JP2017509704A - 線維症を処置するためのセニクリビロック - Google Patents

線維症を処置するためのセニクリビロック Download PDF

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Abstract

本開示は、セニクリビロックを含有する医薬組成物、その調製方法、ならびに炎症及び結合組織疾患及び障害、特に線維症の処置におけるその使用に関する。例えば、線維症または線維性疾患若しくは状態若しくは状態の処置を必要とする対象における線維症または線維性疾患若しくは状態若しくは状態の処置方法であって、前記対象に治療有効量のセニクリビロックまたはその塩若しくは溶媒和化合物；及び追加の活性剤を共投与することを含む、前記方法である。

Description

セニクリビロック（ＣＶＣとしても知られる）は、（Ｓ，Ｅ）−８−（４−（２−ブトキシエトキシ）フェニル）−１−（２−メチルプロピル）−Ｎ−（４−（（（１−プロピル−１Ｈ−イミダゾール−５−イル）メチル）スルフィニル）フェニル）−１，２，３，４−テトラヒドロベンゾ［ｂ］アゾシン−５−カルボキサミドの一般名である。セニクリビロックメシレートの化学構造を図１に表す。セニクリビロックは、Ｃ−Ｃケモカインレセプター２型（ＣＣＲ２）及びＣ−Ｃケモカインレセプター５型（ＣＣＲ５）受容体（２４）に結合し、その活性を阻害する。これらの受容体は、細胞内へのヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）などのウイルスの侵入において役割を果たすのみでなく、傷害の部位への免疫細胞の動員に関しても重要である。この受容体の活性の阻害は、抗炎症性効果を有する可能性がある。より最近では、線維症の発症において炎症が担う役割が調査されている［３０］。それによりＣ−Ｃケモカインレセプター２型（ＣＣＲ２）及びＣＣＲ５が、肝線維症の促進において役割を担う可能性が示されている［３、４、５、３１ ３２］。
一実施形態では、本発明は、それを必要とする対象において線維症または線維性疾患若しくは状態を処置する方法であって、対象に治療有効量のセニクリビロックまたはその塩若しくは溶媒和化合物を投与することを含む、前記方法を提供する。別の実施形態では、線維症または線維性疾患若しくは状態は、肝臓線維症または腎線維症である。なおもさらなる実施形態では、肝臓線維症は、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）を伴う。なおもさらなる実施形態では、肝臓線維症は、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）を伴う。なおもさらなる実施形態では、肝臓線維症は、肝硬変の出現を伴う。別のさらなる実施形態では、肝臓線維症は、非肝硬変性肝線維症を含む。さらなる実施形態では、対象は、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）に感染している。さらなる実施形態では、セニクリビロックまたはその塩若しくは溶媒和化合物は、セニクリビロックまたはその塩若しくは溶媒和化合物及びフマル酸を含む医薬組成物として製剤化される。さらなる実施形態では、対象は、アルコール性肝臓疾患、ＨＩＶ及びＨＣＶ重複感染、ＨＣＶ感染、２型糖尿病（Ｔ２ＤＭ）、代謝症候群（ＭＳ）、及びそれらの組み合わせからなる群より選択される疾患または状態を有する。
一実施形態では、本発明は、それを必要とする対象においてＮＡＳＨを処置する方法であって、対象に治療有効量のセニクリビロック、またはその塩若しくは溶媒和化合物を投与することを含み；ＮＡＳＨまたはＮＡＳＨを伴う肝臓（ｌｉｖｉｅｒ）線維症が、２型糖尿病（Ｔ２ＤＭ）を伴う、前記方法を提供する。
一実施形態では、本発明は、それを必要とする対象においてＮＡＳＨを処置する方法であって、対象に治療有効量のセニクリビロック、またはその塩若しくは溶媒和化合物を投与することを含み；ＮＡＳＨまたはＮＡＳＨを伴う肝臓（ｌｉｖｉｅｒ）線維症が、代謝症候群（ＭＳ）を伴う、前記方法を提供する。
一実施形態では、本発明は、それを必要とする対象においてＮＡＳＨを処置する方法であって、対象に治療有効量のセニクリビロック、またはその塩若しくは溶媒和化合物を投与することを含み；肝臓線維症がＨＩＶ及びＨＣＶ重複感染を伴う、前記方法を提供する。
一実施形態では、本発明は、それを必要とする対象においてＮＡＳＨを処置する方法であって、対象に治療有効量のセニクリビロック、またはその塩若しくは溶媒和化合物を投与することを含み；肝臓線維症がＨＣＶ感染を伴う、前記方法を提供する。
一実施形態では、本発明は、処置の方法であって、セニクリビロックまたはその塩若しくは溶媒和化合物が経口組成物として製剤化される、前記方法を提供する。
一実施形態では、本発明は、処置の方法であって、セニクリビロックまたはその塩若しくは溶媒和化合物が１日１回または１日２回投与される、前記方法を提供する。
一実施形態では、本発明は、処置の方法であって、セニクリビロックまたはその塩若しくは溶媒和化合物が１つまたは複数の追加の活性剤と共投与される、前記方法を提供する。さらなる実施形態では、１つまたは複数の追加の活性剤は、侵入阻害剤、ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤、ヌクレオチド逆転写酵素阻害剤、非ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤、プロテアーゼ阻害剤、インテグラーゼ鎖転移阻害剤、成熟阻害剤、及びそれらの組み合わせからなる群より選択される１つまたは複数の抗レトロウイルス剤である。さらなる実施形態では、１つまたは複数の追加の抗レトロウイルス剤は、ラミブジン、エファビレンツ、ラルテグラビル、ビベコン（ｖｉｖｅｃｏｎ）、ベビリマット、アルファインターフェロン、ジドブジン、アバカビル、ロピナビル、リトナビル、テノホビル、テノホビルジソプロキシル、テノホビルのプロドラッグ、エムトリシタビン、エルビテグラビル、コビシスタット、ダルナビル、アタザナビル、リルピビリン、ドルテグラビル及びそれらの組み合わせからなる群より選択される。
さらなる実施形態では、１つまたは複数の追加の活性剤は、１つまたは複数の免疫系抑制剤である。さらなる実施形態では、１つまたは複数の追加の活性剤は、シクロスポリン、タクロリムス、プレドニゾロン、ヒドロコルチゾン、シロリムス、エベロリムス、アザチオプリン、ミコフェノール酸、メトトレキサート、バシリキシマブ、ダクリズマブ、リツキシマブ、抗胸腺細胞グロブリン、抗リンパ球グロブリン、及びそれらの組み合わせからなる群より選択される。
さらなる実施形態では、１つまたは複数の追加の活性剤は、Ｎ−アセチル−Ｌ−システイン（ＮＡＣ）ならびにアンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、ＡＴ ＩＩ拮抗薬、オベチコール酸（ＯＣＡ）、ＧＦＴ５０５、シムツズマブ（ｓｉｍｔｕｚｕｍａｂ）などの薬剤、またはそれらの組み合わせを含むが、これらに限定されない１つまたは複数の抗線維化剤である。
一実施形態では、本発明は、処置の方法であって、線維症または線維性疾患若しくは状態について処置される対象における１つまたは複数の生体分子のレベルを検出すること、及び１つまたは複数の生体分子のレベルにおける増減に基づいて処置レジメンを決定することを含み、生体分子が、リポ多糖類（ＬＰＳ）、ＬＰｓ結合タンパク質（ＬＢＰ）、１６Ｓ ｒＤＮＡ、ｓＣＤ１４、腸型脂肪酸結合蛋白（Ｉ−ＦＡＢＰ）、ゾヌリン−１、コラーゲン１ａ１及び３ａ１、ＴＧＦ−β、フィブロネクチン−１、及びそれらの組み合わせからなる群より選択される、前記方法を提供する。
一実施形態では、本発明は、処置の方法であって、線維症または線維性疾患若しくは状態について処置される対象における１つまたは複数の生体分子のレベルを検出することを含み、所定の標準レベルと比較した１つまたは複数の生体分子のレベルにおける増減が線維症または線維性疾患若しくは状態の処置有効性を予測し、生体分子が、リポ多糖類（ＬＰＳ）、ＬＰｓ結合タンパク質（ＬＢＰ）、１６Ｓ ｒＤＮＡ、ｓＣＤ１４、腸型脂肪酸結合蛋白（Ｉ−ＦＡＢＰ）、ゾヌリン−１、コラーゲン１ａ１及び３ａ１、ＴＧＦ−β、フィブロネクチン−１、及びそれらの組み合わせからなる群より選択される、前記方法を提供する。
さらなる実施形態では、１つまたは複数の生体分子は、線維症または線維性疾患若しくは状態について処置される対象からの生体試料において測定される。なおもさらなる実施形態では、生体試料は、血液、皮膚、毛包、唾液、口腔粘膜、膣粘膜、汗、涙、上皮組織、尿、精液（ｓｅｍｅｎ）、精液（ｓｅｍｉｎａｌ ｆｌｕｉｄ）、精漿、前立腺液、尿道球腺液（カウパー液）、排泄物、生検、腹水、脳脊髄液、リンパ、脳、及び組織抽出試料または生検試料から選択される。
セニクリビロックメシレートの化学式である。 経口液剤として調合されたセニクリビロックメシレートの、ビーグル犬における、絶対的バイオアベイラビリティと、湿式造粒法によって調製され、様々な酸可溶化剤の賦形剤と混合されたセニクリビロックメシレートの絶対的バイオアベイラビリティを比較するグラフである。 乾燥剤と包装されたときに４０℃及び７５％相対湿度で加速安定性試験に供された異なるセニクリビロック製剤の総不純物及び分解物含有率のグラフである。 異なるセニクリビロック製剤の動的蒸気吸着等温線である。 ビーグル犬での３種の前処置状態における異なる製剤からのセニクリビロックの吸収を示す。 併用錠剤におけるセニクリビロック及びラミブジンのビーグル犬絶対的バイオアベイラビリティを示す。 図７（Ａ〜Ｂ）は、２４週での試験２０２における参加者のＰＢＭＣ中の細胞内ＨＩＶ ＤＮＡレベルを示す。処置群ごとに分けられたベースラインと２４週の間の細胞内ＨＩＶ ＤＮＡレベルにおける倍率変化を示す散布図。線及びエラーバーは、それぞれ平均及び標準誤差の測定値を表す。倍率変化は、各患者のベースライン試料を標準物質として、ＨＩＶ／ＧＡＰＤＨマルチプレックスｑＰＣＲ反応においてΔΔＣＴを使用して算出した。Ａ）完全長ＨＩＶ ＤＮＡ（後期逆転写物）、Ｂ）ストロングストップＨＩＶ ＤＮＡ（初期逆転写物）。 図８（Ａ〜Ｂ）は、培養液中でＲ５好性ウイルスＲＮＡ及びｐ２４に与えるＣＶＣ及びＭＶＣの効果を示す。Ａ）感染４時間後の、対照またはＣＶＣ若しくはＭＶＣで処置された細胞の培養液中のウイルス負荷レベル。エラーバーは、標準偏差を表す。２つの独立した実験を表す。Ｂ）感染４時間後の、対照またはＣＶＣ若しくはＭＶＣで処置された細胞の培養液中の平均ｐ２４抗原レベル。エラーバーは、標準偏差を表す。２つの独立した実験を表す。 Ｒ５好性細胞内ＨＩＶ ＤＮＡレベルに与えるＣＶＣ及びＭＶＣの効果を示す。４時間後の、無薬物対照と比較したＣＶＣまたはＭＶＣ処置細胞の細胞内ストロングストップＤＮＡレベルの平均倍率変化。エラーバーは、標準偏差を表す。倍率変化は、４時間での無薬物対照を標準物質として、ＨＩＶ／ＧＡＰＤＨマルチプレックスｑＰＣＲ反応においてΔΔＣＴを使用して算出した。２つの独立した実験を表す。 ＣＣＲ５へのＣＶＣの多重結合様式を示す。ＣＣＲ５の座標は、結合ポケットにおいてマラビロックに結合されたＣＣＲ５結晶構造（ＰＤＢ ＩＤ：４ＭＢＳ）から生成された。ＣＶＣ結合部位を、ＣＶＣのドッキング後に検査した。ＣＶＣのドッキングポーズは、色付きの細線として示す。７回膜貫通型（７ＴＭ）aへリックスは、らせん体により表され、アミノ酸配列の順番に従って番号付け（１〜７）される。（Ａ）３つの潜在的な結合部位を円で囲った（部位１（白色）、部位２（黒色）及び部位３（淡ピンク色））受容体の細胞外側からの上面図。（Ｂ）ＣＣＲ５膜貫通キャビティにおける側面図。細胞外ループ２（ＥＣＬ２）を標識した。二次構造をカートゥーン構造として表す。全画像は、ＰｙＭＯＬソフトウェアを使用して処理した。 ＣＣＲ５へのＣＶＣの多重結合様式を示す。ＣＣＲ５の座標は、結合ポケットにおいてマラビロックに結合されたＣＣＲ５結晶構造（ＰＤＢ ＩＤ：４ＭＢＳ）から生成された。ＣＶＣ結合部位を、ＣＶＣのドッキング後に検査した。ＣＶＣのドッキングポーズは、色付きの細線として示す。７回膜貫通型（７ＴＭ）aへリックスは、らせん体により表され、アミノ酸配列の順番に従って番号付け（１〜７）される。（Ａ）３つの潜在的な結合部位を円で囲った（部位１（白色）、部位２（黒色）及び部位３（淡ピンク色））受容体の細胞外側からの上面図。（Ｂ）ＣＣＲ５膜貫通キャビティにおける側面図。細胞外ループ２（ＥＣＬ２）を標識した。二次構造をカートゥーン構造として表す。全画像は、ＰｙＭＯＬソフトウェアを使用して処理した。 ＣＣＲ５／マラビロック及びＣＣＲ５／セニクリビロック間のリガンド結合ポケットの比較を示す。リガンド結合ポケットにおける、ＣＶＣのドッキングポーズ（左）、色付き細線、及びＭＶＣのドッキングポーズ、黄色棒、（右）を表すＣＣＲ５の上面図。ＣＣＲ５は、分子表面の表現において示す。ｇｐ１２０結合に関与するキー残基：Ｔｙｒ３７、Ｔｒｐ８６、Ｔｒｐ９４、Ｌｅｕ１０４、Ｔｙｒ１０８、Ｐｈｅ１０９、Ｐｈｅ１１２、Ｔｈｒ１７７、Ｉｌｅ１９８、Ｔｒｐ２４８、Ｔｙｒ２５１、Ｌｅｕ２５５及びＧｌｕ２８３は、ポケット内深く、赤く色づけている。 腎線維症のマウスＵＵＯモデルにおけるＣＶＣの評価の試験模式図を示す。ビヒクル対照及びＣＶＣ ＢＩＤ投与；抗ＴＧＦ−β１抗体、化合物１Ｄ１１（陽性対照）ＱＤ投与、ＢＩＤ、１日２回；ＣＶＣ、セニクリビロック；ｉｐ、腹腔内；ＰＢＳ、リン酸緩衝生理食塩水；ＱＤ、１日１回；ＴＧＦ、トランスフォーミング増殖因子；ＵＵＯ、片側尿管結紮。 腎線維症のマウスＵＵＯモデルにおける各処置群の体重変化（５日目）を示す。 腎線維症のマウスＵＵＯモデルにおける各処置群のコラーゲン体積分率（ＣＶＦ；面積率（％））スコアを示す。データは、群における他のいずれの動物よりも２標準偏差より多く高いＣＶＦ値を有した、ＣＶＣ ２０ｍｇ／ｋｇ／日群における動物からの単一の外れ値を除いて表した。 偽手術の腎皮質組織からのｍＲＮＡ発現を示す。 偽手術の腎皮質組織からのｍＲＮＡ発現を示す。 セニクリビロック（低または高用量）で処置された動物における第９週までの体重変化を示す。 図１７Ａ〜Ｃは、セニクリビロック（低または高用量）で処置された動物における第９週までの肝臓重量及び体重の変化を示す。パネルＡは体重変化を示し、パネルＢは肝臓重量における変化を示し、パネルＣは体重に対する肝臓重量の比率における変化を示す。 図１７Ａ〜Ｃは、セニクリビロック（低または高用量）で処置された動物における第９週までの肝臓重量及び体重の変化を示す。パネルＡは体重変化を示し、パネルＢは肝臓重量における変化を示し、パネルＣは体重に対する肝臓重量の比率における変化を示す。 図１７Ａ〜Ｃは、セニクリビロック（低または高用量）で処置された動物における第９週までの肝臓重量及び体重の変化を示す。パネルＡは体重変化を示し、パネルＢは肝臓重量における変化を示し、パネルＣは体重に対する肝臓重量の比率における変化を示す。 図１８Ａ〜Ｆは、第９週でのセニクリビロック（低または高用量）で処置された動物の全血及び生化学を示す。パネルＡは全血グルコースを示し、パネルＢは血漿ＡＬＴを示し、パネルＣは血漿ＭＣＰ−１を示し、パネルＤは血漿ＭＩＰ−１βを示し、パネルＥは肝臓トリグリセリドを示し、パネルＦは肝臓ヒドロキシプロリンを示す。 図１８Ａ〜Ｆは、第９週でのセニクリビロック（低または高用量）で処置された動物の全血及び生化学を示す。パネルＡは全血グルコースを示し、パネルＢは血漿ＡＬＴを示し、パネルＣは血漿ＭＣＰ−１を示し、パネルＤは血漿ＭＩＰ−１βを示し、パネルＥは肝臓トリグリセリドを示し、パネルＦは肝臓ヒドロキシプロリンを示す。 第９週での、セニクリビロック（低または高用量）で処置された動物のＨＥ染色肝臓切片を示す。 第９週での、セニクリビロック（低または高用量）で処置された動物のＮＡＦＬＤ活性スコアを示す。 第９週での、セニクリビロック（低または高用量）で処置された動物のシリウスレッド染色肝臓切片の代表的な顕微鏡写真を示す。 第９週での、セニクリビロック（低または高用量）で処置された動物のＦ４／８０免疫染色肝臓切片の代表的な顕微鏡写真を示す。 第９週での、セニクリビロック（低または高用量）で処置された動物の炎症面積の割合（％）を示す。 第９週での、セニクリビロック（低または高用量）で処置された動物のＦ４／８０及びＣＤ２０６二重免疫染色肝臓切片の代表的な顕微鏡写真を示す。 第９週での、セニクリビロック（低または高用量）で処置された動物のＦ４／８０陽性細胞のＦ４／８０及びＣＤ２０６二重陽性細胞の割合（％）を示す。 第９週での、セニクリビロック（低または高用量）で処置された動物のＦ４／８０及びＣＤ１６／３２二重免疫染色肝臓切片の代表的な顕微鏡写真を示す。 第９週での、セニクリビロック（低または高用量）で処置された動物のＦ４／８０陽性細胞のＦ４／８０及びＣＤ１６／３２二重陽性細胞の割合（％）を示す。 第９週での、セニクリビロック（低または高用量）で処置された動物のＭ１／Ｍ２比率を示す。 第９週での、セニクリビロック（低または高用量）で処置された動物のオイルレッド染色肝臓切片の代表的な顕微鏡写真を示す。 第９週での、セニクリビロック（低または高用量）で処置された動物の脂肪沈着面積の割合（％）を示す。 第９週での、セニクリビロック（低または高用量）で処置された動物の肝臓におけるＴＵＮＥＬ陽性細胞の代表的な顕微鏡写真を示す。 第９週での、セニクリビロック（低または高用量）で処置された動物のＴＵＮＥＬ陽性細胞の割合（％）を示す。 第９週での、セニクリビロック（低または高用量）で処置された動物の定量的ＲＴ−ＰＣＲを示す。ＴＮＦ−α、ＭＣＰ−１、コラーゲン１型、及びＴＩＭＰ−１のレベルを測定した。 第９週での、セニクリビロック（低または高用量）で処置された動物の定量的ＲＴ−ＰＣＲを示す。ＴＮＦ−α、ＭＣＰ−１、コラーゲン１型、及びＴＩＭＰ−１のレベルを測定した。 図３４Ａ〜Ｆは、第９週での、セニクリビロック（低または高用量）で処置された動物の定量的ＲＴ−ＰＣＲのローデータを示す。パネルＡは３６Ｂ４のレベルを示し、パネルＢはＴＮＦ−αのレベルを示し、パネルＣはＴＩＭＰ−１のレベルを示し、パネルＤはコラーゲン１型のレベルを示し、パネルＥは３６Ｂ４のレベルを示し、パネルｆはＭＣＰ−１のレベルを示す。 図３４Ａ〜Ｆは、第９週での、セニクリビロック（低または高用量）で処置された動物の定量的ＲＴ−ＰＣＲのローデータを示す。パネルＡは３６Ｂ４のレベルを示し、パネルＢはＴＮＦ−αのレベルを示し、パネルＣはＴＩＭＰ−１のレベルを示し、パネルＤはコラーゲン１型のレベルを示し、パネルＥは３６Ｂ４のレベルを示し、パネルｆはＭＣＰ−１のレベルを示す。 図３４Ａ〜Ｆは、第９週での、セニクリビロック（低または高用量）で処置された動物の定量的ＲＴ−ＰＣＲのローデータを示す。パネルＡは３６Ｂ４のレベルを示し、パネルＢはＴＮＦ−αのレベルを示し、パネルＣはＴＩＭＰ−１のレベルを示し、パネルＤはコラーゲン１型のレベルを示し、パネルＥは３６Ｂ４のレベルを示し、パネルｆはＭＣＰ−１のレベルを示す。 図３４Ａ〜Ｆは、第９週での、セニクリビロック（低または高用量）で処置された動物の定量的ＲＴ−ＰＣＲのローデータを示す。パネルＡは３６Ｂ４のレベルを示し、パネルＢはＴＮＦ−αのレベルを示し、パネルＣはＴＩＭＰ−１のレベルを示し、パネルＤはコラーゲン１型のレベルを示し、パネルＥは３６Ｂ４のレベルを示し、パネルｆはＭＣＰ−１のレベルを示す。 図３４Ａ〜Ｆは、第９週での、セニクリビロック（低または高用量）で処置された動物の定量的ＲＴ−ＰＣＲのローデータを示す。パネルＡは３６Ｂ４のレベルを示し、パネルＢはＴＮＦ−αのレベルを示し、パネルＣはＴＩＭＰ−１のレベルを示し、パネルＤはコラーゲン１型のレベルを示し、パネルＥは３６Ｂ４のレベルを示し、パネルｆはＭＣＰ−１のレベルを示す。 図３４Ａ〜Ｆは、第９週での、セニクリビロック（低または高用量）で処置された動物の定量的ＲＴ−ＰＣＲのローデータを示す。パネルＡは３６Ｂ４のレベルを示し、パネルＢはＴＮＦ−αのレベルを示し、パネルＣはＴＩＭＰ−１のレベルを示し、パネルＤはコラーゲン１型のレベルを示し、パネルＥは３６Ｂ４のレベルを示し、パネルｆはＭＣＰ−１のレベルを示す。 ６週から１８週にセニクリビロック（低または高用量）で処置された動物の体重変化を示す。 ６週から１８週にセニクリビロック（低または高用量）で処置された動物の生存曲線を示す。 図３７Ａ〜Ｃは、第１８週での、セニクリビロック（低または高用量）で処置された動物の体重及び肝臓重量を示す。パネルＡは体重を示し、パネルＢは肝臓重量を示し、パネルＣは体重に対する肝臓重量の比率を示す。 図３７Ａ〜Ｃは、第１８週での、セニクリビロック（低または高用量）で処置された動物の体重及び肝臓重量を示す。パネルＡは体重を示し、パネルＢは肝臓重量を示し、パネルＣは体重に対する肝臓重量の比率を示す。 図３８Ａ〜Ｃは、第１８週での、セニクリビロック（低または高用量）で処置された動物の肝臓の巨視的外見を示す。パネルＡはビヒクルのみで処置された動物の肝臓を示し、パネルＢは低用量のセニクリビロックで処置された動物の肝臓を示し、パネルＣは高用量のセニクリビロックで処置された動物の肝臓を示す。 図３８Ａ〜Ｃは、第１８週での、セニクリビロック（低または高用量）で処置された動物の肝臓の巨視的外見を示す。パネルＡはビヒクルのみで処置された動物の肝臓を示し、パネルＢは低用量のセニクリビロックで処置された動物の肝臓を示し、パネルＣは高用量のセニクリビロックで処置された動物の肝臓を示す。 図３８Ａ〜Ｃは、第１８週での、セニクリビロック（低または高用量）で処置された動物の肝臓の巨視的外見を示す。パネルＡはビヒクルのみで処置された動物の肝臓を示し、パネルＢは低用量のセニクリビロックで処置された動物の肝臓を示し、パネルＣは高用量のセニクリビロックで処置された動物の肝臓を示す。 第１８週での、セニクリビロック（低または高用量）で処置された動物の可視腫瘍結節の数を示す。 第１８週での、セニクリビロック（低または高用量）で処置された動物の可視腫瘍結節の最大直径を示す。 第１８週での、セニクリビロック（低または高用量）で処置された動物のＨＥ染色肝臓切片の代表的な顕微鏡写真を示す。 第１８週での、セニクリビロック（低または高用量）で処置された動物のＧＳ免疫染色肝臓切片の代表的な顕微鏡写真を示す。 第１８週での、セニクリビロック（低または高用量）で処置された動物のＣＤ３１免疫染色肝臓切片の代表的な顕微鏡写真を示す。 第１８週での、セニクリビロック（低または高用量）で処置された動物のＣＤ３１陽性面積の割合（％）を示す。 コホート及び試験日ごとのベースラインからのＨＩＶ−１ ＲＮＡレベルにおける変化中央値を示す−試験２０１。 第４８週までの経時的な５０コピー／ｍＬ未満のＨＩＶ−１ ＲＮＡを有する対象の割合−スナップショットアルゴリズム−ＩＴＴ−試験２０２。 第４８週までの経時的なｓＣＤ１４レベル（１０６ｐｇ／ｍＬ）におけるベースラインからのＬＳ平均変化を示す−ＩＴＴ。 ベースライン、第２４週、第４８週でのＡＰＲＩ及びＦＩＢ−４線維症指数スコアに従って群分けされたＣＶＣ（統合データ）処置対象及びＥＦＶ処置対象を示す。 ベースラインＡＰＲＩからの変化対ベースラインｓＣＤ１４からの変化の散布図を示す−第４８週（ＩＴＴ）。 ベースラインＦＩＢ−４からの変化対ベースラインｓＣＤ１４からの変化の散布図を示す−第４８週（ＩＴＴ）。 第４８週までの経時的なクレアチンホスホキナーゼ（ＣＰＫ）におけるベースラインからの平均変化を示す−安全性集団。 重症度グレード対ｃａｖｇ（ｎｇ／ｍＬ）によるＣＰＫ上昇のドット密度表示を示す−第４８週。 重症度グレード対ｃａｖｇ（ｎｇ／ｍＬ）によるＡＬＴ上昇のドット密度表示を示す−第４８週。 重症度グレード対ｃａｖｇ（ｎｇ／ｍＬ）によるＡＳＴ上昇のドット密度表示を示す−第４８週。 重症度グレード対ｃａｖｇ（ｎｇ／ｍＬ）によるビリルビン上昇のドット密度表示を示す−第４８週。 第４８週までの経時的な、空腹時総コレステロール、計算ＬＤＬコレステロール、ＨＤＬコレステロール及びトリグリセリドにおけるベースラインからの平均変化（ｍｇ／ｄＬ）を示す。 第４８週までの経時的な、空腹時総コレステロール、計算ＬＤＬコレステロール、ＨＤＬコレステロール及びトリグリセリドにおけるベースラインからの平均変化（ｍｇ／ｄＬ）を示す。
単数形、例えば「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」は、本出願の全体を通して便宜上使用されるが、文脈または明示による別段の指示がない限り、単数形は、複数形を含むと意図されることが理解されるべきである。さらに、本明細書で言及する全ての雑誌論文、特許、特許出願、刊行物等が全ての目的のためにその全体が参照により本明細書に組み込まれることも理解されるべきである。全ての数値範囲は、その数値範囲内のそれぞれ及び全ての数値点を含むと理解されるべきであり、それぞれ及び全ての数値点を個別に記載しているように解釈されるべきである。同じ成分または特性に向けられた全ての範囲のエンドポイントは、包括的であり、独立して組み合わせ可能であると意図される。
定義：
以下に記述する用語を除いて、本出願において使用される用語は全て、本発明の時点で当業者がそれらに帰するであろう意味を有すると意図される。
「約」は、基準値と実質的に同じ効果を有する、または実質的に同じ結果を提供する全ての値を含む。ゆえに、「約」という用語によって包含される範囲は、その用語が使用される文脈、例えば基準値と関連するパラメータに依存して変動するだろう。ゆえに、文脈によっては、「約」は、例えば、±１５％、±１０％、±５％、±４％、±３％、±２％、±１％、または±１％未満を意味することができる。重要なことには、「約」という用語が先行する基準値の全ての記載は、基準値単独の記載であるとも意図される。先述にかかわらず、本出願では「約」という用語は、曲線下面積（ＡＵＣ、ＡＵＣｔ、及びＡＵＣ∞を含む）Ｃｍａｘ、Ｔｍａｘ、等の薬物動態パラメータに関して特別な意味を有する。薬物動態パラメータに関する数値と関連して使用されるとき、「約」という用語は、基準パラメータの８０％〜１２５％を意味する。
「セニクリビロック」は、化学化合物（Ｓ）−８−［４−（２−ブトキシエトキシ）フェニル］−１−イソブチル−Ｎ−（４−｛［（１−プロピル−１Ｈ−イミダゾール−５−イル）メチル］スルフィニル｝フェニル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−ベンズアゾシン−５−カルボキサミド（構造を下記に示す）を指す。主題のセニクリビロックの組成の詳細は、米国特許出願公開第２０１２／０２３２０２８号に開示されており、これは全ての目的のために参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。関連製剤の詳細は、米国出願第６１／８２３，７６６号に開示され、これは全ての目的のために参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
「本発明の化合物」または「本化合物」は、セニクリビロックまたはその塩若しくは溶媒和化合物を指す。
「実質的に類似する」とは、組成物または製剤の同一性及び量の両方において、かなりの程度まで基準組成物または製剤と似ている組成物または製剤を意味する。
「医薬的に許容され得る」とは、獣医学的目的を含めた医学または薬学において、例えば対象への投与において、使用することができる物質または方法を指す。
「塩」及び「医薬的に許容され得る塩」は、酸付加塩及び塩基付加塩の両方を含む。「酸付加塩」は、生物学的にまたはその他の点で望ましくないものでなく、無機酸及び有機酸で形成される、遊離塩基の生物学的有効性及び特性を保持する塩を指す。「塩基付加塩」は、生物学的にまたはその他の点で望ましくないものでなく、遊離酸に無機塩基または有機塩基を付加することで調製される遊離酸の生物学的有効性及び特性を保持する塩を指す。医薬的に許容され得る塩の例には、アミンなどの塩基残基の鉱酸付加塩または有機酸付加塩；酸性残基のアルカリまたは有機付加塩；等、または前述の塩の１つまたは複数を含む組み合わせが含まれるがこれらに限定されない。医薬的に許容され得る塩には、活性剤の塩及び４級アンモニウム塩が含まれる。例えば、酸性塩には、塩酸、臭化水素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸、硝酸などの無機酸に由来するもの等が含まれ；他の許容可能な無機塩には、ナトリウム塩、カリウム塩、セシウム塩、等の金属塩；及びカルシウム塩、マグネシウム塩、等のアルカリ土類金属塩、または前述の塩の１つまたは複数を含む組み合わせが含まれる。医薬的に許容され得る有機塩には、酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、ステアリン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、パモ酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フェニル酢酸、グルタミン酸、安息香酸、サリチル酸、メシル酸、エシル酸、ベシル酸、スルファニル酸、２−アセトキシ安息香酸、フマル酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンジスルホン酸、シュウ酸、イセチオン酸、ＨＯＯＣ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＨ（ｎは、０〜４である）、等の有機酸から調製された塩；トリエチルアミン塩、ピリジン塩、ピコリン塩、エタノールアミン塩、トリエタノールアミン塩、ジシクロヘキシルアミン塩、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン塩、等の有機アミン塩；及び、アルギン酸塩、アスパラギン酸塩、グルタミン酸塩、等のアミノ酸塩；または１つまたは複数の前述の塩を含む組み合わせが含まれる。
一実施形態では、セニクリビロックの酸付加塩は、セニクリビロックメシレート、例えば、（Ｓ）−８−［４−（２−ブトキシエトキシ）フェニル］−１−イソブチル−Ｎ−（４−｛［（１−プロピル−１Ｈ−イミダゾール−５−イル）メチル］スルフィニル｝フェニル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−ベンズアゾシン−５−カルボキサミドモノメタンスルホネートである。一実施形態では、セニクリビロックメシレートは、淡い緑がかった黄色の結晶性粉末などの、結晶性物質である。一実施形態では、セニクリビロックメシレートは、氷酢酸、メタノール、ベンジルアルコール、ジメチルスルホキシド、及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶けやすく；ピリジン及び無水酢酸にやや溶けやすく；９９．５％エタノールにやや溶けにくく；アセトニトリル、１−オクタノール、及びテトラヒドロフランに溶けにくく；酢酸エチル及びジエチルエーテルにほとんど溶けない。一実施形態では、セニクリビロックメシレートは、ｐＨ１〜２の水溶液に溶けやすく；ｐＨ３でやや溶けにくく、ｐＨ４〜１３及び水中でほとんど溶けない。
「溶媒和化合物」は、溶媒和（本発明の活性剤の分子またはイオンと溶媒分子の組み合わせ）、または溶質イオンまたは分子（本発明の活性剤）と１つまたは複数の溶媒分子からなる凝集体によって形成された複合体を意味する。本発明において、好ましい溶媒和化合物は水和物である。
「医薬組成物」は、本開示の化合物と、哺乳類、例えばヒトへの生物学的に活性な化合物の送達に関して当該分野で一般的に容認される媒体との製剤を指す。そのような媒体には、そのための、全ての薬学的に許容され得るキャリア、希釈剤または賦形剤が含まれる。
「処置する」は、疾患または状態の事実、または疾患または状態の症状を、寛解させる、緩和する、及び軽減することを含む。
「投与する」は、任意の様式の投与、例えば、経口、皮下、舌下、経粘膜、非経口、静脈内、動脈内、バッカル、舌下、局所、膣、直腸、点眼、経耳、経鼻、吸入、及び経皮を含む。「投与する」は、特定の化合物を含む剤形のための処方薬を処方するまたは充填することも含むことができる。「投与する」は、特定の化合物または該化合物を含む剤形に関与する方法を実行するための指示を提供することも含むことができる。
「治療有効量」は、疾患、障害、または他の望ましくない医学的状態を処置するために対象に投与されるとき、その疾患、障害、または状態に関して有益な効果を有するのに十分である活性物質の量を意味する。治療有効量は、活性物質の化学的同一性及び製剤形態、疾患または状態及びその重症度、ならびに処置される患者の年齢、体重、他の関連する特徴によって変動するだろう。所与の活性物質の治療有効量を決定することは、当該分野の通常の技術の範囲内であり、典型的には単なる慣例的実験しか必要としない。
線維症：
線維症は、修復または反応プロセスにおける、器官または組織での過剰な線維性結合組織の形成である。これは、反応性、良性、または病理学的状態であり得る。器官及び／または組織における結合組織の沈着は、下にある器官または組織の構造及び機能を抹消し得る。線維症は、線維組織の過剰沈着のこの病理学的状態、ならびに治癒における結合組織沈着のプロセスである。
線維症は、両方とも、コラーゲン及びグリコサミノグリカンを含む、結合組織を設置する刺激細胞を必然的に含むという点で、瘢痕のプロセスに類似している。多くの免疫性及び炎症性反応を媒介するサイトカインは、線維症の発症において役割を担う。脂肪蓄積、ウイルス性因子、過度のアルコール摂取、ヘパトトキシン（ｈｅｐａｔｏｘｉｎ）など要因の結果生じる肝細胞の損傷は、炎症性の免疫反応を必然的に引き起こす。肝臓におけるサイトカイン及びケモカインの産生の増加により、炎症促進性のマクロファージにその後成熟する炎症促進性単球（前駆細胞）が動員される。炎症促進性のマクロファージは、本質的に線維形成を促進し、最後には、細胞外マトリクス（ＥＣＭ）の沈着を主に担う肝星細胞（ＨＳＣ）を活性化させる。
炎症をもたらす種々の免疫細胞集団の浸潤は、急性及び慢性肝臓傷害後の中心的な病原性特徴である。慢性肝臓炎症は、線維症、肝硬変、ＥＳＬＤ、及びＨＣＣをもたらし得る連続的な肝細胞傷害をもたらす。肝内免疫細胞間の相互作用により、クッパー細胞及びＨＳＣの活性化及び遊走が増大され、それは肝臓線維症を発症させる決定的な事象である。加えて、肝臓線維症の病原においてＣＣＲ２及びＣＣＲ５の役割のエビデンスが増加している［１〜７、９、３１］。Ｃ−Ｃケモカインファミリーのこれらのメンバーは、炎症促進性の単球及びマクロファージ、クッパー細胞、及びＨＳＣを含む線維形成促進性細胞により発現される［１〜４］。ＣＣＲ２シグナル伝達は、骨髄由来線維芽細胞の制御を通して腎線維症の病原において重要な役割を担う［８］。ＣＣＲ２及びＣＣＲ５陽性単球ならびにＣＣＲ５陽性Ｔリンパ球は、局所的に放出されるＭＣＰ−１及びＲＡＮＴＥＳにより誘引され、腎臓における慢性間質性炎症に寄与し得る［１０、１１］。げっ歯類では、ＣＶＣは、肝臓、腸間膜リンパ節、及び腸肝軸としても記載される腸において高く分布する。腸内細菌叢の破壊及び腸肝軸へのその下流効果は、肥満、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）及び非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）などの代謝障害において重要な役割を担う［１６、２３］。
表１は、肝臓細胞により発現されるケモカインを列挙する［３０］。
肝星細胞（ＨＳＣ）の活性化は、肝線維症の病原において重要な役割を担う。肝臓傷害後、肝星細胞（ＨＳＣ）は活性化され、マトリックスメタロプロテイナーゼ（ＭＭＰ）及びその特異的組織阻害剤（ＴＩＭＰ）の組み合わせを発現する［３２］。肝臓傷害の早期段階では、ＨＳＣは、ＭＭＰ−３、ＭＭＰ−１３、及びウロキナーゼ型プラスミノーゲン活性化因子（ｕＰＡ）を一過的に発現し、マトリックス分解表現型を呈する。細胞外マトリックスの分解は、ＣＣＲ２またはＣＣＲ５依存性とは思われない。
活性化ＨＳＣは、単核白血球及び多形核白血球の浸潤を誘発することにより炎症性反応を増幅し得る。浸潤する単球及びマクロファージは、サイトカインの分泌増加及び酸化ストレス関連産物の生成を含むいくつかの機構を介して線維症の発症に関与する。活性化ＨＳＣは、ＣＣＲ２及びＣＣＲ５を発現し得、ＭＣＰ−１、ＭＩＰ−１α、ＭＩＰ−１β及びＲＡＮＴＥＳを含むケモカインを産生し得る。ＣＣＲ２は、ＨＳＣ走化性及び肝線維症の発症を促進させる。ヒト肝臓疾患では、ＭＣＰ−１の増加は、マクロファージ動員及び肝線維症の重症度及び原発性胆汁性肝硬変に関連する。ＣＣＲ５は、ＨＳＣ遊走及び増殖を刺激する。
肝臓傷害及びＨＳＣ活性化の後期段階では、パターンは変化し、細胞は肝臓線維症において蓄積する線維性コラーゲンの分解を阻害する一方で、正常な肝臓マトリックスを分解する能力を有するＭＭＰの組み合わせを発現する。このパターンは、プロＭＭＰ−２及び膜型１（ＭＴ１）−ＭＭＰ発現の組み合わせを特徴とし、これは活性ＭＭＰ−２の細胞周辺生成及び正常な肝臓マトリックスの局所的分解を駆動する。加えて、間質コラゲナーゼ（ＭＭＰ−１／ＭＭＰ−１３）によるフィブリル肝臓コラーゲンの分解のより全体的な阻害をもたらすＴＩＭＰ−１の発現において著しい増加がある。慢性アルコール性肝臓疾患に伴う肝臓傷害では、ＴＮＦ−α、ＩＬ−１、ＩＬ−６、ならびにケモカインＩＬ−８／ＣＸＣＬ８の産生が増加する。ＴＮＦ−αは、非アルコール性脂肪性肝疾患の重要なメディエータでもある。これらの経路は、肝臓線維症の進行において重大な役割を担う。ＨＳＣの活性化を阻害すること及び活性化ＨＳＣのクリアランスを加速させることは、肝線維症の解決のための有効な戦略であり得る。
ケモカインファミリーは、炎症において重要な制御的役割を担う。このファミリーのメンバーには、限定されないが、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ４、ＣＸＣＲ５、ＣＸＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ＣＸＣＲ８、ＣＸＣＲ９、ＣＸＣＲ１０、ＣＸＣＬ１、ＣＸＣＬ２、ＣＸＣＬ３、ＣＸＣＬ４、ＣＸＣＬ５、ＣＸＣＬ６、ＣＸＣＬ７、ＣＸＣＬ８、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＬ１２、ＣＸＣＬ１３、ＣＸＣＬ１４、ＣＸＣＬ１５、ＣＸＣＬ１６、及びＣＸＣＬ１７を含むがこれらに限定されないＣＸＣ受容体及びリガンド；ＣＣＬ１、ＣＣＬ２、ＣＣＬ３、ＣＣＬ４、ＣＣＬ５、ＣＣＬ６、ＣＣＬ７、ＣＣＬ８、ＣＣＬ９、ＣＣＬ１０、ＣＣＬ１１、ＣＣＬ１２、ＣＣＬ１３、ＣＣＬ１４、ＣＣＬ１５、ＣＣＬ１６、ＣＣＬ１７、ＣＣＬ１８、ＣＣＬ１９、ＣＣＬ２０、ＣＣＬ２１、ＣＣＲ１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＣＲ８、ＣＣＲ、及びＣＣＲ１０を含むがこれに限定されないＣＣケモカイン及び受容体；ＸＣＬ１、ＸＣＬ２、及びＸＣＲ１を含むがこれらに限定されないＣケモカイン；ならびにＣＳ３ＣＬ１及びＣＸ３ＣＲ１を含むがこれらに限定されないＣＸ３Ｃケモカインが含まれる。これらの分子は、線維化器官または組織において上方制御され得る。さらなる実施形態では、これらの分子は、線維化器官または組織において下方制御され得る。さらなる実施形態では、これらのケモカインのシグナル伝達経路における分子は、線維化器官または組織において上方制御され得る。さらなる実施形態では、これらのケモカインのシグナル伝達経路における分子は、線維化器官または組織において下方制御され得る。
線維症は、肺、肝臓、骨髄、関節、皮膚、消化管、リンパ節、血管、または心臓を含むがこれらに限定されない体内の多くの組織において起こり得、典型的には炎症または損傷の結果である。非限定的な例には、肺線維症、特発性肺線維症、嚢胞性線維症、肝硬変、心内膜心筋線維症、心筋梗塞、心房線維症、縦隔線維症、骨髄線維症、後腹膜線維症、進行性塊状線維症、じん肺症からの合併症、腎性全身性線維症、クローン病、ケロイド、強皮症／全身性硬化症、関節線維症、ペイロニー病、デュプイトラン拘縮、アテローム性動脈硬化症に伴う線維症、リンパ節線維症、及び癒着性関節包炎が含まれる。
治療的用途の実施形態：
本発明は、線維症を処置する方法を提供する。動物試験におけるＣＶＣの抗線維化効果は、肝臓傷害の発症時（ＴＡＡ）または直後（ＴＡＡ；ＨＦＤ）にＣＶＣ処置が開始されたときには観察されたが、ひとたび肝硬変が確立される（ＴＡＡ）と観察されなかった。これは、ＣＶＣの抗線維化効果が、肝臓線維症が確立し、疾患進行の恐れが重大である集団においてより明白となる可能性を示す。これらには、２型糖尿病（Ｔ２ＤＭ）及び代謝症候群（ＭＳ）に伴う非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）；ＨＩＶ及びＨＣＶ重複感染、またはＨＣＶ感染が含まれる。
ＮＡＳＨ
本発明の組成物は、アメリカ人の２〜５％が罹患する一般的な肝臓疾患である、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）から生じる肝臓線維症を処置するために使用され得る。ＮＡＳＨに起因する肝臓損傷はアルコール性肝臓疾患の特徴のいくつかを有するが、それはアルコールをほとんどまたは全く飲まない人において生じる。ＮＡＳＨにおける主な特徴は、炎症及び肝細胞損傷（風船様腫大）を伴う、肝臓内の脂肪である。ＮＡＳＨは、重度であり得、肝硬変を引き起こし得、その場合、肝臓は永久的に損傷し、瘢痕となり、もはや適切に機能することができなくなる。非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）は、一般的な、しばしば「サイレント」な、２型糖尿病及び代謝症候群などの肥満関連障害に伴う肝臓疾患であり、これはアルコールをほとんどまたはまったく飲まない人において生じ、肝臓内の脂肪の蓄積を特徴とし他の明白な原因を伴わない［３２−４３］。ＮＡＦＬＤスペクトラムの開始時は、単純な脂肪症であり、これは肝臓内での脂肪の積み重ねを特徴とする。炎症を伴わない肝臓の脂肪症は、通常は良性で、進行が遅いか非進行性である。ＮＡＳＨは、ＮＡＦＬＤのより進行型で重度なサブタイプであり、この場合脂肪症は、線維症を伴うか伴わずに、肝臓細胞傷害及び炎症を併発する。
肥満関連障害の有病率の上昇は、ＮＡＳＨの有病率の急速な増加に寄与している。ＮＡＦＬＤを有する対象のおおよそ１０％〜２０％はＮＡＳＨに進行するだろう［４４］。
ＮＡＦＬＤは、慢性肝臓疾患のもっとも一般的な原因である［４５］。大半の米国研究は１０％〜３５％のＮＡＦＬＤの有病率を報告している；しかしながら、これらの割合は、試験集団及び診断の方法で変動する［４６］。米国人口のおおよそ３分の１が肥満と考えられることから、米国人口におけるＮＡＦＬＤの有病率は約３０％である可能性が高い［４６］。一研究では、ＮＡＦＬＤはアメリカ人のおおよそ２７％〜３４％が罹患、または推定８６００万〜１億８００万人の患者がいると見いだされている［４４］。ＮＡＦＬＤは、米国特有ではない。ブラジル、中国、インド、イスラエル、イタリア、日本、韓国、スリランカ、及び台湾を含む世界の他の国からの報告では、有病率の範囲は、６％〜３５％（２０％の中央値）であると示されている［４６］。ＧＥＳＡオーストラリア消化器病学会／Ａｕｓｔｒａｌｉａｎ ｌｉｖｅｒ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎによる研究により、ＮＡＦＬＤは推定５５０万人のオーストラリア人が罹患し、そのうち全成人の４０％は５０歳以上であることが見出されている［４７］。重度に肥満の患者のオーストラリアの研究は、これらの患者の２５％がＮＡＳＨを有することを見出した［４８］。
肝臓生検は、ＮＡＳＨの確定診断をなすために必要である。中年個体の米国研究では、組織学的に確認されたＮＡＳＨの有病率は１２．２％であった［４９］。現在、ＮＡＳＨ有病率は、米国におおよそ９００〜１５００万人（米国人口の３％〜５％）と推定されており、ＥＵ及び中国での有病率も同様である［４６、５０］。肥満集団におけるＮＡＳＨの有病率の範囲は、１０％〜５６％（３３％の中央値）である［４６］。カナダからの痩身個体の部検シリーズでは、脂肪性肝炎及び線維症の有病率はそれぞれ３％及び７％であった［４６］。ＮＡＳＨの有病率は、発展途上地域においても増加しており、これはこれらの地域における、より体を動かさないライフスタイル及び高脂肪及び糖／果糖を含有する加工食品からなる西洋化した食事に適用し始めた人々を要因としている［５１］［５２］。
ＮＡＳＨは、線維症を伴うまたは伴わない、肝細胞傷害を伴う肝脂肪症及び炎症の存在により定義される、深刻な慢性肝臓疾患である［３４］。慢性肝臓炎症は、線維症の前段階であり、これは肝硬変、末期肝臓疾患及び肝細胞癌へと進行し得る。インスリン抵抗性に加えて、脂質貯蔵及び代謝の変化、肝臓内でのコレステロールの蓄積、肝傷害の増加をもたらす酸化ストレス、及び（高果糖含有食事に伴う）腸細菌叢の破壊に次ぐバクテリアルトランスロケーション［３４、５３−５６］は、全て、ＮＡＳＨの進行に寄与する重要な補因子として示されている［５７−６０］。肥満及び糖尿病の蔓延が拡大しているために、ＮＡＳＨは、進行性肝臓疾患のもっとも一般的な原因及び肝臓移植のもっとも一般的な適応症となると予想されている［４６、６１−６３］。ＮＡＳＨの負荷は、任意の承認された治療的介入の欠如と組み合わされて、アンメット・メディカル・ニーズを表わす。
さらなる実施形態では、肝臓線維症は肝硬変の出現を伴う。いくつかの実施形態では、肝硬変はアルコール性損傷を伴う。さらなる実施形態では、肝硬変は、Ｂ型肝炎及びＣ型肝炎感染、原発性胆汁性肝硬変（ＰＢＣ）、原発性硬化性胆管炎、または脂肪性肝疾患を含むがこれらに限定されない、肝炎感染を伴う。いくつかの実施形態では、本発明は、肝臓線維症または肝硬変を発症する恐れのある対象を処置する方法を提供する。
別の実施形態では、線維症は、非肝硬変性肝線維症を含む。別のさらなる実施形態では、対象はヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）に感染している。なおもさらなる実施形態では、対象はＨＣＶ（Ｃ型肝炎ウイルス）を含むがこれに限定されない、肝炎ウイルスに感染している。さらなる実施形態では、対象は糖尿病を有する。さらなる実施形態では、対象は２型糖尿病を有する。さらなる実施形態では、対象は１型糖尿病を有する。さらなる実施形態では、対象は代謝症候群（ＭＳ）を有する。さらなる実施形態では、対象はこれらの疾患または障害の１つまたは複数を有する。さらなる実施形態では、対象はこれらの疾患の１つまたは複数を発症する恐れがある。さらなる実施形態では、対象はインスリン抵抗性を有する。さらなる実施形態では、対象は、増加した血中グルコース濃度、高血圧、上昇したコレステロールレベル、上昇したトリグリセリドレベルを有するか、または肥満である。さらなる実施形態では、対象は多嚢胞性卵巣症候群を有する。
一実施形態では、本発明は、処置の方法であって、セニクリビロックまたはその塩若しくは溶媒和化合物が１つまたは複数の追加の活性剤と共投与される、前記方法を提供する。さらなる実施形態では、１つまたは複数の追加の活性剤は、侵入阻害剤、ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤、ヌクレオチド逆転写酵素阻害剤、非ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤、プロテアーゼ阻害剤、インテグラーゼ鎖転移阻害剤、成熟阻害剤、及びそれらの組み合わせから選択される１つまたは複数の抗レトロウイルス剤である。さらなる実施形態では、１つまたは複数の追加の抗レトロウイルス剤は、ラミブジン、エファビレンツ、ラルテグラビル、ビベコン、ベビリマット、アルファインターフェロン、ジドブジン、アバカビル、ロピナビル、リトナビル、テノホビル、テノホビルジソプロキシル、テノホビルのプロドラッグ、エムトリシタビン、エルビテグラビル、コビシスタット、ダルナビル、アタザナビル、リルピビリン、ドルテグラビル及びそれらの組み合わせからなる群より選択される。さらなる実施形態では、１つまたは複数の追加の活性剤は、１つまたは複数の免疫系抑制剤である。さらなる実施形態では、１つまたは複数の追加の活性剤は、シクロスポリン、タクロリムス、プレドニゾロン、ヒドロコルチゾン、シロリムス、エベロリムス、アザチオプリン、ミコフェノール酸、メトトレキサート、バシリキシマブ、ダクリズマブ、リツキシマブ、抗胸腺細胞グロブリン、抗リンパ球グロブリン、及びそれらの組み合わせからなる群より選択される。
ある特定の実施形態は、本明細書に記載の本処置の処置有効性をモニターする及び／または予測するための方法を含む。かかる方法は、線維症または線維性疾患若しくは状態について処置される対象における（または対象からの生体試料における）、例えば、バイオマーカーなどの、１つまたは複数の生体分子のレベルを検出することを含み、所定の標準レベルと比較した１つまたは複数の生体分子のレベルにおける増減が、本処置の処置有効性を示すまたは予測する。
一実施形態では、本発明は、処置の方法であって、線維症または線維性疾患若しくは状態について処置される対象における１つまたは複数の生体分子のレベルを検出すること、１つまたは複数の生体分子のレベルにおける増減に基づいて処置レジメンを決定することを含み、生体分子は、リポ多糖類（ＬＰＳ）、ＬＰＳ結合タンパク質（ＬＢＰ）、１６Ｓ ｒＤＮＡ、ｓＣＤ１４、腸型脂肪酸結合蛋白（Ｉ−ＦＡＢＰ）、ゾヌリン−１、コラーゲン１ａ１及び３ａ１、ＴＧＦ−β、フィブロネクチン−１、ｈｓ−ＣＲＰ、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＩＬ−３３、フィブリノゲン、ＭＣＰ−１、ＭＩＰ−１α及びＭＩＰ−１β、ＲＡＮＴＥＳ、ｓＣＤ１６３、ＴＧＦ−β、ＴＮＦ−α、ＣＫ−１８（カスパーゼ切断及び全長）などの肝細胞アポトーシスのバイオマーカー、またはＬＰＳ、ＬＢＰ、ｓＣＤ１４、及びＩ−ＦＡＢＰなどのバクテリアルトランスロケーションのバイオマーカー、またはそれらの組み合わせからなる群より選択される、前記方法を提供する。
一実施形態では、本発明は、処置の方法であって、線維症または線維性疾患若しくは状態について処置される対象における１つまたは複数の生体分子のレベルを検出することを含み、所定の標準レベルと比較した１つまたは複数の生体分子のレベルにおける増減が線維症または線維性疾患若しくは状態の処置有効性を予測する、前記方法を提供する。
さらなる実施形態では、１つまたは複数の生体分子は、線維症または線維性疾患若しくは状態について処置される対象からの生体試料において測定される。なおもさらなる実施形態では、生体試料は、血液、皮膚、毛包、唾液、口腔粘膜、膣粘膜、汗、涙、上皮組織、尿、精液（ｓｅｍｅｎ）、精液（ｓｅｍｉｎａｌ ｆｌｕｉｄ）、精漿、前立腺液、尿道球腺液（カウパー液）、排泄物、生検、腹水、脳脊髄液、リンパ、脳、及び組織抽出試料または生検試料から選択される。
投与量及び投与：
特定の対象の投与量は、対象の年齢、体重、全身健康状態、性別、食事、投与時間、投与経路、排出速度及び処置される特定の疾患状態の程度に従って、これらの及び他の因子を考慮することにより決定されることができる。
本発明は、処置の方法であって、セニクリビロックまたはその塩若しくは溶媒和化合物が経口組成物として製剤化される、前記方法を提供する。
本発明は、処置の方法であって、セニクリビロックまたはその塩若しくは溶媒和化合物が例えば、１日１回または１日２回投与される、前記方法を提供する。剤形は、線維性疾患または状態を処置するのに十分な期間にわたって投与されることができる。
経口投与の場合、１日の投与量の範囲は、体重５０ｋｇの成人あたりの有効成分として（すなわち本発明の化合物として）、約５〜１０００ｍｇ、好ましくは約１０〜６００ｍｇ、及びより好ましくは約１０〜３００ｍｇ、最も好ましくは約１５〜２００ｍｇであり、医薬品は、例えば、１日に、１回、または２〜３回の分割用量にて投与されてよい。
セニクリビロックまたはその塩若しくは溶媒和化合物は、経口または注射投与に好適な任意の剤形へと製剤化されてよい。化合物は経口投与されるとき、経口投与用の固体剤形、例えば、錠剤、カプセル、丸剤、顆粒、などに製剤化されることができる。経口投与用の液体剤形、例えば経口液剤、経口懸濁液、シロップ剤等に製剤化されることもできる。「錠剤」という用語は、本明細書で用いるとき、化合物及び好適な補助剤を、円形または不規則なトローチへと、主に、バッカル錠、舌下錠、バッカルウェハ、チュアブル錠、分散錠、可溶錠、発泡錠、徐放錠、制御放出錠、腸溶錠等も含む経口投与用の一般錠剤へと、均一に混合しプレスすることにより調製された、固体調製物を指す。「カプセル」という用語は、本明細書で用いるとき、化合物を、または化合物を好適な補助剤と一緒に、中空カプセル内に充填すること、または軟カプセル材内に密封することにより調製される固体調製物を指す。溶解性及び放出特性に従って、カプセルは、硬カプセル（通常のカプセル）、軟カプセル（ソフトシェルカプセル）、徐放カプセル、制御放出カプセル、腸溶カプセル等に分けることができる。「丸剤」という用語は、本明細書で用いるとき、化合物と好適な補助剤を、好適な方法を介して混合することによって調製される、滴下丸剤、糖衣錠、小丸薬等を含む、球状またはほぼ球状の固体調製物を指す。「顆粒」という用語は、本明細書で用いるとき、化合物と好適な補助剤を混合することにより調製され、ある特定の粒径を有する乾燥粒状調製物を指す。顆粒は、可溶性顆粒（通常、顆粒と称される）、懸濁顆粒、発泡顆粒、腸溶顆粒、徐放顆粒、制御放出顆粒等に分けることができる。「経口液剤」という用語は、本明細書で用いるとき、化合物を経口投与用の好適な溶媒に溶解することにより調製される、沈殿液体調製物を指す。「経口懸濁液」という用語は、本明細書で用いるとき、乾燥懸濁液または濃縮懸濁液も含む、難溶性化合物を液体ビヒクルに分散することにより調製される、経口投与用の懸濁液を指す。「シロップ剤」という用語は、本明細書で用いるとき、化合物を含有する濃縮スクロース水溶液を指す。注射剤形は、製剤分野の従来の方法によって産生されることができ、水性溶媒または非水性溶媒が選択されてよい。最も一般的に使用される水性溶媒は、注射用水、ならびに０．９％塩化ナトリウム溶液または他の好適な水溶液である。一般的に使用される非水性溶媒は、注射用の植物油、主に大豆油、及びアルコール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール等のその他水溶液である。
一実施形態では、セニクリビロックまたはその塩及びフマル酸を含む医薬組成物を提供する。ある特定の実施形態では、セニクリビロックまたはその塩は、セニクリビロックメシレートである。
さらなる実施形態では、フマル酸に対するセニクリビロックまたはその塩の重量比は、約７：１０〜約１０：７、例えば約８：１０〜約１０：８、約９：１０〜約１０：９、または約９５：１００〜約１００：９５である。他のさらなる実施形態では、フマル酸は、組成物の重量基準で、約１５％〜約４０％、例えば約２０％〜約３０％、または約２５％の量で存在する。他のさらなる実施形態では、セニクリビロックまたはその塩は、組成物の重量基準で、約１５％〜約４０％、例えば約２０％〜約３０％、または約２５％の量で存在する。
他のさらなる実施形態では、セニクリビロックまたはその塩及びフマル酸の組成物は、１つまたは複数の充填剤をさらに含む。より具体的な実施形態では、１つまたは複数の充填剤は、微結晶セルロース、第二リン酸カルシウム、セルロース、ラクトース、スクロース、マンニトール、ソルビトール、デンプン、及び炭酸カルシウムから選択される。例えば、ある特定の実施形態では、１つまたは複数の充填剤は、微結晶セルロースである。特定の実施形態では、１つまたは複数の充填剤のセニクリビロックまたはその塩に対する重量比は、約２５：１０〜約１０：８、例えば約２０：１０〜約１０：１０、または約１５：１０である。他の特定の実施形態では、１つまたは複数の充填剤は、組成物の重量基準で、約２５％〜約５５％、例えば約３０％〜約５０％または約４０％の量で存在する。他のさらなる実施形態では、組成物は、１つまたは複数の崩壊剤をさらに含む。より具体的な実施形態では、１つまたは複数の崩壊剤は、架橋型ポリビニルピロリドン、架橋型カルボキシメチルセルロースナトリウム、及びデンプングリコール酸ナトリウムから選択される。例えば、ある特定の実施形態では、１つまたは複数の崩壊剤は、架橋型カルボキシメチルセルロースナトリウムである。特定の実施形態では、１つまたは複数の崩壊剤のセニクリビロックまたはその塩に対する重量比は、約１０：１０〜約３０：１００、例えば約２５：１００である。他の特定の実施形態では、１つまたは複数の崩壊剤は、組成物の重量基準で、約２％〜約１０％、例えば約４％〜約８％、または約６％の量で存在する。他のさらなる実施形態では、組成物は１つまたは複数の潤滑剤をさらに含む。より具体的な実施形態では、１つまたは複数の潤滑剤は、タルク、シリカ、ステアリン、ステアリン酸マグネシウム、及びステアリン酸から選択される。例えば、ある特定の実施形態では、１つまたは複数の潤滑剤は、ステアリン酸マグネシウムである。特定の実施形態では、１つまたは複数の潤滑剤は、組成物の重量基準で、約０．２５％〜約５％、例えば約０．７５％〜約３％、または約１．２５％の量で存在する。
他のさらなる実施形態では、セニクリビロックまたはその塩及びフマル酸の組成物は、表２のそれに実質的に類似する。他のさらなる実施形態では、セニクリビロックまたはその塩及びフマル酸の組成物は、表３及び４のそれと実質的に類似する。他のさらなる実施形態では、セニクリビロックまたはその塩及びフマル酸の組成物のいずれかは、乾式造粒法を必然的に含むプロセスによって産生される。他のさらなる実施形態では、セニクリビロックまたはその塩及びフマル酸の組成物のいずれかは、乾燥剤と包装されたとき、約４０℃、約７５％相対湿度への６週間の曝露後、約４重量％以下、例えば２重量％以下の水含量を有する。他のさらなる実施形態では、上述の組成物のいずれかは、乾燥剤と包装されたとき、４０℃、７５％相対湿度への１２週間の曝露後、約２．５％以下、例えば１．５％以下の総不純物レベルを有する。他のさらなる実施形態では、上述の組成物のいずれかのセニクリビロックまたはその塩は、経口投与後の溶液中のセニクリビロックまたはその塩のバイオアベイラビリティに実質的に類似する、経口投与後の平均絶対的バイオアベイラビリティを有する。なおもさらなる実施形態では、セニクリビロックまたはその塩は、ビーグル犬において、約１０％〜約５０％、例えば約２７％の絶対的バイオアベイラビリティを有する。
別の実施形態では、セニクリビロックまたはその塩及びフマル酸の組成物を含む医薬製剤を提供する。さらなる実施形態では、製剤中の組成物は、顆粒の形態であることができる。他のさらなる実施形態では、製剤中の組成物は、カプセルシェル内に配置される。他のさらなる実施形態では、製剤の組成物は、小袋の中に配置される。他のさらなる実施形態では、製剤の組成物は、錠剤または錠剤の構成成分である。なおも他のさらなる実施形態では、製剤の組成物は、多層錠剤の１つまたは複数の層である。他のさらなる実施形態では、製剤は、１つまたは複数の追加の医薬的に不活性な成分を含む。他のさらなる実施形態では、製剤は、表９のそれに実質的に類似する。他のさらなる実施形態では、表９のに実質的に類似する組成物を有する錠剤を提供する。他のさらなる実施形態では、上記実施形態のいずれかは被覆基質である。別の実施形態では、上述の実施形態のいずれかを調製するための方法を提供する。さらなる実施形態では、該方法は、セニクリビロックまたはその塩及びフマル酸を混和して混和物を形成すること、及び混和物を乾燥造粒することを含む。他のさらなる実施形態では、該方法は、１つまたは複数の充填剤とセニクリビロックまたはその塩及びフマル酸とを混和して混和物を形成することをさらに含む。他のさらなる実施形態では、該方法は、１つまたは複数の崩壊剤とセニクリビロックまたはその塩及びフマル酸とを混和して混和物を形成することをさらに含む。他のさらなる実施形態では、該方法は、１つまたは複数の潤滑剤とセニクリビロックまたはその塩及びフマル酸とを混和して混和物を形成することをさらに含む。他のさらなる実施形態では、該方法は、乾燥造粒した混和物を錠剤へと圧縮することをさらに含む。他のさらなる実施形態では、該方法は、カプセルに乾燥造粒した混和物を充填することを含む。
さらに、本発明の化合物は、輸血用血液または血液製剤と組み合わせて含まれるまたは使用することができる。一実施形態では、本発明の化合物は、潜状ＨＩＶリザーバーを一掃する１つまたは複数の薬剤と組み合わせて含まれるまたは使用され、輸血用血液または血液製剤に加えられることができる。通常、輸血用血液または血液製剤は、複数の人から（ｆｏｒｍ）得た血液を混合することにより産生され、いくつかの場合では、未感染細胞がＨＩＶウイルスに感染した細胞に混入している。そのような場合は、未感染細胞は、ＨＩＶウイルスに感染する可能性が高い。本発明の化合物が、潜状ＨＩＶリザーバーを一掃する１つまたは複数の薬剤と共に輸血用血液または血液製剤に加えられたとき、該ウイルスの感染及び増殖は、防ぐまたは制御されることができる。特に、血液製剤が保存される場合、該ウイルスの感染及び増殖は本発明の化合物の添加により効果的に防ぐまたは制御される。加えて、ＨＩＶウイルスが混入した輸血用血液または血液製剤が人に投与されたとき、その人の体内の該ウイルスの感染及び増殖は、潜状ＨＩＶリザーバーを一掃する１つまたは複数の薬剤と組み合わせて血液または血液製剤に本発明の化合物を加えることにより防ぐことができる。例えば、通常、経口投与により血液または血液製剤を使用する際のＨＩＶ感染性疾患を防ぐためには、投与量は、約６０ｋｇの体重の成人１人あたりのＣＣＲ５／ＣＣＲ２拮抗薬として、約０．０２〜５０ｍｇ／ｋｇ、好ましくは約０．０５〜３０ｍｇ／ｋｇ、及びより好ましくは約０．１〜１０ｍｇ／ｋｇの範囲であり、該医薬品は、１日に１回または２〜３用量投与されてよい。当然のことながら、上記のように、投与量範囲は１日の投与量を分割するのに必要な単位投与量に基づいて制御されることができるが、具体的な対象の投与量は、対象の年齢、体重、全身健康状態、性別、食事、投与時間、投与経路、排出速度及び処置されるべき特定の疾患状態の程度に従って、これら及び他の因子を考慮することにより決定されることができる。この場合、投与経路も適切に選択され、本発明のＨＩＶ感染性疾患を防ぐための医薬品は、輸血または血液製剤を使用する前に直接輸血用血液または血液製剤に加えられてよい。このような場合、望ましくは、本発明の医薬品は、輸血または血液製剤を使用する、直前〜２４時間前、好ましくは直前〜１２時間前、より好ましくは直前〜６時間前に、血液または血液製剤と混合される。
輸血用血液または血液製剤とは別に、本発明の組成物が輸血用血液または血液製剤及び／または他の活性剤と一緒に投与されるとき、医薬品は、輸血または血液製剤を使用するのと、好ましくは同時〜１時間前に投与される。より好ましくは、例えば、医薬品は、１日に１回〜３回投与され、投与は４週間継続される。
併用療法：
本発明の化合物は、単独で、または１つまたは複数の追加の活性剤と組み合わせて使用してよい。１つまたは複数の追加の活性剤は、それを必要とする対象に治療効果を及ぼすことができる任意の化合物、分子、または物質であってよい。１つまたは複数の追加の活性剤は、「共投与」されてよい、すなわち、別々の医薬組成物としてまたは単一の医薬組成物に混和されるかのいずれかで、協調する様式で一緒に対象に投与されてよい。「共投与」では、１つまたは複数の追加の活性剤は、本化合物と同時に投与されてもよく、または本化合物と別々に投与されてもよく、これには異なる時間及び異なる頻度も含まれる。１つまたは複数の追加の活性剤は、経口、静脈内、筋肉内、鼻腔内、皮下内、膣内、直腸内、等の任意の既知の経路で投与されてよく、治療剤も任意の従来の経路によって投与されてよい。多くの実施形態では、１つまたは複数の追加の活性剤の少なくとも１つ及び任意選択的に両方が経口投与されてよい。
これらの１つまたは複数の追加の活性剤は、１つまたは複数の抗線維化剤、抗レトロウイルス剤、免疫系抑制剤、及びＣＣＲ２及び／またはＣＣＲ５阻害剤若しくは処置を含むがこれらに限定されない。２つ以上の医薬品が併用使用されるとき、各医薬品の投与量は、個別に使用されるときの医薬品の投与量に一般的に同一である。しかし、医薬品が他の医薬品の代謝に干渉するとき、各医薬品の投与量は適切に調整される。各医薬品は、同時に、または例えば１２時間、２４時間、３６時間未満の時間間隔において別々に投与されてよい。本明細書に記載の剤形、例えばカプセル、は適切な間隔で投与されることができる。例えば、１日１回、１日２回、１日３回等。具体的には、剤形は、例えば、１日１回または１日２回投与される。さらにより具体的には、剤形は１日１回投与される。一実施形態では、１つまたは複数の抗レトロウイルス剤は、侵入阻害剤、ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤、ヌクレオチド逆転写酵素阻害剤、非ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤、プロテアーゼ阻害剤、インテグラーゼ阻害剤、成熟阻害剤、及びそれらの組み合わせを含むが、これらに限定されない。一実施形態では、１つまたは複数の追加の抗レトロウイルス剤は、ラミブジン、エファビレンツ、ラルテグラビル、ビベコン、ベビリマット、アルファインターフェロン、ジドブジン、アバカビル、ロピナビル、リトナビル、テノホビル、テノホビルジソプロキシル、テノホビルのプロドラッグ、エムトリシタビン、エルビテグラビル、コビシスタット、ダルナビル、アタザナビル、リルピビリン、ドルテグラビル及びそれらの組み合わせを含むが、これらに限定されない。
一実施形態では、１つまたは複数の免疫系抑制剤は、シクロスポリン、タクロリムス、プレドニゾロン、ヒドロコルチゾン、シロリムス、エベロリムス、アザチオプリン、ミコフェノール酸、メトトレキサート、バシリキシマブ、ダクリズマブ、リツキシマブ、抗胸腺細胞グロブリン、抗リンパ球グロブリン、及びそれらの組み合わせを含むが、これらに限定されない。
以下の実施例は、詳細に本発明をさらに例証するが、その範囲を限定するとは解釈されない。
実施例１−セニクリビロックメシレート組成物
酸可溶化剤の同一性を除いて同一であった一連のセニクリビロックメシレート組成物を、Ｋｅｙの１Ｌのボウル造粒機で湿式造粒法によって調製し、その後トレイ乾燥し、ふるい分けし、混合し、カーバープレスで錠剤へと圧縮した。製剤の組成を表２に示す。
この錠剤をビーグル犬に投与した。対照として経口液剤も投与した。製剤及び経口液剤の絶対的バイオアベイラビリティを決定し、図２に示す。結果は、フマル酸を伴うセニクリビロックメシレートが、試験した他の可溶化剤のいずれよりも有意に高いバイオアベイラビリティを有することを示す。
実施例２：セニクリビロックメシレート組成物
セニクリビロックメシレート、フマル酸、微結晶セルロース、架橋型カルボキシメチルセルロースナトリウム、及びステアリン酸マグネシウムを混和し、乾燥造粒し、製粉し、顆粒外の微結晶セルロース、架橋型カルボキシメチルセルロースナトリウム、及びステアリン酸マグネシウムと混ぜ、１０ｋＰを越える硬度及び０．８％ｗ／ｗ未満の破砕性を有する錠剤へと圧縮した。結果得られた錠剤は表３に示す組成を有した。
例示として、実施例２ｂの成分の濃度割合（％）及び錠剤あたりの質量を表４に提供する。
実施例３：セニクリビロックメシレート組成物
セニクリビロックメシレート、微結晶セルロース、架橋型カルボキシメチルセルロースナトリウム、及びステアリン酸マグネシウムを混和し、乾燥造粒し、乾燥させ、製粉し、顆粒外の微結晶セルロース、架橋型カルボキシメチルセルロースナトリウム、フマル酸、コロイド状二酸化ケイ素、及びステアリン酸マグネシウムと混ぜ、１０ｋＰを越える硬度及び０．８％ｗ／ｗ未満の破砕性を有する錠剤へと圧縮した。結果得られた錠剤は、表５に示す組成を有した。
特に、表５の製剤は、表３ｂのものと同じ成分比を有しており、各錠剤に使用される成分の総量においてのみ異なる。したがって、表４は、（遊離塩基に基づいて）１５０ｍｇのセニクリビロックを有する錠剤を示すが、表ＣＣ−１は、表４に示す実施例２ｂの１５０ｍｇの錠剤と同じ成分比で、（遊離塩基に基づいて）２５ｍｇのセニクリビロックを有する錠剤を示す。
実施例４−基準物
表６のクエン酸をベースとする製剤を以下のように調製した。セニクリビロック、ヒドロキシプロピルセルロース、マンニトール及び架橋型カルボキシメチルセルロースナトリウムを混和し、湿式造粒し、乾燥させ、製粉し、微結晶セルロース、架橋型カルボキシメチルセルロースナトリウム、クエン酸、コロイド状二酸化ケイ素、タルク及びステアリン酸マグネシウムと混ぜた。得られた混合物を、１０ｋＰを越える硬度及び０．８％ｗ／ｗ未満の破砕性を有する錠剤へと圧縮した。この錠剤を、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリエチレングリコール８０００、二酸化チタン及び黄色酸化鉄で被覆した。このようにして生成した被覆された錠剤は、米国特許出願公開第２００８／０３１９４２号に開示されているものと実質的に同一であった（例えば、表３を参照されたい）。
実施例５−基準物
セニクリビロック及びヒプロメロース酢酸エステルコハク酸エステル（Ｈｙｐｒｏｍｅｌｌｏｓｅ Ａｃｅｔａｔｅ Ｓｕｃｃｉｎａｔｅ）をメタノールに溶解し、噴霧乾燥して、重量基準で（セニクリビロック遊離塩基の重量に基づいて）２５％のセニクリビロックを含有する微粉にした。この粉末をコロイド状二酸化ケイ素、微結晶セルロース、マンニトール、ラウリル硫酸ナトリウム、架橋型カルボキシメチルセルロースナトリウム及びステアリン酸マグネシウムと混和した。この混和物を、１０ｋＰを越える硬度及び０．８％ｗ／ｗ未満の破砕性を有する錠剤へと圧縮した。錠剤の最終的な組成を表７に示す。
実施例６：ＣＶＣ製剤のバイオアベイラビリティ（Ｂｉｏａｖａｉｌｉｂｉｌｉｔｙ）
ビーグル犬における実施例３の錠剤の絶対的バイオアベイラビリティを、実施例４及び５の錠剤のそれと、ならびにセニクリビロックメシレートの経口液剤及びセニクリビロックメシレート粉末を含有するゼラチンカプセルの両方と比較した。結果を表８に示す。
この実施例は、フマル酸を有する乾式造粒した錠剤におけるセニクリビロック（実施例３）のバイオアベイラビリティが、経口液剤のものと実質的に類似しており、フマル酸を有する湿式造粒した錠剤（実施例１ｂ）またはクエン酸を有する湿式造粒した錠剤（実施例４）におけるセニクリビロックのバイオアベイラビリティよりも有意に高く、ＨＰＭＣ−ＡＳを有する噴霧乾燥した分散体中に非晶性のセニクリビロックを有する錠剤（実施例５）におけるセニクリビロックの２倍を超えることを示す。結晶性ＡＰＩの乾式造粒が、湿式造粒及び非晶性の噴霧乾燥した分散体よりもバイオアベイラビリティの有意な増大をもたらすことを疑う理由がなかったので、これらの結果は驚くべきことである。これは、非晶性の噴霧乾燥した分散体が、難水溶性薬物のバイオアベイラビリティを増大させるのにしばしば使用されるので、特にそうである。これらの結果は、フマル酸がクエン酸より遅い溶解時間を有し、ＣＶＣ ＡＰＩに対して、より低い酸の質量比（クエン酸：ＡＰＩについて３：１対フマル酸：ＡＰＩについて１．０６：１）で使用されたので、さらに驚くべきことである。したがってそれゆえ、フマル酸が、ＣＶＣについて、クエン酸よりも効果的な可溶化剤とされたことは驚くべきことであった。
実施例７：ＣＶＣ製剤の加速安定性
実施例２ｂの錠剤の加速安定性を、４０℃での７５％相対湿度の環境への曝露を介して実施例１ｂ、４及び５の錠剤のそれと比較した。全ての錠剤は、試験の間、乾燥剤と包装した。図３に示すように、実施例２ｂの錠剤は、驚いたことに、他の湿式造粒された錠剤よりもはるかに安定であり、噴霧乾燥した分散体の錠剤と同様に安定である。実施例２ｂの錠剤及び実施例４の錠剤の間の安定性のこの差は、この２つの間の有意な差が、製剤を製造する方法（乾式造粒対湿式造粒）のみであるために、特に驚くべきことである。これらの結果は、造粒方法がセニクリビロックのバイオアベイラビリティ及び安定性の両方に効果を有し得ることは以前に知られていなかったので、さらに驚くべきことである。
実施例８：ＣＶＣ製剤の安定性
実施例２及び３の錠剤の安定性を、４０℃での７５％相対湿度の環境に６週間、錠剤を曝露することにより試験した。全ての錠剤は、試験の間、乾燥剤と包装した。結果を表９に示し、これは錠剤がこれらの条件下で非常に安定していることを示す。
実施例９：ＣＶＣ製剤の安定性
２５℃での動的蒸気吸着等温線は、実施例３及び４の錠剤の安定性とセニクリビロックメシレートのそれとを相関する。吸着は、０％相対湿度から９０％相対湿度まで５％間隔で実施した。各間隔で、１０分以上３０分以下にわたって各試料を平衡化した。平衡化は、質量増大速度が１分あたり０．０３％ｗ／ｗ以下であったとき、または３０分後のどちらか短い方で止めた。図４にあらわす結果は、実施例２ｂの錠剤が実施例４のものよりも有意に安定であることを示す。この結果は、実施例４よりも吸湿性が有意に低い実施例３と矛盾がない。実施例２ｂと比較した際の実施例４の吸湿性の増大は、実施例４の部分的なゲル化及びその後の安定性の低下を引き起こす可能性のある、可動水の高い含量と関係があり得る。
実施例１０：ＣＶＣ製剤のバイオアベイラビリティ
ビーグル犬の異なる胃状態において、実施例３の錠剤のバイオアベイラビリティを、実施例５のもの及びゼラチンカプセル中のセニクリビロックメシレート粉末のものと比較した。バイオアベイラビリティは、そのぞれぞれが胃のｐＨを変える異なる前処置状態下で試験した。具体的には、ペンタガストリンの前処置は最も低いｐＨをもたらし、無処置は中間のｐＨをもたらし、ファモチジン処置は、最も高いｐＨをもたらす。
図５にあらわす結果は、試験した全ての条件下で、実施例３の錠剤が、より高いバイオアベイラビリティを有することを示す。実施例３のバイオアベイラビリティは、ペンタガストリン処置したイヌと未処置のイヌの間であまり変動しなかったが、実施例４は、ペンタガストリン処置したイヌ（最も低い胃のｐＨ）のものと比較して、絶食させた、無処置のイヌ（中間の胃のｐＨ）においてバイオアベイラビリティの有意な低下を示した。胃の酸性度を抑制し、胃のｐＨを上昇させるＨ２受容体アゴニストであるファモチジンによる前処置は、全ての試料についてバイオアベイラビリティを低下させたが、実施例３についての低減は、実施例４についてのものよりもはるかに少なかった。
これらの結果は、乾式造粒したフマル酸を有するセニクリビロック組成物のさらなる予期しない利益を示す。具体的には、このような製剤の薬物動態は、ヒトの胃の可能なｐＨ状態の全範囲にわたって投与した場合、噴霧乾燥した分散体（実施例４）のものほど変動しない。アタザナビルなどの他の弱塩基性抗レトロウイルス薬のバイオアベイラビリティは胃のｐＨに大きく影響されるので、この結果は予期されず、驚くべきことである。このような薬物に関して、無酸症の患者などの疾患または医学的状態により、または制酸薬、プロトンポンプ阻害剤若しくはＨ２受容体アゴニストなどの薬物の共投与により引き起こされ得る胃のｐＨの変化は、バイオアベイラビリティを治療レベル以下に低下させ得る。実施例３の、乾燥造粒した、フマル酸ベースのセニクリビロックメシレート製剤が、胃のｐＨ変化に合わせてバイオアベイラビリティを変化させる傾向がより少ないことを示すこれらの結果は、実施例３が、胃のｐＨレベルの変動を有する、またはそれを有する可能性が高い患者において使用することができる、より確固たる製剤であることを示す。
実施例１１ａ〜１１ｃ：セニクリビロックメシレート及びラミブジン製剤の調製
表１０のセニクリビロックメシレート及びラミブジンの製剤を以下のように調製した。まず、顆粒内成分を混和し、乾燥造粒して、組成物を乾燥造粒した混和物として形成した。この乾燥造粒した混和物を、次いで、顆粒外成分とさらに混和して、混合物を形成した。混合物を錠剤へと圧縮した。１５０ｍｇ ＣＶＣ強度錠剤（実施例１１ｂ及び１１ｃ）の、ビーグル犬におけるセニクリビロック（ＣＶＣ）及びラミブジン（３ＴＣ）の絶対的バイオアベイラビリティを測定した。結果を図６に示す。
実施例１２：ＮＡＳＨのマウスモデルにおける二重ＣＣＲ２及びＣＣＲ５拮抗薬セニクリビロックの抗線維性及び抗炎症性活性
背景：非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）は、脂肪蓄積、慢性炎症（炎症促進性単球及びマクロファージを含む）を特徴とし、線維症が存在するとき、肝硬変または肝細胞癌をもたらし得る。現在、ＮＡＳＨに対して承認された治療法はない。エビデンスにより、Ｃ−Ｃケモカイン受容体（ＣＣＲ）２型及びその主なリガンドである、単球走化性タンパク質−１が肝臓における炎症促進性単球の動員に寄与することが示されている。セニクリビロック（ＣＶＣ）は、１４３人のＨＩＶ−１感染成人における４８週間の第２ｂ相試験において好ましい安全性と耐容性を示した経口の、強力な、二重ＣＣＲ２／ＣＣＲ５拮抗薬である（ＮＣＴ０１３３８８８３）。ＣＶＣは、肝細胞癌をもたらす食餌誘発性ＮＡＳＨのマウスモデルにおいて評価され；モデルの第一の線維性段階からのデータを表す。
方法：ＮＡＳＨを、生後２日での２００μｇストレプトゾトシンの単回注射（グルコース制御障害を引き起こす）、その後４週齢からの高脂肪食によって雄マウスにおいて誘発した。６〜９週齢の、動物の３つの群（ｎ＝６／群）に、０（ビヒクル）、２０（低用量）または１００（高用量）ｍｇ／ｋｇ／日のＣＶＣ用量を、１日２回の強制経口投与を介して投与した。動物を９週齢で屠殺し、肝臓の生化学、遺伝子発現、及び組織学的評価を実施した。
結果：ＣＶＣ処置は、体重または肝臓重量、全血グルコース、または肝臓トリグリセリドに効果を有さなかった。平均（±標準偏差）アラニン・アミノトランスフェラーゼレベルは、対照と比較して両ＣＶＣ処置群において有意に低減し（それぞれ、低用量、高用量及びビヒクルに対して、５８±１２、５１±１３及び１３３±８０Ｕ／Ｌ；ｐ＜０．０５）、肝臓ヒドロキシプロリンは処置群において低減する傾向を示した。リアルタイムＲＴ−ＰＣＲにより、全肝臓ライセートにおけるコラーゲン１型ｍＲＮＡは、ＣＶＣ処置で２７〜３７％低減した。（シリウスレッド染色による）線維症面積の割合（％）は、対照と比較してＣＶＣ処置により有意に低減した（ｐ＜０．０１）：血管周囲腔を含んだ場合、それぞれ、２０ｍｇ／ｋｇ／日、１００ｍｇ／ｋｇ／日及び対照に対して、０．６６％±０．１６、０．６４％±０．１９及び１．１０％±０．３１；血管周囲腔を引いた場合、それぞれ０．２９％±０．１４、０．２０％±０．０６、及び０．６１％±０．２３。重要なことに、組織学的非アルコール性脂肪性肝疾患活性スコア（このモデルの無処置マウスでスコアは０である）は、ＣＶＣ処置で有意に低減し（それぞれ、低用量、高用量及びビヒクルに対して、４．０±０．６、３．７±０．８及び５．３±０．５；ｐ＜０．０５）、これは、主に炎症及び風船様腫大スコアの低下によるものである。ヒトにおいて以前示されたように、血漿単球走化性タンパク質−１レベルにおけるＣＶＣ用量に関連する代償性増加がマウスにおいて観察され（それぞれ、低用量及び高用量に対して、１．１倍及び１．５倍増加）、これはＣＣＲ２の拮抗効果に矛盾しなかった。
結論：これらのデータは、現在ＨＩＶ−１に対するヒト治験での被験薬であるＣＶＣが、ＮＡＳＨのマウスモデルにおいて抗線維性及び抗炎症性活性を有することを示し、これは臨床研究を保証する。これらの知見は、ＣＣＲ２／単球走化性タンパク質−１軸を破壊することがＮＡＳＨに対する新規処置である可能性があるというさらなるエビデンスを提供する。
実施例１３：チオアセトアミド誘発性肝臓線維症及び肝硬変のラットモデルにおける、二重ＣＣＲ２／ＣＣＲ５拮抗薬である、セニクリビロックの有意な抗線維化活性
背景：Ｃ−Ｃケモカイン受容体（ＣＣＲ）２及び５型は、肝臓における炎症及び線維形成に寄与する、炎症促進性単球及びマクロファージ、クッパー細胞及び肝星細胞（ＨＳＣ）上に発現する。セニクリビロック（ＣＶＣ；新規の、強力な、経口、二重ＣＣＲ２／ＣＣＲ５拮抗薬）は、１４３人のＨＩＶ−１感染成人における４８週間の第２ｂ相試験において好ましい安全性／耐容性を有した（ＮＣＴ０１３３８８８３）。この試験は、チオアセトアミド（ＴＡＡ）誘発性傷害により肝線維症が出現しているラットにおける、ＣＶＣのインビボ抗線維化効果及び疾患発症に対する処置介入のタイミングを評価する。
方法：線維症を、雄Ｓｐｒａｇｕｅ−ＤａｗｌｅｙラットにＴＡＡ １５０ｍｇ／ｋｇ ３回／週を８週間腹腔内投与することにより誘発した。ラット（ｎ＝４〜８／群）は、ＣＶＣ ３０ｍｇ／ｋｇ／日（ａ）、ＣＶＣ １００ｍｇ／ｋｇ／日（ｂ）またはビヒクル対照（ｃ）を、ＴＡＡと同時に最初の８週間（群１；早期介入）、第４〜８週中（群２；線維症の出現）またはＴＡＡ投与完了後の第８〜１２週中（群３；肝硬変回復）に受けた。肝臓の生化学、遺伝子発現及び組織学的評価を実施した。
結果：ＴＡＡと同時に始めたとき（群１）、３０ｍｇ（群１ａ）及び１００ｍｇ（群１ｂ）でのＣＶＣは、コラーゲン形態計測により評価して、線維症を有意に低下させた（それぞれ４９％及び３８％低下；ｐ＜０．００１）。コラーゲン１型のタンパク質レベルは、それぞれ群１ａ及び１ｂに対して３０％及び１２％低下し、一方でα−ＳＭＡはそれぞれ１７％及び２２％低下した。処置をＴＡＡ誘発性傷害の４週間後に開始したとき（群２）、統計学的に有意な抗線維化効果がＣＶＣ ３０ｍｇについて観察された（群２ａ、コラーゲンにおいて３６％低下；ｐ＜０．００１）が、ＣＶＣ １００ｍｇ（群２ｂ）については観察されなかった。処置を第８週（肝硬変存在）に開始し、４週間継続したとき（群３）、線維形成性遺伝子発現または線維症へのＣＶＣの有意な効果はなかった。
結論：ＣＶＣは、ＴＡＡに起因する非肝硬変性肝線維症において強力な抗線維化剤である。該薬物は早期介入（群１）及び線維症出現時（群２ａ）においては有効であったが、肝硬変がすでに確立された場合には有効でなかった（群３）。
実施例１４：セニクリビロックは低いナノモル濃度で高いＣＣＲ５受容体占有率を達成する
背景：セニクリビロック（ＣＶＣ）は、未処置成人におけるＨＩＶ−１感染の処置についての第２ｂ相評価を完了している、新規の、１日１回の、強力な、ＣＣＲ５及びＣＣＲ２拮抗薬である（ＮＣＴ０１３３８８８３）。この試験の目的は、ＣＶＣ、ＢＭＳ−２２（ＴＯＣＲＩＳ、ＣＣＲ２拮抗薬）及び承認されたＣＣＲ５拮抗薬である、マラビロック（ＭＶＣ）での処置後のインビトロ受容体占有率及び生物学を評価することであった。
方法論：５ＨＩＶ＋及び５ＨＩＶ−対象からのＰＢＭＣを、ＣＶＣ、ＢＭＳ−２２またはＭＶＣとインキュベートし、その後、無処置またはＲＡＮＴＥＳ（ＣＣＲ５リガンド）若しくはＭＣＰ−１（ＣＣＲ２リガンド）での処置のいずれかを行った。ＣＣＲ５またはＣＣＲ２内在化を阻害する各薬物の能力を評価した。ＣＣＲ５及びＣＣＲ２の細胞表面発現をフローサイトメトリーにより評価し、蛍光値を１細胞あたりの蛍光分子数（ＭＥＳＦ）に変換した。
結果：ＲＡＮＴＥＳの不存在下で、ＣＶＣ及びＭＶＣは両方とも、ＣＣＲ５の細胞表面発現を増加させた。この効果は、ＨＩＶ陰性対象（ＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞）においてはるかに大きい程度まで見られた。ＣＶＣは、ＲＡＮＴＥＳ誘発性ＣＣＲ５内在化を、ＭＶＣよりも低い有効濃度で防いだ。ＣＶＣでのＣＣＲ５が飽和に達する有効濃度は、ＣＤ４＋Ｔ細胞について３．１ｎＭ、及びＣＤ８＋Ｔ細胞について２．３ｎＭであった（それぞれ約９１％及び約９０％受容体占有率）。ＭＶＣは、ＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞の両方について１２．５ｎＭで飽和に達し、これはそれぞれ約８６％及び約８７％受容体占有率を表す。ＣＶＣ及びＭＶＣは、高いが不完全なＣＣＲ５の飽和を達成し、これは、ＲＡＮＴＥＳの不在下両薬剤で増加したＣＣＲ５発現の観察により増幅され得る効果である。ＭＣＰ−１の不存在下、ＣＶＣは、ＣＣＲ２内在化を誘発し、単球上の細胞表面発現を低減させた。ＢＭＳ−２２は、ＣＣＲ２細胞表面発現を微かに増加させた。ＣＶＣは、ＭＣＰ−１誘発性ＣＣＲ２内在化をＢＭＳ−２２よりも低い濃度で防いだ。単球ＣＣＲ２の飽和は、６ｎＭのＣＶＣで達成され、これは、約９８％のＣＣＲ２占有率を表す。８０％を超える受容体占有率に達するには、１．８ｎＭのＣＶＣに対して、平均で１８ｎＭのＢＭＳ−２２が必要とされた。
結論：ＣＶＣは、インビトロでＭＶＣよりもＲＡＮＴＥＳ誘発性ＣＣＲ５内在化を（より低い濃度で）より容易に防いだ。これは、ＣＶＣがインビボでＭＶＣよりもＲＡＮＴＥＳによる細胞活性化の防止においてより有効であり得ることを示す。処置対象におけるベースラインＣＣＲ５発現レベルは、インビボでのＣＣＲ５拮抗薬活性の決定要因であり得る。ＣＶＣは、インビトロで低いナノモル濃度で単球上のＣＣＲ２の約９８％受容体占有率を達成し、ＭＣＰ−１の不在下で単球上のＣＣＲ２発現を低下させた。発現の低下と対になったＣＶＣによるＣＣＲ２の高飽和は、臨床においてＣＶＣで観察される強力なＣＣＲ２遮断を説明し得る。ＣＶＣは、インビトロで強力な免疫調節性活性を有し、慢性ＨＩＶ感染における重要な併用免疫療法性及び抗レトロウイルス性であり得る。
実施例１５：ＣＶＣはＨＩＶ侵入を遮断するが、ＭＶＣのように細胞外空間へのＨＩＶの再分配はもたらさない
背景：インビボでは、ＣＶＣは、ＣＣＲ５好性ウイルス７を保有する処置経験済み個体の単独療法中に有効性を示している。第ＩＩｂ相臨床試験（６５２−２−２０２；ＮＣＴ０１３３８８８３）では、ＣＶＣは、それぞれ両方がエムトリシタビン（ＦＴＣ）及びテノホビル（ＴＤＦ）と組み合わせて投与されたとき、２４週（一次解析）で非ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤（ＮＮＲＴＩ）エファビレンツ（ＥＦＶ）に対して同様の有効性、非ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤（ＮＮＲＴＩ）エファビレンツ（ＥＦＶ）よりも優れた毒性プロファイルを、好ましい安全性及び耐容性を伴って、実証した。我々は、試験２０２（実施例２２）におけるＣＶＣの抗レトロウイルス有効性が、ＭＶＣで観察されるリバウンド現象の結果として過小評価されている可能性があると仮説を立てた。従って、我々は、試験の第２４週目でウイルス学的成功を達成した３０対象から保存したＰＢＭＣにおける細胞内ＨＩＶ ＤＮＡ下落を測定することにより試験２０２（実施例２２）のエキソビボでのサブ解析を実行した。我々は、ＣＶＣまたはＭＶＣが引き起こす可能性がある任意の無細胞ビリオン再分配の程度を決定する及び比較するためにインビトロアッセイも行った。
ここで、我々は、ＣＶＣがウイルス粒子リバウンドを誘発しないことを示す。実際、細胞内ＤＮＡにおいて同等の下落が、ＣＶＣまたはＥＦＶのいずれかで処置された個体において見られた。これは、血漿ウイルス負荷がＣＶＣ処置成功の正確な尺度であることを示す。構造モデルは、ＭＶＣ及びＣＶＣで得られた結果間の差についての潜在的な説明を提供する。
方法：細胞。ＣＤ４、ＣＣＲ５、及びＣＸＣＲ４を発現するＰＭ−１細胞を、１０％ウシ胎児血清を含有するＲＰＭＩ−１６４０培地（Ｒ１０培地）内に３７℃（Ｃ）、５％ＣＯ２で維持した。トランスフェクションに使用した２９３Ｔ細胞は、１０％ＦＢＳ、Ｌ−グルタミン、及び抗生物質のＤＭＥＭ（Ｄ１０培地）内に３７℃（Ｃ）、５％ＣＯ２で維持した。ウイルスストック。ＨＩＶ−１ ＢａＬウイルスを、２９３Ｔ細胞にプラスミドｐＷＴ／ＢａＬをトランスフェクトすることによって産生した。リポフェクタミン２０００をトランスフェクション剤として使用した。培養物上清をトランスフェクションの４８時間後に回収し、０．４５μｍ孔フィルターを通して濾過し、５０単位のベンゾナーゼ／ｍｌのウイルスストックで２０分間、３７℃（Ｃ）で処理して、混入プラスミドＤＮＡを除去した。ウイルスストックを−８０℃（Ｃ）で凍結して、ベンゾナーゼ活性を停止させた。ベンゾナーゼ処理したウイルスストックを臍帯血単核細胞（ＣＢＭＣ）内で増殖させた。ＣＢＭＣを、Ｒ１０培地にてフィトヘマグルチニン（ＰＨＡ−Ｍ）で７２時間刺激し、その後ＨＩＶ−１ ＢａＬに感染させた。ウイルスの増幅培養物を、続いて、インターロイキン２（ＩＬ−２）を補充したＲ１０において成長させ、３７℃（Ｃ）、５％ＣＯ２でインキュベートした。
感染：我々は、阻害濃度のＣＶＣ（２０ｎＭ）及びＭＶＣ（５０ｎＭ）の存在下でＰＭ−１細胞をＨＩＶ−１ ＢａＬに曝露した。両方の薬物を、ＰＭ−１細胞と１時間３７℃（Ｃ）でインキュベートし、その後ウイルスを加えた。５００ｎｇの、ＨＩＶ−１ ＢａＬのｐ２４抗原を、１ｍｌのＲ１０培地中５×１０５細胞あたりでインキュベートした。本文において「無細胞」と記載される、ウイルスのみの対照を使用してウイルス減衰を測定した。ウイルス吸着を、無薬物対照において測定し、これは、５００ｎｇの、ＨＩＶ−１ ＢａＬのｐ２４Ａｇを、薬物処置の不存在下で３７℃（Ｃ）で１時間プレインキュベートした５×１０５個のＰＭ−１細胞あたりに加えたことによる。各薬物処置及び対照を、二重で行った。ウイルスＲＮＡを、ＱＩＡａｍｐウイルスＲＮＡミニキットを製造業者の指示に従って使用して、１４０μｌの上清液から抽出した。試料を分析まで−８０℃（Ｃ）で保存した。上清ウイルス負荷を、プライマーＵＳ１ＳＳＦ（５’−ＡＡＣＴＡＧＧＧＡＡＣＣＣＡＣＴＧＣＴＴＡＡ−３’）、ＵＳ１ＳＳＲ（５’−ＴＧＡＧＧＧＡＴＣＴＣＴＡＧＴＴＡＣＣＡＧＡＧＴＣＡ−３’）及びＵＳ１ＳＳプローブ（５’−（ＦＡＭ）ＣＣＴＣＡＡＴＡＡＡＧＣＴＴＧＣＣＴＴＧＡＧＴＧＣＴＴＣＡＡ）を用いた定量的リアルタイム逆転写ＰＣＲ（ｑＲＴ−ＰＣＲ）及びＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎのｑＲＴ−ＰＣＲスーパーミックスキットを使用して測定した。サイクリングパラメータは：５０℃を１５分間、９５℃を１０分間、その後、５０サイクルの９５℃を１５秒間、及び６０℃を１分間。全ての値は、２つの独立した実験にわたる複製テストの結果である。ＲＮＡコピー数を、ｐＢａＬ／ｗｔの１０倍連続希釈の使用により定量化して、各アッセイについて標準曲線を生成し、以前の試験から既知のコピー数を有する試料に対して較正した。
患者試料：末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）試料を、ＣＣＲ５好性ウイルスを保有するＨＩＶ−１に感染した未処置患者においてエムトリシタビン／テノホビルジソプロキシルフマル酸塩（ＦＴＣ／ＴＤＦ）と組み合わせたＣＶＣ（１００ｍｇまたは２００ｍｇ）またはＥＦＶの有効性、安全性、及び耐容性を比較する第ＩＩｂ相臨床治験、試験２０２の第２４週でウイルス学的成功を達成した３０患者（それぞれ、ＣＶＣ １００ｍｇ、ＣＶＣ ２００ｍｇ及びＥＦＶで１０、１３及び７）から獲得した。ベースライン及び２４週での試料を、ＣＶＣまたはＥＦＶのいずれかを受けるように無作為に割り当てられた、２００細胞以上のＣＤ４数／μｌ、１００、０００未満だが１、０００より多いウイルスＲＮＡコピー／ｍｌのベースラインウイルス負荷を有する参加者から採取した。
細胞内ＤＮＡ ｑＰＣＲ。全ＤＮＡを抽出し、定量化し、−８０℃（Ｃ）で保存した。細胞内ストロングストップＤＮＡレベルを、上述のＵＳ１ＳＳプライマー／プローブセットを用いて定量化した。細胞内完全長ＤＮＡレベルを、ＵＳ１ＦＬプライマー／プローブセット（フォワード：５’−ＡＡＣＴＡＧＧＧＡＡＣＣＣＡＣＴＧＣＴＴＡＡ；リバース：５’−ＣＧＡＧＴＣＣＴＧＣＧＴＣＧＡＧＡＧＡ；プローブ：５’−［ＦＡＭ］−ＣＣＴＣＡＡＴＡＡＡＧＣＴＴＧＣＣＴＴＧＡＧＴＧＣＴＴＣＡＡ）を使用して定量化した。両方のＤＮＡレベルを、ＧＡＰＤＨプライマー／プローブセット（フォワード：５’−ＡＣＣＧＧＧＡＡＧＧＡＡＡＴＧＡＡＴＧＧ；リバース：５’−ＧＣＡＧＧＡＧＣＧＣＡＧＧＧＴＴＡＧＴ；プローブ：５’−（ＶＩＣ）−ＡＣＣＧＧＣＡＧＧＣＴＴＴＣＣＴＡＡＣＧＧＣＴ）を用いて多重化して、ＤＮＡインプットを正規化し、試料完全性を検証した。
統計学的解析：マン・ホイットニー検定を使用して、全３つの処置群に関するインビトロ細胞内ＨＩＶ ＤＮＡレベルを解析した。全てのデータは、Ｐｒｉｓｍ ５ソフトウェアを使用して解析した。
ＣＣＲ５におけるセニクリビロックの分子ドッキング
ＣＣＲ５ケモカイン受容体（蛋白質構造データバンク識別番号［ＰＤＢ ＩＤ］４ＭＢＳ）の結晶構造を、構造バイオインフォマティクス研究共同体（ＲＣＳＢ）蛋白質構造データバンクを通して獲得し、ドッキング標的として使用した。ＣＣＲ５受容体拮抗薬であるセニクリビロック（以前は、ＴＡＫ−６５２／ＴＢＲ−６５２）の構造を、ＰｕｂＣｈｅｍから獲得し、リガンドとして使用した。リガンド−ドッキング構造の極小化を、ＵＣＳＦキメラの使用により促進し、それはＣＣＲ５及びＣＶＣをドッキング計算のためのインプットとして用意し、それは、ＣＣＲ５の７回膜貫通型（７ＴＭ）α−へリックス受容体キャビティにおけるリガンドの配向を予測する。ドッキング計算を実施し、最大サイズのグリッドボックスを使用して、全ての可能なドッキング部位をＣＣＲ５内へと含んだ。結合部位は、７ＴＭキャビティ（残基Ｇｌｕ２８３及びＴｙｒ１０周り）から１５Å未満の全残基からなる。ドッキング結果を処理して、分子間相互作用を同定した。試験９ポーズをさらなる解析のために保持した。ドッキングシステムの精度を検証するために、同じ方法を使用してＭＶＣをＣＣＲ５にドッキングし、結晶構造に関してその配向を決定した。ＰｙＭＯＬを使用して算出された、観察された結晶構造とＡｕｔｏＤｏｃｋ Ｖｉｎａから獲得された予測立体構造間の平均二乗偏差（ＲＭＳＤ）は、０．２７５Åであり、これはプロトコルが健全であったことを示した。
結果
まず、我々は、試験２０２臨床治験中に獲得されたウイルス負荷の測定値を検証するためにＨＩＶ細胞内ＤＮＡを定量化した。この臨床治験において参加者から単離されたＰＢＭＣ中の完全長細胞内ＨＩＶ ＤＮＡレベル（早期逆転写の指標）のエキソビボでの解析は、第２４週で全群（ＣＶＣ １００ｍｇ、ＣＶＣ ２００ｍｇ、ＥＦＶ ６００ｍｇ）を通して類似した（図７Ａ）。ベースラインからの平均倍率変化は、それぞれＣＶＣ群１００ｍｇ（ｎ＝１０）及びＣＶＣ ２００ｍｇ（ｎ＝１１）について、０．６４３及び０．７８７であった。ＥＦＶ ６００ｍｇ群（ｎ＝７）は、２４週で０．８２５のベースラインからの平均倍率変化を有した。差は、統計学的に有意ではなかった。
次に、ストロングストップ細胞内ＨＩＶ ＤＮＡレベル（後期逆転写の指標）を、第２４週で完全長レベルと同時に測定した（図７Ｂ）。ベースラインからの平均倍率変化は、ＣＶＣ １００ｍｇ群については０．４９、ＣＶＣ ２００ｍｇ群については０．６３、及びＥＦＶ ６００ｍｇ群については１．０１であった。平均は、統計学的に有意でなかった。
ＣＶＣ及びＭＶＣ曝露後の細胞外ウイルスレベルを測定するインビトロ実験も行った。培養液中のウイルスのレベルを、侵入阻害剤に曝露された細胞の感染４時間後にｑＲＴ−ＰＣＲ及びＰ２４ ＥＬＩＳＡによって測定した。４時間後、ＭＶＣ処置細胞からの培養液（ベースライン：１．１９×１０１０コピー／ｍｌ、４時間：１．６７×１０１０コピー／ｍｌ）（図８Ａ）は、ベースラインと比較して、ＣＶＣ処置細胞が呈したものよりも高いＲＮＡレベルを呈した。（ベースライン：５０６ｎｇ／ｍｌ、４時間：５２０ｎｇ／ｍｌ）（図８Ｂ）。ＣＶＣ処置細胞からの培養液内のウイルスＲＮＡは、４時間後有意に変化しなかった（ベースライン：１．１９×１０１０コピー／ｍｌ、４時間：１．２６×１０１０コピー／ｍｌ）（図８Ａ）。Ｐ２４レベルはＣＶＣ処置で４時間後にベースラインから下降した（ベースライン：５０６ｎｇ／ｍｌ、４時間：１９２ｎｇ／ｍｌ）（図８Ｂ）無細胞及び無薬物対照について下降したウイルスＲＮＡは４時間後同様であった、それぞれ、１．１４×１０１０コピー／ｍｌ、及び１．１×１０１０コピー／ｍｌ（図８Ａ）。５０６ｎｇ／ｍｌのベースラインｐ２４レベルの後、４時間後の無細胞対照についてのｐ２４抗原レベルは１３８ｎｇ／ｍｌであった。ｐ２４無薬物対照レベルは２４４ｎｇ／ｍｌであった（図８Ｂ）。
ＣＶＣ及びＭＶＣ処置後の細胞外ウイルスレベルにおけるこれらの差は、ＨＩＶ−１ ＢａＬに感染する１時間前にＣＶＣまたはＭＶＣのいずれかに曝露されたＰＭ−１細胞における細胞内ストロングストップＨＩＶ ＤＮＡレベルを検査するよう、我々に促した。全ＤＮＡを４時間後に細胞ペレットから抽出した。ＣＶＣまたはＭＶＣ処置細胞の細胞内ストロングストップＨＩＶ ＤＮＡレベルを無薬物対照と比較した（図９）。我々は、無薬物対照と比較してＭＶＣ処置細胞において０．０２の相対的ＤＮＡレベルを観察し、一方でＣＶＣ処置細胞は、０．１のみの相対的細胞内ＤＮＡレベルを呈した。ＭＶＣ及びＣＶＣ処置細胞の相対的ＤＮＡレベル間の差は、有意であった。
ＭＶＣと複合化したＣＣＲ５ ７ＴＭの結晶構造（ＰＤＢ ＩＤ ４ＭＢＳ）が存在し、これを使用して結合ポケットにＣＶＣがドッキングされたＣＣＲ５のモデルを生成した。我々は、ＣＣＲ５にＭＲＶを再ドッキングすることによっても評価されたドッキングポーズを予測した；最も好ましいエネルギーを伴う上位のポーズは、適切な配向及び立体構造との重複を結晶構造内に有した（ＲＭＳＤは０．３Å未満）。インシリコのＣＣＲ５ドッキングシミュレーションは、ＣＶＣがリガンド−結合ポケットとしても知られるＣＣＲ５構造内の疎水性ポケットのみで結合することを示した（図１０）。上位の９ポーズのみをさらなる解析のために保持した。ＣＣＲ５へのドッキング後にＣＶＣが呈した３つの異なる立体構造があり、それらは３つの部位にクラスター化された（図１０Ａ、Ｂ）。第一の部位（部位１）は、疎水性ポケット内に深く広がり、多くの容量を占める（図１０Ａ）。第二の部位（部位２）は、部分的にポケットの真中に位置しているが、ＴＭ１及びＴＭ７の間でＣＣＲ５から外側に膨出してもいる（図１０Ａ）。第三の部位（部位３）では、いくつかのＣＶＣポーズが受容体キャビティの入り口付近に位置している。
ＣＣＲ５の細胞外ループ及び膜貫通ドメイン内での残基の部位特異的変異誘発は、ｇｐ１２０結合に関与する主要残基を同定している；異なる位置での変異は、ＣＣＲ５へのｇｐ１２０結合を無効にする、損なうまたは影響を与える。ＣＣＲ５内でのｇｐ１２０結合にとって重要であると同定された１３個の主要残基は、Ｔｙｒ３７、Ｔｒｐ８６、Ｔｒｐ９４、Ｌｅｕ１０４、Ｔｙｒ１０８、Ｐｈｅ１０９、Ｐｈｅ１１２、Ｔｈｒ１７７、Ｉｌｅ１９８、Ｔｒｐ２４８、Ｔｙｒ２５１、Ｌｅｕ２５５及びＧｌｕ２８３である。図１１は、結合ポケットにＣＶＣ（左）及びＭＶＣ（右）のドッキングポーズを有するＣＣＲ５の分子表面を示す。ＣＶＣ及びＭＶＣは、それぞれ、約１２８５及び１７９０Å２（ＰｙＭＯＬを使用して算出）の分子表面面積を有する。ＭＶＣは、結合ポケットの真中を占有する。ｇｐ１２０結合に重要であると決定された全１３個の残基は、ＰｙＭＯＬにより測定されて、ＭＶＣから４Å以内である（静電及び／または疎水性相互作用のためにこの試験で使用されたカットオフ距離）。対照的に、ドッキングされたＣＶＣポーズは、同じポケットを占有するが、ＭＶＣについて見られるように中央ではない（図１１）。むしろ、ＣＶＣはポケットの片側にシフトし（図１２Ａ／Ｂ）、ＣＶＣの４Å内のＣＣＲ５の残基のコンセンサスを決定した。ＣＶＣはＭＶＣよりも多くの表面積を占有するものの、ｇｐ１２０結合に重要な１３残基のうちの７つ、すなわちＴｙｒ３７、Ｔｒｐ８６、Ｔｙｒ１０８、Ｐｈｅ１０９、Ｉｌｅ１９８、Ｌｅｕ２５５及びＧｌｕ２８３のみがＣＶＣの４Å以内である。全体として、これらのシミュレーションは、ＣＣＲ５の結合ポケット内でＣＶＣがＭＶＣと同様の領域を占有することを示す。
考察：この試験では、我々は、ＨＩＶ侵入を防ぐ、ＣＶＣ及びＭＶＣの両方のＣＣＲ５拮抗薬が、細胞外ウイルスレベルに、差次的効果を有することを観察した。
未処置対象におけるどちらもＦＴＣ／ＴＤＦを用いたＣＶＣとＥＦＶを比較する第ＩＩｂ相二重盲検、ダブルダミー試験では、ＣＶＣ ２００ｍｇを受けている患者の７３％及びＥＦＶを受けている患者の７１％と比較して、ＣＶＣ １００ｍｇを受けている患者の７６％がウイルス学的成功（５０コピー／ｍｌ未満のＨＩＶ ＲＮＡ）を２４週で達成した。我々は、無細胞ビリオンがＭＶＣの存在下で侵入に失敗した後に標的細胞から追い払われ得るために、ＭＶＣが人為的にウイルス負荷を増加させる可能性があることを以前に示した。現在の試験は、ＣＶＣについて同じ効果が起こる可能性があるかどうか、侵入及び逆転写酵素阻害剤を比較したときに、細胞内ＤＮＡ測定値が抗ウイルス有効性をより正確に表し得るかどうか対処するように設定された。
実際、試験２０２処置群にわたる細胞内ＤＮＡレベルは、選択試料において２４週で同様であった（図７）が、これは治療企図（ＩＴＴ）解析中に観察された傾向を反映している。完全長ＨＩＶ−ＤＮＡレベルもまた、２４週で全群について同様であり、これは、ＣＶＣ及びＥＦＶについて同様の抗ウイルス有効性を示している。ストロングストップＨＩＶ ＤＮＡレベルにおける差が、ＣＶＣ及びＥＦＶ群の間で観察されたが、一方で両ＣＶＣ群は、ＥＦＶと比較してウイルス負荷においてより急な下降を呈した。ストロングストップＨＩＶ ＤＮＡレベルは、侵入阻害剤により直接影響をうけるため、この結果は予想された。ウイルス学的成功及び細胞内ＨＩＶ ＤＮＡレベルにおけるＥＦＶ及びＣＶＣ間の類似性は、この二重ＣＣＲ５及びＣＣＲ２阻害剤の抗ウイルス効力がウイルス負荷測定によってマスクされないことを示す。
我々は、ＣＶＣがインビトロでＭＶＣに見られるようにウイルス反発（ｖｉｒｕｓ ｒｅｐｕｌｓｉｏｎ）をもたらすことができるかどうかも調べた。ウイルス定量の二つの別々の測定、ｑＲＴ−ＰＣＲ及びｐ２４ ＥＬＩＳＡは、ＭＶＣ処置が感染後最大４時間まで細胞外ウイルスレベルを維持したことを示した。対照的に、ＣＶＣでの処置は、４時間でウイルスレベル下降の下降をもたらし、無薬物または無細胞対照のそれと同等であった（図８）。表向きは類似した抗ウイルス機構であるにもかかわらず、無細胞ウイルス及びＣＣＲ５間の相互作用という点でＣＶＣ及びＭＶＣ間に差があるように思われる。
インビトロでの細胞内ストロングストップＤＮＡのさらなる検査は、ＣＶＣがＭＶＣと比較してレベルにおいて微かだが有意な増加を引き起こしたことを示した（図９）。これは、ＣＣＲ５への両阻害剤の差次的効果に起因する可能性があり、これは同様にウイルス及び受容体間の解離速度に影響する。これは、ｇｐ１２０がＭＶＣと比較して、ＣＶＣ結合ＣＣＲ５とより永続的に関連し得る可能性を提起した。
我々は、ＣＣＲ５の結合部位を検査することによってどのようにＣＶＣが標的細胞内へのＨＩＶ侵入を阻害するのかを理解することも目的とした。操作したヒトＣＣＲ５構築物は、以前に、２．７Åの分解能でＭＣＶと複合化して結晶化されている。これは、ＣＣＲ５の完全長結晶構造ではないものの、インシリコドッキングアッセイでＣＣＲ５とのＣＶＣ相互作用をよりよく理解するために活用された。ＣＶＣについて全ての称されるドッキングモデルは、ＣＣＲ５の７ＴＭキャビティへの薬物の深部浸透を示し、これはＭＶＣにも見られる。しかしながら、ＣＶＣドッキングポーズは、細胞外ループ２に近接していなかったため、ＥＣＬ２はドッキング後アクセス可能のままであった。他のグループは、ＣＣＲ５のＮ末端及びＥＣＬ２ドメインの両方が、ＨＩＶ−１とＣＣＲ５の相互作用において決定的な役割を担うことを報告している。加えて、ｇｐ１２０のＶ３ループのステム領域は、Ｖ３クラウンがＥＣＬ２と及び結合ポケットの内側の残基と相互作用する一方でＣＣＲ５のＮ末端に結合すると報告されている。我々のモデルに基づき、我々は、ＥＣＬ２が該モデルにおいて曝露されていると思われるため、ＣＶＣはＥＣＬ２とのｇｐ１２０ Ｖ３ループ相互作用に直接干渉しないと想定することができる。
ＣＣＲ５が不活性状態のままである場合、ＣＶＣはＣＣＲ５活性化を遮断することができると考えられる。７ＴＭ領域内の、２つの残基、Ｔｙｒ３７及びＴｒｐ２４８は、ケモカインリガンドと結合する際にＣＣＲ５活性化にとって重要であると示されており、これはＭＶＣ結合にとっても重要であると示されている。ＭＶＣと同様、ＣＶＣの異なるドッキングポーズは疎水性結合部位に埋まっている。我々のモデルは、Ｔｒｐ２４８へのアクセスはＣＶＣにより遮断されていることを示す；Ｔｒｐ２４８は、ＣＣＲ５活性化に重要であると示されており、これはケモカイン受容体の不活性化を説明する。第二の仮説は、ＣＣＲ５へのＭＶＣの結合が、ＣＣＲ５の全体的立体構造変化を引き起こし得、これはＣＶＣの存在下では変化は少なくあり得る。
他のグループによる部位特異的変異誘発実験及び本試験にある組織培養実験及びドッキングシミュレーションに基づき、我々はＭＶＣが疎水性ポケットの中央を占有し、これがｇｐ１２０結合に重要なＣＣＲ５におけるいくつかの残基のアクセスを難しくしている可能性があるという仮説を立てた。これらの残基は、直接静電、または疎水性相互作用及び／または水媒介性水素結合を通したｇｐ１２０結合にとっても重要であり得る。対照的に、ＣＶＣは結合部位を占有し、ドッキングされたＣＶＣの存在下でもｇｐ１２０がＣＣＲ５結合に重要ないくつかの残基にまだアクセスすることができる可能性がある。この仮説は、ＥＣＬ２の全体を占有する一方でｇｐ１２０が部分的に受容体キャビティを満たすことを示す部位特異的変異誘発試験により支持される。しかしながら、ｇｐ１２０のＶ３ループがＣＣＲ５ ７ＴＭに浸透する程度は依然不明である。また、ＣＣＲ５からのｇｐ１２０の解離速度は、ＭＶＣがＥＣＬ２とＶ３ループの密接な関連を妨害するために、ＭＶＣの存在下で加速されることが報告されている。これらの試験に基づき、ＣＶＣは、ＥＣＬ２／Ｖ３相互作用にＭＶＣとは異なる効果を及ぼす可能性がある。ＣＶＣと複合化したＣＣＲ５の解離及び表面プラズマ共鳴試験、ならびに結晶化は、このトピックに価値ある情報を提供するだろう。
部位特異的変異誘発及び生化学試験は、ＣＶＣとのＣＣＲ５相互作用に重要な残基をはっきりとさせることが求められる。ＣＣＲ５のＮ末端の近位置を決定することも対象である。
本試験では、我々は、ウイルス負荷定量化がＣＶＣの抗ウイルス有効性の正確な尺度であること、及びＣＶＣによるウイルス侵入の阻害が細胞外環境への細胞表面からのウイルス粒子のリバウンドをもたらさないことを実証している。我々のインシリコ構造モデリングは、ＣＶＣとＭＶＣの機能的差異についての潜在的な説明を提供する。ＣＣＲ５へのｇｐ１２０結合にＣＶＣがどのように影響するのかを理解するためにさらなる試験が必要とされる。
実施例１６：腎線維症のマウスモデルにおける二重ＣＣＲ５／ＣＣＲ２拮抗薬セニクリビロックの抗線維化活性
背景：セニクリビロック（ＣＶＣ）は、新規の、経口、１日１回の、二重ＣＣＲ５／ＣＣＲ２拮抗薬であり、第２ｂ相ＨＩＶ開発を完了している（試験２０２；ＮＣＴ０１３３８８８３）。ＣＶＣは、４８週間にわたってＣＶＣで処置された１１５人のＨＩＶ−１感染成人を含む少なくとも１用量で処置されている５５５対象で好ましい安全性プロファイルを有する。近年、ＣＶＣは、食餌誘発性、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）のマウスモデル及びチオアセトアミド誘発性線維症のラットモデルにおいて有意な抗線維化活性を実証した。ここで、我々は片側尿管結紮（ＵＵＯ）により誘発した腎線維症の十分に確立されたマウスモデルにおいてＣＶＣを評価した。
方法論：試験動物を外科手術の前の日（−１日）に体重を対応させた処置群へと割り当てた。雄ＣＤ−１マウス（Ｎ＝５１；７〜８週齢）は、無菌開腹を介して、偽手術または完全右尿管結紮、すなわちＵＵＯを受けた（図１２）。０日目〜５日目：偽手術を受けたマウスは、ビヒクル対照（０．５％メチルセルロース＋１％Ｔｗｅｅｎ−８０）を１日２回の強制経口投与を介して受けた；永久的ＵＵＯ（ｐｅｒｍａｎｅｎｔ ＵＵＯ）を受けたマウスは、ビヒクル対照、ＣＶＣ ７ｍｇ／ｋｇ／日またはＣＶＣ ２０ｍｇ／ｋｇ／日のいずれかを１日２回の強制経口投与を介して受けた。別の群は、抗トランスフォーミング増殖因子ＴＧＦ−β１抗体、化合物１Ｄ１１（陽性対照）を３ｍｇ／ｋｇ／日で−１日目〜４日まで、１日１回腹腔内投与で、及びビヒクル対照を０〜５日目まで受けた。ＣＶＣ １００ｍｇ／ｋｇ／日群（Ｎ＝９）は、最初は試験に含まれていたが、瀕死となったために早期に終了した（５日目に到達した動物がいなかったために解析は実行されなかった）。２０００ｍｇ／ｋｇ／日までのＣＶＣ用量が、外科手術を含まないマウス毒性試験において十分に耐容性を示した。５日目に、動物に麻酔し、血液及び組織を回収してから屠殺した。
試験エンドポイント：試験エンドポイントには：ａ）体重及び腎臓重量；ｂ）閉塞性腎臓からの、ピクロシリウスレッド染色（腎皮質領域の６０〜７０％の試料採取を可能にするために光学顕微鏡検査［２００倍］を用いて盲検様式で獲得及び評価された１０画像／深度／腎臓）の組織学的定量的画像解析により評価され、３つの解剖学的に異なる（２００〜２５０μＭ離れている）組織切片にわたる平均陽性染色、または深度として表された複合コラーゲン体積分率（ＣＶＦ［画像化された総面積（％）］）スコアにより定量化された閉塞性腎臓における線維症；ｃ）生化学解析により評価された凍結腎皮質組織生検のヒドロキシプロリン含有率；ｄ）線維促進性及び炎症性のバイオマーカー（ＭＣＰ−１、コラーゲン１ａ１、コラーゲン３ａ１、ＴＧＦ−β１、フィブロネクチン−１、α−平滑筋アクチン（α−ＳＭＡ）及び結合組織成長因子−１（ＣＴＧＦ−１）を含むｍＲＮＡ発現；を含み、これは、ＨＰＲＴ（ヒポキサンチンホスホリボシルトランスフェラーゼ）に相対発現を正規化したＬｕｍｉｎｅｘ（登録商標）（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（商標）、米国、カリフォルニア州カールスバッド）アッセイを介して評価される。
統計学的解析：データは、平均±平均の標準誤差（ＳＥＭ）として表す。統計学的解析は、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ（登録商標）（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ、Ｉｎｃ．，米国、カリフォルニア州サンディエゴ）を使用して行った。偽手術＋ビヒクル対照とＵＵＯ＋ビヒクル対照群との間、及びＵＵＯ＋ビヒクル対照とＵＵＯ＋化合物１Ｄ１１（陽性対照）群との間での処置差は、対応のないｔ検定によって解析した。ＵＵＯ＋ビヒクル対照とＣＶＣ用量群との間の処置差は、一元配置ＡＮＯＶＡ（分散分析）とダネットの検定（事後）によって解析された。
方法：ＣＶＣは、有意な抗線維性効果を実証し、これは、腎線維症の十分に確立されたマウスＵＵＯモデルにおけるコラーゲン体積分率またはＣＶＦ（組織学的閉塞腎臓切片においてコラーゲンについて陽性に染色された面積％）の減少により規定された。閉塞性腎臓におけるコラーゲン１ａ１、コラーゲン３ａ１、ＴＧＦ−β１及びフィブロネクチン−１ ｍＲＮＡ発現において低減の傾向が観察されたが、これらは統計学的有意性には達しなかった。まとめると、ＣＶＣの作用様式、動物モデル（腎臓及び肝臓）における抗線維性活性、及び大規模な安全性データベースは、線維性疾患におけるさらなる評価を支持する。ＮＡＳＨ及び肝臓線維症を有する非ＨＩＶ感染患者における概念実証試験を計画する。ＨＩＶ−１感染患者における第ＩＩＩ相治験も、ガイドラインが好む第三の薬剤と共投与されるとき、テノホビルジソプロキシルフマル酸塩／エムトリシタビン（ＴＤＦ／ＦＴＣ）に対する新規の「バックボーン」としての固定用量併用のＣＶＣ／ラミブジン（３ＴＣ）を評価するように計画される。
結果：体重及び閉塞性腎臓重量：５日目で、ＣＶＣ ７ｍｇ／ｋｇ／日及び化合物１Ｄ１１（陽性対照）は体重に効果を有さなかったが、ＣＶＣ ２０ｍｇ／ｋｇ／日は、ＵＵＯ＋ビヒクル対照群の体重に対して、中程度だが有意な低減（５％）をもたらした（ｐ＜０．０５）（図１３；体重変化はグラム［ｇ］で示す）。ＵＵＯ＋ビヒクル対照群に対して有意な処置効果（ＣＶＣまたは化合物１Ｄ１１［陽性対照］）は閉塞性または対側性腎臓重量または腎臓重量指数で観察されなかった（データは示さず）。組織学：ＣＶＦの複合測定値（ｃｏｍｐｏｓｉｔｅ ｍｅａｓｕｒｅ）（３つの深度にわたる平均化面積％［±ＳＥＭ］）は、偽手術群のそれと比較してＵＵＯ＋ビヒクル対照群において有意に高かった（１１．４±１．０倍；ｐ＜０．０５）（図１４）。ＣＶＦの複合測定値（３つの深度にわたる平均化［±ＳＥＭ］）において、ＣＶＣ ７ｍｇ／ｋｇ／日及び２０ｍｇ／ｋｇ／日及び化合物１Ｄ１１（陽性対照）は、ＵＵＯ＋ビヒクル対照群のそれと比較して有意にＵＵＯ誘発性増加を減弱した（それぞれ２８．６±８．８％、３１．８±６．８％及び５０．３±７．３％減少；ｐ＜０．０５）。
ヒドロキシプロリン含有率：ＵＵＯ＋ビヒクル対照群からの閉塞性腎臓のヒドロキシプロリン含有率（タンパク質の割合（％））は、偽手術群に比べて有意に増加した（０．７２％対０．２７％；ｐ＜０．０５）（データは示さず）。試験したＣＶＣの用量はいずれも、ＵＵＯ＋ビヒクル対照群と比べて閉塞性腎臓ヒドロキシプロリン含有率におけるＵＵＯ誘発性増加に影響しなかった；しかしながら、化合物１Ｄ１１（陽性対照）群は有意に低いレベルを有した（０．５５％対０．７２％；ｐ＜０．０５）（データは示さず）。
線維促進性及び炎症性のバイオマーカーｍＲＮＡ発現：評価されたそれぞれのバイオマーカー（ＭＣＰ−１、コラーゲン１ａ１、コラーゲン３ａ１、ＴＧＦ−β１、フィブロネクチン−１、α−ＳＭＡ及びＣＴＧＦ−１）に関して、ＵＵＯ＋ビヒクル対照群におけるｍＲＮＡの発現は、偽手術群のそれと比較して有意に増加した（ｐ＜０．０５）（図１５）。ＣＶＣ ７ｍｇ／ｋｇ／日及び２０ｍｇ／ｋｇ／日はコラーゲン１ａ１、コラーゲン３ａ１、ＴＧＦ−β１及びフィブロネクチン−１ ｍＲＮＡ発現におけるＵＵＯ誘発性増加を減弱した。しかしながら、これらの減少は、ＵＵＯ＋ビヒクル対照群と比較すると、統計学的有意性には達しなかった。化合物１Ｄ１１（陽性対照）は、ＵＵＯ＋ビヒクル対照群に対して、コラーゲン１ａ１、コラーゲン３ａ１、ＴＧＦ−β１及びフィブロネクチン−１のｍＲＮＡ発現におけるＵＵＯ誘発性増加を有意に減少した（ｐ＜０．０５）。ＣＶＣ ７ｍｇ／ｋｇ／日及び２０ｍｇ／ｋｇ／日及び化合物１Ｄ１１（陽性対照）は、ＵＵＯ＋ビヒクル対照群と比較して、閉塞性腎臓皮質ＭＣＰ−１、α−ＳＭＡ及びＣＴＧＦ−１ ｍＲＮＡ発現におけるＵＵＯ誘発性増加に有意な効果を有さなかった。（α−ＳＭＡ及びＣＴＧＦ−１ ｍＲＮＡのデータは示さず）。
結論：ＣＶＣは、有意な抗線維性効果を実証し、これは腎線維症の十分に確立されたマウスＵＵＯモデルのコラーゲン体積分率またはＣＶＦ（組織学的閉塞腎臓切片におけるコラーゲンについて陽性に染色された面積％）における減少により規定された。閉塞性腎臓のコラーゲン１ａ１、コラーゲン３ａ１、ＴＧＦ−β１及びフィブロネクチン−１ ｍＲＮＡ発現において低減の傾向が観察されたが、これらは統計学的有意性には達しなかった。まとめると、ＣＶＣの作用様式、動物モデル（腎臓及び肝臓）における抗線維性活性、及び大規模な安全性データベースは、線維性疾患におけるさらなる評価を支持する。ＮＡＳＨ及び肝臓線維症を有する非ＨＩＶ感染患者における概念実証試験を計画する。ＨＩＶ−１感染患者における第ＩＩＩ相治験も、ガイドラインが好む第三の薬剤と共投与されるとき、テノホビルジソプロキシルフマル酸塩／エムトリシタビン（ＴＤＦ／ＦＴＣ）に対する新規の「バックボーン」としての固定用量併用のＣＶＣ／ラミブジン（３ＴＣ）を評価するように計画される。
実施例１７：４８週間にわたってセニクリビロックを受けているＨＩＶ−１感染成人におけるｓＣＤ１４の低減と相関するＡＰＲＩ及びＦＩＢ−４線維症スコアにおける改善
背景及び目的：セニクリビロック（ＣＶＣ）は、新規の、経口、１日１回のＣＣＲ２／ＣＣＲ５拮抗薬であり、臨床治験において好ましい安全性及び抗ＨＩＶ活性を実証している。ＣＶＣは、肝臓疾患の２つの動物モデルにおいて抗線維性活性を実証した。事後分析を試験２０２（ＮＣＴ０１３３８８８３）におけるＡＰＲＩ及びＦＩＢ−４スコアに実行した。
方法：ＣＣＲ５好性ＨＩＶ−１、３５ｋｇ／ｍ２以下のＢＭＩを有し、明らかな肝臓疾患を有さない（すなわち、ＡＬＴ／ＡＳＴグレードは２以下、総ビリルビンは基準値上限以下で、ＨＢＶ、ＨＣＶ、活性または慢性肝臓疾患、または肝硬変無し）１４３人の成人をＣＶＣまたはエファビレンツ（ＥＦＶ）に４：１に無作為化した。ＡＰＲＩ及びＦＩＢ−４スコアを算出した。ベースライン（ＢＬ）から第２４週及び第４８週までのスコアカテゴリーにおける変化を欠落データがない患者において評価した。ＡＰＲＩ及びＦＩＢ−４スコア、ならびにＭＣＰ−１（ＣＣＲ２リガンド）及びｓＣＤ１４（炎症性のバイオマーカー）レベルにおけるＢＬからの変化間の相関性を評価した。
結果：ＢＬでは、ＥＦＶよりもＣＶＣでより多くの患者が０．５以上のＡＰＲＩ及び１．４５以上のＦＩＢ−４を有した；これらの閾値を超えるＣＶＣ患者の割合は、第２４週及び第４８週で低減した（表）。有意な相関性が、第２４週では、ＡＰＲＩスコア及びＭＣＰ−１レベルにおける変化間（ｐ＝０．０１４）、ならびにＦＩＢ−４スコア及びｓＣＤ１４レベル間（ｐ＝０．０１１）で、第４８週では、ＡＰＲＩ（ｐ＝０．０２８）及びＦＩＢ−４スコア（ｐ＝０．００７）及びｓＣＤ１４レベルにおける変化間で観察された（表１１）。
結論：明らかな肝臓疾患を有さないこの集団では、ＣＶＣ処置は、ＡＰＲＩ及びＦＩＢ−４スコアにおける改善を伴い、相関性が、第４８週でのＡＰＲＩ及びＦＩＢ−４スコア及びｓＣＤ１４レベルにおける変化間で観察された。証明されたＣＣＲ２／ＣＣＲ５拮抗効果、動物モデルにおける抗線維性効果及び広範囲な臨床安全性データは、全て肝臓線維症におけるＣＶＣの臨床試験を支持する。
実施例１８：非アルコール性脂肪性肝炎のＳＴＡＭモデルにおけるセニクリビロックのインビボ有効性試験
このインビボ有効性試験は、非アルコール性脂肪性肝炎のＳＴＡＭ（商標）マウスモデルにおけるセニクリビロックの効果を検査するために行われた。
材料及び方法
実験設計及び処置
試験群
群１−ビヒクル：１８匹のＮＡＳＨマウスに、６週齢から１日２回（９：００及び１９：００）１０ｍＬ／ｋｇの容量でビヒクルを経口投与した。
群２−セニクリビロック２０ｍｇ／ｋｇ（ＣＶＣ−低）：１８匹のＮＡＳＨマウスに、６週齢から１日２回（９：００及び１９：００）１０ｍｇ／ｋｇ（２０ｍｇ／ｋｇ／日）の用量でセニクリビロックを補充したビヒクルを経口投与した。
群３−セニクリビロック１００ｍｇ／ｋｇ（ＣＶＣ−高）：１８匹のＮＡＳＨマウスに、６週齢から１日２回（９：００及び１９：００）５０ｍｇ／ｋｇ（１００ｍｇ／ｋｇ／日）の用量でセニクリビロックを補充したビヒクルを経口投与した。
表１２は、処置スケジュールをまとめたものである：
結果
パート１：ＣＶＣの抗ＮＡＳＨ／線維症効果を評価するための試験
第９週までの体重変化及び全身状態（図１６）
体重は、処置期間中に徐々に増加した。処置期間中のビヒクル群とＣＶＣ−低またはＣＶＣ−高群のいずれかとの間で平均体重における有意差はなかった。本試験において、処置期間を通して全身状態の悪化を示した動物はなかった。
第９週での屠殺当日の体重（図１７Ａ及び表１３）。
ビヒクル群とＣＶＣ−低またはＣＶＣ−高群のいずれかとの間で平均体重における有意差はなかった（ビヒクル：１８．９±３．３ｇ、ＣＶＣ−低：１９．５±２．０ｇ、ＣＶＣ−高：１８．７±０．９ｇ）。
第９週での肝臓重量及び体重に対する肝臓重量の比率（図１７Ｂ及びＣ及び表１３）。
ビヒクル群とＣＶＣ−低またはＣＶＣ−高群のいずれかとの間で平均肝臓重量における有意差はなかった（ビヒクル：１２７０±３２６ｍｇ、ＣＶＣ−低：１３３４±９９ｍｇ、ＣＶＣ−高：１３０７±１１９ｍｇ）。
ビヒクル群とＣＶＣ−低またはＣＶＣ−高群のいずれかとの間で体重に対する肝臓重量の比率平均における有意差はなかった（ビヒクル：６．６±０．８％、ＣＶＣ−低：６．９±１．０％、ＣＶＣ−高：７．０±０．８％）。
第９週での全血及び生化学
全血グルコースデータを図１８Ａ〜Ｄ及び表１４に示す。
ビヒクル群とＣＶＣ−低またはＣＶＣ−高群のいずれかとの間で血中グルコースレベルにおける有意差はなかった（ビヒクル：５９０±１０８ｍｇ／ｄＬ、ＣＶＣ−低：５８５±９１ｍｇ／ｄＬ、ＣＶＣ−高：５８５±９１ｍｇ／ｄＬ）。４．４．２．血漿ＡＬＴ（図１８Ｂ、表１４）。ＣＶＣ−低及びＣＶＣ−高群は、ビヒクル群と比較して血漿ＡＬＴレベルにおける有意な低減を示した（ビヒクル：１３３±８０Ｕ／Ｌ、ＣＶＣ−低：５８±１２Ｕ／Ｌ、ＣＶＣ−高：５２±１３Ｕ／Ｌ）。
血漿ＭＣＰ−１データを図１８Ｃ及び表１４に示す。ＣＶＣ−高群は、ビヒクル群と比較して血漿ＭＣＰ−１レベルにおいて有意な増加を示した。ビヒクル群とＣＶＣ−低群との間では血漿ＭＣＰ−１レベルにおける有意差はなかった（ビヒクル：６０±４ｐｇ／ｍＬ、ＣＶＣ−低：６８±１６ｐｇ／ｍＬ、ＣＶＣ−高：９１±１４ｐｇ／ｍＬ）。
血漿ＭＩＰ−１βデータを図１８Ｄ、表１４に示す。ビヒクル群とＣＶＣ−低またはＣＶＣ−高群のいずれかとの間で血漿ＭＩＰ−１βレベルにおける有意差はなかった（ビヒクル：１８±５ｐｇ／ｍＬ、ＣＶＣ−低：１８±２ｐｇ／ｍＬ、ＣＶＣ−高：２０±４ｐｇ／ｍＬ）。
第９週での肝臓の生化学
肝臓トリグリセリド含有率データを図１８Ｄ及び表１４に示す。ビヒクル群とＣＶＣ−低またはＣＶＣ−高群のいずれかとの間で肝臓トリグリセリド含有率における有意差はなかった（ビヒクル：４０．８±２０．４ｍｇ／肝臓ｇ、ＣＶＣ−低：４８．５±１６．１ｍｇ／肝臓ｇ、ＣＶＣ−高：５１．７±１４．１ｍｇ／肝臓ｇ）。
肝臓ヒドロキシプロリン含有率データを図１８Ｅ及び表１４に示す。肝臓ヒドロキシプロリン含有率は、ビヒクル群と比較して、ＣＶＣ−低及びＣＶＣ−高群において低減する傾向があった（ビヒクル：０．７５±０．１８μｇ／ｍｇ、ＣＶＣ−低：０．６３±０．０５μｇ／ｍｇ、ＣＶＣ−高：０．６２±０．０９μｇ／ｍｇ）。
第９週での組織学的解析
ＨＥ染色及びＮＡＦＬＤ活性スコアデータを図１９及び２０、及び表１５に示す。ビヒクル群からの肝臓切片は、深刻な小滴性及び大滴性脂肪沈着、肝細胞風船様腫大及び炎症性細胞浸潤を呈した。ＣＶＣ−低及びＣＶＣ−高群は、炎症性細胞浸潤及び肝細胞風船様腫大において中程度の改善を示し、ビヒクル群と比較してＮＡＳにおける有意な減少を伴った。（ビヒクル：５．３±０．５、ＣＶＣ−低：４．０±０．６、ＣＶＣ−高：３．７±０．８）。ＨＥ染色切片の代表的な顕微鏡写真を図１９に示す。
シリウスレッド染色データを図２１、２２、２３及び表１６に示す。ビヒクル群からの肝臓切片は、肝臓小葉の中心周囲領域におけるコラーゲン沈着を示した。ビヒクル群と比較して、中心周囲領域におけるコラーゲン沈着は、ＣＶＣ−低及びＣＶＣ−高群において顕著に減少した。線維症面積（シリウスレッド陽性面積）はビヒクル群と比較してＣＶＣ−低及びＣＶＣ−高群において有意に低減した（ビヒクル：１．１０±０．３１％、ＣＶＣ−低：０．６６±０．１６％、ＣＶＣ−高：０．６４±０．１９％）。改変（ｍｏｄｉｆｉｅｄ）された線維症面積も、ビヒクル群と比較してＣＶＣ−低及びＣＶＣ−高群において有意に低減した（ビヒクル：０．６１±０．２３％、ＣＶＣ−低：０．２９±０．１４％、ＣＶＣ−高：０．２０±０．０６％）。
肝臓のシリウスレッド染色切片の代表的な顕微鏡写真を図２１に示す。
Ｆ４／８０免疫組織化学データを図２２及び２３、及び表１６に示す。ビヒクル群からの（ｆｏｒｍ）肝臓切片のＦ４／８０免疫染色により、肝臓小葉におけるＦ４／８０＋細胞の蓄積が実証された。ビヒクル群とＣＶＣ−低またはＣＶＣ−高群のいずれかとの間でＦ４／８０＋細胞の数及びサイズ、ならびに炎症面積（Ｆ４／８０陽性面積）の割合（％）において有意差はなかった（ビヒクル：４．９９±１．１０％、ＣＶＣ−低：４．７７±１．０２％、ＣＶＣ−高：４．９６±０．６０％）。
Ｆ４／８０免疫染色切片の代表的な顕微鏡写真を図２２に示す。
Ｆ４／８０＋ＣＤ２０６＋及びＦ４／８０＋ＣＤ１６／３２＋免疫組織化学データを図２４、２５、２６、２７、２８、及び表１６に示す。ビヒクル群とＣＶＣ−低またはＣＶＣ−高群のいずれかとの間でマクロファージにおけるＦ４／８０＋ＣＤ２０６＋細胞の割合（％）において有意差はなかった（ビヒクル：３４．３±４．２％、ＣＶＣ−低：３４．７±６．３％、ＣＶＣ−高：３３．１±３．０％）。ビヒクル群とＣＶＣ−低群間でマクロファージにおけるＦ４／８０＋ＣＤ１６／３２＋細胞の割合（％）において有意差はなかった。Ｆ４／８０＋ＣＤ１６／３２＋細胞の割合（％）は、ビヒクルと比較してＣＶＣ−高群において増加する傾向があった（ビヒクル：３３．５±３．７％、ＣＶＣ−低：３８．７±７．６％、ＣＶＣ−高：４１．５±８．２％）。ビヒクル群とＣＶＣ−低群間でＭ１／Ｍ２比率における有意差はなかった。ＣＶＣ−高群では、Ｍ１／Ｍ２比率は、ビヒクルと比較して増加する傾向にあった（ビヒクル：９９．６±２０．２％、ＣＶＣ−低：１１２．３±１７．０％、ＣＶＣ−高：１２５．１±２１．９％）。
Ｆ４／８０及びＣＤ２０６、Ｆ４／８０及びＣＤ１６／３２二重免疫染色切片の代表的な顕微鏡写真を図２４及び２６に示す。
オイルレッド染色データを図２９、３０、及び表１６に示す。ビヒクル群とＣＶＣ−低またはＣＶＣ−高群のいずれかとの間で脂肪沈着において、ならびに脂肪沈着面積（オイル陽性面積）の割合（％）において有意差はなかった（ビヒクル：９．６６±５．０２％、ＣＶＣ−低：６．５１±３．８８％、ＣＶＣ−高：７．２３±３．５９％）。
オイルレッド染色切片の代表的な顕微鏡写真を図２９に示す。
ＴＵＮＥＬ染色データを図３１、３２及び表１６に示す。ＴＵＮＥＬ陽性細胞の割合（％）は、ビヒクル群と比較してＣＶＣ−低群において有意に増加した。ビヒクル群とＣＶＣ−高群間でＴＵＮＥＬ陽性細胞の割合（％）における有意差はなかった（ビヒクル：３６．０±３．７％、ＣＶＣ−低：４３．３±２．９％、ＣＶＣ−高：３９．０±５．３％）。
肝臓におけるＴＵＮＥＬ陽性細胞の代表的な顕微鏡写真を図３１に示す。
第９週での遺伝子発現解析のデータを図３３及び表１７〜１８に示す。
ＴＮＦα
ビヒクル群とＣＶＣ−低またはＣＶＣ−高群のいずれかとの間でＴＮＦα ｍＲＮＡ発現レベルにおける有意差はなかった（ビヒクル：１．００±０．２４、ＣＶＣ−低：１．１６±０．３９、ＣＶＣ−高：１．０９±０．２３）。
ＭＣＰ−１
ビヒクル群とＣＶＣ−低またはＣＶＣ−高群のいずれかとの間でＭＣＰ−１ ｍＲＮＡにおける有意差はなかった（ビヒクル：１．００±０．３１、ＣＶＣ−低：１．０５±０．５０、ＣＶＣ−高：１．００±０．５３）。
コラーゲン１型
コラーゲン１型ｍＲＮＡ発現レベルは、ビヒクル群と比較してＣＶＣ−低群において有意に下方制御された。コラーゲン１型ｍＲＮＡ発現レベルは、ビヒクル群と比較してＣＶＣ−高群において下方制御される傾向にあった。（ビヒクル：１．００±０．４２、ＣＶＣ−低：０．６３±０．１０、ＣＶＣ−高：０．７３±０．０４）。
ＴＩＭＰ−１
ビヒクル群とＣＶＣ−低及びＣＶＣ−高群のいずれかとの間でＴＩＭＰ−１ ｍＲＮＡ発現レベルにおける有意差はなかった（ビヒクル：１．００±０．４６、ＣＶＣ−低：０．７５±０．３２、ＣＶＣ−高：０．８０±０．２０）。
パート２：ＣＶＣの抗ＨＣＣ効果を評価するための試験
第１８週までの体重変化（図３５）
体重は、処置期間中に徐々に増加した。処置期間中のビヒクル群とＣＶＣ−低またはＣＶＣ−高群のいずれかとの間で平均体重における有意差はなかった。
生存解析データを図３６に示す。ビヒクル群において５９日目（ＩＤ１１２）、７５日目（ＩＤ１１３、１１５）及び８４日目（ＩＤ１１６）に１２匹中４匹のマウスが死亡した（投与の最初の日を０日目と設定した）。ＣＶＣ−低群では、６２日目（ＩＤ２０９）、６４日目（ＩＤ２１７）、７５日目（ＩＤ２１２）、７６日目（ＩＤ２１３）、８４日目（ＩＤ２１５）及び８６日目（ＩＤ２０８）に１２匹中６匹のマウスが死亡した。ＣＶＣ−高群では、６２日目（ＩＤ３１７）、６５日目（ＩＤ３１２）、７０日目（ＩＤ３１６）、７８日目（ＩＤ３１４）及び８５日目（ＩＤ３０９）に１２匹中５匹のマウスが死亡した。ＮＡＳＨの典型的な肝病変を除いて死亡動物における異常な検視所見はなかった。ビヒクル群とＣＶＣ−低またはＣＶＣ−高群のいずれかとの間で生存率において有意差はなかった。委託者の指示により、残りの動物を１８週齢で予定よりも早く屠殺した（予定の屠殺は２０週齢）。
第１８週での屠殺当日の体重データを図３７Ａ及び表１９に示す。体重は、ビヒクル群と比較してＣＶＣ−高群において低減する傾向にあった。ビヒクル群とＣＶＣ−低群間で平均体重における有意差はなかった。（ビヒクル：２３．０±２．３ｇ、ＣＶＣ−低：２２．９±３．５ｇ、ＣＶＣ−高：２０．８±２．７ｇ）。
第１８週での肝臓重量及び体重に対する肝臓重量の比率データを図３７Ｂ及びＣ及び表１９に示す。ビヒクル群とＣＶＣ−低またはＣＶＣ−高群のいずれかとの間で平均肝臓重量における有意差はなかった（ビヒクル：１７８２±５５８ｍｇ、ＣＶＣ−低：１８３７±４１０ｍｇ、ＣＶＣ−高：１８１７±４４６ｍｇ）。ビヒクル群とＣＶＣ−低またはＣＶＣ−高群のいずれかとの間で体重に対する肝臓重量の平均比率における有意差はなかった（ビヒクル：７．７±２．２％、ＣＶＣ−低：８．３±２．８％、ＣＶＣ−高：８．８±２．３％）。
第１８週での肝臓の巨視的解析
肝臓の巨視的外見を図３８Ａ〜Ｃに示す。
肝臓表面上に形成された可視腫瘍結節の数を図３９及び表２０に示す。ビヒクル群とＣＶＣ−低またはＣＶＣ−高群のいずれかとの間で個別のマウスあたりの肝腫瘍結節の数における有意差はなかった（ビヒクル：２．４±４．１、ＣＶＣ−低：１．５±１．９、ＣＶＣ−高：３．６±２．５）。
肝臓表面上に形成された可視腫瘍結節の最大直径を図４０及び表２０に示す。ビヒクル群とＣＶＣ−低またはＣＶＣ−高群のいずれかとの間で腫瘍の最大直径における有意差はなかった（ビヒクル：４．０±４．７ｍｍ、ＣＶＣ−低：４．８±５．４ｍｍ、ＣＶＣ−高：５．３±５．１ｍｍ）。
第１８週での組織学的解析
ＨＥ染色データを図４１に示す。ＨＥ染色は、ビヒクル群において、炎症性細胞の浸潤、大滴性及び小滴性脂肪沈着、肝細胞風船様腫大、病巣変化及び結節性病変を明らかにした。ビヒクル群において８匹中６匹のマウスがＨＣＣ病変を呈した。ＨＣＣ病変は、ＣＶＣ−低群において６匹中５匹のマウスで、ＣＶＣ−高群において７匹中６匹のマウスで検出された。ビヒクル群とＣＶＣ−低またはＣＶＣ−高群のいずれかとの間で明らかな差は見いだされなかった。
ＨＥ染色切片の代表的な顕微鏡写真を図４１に示す。
ＧＳ免疫組織化学データを図４２に示す。切片内のＧＳ陽性結節を、それぞれ、ビヒクル群において８匹中６匹のマウスで、ＣＶＣ−低群において６匹中５匹のマウスで、及びＣＶＣ−高群において７匹中７匹のマウスで検出した。
ＧＳ染色切片の代表的な顕微鏡写真を図４２に示す。
ＣＤ３１免疫組織化学データを図４３及び４４及び表２１に示す。ＣＤ３１陽性面積はビヒクル群と比較してＣＶＣ−低群において低減する傾向にあった。ＣＤ３１陽性面積はビヒクル群と比較してＣＶＣ−高群において増加する傾向にあった（ビヒクル：２．７１±１．３６％、ＣＶＣ−低：１．４７±１．１０％、ＣＶＣ−高：３．６８±１．３７％）。
ＣＤ３１染色切片の代表的な顕微鏡写真を図４３に示す。
要約及び考察
第９週での解析では、低及び高用量のＣＶＣでの処置は、用量依存的様式で線維症面積を有意に低下させた。これは、本試験におけるＣＶＣの抗線維化効果を実証している。低及び高用量のＣＶＣでの処置は、コラーゲン１型のｍＲＮＡ発現レベル及び肝臓ヒドロキシプロリン含有率も低下させ、これはその抗線維性特性を支持している。ＣＶＣ処置群は、血漿ＡＬＴレベル及びＮＡＳを用量依存的様式でビヒクル群と比較して有意に低減させた。ＮＡＳにおける改善は、小葉炎症及び肝細胞風船様腫大の減少によるものである。肝細胞風船様腫大は酸化ストレス誘発性肝細胞障害に由来し、ＮＡＳＨの疾患進行を伴う［２６；２７］ため、肝細胞損傷及び風船様腫大を阻害することによりＣＶＣがＮＡＳＨ病理学を改善したことが強く示される。合わせて、ＣＶＣは、本試験において、潜在的な抗ＮＡＳＨ及び肝保護的効果を有する。
ヒトにおいて示されるように、本試験においてＣＶＣでの処置によって血漿ＭＣＰ−１レベルは増加し、これはＣＶＣによるＣＣＲ２の用量依存的拮抗効果を示すが、血漿ＭＩＰ−１βレベルは処置による有意な変化を何ら示さなかった。ＣＶＣの作用の機構を調査するために、我々は、マクロファージの集団に及ぼすＣＶＣの効果を評価した。予備結果は、ＣＶＣがビヒクル群と比較して高いＭ１／Ｍ２比率の傾向を示したことを実証した。これは、ＣＶＣが炎症した肝臓においてマクロファージ分集団のバランスを調節することにより線維形成を阻害する可能性を示す。これは、将来さらに調査されるだろう。
第１８週での解析では、ＮＡＳＨ由来ＨＣＣへの効果はＣＶＣ処置群において観察されなかった。結論として、ＣＶＣは、抗ＮＡＳＨ、肝保護的及び抗線維化効果を本試験において示した。
実施例１９：ＣＶＣ及び代謝産物の受容体結合特性
ＣＶＣは、５．９ｎｍｏｌ／Ｌの５０％阻害濃度（ＩＣ５０）を有するＣＣＲ２拮抗薬であるという、特有の特性をインビトロで有する。ＣＶＣは、ＣＣＲ５発現チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞へのＲＡＮＴＥＳ、ＭＩＰ−１α、及びＭＩＰ−１βの結合を、それぞれ３．１、２．３、及び２．３ｎｍｏｌ／ＬのＩＣ５０で用量依存的に阻害した。ＣＶＣは、ヒトのエキソビボで、ＣＤ４＋Ｔ細胞については３．１ｎＭ及びＣＤ８＋Ｔ細胞については２．３ｎＭの濃度でＣＣＲ５について９０％以上の受容体占有率を達成した［４］。ＣＶＣは、５．９ｎｍｏｌ／ＬのＩＣ５０でＣＣＲ２ｂへのＭＣＰ−１の結合を阻害した。ＣＶＣは、ヒトのエキソビボで、６ｎＭで単球上のＣＣＲ２について約９８％受容体占有率を達成し、ＭＣＰ−１の不存在下で単球上のＣＣＲ２発現を減少させた。ＣＶＣは、ＣＣＲ３及びＣＣＲ４へのリガンド結合を弱い程度にのみ阻害した。ＣＶＣは、ＣＣＲ１またはＣＣＲ７へのリガンド結合を阻害しなかった。ＣＶＣは、ＲＡＮＴＥＳ誘発性Ｃａ２＋動員を遮断した。
ＣＶＣの２つの代謝産物（Ｍ−Ｉ及びＭ−ＩＩ）は、動物試験において検出された（実施例２０を参照）；Ｍ−ＩＩは、サル及びイヌにおける主な代謝産物であり、Ｍ−Ｉは全種における少数派の代謝産物であった。Ｍ−Ｉは、ＣＶＣのＩＣ５０のおおよそ２倍である６．５ｎｍｏｌ／ＬのＩＣ５０でＣＣＲ５発現細胞へのＲＡＮＴＥＳの結合を阻害した。Ｍ−ＩＩはＲＡＮＴＥＳの結合に効果を有さなかった。
実施例２０：代謝産物の同定
食餌動物への３ｍｇ／ｋｇでの［１４Ｃ］−ＣＶＣの単回用量、経口投与後、不変ＣＶＣがラット及びイヌの血漿中で検出された主な成分であり、総１４Ｃに対するＣＶＣのＡＵＣ０−２４比率はそれぞれ５８．９％及び４７．４％であった［４４］。サルでは、この比率は１２．９％のみであったが、比較的大量の代謝産物Ｍ−ＩＩが検出され、総１４Ｃに対するＭ−ＩＩのＡＵＣ０−２４比率は３４．３％であった。特にイヌ及びサルにおいて、Ｍ−ＩＩの量は、静脈内投与後よりも経口投与後に有意に多かった。これらの結果は、ＣＶＣが全身循環に達する前にＭ−ＩＩに代謝され得ることを示す。Ｍ−Ｉ、Ｔ−１１８４８０３、及びＴ−１１６９５１８を含む少数派の代謝産物も、ラット、イヌ、及びサルの血漿中で検出された。代謝産物Ｍ−Ｉは、ＣＶＣのスルフィニル部分の酸化によって形成され、Ｍ−ＩＩは、［（１−プロピル−１Ｈ−イミダゾール−５−イル）メチル］スルフィニル基のＣ−Ｓ結合の切断、その後のＳ−メチル化を伴うスルフィニル部分のその後の減少によって形成されると推論される。
臨床治験
実施例２１：ＨＩＶ−１感染成人対象における短期有効性データ
方法
ＣＣＲ５好性ＨＩＶ−１感染を有する対象における１０日間のＣＶＣの単独療法の抗ウイルス活性、ＰＫ、安全性、及び耐容性を評価する第２ａ相二重盲検、無作為化、プラセボ対照、用量漸増試験。参加者は、抗レトロウイルス処置経験済みであることが求められ、ＣＣＲ５拮抗薬未経験であること、少なくとも５０００コピー／ｍＬのＨＩＶ−１ ＲＮＡレベル及び少なくとも２５０細胞／ｍｍ３のＣＤ４＋細胞数が行われていることが求められる。１０対象の群をＣＶＣ（２５、５０、７５、１００、または１５０ｍｇ）または対応するプラセボを受けるようにコホートごとに４：１の対象比率で順次登録した。全ての対象は、１日１回用量のＣＶＣまたはプラセボを１０日間受け、４０日目まで経過観察した。
人口統計及び他のベースライン特徴
合計で５４人の対象がこの試験に登録された。人口統計は、用量群にわたって概して類似した。各用量群における対象の大半は、男性（６６．７％〜１００％）であり、年齢中央値の範囲は、３３．５歳（プラセボ群）〜４５．０歳（１５０ｍｇ群）であった。ほとんどの対象は、白人またはアフリカ系アメリカ人であった。ＢＭＩ中央値の範囲は、２２．９ｋｇ／ｍ２（１００ｍｇ群）〜２７．４ｋｇ／ｍ２（２５ｍｇ群）であった。ＨＩＶ−１ ＲＮＡ値の中央値の範囲は、４．００ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ（１５０ｍｇ群）〜４．６０ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ（７５ｍｇ群）であった。ＣＤ４＋細胞数中央値は、１５０ｍｇ群（５０８．０細胞／ｍｍ３）において最も高く、残りの群にわたって範囲は４０２．０〜４６０．０細胞／ｍｍ３であった。
有効性及び安全性の結果
ＣＶＣは、処置完了後に持続したＨＩＶ−１ ＲＮＡレベルへの強力な効果を示した。ＣＣＲ５拮抗薬未経験、処置経験済みＨＩＶ−１感染対象における、２５、５０、７５、及び１５０ｍｇ用量についてのベースラインからの最下点変化中央値は、それぞれ−０．７、−１．６、−１．８、及び−１．７ｌｏｇ１０コピー／ｍＬであった。これらの結果は、ＣＶＣの強力な拮抗性ＣＣＲ５活性を実証する。ＨＩＶ−１ ＲＮＡレベルにおける平均変化を図４５に示す。
ＭＣＰ−１（ＣＣＲ２のリガンドであり、炎症促進性単球上に発現されるケモカイン共受容体であり、ＣＣＬ２としても知られる）、ｈｓ−ＣＲＰ、及びＩＬ−６における変化の探索的評価が行われ、ＭＣＰ−１において有意な用量依存的増加が観察された（表２３）。
１０日目に、最小二乗平均ＭＣＰ−１レベルは、プラセボ群において微かに下降したのに対し、２５、５０、７５、及び１５０ｍｇ用量群で、ベースラインよりもそれぞれ５６．３、９４．２、３４．４、及び３３４．３ｐｇ／ｍＬ高かった。５０及び１５０ｍｇ用量では、これらの結果は、統計学的に有意であった（それぞれ、ｐ＝０．０２４及びｐ＜０．００１）。これらの結果は、ＣＶＣの強力な拮抗性ＣＣＲ２活性を実証する。ＣＶＣは、この１０日間の試験では全体でｈｓ−ＣＲＰまたはＩＬ−６レベルに効果を有さなかった。
有害事象
セニクリビロックは、試験用量で概して十分に耐容性を示し、安全性に対する懸念は確認されなかった。死亡例、重篤な有害事象、または他の重大な有害事象はなく、有害事象による中止例もなかった。大半の処置により出現した有害事象の重症度は、軽度または中程度であった。１５０ｍｇのＣＶＣ（すなわち、試験最高用量）を受けた対象は、他の用量群の対象と比較してより多くの有害事象を有したが、有害事象の重症度は全用量群にわたって同等であった。本試験にて非常に多かった（１０％以上）処置により出現した有害事象は、悪心（１８．５％）、下痢（１６．７％）、頭痛（１４．８％）、及び疲労（１１．０％）であった。
検査値の安全性
観察期間中にＡＬＴ及び／またはＡＳＴ上昇を有する対象が、２５ｍｇ（２対象）、５０ｍｇ（２対象）、１００ｍｇ（１対象）、及び１５０ｍｇ（１対象）用量群において６人、及びＡＳＴ上昇をプラセボ群において有する対象が１人いた。全ての上昇はグレード１であり、単回を超える上昇を有した２対象（両方とも５０ｍｇ用量群）を除いて分離され、後遺症を伴わずに解決した。単回を超える上昇を有した２対象は、５０ｍｇ用量群であり、これらの対象の１人はグレード１の上昇したＡＳＴをベースラインで有した。処置期間中に１００ｍｇ及び１５０ｍｇ用量群の対象において観察されたＡＳＴ上昇（各用量群で１対象に観察された）は、処置の継続中に正常値に戻った。試験中にＡＬＴまたはＡＳＴにおけるグレード２〜４の上昇は発生しなかった。
グレード３またはより高い検査値異常は、投薬前に存在していた２５ｍｇ用量群でのグレード３の低リン酸血症、ベースラインでグレード３のトリグリセリドを有した対象における５０ｍｇ用量群でのグレード４のトリグリセリド上昇、及び膵炎の病歴を有する対象におけるそれぞれグレード３及び４のアミラーゼ及びリパーゼのみであった。
心血管安全性及び理学的検査
グレード３収縮期高血圧が、ベースラインでの収縮期血圧においてグレード２の上昇を有した１５０ｍｇ用量群の対象で観察された。臨床的に関連する理学的検査またはＥＣＧ所見はなかった。
前述のように、ＣＶＣは、ＣＣＲ５及びＣＣＲ２拮抗薬として二重活性を有する。ＭＣＰ−１（ＣＣＲ２のリガンド、ＣＣＬ２としても知られる）、ｈｓ−ＣＲＰ、及びＩＬ−６における変化の探索的評価を実施し、ＭＣＰ−１において有意な用量依存的増加を観察した（表２４を参照されたい）。１０日目に、最小二乗平均ＭＣＰ−１レベルは、プラセボ群において微かに下降したのに対し、２５、５０、７５、及び１５０ｍｇ用量群で、ベースラインよりもそれぞれ５６．３、９４．２、３４．４、及び３３４．３ｐｇ／ｍＬ高かった。５０及び１５０ｍｇ用量では、これらの結果は、統計学的に有意であった（それぞれ、ｐ＝０．０２４及びｐ＜０．００１）。これらの結果は、ＣＶＣの強力な拮抗性ＣＣＲ２活性を実証する。ＣＶＣは、この１０日間の試験では全体でｈｓ−ＣＲＰまたはＩＬ−６レベルに効果を有さなかった。
抵抗性データ
試験２０１では、薬剤抵抗性試験を、ベースライン、７日目、及び４０日目（または、該当する場合は、「早期終了」来診時）で行った。評価可能な試料を有する全ての対象は、ＣＶＣに完全に感受性のままだった。
ウイルス親和性
試験２０１における全ての対象を、そのウイルスがＣＸＣＲ４好性または二重／混合であった場合を除外するためにウイルス親和性について試験した。全ての対象は、スクリーニング（感度強化プロファイルアッセイ（ｅｎｈａｎｃｅｄ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｐｒｏｆｉｌｅ ａｓｓａｙ）に基づく）時にＣＣＲ５好性ウイルスを有した。ＣＶＣの合計で３９対象が処置後に評価可能な試料を有し、これらの対象の１人（ＣＶＣ １５０ｍｇ用量群）は、１０日目に二重／混合好性ウイルスを有すると見いだされた。（異なるアッセイを使用した別の検査値での）さらなる試験により、この対象が主にＣＸＣＲ４好性ウイルスをベースラインで有したことが明らかになった。それゆえ、この対象は、組み入れ基準に従って、本試験に組み込まれるべきではなかった。この対象は、ＣＶＣ処置に応答しなかった；この対象のＨＩＶ−１ ＲＮＡにおける最大低減は、ベースライン値から０．１３ｌｏｇ１０コピー／ｍＬ下であった。
薬物動態／薬力学関係性
試験２０１において試験された全ての用量について、曝露において用量比例的増加を超える増加が「製剤Ｆ１」について観察され、これは、１００ｍｇ用量コホート以外の全てに使用された。
薬物応答は、以下の最大効果（Ｅｍａｘ）モデル：
を使用して特徴づけられ、式中、Ｅは効果であり、Ｅ０はベースライン効果（０に固定）であり、Ｉｍａｘは最大阻害であり、Ｃは、ＰＫ変数（ＡＵＣ０−２４、Ｃｍａｘ、または定常状態濃度［Ｃｓｓ］）を示し、ＩＣ５０は、最大阻害の５０％に相当するＰＫ変数の値であり、γはシグモイド曲線性の程度を示す形状パラメータである。
ＰＫ／ＰＤモデルにおけるＣＶＣのＥｍａｘは、−１．４３ｌｏｇ１０コピー／ｍＬであった。Ｅｍａｘモデルに基づき、２５、５０、７５、及び１５０ｍｇ用量に対するＣＶＣの平均Ｃｓｓは、薬物の最大阻害効果の５４．９％、７９．８％、８５．９％、及び９５．９％になると予想された。ゆえに、７５及び１５０ｍｇ ＱＤの用量レベルは、強力な抗ウイルス活性を示し、ＰＤはＨＩＶ−１感染対象においてＣＶＣのＥｍａｘの８０％を超える効果を与えた。
実施例２２：ＨＩＶ−１感染成人対象における長期有効性データ
試験２０２の有効性結果
試験設計及び目的
これは、ＣＣＲ５単独好性ウイルスを有する、ＨＩＶ−１感染、抗レトロウイルス未処置成人対象において、承認された抗レトロウイルス剤エムトリシタビン／テノホビルジソプロキシルフマル酸塩（ＦＴＣ／ＴＤＦ）と全て併用投与された、承認された抗レトロウイルス剤エファビレンツ（ＥＦＶ、Ｓｕｓｔｉｖａ（登録商標））と比較したＣＶＣ １００ｍｇ及びＣＶＣ ２００ｍｇの有効性及び安全性を評価する無作為化、二重盲検、ダブルダミー、４８週の比較試験である。ＨＩＶ−２、Ｂ型肝炎及び／またはＣ型肝炎、肝臓の硬変または任意の既知の活性または慢性活性肝臓疾患の病歴を有する対象は、本試験から除外した。
おおよそ１５０対象を、固定用量併用製剤（ＴＲＵＶＡＤＡ（登録商標））で非盲検治験薬として提供された承認された抗ウイルス薬剤エムトリシタビン／テノホビルジソプロキシルフマル酸塩（ＦＴＣ／ＴＤＦ）と全て併用で、ＣＶＣ １００ｍｇ＋プラセボ、ＣＶＣ ２００ｍｇ＋プラセボまたは承認された抗ウイルス剤エファビレンツ（ＥＦＶ）＋プラセボへと２：２：１比率で無作為化するように計画した（１４３対象が実際に（ａｃｔｕａｌｌ）無作為化された）。薬物動態学的評価を、最初の２５試験対象において実施して、ＣＶＣ １００ｍｇ及びＣＶＣ ２００ｍｇの選択用量で十分なＣＶＣ血漿曝露が達成されたことを確認してから、残りの試験集団を組み入れた。
人口統計及びベースライン特徴
大半の対象は男性（９４％）及び白人（６２％）であり、平均年齢は３５歳で、平均ボディ・マス・インデックスは２６．２ｋｇ／ｍ２であった。全体で、対象の３２％は黒人／アフリカ系アメリカ人であった。加えて、無作為化対象の２４％はヒスパニック系民族であった。
ベースラインでは、ＨＩＶ−１感染の期間中央値（すなわち、最初の陽性ＨＩＶ−１試験してインフォームド・コンセント日までの時間［月数］）は８か月であり、平均ＨＩＶ−１ ＲＮＡは、４．５０ｌｏｇ１０コピー／ｍＬであり、（対象の８０％が１００，０００コピー／ｍＬ未満のウイルス負荷を有し）、平均ＣＤ４＋細胞数は４０２細胞／ｍｍ３であった（対象の５８％が３５０細胞／ｍｍ３以上のＣＤ４＋細胞数を有した）。
主要有効性結果
主要有効性エンドポイントは、ＦＤＡスナップショットアルゴリズムを使用して５０コピー／ｍＬ未満のＨＩＶ−１ ＲＮＡとして定義された、第２４週でのウイルス学的応答とした。ウイルス学的成功（応答）を有した対象の割合（％）は、３つの処置群の間で同等であった（ＣＶＣ １００ｍｇで７６％、ＣＶＣ ２００ｍｇで７３％、及びＥＦＶで７１％）。ＣＶＣ １００ｍｇ群（５９人中１７人の対象、２９％）及びＣＶＣ ２００ｍｇ群（５６人中１５人の対象、２７％）よりもＥＦＶ群においてより多くの対象が本試験を早期に中止した（２８人中１１人の２８対象、３９％）。
第４８週データは、第２４週で観察されたデータと矛盾しなかった。経時的なウイルス学的成功を有する対象の割合（％）は、３つの処置群で概して同等であったが、第４８週でＥＦＶ群と比較してＣＶＣ群の方が高かった（ＣＶＣ １００ｍｇで６８％、ＣＶＣ ２００ｍｇで６４％、及びＥＦＶで５０％）。
副次的及び探索的解析
炎症のバイオマーカー
探索的解析として、炎症性バイオマーカーＭＣＰ−１、ｓＣＤ１４、高感度Ｃ反応性蛋白［ｈｓ−ＣＲＰ］、インターロイキン−６［ＩＬ−６］、Ｄ−ダイマー、及びフィブリノゲン）のレベルを測定した。ＭＣＰ−１、ｓＣＤ１４、ｈｓ−ＣＲＰ、ＩＬ−６、Ｄ−ダイマー、及びフィブリノゲンのベースライン値及び第２４週及び第４８週でのベースラインからの変化を表２５にまとめる。
用量応答は、ＣＶＣで、ＣＣＲ２のリガンドであるＭＣＰ−１の経時的な増加において観察されたが、一方でＥＦＶ群ではＭＣＰ−１はベースライン値のままであった（図４６を参照されたい）。ＥＦＶ及びＣＶＣ １００ｍｇ及びＣＶＣ ２００ｍｇ処置群間での血漿ＭＣＰ−１のベースラインからの変化における差は、第２４週及び第４８週で統計学的に有意であった（ｐ＜０．００１）（表２５を参照されたい）。
加えて、両ＣＶＣ処置群において、ｓＣＤ１４では４８週間の処置にわたる低減が観察された（繰り返しｓＣＤ１４解析の線形混合モデル解析、下記を参照されたい）が、一方で同じ観察期間中にＥＦＶ群ではｓＣＤ１４の増加が観察された（図４７を参照されたい）。可溶性ＣＤ１４は、単球活性化のバイオマーカーであり、独立して、ＨＩＶ感染患者の大規模な、長期コホート試験における罹患率及び死亡率と、ならびに慢性ウイルス性肝炎を有する患者及び重度の肝線維症を有する患者における不良臨床転帰と関連している。
ｓＣＤ１４試料は、元々２つの別々のバッチにて解析された：バッチ１は、第２４週主要解析に至るまでの試料を含み、バッチ２は、第３２週及び第４８週（試験の終了時）の試料を含んだ。２つのバッチ解析から得たベースラインからのｓＣＤ１４における変化の結果を表２５に表す。１つのバッチで全て解析されたアーカイブされた試料の繰り返し解析を、時点間の解析における一貫性のために実施した。共変量の影響を調整するために、線形混合モデル繰り返し測定解析をｓＣＤ１４におけるベースラインからの変化に実施した（解析は２０１３年９月付け）。ＣＶＣ ２００ｍｇ群における第３２週までのベースラインからの変化を除いて、４８週間の処置にわたって両用量（１００及び２００ｍｇ）でのＣＶＣで観察されたｓＣＤ１４レベルの減少（ＬＳ平均）は、ＥＦＶで観察された増加と比較して統計学的に有意であった（ｐ＜０．０５）（表２６及び図４７を参照されたい）。
炎症の他のバイオマーカー（ｈｓ−ＣＲＰ、ＩＬ−６、Ｄ−ダイマー）における変化は、ＣＶＣ及びＥＦＶ処置群において同様であった。
ＡＰＲＩ及びＦＩＢ−４スコア
さらには、ストリンジェントな適格性基準（ＨＩＶ−１感染、及び２以上のＡＬＴ／ＡＳＴグレード、基準値上限を超える総ビリルビン、ＨＢＶ及び／またはＨＣＶ、活性または慢性肝臓疾患、肝硬変または３５ｋｇ／ｍ２を超えるＢＭＩを伴わない）、に従い明らかな肝臓疾患がないとされる対象を組み込んだこの試験からのデータの事後解析では、標準的な生化学値、血小板、ＡＬＴ、ＡＳＴ、及び年齢（ＦＩＢ−４）スコアを組み合わせたＡＳＴ対血小板比指数（ＡＰＲＩ）及び非侵襲性肝線維症指数スコアにおける改善が、全てのＣＶＣ処置対象（ＣＶＣ １００ｍｇ及び２００ｍｇについての統合データ）の１０％以上で経時的に観察された（図４８）。ＥＦＶ群では、第２４週での対象の５％及び第４８週での対象の６％は、ベースラインから１つのカテゴリーでＡＰＲＩスコアにおいて低減を有した；ＥＦＶで処置された対象は、全ての対象が１．４５未満のスコアをベースラインで有する場合に１つのカテゴリーでＦＩＢ−４において低減しなかった。
上述のように、この試験では、ＣＶＣはまた、単球活性化の重要なマーカーであるｓＣＤ１４に有意な効果を有した。上述と同じ事後解析で、第２４週でＣＶＣ処置対象のＦＩＢ−４スコア及びｓＣＤ１４レベルの変化間、ならびに第４８週でＡＰＲＩ及びＦＩＢ−４スコア及びｓＣＤ１４レベルにおける変化間の統計学的に有意な相関性が観察された。第４８週の結果を図４９及び図５０に示す。
安全性結果
曝露の程度
治験薬物（ＣＶＣまたはＥＦＶ）の摂取の平均期間は、ＥＦＶ処置群よりもＣＶＣ群において長かったが（それぞれ、ＣＶＣ １００ｍｇ及び２００ｍｇで４１．２及び４０．９週、それに対しＥＦＶで３６．２週）、これはＥＦＶ群における中止率がより高かったことによる。
全ての有害事象の要約
合計で、それぞれ、ＣＶＣ １００ｍｇ、ＣＶＣ ２００ｍｇ、及びＥＦＶ群において、５１対象（８８％）、４８対象（８４％）、及び２７対象（９６％）が少なくとも１つの有害事象を有した。非常に頻度高く報告された有害事象（３処置群のいずれかの１０％以上の対象における基本語）は、悪心、上気道感染、下痢、頭痛、発疹事象、疲労、浮動性めまい、鼻咽頭炎、異常な夢、不眠症、リンパ節症、うつ病、及び梅毒であった（表２７）。これらの非常に頻度高く報告された有害事象から、頭痛、疲労、及び上気道感染は、ＥＦＶ群よりもＣＶＣ群においてより頻度高く報告された；浮動性めまい、異常な夢、不眠症、リンパ節症、うつ病、及び梅毒は、ＣＶＣ群よりもＥＦＶ群においてより頻度高く報告された。
ほとんどの有害事象は、軽度または中程度（グレード１またはグレード２）であった。グレード３または４の有害事象を表２９にまとめた。グレード３以上の有害事象を経験した対象の割合（％）は、ＥＦＶ群（１５％）よりもＣＶＣ群（合計で４％）において低かった。ＥＦＶ群の１対象（対象０６００７）が自殺念慮のグレード４の有害事象を有し、これは重篤であると考えられた。ＣＶＣ処置対象ではグレード４の有害事象は報告されなかった。１対象以外のグレード３以上の有害事象（基本語）は報告されなかった。表２８は、死亡、重篤な有害事象、有害事象、重症度ごとの有害事象、治験薬物に関連する有害事象、及び中止につながる有害事象の概要を提供する。
重篤な有害事象を表３０にまとめる。
中止につながる有害事象
治験薬物の中止につながる有害事象を表３１にまとめる。合計で、治験薬物の中止につながる有害事象は、ＣＶＣ ２００ｍｇ群において１対象（２％）及びＥＦＶ群において６対象（２１％）発生した。１人より多くの対象で報告された治験薬物の中止につながる有害事象（基本語）は、それぞれ３及び２対象で報告されたＥＦＶ群での不眠症及び浮動性めまいであり、ＣＶＣ ２００ｍｇ群において１対象及びＥＦＶ群において１対象報告されたうつ病であった（不眠症、浮動性めまい、及びうつ病はＥＦＶについて全て共通する有害事象である）。
グレード付けされた処置により出現した検査値異常を有する対象の数の全体像を表３２に提供する。
グレード３または４（最悪毒性グレード）の処置により出現した検査値異常を表３３にまとめる。ＣＶＣ ２００ｍｇ群にてより頻度高く観察されたＣＰＫの異常を除けば、処置群間でのグレード３またはグレード４検査値異常を有する対象の割合（％）における差はなかった。
クレアチンホスホキナーゼ（ＣＰＫ）においてグレード３または４の増加が、他の２つの処置群よりもＣＶＣ ２００ｍｇ群においてより頻度高く観察された。ＣＶＣ群におけるＣＰＫのグレード３または４増加を有する１２対象（ＣＶＣ １００ｍｇで３対象及びＣＶＣ ２００ｍｇで９対象）から、１１対象が単一時点で観察されたＣＰＫ上昇を有した（８対象がグレード３及び３対象がグレード４上昇を有した）（注記：これらの１１対象の１人［対象４８０１５］は、第８週及び第３６週で単離されたグレード３のＣＰＫ上昇を有した）。１２番目の対象（対象４２００１）は、その後の来診で処置継続中に正常値に戻った２つの連続したＣＰＫ上昇（グレード３、その後グレード４）を有した。ＣＰＫ上昇はいずれも、臨床的症状を伴わなかった；ＣＰＫ上昇のために中止した対象はなく、ＣＶＣ及びＥＦＶ群間で筋骨格障害に関連する有害事象における差はなかった。
ＣＰＫにおけるベースラインからの変化を図５１に示す。いずれの処置群においても経時的な実際の値またはベースラインからの変化でＣＰＫについて明らかな傾向は観察されなかった。
対象となる選択した肝臓パラメータにグレード付けされた処置により出現した検査値異常を有する対象の数を表３４に示す。グレード４のＡＬＴまたはＡＳＴ上昇は観察されなかった。１つのグレード３のＡＳＴ上昇を除き、全てのＡＬＴ及びＡＳＴ上昇は、グレード１またはグレード２であった。１対象（ＣＶＣ １００ｍｇ群の４８０１５）のグレード３ＡＳＴ上昇は、単一時点で観察され、無症候性であった；対象は、グレード３のＡＳＴ上昇のために治験薬物を中止せず、ＡＳＴ上昇に関連する有害事象を報告しなかった。加えて、グレード３のＡＳＴ上昇を有するこの対象は、任意のグレード付けされたビリルビン上昇を有さなかったが、単一のグレード３のＣＰＫ増加を、グレード３ＡＳＴ上昇と同じ試験来診時に有した。ビリルビンにおける全ての異常はグレード１またはグレード２であった。ＡＬＴ、ＡＳＴ、及びビリルビン上昇の大半は、一過性で、継続処置の際その後の来診時にはベースライン値に戻り、いずれの臨床的症状も伴わず、中止をもたらさなかった。
探索的解析を、第２４週及び第４８週で行って、処置により出現した検査有害事象を有する対象におけるＣＶＣ曝露を評価した。特に対象となるのは、ＣＶＣ ２００ｍｇ群においてＣＰＫ異常の発生率が増加しているために、ＣＰＫ上昇、及び対象となる肝臓パラメータ（ＡＳＴ、ＡＬＴ、及びビリルビン）である。両曝露パラメータ（Ｃａｖｇ及びＣｍｉｎ）は、検査値異常との潜在的な関係性を探索するには妥当だと考えられた；しかしながらＣａｖｇは、全体的なＣＶＣ曝露を反映するために、最も関連性が高いと考えられた。
試験処置群間で差があるためにＣＰＫ上昇についての用量応答関係性の潜在的なシグナルであるにもかかわらず、これらの大規模な探索的解析はいずれの曝露応答関係性を明らかにすることができなかった。２を超えるグレードのＣＰＫ重症度の可能性に対してＬｎ曝露を評価するロジスティック回帰分析の結果は、ＣＶＣ曝露とＣＰＫ上昇間の関連を同定しなかった。ＣＶＣ曝露に対してＣＰＫ上昇の頻度または重症度の増加のいずれにおいても傾向はなかった。
同様の解析をＡＬＴ、ＡＳＴ、及びビリルビン上昇について実施したが、これもＣＶＣ曝露と肝臓関連検査値異常との間のいずれの明らかな関係性も明らかにしなかった。（図５２〜図５５）。
代謝パラメータ
空腹時来診でのグレード付けされた処置により出現した空腹時検査値異常を有する対象の数を表３５に示す。総コレステロール、ＬＤＬコレステロール、トリグリセリド、またはグルコースにおける全ての異常は、グレード１またはグレード２であった。総コレステロール及びＬＤＬコレステロールに異常を有する対象の割合（％）は、ＥＦＶ群よりもＣＶＣ群において少なく、これはＣＶＣ処置中のコレステロールにおける経時的な低減に一致する（図５６）。
ＨｂＡ１ｃ、ＨＯＭＡ−ＩＲ、空腹時ＬＤＬ、空腹時ＨＤＬ、空腹時総コレステロール、空腹時総コレステロール／ＨＤＬ比率、及び空腹時トリグリセリドにおける平均ベースライン値及びベースラインからの変化を表３６に示す。代謝パラメータにおけるベースラインからの平均変化を図５６に示す。ＣＶＣ処置（両ＣＶＣ １００ｍｇ及び２００ｍｇ）中に総コレステロールにおける低減が観察され、これは主にＬＤＬコレステロールにおける低減によるものである（表３６を参照されたい）。対照的に、ＬＤＬコレステロールならびにＨＤＬコレステロールにおいてＥＦＶ処置中に増加が観察された。空腹時総コレステロール／ＨＤＬ比率において少ないが同等の低減が全ての処置群において観察された。グルコース、インスリン、ＨＯＭＡ−ＩＲ、ＨｂＡ１ｃ、及びトリグリセリドにおいて経時的な注目すべき変化は観察されなかった（表３６を参照されたい）。
第２４週及び第４８週のウエスト対ヒップ比においていずれの処置群においてもベースラインからの注目すべき変化は観察されなかった。
心血管安全性
処置期間中に最悪の処置により出現したＥＣＧ異常を表３７にまとめる。３０〜６０ミリ秒を超えるＱＴｃの増加を有する対象の割合は、ＥＦＶ群と比較してＣＶＣ群で低かった。ＣＶＣ １００ｍｇ群において１対象のみが６０ミリ秒を超えるＱＴｃ増加を有した。延長または病理学的に延長されたＱＴｃを有した対象はなかった。
ＥＣＧパラメータにおける臨床的に関連する変化はいずれの処置群においても処置期間中観察されなかった。
バイタルサイン
臨床的に関連する平均変化は、いずれのバイタルサインパラメータ（収縮期及び拡張期血圧、心拍数）に関していずれの処置群においても観察されなかった。第２相治験ＭＣＰ−１タンパク質及び遺伝子発現からのＭＣＰ−１に関するデータ観察は、異なる程度の肝臓損傷及び線維症での慢性肝臓疾患を有する患者の肝組織において上方制御されると示された。以前に示したように、血漿ＭＣＰ−１レベルにおける代償性増加が、非臨床及び臨床試験でのＣＶＣ処置後に観察され、これは強力なＣＣＲ２遮断を示す。人におけるＣＶＣによるＣＣＲ２拮抗作用に次ぐＭＣＰ−１レベルにおける代償性増加の延長の影響は現在まだ知られていないが、利用可能なデータは、４８週の安全性データに基づき、肝胆道障害または肝臓パラメータにおける異常のリスクの増加を示していない。
炎症の兆候は、慢性（３か月及び９か月）サル毒性試験における血漿ＭＣＰ−１レベルが対照の約５倍であった１０００ｍｇ／ｋｇ／日の高用量での微視的評価によって臨床病理学的パラメータまたは肝臓を含むいずれの組織においても見られなかった。
実際、ＮＡＳＨのマウスモデルで観察された１００ｍｇ／ｋｇ／日の用量でのＣＶＣの抗線維化効果は、有意に増加した血漿ＭＣＰ−１レベルと共に見られた。加えて、４８週にわたってＣＶＣ処置対象において観察されたＡＰＲＩ及びＦＩＢ−４線維症指数スコアにおける改善は、有意かつ持続的なＭＣＰ−１上昇にもかかわらず生じた。この試験でも、ＣＶＣは、最大４８週までＣＶＣ １００ｍｇ及び２００ｍｇで処置された１１５対象において概して十分な耐容性を示した。
１年目及び２年目でのＮＡＳ及び肝線維症ステージ（ＮＡＳＨ ＣＲＮシステム及びＩｓｈａｋ）における変化は、組織学により評価されるだろう。肝臓生検のコラーゲンの形態計測的定量的評価における変化も評価されるだろう。有効性エンドポイントとＭＣＰ−１血漿レベル間の相関性は評価されて、ＣＶＣ処置で観察される延長されたＭＣＰ−１の増加がＮＡＳＨによる肝臓線維症を有する対象における潜在的なリスクを示すかどうか決定されるだろう。
実施例２３：炎症及び免疫機能のバイオマーカー
単球上に見いだされるケモカイン受容体であるＣＣＲ２のリガンドであるＭＣＰ−１の経時的な増加における用量応答がＣＶＣで観察され、一方でＥＦＶ群ではＭＣＰ−１はベースライン値のままであった。ＥＦＶ及びＣＶＣ １００ｍｇ及びＣＶＣ ２００ｍｇ処置群間での血漿ＭＣＰ−１のベースラインからの変化における差は、第２４週及び第４８週で統計学的に有意であった（ｐ＜０．００１）。これは、ＣＶＣによる強力及び用量依存的なＣＣＲ２遮断を示す。さらには、両ＣＶＣ処置群で最初の２４週にわたる低減が、単球活性化のバイオマーカーでありＨＩＶ感染における死亡率の独立した予測因子である、ｓＣＤ１４について観察され、一方で、同じ観察期間中にＥＦＶ群ではｓＣＤ１４について増加が観察された。第２４週及び第４８週の間に、ｓＣＤ１４レベルはＣＶＣ処置対象においてベースライン値に戻ったが、ＥＦＶ処置対象では上昇し続けた。ＣＶＣ群とＥＦＶ群間のベースラインからの変化における差は第２４週及び第４８週で、さらに繰り返し解析では第４８週で統計学的に有意であった（ｐ＜０．００１）。これらの結果は、単球活性化の低減へのＣＶＣの潜在的な効果を示す。
他の炎症性バイオマーカー（ｈｓ−ＣＲＰ、フィブリノゲン、ＩＬ−６、及びＤ−ダイマー）及び免疫機能のバイオマーカー（ＣＤ４＋Ｔ細胞上またはＣＤ８＋Ｔ細胞上の総ＣＤ３８＋発現及び総ＨＬＡ ＤＲ＋発現）においてベースラインからの変化における処置群間で意味のある差は観察されなかった。
実施例２４：バクテリアルトランスロケーションに伴うバイオマーカーの測定
ＣＶＣ処置対象におけるｓＣＤ１４レベルにおける低減は、ＨＩＶ感染［１５］を有する患者ならびにＮＡＳＨ［１６−１８］、アルコール性肝臓疾患［１７、１９］、ＨＩＶ／ＨＣＶ重複感染［２０］及び肝硬変［２１］を有するものにおいて一般に観察される現象である、バクテリアルトランスロケーションにおける低減と同等とし得る。バクテリアルトランスロケーションは、腸管壁浸漏として一般に記載される現象である、腸粘膜関門を損なう、腸細胞のタイトジャンクション（ＴＪ）の分解の結果として起こる。腸完全性（ｇｕｔ ｉｎｔｅｇｒｉｔｙ）における低減は、免疫不全及び／または腸内細菌叢における有意な変化を伴っており、ディスバイオシス及び細菌異常増殖とも呼ばれる。リポ多糖類（ＬＰＳ）及び１６ＳリボソームＤＮＡ（１６Ｓ ｒＤＮＡ）などの微生物産物のその後のトランスロケーションは、免疫活性化に寄与する。グラム陰性菌の細胞壁の構成成分であるＬＰＳは、膜または可溶性ＣＤ１４（ｓＣＤ１４；単球のＬＰＳ活性化の際に産生される）及びミエロイド分化−２（ＭＤ−２）−ＴＬＲ４複合体と結合する［１４］。
リポ多糖類は、単球及びマクロファージにおける炎症性サイトカイン、特にＴＮＦ−αの非常に強力な誘導物質である。高い血漿ｓＣＤ１４レベルは、肝炎症、線維症、及び疾患進行の他のマーカーと独立したＨＢＶ及びＨＣＶ感染における疾患進行を予測する［２０］。ＬＰＳを含む、腸起源の細菌産物、とりわけエンドトキシンへの曝露は、肝臓炎症、肝細胞傷害及び肝線維症をもたらす［２２］。ＴＬＲ４依存性機構を介したクッパー細胞の活性化及びその後の肝星細胞の活性化は両方とも線維形成の強力な駆動因子である［１９］。
この仮説は、試験６５２−２−２０２、来たる肝障害試験６５２−１−１２１及び肝臓線維症ＰｏＣ試験６５２−２−２０３からアーカイブした試料においてバクテリアルトランスロケーションのバイオマーカーを試験することによって評価されるだろう。これらのバイオマーカーは、ＬＰＳ、ＬＰＳ結合タンパク質（ＬＢＰ）、ｓＣＤ１４、腸型脂肪酸結合蛋白（Ｉ−ＦＡＢＰ）を含むだろう。
実施例２５−ＣＶＣ臨床第１相データ及び第２相に基づく結論
ＨＩＶ感染対象ＣＶＣにおけるデータは、健常ボランティア対象（ｎ＝３９０）における１４単回用量及び複数用量バイオアベイラビリティ試験及びＤＤＩ試験、ならびに最大４８週までＣＶＣで処置された１１５対象を含むＨＩＶ感染対象（ｎ＝１５９）における２つの第２相試験において評価されている。
ＣＶＣ単独が与えられた第１相試験において非常に頻度高く観察された有害事象は、第１相試験ユニットにおいて一般に報告された症状と矛盾しなかった。全体的には、有害事象のパターンは、最大８００ｍｇまでの単回用量及び最大２００ｍｇまでの１０日間にわたる複数の一日用量のＣＶＣを評価するこれらの第１相試験においてＣＶＣが概して十分な耐容性を示したことを示す。これらの試験にわたって観察されたトランスアミナーゼ上昇の頻度及び程度は、科学文献にて第１相試験について記載されたパターンと矛盾しなかった。ＣＶＣは、２５〜１５０ｍｇ用量（ｎ＝４４）での第２ａ相の１０日間ＣＶＣ単独療法試験において、及びＣＶＣ １００ｍｇ及びＣＶＣ ２００ｍｇ（ｎ＝１１５）の用量での第２ｂ相の４８週有効性及び安全性試験において評価されている。両試験において、及び全ての用量のＣＶＣは、好ましい有害事象プロファイルを表した。第２ｂ相試験からの４８週データに基づき、ＣＶＣは、肝胆道障害またはトランスアミナーゼ上昇のリスクの増加を伴わなかった。この試験では、総コレステロール及びＬＤＬコレステロールにおける低減が、ＣＶＣ処置対象において観察された。ＥＣＧパラメータにおける臨床的に関連する変化または任意のバイタルサインパラメータに関する変化は４８週の処置期間中に観察されなかった。有害事象、検査値異常（ＣＰＫ、ＡＬＴ、ＡＳＴ及びビリルビン上昇を含む）または用量制限毒性に関する明らかな用量または曝露関係性は観察されなかった。
第１相プログラムからのデータ及びＨＩＶ感染対象の試験からの第２相データに基づき、我々は、ＮＡＳＨによる肝線維症を有する対象の処置において１日１回摂取されるＣＶＣ １５０ｍｇを２年の期間にわたって試験６５２−２−２０３（主要試験エンドポイントは１年目）で評価すると計画する。試験のクロスオーバーデザインは、２年連続のＣＶＣ処置ならびに１年間のプラセボ処置その後１年間のＣＶＣ処置の安全性及び有効性を評価するだろう。ＣＶＣ処置がＮＡＳＨによる肝線維症に与える影響の標準的な評価は、肝臓生検からの組織学的データ及び組織学的改善の他の測定値に基づいて実行されるだろう。安全性及び耐容性が評価され、肝の毒性または他の器官の毒性のサインについての注意深いモニタリングが実行されるだろう。これには、独立データモニタリング委員会による周期的なデータレビューを含む。試験は、ＣＶＣの抗炎症性及び抗線維化活性及びＮＡＳＨによる肝線維症へのその影響を明瞭にする、及びＣＶＣ １５０ｍｇの安全性及び耐容性の評価のための追加のデータを提供すると期待される。
実施例２６−ＮＡＳＨにおける肝臓の組織学的改善を評価するためのＣＶＣの試験
ＣＶＣが抗炎症性及び抗線維化活性を有し、概して十分に耐容性を示すことを示す、非臨床及び臨床データに基づき、Ｔｏｂｉｒａ社は、第２相試験にてＮＡＳＨによる肝線維症を有する対象におけるＣＶＣを調査することを計画する。この第２相試験は、２型糖尿病（Ｔ２ＤＭ）、全米コレステロール教育プログラム（ＮＣＥＰ）により定義された代謝症候群（ＭＳ）の少なくとも１つの基準を伴う高ボディ・マス・インデックス（ＢＭＩ）（２５ｋｇ／ｍ２超）、架橋線維化、及び／または明確なＮＡＳＨ（５以上のＮＡＳ）を含む、少なくとも１つの寄与因子が存在するために疾患進行の恐れがある肝臓線維症を有する成人対象におけるＮＡＳＨの処置に対するＣＶＣの有効性を評価するだろう。
第２相試験は、この重篤な状態を処置するＣＶＣの可能性を評価するように、及びＮＡＳＨによる肝線維症を有する患者の重大なアンメット・メディカル・ニーズに取り組むように設計される。この試験は、ＮＡＳＨによる肝線維症を有する対象における、プラセボと比較したときのＣＶＣ １５０ｍｇの有効性及び安全性を評価するように設計された無作為化、二重盲検、プラセボ対照試験である。試験集団は、疾患進行の恐れがあるＮＡＳＨ（４以上のＮＡＳ）による肝臓線維症（ＮＡＳＨ臨床研究ネットワーク［ＣＲＮ］ステージ１〜３）を有する対象からなる。
ＣＶＣ １５０ｍｇ（ＤＰ７製剤）の用量は、以下を考慮して、試験６５２−２−２０３にて肝臓線維症を有する対象におけるＮＡＳＨの処置について評価されるだろう。
ＣＶＣは抗炎症性及び抗線維化活性の両方を提供すると予測され、これは主に、ＣＣＲ２及びＣＣＲ５共受容体のその拮抗作用、ならびに肝臓傷害の部位への炎症促進性単球の動員、遊走及び浸潤に結果として与える効果のためである。それゆえ、この試験において使用するための用量を選択するために主に考慮することは、ＣＶＣ血漿曝露がＣＣＲ２及びＣＣＲ５の最大に近い拮抗作用を提供するのに十分であることを確かにすることである。
ＣＶＣによるＣＣＲ２及びＣＣＲ５拮抗作用は、インビトロ及びエキソビボ試験において、及びＨＩＶ−１感染の処置におけるＣＶＣの２つの臨床試験（第２ａ相試験６５２−２−２０１及び第２ｂ相試験６５２−２−２０２）において評価されている。それぞれの場合で、ＣＣＲ２及びＣＣＲ５の強力な及び濃度依存性の拮抗作用が観察された。ＣＣＲ２及びＣＣＲ５拮抗作用の臨床的エビデンスは、血漿ＭＣＰ−１（ＣＣＲ２のリガンド）濃度におけるベースラインからの変化及び血漿ＨＩＶ−ＲＮＡ（ＨＩＶ侵入に必要とされるＣＣＲ５共受容体）における変化を、それぞれこれらの２つの第２相試験において測定することにより確立された。
試験６５２−２−２０２では、ＣＶＣ １００ｍｇ及びＣＶＣ ２００ｍｇ（ＤＰ６製剤）の用量を、１１５人のＨＩＶ−１感染対象において最大４８週間まで（ＣＶＣ摂取の平均［標準誤差］期間：４１．１［１．３３］週）評価し、ＨＩＶ感染の処置において有効で十分に耐容性を示すと見いだされた。ＣＶＣ血漿濃度の増加がウイルス学的転帰の改善に相関すると示した曝露応答解析に基づき、第３相試験においてＨＩＶ感染を処置するための抗ウイルス剤としてＣＶＣをさらに評価するためにはＣＶＣ ２００ｍｇが適切な用量と考えられた。
ＣＶＣ血漿曝露は、しかしながら、ＣＶＣが同じ投薬条件下で投与されたときＨＩＶ感染対象と比較して非ＨＩＶ感染健常ボランティア対象においてより高いように思われる（試験６５２−１−１１１、６５２−１−１１０、６５２−２−２０２）。ＣＶＣ １５０ｍｇの用量は、試験６５２ ２ ２０３において肝臓線維症を有する対象におけるＮＡＳＨの処置について評価されるだろう。基準とする入手可能データに基づき、この用量は、治療的に関連する範囲にあると考えられ、ＮＡＳＨ及び肝臓線維症を有する対象において、試験６５２−２−２０２において評価され強力なＣＣＲ２及びＣＣＲ５拮抗作用をもたらすと見いだされたＣＶＣ ２００ｍｇのそれと同等な曝露を提供すると予想される。
合計で２５０対象（処置群あたり１２５対象）が計画され、総試験処置期間は２年だろう。試験集団には、以下の１つ以上の寄与因子（複数可）が存在するために疾患進行のおそれが増大しているＮＡＳＨ（４以上のＮＡＳ）及び肝臓線維症（ステージ１〜３［ＮＡＳＨ ＣＲＮシステム］）を有する対象が含まれるだろう。
２型糖尿病の書類化された証拠
ＮＣＥＰにより定義される、代謝症候群の以下の基準：
中心性肥満：ウエスト周囲１０２ｃｍまたは４０インチ以上（男性）、８８ｃｍまたは３５インチ以上（女性）
脂質異常症：１．７ｍｍｏｌ／Ｌ（１５０ｍｇ／ｄＬ）以上のＴＧ
脂質異常症：４０ｍｇ／ｄＬ未満（男性）、５０ｍｇ／ｄＬ未満（女性）のＨＤＬコレステロール
１３０／８５ｍｍＨｇ以上の血圧（または高血圧の処置を受けている）
６．１ｍｍｏｌ／Ｌ（１１０ｍｇ／ｄＬ）以上の空腹時血漿グルコースの少なくとも１つを伴う高ＢＭＩ（２５ｋｇ／ｍ２超）；または
架橋線維化（ＮＡＳＨ ＣＲＮステージ３）及び／または明確なＮＡＳＨ（５以上のＮＡＳ）。
２つの処置期間があるだろう。処置期間１は、１年間の二重盲目無作為化処置（ＣＶＣ １５０ｍｇまたは対応するプラセボ）からなるだろう。対象及び治験責任医師は、期間１中、処置割当に対して盲検のままだろう。処置期間２中、元々ＣＶＣ １５０ｍｇに無作為化された対象は、もう１年その処置を受け続け、元々プラセボに無作為化された対象は、プラセボからＣＶＣ １５０ｍｇへとクロスオーバーするだろう。
対象は、治験薬を、１日１回（ＱＤ）２年間にわたって受けるだろう。試験には２つの処置期間が含まれるだろう：処置期間１（第一の年）及び処置期間２（第二の年）。適格な対象がＣＶＣ（ｎ＝１２６）または対応するプラセボ（ｎ＝１２６）を処置の第一の年（処置期間１）に受けるように割当られるだろう。処置期間２では、プラセボ処置対象（ベースラインで無作為化）の半分が、処置の第二の年に、ＣＶＣにクロスオーバーし、残りの半分はプラセボのままだろう。ベースライン（１日目）に、スクリーニング評価後、適格な対象が、スクリーニング時のＮＡＳ（４または５以上）及び線維症ステージ（２以下または２超）により層別化された置換ブロック無作為化を使用して処置群に割当られるだろう。適格な対象は、以下の３処置群のうちの１つに２：１：１の比率で無作為化されるだろう。
ＣＶＣ及び対応するプラセボは、二重盲検治験薬として投与されるだろう。治験薬（ＣＶＣ／対応するプラセボ）は、毎朝食事と一緒に摂取されるべきである。
主要エンドポイント（１年目）生検は、処置期間１の終了前１か月以内で処置期間２開始前に行われなければいけない。最後の（２年目）生検は、治験薬を用いた処置の終了前１か月以内に行われないといけない。
登録は、最大２０人までの対象が無作為化され処置され、データモニタリング委員会（ＤＭＣ）により安全性データがレビューされるまでは、限られた数の部位で開始されるだろう。最初のＤＭＣレビューは、最初の対象が登録された３か月以内、または最大２０人までの対象が無作為化されて少なくとも１０人の対象が１か月間処置された時のいずれか先に来た方にてなされるだろう。残りの試験対象のその後の登録は、ＤＭＣがこれらの最初の１０〜２０対象について安全性データを評価し、試験を継続してもよいと決定したらなされるだろう。
処置期間１中、全ての対象は、１か月目の第２週及び第４週で安全性評価を受けるだろう。加えて、最初の２０対象は、１か月目の第１週及び第３週で安全性評価を受けるだろう。全ての対象は、２か月目には２週ごとに、３〜６か月目の間は月１回、及び８、１０、１２か月目に試験来診評価を受けるだろう。処置期間２中は、対象は、１３〜１５か月目の間は月１回、ならびに１８、２１及び２４か月目に来診するだろう。
主要評価
試験中：
肝臓生検はスクリーニング時、主要エンドポイント時（１年目：処置期間１の終了前１か月以内で処置期間２開始前）、及び２年目（処置の終了前１か月以内）に採取されるだろう。
炎症促進性サイトカイン、炎症のバイオマーカー、肝細胞アポトーシスのバイオマーカー、バクテリアルトランスロケーションのバイオマーカー、空腹時代謝パラメータ、腎臓パラメータ、及びｅＧＦＲが、ベースラインならびに３、６、１２、１５、１８、及び２４か月目に測定されるだろう。
利用可能な部位では、非侵襲的肝臓イメージング（例えば、超音波一過性エラストグラフィ（ｔｒａｎｓｉｅｎｔ ｅｌａｓｔｏｇｒａｐｈｙ）［ＴＥ］、２次元磁気共鳴エラストグラフィ［ＭＲＥ］、音響放射圧［ＡＲＦＩ］）の評価がベースライン及び６、１２、１８、及び２４か月目で行われるだろう。
ＣＶＣについての薬物動態試料は、ベースライン（処置を始める直前の投薬前試料）、０．５、３及び１５か月目（投薬前及び投薬後少なくとも１時間）、ならびに６、１２、１８及び２４か月目（投薬前）にて回収されるだろう。
体重、ウエスト周囲、ヒップ周囲、腕周囲、及び上腕三頭筋部皮下脂肪厚が、ベースラインならびに３、６、１２、１５、１８、及び２４か月目で行われるだろう。身長は、スクリーニング時及び１２か月目で行われるだろう。
理学的検査及び検査解析は、各来診時に行われるだろう。ＥＣＧは、ベースラインならびに３、６、１２、１５、１８、及び２４か月目に行われるだろう。
有害事象及び併用薬を各来診時に評価するだろう。
ＮＡＳＨ、肝臓線維症、及び肝臓生検手法に関するインフォームド・コンセント及び患者教育材料がスクリーニング来診時に復習されるだろう。
治験薬予定表は、治験薬が調剤されるのと同時に各対象に提供されるだろう。予定表は、全ての処置中の来院及び早期中止来診の際に復習されるだろう。
対象は、試験終了経過観察評価のためにその最後の処置を受けた１か月後に、診療所に戻るだろう。
試験の主要な有効性目的は、小葉炎症及び風船様腫大カテゴリーの両方における少なくとも１点改善とともにＮＡＳにおける最小２点改善及び線維症ステージが同時的に悪化していない（悪化は、架橋線維化または肝硬変への進行と定義される）ことにより定義される、スクリーニング生検に対する１年目での非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）活性スコア（ＮＡＳ）における肝組織学的改善を評価することだろう。
二次的な有効性目的は、２年目で線維症ステージが同時的に悪化していない（悪化は、架橋線維化または肝硬変への進行と定義される）ことを伴うＮＡＳＨの解決の評価；１年目で線維症ステージが同時的に悪化していない（悪化は、架橋線維化または肝硬変への進行と定義される）ことを伴うＮＡＳＨの解決；肝臓線維症を有する成人対象におけるＮＡＳＨの１及び２年間にわたる処置のＣＶＣの安全性及び耐容性；集団ＰＫ解析におけるＣＶＣの血漿ＰＫの特徴づけ；１つより多いカテゴリーでの少なくとも１点改善とともにＮＡＳにおける最小２点改善と線維症ステージが同時的に悪化していない（悪化は、架橋線維化または肝硬変への進行と定義される）ことにより定義される２年目でのＮＡＳにおける肝組織学的改善の評価；１年目及び２年目での肝臓生検の形態計測定量的コラーゲンにおける変化により決定される肝臓線維症を有する成体対象におけるプラセボに対するＣＶＣの有効性の評価；１年目及び２年目での組織学的線維症ステージ（非アルコール性脂肪性肝炎臨床研究ネットワーク［ＮＡＳＨ ＣＲＮ］システム及びＩｓｈａｋ）における変化の評価；１年目及び２年目での肝組織線維形成性タンパク質（α−平滑筋アクチン［α−ＳＭＡ］）における変化の評価；非侵襲性肝線維症マーカー（ＡＰＲＩ、ＦＩＢ−４、ヒアルロン酸、ＦｉｂｒｏＴｅｓｔ（ＦｉｂｒｏＳｕｒｅ）、ＮＡＦＬＤ線維症スコア［ＮＦＳ］及びＥｎｈａｎｃｅｄ Ｌｉｖｅｒ Ｆｉｂｒｏｓｉｓ ｔｅｓｔ［ＥＬＦ］）における３、６、１２、１５、１８、及び２４か月目でのベースラインからの変化の評価；１年目及び２年目での肝細胞アポトーシスのバイオマーカーにおけるベースラインからの変化の評価；肝臓パラメータ及び空腹時代謝パラメータにおける３、６、１２、１５、１８、及び２４か月目でのベースラインからの変化の評価；体重、ＢＭＩ、ウエスト周囲、ウエスト対ヒップ比、腕周囲、及び上腕三頭筋部皮下脂肪厚における３、６、１２、１５、１８、及び２４か月目でのベースラインからの変化の評価を含む。
第三の目的には、非侵襲的肝臓イメージング法（例えば、超音波一過性エラストグラフィ［ＴＥ］、２次元磁気共鳴エラストグラフィ［ＭＲＥ］、音響放射圧［ＡＲＦＩ］）における６、１２、１８、及び２４か月目で（利用可能部位で）のベースラインからの変化；炎症促進性サイトカイン及び炎症のバイオマーカーにおける３、６、１２、１５、１８、及び２４か月目でのベースラインからの変化；推算糸球体濾過率（ｅＧＦＲ）及び腎臓パラメータにおける３、６、１２、１５、１８、及び２４か月目でのベースラインからの変化；及びバクテリアルトランスロケーションに伴うバイオマーカーにおける３、６、１２、１５、１８、及び２４か月目でのベースラインからの変化の評価が含まれる。
本明細書の詳細な説明は、本発明の様々な態様及び実施形態を記載するが、別段の指示がない限り、それらのいずれも限定を意図しない。実際、本開示を読んだ当業者は、別段の指示がない限り、その全てが本発明の一部と考えられるべきである、本発明の範囲及び精神から逸脱することなく成されることができる変形、変更、及び調整を認識するだろう。ゆえに、出願者は、本明細書に記載の発明は添付の特許請求の範囲によってのみ限定されることを認識する。
参考文献
Ｓａｉｍａｎ Ｙ，Ｆｒｉｅｄｍａｎ ＳＬ．Ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ｃｈｅｍｏｋｉｎｅｓ ｉｎ ａｃｕｔｅ ｌｉｖｅｒ ｉｎｊｕｒｙ．２０１２；３：２１３．
Ｚｉｍｍｅｒｍａｎｎ ＨＷ，Ｔａｃｋｅ Ｆ．Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ ｐａｔｈｗａｙｓ ａｎｄ ｉｍｍｕｎｅ ｃｅｌｌ ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ ａｓ ａ ｎｏｖｅｌ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ａｐｐｒｏａｃｈ ｉｎ ｌｉｖｅｒ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ａｎｄ ｆｉｂｒｏｓｉｓ．Ｉｎｆｌａｍｍ Ａｌｌｅｒｇｙ Ｄｒｕｇ Ｔａｒｇｅｔｓ．２０１１；１０：５０９−５３６．
Ｓｅｋｉ Ｅ，Ｄｅ Ｍｉｎｉｃｉｓ Ｓ，Ｇｗａｋ ＧＹ，Ｋｌｕｗｅ Ｊ，Ｉｎｏｋｕｃｈｉ Ｓ，Ｂｕｒｓｉｌｌ ＣＡ，Ｌｌｏｖｅｔ ＪＭ，Ｂｒｅｎｎｅｒ ＤＡ，Ｓｃｈｗａｂｅ ＲＦ．ＣＣＲ１ ａｎｄ ＣＣＲ５ ｐｒｏｍｏｔｅ ｈｅｐａｔｉｃ ｆｉｂｒｏｓｉｓ ｉｎ ｍｉｃｅ．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ．２００９；１１９：１８５８−１８７０．
Ｓｅｋｉ Ｅ，ｄｅ Ｍｉｎｉｃｉｓ Ｓ，Ｉｎｏｋｕｃｈｉ Ｓ，Ｔａｕｒａ Ｋ，Ｍｉｙａｉ Ｋ，ｖａｎ Ｒｏｏｉｊｅｎ Ｎ，Ｓｃｈｗａｂｅ ＲＦ，Ｂｒｅｎｎｅｒ ＤＡ．ＣＣＲ２ ｐｒｏｍｏｔｅｓ ｈｅｐａｔｉｃ ｆｉｂｒｏｓｉｓ ｉｎ ｍｉｃｅ．Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ．２００９；５０：１８５−１９７．
Ｍｉｕｒａ Ｋ，Ｙａｎｇ Ｌ，ｖａｎ Ｒｏｏｉｊｅｎ Ｎ，Ｏｈｎｉｓｈｉ Ｈ，Ｓｅｋｉ Ｅ．Ｈｅｐａｔｉｃ ｒｅｃｒｕｉｔｍｅｎｔ ｏｆ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ ｐｒｏｍｏｔｅｓ ｎｏｎａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｓｔｅａｔｏｈｅｐａｔｉｔｉｓ ｔｈｒｏｕｇｈ ＣＣＲ２．Ａｍ Ｊ Ｐｈｙｓｉｏｌ Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔ Ｌｉｖｅｒ Ｐｈｙｓｉｏｌ．２０１２；３０２：Ｇ１３１０−１３３１．
Ｍｉｔｃｈｅｌｌ Ｃ，Ｃｏｕｔｏｎ Ｄ，Ｃｏｕｔｙ ＪＰ，Ａｎｓｏｎ Ｍ，Ｃｒａｉｎ ＡＭ，Ｂｉｚｅｔ Ｖ，Ｒeｎｉａ Ｌ，Ｐｏｌ Ｓ，Ｍａｌｌｅｔ Ｖ，Ｇｉｌｇｅｎｋｒａｎｔｚ Ｈ．Ｄｕａｌ ｒｏｌｅ ｏｆ ＣＣＲ２ ｉｎ ｔｈｅ ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈｅ ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ ｏｆ ｌｉｖｅｒ ｆｉｂｒｏｓｉｓ ｉｎ ｍｉｃｅ．Ａｍ Ｊ Ｐａｔｈｏｌ．２００９；１７４：１７６６−１７７５．
Ｘｉａ Ｙ，Ｅｎｔｍａｎ ＭＬ，Ｗａｎｇ Ｙ．ＣＣＲ２ ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｔｈｅ ｕｐｔａｋｅ ｏｆ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ−ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ ｉｎ ｒｅｎａｌ ｆｉｂｒｏｓｉｓ．ＰＬｏＳ ＯＮＥ ２０１３；８（１０）：ｅ７７４９３．ｄｏｉ：１０．１３７１／ｊｏｕｒｎａｌ．ｐｏｎｅ．００７７４９３
Ｋａｒｌｍａｒｋ ＫＲ，Ｗａｓｍｕｔｈ ＨＥ，Ｔｒａｕｔｗｅｉｎ Ｃ，Ｔａｃｋｅ Ｆ．Ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ−ｄｉｒｅｃｔｅｄ ｉｍｍｕｎｅ ｃｅｌｌ ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ ｉｎ ａｃｕｔｅ ａｎｄ ｃｈｒｏｎｉｃ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ．Ｅｘｐｅｒｔ Ｒｅｖｉｅｗ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ．２００８；２：２３３−２４２
Ｖｉｅｌｈａｕｅｒ Ｖ，Ａｎｄｅｒｓ Ｈ−Ｊ，Ｍａｃｋ Ｍ，Ｃｉｈａｋ Ｊ，Ｓｔｒｕｔｚ Ｆ，Ｓｔａｎｇａｓｓｉｎｇｅｒ Ｍ，Ｌｕｃｋｏｗ Ｂ，Ｇｒoｎｅ Ｈ−Ｊ，Ｓｃｈｌoｎｄｏｒｆｆ Ｄ．Ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅ ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ ｉｎ ｔｈｅ ｍｏｕｓｅ：Ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｖｅ ｆｉｂｒｏｓｉｓ ｃｏｒｒｅｌａｔｅｓ ｗｉｔｈ ｔｕｂｕｌｏｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌ ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ＣＣ ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ２：ａｎｄ ５−ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｌｅｕｋｏｃｙｔｅｓ．Ｊ Ａｍ Ｓｏｃ Ｎｅｐｈｒｏｌ ２００１；１２：１１７３−１１８７．
Ｓｅｇｅｒｅｒ Ｓ，Ｍａｃｋ Ｍ，Ｒｅｇｅｌｅ Ｈ，Ｋｅｒｊａｓｃｈｋｉ Ｄ，Ｓｃｈｌoｎｄｏｒｆｆ Ｄ．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｃ−Ｃ ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ５ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｋｉｄｎｅｙ ｄｉｓｅａｓｅ．Ｋｉｄｎｅｙ Ｉｎｔ １９９９；５６：５２−６４．
Ｗａｉ Ｃ−Ｔ，Ｇｒｅｅｎｓｏｎ Ｊ，Ｆｏｎｔａｎａ Ｒ，Ｋａｌｂｆｌｅｉｓｃｈ Ｊ，Ｍａｒｒｅｒｏ Ｊ，Ｃｏｎｊｅｅｖａｒａｍ Ｈ，Ｌｏｋ Ａ．Ａ ｓｉｍｐｌｅ ｎｏｎｉｎｖａｓｉｖｅ ｉｎｄｅｘ ｃａｎ ｐｒｅｄｉｃｔ ｂｏｔｈ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｆｉｂｒｏｓｉｓ ａｎｄ ｃｉｒｒｈｏｓｉｓ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｃｈｒｏｎｉｃ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ．Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ ２００３；３８：５１８−５２６．
Ｖａｌｌｅｔ−Ｐｉｃｈａｒｄ Ａ，Ｍａｌｌｅｔ Ｖ，Ｎａｌｐａｓ Ｂ，Ｖｅｒｋａｒｒｅ Ｖ，Ｎａｌｐａｓ Ａ，Ｄｈａｌｌｕｉｎ−Ｖｅｎｉｅｒ Ｖ，Ｆｏｎｔａｉｎｅ Ｈ，Ｐｏｌ Ｓ．ＦＩＢ−４：ａｎ ｉｎｅｘｐｅｎｓｉｖｅ ａｎｄ ａｃｃｕｒａｔｅ ｍａｒｋｅｒ ｏｆ ｆｉｂｒｏｓｉｓ ｉｎ ＨＣＶ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ．Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｗｉｔｈ ｌｉｖｅｒ ｂｉｏｐｓｙ ａｎｄ ＦｉｂｒｏＴｅｓｔ．Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ ２００７；４６：３２−３６．
Ｓａｎｄｌｅｒ ＮＧ，Ｗａｎｄ Ｈ，Ｒｏｑｕｅ Ａ，ｅｔ ａｌ．Ｐｌａｓｍａ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ｓｏｌｕｂｌｅ ＣＤ１４ ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔｌｙ ｐｒｅｄｉｃｔ ｍｏｒｔａｌｉｔｙ ｉｎ ＨＩＶ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ．ＪＩＤ ２０１１；２０３：７８０−７９０．
Ｂｒｅｎｃｈｌｅｙ Ｊ，Ｐｒｉｃｅ ＤＡ，Ｓｃｈａｃｋｅｒ ＴＷ，Ａｓｈｅｒ ＴＥ，Ｓｉｌｖｅｓｔｒｉ Ｇ，Ｒａｏ Ｓ，Ｋａｚｚａｚ Ｚ，Ｂｏｒｎｓｔｅｉｎ Ｅ，Ｌａｍｂｏｔｔｅ Ｏ，Ａｌｔｍａｎｎ Ｄ，Ｂｌａｚａｒ ＢＲ，Ｒｏｄｒｉｇｕｅｚ Ｂ，Ｔｅｉｘｅｉｒａ−Ｊｏｈｎｓｏｎ Ｌ，Ｌａｎｄａｙ Ａ，Ｍａｒｔｉｎ ＪＮ，Ｈｅｃｈｔ ＦＭ，Ｐｉｃｋｅｒ ＬＪ，Ｌｅｄｅｒｍａｎ ＭＭ，Ｄｅｅｋｓ ＳＧ，Ｄｏｕｅｋ ＤＣ．Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎ ｉｓ ａ ｃａｕｓｅ ｏｆ ｓｙｓｔｅｍｉｃ ｉｍｍｕｎｅ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｉｎ ｃｈｒｏｎｉｃ ＨＩＶ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ．Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ２００６；１２：１３６５−１３７１．
Ｖａｊｒｏ Ｐ，Ｐａｏｌｅｌｌａ Ｇ，Ｆａｓａｎｏ Ａ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｔａ ａｎｄ Ｇｕｔ−Ｌｉｖｅｒ Ａｘｉｓ：Ｔｈｅｉｒ Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅｓ ｏｎ Ｏｂｅｓｉｔｙ ａｎｄ Ｏｂｅｓｉｔｙ−Ｒｅｌａｔｅｄ Ｌｉｖｅｒ Ｄｉｓｅａｓｅ ＪＰＧＮ ２０１３；５６：４６１−４６８．
Ｒｏｈ ＹＳ，Ｓｅｋｉ Ｅ．Ｔｏｌｌ−ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｉｎ ａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ，ｎｏｎ−ａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｓｔｅａｔｏｈｅｐａｔｉｔｉｓ ａｎｄ ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ ２０１３；２８：３８−４２．
Ｉｌａｎ Ｙ．Ｌｅａｋｙ ｇｕｔ ａｎｄ ｔｈｅ ｌｉｖｅｒ：Ａ ｒｏｌｅ ｆｏｒ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎ ｉｎ ｎｏｎａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｓｔｅａｔｏｈｅｐａｔｉｔｉｓ．Ｗｏｒｌｄ Ｊ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ ２０１２ Ｊｕｎｅ ７；１８：２６０９−２６１８．
Ｐｅｔｒａｓｅｋ Ｊ，Ｍａｎｄｒｅｋａｒ Ｐ，Ｓｚａｂｏ Ｇ．Ｔｏｌｌ−Ｌｉｋｅ Ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｉｎ ｔｈｅ Ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ ｏｆ Ａｌｃｏｈｏｌｉｃ Ｌｉｖｅｒ Ｄｉｓｅａｓｅ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ２０１０，Ａｒｔｉｃｌｅ ＩＤ ７１０３８１，１２ ｐａｇｅｓ．ｄｏｉ：１０．１１５５／２０１０／７１０３８１．
Ｓａｎｄｌｅｒ Ｎ，Ｋｏｈ Ｃ，Ｒｏｑｕｅ Ａ，Ｅｃｃｌｅｓｔｏｎ Ｊ，Ｓｉｅｇｅｌ Ｒ，Ｄｅｍｉｎｏ Ｍ，Ｋｌｅｉｎｅｒ Ｄ，Ｄｅｅｋｓ Ｓ，Ｌｉａｎｇ Ｔ−Ｊ，Ｈｅｌｌｅｒ Ｔ，Ｄｏｕｅｋ Ｄ．Ｈｏｓｔ Ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ Ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｅｄ Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ Ｐｒｅｄｉｃｔｓ Ｏｕｔｃｏｍｅｓ ｏｆ Ｐａｔｉｅｎｔｓ Ｗｉｔｈ ＨＢＶ ｏｒ ＨＣＶ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ ２０１１；１４１：１２２０−１２３０．ｄｏｉ：１０．１０５３／ｊ．ｇａｓｔｒｏ．２０１１．０６．０６３．
Ｗｉｅｓｔ Ｒ，Ｌａｗｓｏｎ Ｍ，Ｇｅｕｋｉｎｇ Ｍ．Ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎ ｉｎ ｌｉｖｅｒ ｃｉｒｒｈｏｓｉｓ．Ｊ Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ ２０１４；６０（１）：１９７−２０９．
Ｓｈａｎａｂ ＡＡ，Ｓｃｕｌｌｙ Ｐ，Ｃｒｏｓｂｉｅ Ｏ，Ｂｕｃｋｌｅｙ Ｍ，Ｏ’Ｍａｈｏｎｙ Ｌ，Ｓｈａｎａｈａｎ Ｆ，Ｇａｚａｒｅｅｎ Ｓ，Ｍｕｒｐｈｙ Ｅ，Ｑｕｉｇｌｅｙ ＥＭ．Ｓｍａｌｌ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｏｖｅｒｇｒｏｗｔｈ ｉｎ ｎｏｎａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｓｔｅａｔｏｈｅｐａｔｉｔｉｓ：ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｔｏｌｌ−ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ４ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｐｌａｓｍａ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ ８．Ｄｉｇ Ｄｉｓ Ｓｃｉ ２０１１；５６：１５２４−１５３４
Ｈｅｎａｏ−Ｍｅｊｉａ Ｊ，Ｅｌｉｎａｖ Ｅ，Ｊｉｎ Ｃ，Ｈａｏ Ｌ，Ｍｅｈａｌ ＷＺ，Ｓｔｒｏｗｉｇ Ｔ，Ｔｈａｉｓｓ ＣＡ，Ｋａｕ ＡＬ，Ｅｉｓｅｎｂａｒｔｈ ＳＣ，Ｊｕｒｃｚａｋ ＭＪ，Ｃａｍｐｏｒｅｚ Ｊ−Ｐ，Ｓｈｕｌｍａｎ ＧＩ，Ｇｏｒｄｏｎ ＪＩ，Ｈｏｆｆｍａｎ ＨＭ；Ｆｌａｖｅｌｌ ＲＡ．Ｉｎｆｌａｍｍａｓｏｍｅ−ｍｅｄｉａｔｅｄ ｄｙｓｂｉｏｓｉｓ ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＮＡＦＬＤ ａｎｄ ｏｂｅｓｉｔｙ．Ｎａｔｕｒｅ ２０１２；４９２：１７９−１８５．ｄｏｉ：１０．１０３８／ｎａｔｕｒｅ１０８０９．
Ｋｌｉｂａｎｏｖ，Ｏｌｇａ Ｍ．；Ｗｉｌｌｉａｍｓ，Ｓｈａｎｎｏｎ Ｈ．；Ｉｌｅｒ，Ｃａｍｅｒｏｎ Ａ （２０１０）．”Ｃｅｎｉｃｒｉｖｉｒｏｃ，ａｎ ｏｒａｌｌｙ ａｃｔｉｖｅ ＣＣＲ５ ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ ｆｏｒ ｔｈｅ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ＨＩＶ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ”．Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎａｌ Ｄｒｕｇｓ １１（８）：９４０−９５０．
Ｋｌｅｉｎｅｒ ＤＥ．ｅｔ ａｌ．，Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ，Ｄｅｓｉｇｎ ａｎｄ ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｈｉｓｔｏｌｏｇｉｃａｌ ｓｃｏｒｉｎｇ ｓｙｓｔｅｍ ｆｏｒ ｎｏｎａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｆａｔｔｙ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ；２００５；４１：１３１３−１３２１．
Ｆｕｊｉｉ Ｈ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒ．Ｔｈｒｏｍｂ．２００９；１６：８９３．
Ｒａｎｇｗａｌａ Ｆ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．２０１１；２２４：４０１．
Ｓｅｋｉ ｅｔ ａｌ．ＣＣＲ１ ａｎｄ ＣＣＲ５ ｐｒｏｍｏｔｅ ｈｅｐａｔｉｃ ｆｉｂｒｏｓｉｓ ｉｎ ｍｉｃｅ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．２００９；１１９（７）：１８５８−１８７０．
Ｘｕ ｅｔ ａｌ．Ｌｉｖｅｒ ｆｉｂｒｏｓｉｓ：ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｏｆ ｉｍｍｕｎｅ−ｍｅｄｉａｔｅｄ ｌｉｖｅｒ ｉｎｊｕｒｙ．Ｃｅｌｌｕｌａｒ ＆ Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．；２０１２；９：２９６−３０１．
Ｋａｒｌｍａｒｋ ｅｔ ａｌ，Ｅｘｐｅｒｔ Ｒｅｖ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．Ｈｅｐａｔｏｌ．２（２），２３３−２４２ （２００８）．
Ｍｉｔｃｈｅｌｌ Ｃ， ｅｔ ａｌ．Ｄｕａｌ ｒｏｌｅ ｏｆ ＣＣＲ２ ｉｎ ｔｈｅ ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈｅ ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ ｏｆ ｌｉｖｅｒ ｆｉｂｒｏｓｉｓ ｉｎ ｍｉｃｅ．Ａｍ Ｊ Ｐａｔｈｏｌ．２００９；１７４：１７６６−１７７５．
Ｂｅｒｒｅｓ Ｍ−Ｌ，ｅｔ ａｌ．Ａｎｔａｇｏｎｉｓｍ ｏｆ ｔｈｅ ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ Ｃｃｌ５ ａｍｅｌｉｏｒａｔｅｓ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｌｉｖｅｒ ｆｉｂｒｏｓｉｓ ｉｎ ｍｉｃｅ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ．Ｎｏｖｅｍｂｅｒ ２０１０；１２０（１１）：４１２９−４１４０
Ｂｅｎｙｏｎ，ＲＣ ａｎｄ ＭＪ Ａｒｔｈｕｒ，Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｍａｔｒｉｘ ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ｈｅｐａｔｉｃ ｓｔｅｌｌａｔｅ ｃｅｌｌｓ．Ｓｅｍｉｎ Ｌｉｖｅｒ Ｄｉｓ．２００１ Ａｕｇ；２１（３）：３７３−８４．
Ｓｈｅｔｈ ＳＧ，Ｃｈｏｐｒａ Ｓ．Ｎａｔｕｒａｌ ｈｉｓｔｏｒｙ ａｎｄ ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ｏｆ ｎｏｎａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｆａｔｔｙ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ ｉｎ ａｄｕｌｔｓ，ＵｐＴｏＤａｔｅ；２０１４
Ｃｈａｌａｓａｎｉ Ｎ，Ｙｏｕｎｏｓｓｉ Ｚ，Ｌａｖｉｎｅ ＪＥ，Ｄｉｅｈｌ ＡＭ，Ｂｒｕｎｔ ＥＭ，Ｃｕｓｉ Ｋ，ｅｔ ａｌ．Ｔｈｅ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ａｎｄ ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ｏｆ ｎｏｎ−ａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｆａｔｔｙ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ：Ｐｒａｃｔｉｃｅ Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅ ｂｙ ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｓｔｕｄｙ ｏｆ Ｌｉｖｅｒ Ｄｉｓｅａｓｅｓ，Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，ａｎｄ ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｉｃａｌ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ．Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ ２０１２；５５：２００５−２３．
ＭｃＣｕｌｌｏｕｇｈ ＡＪ．Ｔｈｅ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｆｅａｔｕｒｅｓ，ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ａｎｄ ｎａｔｕｒａｌ ｈｉｓｔｏｒｙ ｏｆ ｎｏｎａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｆａｔｔｙ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ．Ｃｌｉｎ Ｌｉｖｅｒ Ｄｉｓ ２００４；８（３）：５２１−３３．
Ｌｏｏｍｂａ Ｒ，Ｓｉｒｌｉｎ ＣＢ，Ｓｃｈｗｉｍｍｅｒ ＪＢ，Ｌａｖｉｎｅ ＪＥ．Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ ｐｅｄｉａｔｒｉｃ ｎｏｎａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｆａｔｔｙ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ．Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ ２００９；５０（４）：１２８２−９３．
Ｔｏｒｒｅｓ ＤＭ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＣＤ，Ｈａｒｒｉｓｏｎ ＳＡ．Ｆｅａｔｕｒｅｓ，ｄｉａｇｎｏｓｉｓ，ａｎｄ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｎｏｎａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｆａｔｔｙ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ．Ｃｌｉｎ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ Ｈｅｐａｔｏｌ ２０１２；１０（８）：８３７−５８．
Ｓｃｈｗｅｎｇｅｒ ＫＪ，Ａｌｌａｒｄ ＪＰ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ ｔｏ ｎｏｎ−ａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｆａｔｔｙ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ．Ｗｏｒｌｄ Ｊ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ ２０１４；２０（７）：１７１２−２３．
Ｋｏｏ ＳＨ．Ｎｏｎａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｆａｔｔｙ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ：ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｈｅｐａｔｉｃ ｓｔｅａｔｏｓｉｓ．Ｃｌｉｎ Ｍｏｌ Ｈｅｐａｔｏｌ ２０１３；１９（３）：２１０−５．
Ａｔｔａｒ ＢＭ，Ｖａｎ Ｔｈｉｅｌ ＤＨ．Ｃｕｒｒｅｎｔ ｃｏｎｃｅｐｔｓ ａｎｄ ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ ｉｎ ｎｏｎａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｆａｔｔｙ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ．ＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃＷｏｒｌｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ２０１３；２０１３：４８１８９３
Ｂａｓａｒａｎｏｇｌｕ Ｍ，Ｂａｓａｒａｎｏｇｌｕ Ｇ，Ｓｅｎｔuｒｋ Ｈ．Ｆｒｏｍ ｆａｔｔｙ ｌｉｖｅｒ ｔｏ ｆｉｂｒｏｓｉｓ：ａ ｔａｌｅ ｏｆ ”ｓｅｃｏｎｄ ｈｉｔ”．Ｗｏｒｌｄ Ｊ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ ２０１３；１９（８）：１１５８−６５．
Ｃｏｈｅｎ ＪＣ，Ｈｏｒｔｏｎ ＪＤ，Ｈｏｂｂｓ ＨＨ．Ｈｕｍａｎ ｆａｔｔｙ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ：ｏｌｄ ｑｕｅｓｔｉｏｎｓ ａｎｄ ｎｅｗ ｉｎｓｉｇｈｔｓ．Ｓｃｉｅｎｃｅ ２０１１；３３２（６０３７）：１５１９−２３．
Ｍａｔｔｅｏｎｉ ＣＡ，Ｙｏｕｎｏｓｓｉ ＺＡ，Ｇｒａｍｌｉｃｈ Ｔ，ｅｔ ａｌ．Ｎｏｎａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｆａｔｔｙ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ：Ａ ｓｐｅｃｔｒｕｍ ｏｆ ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｓｅｖｅｒｉｔｙ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ １９９９；１１６（６）：１４１３−１４１９
Ｗｏｒｌｄ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ Ｏｒｇａｎｉｓａｔｉｏｎ Ｇｌｏｂａｌ Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ．Ｎｏｎａｌｃｏｈｏｌｉｃ Ｆａｔｔｙ ｌｉｖｅｒ Ｄｉｓｅａｓｅ ａｎｄ Ｎｏｎａｌｃｏｈｏｌｉｃ Ｓｔｅａｔｏｈｅｐａｔｉｔｉｓ．Ｊｕｎｅ ２０１２．
Ａｈｍｅｄ ＭＨ，Ａｂｕ ＥＯ，Ｂｙｒｎｅ ＣＤ．Ｎｏｎ−Ａｌｃｏｈｏｌｉｃ Ｆａｔｔｙ Ｌｉｖｅｒ Ｄｉｓｅａｓｅ （ＮＡＦＬＤ）：ｎｅｗ ｃｈａｌｌｅｎｇｅ ｆｏｒ ｇｅｎｅｒａｌ ｐｒａｃｔｉｔｉｏｎｅｒｓ ａｎｄ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｂｕｒｄｅｎ ｆｏｒ ｈｅａｌｔｈ ａｕｔｈｏｒｉｔｉｅｓ？ Ｐｒｉｍ Ｃａｒｅ Ｄｉａｂｅｔｅｓ．２０１０；４：１２９−３７．
Ｖｅｒｎｏｎ Ｇ，Ｂａｒａｎｏｖａ Ａ，Ｙｏｕｎｏｓｓｉ ＺＭ．Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ ｒｅｖｉｅｗ：ｔｈｅ ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ ｎａｔｕｒａｌ ｈｉｓｔｏｒｙ ｏｆ ｎｏｎ−ａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｆａｔｔｙ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ ａｎｄ ｎｏｎａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｓｔｅａｔｏｈｅｐａｔｉｔｉｓ ｉｎ ａｄｕｌｔｓ．Ａｌｉｍｅｎｔ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｔｈｅｒ ２０１１；３４：２７４−８５．
Ｔｈｅ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｉｃａｌ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｏｆ Ａｕｓｔｒａｌｉａ／Ａｕｓｔｒａｌｉａｎ Ｌｉｖｅｒ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ Ｊａｎｕａｒｙ ２０１３．ｈｔｔｐ：／／ｓｔａｔｉｃ．ｓｑｕａｒｅｓｐａｃｅ．ｃｏｍ／ｓｔａｔｉｃ／５０ｆｆ０８０４ｅ４ｂ００７ｄ５ａ９ａｂｅ０ａ５／ｔ／５３３２１ａａｅｅ４ｂ０９ｆ９６７ｅｂ０ｃ７ｅ５／１３９５７９２５５８６８４／ｇｅｓａ２０１３＿ｒｅｖｉｓｅｄ％５Ｂ１％５Ｄ．ｐｄｆ
Ｄｉｘｏｎ ＪＢ，Ｂｈａｔｈａｌ ＰＳ，Ｏ’Ｂｒｉｅｎ ＰＥ．Ｎｏｎａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｆａｔｔｙ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ：ｐｒｅｄｉｃｔｏｒｓ ｏｆ ｎｏｎａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｓｔｅａｔｏｈｅｐａｔｉｔｉｓ ａｎｄ ｌｉｖｅｒ ｆｉｂｒｏｓｉｓ ｉｎ ｔｈｅ ｓｅｖｅｒｅｌｙ ｏｂｅｓｅ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．２００１；１２１：９１−１００．
Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＣＤ，Ｓｔｅｎｇｅｒ Ｊ，Ａｓｉｋｅ ＭＩ，Ｔｏｒｒｅｓ ＤＭ，Ｓｈａｗ Ｊ，Ｃｏｎｔｒｅｒａｓ Ｍ，ｅｔ ａｌ．Ｐｒｅｖａｌｅｎｃｅ ｏｆ ｎｏｎａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｆａｔｔｙ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ ａｎｄ ｎｏｎａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｓｔｅａｔｏｈｅｐａｔｉｔｉｓ ａｍｏｎｇ ａ ｌａｒｇｅｌｙ ｍｉｄｄｌｅ−ａｇｅｄ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｕｔｉｌｉｚｉｎｇ ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ ａｎｄ ｌｉｖｅｒ ｂｉｏｐｓｙ：ａ ｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ ｓｔｕｄｙ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ ２０１１；１４０：１２４−１３１．
Ｓｃｈａｔｔｅｎｂｅｒｇ ＪＭ，Ｓｃｈｕｐｐａｎ Ｄ．Ｎｏｎａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｓｔｅａｔｏｈｅｐａｔｉｔｉｓ：ｔｈｅ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｃｈａｌｌｅｎｇｅ ｏｆ ａ ｇｌｏｂａｌ ｅｐｉｄｅｍｉｃ．Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｌｉｐｉｄｏｌ ２０１１；２２：４７９−８８．
Ｂａｈｒａｍｉ Ｈ．Ｎｏｎａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｆａｔｔｙ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ ｉｎ ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ ｃｏｕｎｔｒｉｅｓ．Ｗｏｒｌｄ Ｊ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ ２００５；１１：３８０８−３８０９．
Ｔｉｎｉａｋｏｓ ＤＧ，Ｖｏｓ ＭＢ，Ｂｒｕｎｔ ＥＭ．Ｎｏｎａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｆａｔｔｙ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ：ｐａｔｈｏｌｏｇｙ ａｎｄ ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ．Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｐａｔｈｏｌ ２０１０；５：１４５−７１．
Ｖａｊｒｏ Ｐ，Ｐａｏｌｅｌｌａ Ｇ，Ｆａｓａｎｏ Ａ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｔａ ａｎｄ ｇｕｔ−ｌｉｖｅｒ ａｘｉｓ：ｔｈｅｉｒ ｉｎｆｌｕｅｎｃｅｓ ｏｎ ｏｂｅｓｉｔｙ ａｎｄ ｏｂｅｓｉｔｙ−ｒｅｌａｔｅｄ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ．Ｊ Ｐｅｄｉａｔｒ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ Ｎｕｔｒ ２０１３；５６：４６１−８．
Ｒｏｈ ＹＳ，Ｓｅｋｉ Ｅ．Ｔｏｌｌ−ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｉｎ ａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ，ｎｏｎ−ａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｓｔｅａｔｏｈｅｐａｔｉｔｉｓ ａｎｄ ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ．Ｊ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ Ｈｅｐａｔｏｌ ２０１３；２８ Ｓｕｐｐｌ １：３８−４２．
Ｉｌａｎ Ｙ．Ｌｅａｋｙ ｇｕｔ ａｎｄ ｔｈｅ ｌｉｖｅｒ：ａ ｒｏｌｅ ｆｏｒ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎ ｉｎ ｎｏｎａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｓｔｅａｔｏｈｅｐａｔｉｔｉｓ．Ｗｏｒｌｄ Ｊ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ ２０１２；１８：２６０９−１８．
Ｍｏｓｃｈｅｎ ＡＲ，Ｋａｓｅｒ Ｓ，Ｔｉｌｇ Ｈ．Ｎｏｎ−ａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｓｔｅａｔｏｈｅｐａｔｉｔｉｓ：ａ ｍｉｃｒｏｂｉｏｔａ−ｄｒｉｖｅｎ ｄｉｓｅａｓｅ．Ｔｒｅｎｄｓ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ Ｍｅｔａｂ ２０１３；２４：５３７−４５．
Ｓａｎｙａｌ ＡＪ，Ｃａｍｐｂｅｌｌ−Ｓａｒｇｅｎｔ Ｃ，Ｍｉｒｓｈａｈｉ Ｆ，Ｒｉｚｚｏ ＷＢ，Ｃｏｎｔｏｓ ＭＪ，Ｓｔｅｒｌｉｎｇ ＲＫ，ｅｔ ａｌ．Ｎｏｎａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｓｔｅａｔｏｈｅｐａｔｉｔｉｓ：ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｎｓｕｌｉｎ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ａｎｄ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ ａｂｎｏｒｍａｌｉｔｉｅｓ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ ２００１；１２０：１１８３−９２．
ＭｃＣｌａｉｎ ＣＪ，Ｍｏｋｓｈａｇｕｎｄａｍ ＳＰ，Ｂａｒｖｅ ＳＳ，Ｓｏｎｇ Ｚ，Ｈｉｌｌ ＤＢ，Ｃｈｅｎ Ｔ，ｅｔ ａｌ．Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｏｆ ｎｏｎ−ａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｓｔｅａｔｏｈｅｐａｔｉｔｉｓ．Ａｌｃｏｈｏｌ ２００４；３４：６７−７９．
Ｄａｙ ＣＰ，Ｓａｋｓｅｎａ Ｓ．Ｎｏｎ−ａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｓｔｅａｔｏｈｅｐａｔｉｔｉｓ：ｄｅｆｉｎｉｔｉｏｎｓ ａｎｄ ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ．Ｊ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ Ｈｅｐａｔｏｌ．２００２；１７ Ｓｕｐｐｌ ３：Ｓ３７７−Ｓ８４．
Ｍａｒｒａ Ｆ，Ｇａｓｔａｌｄｅｌｌｉ Ａ，Ｓｖｅｇｌｉａｔｉ Ｂａｒｏｎｉ Ｇ，Ｔｅｌｌ Ｇ，Ｔｉｒｉｂｅｌｌｉ Ｃ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｂａｓｉｓ ａｎｄ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｏｆ ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｎｏｎ−ａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｓｔｅａｔｏｈｅｐａｔｉｔｉｓ．Ｔｒｅｎｄｓ Ｍｏｌ Ｍｅｄ．２００８；１４：７２−８１
Ｃｈａｒｌｔｏｎ ＭＲ，Ｂｕｒｎｓ ＪＭ，Ｐｅｄｅｒｓｏｎ ＲＡ，Ｗａｔｔ ＫＤ，Ｈｅｉｍｂａｃｈ ＪＫ，Ｄｉｅｒｋｈｉｓｉｎｇ ＲＡ．Ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ ａｎｄ ｏｕｔｃｏｍｅｓ ｏｆ ｌｉｖｅｒ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｎｏｎａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｓｔｅａｔｏｈｅｐａｔｉｔｉｓ ｉｎ ｔｈｅ Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．２０１１；１４１：１２４９−５３．
Ｖａｔｃｈｅ Ｇ．Ａｇｏｐｉａｎ ｅｔ ａｌ．Ｌｉｖｅｒ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ｆｏｒ Ｎｏｎａｌｃｏｈｏｌｉｃ Ｓｔｅａｔｏｈｅｐａｔｉｔｉｓ．Ａｎｎａｌｓ ｏｆ Ｓｕｒｇｅｒｙ ２０１２；２５６（４）；６２４−６３３．
ＭｃＣｕｌｌｏｕｇｈ ＡＪ．Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ ｏｆ ｔｈｅ ｍｅｔａｂｏｌｉｃ ｓｙｎｄｒｏｍｅ ｉｎ ｔｈｅ ＵＳＡ．Ｊ Ｄｉｇ Ｄｉｓ．２０１１；１２：３３３−４０．

Claims (23)

  1. 線維症または線維性疾患若しくは状態若しくは状態の処置を必要とする対象における線維症または線維性疾患若しくは状態若しくは状態の処置方法であって、前記対象に治療有効量のセニクリビロックまたはその塩若しくは溶媒和化合物；及び追加の活性剤を共投与することを含む、前記方法。
  2. 前記線維症または線維性疾患若しくは状態が肝臓線維症または腎線維症である、請求項１に記載の方法。
  3. 前記セニクリビロックまたはその塩若しくは溶媒和化合物が、セニクリビロックまたはその塩若しくは溶媒和化合物及びフマル酸を含む医薬組成物として製剤化される、請求項１に記載の方法。
  4. 前記肝臓線維症が非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）を伴う、請求項２に記載の方法。
  5. 前記肝臓線維症が非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）を伴う、請求項２に記載の方法。
  6. 前記肝臓線維症が肝硬変の出現を伴う、請求項２に記載の方法。
  7. 前記肝臓線維症が非肝硬変性肝線維症を含む、請求項２に記載の方法。
  8. 前記対象がヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）に感染している、請求項２に記載の方法。
  9. 前記対象がアルコール性肝臓疾患、ＨＩＶ及びＨＣＶ重複感染、ウイルス性肝炎（ＨＢＶまたはＨＣＶ感染など）、２型糖尿病（Ｔ２ＤＭ）、代謝症候群（ＭＳ）、及びそれらの組み合わせからなる群より選択される疾患または状態を有する、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
  10. ＮＡＳＨの処置を必要とする対象におけるＮＡＳＨの処置方法であって、前記対象に治療有効量のセニクリビロック、またはその塩若しくは溶媒和化合物を投与することを含み；前記ＮＡＳＨが２型糖尿病（Ｔ２ＤＭ）を伴う、前記方法。
  11. ＮＡＳＨの処置を必要とする対象におけるＮＡＳＨの処置方法であって、前記対象に治療有効量のセニクリビロック、またはその塩若しくは溶媒和化合物を投与することを含み；前記ＮＡＳＨが代謝症候群（ＭＳ）を伴う、前記方法。
  12. ＮＡＳＨの処置を必要とする対象におけるＮＡＳＨの処置方法であって、前記対象に治療有効量のセニクリビロック、またはその塩若しくは溶媒和化合物を投与することを含み；前記ＮＡＳＨがＨＩＶ及びＨＣＶ重複感染を伴う、前記方法。
  13. 前記セニクリビロックまたはその塩若しくは溶媒和化合物が、経口組成物として製剤化される、先行請求項のいずれかに記載の方法。
  14. 前記セニクリビロックまたはその塩若しくは溶媒和化合物が、１日１回または１日２回投与される、先行請求項のいずれかに記載の方法。
  15. 前記セニクリビロックまたはその塩若しくは溶媒和化合物が、１つまたは複数の追加の活性剤と共投与される、先行請求項のいずれかに記載の方法。
  16. 前記１つまたは複数の追加の活性剤が、侵入阻害剤、ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤、ヌクレオチド逆転写酵素阻害剤、非ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤、プロテアーゼ阻害剤、インテグラーゼ阻害剤、成熟阻害剤、及びそれらの組み合わせからなる群より選択される１つまたは複数の抗レトロウイルス剤である、請求項１５に記載の方法。
  17. 前記１つまたは複数の追加の抗レトロウイルス剤が、ラミブジン、エファビレンツ、ラルテグラビル、ビベコン、ベビリマット、アルファインターフェロン、ジドブジン、アバカビル、ロピナビル、リトナビル、テノホビル、テノホビルジソプロキシル、テノホビルのプロドラッグ、エムトリシタビン、エルビテグラビル、コビシスタット、ダルナビル、アタザナビル、リルピビリン、ドルテグラビル及びそれらの組み合わせからなる群より選択される、請求項１６に記載の方法。
  18. 前記１つまたは複数の追加の活性剤が、１つまたは複数の免疫系抑制剤である、請求項１５に記載の方法。
  19. 前記１つまたは複数の追加の活性剤が、シクロスポリン、タクロリムス、プレドニゾロン、ヒドロコルチゾン、シロリムス、エベロリムス、アザチオプリン、ミコフェノール酸、メトトレキサート、バシリキシマブ、ダクリズマブ、リツキシマブ、抗胸腺細胞グロブリン、抗リンパ球グロブリン、及びそれらの組み合わせからなる群より選択される、請求項１８に記載の方法。
  20. 線維症または前記線維性疾患若しくは状態若しくは状態について処置される前記対象における１つまたは複数の生体分子のレベルを検出すること、及び１つまたは複数の生体分子の前記レベルの増減に基づいて処置レジメンを決定することを含み、前記生体分子が、リポ多糖類（ＬＰＳ）、ＬＰｓ結合タンパク質（ＬＢＰ）、１６Ｓ ｒＤＮＡ、ｓＣＤ１４、腸型脂肪酸結合蛋白（Ｉ−ＦＡＢＰ）、ゾヌリン−１、コラーゲン１ａ１及び３ａ１、ＴＧＦ−β、フィブロネクチン−１、ｈｓ−ＣＲＰ、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＩＬ−３３、フィブリノゲン、ＭＣＰ−１、ＭＩＰ−１α及びＭＩＰ−１β、ＲＡＮＴＥＳ、ｓＣＤ１６３、ＴＧＦ−β、ＴＮＦ−α、ＣＫ−１８（カスパーゼ切断及び全長）などの肝細胞アポトーシスのバイオマーカー、及びそれらの組み合わせからなる群より選択される、先行請求項のいずれかに記載の方法。
  21. 線維症または前記線維性疾患若しくは状態若しくは状態について処置される前記対象における１つまたは複数の生体分子のレベルを検出することを含み、所定の標準レベルと比較した１つまたは複数の生体分子の前記レベルにおける増減が線維症または前記線維性疾患若しくは状態の処置有効性を予測し、前記生体分子が、リポ多糖類（ＬＰＳ）、ＬＰｓ結合タンパク質（ＬＢＰ）、１６Ｓ ｒＤＮＡ、ｓＣＤ１４、腸型脂肪酸結合蛋白（Ｉ−ＦＡＢＰ）、ゾヌリン−１、コラーゲン１ａ１及び３ａ１、ＴＧＦ−β、フィブロネクチン−１、ｈｓ−ＣＲＰ、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＩＬ−３３、フィブリノゲン、ＭＣＰ−１、ＭＩＰ−１α及びＭＩＰ−１β、ＲＡＮＴＥＳ、ｓＣＤ１６３、ＴＧＦ−β、ＴＮＦ−α、ＣＫ−１８（カスパーゼ切断及び全長）などの肝細胞アポトーシスのバイオマーカー、及びそれらの組み合わせからなる群より選択される、先行請求項のいずれかに記載の方法。
  22. 前記１つまたは複数の生体分子が、線維症または前記線維性疾患若しくは状態について処置される対象からの生体試料において測定される、請求項２０または２１に記載の方法。
  23. 前記生体試料が、血液、皮膚、毛包、唾液、口腔粘膜、膣粘膜、汗、涙、上皮組織、尿、精液（ｓｅｍｅｎ）、精液（ｓｅｍｉｎａｌ ｆｌｕｉｄ）、精漿、前立腺液、尿道球腺液（カウパー液）、排泄物、生検、腹水、脳脊髄液、リンパ、脳、及び組織抽出試料または生検試料から選択される、請求項２２に記載の方法。
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2017526713A (ja) * 2014-09-12 2017-09-14 トビラ セラピューティクス， インコーポレイテッド 線維症を処置するためのセニクリビロック併用療法
JP2021512049A (ja) * 2018-02-02 2021-05-13 シチュアン ケルン−バイオテック バイオファーマシューティカル カンパニー リミテッド カルボン酸基を含む窒素含有ベンゾ複素環化合物、その調製方法及び使用
JP2025503380A (ja) * 2022-01-14 2025-02-04 ダイメリックス バイオサイエンス ピーティーワイ リミテッド ケモカインレセプター経路インヒビターを含む組成物

Families Citing this family (27)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7371772B2 (en) 2001-08-08 2008-05-13 Takeda Pharmaceutical Company Limited Bicyclic compound, production and use thereof
WO2011140441A2 (en) 2010-05-06 2011-11-10 Children's Hospital Medical Center Methods and systems for converting precursor cells into intestinal tissues through directed differentiation
KR20160013068A (ko) * 2013-05-15 2016-02-03 토비라 쎄라퓨틱스, 인크. 세니크리비록 조성물 및 이들을 만들고 이용하는 방법
ES2860423T3 (es) 2014-05-28 2021-10-05 Childrens Hospital Med Ct Métodos y sistemas para convertir células precursoras en tejidos gástricos mediante diferenciación dirigida
CA2963704A1 (en) 2014-10-17 2016-04-21 Children's Hospital Medical Center In vivo model of human small intestine using pluripotent stem cells and methods of making and using same
SG11201704837VA (en) 2014-12-23 2017-07-28 Tobira Therapeutics Inc Process of making cenicriviroc and related analogs
RU2018113437A (ru) * 2015-09-16 2019-10-17 Тобира Терапьютикс, Инк. Комбинированная терапия с использованием ценикривирока для лечения фиброза
US10724095B2 (en) 2015-12-16 2020-07-28 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Diagnostic markers of immunosenescence and methods for determining the susceptibility to nosocomial infections
FR3050112B1 (fr) 2016-04-15 2020-09-04 Soc Civ Immobiliere Gecinq Utilisation de l'acide fenofibrique dans le traitement des maladies hepatiques
CN109415685B (zh) 2016-05-05 2023-07-04 儿童医院医疗中心 用于体外制造胃底组织的方法和与其相关的组合物
BR112018076449A2 (pt) 2016-06-21 2019-04-09 Tobira Therapeutics, Inc. cenicriviroc purificado e intermediários purificados para fazer cenicriviroc
CN106248947A (zh) * 2016-07-21 2016-12-21 中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所 一种哺乳动物高原脑水肿生物标志物及其应用
JP2019526628A (ja) 2016-08-31 2019-09-19 トビラ セラピューティクス， インコーポレイテッド セニクリビロクメシレートの固体形態及びセニクリビロクメシレートの固体形態を製造するプロセス
SG10202104575WA (en) 2016-11-04 2021-06-29 Childrens Hospital Med Ct Liver organoid compositions and methods of making and using same
CA3045145A1 (en) 2016-12-05 2018-06-14 Children's Hospital Medical Center Colonic organoids and methods of making and using same
CA3051977A1 (en) * 2017-02-24 2018-08-30 Genfit Pharmaceutical compositions for combination therapy
US12281334B2 (en) 2017-04-14 2025-04-22 Children's Hospital Medical Center Multi donor stem cell compositions and methods of making same
WO2019074793A1 (en) 2017-10-10 2019-04-18 Children's Hospital Medical Center OESOPHAGIAN TISSUE COMPOSITIONS AND / OR ORGANOIDS AND METHODS OF MAKING SAME
US12379372B2 (en) 2017-12-21 2025-08-05 Children's Hospital Medical Center Digitalized human organoids and methods of using same
GB201804922D0 (en) * 2018-03-27 2018-05-09 Ucl Business Plc Traatment
CA3106634A1 (en) 2018-07-26 2020-01-30 Children's Hospital Medical Center Hepato-biliary-pancreatic tissues and methods of making same
CN112823012A (zh) 2018-09-12 2021-05-18 儿童医院医学中心 用于产生造血干细胞及其衍生物的类器官组合物
WO2020160371A1 (en) 2019-02-01 2020-08-06 The University Of Hong Kong Innervated organoid compositions and methods of making same
US12534709B2 (en) 2019-05-31 2026-01-27 Children's Hospital Medical Center Shaped organoid compositions and methods of making same
CA3141807A1 (en) 2019-05-31 2020-12-03 Children's Hospital Medical Center Methods of generating and expanding hematopoietic stem cells
WO2021133811A1 (en) * 2019-12-26 2021-07-01 Teva Pharmaceuticals International Gmbh Solid state forms of cenicriviroc and process for preparation thereof
WO2022032187A1 (en) * 2020-08-07 2022-02-10 Bristol-Myers Squibb Company Fgf21 combined with ccr2/5 antagonists for the treatment of fibrosis

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2001042208A1 (en) * 1999-12-08 2001-06-14 Teijin Limited Cycloamine ccr5 receptor antagonists
JP2010504280A (ja) * 2006-07-14 2010-02-12 ケモセントリックス， インコーポレイテッド トリアゾリルピリジルベンゼンスルホンアミド類
JP2010505878A (ja) * 2006-10-05 2010-02-25 セントコア・オーソ・バイオテツク・インコーポレーテツド 線維症の処置のためのｃｃｒ２アンタゴニスト
JP6391674B2 (ja) * 2013-05-15 2018-09-19 トビラ セラピューティクス， インコーポレイテッド セニクリビロック組成物並びにその製造及び使用方法

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7371772B2 (en) * 2001-08-08 2008-05-13 Takeda Pharmaceutical Company Limited Bicyclic compound, production and use thereof
CH696628A5 (de) * 2002-02-26 2007-08-31 Eprova Ag Verwendung von Folaten zur Herstellung einer Zubereitung geeignet zur Vorbeugung und Behandlung von Entzündungen und entzündungsassoziierter Krankheiten, im Speziellen zur Beeinflussung der
EP1825866A4 (en) 2004-12-03 2008-03-12 Takeda Pharmaceutical SOLID PREPARATION
CA2608709A1 (en) * 2005-05-31 2006-12-07 Novartis Ag Treatment of liver diseases in which iron plays a role in pathogenesis
US20080194575A1 (en) * 2006-10-04 2008-08-14 Naiara Beraza Treatment for non-alcoholic-steatohepatitis
RU2337365C1 (ru) * 2006-12-12 2008-10-27 Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Новосибирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию (ГОУ ВПО НГМУ Росздрава) Способ дифференциальной диагностики алкогольного и неалкогольного стеатогепатита
RU2435593C2 (ru) * 2009-07-21 2011-12-10 Лев Давидович Раснецов Фармацевтическая композиция для лечения сахарного диабета 2 типа и лекарственное средство на его основе

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2001042208A1 (en) * 1999-12-08 2001-06-14 Teijin Limited Cycloamine ccr5 receptor antagonists
JP2010504280A (ja) * 2006-07-14 2010-02-12 ケモセントリックス， インコーポレイテッド トリアゾリルピリジルベンゼンスルホンアミド類
JP2010505878A (ja) * 2006-10-05 2010-02-25 セントコア・オーソ・バイオテツク・インコーポレーテツド 線維症の処置のためのｃｃｒ２アンタゴニスト
JP6391674B2 (ja) * 2013-05-15 2018-09-19 トビラ セラピューティクス， インコーポレイテッド セニクリビロック組成物並びにその製造及び使用方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
"Tobira Therapeutics presents data supporting anti-fibrotic activity of cenicriviroc in liver disease", AASLD ANNUAL MEETING, BUSINESS WIRE, JPN6018045392, 4 November 2013 (2013-11-04), ISSN: 0003921447 *
ANTIVIRAL THERAPY - AN OFFICIAL PUBLICAITON OF THE INTERNATIONAL SOCIETY FOR ANTIVIRAL RESEARCH; ABS, vol. 18, no. 3, JPN6018045395, 15 October 2013 (2013-10-15), pages 016, ISSN: 0003921449 *
MOLECULAR PHARMACEUTICS, vol. 10, JPN6018045393, 13 August 2013 (2013-08-13), pages 4005 - 4015, ISSN: 0003921448 *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2017526713A (ja) * 2014-09-12 2017-09-14 トビラ セラピューティクス， インコーポレイテッド 線維症を処置するためのセニクリビロック併用療法
JP2021512049A (ja) * 2018-02-02 2021-05-13 シチュアン ケルン−バイオテック バイオファーマシューティカル カンパニー リミテッド カルボン酸基を含む窒素含有ベンゾ複素環化合物、その調製方法及び使用
JP7263659B2 (ja) 2018-02-02 2023-04-25 シチュアン ケルン－バイオテック バイオファーマシューティカル カンパニー リミテッド カルボン酸基を含む窒素含有ベンゾ複素環化合物、その調製方法及び使用
JP2025503380A (ja) * 2022-01-14 2025-02-04 ダイメリックス バイオサイエンス ピーティーワイ リミテッド ケモカインレセプター経路インヒビターを含む組成物

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