JP2017193520A - 抗ウイルス剤及び抗ウイルス用食品組成物 - Google Patents

Abstract

【課題】タケノコ由来物質の新規な利用方法となる抗ウイルス剤及び抗ウイルス用食品組成物を提供する。【解決手段】タケノコ由来物質を有効成分として含有し、ウイルス感染症の予防又は治療に用いられる抗ウイルス剤及び抗ウイルス用食品組成物である。例えば、ウイルスは、ＲＮＡウイルスであって、インフルエンザウイルス、ロタウイルス及びノロウイルスからなる群より選ばれるいずれかのウイルスである。また例えば、タケノコ由来物質は、タケノコの可食部の抽出物である。【選択図】図１

Description

本発明は、新規な抗ウイルス剤及び抗ウイルス用食品組成物、特にタケノコ由来物質を有効成分として含有し、ウイルス感染症の予防又は治療に用いられる抗ウイルス剤及び抗ウイルス用食品組成物に関する。

ウイルス感染症は、環境中（大気、水、土壌、動物など）に存在する病原体であるウイルスが、ヒトの体内に侵入することで引き起こされる感染性疾患であって、局地的な流行で終息することもあるが、動物（特にヒト）の移動によって世界的な規模で感染が拡大し、公衆衛生上の問題となることがある。
ウイルスは、一般に約０．０２〜０．３μｍの大きさからなる微小な寄生体であって、主にタンパク質の殻（カプシド）と、その殻内部にある核酸（ＲＮＡ又はＤＮＡ）から構成されている。
ウイルスは、その複製については完全に細胞に依存しており、まず宿主細胞に吸着して細胞内に侵入する。そして、細胞内でＤＮＡやＲＮＡを放出（脱殻）して複製されるが、その過程では特異的酵素を必要とする。ウイルスに感染した宿主細胞は、正常に機能できなくなって通常は死滅し、その宿主細胞から新しいウイルスが放出されて他の宿主細胞へさらに感染する。
ウイルスは、ゲノムとしてＤＮＡを有するＤＮＡウイルスと、ＲＮＡを有するＲＮＡウイルスとに大別され、ＲＮＡウイルスの中には、代表的なウイルスとして呼吸器疾患を引き起こすインフルエンザウイルスや、消化器疾患を引き起こすロタウイルス及びノロウイルスが知られている。

インフルエンザウイルスは、急性の呼吸器感染症であるインフルエンザを引き起こし、国内では毎年冬に数百万人のインフルエンザ患者が報告されており、インフルエンザは高い罹患率と死亡率を伴うものである。特に、乳幼児や高齢者にとっては重要な疾患であって、高齢者では肺炎の合併率が高く、インフルエンザによる死亡の多くが高齢者で占められている。
インフルエンザウイルスは、オルトミクソウイルス科に属し、核タンパクの抗原性の違いによってＡ型、Ｂ型及びＣ型に分類されている。その中で、Ａ型とＢ型のウイルス表面にある糖タンパク質は変異が大きく、インフルエンザの種類が多い要因となっている。特に、Ａ型インフルエンザウイルスは、抗原性が変異しやすいため、毎年インフルエンザウイルス感染を大流行させている。

インフルエンザウイルス感染の予防として、インフルエンザワクチンが用いられており、ワクチンを皮下注射や筋肉注射することで、インフルエンザウイルスに対する免疫を予め体内に確立しておき、感染を予防することが一般に行われている。
またインフルエンザの治療剤としては、例えば、ウイルスの脱殻過程において細胞内でＲＮＡを放出する際に必要なＭ２蛋白を阻害することで、ウイルス増殖を抑制するアマンタジン（商品名：シンメトレル（登録商標））が用いられている。また、ウイルスの放出過程において感染した宿主細胞からのウイルス放出に必要なノイラミニダーゼを阻害することで、ウイルス増殖を抑制するオセルタミビル（商品名：タミフル（登録商標））やザナミビル（商品名：リレンザ（登録商標））が用いられている。

しかしながら、予防ワクチンについて特にＡ型インフルエンザウイルスでは、抗原性が変異しやすい性質のため、流行の抗原タイプの予測が困難であるのに加えて、ワクチン製造に時間がかかるため、有効なワクチンを十分に製造及び供給することが困難である。
また、インフルエンザ治療剤については、その有効性が認知されている一方で、副作用や耐性株の出現等の問題がある。またアマンタジンでは、Ａ型ウイルスのＭ２蛋白を阻害する効果があるがＢ型ウイルスの蛋白には結合できず効果がない等、同じ活性成分でもウイルスの型によって効果が異なる（非特許文献１参照）。
インフルエンザは、現代においてもその強烈な伝播力によって大きな流行を繰り返す伝染病であって、社会に莫大な被害を及ぼしている。インフルエンザウイルスに有効で安全性の高い薬剤は少ないうえに、耐性ウイルスの出現なども問題視されているため、新規メカニズムの抗インフルエンザウイルス剤の開発が強く望まれているところである。

また、ロタウイルスは、消化器疾患である感染性胃腸炎を引き起こすウイルスであって、一般に乳児下痢症や嘔吐下痢症の原因として知られている。特に、冬季に見られる乳児下痢症は、主に２歳以下の幼児に対して発熱、嘔吐、下痢及び脱水症状を引き起こす重症の下痢症疾患である。
わが国では、ロタウイルス胃腸炎による年間の患者数は約８０万人、入院者数は約７〜８万人に及ぶと推計されており、毎年数名の死亡者が報告されている。ロタウイルスは感染力が非常に強く、衛生環境の整った先進国であっても、概ね５歳までにほぼ１００％のヒトがロタウイルスに一度は感染すると考えられている。アメリカ合衆国では年間約５０万人以上が主に下痢症状で受診し、特に小児は重篤な下痢を起こし易く、罹患患者の約１０％は入院すると言われている。地域差があると考えられるが、全世界で毎年約７０万人程度が亡くなっていると考えられている。
先進国の疫学調査によると、衛生状態の改善ではロタウイルスの有病率を減少させることはできないとされている。また、ロタウイルスに対するワクチンが一応開発されているものの、ワクチンの無効な型や組み替え体が存在するため、それらの対策が求められている。そこで、新規メカニズムのロタウイルス治療剤の開発が期待されている。

また、ノロウイルスは、消化器疾患である感染性胃腸炎を引き起こすウイルスであって、カキなどの貝類の摂食による食中毒の原因になるほか、感染したヒトの糞便や吐瀉物、あるいはそれらが乾燥したものから出る塵埃を介して経口感染する。ノロウイルス属による集団感染は、世界各地の学校や乳幼児施設、高齢者施設などで散発的に発生しており、脱水症状から重症となって死亡する例もある。
ノロウイルス感染症は近年増加傾向にあり、ノロウイルスは変異を繰り返して、ヒトからヒトへ感染するよう変異することがあり、新型のノロウイルスに対する抗体をもたないために大流行することが多い。しかしながら、ノロウイルスに対するワクチンは、一部有効性が認められるものもあるがまだ開発途上にあって、ノロウイルスワクチンの開発や、新規メカニズムのノロウイルス治療剤の開発が期待されている。

一方で、タケノコは、イネ科タケ亜科に属するタケ類又はササ類の若芽であり、日本や中国で古来より食材として利用されてきた。日本で食用に用いられるタケノコとしては、モウソウチク（孟宗竹）を代表として、マダケ（真竹）やハチク（淡竹）が知られている。タケノコは、栄養成分として食物繊維や蛋白質が豊富であり、ビタミンＢ１やビタミンＢ２などのビタミン、ミネラルを含んでいる。また、うまみ成分としてグルタミン酸やアスパラギン酸などのアミノ酸を含み、えぐみ成分としてシュウ酸やホモゲンチジン酸を含むことも知られている。食物繊維が豊富なことから、便秘や大腸がんなどの予防に効果があるとされている。

タケの抽出物の抗菌活性、抗ウイルス活性等の機能性については、例えば、特許文献１に、タケの抽出物成分であるｐ−ベンゾキノン誘導体が抗菌性、抗ウイルス性を示すことが記載されている。特許文献１では、細菌に対する増殖抑止効果を試験しているにすぎず、抗ウイルス活性は試験されておらず、タケノコに関する記載もない。
特許文献２には、イネ科植物の抽出成分が、抗菌性及び抗ウイルス性を示すことが記載されている。特許文献２では、抗ウイルス活性を試験しておらず、タケノコに関する記載もない。
特許文献３には、竹抽出物（竹植物の表皮、竹如）を有効成分とする抗ウイルス組成物が記載されている。特許文献３では、インフルエンザウイルス、ネコカリシウイルス、ノロウイルスに対して抗ウイルス効果があることが試験されているが、タケノコに関する記載はない。
特許文献４には、タケノコを含むタケ類から抽出される抗腫瘍組成物が記載されている。特許文献４では、レトロウイルスの感染が原因の成人Ｔ細胞白血病に効果がある試験結果が示されている。また、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、ＡＩＤＳに対して抗ウイルス剤として使用できることも記載されているが、インフルエンザ、ロタウイルス、ノロウイルスについての記載はない。

上記のようにタケの抽出物の抗菌活性や抗ウイルス活性は報告されているものの、抗ウイルス活性については未だ一部しか明らかになっておらず、タケノコの抗ウイルス性については詳細に検討されていないのが現状であり、上述した機能以外の機能の解明、これら物質の利用法等の開発が望まれている。

特開２００３−２９０６１３号公報 特開２００６−３２０３１０号公報 特開２０１１−４６６３６号公報 特開平７−３００４２４号公報

菅谷憲夫、「ウイルス」、55巻、第1号、2005、p.111-114

本発明は、上記の課題に鑑みてなされたものであり、本発明の目的は、新規な抗ウイルス剤及び抗ウイルス用食品組成物を提供することにある。
本発明の他の目的は、タケノコ由来物質の新規な利用方法となる抗ウイルス剤及び抗ウイルス用食品組成物を提供することにある。

本発明者らは、鋭意研究した結果、タケノコ由来物質が、ウイルス、特にＲＮＡウイルスであるインフルエンザウイルス、ロタウイルス及びノロウイルスの増殖を阻害させる作用を有することを見出した。
詳しく言うと、これらウイルスは、生体内の宿主細胞に吸着して細胞内に侵入し、細胞内でＲＮＡを放出（脱殻）して複製され、宿主細胞から複製されたウイルスが放出されて増殖するところ、本発明者らは、タケノコ由来物質が、これらウイルスの増殖メカニズムにおいてウイルスの宿主細胞への吸着を阻害することを明らかにし、また、当該ウイルスの宿主細胞内での増殖を阻害することを明らかにして、本発明をするに至った。
また、本発明者らは、タケノコ由来物質が、ロタウイルスなどのウイルスの増殖メカニズムにおいて、これらウイルスの吸着を阻害することを明らかにし、また、これらウイルスの細胞内での増殖も阻害することを明らかにして、本発明をするに至った。具体的には、タケノコ由来物質が、ロタウイルスなどのウイルスの増殖メカニズムにおいて、これらウイルスの吸着時期、また複製・放出時期に必要となる糖タンパク質（例えばヘマグルチニン等）や特異的酵素（例えばＲＮＡポリメラーゼ等）の活性を阻害することを明らかにして、本発明をするに至った。

従って、前記課題は、本発明の抗ウイルス剤によれば、タケノコ由来物質を有効成分として含有し、ウイルス感染症の予防又は治療に用いられること、により解決される。
このとき、前記タケノコ由来物質物は、タケノコの抽出物であると良い。
また、前記ウイルスは、ＲＮＡウイルスであると良く、ＲＮＡウイルスのうち、インフルエンザウイルス、ロタウイルス及びノロウイルスからなる群より選ばれるいずれかのウイルスであるとさらに良い。
また、前記ロタウイルスは、ロタウイルスＫＲＨ−２株であると良い。
上記構成により、例えばヒト、特にウイルス感染患者にタケノコ由来物質物を投与すると、タケノコ由来物質物が生体内においてウイルス増殖を阻害する作用を果たすため、本発明をウイルス感染症の予防剤又は治療剤として用いることができる。
そして、タケノコ由来物質物を投与することで、ウイルス増殖の阻害作用が向上する。
そして、ＲＮＡウイルス感染症のうち、特にその強烈な伝播力によって社会に莫大な被害を及ぼすインフルエンザウイルス感染症、ロタウイルス感染症又はノロウイルス感染症の予防剤又は治療剤として好適に用いることができる。
また、ワクチンを接種した幼児から単離されたロタウイルスのＫＲＨ−２株に対しても、予防剤又は治療剤として用いることができる。
そして、ワクチンが効果を示さないロタウイルスに対しても、予防剤又は治療剤として用いることができる。

このとき、前記タケノコの抽出物が、前記タケノコの可食部の抽出物であると良く、可食部の熱水抽出物であるとさらに良い。
上記のように、抽出物の部位や、抽出物の濃度を最適化することで、ＲＮＡウイルス増殖の阻害作用の効果が一層向上する。

このとき、前記抽出物由来であって、前記ＲＮＡウイルスの細胞への吸着を阻害するためのウイルス吸着阻害剤として用いられると良い。
また、前記抽出物由来であって、前記ＲＮＡウイルスの細胞内での複製を阻害するためのウイルス放出阻害剤として用いられると良い。
また、前記抽出物由来であって、前記ＲＮＡウイルスの細胞からの放出を阻害するためのウイルス放出阻害剤として用いられると良い。
上記構成により、ウイルスは、一般に生体内の宿主細胞に吸着して細胞内に侵入し、細胞内でＲＮＡを放出（脱殻）して複製され、宿主細胞から複製されたウイルスが放出されることで増殖するところ、本発明の抽出物が、ウイルス増殖を阻害するために宿主細胞への吸着時期において抗ウイルス活性を発揮することができる。
また本発明の抽出物は、ウイルス増殖を阻害するために宿主細胞内での複製時期において抗ウイルス活性を発揮することもできる。
また本発明の抽出物は、ウイルス増殖を阻害するために宿主細胞内での放出時期において抗ウイルス活性を発揮することもできる。
そのため、例えば、ウイルス感染症患者に対して、ウイルス増殖がどの時期まで進行しているかを把握して最適な投与タイミングで本抗ウイルス剤を投与することができる。

また、タケノコ由来物質を有効成分として含有し、感染性胃腸炎の予防又は治療に用いられる抗ウイルス剤や、ウイルス感染症の予防又は改善に用いられる抗ウイルス用食品組成物も提供することができる。

本発明によれば、新規な抗ウイルス剤及び抗ウイルス用食品組成物を提供することができる。
また、タケノコ由来物質の新規な利用方法となる抗ウイルス剤及び抗ウイルス用食品組成物を提供できる。

タケノコの抽出物によるロタウイルス増殖阻害試験の結果を示すデータである。 タケノコの抽出物によるロタウイルスの吸着時期、培養時期、吸着・培養時期における増殖阻害試験の結果を示すデータ及び、ロタウイルス感染細胞の培養時の異なる期間において、タケノコの抽出物を添加しておいた場合のロタウイルス増殖阻害試験の結果を示すデータである。 タケノコ抽出物のＭＴＴアッセイの結果を示すデータである。 タケノコの抽出物によるロタウイルスＫＵ株増殖阻害試験の結果を示すデータである。 タケノコの抽出物によるロタウイルスＤＳ−１株増殖阻害試験の結果を示すデータである。 タケノコの抽出物によるロタウイルスＳ２株増殖阻害試験の結果を示すデータである。 タケノコの抽出物によるロタウイルスＹＯ株増殖阻害試験の結果を示すデータである。 タケノコの抽出物によるロタウイルスＨＯＳＯＫＡＷＡ株増殖阻害試験の結果を示すデータである。 タケノコの抽出物によるロタウイルスＫＲＨ−２株増殖阻害試験の結果を示すデータである。 タケの抽出物によるロタウイルス増殖阻害試験の結果を示すデータである。 タケの抽出物のＭＴＴアッセイの結果を示すデータである。 タケノコの抽出物によるインフルエンザウイルス増殖阻害試験の結果を示すデータである。

以下、本発明の実施形態について、図１〜図１２を参照しながら説明する。
本実施形態は、タケノコ由来物質を有効成分とし、ヒトに投与することでヒト体内のウイルスの増殖を阻害して、ウイルス感染症の予防又は治療に用いられることを特徴とする抗ウイルス剤及び抗ウイルス用食品組成物の発明に関するものである。
詳しく言うと、ウイルス増殖を阻害するためにウイルスの宿主細胞への吸着時期において抗ウイルス活性を発揮し、また、ウイルスの宿主細胞内での複製時期において抗ウイルス活性を発揮し、さらに、ウイルスの宿主細胞内での放出時期において抗ウイルス活性を発揮することを特徴とする抗ウイルス剤及び抗ウイルス用食品組成物の発明に関するものである。

＜ウイルスの概要＞
ウイルスは、ゲノムがＤＮＡであるかＲＮＡであるかによって、ＤＮＡウイルスとＲＮＡウイルスに大別される。
またＤＮＡウイルスは、ＤＮＡが一本鎖であるか二本鎖であるかによって、主に２つに分類することができる。
具体的には、一本鎖のＤＮＡウイルスとして、パルボウイルス科などが存在し、また、二本鎖のＤＮＡウイルスのうち、エンベロープを有するものとしてヘルペスウイルス科、ポックスウイルス科及びヘパドナウイルス科などが存在し、エンベロープを有しないものとしてアデノウイルス科及びパピローマウイルス科などのウイルスが存在する。
一本鎖のＤＮＡウイルスによって引き起こされるウイルス性疾患としては、ヒトパルボＢ１９（伝染性紅班）などが挙げられ、また、二本鎖のＤＮＡウイルスによって引き起こされるウイルス性疾患としては、単純ヘルペス（歯肉口内炎、唇ヘルペス、性器ヘルペスウイルス感染症）、水痘・帯状疱疹、痘瘡、Ｂ型肝炎、アデノ（咽頭結膜熱、急性出血性結膜炎、流行性角結膜炎）、ヒトパピローマなどが挙げられる。

ＲＮＡウイルスは、ＲＮＡが一本鎖であるか二本鎖であるか、一本鎖ＲＮＡウイルスの場合にはゲノムのセンスがプラス鎖(＋鎖)であるかマイナス鎖(−鎖)であるかによって、主に３つに分類することができる。
具体的には、まず一本鎖の−鎖ＲＮＡウイルスとして、オルトミクソウイルス科、ラブドウイルス科、パラミクソウイルス科、フィロウイルス科、ブニヤウイルス科及びアレナウイルス科などのウイルスが存在する。なお、インフルエンザウイルスは、オルトミクソウイルス科に属している。
これら一本鎖の−鎖ＲＮＡウイルスによって引き起こされるウイルス性疾患としては、インフルエンザ、鳥インフルエンザ、狂犬病、麻疹、ムンプス（流行性耳下腺炎）、ＲＳ（呼吸器感染症）、エボラ（出血熱）、マールブルグ（出血熱）、クリミア・コンゴ出血熱、ＳＦＴＳ、ラッサ（出血熱）、フニン／サビア／ガナリト／マチュポ（出血熱）などが挙げられる。

次に、一本鎖の＋鎖ＲＮＡウイルスのうち、エンベロープを有するものとしてフラビウイルス科、コロナウイルス科、トガウイルス科及びレトロウイルス科などが存在し、エンベロープを有しないものとしてカリシウイルス科及びピコルナウイルス科などのウイルスが存在する。なお、ノロウイルスは、カリシウイルス科に属している。
これら一本鎖の＋鎖ＲＮＡウイルスによって引き起こされるウイルス性疾患としては、デング、ウエストナイル、日本脳炎、Ｃ型肝炎、黄熱、ＳＡＲＳコロナ、ＭＥＲＳコロナ、風疹、ヒト免疫不全（ＡＩＤＳ）、ヒトＴリンパ好性（成人Ｔ細胞白血病）、Ｅ型肝炎、ノロ（感染性胃腸炎）、ポリオ（急性灰白髄炎）、Ａ型肝炎、コクサッキー（手足口病、ヘルパンギーナ）、ライノ（感冒）などが挙げられる。

最後に、二本鎖ＲＮＡウイルスとして、レオウイルス科などが存在する。
なお、ロタウイルスは、レオウイルス科に属している。
二本鎖ＲＮＡウイルスによって引き起こされるウイルス性疾患としては、ロタ（感性性胃腸炎）などが挙げられる。

インフルエンザウイルスは、オルトミクソウイルス科に属するＲＮＡウイルスであって、呼吸器に炎症を誘発させ、感染者の咳及び唾液で空気中に直接伝達されるか、インフルエンザ患者の接触物などによって間接的にもヒトに伝染し得る伝染力の強いウイルスである。
インフルエンザウイルスは、ウイルス表面に存在する抗原性糖タンパク質であるヘマグルチニン（Ｈｅｍａｇｇｌｕｔｉｎｉｎ：ＨＡ）とノイラミニダーゼ（Ｎｅｕｒａｍｉｎｉｄａｓｅ：ＮＡ）の活性によって宿主細胞へ吸着し、また、ノイラミニダーゼの活性によって宿主細胞内に侵入することができる。
インフルエンザウイルスは、これら抗原性糖タンパク質の違いによってＡ型、Ｂ型及びＣ型に分類されている。特に、Ａ型インフルエンザウイルスは、ヘマグルチニン１６種と、ノイラミニダーゼ９種との型によって１４４種類の亜型に分けられる。そして、これらの組み合わせが頻繁に変化し、これに起因して抗原性の異なる新たな亜型のウイルスが出現することが知られている。

インフルエンザウイルスは、急性の呼吸器感染症を引き起こし、その臨床症状は、急激な発熱、頭痛、関節痛、全身倦怠などの全身症状とともに、鼻汁、咳などの風邪にみられる種々の呼吸器症状および３８℃以上の高熱を伴うのが特徴である。
健常人では、通常約２４〜４８時間の潜伏期間をおいて発症し、１〜２週間程度で治癒するが、乳幼児、高齢者や呼吸器、循環器、腎臓に慢性疾患を持つ患者、糖尿病などの代謝疾患や免疫機能が低下している患者などでは、細菌などによる二次感染や肺炎を併発して死に至る場合も少なくない。また、呼吸器の局所感染にとどまらず、インフルエンザ脳炎・脳症などに代表される重症神経系合併症といった極めて重篤な症例も報告されている。このほか、腹痛、悪心・嘔吐、下痢などの消化器症状がみられることもあり、特に小児では注意を要する。

ロタウイルスは、レオウイルス科のロタウイルス属に属するＲＮＡウイルスである。
ロタウイルス粒子は、コア、内殻及び外殻の３層で構成される二重殻粒子からなり、ウイルス粒子内にＲＮＡポリメラーゼやキャップ合成関連酵素を有する。コアは、タンパク質ＶＰ１、ＶＰ２、ＶＰ３からなり、内殻タンパク質ＶＰ６によって覆われて一重殻粒子を形成し、さらに外殻タンパク質ＶＰ４、ＶＰ７で覆われて二重殻粒子つまり感染性ウイルス粒子を形成する。
ロタウイルスは、内殻タンパク質ＶＰ６の抗原性によってＡ〜Ｈ群の８種類に分類される。ヒトへの感染が報告されているロタウイルスは主にＡ群〜Ｃ群である。
ロタウイルスは、ヒトの小腸の腸管上皮細胞に感染し、微絨毛の配列の乱れや欠落などの組織病変の変化を引き起こす。これによって腸からの水の吸収が阻害され下痢症を発症する。通常約４８時間の潜伏期間をおいて発症し、主に乳幼児に急性胃腸炎を引き起こす。
主症状は下痢（血便、粘血便は伴わない）、嘔気、嘔吐、発熱、腹痛であり、通常約１〜２週間で自然に治癒するが、脱水がひどくなるとショック、電解質異常、時には死に至ることもある。

インフルエンザウイルス、ロタウイルスを含むＲＮＡウイルスが細胞内で増殖する過程を説明すると、ウイルスが宿主細胞に吸着する「吸着時期」、吸着したウイルスが細胞内に侵入する「侵入時期」、侵入したウイルスが細胞内でＲＮＡを放出する（脱殻する）「脱殻時期」、脱殻したＲＮＡから新たなウイルスが複製される「複製時期」、そして、複製されたウイルスが細胞から放出される「放出時期」を経ていく。
ウイルスは、核酸やタンパク質の合成に必要な素材を有しておらず、必ず生体細胞を必要とする。生体細胞内に寄生して、細胞の代謝を利用して増殖し、材料、宿主細胞の代謝酵素、タンパク質合成のための宿主細胞リボソームを利用して自己成分を合成する。
例えば細菌は基本的に２分裂によって増殖していくのに対し、ウイルスは１つの粒子が感染した宿主細胞内で一気に数を増やしていく。

「吸着時期」では、ウイルス表面にあるエンベロープ又はカプシドの結合タンパク質（リガンド）が、宿主細胞の表面の受容体（レセプター）に結合する。ウイルスへの感染性は、そのウイルスに対するレセプターを宿主細胞が有しているかどうかに依存する。
インフルエンザウイルスの場合、ウイルス表面にあるヘマグルチニンが細胞側にあるシアル酸受容体に結合する。
ロタウイルスの場合、ウイルス表面にある結合タンパク質（外殻タンパク質ＶＰ４、ＶＰ７）が細胞側にある受容体に結合する。

「侵入時期」では、ウイルスは、一般に細胞の飲食作用（エンドサイトーシス）によって細胞内のエンドソームに取り込まれまる。そして、エンドソーム内の酸性化によって、ウイルス表面のエンベロープと、宿主細胞の細胞膜とが融合する。
インフルエンザウイルスの融合には、宿主細胞由来のエンドプロテアーゼによるヘマグルチニンの特異的配列部位でのペプチド結合の開裂が必須である。この開裂によってヘマグルチニンの膜融合ドメインが露出し、エンドソーム膜との融合が起こる。
ロタウイルスの場合、宿主細胞由来のプロテアーゼ（トリプシン）によって、外殻タンパク質ＶＰ４が、タンパク質ＶＰ５とタンパク質ＶＰ８に開裂している必要がある。この開裂の後、まずタンパク質ＶＰ８がシアル酸を含む分子（第１レセプター）と接触し、次にタンパク質ＶＰ５及び外殻タンパク質ＶＰ７がインテグリン（第２レセプター）と結合することによって、直接侵入あるいはエンドサイトーシスで細胞内へ侵入すると考えられている。

「脱殻時期」では、細胞内へ侵入したウイルスのカプシドが分解され、ＲＮＡが宿主細胞内を遊離する（脱殻）。脱殻からウイルス粒子が再構成されるまでの期間は、ウイルス粒子が見かけ上存在しなくなり、この期間を暗黒期とも言う。
Ａ型インフルエンザウイルスの表面には、Ｍ２蛋白と呼ばれる膜タンパク質が存在しており、Ｍ２蛋白はＨ^＋を通過させるイオンチャネルを形成している。エンドソーム内がさらに酸性化（ｐＨの低下）していくと、このイオンチャネルのゲートが開き、Ｈ^＋がウイルス内へ取り込まれる。これを契機として、ウイルスの脱殻が生じ、ＲＮＡが細胞内に放出される。
ロタウイルスの場合、細胞侵入の際に外殻タンパク質ＶＰ４、ＶＰ７が除去される。外殻タンパク質ＶＰ４、ＶＰ７が外れることで、細胞内に放出された内殻タンパク質ＶＰ６の再配置が起こり、ＲＮＡ転写が開始される。

「複製時期」では、脱殻したＲＮＡが宿主細胞の核内に取り込まれて、新たなＲＮＡが大量に複製されると同時にＲＮＡの転写（ｍＲＮＡの合成）を経てウイルス独自のタンパク質が大量に合成される。ＲＮＡの複製の際には、ＲＮＡ複製酵素となるＲＮＡ依存性のＲＮＡポリメラーゼが機能する。また、ｍＲＮＡからタンパク質への合成の際には、宿主細胞の持つリボソームなどのタンパク質合成系が機能する。複製されたＲＮＡと、合成されたタンパク質とが細胞内で集合し、新たなウイルスが組み立てられる（複製される）。

「放出時期」では、ウイルスは、宿主細胞の細胞膜や核膜をかぶって出芽することや宿主細胞が死滅することで、宿主細胞外へ放出される。
インフルエンザウイルスの場合、細胞内で増殖した後、感染した宿主細胞から放出される際には、ウイルス由来のノイラミニダーゼによるヘマグルチニンとシアル酸受容体との切断が必須である。

ここで、既存の抗インフルエンザウイルス剤について説明すると、アマンタジンは、インフルエンザウイルスのＭ２蛋白のイオンチャンネル作用を阻害し、標的細胞に侵入した後のインフルエンザウイルスの脱殻を抑制することができるものの、Ｍ２蛋白のないＢ型、Ｃ型ウイルスに対する効果はなく、また、強い副作用や耐性菌の発現が問題とされている。
また、オセルタミビルやザナミビルは、インフルエンザウイルスのエンベロープに存在するスパイクタンパク質の１つであるノイラミニダーゼの作用を阻害し、複製されたインフルエンザウイルスが宿主細胞から出芽して他の宿主細胞へ感染を広げることを抑制することができるものの、近年、若年者に対する副作用が問題となっている。

また現在のところでは、ロタウイルスに効果のある一般的な抗ウイルス剤はなく、脱水症状を防止するための水分補給や、体力消耗を防ぐために栄養補給をすることが治療の中心となっている。

ノロウイルスは、カリシウイルス科に属するＲＮＡウイルスであって、培養細胞や実験動物への感染がいまだに成功しておらず、ヒトが唯一の感受性動物であると言われている。
ノロウイルスは、ヒトに対して嘔吐、下痢等の急性胃腸炎症状を引き起こし、症状が消失した後も約３〜７日間ほど患者の便中に排出されるため、２次感染に注意が必要である。
ノロウイルスはヒトの空腸の上皮細胞に感染して繊毛の委縮と扁平化、さらに剥離と脱落を引き起こして下痢を生じると考えられている。
潜伏期間は約２４〜４８時間であると考えられ、嘔気、嘔吐、下痢が主症状であるが、腹痛、頭痛、発熱、悪寒、筋痛、咽頭痛、倦怠感などを伴うこともある。特別な治療を必要とせずに軽快するが、乳幼児や高齢者およびその他、体力の弱っている者での嘔吐、下痢による脱水や窒息には注意をする必要がある。
現在のところ、ノロウイルスに効果のある一般的な抗ウイルス剤はなく、通常、対症療法が行われており、脱水症状を防止するための水分補給や、体力消耗を防ぐために栄養補給をすることが治療の中心となっている。また臨床症状からだけではノロウイルス感染症を特定することは難しいとされている。

＜抗ウイルス剤＞
本発明の抗ウイルス剤の有効成分となる「タケノコ」とは、イネ科タケ亜科に属するタケ類又はササ類の若芽である。
イネ科タケ亜科に属するタケ類又はササ類としては、マダケ属、ナリヒラダケ属、トウチク属、オカメザサ属、ササ属、アズマザサ属、ヤダケ属、メダケ属、カンチク属、ホウライチク属等を挙げることができ、マダケ属に属するモウソウチク、マダケ、またはハチクであることが好ましいが、本発明はこれらに限定されない。
また、タケノコの中には、遺伝的方法、例えば組換え、形質導入、形質転換等により得られるものも含まれる。

竹皮及び基部を除いた、タケノコの可食部には、約９０％の水分が含まれ、その他には数％の食物繊維、炭水化物、蛋白質、少量のビタミンやミネラル、アミノ酸などが含まれている。

本発明の抗ウイルス剤の有効成分となる「タケノコ由来物質」とは、タケノコ又はタケノコの乾燥物や抽出物等が含まれる。
「タケノコの抽出物」とは、タケノコから抽出されるものを言い、タケノコの可食部、表皮を磨り潰したもの、可食部や表皮を搾汁して得られる搾り汁、可食部や表皮を搾汁した後に残る残渣、これら可食部や表皮を磨り潰したものや搾り汁、残渣をそれぞれ濾過した濾液もしくは遠心分離した上清液を含むものである。
また、極性溶媒又は非極性溶媒等で抽出した抽出物も含むものである。極性溶媒を抽出溶媒として用いる場合には、例えば、水、親水性有機溶媒等が挙げられ、これらを単独で又は２種以上組み合わせて、室温又は溶媒の沸点以下の温度で用いると良い。
親水性有機溶媒としては、メタノール、エタノール、プロピルアルコール、イソプロピルアルコール等の炭素数１〜５の低級脂肪族アルコール；アセトン、メチルエチルケトン等の低級脂肪族ケトン；１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等の炭素数２〜５の多価アルコール等が挙げられる。
なお、抽出溶媒や抽出手段は、タケノコ由来の成分を抽出できるものであれば特に限定されることなく、いかなる溶媒や手段を用いても良い。

タケノコから得られる抽出物は、濃縮又は乾燥して用いることが良いが、そのまま用いても良いし、濃縮物又は乾燥物をさらに適当な溶剤に溶解又は懸濁して用いても良い。また、得られた抽出物を、液体クロマトグラフィー等の公知な精製法を用いて、抗ウイルス作用を有する画分を取得し、精製して用いても良い。

ここで、本実施形態の抗ウイルス剤は、タケノコ由来物質としてタケノコの抽出物を用いることが好ましく、より好ましくは、可食部の凍結乾燥物を粉砕した粉末を熱水抽出したタケノコの熱水抽出物を用いると良い。また、可食部や表皮を搾汁（圧搾）して搾り汁として用いても良く、搾り汁を限外濾過してエキスとして用いても良い。また、搾汁した後に残る残渣（搾り汁以外のもの）を用いても良く、その場合には残渣を乾燥させて粉末化したもの（残渣粉末）を用いると良い。また、市販のタケノコの抽出物として搾り汁又はエキスを用いても良く、その場合にはタケノコのエキスを濃縮したものを用いると良い。

＜＜ウイルス増殖阻害作用＞＞
抗ウイルス剤は、タケノコ由来物質が有するウイルス増殖の阻害作用、特にＲＮＡウイルス増殖の阻害作用を通じて、抗ウイルス作用を発揮するものである。
具体的な作用メカニズムは、以下の通りである。
（１）タケノコの抽出物は、ＲＮＡウイルスの増殖過程のうち「吸着時期」において当該ウイルス表面にある結合タンパク質（リガンド）が宿主細胞表面にある受容体（レセプター）に結合する際に、当該ウイルスの宿主細胞への吸着を阻害する作用を果たす。
詳しく言うと、ＲＮＡウイルスがインフルエンザウイルスの場合、タケノコの抽出物が、当該ウイルスの吸着時期に必要となる糖タンパク質（ヘマグルチニン等）の活性を阻害する作用を果たす。
また、ＲＮＡウイルスがロタウイルスの場合、タケノコの抽出物が、当該ウイルスの吸着時期に関与する結合タンパク質（外殻タンパク質ＶＰ４、ＶＰ７）や特異的酵素の活性を阻害する作用を果たす。

（２）また、タケノコの抽出物は、ＲＮＡウイルスの増殖過程のうち「複製時期」において複製されたＲＮＡと、合成されたタンパク質とが集合し、新たなウイルスが組み立てられる際に、当該ウイルスの宿主細胞内での複製を阻害する作用を果たす。
詳しく言うと、ＲＮＡウイルスがインフルエンザウイルスの場合、タケノコの抽出物が、当該ウイルスの複製時期に必要となる特異的酵素の活性を阻害する作用を果たす。
また、ＲＮＡウイルスがロタウイルス又はノロウイルスの場合、タケノコの抽出物が、これらウイルスの複製時期に関与する結合タンパク質や特異的酵素の活性を阻害する作用を果たす。

（３）さらに、タケノコの抽出物は、ＲＮＡウイルスの増殖過程のうち「放出時期」において宿主細胞の細胞膜や核膜をかぶって出芽する際や、宿主細胞が死滅することで、宿主細胞外へ放出される際に、当該ウイルスの宿主細胞内からの放出を阻害する作用を果たす。
詳しく言うと、ＲＮＡウイルスがインフルエンザウイルスの場合、細胞内で増殖した後、感染した宿主細胞から放出される際に生じる、ウイルス由来のノイラミニダーゼによるヘマグルチニンとシアル酸受容体との切断を阻害する作用を果たす。

従って、抗ウイルス剤の有効主成分となるタケノコの抽出物は、従来の抗ウイルス剤にはない作用として、ウイルスの増殖過程のうち少なくとも「吸着時期」、「複製時期」、及び「放出時期」において当該ウイルス増殖を阻害する作用を果たす。
そのため、ウイルスの増殖過程のうち特定の一時期においてのみ抗ウイルス活性を発揮する従来の抗ウイルス剤と比較して、本抗ウイルス剤であれば、ウイルス増殖過程の前半の吸着時期であったとしても、また後半の複製時期や放出時期であったとしても抗ウイルス活性を発揮することが可能となる。
また、本抗ウイルス剤は、例えばＡ型インフルエンザウイルスには効果を発揮するもののＢ型、Ｃ型には効果を有さないアマンタジンのような抗ウイルス剤と比較して、Ａ型、Ｂ型、Ｃ型を問わず、全てのインフルエンザウイルスに対して抗ウイルス活性を発揮する。
従って、従来の抗ウイルス剤として使用認可されているアマンタジンやオセルタミビル、ザナミビルに次ぐ新たな抗ウイルス剤として、臨床応用の可能性がある。

＜＜用途＞＞
本実施形態の抗ウイルス剤は、ウイルス感染症患者、ウイルス感染症に罹患したヒト以外の動物に投与されることで、ウイルス感染症の治療剤として、またウイルス性疾患の治療剤として用いることができる。
また、ウイルス感染症を罹患する前のヒト、ウイルス感染症予備軍のヒト、これらヒト以外の動物を対象としたウイルス感染症の予防剤として、またウイルス性疾患の予防剤として用いることもできる。
また、本実施形態の抗ウイルス剤は、ウイルスを病原体とする感染性胃腸炎の予防剤又は治療剤として用いることもできる。

本実施形態の抗ウイルス剤は、ウイルスのうち、特にインフルエンザウイルス、ロタウイルス及びノロウイルスに感染した患者に対して投与されることが望ましい。
インフルエンザウイルスの場合、Ａ型インフルエンザウイルスに感染した患者に対して投与されることが望ましく、さらに当該ウイルスの亜型がＨ１Ｎ１であることが望ましい。
ロタウイルスの場合、Ａ群ロタウイルスに感染した患者に対して投与されることが望ましく、さらに当該ウイルスがＡ群ロタウイルスＷａ株（Ｇ１Ｐ[８]）であることが望ましいが、これに限定されるものではなく、当該ウイルスがＫＵ株、ＤＳ−１株、Ｓ２株、ＹＯ株、ＨＯＳＯＫＡＷＡ株、ＫＲＨ−２株であっても良い。

本実施形態の抗ウイルス剤は、ウイルスのうち、特にインフルエンザウイルス、ロタウイルス及びノロウイルスに対して上記作用効果を発揮する抗ウイルス剤を含有する医薬組成物、食品組成物等の組成物等として利用することができる。
（医薬組成物）
医薬の分野では、ウイルス増殖を阻害する作用、すなわち、ウイルスの宿主細胞への吸着阻害作用、または、ウイルスの宿主細胞における増殖阻害作用を有効に発揮できる量のタケノコ由来物質と共に、薬学的に許容される担体や添加剤を配合することにより、当該作用を有する医薬組成物が提供される。当該医薬組成物は、医薬品であっても医薬部外品であってもよい。
当該医薬組成物は、内用的に適用されても、また外用的に適用されても良い。従って、当該医薬組成物は、内服剤、静脈注射、皮下注射、皮内注射、筋肉注射及び／又は腹腔内注射等の注射剤、経粘膜適用剤、経皮適用剤等の製剤形態で使用することができる。
当該医薬組成物の剤型としては、適用の形態により、適当に設定できるが、例えば、錠剤、顆粒剤、カプセル剤、粉末剤、散剤などの固形製剤、液剤、懸濁剤などの液状製剤、軟膏剤、またはゲル剤等の半固形剤が挙げられる。

（食品組成物）
食品の分野では、ウイルス増殖を阻害する作用を生体内で発揮できる有効な量のタケノコ由来物質を食品素材として、各種食品に配合することにより、当該作用を有する食品組成物を提供することができる。
すなわち、本発明は、食品の分野において、ウイルス増殖阻害用等と表示された食品組成物を提供することができる。当該食品組成物としては、一般の食品のほか、特定保健用食品、栄養機能食品、機能性表示食品、病院患者用食品、サプリメント等が挙げられる。また、食品添加物として用いることもできる。
当該食品組成物としては、例えば、調味料、畜肉加工品、農産加工品、飲料（清涼飲料、アルコール飲料、炭酸飲料、乳飲料、果汁飲料、茶、コーヒー、栄養ドリンク等）、粉末飲料（粉末ジュース、粉末スープ等）、濃縮飲料、菓子類（キャンディ（のど飴）、クッキー、ビスケット、ガム、グミ、チョコレート等）、パン、シリアル等が挙げられる。また、特定保健用食品、栄養機能食品、機能性表示食品等の場合、カプセル、トローチ、シロップ、顆粒、粉末等の形状であっても良い。

ここで特定保健用食品とは、生理学的機能等に影響を与える保健機能成分を含む食品であって、消費者庁長官の許可を得て特定の保健の用途に適する旨を表示可能なものである。本発明においては、特定の保健用途としてウイルス感染症の予防、治療、ウイルス増殖の阻害、感染性胃腸炎の予防、治療などと表示して販売される食品となる。
また栄養機能食品とは、栄養成分（ビタミン、ミネラル）の補給のために利用される食品であって、栄養成分の機能を表示するものである。栄養機能食品として販売するためには、一日当たりの摂取目安量に含まれる栄養成分量が定められた上限値、下限値の範囲内にある必要があり、栄養機能表示だけでなく注意喚起表示等もする必要がある。
また機能性表示食品とは、事業者の責任において、科学的根拠に基づいた機能性を表示した食品である。販売前に安全性及び機能性の根拠に関する情報などが消費者庁長官へ届け出られたものである。
上記において本発明は、タケノコ由来物質を有効成分として含み、ウイルス感染症患者、ウイルス感染症を罹患したヒト以外の動物を対象とした抗ウイルス剤用特定保健用食品や、抗ウイルス剤栄養機能食品、抗ウイルス剤機能性表示食品として用いることができる。
また本発明は、タケノコ由来物質を有効成分として含み、生体、例えばウイルス感染症を罹患する前のヒト、ウイルス感染症予備軍のヒト、これらヒト以外の動物を対象とした抗ウイルス剤用特定保健用食品や、抗ウイルス剤用栄養機能食品、抗ウイルス剤用機能性表示食品として用いることができる。

＜＜用法及び用量＞＞
本実施形態の抗ウイルス剤の用法としては、例えばインフルエンザウイルスの場合、ヒトの上気道（鼻腔や咽頭）で感染し易いため、例えば、スプレーによって鼻腔内又は口腔内へ直接噴霧することや、吸入器によって鼻腔内又は口腔内へ導入すると良い。また、うがい薬によって口腔内へ導入すると良い。そのほか、点鼻等で経鼻投与しても良いし、のど飴やトローチ、ガム等で経口投与しても良いし、マスクや消毒お手拭きに利用しても良い。
また例えばロタウイルスやノロウイルスの場合、ヒトの腸内で感染し易いため、腸内で抗ウイルス剤が溶解するように（胃では溶解しないように）処方すると良い。例えば、カプセル剤、錠剤、顆粒又はシロップ等によって経口投与すると良い。

＜実施例１＞
タケノコの抽出物を、以下の手順により調製した。
タケノコ（兵庫県産、モウソウチク）の皮を除き、可食部を凍結乾燥した後、粉末化した。凍結乾燥粉末２ｇを１００ｍｌの熱水で９０分抽出した後、２５℃、３５００ｒｐｍで１０分間遠心分離をした。得られた抽出液を５μｍの濾紙で濾過した後、０．４５μｍ滅菌フィルターにて濾過し、−３０度で保管した。

＜比較例１＞
市販のタケ抽出物として、ネオバンブス−２０００(モウソウチク乾留抽出物７０ｗｔ％／エタノール３０ｗｔ％、白井松新薬株式会社製、ネオバンブスは登録商標)を比較試料として用いた。

＜試験１ ロタウイルスの増殖阻害試験＞
実施例１の抗ウイルス剤を用いて、ロタウイルス増殖を阻害する作用を確認する試験を行った。宿主細胞としてＭＡ−１０４細胞（アカゲザル腎細胞）を使用し、またウイルスとしてロタウイルスＷａ株（Ｇ１Ｐ[８]）を使用し、また培地として１０％ＦＢＳ（Ｆｅｔａｌ Ｂｏｖｉｎｅ Ｓｅｒｕｍ）含有のＤＭＥＭ（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ‘ｓ Ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｅａｇｌｅ Ｍｅｄｉｕｍ）培地を使用した。

まず、単層培養したＭＡ−１０４細胞にロタウイルスを０．１ｍｏi（感染多重度）で感染させて室温で１時間放置した（吸着させた）。
その後、培地を除去し、所定濃度に希釈したタケノコの抽出物を含む公知なＤＭＥＭ培地を、ウイルス感染させたＭＡ−１０４細胞に対して添加し、ＣＯ_２インキュベータにて４８時間培養した。
その後、上清を回収し、フォーカス減少法を用いて上清中のウイルス力価（ＦＦＵ／ｍｌ）を測定し、ウイルス増殖阻害率（％）を算出した。また、ウイルス増殖阻害率５０％濃度（ＩＣ５０）を算出した。

（試験１の結果）
上記試験結果を解析して、タケノコの抽出物による各濃度（０．０６ｍｇ／ｍｌ、０．３ｍｇ／ｍｌ、０．６ｍｇ／ｍｌ）のウイルス増殖阻害試験の結果を図１に示す（＊：ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００１）。
各濃度のウイルス増殖阻害率は、順に９４％、９８％、９９％であって、ＩＣ５０は、０．４７ｍｇ／ｍｌであった。
ウイルス増殖阻害率は、タケノコの抽出物の濃度が高くなるにつれてさらに増加した。
なお、「タケノコの抽出物の濃度１ｍｇ／ｍｌ」とは、液体培地１ｍｌに対して１ｍｇのタケノコの抽出物が含まれる濃度であることを示す。
なお、これら試験は複数回行い、同様の再現性が得られた。

（試験１の考察）
試験１の結果から、タケノコの抽出物を添加したものは、全ての濃度においてロタウイルス増殖を阻害する作用が確認された。また、濃度依存的にウイルス増殖を阻害する作用が高くなった。
このことから、タケノコの抽出物に含まれる成分が、ロタウイルス増殖を阻害する作用をもたらしていることが分かった。
また、ロタウイルス増殖を阻害する作用におけるタケノコの抽出物の好適な濃度は０．３ｍｇ／ｍｌ以上であって、より好適な濃度（ＩＣ５０）は０．４７ｍｇ／ｍｌ以上であることが分かった。

＜試験２ ロタウイルスの増殖過程における感染阻害試験＞
実施例１の抗ウイルス剤を用いて、ロタウイルスが増殖するために必要な過程のうち、どの増殖過程を阻害しているかを確認する試験を行った。宿主細胞としてＭＡ−１０４細胞（アカゲザル腎細胞）を使用し、またウイルスとしてロタウイルスＷａ株（Ｇ１Ｐ[８]）を使用し、また培地として１０％ＦＢＳ含有のＤＭＥＭ培地を使用した。
まず、試験１と同様に単層培養したＭＡ−１０４細胞にロタウイルスを０．０１ｍｏi（感染多重度）で感染させて（添加して）室温で１時間放置した（吸着させた）。
そして、３ｍｇ／ｍｌのタケノコの抽出物を添加したＭＥＭ培地を、ウイルス感染させたＭＡ−１０４細胞に対して所定のタイミングで添加した。
ウイルス吸着から１６時間経過後に、−８０℃から３７℃の凍結融解を３回繰り返し、細胞内のウイルス力価をフォーカス法を用いて測定し、ウイルス増殖阻害率を算出した。

タケノコの抽出物を添加しておくタイミングとして、（１）吸着時（ウイルス増殖過程のうち、「吸着時期」に相当するタイミング、ウイルス感染から１時間後まで）、（２）ウイルス培養時（培養０時間から１６時間）、（３）吸着時及び培養時の双方、（４）培養０時間から４時間（ウイルス増殖過程のうち、「侵入・脱殻時期」に相当するタイミング、ウイルス吸着から４時間後まで）、（５）培養４時間から８時間（ウイルス増殖過程のうち、「複製・放出時期」に相当するタイミング、ウイルス吸着の４時間後から８時間後まで）、（６）培養８時間から１２時間、（７）培養１２時間から１６時間に設定した。
詳しく言うと、（１）ではウイルス感染と同時に当該抽出物を添加し、ウイルス感染から１時間後に当該抽出物を添加していない培地と交換した。（２）ではウイルス培養開始時に当該抽出物を添加し、１６時間後まで当該抽出物の存在下で培養を行った。（３）ではウイルス感染と同時に当該抽出物を添加し、ウイルス培養開始時にも当該抽出物を添加し、１６時間後まで当該抽出物の存在下で培養を行った。（４）ではウイルス吸着と同時に当該抽出物を添加し、ウイルス吸着から４時間後に当該抽出物を添加していない培地と交換した。（５）ではウイルス吸着から４時間後に当該抽出物を添加し、ウイルス吸着から８時間後に当該抽出物を添加していない培地と交換した。（６）ではウイルス吸着から８時間後に当該抽出物を添加し、ウイルス吸着から１２時間後に当該抽出物を添加していない培地と交換した。（７）ではウイルス吸着から１２時間後に当該抽出物を添加し、ウイルス吸着から１６時間後に当該抽出物を添加していない培地と交換した。

（試験２の結果）
上記試験結果を解析して、タケノコの抽出物によるウイルスの吸着時、培養時、吸着・培養時における増殖阻害率を比較したグラフを図２に示す（＊：ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００１）。
ウイルスの吸着時、培養時、吸着時及び培養時の双方における増殖阻害率は、順に８５％、１００％、１００％であった。
また、培養時の異なる期間において、抽出物を添加しておいた場合のウイルス増殖阻害試験の結果を図２に示す。
抽出物の添加期間が培養０時間から４時間、培養４時間から８時間、培養８時間から１２時間、培養１２時間から１６時間における増殖阻害率は、順に６９％、７２％、７８％、８５％であった。

（試験２の考察）
試験２の結果から、タケノコの抽出物を添加することで、ウイルスの細胞への吸着時、ウイルスの細胞内での増殖時の双方でウイルスの増殖を阻害していることが判明した。また、「細胞内での増殖時」のほうが「細胞への吸着時」よりもウイルス増殖を阻害する作用が高くなった。ロタウイルスの感染過程におけるすべての過程でウイルスの増殖を阻害していることが示唆されていることから、タケノコの抽出物はロタウイルスの感染時から感染後までの長期間に渡って増殖を阻害することになり、ロタウイルスの治療剤及び予防剤として、非常に有用であると言える。

＜試験３ タケノコの抽出物のＭＴＴアッセイ＞
実施例１の抗ウイルス剤を用いて、タケノコの抽出物の細胞毒性の有無を検討する試験を行った。マイクロプレートに単層培養したＭＡ−１０４細胞にタケノコの抽出物と終濃度１μｇ／ｍｌアセチルトリプシン含有無血清ＭＥＭの混合液を添加し、３７℃で３日間培養した。ＭＴＴ標識試薬を加えて３７℃で４時間更に培養し、可溶化溶液を加えて３７℃で一晩培養した。マイクロプレートリーダーを用いて、リファレンス波長を６９０ｎｍとし、５５０ｎｍで吸光度を測定した。

（試験３の結果）
上記試験結果を解析して、タケノコの抽出物による各濃度の吸光度をプロットしたグラフを図３に示す。
コントロールと比較して、吸光度の減少は観測されなかった。

（試験３の考察）
試験３の結果から、０〜２．４ｍｇ／ｍｌの範囲でタケノコの抽出物に細胞毒性はないことが示唆された。

＜試験４ 様々なロタウイルス株の増殖阻害試験＞
実施例１の抗ウイルス剤を用いて、ロタウイルスＷａ株の代わりに、ＫＵ株、ＤＳ−１株、Ｓ２株、ＹＯ株、ＨＯＳＯＫＡＷＡ株、ＫＲＨ−２株を用いて試験１と同様の試験を行った。

（試験４の結果）
上記試験結果を解析して、タケノコの抽出物による各濃度（０．０６ｍｇ／ｍｌ、０．３ｍｇ／ｍｌ、０．６ｍｇ／ｍｌ、１．２ｍｇ／ｍｌ）の各株に対するウイルス増殖阻害試験の結果を図４〜９に示す。
いずれのロタウイルス株に対しても、増殖阻害活性を示した。

（試験４の考察）
試験４の結果から、タケノコの抽出物を添加したものは、ロタウイルスＷａ株以外のＫＵ株などの株に対しても、全ての濃度においてロタウイルス増殖を阻害する作用が確認された。また、濃度依存的にウイルス増殖を阻害する作用が高くなった。
このことから、タケノコの抽出物に含まれる成分が、ロタウイルスＷａ株以外の株に対しても増殖を阻害する作用をもたらしていることが分かった。多くの血清型及び遺伝子型のロタウイルスに効果を示すことから、タケノコの抽出物は、非常に有用な抗ウイルス剤である。
公知のロタウイルスワクチンである、Ｒｏｔａｒｉｘ（登録商標）やＲｏｔａｔｅｑ（登録商標）が効果を示す血清型及び遺伝子型は限定的であり、すべてのロタウイルス株に対して効果を発揮するものではない。Ｒｏｔａｒｉｘ（登録商標）は、ヒトロタウイルスＧ１Ｐ［８］血清型を弱毒化した単価のワクチンであり、Ｒｏｔａｔｅｑ（登録商標）は、ウシロタウイルスのＶ７に、ヒトロタウイルスのＧ１、Ｇ２、Ｇ３、Ｇ４を組み入れたリアソータント（遺伝子組み換え）のウイルス４種と、ウシロタウイルスのＶＰ４にＰ［８］遺伝子を組み込んだリアソータントのウイルス１種の計５種のウイルスを混ぜた五価のワクチンである。
ロタウイルスのＫＲＨ−２株は、ワクチンを接種した幼児から単離されたものであり、本発明の抗ウイルス剤は、ワクチンが効果を示さないロタウイルスに対しても予防剤又は治療剤として用いることができるという有利な効果を備えるものである。

＜比較試験１ タケの抽出物の増殖阻害試験＞
比較例１のタケの抽出物試料を用いて、試験１と同様にロタウイルスの増殖阻害試験を行った。

（比較試験１の結果）
上記試験結果を解析して、タケの抽出物による各濃度（０．１８ｍｇ／ｍｌ、０．２４ｍｇ／ｍｌ、０．３ｍｇ／ｍｌ、０．３６ｍｇ／ｍｌ、０．４２ｍｇ／ｍｌ、０．４８ｍｇ／ｍｌ、０．５４ｍｇ／ｍｌ、０．６ｍｇ／ｍｌ）のウイルス増殖阻害試験の結果を図１０に示す。
各濃度のウイルス増殖阻害率は、順に２２％、−１％、−２２％、３８％、７３％、８２％、１００％、１００％であった。
ｐ値が０．０５より小さいときに有意差があるとした場合、０．１８ｍｇ／ｍｌ、０．２４ｍｇ／ｍｌ、０．３ｍｇ／ｍｌ、０．３６ｍｇ／ｍｌでは有意差がなく、０．４２ｍｇ／ｍｌ、０．４８ｍｇ／ｍｌ、０．５４ｍｇ／ｍｌ、０．６ｍｇ／ｍｌで有意差があった。
ウイルス増殖阻害率は、タケの抽出物の濃度が高くなるにつれてさらに増加した。

（比較試験１の考察）
比較試験１の結果から、タケの抽出物を添加したものは、０．５４ｍｇ／ｍｌ以上で強い抗ウイルス活性が確認され、０．４２ｍｇ／ｍｌ以上の濃度においてロタウイルス増殖を阻害する作用が確認された。また、濃度依存的にウイルス増殖を阻害する作用が高くなった。
このことから、タケの抽出物に含まれる成分が、ロタウイルス増殖を阻害する作用をもたらしていることが分かった。

＜比較試験２ タケの抽出物のＭＴＴアッセイ＞
比較例１のタケの抽出物試料を用いて、試験３と同様にＭＴＴアッセイを行った。

（比較試験２の結果）
上記試験結果を解析して、タケの抽出物による各濃度の吸光度をプロットしたグラフを図１１に示す。
０．１８ｍｇ／ｍｌ、０．３ｍｇ／ｍｌでは、コントロールと比較して、吸光度の減少は観測されなかったが、０．６ｍｇ／ｍｌでは吸光度が減少しており、細胞障害性が確認された。

（比較試験２の考察）
ウイルスが増殖するためには、生きた細胞が必要不可欠であるが、比較試験１で強い抗ウイルス作用を示した０．６ｍｇ／ｍｌでは細胞の死滅が確認されていることから、細胞の死滅によってウイルス増殖が阻害された可能性もある。しかし、図１１より０．３ｍｇ／ｍｌでは細胞毒性が弱くなっていることから、０．３ｍｇ／ｍｌ〜０．６ｍｇ／ｍｌの間に細胞毒性が軽度かつ抗ウイルス活性を発揮する濃度が存在している可能性があると考えられる。当該濃度は、試験１でタケノコの抽出物で抗ウイルス活性が観測された濃度よりも高く、タケノコの抽出物の方がタケの抽出物より低い濃度で抗ウイルス活性を示しつつ、細胞毒性も低いことが示唆された。

＜試験５ インフルエンザウイルスの増殖阻害試験＞
実施例１の抗ウイルス剤を用いて、インフルエンザウイルス増殖を阻害する作用を確認する試験を行った。宿主細胞としてＭＤＣＫ（Ｍａｄｉｎ−Ｄａｒｂｙ ｃａｎｉｎｅ ｋｉｄｎｅｙ）細胞を使用し、またウイルスとしてインフルエンザウイルスＡ型／ＰＲ／８／３４（Ｈ１Ｎ１）株を使用し、また培地として１０％ＦＢＳ含有のＤＭＥＭ培地を使用した。

まず、ＭＤＣＫ細胞を１．０×１０^４ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌになるように２４ｗｅｌｌプレートにそれぞれ播種し、３７℃、５％ＣＯ_２の条件下で２４時間単層培養した。
そして、培養したＭＤＣＫ細胞にインフルエンザウイルスを０．００１ｍｏi（感染多重度）で感染させて３７℃で１時間放置した（吸着させた）。
その後、液体培地に対して、実施例１のタケノコの抽出物を所定濃度含むように添加し、ＣＯ_２インキュベータにて２４時間培養した。
その後、感染細胞から放出されたウイルスを含む上清を回収し、フォーカス法を用いて細胞のウイルス力価（ＦＦＵ／ｍｌ）を測定し、ウイルス増殖阻害率（％）を算出した。

（試験５の結果）
上記試験結果を解析して、タケノコの抽出物による各濃度（０ｍｇ／ｍｌ、０．００４ｍｇ／ｍｌ、０．００８ｍｇ／ｍｌ、０．０１６ｍｇ／ｍｌ、０．０３２５ｍｇ／ｍｌ、０．０６５ｍｇ／ｍｌ）のウイルス増殖阻害試験の結果を図１２に示す。
各濃度のウイルス増殖阻害率は、順に０％、２３％、７０％、７１％、９１％、９８％であって、ＩＣ５０は、０．００６１ｍｇ／ｍｌであった。
ウイルス増殖阻害率は、タケノコの抽出物の濃度が高くなるにつれてさらに増加した。
なお、これら試験は複数回行い、同様の再現性が得られた。また、ＭＤＣＫ細胞を用いたＭＴＴアッセイの結果、吸光度の減少はみられず、タケノコの抽出物に細胞毒性はないことが示唆された。

（試験５の考察）
試験５の結果から、タケノコの抽出物を添加したものは、全ての濃度においてインフルエンザウイルス増殖を阻害する作用が確認された。また、濃度依存的にウイルス増殖を阻害する作用が高くなった。

さらに、試験５の結果から、例えばタケノコの抽出物を含有する抗ウイルス剤が、ヒトのウイルス感染組織（例えば上気道）に対してスプレーや吸入器等を用いて直接到達するように投与されることで、インフルエンザウイルス増殖を阻害する作用を発揮することが分かった。

Claims (12)

1. タケノコ由来物質を有効成分として含有し、
   ウイルス感染症の予防又は治療に用いられることを特徴とする抗ウイルス剤。
2. 前記ウイルスは、ＲＮＡウイルスであることを特徴とする請求項１に記載の抗ウイルス剤。
3. 前記ＲＮＡウイルスは、インフルエンザウイルス、ロタウイルス及びノロウイルスからなる群より選ばれるいずれかのウイルスであることを特徴とする請求項２に記載の抗ウイルス剤。
4. 前記ロタウイルスは、ロタウイルスＫＲＨ−２株であることを特徴とする請求項３に記載の抗ウイルス剤。
5. 前記タケノコ由来物質が、タケノコの可食部の抽出物であることを特徴とする請求項２乃至４のいずれか１項に記載の抗ウイルス剤。
6. 前記タケノコの可食部の抽出物が、タケノコの可食部の熱水抽出物であることを特徴とする請求項５に記載の抗ウイルス剤。
7. 前記タケノコ由来物質であって、前記ＲＮＡウイルスの細胞への吸着を阻害するためのウイルス吸着阻害剤として用いられることを特徴とする請求項２乃至６のいずれか１項に記載の抗ウイルス剤。
8. 前記タケノコ由来物質であって、前記ＲＮＡウイルスの細胞内での複製を阻害するためのウイルス複製阻害剤として用いられることを特徴とする請求項２乃至６のいずれか１項に記載の抗ウイルス剤。
9. 前記タケノコ由来物質であって、前記ＲＮＡウイルスの細胞からの放出を阻害するためのウイルス放出阻害剤として用いられることを特徴とする請求項２乃至６のいずれか１項に記載の抗ウイルス剤。
10. 前記タケノコ由来物質であって、前記ＲＮＡウイルスの細胞内での増殖を阻害するためのウイルス増殖阻害剤として用いられることを特徴とする請求項２乃至６のいずれか１項に記載の抗ウイルス剤。
11. タケノコ由来物質を有効成分として含有し、
    ウイルスを病原体とする感染性胃腸炎の予防又は治療に用いられることを特徴とする抗ウイルス剤。
12. タケノコ由来物質を有効成分として含有し、
    ウイルス感染症の予防又は改善に用いられることを特徴とする抗ウイルス用食品組成物。

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