JP2008516904A

JP2008516904A - Ｃｄｋ１阻害剤としてのキナゾリニルメチレンチアゾリノン

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Publication number: JP2008516904A
Application number: JP2007536045A
Authority: JP
Inventors: チェン，リー; チェン，シャオキン; リウ，ジン−ジュン
Original assignee: F Hoffmann La Roche AG
Current assignee: F Hoffmann La Roche AG
Priority date: 2004-10-14
Filing date: 2005-10-05
Publication date: 2008-05-22
Also published as: US20060084804A1; CN101039939A; US7501428B2; CN101039939B; BRPI0518164A; KR100890533B1; MX2007004274A; RU2405782C2; AU2005293832A1; EP1802614A1; RU2007117766A; KR20070053343A; CA2583311A1; WO2006040050A1

Abstract

本発明は、Ｒ₁、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｘ及びｎが上記で定義した意味を有する、式（Ｉ）のキナゾリンチアゾリノン誘導体を開示し、これはＣＤＫ１抗増殖活性を実証し、抗癌剤として有用である。

Description

本発明の分野は、ＣＤＫ１抗増殖活性を示し、抗癌剤として有用なキナゾリンチアゾリノン誘導体に関する。

サイクリン依存キナーゼ（ＣＤＫ）は、細胞周期の異なる段階の間の移行、例えばＧ₁（有糸分裂と細胞分裂の新規のラウンドのためのＤＮＡ複製の開始の間のギャップ）における静止期からＳ（活発なＤＮＡ合成の期間）への進行、又はＧ₂からＭ期（ここでは、活発な有糸分裂及び細胞分裂が生じる）への進行の制御において重要な役割を果たすセリン−トレオニンタンパク質キナーゼである。（例えば、Ｓｃｉｅｎｃｅ，２７４：１６４３−１６７７（１９９６）及びＡｎｎ．Ｒｅｖ．ＣｅｌｌＤｅｖ．Ｂｉｏｌ．，１３：２６１−２９１（１９９７）に編集された論文を参照のこと）。ＣＤＫ複合体は、制御サイクリンサブユニット（例えば、サイクリンＡ、Ｂ１、Ｂ２、Ｄ１、Ｄ２、Ｄ３及びＥ）と触媒キナーゼサブユニット（例えば、ＣＤＫ１、ＣＤＫ２、ＣＤＫ４、ＣＤＫ５及びＣＤＫ６）の連関により形成される。名前が示すように、ＣＤＫは、標的基質をリン酸化するのにサイクリンサブユニットへの完全な依存を示し、異なるキナーゼ／サイクリンの組は細胞周期の特異的な段階を通して進行を制御する働きをする。

上記から理解されるように、これらのタンパク質は、様々な細胞機能を制御するタンパク質（酵素）のクラスである。これは、基質タンパク質の構造変化をもたらすタンパク質基質上の特異的アミノ酸のリン酸化により達成される。この構造変化は、基質の活性又は他の結合パートナーと相互作用する能力を調節する。タンパク質キナーゼの酵素活性は、キナーゼが基質にリン酸基を加える程度を指す。それは、例えば時間の関数として生成物に変換された基質の量を決定することにより、測定することができる。基質のリン酸化は、タンパク質キナーゼの活性部位で生じる。

上記の特性の観点から、これらのキナーゼは、細胞増殖、細胞分化及び細胞移動をもたらす成長因子シグナル伝達の伝播において重要な役割を果たす。線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）及び血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）は、腫瘍促進血管形成の重要なメディエーターとして認識されてきた。ＶＥＧＦは、２つの高親和性受容体（その１つは、キナーゼインサートドメイン含有受容体（ＫＤＲ）である）を介したシグナル伝達により内皮細胞を活性化する。（ＨｅｎｎｅｑｕｉｎＬ．Ｆ．ｅｔ．ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４５（６）：１３００（２００２）を参照のこと）。ＦＧＦは、ＦＧＦ受容体（ＦＧＦＲ）を介したシグナル伝達により内皮細胞を活性化する。固形腫瘍は、成長するのに新生血管の形成（血管形成）に依存する。従って、成長シグナル伝達を妨害する受容体ＦＧＦＲ及びＫＤＲの阻害剤は、固形腫瘍の予防及び処置において有用な薬剤である。（ＫｌｏｈｓＷ．Ｅ．ｅｔ．ａｌ．ＣｕｒｒｅｎｔＯｐｉｎｉｏｎｉｎＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１０：５４４（１９９９）を参照のこと）。

ＣＤＫ、例えばＣＤＫ１は、細胞分裂の一般的なアクチベーターとして働くので、ＣＤＫ１の阻害剤は抗増殖剤として有用であり得る。これらの阻害剤は、無秩序な細胞周期進行の抑制における治療的介入の開発に用いることができる。

本発明によれば、式Ｉの化合物

｛式中、
Ｒ₁は、水素、低級アルキル又は

であり；
Ｘは、低級アルキレン、３〜６個の炭素原子を含むシクロ低級アルキレン及びヒドロキシ低級アルキレンから選択され；

は、
アリール環、
３〜６個の炭素原子を含むシクロアルキル環、
３〜５個の炭素原子並びに酸素、窒素及び硫黄から成る群から選択される１〜２個のヘテロ原子を含む、４〜６員ヘテロシクロアルキル環、及び
酸素、硫黄及び窒素から成る群から選択される１〜２個のヘテロ原子を含む５又は６員芳香族複素環、から選択され；
Ｒ₅及びＲ₆は、独立に、水素、ヒドロキシ、ヒドロキシ−低級アルキル、低級アルキル、ハロゲン、ペルフルオロ−低級アルキル及び低級アルコキシから成る群から選択され；
Ｒ₃は、水素、−ＮＨ−Ｒ₇及び−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ₈から選択され；
Ｒ₄は、水素、低級アルキル及び−Ｏ（ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ）_y−Ｒ₁₀から選択され；
Ｒ₇は、水素又は低級アルキルであり；
Ｒ₈及びＲ₁₀は、低級アルキルであり；
ｎは、０〜１の整数であり；且つ
ｙは、０〜３の整数である；
ただし、ｎが０であってＲ₁が水素又は低級アルキルである場合、Ｒ₃/Ｒ₄は両方とも水素であることはできない｝、
又は、Ｒ₁が芳香族複素環中に窒素を含む場合の化合物のＮ−酸化物、Ｒ₁がヘテロシクロアルキル環又は芳香族複素環中に硫黄を含む場合のスルホン；
又は、その医薬として許容される塩が、ＣＤＫ、特にＣＤＫ１の活性を阻害することが発見された。このような薬剤を含むこれらの本発明の薬剤及び医薬組成物は、制御されない又は所望されない細胞増殖、例えば癌、自己免疫疾患、ウイルス性疾患、真菌病、神経変性障害及び循環器疾患に関連した様々な疾患又は疾病状態を処置するのに有用である。

ＣＤＫ、特にＣＤＫ１の活性を阻害及び／又は調節することは、式Ｉのこれらの化合物及びこれらの化合物を含む組成物を、癌、特に固形腫瘍、より詳細には肺癌、乳癌、結腸癌及び前立腺癌の処置における特に抗腫瘍剤として、キナーゼ活性により治療される疾患の処置に有用なものとする。

本明細書中で指摘するように、式Ｉの化合物は潜在的な抗増殖剤であり、ＣＤＫ、特にＣＤＫ１の活性の介在及び／又は阻害に有用であり、その結果癌或いは抑制されない又は異常な細胞増殖に関連した他の疾患を処置するための抗腫瘍剤を提供する。

本発明の１つの好ましい実施態様において、式Ｉの化合物
｛式中、
Ｒ₁は、水素又は

は、アリール環、３〜６個の炭素原子を含むシクロ低級アルキル環、３〜５個の炭素原子並びに酸素、窒素及び硫黄から成る群から選択される１〜２個のヘテロ原子を含む４〜６員ヘテロシクロアルキル環、並びに酸素、硫黄及び窒素から成る群から選択される１〜２個のヘテロ原子を含む５又は６員芳香族複素環から選択され；
Ｒ₅及びＲ₆は、独立に、水素、ヒドロキシ、ヒドロキシ−低級アルキル、低級アルキル、ハロゲン、ペルフルオロ−低級アルキル及び低級アルコキシから成る群から選択され；
Ｒ₃は、水素、−ＮＨＲ₇、及び−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ₈から選択され；
Ｒ₄は、水素、低級アルキル、及び−Ｏ（ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ）y−Ｒ₁₀から選択され；
Ｒ₇は、水素又は低級アルキルであり；
Ｒ₈及びＲ₁₀は低級アルキルであり；
ｎは、０〜１の整数であり；且つ
ｙは、０〜３の整数である；
ただし、ｎが０である場合、Ｒ₁、Ｒ₃及びＲ₄の１つは水素以外である｝
又は、Ｒ₁が芳香族複素環中に窒素を含む場合の化合物のＮ−酸化物、Ｒ₁がヘテロシクロアルキル環又は芳香族複素環中に硫黄を含む場合のスルホン、
又は、その医薬として許容される塩が提供される。

式Ｉの好ましい化合物は、ｎが０の化合物である。これらの化合物は、以下の式の化合物

｛式中、
Ｒ₁’は、水素又は低級アルキルであり；
Ｒ₄’は、低級アルキル又は−Ｏ（ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ）y−Ｒ₁₀であり；且つ
Ｒ₃、Ｒ₁₀及びｙは、上記の通りである｝、
又は、その医薬として許容される塩を含む。

ｎが０の式Ｉの化合物は、以下の式の化合物

｛式中、
Ｒ₁”は、

であり；
Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆及び

は、上記の通りである｝、
又は、Ｒ₁”が芳香族複素環中に窒素を含む場合の化合物のＮ−酸化物、Ｒ₁”がヘテロ環又は芳香族複素環中に硫黄を含む場合のスルホン；
又は、その医薬として許容される塩も含む。

式Ｉの化合物中のｎが１である場合、この化合物は、以下の式

｛式中、
Ｒ₁”、Ｘ、Ｒ₃、Ｒ₄及び

は、上記の通りである｝、
又は、Ｒ₁”が芳香族複素環中に窒素を含む場合の化合物のＮ−酸化物、Ｒ₁”がヘテロ環又は芳香族複素環中に硫黄を含む場合のスルホン；
又は、その医薬として許容される塩を有する。

Ｒ₁及びＲ₁”がアリール部分を含む置換基である場合の化合物Ｉ、Ｉ−Ｂ及びＩ−Ｃにおいて、好ましいアリール部分はフェニルである。本明細書中で用いる場合、ハロゲンとしては、４つの全てのハロゲン、例えば塩素、フッ素、臭素及びヨウ素が挙げられる。

本明細書中で用いる場合、「低級アルキル」という用語（単独又は組み合わせにおいて）は、１〜６個の炭素原子を含む一価の直鎖又は分岐鎖の飽和炭化水素アルキル基、例えばメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシルなどを意味する。

「シクロアルキル」という用語は、一価の非置換の３−から６−員飽和炭化水素環を指す、シクロ−低級アルキル置換基を意味する。好ましいシクロアルキル置換基は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルなどである。

「低級アルコキシ」という用語は、上記で定義した低級アルキルから形成される直鎖又は分岐鎖−Ｏ−低級アルキル基、例えばメトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシなどを意味する。

「アリール」という用語は、一価の単環又は二環式の非置換芳香族炭化水素環、例えばフェニル又はナフチルを意味し、フェニルが好ましい。

「ヘテロシクロアルキル」という用語は、３〜４個の炭素原子並びに酸素、窒素及び硫黄から成る群から選択される１又は２個のヘテロ原子を含む、４〜６員単環式飽和環を指す。好ましい複素環アルキル基には、モルホリニル（ｍｏｐｈｏｌｉｎｙｌ）、テトラヒドロ、チオピラニル又はテトラヒドロピラニルなどが含まれる。

「芳香族複素環」という用語は、４〜５個の炭素原子並びに酸素、窒素及び硫黄から成る群から選択される１〜２個のヘテロ原子を含む、一価の５又は６員単環式芳香族複素環を指す。好ましい芳香族複素環基には、チオフェニル（ｔｈｉｏｐｅｎｙｌ）、チアゾール（ｔｈｉｏａｚｏｌｅ）、ピリジニル、フラニルなどが含まれる。

「低級アルキレン」という用語は、１〜６個の炭素原子を含む、二価の飽和の直鎖又は分岐鎖の炭化水素置換基を指す。

「ヒドロキシ−低級アルキレン」という用語は、ヒドロキシ基で置換、好ましくは一置換された、上記で定義した低級アルキレン置換基を指す。同様に、「アミド−低級アルキレン」を用いる場合、これは、アミド置換基で置換された上記の低級アルキレン置換基を指す。

「シクロ低級アルキレン」又は「シクロアルキレン」という用語は、二価の非置換の３〜６員飽和炭化水素環を指す。好ましいシクロアルキレン置換基は、二価のシクロプロピル及びシクロブチルである。

「ペルフルオロ−低級アルキル」という用語は、上記の任意の低級アルキル基を意味し、ここで低級アルキル基の全ての水素はフッ素により置換又は置き換えられる。好ましいペルフルオロ−低級アルキル基は、トリフルオロメチル、ペンタフルオロエチル、ヘプタフルオロプロピルなどであり、トリフルオロメチルが特に好ましい。

「医薬として許容される塩」という用語は、適切な無毒性の有機酸、無機酸、有機塩基又は無機塩基から形成される、式Ｉ、Ｉ−Ａ及びＩ−Ｃの化合物の生物学的有効性及び特性を保持した、通常の酸付加塩又は塩基付加塩を指す。酸付加塩の例としては、無機酸、例えば塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸及び硝酸から誘導されたもの、並びに有機酸、例えばｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸、メタンスルホン酸、シュウ酸、コハク酸、クエン酸、マレイン酸、乳酸、フマル酸などから誘導されたものが挙げられる。塩基付加塩の例としては、アンモニウム、カリウム、ナトリウム及び、水酸化第４級アンモニウム、例えば、水酸化テトラメチルアンモニウムから誘導されたものが挙げられる。医薬化合物（すなわち、薬剤）の塩への化学修飾は、化合物の物理的及び化学的安定性、吸湿性、流動性及び溶解性を改善するための薬学者に周知の技術である。例えば、Ｈ．Ａｎｓｅｌｅｔａｌ．，ＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＤｏｓａｇｅＦｏｒｍｓａｎｄＤｒｕｇＤｅｌｉｖｅｒｙＳｙｓｔｅｍｓ（６ｔｈＥｄ．１９９５）、ｐｐ．１９６及び１４５６−１４５７を参照のこと。

本発明によれば、式Ｉの化合物は以下の式の化合物から調製することができる

｛式中、Ｒ₃及びＲ₄は、上記の通りである｝。

式ＩＩの化合物は、以下の反応スキーム１により式Ｉの化合物へと変換することができる（ここで、Ｘ、Ｒ₁、Ｒ₃、Ｒ₄及びｎは、上記の通りである）。

本発明によれば、式ＩＩの化合物を、Ｋｎｏｅｖｅｎｅｇｅｌ反応により、式ＩＩＩ−Ａの化合物［ロダニン（２−チオ−４−チアゾリン−４−オン）］と反応させて、式ＩＶの化合物を生成する。Ｋｎｏｅｖｅｎｅｇｅｌ反応の実施における任意の通常の条件を、この縮合を実施する際に利用することができる。一般的に、この反応は、アルカリ金属酢酸塩及び酢酸の存在下において還流温度で実施する。

この合成の次の段階において、式ＩＶの得られた置換チアゾリジンをメチル化剤と反応させて、式ＩＶの化合物上のチオ基をメチル化し、式Ｖの化合物を生成する。好ましいメチル化剤は、ヨードメタンである。この反応は、有機アミン塩基、例えばジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ）中で実施する。この反応の実施において、温度及び圧力は重要でなく、この反応は室温及び大気圧で実施することができる。実際、この反応の実施において、チオ基のメチル化における任意の通常の条件を用いることができる。

この反応の次の段階において、式Ｖの化合物を式ＶＩの化合物と反応させて、式Ｉの化合物を生成する。式ＶＩの化合物はアミンであり、メチルチオ基のアミン置換に通常用いられる任意の手段を、この反応の実施に用いることができる。１つの実施態様によれば、この置換は、通常の溶媒、例えばアセトニトリルの存在下で、式ＶＩの化合物を式Ｖの化合物と反応させることにより実施する。一般的に、この反応は、アミン塩基、例えばジイソプロピルエチルアミンの存在下で実施する。

一方で、式Ｉの化合物は、式ＩＩの化合物を以下の式の化合物と反応させることにより調製することができる

｛式中、Ｒ₁は上記の通りである｝。

式Ｉの化合物を生成するための式ＶＩＩの化合物の式ＩＩの化合物との反応は、閉鎖系において、１００℃〜２００℃の高い温度で、有機溶媒、例えばベンゼン又はトルエン中で実施する。この方法において、この反応は、高温及び高圧下で実施する。式ＶＩＩの化合物は、以下の式の化合物を

｛式中、Ｒ₁、Ｘ及びｎは上記の通りである｝、
式ＩＩＩ−Ａの化合物と反応させることによる直接的な置換により、直接的に形成することができる。この置換反応は、一般的に、アクチベーター及びアミン塩基の存在下で実施する。好ましいアクチベーターは、塩化第二水銀である。この反応は、不活性有機溶媒中で実施する。任意の通常の不活性有機溶媒、例えばアセトニトリル、塩化メチレンなどを用いることができる。この反応の実施においては、アミン塩基、例えばジイソプロピルエチルアミンを用いる。この反応の実施において、温度及び圧力は重要でなく、この反応は室温及び大気圧で実施することができる。この反応の実施において、メルカプト基を置換する任意の通常の方法を用いることができる。

本発明の実施態様によれば、式ＩＩの化合物（Ｒ₄は−Ｏ（ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ）_y−Ｒ₁₀であり、Ｒ₁₀及びｙは上記の通りである）は、以下の式を有する

｛式中、Ｒ₃、Ｒ₁₀及びｙは上記の通りである｝。

式ＩＩ−Ａの化合物は、以下の式の化合物

から、以下の式の化合物と反応させ

｛式中、Ｒ₁₀及びｙは上記の通りである｝、

｛式中、Ｒ₁₀、Ｒ₃及びｙは上記の通りである｝
を生成することにより、調製することができる。

式ＸＩＩの化合物を生成するための、式Ｘの化合物の式ＸＩの化合物との反応は、エーテルを生成するための塩化物をアルカリ金属アルコキシドと反応させる通常の手段により実施する。塩化物をアルカリ金属アルコキシドと反応させる任意の通常の手段は、式ＸＩＩの化合物を形成するのに用いることができる。式ＩＩ−Ａの化合物を生成するためのこの反応の次の段階では、フェニル環上でブロモ基をＣＨＯ置換基に変換するホルミル化反応を用いる。この反応は、６０〜１００℃の温度で、触媒として酢酸パラジウムを用いて、ジフェニルプロピルホスフィン（ｄｐｐ）及び塩基の存在下で、式ＸＩの化合物を一酸化炭素と反応させることにより実施する。この反応の実施においては、一般的に７０〜８０ｐｓｉの圧力が用いられる。一酸化炭素との反応によるフェニル環上でハロゲン化物基を変換するためのホルミル化反応の任意の通常の方法を、この変換の実施に用いることができる。

式Ｘの化合物のＲ₃が−ＮＨＲ₇である場合、この化合物は以下の式を有する

｛式中、Ｒ₇は上記の通りである｝。

式Ｘ−Ａの化合物は、以下の式の化合物から調製することができ、

式ＸＶの化合物（式のこの化合物の合成は、実施例１２ｂに記載する）を以下の式の化合物と反応させることによって

｛式中、Ｒ₇は上記の通りである｝、
以下の式の化合物を生成する

｛式中、Ｒ₇は上記の通りである｝
（これは、式Ｘ−Ａの化合物へと変換することができる）。

式ＸＶの化合物は、式ＸＶの化合物を式ＸＶＩの化合物と反応させることにより、式ＸＶＩＩの化合物へと変換する。この反応は、不活性溶媒の存在下で、式ＸＶＩの化合物を式ＸＶの化合物に添加することにより実施する。任意の通常の不活性溶媒、例えばアセトニトリル及び水は、反応媒質として用いることができる。この反応は、得られた混合物を加熱して還流することにより実施することができる。式ＸＶＩＩの化合物は、通常の塩素化剤、例えばオキシ塩化リンと処理することにより、式Ｘ−Ａの化合物に変換することができる。この反応は、一般的に窒素雰囲気下で、加熱して還流することにより実施される。

式ＸＶＩの化合物は、商業的に利用可能であり、或いはアルキル化試薬、例えばヨードメタンを用いて、それらの対応するチオ尿素（Ｒ₇−ＮＨ−Ｃ（＝Ｓ）−ＮＨ₂）から調製することができる。

式Ｉ、Ｉ−Ｂ及びＩ−Ｃの化合物において、Ｒ₃及びＲ₄が両方とも水素である化合物のクラスのもの、及びＲ₃が−ＮＨＲ₇であり、Ｒ₄が水素又は−Ｏ（ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ）_y−Ｒ₁₀である化合物のクラスのものが好ましい。

ｎが１であり、Ｒ₁及びＲ₁’がアリール環である化合物Ｉ及びＩ−Ｂにおいて、好ましい環は、Ｒ₅及びＲ₆として定義されたこの置換基により非置換又は置換されることのできるフェニルである。

式Ｉ−Ａの化合物の１つの実施態様は、Ｒ₁’が水素である化合物である。Ｒ₄’が−Ｏ（ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ）_y−Ｒ₁₀である化合物は、これらの化合物のクラスである。

本発明の別の実施態様は、ｎが０であり、

がフェニル又は１〜２個のヘテロ原子を含む芳香族複素環である式Ｉ−Ｂの化合物である。好ましい芳香族複素環は、２つのヘテロ原子を含み、１つが窒素であって、他方が硫黄である環であり、チアゾールが最も好ましい。別の好ましい芳香族複素環は、１つのヘテロ原子、好ましくは硫黄を含むものであり、チオフェンが特に好ましい。

ｎが１である式Ｉ−Ｂの化合物の別の実施態様によれば、Ｘが低級アルキレン置換基である化合物である。この実施態様は、Ｒ₁がフェニル又は置換フェニルであることができるフェニル環を含む化合物のクラスを含む。別のクラスの化合物は、ｎが１である化合物、及びＸが低級アルキレン置換基であり、Ｒ₁’が芳香族複素環である化合物である。好ましい芳香族複素環は、２つのヘテロ原子を含み、１つが窒素であって、他方が硫黄であるものであり、チアゾールが最も好ましい。別の好ましい芳香族複素環は、１つのヘテロ原子、好ましくは硫黄を含むものであり、チオフェンが特に好ましい。この好ましいクラスの化合物において、Ｒ₄は好ましくは−Ｏ（ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ）_y−Ｒ₁₀である。

ｎが１である式Ｉ−Ｂの化合物の別の実施態様は、Ｘがヒドロキシ−低級アルキレン置換基である化合物である。このクラスの化合物には、Ｒ₁が芳香族複素環である化合物が含まれる。好ましい芳香族複素環は、２つのヘテロ原子を含み、１つが窒素であって、他方が硫黄であるものであり、チアゾールが最も好ましい。別の好ましい芳香族複素環は、１つのヘテロ原子、好ましくは硫黄を含むものであり、チオフェンが特に好ましい。この好ましいクラスの化合物において、Ｒ₄は好ましくは−Ｏ（ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ）_y−Ｒ₁₀である。ｎが１であり、Ｘ’がヒドロキシ−低級アルキレン置換基である化合物の別の好ましいクラスは、Ｒ₁がフェニル又は置換フェニルであることができるフェニル環である化合物である。この好ましいクラスの化合物において、Ｒ₄は好ましくは−Ｏ（ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ）_y−Ｒ₁₀である。

本発明の医薬組成物は（或いは式Ｉの化合物に加えて）、活性成分として、医薬として許容されるプロドラッグ、医薬として活性な代謝物、及びそのような化合物及び代謝物の医薬として許容される塩を含んで成ることができる。このような化合物、プロドラッグ、多量体、塩及び代謝物は、本明細書中で時々、「活性剤」又は「薬剤」と集合的に称される。

固体の薬剤の場合、本発明の化合物及び塩が、異なる結晶形態又は多型形態で存在することができることは、当業者により理解され、それらの全ては、本発明及び特定された式の範囲内であることが意図される。

治療有効量の本発明の活性剤は、タンパク質キナーゼＣＤＫ１の調節又は制御により介在される疾病を処置するのに用いることができる。「有効量」は、真核生物細胞、例えば哺乳動物、昆虫、植物又は真菌細胞の増殖を顕著に阻害し、そして／或いは顕著に脱分化を防ぎ、示唆された利用、例えば具体的な治療的処置に対して効果的である薬剤の量を意味することが意図されている。

このような量に対応するであろう所定の薬剤の量は、具体的な化合物、疾病状態及びその重度、処置を必要とする対象又は宿主のアイデンティティー（例えば、体重）に依存して変わり得るが、その場合を取り囲む具体的な状況、例えば投与する具体的な薬剤、投与経路、処置条件、及び処置する対象又は宿主に従って当業界で知られた方法においてルーチンに決定することができる。「処置」は、ＣＤＫ１タンパク質キナーゼの活性により、少なくとも部分的に影響を受ける対象、例えば哺乳動物（例えば、ヒト）における疾病状態の少なくとも緩和を意味し、特に哺乳動物が疾病状態を有する傾向があることが見出されたが、それを有すると未だ診断されていない場合に、哺乳動物において生じた疾病状態を予防すること、疾病状態を調節及び／又は阻害すること、及び／又は疾病状態を軽減することが挙げられる。

本発明は、更に、本発明の薬剤を投与することにより、例えば哺乳動物の組織中のタンパク質キナーゼＣＤＫ１活性を調節又は阻害する方法を対象とする。抗増殖剤としての薬剤の活性は、ＭＴＴ試験において、例えば全細胞培養物を用いることにより、既知の方法によって容易に測定される。ＣＤＫ１タンパク質キナーゼ活性のモジュレーターとしての本発明の薬剤の活性は、当業者に利用可能な任意の方法、例えばインビボ及び／又はインビトロでの試験により測定することができる。活性測定に適した試験の例としては、国際公開番号ＷＯ９９／２１８４５、Ｐａｒａｓｔｅｔａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，３７，１６７８８−１６８０１（１９９８）、Ｃｏｎｎｅｌｌ−ＣｒｏｗｌｅｙａｎｄＨａｒｐｅｓ，ＣｅｌｌＣｙｃｌｅ、ＭａｔｅｒｉａｌｓａｎｄＭｅｔｈｏｄｓ，（ＭｉｃｈｅｌｅＰａｇａｎｏ，ｅｄ．Ｓｐｒｉｎｇｅｒ，Ｂｅｒｌｉｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）（１９９５）、国際公開番号ＷＯ９７／３４８７６、及び国際公開番号ＷＯ９６／１４８４３に記載されたものが挙げられる。これらの特性は、例えば以下の実施例に記載した１つ以上の生物学的試験手順を用いることにより評価することができる。

本発明の活性剤は、以下に記載する医薬組成物へと製剤化することができる。本発明の医薬組成物は、効果的な調節、制御又は阻害量の式Ｉの化合物、及び不活性な医薬として許容される担体又は希釈剤を含んで成る。医薬組成物の１つの実施態様において、有効レベルの本発明の薬剤は、抗増殖能力に関連する治療利益を提供するために調製される。「有効レベル」は、増殖が阻害又は抑制されるレベルを意味する。これらの組成物は、投与の様式に適した単位用量形態、例えば非経口又は経口投与において調製する。

本発明の薬剤は、通常の手順に従って、活性成分として、治療有効量の薬剤（例えば、式Ｉの化合物）を、適切な医薬担体又は希釈剤と混合することにより調製された通常の投与形態で投与することができる。これらの手順は、所望の調製物に適した成分の混合、粒状化及び圧縮又は溶解を伴い得る。

用いる医薬担体は、固体又は液体のいずれかであることができる。固体担体の例は、ラクトース、スクロース、タルク、ゼラチン、アガー、ペクチン、アカシア、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸などである。液体担体の例は、シロップ、ピーナッツオイル、オリーブオイル、水などである。同様に、担体又は希釈剤としては、当業界で知られた遅延性（ｔｉｍｅ−ｄｅｌａｙ）又は徐放性物質、例えば単独又はワックス、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メタクリル酸メチルなどを伴ったモノステアリン酸グリセリン又はグリセリルジステアリン酸塩である。

様々な医薬形態を用いることができる。従って、固体担体を用いる場合、調製物は錠剤化、粉体又はペレット形態或いはトローチ又はひし形（ｌｏｚｅｎｇｅ）の形態のハードゼラチンカプセル中に置くことができる。固体担体の量は、変わり得る。液体担体が用いられる場合、調製物は、シロップ、エマルジョン、ソフトゼラチンカプセル、滅菌した注入可能な溶液又はアンプル若しくはバイアル中の懸濁液、又は非水性の液体懸濁液であろう。

安定な水溶性投与形態を得るために、本発明の薬剤の医薬として許容された塩は、有機酸又は無機酸の水溶液中に溶解することができる。溶解性塩形態が利用可能でない場合は、適切な共溶媒又は共溶媒の混合物中に薬剤を溶解することができる。

本発明の組成物中で用いる薬剤の実際の用量は、用いる具体的な複合体、製剤化する具体的な組成物、投与方法、具体的な部位、宿主及び処置する疾病により変わるであろうことが理解される。所定の一連の状態に対して最適な用量は、薬剤に関する実験データの観点から通常の用量決定試験を用いて当業者により確定されることができる。

本発明の組成物は、医薬組成物を調製するための一般的に知られた方法、例えば、通常の技術、例えば混合、溶解、粒状化、糖衣錠形成、ゲル状化、乳化、カプセル化、封入化又は凍結乾燥化を用いることにより製造することができる。医薬組成物は、１つ以上の医薬として許容される担体を用いて、通常の方法において製剤化することができる。この担体は、活性化合物の、医薬として用いることのできる調製物への加工を容易にする賦形剤及び補助剤から選択することができる。

経口投与のために、本化合物は、当業界で知られた医薬として許容される担体と化合物を混合物することにより容易に製剤化することができる。このような担体は、本発明の化合物を、処置する患者による経口摂取のための、錠剤、ピル、糖衣錠、カプセル、液体、ゲル、シロップ、スラリー、懸濁液などとして製剤化することを可能にする。経口使用のための医薬調製物は、活性成分（薬剤）との混合において固体賦形剤を用いて、任意に得られた混合物を粉末にし、必要であれば錠剤又は糖衣錠のコアを得るために適切な補助剤を添加した後に顆粒の混合物を加工して得ることができる。

本発明は、その範囲を制限することを意味しない以下の実施例により更に説明される。積極的に特に明記しない限り、温度は摂氏温度（℃）で表される。

実施例１
５−[１−キナゾリン−６−イル−メタ−（Ｚ）−イリデン］−２−［（チオフェン−２−イルメチル）−アミノ］−チアゾール−４−オン

６−キナゾリンカルボキシアルデヒドの調製

６−メチル−キナゾリン（５．０ｇ、３４．７ｍｍｏｌ）及び二酸化セレン（７．７ｇ、６９．４ｍｍｏｌ）の混合物を、１６０℃で１２時間加熱した。室温まで冷却した後、メタノールを撹拌しながら添加した。固体をろ過により除去した後、ろ液を濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（Ｍｅｒｃｋシリカゲル６０、２３０−４００メッシュ、３０分間におけるヘキサン中の０％〜３０％の酢酸エチル）により、白色の固体として６−キナゾリンカルボキシアルデヒド（２．４ｇ、４３．７％）を得た: ＬＣ−ＭＳｍ／ｅ１５９（ＭＨ⁺）。

５−キナゾリン−６−イルメチレン−２−チオキソ−チアゾリジン−４−オンの調製

酢酸（１０ｍＬ）中の６−キナゾリンカルボキシアルデヒド（実施例１ａ、１．５ｇ、９．５ｍｍｏｌ）、ロダニン（１．２６ｇ、９．５ｍｍｏｌ）及び酢酸ナトリウム（３．１１ｇ、３８ｍｍｏｌ）の懸濁液を、１３０℃で１２時間撹拌した。室温まで冷却した後、水（４０ｍＬ）を添加した。固体をろ過により回収し、水で洗い、乾燥させて、５−キナゾリン−６−イルメチレン−２−チオキソ−チアゾリジン−４−オン（２．６ｇ、１００％）を白色の固体として得た。ＬＣ−ＭＳｍ／ｅ２７４（ＭＨ⁺）。

２−メチルスルファニル−５−キナゾリン−６−イルメチレン−チアゾール−４−オンの調製

無水エタノール（１００ｍＬ）中の５−キナゾリン−６−イルメチレン−２−チオキソ−チアゾリジン−４−オン（実施例１ｂ、２．６ｇ、９．５２ｍｍｏｌ）、ヨードメタン（１．２ｍＬ、１９．０ｍｍｏｌ）及びジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ）（２．４ｍＬ、１４．３ｍｍｏｌ）の懸濁液を、１２時間室温で撹拌した。水（２００ｍＬ）を添加後、固体をろ過により回収し、水で洗い、乾燥させて、黒色の固体として２−メチルスルファニル−５−キナゾリン−６−イルメチレン−チアゾール−４−オン（２．５ｇ、９２％）を得た。ＬＣ−ＭＳｍ／ｅ２８８（ＭＨ⁺）。

５−［１−キナゾリン−６−イル−メタ−（Ｚ）−イリデン］−２−［（チオフェン−２−イルメチル）−アミノ］−チアゾール−４−オンの調製
アセトニトリル（１ｍＬ）中の２−メチルスルファニル−５−キナゾリン−６−イルメチレン−チアゾール−４−オン（実施例１ｃ、５８ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）、チオフェンメチルアミン（４５．３ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）及びジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ）（７０ｕＬ、０．４ｍｍｏｌ）の懸濁液を、２０分間電子レンジにより１４５℃まで加熱した。室温まで冷却した後、固体をろ過により回収し、少量のアセトニトリルで洗い、乾燥させた。フラッシュクロマトグラフィー（Ｍｅｒｃｋシリカゲル６０、２３０−４００メッシュ、３０分間の塩化メチレン中の０％〜５％メタノール）により、淡黄色の固体として、５−［１−キナゾリン−６−イル−メタ−（Ｚ）−イリデン］−２−［（チオフェン−２−イルメチル）−アミノ］−チアゾール−４−オンを得た：ＬＣ−ＭＳｍ／ｅ３５３（ＭＨ⁺）。

実施例２
５−［１−キナゾリン−６−イル−メタ−（Ｚ）−イリデン］−２−（チアゾール−２−イルアミノ）−チアゾール−４−オン

実施例１ｄに記載の手順と類似の手順を用いて、２−メチルスルファニル−５−キナゾリン−６−イルメチレン−チアゾール−４−オン、チアゾール−２−イルアミン及びＤＩＥＡから出発して、５−［１−キナゾリン−６−イル−メタ−（Ｚ）−イリデン］−２−（チアゾール−２−イルアミノ）−チアゾール−４−オン：ＬＣ−ＭＳｍ／ｅを測定した。ＬＣ−ＭＳｍ／ｅ３４０（ＭＨ⁺）。

実施例３
２−［２−（３−フルオロ−フェニル）−エチルアミノ］−５−［１−キナゾリン−６−イル−メタ−（Ｚ）−イリデン］−チアゾール−４−オン

実施例１ｄに記載の手順と類似の手順を用いて、２−メチルスルファニル−５−キナゾリン−６−イルメチレン−チアゾール−４−オン、２−（３−フルオロ−フェニル）−エチルアミン及びＤＩＥＡから出発して、２−［２−（３−フルオロ−フェニル）−エチルアミノ］−５−［１−キナゾリン−６−イル−メタ−（Ｚ）−イリデン］−チアゾール−４−オンを得た：ＬＣ−ＭＳｍ／ｅを測定した。ＬＣ−ＭＳｍ／ｅ３７９（ＭＨ⁺）。

実施例４
２−（２−エトキシ−フェニルアミノ）−５−［１−キナゾリン−６−イル−メタ−（Ｚ）−イリデン］−チアゾール−４−オン

実施例１ｄに記載の手順と類似の手順を用いて、２−メチルスルファニル−５−キナゾリン−６−イルメチレン−チアゾール−４−オン、２−エトキシアニリン及びＤＩＥＡから出発して、２−（２−エトキシ−フェニルアミノ）−５−［１−キナゾリン−６−イル−メタ−（Ｚ）−イリデン］−チアゾール−４−オンを得た：ＬＣ−ＭＳｍ／ｅを測定した。ＬＣ−ＭＳｍ／ｅ３７７（ＭＨ⁺）。

実施例５
２−（４−フルオロ−２−メトキシ−フェニルアミノ）−５−［１−キナゾリン−６−イル−メタ−（Ｚ）−イリデン］−チアゾール−４−オン

実施例１ｄに記載の手順と類似の手順を用いて、２−メチルスルファニル−５−キナゾリン−６−イルメチレン−チアゾール−４−オン、４−フルオロ−２−メトキシ−アニリン及びＤＩＥＡから出発して、２−（４−フルオロ−２−メトキシ−フェニルアミノ）−５−［１−キナゾリン−６−イル−メタ−（Ｚ）−イリデン］−チアゾール−４−オンを得た：ＬＣ−ＭＳｍ／ｅを測定した。ＬＣ−ＭＳｍ／ｅ３８１（ＭＨ⁺）。

実施例６
２−（３−フルオロ−フェニルアミノ）−５−［１−キナゾリン−６−イル−メタ−（Ｚ）−イリデン］−チアゾール−４−オン

実施例１ｄに記載の手順と類似の手順を用いて、２−メチルスルファニル−５−キナゾリン−６−イルメチレン−チアゾール−４−オン、３−フルオロアニリン及びＤＩＥＡから出発して、２−（３−フルオロ−フェニルアミノ）−５−［１−キナゾリン−６−イル−メタ−（Ｚ）−イリデン］−チアゾール−４−オンを得た: ＬＣ− ＭＳｍ／ｅを測定した。ＬＣ−ＭＳｍ／ｅ３５１（ＭＨ⁺）。

実施例７
２−（（Ｒ）−１−ヒドロキシメチル−２−フェニル−エチルアミノ）−５−［１−キナゾリン−６−イル−メタ−（Ｚ）−イリデン］−チアゾール−４−オン

実施例１ｄに記載の手順と類似の手順を用いて、２−メチルスルファニル−５−キナゾリン−６−イルメチレン−チアゾール−４−オン、２−（（Ｒ）−１−ヒドロキシメチル−２−フェニル−エチルアミン及びＤＩＥＡから出発して、２−（（Ｒ）−１−ヒドロキシメチル−２−フェニル−エチルアミノ）−５−［１−キナゾリン−６−イル−メタ−（Ｚ）−イリデン］−チアゾール−４−オンを得た: ＬＣ−ＭＳｍ／ｅを測定した。ＬＣ−ＭＳｍ／ｅ３９１（ＭＨ⁺）。

実施例８
２−（３−フルオロ−ベンジルアミノ）−５−［１−キナゾリン−６−イル−メタ−（Ｚ）−イリデン］−チアゾール−４−オン

実施例１ｄに記載の手順と類似の手順を用いて、２−メチルスルファニル−５−キナゾリン−６−イルメチレン−チアゾール−４−オン、３−フルオロ−ベンジルアミン及びＤＩＥＡから出発して、２−（３−フルオロ−ベンジルアミノ）−５−［１−キナゾリン−６−イル−メタ−（Ｚ）−イリデン］−チアゾール−４−オンを得た：ＬＣ−ＭＳｍ／ｅを観測した。ＬＣ−ＭＳｍ／ｅ３７９（ＭＨ⁺）。

実施例９
２−（２，４−ジメトキシ−フェニルアミノ）−５−[１−キナゾリン−６−イル−メタ−（Ｚ）−イリデン］−チアゾール−４−オン

実施例１ｄに記載の手順と類似の手順を用いて、２−メチルスルファニル−５−キナゾリン−６−イルメチレン−チアゾール−４−オン、２，４−ジメトキシ−フェニルアミン及びＤＩＥＡから出発して、２−（２，４−ジメトキシ−フェニルアミノ）−５−[１−キナゾリン−６−イル−メタ−（Ｚ）−イリデン］−チアゾール−４−オンを得た：ＬＣ−ＭＳｍ／ｅを測定した。ＬＣ−ＭＳｍ／ｅ３９３（ＭＨ⁺）。

実施例１０
５−［１−（４−エトキシ−キナゾリン−６−イル）−メタ−（Ｚ）−イリデン］−２−［２−（３−フルオロ−フェニル）−エチルアミノ］−チアゾール−４−オン

６−ブロモ−４−エトキシ−キナゾリンの調製

無水エチルアルコール（１５０ｍｌ）中の６−ブロモ−４−クロロ−キナゾリン（４．８７ｇ、２０ｍｍｏｌ）、ナトリウムエトキシド（９５％、１４．３２ｇ、２００ｍｍｏｌ）の懸濁液を、４時間室温で撹拌した。この反応後に、溶媒を蒸発させた。次いで、氷水を添加し、その後３ＮのＨＣｌ水溶液を添加してｐＨを９に調節し、沈殿を形成させた。固体を回収し、Ｈ₂Ｏで３回洗い、その後乾燥させた。フラッシュクロマトグラフィー（Ｍｅｒｃｋシリカゲル６０、２３０−４００メッシュ、３０分間におけるヘキサン中の１０％〜５０％の酢酸エチル）により、淡黄色の固体として、６−ブロモ−４−エトキシ−キナゾリン（２．１３ｇ、５５％）を得た。ＬＣ−ＭＳｍ／ｅ２５４（ＭＨ⁺）。

４−エトキシ−キナゾリン−６−カルバルデヒドの調製

無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（２５ｍｌ）中の６−ブロモ−４−エトキシ−キナゾリン（実施例１０ａ、５０６ｍｇ、２ｍｍｏｌ）、ジフェニルプロピルホスフィン（４５．６ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）、酢酸パラジウム（４４．８ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（５０５ｍｇ、５ｍｍｏｌ）の混合物を、７５ｐｓｉの一酸化炭素と共に充填した。上記反応後、混合物を室温で１５分間撹拌し、一酸化炭素を解放し、そしてトリヘキシルシラン（１１４０ｍｇ、４ｍｍｏｌ）を添加した。得られた反応混合物を、７５ｐｓｉの一酸化炭素と共に充填し、８０℃で１８時間加熱した。室温まで反応物を冷却した後に、ジクロロメタンを添加した。得られた溶液を水で３回抽出した。有機層を回収し、濃縮して、黄色の固体を得た。フラッシュクロマトグラフィー（Ｍｅｒｃｋシリカゲル６０、２３０−４００メッシュ、４０分間におけるヘキサン中の１０％〜４０％の酢酸エチル）により、淡黄色の固体として、４−エトキシ−キナゾリン−６−カルバルデヒド（２５６ｍｇ、６６％）を得た。ＬＣ−ＭＳｍ／ｅ２０３（ＭＨ⁺）。

２−［（３−フルオロフェニル）−エチルアミノ］−チアゾール−４−オンの調製。

アセトニトリル（７０ｍＬ）中の（３−フルオロフェニル）−エチルアミン（３．０６ｇ、２２ｍｍｏｌ）及びロダニン（２．６６ｇ、２０ｍｍｏｌ）の溶液に、室温でＤＩＥＡ（７．６６ｍＬ、４４ｍｍｏｌ）を添加した。その後、この溶液を０℃まで冷却し、塩化第二水銀（５．９７ｇ、２２ｍｍｏｌ）を２回で添加した。添加後に、懸濁液を室温まで温め、３日間撹拌した。得られた黒色の固体を、セライトのプラグ（ｐｌｕｇ）に通してろ過し、ジクロロメタン（５００ｍＬ）とメタノール（２５０ｍＬ）で洗った。混合した溶媒を減圧下で除去し、粗残渣を高温条件で酢酸エチル（２５ｍＬ）に溶解し、冷蔵庫の中で一晩保存した。その後、固体をろ過により回収し、酢酸エチルで洗った。空気乾燥した後、３．６５ｇ（７６．６％の収率）の２−［（３−フルオロフェニル）−エチルアミノ］−チアゾール−４−オンを、白色のアモルファス固体として単離した：ＨＲＥＳ（＋）ｍ／ｅＣ₁₁Ｈ₁₁ＦＮ₂ＯＳ（Ｍ＋Ｈ）⁺ に対する理論値（ｃａｌｃｄ）２３９．０６４９、測定値（ｆｏｕｎｄ）２３９．０６４７.

５−［１−（４−エトキシ−キナゾリン−６−イル）−メタ−（Ｚ）−イリデン］−２−［２−（３−フルオロ−フェニル）−エチルアミノ］−チアゾール−４−オンの調製

無水エチルアルコール（１ｍｌ）中の４−エトキシ−キナゾリン−６−カルバルデヒド（実施例１０ｂ、２０ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ)、２−［２−（３−フルオロ−フェニル）−エチルアミノ］−チアゾール−４−オン（実施例１０ｃ、２４ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）及びピペリジン（１０ｕｌ、０．１ｍｍｏｌ）の混合物を、１６０℃で２５分間電子レンジにかけた。この反応物を室温まで冷却した後、固体をろ過により回収し、その後ＭｅＯＨで洗い、乾燥させて、淡黄色の固体として５−［１−（４−エトキシ−キナゾリン−６−イル）−メタ−（Ｚ）−イリデン］−２−［２−（３−フルオロ−フェニル）−エチルアミノ］−チアゾール−４−オン（１２ｍｇ、３０％）を得た。ＬＣ−ＭＳｍ／ｅ４２３（ＭＨ⁺）。

実施例１１
２−アミノ−５−［１−（４−エトキシ−キナゾリン−６−イル）−メタ−（Ｚ）−イリデン］−チアゾール−４−オン

酢酸中の４−エトキシ−キナゾリン−６−カルバルデヒド（実施例１０ｂ）（１当量）、シュードチオヒダントイン（ｐｓｅｕｄｏｔｈｉｏｈｙｄａｎｔｏｉｎ）（１当量）、及び酢酸ナトリウム（４当量）の懸濁液を、１２時間還流下で撹拌した。室温まで冷却した後、水を添加した。この固体をろ過により回収し、水で洗い、乾燥させて、２−アミノ−５−［１−（４−エトキシ−キナゾリン−６−イル）−メタ−（Ｚ）−イリデン］−チアゾール−４−オンを得た。わずかに黄色の固体として、ＬＣ−ＭＳｍ／ｅ３０１（ＭＨ⁺）。ＬＣ−ＭＳｍ／ｅ２５６（ＭＨ⁺）。

実施例１２
５−［１−（４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−イル）−メタ−（Ｚ）−イリデン］−２−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニル−シクロプロピルアミノ）−チアゾール−４−オン

２−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニル−シクロプロピルアミノ）−チアゾール−４−オンの調製

実施例１０ｃに記載した手順と類似の手順を用いて、（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニル−シクロプロピルアミン、ロダニン、塩化第二水銀及びＤＩＥＡから出発して、２−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニル−シクロプロピルアミノ）−チアゾール−４−オンを得た。ＬＣ−ＭＳｍ／ｅ２３２（ＭＨ⁺）。

６−ブロモ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，３］オキサジン−２，４−ジオンの調製

アセトニトリル（１２５０ｍＬ）中の２−アミノ−５−ブロモ−安息香酸（２７０ｇ、１．２５ｍｏｌ）の懸濁液に、ジクロロメタン（ＤＣＭ）（５００ｍＬ）中のトリホスゲン（１２３．８ｇ、４１６．７ｍｍｏｌ）の溶液及びピリジン（１９７．５ｇ、２．５ｍｏｌ）を、５５℃で同時に添加した。得られた混合物を更に３時間撹拌し、その後室温まで冷却した。沈殿をろ過により回収し、アセトニトリルで洗い、乾燥させて、青白い粉末として６−ブロモ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，３］オキサジン−２，４−ジオンを得た（２８０ｇ、９３％）。¹ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）：δ １１．８３（ｓ，１Ｈ）、７．９８（ｓ，１Ｈ）、７．８９−７．８７（ｄ，１Ｈ，）、７．０９−７．０７（ｄ,１Ｈ）。

６−ブロモ−２−メチルアミノ−１Ｈ−キナゾリン−４−オンの調製

アセトニトリル（３６０ｍＬ）と水（９０ｍＬ）の混合溶液に、６−ブロモ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，３］オキサジン−２，４−ジオン（２４．２ｇ、０．１ｍｏｌ）、１,２−ジメチル−イソチオ尿素ヨウ化水素酸（ｈｙｄｒｉｏｄｉｃ）（２３．２ｇ、０．１ｍｏｌ）を添加し、その後無水炭酸ナトリウム（１１．７ｇ、０．１１ｍｏｌ）を添加し、混合物を３時間加熱して還流した。冷却した後、沈殿をろ過により回収し、水で洗って、淡黄色の粉末として６−ブロモ−２−メチルアミノ−１Ｈ−キナゾリン−４−オンを得た（１６．５ｇ、６５ｍｍｏｌ、６５％）。¹ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）：δ１１．２０（ｂ，１Ｈ），７．９１−７．９０（ｄ，１Ｈ），７．６４−７．６３（ｄ，１Ｈ），７．２０−７．１８（ｄ，１Ｈ），６．３０（ｂ，１Ｈ），２．８２−２．８１（ｄ，３Ｈ）。

（６−ブロモ−４−クロロ−キナゾリン−２−イル）−メチル−アミンの調製

オキシ塩化リンの溶液（５０ｍＬ）に、粉末化した６−ブロモ−２−メチルアミノ−１Ｈ−キナゾリン−４−オン（１０．０ｇ、３９．４ｍｍｏｌ）を添加し、その後ジメチル−フェニル−アミン（８ｍＬ）を添加し、そして混合物をＮ₂雰囲気下で３０分間加熱して還流した。冷却後に、混合物を氷上に注ぎ、ＮａＯＨ水溶液（２Ｍ）で塩基性化した。沈殿をろ過により回収し、カラムにより精製して、黄色の固体として（６−ブロモ−４−クロロ−キナゾリン−２−イル）−メチル−アミンを得た（５ｇ、１８．３ｍｍｏｌ、４６．６％）。¹ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）：δ８．０３（ｓ，１Ｈ），７．８６−７．８４（ｍ，２Ｈ），７．４７−７．４５（ｄ，１Ｈ），２．８６−２．８４（ｄ，３Ｈ）。

（６−ブロモ−４−エトキシ−キナゾリン−２−イル）−メチル−アミンの調製

無水アルコール（１５０ｍＬ）中のナトリウムエトキシド（８．１１ｇ、１１９．３ｍｍｏｌ）の溶液に、粉末の（６−ブロモ−４−クロロ−キナゾリン−２−イル）−メチル−アミン（１３ｇ、４７．７ｍｍｏｌ）を１回で添加し、この混合物をＮ₂雰囲気下で室温において３時間撹拌した。過剰のアルコールを減圧下で除去し、残渣をカラムにより精製して、淡黄色の固体として（６−ブロモ−４−エトキシ−キナゾリン−２−イル）−メチル−アミン（４ｇ、１４．２ｍｍｏｌ、２９．８％）を得た。¹ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）：δ７．９０−７．８９（ｄ，１Ｈ），７．７０−７．６７（ｄｄ，１Ｈ），７．３３−７．３１（ｍ，１Ｈ），７．２１−７．２０（ｄｄ，１Ｈ），４．４５−４．４４（ｑ，２Ｈ），２．８３−２．８２（ｄ，３Ｈ），１．４０−１．３７（ｔ，３Ｈ）。

４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−カルバルデヒドの調製

アセトニトリル（４０ｍＬ）及びＤＭＳＯ（４０ｍＬ）の混合溶液に、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（１．６５ｇ、１．４３ｍｍｏｌ）、無水ギ酸ナトリウム（５．８２ｇ、８５．６ｍｍｏｌ）を添加し、その後粉末の（６−ブロモ−４−エトキシ−キナゾリン−２−イル）−メチル−アミン（４ｇ、１４．３ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を、５０ｐｓｉで、ＣＯ雰囲気下において、８５℃まで加熱した。４８時間の撹拌後に、冷却した混合物を水に注ぎ、ＤＣＭ（３×２００ｍＬ）で抽出した。混ぜ合わせた有機相を塩水で洗い、Ｎａ₂ＳＯ₄上で乾燥させ、蒸発させて茶色の固体を得、それをカラムにより精製して、青白い固体として４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−カルバルデヒド（１ｇ、４．３ｍｍｏｌ、３０％）を得た。¹ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）：δ９．９５（ｓ，１Ｈ），８．３８（ｓ，１Ｈ），８．００−７．９７（ｄ，１Ｈ），７．５９−７．５６（ｍ，１Ｈ），７．４６−７．４４（ｄ，１Ｈ），４．５３−４．４８（ｑ，２Ｈ），２．８９−２．８７（ｄ，３Ｈ），１．４４−１．４０（ｔ，３Ｈ）。

５−［１−（４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−イル）−メタ−（Ｚ）−イリデン］−２−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニル−シクロプロピルアミノ）−チアゾール−４−オンの調製
マイクロ波管中の２ｍＬのトルエン中の２−（トランス）−フェニルシクロピルアミノ（ｐｈｅｎｙｌｃｙｃｌｏｐｙｌａｍｉｎｏ）−チアゾール−４−オン（実施例１２ａ、３８．０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌｅ）、及び４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−カルバルデヒド（実施例１２ｆ、４５．５ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌｅ）の懸濁液に、安息香酸（２．０ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌｅ）及びピペリジン（１．５ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌｅ）を添加した。その後、反応混合物を、１時間電子レンジで１５０℃まで加熱した。その後、反応混合物を室温まで冷却し、トルエンで希釈した。固体をろ過により回収し、その固体をトルエン、ＣＨ₂Ｃｌ₂及びエーテルで洗い、茶色の固体として５−［１−（４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−イル）−メタ−（Ｚ）−イリデン］−２−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニル−シクロプロピルアミノ）−チアゾール−４−オンを得た：５２ｍｇ（７２．９％）、ＭＳ：ｍ／ｅ４４６（ＭＨ⁺）。

実施例１３
２−（２−クロロ−ベンジルアミノ）−５−（４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−イルメチレン）−チアゾール−４−オン

２−（２−クロロ−ベンジルアミノ）−チアゾール−４−オンの調製

実施例１０ｃに記載の手順と類似の手順を用いて、２−クロロ−ベンジルアミン、ロダニン、塩化第二水銀及びＤＩＥＡから出発して、２−（２−クロロ−ベンジルアミノ）−チアゾール−４−オンを得た。ＬＣ−ＭＳｍ／ｅ２４１（ＭＨ⁺）。

２−（２−クロロ−ベンジルアミノ）−５−（４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−イルメチレン）−チアゾール−４−オンの調製
マイクロ波管中の２ｍＬのトルエン中の２−（２−クロロ−ベンジルアミノ）−チアゾール−４−オン（実施例１３ａ、３８．５ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌｅ）、及び４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−カルバルデヒド（実施例１２ｆ、４５．５ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌｅ）の懸濁液に、安息香酸（２．０ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌｅ）及びピペリジン（１．５ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌｅ）を添加した。反応混合物を、４５分間電子レンジで１５０℃まで加熱した。次に、反応混合物を室温まで冷却し、固体をろ過し、トルエン、ＭｅＯＨ及びエーテルで洗い、茶色の固体として２−（２−クロロ−ベンジルアミノ）−５−（４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−イルメチレン）−チアゾール−４−オンを得た：４３．２ｍｇ（５９．５％）、ＭＳ：ｍ／ｅ４５４（ＭＨ⁺）。

実施例１４
２−アミノ−５−（４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−イルメチレン）−チアゾール−４−オン

２．５ｍＬのキシレン中のシュードチオヒダントイン（ｐｓｅｕｄｏｔｈｉｏｈｙｄｏｎｔｏｉｎ）（４０．６ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌｅ）、４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−カルバルデヒド（実施例１２ｆ、８１．０ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌｅ）及びＮａＯＡｃ（８２．０ｍｇ、１．０ｍｍｏｌｅ）の懸濁液に、酢酸（７８．６ｍｇ、１．３ｍｍｏｌｅ）を添加した。反応混合物を、還流下で一晩加熱した。次に、反応混合物を室温まで冷却し、固体をろ過し、ＭｅＣＮで洗い、茶色の固体として２−アミノ−５−（４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−イルメチレン）−チアゾール−４−オンと共に粉末にした粗生成物を得た：４．５ｍｇ（３．９％）、ＭＳ：ｍ／ｅ３３０（ＭＨ⁺）。

実施例１５
５−（４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−イルメチレン）−２−［（３−メチル−チオフェン−２−イルメチル）−アミノ］−チアゾール−４−オン

２−［（３−メチル−チオフェン−２−イルメチル）−アミノ］−チアゾール−４−オンの調製。

アセトニトリル（３０ｍＬ）中の３−メチル−チオフェン−２−イルメチルアミン（７００ｍｇ、５．５ｍｍｏｌ）及びロダニン（７３２ｍｇ、５．５ｍｍｏｌ）の懸濁液に、室温でジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ）（１．９１ｍＬ、１１ｍｍｏｌ）を添加した。次に、この懸濁液を０℃まで冷却し、塩化第二水銀（１．５２ｇ、５．６ｍｍｏｌ）を一回で添加した。添加後に、懸濁液を室温まで温めて、３日間撹拌した。得られた黒色の固体をセライトのプラグを通してろ過し、アセトニトリル（２００ｍＬ）及び酢酸エチル（２５０ｍＬ）で洗った。ろ液を減圧下で除去し、粗残渣をジクロロメタン（１５０ｍＬ）に溶解し、水及び塩水溶液で洗った。硫酸マグネシウム上で乾燥した後、ろ液を減圧下で除去し、残渣をジクロロメタン（１０ｍＬ）中に溶解し、ヘキサン（１０ｍＬ）で希釈した。冷蔵庫内で一晩保存した後、固体をろ過により回収し、ジクロロメタンで洗った。空気乾燥した後、３９０ｍｇ（３１．５％の収率)の２−［（３−メチル−チオフェン−２−イルメチル）−アミノ］−チアゾール−４−オンを、淡黄色のアモルファス固体として単離した：ＥＩ−ＨＲＭＳｍ／ｅＣ₉Ｈ₁₀Ｎ₂ＯＳ₂（Ｍ⁺）に対する理論値２２６．０２３５、測定値２２６．０２３２。

５−（４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−イルメチレン）−２−［（３−メチル−チオフェン−２−イルメチル）−アミノ］−チアゾール−４−オンの調製
マイクロ波管中の２ｍＬのトルエン中の２−［（３−メチル−チオフェン−２−イルメチル）−アミノ］−チアゾール−４−オン（３６．２ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌｅ）、及び４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−カルバルデヒド（実施例１２ｆ、４５．５ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌｅ）の懸濁液に、安息香酸（２．０ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌｅ）及びピペリジン（１．５ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌｅ）を添加した。反応混合物を、４５分間電子レンジで１５０℃まで加熱した。その後、反応混合物を室温まで冷却し、その固体をろ過し、トルエン、ＭｅＯＨ及びエーテルで洗い、茶色の固体として５−（４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−イルメチレン）−２−［（３−メチル−チオフェン−２−イルメチル）−アミノ］−チアゾール−４−オンを得た：５６．５ｍｇ（８０．４％）、ＭＳ：ｍ／ｅ４４０（ＭＨ⁺）。

実施例１６
２−（３−クロロ−４−フルオロ−ベンジルアミノ）−５−（４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−イルメチレン）−チアゾール−４−オン

２−（３−クロロ−４−フルオロ−ベンジルアミノ）−チアゾール−４−オンの調製

実施例１５ａに記載した手順と類似の手順を用いて、３−クロロ−４−フルオロ−ベンジルアミン、ロダニン、塩化第二水銀及びＤＩＥＡから出発して、２−（３−クロロ−４−フルオロ−ベンジルアミノ）−チアゾール−４−オンを得た。ＬＣ−ＭＳｍ／ｅ２５９（ＭＨ⁺）。

２−（３−クロロ−４−フルオロ−ベンジルアミノ)−５−（４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−イルメチレン）−チアゾール−４−オンの調製
マイクロ波管中の２ｍＬのトルエン中の２−（３−クロロ−４−フルオロ−ベンジルアミノ−チアゾール−４−オン（実施例１６ａ、４１．４ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌｅ）、及び４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−カルバルデヒド（実施例１２ｆ、４５．５ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌｅ）の懸濁液に、安息香酸（２．０ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌｅ）及びピペリジン（１．５ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌｅ）を添加した。この反応混合物を、３０分間電子レンジで１５０℃まで加熱した。その後、この反応混合物を室温まで冷却し、固体をろ過し、トルエンで洗い、粗生成物５８．８ｍｇ（７７．９％）を得、それを０．５ｍＬの熱いＤＭＦに再溶解し、室温の水で希釈した。沈殿を回収し、水、アセトン及びエーテルで洗い、ＮａＳＯ₄上で乾燥させ、濃縮して、淡黄色の固体として２−（３−クロロ−４−フルオロ−ベンジルアミノ)−５−（４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−イルメチレン）−チアゾール−４−オンを得た：４３．６ｍｇ（５７．７％）、ＭＳ：ｍ／ｅ４７２（ＭＨ⁺）。

実施例１７
２−（２−クロロ−４−フルオロ−ベンジルアミノ）−５−（４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−イルメチレン）−チアゾール−４−オン

２−（２−クロロ−４−フルオロ−ベンジルアミノ）−チアゾール−４−オンの調製

実施例１５ａに記載の手順に類似した手順を用いて、２−クロロ−４−フルオロ−ベンジルアミン、ロダニン、塩化第二水銀及びＤＩＥＡから出発して、２−（２−クロロ−４−フルオロ−ベンジルアミノ）−チアゾール−４−オンを得た。ＬＣ−ＭＳｍ／ｅ２５９（ＭＨ⁺）。

２−（２−クロロ−４−フルオロ−ベンジルアミノ）−５−（４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−イルメチレン）−チアゾール−４−オンの調製
マイクロ波管中の２ｍＬのトルエン中の２−（２−クロロ−４−フルオロ−ベンジルアミノ）−チアゾール−４−オン（実施例１７ａ、４１．４ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌｅ）、及び４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−カルバルデヒド（実施例１２ｆ、４５．５ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌｅ）の懸濁液に、安息香酸（２．０ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌｅ）及びピペリジン（１．５ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌｅ）を添加した。この反応混合物を、３０分間電子レンジで１５０℃まで加熱した。その後、この反応混合物を室温まで冷却し、固体をろ過し、トルエン、ＭｅＯＨ及びエーテルで洗い、淡褐色の固体として、２−（２−クロロ−４−フルオロ−ベンジルアミノ）−５−（４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−イルメチレン）−チアゾール−４−オンを得た：４６．６ｍｇ（６１．７％）、ＭＳ：ｍ／ｅ４７２（ＭＨ⁺）。

実施例１８
２−（２−クロロ−６−メチル−ベンジルアミノ）−５−（４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−イルメチレン）−チアゾール−４−オン

２−（２−クロロ−６−メチル−ベンジルアミノ）−チアゾール−４−オンの調製

実施例１５ａに記載のものと類似の方法を用いて、２−クロロ−６−メチル−ベンジルアミン、ロダニン、塩化第二水銀及びＤＩＥＡから出発して、２−（２−クロロ−６−メチル−ベンジルアミノ）−チアゾール−４−オンを得た。ＬＣ−ＭＳｍ／ｅ２５９（ＭＨ⁺）。

２−（２−クロロ−６−メチル−ベンジルアミノ）−５−（４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−イルメチレン）−チアゾール−４−オンの調製
マイクロ波管中の２ｍＬのトルエン中の２−（２−クロロ−６−メチル−ベンジルアミノ）−チアゾール−４−オン（実施例１８ａ、４０．８ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌｅ）、及び４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−カルバルデヒド（実施例１２ｆ、４５．５ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌｅ）の懸濁液に、安息香酸（２．０ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌｅ）及びピペリジン（１．５ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌｅ）を添加した。この反応混合物を３０分間電子レンジで１５０℃まで加熱した。その後、この反応混合物を室温まで冷却し、固体をろ過し、トルエン、ＭｅＯＨ及びエーテルで洗い、淡褐色の固体として２−（２−クロロ−６−メチル−ベンジルアミノ）−５−（４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−イルメチレン）−チアゾール−４−オンを得た：４５．９ｍｇ（６１．３％）、ＭＳ：ｍ／ｅ４６８（ＭＨ⁺）。

実施例１９
５−（４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−イルメチレン）−２−［（チオフェン−２−イルメチル）−アミノ］−チアゾール−４−オン

２−（チオフェン−２−イルメチル）−アミノ）−チアゾール−４−オンの調製

実施例１５ａに記載のものと類似の方法を用いて、チオフェン−２−イルメチル−アミン、ロダニン、塩化第二水銀及びＤＩＥＡから出発して、２−（チオフェン−２−イルメチル−アミノ）−チアゾール−４−オンを得た。ＬＣ−ＭＳｍ／ｅ２５９（ＭＨ⁺）。

５−（４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−イルメチレン）−２−［（チオフェン−２−イルメチル）−アミノ］−チアゾール−４−オンの調製
マイクロ波管中の２ｍＬのトルエン中の２−［（チオフェン−２−イルメチル）−アミノ］−チアゾール−４−オン（３４．０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌｅ）、及び４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−カルバルデヒド（実施例１２ｆ、４５．５ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌｅ）の懸濁液に、安息香酸（２．０ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌｅ）及びピペリジン（１．５ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌｅ）を添加した。この反応混合物を、３０分間電子レンジで１５０℃まで加熱した。その後、この反応混合物を室温まで冷却し、固体をろ過し、トルエン、ＭｅＯＨ及びエーテルで洗い、茶色の固体として５−（４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−イルメチレン）−２−［（チオフェン−２−イルメチル）−アミノ］−チアゾール−４−オンを得た：４８．６ｍｇ（６９．１％）、ＭＳ：ｍ／ｅ４２６（ＭＨ⁺）。

実施例２０
５−（４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−イルメチレン）−２−［２−（３−フルオロ−フェニル）−エチルアミノ］−チアゾール−４−オン

マイクロ波管中の２ｍＬのトルエン中の２−［２−（３−フルオロ−フェニル）−エチルアミノ］−チアゾール−４−オン（実施例１０ｃ、３８．１ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌｅ）、及び４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−カルバルデヒド（実施例１２ｆ、４５．５ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌｅ）の懸濁液に、安息香酸（２．０ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌｅ）及びピペリジン（１．５ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌｅ）を添加した。この反応混合物を、３０分間１５０℃まで加熱した。その後、この反応混合物を室温まで冷却し、固体をろ過し、トルエン、ＭｅＯＨ及びエーテルで洗い、淡褐色の固体として５−（４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−イルメチレン）−２−［２−（３−フルオロ−フェニル）−エチルアミノ］−チアゾール−４−オンを得た：５２．３ｍｇ（７２．４％）、ＭＳ：ｍ／ｅ４５２（ＭＨ⁺）。

実施例２１
本発明の化合物の薬理学的特性は、多くの薬理試験により確認することができる。以下の例示した薬理試験を、本発明の化合物及びその塩を用いて実施した。本発明の化合物は、５．０μＭ未満のＫｉ値を有するＣＤＫ１／サイクリンＢ活性を示した。これは、全てのこれらの化合物が活性であってＣＤＫ１／サイクリンＢを阻害したことを実証する。

ＣＤＫ１活性の阻害を決定するために、フラッシュプレート（登録商標）（ＮＥＮ（登録商標）−ＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅＰｒｏｄｕｃｔｓ）試験又はＨＴＲＦ試験を実施した。組み換えヒトＣＤＫ１／サイクリンＢ複合体を用いて、両方のタイプのキナーゼ試験を実施した。バキュロウイルスベクター中のＧＳＴ−サイクリンＢ（ＧＳＴ−ｃｙｃＢ）及びＣＤＫ１ｃＤＮＡクローンは、ＢａｙｌｏｒＣｏｌｌｅｇｅｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｈｏｕｓｔｏｎ，ＴＸのＤｒ．Ｗ．Ｈａｒｐｅｒにより提供された。タンパク質は、ＨｉｇｈＦｉｖｅ（登録商標）昆虫細胞において共発現し、前に説明した通り、グルタチオンセファロース樹脂（Ｐｈａｒｍａｃｉａ，Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，ＮＪ）上で精製した（Ｈａｒｐｅｒ，Ｊ．Ｗ．ｅｔａｌ．Ｃｅｌｌ１９９３，７５，８０５−８１６）。網膜芽細胞腫（Ｒｂ）タンパク質（アミノ酸３８６−９２８）の６ｘ−ヒスチジンタグ切断型を、ＣＤＫ１／サイクリンＢ試験のための基質として用いた（発現プラスミドは、Ｄｒ．ＶｅｒｏｎｉｃａＳｕｌｌｉｖａｎ，ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＭｏｌｅｃｕｌａｒＶｉｒｏｌｏｇｙ，ＲｏｃｈｅＲｅｓｅａｒｃｈＣｅｎｔｒｅ，ＷｅｌｗｙｎＧａｒｄｅｎＣｉｔｙ，ＵｎｉｔｅｄＫｉｎｇｄｏｍにより提供された）。Ｒｂタンパク質は、ＣＤＫ１によるリン酸化のための天然の基質である（ＨｅｒｗｉｇａｎｄＳｔｒａｕｓｓＥｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｖｏｌ．２４６（１９９７）ｐｐ．５８１−６０１及びそこで引用されている引用文献を参照のこと）。６２Ｋｄタンパク質の発現は、Ｍ１５Ｅ．コリ（Ｅ．ｃｏｌｉ）株中のＩＰＴＧ誘導プロモーターの制御下であった。細胞を超音波処理により溶解し、１ｍＭのイミダゾールで前処理したＮｉ−キレートアガロースカラムに溶解物をｐＨ８．０で結合させることにより、精製を実施した。その後、樹脂をｐＨ６．０まで徐々に減少するｐＨバッファーで数回洗い、５００ｍＭのイミダゾールで溶出した。溶出タンパク質を、２０ｍＭのＨＥＰＥＳｐＨ７．５、３０％のグリセロール、２００ｍＭのＮａＣｌ及び１ｍＭのＤＴＴに対して透析した。精製したＲｂ融合タンパク質ストックのタンパク質濃度を測り、等分し、−７０℃で保存した。

フラッシュプレートキナーゼ試験のために、９６−ウエルのフラッシュプレートを、ウエルあたり１００μｌを用いて、１０μｇ／ｍｌでＲｂタンパク質により被覆した。プレートを、撹拌器上で、４℃で一晩、又は室温で３時間インキュベートした。非特異的リン酸化を制御するために、一列のウエルを、１００μｌ／ウエルのコーティングバッファーで被覆した（２０ｍＭのＨＥＰＥＳ、０．２ＭのＮａＣｌ）。その後、プレートを洗浄バッファー（リン酸バッファリングした生理食塩水中の０．０１％のＴｗｅｅｎ２０）で二回洗浄した。試験する化合物（「試験化合物」）を、５ｘの最終濃度でウエルに添加した。４０μｌの反応混合物（２５ｍＭのＨＥＰＥＳ、２０ｍＭのＭｇＣｌ₂、０．００２％のＴｗｅｅｎ２０、２ｍＭのＤＴＴ、１μＭのＡＴＰ、４ｎＭの３３Ｐ−ＡＴＰ）及び十分な量の酵素を直ちに添加することにより反応を開始し、バックグラウンドより少なくとも１０倍のカウントを得た。プレートを、３０分間撹拌器上で室温においてインキュベートした。プレートを洗浄バッファーを用いて４回洗浄し、封をし、ＴｏｐＣｏｕｎｔシンチレーションカウンター（ＰａｃｋａｒｄＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔＣｏ．，ＤｏｗｎｅｒｓＧｒｏｖｅ，ＩＬ）上でカウントした。Ｒｂリン酸化の阻害比率（ＣＤＫ活性の阻害の尺度）を、以下の式により決定した：

ここで、「試験化合物」は、試験の繰り返しの１分間あたりの平均カウントを指し、「非特異的」は、ＣＤＫ１／サイクリンＢなどを添加しない場合の、１分間あたりの平均カウントを指し、「全体」は、化合物を添加しない場合の、１分間あたりの平均カウントを指す。ＩＣ₅₀は、説明した試験条件下でタンパク質により誘導された放射標識の結合を５０％減少させる試験化合物の濃度である。阻害剤定数Ｋｉの値は、以下により計算される：Ｋｉ＝ＩＣ５０／（１＋［Ｓ］／Ｋｍ）、ここで［Ｓ］はＡＴＰの濃度であり、Ｋｍはミカエリス定数である。

均一時間分解蛍光（ＨＴＲＦ）キナーゼ試験は、９６−ウエルのポリプロピレンプレート（ＢＤＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｂｅｄｆｏｒｄ、ＭＡ）において実施した。試験化合物は、最初にＤＭＳＯに溶解し、その後１５％のＤＭＳＯ濃度のキナーゼ試験バッファー１（２５ｍＭのＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．０、８ｍＭのＭｇＣｌ₂、１．５ｍＭのＤＴＴ、及び１６２μＭのＡＴＰ）中に希釈した。ＣＤＫ１／サイクリンＢ酵素を、キナーゼ試験バッファー２（２５ｍＭのＨＥＰＥＳ１ｐＨ７．０、８ｍＭのＭｇＣｌ₂、０．００３％のＴｗｅｅｎ２０、０．０４５％のＢＳＡ、１．５ｍＭのＤＴＴ、及び０．３３８μＭのＲｂタンパク質）中に希釈した。キナーゼ反応を開始するために、２０μＬの化合物溶液を、試験プレート中の４０μＬのＣＤＫ１／サイクリンＢ溶液と混合し、ＣＤＫ１／サイクリンＢ及びＲｂの最終濃度をそれぞれ０．１μｇ／ｍＬ及び０．１１３μＭとし、３７℃で３０分間インキュベートした。１５μＬの抗−リン−Ｒｂ（Ｓｅｒ７８０）抗体（ＣｅｌｌＳｉｇｎａｌｉｎｇＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｂｅｖｅｒｌｙ，ＭＡ）を、抗体の１：７６９２の希釈で添加した。３７℃で２５分間インキュベーションを続け、その後ＬＡＮＣＥＥｕ−Ｗ１０２４標識抗ウサギＩｇＧ（１ｎＭ、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ、Ｗｅｌｌｅｓｌｅｙ、ＭＡ）及びＳｕｒｅＬｉｇｈｔ−Ａｌｌｏｐｈｕｃｏｃｙａｎｉｎ（２０ｎＭ、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ、Ｗｅｌｌｅｓｌｅｙ、ＭＡ）に結合した抗Ｈｉｓ抗体を、ウエルに添加した。インキュベーションを、３７℃で更に４０分間続けた。インキュベーションの完了の際に、３５μＬの反応混合物を新たな３８４−ウエルの黒いポリスチレンプレート（ＣｏｒｎｉｎｇＩｎｃｏｒｐｏｒａｔｅｄ、Ｃｏｒｎｉｎｇ、ＮＹ）に移し、３４０ｎｍの励起波長及び６６５／６１５ｎｍの放射波長で蛍光プレートリーダーにおいて読み取った。

本発明の対象の化合物に適用したＣＤＫ１／サイクリンＢ活性を示すＫｉ値は、約０．００１μＭ〜約５．０００μＭの範囲である。いくつかの実施例に関する具体的なデータは、以下の通りである：

Claims

以下の式を有する化合物

｛式中、
Ｒ₁は、水素、低級アルキル又は

であり；
Ｘは、低級アルキレン、３〜６個の炭素原子を含むシクロ低級アルキレン及びヒドロキシ低級アルキレンから選択され；

は、
アリール環、
３〜６個の炭素原子を含むシクロアルキル環、
３〜５個の炭素原子並びに酸素、窒素及び硫黄から成る群から選択される１〜２個のヘテロ原子を含む、４〜６員ヘテロシクロアルキル環、及び
酸素、硫黄及び窒素から成る群から選択される１〜２個のヘテロ原子を含む５又は６員芳香族複素環、から選択され；
Ｒ₅及びＲ₆は、独立に、水素、ヒドロキシ、ヒドロキシ−低級アルキル、低級アルキル、ハロゲン、ペルフルオロ−低級アルキル及び低級アルコキシから成る群から選択され；
Ｒ₃は、水素、−ＮＨ−Ｒ₇及び−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ₈から選択され；
Ｒ₄は、水素、低級アルキル及び−Ｏ（ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ）_y−Ｒ₁₀から選択され；
Ｒ₇は、水素又は低級アルキルであり；
Ｒ₈及びＲ₁₀は、低級アルキルであり；
ｎは、０〜１の整数であり；且つ
ｙは、０〜３の整数である；
ただし、ｎが０であってＲ₁が水素又は低級アルキルである場合、Ｒ₃/Ｒ₄は両方とも水素であることはできない｝、
又は、Ｒ₁が芳香族複素環中に窒素を含む場合の化合物のＮ−酸化物、Ｒ₁がヘテロシクロアルキル環又は芳香族複素環中に硫黄を含む場合のスルホン；
又は、その医薬として許容される塩。
前記化合物が式Ｉ−Ａを有する、請求項１に記載の化合物

｛式中、
Ｒ₁’は、水素又は低級アルキルであり；
Ｒ₄’は、低級アルキル又は−Ｏ（ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ）y−Ｒ₁₀であり；且つ
Ｒ₃、Ｒ₁₀及びｙは、請求項１で定義した通りである｝、
又は、その医薬として許容される塩。
Ｒ₁’が水素である、請求項２に記載の化合物。
前記化合物が、２−アミノ−５−［１−（４−エトキシ−キナゾリン−６−イル）−メチリデン］−チアゾール−４−オンである、請求項３に記載の化合物。
Ｒ₃が−ＮＨＲ₇であり、Ｒ₇が請求項１で定義した通りである、請求項２に記載の化合物。
前記化合物が、２−アミノ−５−（４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−イルメチレン）−チアゾール−４−オンである、請求項５に記載の化合物。
前記化合物が式Ｉ−Ｂを有する、請求項１に記載の化合物

｛式中、
Ｒ₁”は、

であり；且つ
Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆及び

は、請求項１で定義した通りである｝、
又は、Ｒ₁”が芳香族複素環中に窒素を含む場合の化合物のＮ−酸化物、Ｒ₁”がヘテロ環又は芳香族複素環中に硫黄を含む場合のスルホン、又はその医薬として許容される塩。
Ｒ₁”が

であって、

がフェニルであり；且つ
Ｒ₅及びＲ₆が請求項１で定義した通りである、請求項７に記載の化合物。
前記化合物が、２−（２，４−ジメトキシ−フェニルアミノ）−５−［１−キナゾリン−６−イル−メチリデン］−チアゾール−４−オンである、請求項８に記載の化合物。
前記化合物が、２−（２−エトキシ−フェニルアミノ）−５−［１−キナゾリン−６−イル−メチリデン］−チアゾール−４−オンである、請求項８に記載の化合物。
前記化合物が、２−（４−フルオロ−２−メトキシ−フェニルアミノ）−５−［１−キナゾリン−６−イル−メチリデン］−チアゾール−４−オンである、請求項８に記載の化合物。
が、１〜２個のヘテロ原子を含む芳香族複素環である、請求項７に記載の化合物。
前記芳香族複素環が、２個のヘテロ原子を含み、１つが硫黄であり、他方が窒素である、請求項１２に記載の化合物。
前記化合物が、５−［１−キナゾリン−６−イル−メチリデン］−２−（チアゾール−２−イルアミノ）−チアゾール−４−オンである、請求項１３に記載の化合物。
前記化合物が以下の式を有する、請求項１に記載の化合物

｛式中、
Ｒ₁”は、請求項１におけるＲ₁の通りであり；且つ
Ｘ、Ｒ₃、Ｒ₄及び

は、請求項１の通りである｝、
又は、Ｒ₁”が芳香族複素環中に窒素を含む場合の化合物のＮ−酸化物、Ｒ₁”がヘテロ環又は芳香族複素環中に硫黄を含む場合のスルホン；
又は、その医薬として許容される塩。
Ｘが低級アルキレンである、請求項１５に記載の化合物。
Ｒ₃が水素であり、且つ
Ｒ₄が水素又は−Ｏ（ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ）_y−Ｒ₁₀であり、且つ
Ｒ₁₀及びｙが、請求項１で定義した通りである、請求項１６に記載の化合物。
Ｒ₁”が

であって、

がフェニルであり；且つ
Ｒ₅及びＲ₆が、請求項１で定義した通りである、請求項１７に記載の化合物。
前記化合物が、２−［２−（３−フルオロ−フェニル）−エチルアミノ］−５−［１−キナゾリン−６−イル−メチリデン］−チアゾール−４−オンである、請求項１８に記載の化合物。
前記化合物が、２−（３−フルオロ−ベンジルアミノ）−５−［１−キナゾリン−６−イル−メチリデン］−チアゾール−４−オンである、請求項１８に記載の化合物。
前記化合物が、５−［１−（４−エトキシ−キナゾリン−６−イル）−メチリデン］−２−［２−（３−フルオロ−フェニル）−エチルアミノ］−チアゾール−４−オンである、請求項１８に記載の化合物。
Ｒ₁”が

であって、

が、フェニルであり；
Ｒ₃が−ＮＨＲ₇であり、
Ｒ₄が、水素又は−（ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ）_yＲ₁₀であり、且つ
Ｒ₅、Ｒ₆、Ｒ₇、Ｒ₁₀及びｙが、請求項１で定義した通りである、請求項１６に記載の化合物。
前記化合物が、２−（２−クロロ−ベンジルアミノ）−５−（４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−イルメチレン）−チアゾール−４−オンである、請求項２２に記載の化合物。
前記化合物が、２−（３−クロロ−４−フルオロ−ベンジルアミノ）−５−（４−エトキシ−２−メチルアミン−キナゾリン−６−イルメチレン）−チアゾール−４−オンである、請求項２２に記載の化合物。
前記化合物が、２−（２−クロロ−４−フルオロ−ベンジルアミノ）−５−（４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−イルメチレン）−チアゾール−４−オンである、請求項２２に記載の化合物。
前記化合物が、２−（２−クロロ−６−メチル−ベンジルアミノ）−５−（４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−イルメチレン）−チアゾール−４−オンである、請求項２２に記載の化合物。
前記化合物が、５−（４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−イルメチレン）−２−［２−（３−フルオロ−フェニル）−エチルアミノ］−チアゾール−４−オンである、請求項２２に記載の化合物。
Ｒ₁”が

であって、

が、１〜２個のヘテロ原子を含む芳香族複素環であり、且つ
Ｒ₅及びＲ₆が請求項１で与えられた意味を有する、請求項１６に記載の化合物。
芳香族複素環が２個のヘテロ原子を含み、１つが硫黄であって、他方が窒素である、請求項２８に記載の化合物。
芳香族複素環がチアゾール環である、請求項２９に記載の化合物。
芳香族複素環が１個のヘテロ原子を含み、それが硫黄原子である、請求項２８に記載の化合物。
Ｒ₃及びＲ₄が水素である、請求項３１に記載の化合物。
前記化合物が、５−［１−キナゾリン−６−イル−メチリデン］−２−［（チオフェン−２−イルメチル）−アミノ］−チアゾール−４−オンである、請求項３２に記載の化合物。
Ｒ₃が−ＮＨＲ₇であり、且つ
Ｒ₄及びＲ₇が請求項１で定義した通りである、請求項３１に記載の化合物。
前記化合物が、５−（４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−イルメチレン）−２−［（３−メチル−チオフェン−２−イルメチル）−アミノ］−チアゾール−４−オンである、請求項３４に記載の化合物。
前記化合物が、５−（４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−イルメチレン）−２−［（チオフェン−２−イルメチル）−アミノ］−チアゾール−４−オンである、請求項３４に記載の化合物。
Ｘがシクロアルキレンである、請求項１５に記載の化合物。
Ｒ₁”が

であって、

が、フェニルであり；且つ
Ｒ₅及びＲ₆が、請求項１で定義した通りである、請求項３７に記載の化合物。
前記化合物が、５−［１−（４−エトキシ−２−メチルアミノ−キナゾリン−６−イル）−メタ−（Ｚ）−イリデン］−２−２−フェニル−シクロプロピルアミノ）−チアゾール−４−オンである、請求項３８に記載の化合物。
Ｘがヒドロキシ−低級アルキレンである、請求項１５に記載の化合物。
Ｒ₁”が

であって、

が、フェニル環であり；且つ
Ｒ₅及びＲ₆が、請求項１で定義した通りである、請求項４０に記載の化合物。
前記化合物が、２−（1−ヒドロキシメチル−２−フェニル−エチルアミノ）−５−［１−キナゾリン−６−イル−メチリデン］−チアゾール−４−オンである、請求項４１に記載の化合物。
Ｒ₁が、水素又は

であり；
Ｘが、低級アルキレン、３〜６個の炭素原子を含むシクロ低級アルキレン及びヒドロキシ低級アルキレンから選択され；

が、アリール環、３〜６個の炭素原子を含むシクロ低級アルキル環、３〜５個の炭素原子並びに酸素、窒素及び硫黄から成る群から選択される１〜２個のヘテロ原子を含む４〜６員ヘテロシクロアルキル環、並びに酸素、硫黄及び窒素から成る群から選択される１〜２個のヘテロ原子を含む５又は６員芳香族複素環から選択され；
Ｒ₅及びＲ₆が、独立に、水素、ヒドロキシ、ヒドロキシ−低級アルキル、低級アルキル、ハロゲン、ペルフルオロ−低級アルキル及び低級アルコキシから成る群から選択され；
Ｒ₃が、水素、−ＮＨＲ₇、及び−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ₈から選択され；
Ｒ₄が、水素、低級アルキル、及び−Ｏ（ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ）y−Ｒ₁₀から選択され；
Ｒ₇が、水素又は低級アルキルであり；
Ｒ₈及びＲ₁₀が、低級アルキルであり；
ｎが、０〜１の整数であり；且つ
ｙが、０〜３の整数である；
ただし、ｎが０である場合、Ｒ₁、Ｒ₃及びＲ₄の１つが水素以外である、請求項１に記載の式Ｉの化合物、
又は、Ｒ₁が芳香族複素環中に窒素を含む場合の化合物のＮ−酸化物、Ｒ₁がヘテロシクロアルキル環又は芳香族複素環中に硫黄を含む場合のスルホン、
又は、その医薬として許容される塩。
請求項１に記載の化合物を製造するための方法であって、
ａ）式ＩＩの化合物を、

式ＩＩＩ−Ａの化合物の存在下で反応させて、

式ＩＶの化合物を得、

ｂ）式ＩＶの当該化合物を、メチル化剤、例えばヨードメタンの存在下で反応させて、式Ｖの化合物を得、

ｃ）式Ｖの当該化合物を、式ＶＩの第１級アミンの存在下で反応させて、

請求項１に記載の式Ｉの化合物を得、
ｄ）請求項１に記載の式Ｉの当該化合物を、反応混合物から単離し、必要であれば、医薬として許容される塩に変換する、前記方法。
癌、特に固形腫瘍、より詳細には肺癌、乳癌、結腸癌及び前立腺癌の処置のための、請求項１に記載の式Ｉの化合物。
医薬として許容されるアジュバントと共に、少なくとも１つの請求項１に記載の式Ｉの化合物を含んで成る医薬組成物。
癌、特に固形腫瘍、より詳細には肺癌、乳癌、結腸癌及び前立腺癌の処置のための、請求項４６に記載の医薬組成物。
癌、特に固形腫瘍、より詳細には肺癌、乳癌、結腸癌及び前立腺癌の処置のための薬剤の製造における、請求項１に記載の式Ｉの化合物の使用。
請求項４４に記載の方法により調製される、請求項１に記載の式Ｉの化合物。
実質的に上記で記載した、新規の化合物、方法、組成物及び使用。