JP3636609B2 - 豚精液保存液及びその使用方法 - Google Patents
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Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、豚精液を保存する豚精液保存液及びその使用方法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
近年、優れた豚の産肉を生じるため、遺伝的に産肉能力、繁殖能力の高い雄豚の精液を多数の雌豚に人工的に授精させる豚の人工授精が行われている。
【０００３】
人工授精を行う際には豚精液を豚精液保存液によって希釈し、豚精液量を増加させると共に豚精液の保存時間を延長させている。
【０００４】
豚精液保存液は、ブドウ糖２７．５ｇ、クエン酸三ナトリウム（２水和物）６．９ｇ、炭酸水素ナトリウム１．０ｇ、エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム（ＥＤＴＡ．２Ｎａ）２．３５ｇ、クエン酸（１水和物）２．９ｇ、トリス（ヒドロキシル）アミノメタン５．６５ｇ、ゲンタマイシン（アミノ酸糖体抗生物質）６０〜１２０ｍｇを蒸留水で１０００ｍｌにしたものであり、モデナ液として広く知られている。
【０００５】
ここで、豚精液保存液は豚精液と略同じ浸透圧を持つようブドウ糖、緩衝剤により計算調整されており、ブドウ糖は豚精子のエネルギー源となり、炭酸水素ナトリウムは豚精液保存液のｐＨ調整を行っている。なお、豚精液保存液のｐＨは、通常６．８〜７．２である。
【０００６】
豚精液保存液を使用する際には、所定の雄豚から採取した豚精液を直ちに滅菌ガーゼで濾過して膠様物を除去し、豚精液保存液と同じ温度にした後、速やかに豚精液保存液で希釈する。
【０００７】
希釈した豚精液は直ちに人工授精に使用することができ、又、徐々に温度を１５℃に下げ恒温保存することもできる。
【０００８】
このため、豚精液保存液により豚精液量を増加させると共に豚精液の保存時間を延長するので、高能力雄豚精液の安価利用、精液を介した疾病の予防、繁殖成績の高レベル化、交配にかかる時間短縮・コスト低減等の効果を備えている。
【０００９】
【発明が解決しようとする課題】
しかしながら、豚精液保存液内に細菌の発生を防ぐため豚精液保存液を予め加熱滅菌すると、豚精液保存液の組成変化とみられる着色を生じてしまい、結果的に加熱滅菌した豚精液保存液の保存性は非加熱滅菌の豚精液保存液より劣るという問題があり、豚精液の保存時間は２日前後であった。この加熱滅菌は、一般的な凍結保存や用時調製法より劣り、豚精液の保存時間を一層延長するよう豚精液保存液の保存性を高めることが求められていた。
【００１０】
本発明は上述した実情に鑑みてなしたもので、豚精液保存液の保存性を高めることを目的としたものである。
【００１１】
【課題を解決するための手段】
本発明の豚精液保存液は、調製された希釈基液と、豚精液を混合する直前に前記希釈基液に加えるｐＨ調整を行うための添加液とからなり、
前記希釈基液は、蒸留水に対してブドウ糖１〜５％、クエン酸三ナトリウム（２水和物）０．１〜１．５％、エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム（ＥＤＴＡ．２Ｎａ）０．０５〜０．５０％、クエン酸（１水和物）０．０５〜０．５０％、トリス（ヒドロキシル）アミノメタン０．１〜１．５％の混合液を用い、
前記添加液は、蒸留水に炭酸水素ナトリウム０ . ０５〜２０．０％を加えて調整されたものを用いたものである。
【００１２】
本発明では、希釈基液に抗生物質を加えてもよい。
【００１３】
又、本発明では滅菌した希釈基液を用いてもよい。
【００１４】
更に本発明では滅菌した添加液を用いてもよい。
【００１７】
更に、本発明の豚精液保存液において、アミカシン、ゲンタマイシン、カナマイシン、ストレプトマイシン、ポリミキシンＢの群から選ばれる１種もしくは２種以上のいずれかを抗生物質として用いることがある。
【００１８】
本発明の豚精液保存液使用方法は、蒸留水に対してブドウ糖１〜５％、クエン酸三ナトリウム（２水和物）０．１〜１．５％、エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム（ＥＤＴＡ．２Ｎａ）０．０５〜０．５０％、クエン酸（１水和物）０．０５〜０．５０％、トリス（ヒドロキシル）アミノメタン０．１〜１．５％の混合液を希釈基液にするよう、豚精液を希釈する希釈基液を予め調製し、且つ蒸留水に炭酸水素ナトリウム０ . ０５〜２０．０％を加えて調整された添加液を用いるよう所定濃度のｐＨ調整を行うための添加液を予め調製し、使用直前に前記希釈基液と、添加液とを混合するものである。
【００１９】
以上のように本発明の豚精液保存液及びその使用方法によれば、豚精液の保存時間を延長できることが種々の試験を重ねた結果、明らかになった。
【００２０】
又、希釈基液と添加液を適宜別々に加熱滅菌して混合した際には、豚精液保存液の組成変化とみられる着色を防止すると共に、豚精液保存液の性能に良い結果が報告されているｐＨの低下がみられ、豚精液保存液の保存性は、予め希釈基液と添加液を混合して加熱滅菌した豚精液保存液、及び予め希釈基液と添加液を混合して加熱滅菌しない豚精液保存液より優れているものとなる。
【００２１】
【発明の実施の形態】
以下、本発明の豚精液保存液の実施の形態を説明する。
【００２２】
本発明の豚精液保存液を使用する場合には、豚精液保存液を構成する希釈基液と添加液とを予め調製する。
【００２３】
希釈基液は、蒸留水に対してブドウ糖１〜５％、クエン酸三ナトリウム（２水和物）０．１〜１．５％、エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム（ＥＤＴＡ．２Ｎａ）０．０５〜０．５０％、クエン酸（１水和物）０．０５〜０．５０％、トリス（ヒドロキシル）アミノメタン０．１〜１．５％の範囲になるよう調製したものであり、ここでは、ブドウ糖１３．７５ｇ、クエン酸三ナトリウム（２水和物）３．４５ｇ、エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム（ＥＤＴＡ．２Ｎａ）１．１７５ｇ、クエン酸（１水和物）１．４５ｇ、トリス（ヒドロキシル）アミノメタン２．８２５ｇを蒸留水で５００ｍｌにしたものである。
【００２４】
又、希釈基液に加えられる抗生物質は、アミカシン、ゲンタマイシン、カナマイシン、ストレプトマイシン、ポリミキシンＢの群から選ばれる１種もしくは２種以上であって、ここでは、ゲンタマイシン３０〜６０ｍｇを選んでいる。
【００２５】
一方、添加液は、蒸留水に炭酸水素ナトリウム０．０５〜２０％を加えて調整されたものであり、ここでは、蒸留水７．１ｍｌ中に炭酸水素ナトリウム０．５ｇを含んだものである。
【００２６】
希釈基液と添加液が調製された後には、希釈基液５００ｍｌと添加液７．１ｍｌを夫々、別々に１００℃で６０分間加熱滅菌し、使用直前に３５℃に加温した希釈基液に添加液を加え、更に抗生物質を混合する。
【００２７】
又、豚精液が採取された場合には、豚精液を直ちに滅菌カーゼで濾過して膠様物を除去し、なるべく速やかに希釈基液と同じ温度とし、希釈基液で希釈する。
【００２８】
希釈された精液はそのまま直ちに人工受精に使用することができ、又、徐々に１５℃に温度を下げ恒温保存することもできる。
【００２９】
以上の豚精液保存液及びその使用方法において豚精液保存液の保存性の試験を行った。
【００３０】
試験は、豚精液保存液の保存性として豚精子の運動力＋＋以上の豚精子が５０％以上存在する日数、すなわち豚精子の活力保持日数を測定比較した。その結果は表１の通りである。
【００３１】
なお、豚精子の運動力は次によって判定した。
＋＋＋：運動激烈で、活発な前進運動を行うもの。壁に接したものは頭部を集め尾部のみ激烈な運動を行う。渦巻きのごとく、また水の流れのごとく見える場合がある。
＋＋：運動やや活発で、緩慢な前進運動、激しい振せん運動及び活発な旋回運動などを行う程度のもの。
＋：運動微弱で、緩慢な振子運動を行う程度のもの。
−：運動停止。
【００３２】
【表１】
【００３３】
本発明の豚精液保存液及びその使用方法によれば、豚精子の活力保持日数を延長するので豚精液保存液の保存性は従来のものより優れていることが明らかである。
【００３４】
又、希釈基液と添加液を適宜別々に加熱滅菌して混合した際には、豚精液保存液の組成変化とみられる着色を防止すると共に、豚精液保存液の性能に良い結果が報告されているｐＨの低下がみられ、豚精液保存液の保存性は、予め希釈基液と添加液を混合して加熱滅菌した豚精液保存液、及び予め希釈基液と添加液を混合して加熱滅菌しない豚精液保存液より優れているものとなる。
【００３５】
なお、本発明の豚精液保存液は、上述の形態例のみに限定されるものではなく、希釈基液に含まれるクエン酸（１水和物）はクエン酸（無水）でもよいこと、又、トリス（ヒドロキシル）アミノメタンはトリス（ヒドロキシルメチル）アミノメタンでもよいこと、添加液はｐＨ調整するものならばどのようなものでもよいこと、その他、本発明の要旨を逸脱しない範囲内において種々変更を加え得ることは勿論である。
【００３６】
【発明の効果】
本発明の豚精液保存液及びその使用方法によれば、従来の豚精液保存液より保存性を延長させることができるという優れた効果を奏し得る。
【発明の属する技術分野】
本発明は、豚精液を保存する豚精液保存液及びその使用方法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
近年、優れた豚の産肉を生じるため、遺伝的に産肉能力、繁殖能力の高い雄豚の精液を多数の雌豚に人工的に授精させる豚の人工授精が行われている。
【０００３】
人工授精を行う際には豚精液を豚精液保存液によって希釈し、豚精液量を増加させると共に豚精液の保存時間を延長させている。
【０００４】
豚精液保存液は、ブドウ糖２７．５ｇ、クエン酸三ナトリウム（２水和物）６．９ｇ、炭酸水素ナトリウム１．０ｇ、エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム（ＥＤＴＡ．２Ｎａ）２．３５ｇ、クエン酸（１水和物）２．９ｇ、トリス（ヒドロキシル）アミノメタン５．６５ｇ、ゲンタマイシン（アミノ酸糖体抗生物質）６０〜１２０ｍｇを蒸留水で１０００ｍｌにしたものであり、モデナ液として広く知られている。
【０００５】
ここで、豚精液保存液は豚精液と略同じ浸透圧を持つようブドウ糖、緩衝剤により計算調整されており、ブドウ糖は豚精子のエネルギー源となり、炭酸水素ナトリウムは豚精液保存液のｐＨ調整を行っている。なお、豚精液保存液のｐＨは、通常６．８〜７．２である。
【０００６】
豚精液保存液を使用する際には、所定の雄豚から採取した豚精液を直ちに滅菌ガーゼで濾過して膠様物を除去し、豚精液保存液と同じ温度にした後、速やかに豚精液保存液で希釈する。
【０００７】
希釈した豚精液は直ちに人工授精に使用することができ、又、徐々に温度を１５℃に下げ恒温保存することもできる。
【０００８】
このため、豚精液保存液により豚精液量を増加させると共に豚精液の保存時間を延長するので、高能力雄豚精液の安価利用、精液を介した疾病の予防、繁殖成績の高レベル化、交配にかかる時間短縮・コスト低減等の効果を備えている。
【０００９】
【発明が解決しようとする課題】
しかしながら、豚精液保存液内に細菌の発生を防ぐため豚精液保存液を予め加熱滅菌すると、豚精液保存液の組成変化とみられる着色を生じてしまい、結果的に加熱滅菌した豚精液保存液の保存性は非加熱滅菌の豚精液保存液より劣るという問題があり、豚精液の保存時間は２日前後であった。この加熱滅菌は、一般的な凍結保存や用時調製法より劣り、豚精液の保存時間を一層延長するよう豚精液保存液の保存性を高めることが求められていた。
【００１０】
本発明は上述した実情に鑑みてなしたもので、豚精液保存液の保存性を高めることを目的としたものである。
【００１１】
【課題を解決するための手段】
本発明の豚精液保存液は、調製された希釈基液と、豚精液を混合する直前に前記希釈基液に加えるｐＨ調整を行うための添加液とからなり、
前記希釈基液は、蒸留水に対してブドウ糖１〜５％、クエン酸三ナトリウム（２水和物）０．１〜１．５％、エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム（ＥＤＴＡ．２Ｎａ）０．０５〜０．５０％、クエン酸（１水和物）０．０５〜０．５０％、トリス（ヒドロキシル）アミノメタン０．１〜１．５％の混合液を用い、
前記添加液は、蒸留水に炭酸水素ナトリウム０ . ０５〜２０．０％を加えて調整されたものを用いたものである。
【００１２】
本発明では、希釈基液に抗生物質を加えてもよい。
【００１３】
又、本発明では滅菌した希釈基液を用いてもよい。
【００１４】
更に本発明では滅菌した添加液を用いてもよい。
【００１７】
更に、本発明の豚精液保存液において、アミカシン、ゲンタマイシン、カナマイシン、ストレプトマイシン、ポリミキシンＢの群から選ばれる１種もしくは２種以上のいずれかを抗生物質として用いることがある。
【００１８】
本発明の豚精液保存液使用方法は、蒸留水に対してブドウ糖１〜５％、クエン酸三ナトリウム（２水和物）０．１〜１．５％、エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム（ＥＤＴＡ．２Ｎａ）０．０５〜０．５０％、クエン酸（１水和物）０．０５〜０．５０％、トリス（ヒドロキシル）アミノメタン０．１〜１．５％の混合液を希釈基液にするよう、豚精液を希釈する希釈基液を予め調製し、且つ蒸留水に炭酸水素ナトリウム０ . ０５〜２０．０％を加えて調整された添加液を用いるよう所定濃度のｐＨ調整を行うための添加液を予め調製し、使用直前に前記希釈基液と、添加液とを混合するものである。
【００１９】
以上のように本発明の豚精液保存液及びその使用方法によれば、豚精液の保存時間を延長できることが種々の試験を重ねた結果、明らかになった。
【００２０】
又、希釈基液と添加液を適宜別々に加熱滅菌して混合した際には、豚精液保存液の組成変化とみられる着色を防止すると共に、豚精液保存液の性能に良い結果が報告されているｐＨの低下がみられ、豚精液保存液の保存性は、予め希釈基液と添加液を混合して加熱滅菌した豚精液保存液、及び予め希釈基液と添加液を混合して加熱滅菌しない豚精液保存液より優れているものとなる。
【００２１】
【発明の実施の形態】
以下、本発明の豚精液保存液の実施の形態を説明する。
【００２２】
本発明の豚精液保存液を使用する場合には、豚精液保存液を構成する希釈基液と添加液とを予め調製する。
【００２３】
希釈基液は、蒸留水に対してブドウ糖１〜５％、クエン酸三ナトリウム（２水和物）０．１〜１．５％、エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム（ＥＤＴＡ．２Ｎａ）０．０５〜０．５０％、クエン酸（１水和物）０．０５〜０．５０％、トリス（ヒドロキシル）アミノメタン０．１〜１．５％の範囲になるよう調製したものであり、ここでは、ブドウ糖１３．７５ｇ、クエン酸三ナトリウム（２水和物）３．４５ｇ、エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム（ＥＤＴＡ．２Ｎａ）１．１７５ｇ、クエン酸（１水和物）１．４５ｇ、トリス（ヒドロキシル）アミノメタン２．８２５ｇを蒸留水で５００ｍｌにしたものである。
【００２４】
又、希釈基液に加えられる抗生物質は、アミカシン、ゲンタマイシン、カナマイシン、ストレプトマイシン、ポリミキシンＢの群から選ばれる１種もしくは２種以上であって、ここでは、ゲンタマイシン３０〜６０ｍｇを選んでいる。
【００２５】
一方、添加液は、蒸留水に炭酸水素ナトリウム０．０５〜２０％を加えて調整されたものであり、ここでは、蒸留水７．１ｍｌ中に炭酸水素ナトリウム０．５ｇを含んだものである。
【００２６】
希釈基液と添加液が調製された後には、希釈基液５００ｍｌと添加液７．１ｍｌを夫々、別々に１００℃で６０分間加熱滅菌し、使用直前に３５℃に加温した希釈基液に添加液を加え、更に抗生物質を混合する。
【００２７】
又、豚精液が採取された場合には、豚精液を直ちに滅菌カーゼで濾過して膠様物を除去し、なるべく速やかに希釈基液と同じ温度とし、希釈基液で希釈する。
【００２８】
希釈された精液はそのまま直ちに人工受精に使用することができ、又、徐々に１５℃に温度を下げ恒温保存することもできる。
【００２９】
以上の豚精液保存液及びその使用方法において豚精液保存液の保存性の試験を行った。
【００３０】
試験は、豚精液保存液の保存性として豚精子の運動力＋＋以上の豚精子が５０％以上存在する日数、すなわち豚精子の活力保持日数を測定比較した。その結果は表１の通りである。
【００３１】
なお、豚精子の運動力は次によって判定した。
＋＋＋：運動激烈で、活発な前進運動を行うもの。壁に接したものは頭部を集め尾部のみ激烈な運動を行う。渦巻きのごとく、また水の流れのごとく見える場合がある。
＋＋：運動やや活発で、緩慢な前進運動、激しい振せん運動及び活発な旋回運動などを行う程度のもの。
＋：運動微弱で、緩慢な振子運動を行う程度のもの。
−：運動停止。
【００３２】
【表１】
本発明の豚精液保存液及びその使用方法によれば、豚精子の活力保持日数を延長するので豚精液保存液の保存性は従来のものより優れていることが明らかである。
【００３４】
又、希釈基液と添加液を適宜別々に加熱滅菌して混合した際には、豚精液保存液の組成変化とみられる着色を防止すると共に、豚精液保存液の性能に良い結果が報告されているｐＨの低下がみられ、豚精液保存液の保存性は、予め希釈基液と添加液を混合して加熱滅菌した豚精液保存液、及び予め希釈基液と添加液を混合して加熱滅菌しない豚精液保存液より優れているものとなる。
【００３５】
なお、本発明の豚精液保存液は、上述の形態例のみに限定されるものではなく、希釈基液に含まれるクエン酸（１水和物）はクエン酸（無水）でもよいこと、又、トリス（ヒドロキシル）アミノメタンはトリス（ヒドロキシルメチル）アミノメタンでもよいこと、添加液はｐＨ調整するものならばどのようなものでもよいこと、その他、本発明の要旨を逸脱しない範囲内において種々変更を加え得ることは勿論である。
【００３６】
【発明の効果】
本発明の豚精液保存液及びその使用方法によれば、従来の豚精液保存液より保存性を延長させることができるという優れた効果を奏し得る。
Claims (6)
- 調製された希釈基液と、豚精液を混合する直前に前記希釈基液に加えるｐＨ調整を行うための添加液とからなり、
前記希釈基液は、蒸留水に対してブドウ糖１〜５％、クエン酸三ナトリウム（２水和物）０．１〜１．５％、エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム（ＥＤＴＡ．２Ｎａ）０．０５〜０．５０％、クエン酸（１水和物）０．０５〜０．５０％、トリス（ヒドロキシル）アミノメタン０．１〜１．５％の混合液を用い、
前記添加液は、蒸留水に炭酸水素ナトリウム０ . ０５〜２０．０％を加えて調整されたものを用いることを特徴とする豚精液保存液。 - 希釈基液に抗生物質を加えた請求項１に記載の豚精液保存液。
- 滅菌した希釈基液を用いる請求項１又は２に記載の豚精液保存液。
- 滅菌した添加液を用いる請求項１、２又は３に記載の豚精液保存液。
- アミカシン、ゲンタマイシン、カナマイシン、ストレプトマイシン、ポリミキシンＢの群から選ばれる１種もしくは２種以上のいずれかを抗生物質として用いる請求項１、２、３又は４に記載の豚精液保存液。
- 蒸留水に対してブドウ糖１〜５％、クエン酸三ナトリウム（２水和物）０．１〜１．５％、エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム（ＥＤＴＡ．２Ｎａ）０．０５〜０．５０％、クエン酸（１水和物）０．０５〜０．５０％、トリス（ヒドロキシル）アミノメタン０．１〜１．５％の混合液を希釈基液にするよう、豚精液を希釈する希釈基液を予め調製し、且つ蒸留水に炭酸水素ナトリウム０ . ０５〜２０．０％を加えて調整された添加液を用いるよう所定濃度のｐＨ調整を行うための添加液を予め調製し、使用直前に前記希釈基液と、添加液とを混合する豚精液保存液使用方法。
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|---|---|---|---|
| JP04636799A JP3636609B2 (ja) | 1999-02-24 | 1999-02-24 | 豚精液保存液及びその使用方法 |
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| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
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| JP3636609B2 true JP3636609B2 (ja) | 2005-04-06 |
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Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2008007463A1 (fr) * | 2006-07-12 | 2008-01-17 | Nippon Zenyaku Kogyo Co., Ltd. | Composition de dilution et de stockage de sperme |
| CN103843759A (zh) * | 2014-03-07 | 2014-06-11 | 四川农业大学 | 一种适于高海拔地区的鸡精液释稀液及其制备方法与应用 |
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| JP5980499B2 (ja) * | 2011-11-22 | 2016-08-31 | 株式会社ピィアイシィ・バイオ | 豚人工授精用精液希釈保存物 |
| WO2015193265A1 (en) | 2014-06-16 | 2015-12-23 | Università degli Studi di Parma | Composition for extenders for the long-term conservation of animal seminal material |
| CN107711822A (zh) * | 2017-10-09 | 2018-02-23 | 安徽省农业科学院水产研究所 | 一种大鳞副泥鳅精子保存液、活化液和孵化方法 |
| CN110115264A (zh) * | 2018-02-05 | 2019-08-13 | 天津农学院 | 一种稀释剂及其制备方法和在猪精液低温保存中的应用 |
| CN112674077A (zh) * | 2021-01-13 | 2021-04-20 | 江苏中牧倍康药业有限公司 | 一种全能健种猪精液稀释体外常温保存剂 |
| CN115245161A (zh) * | 2022-08-17 | 2022-10-28 | 中国农业大学 | 一种基于牛至油的猪精液常温保存长效稀释剂 |
-
1999
- 1999-02-24 JP JP04636799A patent/JP3636609B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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| WO2008007463A1 (fr) * | 2006-07-12 | 2008-01-17 | Nippon Zenyaku Kogyo Co., Ltd. | Composition de dilution et de stockage de sperme |
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| CN103843759B (zh) * | 2014-03-07 | 2015-05-20 | 四川农业大学 | 一种适于高海拔地区的鸡精液释稀液及其制备方法与应用 |
Also Published As
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| JP2000247801A (ja) | 2000-09-12 |
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