JP3144513B2 - 蛍光顕微鏡 - Google Patents
蛍光顕微鏡Info
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Landscapes
- Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
- Microscoopes, Condenser (AREA)
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は蛍光顕微鏡に関し、詳細
には励起光により発せられた蛍光の３次元画像を再構成
する顕微鏡に関するものである。
には励起光により発せられた蛍光の３次元画像を再構成
する顕微鏡に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】従来より、特に医学・生物学の分野にお
いて、検体の内部より発せられる蛍光を無侵襲（非破
壊）で観察したいという強い要望がある。これは例えば
生体内において発光する蛍光の挙動を観察することが、
その蛍光と相関を有する生理的機能を解明する重要な手
掛りとなるためである。
いて、検体の内部より発せられる蛍光を無侵襲（非破
壊）で観察したいという強い要望がある。これは例えば
生体内において発光する蛍光の挙動を観察することが、
その蛍光と相関を有する生理的機能を解明する重要な手
掛りとなるためである。
【０００３】近年レーザ技術、微弱光検出技術等の発達
により、この検体内部の蛍光を無侵襲で計測し得る技術
が種々開発されている。例えば反射型レーザ走査顕微鏡
は、検体の任意の深さにおける蛍光を共焦点光学系によ
って検出することによりその深さにおける断面内の蛍光
（２次元情報）を観察することを可能にしており、複数
の深さにおける蛍光の像の２次元情報に基づいてその検
体内部の蛍光の像を３次元的に再構成することが可能で
ある。
により、この検体内部の蛍光を無侵襲で計測し得る技術
が種々開発されている。例えば反射型レーザ走査顕微鏡
は、検体の任意の深さにおける蛍光を共焦点光学系によ
って検出することによりその深さにおける断面内の蛍光
（２次元情報）を観察することを可能にしており、複数
の深さにおける蛍光の像の２次元情報に基づいてその検
体内部の蛍光の像を３次元的に再構成することが可能で
ある。
【０００４】一方、通常の光学顕微鏡によれば、フォー
カス面を移動しつつ、各観察蛍光像の情報を収集し、得
られた複数の蛍光画像情報より非焦点面からの画像情報
を、顕微鏡光学系の点像分布関数(PSF:Point Spread Fu
nction）を用いて除去し、検体内部の蛍光の像を３次元
的に再構成することができる。
カス面を移動しつつ、各観察蛍光像の情報を収集し、得
られた複数の蛍光画像情報より非焦点面からの画像情報
を、顕微鏡光学系の点像分布関数(PSF:Point Spread Fu
nction）を用いて除去し、検体内部の蛍光の像を３次元
的に再構成することができる。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】ところで上記反射型レ
ーザ走査顕微鏡は、光学系の光軸方向についても高い分
解能を有するものの蛍光の像を３次元的に再構成するた
めには多くの断面情報を収集する必要があり、データ収
集時間が長くかかるという問題がある。
ーザ走査顕微鏡は、光学系の光軸方向についても高い分
解能を有するものの蛍光の像を３次元的に再構成するた
めには多くの断面情報を収集する必要があり、データ収
集時間が長くかかるという問題がある。
【０００６】一方、通常の光学顕微鏡を用い、顕微鏡の
点像分布関数により検体の内部の蛍光の像を３次元的に
再構成する方法は、光学系の光軸方向の分解能が面内精
度ほど高精度でないという難点がある。
点像分布関数により検体の内部の蛍光の像を３次元的に
再構成する方法は、光学系の光軸方向の分解能が面内精
度ほど高精度でないという難点がある。
【０００７】本発明は上記事情に鑑みなされたものであ
って、検体内の蛍光の３次元像（立体像）を高精度に、
かつ効率よく得る蛍光顕微鏡を提供することを目的とす
るものである。
って、検体内の蛍光の３次元像（立体像）を高精度に、
かつ効率よく得る蛍光顕微鏡を提供することを目的とす
るものである。
【０００８】
【課題を解決するための手段】本発明の蛍光顕微鏡は、
検体内部の蛍光物質に集光された励起光が蛍光物質を励
起し、その励起により発光する蛍光のうち、励起光の光
束から外れた蛍光を複数の異なる方向より集光すること
により複数の蛍光の像を１回の操作で得、この得られた
複数の蛍光の像に基づいて蛍光の像を３次元的に再構成
することを特徴とするものである。
検体内部の蛍光物質に集光された励起光が蛍光物質を励
起し、その励起により発光する蛍光のうち、励起光の光
束から外れた蛍光を複数の異なる方向より集光すること
により複数の蛍光の像を１回の操作で得、この得られた
複数の蛍光の像に基づいて蛍光の像を３次元的に再構成
することを特徴とするものである。
【０００９】すなわち請求項１に記載したように、蛍光
物質を有する検体に該蛍光物質を励起する励起光を照射
する励起光照射手段と、該検体に対向して設けられ、前
記励起光の励起により該蛍光物質より種々の互いに異な
る方向に発せられた蛍光のうち、前記励起光の光束から
外れた方向に発せられた蛍光を、１点に集光せしめる少
なくとも１つの対物レンズと、該対物レンズにより前記
１点に集光せしめられたのち発散する前記蛍光のうち互
いに異なる方向に進む蛍光を受けてそれぞれ結像する少
なくとも２つの結像レンズと、該少なくとも２つの結像
レンズによりそれぞれ結像された蛍光の像の位置に配さ
れて、該蛍光の像を撮像する少なくとも２つの撮像手段
と、該少なくとも２つの撮像手段によりそれぞれ撮像さ
れた少なくとも２つの前記蛍光の像に基づいて、前記蛍
光の３次元像を再構成する再構成手段とを備えてなるこ
とを特徴とするものである。
物質を有する検体に該蛍光物質を励起する励起光を照射
する励起光照射手段と、該検体に対向して設けられ、前
記励起光の励起により該蛍光物質より種々の互いに異な
る方向に発せられた蛍光のうち、前記励起光の光束から
外れた方向に発せられた蛍光を、１点に集光せしめる少
なくとも１つの対物レンズと、該対物レンズにより前記
１点に集光せしめられたのち発散する前記蛍光のうち互
いに異なる方向に進む蛍光を受けてそれぞれ結像する少
なくとも２つの結像レンズと、該少なくとも２つの結像
レンズによりそれぞれ結像された蛍光の像の位置に配さ
れて、該蛍光の像を撮像する少なくとも２つの撮像手段
と、該少なくとも２つの撮像手段によりそれぞれ撮像さ
れた少なくとも２つの前記蛍光の像に基づいて、前記蛍
光の３次元像を再構成する再構成手段とを備えてなるこ
とを特徴とするものである。
【００１０】ここで上記蛍光物質を有する検体とは、検
体自体がもともと蛍光物質を含有するものであってもよ
いし、あるいは、検体が有する特定の物質の挙動を追跡
するためにその特定の物質の挙動と相関関係を有する蛍
光物質を外部より与えられたものであってもよい。
体自体がもともと蛍光物質を含有するものであってもよ
いし、あるいは、検体が有する特定の物質の挙動を追跡
するためにその特定の物質の挙動と相関関係を有する蛍
光物質を外部より与えられたものであってもよい。
【００１１】また上記励起光は、検体に対して対物レン
ズの存する側と同一の側から検体を照射するものであっ
てもよいし、逆の側から検体を照射するものであっても
よい。
ズの存する側と同一の側から検体を照射するものであっ
てもよいし、逆の側から検体を照射するものであっても
よい。
【００１２】
【作用および発明の効果】本発明の蛍光顕微鏡によれ
ば、励起光照射手段により励起光が照射された検体内の
蛍光物質は、励起光のエネルギにより励起されて蛍光を
発する。この蛍光のうち励起光の光束から外れた蛍光が
少なくとも１つの対物レンズにより１点に集光される。
対物レンズは励起光の光束から外れた蛍光を集光するた
め、励起光は対物レンズに入射しない。
ば、励起光照射手段により励起光が照射された検体内の
蛍光物質は、励起光のエネルギにより励起されて蛍光を
発する。この蛍光のうち励起光の光束から外れた蛍光が
少なくとも１つの対物レンズにより１点に集光される。
対物レンズは励起光の光束から外れた蛍光を集光するた
め、励起光は対物レンズに入射しない。
【００１３】対物レンズにより１点に集光された蛍光は
そののち発散し、この発散された励起光は空間的に互い
に異なる位置に配された少なくとも２つの結像レンズに
よりそれぞれ異なる位置に結像される。この互いに異な
る位置に結像された少なくとも２つの像は検体内の１点
より発せられた蛍光を、少なくとも２つの異なる方向か
らそれぞれ観察される像を示すものである。
そののち発散し、この発散された励起光は空間的に互い
に異なる位置に配された少なくとも２つの結像レンズに
よりそれぞれ異なる位置に結像される。この互いに異な
る位置に結像された少なくとも２つの像は検体内の１点
より発せられた蛍光を、少なくとも２つの異なる方向か
らそれぞれ観察される像を示すものである。
【００１４】このように互いに異なる位置に結像された
少なくとも２つの像は、それらの結像位置にそれぞれ配
された撮像手段に検出される。各撮像手段によりそれぞ
れ検出された少なくとも２つの蛍光の像は再構成手段に
入力され、再構成手段は、各撮像手段の位置、各結像レ
ンズの位置、および入力された各蛍光の像の情報に基づ
いて、ＣＴ手法によりこの蛍光の像を３次元的に再構成
する。
少なくとも２つの像は、それらの結像位置にそれぞれ配
された撮像手段に検出される。各撮像手段によりそれぞ
れ検出された少なくとも２つの蛍光の像は再構成手段に
入力され、再構成手段は、各撮像手段の位置、各結像レ
ンズの位置、および入力された各蛍光の像の情報に基づ
いて、ＣＴ手法によりこの蛍光の像を３次元的に再構成
する。
【００１５】上述のように本発明の蛍光顕微鏡は、検体
内の１点より発せられた蛍光を、互いに異なる少なくと
も２つ方向から撮像し、得られた複数の２次元画像情報
に基づいて蛍光の３次元像を再構成しているため、顕微
鏡の光学系の光軸方向についても高分解能であり、また
１回の操作で所望の蛍光の立体像を得ることができ、デ
ータ収集時間も大巾に短縮することができる。
内の１点より発せられた蛍光を、互いに異なる少なくと
も２つ方向から撮像し、得られた複数の２次元画像情報
に基づいて蛍光の３次元像を再構成しているため、顕微
鏡の光学系の光軸方向についても高分解能であり、また
１回の操作で所望の蛍光の立体像を得ることができ、デ
ータ収集時間も大巾に短縮することができる。
【００１６】
【実施例】以下、図面を用いて本発明にかかる蛍光顕微
鏡の実施例について説明する。
鏡の実施例について説明する。
【００１７】図１(a) は本発明の蛍光顕微鏡の第１の実
施例の構成を示す概略構成図である。図示の蛍光顕微鏡
は、図示しない励起光源より出射した励起光ａ1 を、ス
ライドガラス15上に配された蛍光物質（図示せず）を有
する試料10内の１点に集光せしめる暗視野コンデンサレ
ンズ21と、試料10に対して暗視野コンデンサレンズ21と
逆の側に、試料10に対向して設けられ、励起光ａ1 の励
起によって発せられた試料10内部の蛍光のうち、蛍光物
質を励起したのちの励起光ａ2 の光束から外れた方向へ
伝搬する蛍光ｂを集光点Ａに集光せしめる対物レンズ22
と、この対物レンズ22により集光点Ａに集光せしめられ
たのち発散する蛍光ｂのうち、互いに異なる方向に伝搬
する蛍光ｂ1 ，ｂ2 ，……，ｂ9 を各別に受けて、各蛍
光ｂ1 ，ｂ2 ，……，ｂ9 の像を結像する９個の結像レ
ンズ31と、これら各結像レンズ31の像面Ｋに沿って配さ
れ、これらの結像レンズにより各別に結像される蛍光ｂ
1 ，ｂ2 ，……，ｂ9 の２次元画像を各別に撮像する９
個のＣＣＤ撮像素子41と、これらＣＣＤ撮像素子41によ
りそれぞれ撮像された蛍光ｂ1 ，ｂ2 ，……，ｂ9 の２
次元画像に基づいて試料10内において発光する蛍光の３
次元画像を再構成する再構成手段51とを備えている。
施例の構成を示す概略構成図である。図示の蛍光顕微鏡
は、図示しない励起光源より出射した励起光ａ1 を、ス
ライドガラス15上に配された蛍光物質（図示せず）を有
する試料10内の１点に集光せしめる暗視野コンデンサレ
ンズ21と、試料10に対して暗視野コンデンサレンズ21と
逆の側に、試料10に対向して設けられ、励起光ａ1 の励
起によって発せられた試料10内部の蛍光のうち、蛍光物
質を励起したのちの励起光ａ2 の光束から外れた方向へ
伝搬する蛍光ｂを集光点Ａに集光せしめる対物レンズ22
と、この対物レンズ22により集光点Ａに集光せしめられ
たのち発散する蛍光ｂのうち、互いに異なる方向に伝搬
する蛍光ｂ1 ，ｂ2 ，……，ｂ9 を各別に受けて、各蛍
光ｂ1 ，ｂ2 ，……，ｂ9 の像を結像する９個の結像レ
ンズ31と、これら各結像レンズ31の像面Ｋに沿って配さ
れ、これらの結像レンズにより各別に結像される蛍光ｂ
1 ，ｂ2 ，……，ｂ9 の２次元画像を各別に撮像する９
個のＣＣＤ撮像素子41と、これらＣＣＤ撮像素子41によ
りそれぞれ撮像された蛍光ｂ1 ，ｂ2 ，……，ｂ9 の２
次元画像に基づいて試料10内において発光する蛍光の３
次元画像を再構成する再構成手段51とを備えている。
【００１８】上記ＣＣＤ撮像素子41は図１(b) に示すよ
うに結像面Ｋ内において、ほぼ正八角形の各頂点および
中心に位置するように配され、結像レンズ31についても
同様の配置である。
うに結像面Ｋ内において、ほぼ正八角形の各頂点および
中心に位置するように配され、結像レンズ31についても
同様の配置である。
【００１９】また上記対物レンズ22は開口数ＮＡの値が
大きいものが望ましい。
大きいものが望ましい。
【００２０】次に本実施例の作用について説明する。
【００２１】図示しない励起光源より出射した励起光ａ
1 は暗視野コンデンサレンズ21に入射し、コンデンサレ
ンズ21内で反射を繰り返し、油浸およびスライドガラス
16を介して、スライドガラス16上に配された試料10内の
蛍光物質に集光し、その後発散して試料10より出射す
る。この励起光ａ1 の光束が試料10を出射する際の光束
と対物レンズ22の光軸とがなす角度はαである。
1 は暗視野コンデンサレンズ21に入射し、コンデンサレ
ンズ21内で反射を繰り返し、油浸およびスライドガラス
16を介して、スライドガラス16上に配された試料10内の
蛍光物質に集光し、その後発散して試料10より出射す
る。この励起光ａ1 の光束が試料10を出射する際の光束
と対物レンズ22の光軸とがなす角度はαである。
【００２２】上記励起光ａ1 の励起により試料10内の蛍
光物質は蛍光を発し、その蛍光のうち、対物レンズ22の
光軸と伝搬方向とのなす角度がβ（α＞β）の蛍光ｂは
対物レンズ22に入射し、対物レンズ22により点Ａに集光
されたのち発散する。この発散したのちの蛍光ｂのう
ち、一部の蛍光ｂ1 ，ｂ2 ，……，ｂ9 はそれらの伝搬
方向の光路上に配された９個の結像レンズ31にそれぞれ
入射し、各結像レンズ31によりそれぞれ結像し、その像
は９個のＣＣＤ撮像素子41によりそれぞれ撮像される。
光物質は蛍光を発し、その蛍光のうち、対物レンズ22の
光軸と伝搬方向とのなす角度がβ（α＞β）の蛍光ｂは
対物レンズ22に入射し、対物レンズ22により点Ａに集光
されたのち発散する。この発散したのちの蛍光ｂのう
ち、一部の蛍光ｂ1 ，ｂ2 ，……，ｂ9 はそれらの伝搬
方向の光路上に配された９個の結像レンズ31にそれぞれ
入射し、各結像レンズ31によりそれぞれ結像し、その像
は９個のＣＣＤ撮像素子41によりそれぞれ撮像される。
【００２３】これらＣＣＤ撮像素子41に撮像される画像
は、試料10内の１点より発せられた蛍光ｂを互いに異な
る９方向よりそれぞれ観察した２次元画像を示すもので
ある。
は、試料10内の１点より発せられた蛍光ｂを互いに異な
る９方向よりそれぞれ観察した２次元画像を示すもので
ある。
【００２４】このように撮像素子41により撮像された９
個の互いに異なる２次元画像はそれぞれ電気信号に変換
されて再構成手段51に入力され、再構成手段51により各
光学系位置と上記９個の２次元画像とに基づいてＣＴ手
法による計算処理がなされ、試料10内において励起光ａ
1 により励起された蛍光物質の３次元画像が再構成さ
れ、この３次元画像はＣＲＴ61により可視像として出力
される。
個の互いに異なる２次元画像はそれぞれ電気信号に変換
されて再構成手段51に入力され、再構成手段51により各
光学系位置と上記９個の２次元画像とに基づいてＣＴ手
法による計算処理がなされ、試料10内において励起光ａ
1 により励起された蛍光物質の３次元画像が再構成さ
れ、この３次元画像はＣＲＴ61により可視像として出力
される。
【００２５】上述の作用により出力された蛍光の３次元
画像は、顕微鏡の光学系、光軸方向についても高分解能
を有し、また、上記１回の撮像操作により９方向からの
２次元画像を同時に得ることができるため、計測に要す
る時間が長期化することがなく、効率よく３次元画像を
再構成することができる。
画像は、顕微鏡の光学系、光軸方向についても高分解能
を有し、また、上記１回の撮像操作により９方向からの
２次元画像を同時に得ることができるため、計測に要す
る時間が長期化することがなく、効率よく３次元画像を
再構成することができる。
【００２６】図２は本発明にかかる蛍光顕微鏡の第２の
実施例を示す概略構成図である。図示の蛍光顕微鏡はい
わゆる落射タイプのものであり、図示しない励起光源よ
り出射した励起光ａ3 を試料11内へ導光し、試料11内に
おいて蛍光物質（図示せず）に集光せしめるミラー23お
よび集光レンズ24と、試料11に対して集光レンズ24と同
一の側に設けられ、励起光ａ3 の励起によって発せられ
た蛍光物質の蛍光のうち、励起光ａ3 の試料11内の蛍光
物質を励起したのちの励起光ａ4 の光束から外れた方向
へ伝搬する蛍光ｃ1 ，ｃ2 を集光点Ｂにそれぞれ集光せ
しめる２個の対物レンズ32と、これら22の対物レンズ32
により集光点Ｂに集光せしめられたのちそれぞれ発散す
る蛍光ｃ1 ，ｃ2 を各別に受けて、各蛍光ｃ1 ，ｃ2 の
像を結像する２個のレンズ33と、これら各結像レンズ33
の像面Ｌに配され、各結像レンズ33により結像される蛍
光ｃ1 ，ｃ2 の像を各別に撮像する２個のＣＣＤ撮像素
子41と、各撮像素子41によりそれぞれ撮像された蛍光ｃ
1 ，ｃ2 の像に基づいて試料11内において発光する蛍光
の３次元画像を再構成する再構成手段52とを備えてい
る。
実施例を示す概略構成図である。図示の蛍光顕微鏡はい
わゆる落射タイプのものであり、図示しない励起光源よ
り出射した励起光ａ3 を試料11内へ導光し、試料11内に
おいて蛍光物質（図示せず）に集光せしめるミラー23お
よび集光レンズ24と、試料11に対して集光レンズ24と同
一の側に設けられ、励起光ａ3 の励起によって発せられ
た蛍光物質の蛍光のうち、励起光ａ3 の試料11内の蛍光
物質を励起したのちの励起光ａ4 の光束から外れた方向
へ伝搬する蛍光ｃ1 ，ｃ2 を集光点Ｂにそれぞれ集光せ
しめる２個の対物レンズ32と、これら22の対物レンズ32
により集光点Ｂに集光せしめられたのちそれぞれ発散す
る蛍光ｃ1 ，ｃ2 を各別に受けて、各蛍光ｃ1 ，ｃ2 の
像を結像する２個のレンズ33と、これら各結像レンズ33
の像面Ｌに配され、各結像レンズ33により結像される蛍
光ｃ1 ，ｃ2 の像を各別に撮像する２個のＣＣＤ撮像素
子41と、各撮像素子41によりそれぞれ撮像された蛍光ｃ
1 ，ｃ2 の像に基づいて試料11内において発光する蛍光
の３次元画像を再構成する再構成手段52とを備えてい
る。
【００２７】次に本実施例の作用について説明する。
【００２８】図示しない励起光源より出射した励起光ａ
3 はミラー23により進行方向が略90°変えられて集光レ
ンズ24に入射し、蛍光物質を有する試料11内の１点に集
光される。励起光ａ3 はこの試料11内において集光する
ことにより、集光点に有する蛍光物質と励起し、それに
より蛍光物質は蛍光を発する。励起光ａ3 は集光したの
ち発散し試料11に入射した際の伝搬方向を維持して試料
11より出射する（図２においてａ4 により示す）。
3 はミラー23により進行方向が略90°変えられて集光レ
ンズ24に入射し、蛍光物質を有する試料11内の１点に集
光される。励起光ａ3 はこの試料11内において集光する
ことにより、集光点に有する蛍光物質と励起し、それに
より蛍光物質は蛍光を発する。励起光ａ3 は集光したの
ち発散し試料11に入射した際の伝搬方向を維持して試料
11より出射する（図２においてａ4 により示す）。
【００２９】試料11内において励起された蛍光はその励
起された蛍光物質を中心とした球面状に伝搬するが、そ
の蛍光のうちの一部の蛍光ｃ1 ，ｃ2 は２つの対物レン
ズ32に入射し集光点Ｂに集光され、その後発散してそれ
ぞれ結像レンズ33に入射し、２つのＣＣＤ撮像素子41上
にそれぞれ結像し、蛍光ｃ1 ，ｃ2 の像が撮像素子41に
より撮像される。
起された蛍光物質を中心とした球面状に伝搬するが、そ
の蛍光のうちの一部の蛍光ｃ1 ，ｃ2 は２つの対物レン
ズ32に入射し集光点Ｂに集光され、その後発散してそれ
ぞれ結像レンズ33に入射し、２つのＣＣＤ撮像素子41上
にそれぞれ結像し、蛍光ｃ1 ，ｃ2 の像が撮像素子41に
より撮像される。
【００３０】以下、前記第１の実施例と同様の作用によ
り、試料11内において励起された蛍光物質の３次元画像
が再構成されＣＲＴ62に可視像として出力される。
り、試料11内において励起された蛍光物質の３次元画像
が再構成されＣＲＴ62に可視像として出力される。
【００３１】上述の作用により可視像として出力された
画像は前記実施例と同様、顕微鏡光学系の光軸方向につ
いても高分解能を有し、また効率良く３次元画像を再構
成することができる。
画像は前記実施例と同様、顕微鏡光学系の光軸方向につ
いても高分解能を有し、また効率良く３次元画像を再構
成することができる。
【００３２】なお、本実施例の蛍光顕微鏡は、第１の実
施例の蛍光顕微鏡に対して撮像する蛍光の光軸に対する
角度が大きくなるため、光軸方向の分解能を一層向上す
ることができる。
施例の蛍光顕微鏡に対して撮像する蛍光の光軸に対する
角度が大きくなるため、光軸方向の分解能を一層向上す
ることができる。
【図１】(a) 本発明にかかる蛍光顕微鏡の第１の実施例
を示す概略構成図 (b)(a)の矢視ＰによるＣＣＤ撮像素子の配列を示す図
を示す概略構成図 (b)(a)の矢視ＰによるＣＣＤ撮像素子の配列を示す図
【図２】本発明にかかる蛍光顕微鏡の第２の実施例を示
す概略構成図
す概略構成図
10，11 試料 21 暗視野コンデンサレンズ 22，32 対物レンズ 23 ミラー 24 集光レンズ 31，33 結像レンズ 41 ＣＣＤ撮像素子 51，52 再構成手段 61，62 ＣＲＴ
フロントページの続き (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) G02B 19/00 - 21/00 G02B 21/06 - 21/36 G01N 21/17 G01N 21/27 G01N 21/64
Claims (1)
- 【請求項１】 蛍光物質を有する検体に該蛍光物質を励
起する励起光を照射する励起光照射手段と、 該検体に対向して設けられ、前記励起光の励起により該
蛍光物質より種々の互いに異なる方向に発せられた蛍光
のうち、前記励起光の光束から外れた方向に発せられた
蛍光を、１点に集光せしめる少なくとも１つの対物レン
ズと、 該対物レンズにより前記１点に集光せしめられたのち発
散する前記蛍光のうち互いに異なる方向に進む蛍光を受
けてそれぞれ結像する少なくとも２つの結像レンズと、 該少なくとも２つの結像レンズによりそれぞれ結像され
た蛍光の像の位置に配されて、該蛍光の像を撮像する少
なくとも２つの撮像手段と、 該少なくとも２つの撮像手段によりそれぞれ撮像された
少なくとも２つの前記蛍光の像に基づいて、前記蛍光の
３次元像を再構成する再構成手段とを備えてなることを
特徴とする蛍光顕微鏡。
Priority Applications (1)
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|---|---|---|---|
| JP14599593A JP3144513B2 (ja) | 1993-06-17 | 1993-06-17 | 蛍光顕微鏡 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP14599593A JP3144513B2 (ja) | 1993-06-17 | 1993-06-17 | 蛍光顕微鏡 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH075368A JPH075368A (ja) | 1995-01-10 |
| JP3144513B2 true JP3144513B2 (ja) | 2001-03-12 |
Family
ID=15397731
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP14599593A Expired - Fee Related JP3144513B2 (ja) | 1993-06-17 | 1993-06-17 | 蛍光顕微鏡 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3144513B2 (ja) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE19842153C2 (de) * | 1998-09-15 | 2003-07-31 | Leica Microsystems | Fluoreszenzmikroskop |
| EP2315027A1 (en) * | 2002-08-16 | 2011-04-27 | Decision Biomarkers Incorporated | Substrates for isolating, reacting and microscopically analyzing materials |
| JP2015135463A (ja) * | 2013-12-19 | 2015-07-27 | オリンパス株式会社 | 顕微鏡装置、及び、顕微鏡システム |
| JP2016206652A (ja) * | 2015-04-21 | 2016-12-08 | オリンパス株式会社 | 試料の３次元構造の撮像方法及び顕微鏡装置 |
-
1993
- 1993-06-17 JP JP14599593A patent/JP3144513B2/ja not_active Expired - Fee Related
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| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH075368A (ja) | 1995-01-10 |
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