JP2012144485A

JP2012144485A - 血糖濃度上昇抑制剤

Info

Publication number: JP2012144485A
Application number: JP2011004316A
Authority: JP
Inventors: Kotomi Ishimaru; 琴美石丸; Kazuhisa Sawada; 和久澤田; Noriko Osaki; 紀子大崎
Original assignee: Kao Corp
Current assignee: Kao Corp
Priority date: 2011-01-12
Filing date: 2011-01-12
Publication date: 2012-08-02

Abstract

【課題】食後の血糖濃度上昇を抑制することで体内の血糖値を正常な範囲に調節することができ、糖尿病や肥満、動脈硬化症の発症リスクの低下・予防・改善・緩和・処置に有用な血糖濃度上昇抑制剤の提供。
【解決手段】グルタミン酸のγ位のカルボキシル基とα位のアミノ基がペプチド結合したポリグルタミン酸でそのカルボキシル基の水素原子の５０％以上がカリウムに置換されたものを有効成分として含有する医薬又は食品用途として有用な血糖濃度上昇抑制剤。
【選択図】なし

Description

本発明は、血糖濃度上昇抑制剤に関する。

通常、食後、特に糖質を含む食事を摂取した後は、血糖値が上昇することにより、インスリン分泌が促進される。インスリンは、脂肪組織・筋肉への糖取込みを促進し、中性脂肪（脂肪細胞）やグリコーゲン（筋細胞）として貯蔵する。また、インスリンは肝臓において糖新生（糖放出）を抑制する。このようにインスリンは肝臓・筋肉・脂肪などに作用し、食後の急激な血糖値上昇を抑制する。しかし、高血糖状態が維持され、インスリンの分泌が続くと、インスリンの標的臓器である筋肉、肝臓、脂肪組織でのインスリン感受性の低下（インスリン抵抗性）が生じ、さらに膵臓からインスリンがより多く分泌されるようになる。そして、インスリン分泌が繰り返されると、最終的に膵臓が疲弊し、膵β細胞からのインスリンの分泌が低下するが、各標的臓器のインスリン抵抗性は増大したままの状態となる。斯くしてインスリン作用機構が正常に機能しなくなると、肥満や糖尿病等になりやすい体質、更には肥満やＩＩ型糖尿病（高血糖症）等になることが知られている。

近年、食後高血糖や高脂血症が心血管イベントの独立した危険因子であることが報告され（非特許文献１、２）、空腹時高血糖と循環器疾患が原因で死亡する確率との相関は低いが、糖負荷試験（ＯＧＴＴ）２時間値が２００ｍｇ／ｄＬ以上の高血糖者では、その血糖値と循環器疾患が原因で死亡する確率との相関が高いことが報告されている（非特許文献２）。さらに、血管内皮細胞を高血糖の状態で培養した場合、継続的に高血糖の状態にした場合よりも断続的に高血糖の状態にした場合に細胞のアポトーシスが高頻度に起こること（非特許文献３）も報告されている。
従って、食後の急激な血糖濃度上昇とそれに伴う高インスリン血症を改善することが、糖尿病、動脈硬化症の予防につながると考えられている。

更に、健常者と比較し、Ｉ型糖尿病ではインスリン分泌が低いこと、ＩＩ型糖尿病では食後早期のインスリン分泌反応が低いのが特質である。健常者の食後血糖値は、インスリンにより調節され、通常、食事に反応して７．８ｍｍｏｌ/Ｌ(１４０ｍｇ/ｄＬ)よりも上昇することはなく、一般的に２〜３時間以内に食前値に戻る（非特許文献４、５）。しかしながら、インスリン作用が低下しているＩ型およびＩＩ型糖尿病患者では、極めて頻繁に食後高血糖の現象が認められる。更に、食後高血糖は進行性のインスリン作用の低下やβ細胞機能（インスリン分泌低下）という臨床的に明らかな糖尿病よりも前に生じる現象であり、食後の高血糖を防ぐことは、糖尿病、動脈硬化症の予防にもつながると考えられている。

このような観点から、食後高血糖の改善のために、小腸における糖質の消化・吸収を遅延させるα−グルコシダーゼ阻害薬の投与や、インスリンの分泌を促すスルフォニウムウレア系製剤、速効型インスリン分泌促進薬等の投与が行われている。

しかし、α−グルコシダーゼ阻害薬は、糖質摂取前の投与でないと効果が発揮できないこと、単糖であるグルコース摂取による血糖濃度上昇には作用しないこと、大腸内での糖の異常発酵による下痢・ガスの貯留などの腸管症状が問題となっている。また、スルフォニウムウレア系製剤は糖質摂取前の投与でないと効果が発揮できないことや過剰に投与するとインスリンの過剰分泌を招き、低血糖を来すことがあり、注意が必要である。さらにこれら医療用合成製剤は、処方箋を必要とするため、簡易には入手できないばかりか、製剤の投与又は服用により種々の副作用を伴うことがあり、その使用にあたっては医師の厳格な管理・指導が必要である。
このため、日常的に用いることができ、かつ副作用の少ない食後高血糖改善剤が求められていた。

特許文献１には、血糖値上昇を抑制するために、ポリグルタミン酸を用いた血糖値改善剤が提案されている。ポリグルタミン酸は、その保水力の高さから保湿剤、吸収剤等として広く使用されており、生分解性ポリマーとして注目されている。また、小腸からのカルシウム吸収促進作用や血圧上昇抑制作用、唾液分泌促進作用があることが報告されている（例えば、特許文献２、３参照）。
しかし、ポリグルタミン酸の特定の塩に関する血糖濃度上昇抑制作用については、これまで具体的な報告がない。

特開２００５−２００３３０号公報特開平５−９５７６７号公報特開２００８−２５５０６３号公報

Diabetes Care．1999；22：920−924 Arch Intern Med．2001；161：397−405 Am J Physiol Endocrinol Metab 2001；281：E924−930 Diabetes Care 2001；24（4）：775−778 J Clin Invest 1988；81（2）：442−448

本発明は、食後の血糖濃度上昇を抑制しうる血糖濃度上昇抑制剤を提供することを課題とする。また、血糖濃度の上昇の結果引き起こされる糖尿病や肥満、動脈硬化症を予防・改善するのに有用な血糖濃度上昇抑制剤を提供することを課題とする。
すなわち本発明は、医薬又は食品用途として有用な血糖濃度上昇抑制剤を提供することを課題とする。具体的には、本発明は、食後の血糖濃度上昇を抑えることで、糖尿病や肥満、動脈硬化症の発症リスクの低下・予防・改善・緩和・処置のための医薬又は非医薬用途である食品用途として有用な血糖濃度上昇抑制剤を提供することを課題とする。

本発明者等は上記課題に鑑み、鋭意検討を行った。その結果、ポリグルタミン酸のカリウム塩に優れた血糖濃度上昇抑制効果があることを見出した。本発明はこれらの知見に基づいて完成するに至ったものである。

本発明は、ポリグルタミン酸のカリウム塩を有効成分として含有する血糖濃度上昇抑制剤に関する。

本発明の血糖濃度上昇抑制剤は、血糖濃度上昇、特に食後における血糖濃度上昇を抑制することができる。さらに、本発明の血糖濃度上昇抑制剤は、食後の血糖濃度上昇を抑制することで体内の血糖値を正常な範囲に調節することができ、糖尿病や肥満、動脈硬化症の発症リスクの低下・予防・改善・緩和・処置に有用である。

以下、本発明を詳細に説明する。
本発明の血糖濃度上昇抑制剤は、ポリグルタミン酸のカリウム塩を有効成分として含有する。ポリグルタミン酸は、グルタミン酸のγ位のカルボキシル基とα位のアミノ基がペプチド結合したもので、その構造式は(-NH-CH(COOH)-CH₂-CH₂-CO-)nで表されるが、本発明に用いられるポリグルタミン酸のカリウム塩は、前記構造式におけるカルボキシル基の水素原子の５０％以上がカリウムに置換されたものである。本発明に用いられるポリグルタミン酸のカリウム塩は、前記構造式においてカルボキシル基の水素原子の６０％がカリウムに置換されたものであることが好ましく、さらに上記カルボキシル基の水素原子の７０％以上、さらに８０％以上、さらに９０％以上、さらに９５％以上、殊更９９％以上がカリウムに置換されたものであることが好ましいが、実質的にすべてのカルボキシル基がカリウムに置換されたものであることが特に好ましい。また、前記構造式において末端に位置することになるカルボキシル基も、カリウムで置換されたものであることが好ましい。
ポリグルタミン酸のカリウム塩は、ポリグルタミン酸や、他のポリグルタミン酸の塩に比べて血糖濃度の上昇を顕著に抑制する作用を有する。従って、当該ポリグルタミン酸のカリウム塩は、血糖濃度上昇抑制剤として使用することができ、また、血糖濃度上昇抑制剤を製造するために使用することができる。ポリグルタミン酸のカリウム塩が食後の血糖濃度上昇を抑制する作用があることは今まで知られていなかった。また、ポリグルタミン酸のカリウム塩に肥満の予防・改善効果があることも知られていない。本発明に用いられるポリグルタミン酸のカリウム塩は、後述の実施例で示すように、血糖濃度上昇、特に食後の血糖濃度上昇を抑制する効果を有する。

本発明において、「血糖濃度上昇を抑制する」とは、主として食後の血糖値の上昇を抑制することを意味する。食後の血糖濃度上昇の抑制は、食後に引き起こされる血糖値の上昇を必ずしも完全に抑制することを意味するものではなく、本発明の血糖濃度上昇抑制剤を投与していない場合に比べて、血糖値の上昇度合を穏やかにすることをも含む概念である。

後述の実施例に示すように、本発明に用いられるポリグルタミン酸のカリウム塩の血糖濃度上昇抑制効果は、ポリグルタミン酸カリウム塩の分子量に関わらず全般的に認められる。
本発明に用いられるポリグルタミン酸のカリウム塩の分子量は、重量平均分子量が約５００以上であることが好ましく、１，０００以上であることがより好ましく、２，０００以上であることがさらに好ましく、３，０００以上であることがさらに好ましく、６，０００以上であることが特に好ましい。
また、使用されるポリグルタミン酸のカリウム塩の重量平均分子量の上限は約５，０００，０００であるのが好ましいが、製造面、及び本発明の血中血糖濃度上昇抑制剤を経口用液体製剤としたときの喉ごし、ぬるつき、嚥下のしやすさなどの観点から、その粘度が比較的低い方が好ましく、使用されるポリグルタミン酸のカリウム塩の重量平均分子量は１,０００,０００以下であるのがより好ましく、５００,０００以下であるのがさらに好ましい。
より具体的には、本発明に用いるポリグルタミン酸のカリウム塩の重量平均分子量は５００〜５，０００，０００であることが好ましく、１，０００〜１，０００,０００であることがより好ましく、２，０００〜５００,０００であることがさらに好ましく、３，０００〜５００,０００であることがさらに好ましく、６，０００〜５００,０００であることがさらに好ましく、８，０００〜４００，０００であることが特に好ましく、１０，０００〜３００，０００であることが殊更好ましい。
重量平均分子量の測定は、例えば、ゲルろ過カラムを用いた高速液体クロマトグラフィーにより行うことができる。

本発明に用いられるポリグルタミン酸のカリウム塩は、化学的合成や微生物によって生産したポリグルタミン酸又はその塩、あるいは市販されているポリグルタミン酸又はその塩を、後述する実施例に記載されているように水酸化カリウム水溶液を用いて中和することで得ることができる。また、カリウムを含有する混合培地で培養した微生物によって生産することもできる。ポリグルタミン酸のカリウム塩を構成するグルタミン酸の光学活性はＤ体でもＬ体でもよく、それらの混合物でもよい。天然のポリグルタミン酸は、グルタミン酸がγ位で結合した重合体であり、野生型でポリグルタミン酸を生産する微生物としては、例えば、納豆菌を含む一部のバチルス（Bacillus）属細菌とその近縁種（Bacillus subtilis var．chungkookjang、Bacillus licheniformis、Bacillus megaterium、Bacillus anthracis、Bacillus halodurans）や、Natrialba aegyptiaca、Hydra等を挙げることができる［Ashiuchi，M.，et al.:Appl．Microbiol．Biotechnol.，59，pp.9-14(2002)］。また、遺伝子組換え技術を用いたポリグルタミン酸の生産例としては、プラスミドにて遺伝子導入された組換え枯草菌（Bacillus subtilis ISW1214株）において約9g/L/5日［Ashiuchi，M.，et al.:Biosci．Biotechnol．Biochem.，70，pp.1794-1797(2006)］、プラスミドにて遺伝子導入された組換え大腸菌において約4g/L/1.5日[Jiang，H.，et al.:Biotechnol．Lett.，28，pp.1241-1246(2006)]の生産性が得られることが知られている。或いは、ポリグルタミン酸は、食品添加物、化粧品素材及び増粘剤等として商業的に生産されており、国内及び海外のポリグルタミン酸メーカーが供給するポリグルタミン酸を購入することもできる（例えば、国内メーカー：日本ポリグル、一丸ファルコス、明治フードマテリア等、海外メーカー：バイオリーダース等）。

本発明に用いられるポリグルタミン酸のカリウム塩は、糖質、脂質及び／又は蛋白質を摂取した後の血糖濃度上昇を抑制することができる。しかもその抑制効果は、ポリグルタミン酸や他のポリグルタミン酸塩と比較して顕著に優れる。

本発明の血糖濃度上昇抑制剤は、前記ポリグルタミン酸のカリウム塩そのものであってもよい。また、本発明の血糖濃度上昇抑制剤は、ポリグルタミン酸のカリウム塩の他に、例えば酸化チタン、炭酸カルシウム、蒸留水、乳糖、デンプン等の適当な液体または固体の賦形剤または増量剤を含んでもよい。この場合、ポリグルタミン酸のカリウム塩の配合量は特に制限されないが、血糖濃度上昇抑制剤中０．０１〜１００質量％含まれるのが好ましく、０．１〜９５質量％含まれるのがより好ましく、５〜９０質量％含まれるのが更に好ましく、１０〜８５質量％含まれるのが特に好ましい。

本発明の血糖濃度上昇抑制剤を食品や医薬品等の用途に用いる場合、ポリグルタミン酸のカリウム塩を単体でヒト及び動物に、消化管内投与、腹腔内投与、血管内投与、皮内投与、皮下投与等により投与できる他、各種食品、医薬品、ペットフード等に配合して摂取することができる。食品としては、一般食品のほか、血糖濃度上昇抑制、肥満や糖尿病の発症リスクの低下・予防・改善・緩和・処置をコンセプトとし、必要に応じてその旨を表示した美容食品、病者用食品、特定保健用食品等の食品に応用できる。医薬品として使用する場合は、例えば、錠剤、顆粒剤等の経口用固形製剤や、内服液剤、シロップ剤等の経口用液体製剤とすることができる。

なお、経口用固形製剤を調製する場合にはポリグルタミン酸のカリウム塩に、賦形剤、必要に応じて結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味剤、矯臭剤等を加えた後、常法により錠剤、被覆錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤等を製造することができる。また、経口用液体製剤を調製する場合は、矯味剤、緩衝剤、安定化剤、矯味剤等を加えて常法により内服液剤、シロップ剤、エリキシル剤等を製造することができる。

上記各食品や製剤中のポリグルタミン酸のカリウム塩の配合量は特に制限されないが、０．０１〜１００質量％含まれるのが好ましく、０．０３〜９０質量％含まれるのがより好ましく、０．１〜８０質量％含まれるのが更に好ましく、０．３〜７０質量％含まれるのが特に好ましく、１〜６０質量％含まれるのが殊更好ましい。
上記各食品や製剤中の有効投与（摂取）量は、ポリグルタミン酸のカリウム塩として、１日当たり０．０１ｇ／ｋｇ体重〜１．０ｇ／ｋｇ体重とするのが好ましく、０．００３ｇ／ｋｇ体重〜０．５ｇ／ｋｇ体重とするのがより好ましく、０．０１ｇ／ｋｇ体重〜０．２ｇ／ｋｇ体重とするのが更に好ましい。また、本発明の血糖濃度上昇抑制剤は、食前・食中・食後に用いると効果的であり、食前又は食中に用いることが好ましく、食前1時間から食中に用いることがより好ましい。
投与又は摂取対象者としては、それを必要としている者であれば特に制限されないが、空腹時血糖値が１００ｍｇ／ｄＬ以上、あるいは、空腹時血中トリグリセリド値が１００ｍｇ／ｄＬ以上の者を投与又は摂取対象者とすることが好ましい。また、食後２時間時血糖値が１４０ｍｇ／ｄＬ以上のものを投与又は摂取対象者とすることが好ましい。

以下、本発明を実施例に基づきさらに詳細に説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。

〔分析方法〕
ポリグルタミン酸のカリウム塩の定量法及び重量平均分子量測定法−１：
ポリグルタミン酸のカリウム塩の定量及び重量平均分子量測定は、Ｄ−６０００（日立ハイテクノロジーズ社製）ＨＰＬＣシステムを用いてゲルろ過法にて実施した。分析条件は、分析カラムにＴＳＫＧｅｌＧ４０００ＰＷＸＬ及びＴＳＫＧｅｌＧ６０００ＰＷＸＬゲルろ過カラム（商品名、東ソー社製）を用い、溶離液に０．１Ｍ硫酸ナトリウムを使用し、流速１．０ｍＬ／分、カラム温度５０℃とし、ＵＶ検出波長を２１０ｎｍとした。また、濃度は分子量８８０ｋのポリグルタミン酸（明治フードマテリア社製）を標準品として用いて検量線を作成することで算出した。また、重量平均分子量は、プルラン（商品名：ＳｈｏｄｅｘＳＴＡＮＤＡＲＤＰ−８２、昭和電工社製）を用いて予め重量平均分子量を求めた分子量の異なる複数のポリグルタミン酸（和光純薬工業社製（商品名：１６２−２１４１１、１６２−２１４０１）、ＳＩＧＭＡ−ＡＬＤＲＩＣＨ社製（商品名：Ｐ−４８８６、Ｐ−４７６１）、明治フードマテリア社製（分子量８８０ｋ））を標準品として用いて測定した。

ポリグルタミン酸のカリウム塩の重量平均分子量測定法−２：
分子量が１０ｋ前後となる低分子量ポリグルタミン酸のカリウム塩の重量平均分子量測定は、Ｄ−６０００（日立ハイテクノロジーズ社製）ＨＰＬＣシステムを用いてゲルろ過法にて実施した。分析条件は、分析カラムにＴＳＫＧｅｌＧ３０００ＰＷＸＬゲルろ過カラム（商品名、東ソー社製）を用い、溶離液に０．１Ｍ硫酸ナトリウムを使用し、流速０．８ｍＬ／分、カラム温度５０℃とし、ＵＶ検出波長を２１０ｎｍとした。重量平均分子量は、プルラン（商品名：ＳｈｏｄｅｘＳＴＡＮＤＡＲＤＰ−８２、昭和電工社製）を用いて予め重量平均分子量を求めたポリグルタミン酸（明治フードマテリア社製、分子量９ｋ）、ポリーヒドロキシプロリン（ＳＩＧＭＡ−ＡＬＤＲＩＣＨ社製、分子量４ｋ）を標準品として用い測定した。

ポリグルタミン酸塩の金属分析法：
ポリグルタミン酸塩の金属分析は、Ｄ−７０００（日立ハイテクノロジーズ社製）ＨＰＬＣシステムを用いてイオンクロマト法にて実施した。分析条件は、ガードカラムにＳｈｏｄｅｘＩＣＹＫ−Ｇ、分析カラムにＳｈｏｄｅｘＩＣＹＫ−４２１（いずれも商品名、昭和電工社製）を用い、溶離液を１．５ｍＭクエン酸水溶液とし、流速１．０ｍＬ／分、カラム温度４０℃で電気伝導度検出器を用いて検出を行なった。標準試料として関東化学社製のナトリウム標準液（１０００ｐｐｍ）及びカリウム標準液（１０００ｐｐｍ）を用い、これらの標準品について１０〜１００ｍｇ／Ｌの範囲で検量線を作成し、これらの検量線に基づきポリグルタミン酸塩の金属分析を実施した。

〔調製例１〕重量平均分子量１２，０００のポリグルタミン酸カリウム塩の調製
重量平均分子量９，０００のポリグルタミン酸のナトリウム塩（明治フードマテリア社製）を初発材料として、１０％（ｗ／ｗ）水溶液を５００ｍＬ作製し、氷冷下にて塩酸を用いてｐＨ２以下に調整した。続いて、生成した酸沈殿物を８，０００ｒｐｍ、５分の遠心分離（商品名：ｈｉｍａｃＣＲ２１ＧＩＩＩ、日立工機社製）にて回収し、得られた沈殿物を同量の蒸留水を用いて洗浄し、再度遠心分離に供した。この洗浄操作を２回繰り返し行なった後、得られた沈殿物を３００ｍＬの蒸留水に懸濁し、これをｐＨ７以上となるように水酸化カリウム水溶液を用いて中和した。この上記酸処理および水酸化カリウムによる中和処理を再度実施し、得られた中和試料に対して２．５倍量のエタノールを添加し、氷冷下にて一晩放置した。このエタノール添加により生成した沈殿物を１４，０００ｒｐｍ、５分の遠心分離（同上）にて回収し、回収試料を減圧乾燥に供して、２７．４ｇの固形物を得た。この試料の重量平均分子量は前述の分析方法により、１２，０００と算出された。また、この試料はポリグルタミン酸のカルボキシル基量に相当する量のカリウムが検出され、ナトリウムは検出限界以下であったため、中和前のポリグルタミン酸の実質的にすべてのカルボキシル基の水素原子がカリウムに置換されたものであることが確認された。

〔調製例２〕重量平均分子量２４０，０００のポリグルタミン酸カリウム塩の調製
重量平均分子量３５０，０００のポリグルタミン酸のナトリウム塩（明治フードマテリア社製）を初発材料として、５％（ｗ／ｗ）水溶液を１Ｌ作製し、氷冷下にて塩酸を用いてｐＨ１以下に調整した。続いて、生成した酸沈殿物を８，０００ｒｐｍ、５分の遠心分離（商品名：ｈｉｍａｃＣＲ２１ＧＩＩＩ、日立工機社製）にて回収し、得られた沈殿物を同量の蒸留水を用いて洗浄し、再度遠心分離に供した。この洗浄操作を２回繰り返し行なった後、得られた沈殿物を８００ｍLの蒸留水に懸濁し、これをｐＨ７以上となるように水酸化カリウム水溶液を用いて中和した。この上記酸処理および水酸化カリウムによる中和処理を再度実施し、このエタノール添加により生成した沈殿物を１４，０００ｒｐｍ、５分の遠心分離（同上）にて回収し、回収試料を減圧乾燥に供して、３６．２ｇの固形物を得た。この試料の重量平均分子量は前述の分析方法により、２４０，０００と算出された。また、この試料はポリグルタミン酸のカルボキシル基量に相当する量のカリウムが検出され、ナトリウムは検出限界以下であったため、中和前のポリグルタミン酸の実質的にすべてのカルボキシル基の水素原子がカリウムに置換されたものであることが確認された。

〔試験例〕ポリグルタミン酸のカリウム塩の血糖濃度上昇抑制作用
重量平均分子量１２，０００及び２４０，０００（調製例１、２で調製）のポリグルタミン酸のカリウム塩と、重量平均分子量９，０００及び３５０，０００のポリグルタミン酸のナトリウム塩（明治フードマテリア社製）を用いて下記のように経口投与サンプルを調製した。
また、８週齢の雄性マウス（C57BL/6J Jcl：日本クレア社製）を各群１０匹ずつ用いて下記のように経口投与試験を行った。

経口投与サンプルの調製：
グルコース（関東化学社製）とトリオレイン（Glyceryl trioleate：Sigma社製）をレシチン（卵製、和光純薬社製）とアルブミン(ウシ血清由来、Sigma社製)を用いて乳化し、乳液を調製した。この乳液に、ポリグルタミン酸塩試料を添加し、最終濃度がポリグルタミン酸塩試料５（ｗ/ｗ）％、グルコース５（ｗ/ｗ）％、トリオレイン５（ｗ/ｗ）％、乳化剤（レシチン０．２（ｗ/ｗ）％、アルブミン１．０（ｗ/ｗ）％）となるよう、経口投与サンプルを調製した。なお、コントロールサンプルとして、ポリグルタミン酸塩の代わりに水を添加したサンプルを調製した。

経口投与試験：
一晩絶食させたマウスをエ−テル麻酔下、眼窩静脈よりヘパリン処理ヘマトクリット毛細管（VITREX社製）を用い、初期採血を行った。その後、経口投与サンプルを経口ゾンデ針にて経口投与し、１０分、３０分、１時間、２時間後にエーテル麻酔下、眼窩静脈より採血を行った。マウスに対する経口投与量を下記表１に示す。

ヘパリン処理ヘマトクリット毛細管で採取した血液から、直ちに簡易血糖測定装置ＡＣＣＵ-ＣＨＥＫ（商品名、Roche Dagnostics社製）を用いて血糖値を測定した。
サンプル経口投与後の２時間後までの血糖値を測定した結果、血糖値が最大となるのは投与後１０分後であることがわかった。そこで、血糖の最大値（投与１０分後）と初期値（初期採血時）の差（Δ値）を最大血糖濃度上昇と定義し、コントロール群を１００としたときの値を表２に示した。

得られた最大血糖濃度上昇の値をもとに、群間の統計学的有意差についても検討し、その結果も表２に示した。分散分析によって有意性（Ｐ＜０．０５）が認められた場合、多重比較検定（Bonferroni／Dunn法）により、コントロール群と各ポリグルタミン酸塩投与群との間、及び類似分子量のナトリウム塩投与群とカリウム塩投与群との間での検定を行い、得られた結果から、Ｐ＜０．０５を有意な差として有意性を判断した。

表２の結果から、ポリグルタミン酸のナトリウム塩には、分子量に係わらず血糖濃度上昇抑制作用が認められないことがわかる。これに対し、ポリグルタミン酸のカリウム塩を投与した群では、コントロール群とナトリウム塩投与群のいずれと比較しても有意に血糖濃度上昇が抑制されていた。以上の結果から、血糖濃度上昇抑制剤の有効成分として、ポリグルタミン酸のカリウム塩を採用することで、他のポリグルタミン酸塩にはない顕著な血糖濃度上昇抑制効果が得られることがわかった。

前述のように、食後の急激な血糖濃度上昇はインスリン抵抗性を生じ、ひいては糖尿病や肥満、動脈硬化症を引き起こすことが知られている。そのため、前記ポリグルタミン酸のカリウム塩は、急激な血糖濃度上昇を効果的に抑制することで、糖尿病や肥満、動脈硬化症の予防・改善等に好適に用いることができる。

Claims

ポリグルタミン酸のカリウム塩を有効成分として含有する血糖濃度上昇抑制剤。