JP2015155394A - 光老化抑制剤 - Google Patents
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Abstract
Description
[1]有効成分として、カミツレエキスおよびラン科植物エキスを含有する皮膚光老化抑制剤。
[2]有効成分として、カミツレエキスおよびラン科植物エキスを含有する皮膚内糖酸化抑制剤。
[3]有効成分として、カミツレエキスおよびラン科植物エキスを含有する光老化防止用皮膚外用剤。
カミツレ Matricaria chamomilla L. (Compositae)の花を細切し、自然乾燥した。この乾燥品10kgに30%エタノール溶液を加えて浸漬した後、圧搾分離し、抽出液を得た。一方、残渣に30%エタノール溶液を加え、同様の方法で浸漬、分離した後、溶媒を減圧下で蒸発除去した軟エキスを、先に得られた抽出液に加えてよく撹拌した後、これをろ過し、そのろ液に1,3−ブチレングリコール(2L)を加えてよく撹拌し、静置、ろ過してカミツレエキス(乾燥固形分約1.0重量%)を得た。このエキスにはタンニンが確認された。
カミツレ Matricaria chamomilla Linne (Compositae) の花に70%1,3−ブチレングリコール溶液を加えて抽出し、ろ過して得たろ液に水を加えて混合し、冷暗所にて静置した後、ろ過してカミツレエキス(乾燥固形分約0.8重量%)を得た。このエキスにはタンニンが確認された。
ラン科デンドロビウム属植物(Dendrobium)の交配種 Dendrobium HYBRID の茎、レリア属植物(Laelia)とカトレヤ属植物(Cattleya)の交配種 Laeliocattleya Drumbeat の葉及び茎並びにブラッサボラ属植物(Brassavola)とカトレヤ属植物(Cattleya)の交配種 Brassocattleya Marcella Koss の葉及び茎に、50%1,3−ブチレングリコール溶液を加えて抽出し、ろ過してラン科植物エキス(乾燥固形分約0.2重量%)を得た。このエキスには、アミノ酸および糖(グルコース)が確認された。
(皮膚一次刺激性試験)
本発明のカミツレエキスおよびラン科植物エキスの混合物(2:1〜1:1)を乾燥固形分濃度が1.0重量%となるように調製し、背部を剃毛した日本白色家兎(雌性、1群3匹、体重2.1kg前後)の皮膚に適用した。適用の24、48、72時間後にドレイズの判定基準に基づき紅斑及び浮腫を指標として評価を行った。その結果は、全ての動物において、何等、紅斑及び浮腫を認めず、皮膚一次刺激性に関して問題がないことを確認した。
本発明のカミツレエキスおよびラン科植物エキスの混合物(2:1〜1:1)を乾燥固形分濃度が1.0重量%となるように調製し、背部を剃毛したハートレー系モルモット(雌性、1群3匹、体重320g前後)の皮膚に1日1回、週5回、0.5mL/匹を塗布した。塗布は2週に渡って行い、剃毛は各週の最終塗布日に行った。各塗布日及び最終塗布日の翌日にドレイズの判定基準に基づき紅斑及び浮腫を指標として評価を行った。その結果は、全ての動物において、2週間に渡って何等、紅斑及び浮腫を認めず、皮膚累積刺激性に関して問題がないことを確認した。
UVAを照射していない新生児包皮由来ケラチノサイト(継代数7)及び成人腹部皮膚由来ケラチノサイト(継代数9及び10)における、p16INK4a遺伝子の発現量を測定した。結果は表1に示され、成人腹部皮膚由来ケラチノサイトにおいて、老化関連遺伝子p16INK4aの強い発現が認められた。
[試料]
(1):製造例2のカミツレエキス(終濃度0.002%)
(2):製造例2のカミツレエキス(終濃度0.001%)+製造例3のラン科植物エキス(終濃度0.0005%)
(3):対照として、70%ブチレングリコール
[方法]
5×104個の成人腹部皮膚由来ケラチノサイト(TOYOBO)をφ35mm細胞培養用ディッシュに播種しサブコンフルエントになるまで培養し、これに試料を添加後更に一晩培養した。培養後培地をEpiLife Medium(Calcium-and Phenol Red-Free)に置換し、ケラチノサイトに照射量;5J/cm2になるようUVA照射を行った。再度試料を添加した培地に交換して一晩培養した後細胞を回収し、リアルタイムPCR法にてp21Cip1遺伝子発現量を測定した。
[結果]
p21Cip1遺伝子発現量は、図1及び図2のとおりであった。これら結果に見られるとおり、老化関連遺伝子p16INK4aの強い発現が認められる成人皮膚由来ケラチノサイトにおいて(表1)、UVA照射によりp21Cip1の発現量の増加が認められた(図1及び図2)。このUVA照射によるp21Cip1の発現上昇はカミツレエキス単独添加では抑えられなかったが、カミツレエキスおよびラン科植物エキスを併用することで優位に相乗的に抑制された(図1及び図2)。
[試料]
(1):製造例2のカミツレエキス(終濃度0.002%)
(2):製造例2のカミツレエキス(終濃度0.001%)+製造例3のラン科植物エキス(終濃度0.0005%)
(3):対照として、70%ブチレングリコール
[方法]
5×104個の成人腹部皮膚由来ケラチノサイト(継代数10)(TOYOBO)をφ35mm細胞培養用ディッシュに播種しサブコンフルエントになるまで培養し、試料添加後更に一晩培養した。培養後培地をEpiLife Medium(Calcium-and Phenol Red-Free)に置換し、ケラチノサイトに照射量;5J/cm2になるようUVA照射を行った。再度試料を添加した培地に交換して一晩培養した後細胞を回収し、Western Blot法にてカルボキシメチルリジンを有する(糖酸化した)たんぱく質を検出した。
[結果]
糖酸化たんぱく質生成量は、図3のとおりであった。UVA照射により成人皮膚由来ケラチノサイトにおいて、カルボキシメチルリジンを有する(糖酸化した)たんぱく質の生成が認められる。糖酸化たんぱく質の生成については、カミツレエキス単独添加でも抑制効果が認められるが、ラン科植物エキスを併用することでより更に強く生成が相乗的に抑制されることが判明した。
本発明による皮膚光老化抑制剤、または皮膚内糖酸化抑制剤を使用して、各種皮膚外用剤を製造した。その処方例は以下のとおりである。エタノールはEtOH、1,3−ブチレングリコールは1,3−BGと略記する。
重量%
・ソルビット 2
・ポリオキシエチレンオレイルエーテル(25E.O.付加物)2
・EtOH 20
・1,3−BG 2
・アスコルビン酸2−グルコシド 0.2
・製造例1のカミツレエキス 1.0
・製造例3のラン科植物エキス 0.5
・pH調整剤 適量
・精製水 100とする量
重量%
・スクワラン 3
・ワセリン 1
・ステアリルアルコール 0.3
・ソルビタンモノステアレート 1.5
・ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノオレート 3
・1,3−BG 10
・製造例2のカミツレエキス 1.0
・製造例3のラン科植物エキス 1.0
・アスコルビン酸リン酸エステルマグネシウム塩 0.1
・アセロラ30%1,3−BG抽出液 1.0
・豚コラーゲン抽出液 2.0
・防腐剤(パラオキシ安息香酸エステル) 適量
・精製水 100とする量
質量%
・流動パラフィン 30.0
・スクワラン 20.0
・オリーブ油 20.0
・パルミチン酸イソプロピル 10.0
・オリーブ油 1.0
・液状シア脂 1.0
・ブチルヒドロキシアニソール 0.1
・DL−α−トコフェロール誘導体 0.1
・ビルベリー30%1,3−BG抽出液 1.0
・防腐剤(パラオキシ安息香酸エステル) 適量
・香料 適量
・製造例2のカミツレエキス 0.5
・製造例3のラン科植物エキス 0.5
・1,3−BG 100とする量
質量%
・サラシミツロウ 11.0
・流動パラフィン 22.0
・ラノリン 10.0
・オリーブ油 5.0
・パーム油 5.0
・カチオン性界面活性剤 3.0
・アロエベラ葉50%1,3−BG抽出液 2.0
・豚プラセンター抽出液 0.1
・アスコルビン酸リン酸エステルマグネシウム塩 0.1
・製造例1のカミツレエキス 1.0
・製造例3のラン科植物エキス 0.5
・液状シア脂 1.0
・ヒドロキシプロピルセルロース 2.0
・精製水 100とする量
Claims (3)
- 有効成分として、カミツレエキスおよびラン科植物エキスを含有する皮膚光老化抑制剤。
- 有効成分として、カミツレエキスおよびラン科植物エキスを含有する皮膚内糖酸化抑制剤。
- 有効成分として、カミツレエキスおよびラン科植物エキスを含有する光老化防止用皮膚外用剤。
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