JP2017014165A - 血流改善剤 - Google Patents

Abstract

【課題】 血流改善効果の高い血流改善組成物を提供すること。【解決手段】 シトルリンと、ターミナリア、稲、マキベリー、黒ショウガ、ショウガ、ヒハツ、コショウ等の植物素材などの特定の成分とを有効成分として含有することを特徴とする血流改善組成物である。【選択図】図１

Description

本発明は、血流改善効果を有する組成物に係り、詳しくは、シトルリン及び特定の他の成分を有効成分とする組成物に関する。

現代社会においては、運動不足やストレスによる自律神経失調等の様々な要因から、血液の循環（血流）の不調が問題となることが多い。この血流の不調（血流量の低下）は、頭痛、肩凝り、肌のくすみ、冷え性、むくみ等の様々な症状を引き起こすため、健康上、美容上の観点から、血流量を増加させ、血流を改善する方策が求められている。

このような血流改善のための組成物として、例えば、ヒソップ抽出物（特許文献１参照）や、カシス濃縮物とアミノ酸または有機酸を含む組成物（特許文献２参照）や、カモミール抽出エキス（特許文献３参照）等が提案されている。

一方、本件出願人は、松樹皮抽出物と黒胡椒抽出物とを含有する血流改善用組成物（特許文献４参照）を提案している。

特開２００６−８５７５号公報 特開２００４−２６２８７８号公報 特開２００５−６８０６９号公報 特開２０１２−０５１８３３号公報

本発明の課題は、高い血流改善効果を有する組成物を提供することにある。

本発明者らは、シトルリンの血流改善能について鋭意調査・研究したところ、シトルリンと特定の他の成分とを組み合わせることにより、高い血流改善効果が得られることを見いだし、本発明を完成するに至った。すなわち、シトルリンと、血流改善能がほとんどないか、その能力が小さい特定の他の成分を組み合わせることにより、血流改善能を相乗的に向上させることができることを見いだした。

すなわち、本発明は、シトルリンと、下記（ａ）〜（ｅ）からなる群より選ばれる少なくとも１種の成分とを有効成分として含有することを特徴とする組成物に関する。
（ａ）ターミナリア、稲、マキベリー、黒ショウガ、ショウガ、ヒハツ、及びコショウから選ばれる少なくとも１種の植物素材
（ｂ）麦芽糖、トレハロース、還元パラチノース、還元麦芽糖、ステアリン酸カルシウム、及びシェラックから選ばれる少なくとも１種の機能性添加剤
（ｃ）ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、及びバリンから選ばれる少なくとも１種のアミノ酸
（ｄ）没食子酸
（ｅ）ビタミンＡ、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＣ、パントテン酸ナトリウム、ナイアシン、葉酸、ビオチン、ビタミンＫ、イノシトール、カルシウム、亜鉛、鉄、銅、セレン、モリブデン、マグネシウム、及びクロムから選ばれる少なくとも１種のビタミン・ミネラル類

。
本発明の組成物は、シトルリンと（ａ）〜（ｅ）からなる群より選ばれる少なくとも１種の成分とからなる有効成分を添加して得たものであってもよい。

本発明の組成物において、シトルリン及び他の有効成分の配合質量比は、０．５：１〜７０：１の範囲であることが好ましい。
また、本発明の組成物は、錠剤、カプセル剤、粉末剤、顆粒剤、又は液剤であることが好ましい。

また、本発明は、上記本発明の組成物を摂取させることを特徴とする血流改善方法（ただし、医療行為を除く）に関する。

本発明の組成物によれば、血流量を増加させ、高い血流改善効果を得ることができる。

本発明の組成物（シトルリン＋植物素材）をブタ肺動脈血管内皮細胞（ＰＰＡＥＣ）に適用した場合のＮＯ産生量の結果を示す図である。左上のグラフが、植物素材としてターミナリアを用いたものであり、右上のグラフが、植物素材として稲（米ぬか）を用いたものであり、左下のグラフが、植物素材としてマキベリーを用いたものであり、右下のグラフが、植物素材として黒ショウガを用いたものである。 本発明の組成物（シトルリン＋植物素材）をブタ肺動脈血管内皮細胞（ＰＰＡＥＣ）に適用した場合のＮＯ産生量の結果を示す図である。左上のグラフが、植物素材としてショウガを用いたものであり、右上のグラフが、植物素材としてヒハツを用いたものであり、左下のグラフが、植物素材としてコショウ（バイオペリン）を用いたものである。 本発明の組成物（シトルリン＋機能性添加剤）をブタ肺動脈血管内皮細胞（ＰＰＡＥＣ）に適用した場合のＮＯ産生量の結果を示す図である。左上のグラフが、機能性添加剤として麦芽糖を用いたものであり、右上のグラフが、機能性添加剤としてトレハロースを用いたものであり、左下のグラフが、機能性添加剤として還元パラチノースを用いたものであり、右下のグラフが、機能性添加剤として還元麦芽糖を用いたものである。 本発明の組成物（シトルリン＋機能性添加剤）をブタ肺動脈血管内皮細胞（ＰＰＡＥＣ）に適用した場合のＮＯ産生量の結果を示す図である。左のグラフが、機能性添加剤としてステアリン酸カルシウムを用いたものであり、右のグラフが、機能性添加剤としてシェラックを用いたものである。 本発明の組成物（シトルリン＋アミノ酸）をブタ肺動脈血管内皮細胞（ＰＰＡＥＣ）に適用した場合のＮＯ産生量の結果を示す図である。左上のグラフが、アミノ酸としてロイシンを用いたものであり、右上のグラフが、アミノ酸としてメチオニンを用いたものであり、左下のグラフが、アミノ酸としてフェニルアラニンを用いたものであり、右下のグラフが、アミノ酸としてプロリンを用いたものである。 本発明の組成物（シトルリン＋アミノ酸）をブタ肺動脈血管内皮細胞（ＰＰＡＥＣ）に適用した場合のＮＯ産生量の結果を示す図である。左上のグラフが、アミノ酸としてセリンを用いたものであり、右上のグラフが、アミノ酸としてトレオニンを用いたものであり、左下のグラフが、アミノ酸としてトリプトファンを用いたものであり、右下のグラフが、アミノ酸としてチロシンを用いたものである。 本発明の組成物（シトルリン＋アミノ酸）をブタ肺動脈血管内皮細胞（ＰＰＡＥＣ）に適用した場合のＮＯ産生量の結果を示す図であり、アミノ酸としてバリンを用いたものである。 本発明の組成物（シトルリン＋ポリフェノール）をブタ肺動脈血管内皮細胞（ＰＰＡＥＣ）に適用した場合のＮＯ産生量の結果を示す図であり、ポリフェノールとして没食子酸を用いたものである。 本発明の組成物（シトルリン＋ビタミン・ミネラル類）をブタ肺動脈血管内皮細胞（ＰＰＡＥＣ）に適用した場合のＮＯ産生量の結果を示す図である。左上のグラフが、ビタミン類としてビタミンＡを用いたものであり、右上のグラフが、ビタミン類としてビタミンＢ１を用いたものであり、左下のグラフが、ビタミン類としてビタミンＢ２を用いたものであり、右下のグラフが、ビタミン類としてビタミンＣを用いたものである。 本発明の組成物（シトルリン＋ビタミン・ミネラル類）をブタ肺動脈血管内皮細胞（ＰＰＡＥＣ）に適用した場合のＮＯ産生量の結果を示す図である。左上のグラフが、ビタミン類としてパントテン酸ナトリウムを用いたものであり、右上のグラフが、ビタミン類としてナイアシンを用いたものであり、左下のグラフが、ビタミン類として葉酸を用いたものであり、右下のグラフが、ビタミン類としてビオチンを用いたものである。 本発明の組成物（シトルリン＋ビタミン・ミネラル類）をブタ肺動脈血管内皮細胞（ＰＰＡＥＣ）に適用した場合のＮＯ産生量の結果を示す図である。左のグラフが、ビタミン類としてビタミンＫを用いたものであり、右のグラフが、ビタミン類としてイノシトールを用いたものである。 本発明の組成物（シトルリン＋ビタミン・ミネラル類）をブタ肺動脈血管内皮細胞（ＰＰＡＥＣ）に適用した場合のＮＯ産生量の結果を示す図である。左上のグラフが、ミネラル類としてカルシウムを用いたものであり、右上のグラフが、ミネラル類として亜鉛を用いたものであり、左下のグラフが、ミネラル類として鉄を用いたものであり、右下のグラフが、ミネラル類として銅を用いたものである。 本発明の組成物（シトルリン＋ビタミン・ミネラル類）をブタ肺動脈血管内皮細胞（ＰＰＡＥＣ）に適用した場合のＮＯ産生量の結果を示す図である。左上のグラフが、ミネラル類としてセレンを用いたものであり、右上のグラフが、ミネラル類としてモリブデンを用いたものであり、左下のグラフが、ミネラル類としてマグネシウムを用いたものであり、右下のグラフが、ミネラル類としてクロムを用いたものである。

本発明の組成物は、シトルリンと、下記（ａ）〜（ｅ）からなる群より選ばれる少なくとも１種の成分（以下、他成分ということがある）とを有効成分として含有することを特徴とする。シトルリンと共に用いられる下記（ａ）〜（ｅ）の成分は、１種単独（例えば（ａ）成分）で用いてもよいし、２種以上組み合わせて用いてもよい。他成分を２種以上組み合せて用いる場合、シトルリンと相乗効果の高い他成分同士を組み合わせることが好ましい。

本発明の組成物（血流改善組成物）は、かかる有効成分の組合せの相乗効果により、より有効に、血管周辺の筋肉を弛緩させて血管を拡張し、血流量を増加させることができ、頭痛、肩凝り、肌のくすみ、冷え症、勃起不全等の症状を効果的に予防ないし改善することができる。

［シトルリン］
本発明の血流改善組成物の有効成分となるシトルリンとしては、Ｌ−シトルリンであっても、Ｄ−シトルリンであってもよいが、Ｌ−シトルリンであることが好ましい。シトルリンは、化学合成により得られたもの、発酵に得られたもの等、その製造方法は問わない。また、シトルリンは、塩の形態であってもよく、塩としては、薬学的に許容される塩であれば特に制限されるものではなく、例えば、無機酸塩、有機酸塩、金属塩、アンモニウム塩を挙げることができる。シトルリンは、医薬品、試薬等として市販されており、これらの市販品を用いることができる。

［他成分］
（ａ）植物素材
本発明の血流改善組成物においては、シトルリンと共に、有効成分として、ターミナリア、稲、マキベリー、黒ショウガ、ショウガ、ヒハツ、及びコショウから選ばれる少なくとも１種の植物素材を用いることが好ましい。

これらの植物素材は、葉、茎、根、花、実、幹、枝等、植物のいずれの部位であってもよく、植物素材そのもの（乾燥物を含む）の他、その粉砕物、搾汁、抽出物等の植物素材処理物を用いることができる。粉砕物としては、粉末、顆粒等が挙げられる。搾汁や抽出物は、液状であってもよいが、ペースト状や乾燥粉末として用いることもできる。抽出物は、適当な溶媒を用いて抽出することにより得ることができ、溶媒としては、例えば、水（温水、熱水）、エタノール、含水エタノールを用いることができる。これらの植物素材は、市販されているものを使用することができる。

ターミナリアとしては、例えば、Terminalia bellirica（belerica）、Terminalia catappa、Terminalia tomentosa、Terminalia citrina、Terminalia phellocarpa、Terminalia copelandii、Terminalia brassi、Terminalia ivorensis、Terminalia superba、Terminalia arjuna、Terminalia chebula等を挙げることができ、これらの中でも、Terminalia bellirica（belerica）、Terminalia chebulaが好ましい。本発明の植物素材として用いる部位としては、果実が好ましい。

稲は、イネ科イネ属の植物である。本発明の植物素材として用いる部位としては、玄米の外皮や胚が好ましく、具体的には、玄米を精白する際に副産物として得られる米ぬかを用いることが好ましい。稲の種類としては、特に制限はなく、ジャポニカ種、インディカ種等を挙げることができる。

マキベリーは、チリのパタゴニアを原産地とするポルトノキ科の植物であり、学術名は、Aristotellia chilensisである。本発明の植物素材として用いる部位としては、果実が好ましい。

黒ショウガは、学名をＫａｅｍｐｆｅｒｉａ Ｐａｒｖｉｆｌｏｒａといい、東南アジアに自生するショウガ科バンウコン属の植物である。本発明の植物素材として用いる部位としては、根茎が好ましい。

ショウガは、ショウガ科ショウガ属の植物であり、例えば、三州生姜、黄生姜、金時生姜、谷中生姜を挙げることができる。また、インドネシアやインドで栽培されている赤ショウガ（Zingiber officinale var. Rubra）も好ましく用いることができる。本発明の植物素材として用いる部位としては、根茎が好ましい。

ヒハツは、コショウ科の植物であり、本発明の植物素材として用いる部位としては、果実が好ましい。

コショウは、コショウ科の植物（Ｐｉｐｅｒ ｎｉｇｒｕｍ）であり、本発明の植物素材として用いる部位としては、果実が好ましい。収穫のタイミング等から、黒コショウ、白コショウ、赤コショウ等の種類が存在し、いずれの種類であってもよいが、黒コショウが好ましい。黒コショウは、コショウの木から取れた未熟な実を乾燥させたものであり、辛味成分ピペリンが含まれている。本発明のコショウとしては、このピペリンを含有するものが好ましい。

（ｂ）機能性添加剤
本発明の血流改善組成物においては、シトルリンと共に、有効成分として、麦芽糖、トレハロース、還元パラチノース、還元麦芽糖、ステアリン酸カルシウム、及びシェラックから選ばれる少なくとも１種の機能性添加剤を用いることが好ましい。

（ｃ）アミノ酸
本発明の血流改善組成物においては、シトルリンと共に、有効成分として、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、及びバリンから選ばれる少なくとも１種のアミノ酸（塩を含む）を用いることが好ましい。塩としては、例えば、ナトリウム塩、塩酸塩等を挙げることができる。

（ｄ）没食子酸
本発明の血流改善組成物においては、シトルリンと共に、有効成分として、没食子酸を用いることが好ましい。

（ｅ）ビタミン・ミネラル類
本発明の血流改善組成物においては、シトルリンと共に、有効成分として、ビタミンＡ、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＣ、パントテン酸ナトリウム、ナイアシン、葉酸、ビオチン、ビタミンＫ、イノシトール、カルシウム、亜鉛、鉄、銅、セレン、モリブデン、マグネシウム、及びクロムから選ばれる少なくとも１種のビタミン・ミネラル類を用いることが好ましい。なお、本発明のミネラル類としてのカルシウム、亜鉛、鉄、銅、セレン、モリブデン、マグネシウム、及びクロムは、これらの金属を含む化合物の形態を含む。

本発明の血流改善組成物は、血流改善作用を有する血流改善剤として用いることができ、かかる血流改善剤は、シトルリン及び所定の他成分を含有し、血流改善に用いられる点において、製品として他の製品と区別することができるものであれば特に制限されるものではない。例えば、本発明に係る製品の本体、包装、説明書、宣伝物のいずれかに血流改善作用の機能がある旨を表示したものが本発明の範囲に含まれる。例えば、医薬品（医薬部外品を含む）や、特定保健用食品、栄養機能食品、機能性表示食品等の所定機関より効能の表示が認められた機能性食品などのいわゆる健康食品や、飼料等を挙げることができる。いわゆる健康食品においては、「めぐりを良くする」、「冷えを改善する」、「むくみが気になる方に」、「肌の色が気になる方に」、「目のくまが気になる方に」、「血管機能を高める」、「血管のしなやかさを高める」、「男性機能のサポートに」、「男性の活力に」等を表示したものを例示することができる。本発明の血流改善剤は、上記の効果が気になる人であれば性別や年齢に関係なく摂取することができるが、本発明の血流改善剤の効果をより有効に享受することができることから、疾病者を除く健常者が摂取することが望ましく、また、上記の悩みを持つ高齢者が摂取することが望ましい。また、冷えの改善効果や男性機能の改善が得られることから、夜に摂取することが望ましい。

本発明の血流改善組成物の形態としては、例えば、錠剤、カプセル剤、粉末剤、顆粒剤、液剤、粒状剤、棒状剤、板状剤、ブロック状剤、固形状剤、丸状剤、ペースト状剤、クリーム状剤、カプレット状剤、ゲル状剤、チュアブル状剤、スティック状剤等を挙げることができる。これらの中でも、錠剤、カプセル剤、粉末剤、顆粒剤、液剤の形態が特に好ましい。具体的には、サプリメントや、ペットボトル、缶、瓶等に充填された容器詰飲料や、水（湯）、牛乳、果汁、青汁等に溶解して飲むためのインスタント粉末飲料、インスタント顆粒飲料を例示することができる。これらは食事の際などに手軽に飲用しやすく、また嗜好性を高めることができるという点で好ましい。

本発明の血流改善組成物におけるシトルリン及び他成分（有効成分）の含有量としては、その効果の奏する範囲で適宜含有させればよい。

一般的には、本発明の血流改善組成物が医薬品やサプリメント（錠剤，カプセル剤）の場合には、有効成分が乾燥質量換算で全体の０．０００１〜１００質量％含まれていることが好ましく、０．１〜８５質量％含まれていることがより好ましく、０．５〜７０質量％含まれていることがさらに好ましい。

本発明の血流改善組成物が容器詰飲料（液剤）である場合には、有効成分が乾燥質量換算で全体の０．０００１〜１５質量％含まれていることが好ましく、０．００１〜１２．５質量％含まれていることがより好ましく、０．０１〜１０質量％含まれていることがさらに好ましい。

また、本発明の血流改善組成物がインスタント粉末飲料（粉末剤）、インスタント顆粒飲料（顆粒剤）である場合には、有効成分が乾燥質量換算で全体の０．００１〜８０質量％含まれていることが好ましく、０．００５〜７０質量％含まれていることがより好ましく、０．１〜６０質量％含まれていることがさらに好ましい。

本発明の効果をより有効に発揮させるためには、有効成分が乾燥質量換算で本発明の血流改善組成物全体（水分を除く）の８０％以上含まれていることが好ましく、９０％以上含まれていることがより好ましく、９５％以上含まれていることがさらに好ましく、１００％であることが特に好ましい。さらに、本発明の血流改善組成物が成分（ａ）〜（ｅ）のいずれかを含有する場合、その含有される成分は、本発明における有効成分のみで構成されることが好ましい。すなわち、本発明の血流改善組成物が例えば成分（ａ）（植物素材）を含む場合には、ターミナリア、稲、マキベリー、黒ショウガ、ショウガ、ヒハツ、コショウ以外の植物素材を含まないように構成することが好ましい。

本発明の血流改善組成物の摂取量としては特に制限はないが、本発明の効果をより顕著に発揮させる観点から、１日当たりの有効成分の摂取量が、２００ｍｇ／日以上となるように摂取することが好ましく、４００ｍｇ／日以上となるように摂取することがより好ましく、６００ｍｇ／日以上となるように摂取することがさらに好ましい。その上限は特に制限されないが、例えば、１０ｇ／日であり、好ましくは８ｇ／日である。

本発明の血流改善組成物は、1日の摂取量が前記摂取量となるように、１つの容器に、又は例えば２〜３の複数の容器に分けて、1日分として収容することができる。

シトルリン及び他成分の配合質量比としては、乾燥質量換算で、０．５：１〜７０：１の範囲であることが好ましく、０．７５：１〜６０：１の範囲であることがより好ましく、１：１〜６０：１の範囲であることがさらに好ましく、１：１〜５０：１の範囲であることが特に好ましい。シトルリン及び他成分の配合比が、上記範囲であることにより、本発明の効果をより有効に発揮することができる。

本発明の血流改善組成物は、必要に応じて、経口用として許容される有効成分以外の成分を添加して、公知の製剤方法によって製造することができる。

また、本発明の血流改善組成物としては、有効成分を含有する血流改善食品の他、食品に対して有効成分を添加して得た血流改善食品を挙げることができ、例えば、通常の食品に比して本発明の有効成分含有量を増加させた食品や、本発明の有効成分を通常含まない食品に対して有効成分を添加した食品を挙げることができる。有効成分の添加は、それぞれの成分を別々に添加してもよいし、同時に添加してもよく、また、有効成分以外の他の成分と共に添加してもよい。

本発明の血流改善食品としては、例えば、炭酸飲料、栄養飲料、果実飲料、乳酸飲料、スムージー、青汁等の飲料；アイスクリーム、アイスシャーベット、かき氷等の冷菓；そば、うどん、はるさめ、中華麺、即席麺等の麺類；飴、キャンディー、ガム、チョコレート、錠菓、スナック菓子、ビスケット、ゼリー、ジャム、クリーム、焼き菓子、パン等の菓子類；かまぼこ、ハム、ソーセージ等の水産・畜産加工食品；加工乳、発酵乳、ヨーグルト等の乳製品；サラダ油、てんぷら油、マーガリン、マヨネーズ、ショートニング、ホイップクリーム、ドレッシング等の油脂及びその加工食品；ソース、醤油等の調味料；カレー、シチュー、親子丼、お粥、雑炊、中華丼、かつ丼、天丼、牛丼、ハヤシライス、オムライス、おでん、マーボドーフ、餃子、シューマイ、ハンバーグ、ミートボール、各種ソース、各種スープ等のレトルトパウチ食品などを挙げることができる。

本発明の血流改善方法としては、上記説明した本発明の血流改善組成物を摂取させることを特徴とするが、医療行為は含まれない。本発明の血流改善組成物は、上記の効果が気になる人であれば性別や年齢に関係なく摂取させることができるが、本発明の血流改善組成物の効果をより有効に享受することができることから、疾病者を除く健常者に摂取させることが望ましく、また、上記の悩みを持つ高齢者に摂取させることがさらに望ましい。また、冷えの改善効果や男性機能の改善が得られることから、夜に摂取させることが望ましい。本発明の方法としては、例えば、レストラン等の飲食店において、本発明の血流改善食品を提供することにより、血流の改善を図る方法を挙げることができる。

以下、本発明を実施例に基づき説明する。
［実施例１］
１．細胞培養
（１）３７℃、５％ＣＯ_２インキュベーター内で、７５ｃｍ^２フラスコを用いて、ブタ肺動脈血管内皮細胞（ＰＰＡＥＣ）を１０％ＦＢＳ−ＲＰＭＩ １６４０により培養した。
（２）トリプシン処理により浮遊させた細胞を７５ｃｍ^２フラスコから９６ｗｅｌｌ ｐｌａｔｅの各ｗｅｌｌに１．０×１０^４ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌの細胞密度で播種した。
（３）３７℃、５％ＣＯ_２インキュベーター内で４８時間前培養した。
（４）各ｗｅｌｌより培地を除去後、４％ＦＢＳ−αＭＥＭにて所定濃度に調製した被験物質含有培地を１００μＬずつ添加し、ＣＯ_２インキュベーター内で２４時間培養した。

なお、シトルリンと他成分の併用サンプルについては、それぞれ２倍濃度の被験物質含有培地を５０μＬずつ添加することで目的の濃度とした。また、ｃｏｎｔｒｏｌについては、被験物質をＤＭＳＯに溶解したものに対しては０．２５％ＤＭＳＯ含有４％ＦＢＳ−αＭＥＭを用いて調製し、その他の被験物質に対しては４％ＦＢＳ−αＭＥＭを用いて調製した。

シトルリンについては、市販のシトルリンを用いた。シトルリンと共に用いる他成分としては、表１〜表５に示す物質を用いた。

２．ＮＯ産生量の評価
（１）２４時間培養後、培養上清５０μＬを１．５ｍＬサンプルチューブに回収し、Ｎ＝３のサンプルを混合した。
（２）４℃、２０００ｇで３分間遠心し、上清を別の１．５ｍＬエッペンチューブに移した。
（３）Ｎｉｔｒａｔｅ／Ｎｉｔｒｉｔｅ Ａｓｓａｙ Ｋｉｔ，Ｆｌｕｏｒｏｍｅｔｒｉｃ（Ｃａｙｍａｎ製）を用いて、（２）のサンプル中のＮＯ濃度（μＭ）を測定した。なお、血管内皮細胞から産生されるＮＯは、血管周辺の筋肉を弛緩させて血管を拡張する作用を有する。
（４）算出したＮＯ濃度をもとに「％ ｏｆ ｃｏｎｔｒｏｌ」を算出した。

％ ｏｆ ｃｏｎｔｒｏｌ
＝試料のＮＯ濃度（μＭ）／ｃｏｎｔｒｏｌのＮＯ濃度（μＭ）×１００

その結果を表１〜表５、及び図１〜図１３に示す。各図は、左から、「コントロール（添加なし）」、「シトルリンの単独添加」、「他成分の単独添加」、「シトルリン＋他成分添加」の結果を表す。また、グラフ下部の説明における数値は、サンプル濃度を示し、例えば、図１の左上のグラフの「シトルリン_３１．２」は、シトルリン３１．２（μｇ／ｍＬ）を示す。添加成分の濃度単位は、すべてのグラフにおいて、μｇ／ｍＬである。縦軸は「％ ｏｆ ｃｏｎｔｒｏｌ」を示す。

ターミナリアについては、果実の熱水抽出物（乾燥粉末）を用いた。
米ぬかについては、市販品を用いた。
長命草については、葉の乾燥粉砕末を用いた。
マキベリーについては、市販品の果実の乾燥粉末を用いた。
黒ショウガについては、黒ショウガの根茎の６０％エタノール抽出物（乾燥粉末）を用いた。
ショウガについては、ショウガの根茎の熱水抽出物（乾燥粉末）を用いた。
ヒハツについては、果実の乾燥粉末を用いた。
コショウについては、黒コショウの１００％エタノール抽出物を用いた。
ヨモギについては、生葉の微粉砕末を用いた。
カフェインについては、市販のカフェインを用いた。

表１〜表５、及び図１〜図１３に示すように、シトルリンと、本発明の特定の他成分を組み合わせることにより、ＮＯの産生量が相乗的に増加した。したがって、本発明の血流改善組成物によれば、血管の拡張が促進され、有効に血流の改善を図ることができる。

［実施例２］（錠剤の製造）
下記成分からなるタブレット６錠（７２００ｍｇ）を製造した。

還元麦芽糖 ５質量％
シトルリン ８０質量％
ショウガ抽出物 ４質量％
コショウ抽出物 １質量％
ヒハツ抽出物 １質量％
ビタミンＣ １質量％
葉酸 １質量％
没食子酸 １質量％
セルロース ２質量％
二酸化ケイ素 ２質量％
ステアリン酸カルシウム １質量％
シェラック １質量％

上記錠剤は一日に２、３回に分けて水と共に服用する。

［実施例３］（カプセル剤の製造）
下記混合物をソフトカプセルに封入し、カプセル剤を製造した。

シトルリン ２００ｍｇ
黒ショウガ末 １００ｍｇ
麦芽糖 ５０ｍｇ
二酸化ケイ素 １０ｍｇ
ナイアシン ５ｍｇ
ビタミンＢ１ ５ｍｇ
ビタミンＢ２ ５ｍｇ
ロイシン ２．５ｍｇ
チロシン ２．５ｍｇ
バリン ２．５ｍｇ
塩化鉄 １ｍｇ

上記カプセル剤は８錠を一日に２〜４回に分けて水と共に服用する。

［実施例４］（顆粒剤の製造）
下記成分を混合して常法により顆粒剤（５０００ｍｇ）を製造した。

シトルリン ３０００ｍｇ
ターミナリアベリリカ末 ４００ｍｇ
還元パラチノース ５００ｍｇ
二酸化ケイ素 ２００ｍｇ
ショ糖脂肪酸エステル ５０ｍｇ
イノシトール ２５ｍｇ
ビオチン １０ｍｇ
グルコン酸亜鉛 １０ｍｇ
塩化マグネシウム ５ｍｇ
トレオニン ５ｍｇ
トリプトファン ２．５ｍｇ
デンプン 残部

［実施例５］（インスタント粉末剤の製造）
下記成分を混合して常法によりインスタント粉末（１０ｇ）を製造した。

トレハロース ０．１ｇ
還元パラチノース ０．１ｇ
ステアリン酸カルシウム ２ｇ
黒ショウガ抽出物（乾燥粉末） １ｇ
シトルリン １ｇ
没食子酸 ０．０２ｇ
グルタミン ０．０１ｇ
グルコン酸亜鉛 ０．００１ｇ
塩化鉄 ０．００１ｇ
水溶性セルロース 残部

［実施例６］（液剤の製造）
下記成分からなる液剤（５００ｍＬ）を製造した。

マキベリー抽出物 ３０００ｍｇ
トレハロース ２５０ｍｇ
シトルリン ３００ｍｇ
ビタミンＫ １５０ｍｇ
塩化カルシウム ５０ｍｇ
バリン ２５ｍｇ
ロイシン ２５ｍｇ
イソロイシン ２５ｍｇ
フェニルアラニン １０ｍｇ
プロリン １０ｍｇ
ビタミンＣ ５００ｍｇ
ビタミンＡ １２０ｍｇ
ビタミンＢ１ ６０ｍｇ
ビタミンＢ２ ６０ｍｇ
グルコン酸亜鉛 ５０ｍｇ
水 残量

本発明の組成物は、血流を改善する効果を有し、経口剤として用いることができることから、本発明の産業上の有用性は高い。

本発明は、血流改善効果を有する組成物に係り、詳しくは、シトルリン及び特定の他の成分を有効成分とする組成物に関する。

現代社会においては、運動不足やストレスによる自律神経失調等の様々な要因から、血液の循環（血流）の不調が問題となることが多い。この血流の不調（血流量の低下）は、頭痛、肩凝り、肌のくすみ、冷え性、むくみ等の様々な症状を引き起こすため、健康上、美容上の観点から、血流量を増加させ、血流を改善する方策が求められている。

このような血流改善のための組成物として、例えば、ヒソップ抽出物（特許文献１参照）や、カシス濃縮物とアミノ酸または有機酸を含む組成物（特許文献２参照）や、カモミール抽出エキス（特許文献３参照）等が提案されている。

一方、本件出願人は、松樹皮抽出物と黒胡椒抽出物とを含有する血流改善用組成物（特許文献４参照）を提案している。

特開２００６−８５７５号公報 特開２００４−２６２８７８号公報 特開２００５−６８０６９号公報 特開２０１２−０５１８３３号公報

本発明の課題は、高い血流改善効果を有する組成物を提供することにある。

本発明者らは、シトルリンの血流改善能について鋭意調査・研究したところ、シトルリンと特定の他の成分とを組み合わせることにより、高い血流改善効果が得られることを見いだし、本発明を完成するに至った。すなわち、シトルリンと、血流改善能がほとんどないか、その能力が小さい特定の他の成分を組み合わせることにより、血流改善能を相乗的に向上させることができることを見いだした。

すなわち、本発明は、シトルリンとターミナリアとを有効成分として含有することを特徴とする組成物に関する。

本発明の組成物において、シトルリン及びターミナリアの配合質量比は、０．５：１〜７０：１の範囲であることが好ましい。
また、本発明の組成物は、錠剤、カプセル剤、粉末剤、顆粒剤、又は液剤であることが好ましい。

本発明の組成物によれば、血流量を増加させ、高い血流改善効果を得ることができる。

左上のグラフが、本発明の組成物（シトルリン＋ターミナリア）をブタ肺動脈血管内皮細胞（ＰＰＡＥＣ）に適用した場合のＮＯ産生量の結果を示す図である。その他グラフが、参考例の組成物（シトルリン＋植物素材）をブタ肺動脈血管内皮細胞（ＰＰＡＥＣ）に適用した場合のＮＯ産生量の結果を示す図であり、右上のグラフが、植物素材として稲（米ぬか）を用いたものであり、左下のグラフが、植物素材としてマキベリーを用いたものであり、右下のグラフが、植物素材として黒ショウガを用いたものである。 参考例の組成物（シトルリン＋植物素材）をブタ肺動脈血管内皮細胞（ＰＰＡＥＣ）に適用した場合のＮＯ産生量の結果を示す図である。左のグラフが、植物素材としてショウガを用いたものであり、右のグラフが、植物素材としてコショウ（バイオペリン）を用いたものである。 参考例の組成物（シトルリン＋機能性添加剤）をブタ肺動脈血管内皮細胞（ＰＰＡＥＣ）に適用した場合のＮＯ産生量の結果を示す図である。左上のグラフが、機能性添加剤として麦芽糖を用いたものであり、右上のグラフが、機能性添加剤としてトレハロースを用いたものであり、左下のグラフが、機能性添加剤として還元パラチノースを用いたものであり、右下のグラフが、機能性添加剤として還元麦芽糖を用いたものである。 参考例の組成物（シトルリン＋機能性添加剤）をブタ肺動脈血管内皮細胞（ＰＰＡＥＣ）に適用した場合のＮＯ産生量の結果を示す図である。左のグラフが、機能性添加剤としてステアリン酸カルシウムを用いたものであり、右のグラフが、機能性添加剤としてシェラックを用いたものである。 参考例の組成物（シトルリン＋アミノ酸）をブタ肺動脈血管内皮細胞（ＰＰＡＥＣ）に適用した場合のＮＯ産生量の結果を示す図である。左上のグラフが、アミノ酸としてロイシンを用いたものであり、右上のグラフが、アミノ酸としてメチオニンを用いたものであり、左下のグラフが、アミノ酸としてフェニルアラニンを用いたものであり、右下のグラフが、アミノ酸としてプロリンを用いたものである。 参考例の組成物（シトルリン＋アミノ酸）をブタ肺動脈血管内皮細胞（ＰＰＡＥＣ）に適用した場合のＮＯ産生量の結果を示す図である。左上のグラフが、アミノ酸としてセリンを用いたものであり、右上のグラフが、アミノ酸としてトレオニンを用いたものであり、左下のグラフが、アミノ酸としてトリプトファンを用いたものであり、右下のグラフが、アミノ酸としてチロシンを用いたものである。 参考例の組成物（シトルリン＋アミノ酸）をブタ肺動脈血管内皮細胞（ＰＰＡＥＣ）に適用した場合のＮＯ産生量の結果を示す図であり、アミノ酸としてバリンを用いたものである。 参考例の組成物（シトルリン＋ポリフェノール）をブタ肺動脈血管内皮細胞（ＰＰＡＥＣ）に適用した場合のＮＯ産生量の結果を示す図であり、ポリフェノールとして没食子酸を用いたものである。 参考例の組成物（シトルリン＋ビタミン・ミネラル類）をブタ肺動脈血管内皮細胞（ＰＰＡＥＣ）に適用した場合のＮＯ産生量の結果を示す図である。左上のグラフが、ビタミン類としてビタミンＡを用いたものであり、右上のグラフが、ビタミン類としてビタミンＢ１を用いたものであり、左下のグラフが、ビタミン類としてビタミンＢ２を用いたものであり、右下のグラフが、ビタミン類としてビタミンＣを用いたものである。 参考例の組成物（シトルリン＋ビタミン・ミネラル類）をブタ肺動脈血管内皮細胞（ＰＰＡＥＣ）に適用した場合のＮＯ産生量の結果を示す図である。左上のグラフが、ビタミン類としてパントテン酸ナトリウムを用いたものであり、右上のグラフが、ビタミン類としてナイアシンを用いたものであり、左下のグラフが、ビタミン類として葉酸を用いたものであり、右下のグラフが、ビタミン類としてビオチンを用いたものである。 参考例の組成物（シトルリン＋ビタミン・ミネラル類）をブタ肺動脈血管内皮細胞（ＰＰＡＥＣ）に適用した場合のＮＯ産生量の結果を示す図である。左のグラフが、ビタミン類としてビタミンＫを用いたものであり、右のグラフが、ビタミン類としてイノシトールを用いたものである。 参考例の組成物（シトルリン＋ビタミン・ミネラル類）をブタ肺動脈血管内皮細胞（ＰＰＡＥＣ）に適用した場合のＮＯ産生量の結果を示す図である。左上のグラフが、ミネラル類としてカルシウムを用いたものであり、右上のグラフが、ミネラル類として亜鉛を用いたものであり、左下のグラフが、ミネラル類として鉄を用いたものであり、右下のグラフが、ミネラル類として銅を用いたものである。 参考例の組成物（シトルリン＋ビタミン・ミネラル類）をブタ肺動脈血管内皮細胞（ＰＰＡＥＣ）に適用した場合のＮＯ産生量の結果を示す図である。左上のグラフが、ミネラル類としてセレンを用いたものであり、右上のグラフが、ミネラル類としてモリブデンを用いたものであり、左下のグラフが、ミネラル類としてマグネシウムを用いたものであり、右下のグラフが、ミネラル類としてクロムを用いたものである。

本発明の組成物は、シトルリンとターミナリアとを有効成分として含有することを特徴とする。その他の他成分は、１種単独で組み合わせて用いてもよいし、２種以上組み合わせて用いてもよい。他成分を組み合せて用いる場合、シトルリンと相乗効果の高い他成分を組み合わせることが好ましい。

本発明の組成物（血流改善組成物）は、かかる有効成分の組合せの相乗効果により、より有効に、血管周辺の筋肉を弛緩させて血管を拡張し、血流量を増加させることができ、頭痛、肩凝り、肌のくすみ、冷え症、勃起不全等の症状を効果的に予防ないし改善することができる。

［シトルリン］
本発明の血流改善組成物の有効成分となるシトルリンとしては、Ｌ−シトルリンであっても、Ｄ−シトルリンであってもよいが、Ｌ−シトルリンであることが好ましい。シトルリンは、化学合成により得られたもの、発酵に得られたもの等、その製造方法は問わない。また、シトルリンは、塩の形態であってもよく、塩としては、薬学的に許容される塩であれば特に制限されるものではなく、例えば、無機酸塩、有機酸塩、金属塩、アンモニウム塩を挙げることができる。シトルリンは、医薬品、試薬等として市販されており、これらの市販品を用いることができる。

［他成分］
（ａ）植物素材
本発明の血流改善組成物においては、シトルリンと共に、有効成分として、ターミナリアを含有することを特徴とするが、その他含有させる他成分としては、稲、マキベリー、黒ショウガ、ショウガ、及びコショウから選ばれる少なくとも１種の植物素材を用いることが好ましい。

これらの植物素材は、葉、茎、根、花、実、幹、枝等、植物のいずれの部位であってもよく、植物素材そのもの（乾燥物を含む）の他、その粉砕物、搾汁、抽出物等の植物素材処理物を用いることができる。粉砕物としては、粉末、顆粒等が挙げられる。搾汁や抽出物は、液状であってもよいが、ペースト状や乾燥粉末として用いることもできる。抽出物は、適当な溶媒を用いて抽出することにより得ることができ、溶媒としては、例えば、水（温水、熱水）、エタノール、含水エタノールを用いることができる。これらの植物素材は、市販されているものを使用することができる。

ターミナリアとしては、例えば、Terminalia bellirica（belerica）、Terminalia catappa、Terminalia tomentosa、Terminalia citrina、Terminalia phellocarpa、Terminalia copelandii、Terminalia brassi、Terminalia ivorensis、Terminalia superba、Terminalia arjuna、Terminalia chebula等を挙げることができ、これらの中でも、Terminalia bellirica（belerica）、Terminalia chebulaが好ましい。本発明の植物素材として用いる部位としては、果実が好ましい。

稲は、イネ科イネ属の植物である。本発明の植物素材として用いる部位としては、玄米の外皮や胚が好ましく、具体的には、玄米を精白する際に副産物として得られる米ぬかを用いることが好ましい。稲の種類としては、特に制限はなく、ジャポニカ種、インディカ種等を挙げることができる。

マキベリーは、チリのパタゴニアを原産地とするポルトノキ科の植物であり、学術名は、Aristotellia chilensisである。本発明の植物素材として用いる部位としては、果実が好ましい。

黒ショウガは、学名をＫａｅｍｐｆｅｒｉａ Ｐａｒｖｉｆｌｏｒａといい、東南アジアに自生するショウガ科バンウコン属の植物である。本発明の植物素材として用いる部位としては、根茎が好ましい。

ショウガは、ショウガ科ショウガ属の植物であり、例えば、三州生姜、黄生姜、金時生姜、谷中生姜を挙げることができる。また、インドネシアやインドで栽培されている赤ショウガ（Zingiber officinale var. Rubra）も好ましく用いることができる。本発明の植物素材として用いる部位としては、根茎が好ましい。

コショウは、コショウ科の植物（Ｐｉｐｅｒ ｎｉｇｒｕｍ）であり、本発明の植物素材として用いる部位としては、果実が好ましい。収穫のタイミング等から、黒コショウ、白コショウ、赤コショウ等の種類が存在し、いずれの種類であってもよいが、黒コショウが好ましい。黒コショウは、コショウの木から取れた未熟な実を乾燥させたものであり、辛味成分ピペリンが含まれている。本発明のコショウとしては、このピペリンを含有するものが好ましい。

（ｂ）機能性添加剤
本発明の血流改善組成物においては、シトルリン及びターミナリアと共に、有効成分として、麦芽糖、トレハロース、還元パラチノース、還元麦芽糖、ステアリン酸カルシウム、及びシェラックから選ばれる少なくとも１種の機能性添加剤を用いることが好ましい。

（ｃ）アミノ酸
本発明の血流改善組成物においては、シトルリン及びターミナリアと共に、有効成分として、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、及びバリンから選ばれる少なくとも１種のアミノ酸（塩を含む）を用いることが好ましい。塩としては、例えば、ナトリウム塩、塩酸塩等を挙げることができる。

（ｄ）没食子酸
本発明の血流改善組成物においては、シトルリン及びターミナリアと共に、有効成分として、没食子酸を用いることが好ましい。

（ｅ）ビタミン・ミネラル類
本発明の血流改善組成物においては、シトルリン及びターミナリアと共に、有効成分として、ビタミンＡ、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＣ、パントテン酸ナトリウム、ナイアシン、葉酸、ビオチン、ビタミンＫ、イノシトール、カルシウム、亜鉛、鉄、銅、セレン、モリブデン、マグネシウム、及びクロムから選ばれる少なくとも１種のビタミン・ミネラル類を用いることが好ましい。なお、本発明のミネラル類としてのカルシウム、亜鉛、鉄、銅、セレン、モリブデン、マグネシウム、及びクロムは、これらの金属を含む化合物の形態を含む。

本発明の血流改善組成物は、血流改善作用を有する血流改善剤として用いることができ、かかる血流改善剤は、シトルリン及び所定の他成分を含有し、血流改善に用いられる点において、製品として他の製品と区別することができるものであれば特に制限されるものではない。例えば、本発明に係る製品の本体、包装、説明書、宣伝物のいずれかに血流改善作用の機能がある旨を表示したものが本発明の範囲に含まれる。例えば、医薬品（医薬部外品を含む）や、特定保健用食品、栄養機能食品、機能性表示食品等の所定機関より効能の表示が認められた機能性食品などのいわゆる健康食品や、飼料等を挙げることができる。いわゆる健康食品においては、「めぐりを良くする」、「冷えを改善する」、「むくみが気になる方に」、「肌の色が気になる方に」、「目のくまが気になる方に」、「血管機能を高める」、「血管のしなやかさを高める」、「男性機能のサポートに」、「男性の活力に」等を表示したものを例示することができる。本発明の血流改善剤は、上記の効果が気になる人であれば性別や年齢に関係なく摂取することができるが、本発明の血流改善剤の効果をより有効に享受することができることから、疾病者を除く健常者が摂取することが望ましく、また、上記の悩みを持つ高齢者が摂取することが望ましい。また、冷えの改善効果や男性機能の改善が得られることから、夜に摂取することが望ましい。

本発明の血流改善組成物の形態としては、例えば、錠剤、カプセル剤、粉末剤、顆粒剤、液剤、粒状剤、棒状剤、板状剤、ブロック状剤、固形状剤、丸状剤、ペースト状剤、クリーム状剤、カプレット状剤、ゲル状剤、チュアブル状剤、スティック状剤等を挙げることができる。これらの中でも、錠剤、カプセル剤、粉末剤、顆粒剤、液剤の形態が特に好ましい。具体的には、サプリメントや、ペットボトル、缶、瓶等に充填された容器詰飲料や、水（湯）、牛乳、果汁、青汁等に溶解して飲むためのインスタント粉末飲料、インスタント顆粒飲料を例示することができる。これらは食事の際などに手軽に飲用しやすく、また嗜好性を高めることができるという点で好ましい。

本発明の血流改善組成物におけるシトルリン及び他成分（有効成分）の含有量としては、その効果の奏する範囲で適宜含有させればよい。

一般的には、本発明の血流改善組成物が医薬品やサプリメント（錠剤，カプセル剤）の場合には、有効成分が乾燥質量換算で全体の０．０００１〜１００質量％含まれていることが好ましく、０．１〜８５質量％含まれていることがより好ましく、０．５〜７０質量％含まれていることがさらに好ましい。

本発明の血流改善組成物が容器詰飲料（液剤）である場合には、有効成分が乾燥質量換算で全体の０．０００１〜１５質量％含まれていることが好ましく、０．００１〜１２．５質量％含まれていることがより好ましく、０．０１〜１０質量％含まれていることがさらに好ましい。

また、本発明の血流改善組成物がインスタント粉末飲料（粉末剤）、インスタント顆粒飲料（顆粒剤）である場合には、有効成分が乾燥質量換算で全体の０．００１〜８０質量％含まれていることが好ましく、０．００５〜７０質量％含まれていることがより好ましく、０．１〜６０質量％含まれていることがさらに好ましい。

本発明の効果をより有効に発揮させるためには、有効成分が乾燥質量換算で本発明の血流改善組成物全体（水分を除く）の８０％以上含まれていることが好ましく、９０％以上含まれていることがより好ましく、９５％以上含まれていることがさらに好ましく、１００％であることが特に好ましい。

本発明の血流改善組成物の摂取量としては特に制限はないが、本発明の効果をより顕著に発揮させる観点から、１日当たりの有効成分の摂取量が、２００ｍｇ／日以上となるように摂取することが好ましく、４００ｍｇ／日以上となるように摂取することがより好ましく、６００ｍｇ／日以上となるように摂取することがさらに好ましい。その上限は特に制限されないが、例えば、１０ｇ／日であり、好ましくは８ｇ／日である。

本発明の血流改善組成物は、１日の摂取量が前記摂取量となるように、１つの容器に、又は例えば２〜３の複数の容器に分けて、１日分として収容することができる。

シトルリン及び他成分の配合質量比としては、乾燥質量換算で、０．５：１〜７０：１の範囲であることが好ましく、０．７５：１〜６０：１の範囲であることがより好ましく、１：１〜６０：１の範囲であることがさらに好ましく、１：１〜５０：１の範囲であることが特に好ましい。シトルリン及び他成分の配合比が、上記範囲であることにより、本発明の効果をより有効に発揮することができる。

本発明の血流改善組成物は、必要に応じて、経口用として許容される有効成分以外の成分を添加して、公知の製剤方法によって製造することができる。

また、本発明の血流改善組成物としては、有効成分を含有する血流改善食品の他、食品に対して有効成分を添加して得た血流改善食品を挙げることができ、例えば、通常の食品に比して本発明の有効成分含有量を増加させた食品や、本発明の有効成分を通常含まない食品に対して有効成分を添加した食品を挙げることができる。有効成分の添加は、それぞれの成分を別々に添加してもよいし、同時に添加してもよく、また、有効成分以外の他の成分と共に添加してもよい。

本発明の血流改善食品としては、例えば、炭酸飲料、栄養飲料、果実飲料、乳酸飲料、スムージー、青汁等の飲料；アイスクリーム、アイスシャーベット、かき氷等の冷菓；そば、うどん、はるさめ、中華麺、即席麺等の麺類；飴、キャンディー、ガム、チョコレート、錠菓、スナック菓子、ビスケット、ゼリー、ジャム、クリーム、焼き菓子、パン等の菓子類；かまぼこ、ハム、ソーセージ等の水産・畜産加工食品；加工乳、発酵乳、ヨーグルト等の乳製品；サラダ油、てんぷら油、マーガリン、マヨネーズ、ショートニング、ホイップクリーム、ドレッシング等の油脂及びその加工食品；ソース、醤油等の調味料；カレー、シチュー、親子丼、お粥、雑炊、中華丼、かつ丼、天丼、牛丼、ハヤシライス、オムライス、おでん、マーボドーフ、餃子、シューマイ、ハンバーグ、ミートボール、各種ソース、各種スープ等のレトルトパウチ食品などを挙げることができる。

以下、本発明を実施例に基づき説明する。
［実施例１］
１．細胞培養
（１）３７℃、５％ＣＯ_２インキュベーター内で、７５ｃｍ^２フラスコを用いて、ブタ肺動脈血管内皮細胞（ＰＰＡＥＣ）を１０％ＦＢＳ−ＲＰＭＩ １６４０により培養した。
（２）トリプシン処理により浮遊させた細胞を７５ｃｍ^２フラスコから９６ｗｅｌｌ ｐｌａｔｅの各ｗｅｌｌに１．０×１０^４ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌの細胞密度で播種した。
（３）３７℃、５％ＣＯ_２インキュベーター内で４８時間前培養した。
（４）各ｗｅｌｌより培地を除去後、４％ＦＢＳ−αＭＥＭにて所定濃度に調製した被験物質含有培地を１００μＬずつ添加し、ＣＯ_２インキュベーター内で２４時間培養した。

なお、シトルリンと他成分の併用サンプルについては、それぞれ２倍濃度の被験物質含有培地を５０μＬずつ添加することで目的の濃度とした。また、ｃｏｎｔｒｏｌについては、被験物質をＤＭＳＯに溶解したものに対しては０．２５％ＤＭＳＯ含有４％ＦＢＳ−αＭＥＭを用いて調製し、その他の被験物質に対しては４％ＦＢＳ−αＭＥＭを用いて調製した。

シトルリンについては、市販のシトルリンを用いた。シトルリンと共に用いる他成分としては、表１〜表５に示す物質を用いた。

２．ＮＯ産生量の評価
（１）２４時間培養後、培養上清５０μＬを１．５ｍＬサンプルチューブに回収し、Ｎ＝３のサンプルを混合した。
（２）４℃、２０００ｇで３分間遠心し、上清を別の１．５ｍＬエッペンチューブに移した。
（３）Ｎｉｔｒａｔｅ／Ｎｉｔｒｉｔｅ Ａｓｓａｙ Ｋｉｔ，Ｆｌｕｏｒｏｍｅｔｒｉｃ（Ｃａｙｍａｎ製）を用いて、（２）のサンプル中のＮＯ濃度（μＭ）を測定した。なお、血管内皮細胞から産生されるＮＯは、血管周辺の筋肉を弛緩させて血管を拡張する作用を有する。
（４）算出したＮＯ濃度をもとに「％ ｏｆ ｃｏｎｔｒｏｌ」を算出した。

％ ｏｆ ｃｏｎｔｒｏｌ
＝試料のＮＯ濃度（μＭ）／ｃｏｎｔｒｏｌのＮＯ濃度（μＭ）×１００

その結果を表１〜表５、及び図１〜図１３に示す。各図は、左から、「コントロール（添加なし）」、「シトルリンの単独添加」、「他成分の単独添加」、「シトルリン＋他成分添加」の結果を表す。また、グラフ下部の説明における数値は、サンプル濃度を示し、例えば、図１の左上のグラフの「シトルリン_３１．２」は、シトルリン３１．２（μｇ／ｍＬ）を示す。添加成分の濃度単位は、すべてのグラフにおいて、μｇ／ｍＬである。縦軸は「％ ｏｆ ｃｏｎｔｒｏｌ」を示す。

ターミナリアについては、果実の熱水抽出物（乾燥粉末）を用いた。
米ぬかについては、市販品を用いた。
長命草については、葉の乾燥粉砕末を用いた。
マキベリーについては、市販品の果実の乾燥粉末を用いた。
黒ショウガについては、黒ショウガの根茎の６０％エタノール抽出物（乾燥粉末）を用いた。
ショウガについては、ショウガの根茎の熱水抽出物（乾燥粉末）を用いた。
コショウについては、黒コショウの１００％エタノール抽出物を用いた。
ヨモギについては、生葉の微粉砕末を用いた。
カフェインについては、市販のカフェインを用いた。

表１及び図１に示すように、シトルリンとターミナリアを組み合わせることにより、ＮＯの産生量が相乗的に増加した。したがって、本発明の血流改善組成物によれば、血管の拡張が促進され、有効に血流の改善を図ることができる。

［参考例１］（錠剤の製造）
下記成分からなるタブレット６錠（７２００ｍｇ）を製造した。

還元麦芽糖 ５質量％
シトルリン ８０質量％
ショウガ抽出物 ４質量％
コショウ抽出物 １質量％
ヒハツ抽出物 １質量％
ビタミンＣ １質量％
葉酸 １質量％
没食子酸 １質量％
セルロース ２質量％
二酸化ケイ素 ２質量％
ステアリン酸カルシウム １質量％
シェラック １質量％

上記錠剤は一日に２、３回に分けて水と共に服用する。

［参考例２］（カプセル剤の製造）
下記混合物をソフトカプセルに封入し、カプセル剤を製造した。

シトルリン ２００ｍｇ
黒ショウガ末 １００ｍｇ
麦芽糖 ５０ｍｇ
二酸化ケイ素 １０ｍｇ
ナイアシン ５ｍｇ
ビタミンＢ１ ５ｍｇ
ビタミンＢ２ ５ｍｇ
ロイシン ２．５ｍｇ
チロシン ２．５ｍｇ
バリン ２．５ｍｇ
塩化鉄 １ｍｇ

上記カプセル剤は８錠を一日に２〜４回に分けて水と共に服用する。

［実施例２］（顆粒剤の製造）
下記成分を混合して常法により顆粒剤（５０００ｍｇ）を製造した。

シトルリン ３０００ｍｇ
ターミナリアベリリカ末 ４００ｍｇ
還元パラチノース ５００ｍｇ
二酸化ケイ素 ２００ｍｇ
ショ糖脂肪酸エステル ５０ｍｇ
イノシトール ２５ｍｇ
ビオチン １０ｍｇ
グルコン酸亜鉛 １０ｍｇ
塩化マグネシウム ５ｍｇ
トレオニン ５ｍｇ
トリプトファン ２．５ｍｇ
デンプン 残部

［参考例３］（インスタント粉末剤の製造）
下記成分を混合して常法によりインスタント粉末（１０ｇ）を製造した。

トレハロース ０．１ｇ
還元パラチノース ０．１ｇ
ステアリン酸カルシウム ２ｇ
黒ショウガ抽出物（乾燥粉末） １ｇ
シトルリン １ｇ
没食子酸 ０．０２ｇ
グルタミン ０．０１ｇ
グルコン酸亜鉛 ０．００１ｇ
塩化鉄 ０．００１ｇ
水溶性セルロース 残部

［参考例４］（液剤の製造）
下記成分からなる液剤（５００ｍＬ）を製造した。

マキベリー抽出物 ３０００ｍｇ
トレハロース ２５０ｍｇ
シトルリン ３００ｍｇ
ビタミンＫ １５０ｍｇ
塩化カルシウム ５０ｍｇ
バリン ２５ｍｇ
ロイシン ２５ｍｇ
イソロイシン ２５ｍｇ
フェニルアラニン １０ｍｇ
プロリン １０ｍｇ
ビタミンＣ ５００ｍｇ
ビタミンＡ １２０ｍｇ
ビタミンＢ１ ６０ｍｇ
ビタミンＢ２ ６０ｍｇ
グルコン酸亜鉛 ５０ｍｇ
水 残量

本発明の組成物は、血流を改善する効果を有し、経口剤として用いることができることから、本発明の産業上の有用性は高い。

Claims (5)

1. シトルリンと、下記（ａ）〜（ｅ）からなる群より選ばれる少なくとも１種の成分とを有効成分として含有することを特徴とする組成物。
   （ａ）ターミナリア、稲、マキベリー、黒ショウガ、ショウガ、ヒハツ、及びコショウから選ばれる少なくとも１種の植物素材
   （ｂ）麦芽糖、トレハロース、還元パラチノース、還元麦芽糖、ステアリン酸カルシウム、及びシェラックから選ばれる少なくとも１種の機能性添加剤
   （ｃ）ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、及びバリンから選ばれる少なくとも１種のアミノ酸
   （ｄ）没食子酸
   （ｅ）ビタミンＡ、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＣ、パントテン酸ナトリウム、ナイアシン、葉酸、ビオチン、ビタミンＫ、イノシトール、カルシウム、亜鉛、鉄、銅、セレン、モリブデン、マグネシウム、及びクロムから選ばれる少なくとも１種のビタミン・ミネラル類
2. シトルリンと（ａ）〜（ｅ）からなる群より選ばれる少なくとも１種の成分とからなる有効成分を添加して得たことを特徴とする請求項１記載の組成物。
3. シトルリン及び他の有効成分の配合質量比が、０．５：１〜７０：１の範囲であることを特徴とする請求項１又は２記載の組成物。
4. 錠剤、カプセル剤、粉末剤、顆粒剤、又は液剤であることを特徴とする請求項１〜３のいずれか記載の組成物。
5. 請求項１〜４のいずれか記載の組成物を摂取させることを特徴とする血流改善方法（ただし、医療行為を除く）。