈ　ｄｅｎｓｉｔｙ　ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎｓ　（ＨＤＬ）のエステル化に重要な役割を果たしており、ｌｏｗ　ｄｅｎｓｉｔｙ　ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎｓ　（ＬＤＬｓ）の酸化を防ぐ抗酸化作用や動脈硬化も関与する酵素である。
以上より、パラオキソナーゼの変異は、動脈硬化や心血管疾患などの生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
（Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｈｕｍａｎ　ｓｅｒｕｍ　ｐａｒａｏｘｏｎａｓｅ　５５　ａｎｄ　１９２　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓｏｎ　ｔｈｅ　ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ　ｂｙ　ｈｉｇｈ　ｄｅｎｓｉｔｙ　ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ　ａｇａｉｎｓｔ　ｌｏｗ　ｄｅｎｓｉｔｙ　ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ　ｏｘｉｄａｔｉｖｅ　ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ．　ＦＥＢＳ　Ｌｅｔｔ．　４２３：　５７−６０，　１９９８．）
（Ｏｄａｗａｒａ，　Ｍ．；　Ｔａｃｈｉ，　Ｙ．；　Ｙａｍａｓｈｉｔａ，　Ｋ．　：　Ｐａｒａｏｘｏｎａｓｅ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ　Ｇｌｎ１９２−Ａｒｇ　ｉｓ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｃｏｒｏｎａｒｙ　ｈｅａｒｔ　ｄｉｓｅａｓｅ　ｉｎ　Ｊａｐａｎｅｓｅ　ｎｏｎｉｎｓｕｌｉｎ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ｄｉａｂｅｔｅｓ　ｍｅｌｌｉｔｕｓ．　Ｊ．　Ｃｌｉｎ．　Ｅｎｄｏｃｒ．　Ｍｅｔａｂ．　８２：　２２５７−２２６０，　１９９７．）
【０１３１】
（６２）ＣＤ３６
ＣＤ３６はスカベンジャーリセプターとして重要な役割を果たしており、変性脂質の代謝やや動脈硬化も関与する酵素である。
以上より、ＣＤ３６の変異は、動脈硬化などの生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
（Ｐｒａｖｅｎｅｃ，　Ｍ．；　Ｚｉｄｅｋ，　Ｖ．；　Ｓｉｍａｋｏｖａ，　Ｍ．；　Ｋｒｅｎ，　Ｖ．；　Ｋｒｅｎｏｖａ，　Ｄ．；　Ｈｏｒｋｙ，　Ｋ．；　Ｊａｃｈｙｍｏｖａ，　Ｍ．；　Ｍｉｋｏｖａ，　Ｂ．；　Ｋａｚｄｏｖａ，　Ｌ．；　Ａｉｔｍａｎ，　Ｔ．　Ｊ．；　Ｃｈｕｒｃｈｉｌｌ，　Ｐ．　Ｃ．；　Ｗｅｂｂ，　Ｒ．　Ｃ．；　Ｈｉｎｇａｒｈ，　Ｎ．　Ｈ．；　Ｙａｎｇ，　Ｙ．；　Ｗａｎｇ，　Ｊ．−Ｍ．；　Ｓｔ．　Ｌｅｚｉｎ，　Ｅ．　Ｍ．；　Ｋｕｒｔｚ，　Ｔ．　Ｗ．　：　Ｇｅｎｅｔｉｃｓ　ｏｆ　Ｃｄ３６　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇ　ｏｆ　ｍｕｌｔｉｐｌｅ　ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ　ｒｉｓｋ　ｆａｃｔｏｒｓ　ｉｎ　ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓ　ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ．　Ｊ．　Ｃｌｉｎ．　Ｉｎｖｅｓｔ．　１０３：　１６５１−１６５７，　１９９９．）
【０１３２】
（６３）ケモカインレセプター２
ＭＣＰ１　（ｍｏｎｏｃｙｔｅ　ｃｈｅｍｏａｔｔｒａｃｔａｎｔ　ｐｒｏｔｅｉｎ）　は血管内皮やマクロファージで産生され、動脈硬化病変での単球の進展に重要であり、ケモカインレセプター２はＭＣＰ１の受容体である。ケモカインレセプター２遺伝子の変異は、早期発症の動脈硬化に重要な役割を果たしている。
以上より、ケモカインレセプター２の変異は、早期発症の動脈硬化など生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
（Ｃｈａｒｏ，　Ｉ．　Ｆ．；　Ｍｙｅｒｓ，　Ｓ．　Ｊ．；　Ｈｅｒｍａｎ，　Ａ．；　Ｆｒａｎｃｉ，　Ｃ．；　Ｃｏｎｎｏｌｌｙ，　Ａ．　Ｊ．；　Ｃｏｕｇｈｌｉｎ，　Ｓ．　Ｒ．　：　Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｃｌｏｎｉｎｇ　ａｎｄ　ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｔｗｏ　ｍｏｎｏｃｙｔｅ　ｃｈｅｍｏａｔｔｒａｃｔａｎｔ　ｐｒｏｔｅｉｎ　１　ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ　ｒｅｖｅａｌｓ　ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ　ｓｐｌｉｃｉｎｇ　ｏｆｔｈｅ　ｃａｒｂｏｘｙｌ−ｔｅｒｍｉｎａｌ　ｔａｉｌｓ．　Ｐｒｏｃ．　Ｎａｔ．　Ａｃａｄ．　Ｓｃｉ．　９１：　２７５２−２７５６，　１９９４．）　（Ｄｅｃｒｅａｓｅｄ　ｌｅｓｉｏｎ　ｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ｉｎ　ＣＣＲ２　−／−　ｍｉｃｅ　ｒｅｖｅａｌｓ　ａ　ｒｏｌｅ　ｆｏｒ　ｃｈｅｍｏｋｉｎｅｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｉｎｉｔｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ．　Ｎａｔｕｒｅ　３９４：　８９４−８９７，　１９９８．）
【０１３３】
（６４）細胞接着因子１（ＩＣＡＭ１）
ＩＣＡＭ１はリンパ球関連抗原（ＬＦＡ１）のリガンドであり、抗ＩＣＡＭ１抗体は移植心の拒絶反応を抑制などに重要な役割を果たしており、動脈硬化進展にも関与する接着因子である。
以上より、ＩＣＡＭ１の変異は、動脈硬化進展などの生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
（Ｓｉｍｍｏｎｓ，　Ｄ．；　Ｍａｋｇｏｂａ，　Ｍ．　Ｗ．；　Ｓｅｅｄ，　Ｂ．　：　ＩＣＡＭ，　ａｎ　ａｄｈｅｓｉｏｎ　ｌｉｇａｎｄ　ｏｆ　ＬＦＡ−１，　ｉｓ　ｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｎｅｕｒａｌ　ｃｅｌｌ　ａｄｈｅｓｉｏｎ　ｍｏｌｅｃｕｌｅ　ＮＣＡＭ．　Ｎａｔｕｒｅ　３３１：　６２４−６２７，　１９８８．）
【０１３４】
（６５）マトリックスメタロプロテアーゼ３
マトリックスメタロプロテアーゼ３（ＭＭＰ３）は粥腫のプラーク破綻に重要な役割を果たしており、動脈硬化進展にも関与する酵素である。
以上より、マトリックスメタロプロテアーゼ３の変異は、冠動脈疾患などの生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
（Ｆｏｒｍｓｔｏｎｅ，　Ｃ．　Ｊ．；　Ｂｙｒｄ，　Ｐ．　Ｊ．；　Ａｍｂｒｏｓｅ，　Ｈ．　Ｊ．；　Ｒｉｌｅｙ，　Ｊ．　Ｈ．；　Ｈｅｒｎａｎｄｅｚ，　Ｄ．；　ＭｃＣｏｎｖｉｌｌｅ，　Ｃ．　Ｍ．；　Ｔａｙｌｏｒ，　Ａ．　Ｍ．　Ｒ．　：　Ｔｈｅ　ｏｒｄｅｒ　ａｎｄ　ｏｒｉｅｎｔａｔｉｏｎ　ｏｆａ　ｃｌｕｓｔｅｒ　ｏｆ　ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ　ｇｅｎｅｓ，　ｓｔｒｏｍｅｌｙｓｉｎ　２，　ｃｏｌｌａｇｅｎａｓｅ，　ａｎｄ　ｓｔｒｏｍｅｌｙｓｉｎ，　ｔｏｇｅｔｈｅｒ　ｗｉｔｈ　Ｄ１１Ｓ３８５，　ｏｎ　ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ　１１ｑ２２−ｑ２３．　Ｇｅｎｏｍｉｃｓ　１６：２８９−２９１，　１９９３．）
【０１３５】
（６６）肝細胞増殖因子
肝細胞増殖因子は肝細胞の成長・増殖に重要な役割を果たしている。動脈硬化や内皮細胞の増殖作用は、不明である。
ケース・コントロールでの臨床例の解析で、肝細胞増殖因子の変異は、冠動脈疾患などの生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
（Ｇｏｈｄａ，　Ｅ．；　Ｔｓｕｂｏｕｃｈｉ，　Ｈ．；　Ｎａｋａｙａｍａ，　Ｈ．；　Ｈｉｒｏｎｏ，　Ｓ．；　Ｓａｋｉｙａｍａ，　Ｏ．；　Ｔａｋａｈａｓｈｉ，　Ｋ．；　Ｍｉｙａｚａｋｉ，　Ｈ．；　Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ，　Ｓ．；　Ｄａｉｋｕｈａｒａ，　Ｙ．　：　Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ａｎｄｐａｒｔｉａｌ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ　ｆｒｏｍ　ｐｌａｓｍａ　ｏｆ　ａ　ｐａｔｉｅｎｔ　ｗｉｔｈ　ｆｕｌｍｉｎａｎｔ　ｈｅｐａｔｉｃ　ｆａｉｌｕｒｅ．　Ｊ．　Ｃｌｉｎ．　Ｉｎｖｅｓｔ．　８１：　４１４−４１９，　１９８８．）
（６７）アクチン結合蛋白（ＳＭ２２）
ＳＭ２２は、動脈硬化に重要な役割を果たしている酵素であり、ＳＭ２２の変異は、生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
（Ｃａｍｏｒｅｔｔｉ−Ｍｅｒｃａｄｏ，　Ｂ．；　Ｆｏｒｓｙｔｈｅ，　Ｓ．　Ｍ．；　ＬｅＢｅａｕ，　Ｍ．　Ｍ．；　Ｅｓｐｉｎｏｓａ，　Ｒ．，　ＩＩＩ；　Ｖｉｅｉｒａ，　Ｊ．　Ｅ．；　Ｈａｌａｙｋｏ，　Ａ．　Ｊ．；　Ｗｉｌｌａｄｓｅｎ，　Ｓ．；　Ｋｕｒｔｚ，　Ｂ．；　Ｏｂｅｒ，　Ｃ．；　Ｅｖａｎｓ，　Ｇ．　Ａ．；　Ｔｈｗｅａｔｔ，　Ｒ．；　Ｓｈａｐｉｒｏ，　Ｓ．；　Ｎｉｕ，　Ｑ．；　Ｑｉｎ，　Ｙ．；　Ｐａｄｒｉｄ，　Ｐ．　Ａ．；　Ｓｏｌｗａｙ，　Ｊ．　：　Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ａｎｄ　ｃｙｔｏｇｅｎｅｔｉｃ　ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｈｕｍａｎ　ＳＭ２２　ｇｅｎｅ　（ＴＡＧＬＮ）．　Ｇｅｎｏｍｉｃｓ　４９：　４５２−４５７，　１９９８．）
（６８）メチレンテトラヒドロ葉酸還元酵素
メチレンテトラヒドロ葉酸還元酵素はメチオニンーホモシステイン代謝に重要な役割を果たしており、動脈硬化の進展や血栓形成に関与する酵素である。
以上より、メチレンテトラヒドロ葉酸還元酵素の変異（Ｃ６７７Ｔ）は、血栓形成や動脈硬化などの生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
（Ｇｏｙｅｔｔｅ，　Ｐ．；　Ｓｕｍｎｅｒ，　Ｊ．　Ｓ．；　Ｍｉｌｏｓ，　Ｒ．；　Ｄｕｎｃａｎ，　Ａ．　Ｍ．　Ｖ．；　Ｒｏｓｅｎｂｌａｔｔ，　Ｄ．　Ｓ．；　Ｍａｔｔｈｅｗｓ，　Ｒ．　Ｇ．；　Ｒｏｚｅｎ，　Ｒ．　：　Ｈｕｍａｎ　ｍｅｔｈｙｌｅｎｅｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｆｏｌａｔｅ　ｒｅｄｕｃｔａｓｅ：　ｉｓｏｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃＤＮＡ，　ｍａｐｐｉｎｇ　ａｎｄ　ｍｕｔａｔｉｏｎ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ．　Ｎａｔｕｒｅ　Ｇｅｎｅｔ．　７：　１９５−２００，　１９９４．）（　Ｋｌｕｉｊｔｍａｎｓ，　Ｌ．　Ａ．　Ｊ．；　ｖａｎ　ｄｅｎ　Ｈｅｕｖｅｌ，　Ｌ．　Ｐ．　Ｗ．Ｊ．；　Ｂｏｅｒｓ，　Ｇ．　Ｈ．　Ｊ．；　Ｆｒｏｓｓｔ，　Ｐ．；　Ｓｔｅｖｅｎｓ，　Ｅ．　Ｍ．　Ｂ．；　ｖａｎ　Ｏｏｓｔ，　Ｂ．　Ａ．；　ｄｅｎ　Ｈｅｉｊｅｒ，　Ｍ．；　Ｔｒｉｊｂｅｌｓ，　Ｆ．　Ｊ．　Ｍ．；　Ｒｏｚｅｎ，　Ｒ．；　Ｂｌｏｍ，　Ｈ．　Ｊ．　：　Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｉｎ　ｍｉｌｄ　ｈｙｐｅｒｈｏｍｏｃｙｓｔｅｉｎｅｍｉａ：　ａ　ｃｏｍｍｏｎ　ｍｕｔａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｍｅｔｈｙｌｅｎｅｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｆｏｌａｔｅ　ｒｅｄｕｃｔａｓｅ　ｇｅｎｅ　ｉｓ　ａ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｒｉｓｋ　ｆａｃｔｏｒ　ｆｏｒ　ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ　ｄｉｓｅａｓｅ．　Ａｍ．　Ｊ．　Ｈｕｍ．　Ｇｅｎｅｔ．　５８：　３５−４１，　１９９６．）
（６９）組織メタロプロテアーゼインヒビター−１
組織メタロプロテアーゼインヒビター−１は、動脈壁の間質の代謝に重要な役割を果たしており、腹部動脈瘤の形成に関与する酵素である。
以上より、組織メタロプロテアーゼインヒビター−１の変異は、動脈硬化性病変（動脈瘤など）の生活習慣病の遺伝的マーカーになりうる。
（Ｗａｎｇ　ｅｔ　ａｌ．　Ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｃｏｄｉｎｇ　ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ　ｆｏｒ　ｔｉｓｓｕｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ　ｏｆ　ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ　１　（ＴＩＭＰ１）　ａｎｄ　２　（ＴＩＭＰ２）　ｉｎ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ａｎｅｕｒｙｓｍｓ．　ＭａｔｒｉｘＢｉｏｌ　１８，　１２１ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ　１　（ＴＩＭＰ１）　ａｎｄ　２　（ＴＩＭＰ２）　ｉｎ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈａｎｅｕｒｙｓｍｓ．　Ｍａｔｒｉｘ　Ｂｉｏｌ　１８，　１２１，　１９９９）
【０１３６】
＜４＞本発明のキットの製造
本発明のキットは、前記キャプチャーオリゴヌクレオチドが支持体上に固定化されたものである。
【０１３７】
（１）支持体、及び支持体へのオリゴヌクレオチドの固定化
オリゴヌクレオチドを固定化する支持体の材質は、オリゴヌクレオチドを安定化して固定化することができるものであれば特に制限されないが、例えば、ガラス、ポリカーボネートやプラスチックなどの合成樹脂が挙げられる。支持体の形態は特に制限されないが、球状や板状またはフィルム状が挙げられる。支持体の表面は均質で平滑なものが適している。
【０１３８】
支持体へのオリゴヌクレオチドの固定化は、物理的吸着、電気的結合または分子共有結合など、通常のハイブリダイゼーション法に用いられる手法を用いることができるが、後記実施例においては、表面にカルボジイミド基またはイソシアネート基を有する支持体（特開平８−２３９７５号）を使用し、紫外線照射して共有結合によりオリゴヌクレオチドを固定化する方法を採用した。このような表面にカルボジイミド基またはイソシアネート基を有する支持体を用いる場合、キャプチャーオリゴとして、アミノ基を有するリンカーを末端に付加したオリゴヌクレオチドを用いることが好ましい。
【０１３９】
オリゴヌクレオチドを支持体上にスポットする際に、オリゴヌクレオチドのスポット量が少なすぎると、オリゴヌクレオチドと核酸プローブとの間の充分な反応性を充分に確保することができず、判定が困難になることがある。さらに、核酸プローブの標識にはビオチンとストレプトアビジン酵素コンジュゲートの系を使用し、一般的なＯＡ用スキャナーで読み取ることを可能にするため、支持体の表面には径１０〜１，０００μｍのサイズでスポットすることが好ましい。オリゴヌクレオチドの固定化は、例えば、スポッティングマシーンを使用して支持体状にオリゴヌクレオチド溶液をスポッティングすることにより行うことができる。オリゴヌクレオチド溶液は、通常ほぼ円形にスポッティングされる。
【０１４０】
（２）オリゴヌクレオチドの支持体上への配置
各々のオリゴヌクレオチドは、単一の支持体に複数スポットされるが、それぞれのスポットは格子状に配置することが好ましい。変異を含むキャプチャーとそれに対応する野生型オリゴは、比較が容易にできるように配置するとよい。例えば、各遺伝子のある変異箇所では、野生型オリゴと変異型オリゴを対比できる様に並べて配置し、更にネガティブ・コントロールとポジティブ・コントロールを並べて配置し、これらを１つのブロックとして配置する。一つの遺伝子に複数の変異箇所がある場合は、無作為に並べることも可能であるが、上記ブロックを遺伝子毎に並べて配置し、対比が容易にすることが好ましい。
【０１４１】
さらに望ましい配置は、各スポットを疾患別にグループ分けし、疾患リスク判定を容易にすることである。また野生型と変異型をそれぞれまとめて配置することにより更に判定を容易にすることができる。
【０１４２】
＜５＞被検体からの核酸の調製と核酸プローブの調製
被検試料からの核酸の調製は、通常の細胞からの核酸の調製法と同様にして行うことができるが、いくつかの標準的な方法があり、いずれの方法を用いても本キットは使用可能である。
【０１４３】
得られた核酸を基に、染色体のタイピングを行うための核酸プローブを調製する。核酸プローブは、キャプチャーオリゴまたはコントロールオリゴの塩基配列に対応して設計されたプライマーを使用して核酸増幅することによって調製することができる。核酸プローブは通常ＤＮＡが用いられるが、ＲＮＡであってもよい。核酸増幅の方法としては、例えば、ＰＣＲによりＤＮＡとして増幅する方法、あるいはインビトロ・トランスクリプション法によりＲＮＡとして増幅する方法が挙げられる。
【０１４４】
遺伝子によっては、心血管疾患、肥満又は生活習慣病に関与する複数の変異部位を有するため、それぞれの変異箇所に応じた核酸プローブを調製することができる。ＰＣＲに用いるプライマーを予め標識しておくと、標識化された核酸プローブを得ることができる。ＰＣＲ反応中、あるいは反応後にプローブを標識しても良い。標識物質には蛍光物質またはハプテンなど、通常のハイブリダイゼーションに用いるプローブと同様の標識物質を用いることができる。具体的に例えば、蛍光物質としては、フルオレセイン（ＦＩＴＣ）、ローダミン、フィコエリスリン、テキサスレッド、シアニン系蛍光色素などが、ハプテンとしてはビオチン、ジゴキシゲニン、ジニトロフェニル、フルオレセインなどが挙げられる。
【０１４５】
核酸プローブを作製するためのプライマーは、オリゴヌクレオチドを固定化した支持体と共に、本キットに含めることができる。
【０１４６】
＜６＞支持体上のオリゴヌクレオチドと核酸プローブのハイブリダイゼーションハイブリダイゼーションは、通常の核酸のハイブリダイゼーションと同様にして行うことができる。以下に具体的な方法を例示する。
【０１４７】
ＳＳＣ（Ｓｔａｎｄａｒｄ　Ｓａｌｉｎｅ　Ｃｉｔｒａｔｅ）などの塩溶液、硫酸ドデシルナトリウム（ＳＤＳ）、牛血清アルブミン（ＢＳＡ）などのブロッキング溶液、および融合反応促進のための添加剤からなる融合液に、核酸プローブを加える。プローブが２本鎖の場合は熱やアルカリによる変性を行う。支持体上に核酸プローブを数μＬ添加した後、数時間加熱操作（通常３７〜５０℃）を行い、支持体上に固定化されているオリゴヌクレオチドと核酸プローブ間でハイブリッドを形成させる。
【０１４８】
支持体上に５×ＳＳＣまたは３Ｍテトラメチルアンモニウムクロライドを加えて加熱し（通常３７〜５０℃）、非特異的なハイブリッドを形成していないものを支持体上から剥離させ、特異的なハイブリッドのみを選択的に支持体上に残す。
【０１４９】
ハイブリッドの検出には、核酸プローブに導入されている蛍光物質またはハプテンを使用する。ハプテンを使用する場合は、ハプテンを認識する蛋白質またはそれに結合する蛋白質とアルカリフォスファターゼまたはホースラディッシュ・ペルオキシダーゼなどの結合体（酵素コンジュゲート）を含む溶液を支持体上に加え、室温で数１０分間反応させる。なお、このハプテンと酵素コンジュゲートの結合を行う前に、オリゴヌクレオチドを固定化した領域以外の支持体の領域をカゼインなどの蛋白質を用いて完全に被覆することによって、酵素コンジュゲートと支持体の非特異的吸着反応を阻害することができる。この処理は、オリゴヌクレオチドを固定化した後、支持体上にカゼインなどの蛋白質の溶液を加え、室温で数１０分間放置することによって行うことができる。
【０１５０】
酵素コンジュゲートと核酸プローブ中のハプテンとの結合反応終了後、ハプテンと結合しなかった酵素コンジュゲートを界面活性剤を含む適当な緩衝液で洗浄し排除することによって、支持体上には核酸プローブ中のハプテンと結合した酵素コンジュゲートのみが残ることになる。
【０１５１】
ハイブリッドを可視化するには、ハプテンと酵素コンジュゲート結合体のみが存在する場合にのみ不溶化化合物になる化合物を添加し、その不溶化化合物生成が酵素反応によって増幅され可視化される。この時用いられる化合物としては、酵素コンジュゲート中の酵素がアルカリフォスファターゼの場合、ニトロブルーテトラゾリウムクロライド（ＮＢＴ）とＢＣＩＰ（５−ブロモ−４−クロロ−３−インドリルリン酸−ｐトルイジントルイジン塩）が用いられる。酵素がホースラディッシュ・ペルオキシダーゼの場合は、ＴＭＢ（３，３’，５，５’−テトラメチルベンチジン）などを用いることができる。
【０１５２】
得られたハイブリダイゼーションの結果を基にした被検体由来の染色体のタイピングは、キャプチャーオリゴを固定化した位置における色素沈着または蛍光発色を見ることによって行う。すなわち、色素沈着または蛍光発色のある位置が該当する変異に相当する。野生型キャプチャーオリゴを固定化した位置に陽性シグナルが認められれば、被検体由来の染色体上の遺伝子の塩基配列上の変異がそのキャプチャーが示す塩基であることになる。逆に変異型キャプチャーオリゴを固定化した位置に陽性シグナルが認められれば、被検体由来の染色体上の遺伝子の塩基配列上の変異がそのキャプチャーが示す塩基であることになる。更に、これらのシグナル強度に対して、ポシティブ・コントロールキャプチャーオリゴに得られるシグナルは、等しいかそれ以上である必要であり、かつネガティブ・コントロールキャプチャーオリゴに得られるシグナル（通常、ハイブリダイゼーションが適正に行われれば、シグナルは生じない）は低くなっている必要がある。つまり、ネガティブ・コントロールにシグナルが得られる場合は、ハイブリダイゼーションが適切な条件で行われなかったことを意味する。
【０１５３】
＜７＞遺伝性の心血管系疾患、肥満および生活習慣病の遺伝的リスクを判別する方法
上記した本発明のキットを用いることにより、遺伝性の心血管系疾患、肥満および生活習慣病の遺伝的リスクを判別することができる。同キットを用いて被検者由来の核酸をオリゴヌクレオチドにハイブリダイズさせ、被検者由来の核酸と完全に一致する塩基配列を有するオリゴヌクレオチドが、野生型である変異型であるかを同定する。そして、変異型と同定された遺伝子又は遺伝子群を特定することによって、前記遺伝的リスクを判別することができる。
【０１５４】
【実施例】
以下、実施例により本発明をさらに具体的に説明する。
【０１５５】
【実施例１】オリゴヌクレオチドの合成
常法に従い、オリゴヌクレオチド合成機（Ｐｅｒｋｉｎ−ｅｌｍｅｒ　Ａｐｐｌｉｅｄ　ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を用いて、５’末端にアミノ基または水酸基を有するオリゴヌクレオチドを合成し、脱保護を施した後、乾燥させた。このオリゴヌクレオチド乾燥体を１０ｍＭ　Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．５），　１ｍＭ　ＥＤＴＡ緩衝液を用いて溶解し、１００ｐｍｏｌ／μＬのオリゴヌクレオチド溶液を調製した。合成したオリゴヌクレオチドの配列は、配列表の配列番号１〜５７９に示した。
【０１５６】
【実施例２】支持体へのオリゴヌクレオチドのスポッティング（５’末端にアミノ基を有するオリゴヌクレオチドを用いる場合）
５’末端にアミノ基を有するオリゴヌクレオチド溶液１０μＬに対してマイクロスポッティング溶液（ＴｅｌｅＣｈｅｍ　Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｉｎｃ．）を１０μＬ混合し、マイクロタイタープレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　Ｌｔｄ．）上に分注した。スポッティングマシンの所定の位置にシラン化スライドグラス（Ｍａｔｓｕｎａｍｉ　Ｇｌａｓｓ　Ｉｎｄ．，Ｌｔｄ．）を配置し、スポッティングマシンを作動させ、スライドグラス上にオリゴヌクレオチド溶液をスポットした。
【０１５７】
スポッティング終了後、スライドグラスに熱水からの蒸気を数秒間あてた。その後、紫外線を３０ｍＪ照射した。再度蒸気に数秒間曝露した後、ホットプレート上にスライドグラスを置いて水分を除去した。０．１％硫酸ドデシルナトリウム水溶液でスライドグラスを濯いだ後、蒸留水で濯いだ。
【０１５８】
スライドグラスを３％　ＢＳＡ（ウシ血清アルブミン）を含む１００ｍＭ　Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．５），１００ｍＭ　ＮａＣｌ，　０．１％　Ｔｒｉｔｏｎ　Ｘ−１００に室温で３０分間浸し、ブロッキングした。その後、スライドグラスを室温で乾燥させた後、１０ｍＭ　Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．５），　１ｍＭ　ＥＤＴＡ緩衝液で洗浄した。スライドグラスを再度室温で乾燥させ、使用まで乾燥状態で冷暗所で保存した。
【０１５９】
【実施例３】支持体へのオリゴヌクレオチドのスポッティング（５’末端にＯＨ基を有するオリゴヌクレオチドを用いる場合）
５’末端に水酸基を有するオリゴヌクレオチド溶液１０μＬに対してスポッティング溶液（２Ｍ　　塩化ナトリウム水溶液）を１０μＬ混合し、マイクロタイタープレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　Ｌｔｄ．）上に分注した。スポッティングマシンの所定の位置にカルボジイミド基を有するスライドグラスを配置し、スポッティングマシンを作動させ、スライドグラス上にオリゴヌクレオチド溶液をスポットした。
【０１６０】
スポッティング終了後、スライドグラスを３７℃の乾燥機に３０分間置いた。その後、スライドグラスを３％　ＢＳＡ（ウシ血清アルブミン）を含む１００ｍＭ　Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．５），１００ｍＭ　ＮａＣｌ，　０．１％　Ｔｒｉｔｏｎ　Ｘ−１００に室温で３０分間浸し、ブロッキングした。その後、スライドグラスを室温で乾燥させた後、１０ｍＭ　Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．５），　１ｍＭ　ＥＤＴＡ緩衝液で洗浄した。スライドグラスを再度室温で乾燥させ、使用まで乾燥状態で冷暗所で保存した。
【０１６１】
【実施例４】核酸プローブの調製
Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｃｌｏｎｉｎｇ　Ａ　ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　Ｍａｎｕａｌ，　３ｒｄ　Ｅｄｉｔｉｏｎ，　Ｃｏｌｄ　Ｓｐｒｉｎｇ　ＨａｒｂｏｒＬａｂｏｒａｔｏｒｙ　Ｐｒｅｓｓに記載の方法にしたがって、ヒト血液から染色体ＤＮＡを抽出した。ＰＣＲ増幅は以下のようにして行った。サーマルサイクラー用０．２ｍＬチューブにＨｏｔｓｔａｒｔａｑ　Ｍａｓｔｅｒ　Ｍｉｘ　Ｋｉｔ（ＱＩＧＥＮ　Ｋ．Ｋ．）２５μＬと、被検体由来の染色体ＤＮＡ　１μＬと、１００ｐｍｏｌ／μＬのプライマーを１μＬずつセットで添加し、蒸留水で全量を５０μＬにした。サーマルサイクラー（ＰＴＣ−２００，　ＭＪ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｉｎｃ．）にチューブをセットして、▲１▼９５℃：１５分、▲２▼９５℃：１分、▲３▼６０℃：３０秒、▲４▼７２℃：１５秒、▲５▼７２℃、１０分の加熱サイクル中、▲２▼〜▲４▼を４０回繰り返すプログラムを作動させた。
【０１６２】
プローブ合成反応が終了した後、反応物から１μＬを取り出し、６×泳動色素（３０％グリセロール、０．２５％ブロモフェノールブルー、０．２５％キシレンシアノール）を１μＬと、１０ｍＭ　Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．５），　１ｍＭ　ＥＤＴＡ緩衝液４μＬとを混合した。混合後、２％アガロースゲル上で１００Ｖ、２５分間の条件で電気泳動させた。泳動後、０．５μｇ／ｍＬのエチジウムブロマイドを含む蒸留水にゲルを１５分間浸し、紫外線照射により写真に記録した。
【０１６３】
【実施例５】ハイブリダイゼーション
実施例３で調製した核酸プローブ５μＬを取り、１．５ｍＬ容チューブに加え、さらにＵｎｉＨｙｂ　Ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ（Ｔｅｌｅｃｈｅｍ　Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｉｎｃ．）２０μＬを加えて混合し、ハイブリダイゼーション溶液を調製した。この溶液を１００℃で１０分間加熱処理を行った後、氷中に５分間浸した。この核酸プローブを、実施例２および３で作製したオリゴヌクレオチドをスポットしたスライドグラスに１０μＬのせ、さらにカバーグラスを載せた。ハイブリカセット（Ｔｅｌｅｃｈｅｍ　ＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＩｎｃ．）にスライドグラスを入れ、４２℃の水槽につけ遮光して１時間放置した。ハイブリカセットからスライドグラスを取り出し、４℃の５×ＳＳＣ（０．７５Ｍ　ＮａＣｌ，０．０７５Ｍ　クエン酸ナトリウム）に浸してカバーグラスを除去した。スライドグラスを４℃の５×ＳＳＣに３０分間浸す操作を２回行い、室温の３Ｍテトラメチルアンモニウムクロライド水溶液で２回濯いだ後、４５℃の３Ｍテトラメチルアンモニウムクロライド水溶液で２回濯いだ。最後に２×ＳＳＣの入った溶液にスライドグラスを移した。
【０１６４】
【実施例６】化学発色検出
容器からスライドグラスを取り出し、オリゴヌクレオチドが固定化されていない部分の水分をペーパータオルで拭い取り、オリゴヌクレオチド固定化部分にはブロックエース溶液（大日本製薬株式会社）を２００μＬ載せた。室温で３０分間放置した後、分注機で溶液を吸い取った。５ｍＬのＴＢＳＴ溶液（５０ｍＭ　Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．５），　０．１５Ｍ　ＮａＣｌ，　０．０５％　Ｔｗｅｅｎ　２０）にアビジンＤＨおよびビオチン化ペルオキシダーゼ（Ｖｅｃｔｏｒ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，　Ｉｎｃ．）をそれぞれ１滴加えて混合した溶液２００μＬを、スライドグラス上のオリゴヌクレオチド固定化部分に載せ、室温で３０分間放置した。
【０１６５】
分注機で溶液を吸い取り、スライドグラスをＴＢＳＴ溶液の入った容器に移し、振とうしながら室温で５分間洗浄した。溶液を一旦捨てて、新しいＴＢＳＴ溶液を容器に加え、振とうしながら室温で５分間洗浄した。スライドグラスを容器から取り出し、オリゴヌクレオチドが固定化されていない部分の水分をペーパータオルで拭い取った。オリゴヌクレオチド固定化領域にはＴＭＢ（Ｖｅｃｔｏｒ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，　Ｉｎｃ．）を２００μＬ載せ、室温で２０分間反応させた後、スライドグラスを脱イオン水で洗浄し酵素反応を停止させた。
【０１６６】
【実施例７】
化学発色後に、ＯＡ用スキャナー（ＮＥＣ　Ｍｕｌｔｉｒｅａｄｅｒ　６００ＳＲ）とフォトショップＶｅｒ　５．０（アドビシステムズ株式会社）を用いてコンピューター内にＴＩＦＦ画像として保存した。この画像を基に、化学発色検出によって形成した色素沈着がある場合は、スライドグラス上に固定化されたオリゴヌクレオチド（キャプチャーオリゴ）と被検体由来の核酸プローブが完全な相補性を持ち２本鎖を形成したことを示す。
【０１６７】
図２に各々の遺伝子の塩基置換の有無を明らかにするためのスポットの配置を示したが、各々の遺伝子毎のブロックの配置の順番は任意で良い。また、これらの中から必要に応じた組み合わせでスポットすることも可能である。
【０１６８】
図２に示した遺伝子のうち、アドレナリン・レセプターβ３遺伝子の変異がＴｒｐ６４Ａｒｇ（ＴＧＧ／ＣＧＧ）、アドレナリン・レセプターβ２遺伝子の変異がＧｌｎ２７Ｇｌｕ（ＣＡＡ／ＧＡＡ）、ＧＴＰ・バインディング・プロテイン３遺伝子の変異がＳｅｒ２７５Ｓｅｒ（ＴＣＣ／ＴＣＴ）、ペルオキシソーム・プロリファレーター・アクチベーティッド・レセプターγ２遺伝子の変異がＰｒｏ１２Ａｌａ（ＣＣＡ／ＧＣＡ）、Ｐｒｏ１１５Ｇｌｎ（ＣＣＡ／ＣＡＡ）、プラスミノーゲン・アクチベーター・インヒビター１遺伝子の変異が−６７１〜−６７５に見られるＧの欠失、ファティー・アシッド・バインディング・プロテイン２遺伝子の変異がＡｌａ５４Ｔｈｒ（ＧＣＴ／ＡＣＴ）、インスリン・レセプター・サブストレイト１遺伝子の変異がＧｌｙ９７２Ａｒｇ（ＧＧＧ／ＡＧＧ）、コレシストキニン−Ａ・レセプター遺伝子の変異が−１２８Ｇ／Ｔ、−８１Ａ／Ｇの各々のタイピング結果を図３および表１９にまとめた。
【０１６９】
【表１９】

【０１７０】
【発明の効果】
本発明により、心血管疾患、肥満および生活習慣病に関連する複数の遺伝子変異を容易に検出することができ、その判定結果に基づいた疾病治療と予防が可能な方法及びキットが提供される。
【０１７１】
【配列表】

【図面の簡単な説明】
【図１】本発明のキットにおけるオリゴヌクレオチドの配列の一例を示す図。
【図２】実施例で作製したスライドグラス上に固定化されたオリゴヌクレオチドの配置を示す図。
【図３】図２のスライドグラスに固定化されたオリゴヌクレオチドを用いた被検体由来の核酸の染色体のタイピングの結果を示す図（写真）。

Claims (9)

1. 支持体に固定化された複数種のキャプチャーオリゴヌクレオチドを含み、これらのキャプチャーオリゴヌクレオチドと被検者由来の核酸とのハイブリダイゼーションにより、遺伝性の心血管系疾患、肥満および生活習慣病の遺伝的リスクを判別するためのキットであって、
   前記遺伝性の心血管系疾患、肥満および生活習慣病は、それぞれの疾患に関与する遺伝子の多型が発症と相関し、
   前記複数種のキャプチャーオリゴヌクレオチドは、前記のそれぞれの疾患毎に選ばれる少なくとも一つの遺伝子の多型の有無を検出し得る、野生型遺伝子及び多型を含む遺伝子のそれぞれの配列に由来するオリゴヌクレオチド対を含み、
   前記キャプチャーオリゴヌクレオチドは、対応する疾患毎にグループ分けされて支持体上に配置されたことを特徴とするキット。
2. 前記支持体の表面はカルボジイミド基またはイソシアネート基でコートされ、このカルボジイミド基またはイソシアネート基と前記オリゴヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド末端に付加されたリンカーのアミノ基との反応により共有結合が形成された請求項１に記載のキット。
3. 前記オリゴヌクレオチドは、前記支持体の表面に直径１０〜１，０００μｍのサイズに固定された請求項１記載のキット。
4. 前記心血管系疾患、肥満および生活習慣病に関与する遺伝子が、アドレナリン・レセプターβ３、アドレナリン・レセプターβ２、ペルオキシソーム・プロリファレーター・アクチベーティッド・レセプターγ２、レプチン・レセプター、レプチン、プラスミノーゲン・アクチベーター・インヒビター１、ヘパティック・ニュークレアー・ファクター１α、ヘパティック・ニュークレアー・ファクター１β、ニューロ・ペプチド・Ｙ、アンカップリング・プロテイン１、アンカップリング・プロテイン２、アンカップリング・プロテイン３、ＧＴＰ・バインディング・プロテイン３、ファティー・アシッド・バインディング・プロテイン２、プロ・オピオメラノコルチン、コカイン・アンド・アンフェタミン・レギュレイティッド・トランスクリプト、プロテイン・フォスファターゼ１・グリコーゲン・レギュレイティッド・Ｇサブユニット、インスリン・レセプター・サブストレイト１、メラノコルチン−４・レセプター、コレシストキニン−Ａ・レセプター、ニューロ・ペプチド・Ｙ・レセプター、ドーパミンＤ２・レセプター、ドーパミンＤ４・レセプター、アンジオテンシン変換酵素、腫瘍壊死因子α、インスリン・レセプター、セロトニン・レセプター、アディポネクチン、低比重リポプロテイン・レセプター、グルココルチコイド・レセプター、リポプロテイン・リパーゼ、脂肪酸輸送タンパク１、アルデヒド脱水素酵素、アポリポプロテインＡ、アポリポプロテインＢ、コレステリル・エステル・トランスファー・プロテイン、ボンベシン・レセプター、メラノコルチン・レセプター３型、メラノコルチン・レセプター４型、メラノコルチン・レセプター５型、インスリン様成長因子、ヘパティック・リパーゼ、アポリポプロテインＥ、アポリポプロテインＣ、アポリポプロテインＤ、アポリポプロテインＢ、アドレナリン・レセプターα２Ｂ、エンドセリン、グルカゴン様ペプチド・レセプター、アグーチ・シグナリング・プロテイン、ガラニン、グルカゴン・レセプター、プロホルモン・コンバーターゼ１、プロホルモン・コンバーターゼ２、プロホルモン・コンバーターゼ３、カルボキシペプチダーゼＥ、ホルモン感受性リパーゼ、アンジオテンシノーゲン、アンジオテンシンＩＩレセプター、内皮型ヒトＮＯ合成酵素、パラオキソナーゼ、ＣＤ３６、ケモカインレセプター２、細胞接着因子１（ＩＣＡＭ１）、マトリックスメタロプロテアーゼ３、ＣＤ４０リガンド、肝細胞増殖因子、アクチン結合蛋白（ＳＭ２２）、メチレンテトラヒドロ葉酸還元酵素、又は組織メタロプロテアーゼインヒビター−１をコードする遺伝子から、各々の疾患毎に選ばれる１種又は２種以上である請求項１記載のキット。
5. 前記心血管系疾患、肥満および生活習慣病に関わる遺伝子が、アドレナリン・レセプターβ３、アドレナリン・レセプターβ２、ペルオキシソーム・プロリファレーター・アクチベーティッド・レセプターγ２、ＧＴＰ・バインディング・プロテイン３、プラスミノーゲン・アクチベーター・インヒビター１、ファティー・アシッド・バインディング・プロテイン２、インスリン・レセプター・サブストレイト１、コレシストキニン−Ａ・レセプター、アンジオテンシノーゲン、アンジオテンシンＩＩレセプター、内皮型ヒトＮＯ合成酵素、パラオキソナーゼ、ＣＤ３６、ケモカインレセプター２、細胞接着因子１（ＩＣＡＭ１）、マトリックスメタロプロテアーゼ３、ＣＤ４０リガンド、肝細胞増殖因子、アクチン結合蛋白（ＳＭ２２）、メチレンテトラヒドロ葉酸還元酵素、及び組織メタロプロテアーゼインヒビター−１をコードする遺伝子の全てである請求項４記載のキット。
6. アドレナリン・レセプターβ３遺伝子の変異がＴｒｐ６４Ａｒｇ（ＴＧＧ／ＣＧＧ）、アドレナリン・レセプターβ２遺伝子の変異が−１４２９Ｔ／Ｇ、−１３４３Ａ／Ｇ、−１０２３Ｇ／Ａ、−６５４Ｇ／Ａ、−４６８Ｃ／Ｇ、−３６７Ｔ／Ｃ、−４７Ｔ／Ｃ、−２０Ｔ／Ｃ、Ａｒｇ１６Ｇｌｙ（ＡＧＡ／ＧＧＡ）、Ｇｌｎ２７Ｇｌｕ（ＣＡＡ／ＧＡＡ）、Ｖａｌ１３４Ｍｅｔ（ＧＴＧ／ＡＴＧ）、Ｔｈｒ１６４Ｉｌｅ（ＡＣＣ／ＡＴＣ）、ペルオキシソーム・プロリファレーター・アクチベーティッド・レセプターγ２遺伝子の変異が−２０８Ｔ／Ｇ、Ｐｒｏ１２Ａｌａ（ＣＣＡ／ＧＣＡ）、Ｐｒｏ１１５Ｇｌｎ（ＣＣＡ／ＣＡＡ）、Ａｒｇ３１６Ｃｙｓ（ＣＧＣ／ＴＧＣ）Ｈｉｓ４７１Ｈｉｓ（ＣＡＣ／ＣＡＴ）、レプチン・レセプター遺伝子の変異がＬｙｓ１０９Ａｒｇ（ＡＡＧ／ＡＧＧ）、Ｌｙｓ２０４Ａｒｇ（ＡＡＡ／ＡＧＡ）、Ｇｌｎ２２３Ａｒｇ（ＣＡＧ／ＣＧＧ）、Ｇｌｎ２６９Ｐｒｏ（ＣＡＡ／ＣＣＡ）、Ｓｅｒ３４３Ｓｅｒ（ＡＧＴ／ＡＧＣ）、Ｓｅｒ４９２Ｔｈｒ（ＡＧＴ／ＡＣＴ）、Ｌｙｓ６５６Ａｓｎ（ＡＡＧ／ＡＡＣ）、Ａｌａ９７６Ａｓｐ（ＧＣＣ／ＧＡＣ）、Ｔｙｒ９８６Ｔｙｒ（ＴＡＣ／ＴＡＴ）、Ｐｒｏ１０１９Ｐｒｏ（ＣＣＧ／ＣＣＡ）、レプチン遺伝子の変異が−２７９３Ｔ／Ｃ、−２５７５Ｔ／Ｇ、−２５７０Ｔ／Ｇ、−２５４９Ｃ／Ａ、−２５４８Ｇ／Ａ、−２４３７Ｔ／Ｇ、−２０９４Ｔ／Ｃ、−１９６３Ｃ／Ｔ、−１８８７Ｃ／Ｔ、−１８２３Ｃ／Ｔ、−１４４７Ｔ／Ｇ、−１３８７Ｇ／Ａ、−６３３Ｃ／Ｔ、−５７０Ｃ／Ｔ、−４７７Ｇ／Ｔ、−４７６Ｃ／Ｔ、−１８８Ｃ／Ａ、１９Ａ／Ｇ、Ｐｈｅ１７Ｌｅｕ（ＴＴＣ／ＣＴＣ）、Ｔｈｒ４８Ｔｈｒ（ＡＣＧ／ＡＣＡ）、Ｓｅｒ９１Ｓｅｒ（ＴＣＣ／ＴＣＴ）、Ａｓｎ１０２Ａｓｎ（ＡＡＣ／ＡＡＴ）、Ｖａｌ１１０Ｍｅｔ（ＧＴＧ／ＡＴＧ）、Ｇｌｕ１２６Ｇｌｎ（ＧＡＧ／ＣＡＧ）、５３８Ｃ／Ｔ、プラスミノーゲン・アクチベーター・インヒビター１遺伝子の変異が−８４４Ｇ／Ａ、−６７１〜−６７５に見られるＧの欠失、９７８５Ｇ／Ａ、１１０５３Ｇ／Ｔ、１１３２０〜１１３４５に見られるＣＧＣＧＣＣＣＣＣの挿入または欠失、ヘパティック・ニュークレアー・ファクター１α遺伝子の変異がＩｌｅ２７Ｌｅｕ（ＡＴＣ／ＣＴＣ）、ヘパティック・ニュークレアー・ファクター１β遺伝子の変異が１９６８Ａ／Ｇ、ニューロ・ペプチド・Ｙ遺伝子の変異がＬｅｕ７Ｐｒｏ（ＣＴＧ／ＣＣＧ）、アンカップリング・プロテイン１遺伝子の変異が−３８２６Ａ／Ｇ、アンカップリング・プロテイン２遺伝子の変異が１９Ｃ／Ｔ、２７Ｃ／Ｇ、９７Ｃ／Ｔ、Ｇｌｙ８５Ｓｅｒ（ＧＧＣ／ＡＧＣ）、Ａｌａ５５Ｖａｌ（ＧＣＣ／ＧＴＣ）、エクソン８内のくり返し配列（ＣＣＣＴＣＴ）の有無、アンカップリング・プロテイン３遺伝子の変異が−１５５Ｃ／Ｔ、−５５Ｃ／Ｔ、５Ｇ／Ａ、Ｔｙｒ２００Ｔｙｒ（ＴＡＴ／ＴＡＣ）、Ｇｌｙ８４Ｓｅｒ（ＧＧＣ／ＡＧＣ）、Ｔｙｒ９９Ｔｙｒ（ＴＡＴ／ＴＡＣ）、イントロン４内の変異：−１４３Ａ／Ｇ、−９６Ｃ／Ｔ、−４７Ａ／Ｇ、−４６Ａ／Ｔ、ＧＴＰ・バインディング・プロテイン３遺伝子の変異が−３５０Ａ／Ｃ、Ｇｌｙ２７２Ｓｅｒ（ＧＧＣ／ＡＧＣ）、Ｓｅｒ２７５Ｓｅｒ（ＴＣＣ／ＴＣＴ）、１４２９Ｃ／Ｔ、ファティー・アシッド・バインディング・プロテイン２遺伝子の変異がＡｌａ５４Ｔｈｒ（ＧＣＴ／ＡＣＴ）、プロ・オピオメラノコルチン遺伝子の変異がＡｓｐ８０Ａｓｎ（ＧＡＣ／ＡＡＣ）、アミノ酸番号７３に入る挿入（ＧＧＣＧＣＡ／ＡＧＣＡＧＣＧＧＣまたはＣＣＡＧＣＡ／ＧＧＣＣＣＧＧＣ）、Ｇｌｕ１８０Ａｍｂ（ＧＡＧ／ＴＡＧ）、Ｇｌｕ１８８Ｇｌｙ（ＧＡＧ／ＧＧＧ）、コカイン・アンド・アンフェタミン・レギュレイティッド・トランスクリプト遺伝子の変異がＳｅｒ６６Ｔｈｒ（ＡＧＴ／ＡＣＴ）、１４５７番目のＡの欠失（ＣＡＴ／ＣＴ）、１４７５Ａ／Ｇ、プロテイン・フォスファターゼ１・グリコーゲン・レギュレイティッド・Ｇサブユニット遺伝子の変異がＡｓｐ９０５Ｔｙｒ（ＧＡＣ／ＴＡＣ）、インスリン・レセプター・サブストレイト１遺伝子の変異がＰｒｏ１７０Ａｒｇ（ＣＣＣ／ＣＧＣ）、Ｍｅｔ２０９Ｔｈｒ（ＡＴＧ／ＡＣＧ）、Ａｌａ５３０Ｐｒｏ（ＧＣＣ／ＣＣＣ）、Ｓｅｒ８０９Ｐｈｅ（ＴＣＴ／ＴＴＴ）、Ｇｌｙ９７２Ａｒｇ（ＧＧＧ／ＡＧＧ）、インスリン・レセプター遺伝子の変異がＡｓｐ５９Ｇｌｙ（ＧＡＴ／ＧＧＴ）、Ｌｅｕ６２Ｐｒｏ（ＣＴＧ／ＣＣＧ）、メラノコルチン−４・レセプター遺伝子の変異がＳｅｒ３０Ｐｈｅ（ＴＣＣ／ＴＴＣ）、Ｔｙｒ３５ｃｈ（ＴＡＣ／ＴＡＡ）、Ａｓｐ３７Ｖａｌ（ＧＡＴ／ＧＴＴ）、Ｐｒｏ７８Ｌｅｕ（ＣＣＣ／ＣＴＣ）、Ｉｌｅ１０３Ｖａｌ（ＡＴＣ／ＧＴＣ）、Ｔｈｒ１１２Ｍｅｔ（ＡＣＧ／ＡＴＧ）、Ｉｌｅ１３７Ｔｈｒ（ＡＴＴ／ＡＣＴ）、コドン２１１の下流の欠失（ＴＣＴＣＴＣＴ／ＴＣＴ）、Ｉｌｅ２５Ｉｌｅ（ＡＴＴ／ＣＴＴ）、Ｇｌｙ２５２Ｓｅｒ（ＧＧＣ／ＡＧＣ）、Ｉｌｅ３１７Ｔｈｒ（ＡＴＣ／ＡＣＣ）、Ａｒｇ１６５Ｔｒｐ（ＣＧＧ／ＴＧＧ）、コレシストキニン−Ａ・レセプター遺伝子の変異が−１２８Ｇ／Ｔ、−８１Ａ／Ｇ、アンジオテンシノーゲンの変異がＭｅｔ２３５Ｔｈｒ（ＡＴＧ／ＡＣＧ）、アンジオテンシンＩＩレセプターの変異が３’ＵＴＲ（＋８６）（Ａ／Ｃ）、内皮型ヒトＮＯ合成酵素の変異がＧｌｕ２９８Ａｓｐ（ＧＡＧ／ＧＡＴ）、パラオキソナーゼの変異がＭｅｔ５５Ｌｅｕ（ＡＴＧ／ＴＴＧ）、ＣＤ３６の変異がＰｒｏ９０Ｓｅｒ（ＣＣＴ／ＴＣＴ）、ケモカインレセプター２の変異がＶａｌ６４Ｉｌｅ（ＧＴＣ／ＡＴＣ）、細胞接着因子１（ＩＣＡＭ１）の変異がＬｙｓ２９Ｍｅｔ（ＡＡＧ／ＡＴＧ）、マトリックスメタロプロテアーゼ３の変異が５’ＵＴＲ（１１７１）　Ａ　ｉｎｓｅｒｔｉｏｎ、ＣＤ４０リガンドの変異がＴｒｐ１４０Ｃｙｓ（ＴＧＧ／ＴＧＣ）、Ｓｅｒ１８４Ｔｅｒｍ（ＴＣＧ／ＴＡＧ）、アクチン結合蛋白（ＳＭ２２）の変異がＬｙｓ４１９Ａｒｇ（ＡＡＧ／ＡＧＧ）、Ａｌａ４４９Ｇｌｕ（ＧＣＧ／ＧＡＧ）、Ｇｌｙ８９２Ａｓｐ（ＧＧＴ／ＧＡＴ）、メチレンテトラヒドロ葉酸還元酵素の変異がＡｌａ２２２Ｖａｌ（ＧＣＣ／ＧＴＣ）、組織メタロプロテアーゼインヒビター−１の変異がＰｈｅ１２４Ｐｈｅ（ＴＴＣ／ＴＴＴ）からそれぞれ選択される請求項５に記載のキット。
7. アドレナリン・レセプターβ３、アドレナリン・レセプターβ２、ペルオキシソーム・プロリファレーター・アクチベーティッド・レセプターγ２、レプチン・レセプター、レプチン、プラスミノーゲン・アクチベーター・インヒビター１、ヘパティック・ニュークレアー・ファクター１α、ヘパティック・ニュークレアー・ファクター１β、ニューロ・ペプチド・Ｙ、アンカップリング・プロテイン１、アンカップリング・プロテイン２、アンカップリング・プロテイン３、ＧＴＰ・バインディング・プロテイン３、ファティー・アシッド・バインディング・プロテイン２、プロ・オピオメラノコルチン、コカイン・アンド・アンフェタミン・レギュレイティッド・トランスクリプト、プロテイン・フォスファターゼ１・グリコーゲン・レギュレイティッド・Ｇサブユニット、インスリン・レセプター・サブストレイト１、インスリン・レセプター、メラノコルチン−４・レセプター、コレシストキニン−Ａ・レセプター、アンジオテンシノーゲン、アンジオテンシンＩＩレセプター、内皮型ヒトＮＯ合成酵素、パラオキソナーゼ、ＣＤ３６、ケモカインレセプター２、細胞接着因子１（ＩＣＡＭ１）、マトリックスメタロプロテアーゼ３、ＣＤ４０リガンド、肝細胞増殖因子、アクチン結合蛋白（ＳＭ２２）、メチレンテトラヒドロ葉酸還元酵素、組織メタロプロテアーゼインヒビター−１各々の変異型遺伝子の点突然変異または数塩基の挿入または欠失を含む配列に由来し、配列番号７９〜５７９に示す塩基配列のうち、ネガティブコントロールを除くいずれかのオリゴヌクレオチドを含むことを特徴とする請求項６記載のキット。
8. 支持体に固定化された複数種のキャプチャーオリゴヌクレオチドと被検者由来の核酸とのハイブリダイゼーションにより、遺伝性の心血管系疾患、肥満および生活習慣病の遺伝的リスクを判別するために用いられる、被検者由来の核酸を増幅するためのプライマーセットであって、
   アドレナリン・レセプターβ３、アドレナリン・レセプターβ２、ペルオキシソーム・プロリファレーター・アクチベーティッド・レセプターγ２、レプチン・レセプター、レプチン、プラスミノーゲン・アクチベーター・インヒビター１、ヘパティック・ニュークレアー・ファクター１α、ヘパティック・ニュークレアー・ファクター１β、ニューロ・ペプチド・Ｙ、アンカップリング・プロテイン１、アンカップリング・プロテイン２、アンカップリング・プロテイン３、ＧＴＰ・バインディング・プロテイン３、ファティー・アシッド・バインディング・プロテイン２、プロ・オピオメラノコルチン、コカイン・アンド・アンフェタミン・レギュレイティッド・トランスクリプト、プロテイン・フォスファターゼ１・グリコーゲン・レギュレイティッド・Ｇサブユニット、インスリン・レセプター・サブストレイト１、インスリン・レセプター、メラノコルチン−４・レセプター、コレシストキニン−Ａ・レセプターアンジオテンシノーゲン、アンジオテンシンＩＩレセプター、内皮型ヒトＮＯ合成酵素、パラオキソナーゼ、ＣＤ３６、ケモカインレセプター２、細胞接着因子１（ＩＣＡＭ１）、マトリックスメタロプロテアーゼ３、ＣＤ４０リガンド、肝細胞増殖因子、アクチン結合蛋白（ＳＭ２２）、メチレンテトラヒドロ葉酸還元酵素、及び組織メタロプロテアーゼインヒビター−１の各々の遺伝子配列の一部に相当する配列番号１〜７８から選択される塩基配列を有するオリゴヌクレオチド対からなるプライマーセット。
9. 支持体に固定化された複数種のキャプチャーオリゴヌクレオチドと、被検者由来の核酸とのハイブリダイゼーションを行うことにより、遺伝性の心血管系疾患、肥満および生活習慣病の遺伝的リスクを判別する方法であって、
   前記遺伝性の心血管系疾患、肥満および生活習慣病は、それぞれの疾患に関与する遺伝子の多型が発症と相関し、
   前記複数種のキャプチャーオリゴヌクレオチドは、前記のそれぞれの疾患毎に選ばれる少なくとも一つの遺伝子の多型の有無を検出し得る、野生型遺伝子及び多型を含む遺伝子のそれぞれの配列に由来するオリゴヌクレオチド対を含み、
   前記キャプチャーオリゴヌクレオチドは、対応する疾患毎にグループ分けされて支持体上に配置され、
   前記ハイブリダイゼーションにより、被検者由来の核酸と完全に一致する塩基配列を有するオリゴヌクレオチドを同定することを特徴とする方法。

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