JP3144024B2 - （ｓ）−２−（４−クロロフェニル）−３−メチル酪酸の製造方法 - Google Patents
（ｓ）−２−（４−クロロフェニル）−３−メチル酪酸の製造方法Info
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- JP3144024B2 JP3144024B2 JP04033259A JP3325992A JP3144024B2 JP 3144024 B2 JP3144024 B2 JP 3144024B2 JP 04033259 A JP04033259 A JP 04033259A JP 3325992 A JP3325992 A JP 3325992A JP 3144024 B2 JP3144024 B2 JP 3144024B2
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Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、式化７で示される
（Ｓ）−２−（４−クロロフェニル）−３−メチル酪酸
の製造方法に関する。本発明の方法で得られる（Ｓ）−
２−（４−クロロフェニル）−３−メチル酪酸は、殺虫
剤の原料として有用な化合物である。
（Ｓ）−２−（４−クロロフェニル）−３−メチル酪酸
の製造方法に関する。本発明の方法で得られる（Ｓ）−
２−（４−クロロフェニル）−３−メチル酪酸は、殺虫
剤の原料として有用な化合物である。
【化７】
【０００２】
【従来の技術】（Ｓ）−２−（４−クロロフェニル）−
３−メチル酪酸をラセミ体の２−（４−クロロフェニ
ル）−３−メチルブチロニトリル、または２−（４−ク
ロロフェニル）−３−メチルブチルアミドから、生化学
的な作用によって製造する方法として、ブレビバクテリ
ウムを用いた方法が知られている（特開平１−２４０１
９９）。
３−メチル酪酸をラセミ体の２−（４−クロロフェニ
ル）−３−メチルブチロニトリル、または２−（４−ク
ロロフェニル）−３−メチルブチルアミドから、生化学
的な作用によって製造する方法として、ブレビバクテリ
ウムを用いた方法が知られている（特開平１−２４０１
９９）。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】現在、ブレビバクテリ
ウムを用いて（Ｓ）−２−（４−クロロフェニル）−３
−メチル酪酸を製造する方法が知られているが、その生
成率は低く、かつ得られる（Ｓ）−２−（４−クロロフ
ェニル）−３−メチル酪酸の光学純度も十分ではない。
そこで、より生成率が高く、かつ光学純度の高い（Ｓ）
−２−（４−クロロフェニル）−３−メチル酪酸が得ら
れる製造方法が求められている。
ウムを用いて（Ｓ）−２−（４−クロロフェニル）−３
−メチル酪酸を製造する方法が知られているが、その生
成率は低く、かつ得られる（Ｓ）−２−（４−クロロフ
ェニル）−３−メチル酪酸の光学純度も十分ではない。
そこで、より生成率が高く、かつ光学純度の高い（Ｓ）
−２−（４−クロロフェニル）−３−メチル酪酸が得ら
れる製造方法が求められている。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記の課
題を解決するため、２−（４−クロロフェニル）−３−
メチルブチロニトリル、または２−（４−クロロフェニ
ル）−３−メチルブチルアミドから、（Ｓ）−２−（４
−クロロフェニル）−３−メチル酪酸を効率よく生成す
る微生物を広く自然界より探索した。その結果、青森県
三沢市の土壌より分離した細菌B21C9株がそのような目
的にかなう微生物であることを見いだし、さらに検討を
重ねて本発明を完成するに至った。
題を解決するため、２−（４−クロロフェニル）−３−
メチルブチロニトリル、または２−（４−クロロフェニ
ル）−３−メチルブチルアミドから、（Ｓ）−２−（４
−クロロフェニル）−３−メチル酪酸を効率よく生成す
る微生物を広く自然界より探索した。その結果、青森県
三沢市の土壌より分離した細菌B21C9株がそのような目
的にかなう微生物であることを見いだし、さらに検討を
重ねて本発明を完成するに至った。
【発明の効果】本発明を利用することにより、常温常圧
の条件下で、短時間のうちに、微生物を用いて、ラセミ
体の２−（４−クロロフェニル）−３−メチルブチロニ
トリルまたは２−（４−クロロフェニル）−３−メチル
ブチルアミドを原料として、（Ｓ）−２−（４−クロロ
フェニル）−３−メチル酪酸を製造することができる。
すなわち、本発明によれば、ラセミ体の２−（４−クロ
ロフェニル）−３−メチルブチロニトリルまたは２−
（４−クロロフェニル）−３−メチルブチルアミドか
ら、生成率４３〜５０％で、光学純度が１００％の
（Ｓ）−２−（４−クロロフェニル）−３−メチル酪酸
を４０時間以内に得ることができる（ただし、生成率＝
（Ｓ）−２−（４−クロロフェニル）−３−メチル酪酸
／ラセミ体の２−（４−クロロフェニル）−３−メチル
ブチロニトリルまたは２−（４−クロロフェニル）−３
−メチルブチルアミド×１００と定義する。）ので、本
発明は、産業上非常に有効である。以下。本発明を更に
詳細に説明する。すなわち、本発明は、シュードモナス
属に属し、式化８で示される２−（４−クロロフェニ
ル）−３−メチルブチロニトリル、または式化９で示さ
れる２−（４−クロロフェニル）−３−メチルブチルア
ミドを、式化１０で示される（Ｓ）−２−（４−クロロ
フェニル）−３−メチル酪酸へと変換する能力を有する
微生物を用いることを特徴とする（Ｓ）−２−（４−ク
ロロフェニル）−３−メチル酪酸の製造に関する。
の条件下で、短時間のうちに、微生物を用いて、ラセミ
体の２−（４−クロロフェニル）−３−メチルブチロニ
トリルまたは２−（４−クロロフェニル）−３−メチル
ブチルアミドを原料として、（Ｓ）−２−（４−クロロ
フェニル）−３−メチル酪酸を製造することができる。
すなわち、本発明によれば、ラセミ体の２−（４−クロ
ロフェニル）−３−メチルブチロニトリルまたは２−
（４−クロロフェニル）−３−メチルブチルアミドか
ら、生成率４３〜５０％で、光学純度が１００％の
（Ｓ）−２−（４−クロロフェニル）−３−メチル酪酸
を４０時間以内に得ることができる（ただし、生成率＝
（Ｓ）−２−（４−クロロフェニル）−３−メチル酪酸
／ラセミ体の２−（４−クロロフェニル）−３−メチル
ブチロニトリルまたは２−（４−クロロフェニル）−３
−メチルブチルアミド×１００と定義する。）ので、本
発明は、産業上非常に有効である。以下。本発明を更に
詳細に説明する。すなわち、本発明は、シュードモナス
属に属し、式化８で示される２−（４−クロロフェニ
ル）−３−メチルブチロニトリル、または式化９で示さ
れる２−（４−クロロフェニル）−３−メチルブチルア
ミドを、式化１０で示される（Ｓ）−２−（４−クロロ
フェニル）−３−メチル酪酸へと変換する能力を有する
微生物を用いることを特徴とする（Ｓ）−２−（４−ク
ロロフェニル）−３−メチル酪酸の製造に関する。
【化８】
【化９】
【化１０】
【０００５】本発明で使用する微生物は、シュードモナ
ス属に属し、２−（４−クロロフェニル）−３−メチル
ブチロニトリル、または２−（４−クロロフェニル）−
３−メチルブチルアミドを、（Ｓ）−２−（４−クロロ
フェニル）−３−メチル酪酸へと変換する能力を有する
微生物である。特に好適なものとして、本明細書に記載
のシュードモナス・エスピー(Pseudomonas sp.)B21C9株
（微工研条寄第３７３７号）が挙げられる。本菌株の菌
学的性質は以下に示すとおりである。 （ａ）形態 1) 細胞の形および大きさ： 形 ； 桿状 大きさ ； ０. ５〜０. ８×０. ８〜２μｍ 2) 細胞の多形性の有無： 無 3) 運動性の有無 ： 有、極鞭毛 4) 胞子の有無 ： 無 5) グラム染色 ： 陰性 6) 抗酸性 ： 無 （ｂ）生育状態 1) 肉汁寒天平板培養 ：周円、凸状、光沢有、薄茶
色 2) 肉汁寒天斜面培養 ：光沢有、薄茶色 3) 肉汁液体培養 ：一様に混濁して生育 4) 肉汁ゼラチン穿刺培養：液化しない 5) リトマスミルク ：凝固せず、青変する （ｃ）生理学的性質 1) 硝酸塩の還元 ： ＋ 2) 脱窒反応 ： − 3) ＭＲテスト ： − 4) ＶＰテスト ： − 5) インドールの生成 ： − 6) 硫化水素の生成 ： ＋ 7) デンプンの加水分解 ： − 8) クエン酸の利用 ：コーサー の培地 ； ＋ クリスチャンセン の培地 ； ＋ 9) 無機窒素源の利用 ： NaNO3 ； ＋ (NH4)2SO4 ； ＋ 10) 色素の生成 ： キングＡ培地 ； − キングＢ培地 ； ＋ （蛍光色素） 11) ウレアーゼ ： ＋ 12) オキシダーゼ ： ＋ 13) カタラーゼ ： ＋ 14) 生育の範囲 ： ｐＨ ； ５. １〜８. ８ 温度 ； ３〜３９℃ 15) 酸素に対する態度 ： 好気性 16) Ｏ−Ｆテスト ： Ｏ （ｄ）その他の性質 1) ポリ−β−ヒドロキシ酪酸の蓄積：＋ 2) アルギニンジヒドロラーゼ ：＋ 3) ＧＣ含量 ： ６１. ２％
ス属に属し、２−（４−クロロフェニル）−３−メチル
ブチロニトリル、または２−（４−クロロフェニル）−
３−メチルブチルアミドを、（Ｓ）−２−（４−クロロ
フェニル）−３−メチル酪酸へと変換する能力を有する
微生物である。特に好適なものとして、本明細書に記載
のシュードモナス・エスピー(Pseudomonas sp.)B21C9株
（微工研条寄第３７３７号）が挙げられる。本菌株の菌
学的性質は以下に示すとおりである。 （ａ）形態 1) 細胞の形および大きさ： 形 ； 桿状 大きさ ； ０. ５〜０. ８×０. ８〜２μｍ 2) 細胞の多形性の有無： 無 3) 運動性の有無 ： 有、極鞭毛 4) 胞子の有無 ： 無 5) グラム染色 ： 陰性 6) 抗酸性 ： 無 （ｂ）生育状態 1) 肉汁寒天平板培養 ：周円、凸状、光沢有、薄茶
色 2) 肉汁寒天斜面培養 ：光沢有、薄茶色 3) 肉汁液体培養 ：一様に混濁して生育 4) 肉汁ゼラチン穿刺培養：液化しない 5) リトマスミルク ：凝固せず、青変する （ｃ）生理学的性質 1) 硝酸塩の還元 ： ＋ 2) 脱窒反応 ： − 3) ＭＲテスト ： − 4) ＶＰテスト ： − 5) インドールの生成 ： − 6) 硫化水素の生成 ： ＋ 7) デンプンの加水分解 ： − 8) クエン酸の利用 ：コーサー の培地 ； ＋ クリスチャンセン の培地 ； ＋ 9) 無機窒素源の利用 ： NaNO3 ； ＋ (NH4)2SO4 ； ＋ 10) 色素の生成 ： キングＡ培地 ； − キングＢ培地 ； ＋ （蛍光色素） 11) ウレアーゼ ： ＋ 12) オキシダーゼ ： ＋ 13) カタラーゼ ： ＋ 14) 生育の範囲 ： ｐＨ ； ５. １〜８. ８ 温度 ； ３〜３９℃ 15) 酸素に対する態度 ： 好気性 16) Ｏ−Ｆテスト ： Ｏ （ｄ）その他の性質 1) ポリ−β−ヒドロキシ酪酸の蓄積：＋ 2) アルギニンジヒドロラーゼ ：＋ 3) ＧＣ含量 ： ６１. ２％
【０００６】以上の諸性質をバージーの細菌分類書（Be
rgey's Manual of Systematic Bac-teriology）によ
り、検索すると、属としてシュードモナス属に属するこ
とがわかるものの、種で一致するものは記載されていな
い。また、ニトリル化合物を変換する活性を有すると報
告されている既知のシュードモナス属菌株（特公昭５９
−３７９５１、特公昭６２−２５７３８６）にも一致す
るものはない。よって、本発明者らは、本菌株をシュー
ドモナスに属する新菌株であると同定し、シュードモナ
ス・エスピー（Pseudomonase sp.）B21C9と命名した。
本菌株は、工業技術院微生物工業技術研究所に微工研条
寄第３７３７号（FERMBP-３７３７）として寄託されて
いる。
rgey's Manual of Systematic Bac-teriology）によ
り、検索すると、属としてシュードモナス属に属するこ
とがわかるものの、種で一致するものは記載されていな
い。また、ニトリル化合物を変換する活性を有すると報
告されている既知のシュードモナス属菌株（特公昭５９
−３７９５１、特公昭６２−２５７３８６）にも一致す
るものはない。よって、本発明者らは、本菌株をシュー
ドモナスに属する新菌株であると同定し、シュードモナ
ス・エスピー（Pseudomonase sp.）B21C9と命名した。
本菌株は、工業技術院微生物工業技術研究所に微工研条
寄第３７３７号（FERMBP-３７３７）として寄託されて
いる。
【０００７】本発明に用いる菌株の培養は、シュードモ
ナス属微生物の培養に常用される炭素源、窒素源、無機
物等を含む各種の培地を使用することができる。炭素源
としては、グルコース、グリセリン、糖蜜などである。
窒素源としては、ペプトン、酵母エキス、大豆粉、コー
ンスティープリカー、綿実粉、乾燥酵母、カザミノ酸、
塩化アンモニウム、硝酸アンモニウム、硫酸アンモニウ
ム、尿素などである。無機物としては、カリウム、ナト
リウム、マグネシウム、鉄、マンガン等の塩類、および
リン酸塩類、たとえば塩化カリウム、塩化ナトリウム、
硫酸マグネシウム、硫酸第一鉄、硫酸マンガン、リン酸
カリウム、リン酸ナトリウムなどである。また、本発明
における反応活性を促進する物質として、クロトノニト
リル等のシアノ化合物、クロトンアミド等のアミド化合
物を添加してもよい。培養は、通常、好気的におこなわ
れ、通気攪拌培養が適当である。培養温度は、２０〜３
５℃、好ましくは、２５〜３０℃で、ｐＨは６〜８が好
ましい。培養時間は、種々の条件によって異なるが、１
〜３日間程度が好ましい。
ナス属微生物の培養に常用される炭素源、窒素源、無機
物等を含む各種の培地を使用することができる。炭素源
としては、グルコース、グリセリン、糖蜜などである。
窒素源としては、ペプトン、酵母エキス、大豆粉、コー
ンスティープリカー、綿実粉、乾燥酵母、カザミノ酸、
塩化アンモニウム、硝酸アンモニウム、硫酸アンモニウ
ム、尿素などである。無機物としては、カリウム、ナト
リウム、マグネシウム、鉄、マンガン等の塩類、および
リン酸塩類、たとえば塩化カリウム、塩化ナトリウム、
硫酸マグネシウム、硫酸第一鉄、硫酸マンガン、リン酸
カリウム、リン酸ナトリウムなどである。また、本発明
における反応活性を促進する物質として、クロトノニト
リル等のシアノ化合物、クロトンアミド等のアミド化合
物を添加してもよい。培養は、通常、好気的におこなわ
れ、通気攪拌培養が適当である。培養温度は、２０〜３
５℃、好ましくは、２５〜３０℃で、ｐＨは６〜８が好
ましい。培養時間は、種々の条件によって異なるが、１
〜３日間程度が好ましい。
【０００８】本発明において、前述の培養菌体を用いた
（Ｓ）−２−（４−クロロフェニル）−３−メチル酪
酸）の製造は次のようにしておこなわれる。前述の方法
で、１〜３日菌体を培養した培養液、あるいは培養液か
ら分離した菌体を水またはｐＨ６〜９のリン酸バッファ
ーあるいはトリス−塩酸等の緩衝液に懸濁し、これに２
−（４−クロロフェニル）−３−メチルブチロニトリ
ル、または２−（４−クロロフェニル）−３−メチルブ
チルアミドを添加し、反応を行う。菌体の濃度は、０．
０１〜１０重量％が適当である。 ２−（４−クロロフ
ェニル）−３−メチルブチロニトリル、または２−（４
−クロロフェニル）−３−メチルブチルアミドの添加濃
度は、０．０１〜１０重量％程度、好ましくは０．１〜
５重量％である。それらは液状または粉末のまま添加す
ることが可能であり、また反応液中に完全に溶解しなく
てもよい。反応中は、反応液を任意の方法で攪拌し、分
散させることが好ましい。例えば、通常よく用いられる
攪拌器、あるいは往復震盪器等を利用することができ
る。反応温度は、１５〜６５℃、好ましくは２０〜４０
℃、反応ｐＨは４〜１１、好ましくは６〜９である。反
応は通常１〜４０時間の範囲で十分である。（Ｓ）−２
−（４−クロロフェニル）−３−メチル酪酸の生成率が
５０％に達した以降に反応を停止することが最も好まし
い。しかしながら、生成率が５０％に達する前に反応を
停止した場合にも、生成された（Ｓ）−２−（４−クロ
ロフェニル）−３−メチル酪酸の光学純度に問題はな
く、また反応時間を延長しても、生成された（Ｓ）−２
−（４−クロロフェニル）−３−メチル酪酸の光学純度
に問題はないので、反応時間を任意に設定することが可
能である。反応終了後の反応液から（Ｓ）−２−（４−
クロロフェニル）−３−メチル酪酸の回収は、反応液に
塩酸を添加してｐＨを１〜２としたのち、適当な溶媒で
反応生成物、未反応基質および中間体を抽出後、シリカ
ゲルグロマトグラフィーを用いて、反応生成物である
（Ｓ）−２−（４−クロロフェニル）−３−メチル酪酸
を回収する方法等により行うことが可能である。
（Ｓ）−２−（４−クロロフェニル）−３−メチル酪
酸）の製造は次のようにしておこなわれる。前述の方法
で、１〜３日菌体を培養した培養液、あるいは培養液か
ら分離した菌体を水またはｐＨ６〜９のリン酸バッファ
ーあるいはトリス−塩酸等の緩衝液に懸濁し、これに２
−（４−クロロフェニル）−３−メチルブチロニトリ
ル、または２−（４−クロロフェニル）−３−メチルブ
チルアミドを添加し、反応を行う。菌体の濃度は、０．
０１〜１０重量％が適当である。 ２−（４−クロロフ
ェニル）−３−メチルブチロニトリル、または２−（４
−クロロフェニル）−３−メチルブチルアミドの添加濃
度は、０．０１〜１０重量％程度、好ましくは０．１〜
５重量％である。それらは液状または粉末のまま添加す
ることが可能であり、また反応液中に完全に溶解しなく
てもよい。反応中は、反応液を任意の方法で攪拌し、分
散させることが好ましい。例えば、通常よく用いられる
攪拌器、あるいは往復震盪器等を利用することができ
る。反応温度は、１５〜６５℃、好ましくは２０〜４０
℃、反応ｐＨは４〜１１、好ましくは６〜９である。反
応は通常１〜４０時間の範囲で十分である。（Ｓ）−２
−（４−クロロフェニル）−３−メチル酪酸の生成率が
５０％に達した以降に反応を停止することが最も好まし
い。しかしながら、生成率が５０％に達する前に反応を
停止した場合にも、生成された（Ｓ）−２−（４−クロ
ロフェニル）−３−メチル酪酸の光学純度に問題はな
く、また反応時間を延長しても、生成された（Ｓ）−２
−（４−クロロフェニル）−３−メチル酪酸の光学純度
に問題はないので、反応時間を任意に設定することが可
能である。反応終了後の反応液から（Ｓ）−２−（４−
クロロフェニル）−３−メチル酪酸の回収は、反応液に
塩酸を添加してｐＨを１〜２としたのち、適当な溶媒で
反応生成物、未反応基質および中間体を抽出後、シリカ
ゲルグロマトグラフィーを用いて、反応生成物である
（Ｓ）−２−（４−クロロフェニル）−３−メチル酪酸
を回収する方法等により行うことが可能である。
【０００９】
【実施例】次に、本発明の実施例を示すが、この実施例
は単なる一例を示すものであって、本発明を限定するも
のではない。
は単なる一例を示すものであって、本発明を限定するも
のではない。
【００１０】実施例１ グリセロール１％、ポリペプトン０. ５％、酵母エキス
０. ３％、マルトエキス０. ３％を含み、ｐＨを７. ２
とした殺菌培地４００ｍｌに、あらかじめ同培地で培養
したシュードモナス・エスピーB21C9株を１％植菌し、
２６℃で２日間振とう培養した。培養後、遠心分離にて
菌体を集め、これに０. １Ｍリン酸バッファー（ｐＨ
７. ０）４０ｍｌを加えて懸濁させた後、ラセミ体の２
−（４−クロロフェニル）−３−メチルブチロニトリル
（６０ｍｇ，３００μモル）を加え、２６℃、５００ｒ
ｐｍの攪拌で反応をおこなった。２０時間後に反応を終
了し、遠心分離により菌体を除去した後、その上清に４
８ｍｌのアセトニトリルを添加し、反応混液の組成およ
び含量をガスクロマトグラフィーにより測定した。次い
で、反応混液を乾燥するまで蒸発させた後、残分をヘキ
サンとエタノールの混合物（容量比で４：１，１ｍｌ）
で溶出した。溶出された反応生成物の光学純度を、以下
の条件の高速液体クロマトグラフィーにより測定した。 カラム； SUMIPAX OA-4500 (5μ,4mm I.D.x25cm) 溶媒 ； n-ヘキサン/1,2-シ゛クロロエタン/エタノール /酢酸 (350/150
/0.5/0.1) 流速 ； 1.0ml/min 検出 ； UV (254nm) 反応混液に含まれた反応生成物の生成量と光学純度を表
１に示す。
０. ３％、マルトエキス０. ３％を含み、ｐＨを７. ２
とした殺菌培地４００ｍｌに、あらかじめ同培地で培養
したシュードモナス・エスピーB21C9株を１％植菌し、
２６℃で２日間振とう培養した。培養後、遠心分離にて
菌体を集め、これに０. １Ｍリン酸バッファー（ｐＨ
７. ０）４０ｍｌを加えて懸濁させた後、ラセミ体の２
−（４−クロロフェニル）−３−メチルブチロニトリル
（６０ｍｇ，３００μモル）を加え、２６℃、５００ｒ
ｐｍの攪拌で反応をおこなった。２０時間後に反応を終
了し、遠心分離により菌体を除去した後、その上清に４
８ｍｌのアセトニトリルを添加し、反応混液の組成およ
び含量をガスクロマトグラフィーにより測定した。次い
で、反応混液を乾燥するまで蒸発させた後、残分をヘキ
サンとエタノールの混合物（容量比で４：１，１ｍｌ）
で溶出した。溶出された反応生成物の光学純度を、以下
の条件の高速液体クロマトグラフィーにより測定した。 カラム； SUMIPAX OA-4500 (5μ,4mm I.D.x25cm) 溶媒 ； n-ヘキサン/1,2-シ゛クロロエタン/エタノール /酢酸 (350/150
/0.5/0.1) 流速 ； 1.0ml/min 検出 ； UV (254nm) 反応混液に含まれた反応生成物の生成量と光学純度を表
１に示す。
【表1 】
【００１１】実施例２ 実施例１に記載した方法で調製した菌体懸濁液４０ｍＬ
に、ラセミ体の２−（４−クロロフェニル）−３−メチ
ルブチルアミド（６３ｍｇ，３００μモル）を加え、３
６℃、５００ｒｐｍで反応をおこなった。４０時間目に
反応を終了した後、実施例１に記載した方法で、反応混
液の組成、反応生成物の生成量および光学純度を測定し
た。反応混液は、２−（４−クロロフェニル）−３−メ
チル酪酸を生成物として、１５０μモル含み、そのＳ体
とＲ体の比率は、１００対０であった。
に、ラセミ体の２−（４−クロロフェニル）−３−メチ
ルブチルアミド（６３ｍｇ，３００μモル）を加え、３
６℃、５００ｒｐｍで反応をおこなった。４０時間目に
反応を終了した後、実施例１に記載した方法で、反応混
液の組成、反応生成物の生成量および光学純度を測定し
た。反応混液は、２−（４−クロロフェニル）−３−メ
チル酪酸を生成物として、１５０μモル含み、そのＳ体
とＲ体の比率は、１００対０であった。
【００１２】実施例３ グリセロール１％、ポリペプトン０. ５％、酵母エキス
０. ３％、マルトエキス０. ３％、クロトンアミド０.
２５％を含み、ｐＨを７. ２とした殺菌培地４００ｍｌ
に、あらかじめ同培地で培養したシュードモナス・エス
ピーB21C9株を１％植菌し、２６℃で２日間培養した。
以下、実施例１に記載した方法で、菌体懸濁液の調製、
反応をおこない、反応混液の組成、反応生成物の生成量
および光学純度を測定した。結果を表２に示す。
０. ３％、マルトエキス０. ３％、クロトンアミド０.
２５％を含み、ｐＨを７. ２とした殺菌培地４００ｍｌ
に、あらかじめ同培地で培養したシュードモナス・エス
ピーB21C9株を１％植菌し、２６℃で２日間培養した。
以下、実施例１に記載した方法で、菌体懸濁液の調製、
反応をおこない、反応混液の組成、反応生成物の生成量
および光学純度を測定した。結果を表２に示す。
【表２】
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ Ｃ１２Ｒ 1:38） (72)発明者 光田 賢 兵庫県宝塚市高司４丁目２番１号 住友 化学工業株式会社内 (56)参考文献 特開 平２−84198（ＪＰ，Ａ) 特表 平６−506343（ＪＰ，Ａ) 国際公開92／1062（ＷＯ，Ａ１) (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) C12P 7/40 C12N 1/20 ＣＡ（ＳＴＮ) ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ)
Claims (2)
- 【請求項１】式化１で示される２−（４−クロロフェニ
ル）−３−メチルブチロニトリル、または式化２で示さ
れる２−（４−クロロフェニル）−３−メチルブチルア
ミドにシュードモナス・エスピー（Pseudomonas sp.）
B21C9株（微工研条寄第３７３７号）を作用させて、式
化３で示される（Ｓ）−２−（４−クロロフェニル）−
３−メチル酪酸を生成させることを特徴とする、（Ｓ）
−２−（４−クロロフェニル）−３−メチル酪酸の製造
方法。 【化１】 【化２】 【化３】 - 【請求項２】式化４で示される２−（４−クロロフェニ
ル）−３−メチルブチロニトリル、または式化５で示さ
れる２−（４−クロロフェニル）−３−メチルブチルア
ミドを式化６で示される（Ｓ）−２−（４−クロロフェ
ニル）−３−メチル酪酸へ変換する活性を有するシュー
ドモナス・エスピー（Pseudomonas sp.）B21C9株（微
工研条寄第３７３７号）。 【化４】 【化５】 【化６】
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP04033259A JP3144024B2 (ja) | 1992-02-20 | 1992-02-20 | （ｓ）−２−（４−クロロフェニル）−３−メチル酪酸の製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP04033259A JP3144024B2 (ja) | 1992-02-20 | 1992-02-20 | （ｓ）−２−（４−クロロフェニル）−３−メチル酪酸の製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH05227981A JPH05227981A (ja) | 1993-09-07 |
| JP3144024B2 true JP3144024B2 (ja) | 2001-03-07 |
Family
ID=12381519
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP04033259A Expired - Fee Related JP3144024B2 (ja) | 1992-02-20 | 1992-02-20 | （ｓ）−２−（４−クロロフェニル）−３−メチル酪酸の製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3144024B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6619037B1 (en) | 1999-01-19 | 2003-09-16 | Hitachi Construction Machinery Co., Ltd. | Hydraulic driving device of civil engineering and construction machinery |
-
1992
- 1992-02-20 JP JP04033259A patent/JP3144024B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6619037B1 (en) | 1999-01-19 | 2003-09-16 | Hitachi Construction Machinery Co., Ltd. | Hydraulic driving device of civil engineering and construction machinery |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH05227981A (ja) | 1993-09-07 |
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