JP2022017705A - 微小粒子分取装置、微小粒子分取方法、プログラム、及び微小粒子分取システム - Google Patents

微小粒子分取装置、微小粒子分取方法、プログラム、及び微小粒子分取システム Download PDF

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Abstract

【課題】微小粒子の分取において、純度を維持しつつ回収率を向上する手法を提供すること。【解決手段】本技術は、粒子の分取判定を実行する判定部を備えており、前記判定部は、分取判定される粒子が属する粒子集団と、前記粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が属する粒子集団と、に応じて、これら粒子の関係性が定義されているルールデータを用いて前記判定を行う微小粒子分取装置を提供する。前記分取判定される粒子及び前記所定範囲内の他の粒子が属しうる粒子集団は、以下の（ａ）～（ｃ）の粒子集団を含む：（ａ）分取対象である粒子の粒子集団、（ｂ）分取対象でないが前記判定において無視可能な粒子の粒子集団、及び（ｃ）前記分取対象である粒子及び前記無視可能な粒子のいずれでもない粒子の粒子集団。【選択図】図１

Description

本技術は、微小粒子分取装置、微小粒子分取方法、プログラム、及び微小粒子分取システムに関する。
微小粒子を分取するために、これまでに種々の微小粒子分取装置が開発されてきている。例えばフローサイトメータにおいて用いられる粒子分取系において、フローセル又はマイクロチップに形成されたオリフィスから、細胞を含むサンプル液とシース液とから構成される層流が吐出される。吐出される際に所定の振動が当該層流に与えられて、液滴が形成される。当該形成された液滴の移動方向が、目的の粒子を含むか含まないかによって電気的に制御されて、目的の粒子が分取される。
上記のように液滴を形成せずに、マイクロチップ内で目的の粒子を分取する技術も開発されている。例えば、下記特許文献１には、「微小粒子を含むサンプル液が通流するサンプル液導入流路と、該サンプル液導入流路にその両側から合流し、前記サンプル液の周囲にシース液を導入する少なくとも１対のシース液導入流路と、前記サンプル液導入流路及びシース液導入流路に連通し、これらの流路を通流する液体が合流して通流する合流流路と、該合流流路に連通し、回収対象の微小粒子を吸引して引き込む負圧吸引部と、 該負圧吸引部の両側に設けられ、前記合流流路に連通する少なくとも１対の廃棄用流路と、を有するマイクロチップ。」（請求項１）が記載されている。当該マイクロチップにおいて、目的の粒子は吸引によって負圧吸引部へと回収される。
特開２０１２－１２７９２２号公報
微小粒子分取装置において、しばしば血液由来サンプルから目的細胞を分取することが行われる。血液由来サンプルの量は限定される場合が多く、１回の微小粒子分取処理で、目的細胞をできる限り多く取得することが望ましい。また、目的外の細胞は、分取後の操作（例えば培養又は遺伝子操作）に影響を及ぼす可能性があるので、分取後の操作に影響を及ぼしうる目的外細胞は、できる限り分取せずに廃棄されることが求められうる。
そこで、上記で述べたような微小粒子分取装置では、目的細胞のみを回収するような設定で分取処理が行われうる。当該設定では、例えば、或る目的細胞を回収した場合に当該目的細胞付近に存在する目的外細胞も一緒に回収される可能性が有る場合は、当該目的細胞は回収せず、廃棄されうる。当該廃棄によって、回収された細胞集団中も目的細胞の割合は高くなるが、回収率は低くなる傾向にある。
ここで、例えば、血液中の赤血球は、上記分取処理後の操作、例えば培養又は遺伝子操作などに対して与える影響は少ない。そのため、分取の目的によっては、赤血球が目的細胞と一緒に回収されることが許容されうる。しかしながら、上記で述べた設定において、赤血球は目的外細胞であると判定されるため、目的細胞付近に赤血球が存在する場合には当該目的細胞は回収されずに廃棄される。また、赤血球の数の割合は高く、赤血球が目的細胞の付近に存在する頻度も高いため、目的細胞の回収率は低くなる。なお、溶血という赤血球を除去する工程も行われるが、この工程には限界が有り、赤血球を完全に無くすことはできない場合がある。
以上を踏まえ、本技術は、微小粒子の分取において、分取される目的粒子の純度への影響を低減しつつ目的粒子の回収率を高めるための技法を提供することを目的とする。
本発明者らは、特定の分取処理を実行する微小粒子分取装置によって上記課題を解決できることを見出した。
すなわち、本技術は、
粒子の分取判定を実行する判定部を備えており、
前記判定部は、分取判定される粒子が属する粒子集団と、前記粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が属する粒子集団と、に応じて、これら粒子の関係性が定義されているルールデータを用いて前記判定を行い、
前記分取判定される粒子及び前記所定範囲内の他の粒子が属しうる粒子集団は、以下の（ａ）～（ｃ）の粒子集団を含み、
（ａ）分取対象である粒子の粒子集団、
（ｂ）分取対象でないが前記判定において無視可能な粒子の粒子集団、及び
（ｃ）前記分取対象である粒子及び前記無視可能な粒子のいずれでもない粒子の粒子集団
且つ、
前記無視可能な粒子は赤血球を含む、
微小粒子分取装置を提供する。
前記判定部は、前記判定において用いられるルールデータを変更することができ、
前記判定部が利用可能なルールデータのうちの少なくとも一つが、
分取判定される粒子が前記（ａ）の分取対象である粒子の粒子集団に属し且つ前記粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が前記（ｂ）の無視可能な粒子の粒子集団に属する場合において、前記他の粒子の進路は、分取対象である粒子の進路である、
と定義していてよい。
前記微小粒子分取装置は、前記ルールデータを生成するルールデータ生成部をさらに備えていてよく、
前記ルールデータ生成部は、前記分取判定される粒子及び前記所定範囲内の他の粒子が属しうる粒子集団に基づき、ルールデータを生成しうる。
前記微小粒子分取装置は、前記分取判定される粒子及び前記所定範囲内の他の粒子が属しうる粒子集団を設定するためのゲーティング操作を受け付ける入力部をさらに備えていてよい。
前記判定部は、流路内を流れる粒子への光照射によって生じた光に基づき、粒子がどの粒子集団に属するかを決定しうる。
前記微小粒子分取装置は、血液細胞の分取を行うために用いられていてよい。
前記微小粒子分取装置は、血液細胞のうちから所定のＴ細胞を選択的に分取するために用いられてよい。
前記ルールデータは、多次元データでありうる。
前記ルールデータは、二次元マトリックスデータでありうる。
前記判定部は、前記所定範囲内に、前記分取判定される粒子及びその他の１以上の粒子が存在する場合に前記判定を行いうる。
前記判定部は、前記分取判定される粒子及び前記所定範囲内の他の粒子からなる粒子群の各粒子について、当該粒子群の他の全ての粒子それぞれとの関係性を判定しうる。
前記判定部は、前記各粒子が、前記他の全ての粒子それぞれとの関係において無視可能であるかを定義するルールデータを用いて、前記関係性の判定を行いうる。
前記判定部は、前記関係性の判定の結果、他の全ての粒子との関係において無視可能であると判定された粒子に対しては、進路を割り当てず、且つ、当該粒子以外の粒子に対して、進路を割り当てうる。
前記判定部は、割り当てられた進路に応じて前記分取判定される粒子の進路が定義されているルールデータを用いて、当該粒子の進路を判定しうる。
また、本技術は、
粒子の分取判定を実行する判定部を備えており、
前記判定部は、分取判定される粒子が属する粒子集団と、前記粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が属する粒子集団と、に応じて、これら粒子の関係性が定義されているルールデータを用いて前記判定を行い、
前記分取判定される粒子及び前記所定範囲内の他の粒子が属しうる粒子集団は、以下の（ａ）～（ｃ）の粒子集団を含む、
（ａ）分取対象である粒子の粒子集団、
（ｂ）分取対象でないが前記判定において無視可能な粒子の粒子集団、及び
（ｃ）前記分取対象である粒子及び前記無視可能な粒子のいずれでもない粒子の粒子集団、
微小粒子分取装置も提供する。
また、本技術は、
分取判定される粒子が属する粒子集団と、前記粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が属する粒子集団と、に応じて、これら粒子の関係性が定義されているルールデータを用いて、粒子の分取判定を実行する判定工程を含み、
前記分取判定される粒子及び前記所定範囲内の他の粒子が属しうる粒子集団は、以下の（ａ）～（ｃ）の粒子集団を含み、
（ａ）分取対象である粒子の粒子集団、
（ｂ）分取対象でないが前記判定において無視可能な粒子の粒子集団、及び
（ｃ）前記分取対象である粒子及び前記無視可能な粒子のいずれでもない粒子の粒子集団
且つ、
前記無視可能な粒子は赤血球を含む、
微小粒子分取方法も提供する。
また、本技術は、
分取判定される粒子が属する粒子集団と、前記粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が属する粒子集団と、に応じて、これら粒子の関係性が定義されているルールデータを用いて、粒子の分取判定を実行する判定工程を含み、
前記分取判定される粒子及び前記所定範囲内の他の粒子が属しうる粒子集団は、以下の（ａ）～（ｃ）の粒子集団を含み、
（ａ）分取対象である粒子の粒子集団、
（ｂ）分取対象でないが前記判定において無視可能な粒子の粒子集団、及び
（ｃ）前記分取対象である粒子及び前記無視可能な粒子のいずれでもない粒子の粒子集団
且つ、
前記無視可能な粒子は赤血球を含む、
微小粒子分取方法を、微小粒子分取装置に実行させるためのプログラムも提供する。
また、本技術は、
粒子の分取判定を実行する判定部と、
当該分取判定において用いられるルールデータを生成するルールデータ生成部と、
を含み、
前記判定部は、分取判定される粒子が属する粒子集団と、前記粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が属する粒子集団と、に応じて、これら粒子の関係性が定義されているルールデータを用いて前記判定を行い、
前記分取判定される粒子及び前記所定範囲内の他の粒子が属しうる粒子集団は、以下の（ａ）～（ｃ）の粒子集団を含み、
（ａ）分取対象である粒子の粒子集団、
（ｂ）分取対象でないが前記判定において無視可能な粒子の粒子集団、及び
（ｃ）前記分取対象である粒子及び前記無視可能な粒子のいずれでもない粒子の粒子集団
且つ、
前記無視可能な粒子は赤血球を含む、
微小粒子分取システムも提供する。
本技術において用いられる微小粒子分取用マイクロチップの構成例を示す図である。 本技術において用いられる微小粒子分取用マイクロチップを用いた微小粒子分取処理のフローの一例を示す図である。 本技術において用いられる微小粒子分取用マイクロチップの粒子分取部の一例の拡大図である。 制御部の一例のブロック図である。 接続流路部分の拡大図である。 接続流路部分の拡大図である。 接続流路部分の拡大図である。 接続流路部分の拡大図である。 ゲーティングの例を示す図である。 分取判定パターンの例を示す図である。 分取判定処理の一例を示すフロー図である。 分取判定処理において用いられる進路割当表及びルールデータの例を示す図である。 分取判定処理において用いられるルールデータの一例及び当該ルールデータを用いて分取判定処理を行った場合の分取判定結果を示す図である。 分取判定処理において用いられるルールデータの一例及び当該ルールデータを用いて分取判定処理を行った場合の分取判定結果を示す図である。 分取判定処理において用いられるルールデータの一例及び当該ルールデータを用いて分取判定処理を行った場合の分取判定結果を示す図である。 分取判定処理において用いられるルールデータの一例及び当該ルールデータを用いて分取判定処理を行った場合の分取判定結果を示す図である。 本技術に従う微小粒子分取装置の一例の模式図である。 ゲーティングの例を示す図である。 分取判定パターンの例を示す図である。 分取判定処理において用いられる進路割当表及びルールデータの例を示す図である。 分取判定処理の一例を示すフロー図である。 分取判定処理において用いられる進路割当表及びルールデータの例を示す図である。 図２０に記載のルールデータを用いて分取判定を行った場合の分取判定結果を示す図である。 分取判定処理において用いられる進路割当表及びルールデータの例を示す図である。 図２２に記載のルールデータを用いて分取判定を行った場合の分取判定結果を示す図である。 分取判定処理において用いられる進路割当表及びルールデータの例を示す図である。 図２４に記載のルールデータを用いて分取判定を行った場合の分取判定結果を示す図である。 分取判定処理において用いられる進路割当表及びルールデータの例を示す図である。 図２６に記載のルールデータを用いて分取判定を行った場合の分取判定結果を示す図である。 分取判定処理において用いられる進路割当表及びルールデータの例を示す図である。 図２８に記載のルールデータを用いて分取判定を行った場合の分取判定結果を示す図である。
以下、本技術を実施するための好適な形態について説明する。なお、以下に説明する実施形態は、本技術の代表的な実施形態を示したものであり、本技術の範囲がこれらの実施形態のみに限定されることはない。なお、本技術の説明は以下の順序で行う。
１．第１の実施形態（微小粒子分取装置）
（１）第１の実施形態の説明
（２）閉鎖型微小粒子分取装置の例
（３）判定処理の詳細
（３－１）判定処理の基本概念
（３－２）判定処理のフロー例（純度を重視し且つ回収率を高める判定パターン）
（３－３）ルールデータの変更による種々の分取判定パターンの実現
（３－３－１）目的細胞の純度を優先した分取判定処理の例
（３－３－２）目的細胞の純度を優先した分取判定処理の他の例
（３－３－３）目的細胞の収率を優先した分取判定処理の例
（３－３－４）目的細胞の純度を重視し且つ回収率を高めるための分取判定処理の例
（３－３－５）実施例
（４）フローサイトメータとして構成された微小粒子分取装置の例
（５）判定処理の詳細
（５－１）判定処理の基本概念
（５－２）判定処理のフロー例
（５－３）ルールデータの変更による種々の分取判定パターンの実現
（５－３－１）目的細胞の純度を重視し且つ回収率を向上するための分取判定処理の例
（５－３－２）目的細胞の純度を重視した分取判定処理の例
（５－３－３）分取判定において考慮される範囲を狭めた分取判定処理の例
（５－３－４）目的細胞の回収率を重視した分取判定処理の例
（５－３－５）分取判定において考慮される範囲内に１つの粒子が含まれている場合にだけ分取すると判定する分取判定処理の例
２．第２の実施形態（微小粒子分取方法）
３．第３の実施形態（プログラム）
４．第４の実施形態（微小粒子分取システム）
１．第１の実施形態（微小粒子分取装置）
（１）第１の実施形態の説明
本技術の微小粒子分取装置は、粒子の分取判定を実行する判定部を備えている。当該判定部は、分取判定される粒子が属する粒子集団と、前記粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が属する粒子集団と、に応じて、これらの粒子の関係性が定義されているルールデータを用いて前記判定を行いうる。前記分取判定される粒子及び前記所定範囲内の他の粒子が属しうる粒子集団は、以下の（ａ）～（ｃ）の粒子集団を含みうる。
（ａ）分取対象である粒子の粒子集団、
（ｂ）分取対象でないが前記判定において無視可能な粒子の粒子集団、及び
（ｃ）前記分取対象である粒子及び前記無視可能な粒子のいずれでもない粒子の粒子集団。
本技術の微小粒子分取装置は、前記ルールデータを用いて分取判定を実行する判定部を備えていることにより、分取対象粒子の純度への影響を低減しつつ、分取対象粒子の回収率を高める分取判定を実行することができる。
本技術の好ましい実施態様において、前記無視可能な粒子は赤血球を含む。すなわち、前記微小粒子分取装置は、無視可能な粒子として赤血球を含むように前記ルールデータを生成することができ、そして、当該ルールデータに従い粒子の分取判定を行いうる。
上記で述べたとおり、赤血球は、分取の目的によっては、目的細胞と一緒に回収されてもよい。無視可能な粒子が赤血球を含むように粒子集団を設定することによって、前記微小粒子分取装置の判定部は、赤血球を無視するように分取判定を実行できる。これにより、目的細胞の回収率を高めることができる一方で、例えば培養又は遺伝子操作などの分取処理後操作に影響を及ぼすことを防ぐこともできる。
この実施態様において、微小粒子分取装置による分取処理に付される試料は、例えば生体粒子含有試料であり、特には細胞含有試料であり、より特には血液細胞含有試料である。この実施態様において、分取対象である粒子は、例えば細胞であり、特には血液細胞であり、より特には白血球を含み、より特にはＴ細胞、Ｂ細胞、顆粒球、及び単球から選ばれる少なくとも一つを含みうる。すなわち、本技術の微小粒子分取装置は、血液細胞の分取を行うために用いられてよく、より特には血液細胞のうちから所定の白血球（例えばＴ細胞など）を選択的に分取するために用いられる
本技術の好ましい実施態様において、前記判定部は、前記判定において用いられるルールデータを変更することができるように構成されうる。これにより、前記微小粒子分取装置は、目的に応じた粒子分取処理を実行することができる。例えば、目的細胞と赤血球とが一緒に分取されることを許容する分取処理だけでなく、目的細胞と赤血球とが一緒に分取されることを許容しない分取処理も実行することができる。
この実施態様において、前記判定部が利用可能なルールデータのうちの少なくとも一つは、例えば、
分取判定される粒子が前記（ａ）の分取対象である粒子の粒子集団に属し且つ前記粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が前記（ｂ）の無視可能な粒子の粒子集団に属する場合において、前記他の粒子の進路は、分取対象である粒子の進路である、
と定義していてよい。
このように定義されたルールデータによって、無視可能な粒子が分取対象粒子と一緒に回収されることが許容される。これにより、分取処理後の操作に影響を及ぼすことを防ぎつつ、目的細胞の回収率を高めることができる。
以下で、本技術に従う微小粒子分取装置の構成及び分取処理について、図面を参照しながら説明する。
（２）閉鎖型微小粒子分取装置の例
（２－１）装置の構成及び分取操作
本技術に従う微小粒子分取装置は、閉鎖空間内で微小粒子の分取を行う装置として構成されてよく、例えば微小粒子の進行する流路を制御することによって微小粒子の分取を行う装置として構成されてよい。図１に、本技術に従う微小粒子分取装置の構成例を示す。同図には、当該装置に含まれるチップの流路構造の例も示されている。図２に、前記微小粒子分取装置により行われる分取操作のフロー図の一例を示す。
図１に示される微小粒子分取装置１００は、光照射部１０１、検出部１０２、制御部１０３、及び微小粒子分取用マイクロチップ１５０を備えている。制御部１０３は、図４に示されるとおり、信号処理部１０４、判定部１０５、及び分取制御部１０６を含みうる。
以下で、まず微小粒子分取用マイクロチップ１５０について説明し、次に、微小粒子分取装置１００による分取操作を説明しながら、当該装置の他の構成要素について説明する。
図１に示される微小粒子分取用マイクロチップ１５０は、サンプル液流路１５２と、サンプル液流路１５２と合流部１６２で合流するシース液流路１５４とを有する。微小粒子分取用マイクロチップ１５０には、さらに、サンプル液インレット１５１及びシース液インレット１５３が設けられている。
なお、図１において、シース液流路１５４の一部が点線で示されている。当該点線で示されている部分は、実線で示されるサンプル液流路１５２よりも低い位置（矢印で示される光軸方向にずれた位置）にあり、点線で示される流路と実線で示される流路とが交差する位置で、これら流路は連通していない。また、図１においては、サンプル液流路１５２は、サンプル液インレット１５１から合流部１６２までの間で２回曲がるように示されているが、これはサンプル液流路１５２とシース液流路１５４との区別を容易にするためである。サンプル液流路１５２は、サンプル液インレット１５１から合流部１６２までの間でこのように曲がることなく直線的に構成されていてよい。
微小粒子分取操作において、サンプル液インレット１５１から微小粒子を含むサンプル液がサンプル液流路１５２に導入され、且つ、シース液インレット１５３から微小粒子を含まないシース液がシース液流路１５４に導入される。
微小粒子分取用マイクロチップ１５０は、合流部１６２を一端に有する合流流路１５５を有する。合流流路１５５は、微小粒子の分取判別を行うために用いられる分取判別部１５６を含む。
前記サンプル液及び前記シース液は、合流部１６２で合流し、そして、合流流路１５５内を、粒子分取部１５７に向かって流れる。特には、前記サンプル液及び前記シース液が合流部１６２で合流して、例えばサンプル液の周囲がシース液で囲まれた層流が形成される。好ましくは、層流中には微小粒子が略一列に並んでいる。サンプル液流路１５２と２つのシース液流路１５４とが合流部１６２で合流しており且つ当該合流部１６２を一端とする合流流路１５５を有するという流路構造によって、略一列に並んで流れる微小粒子を含む層流が形成される。これにより、以下で説明する分取判別部（検出領域ともいう）１５６における光照射において、１つの微小粒子への光照射により生じた光と他の微小粒子への光照射により生じた光とを区別しやすくなる。
微小粒子分取用マイクロチップ１５０は、さらに、合流流路１５５の他端に粒子分取部１５７を有する。図３に、粒子分取部１５７の拡大図を示す。図３Ａに示されるとおり、当該他端で、合流流路１５５は、接続流路１７０を介して微小粒子回収流路１５９と接続されている。図３Ａに示されるとおり、合流流路１５５、接続流路１７０、及び微小粒子回収流路１５９は同軸上にあってよい。
粒子分取部１５７に回収対象粒子が流れてきた場合に、図３Ｂに示されるとおり、合流流路１５５から接続流路１７０を通って微小粒子回収流路１５９へ入る流れが形成されて、回収対象粒子（本明細書内において「分取対象粒子」ともいう）が微小粒子回収流路１５９内へ回収される。このように、回収対象粒子は、接続流路１７０を通って微小粒子回収流路１５９へと流れる。
粒子分取部１５７に回収対象粒子でない微小粒子が流れてきた場合に、回収対象粒子でない当該微小粒子は、図３Ｃに示されるとおり、分岐流路１５８へと流れる。この場合において、微小粒子回収流路１５９へ入る流れは形成されない。
微小粒子回収流路１５９は、図１に示されるとおり、粒子分取部１５７から直線状に伸び、Ｕターンし、そして、サンプル液インレット１５１及びシース液インレット１５３が形成する面と同じ面へ到達するように形成されている。微小粒子回収流路１５９を流れる液体は、回収流路末端１６３からチップ外へと排出される。
２つの分岐流路１５８も、図１に示されるとおり、粒子分取部１５７から直線状に伸び、Ｕターンし、そして、サンプル液インレット１５１及びシース液インレット１５３が形成されている面と同じ面へ到達するように形成されている。分岐流路１５８を流れる液体は、分岐流路末端１６６からチップ外へと排出される。
微小粒子回収流路１５９は、図１において、Ｕターンする部分で、実線及び点線へと表示方法が変更されている。この変更は、その途中で光軸方向における位置が変化していることを示す。このように光軸方向の位置を変化させることで、分岐流路１５８と交差する部分で、微小粒子回収流路１５９及び分岐流路１５８が連通しない。
回収流路末端１６３及び２つの分岐流路末端１６６のいずれもが、サンプル液インレット１５１及びシース液インレット１５３が形成されている面に形成されている。さらに、後述する導入流路１６１へ液体を導入するための導入流路インレット１６４も、当該面に形成されている。このように、微小粒子分取用マイクロチップ１５０は、液体が導入されるインレット及び液体が排出されるアウトレットの全てが１つの面に形成されている。これにより、当該チップの微小粒子分取装置１００への取り付けが容易になる。例えば、２以上の面にインレット及び／又はアウトレットが形成されている場合と比べて、微小粒子分取装置１００に設けられている流路と微小粒子分取用マイクロチップ１５０の流路との接続が容易になる。
微小粒子分取用マイクロチップ１５０は、図１及び３に示されるとおり、接続流路１７０へ液体を導入するための導入流路１６１を有する。
導入流路１６１から液体を接続流路１７０へ導入することで、接続流路１７０内が当該液体によって満たされる。これにより、目的外の微小粒子が微小粒子回収流路１５９へ侵入することを防ぐことができる。
微小粒子分取用マイクロチップ１５０は、合流流路１５５の他端で、合流流路１５５と接続されている２つの分岐流路１５８を有する。このように、本技術において用いられる微小粒子分取用マイクロチップにおいて、前記合流流路は、前記接続流路と前記少なくとも一つの分岐流路へと分岐していてよい。
回収対象粒子以外の微小粒子は、微小粒子回収流路１５９へ侵入することなく、２つの分岐流路１５８のいずれかへ流れる。
図２に示されるとおり、微小粒子分取用マイクロチップ１５０を用いた微小粒子分取操作は、微小粒子を含む液体を合流流路１５５に流す通流工程Ｓ１と、合流流路１５５を流れる微小粒子が回収対象粒子であるかを判定する判定工程Ｓ２と、回収対象粒子を微小粒子回収流路１５９内へと回収する回収工程Ｓ３とを含む。
以下で各工程について説明する。
（２－２）通流工程
通流工程Ｓ１において、サンプル液インレット１５１及びシース液インレット１５３から、微小粒子を含むサンプル液及び微小粒子を含まないシース液が、それぞれサンプル液流路１５２及びシース液流路１５４に導入される。
当該サンプル液及び当該シース液が合流部１６２で合流して、例えばサンプル液の周囲がシース液で囲まれた層流が形成される。好ましくは、層流中には微小粒子が略一列に並んでいる。すなわち、通流工程Ｓ１において、略一列に並んで流れる微小粒子を含む層流が形成されうる。
このようにして、通流工程Ｓ１において、微小粒子を含む液体が、特には層流として、合流流路１５５内を通流される。前記液体は、合流流路１５５内を、合流部１６２から粒子分取部１５７へ向かって流れる。
（２－３）判定工程
判定工程Ｓ２において、合流流路１５５を流れる微小粒子が回収対象粒子であるかが判定される。当該判定は、判定部１０５により行われうる。判定部１０５は、当該判定を、光照射部１０１による微小粒子への光照射によって生じた光に基づき行いうる。判定工程Ｓ２の例について、以下でより詳細に説明する。
判定工程Ｓ２において、光照射部１０１が、微小粒子分取用マイクロチップ１５０中の合流流路１５５（特には分取判別部１５６）を流れる微小粒子に光（例えば励起光など）を照射し、当該光照射により生じた光を検出部１０２が検出する。検出部１０２により検出された光の特徴に基づき、判定部１０５が、微小粒子が回収対象粒子であるかを判定する。例えば、判定部１０５は、散乱光に基づく判定、蛍光に基づく判定、又は、画像（例えば暗視野画像若しくは／且つ明視野画像など）に基づく判定を行いうる。後述の回収工程Ｓ３において、制御部１０３が、微小粒子分取用マイクロチップ１５０中の流れを制御することによって、回収対象粒子が微小粒子回収流路１５９内へ回収される。
光照射部１０１は、微小粒子分取用マイクロチップ１５０中の流路内を流れる微小粒子に光（例えば励起光など）を照射する。光照射部１０１は、光を出射する光源と、分取判別部を流れる微小粒子に対して励起光を集光する対物レンズとを含みうる。光源は、分析の目的に応じて当業者により適宜選択されてよく、例えばレーザダイオード、ＳＨＧレーザ、固体レーザ、ガスレーザ、高輝度ＬＥＤ、若しくはハロゲンランプであってよく、又は、これらのうちの２つ以上の組み合わせであってもよい。光照射部は、光源及び対物レンズに加えて、必要に応じて他の光学素子を含んでいてもよい。
本技術の一つの実施態様において、検出部１０２は、光照射部１０１による光照射によって前記微小粒子から生じた散乱光及び／又は蛍光を検出する。検出部１０２は、微小粒子から生じた蛍光及び／又は散乱光を集光する集光レンズと検出器とを含みうる。当該検出器として、ＰＭＴ、フォトダイオード、ＣＣＤ、及びＣＭＯＳなどが用いられうるがこれらに限定されない。検出部１０２は、集光レンズ及び検出器に加えて、必要に応じて他の光学素子を含んでいてもよい。検出部１０２は、例えば分光部をさらに含みうる。分光部を構成する光学部品として、例えばグレーティング、プリズム、及び光フィルターを挙げることができる。分光部によって、例えば検出されるべき波長の光を、他の波長の光から分けて検出することができる。検出部１０２は、検出された光を光電変換によって、アナログ電気信号に変換しうる。検出部１０２は、さらに当該アナログ電気信号をＡＤ変換によってデジタル電気信号に変換しうる。
本技術の他の実施態様において、検出部１０２は、光照射部１０１による光照射により生成される画像を取得してもよい。前記画像は、例えば暗視野画像、明視野画像、又はこれらの両方であってよい。この実施態様において、光照射部１０１は例えばハロゲンランプ又はレーザを含み、検出部１０２は、ＣＣＤ又はＣＭＯＳを含みうる。検出部１０２は、例えばＣＭＯＳセンサが組み込まれた基板とＤＳＰ（Digital Signal Processor）を組み込まれた基板とが積層された撮像素子であってもよい。当該撮像素子のＤＳＰを機械学習部として動作させることによって、当該撮像素子はいわゆるＡＩセンサとして動作することができる。当該撮像素子を含む検出部１０２は、微小粒子が回収対象粒子であるかを、例えば学習モデルに基づき判定しうる。また、当該学習モデルは、本技術に従う方法が行われている間に、リアルタイムで更新されてもよい。例えば、ＣＭＯＳセンサ中の画素アレイ部のリセット中、当該画素アレイ部の露光中、又は当該画素アレイ部の各単位画素からの画素信号の読出中に、ＤＳＰが機械学習処理を行いうる。ＡＩセンサとして動作する撮像素子の例として、例えば、国際公開第２０１８／０５１８０９号に記載された撮像装置を挙げることができる。
制御部１０３に含まれる信号処理部１０４は、検出部１０２により得られたデジタル電気信号の波形を処理して、判定部１０５による判定のために用いられる光の特徴に関する情報（データ）を生成しうる。当該光の特徴に関する情報として、信号処理部１０４は、デジタル電気信号の波形から、例えば当該波形の幅、当該波形の高さ、及び当該波形の面積のうちの１つ、２つ、又は３つを取得しうる。また、当該光の特徴に関する情報には、例えば、当該光が検出された時刻が含まれていてよい。以上の信号処理部１０４による処理は、特には、前記散乱光及び／又は蛍光が検出される実施態様において行われうる。
制御部１０３に含まれる判定部１０５は、流路中を流れる微小粒子への光照射により生じた光に基づき、当該微小粒子が回収対象粒子であるかを判定する。
前記散乱光及び／又は蛍光が検出される実施態様において、検出部１０２により得られたデジタル電気信号の波形が制御部１０３によって処理され、そして、当該処理によって生成された光の特徴に関する情報に基づき、判定部１０５が、当該微小粒子が回収対象粒子であるかを判定する。例えば、散乱光に基づく判定において、微小粒子の外形及び／又は内部構造の特徴が特定され、当該特徴に基づき微小粒子が回収対象粒子であるかが判定されてよい。さらに、例えば細胞などの微小粒子に対して予め前処理を施しておくことで、フローサイトメトリーにおいて用いられる特徴と同様の特徴に基づき、当該微小粒子が回収対象粒子であるかを判定することもできる。また、例えば細胞などの微小粒子を抗体又は色素（特には蛍光色素）で標識を行っておくことで、当該微小粒子の表面抗原の特徴に基づき、当該微小粒子が回収対象粒子であるかを判定することもできる。
前記画像が取得される実施態様において、制御部１０３に含まれる判定部１０５は、取得された画像（例えば暗視野画像、明視野画像、又はこれらの両方）に基づき、微小粒子が回収対象粒子であるかを判定する。例えば、微小粒子（特には細胞）の形態、サイズ、及び色のうちの一つ又は二つ以上の組合せに基づき、微小粒子が回収対象粒子であるかが判定されうる。
前記判定は、例えば、当該光の特徴に関する情報が予め指定された基準を満たすかによって行われうる。当該基準は、微小粒子が回収対象粒子であることを示す基準でありうる。当該基準は、当業者により適宜設定されてよく、例えばフローサイトメトリーなどの技術分野において用いられる基準のような、光の特徴に関する基準でありうる。
分取判別部１５６中の１つの位置に１つの光が照射されてよく、又は、分取判別部１５６中の複数の位置のそれぞれに光が照射されてもよい。例えば、分取判別部１５６中の２つの異なる位置のそれぞれに光が照射されるようにマイクロチップ１５０は構成されうる（すなわち、分取判別部１５６中に、光が照射される位置が２つある。）。この場合において、例えば、１つの位置での微小粒子への光照射によって生じた光（例えば蛍光及び／又は散乱光など）に基づき当該微小粒子が回収対象粒子であるかが判定されうる。さらに、当該１つの位置での前記光照射によって生じた光の検出時刻ともう一つの位置での光照射によって生じた光の検出時刻との差に基づき、流路内における微小粒子の速度を算出することもできる。当該算出のために、予め、２つの照射位置の間の距離が決定されていてよく、前記２つの検出時刻の差と前記距離に基づき微小粒子の速度が決定されうる。さらに、当該速度に基づき、以下で述べる粒子分取部１５７への到達時刻を正確に予測することができる。当該到達時刻が正確に予測されることで、微小粒子回収流路１５９へ入る流れの形成のタイミングを最適化することができる。また、或る微小粒子の粒子分取部１５７への到達時刻と当該或る微小粒子の前又は後の微小粒子の粒子分取部１５７への到達時刻との差が所定の閾値以下である場合は、当該或る微小粒子を回収しないと判定することもできる。当該或る微小粒子とその前又は後の微小粒子との間の距離が狭い場合に、当該或る微小粒子の吸引の際に当該前又は後の微小粒子が一緒に回収される可能性が高まる。当該一緒に回収される可能性が高い場合には当該或る微小粒子を回収しないと判定することによって、当該前又は後の微小粒子が回収されることを防ぐことができる。これにより、回収された微小粒子のうちの目的とする微小粒子の純度を高めることができる。分取判別部１５６中の２つの異なる位置のそれぞれに光が照射されるマイクロチップ及び当該マイクロチップを含む装置の具体例は、例えば特開２０１４－２０２５７３号公報に記載されている。
なお、制御部１０３は、光照射部１０１による光照射及び／又は検出部１０２による光の検出を制御してもよい。また、制御部１０３は、微小粒子分取用マイクロチップ１５０内に流体を供給するためのポンプの駆動を制御しうる。制御部１０３は、例えば、本技術に従う微小粒子分取方法を微小粒子分取装置１００に実行させるためのプログラムとＯＳとが格納されたハードディスク、ＣＰＵ、及びメモリにより構成されてよい。例えば汎用のコンピュータにおいて制御部１０３の機能が実現されうる。前記プログラムは、例えばｍｉｃｒｏＳＤメモリカード、ＳＤメモリカード、又はフラッシュメモリなどの記録媒体に記録されていてもよい。当該記録媒体に記録された前記プログラムを、微小粒子分取装置１００に備えられているドライブ（図示されていない）が読み出し、そして、制御部１０３が、当該読み出されたプログラムに従い、微小粒子分取装置１００に本技術に従う微小粒子分取方法を実行させてもよい。
（２－４）回収工程
回収工程Ｓ３において、判定工程Ｓ２において回収対象粒子であると判定された微小粒子が、微小粒子回収流路１５９内へ回収される。回収工程Ｓ３は、マイクロチップ１５０中の粒子分取部１５７において行われる。粒子分取部１５７において、合流流路１５５を流れてきた前記層流は、２つの分岐流路１５８へと別れて流れる。図１に記載の粒子分取部１５７は２つの分岐流路１５８を有するが、分岐流路の数は２つに限られない。粒子分取部１５７には、例えば１つ又は複数（例えば２つ、３つ、又は４つなど）の分岐流路が設けられうる。分岐流路は、図１におけるように１平面上でＹ字状に分岐するように構成されていてよく、又は、三次元的に分岐するように構成されていてもよい。
接続流路１７０付近の拡大図を図５Ａ及び５Ｂに示す。図５Ａは、接続流路１７０付近の模式的な斜視図である。図５Ｂは、導入流路１６１の中心線と接続流路１７０の中心線とを通る平面における模式的な断面図である。接続流路１７０は、分取判別部１５６側の流路１７０ａ（以下、上流側接続流路１７０ａともいう）と、微小粒子回収流路１５９側の流路１７０ｂ（以下、下流側接続流路１７０ｂともいう）と、接続流路１７０と導入流路１６１との接続部１７０ｃとを含む。導入流路１６１は、接続流路１７０の流路の軸に対して略垂直になるように設けられている。図５Ａ及び５Ｂにおいて、２つの導入流路１６１が、接続流路１７０の略中心位置にて向かい合うように設けられているが、１つの導入流路だけが設けられていてもよい。
上流側接続流路１７０ａの横断面の形状及び寸法は、下流側接続流路１７０ｂの形状及び寸法と、同じであってよい。例えば、図５Ａ及び５Ｂに示されるとおり、上流側接続流路１７０ａの横断面及び下流側接続流路１７０ｂの横断面のいずれもが、同じ寸法を有する略円形であってよい。代替的には、これら２つの横断面のいずれもが同じ寸法を有する矩形（例えば正方形又は長方形など）であってもよい。
２つの導入流路１６１から、図５Ｂ中に矢印に示されるとおりに液体が接続流路１７０へと供給される。当該液体は、接続部１７０ｃから、上流側接続流路１７０ａ及び下流側接続流路１７０ｂの両方へ流れる。
回収工程が行われない場合は、当該液体は以下のとおりに流れる。
上流側接続流路１７０ａへ流れた液体は、接続流路１７０の合流流路１５５との接続面から出たのち、２つの分岐流路１５８へと別れて流れる。このように当該液体が当該接続面から出ていることによって、微小粒子回収流路１５９内へ回収される必要のない液体及び微小粒子が、接続流路１７０を通って微小粒子回収流路１５９へ入ることを防ぐことができる。
下流側接続流路１７０ｂへ流れた液体は、微小粒子回収流路１５９内へと流れる。これによって、微小粒子回収流路１５９内が当該液体によって満たされる。
回収工程が行われる場合においても、当該液体は、２つの導入流路１６１から接続流路１７０へと供給されうる。しかしながら、微小粒子回収流路１５９内の圧力変動により、特には微小粒子回収流路１５９内に負圧を発生させることによって、合流流路１５５から接続流路１７０を通って微小粒子回収流路１５９へと流れる流れが形成される。すなわち、合流流路１５５から、上流側接続流路１７０ａ、接続部１７０ｃ、及び下流側接続流路１７０ｂをこの順に通って微小粒子回収流路１５９へと流れる流れが形成される。これにより、回収対象粒子が、微小粒子回収流路１５９内に回収される。
上流側接続流路１７０ａの横断面の形状及び／又は寸法は、下流側接続流路１７０ｂの形状及び／又は寸法と異なっていてもよい。これら２つの流路の寸法が異なる例を図６Ａ及び６Ｂに示す。図６Ａ及び６Ｂに示されるとおり、接続流路１８０は、分取判別部１５６側の流路１８０ａ（以下、上流側接続流路１８０ａともいう）と、微小粒子回収流路１５９側の流路１８０ｂ（以下、下流側接続流路１８０ｂともいう）と、接続流路１８０と導入流路１６１との接続部１８０ｃとを含む。上流側接続流路１８０ａの横断面及び下流側接続流路１８０ｂの横断面はいずれも略円形の形状を有するが、後者の横断面の直径は、前者の横断面の直径よりも大きい。後者の横断面の直径を前者のものよりも大きくすることによって、両者の直径が同じ場合と比べて、上記で述べた負圧による微小粒子分取動作の直後に微小粒子回収流路１５９内に既に分取された回収対象粒子が接続流路１８０を通って合流流路１５５へと放出されることをより効果的に防ぐことができる。
例えば、上流側接続流路１８０ａの横断面及び下流側接続流路１８０ｂの横断面がいずれも矩形である場合は、後者の横断面の面積を前者の横断面の面積よりも大きくすることによって、上記で述べたように、既に回収された微小粒子が接続流路１８０を通って合流流路１５５へと放出されることをより効果的に防ぐことができる。
回収工程Ｓ３において、微小粒子回収流路１５９内の圧力変動により、前記回収対象粒子が前記接続流路を通って前記微小粒子回収流路内へと回収される。当該回収は、例えば、上記で述べた通り、微小粒子回収流路１５９内に負圧を発生させることによって行われてよい。当該負圧は、例えばマイクロチップ１５０の外部に取り付けられているアクチュエータ１０７（特にはピエゾアクチュエータ）により、微小粒子回収流路１５９を規定する壁が変形されることにより生じうる。当該負圧によって、微小粒子回収流路１５９へ入る当該流れが形成されうる。当該負圧を発生させるために、例えば、微小粒子回収流路１５９の壁を変形させることができるように、アクチュエータ１０７がマイクロチップ１５０外部に取り付けられうる。当該壁の変形によって、微小粒子回収流路１５９の内空が変化されて、負圧が発生されうる。アクチュエータ１０７は、例えばピエゾアクチュエータでありうる。回収対象粒子が微小粒子回収流路１５９へと吸い込まれる際には、前記層流を構成するサンプル液又は前記層流を構成するサンプル液及びシース液も、微小粒子回収流路１５９へと流れうる。このようにして、回収対象粒子は、粒子分取部１５７において分取されて、微小粒子回収流路１５９へと回収される。
回収対象粒子でない微小粒子が接続流路１７０を通って微小粒子回収流路１５９へと入ることを防ぐために、接続流路１７０には導入流路１６１が備えられている。接続流路１７０には、導入流路１６１から液体が導入される。当該液体の導入によって、当該液体により接続流路１７０が満たされる。さらに、当該液体の一部によって接続流路１７０から合流流路１５５に向かう流れが形成されることで、回収対象粒子以外の微小粒子が微小粒子回収流路１５９へ入ることが防がれる。接続流路１７０から合流流路１５５に向かう流れを形成する液体は、合流流路１５５を流れる液体が分岐流路１５８へと流れる流れによって、合流流路１５５内を流れることなく、当該液体と同様に分岐流路１５８を流れる。
なお、接続流路１７０に導入された液体の残りは、微小粒子回収流路１５９へと流れる。これにより、微小粒子回収流路１５９内は当該液体によって満たされうる。
分岐流路１５８へと流れた流れは、分岐流路末端１６０にて、マイクロチップの外部へと吐出されうる。また、微小粒子回収流路１５９へと回収された回収対象粒子は、回収流路末端１６３にて、マイクロチップの外部へと吐出されうる。回収流路末端１６３には、チューブなどの流路を介して容器が接続されうる。当該容器に、回収対象粒子が回収されてよい。
図１及び図３に示されるように、本技術において用いられる微小粒子分取用マイクロチップにおいて、前記合流流路、前記接続流路、及び前記回収流路が直線状に並んでいてよい。これら３つの流路が直線状（特には同軸上）に並んでいる場合、例えば前記接続流路及び前記回収流路が前記合流流路に対して角度を有して配置されている場合と比べて、回収工程をより効率的に行うことができる。例えば、回収対象粒子を接続流路へと導くために要する吸引量をより少なくすることができる。
また、本技術において用いられる微小粒子分取用マイクロチップにおいて、微小粒子は、合流流路内を略一列に並び、接続流路へ向かって流れる。そのため、回収工程における吸引量を少なくすることもできる。
以上で述べたとおり、本技術において用いられる微小粒子分取用マイクロチップにおいて、前記導入流路から前記接続流路へ液体が供給される。これにより、前記接続流路内に、前記導入流路と前記接続流路との接続位置から前記合流流路に向かって流れる流れが形成されて、前記合流流路を流れる液体が前記接続流路へと侵入することを防ぐことができ、回収対象粒子以外の微小粒子が接続流路を通って回収流路へ流れることを防ぐこともできる。前記回収工程を行う際には、上記で述べたとおり、例えば回収流路内に生じた負圧によって、回収対象粒子が、前記接続流路を通って、前記回収流路内へと回収される。
（２－５）微小粒子分取用マイクロチップ及び微小粒子
本技術において、「マイクロ」とは、微小粒子分取用マイクロチップに含まれる流路の少なくとも一部が、μｍオーダの寸法を有すること、特にはμｍオーダの横断面寸法を有することを意味する。すなわち、本技術において、「マイクロチップ」とは、μｍオーダの流路を含むチップ、特にはμｍオーダの横断面寸法を有する流路を含むチップをいう。例えば、μｍオーダの横断面寸法を有する流路から構成されている粒子分取部を含むチップが、本技術に従うマイクロチップと呼ばれうる。例えば、粒子分取部１５７のうち、合流流路１５５の横断面は例えば矩形であり、合流流路１５５の幅は、粒子分取部１５７内において例えば１００μｍ～５００μｍであり、特には１００μｍ～３００μｍでありうる。合流流路１５５から分岐する分岐流路の幅は、合流流路１５５の幅よりも小さくてよい。接続流路１７０の横断面は例えば円形であり、接続流路１７０と合流流路１５５との接続部における接続流路１７０の直径は例えば１０μｍ～６０μｍ、特には２０μｍ～５０μｍでありうる。流路に関するこれらの寸法は、微小粒子のサイズ、特には回収対象粒子のサイズに応じて適宜変更されてよい。
微小粒子分取用マイクロチップ１５０は、当技術分野で既知の方法により製造されうる。例えば、当該生体粒子分取用マイクロチップ１５０は、所定の流路が形成された２枚以上の基板を貼り合わせることにより製造することができる。流路は、例えば２枚以上の基板（特には２枚の基板）の全てに形成されていてもよく、又は、２枚以上の基板の一部の基板（特には２枚の基板のうちの一枚）にのみ形成されていてもよい。基板を貼り合わせる時の位置の調整をより容易にするために、流路は、一枚の基板にのみ形成されていることが好ましい。例えば、図１において点線と実線で示されるように、２つの流路が、光軸方向の異なる位置で（互いに連通しないように）且つ光軸方向から見た場合に交差するように設けられている流路構造は、流路が設けられた３枚以上の基板を積層することによって作成することができる。
微小粒子分取用マイクロチップ１５０を形成する材料として、当技術分野で既知の材料が用いられうる。例えば、ポリカーボネート、シクロオレフィンポリマー、ポリプロピレン、ＰＤＭＳ（polydimethylsiloxane）、ポリメタクリル酸メチル（ＰＭＭＡ）、ポリエチレン、ポリスチレン、ガラス、及びシリコンが挙げられるがこれらに限定されない。特に、加工性に優れており且つ成形装置を使用して安価にマイクロチップを製造することができることから、例えばポリカーボネート、シクロオレフィンポリマー、及びポリプロピレンなどの高分子材料が特に好ましい。
微小粒子分取用マイクロチップ１５０は、好ましくは透明である。例えば、微小粒子分取用マイクロチップ１５０は、少なくとも光（レーザ光及び散乱光）が通過する部分が透明であり、例えば分取判別部が透明でありうる。微小粒子分取用マイクロチップ１５０全体が透明であってもよい。
なお、以上では、使い捨て可能な微小粒子分取用マイクロチップ１５０に上記流路群が形成されている実施態様を説明したが、本技術において、上記流路群はマイクロチップ１５０に形成されていなくてもよい。例えば、上記流路群は、例えばプラスチック又はガラスなどの基板内に形成されてもよい。また、上記流路群は、２次元的又は３次元的な構造を有していてもよい。
本技術において、微小粒子は、微小粒子分取用マイクロチップ中の流路内を流れることができる寸法を有する粒子であってよい。本技術において、微小粒子は当業者により適宜選択されてよい。本技術において、微小粒子には、細胞、細胞塊、微生物、及びリポソームなどの生物学的微小粒子、並びに、ゲル粒子、ビーズ、ラテックス粒子、ポリマー粒子、及び工業用粒子などの合成微小粒子などが包含されうる。
生物学的微小粒子（生体粒子ともいう）には、各種細胞を構成する染色体、リポソーム、ミトコンドリア、オルガネラ(細胞小器官)などが含まれうる。細胞には、動物細胞(血球系細胞など)および植物細胞が含まれうる。細胞は、特には血液系細胞又は組織系細胞でありうる。前記血液系細胞は、例えばＴ細胞及びＢ細胞などの浮遊系細胞であってよい。前記組織系細胞は、例えば接着系の培養細胞又は組織からばらされた接着系細胞などであってよい。細胞塊には、例えばスフェロイド及びオルガノイドなどが含まれうる。微生物には、大腸菌などの細菌類、タバコモザイクウイルスなどのウイルス類、イースト菌などの菌類などが含まれうる。さらに、生物学的微小粒子には、核酸、タンパク質、これらの複合体などの生物学的高分子も包含されうる。これら生物学的高分子は、例えば細胞から抽出されたものであってよく又は血液サンプル若しくは他の液状サンプルに含まれるものであってもよい。
合成微小粒子は、例えば有機若しくは無機高分子材料又は金属などからなる微小粒子でありうる。有機高分子材料には、ポリスチレン、スチレン・ジビニルベンゼン、及びポリメチルメタクリレートなどが含まれうる。無機高分子材料には、ガラス、シリカ、及び磁性体材料などが含まれうる。金属には、金コロイド及びアルミなどが含まれうる。前記合成微小粒子は、例えばゲル粒子又はビーズなどであってよく、より特にはオリゴヌクレオチド、ペプチド、タンパク質、及び酵素から選ばれる１つ又は２つ以上の組合せが結合されたゲル粒子又はビーズであってよい。
微小粒子の形状は、球形若しくは略球形であってよく、又は非球形であってもよい。微小粒子の大きさ及び質量は、マイクロチップの流路のサイズによって当業者により適宜選択されうる。他方で、マイクロチップの流路のサイズも、微小粒子の大きさ及び質量によって適宜選択されうる。本技術において、微小粒子には、必要に応じて化学的又は生物学的な標識、例えば蛍光色素又は蛍光タンパクなど、が取り付けられうる。当該標識によって、当該微小粒子の検出がより容易になりうる。取り付けられるべき標識は、当業者により適宜選択されうる。当該標識には、微小粒子に特異的に反応する分子（例えば抗体、アプタマー、ＤＮＡ、又はＲＮＡなど）が結合しうる。
本技術の一つの実施態様に従い、前記微小粒子は生体粒子であり、特には細胞でありうる。
（３）判定処理の詳細
（３－１）判定処理の基本概念
回収工程Ｓ３において、微小粒子分取装置１００は、上記のとおり、回収対象粒子を回収する際に例えば微小粒子回収流路１５９内に負圧を発生させることによって、合流流路１５５から接続流路１７０を通って微小粒子回収流路１５９へと流れる流れが形成される。そのため、回収対象粒子と一緒に、回収対象粒子周囲の所定範囲内の流体（特には液体）が、微小粒子回収流路１５９内に回収される。当該所定範囲内（より特には回収対象粒子の進行方向における前及び後の所定範囲内）に他の粒子が存在する場合に、当該回収対象粒子を回収すると、当該他の粒子も一緒に微小粒子回収流路１５９内に回収される。そのため、当該他の粒子が、回収されるべきでない粒子である場合は、判定部１０５が当該回収対象粒子を回収しないと判定することによって、回収された粒子に占める回収対象粒子の純度を高めることができる。
判定工程Ｓ２において、判定部１０５は、前記所定範囲内に他の粒子が存在するかを、分取判定される粒子への光照射により生じた光が検出された時刻と、当該粒子の前又は後を流れる他の粒子への光照射により生じた光が検出された時刻とに基づき、判定しうる。これら粒子の合流流路１５５内での速度は、例えば上記（２－３）で述べたとおりに特定することができる。そのため、例えば前者の時刻と後者時刻との差に基づき、判定部１０５は、前記所定範囲内に他の粒子が存在するかを判定することができる。より具体的には、当該差が所定の値以下であるかによって、判定部１０５は、前記所定範囲内に他の粒子が存在するかを判定しうる。すなわち、前記所定範囲は、時刻の差に関する前記所定の値に基づき特定された範囲であってよい。
当該所定の値は、予め特定することができ、例えば前記負圧を１回発生させた場合に、分取判定される粒子に対して他の粒子がどの程度離れていれば、当該他の粒子が微小粒子回収流路１５９内に回収されないかを特定することによって、前記所定の値を特定することができる。
なお、本明細書内において、前記所定の値を、「ガードタイム（Guard Time）」ともいう。また、前記所定範囲は、上記で述べた通り、前記所定の値に基づき特定することができるので、本明細書内において、語「ガードタイム」を、前記所定範囲を意味するものとして使用することもある。
以上のとおり、判定部１０５は、分取判定される粒子周囲の所定範囲内に他の粒子が存在するか及び／又は当該他の粒子の種類に基づき、当該或る粒子を回収するかを判定しうる。そして、当該所定範囲内に他の粒子が存在する場合に、分取判定される粒子を分取しないと判定部１０５が判定することによって、上記で述べたとおり、回収された粒子のうちの目的粒子の純度を高めることができる。一方で、分取後処理が赤血球によって影響を受けない場合においては、赤血球は目的粒子と一緒に回収されることが許容されるにもかかわらず、目的粒子が回収されないことになり、目的粒子の回収率が下がる。そこで、目的粒子周囲の所定範囲内に、回収されることが許容される他の粒子が存在する場合において、当該目的粒子を分取することができれば、目的粒子の回収率を上げることができ、これは分取後処理の種類又は目的によっては好ましいこともある。
以下で、上記のとおりに純度を高めるための手法、及び、回収率を高めるための手法について、血液のうちから特定の白血球を分取する場合を例として説明する。
まず、微小粒子分取装置１００による血液細胞の分取を行うために、まずサンプル調製及びゲーティングが行われる。サンプル調製は、例えばフローサイトメトリーなどの技術分野において既知の手段を用いて行われてよく、サンプル調製方法は当業者により適宜選択されてよい。例えば、前記サンプル調製のために、血液に対して溶血処理が行われうる。溶血処理により、血液中の赤血球が溶血される。溶血処理は、当業者に既知の溶血剤を用いて行われてよい。
当該溶血処理によって全ての赤血球を溶血しようとすると、白血球にも影響を及ぼすことがある。そのため、当該溶血処理は、全ての赤血球が溶血される前に終了されうる。すなわち、溶血処理によって得られた血液サンプル中には、溶血されていない赤血球が存在しうる。
前記溶血処理によって調製された血液サンプルの一部を用いて、ゲーティングが行われる。ゲーティングは、目的とする細胞（例えばＴ細胞）の分取が可能となるように、当業者により適宜設定されてよい。ゲーティングのために、サンプル中の細胞への光照射によって生じる散乱光及び蛍光が用いられうる。
以下で、図７を参照しながら、ゲーティングの例を説明する。当該例は、血液サンプルから、キラーＴ細胞及びヘルパーＴ細胞を選択的に回収するためのゲーティングの例である。
前記血液サンプルを、上記（２）で説明したとおりに、微小粒子分取装置１００の微小粒子分取用マイクロチップ１５０中に流し、光照射部１０１及び検出部１０２によって、当該血液サンプル中の各粒子への光照射により生じた光が検出される。
検出された光に関するデータを用いて、例えば図７Ａに示されるように、前方散乱光（ＦＳＣ）及び側方散乱光（ＳＳＣ）の二次元プロット（ドットプロット）が生成される。生成された二次元プロットに対して、ゲートＲ１及びＲ５が設定される。ゲートＲ１は、リンパ球に対するゲートであり、且つ、ゲートＲ５は、赤血球に対するゲートである。ゲートＲ５には、赤血球だけでなく、例えば細胞デブリ又は泡などが含まれてもよい。
ゲートＲ１を、ＣＤ３に基づくヒストグラムへと展開すると、例えば図７Ｂに示されるとおりのヒストグラムが得られる。当該ヒストグラムに対して、ゲートＲ２を設定する。ゲートＲ２は、ＣＤ３陽性の細胞、すなわちＴ細胞に対するゲートである。
ゲートＲ２を、ＣＤ４及びＣＤ８に基づく二次元プロットへと展開すると、例えば図７Ｃに示されるとおりの二次元プロットが得られる。当該二次元プロットに対して、ゲートＲ３及びゲートＲ４を設定する。ゲートＲ３は、ＣＤ８陽性且つＣＤ４陰性の細胞、すなわちキラーＴ細胞に対するゲートである。ゲートＲ４は、ＣＤ８陰性且つＣＤ４陽性の細胞、すなわちヘルパーＴ細胞に対するゲートである。
以上のとおりのゲーティングによって、前記血液サンプルに含まれる細胞群は、以下のとおりの細胞集団に分けられる。
細胞集団０：以下の細胞集団１～３以外の細胞
細胞集団１：ゲートＲ１、Ｒ２、及びＲ３に属する細胞（キラーＴ細胞）
細胞集団２：ゲートＲ１、Ｒ２、及びＲ４に属する細胞（ヘルパーＴ細胞）
細胞集団３：ゲートＲ５に属する細胞（赤血球）
以上のとおりのゲーティングによって、細胞集団１及び細胞集団２を分取することで、キラーＴ細胞及びヘルパーＴ細胞を高い含有割合で含む細胞集団が得られる。以下では、血液サンプルから細胞集団１及び２のいずれかに属する細胞を分取する場合について説明する。
図８は、分取判定される細胞とその細胞周囲の所定範囲内（すなわちガードタイム内）の細胞（特にはその細胞の前又は後を流れる細胞）の有無に応じた分取判定パターンの例を示す図である。
図８の左にある「ガードタイム内の粒子の存在例」に、ケース１～９が示されている。これらケースに関して、ガードタイム内の中心にある丸囲みされた数字が、分取判定対象である細胞を示す。この数字は、上記で述べた細胞集団に付された番号にそれぞれ対応する。また、ガードタイムの紙面左から右への方向が、分取判定される粒子の合流流路１５５内における進行方向である。
図８のうち、判定パターンＡは、分取判定される粒子が目的細胞であったとしても、当該細胞周囲のガードタイム内に他の粒子が存在する場合には、当該分取判定される粒子は分取しないと判定する判定パターンである。すなわち、判定パターンＡは、目的細胞の純度を重視した判定パターンである。図８のうち、判定パターンＢは、判定パターンＡにおける目的細胞の純度を極力維持しつつ、目的細胞の回収率を向上する判定パターンである。以下で、これら判定パターンの詳細について、判定パターンＡを最初に説明し、次に判定パターンＢを説明する。
判定パターンＡのケース１では、分取判定される粒子は細胞集団０に属し且つガードタイム内に他の細胞が存在しないので、判定部１０５は、当該粒子を分取しないと判定する。
ケース２及び３では、分取判定される粒子は細胞集団１又は２に属し（すなわちキラーＴ細胞又はヘルパーＴ細胞であり）且つガードタイム内に他の粒子が存在しないので、判定部１０５は、当該粒子を分取すると判定する。
ケース４では、分取判定される粒子は細胞集団３に属し（すなわち赤血球であり）且つガードタイム内に他の粒子が存在しないので、判定部１０５は、当該粒子を分取しないと判定する。
ケース５では、分取判定される粒子は細胞集団１に属するが、ガードタイム内に（分取判定される細胞の後に）細胞集団０に属する粒子が存在する。分取判定される粒子は目的細胞であるが、当該粒子を回収すると細胞集団０に属する粒子も一緒に回収され、細胞集団０に属する粒子が回収されると、目的細胞の純度が下がる。そのため、ケース５では、判定部１０５は、分取判定される粒子を分取しないと判定する。
ケース６では、分取判定される粒子は細胞集団１に属するが、ガードタイム内に（分取判定される細胞の前に）細胞集団０に属する粒子が存在する。分取判定される粒子は目的細胞であるが、当該粒子を回収すると細胞集団０に属する粒子も一緒に回収される。そのため、ケース６では、ケース５と同様に、判定部１０５は、分取判定される粒子を分取しないと判定する。
ケース７では、分取判定される粒子は細胞集団１に属し且つガードタイム内に（分取判定される細胞の後に）細胞集団２に属する粒子が存在する。分取判定される粒子は目的細胞であり、当該粒子を回収すると細胞集団２に属する粒子も一緒に回収される。細胞集団２に属する粒子は目的細胞であり、回収されることが望ましい。そのため、ケース７では、判定部１０５は、分取判定される粒子を分取すると判定する。
ケース８では、分取判定される粒子は細胞集団１に属し且つガードタイム内に（分取判定される細胞の前に）細胞集団３に属する粒子（特には赤血球）が存在する。分取判定される粒子は目的細胞であり、当該細胞を回収すると細胞集団３に属する細胞も一緒に回収される。細胞集団３に属する粒子は目的細胞でないので、当該粒子が回収されると、目的細胞の純度が下がる。そのため、ケース８では、判定部１０５は、分取判定される粒子を分取しないと判定する。
ケース９では、分取判定される粒子は細胞集団１に属し且つガードタイム内の分取判定される粒子の前及び後に、細胞集団２に属する粒子及び細胞集団３に属する粒子がそれぞれ存在する。分取判定される粒子は目的細胞であり、当該粒子を回収すると細胞集団２に属する粒子及び細胞集団３に属する粒子も一緒に回収される。細胞集団２に属する粒子は目的細胞であるが、細胞集団３に属する粒子は目的細胞でないので、当該細胞が回収されると、目的細胞の純度が下がる。そのため、ケース９では、判定部１０５は、分取判定される粒子を分取しないと判定する。
以上で説明したとおり、判定パターンＡでは、目的細胞の純度を高めるために、ケース８及び９において、判定部１０５は、分取判定される粒子を分取しないと判定する。しかしながら、上記で述べた通り、例えば細胞集団３に属する粒子が分取操作後の処理において影響を及ぼさない場合など、細胞集団３に属する粒子が目的細胞と一緒に回収されることが許容される場合には、目的細胞の回収率を高めるために、ケース８及び９においても、分取すると判定されることが好ましい。そのような判定パターンが、図８に示される判定パターンＢである。判定パターンＢにおいて、具体的には以下のとおりの判定が行われうる。
ケース１～７に関して、判定パターンＢでは、判定パターンＡと同じように分取判定が行われる。
ケース８に関して、分取判定される粒子は目的細胞であり、当該粒子を回収すると、細胞集団３に属する粒子も一緒に回収される。細胞集団３に属する粒子は目的細胞でないが、目的細胞と一緒に回収されることが許容される。そのため、ケース８では、判定部１０５は、分取判定される粒子を分取すると判定する。
ケース９に関して、分取判定される粒子は目的細胞であり、当該粒子を回収すると細胞集団２に属する粒子及び細胞集団３に属する粒子も一緒に回収される。細胞集団２に属する粒子は目的細胞であり、一緒に回収されることが望ましい。細胞集団３に属する粒子は目的細胞でないが回収されることが許容される。そのため、ケース９では、判定部１０５は、分取判定される粒子を分取すると判定する。
図８の判定パターンＡ及びＢは、分取判定される粒子が属する粒子集団と、前記粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が属する粒子集団と、に応じて、これら粒子の関係性が定義されているルールデータを用いて分取判定することによって、実現することができる。より具体的には、本技術に従い、判定部１０５は、分取判定される粒子が属する粒子集団と、前記粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が属する粒子集団と、に応じて、これら粒子の関係性が定義されているルールデータを用いて前記判定を行い、前記分取判定される粒子及び前記所定範囲内の粒子が属しうる粒子集団は、以下の（ａ）～（ｃ）の粒子集団を含みうる。
（ａ）分取対象である粒子の粒子集団、
（ｂ）分取対象でないが前記判定において無視可能な粒子の粒子集団、及び
（ｃ）前記分取対象である粒子及び前記無視可能な粒子のいずれでもない粒子の粒子集団。
ここで、前記関係性は、例えば、前記分取判定される粒子が属する粒子集団と前記他の粒子が属する粒子集団とに基づき特定される、前記他の粒子が進行すべき進路であってよい。
例えば、上記で述べた細胞集団１及び２を前記（ａ）の粒子集団として設定し、細胞集団３を前記（ｂ）の粒子集団として設定し、且つ、細胞集団０を前記（ｃ）の粒子集団として設定することで、上記図８で説明した判定パターンの両方を実現することができる。
（３－２）判定処理のフロー例（純度を重視し且つ回収率を高める判定パターン）
以下で、図８を参照して説明した分取判定パターンＢを実現するための、判定部１０５による分取判定処理の具体例を、図９及び１０を参照しながら説明する。図９は、当該分取判定処理のフロー図の一例である。図９には、上記で述べたケース２及びケース９における当該フローに従う分取判定を説明するための模式図も示されている。図１０は、当該判定処理において用いられる進路割当表及びルールデータの例である。
図９のステップＳ１０１において、判定部１０５は、分取判定される粒子への光照射により生じた光の特徴に関する情報を取得する。当該光の特徴に関する情報は、例えば、上記で述べたとおりに信号処理部１０４によって生成されたものであってよい。
ステップＳ１０２において、判定部１０５は、流路内を流れる粒子への光照射によって生じた光に基づき、粒子がどの粒子集団に属するかを決定する。特には、判定部１０５は、ステップＳ１０１において取得した前記光の特徴に関する情報に基づき、分取判定される粒子が属する粒子集団を決定する。
具体的には、判定部１０５は、当該情報に基づき、当該粒子が、細胞集団０、１、２、及び３のいずれに属するかを決定する。
例えばケース２に関しては、図９に示されるとおり、判定部１０５は、分取判定される粒子が、細胞集団１に属すると決定する。
また、ケース９に関しても、図９に示されるとおり、判定部１０５は、分取判定される粒子が、細胞集団１に属すると決定する。
ステップＳ１０３において、判定部１０５は、ステップＳ１０２において決定された粒子集団に基づき、分取判定される粒子の進路を特定する。判定部１０５は、当該特定のために、例えば、粒子集団と粒子集団に属する粒子が進行すべき進路とが関連付けられている進路割当用データを参照しうる。例えば、当該進路割当用データは、粒子集団の種類に応じて、当該粒子集団に属する粒子が進行すべき進路が、分取対象である粒子が進行する進路であるか又は分取対象でない粒子が進行する進路であるかを定義するデータでありうる。当該進路割当用データは、例えば図１０に示されるような進路割当表であってよい。
ステップＳ１０３において、具体的には、当該粒子が細胞集団１又は２に属する場合は、当該粒子の進路を、微小粒子回収流路１５９であると特定する。また、当該粒子が細胞集団０又は３に属する場合は、当該粒子の進路を、分岐流路１５８であると特定する。これら進路は、例えば符号化されていてよく、各進路に割り当てられた符号が、当該粒子に付与されてよい。例えば、図１０の「進路割当表」に示されるとおり、細胞集団１又は２に属する粒子は分取対象である粒子であり、当該粒子の進路が微小粒子回収流路１５９であることが、「１」により表されてよい。また、細胞集団０又は３に属する粒子は分取対象でない粒子であり、当該粒子の進路が分岐流路１５８であることは、「０」により表わされてよい。このように進路が符号化されている場合、ステップＳ１０２において決定された細胞集団の種類に基づき、判定部１０５は、各粒子に「１」又は「０」の符号を割り当てる。
例えばケース２に関しては、分取判定される粒子は細胞集団１に属するので、図９に示されるとおり、判定部１０５は、図１０の進路割当表を参照して、当該粒子に進路１を割り当てる。
また、ケース９に関しても、分取判定される粒子は細胞集団１に属するので、図９に示されるとおり、判定部１０５は、図１０の進路割当表を参照して、分取判定される粒子に進路１を割り当てる。
ステップＳ１０４において、判定部１０５は、分取判定される粒子周囲の所定範囲内に（すなわちガードタイム内に）、他の粒子が存在するかを判定する。
具体的には、判定部１０５は、ステップＳ１０１～１０３における処理の対象となった粒子の進行方向における前又は後の所定範囲内に、他の粒子が存在するかを判定する。当該判定は、分取判定される粒子への光照射により生じた光が検出された時刻と、その前及び／又は後に流れている粒子への光照射により生じた光が検出された時刻と、に基づき行われてよい。例えば、これら時刻の差の絶対値が所定の値以下である場合は、判定部１０５は、他の粒子が存在すると判定する。当該絶対値が所定の値よりも大きい場合は、判定部１０５は、他の粒子が存在しないと判定する。
ステップＳ１０４において、判定部１０５は、分取判定される粒子周囲の所定範囲内に他の粒子が存在すると判定した場合には、処理をステップＳ１０５に進める。判定部１０５は、分取判定される粒子周囲の所定範囲内に他の粒子が存在しないと判定した場合には、処理をステップＳ１０９に進める。
例えばケース２に関しては、分取判定される粒子周囲の所定範囲内に他の粒子が存在しないので、判定部１０５は、処理をステップＳ１０９に進める。
また、ケース９に関しては、分取判定される粒子周囲の所定範囲内に他の粒子が存在するので、判定部１０５は、処理をステップＳ１０５に進める。
このように、本技術の好ましい実施態様において、判定部は、分取判定される粒子周囲の所定範囲内に他の粒子が存在するかを判定する。そして、当該判定部は、当該所定範囲内に他の粒子が存在すると判定した場合に、ルールデータを用いた判定を行いうる。これにより、必要な場合にだけルールデータを用いた判定を行うことができ、不必要な処理を減らすことができる。
また、本例におけるフローでは、分取判定される粒子の進路の特定工程（ステップＳ１０１～Ｓ１０３）の後に、前記所定範囲内の他の粒子の存在判定工程（ステップＳ１０４）が行われているが、本技術に従う判定処理において、前記存在判定工程を先に行い、次に、前記特定工程が行われてもよい。
ステップＳ１０５において、判定部１０５は、前記所定範囲内に存在する他の粒子が属する粒子集団を決定する。当該決定は、上記で説明したステップＳ１０１及びＳ１０２と同じように行われてよい。
例えばケース９に関して、判定部１０５は、分取判定される粒子の前に存在する粒子が細胞集団２に属すると決定し、且つ、分取判定される粒子の後に存在する粒子が細胞集団３に属すると決定する。
ステップＳ１０６において、判定部１０５は、分取判定される粒子（すなわちステップＳ１０１～Ｓ１０３における処理の対象となった粒子）が属する粒子集団と、当該粒子周囲の所定範囲内の他の粒子（すなわちステップＳ１０５における処理の対象となった粒子）が属する粒子集団と、に応じた、これら粒子の関係性（より具体的にはこれら粒子の関係性に基づく他の粒子の進路）が定義されているルールデータを参照して、分取判定される粒子と他の粒子との関係性を特定する。
前記ルールデータの例が、図１０に示されている。図１０に示されているルールデータは、分取判定される粒子が属する細胞集団の種類と、他の粒子が属する細胞集団の種類と、に応じて、０又は１の値が特定されている（図１０では下線付加された０又は１として示されている）。例えば、判定部１０５は、分取判定される粒子が属する細胞集団が１又は２であり（すなわち分取対象である粒子である場合）且つ他の粒子が属する細胞集団が１、２、又は３である場合は、分取判定される粒子と他の粒子との関係性が「１」であると特定し、その他の場合は、これら２つの粒子の関係性が「０」であると特定しうる。「１」は、他の粒子の進路が、分取対象である粒子が進行する流路（微小粒子回収流路１５９）であることを意味し、「０」は、他の粒子の進路が、分取対象でない粒子が進行する流路（分岐流路１５８）であることを意味する。
すなわち、前記ルールデータは、分取判定される粒子が前記（ａ）の分取対象である粒子の粒子集団（本例では細胞集団１又は２）に属し且つ前記粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が前記（ｂ）の無視可能な粒子の粒子集団（本例では細胞集団３）に属する場合において、前記他の粒子の進路は、分取対象である粒子の進路（本例では関係性１）であると定義している。このように定義されたルールデータを用いることで、例えば赤血球などの無視可能な粒子が前記所定範囲内に存在する場合に、当該粒子が目的粒子と一緒に回収されることを許容することができる。これにより、目的粒子の純度を重視し且つ回収率も向上されるように分取判定することができる。
また、前記ルールデータは、分取判定される粒子が前記（ａ）の分取対象である粒子の粒子集団（本例では細胞集団１又は２）に属し且つ前記粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が前記（ａ）の分取対象である粒子の粒子集団に属する場合において、前記他の粒子の進路は、分取対象である粒子の進路（本例では関係性１）であると定義している。このように定義されたルールデータによって、前記分取判定される粒子及び前記所定範囲内の他の粒子の両方が目的粒子である場合に、これら粒子を一緒に回収することができる。
また、前記ルールデータは、分取判定される粒子が前記（ａ）の分取対象である粒子の粒子集団（本例では細胞集団１又は２）に属し且つ前記粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が前記（ｃ）のいずれでもない粒子の粒子集団（本例では細胞集団０）に属する場合において、前記他の粒子の進路は、分取対象でない粒子の進路（本例では関係性０）であると定義している。このように定義されたルールデータによって、回収されるべきでない粒子が、目的粒子と一緒に回収されることを防ぐことができる。
前記ルールデータは、分取判定される粒子が前記（ｂ）の無視可能な粒子の粒子集団（本例では細胞集団３）に属する場合には、前記粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が前記（ａ）～（ｃ）のいずれの粒子集団に属するとしても、前記他の粒子の進路は、分取対象でない粒子の進路（本例では関係性０）であると定義している。
また、前記ルールデータは、分取判定される粒子が前記（ｃ）のいずれでもない粒子の粒子集団（本例では細胞集団０）に属する場合にも、前記粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が前記（ａ）～（ｃ）のいずれの粒子集団に属するとしても、前記他の粒子の進路は、分取対象でない粒子の進路（本例では関係性０）であると定義している。
このように定義されたルールデータによって、目的粒子の純度を高めることができる。
例えばケース９に関して、前記分取判定される粒子が属する細胞集団が「１」であり且つ前記前に存在する粒子が属する細胞集団が「２」である。そのため、判定部１０５は、当該ルールデータを参照して、図１０に示されるとおり、前記前に存在する粒子の進路として「１」（図１０では下線付加されている）を割り当てる。
また、前記分取判定される粒子が属する細胞集団が「１」であり且つ前記後に存在する粒子が属する細胞集団が「３」である。そのため、判定部１０５は、当該ルールデータを参照して、図１０に示されるとおり、前記後に存在する粒子の進路として「１」（図１０では下線付加されている）を割り当てる。
ステップＳ１０７において、判定部１０５は、ステップＳ１０３において特定された分取判定される粒子の進路と、ステップＳ１０６において特定された関係性（すなわち２つの粒子の関係性に基づく他の粒子の進路）に基づき、分取判定される粒子を分取するかを最終的に決定する。
より具体的には、判定部１０５は、分取判定される粒子の進路が、分取対象である粒子が進行する流路（微小粒子回収流路１５９）であり、且つ、他の粒子の進路も、分取対象である粒子が進行する流路である場合に、分取判定される粒子を分取すると最終的に決定する。また、判定部１０５は、分取判定される粒子の進路が、分取対象である粒子が進行する流路であるが、他の粒子の進路（他の粒子が２以上存在する場合は、他の粒子のうちの少なくとも一つの進路）が、分取対象でない粒子が進行する流路（分岐流路１５８）である場合には、分取判定される粒子を分取しないと最終的に決定する。また、判定部１０５は、分取判定される粒子の進路が、分取対象でない粒子が進行する流路である場合には、他の粒子の進路がいずれの流路であっても、分取判定される粒子を分取しないと最終的に決定する。
このように、前記ルールデータに従う進路割当結果を考慮して、分取判定される粒子の進路を最終的に決定することで、分取判定される粒子の種類と他の粒子の種類とに応じた分取判定処理が可能となり、例えば赤血球などの無視可能な粒子の回収を許容することができる。
例えば、ステップＳ１０３において特定された分取判定される粒子の進路が「１」であり且つステップＳ１０６において特定された関係性（特には他の粒子の進路）の全てが「１」である場合には、判定部１０５は、分取判定される粒子を分取すると判定する。これ以外の場合（例えば、分取判定される粒子の進路が「０」である場合、及び、前記関係性のいずれか１つ以上が「０」である場合）には、判定部１０５は、分取判定される粒子を分取しないと判定する。このように判定することによって、目的外の細胞が、目的細胞と一緒に分取されることを防ぐことができる。
例えばケース９に関して、ステップＳ１０３において特定された、分取判定される粒子の進路は「１」であり、且つ、ステップＳ１０６において特定された関係性は全て「１」である。そのため、ステップＳ１０７において、判定部１０５は、分取判定される粒子を分取すると判定する。
ステップＳ１０８は、ガードタイム内に他の粒子が存在しない場合における判定部１０５による処理の例である。ステップＳ１０８において、判定部１０５は、ステップＳ１０３において特定された進路に基づき、分取判定される粒子を分取するかを決定する。例えば、判定部１０５は、ステップＳ１０３において分取判定される粒子の進路が「１」であると特定されている場合は、当該粒子を分取すると判定し、当該粒子の進路が「０」であると特定されている場合は、当該粒子を分取しないと判定する。
ステップＳ１０９において、判定部１０５は、ステップＳ１０７又はＳ１０８において得られた判定結果を、分取制御部１０６に送信する。例えば、分取制御部１０６は、分取判定される粒子を分取するとの判定結果を受信した場合は、当該粒子に対して回収工程Ｓ３を実行するよう微小粒子分取装置を駆動する。分取制御部１０６は、分取判定される粒子を分取しないとの判定結果を受信した場合は、当該粒子に対して回収工程Ｓ３を実行しないように微小粒子分取装置を制御する。
以上で述べた分取判定処理を、判定部１０５は、分取判定される粒子のそれぞれに対して行う。
以上の分取判定処理において用いられたルールデータによって、分取判定される粒子が前記（ａ）の粒子集団に属する粒子であれば、当該分取判定される粒子周囲の他の粒子が、前記（ｂ）の無視可能な粒子の粒子集団に属するとしても、当該分取判定される粒子を分取すると判定することができる。より具体的には、前記ルールデータは、分取判定される粒子が細胞集団１又は２に属し且つ他の粒子が細胞集団３に属する場合に、関係性として「１」を定義しているので、上記のような判定が可能となる。これにより、目的粒子の純度を維持しつつ、目的粒子の回収率を高めることができる。
また、前記ルールデータは、図１０に示されるような多次元データであってよく、例えば二次元マトリックスデータ又は三次元マトリックスデータであってよい。多次元データであることによって、分取判定される粒子が属する粒子集団と他の粒子が属する粒子集団との関係性を定義することが可能となる。例えば、他の粒子が１つである場合は、二次元マトリックスデータが用いられてよく、他の粒子が２つであるときは、二次元マトリックスデータ又は三次元マトリックスデータのいずれかが採用されてよい。
（３－３）ルールデータの変更による種々の分取判定パターンの実現
本技術において、判定部は、判定において用いられるルールデータを変更することができるように構成されていてよい。これにより、当該判定処理フローで用いられるルールデータを変更することで、例えば目的細胞の回収率を高める判定パターン及び目的細胞の純度を高める判定パターンなど、種々の判定パターンを実現することができる。これにより、装置ユーザの種々のニーズに対応することができる。
また、本技術の微小粒子分取装置は、分取判定される粒子が属する粒子集団と、前記粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が属する粒子集団と、に応じて、これら粒子の関係性が定義されているルールデータを複数有していてよい。複数のルールデータは、例えば微小粒子分取装置の制御部に格納されていてよい。複数のルールデータは、記録媒体に格納されていてもよい。当該記録媒体は微小粒子分取装置内にあってよく又は当該装置外にあってもよい。制御部が、当該記録媒体に格納されているルールデータを取得し、粒子分取判定において使用しうる。
また、本技術の微小粒子分取装置は、前記ルールデータを生成するルールデータ生成部をさらに備えていてよい。当該ルールデータ生成部は、例えば上記で説明した制御部１０３に含まれていてよい。前記ルールデータ生成部は、前記分取判定される粒子及び前記所定範囲内の他の粒子が属しうる粒子集団に基づき、ルールデータを生成しうる。例えば、ゲーティングによって特定された粒子集団と、各粒子集団の前記（ａ）～（ｃ）への割り当てと、に基づき、ルールデータを生成しうる。このようなルールデータ生成を可能とするために、好ましくは、前記微小粒子分取装置は、前記分取判定される粒子及び前記所定範囲内の他の粒子が属しうる粒子集団を設定するためのゲーティング操作を受け付ける入力部をさらに備えていてよい。入力部の構成は、当業者により適宜設定されてよく、例えば上記で述べたとおりであってよい。そのような入力部は、例えばゲートを設定可能な入力装置（例えばマウス、タッチパッド、キーボードなど）を含んでよく、当該入力装置が、設定されるゲートを表示する表示装置と組み合わせて用いられうる。
以下で、上記（３－１）において述べたケース１～９に関して、ルールデータの変更によって、種々の分取判定パターンが実現できることを説明する。なお、以下の分取判定パターンにおいて採用される細胞集団のゲーティングは、上記（３－１）において説明したものと同じである。
（３－３－１）目的細胞の純度を優先した分取判定処理の例
図１１に、目的細胞の純度を重視した分取判定において用いられるルールデータの例、及び、当該ルールデータを用いて分取判定を行った場合の分取判定結果の例を示す。
なお、当該分取判定結果は、上記で図８を参照して説明したものと同じである。
図１１の左上に、ルールデータが示されている。当該ルールデータは、分取判定される粒子が細胞集団１又は２に属し且つ分取判定される粒子周囲の他の粒子も細胞集団１又は２に属する場合に、当該他の粒子の進路が、分取対象である粒子が進行する流路である（ルールデータ表中において下線付加された数字１で示されている）と定義している。また、当該ルールデータは、その他の場合には、当該他の粒子の進路が、分取対象でない粒子が進行する流路である（表中において下線付加された数字０で示されている）と定義している。図１１の右上に示されている進路割当表は、図１０に記載されたものと同じである。
図１１の下に、ケース１～９における分取判定結果が示されている。ケース１～９における分取判定処理を以下で説明する。
（ケース１～４について）
ケース１～４では、分取判定される粒子周囲の所定範囲（ガードタイム）内に他の粒子が存在しないため、ステップＳ１０４において、判定部１０５は処理をステップＳ１０９に進める。そのため、ステップＳ１０１～Ｓ１０３において判定部１０５により特定された進路に基づき、判定部１０５は、ステップＳ１０９において、分取判定される粒子を分取するかを決定する。
例えば、ケース１及び４では、図１１に示されるとおり、ステップＳ１０３において、判定部１０５は、分取判定される粒子の進路として、「０」を割り当て、すなわち、当該粒子の進路が分岐流路１５８であると特定する。そして、ステップＳ１０９において、判定部１０５は、分取判定される粒子の進路に「０」が割り当てられていることに基づき、当該粒子を分取しないと判定する。例えば、判定部１０５は、分取判定結果として、分取しないことを示す「０」（図１１では斜体で記載されている）を、当該分取判定される粒子に割り当てる。
ケース２及び３では、図１１に示されるとおり、ステップＳ１０３において、判定部１０５は、分取判定される粒子の進路として、「１」を割り当て、すなわち、当該粒子の進路が微小粒子回収流路１５９であると特定する。そして、ステップＳ１０９において、判定部１０５は、分取判定される粒子の進路に「１」が割り当てられていることに基づき、当該粒子を分取すると判定する。例えば、判定部１０５は、分取判定結果として、分取することを示す「１」（図１１では斜体で記載されている）を、当該分取判定される粒子に割り当てる。
（ケース５～９について）
ケース５～９では、ケース１～４と異なり、分取判定される粒子周囲の所定範囲（ガードタイム）内に他の粒子が存在するため、ステップＳ１０４において、判定部１０５は処理をステップＳ１０５に進める。以下で各ケースについて説明する。
ケース５に関して、ステップＳ１０３において、判定部１０５は、分取判定される粒子の進路として、「１」を割り当て、すなわち、当該粒子の進路が微小粒子回収流路１５９であると特定する。
次に、ステップＳ１０５において、判定部１０５は、分取判定される粒子の後に存在する他の粒子が細胞集団０に属すると特定する。
次に、ステップＳ１０６において、判定部１０５は、ルールデータを参照し、当該分取判定される粒子と当該他の粒子との関係性を特定する。判定部１０５は、当該分取判定される粒子は細胞集団１に属し且つ当該他の粒子は細胞集団０に属するので、これら粒子の関係性として「０」（図１１では下線付加されている）を特定し、すなわち当該他の粒子の進路が、分取対象でない粒子が進行する流路（分岐流路１５８）であると特定する。
次に、ステップＳ１０７において、判定部１０５は、ステップＳ１０３において特定された進路及びステップＳ１０６において特定された関係性に基づき、分取判定される粒子を分取するかを判定する。ステップＳ１０３において特定された進路は「１」であるがステップＳ１０６において特定された関係性は「０」であり、全ての値が「１」でない。全ての値が「１」でないため、判定部１０５は、分取判定される粒子を分取しないと判定する。例えば、判定部１０５は、分取判定結果として、分取しないことを示す「０」（図１１では斜体で記載されている）を、当該分取判定される粒子に割り当てる。
次に、ステップＳ１０９において、判定部１０５は、ステップ１０７において得られた分取判定結果を、分取制御部１０６に送信する。
ケース６に関して、ステップＳ１０３において、判定部１０５は、分取判定される粒子の進路として、「１」を割り当て、すなわち、当該粒子の進路が微小粒子回収流路１５９であると特定する。
次に、ステップＳ１０５において、判定部１０５は、分取判定される粒子の前に存在する他の粒子が細胞集団０に属すると特定する。
次に、ステップＳ１０６において、判定部１０５は、ルールデータを参照し、当該分取判定される粒子と当該他の粒子との関係性を特定する。ケース５と同様に、これら粒子の関係性として「０」（図１１では下線付加されている）を特定し、すなわち当該他の粒子の進路は、分取対象でない粒子が進行する流路（分岐流路１５８）であると特定する。
次に、ステップＳ１０７において、判定部１０５は、ステップＳ１０３において特定された進路及びステップＳ１０６において特定された関係性に基づき、分取判定される粒子を分取するかを判定する。具体的には、判定部１０５は、ケース５と同様に、分取判定される粒子を分取しないと判定する。
次に、ステップＳ１０９において、判定部１０５は、ステップ１０７において得られた分取判定結果を、分取制御部１０６に送信する。
ケース７に関して、ステップＳ１０３において、判定部１０５は、分取判定される粒子の進路として、「１」を割り当て、すなわち、当該粒子の進路が微小粒子回収流路１５９であると特定する。
次に、ステップＳ１０５において、判定部１０５は、分取判定される粒子の後に存在する他の粒子が細胞集団２に属すると特定する。
次に、ステップＳ１０６において、判定部１０５は、ルールデータを参照し、当該分取判定される粒子と当該他の粒子との関係性を特定する。判定部１０５は、当該分取判定される粒子は細胞集団１に属し且つ当該他の粒子は細胞集団２に属するので、これら粒子の関係性として「１」（図１１では下線付加されている）を特定し、すなわち当該他の粒子の進路が、分取対象である粒子が進行する流路（微小粒子回収流路１５９）であると特定する。
次に、ステップＳ１０７において、判定部１０５は、ステップＳ１０３において特定された進路及びステップＳ１０６において特定された関係性に基づき、分取判定される粒子を分取するかを判定する。ステップＳ１０３において特定された進路が「１」であり且つステップＳ１０６において特定された関係性が「１」であり、全ての値が１である。全ての値が１であるため、判定部１０５は、分取判定される粒子を分取すると判定する。例えば、判定部１０５は、分取判定結果として、分取することを示す「１」（図１１では斜体で記載されている）を、当該分取判定される粒子に割り当てる。
次に、ステップＳ１０９において、判定部１０５は、ステップＳ１０７において得られた分取判定結果を、分取制御部１０６に送信する。
ケース８に関して、ステップＳ１０３において、判定部１０５は、分取判定される粒子の進路として、「１」を割り当て、すなわち、当該粒子の進路が微小粒子回収流路１５９であると特定する。
次に、ステップＳ１０５において、判定部１０５は、分取判定される粒子の前に存在する他の粒子が細胞集団３に属すると特定する。
次に、ステップＳ１０６において、判定部１０５は、ルールデータを参照し、当該分取判定される粒子と当該他の粒子との関係性を特定する。判定部１０５は、当該分取判定される粒子は細胞集団１に属し且つ当該他の粒子は細胞集団３に属するので、これら粒子の関係性として「０」（図１１では下線付加されている）を特定し、すなわち当該他の粒子の進路が、分取対象でない粒子が進行する流路（分岐流路１５８）であると特定する。
次に、ステップＳ１０７において、判定部１０５は、ステップＳ１０３において特定された進路及びステップＳ１０６において特定された関係性に基づき、分取判定される粒子を分取するかを判定する。具体的には、ステップＳ１０３において特定された進路が「１」であるがステップＳ１０６において特定された関係性が「０」であり、全ての値が「１」でない。全ての値が「１」でないため、判定部１０５は、分取判定される粒子を分取しないと判定する。例えば、判定部１０５は、分取判定結果として、分取しないことを示す「０」（図１１では斜体で記載されている）を、当該分取判定される粒子に割り当てる。
次に、ステップＳ１０９において、判定部１０５は、ステップＳ１０７において得られた分取判定結果を、分取制御部１０６に送信する。
ケース９に関して、ステップＳ１０３において、判定部１０５は、分取判定される粒子の進路として、「１」を割り当て、すなわち、当該粒子の進路が微小粒子回収流路１５９であると特定する。
次に、ステップＳ１０５において、判定部１０５は、分取判定される粒子の後に存在する他の粒子が細胞集団３に属すると特定し、且つ、分取判定される粒子の前に存在する他の粒子が細胞集団２に属すると特定する。
次に、ステップＳ１０６において、判定部１０５は、ルールデータを参照し、当該分取判定される粒子と当該２つの他の粒子それぞれとの関係性を特定する。判定部１０５は、当該分取判定される粒子は細胞集団１に属し且つ当該後に存在する他の粒子は細胞集団３に属するので、これら粒子の関係性として「０」（図１１では下線付加されている）を特定し、すなわち当該後に存在する他の粒子の進路が、分取対象でない粒子が進行する流路（分岐流路１５８）であると特定する。また、判定部１０５は、当該分取判定される粒子は細胞集団１に属し且つ当該前に存在する他の粒子は細胞集団２に属するので、これら粒子の関係性として「１」（図１１では下線付加されている）を特定し、すなわち当該前に存在する他の粒子の進路が、分取対象である粒子が進行する流路（微小粒子回収流路１５９）であると特定する。
次に、ステップＳ１０７において、判定部１０５は、ステップＳ１０３において特定された進路及びステップＳ１０６において特定された関係性に基づき、分取判定される粒子を分取するかを判定する。具体的には、ステップＳ１０３において特定された進路が「１」であり且つステップＳ１０６において特定された当該分取判定される粒子と当該前に存在する他の粒子との関係性が「１」であるが、当該分取判定される粒子と当該前後に存在する他の粒子との関係性が「０」である。そのため、全ての値が１でないので、判定部１０５は、分取判定される粒子を分取しないと判定する。例えば、判定部１０５は、分取判定結果として、分取しないことを示す「０」（図１１では斜体で記載されている）を、当該分取判定される粒子に割り当てる。
次に、ステップＳ１０９において、判定部１０５は、ステップＳ１０７において得られた分取判定結果を、分取制御部１０６に送信する。
以上のとおり、図１１に示されるルールデータによって、目的細胞の純度を重視した分取判定が可能となる。
なお、図１１に示されるルールデータは、以下のとおりに定義を行うものであると言い換えることができる。
前記ルールデータは、分取判定される粒子が前記（ａ）の分取対象である粒子の粒子集団（本例では細胞集団１又は２）に属し且つ前記粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が前記（ａ）の分取対象である粒子の粒子集団に属する場合において、前記他の粒子の進路は、分取対象である粒子の進路（本例では関係性１）であると定義している。このように定義されたルールデータによって、前記分取判定される粒子及び前記所定範囲内の他の粒子の両方が目的粒子である場合に、これら粒子を一緒に回収することができる。
前記ルールデータは、分取判定される粒子が前記（ａ）の分取対象である粒子の粒子集団（本例では細胞集団１又は２）に属し且つ前記粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が前記（ｂ）の無視可能な粒子の粒子集団（本例では細胞集団３）に属する場合において、前記他の粒子の進路は、分取対象でない粒子の進路（本例では関係性０）であると定義している。このように定義されたルールデータを用いることで、例えば赤血球などの無視可能な粒子が前記所定範囲内に存在する場合には、当該粒子が目的粒子と一緒に回収されることを防ぐことができる。これにより、目的粒子の純度を向上させることができる。
また、前記ルールデータは、分取判定される粒子が前記（ａ）の分取対象である粒子の粒子集団（本例では細胞集団１又は２）に属し且つ前記粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が前記（ｃ）のいずれでもない粒子の粒子集団（本例では細胞集団０）に属する場合において、前記他の粒子の進路は、分取対象でない粒子の進路（本例では関係性０）であると定義している。このように定義されたルールデータによって、回収されるべきでない粒子が、目的粒子と一緒に回収されることを防ぐことができる。
前記ルールデータは、分取判定される粒子が前記（ｂ）の無視可能な粒子の粒子集団（本例では細胞集団３）に属する場合には、前記粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が前記（ａ）～（ｃ）のいずれの粒子集団に属するとしても、前記他の粒子の進路は、分取対象でない粒子の進路（本例では関係性０）であると定義している。
また、前記ルールデータは、分取判定される粒子が前記（ｃ）のいずれでもない粒子の粒子集団（本例では細胞集団０）に属する場合にも、前記粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が前記（ａ）～（ｃ）のいずれの粒子集団に属するとしても、前記他の粒子の進路は、分取対象でない粒子の進路（本例では関係性０）であると定義している。
このように定義されたルールデータによって、目的粒子の純度を高めることができる。
（３－３－２）目的細胞の純度を優先した分取判定処理の他の例
図１２に、目的細胞の純度を重視した分取判定において用いられるルールデータの他の例、及び、当該ルールデータを用いて分取判定を行った場合の分取判定結果の例を示す。当該ルールデータは、ガードタイム内に他の粒子が存在する場合は、分取判定される粒子を分取しないと判定するためのルールデータである。
図１２の左上に、ルールデータが示されている。当該ルールデータは、分取判定される粒子がいずれの細胞集団に属する場合においても、他の粒子の進路は、分取対象でない粒子が進行する流路である（表中において下線付加された「０」で示されている）と定義されている。すなわち、このルールデータを用いると、ガードタイム内に他の粒子が存在する場合は、判定部１０５は、分取判定される粒子を分取しないと判定することになる。図１２の右上に示されている進路割当表は、図１０において説明したものと同じである。
図１２の下に、ケース１～９における分取判定結果が示されている。ケース１～９における分取判定処理を以下で説明する。
（ケース１～４について）
ケース１～４では、ルールデータを参照しないので、上記（３－３－１）において説明したものと同じ分取判定結果となる。
（ケース５～９について）
ケース５、６、及び８では、ルールデータを参照するが、ステップＳ１０６において特定される関係性は、上記（３－３－１）において説明したものと同じである。そのため、上記（３－３－１）において説明したものと同じ分取判定結果となる。
以下で、上記（３－３－１）と異なる分取判定結果となるケース７及び９について説明する。
ケース７に関して、ステップＳ１０３において、判定部１０５は、分取判定される粒子の進路として、「１」を割り当て、すなわち、当該粒子の進路が微小粒子回収流路１５９であると特定する。
次に、ステップＳ１０５において、判定部１０５は、分取判定される粒子の後に存在する他の粒子が細胞集団２に属すると特定する。
次に、ステップＳ１０６において、判定部１０５は、ルールデータを参照し、当該分取判定される粒子と当該他の粒子との関係性を特定する。判定部１０５は、当該分取判定される粒子は細胞集団１に属し且つ当該他の粒子は細胞集団２に属するので、これら粒子の関係性として「０」（図１２では下線付加されている）を特定し、すなわち当該他の粒子の進路が、分取対象でない粒子が進行する流路（分岐流路１５８）であると特定する。
次に、ステップＳ１０７において、判定部１０５は、ステップＳ１０３において特定された進路及びステップＳ１０６において特定された関係性に基づき、分取判定される粒子を分取するかを判定する。ステップＳ１０３において特定された進路は「１」であるがステップＳ１０６において特定された関係性は「０」であり、全ての値が「１」でない。全ての値が「１」でないため、判定部１０５は、分取判定される粒子を分取しないと判定する。例えば、判定部１０５は、分取判定結果として、分取しないことを示す「０」（図１２では斜体で記載されている）を、当該分取判定される粒子に割り当てる。
次に、ステップＳ１０９において、判定部１０５は、ステップ１０７において得られた分取判定結果を、分取制御部１０６に送信する。
ケース９に関して、ステップＳ１０３において、判定部１０５は、分取判定される粒子の進路として、「１」を割り当て、すなわち、当該粒子の進路が微小粒子回収流路１５９であると特定する。
次に、ステップＳ１０５において、判定部１０５は、分取判定される粒子の後に存在する他の粒子が細胞集団３に属すると特定し、且つ、分取判定される粒子の前に存在する他の粒子が細胞集団２に属すると特定する。
次に、ステップＳ１０６において、判定部１０５は、ルールデータを参照し、当該分取判定される粒子と当該２つの他の粒子それぞれとの関係性を特定する。判定部１０５は、当該分取判定される粒子は細胞集団１に属し且つ当該後に存在する他の粒子は細胞集団３に属するので、これら粒子の関係性として「０」（図１２では下線付加されている）を特定し、すなわち当該後に存在する他の粒子の進路が、分取対象でない粒子が進行する流路（分岐流路１５８）であると特定する。また、判定部１０５は、当該分取判定される粒子は細胞集団１に属し且つ当該前に存在する他の粒子は細胞集団２に属するので、これら粒子の関係性として「０」（図１２では下線付加されている）を特定し、すなわち当該前に存在する他の粒子の進路が、分取対象でない粒子が進行する流路（分岐流路１５８）であると特定する。
次に、ステップＳ１０７において、判定部１０５は、ステップＳ１０３において特定された進路及びステップＳ１０６において特定された関係性に基づき、分取判定される粒子を分取するかを判定する。具体的には、ステップＳ１０３において特定された進路が「１」であるが、ステップＳ１０６において特定された当該分取判定される粒子と当該前又は後に存在する他の粒子との関係性が「０」である。そのため、全ての値が１でないので、判定部１０５は、分取判定される粒子を分取しないと判定する。例えば、判定部１０５は、分取判定結果として、分取しないことを示す「０」（図１２では斜体で記載されている）を、当該分取判定される粒子に割り当てる。
次に、ステップＳ１０９において、判定部１０５は、ステップＳ１０７において得られた分取判定結果を、分取制御部１０６に送信する。
以上のとおり、図１２に示されるルールデータによっても、目的細胞の純度を重視した分取判定が可能となる。
なお、図１２に示されるルールデータは、以下のとおりに定義を行うものであると言い換えることができる。
前記ルールデータは、分取判定される粒子が前記（ａ）～（ｃ）のいずれの粒子集団に増する場合においても、前記他の粒子の進路は、分取対象でない粒子の進路であると定義している。このように定義されたルールデータを用いることで、１回の分取処理において、２つ以上の粒子が回収されることを防ぐことができる。このような判定処理によっても、目的粒子の純度を高めることが可能である。
（３－３－３）目的細胞の収率を優先した分取判定処理の例
図１３に、目的細胞の収率を重視した分取判定において用いられるルールデータの例、及び、当該ルールデータを用いて分取判定を行った場合の分取判定結果の例を示す。当該ルールデータは、分取判定される粒子が分取対象粒子であれば、ガードタイム内に存在する他の粒子がいずれの粒子であっても分取判定される粒子を分取すると判定するためのルールデータである。
図１３の左上に、ルールデータが示されている。当該ルールデータは、分取判定される粒子が細胞集団１又は２に属する場合において、他の粒子がいずれの細胞集団に属していても、当該他の粒子の進路は、分取対象である粒子が進行する流路である（表中において下線付加された「１」で示されている）と定義している。また、分取判定される粒子が細胞集団０又は３に属する場合において、他の粒子がいずれの細胞集団に属していても、当該他の粒子の進路は、分取対象でない粒子が進行する流路である（表中において下線付加された「０」で示されている）と定義している。すなわち、このルールデータを用いると、分取判定される粒子が分取対象である粒子であれば、ガードタイム内に存在する他の粒子の種類に関係なく、分取判定される粒子を分取すると判定することになる。図１３の右上に示されている進路割当表は、図１０において説明したものと同じである。
図１３の下に、ケース１～９における分取判定結果が示されている。ケース１～９における分取判定処理を以下で説明する。
（ケース１～４について）
ケース１～４では、ルールデータを参照しないので、上記（３－３－１）において説明したものと同じ分取判定結果となる。
（ケース５～９について）
ケース５に関して、ステップＳ１０３において、判定部１０５は、分取判定される粒子の進路として、「１」を割り当て、すなわち、当該粒子の進路が微小粒子回収流路１５９であると特定する。
次に、ステップＳ１０５において、判定部１０５は、分取判定される粒子の後に存在する他の粒子が細胞集団０に属すると特定する。
次に、ステップＳ１０６において、判定部１０５は、ルールデータを参照し、当該分取判定される粒子と当該他の粒子との関係性を特定する。判定部１０５は、当該分取判定される粒子は細胞集団１に属し且つ当該他の粒子は細胞集団０に属するので、これら粒子の関係性として「１」（図１３では下線付加されている）を特定し、すなわち当該他の粒子の進路が、分取対象である粒子が進行する流路（微小粒子回収流路１５９）であると特定する。
次に、ステップＳ１０７において、判定部１０５は、ステップＳ１０３において特定された進路及びステップＳ１０６において特定された関係性に基づき、分取判定される粒子を分取するかを判定する。ステップＳ１０３において特定された進路は「１」であり且つステップＳ１０６において特定された関係性は「１」であり、全ての値が「１」である。全ての値が「１」であるため、判定部１０５は、分取判定される粒子を分取すると判定する。例えば、判定部１０５は、分取判定結果として、分取することを示す「１」（図１３では斜体で記載されている）を、当該分取判定される粒子に割り当てる。
次に、ステップＳ１０９において、判定部１０５は、ステップ１０７において得られた分取判定結果を、分取制御部１０６に送信する。
ケース６に関して、ステップＳ１０３において、判定部１０５は、分取判定される粒子の進路として、「１」を割り当て、すなわち、当該粒子の進路が微小粒子回収流路１５９であると特定する。
次に、ステップＳ１０５において、判定部１０５は、分取判定される粒子の前に存在する他の粒子が細胞集団０に属すると特定する。
次に、ステップＳ１０６において、判定部１０５は、ルールデータを参照し、当該分取判定される粒子と当該他の粒子との関係性を特定する。ケース５と同様に、これら粒子の関係性として「１」（図１３では下線付加されている）を特定し、すなわち当該他の粒子の進路は、分取対象である粒子が進行する流路（微小粒子回収流路１５９）であると特定する。
次に、ステップＳ１０７において、判定部１０５は、ステップＳ１０３において特定された進路及びステップＳ１０６において特定された関係性に基づき、分取判定される粒子を分取するかを判定する。具体的には、判定部１０５は、ケース５と同様に、分取判定される粒子を分取すると判定する。
次に、ステップＳ１０９において、判定部１０５は、ステップ１０７において得られた分取判定結果を、分取制御部１０６に送信する。
ケース７に関して、ステップＳ１０３において、判定部１０５は、分取判定される粒子の進路として、「１」を割り当て、すなわち、当該粒子の進路が微小粒子回収流路１５９であると特定する。
次に、ステップＳ１０５において、判定部１０５は、分取判定される粒子の後に存在する他の粒子が細胞集団２に属すると特定する。
次に、ステップＳ１０６において、判定部１０５は、ルールデータを参照し、当該分取判定される粒子と当該他の粒子との関係性を特定する。判定部１０５は、当該分取判定される粒子は細胞集団１に属し且つ当該他の粒子は細胞集団２に属するので、これら粒子の関係性として「１」（図１１では下線付加されている）を特定し、すなわち当該他の粒子の進路が、分取対象である粒子が進行する流路（微小粒子回収流路１５９）であると特定する。
次に、ステップＳ１０７において、判定部１０５は、ステップＳ１０３において特定された進路及びステップＳ１０６において特定された関係性に基づき、分取判定される粒子を分取するかを判定する。ステップＳ１０３において特定された進路が「１」であり且つステップＳ１０６において特定された関係性が「１」であり、全ての値が１である。全ての値が１であるため、判定部１０５は、分取判定される粒子を分取すると判定する。例えば、判定部１０５は、分取判定結果として、分取することを示す「１」（図１３では斜体で記載されている）を、当該分取判定される粒子に割り当てる。
次に、ステップＳ１０９において、判定部１０５は、ステップＳ１０７において得られた分取判定結果を、分取制御部１０６に送信する。
ケース８に関して、ステップＳ１０３において、判定部１０５は、分取判定される粒子の進路として、「１」を割り当て、すなわち、当該粒子の進路が微小粒子回収流路１５９であると特定する。
次に、ステップＳ１０５において、判定部１０５は、分取判定される粒子の前に存在する他の粒子が細胞集団３に属すると特定する。
次に、ステップＳ１０６において、判定部１０５は、ルールデータを参照し、当該分取判定される粒子と当該他の粒子との関係性を特定する。判定部１０５は、当該分取判定される粒子は細胞集団１に属し且つ当該他の粒子は細胞集団３に属するので、これら粒子の関係性として「１」（図１３では下線付加されている）を特定し、すなわち当該他の粒子の進路が、分取対象である粒子が進行する流路（微小粒子回収流路１５９）であると特定する。
次に、ステップＳ１０７において、判定部１０５は、ステップＳ１０３において特定された進路及びステップＳ１０６において特定された関係性に基づき、分取判定される粒子を分取するかを判定する。具体的には、ステップＳ１０３において特定された進路が「１」であり且つステップＳ１０６において特定された関係性が「１」であり、全ての値が「１」である。全ての値が「１」であるため、判定部１０５は、分取判定される粒子を分取すると判定する。例えば、判定部１０５は、分取判定結果として、分取することを示す「１」（図１３では斜体で記載されている）を、当該分取判定される粒子に割り当てる。
次に、ステップＳ１０９において、判定部１０５は、ステップＳ１０７において得られた分取判定結果を、分取制御部１０６に送信する。
ケース９に関して、ステップＳ１０３において、判定部１０５は、分取判定される粒子の進路として、「１」を割り当て、すなわち、当該粒子の進路が微小粒子回収流路１５９であると特定する。
次に、ステップＳ１０５において、判定部１０５は、分取判定される粒子の後に存在する他の粒子が細胞集団３に属すると特定し、且つ、分取判定される粒子の前に存在する他の粒子が細胞集団２に属すると特定する。
次に、ステップＳ１０６において、判定部１０５は、ルールデータを参照し、当該分取判定される粒子と当該２つの他の粒子それぞれとの関係性を特定する。判定部１０５は、当該分取判定される粒子は細胞集団１に属し且つ当該後に存在する他の粒子は細胞集団３に属するので、これら粒子の関係性として「１」（図１３では下線付加されている）を特定し、すなわち当該後に存在する他の粒子の進路が、分取対象である粒子が進行する流路（微小粒子回収流路１５９）であると特定する。また、判定部１０５は、当該分取判定される粒子は細胞集団１に属し且つ当該前に存在する他の粒子は細胞集団２に属するので、これら粒子の関係性として「１」（図１１では下線付加されている）を特定し、すなわち当該前に存在する他の粒子の進路が、分取対象である粒子が進行する流路（微小粒子回収流路１５９）であると特定する。
次に、ステップＳ１０７において、判定部１０５は、ステップＳ１０３において特定された進路及びステップＳ１０６において特定された関係性に基づき、分取判定される粒子を分取するかを判定する。具体的には、ステップＳ１０３において特定された進路が「１」であり且つステップＳ１０６において特定された当該分取判定される粒子と当該前又は後に存在する他の粒子との関係性が「１」である。そのため、全ての値が１であるので、判定部１０５は、分取判定される粒子を分取すると判定する。例えば、判定部１０５は、分取判定結果として、分取することを示す「１」（図１３では斜体で記載されている）を、当該分取判定される粒子に割り当てる。
次に、ステップＳ１０９において、判定部１０５は、ステップＳ１０７において得られた分取判定結果を、分取制御部１０６に送信する。
以上のとおり、図１３に示されるルールデータによって、目的細胞の収率を重視した分取判定が可能となる。
なお、図１３に示されるルールデータは、以下のとおりに定義を行うものであると言い換えることができる。
前記ルールデータは、分取判定される粒子が前記（ａ）の分取対象である粒子の粒子集団（本例では細胞集団１又は２）に属する場合は、前記粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が前記（ａ）～（ｃ）のいずれの粒子集団に属する場合であっても、前記他の粒子の進路は、分取対象である粒子の進路（本例では関係性１）であると定義している。
前記ルールデータは、分取判定される粒子が前記（ｂ）の無視可能な粒子の粒子集団（本例では細胞集団３）に属する場合には、前記粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が前記（ａ）～（ｃ）のいずれの粒子集団に属するとしても、前記他の粒子の進路は、分取対象でない粒子の進路（本例では関係性０）であると定義している。
また、前記ルールデータは、分取判定される粒子が前記（ｃ）のいずれでもない粒子の粒子集団（本例では細胞集団０）に属する場合にも、前記粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が前記（ａ）～（ｃ）のいずれの粒子集団に属するとしても、前記他の粒子の進路は、分取対象でない粒子の進路（本例では関係性０）であると定義している。
このように定義されたルールデータによって、目的粒子の収率を高めることができる。
（３－３－４）目的細胞の純度を重視し且つ回収率を高めるための分取判定処理の例
図１４に、目的細胞の純度を重視し且つ回収率を高めるための分取判定処理において用いられるルールデータの例、及び、当該ルールデータを用いて分取判定を行った場合の分取判定結果の例を示す。当該ルールデータは、ガードタイム内の他の粒子が無視可能な粒子である場合は、分取判定において当該他の粒子を無視するように、分取判定される粒子を分取するためのルールデータである。
図１４の左上に、ルールデータが示されている。当該ルールデータは、分取判定される粒子が細胞集団１又は２に属し且つ分取判定される粒子周囲の他の粒子も細胞集団１、２、又は３に属する場合に、当該他の粒子の進路が、分取対象である粒子が進行する流路である（ルールデータ表中において下線付加された数字１で示されている）と定義している。また、当該ルールデータは、その他の場合には、当該他の粒子の進路が、分取対象でない粒子が進行する流路である（表中において下線付加された数字０で示されている）と定義している。図１１に記載のルールデータと図１４に記載のルールデータとの相違点は、分取判定される粒子が細胞集団１又は２に属し且つ他の粒子が細胞集団３に属する場合である。
図１４の右上に示されている進路割当表は、図１０に記載されたものと同じである。
図１４の下に、ケース１～９における分取判定結果が示されている。ケース１～９における分取判定処理を以下で説明する。
（ケース１～４について）
ケース１～４では、ルールデータを参照しないので、上記（３－３－１）において説明したものと同じ分取判定結果となる。
（ケース５～９について）
ケース５～７では、ルールデータを参照するが、ステップＳ１０６において特定される関係性は、上記（３－３－１）において説明したものと同じである。そのため、上記（３－３－１）において説明したものと同じ分取判定結果となる。
以下で、上記（３－３－１）と異なる分取判定結果となるケース８及び９について説明する。
ケース８に関して、ステップＳ１０３において、判定部１０５は、分取判定される粒子の進路として、「１」を割り当て、すなわち、当該粒子の進路が微小粒子回収流路１５９であると特定する。
次に、ステップＳ１０５において、判定部１０５は、分取判定される粒子の前に存在する他の粒子が細胞集団３に属すると特定する。
次に、ステップＳ１０６において、判定部１０５は、ルールデータを参照し、当該分取判定される粒子と当該他の粒子との関係性を特定する。判定部１０５は、当該分取判定される粒子は細胞集団１に属し且つ当該他の粒子は細胞集団３に属するので、これら粒子の関係性として「１」（図１４では下線付加されている）を特定し、すなわち当該他の粒子の進路が、分取対象である粒子が進行する流路（微小粒子回収流路１５９）であると特定する。
次に、ステップＳ１０７において、判定部１０５は、ステップＳ１０３において特定された進路及びステップＳ１０６において特定された関係性に基づき、分取判定される粒子を分取するかを判定する。具体的には、ステップＳ１０３において特定された進路が「１」であり且つステップＳ１０６において特定された関係性が「１」であり、全ての値が「１」である。全ての値が「１」であるため、判定部１０５は、分取判定される粒子を分取すると判定する。例えば、判定部１０５は、分取判定結果として、分取することを示す「１」（図１４では斜体で記載されている）を、当該分取判定される粒子に割り当てる。
次に、ステップＳ１０９において、判定部１０５は、ステップＳ１０７において得られた分取判定結果を、分取制御部１０６に送信する。
ケース９に関して、ステップＳ１０３において、判定部１０５は、分取判定される粒子の進路として、「１」を割り当て、すなわち、当該粒子の進路が微小粒子回収流路１５９であると特定する。
次に、ステップＳ１０５において、判定部１０５は、分取判定される粒子の後に存在する他の粒子が細胞集団３に属すると特定し、且つ、分取判定される粒子の前に存在する他の粒子が細胞集団２に属すると特定する。
次に、ステップＳ１０６において、判定部１０５は、ルールデータを参照し、当該分取判定される粒子と当該２つの他の粒子それぞれとの関係性を特定する。判定部１０５は、当該分取判定される粒子は細胞集団１に属し且つ当該後に存在する他の粒子は細胞集団３に属するので、これら粒子の関係性として「１」（図１４では下線付加されている）を特定し、すなわち当該後に存在する他の粒子の進路が、分取対象である粒子が進行する流路（微小粒子回収流路１５９）であると特定する。また、判定部１０５は、当該分取判定される粒子は細胞集団１に属し且つ当該前に存在する他の粒子は細胞集団２に属するので、これら粒子の関係性として「１」（図１４では下線付加されている）を特定し、すなわち当該前に存在する他の粒子の進路が、分取対象である粒子が進行する流路（微小粒子回収流路１５９）であると特定する。
次に、ステップＳ１０７において、判定部１０５は、ステップＳ１０３において特定された進路及びステップＳ１０６において特定された関係性に基づき、分取判定される粒子を分取するかを判定する。具体的には、ステップＳ１０３において特定された進路が「１」であり、且つ、ステップＳ１０６において特定された当該分取判定される粒子と当該前又は後に存在する他の粒子との関係性が「１」である。そのため、全ての値が１であるので、判定部１０５は、分取判定される粒子を分取すると判定する。例えば、判定部１０５は、分取判定結果として、分取することを示す「１」（図１４では斜体で記載されている）を、当該分取判定される粒子に割り当てる。
次に、ステップＳ１０９において、判定部１０５は、ステップＳ１０７において得られた分取判定結果を、分取制御部１０６に送信する。
以上のとおり、図１４に示されるルールデータによって、目的細胞の純度を極力維持しつつ回収率を向上させることができる。
なお、図１４に示されるルールデータは、図１０に記載のルールデータと同じである。そのため、図１４に示されるルールデータは、上記（３－２）におけるステップＳ１０６に関して述べたとおりに定義を行うものであると言い換えることができる。
（３－３－５）実施例
上記（３－３－１）では、ケース１～９について説明した。上記で述べたゲーティングによって考えられる前記所定範囲内の粒子の存在パターンは、ケース１～９も含め、合計で２９２パターンある。そこで、これら２９２パターンの全てについて、上記（３－３－１）において説明した分取判定処理によって適切に分取判定を行うことができるかを、Microsoft社のExcelを用いて検証した。その結果、いずれのパターンについても、当該分取判定処理を行うことによって、適切に分取判定できることが確認された。
また、上記（３－３－２）～（３－３－４）において説明した分取判定処理のいずれによっても、同様の検証を行った。その結果、いずれの分取判定処理によっても、２９２パターンの全てについて適切に分取判定できることが確認された。
（４）フローサイトメータとして構成された微小粒子分取装置の例
本技術に従う微小粒子分取装置は、微小粒子を含む液滴を形成し、当該液滴の進行方向を制御することによって微小粒子の分取を行う装置として構成されてよく、例えばフローサイトメトリーを行う微小粒子分取装置として構成されてよい。図１５に、本技術に従う微小粒子分取装置の構成例を示す。
図１５に示される微小粒子分取装置２００は、制御部１、光照射部２、分析対象となる粒子が流れる流路が設けられたチップＴ、検出部３、出力部４、入力部５、及び分取部６を含む。微小粒子分取装置２００は、フローサイトメトリーを行う系として構成されている。
（４－１）光照射部
光照射部２は、チップＴの流路の所定の位置に光の照射を行うように構成されている。流路内の光照射位置を粒子が通過することで、粒子に光が照射され、その結果蛍光及び／又は散乱光が生じる。
光照射部２は、光を出射する少なくとも一つの光源、好ましくは互いに異なる波長の光を出射する複数の光源を含む。前記光源はレーザ光源であってよいが、他の光源であってもよく、例えばＬＥＤなどであってもよい。
前記光源は、単一波長のレーザ光を出射するレーザ光源であってよく、例えば発振波長が固定されたレーザ光源であってよく又は発振波長が可変のレーザ光源であってもよい。これらレーザ光源の波長は発振波長を意味する。これらレーザ光源により出射されたレーザ光は、その発振波長のままで、粒子に照射されてよい。
前記光源がレーザ光源である場合、前記光源は、半導体レーザ、アルゴンイオン（Ar）レーザ、ヘリウム－ネオン（He-Ne）レーザ、ダイ（dye）レーザ、クリプトン（Cr）レーザ、及び、半導体レーザと波長変換光学素子を組み合わせた固体レーザからなる群から選ばれるいずれかであってよく、特に好ましくは半導体レーザである。
光照射部２が複数の光源を含む場合、光照射部２は、これら光源から出射された光が合波され、そして、合波された光が粒子に照射されるように構成されうる。光が照射される位置は、１つ以上であてよく、すなわち、光照射部２は、複数の励起光が合波されて１つ以上（例えば１つ、２つ、３つ、４つ、又は５つ）のスポットに照射されるように構成されてよく、当該スポットを粒子が通過するように、微小粒子分取装置２００は構成されうる。
光照射部２をこのように構成するために、光照射部２はこれら複数の光を所定の位置に導くための導光光学系を含みうる。当該導光光学系は、例えば、複数の光を合波するために、例えばビームスプリッター群及びミラー群などの光学部品を含んでよい。また、前記導光光学系は、合波された励起光を集光するためのレンズ群を含んでよく、例えば対物レンズを含んでよい。
（４－２）チップ
チップＴは、例えばフローセルとして構成されうる。チップＴには流路が設けられている。チップＴに設けられている流路構造は、例えば、粒子が略一列に並んで流れる流れ（特には層流）を形成するように構成されている。
図１５に示されるチップＴには、流路Ｐ１１、Ｐ１２ａ、Ｐ１２ｂ、及びＰ１３が設けられている。粒子を含むサンプル液が収容されている容器（バッグ）Ｂ１から、当該サンプル液がサンプル液流路Ｐ１１に導入される。当該サンプル液は、サンプル液流路Ｐ１１を主流路Ｐ１３に向かって流れる。シース液を含む容器（バッグ）Ｂ２から、シース液がチップＴに導入される。シース液は、２本のシース液流路Ｐ１２ａ及びＰ１２ｂを、主流路Ｐ１３に向かって流れる。サンプル液流路Ｐ１１とシース液流路Ｐ１２ａ及びＰ１２ｂは合流して主流路Ｐ１３を形成するように構成されている。サンプル液流路Ｐ１１内を送液されるサンプル液と、シース液流路Ｐ１２ａ及びＰ１２ｂ内を送液されるシース液とが、前記３つの流路が合流する地点にて合流し、そして、主流路Ｐ１３内を流れる。主流路Ｐ１３内には、例えばサンプル液がシース液に挟み込まれた層流が流れる。当該層流中には、粒子が略一列に並んでいる。主流路Ｐ１３内を並んで流れる粒子に、光照射部２によって生成された光（特にはレーザ光）が照射され、これにより生じた光が、検出部３によって検出される。
チップＴは、２次元又は３次元の流路構造を有するものであってよい。チップＴは、プラスチック材料又はガラス材料から形成された基板形状を有しうる。チップＴ及びチップＴに設けられる流路構造は、図１５に示されるものに限定されず、例えばフローサイトメータに関する技術分野において既知のチップ及び流路構造が採用されてもよい。すなわち、本技術において、蛍光検出は、例えばフローサイトメータによる蛍光検出であってよい。
チップＴに設けられる流路の横断面の形状は例えば円形、楕円形、又は矩形（正方形又は長方形）などであってよい。流路の横断面が円形又は楕円形である場合、その直径又は長径は、例えば１ｍｍ以下であってよく、特には１０μｍ以上１ｍｍ以下であってよい。流路の横断面が正方形又は長方形である場合、その一辺又は長辺の長さは、例えば１ｍｍ以下であってよく、特には１０μｍ以上１ｍｍ以下であってよい。
チップＴには、前記層流が吐出される吐出口が備えられている。チップＴを振動させることによって、当該層流から液滴が形成される。形成された各液滴は、１つ又は複数の粒子を含みうる。各液滴を荷電し、荷電された液滴の進行方向を制御することによって、粒子を分取することができる。
（４－３）分取部
分取部６は、上記で述べたとおり、荷電された粒子含有液滴を形成し、当該液滴の進行方向を制御して分取することができるように構成されうる。例えば、分取部６は、当該液滴の形成のためにチップＴを振動させる振動素子、液滴を荷電する荷電部、及び荷電された液滴の進行方向を制御する偏向板を含みうる。分取部６は、例えば後述の分取制御部によって制御されて、分取処理を実行しうる。
前記振動素子は、チップＴを振動させることによって、前記吐出口から吐出された前記層流を液滴化させる。前記振動素子は例えばピエゾ素子であってよい。前記振動素子は、チップＴと一体的に構成されたものであってもよく、又は、一体的に構成されたものでなくてもよい。一体的に構成されたものでない場合、前記振動素子は、チップＴと接触可能であるように配置されうる。
前記荷電部は、前記吐出口から吐出される液滴に、正又は負の電荷を付与する。前記荷電部は、例えば、流路を送液されるサンプル液又はシース液に電気的に接触するように挿入されている電極によって液滴に電荷を付与する。
微小粒子分取装置２００は、前記振動素子の駆動電圧の周波数と、前記荷電部の電圧（チャージ電圧）の切り換えタイミングと、を同期させることにより、前記吐出口から吐出される液滴の一部にプラス又はマイナスのいずれかの電荷を付与しうる。一部の液滴には、電荷を付与されず、チャージなしとされていてもよい。
前記偏向板は、液滴の進行方向を制御するように構成されうる。例えば、前記偏向板は、前記液滴の進路を挟んで対向するように配置された一対の偏向板であってよい。当該偏向板は、液滴に付与された電荷との間に作用する電気的な力によって、各液滴の進行方向を変化させうる。当該偏向板は、当技術分野において通常使用される電極であってよい。
微小粒子分取装置２００は、液滴を回収する複数の回収容器を交換可能に取り付けられるように構成されていてよい。当該複数の回収容器は、分取対象である粒子を回収する１つ又は複数の回収容器と、分取対象でない粒子を回収する１つ又は２以上の容器とを含みうる。前記複数の回収容器として、当技術分野において既知の容器が採用されてよい。
（４－４）検出部
検出部３は、光照射部２による粒子への光照射により生じた光を検出する。例えば、検出部３は、チップＴの流路内を流れる粒子への光照射により生じた光を検出するように構成されていてよい。検出部３が検出する光は、例えば蛍光及び／又は散乱光を含む光であってよい。前記散乱光は、例えば前方散乱光、後方散乱光、及び側方散乱光のいずれか１つ以上であってよい。
検出部３は、光照射部２による粒子への光照射により生じた光を検出する少なくとも一つの光検出器を備えている。各光検出器は、１以上の受光素子を含み、例えば受光素子アレイを有する。各光検出器は、例えば受光素子として、１又は複数のＰＭＴ（光電子増倍管）及び／又はフォトダイオードを含んでよく、特には１又は複数のＰＭＴを含む。当該光検出器は、例えば複数のＰＭＴを一次元方向に配列したＰＭＴアレイを含みうる。
検出部３は、光を分光する分光部を含みうる。当該分光部は、各光検出器に備えられていてよい。当該分光部は、例えば、光（例えば蛍光）を分光して、所定の検出波長が割り当てられた受光素子（例えばＰＭＴ）に、当該所定の検出波長の光を到達させるように構成されうる。
検出部３は、蛍光測定器、散乱光測定器、透過光測定器、反射光測定器、回折光測定器、紫外分光測定器、赤外分光測定器、ラマン分光測定器、ＦＲＥＴ測定器、及びＦＩＳＨ測定器から選ばれる１つ以上の測定器を含みうる。また、検出部３は、例えばＣＣＤ又はＣＭＯＳなどの２次元受光素子を含んでもよい。
検出部３は、信号処理部を含みうる。当該信号処理部が、前記蛍光検出器により得られた電気信号をデジタル信号に変換する。当該信号処理部は、当該変換を行う装置として例えばＡ／Ｄ変換器を含んでよい。光検出器により検出された光信号は、当該信号処理部によりデジタル信号に変換され、そして、制御部１に送信されうる。前記デジタル信号が、制御部１により光データとして取り扱われ、後述の分取判定処理において用いられる。
検出部３（特に光検出器）は、粒子から生成された光を検出可能な位置に配置される。例えば、図１５に示されるように、検出部３は、チップＴ（特には主流路Ｐ１３）を光照射部２と検出部３とで挟むように配置されてよく、又は、検出部３は、チップＴに対して、光照射部２と同じ側に配置されてもよい。
（４－５）制御部
制御部１は、図１５に示されるとおり、例えば判定部２０１及び分取制御部２０２を含む。
判定部２０１は、光照射部による粒子への光照射により得られた光の特徴に基づき、粒子が回収対象粒子であるかを判定する。例えば、判定部２０１は、散乱光に基づく判定、蛍光に基づく判定、又は、画像（例えば暗視野画像若しくは／且つ明視野画像など）に基づく判定を行いうる。上記（２）における判定部１０５に関する説明が、判定部２０１にも当てはまる。
分取制御部２０２は、判定部２０１により得られた判定結果に基づき分取部６を制御して、粒子の分取を実行させる。
制御部１の構成例を以下で説明する。制御部１により行われる分取判定及び分取制御は例えば以下の構成により実現されうるが、制御部１の構成は以下に限定されない。
制御部１は、例えばＣＰＵ（Central Processing Unit）、ＲＡＭ、及びＲＯＭを備えていてよい。ＣＰＵ、ＲＡＭ、及びＲＯＭは、バスを介して相互に接続されていてよい。バスには、さらに入出力インタフェースが接続されていてよい。バスには、当該入出力インタフェースを介して、出力部４及び入力部５が接続されうる。
前記入出力インタフェースにはさらに、例えば通信装置、記憶装置、及びドライブが接続されていてよい。
前記通信装置は、制御部１をネットワークに有線又は無線で接続する。前記通信装置によって、制御部１は、ネットワークを介して各種データ（例えば光データ及び／又はＳＲデータなど）を取得することができる。取得したデータは、例えば記憶部（図示せず）に格納されうる。前記通信装置の種類は当業者により適宜選択されてよい。
前記記憶装置には、オペレーティング・システム（例えば、ＷＩＮＤＯＷＳ（登録商標）、ＵＮＩＸ（登録商標）、又はＬＩＮＵＸ（登録商標）など）、本技術に従う情報処理方法を情報処理装置（又は粒子分析装置若しくは粒子分析システム）に実行させるためのプログラム及び他の種々のプログラム、並びに、光データ、ＳＲデータ、及び他の種々のデータが格納されうる。
前記ドライブは、記録媒体に記録されているデータ（例えば光データ及びＳＲデータなど）又はプログラムを読み出して、ＲＡＭに出力することができる。記録媒体は、例えば、ｍｉｃｒｏＳＤメモリカード、ＳＤメモリカード、又はフラッシュメモリであるが、これらに限定されない。
（４－６）出力部及び入力部
出力部４は、各種データを出力する出力装置を含みうる。例えば分取判定の結果を出力する装置を含む。当該出力装置は、例えば表示装置（ディスプレイ）を含みうる。また、出力部４は例えば印刷装置を含みうる。前記印刷装置は、分取判定の結果を、例えば紙などの印刷媒体に印刷して出力しうる。
入力部５は、例えばユーザによる操作を受け付ける装置である。入力部５は、例えばマウス、キーボード、又はディスプレイ（この場合ユーザ操作はディスプレイへのタッチ操作であってよい）を含みうる。入力部５は、例えば、ユーザによるゲーティング操作を受け付ける。また、入力部５は、各ゲートが前記（ａ）、（ｂ）、又は（ｃ）の粒子集団のいずれであるかを特定するユーザ操作を受け付ける。
（５）判定処理の詳細
（５－１）判定処理の基本概念
本技術を上記（４）で説明した微小粒子分取装置に適用した場合における判定処理の例を、以下で説明する。
以下で、図１６を参照しながらゲーティングの例を説明する。当該例は、血液サンプルから、キラーＴ細胞及びヘルパーＴ細胞を１つの細胞集団として回収し、且つ、顆粒球及び単球を１つの細胞集団として回収するためのゲーティングの例である。
上記（３）において述べた血液サンプルを、上記（５）で説明した微小粒子分取装置２００のチップＴ中に流し、光照射部２及び検出部３によって、当該血液サンプル中の各粒子への光照射により生じた光が検出される。
検出された光に関するデータを用いて、例えば図１６Ａに示されるように、前方散乱光（ＦＳＣ）及び側方散乱光（ＳＳＣ）の二次元プロット（ドットプロット）が生成される。生成された二次元プロットに対して、ゲートＲ１、Ｒ５、及びＲ６を設定する。ゲートＲ１は、リンパ球に対するゲートであり、ゲートＲ５は、赤血球に対するゲートであり、ゲートＲ６は、顆粒球及び単球に対するゲートである。ゲートＲ５には、赤血球だけでなく、例えば細胞デブリ又は泡などが含まれてもよい。
ゲートＲ１を、ＣＤ３に基づくヒストグラムへと展開すると、例えば図１６Ｂに示されるとおりのヒストグラムが得られる。当該ヒストグラムに対して、ゲートＲ２を設定する。ゲートＲ２は、ＣＤ３陽性の細胞、すなわちＴ細胞に対するゲートである。
ゲートＲ２を、ＣＤ４及びＣＤ８に基づく二次元プロットへと展開すると、例えば図１６Ｃに示されるとおりの二次元プロットが得られる。当該二次元プロットに対して、ゲートＲ３及びゲートＲ４を設定する。ゲートＲ３は、ＣＤ８陽性且つＣＤ４陰性の細胞、すなわちキラーＴ細胞に対するゲートである。ゲートＲ４は、ＣＤ８陰性且つＣＤ４陽性の細胞、すなわちヘルパーＴ細胞に対するゲートである。
以上のゲーティングによって、前記血液サンプルに含まれる細胞群は、以下のとおりの細胞集団に分けられる。
細胞集団０：以下の細胞集団１～４以外の細胞
細胞集団１：ゲートＲ１、Ｒ２、及びＲ３に属する細胞（キラーＴ細胞）
細胞集団２：ゲートＲ１、Ｒ２、及びＲ４に属する細胞（ヘルパーＴ細胞）
細胞集団３：ゲートＲ５に属する細胞（赤血球）
細胞集団４：ゲートＲ６に属する細胞（顆粒球及び単球）
以上のとおりのゲーティングによって、細胞集団１及び細胞集団２を１つの回収容器に分取し且つ細胞集団４をもう１つの回収容器に分取することで、キラーＴ細胞及びヘルパーＴ細胞を高い含有割合で含む細胞集団と顆粒球及び単球を高い含有割合で含む細胞集団が得られる。
また、同図に示されるとおり、細胞集団１及び細胞集団２が回収される容器へと進行する液滴の進路はストリーム０と設定され、細胞集団４が回収される容器へと進行する液滴の進路はストリーム１と設定され、細胞集団０及び３が回収される容器へと進行する液滴の進路はストリーム２と設定されている。このように、本例では、粒子を分取するかの判定に加え、粒子の進路も判定される。すなわち、本例では、回収対象である２種以上の粒子が、2つ以上の容器へと選択的に回収される。
以下では、血液サンプルから細胞集団１及び２のいずれかに属する細胞を分取し且つ細胞集団４に属する細胞を分取する場合について説明する。
図１７は、分取判定される細胞とその細胞周囲の所定範囲内の細胞（特にはその細胞の前又は後を流れる細胞）の有無に応じた分取判定パターンの例を示す図である。
図１７の左にある「粒子の存在パターン例」に、ケース１～９が示されている。同図中に矢印で示された「対象液滴の分取判定において考慮される範囲」が、前記所定範囲に相当する。
これらケースにおいて示される、「現在の液滴」が、分取判定される粒子を含む液滴であり、「前の液滴」が、当該現在の液滴よりも１つ先に形成された液滴であり、「後の液滴」が、当該現在の液滴よりも１つ後に形成された液滴である。
これら液滴中に存在する粒子が、丸囲みの数字で示されている。この数字は、上記で述べた細胞集団に付された番号にそれぞれ対応する。当該現在の液滴の中心に存在する液滴が、分取判定される粒子である。
また、図１７において、「対象液滴の分取判定において考慮される範囲」を規定する点線は、前の液滴及び後の液滴にかかっている。この点線により規定される範囲内に存在する、分取判定される粒子以外の粒子が、分取判定される粒子を分取するかの判定において考慮される。なお、この点線が前の液滴及び後の液滴にも点線がかかっているのは、上記微小粒子分取装置において、通常は、粒子への光照射により生じた光の検出は、液滴を形成する前に行われ、前の液滴又は後の液滴に含まれるべき粒子が、分取判定される液滴に含まれる可能性があること、及び、前の液滴又は後の液滴が、現在の液滴と一緒に分取される可能性があることを考慮したためである。
なお、前記所定範囲は、上記（３）において述べたガードタイムと同様に、当業者により適宜設定されてよい。例えば、純度が重視される分取判定処理において、前記所定範囲を液滴の進行方向に沿って広げることで、目的細胞の回収率はやや下がるが、分取判定の精度を高めることができる。反対に、前記所定範囲を狭めることで、精度はやや低くなるが、回収率を高めることができる。また、回収率を重視した分取判定処理において、前記所定範囲を液滴の進行方向に沿って広げることで、目的細胞の回収率を挙げることができる。反対に、前記所定範囲を狭めることで、目的細胞の回収率はやや低くなるが、純度を高めることができる。
図１７の判定パターン１は、分取判定される粒子が目的細胞であったとしても、当該細胞周囲の所定範囲内に他の細胞が存在する場合には、当該目的細胞は分取しないと判定される場合を説明する。すなわち、判定パターン１は、目的細胞をより高い純度で回収するための判定パターンである。図１７のうち、判定パターン２は、判定パターン１における目的細胞の純度を極力維持しつつ、目的細胞の回収率が向上された判定パターンである。以下で、これら判定パターンの詳細について、判定パターン１を最初に説明し、次に判定パターン２を説明する。
判定パターン１において、ケース１～９は以下のとおりに判定される。
ケース１では、分取判定される粒子は細胞集団０に属し且つ前記所定範囲内に他の細胞が存在しないので、判定部２０１は、当該粒子を分取しないと判定し、且つ、当該粒子の進路が進路２であると判定する。
ケース２では、分取判定される粒子は細胞集団１に属し（すなわちキラーＴ細胞であり）且つ前記所定範囲内に他の細胞が存在しない。そのため、判定部２０１は、当該粒子を分取すると判定し、且つ、当該粒子の進路が進路０であると判定する。
すると判定する。
ケース３では、分取判定される粒子は細胞集団４に属し（すなわち顆粒球又は単球であり）且つ前記所定範囲内に他の細胞が存在しない。そのため、判定部２０１は、当該粒子を分取すると判定し、且つ、当該粒子の進路が進路１であると判定する。
すると判定する。
ケース４では、分取判定される粒子は細胞集団３に属し（すなわち赤血球であり）且つガードタイム内に他の細胞が存在しないので、判定部２０１は、当該粒子を分取しないと判定し、且つ、当該粒子の進路が進路２であると判定する。
ケース５では、分取判定される粒子は細胞集団１に属するが、前記所定範囲内に（分取判定される粒子の後に）細胞集団０に属する粒子が存在する。分取判定される粒子は目的細胞であるが、当該粒子を回収するために現在の液滴を回収すると、後の液滴に含まれる細胞集団０に属する粒子も一緒に回収される可能性がある。細胞集団０に属する粒子が目的細胞と一緒に回収されると、目的細胞の純度の低下をもたらす。そのため、ケース５では、判定部２０１は、分取判定される粒子を分取しないと判定し、且つ、当該粒子の進路が進路２であると判定する。
ケース６では、分取判定される粒子は細胞集団１に属するが、前記所定範囲内に（分取判定される粒子の前に）細胞集団４に属する細胞が存在する。分取判定される粒子は目的細胞であるが、当該粒子を回収するために現在の液滴の分取を行うと、現在の液滴に含まれる細胞集団４に属する粒子も一緒に回収される。そのため、ケース６では、判定部２０１は、分取判定される細胞を分取しないと判定し、且つ、当該粒子の進路が進路２であると判定する。
ケース７では、分取判定される粒子は細胞集団１に属し且つ前記所定範囲内に細胞集団２に属する粒子が存在する。分取判定される細胞は目的細胞であり、当該細胞を回収すると細胞集団２に属する細胞も一緒に回収される。細胞集団２に属する細胞は目的細胞であるので、分取判定される粒子と一緒に回収されることが望ましい。そのため、ケース７では、判定部２０１は、分取判定される粒子を分取すると判定し、且つ、当該粒子の進路が進路０であると判定する。
ケース８では、分取判定される粒子は細胞集団１に属する。ケース８では、さらに、前記所定範囲内のうち、分取判定される粒子の前に細胞集団３に属する粒子（特には赤血球）が存在し、分取判定される粒子の後に細胞集団２に属する粒子が存在する。分取判定される粒子は目的細胞であるが、当該粒子を含む液滴を回収すると、細胞集団３に属する粒子も一緒に回収される可能性がある。細胞集団３に属する細胞は目的細胞でないので、当該細胞が回収されると、目的細胞の純度が下がる。そのため、ケース８では、判定部２０１は、分取判定される粒子を分取しないと判定し、且つ、当該粒子の進路を進路２であると判定する。
ケース９では、分取判定される粒子は細胞集団２に属し且つ前記所定範囲内の分取判定される粒子の後に、細胞集団３に属する粒子が存在する。分取判定される粒子は目的細胞であるが、当該細胞を含む現在の液滴を回収すると細胞集団３に属する粒子も一緒に回収される可能性がある。細胞集団３に属する粒子は目的細胞でないので、当該細胞が分取判定される粒子と一緒に回収されると、目的細胞の純度が下がる。そのため、ケース９では、判定部１０５は、分取判定される粒子を分取しないと判定し、且つ、当該粒子の進路を進路２であると判定する。
以上のとおり、判定パターン１では、目的細胞の純度を高めるために、ケース８及び９において、判定部２０１は、分取判定される粒子を分取しないと判定する。しかしながら、上記（３）で述べた通り、例えば細胞集団３に属する細胞が分取操作後の処理において影響を及ぼさない場合など、細胞集団３に属する粒子が目的細胞と一緒に回収されることが許容される場合には、目的細胞の回収率を高めるために、ケース８及び９においても、分取すると判定されることが好ましい。
回収率を高めるための判定パターンを、判定パターン２を参照しながら説明する。
図１７において、ケース１～７では、図１７に関して説明したとおりに、判定部２０１は分取判定を行う。
ケース８では、分取判定される粒子は細胞集団１に属し且つ前記所定範囲内のうち分取判定される粒子の前に細胞集団３に属する粒子が存在し、分取判定される粒子の後に細胞集団２に属する粒子が存在する。分取判定される粒子は目的細胞であり、当該細胞を回収すると、細胞集団３に属する粒子も一緒に回収される。細胞集団３に属する粒子は目的細胞でないが、目的細胞と一緒に回収されることが許容される。そのため、ケース８では、判定部２０１は、分取判定される粒子を分取すると判定し、且つ、分取判定される粒子の進路を進路０であると判定する。
ケース９では、分取判定される粒子は細胞集団２に属し且つ前記所定範囲内の分取判定される粒子の後に、細胞集団３に属する粒子が存在する。分取判定される粒子は目的細胞であるが、当該細胞を含む現在の液滴を回収すると細胞集団３に属する粒子も一緒に回収される可能性がある。細胞集団３に属する粒子は目的細胞でないが、目的細胞と一緒に回収することが許容される。そのため、ケース９では、判定部２０１は、分取判定される粒子を分取すると判定し、且つ、分取判定される粒子の進路を進路０であると判定する。
以上で説明した判定パターン１及び判定パターン２は、分取判定される粒子が属する粒子集団と、前記粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が属する粒子集団と、に応じて、これら粒子の関係性が定義されているルールデータを用いて実現することができる。より具体的には、本技術に従い、判定部２０１は、分取判定される粒子が属する粒子集団と、前記粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が属する粒子集団と、に応じて、これら粒子の関係性が定義されているルールデータを用いて前記判定を行う。前記分取判定される粒子及び前記所定範囲内の粒子が属しうる粒子集団は、以下の（ａ）～（ｃ）の粒子集団を含みうる。
（ａ）分取対象である粒子の粒子集団、
（ｂ）分取対象でないが前記判定において無視可能な粒子の粒子集団、及び
（ｃ）前記分取対象である粒子及び前記無視可能な粒子のいずれでもない粒子の粒子集団。
ここで、前記関係性は、より具体的には、分取判定において考慮される粒子のうちの或る粒子が、他の粒子との関係において無視可能であるかという関係性であってよい。
上記で述べた細胞集団１及び２を前記（ａ）の粒子集団として設定し、細胞集団３を前記（ｂ）の粒子集団として設定し、且つ、細胞集団０を前記（ｃ）の粒子集団として設定することで、上記図１７で説明した判定パターン１及び２の両方が可能となる。
さらに、前記（ａ）～（ｃ）の粒子集団が設定されているルールデータを用いることによって、複数種類の目的粒子を、互いに異なる複数の進路へ割り当てるように判定することもできる。これにより、１回の分取操作で、複数種類の目的粒子を、指定された複数の回収容器へと選択的に回収することもできる。
このような複数の進路への割り当てのために、好ましくは、前記ルールデータに加えて、各粒子に割り当てられた進路の一致を判定するためのルールデータが用いられる。
（５－２）判定処理のフロー例
以下で、前記ルールデータを用いる分取判定処理の具体例を、図１８及び１９を参照しながら説明する。図１８のＡは、当該処理における粒子集団への進路の割り当てに関する進路割当表を示す。図１８のＢは、或る粒子が、他の粒子との観点から分取判定において無視可能であるかを定義するルールデータである。図１８のＣは、２つの粒子に割り当てられた進路の関係性に基づき分取判定される粒子の進路を定義するルールデータである。図１９は、分取判定処理のフロー図の一例である。図１９において、当該フロー図に加えて、上記で述べたケース８における分取判定処理を説明するための図が示されている。
図１９に示されるステップＳ２０１において、判定部２０１は、分取判定される粒子への光照射により生じた光の特徴に関する情報を取得する。当該光の特徴に関する情報は、例えば、上記で述べたとおりに検出部により検出された光に基づくものであってよい。
ステップＳ２０２において、判定部２０１は、流路内を流れる粒子への光照射によって生じた光に基づき、粒子がどの粒子集団に属するかを決定する。特には、判定部２０１は、ステップＳ２０１において取得した前記光の特徴に関する情報に基づき、分取判定される粒子が属する粒子集団を決定する。具体的には、判定部２０１は、当該情報に基づき、当該粒子が、細胞集団０、１、２、３、及び４のうちのいずれに属するかを決定する。
例えばケース８に関しては、図１９に示されるとおり、判定部２０１は、分取判定される粒子が細胞集団１に属すると決定する。
ステップＳ２０３において、判定部２０１は、ステップＳ２０２において決定された粒子集団に基づき、分取判定される粒子の進路を特定する。判定部２０１は、当該特定のために、例えば、粒子集団と粒子集団に属する粒子が進行すべき進路とが関連付けられている進路割当用データを参照しうる。例えば、当該進路割当用データは、粒子集団の種類に応じて、当該粒子集団に属する粒子が進行すべき進路が、分取対象である粒子が進行する進路であるか又は分取対象でない粒子が進行する進路であるかを定義するデータでありうる。当該進路割当用データは、例えば図１８に示されるような進路割当表であってよい。
ステップＳ２０３において、具体的には、当該粒子が細胞集団１又は２に属する場合は、当該粒子の進路を、図１８に示されるとおり、進路「０」であると特定する。当該粒子が細胞集団０又は３に属する場合、当該粒子の進路を進路「２」であると特定する。当該粒子が細胞集団４に属する場合、当該粒子の進路を進路「１」であると特定する。
ケース８に関しては、分取判定される粒子は細胞集団１に属するので、図１９に示されるとおり、判定部２０１は、図１８Ａの進路割当表を参照して、当該粒子に進路１を割り当てる。
進路割当表に記載された進路に関して以下で説明する。
進路０は、分取対象である粒子のうち、細胞集団１及び２に属する粒子が進行する進路であり、進路０へ進行した粒子は、回収容器（以下「回収容器０」という）へ回収される。
進路１は、分取対象である粒子のうち、細胞集団４に属する粒子が進行する進路であり、進路１へ進行した粒子は、他の回収容器（以下「回収容器１」という）へ回収される。
進路２は、分取対象でない粒子が進行する粒子であり、進路２へ進行した粒子は、さらに他の回収容器（以下「回収容器２」という）へ回収される。
これらの進路及び回収容器は、例えば図１５に示されるように構成されうる。なお、図１５は模式的な例であり、進路及び回収容器の構成は図１５に記載されたものに限定されない。
液滴の進路０、１、又は２への進行制御は、前記分取部における粒子含有液滴への電荷付与及び偏向板による偏向によって行われてよい。例えば、以下のとおりに行われる。
進路０への進行は、例えば、前記分取部において、正に荷電された粒子含有液滴の進行方向を、偏向板によって偏向することによって、行われてよい。そして、進路０の先に設けられた回収容器０に、当該粒子含有液滴が回収される。
進路１への進行は、前記分取部において、負に荷電された粒子含有液滴の進行方向を、偏向板によって偏向することによって、行われてよい。そして、進路１の先に設けられた回収容器１に、当該粒子含有液滴が回収される。
進路２への進行は、前記分取部において、荷電されていない粒子含有液滴を、偏向板によって偏向することなく直進させることによって、行われてよい。そして、進路２の先に設けられた回収容器２に、当該粒子含有液滴が回収される。
ステップＳ２０４において、判定部２０１は、分取判定される粒子周囲の所定範囲内に、他の粒子が存在するかを判定する。
具体的には、判定部２０１は、ステップＳ２０１～２０３における処理の対象となった粒子の進行方向における前又は後の所定範囲内に、他の粒子が存在するかを判定する。当該判定は、分取判定される粒子への光照射により生じた光が検出された時刻と、その前及び／又は後に流れている粒子への光照射により生じた光が検出された時刻と、に基づき行われてよい。例えば、これら時刻の差の絶対値が所定の値以下である場合は、判定部２０１は、他の粒子が存在すると判定する。当該絶対値が所定の値よりも大きい場合は、判定部２０１は、他の粒子が存在しないと判定する。
ステップＳ２０４において、判定部２０１は、分取判定される粒子周囲の所定範囲内に他の粒子が存在すると判定した場合には、処理をステップＳ２０５に進める。判定部２０１は、分取判定される粒子周囲の所定範囲内に他の粒子が存在しないと判定した場合には、処理をステップＳ２０９に進める。
ケース８に関して、判定部２０１は、前記所定範囲内に２つの粒子が存在すると判定し、処理をステップＳ２０５に進める。
このように、本技術の好ましい実施態様において、判定部は、分取判定される粒子周囲の所定範囲内に他の粒子が存在するかを判定する。そして、当該判定部は、当該所定範囲内に他の粒子が存在すると判定した場合に、ルールデータを用いた判定を行いうる。これにより、必要な場合にだけルールデータを用いた判定を行うことができ、不必要な処理を減らすことができる。
また、本例におけるフローでは、分取判定される粒子の進路の特定工程（ステップＳ２０１～Ｓ２０３）の後に、前記所定範囲内の他の粒子の存在判定工程（ステップＳ２０４）が行われているが、本技術に従う判定処理において、前記存在判定工程を先に行い、次に、前記特定工程が行われてもよい。
ステップＳ２０５において、判定部２０１は、前記所定範囲内に存在する他の粒子が属する粒子集団を決定する。当該決定は、上記で説明したステップＳ２０１及びＳ２０２と同じように行われてよい。
ケース８に関して、判定部２０１は、分取判定される粒子の前に存在する粒子が、細胞集団３に属すると特定し、且つ、分取判定される粒子の後に存在する粒子が、細胞集団２に属すると特定する。
ステップＳ２０６において、判定部２０１は、前記分取判定される粒子及び前記所定範囲内の他の粒子からなる粒子群の各粒子について、当該粒子群の他の全ての粒子それぞれとの関係性を判定する。判定部２０１は、前記各粒子が、前記他の全ての粒子それぞれとの関係において無視可能であるかを定義するルールデータを用いて、前記関係性の判定を行いうる。
より具合的には、まず、判定部２０１は、分取判定される粒子（すなわちステップＳ２０１～Ｓ２０３における処理の対象となった粒子）が属する粒子集団と、当該粒子周囲の所定範囲内の他の粒子（すなわちステップＳ１０５における処理の対象となった粒子）が属する粒子集団と、に応じた、これら粒子の関係性が定義されているルールデータを参照して、前記所定範囲内の或る粒子と他の粒子との関係性を特定する。
前記関係性は、より具体的には、前記所定範囲内の或る粒子が、他の粒子に関して無視できるかという関係性であってよく、さらにより具体的には、前記所定範囲内の或る粒子が、他の粒子の分取後処理において無視できるかという関係性であってよい。当該関係性は、分取操作後の処理に応じて適宜設定されてよく、例えば分取後操作を行うユーザが当該関係性を設定し、この設定に基づきルールデータが設定されうる。
前記ルールデータの例は、図１８Ｂに示されている「ルールデータ」の表である。図１８Ｂに示されているルールデータは、或る粒子が属する細胞集団の種類と、他の粒子が属する細胞集団の種類と、に応じて、０又は１の値が特定されている（図１８Ｂでは下線付加された０又は１として示されている）。「０」は、或る粒子は、他の粒子との関係において無視可能でないことを示す。「１」は、或る粒子は、他の粒子との関係において無視可能であることを示す。
例えば、判定部２０１は、或る粒子が属する細胞集団が１である場合において、他の粒子は、いずれの細胞集団に属する場合においても、これら粒子の関係性を「０」であると特定する。或る粒子が属する細胞集団が、０、２、及び４のいずれの場合においても、同様である。
また、判定部２０１は、或る粒子が属する細胞集団が３である場合において、他の粒子が、細胞集団１又は２に属するときは、これら粒子の関係性を「１」と特定し、すなわち当該或る粒子は、当該他の粒子との関係において無視可能であると特定する。また、判定部２０１は、或る粒子が属する細胞集団が３である場合において、他の粒子が細胞集団０、３、又は４に属するときは、これら粒子の関係性を「０」と特定し、すなわち当該或る粒子は、当該他の粒子との関係において無視可能でないと特定する。
ケース８に関して、判定部２０１は、分取判定される粒子と、当該粒子の前及び後に存在する粒子のそれぞれとの関係性を特定する。判定部２０１は、当該分取判定される粒子が細胞集団１に属し且つ当該前に存在する粒子が細胞集団３に属するので、前記ルールデータを参照して、これら２つの粒子の関係性が「０」であると特定する。同様に、判定部２０１は、当該分取判定される粒子と当該後に存在する粒子との関係性が「０」であると特定する。
判定部２０１は、当該前に存在する粒子と、当該分取判定される粒子及び当該後に存在する粒子のそれぞれと、の関係性も特定する。判定部２０１は、当該前に存在する粒子が細胞集団３に属し且つ当該分取判定される粒子が細胞集団１に属するので、前記ルールデータを参照して、これら２つの粒子の関係性が「１」であると特定する。同様に、判定部２０１は、当該前に存在する粒子と当該後に存在する粒子との関係性が「１」であると特定する。
判定部２０１は、当該後に存在する粒子と、当該分取判定される粒子及び当該前に存在する粒子のそれぞれと、の関係性も特定する。判定部２０１は、当該後に存在する粒子が細胞集団２に属し且つ当該分取判定される粒子が細胞集団１に属するので、前記ルールデータを参照して、これら２つの粒子の関係性が「０」であると特定する。同様に、判定部２０１は、当該後に存在する粒子と当該前に存在する粒子との関係性が「０」であると特定する。
すなわち、前記ルールデータは、或る粒子が前記（ｂ）の無視可能な粒子の粒子集団（本例では細胞集団３）に属し、且つ、他の粒子が前記（ａ）の分取対象である粒子の粒子集団（本例では細胞集団１又は２）に属する場合において、前記或る粒子は、前記他の粒子との関係において無視可能であると定義している。また、前記ルールデータは、その他の場合については、或る粒子は、他の粒子との関係において無視可能でないと定義している。このように定義されたルールデータを用いることで、例えば赤血球などの無視可能な粒子が前記所定範囲内に存在する場合に、当該粒子が目的粒子と一緒に回収されることを許容することができる。これにより、目的粒子の回収率を向上させることができる。
ステップＳ２０６において、判定部２０１は、さらに、各粒子について、上記で特定された関係性に基づき、分取判定において無視可能であるかを判定する。
例えば、判定部２０１は、或る粒子について、前記所定範囲内の他の粒子それぞれとの関係性全てが無視可能であると特定された場合に、当該或る粒子を無視可能であると判定し、この場合以外の場合に（すなわち、前記所定範囲内の他の粒子それぞれとの関係性のいずれか１つ以上が無視可能でないと特定された場合に）、当該或る粒子を無視可能でないと判定する。
ケース８に関して、分取判定される粒子について、他の２つの粒子それぞれとの観点で特定された関係性は、上記のとおりいずれも「０」である。そのため、判定部２０１は、当該分取判定される粒子について、「無視可能でない」と判定する。また、前記前に存在する粒子について、他の２つの粒子それぞれとの観点で特定された関係性は、上記のとおりいずれも「１」である。そのため、判定部２０１は、当該前に存在する粒子について、「無視可能である」と判定する。また、前記後に存在する粒子について、他の２つの粒子それぞれとの観点で特定された関係性は、上記のとおりいずれも「０」である。そのため、判定部２０１は、当該前に存在する粒子について、「無視可能でない」と判定する。
ステップＳ２０７において、判定部２０１は、ステップＳ２０６において無視可能でないと判定された全粒子の進路を特定する。すなわち、判定部２０１は、ステップＳ２０６において無視可能であると判定された粒子の進路は特定されなくてよい。進路の特定は、例えば前記進路割当表を参照して行われてよい。
ケース８に関して、判定部２０１は、ステップＳ２０６において無視可能でないと判定された前記分取判定される粒子及び前記後に存在する粒子のそれぞれについて進路を特定する。判定部２０１は、前記進路割当表を参照し、分取判定される粒子の進路が進路０（図１９においては「stream 0」と示されている）であると特定する。また、判定部２０１は、同様に、前記後に存在する粒子の進路が進路０（「stream 0」と示されている）であると特定する。
以上のとおり、本技術において、判定部は、前記関係性の判定の結果、他の全ての粒子との関係において無視可能であると判定された粒子に対しては、進路を割り当てず、且つ、当該粒子以外の粒子に対して、進路を割り当てうる。
ステップＳ２０８において、判定部２０１は、ステップＳ２０７において特定された進路に基づき、分取判定される粒子の進路を最終的に決定する。これにより、分取判定される粒子が分取されるかが決定され、さらには、分取判定される粒子が回収される容器も決定される。
ステップＳ２０７において例えば２つ以上の粒子それぞれについて進路が特定された場合（すなわち２以上の進路が特定された場合）には、ステップＳ２０８において、判定部２０１は、例えば図１８Ｃに示されるルールデータを参照して、分取判定される粒子を含有する液滴の進路を最終決定してよい。当該ルールデータは、ステップＳ２０７において特定された進路が一致する場合は、その進路が、分取判定される粒子を含有する液滴の進路であると定義し、且つ、一致しない場合には、分取判定される粒子を含有する液滴の進路は、分取対象でない粒子が進行する進路であると特定する。本技術において、１つの進路は１つの回収容器へと対応付けられていてよい。これにより、進路を特定することで、粒子含有液滴が回収される回収容器も特定される。
ケース８に関しては、判定部２０１は、ステップＳ２０７において特定された２つの粒子の進路がいずれも「０」であることに応じて、当該ルールデータを参照し、分取判定される粒子を含有する液滴の進路が、進路０であると特定する。
ステップＳ２０９は、前記所定範囲内に他の粒子が存在しない場合における判定部２０１による処理の例である。ステップＳ２０９において、判定部２０１は、ステップＳ２０３において特定された進路を、分取判定される粒子の進路として決定する。これにより、分取判定される粒子が分取されるかが決定され、さらには、分取判定される粒子が回収される容器も決定される。
ステップＳ２１０において、判定部２０１は、ステップＳ２０８又はＳ２０９において得られた判定結果を、分取制御部２０２に送信する。分取制御部２０２は、判定結果に基づき、微小粒子分取装置（特には分取部）を制御して、分取判定される粒子を含有する液滴の進行方向を特定された進路へと導く。これにより、当該特定された進路へと対応付けられた回収容器へと、分取判定される粒子が回収される。
ケース８に関しては、ステップＳ２０８において、分取判定される粒子を含有する液滴の進路は進路０であると判定された。判定部２０１は、当該判定の結果を分取制御部２０２に送信する。分取制御部２０２は、当該判定結果に基づき、当該液滴を進路０へと導くように分取部を制御して、当該液滴の進行方向を進路０へと進行させる。これにより、当該分取判定される粒子が、回収容器０へと回収される。
以上で述べた分取判定処理を、判定部２０１は、分取判定される粒子のそれぞれに対して行う。
（５－３）ルールデータの変更による種々の分取判定パターンの実現
微小粒子分取装置２００に関しても、判定部２０１は、判定において用いられるルールデータを変更することができるように構成されていてよい。これにより、当該判定処理フローで用いられるルールデータを変更することで、例えば目的細胞の回収率を高める判定パターン及び目的細胞の純度を高める判定パターンなど、種々の判定パターンを実現することができる。これにより、装置ユーザの種々のニーズに対応することができる。
以下で、上記（５－１）において述べたケース１～９に関して、ルールデータの変更によって、種々の分取判定パターンが実現できることを説明する。なお、以下の分取判定パターンにおいて採用される細胞集団のゲーティングは、上記（５－１）において説明したものと同じである。
（５－３－１）目的細胞の純度を重視し且つ回収率を向上するための分取判定処理の例
この分取判定処理の例を、図２０及び２１を参照しながら説明する。この分取判定処理は、上記で図１７を参照して説明した分取判定パターン２を実現する。
図２０Ａは、上記で説明したとおりの進路割当表である。図２０Ｂは、或る粒子が他の粒子との関係の観点から分取判定において無視可能であるかを定義するルールデータである。図２０Ｃは、進路の関係性に基づき、分取判定される粒子を含む液滴の進路を定義するルールデータである。これら図は、上記で説明した図１８に記載されたものと同じである。
図２１に、当該ルールデータを用いて分取判定を行った場合の分取判定結果の例を示す。
図２１に、ケース１～９における分取判定結果が示されている。ケース１～９における分取判定処理を以下で説明する。
（ケース１～４について）
ケース１～４では、分取判定される粒子周囲の所定範囲内に他の粒子が存在しないため、ステップＳ２０４において、判定部２０１は処理をステップＳ２０９に進める。そのため、ステップＳ２０１～Ｓ２０３において特定された進路に基づき、判定部２０１は、ステップＳ２０９において、分取判定される粒子の進路を決定決定する。
以下で各ケースについて説明する。
ケース１では、判定部２０１は、ステップＳ２０２において、分取判定される粒子が、細胞集団０に属すると特定する。そして、判定部２０１は、ステップＳ２０３において、分取判定される粒子が細胞集団０に属すると特定されたことに基づき、当該粒子の進路として「２」を割り当て、すなわち、分取対象でない粒子が回収される回収容器（回収容器２）へと進行する進路であると特定する。そして、ステップＳ２０９において、判定部２０１は、ステップＳ２０３において特定された進路が、当該粒子の進路であると最終的に決定する。
ケース２では、判定部２０１は、ステップＳ２０２において、分取判定される粒子が、細胞集団１に属すると特定する。そして、判定部２０１は、ステップＳ２０３において、分取判定される粒子が細胞集団１に属すると特定されたことに基づき、当該粒子の進路として「０」を割り当て、すなわち、分取対象である粒子のうち、細胞集団１及び２に属する粒子が回収される回収容器（回収容器０）へと進行する進路であると特定する。そして、ステップＳ２０９において、判定部２０１は、ステップＳ２０３において特定された進路が、当該粒子の進路であると最終的に決定する。
ケース３では、判定部２０１は、ステップＳ２０２において、分取判定される粒子が、細胞集団４に属すると特定する。そして、判定部２０１は、ステップＳ２０３において、分取判定される粒子が細胞集団４に属すると特定されたことに基づき、当該粒子の進路として「１」を割り当て、すなわち、当該粒子の進路が、分取対象である粒子のうち、細胞集団４に属する粒子が回収される回収容器（回収容器１）へと進行する進路であると特定する。そして、ステップＳ２０９において、判定部２０１は、ステップＳ２０３において特定された進路が、当該粒子の進路であると最終的に決定する。
ケース４では、判定部２０１は、ステップＳ２０２において、分取判定される粒子が、細胞集団３に属すると特定する。そして、判定部２０１は、ステップＳ２０３において、分取判定される粒子が細胞集団３に属すると特定されたことに基づき、当該粒子の進路として「２」を割り当て、すなわち、分取対象でない粒子が回収される回収容器（回収容器２）へと進行する進路であると特定する。そして、ステップＳ２０９において、判定部２０１は、ステップＳ２０３において特定された進路が、当該粒子の進路であると最終的に決定する。
（ケース５～９について）
ケース５～９では、ケース１～４と異なり、分取判定される粒子周囲の所定範囲（ガードタイム）内に他の粒子が存在するため、ステップＳ２０４において、判定部２０１は処理をステップＳ２０５に進める。
以下で各ケースについて説明する。
ケース５に関して、ステップＳ２０３において、判定部２０１は、分取判定される粒子の進路として、「０」を割り当て、すなわち、分取対象である粒子のうち、細胞集団１及び２に属する粒子が回収される回収容器（回収容器０）へと進行する進路であると特定する。
次に、ステップＳ２０５において、判定部２０１は、分取判定される粒子の後に存在する他の粒子が細胞集団０に属すると特定する。
次に、ステップＳ２０６において、判定部２０１は、分取判定される粒子が属する粒子集団と、当該粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が属する粒子集団と、に応じた、これら粒子の関係性が定義されているルールデータ（図２０Ｂに示されるルールデータ）を参照して、前者の粒子と後者の粒子との関係性を特定する。
当該分取判定される粒子は細胞集団１に属し且つ当該他の粒子は細胞集団０に属するので、判定部２０１は、前記ルールデータを参照し、当該分取判定される粒子については、関係性として「０」（無視可能でない）を特定し、当該他の粒子についても、関係性として「０」（無視可能でない）を特定する。
ステップＳ２０６において、判定部２０１は、さらに、各粒子について、上記で特定された関係性に基づき、分取判定において無視可能であるかを判定する。上記のとおり、いずれの粒子についても「０」が特定されているので、判定部２０１は、いずれの粒子も無視可能でないと判定する。
次に、ステップＳ２０７において、判定部２０１は、ステップＳ２０６において無視可能でないと判定された全粒子の進路を特定する。すなわち、判定部２０１は、当該分取判定される粒子については、進路が「０」であると特定し、当該他の粒子については、進路が「２」であると特定する。
ステップＳ２０８において、判定部２０１は、ステップＳ２０７において特定された進路に基づき、分取判定される粒子の進路を最終的に決定する。具体的には、２つの進路は一致しないので、判定部２０１は、分取判定される粒子を含有する液滴の進路は、分取対象でない粒子が進行する進路であると特定する。
より具体的には、ステップＳ２０８において、ステップＳ２０７において、２つ以上の粒子それぞれについて進路が特定されているので、判定部２０１は、例えば図２０Ｃに示されるルールデータを参照して、分取判定される粒子を含有する液滴の進路を最終決定する。当該ルールデータでは、一方の粒子の進路が「０」であり且つ他方の粒子の進路が「２」である場合に、最終的な進路は「２」（図２０Ｃでは、下線付加された斜体で記載されている）であると定義されている。そのため、判定部２０１は、分取判定される粒子を含有する液滴の進路は、分取対象でない粒子が回収される回収容器（回収容器２）へと進行する進路であると最終的に決定する。
次に、ステップＳ２１０において、判定部２０１は、ステップ２０８において得られた分取判定結果を、分取制御部２０２に送信する。
ケース６に関して、ステップＳ２０３において、判定部２０１は、分取判定される粒子の進路として、「０」を割り当て、すなわち、分取対象である粒子のうち、細胞集団１及び２に属する粒子が回収される回収容器（回収容器０）へと進行する進路であると特定する。
次に、ステップＳ２０５において、判定部２０１は、分取判定される粒子の前に存在する他の粒子が細胞集団４に属すると特定する。
次に、ステップＳ２０６において、判定部２０１は、分取判定される粒子が属する粒子集団と、当該粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が属する粒子集団と、に応じた、これら粒子の関係性が定義されているルールデータ（図２０Ｂに示されるルールデータ）を参照して、前者の粒子と後者の粒子との関係性を特定する。
当該分取判定される粒子は細胞集団１に属し且つ当該他の粒子は細胞集団４に属するので、判定部２０１は、前記ルールデータを参照し、当該分取判定される粒子については、関係性として「０」（無視可能でない）を特定し、当該他の粒子についても、関係性として「０」（無視可能でない）を特定する。
ステップＳ２０６において、判定部２０１は、さらに、各粒子について、上記で特定された関係性に基づき、分取判定において無視可能であるかを判定する。上記のとおり、いずれの粒子についても「０」が特定されているので、判定部２０１は、いずれの粒子も無視可能でないと判定する。
次に、ステップＳ２０７において、判定部２０１は、ステップＳ２０６において無視可能でないと判定された全粒子の進路を特定する。すなわち、判定部２０１は、当該分取判定される粒子については、進路が「０」であると特定し、当該他の粒子については、進路が「１」であると特定する。
ステップＳ２０８において、判定部２０１は、ステップＳ２０７において特定された進路に基づき、分取判定される粒子の進路を最終的に決定する。具体的には、２つの進路は一致しないので、判定部２０１は、分取判定される粒子を含有する液滴の進路は、分取対象でない粒子が進行する進路であると特定する。
より具体的には、ステップＳ２０８において、２つ以上の粒子それぞれについて進路がステップＳ２０７において特定されているので、判定部２０１は、例えば図２０Ｃに示されるルールデータを参照して、分取判定される粒子を含有する液滴の進路を最終決定する。当該ルールデータでは、一方の粒子の進路が「０」であり且つ他方の粒子の進路が「１」である場合に、最終的な進路は「２」（図２０Ｃでは、下線付加された斜体で記載されている）であると定義されている。そのため、判定部２０１は、分取判定される粒子を含有する液滴の進路は、分取対象でない粒子が回収される回収容器（回収容器２）へと進行する進路であると最終的に決定する。
次に、ステップＳ２１０において、判定部２０１は、ステップ２０８において得られた分取判定結果を、分取制御部２０２に送信する。
ケース７に関して、ステップＳ２０３において、判定部２０１は、分取判定される粒子の進路として、「０」を割り当て、すなわち、分取対象である粒子のうち、細胞集団１及び２に属する粒子が回収される回収容器（回収容器０）へと進行する進路であると特定する。
次に、ステップＳ２０５において、判定部２０１は、分取判定される粒子の後に存在する他の粒子が細胞集団２に属すると特定する。
次に、ステップＳ２０６において、判定部２０１は、分取判定される粒子が属する粒子集団と、当該粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が属する粒子集団と、に応じた、これら粒子の関係性が定義されているルールデータ（図２０Ｂに示されるルールデータ）を参照して、前者の粒子と後者の粒子との関係性を特定する。
当該分取判定される粒子は細胞集団１に属し且つ当該他の粒子は細胞集団２に属するので、判定部２０１は、前記ルールデータを参照し、当該分取判定される粒子については、関係性として「０」（無視可能でない）を特定し、当該他の粒子についても、関係性として「０」（無視可能でない）を特定する。
ステップＳ２０６において、判定部２０１は、さらに、各粒子について、上記で特定された関係性に基づき、分取判定において無視可能であるかを判定する。上記のとおり、いずれの粒子についても「０」が特定されているので、判定部２０１は、いずれの粒子も無視可能でないと判定する。
次に、ステップＳ２０７において、判定部２０１は、ステップＳ２０６において無視可能でないと判定された全粒子の進路を特定する。すなわち、判定部２０１は、当該分取判定される粒子については、進路が「０」であると特定し、当該他の粒子については、進路が「０」であると特定する。
ステップＳ２０８において、判定部２０１は、ステップＳ２０７において特定された進路に基づき、分取判定される粒子の進路を最終的に決定する。具体的には、２つの進路は一致しているので、判定部２０１は、分取判定される粒子を含有する液滴の進路は、分取対象である粒子が進行する進路であると特定する。
より具体的には、ステップＳ２０８において、ステップＳ２０７において、２つ以上の粒子それぞれについて進路が特定されているので、判定部２０１は、例えば図２０Ｃに示されるルールデータを参照して、分取判定される粒子を含有する液滴の進路を最終決定する。当該ルールデータでは、一方の粒子の進路が「０」であり且つ他方の粒子の進路が「０」である場合に、最終的な進路は「０」（図２０Ｃでは、下線付加された斜体で記載されている）であると定義されている。そのため、判定部２０１は、分取判定される粒子を含有する液滴の進路として「０」を割り当て、すなわち、分取対象である粒子のうち、細胞集団１及び２に属する粒子が回収される回収容器（回収容器０）へと進行する進路であると最終的に決定する。
次に、ステップＳ２１０において、判定部２０１は、ステップ２０８において得られた分取判定結果を、分取制御部２０２に送信する。
ケース８に関して、ステップＳ２０３において、判定部２０１は、分取判定される粒子の進路として、「０」を割り当て、すなわち、分取対象である粒子のうち、細胞集団１及び２に属する粒子が回収される回収容器（回収容器０）へと進行する進路であると特定する。
次に、ステップＳ２０５において、判定部２０１は、分取判定される粒子の前に存在する他の粒子が細胞集団３に属すると特定し、且つ、分取判定される粒子の後に存在する他の粒子が細胞集団２に属すると特定する。
次に、ステップＳ２０６において、判定部２０１は、分取判定される粒子が属する粒子集団と、当該粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が属する粒子集団と、に応じた、これら粒子の関係性が定義されているルールデータ（図２０Ｂに示されるルールデータ）を参照して、前者の粒子と後者の粒子との関係性を特定する。
前記分取判定される粒子（細胞集団１に属する）に関しては、前記前に存在する粒子との関係は、前記ルールデータより「０」であり、且つ、前記後に存在する粒子との関係も、前記ルールデータより「０」である。そのため、判定部２０１は、前記分取判定される粒子について、他の粒子との関係において、分取判定において無視可能でないと判定する。
前記前に存在する粒子（細胞集団３に属する）に関しては、前記分取判定される粒子との関係は、前記ルールデータより「１」であり、且つ、前記後に存在する粒子との関係も、前記ルールデータより「１」である。そのため、判定部２０１は、前記前に存在する粒子について、他の粒子との関係において、分取判定において無視可能であると判定する。
前記後に存在する粒子（細胞集団２に属する）に関しては、前記分取判定される粒子との関係は、前記ルールデータより「０」であり、且つ、前記前に存在する粒子との関係も、前記ルールデータより「０」である。そのため、判定部２０１は、前記前に存在する粒子について、他の粒子との関係において、分取判定において無視可能でないと判定する。
次に、ステップＳ２０７において、判定部２０１は、ステップＳ２０６において無視可能でないと判定された全粒子（すなわち、前記分取判定される粒子及び前記後に存在する粒子）の進路を特定する。すなわち、判定部２０１は、前記分取判定される粒子については、進路が「０」であると特定し、前記後に存在する粒子についても、進路が「０」であると特定する。
ステップＳ２０８において、判定部２０１は、ステップＳ２０７において特定された進路に基づき、分取判定される粒子の進路を最終的に決定する。具体的には、２つの進路は一致しているので、判定部２０１は、分取判定される粒子を含有する液滴の進路は、分取対象である粒子が進行する進路であると特定する。
より具体的には、ステップＳ２０８において、ステップＳ２０７において、２つの粒子それぞれについて進路が特定されているので、判定部２０１は、例えば図２０Ｃに示されるルールデータを参照して、分取判定される粒子を含有する液滴の進路を最終決定する。当該ルールデータでは、一方の粒子の進路が「０」であり且つ他方の粒子の進路が「０」である場合に、最終的な進路は「０」（図２０Ｃでは、下線付加された斜体で記載されている）であると定義されている。そのため、判定部２０１は、分取判定される粒子を含有する液滴の進路として「０」を割り当て、すなわち、分取対象である粒子のうち、細胞集団１及び２に属する粒子が回収される回収容器（回収容器０）へと進行する進路であると最終的に決定する。
次に、ステップＳ２１０において、判定部２０１は、ステップ２０８において得られた分取判定結果を、分取制御部２０２に送信する。
ケース９に関して、ステップＳ２０３において、判定部２０１は、分取判定される粒子の進路として、「０」を割り当て、すなわち、分取対象である粒子のうち、細胞集団１及び２に属する粒子が回収される回収容器（回収容器０）へと進行する進路であると特定する。
次に、ステップＳ２０５において、判定部２０１は、分取判定される粒子の後に存在する他の粒子が細胞集団３に属すると特定する。
次に、ステップＳ２０６において、判定部２０１は、分取判定される粒子が属する粒子集団と、当該粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が属する粒子集団と、に応じた、これら粒子の関係性が定義されているルールデータ（図２０Ｂに示されるルールデータ）を参照して、前記２つの粒子との関係性を特定する。
前記分取判定される粒子（細胞集団１に属する）に関しては、前記後に存在する粒子との関係は、前記ルールデータより「０」である。そのため、判定部２０１は、前記分取判定される粒子について、他の粒子との関係において、分取判定において無視可能でないと判定する。
前記後に存在する粒子（細胞集団３に属する）に関しては、前記分取判定される粒子との関係は、前記ルールデータより「１」である。そのため、判定部２０１は、前記後に存在する粒子について、他の粒子との関係において、分取判定において無視可能であると判定する。
次に、ステップＳ２０７において、判定部２０１は、ステップＳ２０６において無視可能でないと判定された全粒子（すなわち、前記分取判定される粒子のみ）の進路を特定する。すなわち、判定部２０１は、前記分取判定される粒子については、進路が「０」であると特定する。
ステップＳ２０８において、判定部２０１は、ステップＳ２０７において特定された進路に基づき、分取判定される粒子の進路を最終的に決定する。
より具体的には、ステップＳ２０８において、ステップＳ２０７において、前記分取判定される粒子についてだけ進路が特定されているので、判定部２０１は、当該特定された進路「０」を最終的な進路であると最終的に決定する。
次に、ステップＳ２１０において、判定部２０１は、ステップ２０８において得られた分取判定結果を、分取制御部２０２に送信する。
以上のとおり、図２０に示される無視可能であるかに関する関係性を定義するルールデータを用いることで、図１７を参照して説明した分取判定パターン２を実現することができ、目的細胞の純度を重視し且つ目的細胞の回収率が向上された分取判定処理が可能となる。
なお、前記ルールデータは、以下のとおりに定義を行うものであると言い換えることもできる。
前記ルールデータは、前記所定範囲内の或る粒子が前記（ｂ）の無視可能な粒子の粒子集団（本例では細胞集団３）に属し、且つ、他の粒子が前記（ａ）の分取対象である粒子の粒子集団（本例では細胞集団１又は２）に属する場合において、前記或る粒子は、前記他の粒子との関係において無視可能であると定義している。また、前記ルールデータは、その他の場合については、或る粒子は、他の粒子との関係において無視可能でないと定義している。このように定義されたルールデータを用いることで、例えば赤血球などの無視可能な粒子が前記所定範囲内に存在する場合に、当該粒子が目的粒子と一緒に回収されることを許容することができる。これにより、目的粒子の回収率を向上させることができる。
（５－３－２）目的細胞の純度を重視した分取判定処理の例
この分取判定処理の例を、図２２及び２３を参照しながら説明する。この分取判定処理は、目的細胞の純度を重視したものであり、上記で図１７を参照して説明した分取判定パターン１を実現する。
図２２Ａは、上記で説明したとおりの進路割当表である。図２２Ｂは、或る粒子が他の粒子との関係の観点から分取判定において無視可能であるかを定義するルールデータである。図２２Ｃは、進路の関係性に基づき、分取判定される粒子を含む液滴の進路を定義するルールデータである。
図２３に、当該ルールデータを用いて分取判定を行った場合の分取判定結果の例を示す。
図２３に、ケース１～９における分取判定結果が示されている。ケース１～９における分取判定処理を以下で説明する。
（ケース１～４について）
ケース１～４において、上記（５－３－１）においてケース１～４に関して述べた処理と同じ処理が行われ、同じ処理結果が得られる。
（ケース５～９について）
ケース５～７についても、上記（５－３－１）においてケース５～７に関して述べた処理と同じ処理が行われ、同じ処理結果が得られる。
ケース８及び９に関しては、上記（５－３－１）と異なる判定処理が行われる。以下でこれらのケースに関して説明する。
ケース８に関して、ステップＳ２０３において、判定部２０１は、分取判定される粒子の進路として、「０」を割り当て、すなわち、分取対象である粒子のうち、細胞集団１及び２に属する粒子が回収される回収容器（回収容器０）へと進行する進路であると特定する。
次に、ステップＳ２０５において、判定部２０１は、分取判定される粒子の前に存在する他の粒子が細胞集団３に属すると特定し、且つ、分取判定される粒子の後に存在する他の粒子が細胞集団２に属すると特定する。
次に、ステップＳ２０６において、判定部２０１は、分取判定される粒子が属する粒子集団と、当該粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が属する粒子集団と、に応じた、これら粒子の関係性が定義されているルールデータ（図２２Ｂに示されるルールデータ）を参照して、前者の粒子と後者の粒子との関係性を特定する。図２２Ｂのルールデータは、図２０Ｂのものと異なり、「１」が存在しない。そのため、このルールデータを採用する場合は、無視可能であると判定される粒子は生じない。
前記分取判定される粒子（細胞集団１に属する）に関しては、前記前に存在する粒子との関係は、前記ルールデータより「０」であり、且つ、前記後に存在する粒子との関係も、前記ルールデータより「０」である。そのため、判定部２０１は、前記分取判定される粒子について、他の粒子との関係において、分取判定において無視可能でないと判定する。
前記前に存在する粒子（細胞集団３に属する）に関しては、前記分取判定される粒子との関係は、前記ルールデータより「０」であり、且つ、前記後に存在する粒子との関係も、前記ルールデータより「０」である。そのため、判定部２０１は、前記前に存在する粒子について、他の粒子との関係において、分取判定において無視可能でないと判定する。
前記後に存在する粒子（細胞集団２に属する）に関しては、前記分取判定される粒子との関係は、前記ルールデータより「０」であり、且つ、前記前に存在する粒子との関係も、前記ルールデータより「０」である。そのため、判定部２０１は、前記前に存在する粒子について、他の粒子との関係において、分取判定において無視可能でないと判定する。
次に、ステップＳ２０７において、判定部２０１は、ステップＳ２０６において無視可能でないと判定された全粒子（すなわち、前記分取判定される粒子、前記前に存在する粒子、及び前記後に存在する粒子）の進路を特定する。すなわち、判定部２０１は、前記分取判定される粒子については、進路が「０」であると特定し、前記後に存在する粒子についても、進路が「０」であると特定する。一方で、前記後に存在する粒子については、進路が「２」であると特定する。
ステップＳ２０８において、判定部２０１は、ステップＳ２０７において特定された進路に基づき、分取判定される粒子の進路を最終的に決定する。具体的には、３つの進路は一致していないので、判定部２０１は、分取判定される粒子を含有する液滴の進路は、分取対象でない粒子が進行する進路「２」を割り当て、すなわち、分取対象でない粒子が回収される回収容器（回収容器２）へと進行する進路であると最終的に決定する。
次に、ステップＳ２１０において、判定部２０１は、ステップ２０８において得られた分取判定結果を、分取制御部２０２に送信する。
以上のとおり、図２２に示される無視可能であるかに関する関係性を定義するルールデータを用いることで、図１７を参照して説明した分取判定パターン１を実現することができ、目的細胞の純度を高めることができる。
なお、前記ルールデータは、以下のとおりに定義を行うものであると言い換えることもできる。
前記ルールデータは、前記所定範囲内の或る粒子が前記（ａ）～（ｃ）のいずれの粒子集団に属する場合においても、前記或る粒子は、前記他の粒子との関係において無視可能でないと定義している。このように定義されたルールデータを用いることで、目的粒子の純度を高めることができる。
（５－３－３）分取判定において考慮される範囲を狭めた分取判定処理の例
上記（５－３－１）及び（５－３－２）では、分取判定において考慮される粒子が存在する範囲は、分取判定される粒子を含む液滴だけでなく、その前後の液滴の一部も含むように設定されている。これは、当該前後の液滴に含まれるべき粒子が、分取判定される粒子を含む液滴に含まれる可能性があり、その可能性を排除して、目的粒子の純度を高めるためである。しかしながら、純度の高さよりも、回収率が重視される場合がある。そのような場合には、前記範囲を狭めてもよい。前記範囲を狭めることによって、目的粒子の回収率を高めることができる。そのような場合の例として、以下で図２４及び２５を参照しながら、前記範囲を、分取判定される粒子を含む液滴を含むが、その前後の液滴を含まないように設定した場合の分取判定処理の結果を説明する。
図２４は、前記分取判定処理において用いられる進路割当表及びルールデータであり、これらは、上記（５－３－２）において説明したものと同じである。図２５は、前記分取判定処理の結果を示す図である。図２５において示されるとおり、同図中の分取判定において考慮される粒子が存在する範囲は、上記（５－３－２）において説明した図２３中の分取判定において考慮される粒子が存在する範囲よりも狭められている。
（ケース１～４について）
ケース１～４において、上記（５－３－２）においてケース１～４に関して述べた処理と同じ処理が行われ、同じ処理結果が得られる。
（ケース５～９について）
ケース５について、前記範囲が狭められたことにより、上記（５－３－２）において述べた場合と異なり、ステップＳ２０４において、判定部２０１は、分取判定される粒子周囲の所定範囲内に他の粒子が存在しないため、処理をステップＳ２０９に進める。その結果、ケース５の分取判定処理結果は、ケース２と同じになる。これにより、上記（５－３－２）においては廃棄された目的粒子が、ケース５においても、目的粒子が回収容器０に回収される。
ケース６及び７については、前記範囲が狭められているが、分取判定において考慮される粒子に変化はないので、上記（５－３－２）と同じ分取判定処理が行われ、同じ処理結果が得られる。
ケース８に関しては、前記範囲が狭められたことにより、上記（５－３－２）において述べた場合と異なり、ステップＳ２０４において、判定部２０１は、分取判定される粒子周囲の所定範囲内に他の粒子が存在しないため、処理をステップＳ２０９に進める。その結果、ケース８の分取判定処理結果は、ケース２と同じになる。これにより、上記（５－３－２）においては廃棄された目的粒子が、ケース５においても、目的粒子が回収容器０に回収される。
ケース９に関しても、前記範囲が狭められたことにより、上記（５－３－２）において述べた場合と異なり、ステップＳ２０４において、判定部２０１は、分取判定される粒子周囲の所定範囲内に他の粒子が存在しないため、処理をステップＳ２０９に進める。
ケース９では、ステップＳ２０１～Ｓ２０３において、分取判定される粒子は、細胞集団２に属すると判定され、そして、当該粒子の進路は「０」であると特定されている。そのため、ステップＳ２０９において、判定部２０１は、分取判定される粒子の進路が「０」であると最終的に決定し、すなわち、細胞集団１及び２に属する粒子が回収される回収容器（回収容器０）へと進行する進路であると特定する。
（５－３－４）目的細胞の回収率を重視した分取判定処理の例
上記（５－３－２）では、目的細胞の純度を重視した分取判定処理を説明した。ステップＳ２０８において参照されるルールデータを変更することで、目的細胞の回収率を高めることもできる。以下で、図２６及び２７を参照しながら、目的細胞の回収率を高める分取判定処理について説明する。
図２６は、前記分取判定処理において用いられる進路割当表及びルールデータである。
図２６Ａ及びＢの進路割当表及びルールデータは、上記（５－３－２）において説明したものと同じである。
図２６Ｃに示されるルールデータが、上記（５－３－２）において説明したものと異なる。図２６Ｃにおいて、優先順位は、進路０が最も優先され、次に進路１が優先され、進路２は最も優先されていない。すなわち、前記範囲内に、進路０が割り当てられた粒子が含まれる場合は、前記範囲内に進路１又は２が割り当てられた粒子が含まれるとしても、分取判定される粒子を含む液滴の進路は０であると定義されている。前記範囲内に、進路１に割り当てられた粒子と進路２に割り当てられた粒子とが存在する場合には、分取判定される粒子を含む液滴の進路は１であると定義されている。前記範囲内に、進路２に割り当てられた粒子だけが存在する場合にのみ、分取判定される粒子を含む液滴の進路は２であると定義されている。
（ケース１～４について）
ケース１～４において、上記（５－３－２）においてケース１～４に関して述べた処理と同じ処理が行われ、同じ処理結果が得られる。
（ケース５～９について）
ケース５について、ステップＳ２０１～Ｓ２０７は、上記（５－３－２）と同じ処理が行われる。
ステップＳ２０８において、判定部２０１は、図２６Ｃに示されるルールデータを参照して、分取判定される粒子を含有する液滴の進路を最終決定する。当該ルールデータでは、一方の粒子の進路が「０」であり且つ他方の粒子の進路が「２」である場合に、最終的な進路は「０」（図２６Ｃでは、下線付加された斜体で記載されている）であると定義されている。そのため、判定部２０１は、分取判定される粒子を含有する液滴の進路は、分取対象である粒子が回収される回収容器（回収容器０）へと進行する進路であると最終的に決定する。
ケース６についても、ステップＳ２０１～Ｓ２０７は、上記（５－３－２）と同じ処理が行われる。
ステップＳ２０８において、判定部２０１は、図２６Ｃに示されるルールデータを参照して、分取判定される粒子を含有する液滴の進路を最終決定する。当該ルールデータでは、一方の粒子の進路が「０」であり且つ他方の粒子の進路が「１」である場合に、最終的な進路は「０」（図２６Ｃでは、下線付加された斜体で記載されている）であると定義されている。そのため、判定部２０１は、分取判定される粒子を含有する液滴の進路は、分取対象である粒子が回収される回収容器（回収容器０）へと進行する進路であると最終的に決定する。
ケース７についても、ステップＳ２０１～Ｓ２０７は、上記（５－３－２）と同じ処理が行われる。
ステップＳ２０８において、判定部２０１は、図２６Ｃに示されるルールデータを参照して、分取判定される粒子を含有する液滴の進路を最終決定する。当該ルールデータでは、一方の粒子の進路が「０」であり且つ他方の粒子の進路が「０」である場合に、最終的な進路は「０」（図２６Ｃでは、下線付加された斜体で記載されている）であると定義されている。そのため、判定部２０１は、分取判定される粒子を含有する液滴の進路は、分取対象である粒子が回収される回収容器（回収容器０）へと進行する進路であると最終的に決定する。
ケース８についても、ステップＳ２０１～Ｓ２０７は、上記（５－３－２）と同じ処理が行われる。
ステップＳ２０８において、判定部２０１は、図２６Ｃに示されるルールデータを参照して、分取判定される粒子を含有する液滴の進路を最終決定する。前記範囲内に含まれる粒子に割り当てられた進路は「０」及び「２」である。２つの粒子に割り当てられた２つの進路が「０」及び「０」である場合、「０」及び「２」である場合、「２」及び「０」である場合のいずれについても、最終的な進路は「０」（図２６Ｃでは、下線付加された斜体で記載されている）であると定義されている。そのため、判定部２０１は、分取判定される粒子を含有する液滴の進路は、分取対象である粒子が回収される回収容器（回収容器０）へと進行する進路であると最終的に決定する。
ケース９に関しても、ステップＳ２０１～Ｓ２０７は、上記（５－３－２）と同じ処理が行われる。
ステップＳ２０８において、判定部２０１は、図２６Ｃに示されるルールデータを参照して、分取判定される粒子を含有する液滴の進路を最終決定する。前記範囲内に含まれる粒子に割り当てられた進路は「０」及び「２」である。２つの粒子に割り当てられた２つの進路が「０」及び「２」である場合、最終的な進路は「０」（図２６Ｃでは、下線付加された斜体で記載されている）であると定義されている。そのため、判定部２０１は、分取判定される粒子を含有する液滴の進路は、分取対象である粒子が回収される回収容器（回収容器０）へと進行する進路であると最終的に決定する。
（５－３－５）分取判定において考慮される範囲内に１つの粒子が含まれている場合にだけ分取すると判定する分取判定処理の例
本技術に従い、分取判定において考慮される範囲内に１つの粒子が含まれている場合にだけ分取すると判定することもできる。このような判定によって、目的細胞の純度をさらに高めることができる。このような判定を行う判定処理を、図２８及び２９を参照しながら説明する。
図２８は、前記分取判定処理において用いられる進路割当表及びルールデータである。図２８Ａの進路割当表及び図２８Ｂのルールデータは、上記（５－３－２）において説明したものと同じである。図２８Ｃのルールデータは、２つの粒子にそれぞれ割り当てられた進路がいずれの進路であっても、最終的な進路として「２」を定義している。これにより、２つ以上の粒子が前記範囲内に含まれる場合は、分取判定される粒子を含む液滴の進路は、分取対象でない粒子が回収される回収容器（回収容器２）へと進行する進路であると最終的に決定される。
図２９は、上記ケース１～９について、前記ルールデータを用いる判定処理結果を説明するための図である。図２９では、分取判定において考慮される粒子が存在する範囲が、分取判定される粒子を含む液滴だけでなく、その前後の液滴の全てを含むように設定されている。これは、目的粒子の純度をさらに高めるためである。
（ケース１～４について）
ケース１～４において、上記（５－３－２）においてケース１～４に関して述べた処理と同じ処理が行われ、同じ処理結果が得られる。
（ケース５～９について）
ケース５～９について、ステップＳ２０１～Ｓ２０７は、上記（５－３－２）と同じ処理が行われる。
ステップＳ２０８において、判定部２０１は、図２６Ｃに示されるルールデータを参照して、分取判定される粒子を含有する液滴の進路を最終決定する。
例えばケース５に関して、当該ルールデータでは、一方の粒子の進路が「０」であり且つ他方の粒子の進路が「２」である場合に、最終的な進路は「２」（図２８Ｃでは、下線付加された斜体で記載されている）であると定義されている。そのため、判定部２０１は、分取判定される粒子を含有する液滴の進路は、分取対象である粒子が回収される回収容器（回収容器２）へと進行する進路であると最終的に決定する。
その他のケースに関しても、判定部２０１は、当該ルールデータを参照して、最終的な進路を「２」と特定し、すなわち、分取判定される粒子を含有する液滴の進路は、分取対象である粒子が回収される回収容器（回収容器２）へと進行する進路であると最終的に決定する。
２．第２の実施形態（微小粒子分取方法）
本技術は、分取判定される粒子が属する粒子集団と、前記粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が属する粒子集団と、に応じて、これら粒子の関係性が定義されているルールデータを用いて、粒子の分取判定を実行する判定工程を含む微小粒子分取方法も提供する。これらの粒子が属しうる粒子集団は、以下の粒子集団を含む。
（ａ）分取対象である粒子の粒子集団、
（ｂ）分取対象でないが前記判定において無視可能な粒子の粒子集団、及び
（ｃ）前記分取対象である粒子及び前記無視可能な粒子のいずれでもない粒子の粒子集団。
前記判定工程を実行することによって、上記１．で述べたとおり、高い回収率で目的とする分取対象粒子の回収することが可能である。
好ましくは、前記（ｃ）の粒子集団の無視可能な粒子は赤血球を含む。これにより、上記１．において述べたように、前記判定工程において、赤血球を無視することができ、これにより、例えば培養又は遺伝子操作などの分取処理後操作に影響を及ぼすことを防ぎつつ、目的細胞の回収率を高めることができる。
本技術の微小粒子分取方法における前記判定工程は、上記１．において図１０及び１９を参照して説明した処理フローのとおりに行われてよい。以下ではまず、これら２つの処理フローに共通する工程を説明する。次に、これら処理フローのそれぞれに特有の工程について説明する。
（１）前記２つの処理フローに共通する工程
前記判定工程は、分取判定される粒子が属する粒子集団を決定する粒子集団決定工程を含みうる。この工程は、上記１．において図１０を参照して説明したステップＳ１０２、及び、図１９を参照して説明したステップＳ２０２に対応する。これらステップに関する説明が、前記存在判定工程について当てはまる。
さらに、前記判定工程は、当該決定された粒子集団に基づき、分取判定される粒子の進路を仮決定する仮決定工程を含みうる。当該仮決定工程は、上記１．において図１０を参照して説明したステップＳ１０３、及び、図１９を参照して説明したステップＳ２０３に対応する。これらステップに関する説明が、前記仮決定工程について当てはまる。
本技術の好ましい実施態様において、前記判定工程は、前記所定範囲内に他の粒子が存在するかを判定する存在判定工程を含む。当該存在判定工程は、上記１．において図１０を参照して説明したステップＳ１０４、及び、図１９を参照して説明したステップＳ２０４に対応する。これらステップに関する説明が、前記存在判定工程について当てはまる。
本技術の好ましい実施態様において、前記判定工程は、前記仮決定工程において仮決定された進路を、分取判定される粒子の進路であるとして最終決定する最終決定工程を含みうる。この最終決定工程は、上記１．において図１０を参照して説明したステップＳ１０８、及び、図１９を参照して説明したステップＳ２０９に対応する。これらステップに関する説明が、前記最終決定工程について当てはまる。
本技術の好ましい実施態様において、前記判定工程は、前記他の粒子が属する粒子集団を決定する粒子集団決定工程を含む。当該粒子集団決定工程は、上記１．において図１０を参照して説明したステップＳ１０５、及び、図１９を参照して説明したステップＳ２０５に対応する。これらステップに関する説明が、前記粒子集団決定工程について当てはまる。
本技術の好ましい実施態様において、前記判定工程は、前記ルールデータを参照して、前記所定範囲内に存在する複数の粒子間の関係性を特定する関係性特定工程を含む。当該関係性特定工程は、上記１．において図１０を参照して説明したステップＳ１０６、及び、図１０を参照して説明したステップＳ２０６に対応する。これらステップに関する説明が、前記関係性特定工程について当てはまる。
（２）図１０の処理フローに特有の工程
本技術の一つの実施態様において、前記関係性特定工程において、前記ルールデータを参照して、分取判定される粒子が属する粒子集団と他の粒子が属する粒子集団との関係性が特定される。このように関係性を特定する関係性特定工程は、上記１．において図１０を参照して説明したステップＳ１０６に相当する。
本技術の一つの実施態様において、前記判定工程は、前記仮決定工程において決定された進路と、前記関係性特定工程において特定された関係性とに基づき、分取判定される粒子を分取するかを決定する最終決定工程を含む。当該最終決定工程は、上記１．において図１０を参照して説明したステップＳ１０７に相当する。
（３）図１９の処理フローに特有の工程
本技術の他の実施態様において、前記関係性特定工程において、前記ルールデータを参照して、前記所定範囲内に存在するすべての粒子それぞれについて、他の粒子との関係性が特定されうる。このように関係性を特定する関係性特定工程は、図１９を参照して説明したステップＳ２０６に相当する。この実施態様において、特定される関係性は、各粒子が、他の粒子の存在の観点から、分取判定において無視可能であるかという関係性であってよい。
前記他の実施態様において、前記微小粒子分取方法は、前記関係性特定工程において無視可能でないと判定された粒子の全てについて、当該粒子が進行すべき進路を、当該粒子が属する粒子集団に基づき特定する進路特定工程をさらに含む。当該進路特定工程は、図１９におけるステップＳ２０７に相当する。当該進路特定工程において、前記関係性特定工程において無視可能であると判定された粒子については、当該粒子の進行すべき流路は特定されなくてよい。
前記他の実施態様において、前記進路特定工程において特定された進路に基づき、分取判定される粒子を含む液滴の進路を最終決定する最終決定工程を含む。当該最終決定工程は、図１９におけるステップＳ２０８に相当する。
前記進路特定工程において２以上の進路が特定された場合、前記最終決定工程において、当該２以上の進路に基づき、分取判定される粒子を含む液滴の進路を定義するルールデータが用いられてよい。当該ルールデータは、当該２以上の進路が一致する場合は、前記液滴の進路は、当該一致した進路であると定義し、当該２以上の進路が一致しない場合は、当該液滴に進路は、分取対象でない粒子が進行する進路（例えば廃棄される粒子が進行する進路）であると定義するものであってよい。
３．第３の実施形態（プログラム）
本技術は、上記２．において述べた微小粒子分取方法を微小粒子分取装置に実行させるためのプログラムも提供する。当該プログラムは、本技術の微小粒子分取装置に備えられているハードディスクに格納されていてよく、又は、例えばｍｉｃｒｏＳＤメモリカード、ＳＤメモリカード、又はフラッシュメモリなどの記録媒体に記録されていてもよい。例えば、前記微小粒子分取装置の制御部が、当該プログラムに従い、当該微小粒子分取装置に本技術の微小粒子分取方法を実行させうる。
４．第４の実施形態（微小粒子分取システム）
本技術は、上記１．において述べた分取判定を行う判定部を含む微小粒子分取判定システムも提供する。当該システムは、例えば、当該分取判定において用いられるルールデータを生成するルールデータ生成部をさらに含みうる。当該ルールデータ生成部は、例えばユーザにより入力された前記（ａ）～（ｃ）の粒子集団に関する設定に基づき、ルールデータを生成しうる。前記（ａ）～（ｃ）の粒子集団に関する設定は、例えばゲーティング又はこれに準ずる設定であってよい。当該ルールデータ生成部は、前記粒子集団に関する設定に加えて、目的粒子の純度及び／又は回収率に関する設定に基づき、ルールデータを生成してよい。
なお、本技術は、以下のような構成をとることもできる。
〔１〕
粒子の分取判定を実行する判定部を備えており、
前記判定部は、分取判定される粒子が属する粒子集団と、前記粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が属する粒子集団と、に応じて、これら粒子の関係性が定義されているルールデータを用いて前記判定を行い、
前記分取判定される粒子及び前記所定範囲内の他の粒子が属しうる粒子集団は、以下の（ａ）～（ｃ）の粒子集団を含み、
（ａ）分取対象である粒子の粒子集団、
（ｂ）分取対象でないが前記判定において無視可能な粒子の粒子集団、及び
（ｃ）前記分取対象である粒子及び前記無視可能な粒子のいずれでもない粒子の粒子集団
且つ、
前記無視可能な粒子は赤血球を含む、
微小粒子分取装置。
〔２〕
前記判定部は、前記判定において用いられるルールデータを変更することができ、
前記判定部が利用可能なルールデータのうちの少なくとも一つが、
分取判定される粒子が前記（ａ）の分取対象である粒子の粒子集団に属し且つ前記粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が前記（ｂ）の無視可能な粒子の粒子集団に属する場合において、前記他の粒子の進路は、分取対象である粒子の進路である、
と定義している、
〔１〕に記載の微小粒子分取装置。
〔３〕
前記微小粒子分取装置は、前記ルールデータを生成するルールデータ生成部をさらに備えており、
前記ルールデータ生成部は、前記分取判定される粒子及び前記所定範囲内の他の粒子が属しうる粒子集団に基づき、ルールデータを生成する、〔１〕又は〔２〕に記載の微小粒子分取装置。
〔４〕
前記微小粒子分取装置は、前記分取判定される粒子及び前記所定範囲内の他の粒子が属しうる粒子集団を設定するためのゲーティング操作を受け付ける入力部をさらに備えている、〔１〕～〔３〕のいずれか一つに記載の微小粒子分取装置。
〔５〕
前記判定部は、流路内を流れる粒子への光照射によって生じた光に基づき、粒子がどの粒子集団に属するかを決定する、〔１〕～〔４〕のいずれか一つに記載の微小粒子分取装置。
〔６〕
血液細胞の分取を行うために用いられる、〔１〕～〔５〕のいずれか一つに記載の微小粒子分取装置。
〔７〕
血液細胞のうちから所定のＴ細胞を選択的に分取するために用いられる、〔１〕～〔６〕のいずれか一つに記載の微小粒子分取装置。
〔８〕
前記ルールデータは、多次元データである、〔１〕～〔７〕のいずれか一つに記載の微小粒子分取装置。
〔９〕
前記ルールデータは、二次元マトリックスデータである、〔１〕～〔８〕のいずれか一つに記載の微小粒子分取装置。
〔１０〕
前記判定部は、前記所定範囲内に、前記分取判定される粒子及びその他の１以上の粒子が存在する場合に前記判定を行う、〔１〕～〔９〕のいずれか一つに記載の微小粒子分取装置。
〔１１〕
粒子の分取判定を実行する判定部を備えており、
前記判定部は、分取判定される粒子が属する粒子集団と、前記粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が属する粒子集団と、に応じて、これら粒子の関係性が定義されているルールデータを用いて前記判定を行い、
前記分取判定される粒子及び前記所定範囲内の他の粒子が属しうる粒子集団は、以下の（ａ）～（ｃ）の粒子集団を含む、
（ａ）分取対象である粒子の粒子集団、
（ｂ）分取対象でないが前記判定において無視可能な粒子の粒子集団、及び
（ｃ）前記分取対象である粒子及び前記無視可能な粒子のいずれでもない粒子の粒子集団、
微小粒子分取装置。
〔１２〕
前記判定部は、前記分取判定される粒子及び前記所定範囲内の他の粒子からなる粒子群の各粒子について、当該粒子群の他の全ての粒子それぞれとの関係性を判定する、〔１〕～〔１１〕のいずれか一つ請求項１に記載の微小粒子分取装置。
〔１３〕
前記判定部は、前記各粒子が、前記他の全ての粒子それぞれとの関係において無視可能であるかを定義するルールデータを用いて、前記関係性の判定を行う、〔１２〕に記載の微小粒子分取装置。
〔１４〕
前記判定部は、前記関係性の判定の結果、他の全ての粒子との関係において無視可能であると判定された粒子に対しては、進路を割り当てず、且つ、当該粒子以外の粒子に対して、進路を割り当てる、〔１３〕に記載の微小粒子分取装置。
〔１５〕
前記判定部は、割り当てられた進路に応じて前記分取判定される粒子の進路が定義されているルールデータを用いて、当該粒子の進路を判定する、〔１４〕に記載の微小粒子分取装置。
〔１６〕
分取判定される粒子が属する粒子集団と、前記粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が属する粒子集団と、に応じて、これら粒子の関係性が定義されているルールデータを用いて、粒子の分取判定を実行する判定工程を含み、
前記分取判定される粒子及び前記所定範囲内の他の粒子が属しうる粒子集団は、以下の（ａ）～（ｃ）の粒子集団を含み、
（ａ）分取対象である粒子の粒子集団、
（ｂ）分取対象でないが前記判定において無視可能な粒子の粒子集団、及び
（ｃ）前記分取対象である粒子及び前記無視可能な粒子のいずれでもない粒子の粒子集団
且つ、
前記無視可能な粒子は赤血球を含む、
微小粒子分取方法。
〔１７〕
分取判定される粒子が属する粒子集団と、前記粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が属する粒子集団と、に応じて、これら粒子の関係性が定義されているルールデータを用いて、粒子の分取判定を実行する判定工程を含み、
前記分取判定される粒子及び前記所定範囲内の他の粒子が属しうる粒子集団は、以下の（ａ）～（ｃ）の粒子集団を含み、
（ａ）分取対象である粒子の粒子集団、
（ｂ）分取対象でないが前記判定において無視可能な粒子の粒子集団、及び
（ｃ）前記分取対象である粒子及び前記無視可能な粒子のいずれでもない粒子の粒子集団
且つ、
前記無視可能な粒子は赤血球を含む、
微小粒子分取方法を、微小粒子分取装置に実行させるためのプログラム。
〔１８〕
粒子の分取判定を実行する判定部と、
当該分取判定において用いられるルールデータを生成するルールデータ生成部と、
を含み、
前記判定部は、分取判定される粒子が属する粒子集団と、前記粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が属する粒子集団と、に応じて、これら粒子の関係性が定義されているルールデータを用いて前記判定を行い、
前記分取判定される粒子及び前記所定範囲内の他の粒子が属しうる粒子集団は、以下の（ａ）～（ｃ）の粒子集団を含み、
（ａ）分取対象である粒子の粒子集団、
（ｂ）分取対象でないが前記判定において無視可能な粒子の粒子集団、及び
（ｃ）前記分取対象である粒子及び前記無視可能な粒子のいずれでもない粒子の粒子集団
且つ、
前記無視可能な粒子は赤血球を含む、
微小粒子分取システム。
１００ 微小粒子分取装置
１０１ 光照射部
１０２ 検出部
１０３ 制御部
１０５ 判定部
１５０ 微小粒子分取用マイクロチップ
２００ 微小粒子分取装置
１ 制御部
２ 光照射部
３ 検出部
２０１ 判定部
Ｔ チップ

Claims (18)

  1. 粒子の分取判定を実行する判定部を備えており、
    前記判定部は、分取判定される粒子が属する粒子集団と、前記粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が属する粒子集団と、に応じて、これら粒子の関係性が定義されているルールデータを用いて前記判定を行い、
    前記分取判定される粒子及び前記所定範囲内の他の粒子が属しうる粒子集団は、以下の（ａ）～（ｃ）の粒子集団を含み、
    （ａ）分取対象である粒子の粒子集団、
    （ｂ）分取対象でないが前記判定において無視可能な粒子の粒子集団、及び
    （ｃ）前記分取対象である粒子及び前記無視可能な粒子のいずれでもない粒子の粒子集団
    且つ、
    前記無視可能な粒子は赤血球を含む、
    微小粒子分取装置。
  2. 前記判定部は、前記判定において用いられるルールデータを変更することができ、
    前記判定部が利用可能なルールデータのうちの少なくとも一つが、
    分取判定される粒子が前記（ａ）の分取対象である粒子の粒子集団に属し且つ前記粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が前記（ｂ）の無視可能な粒子の粒子集団に属する場合において、前記他の粒子の進路は、分取対象である粒子の進路である、
    と定義している、
    請求項１に記載の微小粒子分取装置。
  3. 前記微小粒子分取装置は、前記ルールデータを生成するルールデータ生成部をさらに備えており、
    前記ルールデータ生成部は、前記分取判定される粒子及び前記所定範囲内の他の粒子が属しうる粒子集団に基づき、ルールデータを生成する、請求項１に記載の微小粒子分取装置。
  4. 前記微小粒子分取装置は、前記分取判定される粒子及び前記所定範囲内の他の粒子が属しうる粒子集団を設定するためのゲーティング操作を受け付ける入力部をさらに備えている、請求項１に記載の微小粒子分取装置。
  5. 前記判定部は、流路内を流れる粒子への光照射によって生じた光に基づき、粒子がどの粒子集団に属するかを決定する、請求項１に記載の微小粒子分取装置。
  6. 血液細胞の分取を行うために用いられる、請求項１に記載の微小粒子分取装置。
  7. 血液細胞のうちから所定のＴ細胞を選択的に分取するために用いられる、請求項１に記載の微小粒子分取装置。
  8. 前記ルールデータは、多次元データである、請求項１に記載の微小粒子分取装置。
  9. 前記ルールデータは、二次元マトリックスデータである、請求項１に記載の微小粒子分取装置。
  10. 前記判定部は、前記所定範囲内に、前記分取判定される粒子及びその他の１以上の粒子が存在する場合に前記判定を行う、請求項１に記載の微小粒子分取装置。
  11. 粒子の分取判定を実行する判定部を備えており、
    前記判定部は、分取判定される粒子が属する粒子集団と、前記粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が属する粒子集団と、に応じて、これら粒子の関係性が定義されているルールデータを用いて前記判定を行い、
    前記分取判定される粒子及び前記所定範囲内の他の粒子が属しうる粒子集団は、以下の（ａ）～（ｃ）の粒子集団を含む、
    （ａ）分取対象である粒子の粒子集団、
    （ｂ）分取対象でないが前記判定において無視可能な粒子の粒子集団、及び
    （ｃ）前記分取対象である粒子及び前記無視可能な粒子のいずれでもない粒子の粒子集団、
    微小粒子分取装置。
  12. 前記判定部は、前記分取判定される粒子及び前記所定範囲内の他の粒子からなる粒子群の各粒子について、当該粒子群の他の全ての粒子それぞれとの関係性を判定する、請求項１に記載の微小粒子分取装置。
  13. 前記判定部は、前記各粒子が、前記他の全ての粒子それぞれとの関係において無視可能であるかを定義するルールデータを用いて、前記関係性の判定を行う、請求項１２に記載の微小粒子分取装置。
  14. 前記判定部は、前記関係性の判定の結果、他の全ての粒子との関係において無視可能であると判定された粒子に対しては、進路を割り当てず、且つ、当該粒子以外の粒子に対して、進路を割り当てる、請求項１３に記載の微小粒子分取装置。
  15. 前記判定部は、割り当てられた進路に応じて前記分取判定される粒子の進路が定義されているルールデータを用いて、当該粒子の進路を判定する、請求項１４に記載の微小粒子分取装置。
  16. 分取判定される粒子が属する粒子集団と、前記粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が属する粒子集団と、に応じて、これら粒子の関係性が定義されているルールデータを用いて、粒子の分取判定を実行する判定工程を含み、
    前記分取判定される粒子及び前記所定範囲内の他の粒子が属しうる粒子集団は、以下の（ａ）～（ｃ）の粒子集団を含み、
    （ａ）分取対象である粒子の粒子集団、
    （ｂ）分取対象でないが前記判定において無視可能な粒子の粒子集団、及び
    （ｃ）前記分取対象である粒子及び前記無視可能な粒子のいずれでもない粒子の粒子集団
    且つ、
    前記無視可能な粒子は赤血球を含む、
    微小粒子分取方法。
  17. 分取判定される粒子が属する粒子集団と、前記粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が属する粒子集団と、に応じて、これら粒子の関係性が定義されているルールデータを用いて、粒子の分取判定を実行する判定工程を含み、
    前記分取判定される粒子及び前記所定範囲内の他の粒子が属しうる粒子集団は、以下の（ａ）～（ｃ）の粒子集団を含み、
    （ａ）分取対象である粒子の粒子集団、
    （ｂ）分取対象でないが前記判定において無視可能な粒子の粒子集団、及び
    （ｃ）前記分取対象である粒子及び前記無視可能な粒子のいずれでもない粒子の粒子集団
    且つ、
    前記無視可能な粒子は赤血球を含む、
    微小粒子分取方法を、微小粒子分取装置に実行させるためのプログラム。
  18. 粒子の分取判定を実行する判定部と、
    当該分取判定において用いられるルールデータを生成するルールデータ生成部と、
    を含み、
    前記判定部は、分取判定される粒子が属する粒子集団と、前記粒子周囲の所定範囲内の他の粒子が属する粒子集団と、に応じて、これら粒子の関係性が定義されているルールデータを用いて前記判定を行い、
    前記分取判定される粒子及び前記所定範囲内の他の粒子が属しうる粒子集団は、以下の（ａ）～（ｃ）の粒子集団を含み、
    （ａ）分取対象である粒子の粒子集団、
    （ｂ）分取対象でないが前記判定において無視可能な粒子の粒子集団、及び
    （ｃ）前記分取対象である粒子及び前記無視可能な粒子のいずれでもない粒子の粒子集団
    且つ、
    前記無視可能な粒子は赤血球を含む、
    微小粒子分取システム。
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