JP2017160168A - Influenza therapeutic agent - Google Patents
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Abstract
【課題】インフルエンザ治療剤を提供する。より詳しくは、インフルエンザウイルス感染に伴う肺炎の予防及び／又は治療によるインフルエンザ治療剤を提供する。【解決手段】抗HMGB1モノクローナル抗体の投与による。本発明の抗HMGB1モノクローナル抗体を有効成分とするインフルエンザ治療剤によれば、インフルエンザによる死亡リスクを低減化することができる。本発明の有効成分としての抗HMGB1モノクローナル抗体は、インフルエンザウイルスに対して直接的に作用するのではなく、インフルエンザウイルス感染に伴う症状を抑制することにより効果を発揮する。特にインフルエンザウイルス感染に伴う肺炎に対して有効な予防剤及び／治療剤となり得る。さらに、本発明のインフルエンザ治療剤は従来のインフルエンザ治療剤とは作用機序が異なるため、従来公知のインフルエンザ治療剤と併用して使用することができる。【選択図】図４PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a therapeutic agent for influenza. More specifically, an influenza therapeutic agent for preventing and / or treating pneumonia associated with influenza virus infection is provided. By administration of an anti-HMGB1 monoclonal antibody. According to the influenza therapeutic agent containing the anti-HMGB1 monoclonal antibody of the present invention as an active ingredient, the risk of death from influenza can be reduced. The anti-HMGB1 monoclonal antibody as the active ingredient of the present invention does not act directly on influenza virus, but exerts its effect by suppressing the symptoms associated with influenza virus infection. In particular, it can be an effective prophylactic and / or therapeutic agent for pneumonia associated with influenza virus infection. Furthermore, since the influenza therapeutic agent of the present invention has a different mechanism of action from the conventional influenza therapeutic agent, it can be used in combination with a conventionally known influenza therapeutic agent. [Selection diagram] Fig. 4
Description
本発明は、インフルエンザ治療剤に関するものである。より詳しくは、インフルエンザウイルス感染に伴う炎症に関し、特に肺炎の予防及び／又は治療に関する。更に本発明は、作用機序の異なる他のインフルエンザ治療剤との併用に関する。 The present invention relates to an influenza therapeutic agent. More specifically, the present invention relates to inflammation associated with influenza virus infection, and particularly relates to prevention and / or treatment of pneumonia. Furthermore, the present invention relates to the combined use with other influenza therapeutic agents having different action mechanisms.
かぜ症候群の原因は約９割以上がウイルスに感染し発症する病気で、原因ウイルスは200種類以上あるといわれている。インフルエンザはかぜ症候群の一種で、原因となるインフルエンザウイルス（主にA,B）は感染力が非常に強く、高熱を特徴とした様々な全身症状を起こす。かぜ症候群は初期に喉や鼻の上気道炎症状が表れる。それに対しインフルエンザは急激な発熱があり、続いて倦怠感、筋肉痛、関節痛などの全身症状や上気道炎症状が強く表れる。大多数の人では、1〜2週間で自然治癒するが、体力のない高齢者や乳幼児などは気管支炎や肺炎を併発し易く、重症化すると脳炎や心不全を起こすこともある。 About 90% or more of the causes of cold syndrome are caused by infection with viruses, and it is said that there are over 200 types of causative viruses. Influenza is a type of cold syndrome, and the causative influenza viruses (mainly A and B) are very infectious and cause various systemic symptoms characterized by high fever. Cold syndrome initially manifests as inflammation of the upper respiratory tract of the throat and nose. In contrast, influenza has a rapid fever, followed by strong general symptoms such as fatigue, muscle pain, and joint pain, and symptoms of upper respiratory tract inflammation. Most people will heal spontaneously in 1 to 2 weeks, but elderly people and infants who are not physically strong are more likely to have bronchitis and pneumonia, and when they become severe, encephalitis and heart failure may occur.
インフルエンザと肺炎の関係について、インフルエンザウイルスによるウイルス性肺炎や、インフルエンザに引き続いて発症する肺炎（二次感染）が挙げられる。肺炎はその後に発症するARDS（acute respiratory distress syndrome）や、インフルエンザが治癒したと思えた頃に発症する二次感染による肺炎等、重症化しやすく、インフルエンザで死亡する人の殆どが肺炎によるといわれている。 Examples of the relationship between influenza and pneumonia include viral pneumonia caused by influenza virus and pneumonia that develops following influenza (secondary infection). Pneumonia is likely to become severe, such as ARDS (acute respiratory distress syndrome) that subsequently develops, and pneumonia due to secondary infection that develops when the flu seemed to be cured, and most people who die from influenza are said to be caused by pneumonia Yes.
インフルエンザに対する治療剤には、抗ウイルス薬としてオセルタミビルリン酸塩（商品名：タミフル）、ザナミビル水和物（商品名：リレンザ）、アマンタジン塩酸塩（商品名：シンメトレル等）、ペラミビル水和物（商品名：ラピアクタ）、ラニナミビルオクタン酸エステル水和物（商品名：イナビル）等がある。これらの薬剤は、感染後の有効時間帯が略48時間とされており使用に制限がある。また抗ウイルス剤耐性株の出現が報告されている。さらに、危惧される高病原性の鳥インフルエンザの流行に対しては、ワクチンの安定供給体制も整っていない。前述のオセルタミビルリン酸塩、ザナミビル水和物、ペラミビル水和物、ラニナミビルオクタン酸エステル水和物は、いずれもインフルエンザウイルスの表面に存在するノイラミニダーゼ（NA）に対する阻害剤であり、感染初期のみで有効である。発症から48時間以降の場合は、個体治癒効果は殆ど期待できない。また、これらの薬剤は耐性ウイルスに対しては有効ではない。耐性ウイルスとしては、例えばノイラミニダーゼの274番目のアミノ酸が通常のヒスチジンからチロシンへの置換したものが挙げられる。 Anti-viral drugs such as oseltamivir phosphate (trade name: Tamiflu), zanamivir hydrate (trade name: Rilenza), amantadine hydrochloride (trade name: simmetrel, etc.), peramivir hydrate (product) Name: Rapiacta), laninamivir octanoate ester hydrate (trade name: Inavir) and the like. These drugs have a limited use time of about 48 hours after infection. The emergence of antiviral drug-resistant strains has also been reported. Furthermore, there is no stable supply system for vaccines against the highly pathogenic avian influenza epidemic. The aforementioned oseltamivir phosphate, zanamivir hydrate, peramivir hydrate, and laninamivir octanoate hydrate are all inhibitors of neuraminidase (NA) present on the surface of influenza virus, and only in the early stages of infection. It is effective in. In the case of 48 hours after onset, almost no individual healing effect can be expected. In addition, these drugs are not effective against resistant viruses. Examples of resistant viruses include those in which the 274th amino acid of neuraminidase is substituted from normal histidine to tyrosine.
抗ウイルス剤とは異なる作用機序であって、薬剤耐性インフルエンザウイルス、ウイルスサブタイプに影響を受けずインフルエンザの症状を改善しうる薬剤の開発が望まれている。 Development of a drug that has an action mechanism different from that of an antiviral agent and that can improve the symptoms of influenza without being affected by drug-resistant influenza virus and virus subtypes is desired.
HMGB1（High Mobility Group Box 1:以下、「HMGB1」という）タンパク質は、代表的なDAMP(danger-associated molecular patterns)である。HMGB1 はDNA の編成や転写調節に関わる非ヒストンクロマチン関連性タンパク質ファミリーの一員である。IL-1αと同様に細胞のネクローシスにより細胞核から細胞外に放出され炎症反応を誘導する。HMGB1 は樹状細胞や単球などに作用し、成熟化・浸潤・サイトカインや炎症メディエーターの放出を誘導することが示唆されている。また、好中球上のTLR4 に認識されると、疾患との関連としてHMGB1 は関節炎やシェーグレン症候群における炎症反応に寄与していることが示唆されている。また、HMGB1 は癌において高発現しており、NF-κB の活性化を介して細胞の生存・増殖を助長していることが示唆されている。近年、細胞の壊死によりHMGB1が細胞外に遊離したり、血管炎症性シグナル応答で細胞外に能動分泌が見られるなど、新たな炎症マーカーとしても注目されている。HMGB1はげっ歯類からヒトまで99％以上のアミノ酸配列について相同性を有するタンパク質である。このHMGB1は正常細胞にも存在するが、敗血症（全身性炎症反応症候群）において放出される菌体内毒素であるLPS（リポ多糖）による刺激によって血中濃度が上昇し、最終的な組織障害をもたらす。このHMGB1に対する抗HMGB1モノクローナル抗体を有効成分とする薬剤について、脳血管攣縮抑制剤（特許文献１）及び脳梗塞抑制剤（特許文献２）がすでに特許されているが、インフルエンザやインフルエンザウイルス感染に伴う肺炎の予防及び／又は治療については開示されていない。 HMGB1 (High Mobility Group Box 1: hereinafter referred to as “HMGB1”) protein is a typical DAMP (danger-associated molecular patterns). HMGB1 is a member of a family of non-histone chromatin-related proteins involved in DNA organization and transcriptional regulation. Like IL-1α, it is released from the nucleus by cell necrosis and induces an inflammatory reaction. HMGB1 has been suggested to act on dendritic cells and monocytes to induce maturation, invasion, and release of cytokines and inflammatory mediators. In addition, when it is recognized by TLR4 on neutrophils, it has been suggested that HMGB1 contributes to the inflammatory response in arthritis and Sjogren's syndrome in relation to the disease. HMGB1 is highly expressed in cancer, suggesting that it promotes cell survival and proliferation through activation of NF-κB. In recent years, it has been attracting attention as a new inflammatory marker, such as HMGB1 being released extracellularly due to cell necrosis, or active secretion being observed extracellularly by vascular inflammatory signal response. HMGB1 is a protein having homology with 99% or more amino acid sequences from rodents to humans. Although this HMGB1 is also present in normal cells, the blood level is increased by stimulation with LPS (lipopolysaccharide), an endotoxin released in sepsis (systemic inflammatory response syndrome), resulting in final tissue damage . Regarding drugs containing anti-HMGB1 monoclonal antibody against HMGB1 as an active ingredient, cerebral vasospasm inhibitor (Patent Document 1) and cerebral infarction inhibitor (Patent Document 2) have already been patented. There is no disclosure of prevention and / or treatment of pneumonia.
本発明は、インフルエンザ治療剤を提供することを課題とする。より詳しくは、インフルエンザウイルス感染に伴う炎症に関し、特に肺炎の予防及び／又は治療によるインフルエンザ治療剤を提供することを課題とする。更に本発明は、作用機序の異なる他のインフルエンザ治療剤との併用によるインフルエンザ治療剤を提供することを課題とする。 An object of the present invention is to provide a therapeutic agent for influenza. More specifically, an object of the present invention is to provide a therapeutic agent for influenza by prevention and / or treatment of pneumonia, particularly regarding inflammation associated with influenza virus infection. Furthermore, this invention makes it a subject to provide the influenza therapeutic agent by combined use with the other influenza therapeutic agent from which an action mechanism differs.
本願発明者らは、上記課題を解決するためにインフルエンザウイルス感染モデルに対して抗HMGB1モノクローナル抗体を投与したところ、抗HMGB1モノクローナル抗体の投与により生存率の改善が認められた。さらに鋭意検討を重ねた結果、抗HMGB1モノクローナル抗体によりインフルエンザウイルス感染による炎症症状を改善したことを見出し、本発明を完成した。作用機序の異なる他のインフルエンザ治療剤との併用により、より効果的なインフルエンザ治療薬を提供することができる。 The inventors of the present application administered an anti-HMGB1 monoclonal antibody to an influenza virus infection model in order to solve the above problems, and the improvement of the survival rate was observed by the administration of the anti-HMGB1 monoclonal antibody. As a result of further intensive studies, it was found that inflammatory symptoms caused by influenza virus infection were improved by anti-HMGB1 monoclonal antibody, and the present invention was completed. By using in combination with other influenza therapeutic agents having different action mechanisms, a more effective influenza therapeutic agent can be provided.
すなわち本発明は、以下よりなる。
１．抗HMGB1モノクローナル抗体を有効成分とする、インフルエンザ治療剤。
２．インフルエンザ治療剤が、インフルエンザウイルス感染に伴う炎症に対するものである、前項１に記載のインフルエンザ治療剤。
３．インフルエンザ治療剤が、インフルエンザウイルス感染に伴う肺炎の予防及び／又は治療によるインフルエンザ治療である前項１に記載のインフルエンザ治療剤。
４．抗HMGB1モノクローナル抗体を、１回当たり0.2〜5 mg/kg投与するものである前項１〜３のいずれか１に記載のインフルエンザ治療剤。
５．抗HMGB1モノクローナル抗体とは作用機序の異なるインフルエンザ治療剤を併用することを特徴とする、前項１〜４のいずれか１に記載のインフルエンザ治療剤。
６．抗HMGB1モノクローナル抗体とは作用機序の異なるインフルエンザ治療剤が、ノイラミニダーゼ阻害薬である、前項５に記載のインフルエンザ治療剤。
７．抗HMGB1モノクローナル抗体とは作用機序の異なるインフルエンザ治療剤が、ペラミビルである、前項５に記載のインフルエンザ治療剤。
That is, this invention consists of the following.
1. Influenza treatment agent comprising anti-HMGB1 monoclonal antibody as an active ingredient.
2. 2. The influenza therapeutic agent according to item 1, wherein the influenza therapeutic agent is for inflammation associated with influenza virus infection.
3. 2. The influenza therapeutic agent according to 1 above, wherein the influenza therapeutic agent is influenza treatment by prevention and / or treatment of pneumonia associated with influenza virus infection.
4). 4. The influenza therapeutic agent according to any one of 1 to 3 above, wherein the anti-HMGB1 monoclonal antibody is administered at 0.2 to 5 mg / kg at a time.
5. 5. The influenza therapeutic agent according to any one of items 1 to 4, wherein an influenza therapeutic agent having a different mechanism of action from the anti-HMGB1 monoclonal antibody is used in combination.
6). 6. The influenza therapeutic agent according to 5 above, wherein the influenza therapeutic agent having a different mechanism of action from the anti-HMGB1 monoclonal antibody is a neuraminidase inhibitor.
7). 6. The influenza therapeutic agent according to 5 above, wherein the influenza therapeutic agent having a different mechanism of action from the anti-HMGB1 monoclonal antibody is peramivir.
本発明の抗HMGB1モノクローナル抗体を有効成分とするインフルエンザ治療剤によれば、インフルエンザウイルス感染による死亡リスクを低減化することができる。本発明の有効成分としての抗HMGB1モノクローナル抗体は、インフルエンザウイルスに対して直接的に作用するのではなく、インフルエンザウイルス感染に伴う肺炎に対して有効な予防剤及び／治療剤となり得る。本発明の抗HMGB1モノクローナル抗体を有効成分とするインフルエンザ治療剤によれば、インフルエンザウイルス感染により上昇した生体内のHMGB1に作用して効果を発揮する。そのため、インフルエンザ治療剤耐性インフルエンザウイルスに係るサブタイプには影響なくインフルエンザウイルス感染に伴う炎症を抑制することができ、極めて有用である。 According to the influenza therapeutic agent comprising the anti-HMGB1 monoclonal antibody of the present invention as an active ingredient, the risk of death due to influenza virus infection can be reduced. The anti-HMGB1 monoclonal antibody as an active ingredient of the present invention does not act directly on influenza virus, but can be a prophylactic and / or therapeutic agent effective against pneumonia associated with influenza virus infection. According to the influenza therapeutic agent comprising the anti-HMGB1 monoclonal antibody of the present invention as an active ingredient, the agent acts on HMGB1 in the living body increased due to influenza virus infection and exhibits its effect. Therefore, the inflammation accompanying influenza virus infection can be suppressed without affecting the subtype related to the influenza therapeutic agent resistant influenza virus, which is extremely useful.
本発明のインフルエンザ治療剤は、抗HMGB1モノクローナル抗体を有効成分とする。抗HMGB1モノクローナル抗体は、原則としてHMGB1のみに結合して無毒化し、他の化合物等には作用しない。よって副作用が生じる可能性はないか、極めて少ないと考えられる。抗HMGB1モノクローナル抗体を有効成分とするインフルエンザ治療剤を投与することで、インフルエンザウイルス感染に伴う肺炎を予防及び／又は治療し、その結果インフルエンザを治療することができる。 The therapeutic agent for influenza of the present invention comprises an anti-HMGB1 monoclonal antibody as an active ingredient. In principle, the anti-HMGB1 monoclonal antibody binds only to HMGB1 to be detoxified and does not act on other compounds. Therefore, it is considered that there is no possibility that side effects will occur or very little. By administering an influenza therapeutic agent comprising an anti-HMGB1 monoclonal antibody as an active ingredient, pneumonia associated with influenza virus infection can be prevented and / or treated, and as a result, influenza can be treated.
本明細書において抗HMGB1モノクローナル抗体の調製は、自体公知の方法に従うことができる。例えば、市販のHMGB1を用いてマウスやラット等を免疫し、その抗体産生細胞や脾細胞と骨髄腫細胞とを融合させてハイブリドーマを得ることができる。このハイブリドーマをクローニングし、HMGB1へ特異的に反応する抗体を産生しているクローンをスクリーニングすることができる。このクローンを培養し、分泌されるモノクローナル抗体を精製することができる。例えば特許文献１又は２に示す方法により得ることができる。参考として、ヒト、ラット及びウシのHMGB1タンパク質のアミノ酸配列を以下に示す。C末端部分において、下線を施した部位が種特異的配列である。本明細書において、好適な抗HMGB1モノクローナル抗体はHMGB1 のC末端部分、例えば配列番号４〜６のいずれかの部位をエピトープとするモノクローナル抗体である。特に配列番号５に示すアミノ酸配列をエピトープとする抗HMGB1モノクローナル抗体はHMGB1との強い結合能を示す。 In this specification, the anti-HMGB1 monoclonal antibody can be prepared according to a method known per se. For example, a hybridoma can be obtained by immunizing a mouse or rat using commercially available HMGB1 and fusing the antibody-producing cells or spleen cells with myeloma cells. This hybridoma can be cloned and a clone producing an antibody that reacts specifically with HMGB1 can be screened. This clone can be cultured and the secreted monoclonal antibody can be purified. For example, it can be obtained by the method shown in Patent Document 1 or 2. For reference, the amino acid sequences of human, rat and bovine HMGB1 proteins are shown below. In the C-terminal part, the underlined site is a species-specific sequence. In the present specification, a suitable anti-HMGB1 monoclonal antibody is a monoclonal antibody having an epitope on the C-terminal portion of HMGB1, for example, any one of SEQ ID NOs: 4 to 6. In particular, the anti-HMGB1 monoclonal antibody having the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 5 as an epitope exhibits strong binding ability to HMGB1.
Human HMGB1 (NCBI Reference Sequence: NP_002119.1)（配列番号１）
mgkgdpkkpr gkmssyaffv qtcreehkkk hpdasvnfse fskkcserwk tmsakekgkf edmakadkar yeremktyip pkgetkkkfk dpnapkrpps afflfcseyr pkikgehpgl sigdvakklg emwnntaadd kqpyekkaak lkekyekdia ayrakgkpda akkgvvkaek skkkkeeeed eedeedeeee edeededeee dddde
Human HMGB1 (NCBI Reference Sequence: NP_002119.1) (SEQ ID NO: 1)
mgkgdpkkpr gkmssyaffv qtcreehkkk hpdasvnfse fskkcserwk tmsakekgkf edmakadkar yeremktyip pkgetkkkfk dpnapkrpps afflfcseyr pkikgehpgl sigdvakklg emwnntaadd kqpyekkaak lkekyekdia ayrakgkpda akkgvvkaek skkkkeeeed eedeedeeee e d eede d eee dddde
Rat HMGB1 (NCBI Reference Sequence: NP_037095.1)（配列番号２）
mgkgdpkkpr gkmssyaffv qtcreehkkk hpdasvnfse fskkcserwk tmsakekgkf edmakadkar yeremktyip pkgetkkkfk dpnapkrpps afflfcseyr pkikgehpgl sigdvakklg emwnntaadd kqpyekkaak lkekyekdia ayrakgkpda akkgvvkaek skkkkeeedd eedeedeeee eeeededeee dddde
Rat HMGB1 (NCBI Reference Sequence: NP_037095.1) (SEQ ID NO: 2)
mgkgdpkkpr gkmssyaffv qtcreehkkk hpdasvnfse fskkcserwk tmsakekgkf edmakadkar yeremktyip pkgetkkkfk dpnapkrpps afflfcseyr pkikgehpgl sigdvakklg emwnntaadd kqpyekkaak lkekyekdia ayrakgkpda akkgvvkaek skkkkeeedd eedeedeeee e e eededeee dddde
Bovine HMGB1（配列番号３）
mgkgdpkkpr gkmssyaffv qtcreehkkk hpdasvnfse fskkcserwk tmsakekgkf edmakadkar yeremktyip pkgetkkkfk dpnapkrpps afflfcseyr pkikgehpgl sigdvakklg emwnntaadd kqpyekkaak lkekyekdia ayrakgkpda akkgvvkaek skkkkeeeed eedeedeeee edeedeeeee dddde
Bovine HMGB1 (SEQ ID NO: 3)
mgkgdpkkpr gkmssyaffv qtcreehkkk hpdasvnfse fskkcserwk tmsakekgkf edmakadkar yeremktyip pkgetkkkfk dpnapkrpps afflfcseyr pkikgehpgl sigdvakklg emwnntaadd kqpyekkaak lkekyekdia ayrakgkpda akkgvvkaek skkkkeeeed eedeedeeee edeede e eee dddde
HMGB1ペプチドNo.41: edeededeee dddde （配列番号４）
HMGB1ペプチドNo.41部分: eee dddde （配列番号５）
HMGB1ペプチドNo.40: deeeeedeededeee （配列番号６）
HMGB1 peptide No. 41: e d eede d eee dddde (SEQ ID NO: 4)
HMGB1 peptide No. 41 part: eee dddde (SEQ ID NO: 5)
HMGB1 peptide No. 40: deeeee d eede d eee (SEQ ID NO: 6)
本発明の抗HMGB1モノクローナル抗体を有効成分とするインフルエンザ治療剤は、その剤形や投与形態は特に問わない。有効成分としての抗HMGB1モノクローナル抗体とともに、溶液、マイクロエマルジョン、分散液、リポソーム、又は高薬物濃度に好適なその他の適確な形状として、製剤化することができる。必要量の抗HMGB1モノクローナル抗体を、必要に応じて上に列挙した成分の1つ又は組み合わせとともに、適切な溶媒中に組み入れた後、ろ過滅菌することによって、調製することができる。 The influenza therapeutic agent containing the anti-HMGB1 monoclonal antibody of the present invention as an active ingredient is not particularly limited in its dosage form and administration form. Along with the anti-HMGB1 monoclonal antibody as an active ingredient, it can be formulated as a solution, microemulsion, dispersion, liposome, or other suitable shape suitable for high drug concentrations. The required amount of anti-HMGB1 monoclonal antibody can be prepared by incorporating in a suitable solvent, optionally with one or a combination of the components listed above, and then filter sterilizing.
本発明のインフルエンザ治療剤は、当分野で知られている多様な方法によって投与することができる。投与形態は特に問わないが、インフルエンザ治療を考慮すれば、注射剤として静脈内投与することが好ましい。その場合、溶媒としては、pHを調整した生理食塩水やグルコース水溶液など、血漿の等張液を用いることができる。また、抗体を塩類等と共に凍結乾燥した場合には、純水、蒸留水、滅菌水等も使用できる。その濃度も通常の抗体製剤のものとすればよく、1〜5 mg/mLとすることができる。但し、注射剤の浸透圧は、血漿と同等にする必要がある。 The influenza therapeutic agent of the present invention can be administered by various methods known in the art. The administration form is not particularly limited, but in consideration of influenza treatment, it is preferably administered intravenously as an injection. In that case, as the solvent, an isotonic solution of plasma such as a physiological saline adjusted with pH or an aqueous glucose solution can be used. In addition, when the antibody is lyophilized with salts or the like, pure water, distilled water, sterilized water, or the like can also be used. The concentration may be that of a normal antibody preparation, and can be 1 to 5 mg / mL. However, the osmotic pressure of the injection must be equivalent to that of plasma.
本発明のインフルエンザ治療剤の投与時期は特に制限されないが、インフルエンザ感染後、早ければ早いほど好ましいが、具体的にはインフルエンザウイルス感染後７日以内、好ましくは４８時間以内、より好ましくは２４時間以内である。 The administration time of the influenza therapeutic agent of the present invention is not particularly limited, but it is preferably as soon as possible after influenza infection. Specifically, it is within 7 days after influenza infection, preferably within 48 hours, more preferably within 24 hours. It is.
後述する実施例に示す通り、マウスに対して１回当たり2 mg/kgの抗HMGB1モノクローナル抗体を投与した場合に、インフルエンザウイルス感染に伴う死亡率に顕著な改善効果が認められた（図４参照）。また、インフルエンザウイルス感染に伴う肺組織中の好中球浸潤や炎症症状について抗HMGB1モノクローナル抗体の投与により改善が認められた（図６、７、８参照）。一方、感染したインフルエンザウイルスのコピー数は抗HMGB1モノクローナル抗体の投与によっても減少しなかった。このことより、本発明の抗HMGB1モノクローナル抗体は、インフルエンザウイルスそのものに直接作用するのではなく、インフルエンザウイルスの感染に伴う炎症、特にインフルエンザウイルスの感染に伴う肺炎の予防及び／又は治療に対して有効に作用するものと考えられる。 As shown in the Examples described later, when 2 mg / kg of anti-HMGB1 monoclonal antibody was administered to mice once, a marked improvement effect was observed in the mortality associated with influenza virus infection (see FIG. 4). ). In addition, neutrophil infiltration and inflammatory symptoms in lung tissues associated with influenza virus infection were improved by administration of anti-HMGB1 monoclonal antibody (see FIGS. 6, 7 and 8). On the other hand, the copy number of the infected influenza virus was not reduced by the administration of anti-HMGB1 monoclonal antibody. Thus, the anti-HMGB1 monoclonal antibody of the present invention does not directly act on the influenza virus itself, but is effective for the prevention and / or treatment of inflammation associated with influenza virus infection, particularly pneumonia associated with influenza virus infection. It is thought that it acts on.
これらの結果から考えると、ヒトに対する投与量は１回当たり抗HMGB1モノクローナル抗体を0.2〜5 mg/kgとすることができ、より好適には1〜2 mg/kgとすることができる。但しこれら薬剤の投与量は、患者の年齢や性別、疾患の重篤度等によって適宜変更することができる。また、本発明のインフルエンザ治療剤は、複数回にわたって、又は持続的に投与することができる。 Considering these results, the dosage for humans can be 0.2-5 mg / kg, more preferably 1-2 mg / kg of anti-HMGB1 monoclonal antibody per dose. However, the dosage of these drugs can be appropriately changed depending on the age and sex of the patient, the severity of the disease, and the like. Moreover, the influenza therapeutic agent of this invention can be administered in multiple times or continuously.
さらには、本発明のインフルエンザ治療剤とともに、他のインフルエンザ治療剤を併用して用いることもできる。本発明のインフルエンザ治療剤の有効成分である抗HMGB1モノクローナル抗体を、１以上の別のインフルエンザ治療剤とともに製剤化し、及び／又は併用して投与してもよい。併用可能な別のインフルエンザ治療剤としては特に限定されず、既に市販されている治療剤、又は今後開発される治療剤の何れであってもよい。当該別のインフルエンザ治療剤は、抗HMGB1モノクローナル抗体とは作用機序の異なるインフルエンザ治療剤が好適である。例えばノイラミニダーゼ阻害薬、Ｍ２タンパク質阻害剤等が挙げられる。ノイラミニダーゼ治療薬として、ペラミビル（商品名：ラピアクタ）、 オセルタミビル（商品名：タミフル）、ザナミビル（商品名：リレンザ）等が挙げられ、特に好適にはペラミビルが用いられる。有効成分としてのペラミビル、オセルタミビル、ザナミビル等は、薬学的に許容しうる塩や水和物も含まれる。既に市販されている治療剤の投与量は、既存の投与量を適用することもできるし、本発明の抗HMGB1モノクローナル抗体による併用効果を期待し、既存の投与量よりもより低い投与量で使用することもできる。 Furthermore, other influenza therapeutic agents can be used in combination with the influenza therapeutic agent of the present invention. The anti-HMGB1 monoclonal antibody that is an active ingredient of the influenza therapeutic agent of the present invention may be formulated with and / or used in combination with one or more other influenza therapeutic agents. Another influenza therapeutic agent that can be used in combination is not particularly limited, and may be any therapeutic agent that is already on the market or a therapeutic agent that will be developed in the future. The other influenza therapeutic agent is preferably an influenza therapeutic agent having a different mechanism of action from the anti-HMGB1 monoclonal antibody. Examples include neuraminidase inhibitors and M2 protein inhibitors. Examples of the neuraminidase therapeutic agent include peramivir (trade name: Rapiacta), oseltamivir (trade name: Tamiflu), zanamivir (trade name: Relenza), and particularly preferred is peramivir. Peramivir, oseltamivir, zanamivir and the like as active ingredients also include pharmaceutically acceptable salts and hydrates. As for the dose of the therapeutic agent already on the market, the existing dose can be applied, and the anti-HMGB1 monoclonal antibody of the present invention is expected to be used in combination, and the dose is lower than the existing dose. You can also
以下、実施例を挙げて本発明をより具体的に説明するが、本発明はもとより下記実施例により制限を受けるものではなく、明細書記載の趣旨に適合し得る範囲で適当に変更を加えて実施することも可能であり、それらはいずれも本発明の技術的範囲に含まれる。 Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to examples. However, the present invention is not limited by the following examples, but may be appropriately modified within a range that can meet the gist of the description. It is also possible to implement, and they are all included in the technical scope of the present invention.
（実施例１） 抗HMGB1モノクローナル抗体の調製
特許文献１に記載の方法と同手法により、抗HMGB1モノクローナル抗体を調製した。具体的には、以下のとおりである。
(Example 1) Preparation of anti-HMGB1 monoclonal antibody An anti-HMGB1 monoclonal antibody was prepared by the same method as described in Patent Document 1. Specifically, it is as follows.
１．ラットの免疫
市販のウシ胸腺由来HMGB1とHMGB2との混合物（和光純薬工業社製、コード番号：080-070741）1 mg/mLを2 mLガラス製注射筒にとり、別の2 mLガラス製注射筒にとった等容量のフロイント完全アジュバンドと連結管を通じて徐々に混和することによって、エマルションとした。セボフルレンにより麻酔したラットの後肢足蹠に、得られたエマルションを0.05 mLずつ、計0.1 mL注射投与した。２週間後、頚静脈から試験採血し、抗体価の上昇を確認した。次いで、腫大した腸骨リンパ節を前記注射投与から３週間後に無菌的に取り出した。得られた２個のリンパ節から、約6×107 個の細胞を回収することができた。
1. Immunization of rat Commercially available mixture of bovine thymus-derived HMGB1 and HMGB2 (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., code number: 080-070741) 1 mg / mL in a 2 mL glass syringe and another 2 mL glass syringe Emulsions were made by gradually mixing with an equal volume of Freund's complete adjuvant taken through a connecting tube. 0.05 mL of the obtained emulsion was injected by 0.1 mL in total into the hind footpads of rats anesthetized with sevoflurane. Two weeks later, test blood was collected from the jugular vein, and an increase in antibody titer was confirmed. The swollen iliac lymph nodes were then aseptically removed 3 weeks after the injection administration. Approximately 6 × 10 7 cells could be recovered from the two obtained lymph nodes.
２．細胞融合とクローニング
上記腸骨リンパ節細胞とマウスミエローマSP2/O-Ag14(SP2)細胞を、ポリエチレングリコールを用いて融合させ、得られた融合細胞を96穴マイクロプレートに蒔いた。１週間後、最初のELISAスクリーニングを行ない、陽性細胞を含むウェルの試料について、ウェスタンブロットにより二次スクリーニングを行なった。陽性を示すウェルの細胞を24穴マイクロプレートに移し、細胞をほぼコンフルエントな状態（約2×105）に殖やしてから、0.5 mLの凍結培地（GIT培地にウシ胎児血清を10 v/v％とジメチルスルホキシドを10 v/v％添加したもの）を用いて、液体窒素中で凍結保存した。この凍結保存細胞を解凍した後、96穴マイクロプレートでクローニングした。
2. Cell fusion and cloning The iliac lymph node cells and mouse myeloma SP2 / O-Ag14 (SP2) cells were fused using polyethylene glycol, and the resulting fused cells were seeded in a 96-well microplate. One week later, an initial ELISA screening was performed and samples from wells containing positive cells were subjected to secondary screening by Western blot. Cells in positive wells are transferred to a 24-well microplate, and the cells are grown to near confluence (approximately 2 x 10 5 ), then 0.5 mL of freezing medium (GIT medium with 10 v / v% fetal bovine serum) And dimethyl sulfoxide added at 10 v / v%) and stored frozen in liquid nitrogen. The cryopreserved cells were thawed and then cloned in a 96-well microplate.
３．抗体の精製
回転培養装置（SARSTEDT社製）により上記陽性細胞を２週間大量培養し、濃度2〜3 mg/mLの抗体液を得た。この抗体液をアフィニティゲル（インビトロジェン社製、MEP-HyperCel）と中性pH下で混和し、抗HMGB1抗体をゲルへ特異的に結合させた。特異的にゲルに結合した抗体を、酢酸ナトリウムバッファー（pH 4）により溶出した。溶出液を限外濾過装置により濃縮した後、セファロースCL6Bゲル濾過カラム（直径2 cm×長さ97 cm）によって、さらに精製し、抗HMGB1モノクローナル抗体を得た。
3. Purification of antibody The positive cells were cultured in a large amount for 2 weeks using a rotary culture apparatus (manufactured by SARSTEDT) to obtain an antibody solution having a concentration of 2 to 3 mg / mL. This antibody solution was mixed with an affinity gel (manufactured by Invitrogen, MEP-HyperCel) under neutral pH to specifically bind the anti-HMGB1 antibody to the gel. The antibody specifically bound to the gel was eluted with sodium acetate buffer (pH 4). The eluate was concentrated by an ultrafiltration device and further purified by a Sepharose CL6B gel filtration column (diameter 2 cm × length 97 cm) to obtain an anti-HMGB1 monoclonal antibody.
４．エピトープの確認
上記精製して得られた抗HMGB1モノクローナル抗体（クローン#10-22抗体）についてエピトープマッピングを行った（図２）。その結果クローン#10-22抗体は配列番号４に示すペプチド、特に配列番号５に示すペプチドをエピトープとし、強い結合定数（Kd）を示した（表１、図２）。以下の実施例では、抗HMGB1モノクローナル抗体としてクローン#10-22抗体を用いた。
HMGB1ペプチドNo.41: edeededeee dddde （配列番号４）
HMGB1ペプチドNo.41部分: eee dddde （配列番号５）
4). Confirmation of epitope Epitope mapping was performed on the anti-HMGB1 monoclonal antibody (clone # 10-22 antibody) obtained by the above purification (FIG. 2). As a result, clone # 10-22 antibody exhibited a strong binding constant (Kd) with the peptide shown in SEQ ID NO: 4, particularly the peptide shown in SEQ ID NO: 5 as an epitope (Table 1, FIG. 2). In the following examples, clone # 10-22 antibody was used as an anti-HMGB1 monoclonal antibody.
HMGB1 peptide No. 41: e d eede d eee dddde (SEQ ID NO: 4)
HMGB1 peptide No. 41 part: eee dddde (SEQ ID NO: 5)
（実施例２）インフルエンザウイルス感染モデルマウスに対する効果
本実施例では、インフルエンザウイルス感染モデルマウスに対する抗HMGB1モノクローナル抗体の効果として、生存率に対する効果を確認した。
(Example 2) Effect on influenza virus-infected model mice In this example, the effect on survival rate was confirmed as the effect of anti-HMGB1 monoclonal antibody on influenza virus-infected model mice.
１．インフルエンザの感染及び抗体の投与スケジュール
８〜９週齢の雄マウス（C57/BL6J）を用いた。インフルエンザウイルス（A/Puerto Rico/8/34 (H1N1)）を100PFU／マウスで経鼻的に感染させ、本実施例のインフルエンザウイルス感染モデルとした。インフルエンザウイルス感染後１時間、２４時間及び４８時間後に抗体を2 mg/kg尾静脈投与した。抗体の投与は、実施例１において作製した抗HMGB1モノクローナル抗体（#10-22）の投与群１５匹と対照抗体（抗Keyhole Limpet hemocyanin（KLH）抗体：自家製）投与群１５匹に分けた（図３）。
1. Influenza infection and antibody administration schedule Male mice (C57 / BL6J) 8-9 weeks old were used. Influenza virus (A / Puerto Rico / 8/34 (H1N1)) was infected nasally with 100 PFU / mouse, and used as an influenza virus infection model of this example. The antibody was administered at 2 mg / kg tail vein 1 hour, 24 hours and 48 hours after influenza virus infection. The administration of the antibody was divided into 15 groups administered with the anti-HMGB1 monoclonal antibody (# 10-22) prepared in Example 1 and 15 groups administered with a control antibody (anti-Keyhole Limpet hemocyanin (KLH) antibody: homemade) (FIG. 3).
２．生存率
本発明の抗HMGB1モノクローナル抗体投与群及び対照抗体投与群のインフルエンザウイルス感染に伴う生存率をカプランマイヤー（Kaplan-Meier）法にて確認した。生存時間の差についてはCox-Mantel検定を行った。その結果、抗HMGB1モノクローナル抗体投与群において、明らかに生存率の改善が認められた（図４）。
2. Survival rate The survival rate associated with influenza virus infection in the anti-HMGB1 monoclonal antibody administration group and the control antibody administration group of the present invention was confirmed by the Kaplan-Meier method. Cox-Mantel test was performed for the difference in survival time. As a result, the survival rate was clearly improved in the anti-HMGB1 monoclonal antibody administration group (FIG. 4).
（実施例３）インフルエンザウイルス感染モデルマウスに対する効果
本実施例では、インフルエンザウイルス感染モデルマウスに対する抗HMGB1モノクローナル抗体の効果として、病理学的検討を行った。具体的には感染局所での炎症（肺病理学的検討(HE/Gr1)）、気管支肺胞洗浄液（BALF）における好中球数、感染ウイルス量、HMGB1、酸化ストレスを確認した。
(Example 3) Effect on influenza virus-infected model mice In this example, a pathological study was conducted as the effect of anti-HMGB1 monoclonal antibody on influenza virus-infected model mice. Specifically, inflammation in the infected area (pulmonary pathological study (HE / Gr1)), neutrophil count in the bronchoalveolar lavage fluid (BALF), infectious viral load, HMGB1, and oxidative stress were confirmed.
１．インフルエンザの感染及び抗体の投与スケジュール
実施例２と同様にインフルエンザウイルス感染モデルを作製し、インフルエンザウイルス感染後１時間、２４時間及び４８時間後に抗体を2 mg/kg尾静脈投与した。抗体の投与は、実施例１において作製した抗HMGB1モノクローナル抗体（#10-22）の投与群と対照抗体（抗KLH抗体）投与群に分けた。インフルエンザウイルス感染後３日、５日、７日及び１０日目に肺、BALF及び血清を採取した（図５）。
1. Influenza infection and antibody administration schedule An influenza virus infection model was prepared in the same manner as in Example 2, and the antibody was administered at 2 mg / kg tail vein 1 hour, 24 hours and 48 hours after influenza virus infection. Antibody administration was divided into an anti-HMGB1 monoclonal antibody (# 10-22) administration group prepared in Example 1 and a control antibody (anti-KLH antibody) administration group. Lungs, BALF, and serum were collected on days 3, 5, 7, and 10 after influenza virus infection (FIG. 5).
２．肺病理学的検討(HE/Gr1)
感染１０日目のマウスを開腹し、肺病理学的な症状を確認した。その結果、対照抗体を投与したマウスでは肺及びその周辺で炎症状態が認められるのに対して、抗HMGB1モノクローナル抗体投与したマウスでは炎症が抑制されていることが確認された（図６）。
2. Pulmonary pathological study (HE / Gr1)
The mouse on the 10th day after infection was opened, and pulmonary pathological symptoms were confirmed. As a result, it was confirmed that in mice administered with the control antibody, inflammation was observed in the lung and the vicinity thereof, whereas in mice administered with the anti-HMGB1 monoclonal antibody, inflammation was suppressed (FIG. 6).
３．組織学的所見（好中球浸潤）
感染後３日、５日、７日及び１０日目のマウスから肺組織を採取し、組織学的所見を行った。その結果、対照抗体を投与したマウスでは炎症細胞浸潤が認められた（図７）。さらにBALF中の好中球数を確認した結果、何れの感染時期においても抗HMGB1モノクローナル抗体投与した場合に、対照と比較して好中球数が抑制されていることが認められた（図８）。
3. Histological findings (neutrophil infiltration)
Lung tissue was collected from mice 3 days, 5 days, 7 days and 10 days after infection, and histological findings were performed. As a result, inflammatory cell infiltration was observed in mice administered with the control antibody (FIG. 7). Furthermore, as a result of confirming the neutrophil count in BALF, it was found that the neutrophil count was suppressed as compared with the control when the anti-HMGB1 monoclonal antibody was administered at any infection stage (FIG. 8). ).
４．感染ウイルス量
感染後３日、５日、７日及び１０日目のマウスから採取した血清及びBALFについて、インフルエンザウイルス量を測定した。インフルエンザウイルス量は、RT-PCR法により測定した。その結果、何れの感染時期においても抗HMGB1モノクローナル抗体を投与した場合に、対照と比較してインフルエンザウイルス量の違いは特に認められなかった（図９）。このことより、抗HMGB1モノクローナル抗体は、インフルエンザウイルスに対しては直接作用するものではないと考えられた。
4). Infectious viral load The influenza viral load was measured for serum and BALF collected from mice on days 3, 5, 7, and 10 after infection. The amount of influenza virus was measured by the RT-PCR method. As a result, when the anti-HMGB1 monoclonal antibody was administered at any time of infection, there was no particular difference in the amount of influenza virus compared to the control (FIG. 9). From this, it was considered that the anti-HMGB1 monoclonal antibody does not act directly against influenza virus.
５．血清中及びBALF中のHMGB1量
感染後３日、５日、７日及び１０日目のマウスから採取した血清及びBALFについて、HMGB1量を測定した。HMGB1量は、ELISA法により測定した。その結果、血清中においては、何れの感染時期においても抗HMGB1モノクローナル抗体を投与した場合に、対照と比較してHMGB1値が抑制されていることが認められた（図１０）。また、BALF中では、感染後７日目、１０日目において抗HMGB1モノクローナル抗体を投与した場合に、対照と比較してHMGB1値が抑制されていることが認められた（図１０）。
5. HMGB1 amount in serum and BALF HMGB1 amount was measured for serum and BALF collected from mice on days 3, 5, 7, and 10 after infection. The amount of HMGB1 was measured by ELISA method. As a result, in the serum, it was recognized that the HMGB1 value was suppressed compared to the control when the anti-HMGB1 monoclonal antibody was administered at any time of infection (FIG. 10). Moreover, in BALF, when anti-HMGB1 monoclonal antibody was administered on the 7th day and 10th day after infection, it was recognized that the HMGB1 value was suppressed compared with the control (FIG. 10).
６．酸化ストレス量（抗酸化作用）
感染後３日、５日、７日及び１０日目のマウスから採取したBALFについてd-ROMsテスト（Diacron社Reactive OxygenMetabolitie：活性酸素代謝物テスト）を生体試料分析 Vol.32, No.4 (2009)に示す方法に基づき行なった。得られたU. CARR（ユニット・カール）値により酸化ストレスの程度を確認した。その結果、何れの感染時期においても抗HMGB1モノクローナル抗体を投与した場合に、対照と比較してU. CARR値が抑制されていることが認められた（図１１）。このことより、抗HMGB1モノクローナル抗体は、インフルエンザウイルス感染による酸化ストレスを軽減しうると考えられた。
6). Oxidative stress (antioxidant action)
For BALF collected from mice 3 days, 5 days, 7 days and 10 days after infection, biological sample analysis Vol. 32, No. 4 (2009) was conducted using d-ROMs test (Diacron Reactive Oxygen Metabolitie). ). The degree of oxidative stress was confirmed by the obtained U. CARR (unit curl) value. As a result, it was recognized that the U. CARR value was suppressed compared to the control when the anti-HMGB1 monoclonal antibody was administered at any infection stage (FIG. 11). From this, it was considered that the anti-HMGB1 monoclonal antibody can reduce oxidative stress caused by influenza virus infection.
（実施例４）インフルエンザウイルス感染モデルマウスに対する効果
本実施例では、インフルエンザウイルス感染モデルマウスに対し、抗HMGB1モノクローナル抗体と、作用機序の異なる既存の抗インフルエンザウイルス剤の併用効果を確認した。効果として、生存率及び体重による効果を確認した。
(Example 4) Effect on influenza virus-infected model mice In this example, the combined effect of an anti-HMGB1 monoclonal antibody and an existing anti-influenza virus agent having a different mechanism of action on influenza virus-infected model mice was confirmed. As effects, the effects of survival rate and body weight were confirmed.
１．インフルエンザの感染及び抗体の投与スケジュール
８〜９週齢の雄マウス（C57/BL6J）を用いた。インフルエンザウイルス（A/Puerto Rico/8/34 (H1N1)）を400PFU／マウスで経鼻的に感染させたものを、本実施例のインフルエンザウイルス感染モデルとした。抗HMGB1モノクローナル抗体として実施例１で作製した抗HMGB1モノクローナル抗体（#10-22）を用いた。併用する既存の抗インフルエンザウイルス剤として、ペラミビル（商品名：ラピアクタ）を用いた。
1. Influenza infection and antibody administration schedule Male mice (C57 / BL6J) 8-9 weeks old were used. Influenza virus (A / Puerto Rico / 8/34 (H1N1)) infected by nasal infection with 400 PFU / mouse was used as the influenza virus infection model of this example. The anti-HMGB1 monoclonal antibody (# 10-22) prepared in Example 1 was used as the anti-HMGB1 monoclonal antibody. Peramivir (trade name: Rapiacta) was used as an existing anti-influenza virus agent to be used in combination.
インフルエンザウイルス感染後２−４日目にペラミビルを10 mg/kg/日を筋注投与した。抗HMGB1モノクローナル抗体はインフルエンザウイルス感染後２−４日目に5 mg/kg/日を尾静脈投与した（図１２参照）。抗HMGB1モノクローナル抗体及びペラミビルの併用投与群（n=9）、ペラミビルの単独投与群（n=14）について、生存率及び体重減少に及ぼす効果を確認した。 Peramivir was administered intramuscularly at 10 mg / kg / day on days 2-4 after influenza virus infection. The anti-HMGB1 monoclonal antibody was administered at 5 mg / kg / day via the tail vein 2-4 days after influenza virus infection (see FIG. 12). Anti-HMGB1 monoclonal antibody and peramivir combination administration group (n = 9) and peramivir single administration group (n = 14) were confirmed to have an effect on survival rate and weight loss.
２．生存率
上記各投与群でのインフルエンザウイルス感染に伴う生存率をカプランマイヤー（Kaplan-Meier）法にて確認した。生存時間の差についてはCox-Mantel検定を行った。その結果、ペラミビルの単独投与群に比べて抗HMGB1モノクローナル抗体及びペラミビルの併用投与群で、生存率の改善が認められた（図１２）。
2. Survival rate Survival rate associated with influenza virus infection in each of the above administration groups was confirmed by the Kaplan-Meier method. Cox-Mantel test was performed for the difference in survival time. As a result, an improvement in the survival rate was observed in the combination administration group of anti-HMGB1 monoclonal antibody and peramivir compared to the single administration group of peramivir (FIG. 12).
３．体重
上記各マウスについて、インフルエンザウイルス感染後、各薬剤の投与群についてインフルエンザウイルス感染直前の体重を100％とし、その後の体重の変動率を確認した。その結果、いずれの群においてもインフルエンザウイルス感染後に体重の減少傾向が認められ、感染後９〜１１日ごろに体重減少が最も激しかった。しかしながら、抗HMGB1モノクローナル抗体及びペラミビルの併用投与群では体重減少の割合が抑制されていることが確認された（図１３）。
3. Body weight For each of the above mice, the body weight immediately before influenza virus infection was set to 100% in each drug administration group after influenza virus infection, and the subsequent fluctuation rate of body weight was confirmed. As a result, in all groups, a tendency to decrease in body weight was observed after infection with influenza virus, and weight loss was most intense around 9 to 11 days after infection. However, it was confirmed that the proportion of weight loss was suppressed in the combined administration group of anti-HMGB1 monoclonal antibody and peramivir (FIG. 13).
以上詳述したように、本発明の抗HMGB1モノクローナル抗体を有効成分とするインフルエンザ治療剤によれば、インフルエンザによる死亡リスクを低減化することができる。本発明の有効成分としての抗HMGB1モノクローナル抗体は、インフルエンザウイルスに対して直接的に作用するのではなく、インフルエンザウイルス感染に伴う症状を抑制することにより効果を発揮する。特に、肺炎に対して有効な予防剤及び／治療剤となり得る。本発明のインフルエンザ治療剤によれば、インフルエンザウイルス感染により上昇した生体内のHMGB1に作用して抗肺炎作用を発揮するため、インフルエンザ治療剤耐性インフルエンザウイルスに係るサブタイプには影響なくインフルエンザウイルス感染に伴う肺炎を抑制することができ、極めて有用である。 As described above in detail, according to the influenza therapeutic agent comprising the anti-HMGB1 monoclonal antibody of the present invention as an active ingredient, the risk of death due to influenza can be reduced. The anti-HMGB1 monoclonal antibody as an active ingredient of the present invention does not act directly on influenza virus, but exerts an effect by suppressing symptoms associated with influenza virus infection. In particular, it can be an effective prophylactic and / or therapeutic agent for pneumonia. According to the influenza therapeutic agent of the present invention, it exerts an anti-pneumonia effect by acting on the in vivo HMGB1 increased by influenza virus infection, so it does not affect the influenza virus resistant subtype related to influenza virus infection. The accompanying pneumonia can be suppressed and is extremely useful.
さらに、本発明のインフルエンザ治療剤は従来のインフルエンザ治療剤とは作用機序が異なるため、従来公知のインフルエンザ治療剤と併用して使用することができ、より確実なインフルエンザ治療効果が期待できる。 Furthermore, since the mechanism of action of the influenza therapeutic agent of the present invention is different from that of conventional influenza therapeutic agents, it can be used in combination with conventionally known influenza therapeutic agents, and a more reliable influenza therapeutic effect can be expected.
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