JP2902148B2 - 硝酸菌の硝化反応促進方法 - Google Patents
硝酸菌の硝化反応促進方法Info
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- JP2902148B2 JP2902148B2 JP8537091A JP8537091A JP2902148B2 JP 2902148 B2 JP2902148 B2 JP 2902148B2 JP 8537091 A JP8537091 A JP 8537091A JP 8537091 A JP8537091 A JP 8537091A JP 2902148 B2 JP2902148 B2 JP 2902148B2
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Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は水産動物の畜養・輸送設
備、水族館等の閉鎖系循環水に含まれる硝化細菌（硝化
菌という）のうち硝酸菌の硝化反応促進方法に関し、廃
水または下水処理設備、土壌、海水および河川水などに
含まれる硝酸菌の硝化反応促進方法に関し、それらの菌
数測定手段としても利用できる方法に関する。
備、水族館等の閉鎖系循環水に含まれる硝化細菌（硝化
菌という）のうち硝酸菌の硝化反応促進方法に関し、廃
水または下水処理設備、土壌、海水および河川水などに
含まれる硝酸菌の硝化反応促進方法に関し、それらの菌
数測定手段としても利用できる方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】硝化菌はアンモニアまたは亜硝酸を亜硝
酸または硝酸に酸化し、二酸化炭素を唯一の炭素源とし
て菌体成分を合成する独立栄養細菌であり、有機物が共
存すると硝化菌の硝化反応は阻害されるといわれてき
た。
酸または硝酸に酸化し、二酸化炭素を唯一の炭素源とし
て菌体成分を合成する独立栄養細菌であり、有機物が共
存すると硝化菌の硝化反応は阻害されるといわれてき
た。
【０００３】硝化菌にはアンモニアを酸化して亜硝酸塩
にするアンモニア酸化菌（以下「亜硝酸菌」という）
と、亜硝酸塩を酸化して硝酸塩にする亜硝酸酸化菌（以
下「硝酸菌」という）の２つの細菌群からなる。それぞ
れの化学反応式はつぎの通りである。 （ａ）亜硝酸菌のアンモニア酸化反応 ＮＨ4 + ＋３／２Ｏ2 →ＮＯ2 - ＋Ｈ2 Ｏ＋３９．５ｋｃａｌ （ｂ）硝酸菌の亜硝酸酸化反応 ＮＯ2 - ＋１／２Ｏ2 →ＮＯ3 - ＋２１．６ｋｃａｌ
にするアンモニア酸化菌（以下「亜硝酸菌」という）
と、亜硝酸塩を酸化して硝酸塩にする亜硝酸酸化菌（以
下「硝酸菌」という）の２つの細菌群からなる。それぞ
れの化学反応式はつぎの通りである。 （ａ）亜硝酸菌のアンモニア酸化反応 ＮＨ4 + ＋３／２Ｏ2 →ＮＯ2 - ＋Ｈ2 Ｏ＋３９．５ｋｃａｌ （ｂ）硝酸菌の亜硝酸酸化反応 ＮＯ2 - ＋１／２Ｏ2 →ＮＯ3 - ＋２１．６ｋｃａｌ
【０００４】これらの細菌は従属栄養細菌（有機物の酸
化反応によって生ずるエネルギーを利用して増殖する）
に比べて増殖速度が遅く、硝化反応が十分に現れるだけ
の菌量に達するまでに長期間を要する。従来の硝酸菌の
計数方法を例にその詳細を以下に説明する。
化反応によって生ずるエネルギーを利用して増殖する）
に比べて増殖速度が遅く、硝化反応が十分に現れるだけ
の菌量に達するまでに長期間を要する。従来の硝酸菌の
計数方法を例にその詳細を以下に説明する。
【０００５】下水または土壌の硝酸菌を計測する場合、
１リットルの蒸留水に対し、亜硝酸ナトリウム３０ｍ
ｇ、第一リン酸カリウム１００ｍｇ、キレート鉄６ｍ
ｇ、硫酸マグネシウム・７水塩５０ｍｇ、塩化カルシウ
ム・２水塩２０ｍｇ、炭酸水素ナトリウム２００ｍｇ、
炭酸カルシウム少量、石英砂少量を加え、ｐＨ７．０と
し、高圧滅菌する｛河合章：窒素化合物の代謝に関する
細菌群の計数法、「陸水生物生産研究法（陸水生物生産
測定方法論研究会編」、２９１〜２９５（１９６
９）｝。この培地９ｍｌを滅菌した試験管に分注する。
１リットルの蒸留水に対し、亜硝酸ナトリウム３０ｍ
ｇ、第一リン酸カリウム１００ｍｇ、キレート鉄６ｍ
ｇ、硫酸マグネシウム・７水塩５０ｍｇ、塩化カルシウ
ム・２水塩２０ｍｇ、炭酸水素ナトリウム２００ｍｇ、
炭酸カルシウム少量、石英砂少量を加え、ｐＨ７．０と
し、高圧滅菌する｛河合章：窒素化合物の代謝に関する
細菌群の計数法、「陸水生物生産研究法（陸水生物生産
測定方法論研究会編」、２９１〜２９５（１９６
９）｝。この培地９ｍｌを滅菌した試験管に分注する。
【０００６】一方試料を滅菌希釈液で１０倍・１０倍に
薄め、それぞれの希釈段階の試料１ｍｌを上記培地を分
注した試験管に加える。通常各段階ごとに３本または５
本の培地に接触し、６０日間、２０〜３０℃で培養し、
各培地の残存亜硝酸イオン（ＮＯ2 - ）を検出し、その
結果から統計学的に最確数（most probable number ,Ｍ
ＰＮ）とよばれる数を計算し、試料中の菌数を推定す
る。
薄め、それぞれの希釈段階の試料１ｍｌを上記培地を分
注した試験管に加える。通常各段階ごとに３本または５
本の培地に接触し、６０日間、２０〜３０℃で培養し、
各培地の残存亜硝酸イオン（ＮＯ2 - ）を検出し、その
結果から統計学的に最確数（most probable number ,Ｍ
ＰＮ）とよばれる数を計算し、試料中の菌数を推定す
る。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】（１）従来の計測方法
では培養所要日数が通常６０日間以上と著しく長く、迅
速な計測はおこなえない。そのため硝化装置などの運転
状況を的確に判断できない。
では培養所要日数が通常６０日間以上と著しく長く、迅
速な計測はおこなえない。そのため硝化装置などの運転
状況を的確に判断できない。
【０００８】（２）各希釈段階ごとに３または５本の試
験管を用いるために、多くの器具、装置および労力を要
する。それに加え培養日数が著しく長いために、集中的
に多数の試料を計測するためにはさらに多くの器具、装
置と労力が必要となり、効率よく計測することは現実に
は困難であった。
験管を用いるために、多くの器具、装置および労力を要
する。それに加え培養日数が著しく長いために、集中的
に多数の試料を計測するためにはさらに多くの器具、装
置と労力が必要となり、効率よく計測することは現実に
は困難であった。
【０００９】（３）硝化装置が定常運転において、系内
のなんらかの原因により硝酸菌がダメージを受け硝化性
能が低下して亜硝酸イオンが蓄積することがある。その
場合性能回復に要する時間は有機物廃水浄化装置などに
比べて長時間を要する。これは従属栄養細菌に比べて硝
酸菌の増殖が遅く、そのため硝化性能が現れるだけの菌
量に達するのに長時間を要するからである。
のなんらかの原因により硝酸菌がダメージを受け硝化性
能が低下して亜硝酸イオンが蓄積することがある。その
場合性能回復に要する時間は有機物廃水浄化装置などに
比べて長時間を要する。これは従属栄養細菌に比べて硝
酸菌の増殖が遅く、そのため硝化性能が現れるだけの菌
量に達するのに長時間を要するからである。
【００１０】本発明は以上の問題点を解決するために、
硝化菌のうち硝酸菌の菌数測定も可能な硝化反応促進方
法を提案するものである。
硝化菌のうち硝酸菌の菌数測定も可能な硝化反応促進方
法を提案するものである。
【００１１】
【課題を解決するための手段】本発明は硝酸菌の硝化反
応を促進させる方法において、 （１）クエン酸もしくはその塩、シスアコニット酸また
はその塩、イソクエン酸もしくはその塩、コハク酸もし
くはその塩、フマル酸もしくはその塩、リンゴ酸もしく
はその塩、グリオキシル酸またはその塩、アデノシン３
リン酸（ＡＴＰ）またはその塩、 （２）Ｌ−グルタミン酸もしくはその塩、Ｌ−アスパラ
ギン酸もしくはその塩、Ｌ−セリンもしくはその塩、 （３）α−Ｌ−ラムノース、α−Ｌ−フコース、Ｄ−グ
ルクロン酸もしくはその塩、Ｎ−アセチルグルコサミ
ン、Ｎ−アセチル−Ｄ−ムラミン酸、 （４）α−Ｌ−ラムノース１分子、Ｄ−グルクロン酸１
分子およびＤ−グルコース２分子を１ユニットとし、該
ユニットが直鎖状に重合した高分子多糖類のうち少なく
とも１種類以上の有機化合物を含む液で硝酸菌を培養す
ることを特徴とする硝酸菌の硝化反応促進方法である。
応を促進させる方法において、 （１）クエン酸もしくはその塩、シスアコニット酸また
はその塩、イソクエン酸もしくはその塩、コハク酸もし
くはその塩、フマル酸もしくはその塩、リンゴ酸もしく
はその塩、グリオキシル酸またはその塩、アデノシン３
リン酸（ＡＴＰ）またはその塩、 （２）Ｌ−グルタミン酸もしくはその塩、Ｌ−アスパラ
ギン酸もしくはその塩、Ｌ−セリンもしくはその塩、 （３）α−Ｌ−ラムノース、α−Ｌ−フコース、Ｄ−グ
ルクロン酸もしくはその塩、Ｎ−アセチルグルコサミ
ン、Ｎ−アセチル−Ｄ−ムラミン酸、 （４）α−Ｌ−ラムノース１分子、Ｄ−グルクロン酸１
分子およびＤ−グルコース２分子を１ユニットとし、該
ユニットが直鎖状に重合した高分子多糖類のうち少なく
とも１種類以上の有機化合物を含む液で硝酸菌を培養す
ることを特徴とする硝酸菌の硝化反応促進方法である。
【００１２】
【作用】特定有機化合物によって硝酸菌の硝化能力が促
進され、比較的短時間のうちに検出可能な濃度差の亜硝
酸イオン（ＮＯ2 - ）が除去される。なお特定の有機化
合物による硝酸菌の硝化能力促進のメカニズムはまだ不
明である。おそらくこれらの特定有機化合物は、従属栄
養細菌にあっては他の有機化合物から容易に生合成され
るが、硝酸菌にあっては代謝経路の違いからその生合成
に相当の時間を要するのではないかと考えられる。
進され、比較的短時間のうちに検出可能な濃度差の亜硝
酸イオン（ＮＯ2 - ）が除去される。なお特定の有機化
合物による硝酸菌の硝化能力促進のメカニズムはまだ不
明である。おそらくこれらの特定有機化合物は、従属栄
養細菌にあっては他の有機化合物から容易に生合成され
るが、硝酸菌にあっては代謝経路の違いからその生合成
に相当の時間を要するのではないかと考えられる。
【００１３】
（例１）以下に硝酸菌の代表菌株（Nitrobacter agilis
ATCC14123) を例にとって、本発明の一実施例を説明す
る。なおこの実施例での硝酸菌の培養は表１に示す高圧
滅菌した培地（次の培地を参考にした。Lewis,R.F. and
D.Pramer , 1958 , "Isolation of Nitrosomonas in p
ureculture" , 76 , 524-528 ）を用いて、すべて無菌
的に操作した。
ATCC14123) を例にとって、本発明の一実施例を説明す
る。なおこの実施例での硝酸菌の培養は表１に示す高圧
滅菌した培地（次の培地を参考にした。Lewis,R.F. and
D.Pramer , 1958 , "Isolation of Nitrosomonas in p
ureculture" , 76 , 524-528 ）を用いて、すべて無菌
的に操作した。
【表１】
【００１４】表１の培地であらかじめ１０日間前培養し
ておいた硝酸菌液１０ｍｌを新鮮培地１００ｍｌに加
え、２つの三角フラスコ（２００ｍｌ容）にそれぞれ２
０ｍｌずつ分注した。ついで添加濃度が１および５ｍＭ
となるようにろ過滅菌したクエン酸３ナトリウム・２水
和物溶液をそれぞれ加え、温度３０℃、回転数１２０ｒ
ｐｍで９６時間回転培養した。これらの培養液について
培養開始時と終了時の亜硝酸濃度をグリース・ロミイン
試薬法で測定した。
ておいた硝酸菌液１０ｍｌを新鮮培地１００ｍｌに加
え、２つの三角フラスコ（２００ｍｌ容）にそれぞれ２
０ｍｌずつ分注した。ついで添加濃度が１および５ｍＭ
となるようにろ過滅菌したクエン酸３ナトリウム・２水
和物溶液をそれぞれ加え、温度３０℃、回転数１２０ｒ
ｐｍで９６時間回転培養した。これらの培養液について
培養開始時と終了時の亜硝酸濃度をグリース・ロミイン
試薬法で測定した。
【００１５】添加物質がシスアコニット酸無水物の場合
は５ｍＭおよび１０ｍＭ、イソクエン酸三ナトリウム・
２水和物の場合は５ｍＭおよび１０ｍＭ、コハク酸ナト
リウム・６水和物の場合は１ｍＭおよび５ｍＭ、フマル
酸１ナトリウムの場合は１ｍＭおよび５ｍＭ、Ｌ−リン
ゴ酸２ナトリウムの場合は１ｍＭおよび１０ｍＭ、グリ
オキシル酸１水和物の場合は５ｍＭおよび１０ｍＭ、ア
デノシン３リン酸（ＡＴＰ）２ナトリウム３水和物の場
合は２５ｍｇ／ｌおよび５０ｍｇ／ｌとなるようにそれ
ぞれ培地に加え、上記方法と同様回転培養を行った。
は５ｍＭおよび１０ｍＭ、イソクエン酸三ナトリウム・
２水和物の場合は５ｍＭおよび１０ｍＭ、コハク酸ナト
リウム・６水和物の場合は１ｍＭおよび５ｍＭ、フマル
酸１ナトリウムの場合は１ｍＭおよび５ｍＭ、Ｌ−リン
ゴ酸２ナトリウムの場合は１ｍＭおよび１０ｍＭ、グリ
オキシル酸１水和物の場合は５ｍＭおよび１０ｍＭ、ア
デノシン３リン酸（ＡＴＰ）２ナトリウム３水和物の場
合は２５ｍｇ／ｌおよび５０ｍｇ／ｌとなるようにそれ
ぞれ培地に加え、上記方法と同様回転培養を行った。
【００１６】また比較のため、これと並行して添加物質
を含まない硝酸菌のみの培養液（コントロール）につい
ても硝化試験を行った。以上の結果を表２に示す。これ
よりコハク酸５ｍＭを除く他の添加培地は、残存亜硝酸
濃度はコントロールよりも低く、これらの添加物質は硝
酸菌の硝化反応を促進させる効果があることが分かっ
た。
を含まない硝酸菌のみの培養液（コントロール）につい
ても硝化試験を行った。以上の結果を表２に示す。これ
よりコハク酸５ｍＭを除く他の添加培地は、残存亜硝酸
濃度はコントロールよりも低く、これらの添加物質は硝
酸菌の硝化反応を促進させる効果があることが分かっ
た。
【００１７】なお同時に行った菌数の計数から培養終了
時の菌濃度を比較すると、ＡＴＰはコントロールの菌濃
度（２．６×１０8 cells/ml) とほぼ同じか下回り、硝
酸菌の増殖促進にほとんど効果がなかった。
時の菌濃度を比較すると、ＡＴＰはコントロールの菌濃
度（２．６×１０8 cells/ml) とほぼ同じか下回り、硝
酸菌の増殖促進にほとんど効果がなかった。
【００１８】一方クエン酸、シスアコニット酸、イソク
エン酸、コハク酸、フマル酸、リンゴ酸およびグルオキ
シル酸は硝酸菌の増殖促進と硝化反応促進のそれぞれの
最適添加濃度が異なり、これらの物質は添加濃度によっ
て硝酸菌の増殖または硝化反応のどちらかを促進する効
果があった。
エン酸、コハク酸、フマル酸、リンゴ酸およびグルオキ
シル酸は硝酸菌の増殖促進と硝化反応促進のそれぞれの
最適添加濃度が異なり、これらの物質は添加濃度によっ
て硝酸菌の増殖または硝化反応のどちらかを促進する効
果があった。
【表２】 注）表中の添加物質名はすべて略名である。
【００１９】（例２）Ｌ−グルタミン酸ナトリウムが１
ｍｇ／ｌおよび５ｍｇ／ｌに、Ｌ−アスパラギン酸ナト
リウムが１ｍｇ／ｌおよび５ｍｇ／ｌに、Ｌ−セリンが
５ｍｇ／ｌおよび１０ｍｇ／ｌとなるように添加した培
地について、前培養９６時間の硝酸菌を植種し、例１と
同様にして培養を行った。これらの結果を表３に示す。
ｍｇ／ｌおよび５ｍｇ／ｌに、Ｌ−アスパラギン酸ナト
リウムが１ｍｇ／ｌおよび５ｍｇ／ｌに、Ｌ−セリンが
５ｍｇ／ｌおよび１０ｍｇ／ｌとなるように添加した培
地について、前培養９６時間の硝酸菌を植種し、例１と
同様にして培養を行った。これらの結果を表３に示す。
【００２０】これよりいずれの添加物質の場合も、亜硝
酸はコントロールよりも速く除去され、硝酸菌の硝化反
応を促進させる効果があることが分かった。
酸はコントロールよりも速く除去され、硝酸菌の硝化反
応を促進させる効果があることが分かった。
【００２１】しかし同時に行った菌数の計数から培養終
了時の菌濃度を比較すると、これらの添加物質ではコン
トロールの菌濃度（２．６×１０8 cells/ml) とほぼ同
じか下回り、いずれも硝酸菌の増殖に効果がなかった。
了時の菌濃度を比較すると、これらの添加物質ではコン
トロールの菌濃度（２．６×１０8 cells/ml) とほぼ同
じか下回り、いずれも硝酸菌の増殖に効果がなかった。
【表３】
【００２２】（例３）α−Ｌ−ラムノースおよびα−Ｌ
−フコースがそれぞれ１ｍＭおよび５ｍＭに、Ｄ−グル
クロン酸ナトリウムが１ｍＭおよび５ｍＭに、Ｎ−アセ
チル−Ｄ−グルコサミンが１ｍｇ／ｌおよび５ｍｇ／
ｌ、Ｎ−アセチル−Ｄ−ムラミン酸が２５ｍｇ／ｌおよ
び５０ｍｇ／ｌとなるように添加した培地（表１）につ
いて、前培養９６時間の硝酸菌を植種し、例１と同様に
して培養した。これらの結果を表４に示す。
−フコースがそれぞれ１ｍＭおよび５ｍＭに、Ｄ−グル
クロン酸ナトリウムが１ｍＭおよび５ｍＭに、Ｎ−アセ
チル−Ｄ−グルコサミンが１ｍｇ／ｌおよび５ｍｇ／
ｌ、Ｎ−アセチル−Ｄ−ムラミン酸が２５ｍｇ／ｌおよ
び５０ｍｇ／ｌとなるように添加した培地（表１）につ
いて、前培養９６時間の硝酸菌を植種し、例１と同様に
して培養した。これらの結果を表４に示す。
【００２３】これよりいずれの添加物質の場合も亜硝酸
はコントロールより速く除去され、硝酸菌の硝化反応を
促進させる効果があることが分かった。
はコントロールより速く除去され、硝酸菌の硝化反応を
促進させる効果があることが分かった。
【００２４】なお同時に行った菌数の計数から培養終了
時の菌濃度を比較すると、Ｌ−ラムノースおよびＬ−フ
コースは硝酸菌の増殖促進と硝化反応促進のそれぞれの
最適添加濃度は一致せず、その添加濃度によって硝酸菌
の増殖または硝化反応のどちらかを促進する効果があっ
た。しかしＤ−グルクロン酸、Ｎ−アセチル−Ｄ−グル
コサミンおよびＮ−アセチル−Ｄ−ムラミン酸ではコン
トロールの菌濃度（２．６×１０8 cells/ml) とほぼ同
じか下回り、いずれも硝酸菌の増殖に効果がなかった。
時の菌濃度を比較すると、Ｌ−ラムノースおよびＬ−フ
コースは硝酸菌の増殖促進と硝化反応促進のそれぞれの
最適添加濃度は一致せず、その添加濃度によって硝酸菌
の増殖または硝化反応のどちらかを促進する効果があっ
た。しかしＤ−グルクロン酸、Ｎ−アセチル−Ｄ−グル
コサミンおよびＮ−アセチル−Ｄ−ムラミン酸ではコン
トロールの菌濃度（２．６×１０8 cells/ml) とほぼ同
じか下回り、いずれも硝酸菌の増殖に効果がなかった。
【表４】
【００２５】（例４）Pseudomonas elodea (ATCC31461)
が産出する粘液物質を脱アセチル化し生成して得られた
高分子多糖類（和光純薬製商品名：ゲランガム）を用い
て硝酸菌の硝化試験をおこなった。この物質は、α−Ｌ
−ラムノース１分子、Ｄ−グルクロン酸１分子およびＤ
−グルコース２分子を１ユニットとし該ユニットが直鎖
状に重合下高分子多糖類（平均重量分子量は６５万）で
ある。この物質が０．１、０．２、０．５、１．０およ
び５．０％の濃度となるように加え高圧滅菌した培地
（表１）に前培養６日間の硝酸菌を植種し、例１と同様
にして９６時間培養した。その結果を表５に示す。
が産出する粘液物質を脱アセチル化し生成して得られた
高分子多糖類（和光純薬製商品名：ゲランガム）を用い
て硝酸菌の硝化試験をおこなった。この物質は、α−Ｌ
−ラムノース１分子、Ｄ−グルクロン酸１分子およびＤ
−グルコース２分子を１ユニットとし該ユニットが直鎖
状に重合下高分子多糖類（平均重量分子量は６５万）で
ある。この物質が０．１、０．２、０．５、１．０およ
び５．０％の濃度となるように加え高圧滅菌した培地
（表１）に前培養６日間の硝酸菌を植種し、例１と同様
にして９６時間培養した。その結果を表５に示す。
【００２６】これよりゲランガムがいずれの濃度の時で
も、残存亜硝酸濃度がコントロールよりも低く、硝酸菌
の硝化反応を促進させることが分かった。
も、残存亜硝酸濃度がコントロールよりも低く、硝酸菌
の硝化反応を促進させることが分かった。
【００２７】なお同時に行った菌数の計数から培養終了
時の菌濃度を比較すると、この添加物質は硝酸菌の増殖
促進と硝化反応促進のそれぞれの最適添加濃度が異な
り、その添加濃度によって硝酸菌の増殖または硝化反応
のどちらかを促進する効果があった。
時の菌濃度を比較すると、この添加物質は硝酸菌の増殖
促進と硝化反応促進のそれぞれの最適添加濃度が異な
り、その添加濃度によって硝酸菌の増殖または硝化反応
のどちらかを促進する効果があった。
【表５】
【００２８】（例５）ク エン酸ナトリウム・２水和物が１ｍＭ、シスアコニッ
ト酸無水物が５ｍＭ、イソクエン酸三ナトリウム２水和
物が５ｍＭ、コハク酸ナトリウム・６水和物が１ｍＭ、
フマル酸１ナトリウムが５ｍＭ、Ｌ−リンゴ酸２ナトリ
ウムが１ｍＭ、グリオキシル酸１水和物が５ｍＭ、アデ
ノシン３リン酸２ナトリウム３水和物（ＡＴＰ）が２５
ｍｇ／ｌ、Ｌ−グルタミン酸ナトリウム・１水和物が１
ｍｇ／ｌ、Ｌ−アスパラギン酸ナトリウム・１水和物が
１ｍｇ／ｌ、Ｌ−セリンが５ｍｇ／ｌ、α−Ｌ−ラムノ
ースが１ｍＭ、α−Ｌ−フコースが１ｍＭ、Ｄ−グルク
ロン酸ナトリウム・１水和物が１ｍＭ、Ｎ−アセチルグ
ルコサミンが１ｍｇ／ｌ、Ｎ−アセチル−Ｄ−ムラミン
酸が２５ｍｇ／ｌ、ゲランガムが０．５％の濃度となる
ように表６の培地（Engel, M. S. and M. Alexander ,
1951 . "Growth andautotrophic metabolism of Nitoro
somonas europaea" , J. Bacteriol., 76 ,217-222) に
加え、それぞれの物質の添加培地を調製した。これを各
添加培地ごとに３本の試験管に５ｍｌずつ分注した。
ト酸無水物が５ｍＭ、イソクエン酸三ナトリウム２水和
物が５ｍＭ、コハク酸ナトリウム・６水和物が１ｍＭ、
フマル酸１ナトリウムが５ｍＭ、Ｌ−リンゴ酸２ナトリ
ウムが１ｍＭ、グリオキシル酸１水和物が５ｍＭ、アデ
ノシン３リン酸２ナトリウム３水和物（ＡＴＰ）が２５
ｍｇ／ｌ、Ｌ−グルタミン酸ナトリウム・１水和物が１
ｍｇ／ｌ、Ｌ−アスパラギン酸ナトリウム・１水和物が
１ｍｇ／ｌ、Ｌ−セリンが５ｍｇ／ｌ、α−Ｌ−ラムノ
ースが１ｍＭ、α−Ｌ−フコースが１ｍＭ、Ｄ−グルク
ロン酸ナトリウム・１水和物が１ｍＭ、Ｎ−アセチルグ
ルコサミンが１ｍｇ／ｌ、Ｎ−アセチル−Ｄ−ムラミン
酸が２５ｍｇ／ｌ、ゲランガムが０．５％の濃度となる
ように表６の培地（Engel, M. S. and M. Alexander ,
1951 . "Growth andautotrophic metabolism of Nitoro
somonas europaea" , J. Bacteriol., 76 ,217-222) に
加え、それぞれの物質の添加培地を調製した。これを各
添加培地ごとに３本の試験管に５ｍｌずつ分注した。
【００２９】一方下水汚泥から純粋分離した硝酸菌を培
地（表６）により７日間培養（このときの菌濃度は直接
計数で１．２×１０8 ｃｅｌｌｓ／ｍｌ）した後、この
培養液を無菌生理食塩水で１０8 〜１０10倍希釈した。
その各段階希釈液１ｍｌを上記添加培地ごとに準備した
３本の試験管にそれぞれ加えた。これらの試験管を毎分
１８０ストローク、３０℃で振とう培養した。
地（表６）により７日間培養（このときの菌濃度は直接
計数で１．２×１０8 ｃｅｌｌｓ／ｍｌ）した後、この
培養液を無菌生理食塩水で１０8 〜１０10倍希釈した。
その各段階希釈液１ｍｌを上記添加培地ごとに準備した
３本の試験管にそれぞれ加えた。これらの試験管を毎分
１８０ストローク、３０℃で振とう培養した。
【００３０】またこれと並行して、添加物質を加えない
培地（表６）を分注した３本の試験管（コントロール）
にも各段階希釈液１ｍｌをそれぞれ加え、上記と同じ条
件で培養した。
培地（表６）を分注した３本の試験管（コントロール）
にも各段階希釈液１ｍｌをそれぞれ加え、上記と同じ条
件で培養した。
【００３１】これらの試験管について５日毎に残存亜硝
酸濃度を測定した。培地の亜硝酸濃度が２０ｍｇ／ｌ以
上減少するのに要した日数と、これらの結果から求めた
最確数（ＭＰＮ）値による菌濃度推定値を表７に示し
た。
酸濃度を測定した。培地の亜硝酸濃度が２０ｍｇ／ｌ以
上減少するのに要した日数と、これらの結果から求めた
最確数（ＭＰＮ）値による菌濃度推定値を表７に示し
た。
【００３２】これより最確数（ＭＰＮ）と直接計数によ
り求めた菌濃度とは比較的よく一致した。またコントロ
ールに比べて、添加培地は所要培養日数が著しく短いこ
とが分かった。
り求めた菌濃度とは比較的よく一致した。またコントロ
ールに比べて、添加培地は所要培養日数が著しく短いこ
とが分かった。
【表６】
【表７】 注）表中の添加物質名はすべて略名である。
【００３３】
【発明の効果】（１）本発明では従来の無機化合物（亜
硝酸）による硝酸菌の培養に比べて硝化能力（亜硝酸除
去能力）が３〜６倍も向上する。 （２）起動時またはトラブル発生時の硝化装置は硝化能
力が低い。このような場合でも、本発明によれば従来と
は比較にならないほど硝化能力を迅速に向上または回復
できる。 （３）従来の方法では所要培養日数が著しく長く、迅速
な計測が行えなかった硝酸菌の菌数計測が、比較的短日
数で可能となり、硝化装置等の起動・停止または運転状
況を的確に判断することが可能となる。 （４）硝酸菌の菌数計測が比較的簡単で短日数で行える
ため、従来法で必要な多くの器具、装置及び労力の低減
が図れる。
硝酸）による硝酸菌の培養に比べて硝化能力（亜硝酸除
去能力）が３〜６倍も向上する。 （２）起動時またはトラブル発生時の硝化装置は硝化能
力が低い。このような場合でも、本発明によれば従来と
は比較にならないほど硝化能力を迅速に向上または回復
できる。 （３）従来の方法では所要培養日数が著しく長く、迅速
な計測が行えなかった硝酸菌の菌数計測が、比較的短日
数で可能となり、硝化装置等の起動・停止または運転状
況を的確に判断することが可能となる。 （４）硝酸菌の菌数計測が比較的簡単で短日数で行える
ため、従来法で必要な多くの器具、装置及び労力の低減
が図れる。
Claims (1)
- 【請求項１】 硝酸菌の硝化反応を促進させる方法にお
いて、 （１）クエン酸もしくはその塩、シスアコニット酸また
はその塩、イソクエン酸もしくはその塩、コハク酸もし
くはその塩、フマル酸もしくはその塩、リンゴ酸もしく
はその塩、グリオキシル酸またはその塩、アデノシン３
リン酸（ＡＴＰ）またはその塩、 （２）Ｌ−グルタミン酸もしくはその塩、Ｌ−アスパラ
ギン酸もしくはその塩、Ｌ−セリンもしくはその塩、 （３）α−Ｌ−ラムノース、α−Ｌ−フコース、Ｄ−グ
ルクロン酸もしくはその塩、Ｎ−アセチルグルコサミ
ン、Ｎ−アセチル−Ｄ−ムラミン酸、 （４）α−Ｌ−ラムノース１分子、Ｄ−グルクロン酸１
分子およびＤ−グルコース２分子を１ユニットとし、該
ユニットが直鎖状に重合した高分子多糖類のうち少なく
とも１種類以上の有機化合物を含む液で硝酸菌を培養す
ることを特徴とする硝酸菌の硝化反応促進方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8537091A JP2902148B2 (ja) | 1991-04-17 | 1991-04-17 | 硝酸菌の硝化反応促進方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8537091A JP2902148B2 (ja) | 1991-04-17 | 1991-04-17 | 硝酸菌の硝化反応促進方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH04317800A JPH04317800A (ja) | 1992-11-09 |
| JP2902148B2 true JP2902148B2 (ja) | 1999-06-07 |
Family
ID=13856831
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP8537091A Expired - Lifetime JP2902148B2 (ja) | 1991-04-17 | 1991-04-17 | 硝酸菌の硝化反応促進方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2902148B2 (ja) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2467025C (en) * | 2001-12-13 | 2014-05-27 | Environmental Operating Solutions, Inc. | Process and apparatus for waste water treatment |
| CN117003404B (zh) * | 2023-09-18 | 2025-07-25 | 苏州森荣环保处置有限公司 | 一种高氨氮废水处理试剂 |
-
1991
- 1991-04-17 JP JP8537091A patent/JP2902148B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH04317800A (ja) | 1992-11-09 |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 19990223 |