JP2005281155A - Ｆｘｒ活性化を介したコレステロールホメオスタシス関連遺伝子転写活性調節剤 - Google Patents
Ｆｘｒ活性化を介したコレステロールホメオスタシス関連遺伝子転写活性調節剤 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2005281155A JP2005281155A JP2004094274A JP2004094274A JP2005281155A JP 2005281155 A JP2005281155 A JP 2005281155A JP 2004094274 A JP2004094274 A JP 2004094274A JP 2004094274 A JP2004094274 A JP 2004094274A JP 2005281155 A JP2005281155 A JP 2005281155A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- group
- fxr
- hydrogen
- alkyl group
- functional
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 101000603876 Homo sapiens Bile acid receptor Proteins 0.000 title abstract description 33
- 102100038495 Bile acid receptor Human genes 0.000 title abstract description 32
- 230000004913 activation Effects 0.000 title description 9
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title description 8
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 title description 6
- 230000031154 cholesterol homeostasis Effects 0.000 title 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 18
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 claims abstract description 18
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims abstract description 12
- 125000004435 hydrogen atom Chemical class [H]* 0.000 claims abstract description 12
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 6
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 6
- 125000000304 alkynyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 6
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract 10
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims abstract 10
- 208000031226 Hyperlipidaemia Diseases 0.000 claims description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 7
- YXHVCZZLWZYHSA-UHFFFAOYSA-N (Z)-6-[8-pentadecenyl]salicylic acid Natural products CCCCCCC=CCCCCCCCC1=CC=CC(O)=C1C(O)=O YXHVCZZLWZYHSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- YXHVCZZLWZYHSA-FPLPWBNLSA-N Ginkgoic acid Chemical compound CCCCCC\C=C/CCCCCCCC1=CC=CC(O)=C1C(O)=O YXHVCZZLWZYHSA-FPLPWBNLSA-N 0.000 claims description 6
- 208000001024 intrahepatic cholestasis Diseases 0.000 claims description 6
- 230000007872 intrahepatic cholestasis Effects 0.000 claims description 6
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 claims description 5
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 claims description 4
- 239000003529 anticholesteremic agent Substances 0.000 claims description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 2
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 claims description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 18
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 3
- 239000003524 antilipemic agent Substances 0.000 abstract description 2
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 14
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 12
- 239000003613 bile acid Substances 0.000 description 11
- 238000001994 activation Methods 0.000 description 8
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 8
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 7
- RUDATBOHQWOJDD-UHFFFAOYSA-N (3beta,5beta,7alpha)-3,7-Dihydroxycholan-24-oic acid Natural products OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)CC2 RUDATBOHQWOJDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- RUDATBOHQWOJDD-BSWAIDMHSA-N chenodeoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)CC1 RUDATBOHQWOJDD-BSWAIDMHSA-N 0.000 description 6
- 229960001091 chenodeoxycholic acid Drugs 0.000 description 6
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 6
- HSINOMROUCMIEA-FGVHQWLLSA-N (2s,4r)-4-[(3r,5s,6r,7r,8s,9s,10s,13r,14s,17r)-6-ethyl-3,7-dihydroxy-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]-2-methylpentanoic acid Chemical compound C([C@@]12C)C[C@@H](O)C[C@H]1[C@@H](CC)[C@@H](O)[C@@H]1[C@@H]2CC[C@]2(C)[C@@H]([C@H](C)C[C@H](C)C(O)=O)CC[C@H]21 HSINOMROUCMIEA-FGVHQWLLSA-N 0.000 description 5
- 102100023172 Nuclear receptor subfamily 0 group B member 2 Human genes 0.000 description 5
- 108010045262 enhanced cyan fluorescent protein Proteins 0.000 description 5
- 108010003814 member 2 group B nuclear receptor subfamily 0 Proteins 0.000 description 5
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940121710 HMGCoA reductase inhibitor Drugs 0.000 description 4
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 4
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 4
- 239000002471 hydroxymethylglutaryl coenzyme A reductase inhibitor Substances 0.000 description 4
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 4
- 229940126585 therapeutic drug Drugs 0.000 description 4
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 4
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 3
- 108010093662 Member 11 Subfamily B ATP Binding Cassette Transporter Proteins 0.000 description 3
- 108020005497 Nuclear hormone receptor Proteins 0.000 description 3
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 3
- 102000006255 nuclear receptors Human genes 0.000 description 3
- 108020004017 nuclear receptors Proteins 0.000 description 3
- 229940043274 prophylactic drug Drugs 0.000 description 3
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 3
- 238000003571 reporter gene assay Methods 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 102100028282 Bile salt export pump Human genes 0.000 description 2
- SMEROWZSTRWXGI-UHFFFAOYSA-N Lithocholsaeure Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)CC2 SMEROWZSTRWXGI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100024640 Low-density lipoprotein receptor Human genes 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 230000001906 cholesterol absorption Effects 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 2
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- SMEROWZSTRWXGI-HVATVPOCSA-N lithocholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)CC1 SMEROWZSTRWXGI-HVATVPOCSA-N 0.000 description 2
- 229940096701 plain lipid modifying drug hmg coa reductase inhibitors Drugs 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 2
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 2
- CABVTRNMFUVUDM-VRHQGPGLSA-N (3S)-3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA Chemical compound O[C@@H]1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC(=O)NCCSC(=O)C[C@@](O)(CC(O)=O)C)O[C@H]1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 CABVTRNMFUVUDM-VRHQGPGLSA-N 0.000 description 1
- 0 *c1cccc(*)c1* Chemical compound *c1cccc(*)c1* 0.000 description 1
- 108020004463 18S ribosomal RNA Proteins 0.000 description 1
- MBYNDKVOZOAOIS-FPLPWBNLSA-N 2-(10-heptadecenyl)-6-hydroxybenzoic acid Chemical compound CCCCCC\C=C/CCCCCCCCCC1=CC=CC(O)=C1C(O)=O MBYNDKVOZOAOIS-FPLPWBNLSA-N 0.000 description 1
- -1 8-pentadecenyl ginkgolic acid 15: 1 Chemical compound 0.000 description 1
- 206010003210 Arteriosclerosis Diseases 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010008635 Cholestasis Diseases 0.000 description 1
- 108090000943 Cholesterol 7-alpha-monooxygenases Proteins 0.000 description 1
- 102000004410 Cholesterol 7-alpha-monooxygenases Human genes 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 208000000563 Hyperlipoproteinemia Type II Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 108010001831 LDL receptors Proteins 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150078416 RXR gene Proteins 0.000 description 1
- 108700008625 Reporter Genes Proteins 0.000 description 1
- 102000034527 Retinoid X Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010038912 Retinoid X Receptors Proteins 0.000 description 1
- 101100221606 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) COS7 gene Proteins 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 206010045261 Type IIa hyperlipidaemia Diseases 0.000 description 1
- 229940127226 anticholesterol agent Drugs 0.000 description 1
- 208000011775 arteriosclerosis disease Diseases 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 230000007870 cholestasis Effects 0.000 description 1
- 231100000359 cholestasis Toxicity 0.000 description 1
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 description 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 230000010235 enterohepatic circulation Effects 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 201000001386 familial hypercholesterolemia Diseases 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 208000031225 myocardial ischemia Diseases 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 1
- 230000022532 regulation of transcription, DNA-dependent Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 1
- 101150096065 shp gene Proteins 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 1
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091005957 yellow fluorescent proteins Proteins 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
【課題】より強力な高脂血症治療剤を提供すること。
【解決手段】ＦＸＲ活性を有する下記の式（１）で示される化合物を用いることにより達成する。
【化１】
式中Ｒ１は水素、アシル基、アルキル基、アリール基から選ばれる官能基、Ｒ２
は水素、アルキル基、アリール基から選ばれる官能基を示し、Ｒ３はアルキル基、
アルキニル基、アルケニル基から選ばれる官能基を示す。
【選択図】 図１
【解決手段】ＦＸＲ活性を有する下記の式（１）で示される化合物を用いることにより達成する。
【化１】
式中Ｒ１は水素、アシル基、アルキル基、アリール基から選ばれる官能基、Ｒ２
は水素、アルキル基、アリール基から選ばれる官能基を示し、Ｒ３はアルキル基、
アルキニル基、アルケニル基から選ばれる官能基を示す。
【選択図】 図１
Description
本発明は、高脂血症治療剤及び肝内胆汁うっ滞症治療剤として有用なFXR（farnesoid X receptor）転写活性調節剤に関する。
高脂血症は、遺伝性、もしくは不適切な食事や運動不足が原因で、血中の脂質が過剰となり、動脈硬化を引き起こして虚血性心疾患などの様々な成人病をもたらす。
一方核内レセプターは、リガンドの結合により活性化され、標的遺伝子の発現を制御する転写因子であり、様々な生理現象に重要な役割を果たしている。1999年に、核内レセプターの一員であるFXRのリガンドが、ケノデオキシコール酸（CDCA）をはじめとする胆汁酸分子であり、CDCAによりFXRの転写活性が増強されることが示された（非特許文献１，２，３）。
胆汁酸はコレステロールより合成されるが、この転換は最終産物である胆汁酸により抑制される。胆汁酸により活性化されるFXRは律速酵素であるコレステロール7αヒドロキシラーゼ（CYP7A1）の遺伝子発現を抑制することにより、このフィードバック制御を担っている。FXRを欠損したマウスでは、血中コレステロール、胆汁酸、トリグリセリド等の上昇をきたすことが明らかとなった(非特許文献４)。胆汁酸は腸管からのコレステロール吸収を促進するため、FXR欠損マウスでは、コレステロールの胆汁酸への転換は促進されるものの、胆汁酸生合成量の増加により、腸管からのコレステロール吸収が促進されたためと考えられる。また、FXRの活性化が血清トリグリセリドの低下を引き起こすという報告もされている（非特許文献５）。したがって、FXRの活性化剤には血清トリグリセリド、コレステロール低下作用が期待され、高脂血症の予防治療薬の有力な候補となる。
また、FXR活性化剤は肝内胆汁うっ滞症の治療薬としても有用である(非特許文献６)。肝内胆汁うっ滞症は肝臓内で胆汁の流れが滞り、肝細胞が壊れていく病気である。FXRは、胆汁酸の胆汁中への排泄を担い腸肝循環に重要な遺伝子であるbile salt export pump遺伝子(BSEP)の発現を促進することから、FXRの活性化剤は肝内からの胆汁酸の排出を促し、肝内胆汁うっ滞を改善すると考えられる。
強力なFXRの生理的リガンドとして知られるケノデオキシコール酸(CDCA)は毒性をもつリトコール酸に代謝されるため、医薬品としての活用は困難である。しかし、胆汁酸とは異なる構造を持つ化合物は，毒性物質へ代謝されない高脂血症予防治療薬として期待される。
Makishima, M. et al., Science, 284, pp.1362-1365, 1999 Parks D. J. et al., Science, 284, pp.1365-1368, 1999 Wang,H. et al., Mol. Cell, 3, pp.543-553, 1999 Sinal et al., Cell 102, pp731-744, 2000 Maloney et al., J. Med. Chem. 43, pp.2971-2974, 2000 Liu et al., J. Clin. Invest, pp.1678-1687, 2003
Makishima, M. et al., Science, 284, pp.1362-1365, 1999 Parks D. J. et al., Science, 284, pp.1365-1368, 1999 Wang,H. et al., Mol. Cell, 3, pp.543-553, 1999 Sinal et al., Cell 102, pp731-744, 2000 Maloney et al., J. Med. Chem. 43, pp.2971-2974, 2000 Liu et al., J. Clin. Invest, pp.1678-1687, 2003
コレステロール低下剤としては、HMG-CoA還元酵素阻害剤が臨床上高い評価を受けている。しかしながら、高い血清コレステロール値を持つ家族性高コレステロール血症の患者、あるいは冠動脈疾患をもつ患者に対し、目標とする低レベルの血清コレステロール値まで下げるには十分な効果を有しておらず、このような患者にも有効な、より強力な高脂血症治療剤が望まれている。
HMG-CoA還元酵素阻害剤の主な作用メカニズムは間接的なLDL受容体の発現増強作用にあると考えられている。しかしながら、その作用には限界があり、血清コレステロールの濃度に下げ止まりがあることも事実である。そこでHMG-CoA還元酵素阻害剤とは異なる作用メカニズムの医薬品を開発する事により、単独またはHMG-CoA還元酵素阻害剤との併用により強力な血清コレステロール低下作用を示すことが期待できる。FXRの活性化剤はHMG-CoAとは異なる作用メカニズムを持つため有用なコレステロール低下薬となりうる。さらにFXRの活性化剤には血清トリグリセリドを低下させる働きがあることからも、高脂血症予防治療薬として期待が持たれる。
本発明はレポータージーンアッセイを用いギンコール酸がFXR活性化作用をもつことを発見する事により完成に至った。すなわち本発明は下記の式(1)に示した化合物（１）がFXR活性化作用をもつことに基づくものである。
式中、Ｒ１は水素原子、アシル基、アルキル基、アリール基から選ばれる官能
基、Ｒ２は水素原子、アルキル基、アリール基から選ばれる官能基を示し、
Ｒ３はアルキル基、アルキニル基、アルケニル基から選ばれる官能基を示す。
本化合物は、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム等の薬学的
に許容される塩である場合を含む。
基、Ｒ２は水素原子、アルキル基、アリール基から選ばれる官能基を示し、
Ｒ３はアルキル基、アルキニル基、アルケニル基から選ばれる官能基を示す。
本化合物は、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム等の薬学的
に許容される塩である場合を含む。
上記化合物は、FXRの転写活性調節を行うことにより血清トリグリセリド、コレステロール低下作用が期待される。また、これら化合物は胆汁酸とは異なる構造をもつ化合物であり、毒性を持つリトコール酸に代謝されることが無い。従って、効果的な高脂血症予防治療薬として期待できる。また、FXRの活性化はBSEPの転写を促進し肝内胆汁うっ滞症の予防治療薬としても有効である。
化学式で表される化合物およびその塩は、これを医薬として用いるにあたり経口的または非経口的に投与することができる。すなわち通常用いられる投与形態、例えば錠剤、カプセル剤、シロップ剤、懸濁液等の形で経口的に投与することができ、あるいはその溶液、乳剤、懸濁液等の液剤の形にしたものを注射の形で非経口投与することができる。坐剤の形で直腸投与することもできる。また、前記の適当な投与剤形は許容される通常の担体、賦形剤、結合剤、安定剤などに活性化合物を配合することにより製造することができる。また、注射剤として用いる場合には許容される緩衝剤、溶解補助剤、等張剤等を添加することもできる。また、本発明の化合物の投与量は、通常1~50mg/体重kgであり、好ましくは5~30mg/体重kgである。投与対象は、哺乳動物であり、通常ヒトである。
(実施例１)レポータージーンアッセイによるFXR活性化化合物の評価
FXRはリガンドと結合しFXR結合配列(FXRE)に結合することにより下流の遺伝子の転写促進を行う。FXR結合配列(FXRE)下にCMV promoterの3'側201 bpと enhanced yellow fluorescent protein (EYFP)遺伝子をつないだプラスミド (レポータープラスミド)とSV40 promoter下にenhanced cyan fluorescent protein (ECFP)遺伝子をつないだプラスミド(内部標準測定用プラスミド)、核内受容体発現用プラスミドとしてRXR遺伝子を有するプラスミド及びFXR遺伝子を有するプラスミドの4種をCOS7細胞に導入した。この細胞の培養液中に被験化合物を添加し、約40時間後に培地を除きPBSでwashした後EYFPとECFPの蛍光を測定した。細胞内へのプラスミドの導入効率等の補正を行うために、内部標準として測定したECFPの蛍光値でEYFPの蛍光値の補正を行った。すなわちFXRの転写活性は(EYFPの蛍光値) / (ECFPの蛍光値)の値により評価を行った。
FXRはリガンドと結合しFXR結合配列(FXRE)に結合することにより下流の遺伝子の転写促進を行う。FXR結合配列(FXRE)下にCMV promoterの3'側201 bpと enhanced yellow fluorescent protein (EYFP)遺伝子をつないだプラスミド (レポータープラスミド)とSV40 promoter下にenhanced cyan fluorescent protein (ECFP)遺伝子をつないだプラスミド(内部標準測定用プラスミド)、核内受容体発現用プラスミドとしてRXR遺伝子を有するプラスミド及びFXR遺伝子を有するプラスミドの4種をCOS7細胞に導入した。この細胞の培養液中に被験化合物を添加し、約40時間後に培地を除きPBSでwashした後EYFPとECFPの蛍光を測定した。細胞内へのプラスミドの導入効率等の補正を行うために、内部標準として測定したECFPの蛍光値でEYFPの蛍光値の補正を行った。すなわちFXRの転写活性は(EYFPの蛍光値) / (ECFPの蛍光値)の値により評価を行った。
式(1)中、R1=H、R2=8-pentadecenylであるギンコール酸15:1(式(2)の化合物)、及び、式(1)中、R1=H、R2=10-heptadecenylであるギンコール酸17:1(式(3)の化合物)処理により、FXR転写活性の促進が引き起こされた（図１）。これらの活性化は同濃度のCDCAと同等もしくは高い率であった。なお、これらの化合物はRXRの活性化は引き起こさずFXRを活性化する事により、レポータージーンの発現を上昇させた。
(実施例2)定量的RT-PCR
CYP7Ａ1 mRNAの発現量抑制及びsmall heterodimer partner(SHP) mRNAの発現量増加を定量的PCRで測定した。SHP遺伝子はFXRの活性化により転写促進されることが明らかとなっており、CYP7A1と同様にFXR活性化の指標として使用できる。肝癌由来培養細胞であるHepG2を10% FCSを含むDMEM培地で培養した。培地を10%活性炭処理FCSを含むフェノールレッド不含DMEMに交換後、さらに6時間後に被験物質及び10%活性炭処理FCSを含むフェノールレッド不含DMEMに置換し培養を行った。24時間後細胞を回収し、RNeasy kit (QIAGEN)を用いてRNAの抽出を行った。得られたRNAを用い、TaqMan PCR法によりCYP7A1及びSHP mRNAの定量を行った。各試料は18s rRNAを用いてRNA濃度の補正を行った。
CYP7Ａ1 mRNAの発現量抑制及びsmall heterodimer partner(SHP) mRNAの発現量増加を定量的PCRで測定した。SHP遺伝子はFXRの活性化により転写促進されることが明らかとなっており、CYP7A1と同様にFXR活性化の指標として使用できる。肝癌由来培養細胞であるHepG2を10% FCSを含むDMEM培地で培養した。培地を10%活性炭処理FCSを含むフェノールレッド不含DMEMに交換後、さらに6時間後に被験物質及び10%活性炭処理FCSを含むフェノールレッド不含DMEMに置換し培養を行った。24時間後細胞を回収し、RNeasy kit (QIAGEN)を用いてRNAの抽出を行った。得られたRNAを用い、TaqMan PCR法によりCYP7A1及びSHP mRNAの定量を行った。各試料は18s rRNAを用いてRNA濃度の補正を行った。
コントロールとして使用したDMSO 0.1%処理との比較の結果、ギンコール酸は30 μMでCYP7A1 mRNAの発現を約70%抑制し、SHP mRNAの発現を約2倍に上昇させた。これより、これら化合物がFXRの活性化を引き起こし下流の遺伝子の発現量を調整することが明らかとなった。
Claims (4)
- 下記の式（１）で示されるギンコール酸又はその誘導体を用いることを特徴とするFXRの活性化法。
は水素、アルキル基、アリール基から選ばれる官能基を示し、Ｒ３はアルキル基、
アルキニル基、アルケニル基から選ばれる官能基を示す。 - 下記の式（１）で示されるギンコール酸又はその誘導体を用いることを特徴とするコレステロール低下薬。
は水素、アルキル基、アリール基から選ばれる官能基を示し、Ｒ３はアルキル基、
アルキニル基、アルケニル基から選ばれる官能基を示す。 - 下記の式（１）で示されるギンコール酸又はその誘導体を用いることを特徴とする高脂血症予防治療薬。
は水素、アルキル基、アリール基から選ばれる官能基を示し、Ｒ３はアルキル基、
アルキニル基、アルケニル基から選ばれる官能基を示す。 - 下記の式（１）で示されるギンコール酸又はその誘導体を用いることを特徴とする肝内胆汁うっ滞症予防治療薬。
は水素、アルキル基、アリール基から選ばれる官能基を示し、Ｒ３はアルキル基、
アルキニル基、アルケニル基から選ばれる官能基を示す。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2004094274A JP2005281155A (ja) | 2004-03-29 | 2004-03-29 | Ｆｘｒ活性化を介したコレステロールホメオスタシス関連遺伝子転写活性調節剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2004094274A JP2005281155A (ja) | 2004-03-29 | 2004-03-29 | Ｆｘｒ活性化を介したコレステロールホメオスタシス関連遺伝子転写活性調節剤 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2005281155A true JP2005281155A (ja) | 2005-10-13 |
Family
ID=35179934
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2004094274A Pending JP2005281155A (ja) | 2004-03-29 | 2004-03-29 | Ｆｘｒ活性化を介したコレステロールホメオスタシス関連遺伝子転写活性調節剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2005281155A (ja) |
Cited By (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP2399988A2 (en) | 2006-08-11 | 2011-12-28 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Cell culture system for replication of HCV through the farnesoid X receptor (FXR) activation or inhibition and diagnostic method for HCV infection |
| CN103159612A (zh) * | 2011-12-15 | 2013-06-19 | 张加明 | 从银杏外种皮中提取银杏酸的工业化生产技术 |
| CN108451970A (zh) * | 2018-04-03 | 2018-08-28 | 徐州工程学院 | 一种提取银杏叶多糖的方法 |
| WO2018178260A1 (en) | 2017-03-30 | 2018-10-04 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Methods and pharmaceutical compositions for reducing persistence and expression of episomal viruses |
| CN110540955A (zh) * | 2019-08-28 | 2019-12-06 | 北京协同创新研究院 | 一种提高分化细胞中nrob2基因表达量的方法 |
| EP3711762A1 (en) | 2013-09-11 | 2020-09-23 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | A farnesoid x receptor agonsits foruse and pharmaceutical compositions for the treatment of chronic hepatitis b virus infection |
| WO2021009332A1 (en) | 2019-07-18 | 2021-01-21 | Enyo Pharma | Method for decreasing adverse-effects of interferon |
| WO2021144330A1 (en) | 2020-01-15 | 2021-07-22 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Use of fxr agonists for treating an infection by hepatitis d virus |
| WO2022152770A1 (en) | 2021-01-14 | 2022-07-21 | Enyo Pharma | Synergistic effect of a fxr agonist and ifn for the treatment of hbv infection |
| WO2022229302A1 (en) | 2021-04-28 | 2022-11-03 | Enyo Pharma | Strong potentiation of tlr3 agonists effects using fxr agonists as a combined treatment |
-
2004
- 2004-03-29 JP JP2004094274A patent/JP2005281155A/ja active Pending
Cited By (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP2399575A2 (en) | 2006-08-11 | 2011-12-28 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Methods, uses and compositions for treatment of an infection by a virus of the family of flaviviridae through the farnesoid X receptor (FXR) inhibition |
| EP2399988A2 (en) | 2006-08-11 | 2011-12-28 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Cell culture system for replication of HCV through the farnesoid X receptor (FXR) activation or inhibition and diagnostic method for HCV infection |
| CN103159612A (zh) * | 2011-12-15 | 2013-06-19 | 张加明 | 从银杏外种皮中提取银杏酸的工业化生产技术 |
| EP3711762A1 (en) | 2013-09-11 | 2020-09-23 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | A farnesoid x receptor agonsits foruse and pharmaceutical compositions for the treatment of chronic hepatitis b virus infection |
| WO2018178260A1 (en) | 2017-03-30 | 2018-10-04 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Methods and pharmaceutical compositions for reducing persistence and expression of episomal viruses |
| CN108451970A (zh) * | 2018-04-03 | 2018-08-28 | 徐州工程学院 | 一种提取银杏叶多糖的方法 |
| CN108451970B (zh) * | 2018-04-03 | 2021-03-02 | 徐州工程学院 | 一种提取银杏叶多糖的方法 |
| WO2021009332A1 (en) | 2019-07-18 | 2021-01-21 | Enyo Pharma | Method for decreasing adverse-effects of interferon |
| CN110540955A (zh) * | 2019-08-28 | 2019-12-06 | 北京协同创新研究院 | 一种提高分化细胞中nrob2基因表达量的方法 |
| CN110540955B (zh) * | 2019-08-28 | 2021-09-17 | 北京协同创新研究院 | 一种提高分化细胞中nrob2基因表达量的方法 |
| WO2021144330A1 (en) | 2020-01-15 | 2021-07-22 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Use of fxr agonists for treating an infection by hepatitis d virus |
| WO2022152770A1 (en) | 2021-01-14 | 2022-07-21 | Enyo Pharma | Synergistic effect of a fxr agonist and ifn for the treatment of hbv infection |
| WO2022229302A1 (en) | 2021-04-28 | 2022-11-03 | Enyo Pharma | Strong potentiation of tlr3 agonists effects using fxr agonists as a combined treatment |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Wamil et al. | Inhibition of 11ß-hydroxysteroid dehydrogenase type 1 as a promising therapeutic target | |
| Phelps et al. | The influence of biological sex and sex hormones on bile acid synthesis and cholesterol homeostasis | |
| Colapietro et al. | PPAR agonists for the treatment of primary biliary cholangitis: old and new tales | |
| Quinet et al. | LXR ligand lowers LDL cholesterol in primates, is lipid neutral in hamster, and reduces atherosclerosis in mouse | |
| JP6594400B2 (ja) | 肝障害を処置するための１，３−ジフェニルプロパ−２−エン−１−オン誘導体の使用 | |
| JP4825977B2 (ja) | Ｆｘｒ活性化を介したコレステロールホメオスタシス関連遺伝子転写活性調節剤 | |
| Wagner et al. | CAR and PXR agonists stimulate hepatic bile acid and bilirubin detoxification and elimination pathways in mice | |
| JP6564372B2 (ja) | バルドキソロンメチルまたはその類似体を使用して内皮機能障害を処置および予防する方法 | |
| EP3263134B1 (en) | Composition for preventing or treating valve calcification, containing dpp-4 inhibitor | |
| JPWO2017170434A1 (ja) | Ｆｘｒアゴニストとａｒｂの組み合わせ医薬 | |
| Liang et al. | Knockdown of growth-arrest specific transcript 5 restores oxidized low-density lipoprotein-induced impaired autophagy flux via upregulating miR-26a in human endothelial cells | |
| EP1978947A2 (en) | Use of nitrooxyderivative of drug for the treatment of muscular dystrophies | |
| JP2005281155A (ja) | Ｆｘｒ活性化を介したコレステロールホメオスタシス関連遺伝子転写活性調節剤 | |
| Roche et al. | Impact of soluble epoxide hydrolase inhibition on early kidney damage in hyperglycemic overweight mice | |
| CN1338944A (zh) | 用于心血管适应症的胆固醇酯转移蛋白抑制剂和苯氧异丁酸类衍生物的联合形式 | |
| JP2009534391A (ja) | 体重減少の誘発およびｐｔｐ１ｂの選択的阻害 | |
| JP2006524697A (ja) | アルドステロン受容体拮抗薬と抗肥満剤の組合せ | |
| JPWO2005092328A1 (ja) | Ｆｘｒ活性化化合物 | |
| AU2020201980A1 (en) | Combination of FXR agonists | |
| Tran et al. | Inhibition of Jumonji demethylases reprograms severe dilated cardiomyopathy and prolongs survival | |
| WO2001060355A1 (en) | Modulation of bone formation | |
| JP2019532048A (ja) | Ｆｘｒアゴニストの新規のレジーム | |
| Chandalia et al. | MBX‐102/JNJ39659100, a novel non‐TZD selective partial PPAR‐γ agonist lowers triglyceride independently of PPAR‐α activation | |
| JP2021533190A (ja) | ＬＤＬコレステロールの細胞内クリアランスを増強しかつスタチンとの併用療法で効力を高めかつ副作用を減らすための、カルバメートβフェニルエタノールアミン類似体の新規使用法 | |
| EP3400071A1 (en) | Novel compounds which activate estrogen receptors and compositions and methods of using the same |