JP4263485B2 - ハイブリドーマ細胞系ｇ２５０およびモノクローナル抗体を製造するためのその使用 - Google Patents

ハイブリドーマ細胞系ｇ２５０およびモノクローナル抗体を製造するためのその使用 Download PDF

Info

Publication number
JP4263485B2
JP4263485B2 JP2002563309A JP2002563309A JP4263485B2 JP 4263485 B2 JP4263485 B2 JP 4263485B2 JP 2002563309 A JP2002563309 A JP 2002563309A JP 2002563309 A JP2002563309 A JP 2002563309A JP 4263485 B2 JP4263485 B2 JP 4263485B2
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
antibody
cells
cell
producing
chimeric
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
JP2002563309A
Other languages
English (en)
Other versions
JP2004522447A (ja
Inventor
オースターウィーク エグベルト
ワーナー スヴェン
ウルリヒ シュテファン
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Heidelberg Pharma AG
Original Assignee
Wilex AG
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Wilex AG filed Critical Wilex AG
Publication of JP2004522447A publication Critical patent/JP2004522447A/ja
Application granted granted Critical
Publication of JP4263485B2 publication Critical patent/JP4263485B2/ja
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/30—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
    • C07K16/3038—Kidney, bladder
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6851—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell
    • A61K47/6861—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell the tumour determinant being from kidney or bladder cancer cell
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Description

本発明は、ハイブリドーマ細胞Ｇ２５０またはＧ２５０抗体を製造する能力を有するそれらの子孫細胞に関する。
マウス骨髄腫細胞と免疫化マウスからの脾臓細胞との融合は、ＫｏｈｌｅｒおよびＭｉｌｓｔｅｉｎら、Ｎａｔｕｒｅ，２５６，４９５−９９７（１９７５）によって最初に記載され、この場合、この方法は、モノクローナル抗体（ｍＡｂ）と呼称される均一な抗体を製造する連続的な細胞系を得ることを可能にするものである。
ハイブリッド細胞またはハイブリドーマを示す多くの例が記載されている。これらのハイブリドーマは、種々の科学的研究に使用可能な抗体を製造するために使用される（Current Topics in Microbiology and Immunology, Volume 81-“Lympghocyte Hybrimomas”, F.Melchers et al., Springer-Verlag (1978) and references therein; C.J. Barnstable et al., Cell, (1978), 14, 9-20; P. Parham, W.F. Bodmer, Neture (1978), 276, 397-399; Handbook of Experimental Immunology, 3rd edition, Vol. 2, D.M. Wier, editor, Blackwell, 1978, Chapter 25, Chem. Eng. News, 15-17 (1979); Kennett, R.H., McKearn, J.T., and Bechtol, K.B. (1980) Monoclonal Antibodies. Hybridomas: A New Dimension in Biological Analysis (Plenum, New York)）。これらは、ハイブリドーマによるモノクローナル抗体製造のための重要な技術を報告するものである。
モノクローナル抗体Ｇ２５０、サブクラスＩｇＧ１は、選択的に、腎細胞腫細胞（ＲＣＣ）膜上で発現するが、正常な基部管状上皮（proximal tubular epithelium）中で発現しない抗原を認識する。抗体Ｇ２５０は、マウスを、種々の患者から得られた原発性ＲＣＣ病変からの細胞ホモジェネートで免疫することによって得られた（Oosterwijk et al., Int. J. Cancer 38 (1986), 489-494）。
モノクローナル抗体Ｇ２５０ならびにそのキメラ誘導体は、臨床試験において使用されている（Steffens et al., J. Clin. Oncol. 15 (1997), 1529-1537）。Ｇ２５０の抗原結合部位をコードする核酸配列は、本明細書中において参考のためにのみ引用される、係争中のＵＳ−出願ＵＳ６０／２６６８５３の対象である。
Ｇ２５０抗体を発現するハイブリドーマ細胞の製造は、一般には、国際特許出願ＷＯ８８／０８８５４およびＯｏｓｔｅｒｗｉｊｋら（前記参照）中で記載されている。前記に示したように、原発性ＲＣＣ病変からの細胞ホモジェネートが種々の患者から得られ、このように非特異的材料が、免疫抗原として使用された。さらに、ハイブリドーマ細胞系は、ブタペスト条約による、認定受託機関には寄託されていない。したがって、入手可能な先行技術文献から、Ｇ２５０ハイブリドーマ細胞系を正確に再現することは可能でないように思われる。
同時に、Ｇ２５０抗体が、ＷＯ９３／１８１５２で示された、いわゆるＭＮ抗原と結合することが見出された。しかしながら、ＭＮ抗原上のＧ２５０結合部位は、現在においても知られていない。さらに、最近の結果によって、Ｇ２５−結合部位が、Ｇ２５０ハイブリドーマ細胞系を再現するための負担を増加させる、立体配座エピトープであることが示され、それというのも、Ｇ２５０と結合するＭＮ抗原上の特異的なエピトープ配列が提供されないためである。
したがって、本発明は、Ｇ２５０モノクローナル抗体を製造する能力を有するハイブリドーマ細胞に関する。このハイブリドーマ細胞は、微生物の寄託に関するブタペスト条約にしたがって、２００１年９月１１日、Ｄｅｕｔｃｈ Ｓａｍｍｌｕｎｇ ｖｏｎ Ｍｉｋｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｅｎ ｕｎｄ Ｚｅｌｌｋｕｌｔｕｒｅｎ ＧｍｂＨ（ＤＳＭＺ）、Ｍａｓｃｈｅｒｏｄｅｒ Ｗｅｇ １ｂ，３８１２４ Ｂｒａｕｓｃｈｗｅｉｇ，Ｇｅｒｍａｎｙで、寄託番号ＤＳＭ ＡＣＣ ２５２６で寄託された。この寄託によって、Ｇ２５０抗体を製造するハイブリドーマ細胞系が、初めて開示された。
本発明の他の対象は、Ｇ２５０抗体を製造する前記ハイブリドーマＤＳＭ ＡＣＣ ２５２６から誘導された子孫細胞である。
好ましい実施態様において、本発明は、Ｇ２５０抗体を製造する寄託されたハイブリドーマ細胞の子孫細胞に関し、その際、子孫細胞は、組換えＤＮＡ法、たとえば、Ｇ２５０抗体をコードするかまたは少なくともその抗原結合部位をコードする遺伝物質を、レセプター細胞中にトランスファーすることによって得られる。遺伝物質は、直接的にかまたは間接的に、寄託されたハイブリドーマ細胞Ｇ２５０から得ることができる。“直接的に得られる”とは、Ｇ２５０遺伝物質が寄託されたハイブリドーマ細胞から誘導されることを意味する。“間接的に得られる”とは、Ｇ２５０遺伝物質が、すでに存在するＧ２５０子孫細胞から誘導されるか、あるいは化学合成を含む他の源から誘導されることを意味する。
好ましくは、Ｇ２５０遺伝物質は、少なくともＧ２５０抗原結合部位をコードするヌクレオチド配列、特に、図１に示したようなＨ鎖抗原−結合部位の相補性決定部ＣＤＲ３、ＣＤＲ２および／またはＣＤＲ１(Ｈ１−Ｈ３を示す）をコードするヌクレオチド配列、および／または、図１に示したようなＬ鎖抗原−結合部位の相補性決定部ＣＤＲ３、ＣＤＲ２および／またはＣＤＲ１（Ｌ１−Ｌ３を示す）をコードするヌクレオチド配列を含む。
本発明によれば、用語“Ｇ２５０抗体”は、多重特異性抗体（たとえば二重特異性抗体）を含む任意の抗体を包含し、かつ、これらが好ましい活性を示す限りは抗体フラグメント、すなわち、少なくとも一つのＧ２５０抗原−結合部位をも包含する。抗体は、ＩｇＭ、ＩｇＧ（たとえば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４）、ＩｇＤ、ＩｇＡまたはＩｇＥ、特にＩｇG抗体、タンパク質分解法によってかまたは組換えＤＮＡ法によって得ることができる、組換え抗体または抗体フラグメントであってもよい。
本明細書中で使用される用語“モノクローナル抗体”は、ほぼ均一な抗体の細胞群から得られる抗体、すなわち、細胞群を有する独立した抗体が、わずかな量で存在していてもよい天然に生じうる突然変異を除き同一であることを意味する。
本明細書中で使用される用語“抗体”は、少なくとも一つのＧ２５０抗原−結合部位、すなわち、Ｇ２５０Ｈ鎖の少なくともＣＤＲ３ドメインおよび／またはＧ２５０Ｌ鎖のＣＤＲ３ドメインを含有する任意のポリペプチドか、あるいは本来のＧ２５０ ＣＤＲ３ドメインに対して、アミノ酸レベルで少なくとも８０％、好ましくは少なくとも９０％の同一性を有する変異体Ｇ２５０ ＣＤＲ３ドメインを含有する任意のポリペプチドに関するが、但し、この場合、変異体ＣＤＲ３領域は、本来のＣＤＲ３領域と同等の抗原−結合特性、特にアフィニティおよび特異性を有する。
好ましくは、本明細書の範囲内で“抗体”の用語は、キメラ抗体、ヒト化抗体、および完全ヒト化抗体（fully humanized antibodies）、一本鎖抗体、たとえば、ｓＦｖ抗体フラグメント、Ｄｉａｂｏｄｙフラグメント、タンパク分解性または組み換え抗体フラグメント、たとえば、Ｆｖ−、Ｆａｂ−、Ｆａｂ’−またはＦ（ａｂ’）２−フラグメントまたは抗体の他の抗原−結合配列を含む。さらに抗体は、他の独立体との融合体または結合体であってもよい。
本明細書中において、抗体は、特にキメラ抗体を含み、その際、抗体は、抗原−結合部位を有するＨ鎖および／またはＬ鎖の部分が、本来のハイブリドーマ細胞系Ｇ２５０から誘導された相当する配列と同一であるかまたは相同であり、その一方で鎖の残余部分は、他の種から誘導された相当する配列または他の抗体クラスまたはサブクラスに属する配列、さらには、好ましい生物学的活性を示すこのような抗体のフラグメントと同一かまたは相同である。より好ましくは、キメラ抗体は、可変領域、たとえば、相補性決定部（ＣＤＲｓ）および本来のＧ２５０モノクローナル抗体のＨ鎖またはＬ鎖からの枠組み領域およびヒト定常配列、特に、ヒトκ−Ｌ鎖およびγ−Ｈ鎖配列を含む。キメラ抗体の製造方法は、Ｍｏｒｒｉｓｏｎら（Proc.Natl. Acad. Sci. USA 81 (1984), 6851-6855）に記載されており、この場合、この文献は、本明細書中において参考のためにのみ引用されているものである。
さらに、本明細書中に示された抗体は、ヒト化抗体または完全ヒト化抗体を含む。ヒト化抗体は、免疫グロブリン、免疫グロブリン鎖またはこれらのフラグメントであり、この場合、これらは非ヒト免疫グロブリンから誘導された最小限の配列を含む。特に、ヒト化抗体は、得られたヒト抗体のＣＤＲからの残基が、Ｇ２５０ ＣＤＲ、特にＨ鎖および／またはＬ鎖のＣＤＲ１、ＣＤＲ２および／またはＣＤＲ３からの残基によって置換された、ヒト免疫グロブリンである。さらに、ヒト化抗体は、レシピエントヒト抗体かまたは移入されたＧ２５０ ＣＤＲ配列中で見出されることのない残基を含有していてもよい。これらの改変によってさらに精製され、抗体性能を最適化することができる。一般に、ヒト化抗体または完全ヒト化抗体は、ほぼすべてが、少なくとも１個、典型的には２個の可変領域を含有していてもよく、その際、すべてかまたはほぼすべてのＣＤＲドメインが、本来のＧ２５０免疫グロブリンのドメインに相当し、かつ、すべてかまたはほぼすべての枠組み領域および定常領域は、ヒト免疫グロブリン配列に相当するものである。ヒト化抗体の製造は、たとえばＪｏｎｅｓら（Nature 321(1986),522-525）、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎら（Nature 332 (1988), 323-329）、およびＰｒｅｓｔａら（Curr. Op. Struct. Biol. 2 (1992), 332-339）で記載されており、この場合、この文献は、本明細書中において参考のためにのみ引用されているものである。
さらに、特に抗体は、一本鎖抗体、たとえば抗体のＶＨおよびＶＬ領域を有する一本鎖Ｆｖ抗体フラグメントを含み、その際、これらの領域は、一本鎖のポリペプチド中に存在する。一般に、ＦｖポリペプチドはさらにｓＦｖによって抗原結合の好ましい構造を形成させる、ＶＨおよびＶＬ領域間のポリペプチドリンカーを含む。ｓＦＶ抗体の製造は、たとえば、Ｐｌｕｅｃｋｔｈｕｎら（The Pharmacology of Monoclonal Antibodies, Vol. 113, Rosenburg and Moore, Eds., Springer Verlag, NY, pp. 269-315 (1994), Barbas III (Methods: Companion Methods Enzymol. 2 (1991), 119)）およびＨｏｏｇｅｎｂｏｏｍら（Immunol. Rev. 130 (1992), 41-68）で記載されており、この場合、この文献は、本明細書中において参考のためにのみ引用されているものである。
さらに、特に抗体は、ｄｉａｂｏｄｙ、すなわち、２個の抗原結合部位を有する小さい抗体を含み、この場合、これらのフラグメントは、同一のポリペプチド鎖上で、Ｌ鎖可変部と連結されたＨ鎖可変部を有する。あまりにも短く、同一鎖上で２個の領域間で対にならないリンカーを用いて、ドメインは、他の鎖の相補的領域と強制的に対になり、かつ２個の抗原結合部位を形成する。ｄｉａｂｏｄｙの製造は、たとえば、Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒら（Proc. Natl. Sci. USA 90 (1993), 6444-6448）によって記載されているが、この場合、この文献は、参考のためにのみ引用されているものである。
さらに、特に抗体は、多重特異性抗体、たとえば、少なくとも１個のＧ２５０抗原結合部位および異なる抗体、たとえば抗ＣＤ−３抗体からの抗原結合部位を有するヘテロ二重特異性抗体を含む。
Ｇ２５０ハイブリドーマ細胞またはこれらの子孫細胞によって製造された抗体は、マーカー成分または作用成分と融合するかまたは結合されてもよい。たとえば、Ｇ２５０抗体は、組換え的に改変され、したがって、サイトカイン、たとえばインターロイキン−２（ＩＬ−２）、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）および／または顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）と結合していてもよい。
さらに、Ｇ２５０抗体は、たとえば、適したマーカー群、たとえば蛍光群、放射性マーカー群等か、あるいは放射性同位体、たとえば、Ｉ、Ｙ、Ｐｒ、Ｔｍ、Ｉｎ、たとえば、１２３Ｉ、１２５Ｉ、１３５Ｉ、９９ｍＴｍまたは１１１Ｉｎを含む細胞毒、化学療法剤および細菌、ファージ、植物または動物由来の酵素的に活性の毒、またはこれらのフラグメントと、共有結合させるかまたは融合させることによって結合されていてもよい。
本来のＧ２５０ハイブリドーマ細胞またはこれらの任意の後代からのＧ２５０特異的遺伝物質であるか、あるいは合成由来のＧ２５０遺伝物質がトランスファーされた、レセプター細胞は、抗体を発現する能力を有する任意の適したホスト細胞であってもよい。たとえば、ホスト細胞は、原核細胞、好ましくはＥ．Ｃｏｌｉ細胞または真核細胞であってもよい。好ましい真核細胞は、たとえば昆虫、酵母および哺乳類細胞である。最も好ましいホスト細胞は哺乳類細胞、たとえば、ヒトまたはマウス骨髄腫細胞またはＣＨＯ−細胞である。
さらに、本発明は、Ｇ２５０抗体またはこれらの誘導体を製造する方法を含み、この場合、この方法は：Ｇ２５０ハイブリドーマ細胞またはこれらの子孫細胞を、適した条件下で培養し、その際、Ｇ２５０抗体が製造され、かつ、細胞および／または細胞培地から抗体および／またはその誘導体を得る。
この方法によって得られる抗体は、特に、活性物質としての抗体、さらに製薬学的に認容性のキャリアー、希釈剤および／またはアジュバントを含む医薬品組成物を製造するのに有用である。
特に好ましい実施態様において、活性物質は、キメラＧ２５０抗体であり、この場合、これらは、それ自体でかまたは放射性群、たとえば１２３Ｉ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、９９ｍＴｍまたは１１１Ｉｎとの結合体として存在していてもよい。
さらに、本発明は、前記に示されたＧ２５０抗体、たとえばモノクローナル抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、完全ヒト化抗体、二重特異性抗体および、たとえば、（Ｆａｂ’）２−、Ｆａｂ’−、Ｆａｂ−およびＦｖ−フラグメントのようなこれらのフラグメントを製造するための、寄託されたハイブリドーマ細胞およびそれらの子孫細胞の使用に関する。
キメラＧ２５０抗体は、術後の腎細胞腫の治療のための臨床的研究において良好に使用された。研究はいまだ完了していないものの、治療された患者はすでに、メディアン生存時間において、未治療の患者（３ヶ月）または標準的処置で治療された患者（１０〜１２ヶ月）と比較して著しい増加（１５ヶ月以上）を示した。
驚くべきことに、いくつかの場合において、治療開始後６ヶ月以上（more than 6 months）に亘って、腫瘍の退行（regression）が生じた。このようにして、キメラＧ２５０抗体および他のＧ２５０抗体は、ガン治療、好ましくは腎細胞腫の治療、より好ましくは、腫瘍手術後の転移の治療のために、遅延した免疫応答を導く能力を有する。
例１
Ｇ２５０ハイブリドーマ細胞系の寄託
Ｇ２５０ハイブリドーマ細胞系は、ＷＯ８８／０８８５４の例１に記載のようにして製造した。その文献には、一般的な免疫化プロトコールが示されていた。他の情報、たとえば、Ｇ２５０抗体およびＧ２５０ハイブリドーマ細胞の分子学的特徴については示されていなかった。
Ｇ２５０ハイブリドーマ細胞系は、ブタペスト条約にしたがって、ＤＳＭＺで、寄託番号 ＤＳＭ ＡＣＣ ２５２６として、２００１年９月１１日に寄託された。
例２
モノクローナル抗体Ｇ２５０によって認識されたエピトープのマッピング
まとめられた実験的証拠によれば、モノクローナル抗体Ｇ２５０（ＭａｂＧ２５０）によって認識されたＧ２５０タンパク質エピトープは、立体配座であり、どちらかといえば非線状の種類である。この仮説は、以下の観察に基づくものである：
ＭａｂＧ２５０は、ウエスタンブロット分析において抗原Ｇ２５０と反応しなかった。
ＭＡｂＧ２５０アフィニティクロマトグラフィーによるＧ２５０抗原の精製は、非効率的であり、その際、効率は、精製の実施に要する時間が増加するにつれて減少し、タンパク質分解を回避するための最適の条件にもかかわらず、Ｇ２５０エピトープの急速な分解／変性が示唆された。一般的にデタージェントの添加は、ＥＬＩＳＡ中で減少したＧ２５０検出レベルを導いた。
Ｇ２５０抗原をコードするｃＤＮＡを切断（truncation）し、引き続いてＧ２５０−ネガティブ細胞へ一時的にトランスフェクションをおこない、その後に、以下に示された免疫組織学的分析をおこなった：
Figure 0004263485
これによって、長いｃＤＮＡコンストラクトが使用された場合においても、Ｇ２５０−反応性が失われることが見出された。
さらに、Ｇ２５０エピトープを明確に示すために、ＮｏｖａＴｏｐｅ ｓｙｓｔｅｍ（Novagen Inc.）が使用され、この場合、この系は、このベクター中にライゲートされたすべてのコンストラクトの発現を確実にする系であり、すなわち、リーディングフレームに関係なく、可能なすべてのフラグメントが発現する。これは、タンパク質の中間部分において存在するエピトープの同定を可能にする。
ＭＮ（Ｇ２５０）抗原をコードするｃＤＮＡは、ＤＮＡｓｅＩで２時間に亘って処理し、約１５〜７０個のアミノ酸の長さを有するポリペプチドをコードする約５０〜２００個のヌクレオチドのフラグメントが生じる。ｄＡテーリングの後に、フラグメントをｐＳｃｒｅｅｎ Ｔベクター中に挿入し、かつ、ライゲーション混合物を、トランスフォーメーションのためにコンピテントＥ．Ｃｏｌｉ ＤＥ３細菌に添加した。細菌を選択プレート上にプレーティングした。細菌コロニーをニトロセルロースフィルター上にブロッティングし、かつＧ２５０抗体でスクリーニングした。全部で７個のコロニーをＭＡｂＧ２５０で同定した。Ｇ２５０反応性は弱かった。さらに再度スクリーニングした後に、一つのコロニーのみが極めて弱いにもかかわらずＭｂＧ２５０と反応したが、おそらくはバックグランドによる染色であった。クローンのシークエンス分析は、任意のＧ２５０配列を示さなかったが、しかしながら、切断されたベクターの存在を示した。したがって、ニトロセルロースブロットの染色は、おそらくは非特異的バックグランドによるものである。
他の試験において、ＭＮ（Ｇ２５０）抗原をコードするｃＤＮＡは、ＤＮａｓｅＩで処理されるが、しかしながら、約６５〜２００個のアミノ酸のポリペプチドをコードする２００〜６００個のヌクレオチドのフラグメントが単離され、かつ発現ベクター中にクローニングされ、かつ細菌中で発現させた。別個の細菌コロニーをＧ２５０抗体に関してスクリーニングした。
Ｇ２５０での反応性は示されなかった。ブロットは、延長された時間に亘って染色されたが、その後に、わずかな染色が６個の細菌単離物で観察された。細菌単離物は、切断ベクターおよび関連のない配列のみを含有していた。
したがって、ＭＡｂ Ｇ２５０との強い反応性を有するＭＮ抗原の配列は全く同定されなかった。
これらの結果は、Ｇ２５０エピトープが立体配座エピトープであることを強く示している。さらに、ＭＮ抗原上のＧ２５０エピトープは、種々試みたが通常の方法によって特徴付けることはできなかった。
例３
キメラＧ２５０ ＩｇＧ生産細胞系の製造
一般的なストラテジー
マウスＧ２５０抗体のマウス／ヒト キメラ型の抗体を構築するために、抗体の結合特異性を決定するＨ鎖およびＬ鎖の可変部遺伝子は、Ｇ２５０マウスハイブリドーマからクローニングされ、かつｉｎ ｖｉｔｒｏで、ヒト定常部遺伝子と一緒に構築され、マウス／ヒトキメラキメラ遺伝子を製造した。適切な細胞系中でのこれらのキメラ遺伝子の発現は、本来のマウス抗体と同様の結合特性を有するキメラ抗体の製造を生じるが、しかしながら約７５％の分子はヒト配列を有している。
Ｇ２５０ハイブリドーマからのＨ鎖およびＬ鎖遺伝子の可変部をクローニングするためのストラテジーは、機能的に再構築された（および発現された）免疫グロブリン遺伝子のための、ゲノム中の可変部と相当するＪ（ジョイント）鎖との架橋に基づく。Ｊ鎖ＤＮＡプローブは、Ｊ鎖と結合するＤＮＡを単離するための遺伝子ライブラリーのスクリーニングのために使用することができ；さらに生殖細胞系組織（再構築なし）中のＤＮＡもＪプローブとハイブリダイズするが、しかしながら可変部配列とは結合せず、単離されたクローンの制限酵素分析によって同定することができる。
したがって、クローニングストラテジーは、ＪＨおよびＪＫプローブを用いて、再構築されたＨ鎖およびＬ鎖遺伝子から可変領域を単離した。さらに、正確な遺伝子クローンの同定および特徴付けを補助するために、Ｈ鎖およびＬ鎖の可変領域に相当するｃＤＮＡクローンが、Ｇ２５０ハイブリドーマ中で製造されたｍＲＮＡから得られた。Ｇ２５０ ｃＤＮＡ配列とマッチングするこれらのゲノミッククローンは、ヒト定常部を含む発現ベクター中でクローニングされ、かつマウス骨髄腫細胞中にトランスファーすることで抗体が製造されるかどうかを調べた。生産細胞からの抗体については、その後に、マウスＧ２５０抗体と比較しての結合特異性を試験した。
Ｇ２５０ＶＨｃＤＮＡおよびＶＬｃＤＮＡのクローニング
全ＲＮＡを、Ｇ２５０ハイブリドーマ細胞から単離し、特異的ＶＨおよびＶＬ ｃＤＮＡクローンを製造するために使用した。第１ストランドのｃＤＮＡ合成を、マウスκ鎖およびＩｇＧ定常部に特異的なオリゴヌクレオチドプライマーを用いておこなった。ｄGテーリングの後に、第２ストランド合成を、Ｃ−末端（tailed）オリグヌクレオチドプライマーを用いておこなった。Ｈ鎖およびＬ鎖の可変部は、特異的５’−および３’−プライマーを用いてポリメラーゼ連鎖反応によって増幅させ、かつ増幅産物を、プラスミドベクターｐＵＣ１９中にクローニングした。ＶＨおよびＶＬクローンについてＤＮＡシークエンス分析をおこない、推定されるＧ２５０Ｈ鎖およびＬ鎖可変部の塩基配列を確立した。シークエンシングの結果は、図１に示した。
Ｇ２５０可変部の遺伝子のクローニング
可変部遺伝子をクローニングするために、高分子量ゲノミックＤＮＡを、単離された核をＳＤＳおよびプロテアーゼＫで処理し、引き続いてフェノール抽出を２回、その後にエタノール沈殿を１回おこなうことによって、Ｇ２５０ハイブリドーマ細胞から単離した。
Ｈ鎖遺伝子座に関してＪ領域プローブを用いてのサザンブロッティングは、Ｇ２５０Ｈ鎖が、２．３ｋｂのＥｃｏＲＩ ＤＮＡフラグメントを含むことを示唆した。したがって、ハイブリドーマＤＮＡ細胞からのＥｃｏＲＩフラグメントを、０．８％アガロースゲル上に分画し、約２〜３ｋｂフラグメントのサイズの範囲をゲルから溶離し、かつλバクテリオファージＺａｐＩＩ（Stratagene, La Jolla California, USA）のベクターアームにライゲートした。ライゲーションを、ｉｎ ｖｉｔｒｏで、Ｇｉｄａｐａｃｋ Ｇｏｌｄ（Stratagene）を用いてファージ粒子中にパッケージングし、かつ、１５０ｍｍプレート当たり約２０，０００プラークの密度で、Ｅ．Ｃｏｌｉ ＬＥ３９２上にプレーティングした。プラークを、ニトロセルロースフィルター上にトランスファーし、かつ、３２Ｐ−ラベルされたＤＮＡプローブ（マウスＪ３およびＪ４エキソンを含有する２．０ＫｂのＥＣＯＲＩ−ＢａｍＨＩフラグメント）で試験した。
Ｌ鎖Ｇ２５０可変領域の遺伝子に関して、κ−遺伝子座からのマウスＪ鎖プローブを用いてのサザンブロッティング分析は、正確な遺伝子が、５．５ＫｂのＨｉｎｄＩＩＩフラグメント上に位置することを示した。したがって、Ｇ２５０ハイブリドーマＤＮＡは、ＨｉｎｄＩＩＩで切断され、かつ５〜６ＫｂのＤＮＡフラグメントを、０．８％アガロースゲルから単離し、かつ、バクテリオファージλベクター Ｃｈａｒｏｎ２７のアームにライゲートした。ライゲートされたＤＮＡをｉｎ ｖｉｔｒｏで、Ｇｉｇａｐａｃｋ Ｇｏｌｄ（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ）を用いて、ファージ粒子中にパッケージングし、かつ、Ｅ．Ｃｏｌｉ ＬＥ３９２細胞上に、１５０ｍｍプレート当たり約２０，０００プラークの密度でプレーティングした。プラークをニトロセルロースフィルターにトランスファーし、かつ、３２Ｐ−ラベルＤＮＡプローブで試験した（全部で５個のＪκエキソンを含む、２．７ＫｂのＨｉｎｄＩＩＩフラグメント）。
Ｈ鎖およびＬ鎖遺伝子に関する推定されるクローンを、Ｊ鎖プローブを用いて、少なくとも３回のプラーク精製の後に単離し、それぞれの精製段階において、ファージＤＮＡに対するハイブリダイゼーションを試験した。Ｈ鎖およびＬ鎖遺伝子のための単離されたファージクローンから精製されたＤＮＡを、ＥｃｏＲＩ（Ｈ鎖）およびＨｉｎｄＩＩＩ（Ｌ鎖）で切断し、かつアガロースゲル上に分画した。適切なサイズのフラグメント（Ｈ鎖に関しては２．３ｋｂおよびＬ鎖に関しては５．５ｋｂ）を、ゲルから単離し、かつプラスミドベクターｐＵＣ１９中にサブクローニングした。これらのサブクローニングされたＤＮＡフラグメントは、制限エンドヌクレアーゼマッピングおよびＤＮＡ配列分析によって、本来のＧ２５０ハイブリドーマから得られるｃＤＮＡクローンの構造に適合する可変領域抗体遺伝子を含有することが示された。
発現プラスミド
２．３ｋｂのＥｃｏＲＩ Ｈ鎖可変領域フラグメントを、ヒトＧ１定常領域および哺乳類細胞中で選択可能なマーカーに対する耐性を付与する遺伝子を含有する、適した発現ベクター中にクローニングした。５．５ｋｂのＨｉｎｄＩＩＩ Ｌ鎖フラグメントを、ヒトκ定常領域および哺乳類細胞中で選択可能なマーカーに対する耐性を付与する遺伝子を含有する、適した発現ベクター中にクローニングした。クローニングしたフラグメントの存在および発現ベクタ−中でのその配置を、制限酵素マッピングによって試験した。基礎となるベクターは、従来よりキメラ抗体の構築のために使用されていたものである（Sun, L. et al., (1987) PNAS 84, p. 214; Knight et al., (1993), Molecular Immunology 30, p. 1443-1453）。キメラ抗体遺伝子の発現は、クローンニングされた可変領域の上流に存在する天然の免疫グロブリンプロモーターを用いて達成され；下流の調節シグナルは、定常領域遺伝子と関連する要素によって提供された。
Ｇ２５０キメラ抗体の発現
Ｈ鎖およびＬ鎖発現ベクターは、エレクトロポレーション技術を用いて、非−生産性マウス骨髄腫細胞系の同時−トランスフェクトのために使用された。ＥＬＩＳＡアッセイを、ヒトＦｃ領域を有する抗体のスクリーニングのためのクローンをスクリーニングするために使用し、かつ、最も高い生産物（producer）（ｃＧ２５０）を、他の特徴付けのために選択した。
キメラ抗体は、タンパク質Ａ−セファロース上でクロマトグラフィーによって精製し、かつ、抗体が正確な特異性を有することを証明するための競合アッセイ中で分析した。ｃＧ２５０抗体は、Ａ７０４腎細胞腫細胞（この場合、これは、Ｇ２５０抗体を発現する）との結合に関しての１２５Ｉ−ラベルマウスＧ２５０との競合において、非ラベルマウスＧ２５０とほぼ等しく効果的であることが見出された。したがって、キメラＧ２５０抗体は、その結合特性に関して、本来のマウスＧ２５０抗体と類似している。
例４
臨床試験におけるキメラＧ２５０抗体の使用
投与プロトコール
術後の転移を有する腎細胞腫の患者は、１２週間に亘って、１週間当たり１回の輸液で、３０分に亘ってキメラＧ２５０抗体 ５０ｍｇを投与することによって処理した。
有効性の判断：
この試験において、６ヶ月以上に亘って、疾病の継続的な安定化が、患者３２人のうち８人（２５％）で達成された。すべての患者に関する進行に対してのメディアン時間は、４〜７０週間の範囲で１６週間であった（平均２６、２７週間）。試験を中断した日時である２００１年１２月において、５人の患者についてはなおも進行がみられなかった（５１＋、５６＋、６０＋、６４＋および７０＋週間）。
これらの発見の重要性は、これらの患者の多くが、記録された進行性疾病を有することによって支持されるが、他の２人の患者については、試験への参加時において進行していたと考えられる。さらに、これらの患者のうち３人は、以前のサイトカイン療法および化学療法に対して治療抵抗性であるか、あるいは、サイトカイン治療後の数年間で再発していた。４人の患者については治療歴がなく、転移の診断の後すぐに試験薬剤で治療した。試験への参加時において、これらの患者のうち３人は、８０％のKarnofsky performance status（ＫＰＳ）を有し、２人が９０％のＫＰＳを有していた。ヘモグロビン（Ｈｇｂ）は、５人の患者において１０ｇ／ｄＬを下廻った。９０％のperfomenace status 中央値（平均９１％）は、非応答性の患者群と同一であった。さらに。９．８ｇ／ｄＬ（平均 １０．９７ｇ／ｄＬ）のメディアンＨｇｂは相対的に低かった。
１人の患者において、完全に目的とする緩解が達成された。目的とする応答は、遅延して生じ、治療の開始後６ヶ月を上廻って生じた。他の患者では、その標的病変の大きさの５９％相当する減少を生じた。双方の患者の応答は、それぞれ６４週、および７０週で、２００１年１２月での評価と同様に継続していた。腫瘍の退行は、試験開始後６ヶ月を上廻って遅くに生じた。遅発性応答は、キメラ抗体の静脈内注射（iv injection）による治療の継続期間が相対的に短く、かつ、ＡＤＣＣとは無関係の遅延した免疫応答が生じたものと解釈されてもよい。
応答は、１年以上に亘って継続可能であり、かつ２００１年１２月においてなおも継続していた。総合的な臨床効果率（clinical benefit）（少なくとも６ヶ月を上廻るか、または目的の応答）は２５％であった。さらに、試験的治療参加後６ヶ月で、患者の８７．５％（２８／３２）が依然として生存していたことは強調されるべきである。
２００１年１１月の末において、メディアン生存時間の推定が、少なくとも１３．５ヶ月であると算定された。
２００２年１月の末において、メディアン生存時間の推定が、少なくとも１５ヶ月であると算定された。これは、未治療の患者（３ヶ月）のメディアン生存時間よりもかなり高く、かつ、ＦＤＡ承認の標準的治療、すなわち、高用量インターロイキン２の投与（１０〜１２ヶ月）で治療した患者のメディアン生存時間よりもかなり高いものである。
このようにして、キメラ抗体Ｇ２５０が、腎細胞腫の治療に関しての適した治療薬であることが明らかになった。好ましい実施態様において、治療は、体中に分散した転移を取り除くために、主な腫瘍の外科的手術による除去、および引き続いてのＧ２５０の投与を含む。
本発明によるＶＨＧ２５０およびＶＬＧ２５０のシークエンシングの結果を示す図

Claims (18)

  1. モノクローナル抗体Ｇ２５０を製造するハイブリドーマ細胞Ｇ２５０（受託番号：ＤＳＭ ＡＣＣ ２５２６）。
  2. モノクローナル抗体Ｇ２５０を製造する細胞を製造するための、請求項１に記載のハイブリドーマ細胞Ｇ２５０（受託番号：ＤＳＭ ＡＣＣ ２５２６）の使用。
  3. 前記細胞が、Ｇ２５０抗体または少なくともＧ２５０抗体の抗原結合部位をコードする遺伝物質を細胞にトランスファーすることによって得られる、請求項２に記載の使用。
  4. 前記細胞が、キメラ抗体、ヒト化抗体、完全ヒト化抗体、二重特異性抗体、一本鎖抗体、またはＦ（ａｂ’）２、Ｆａｂ’またはＦａｂ抗体フラグメントを製造する、請求項２に記載の使用。
  5. 前記細胞が、原核細胞である、請求項２から４までのいずれか１項に記載の使用。
  6. 前記細胞が、Ｅ．Ｃｏｌｉ細胞である、請求項５に記載の使用。
  7. 前記細胞が、真核細胞である、請求項２から４までのいずれか１項に記載の使用。
  8. 前記細胞が、酵母細胞、骨髄腫細胞またはＣＨＯ−細胞である、請求項７に記載の使用。
  9. Ｇ２５０抗体を製造するための方法において、適した条件下で、請求項１から７までのいずれか１項に記載の細胞を培養し、抗体が製造され、かつ細胞および／または培地から抗体を得ることを特徴とする、Ｇ２５０抗体を製造するための方法。
  10. 癌治療において、遅延した免疫応答を惹起する活性物質としてＧ２５０抗体を含有する医薬品を製造するために使用される請求項９に記載の方法。
  11. 医薬品がキメラＧ２５０抗体を含有する、請求項１０に記載の方法。
  12. 医薬品が、放射性ラベルされた形でのキメラＧ２５０抗体を含有する、請求項１０に記載の方法。
  13. 医薬品が、サイトカインと結合したキメラＧ２５０抗体を含有する、請求項１０に記載の方法。
  14. サイトカインが、ＩＬ−２、ＴＮＦおよび／またはＧＭ−ＣＳＦである、請求項１３に記載の方法。
  15. Ｇ２５０抗体を製造するための、請求項１から７までのいずれか１項に記載の細胞の使用。
  16. 癌治療において、遅延した免疫応答を惹起する薬剤を製造するための、請求項１から７までのいずれか１項に記載の細胞により製造されたＧ２５０抗体の使用。
  17. 腎細胞腫の治療のための、請求項１６に記載の使用。
  18. 腫瘍の手術後の転移を治療するための、請求項１６または１７に記載の使用。
JP2002563309A 2001-02-07 2002-02-07 ハイブリドーマ細胞系ｇ２５０およびモノクローナル抗体を製造するためのその使用 Expired - Lifetime JP4263485B2 (ja)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US26685301P 2001-02-07 2001-02-07
US32700801P 2001-10-05 2001-10-05
PCT/EP2002/001282 WO2002062972A2 (en) 2001-02-07 2002-02-07 Hybridoma cell line g250 and its use for producing monoclonal antibodies

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JP2004522447A JP2004522447A (ja) 2004-07-29
JP4263485B2 true JP4263485B2 (ja) 2009-05-13

Family

ID=26952068

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2002563309A Expired - Lifetime JP4263485B2 (ja) 2001-02-07 2002-02-07 ハイブリドーマ細胞系ｇ２５０およびモノクローナル抗体を製造するためのその使用

Country Status (12)

Country Link
US (1) US20040219633A1 (ja)
EP (2) EP1385959A2 (ja)
JP (1) JP4263485B2 (ja)
AT (1) ATE337395T1 (ja)
AU (2) AU2002238537B8 (ja)
CA (1) CA2435683C (ja)
DE (1) DE60214127T2 (ja)
DK (2) DK1358318T3 (ja)
ES (2) ES2266448T3 (ja)
MX (1) MXPA03006992A (ja)
PT (2) PT1733736E (ja)
WO (2) WO2002063010A2 (ja)

Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20040077081A1 (en) * 2001-02-07 2004-04-22 Egbert Oosterwijk Hybridoma cell line g250 and its use for producing monoclonal antibodies
US20090162382A1 (en) * 2002-03-01 2009-06-25 Bernett Matthew J Optimized ca9 antibodies and methods of using the same
JP5408833B2 (ja) 2002-07-01 2014-02-05 ヴィレックス アクチェンゲゼルシャフト 腎細胞腫を治療するためのＣＧ２５０およびＩＬ−２またはＩＦＮ−αを含有する抗腫瘍剤
US7691375B2 (en) * 2004-07-02 2010-04-06 Wilex Ag Adjuvant theraphy of G250-expressing tumors
US8466263B2 (en) 2005-12-02 2013-06-18 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Carbonic anhydrase IX (G250) anitbodies
DOP2006000277A (es) * 2005-12-12 2007-08-31 Bayer Pharmaceuticals Corp Anticuerpos anti mn y métodos para su utilización
WO2008091798A2 (en) * 2007-01-22 2008-07-31 Xencor, Inc. Optimized ca9 antibodies and methods of using the same
GB0911569D0 (en) * 2009-07-03 2009-08-12 Ulive Entpr Ltd Method for the detection of organ or tissue injury
EP2477661B1 (en) * 2009-09-15 2017-06-14 Wilex AG Selective detection of bone metastases in renal clear cell carcinoma
ES2703572T3 (es) * 2013-02-22 2019-03-11 Heidelberg Pharma Ag Tratamiento del cáncer basado en la estratificación de CAIX
AR095863A1 (es) * 2013-04-16 2015-11-18 Genentech Inc Variantes de pertuzumab, su evaluación, método de tratamiento, método de preparación y artículo de fabricación
MA56467A (fr) * 2019-07-02 2022-05-11 Telix Int Pty Ltd Anticorps dirigés contre caix avec une affinité réduite pour le récepteur fc néonatal
WO2025213177A2 (en) * 2024-04-05 2025-10-09 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Antibodies against caix and methods of use thereof

Family Cites Families (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4816567A (en) * 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
AU6032786A (en) * 1985-07-25 1987-01-29 University Of Minnesota Detection, imaging and therapy of renal cell carcinoma with monoclonal antibodies in vivo
US5618920A (en) * 1985-11-01 1997-04-08 Xoma Corporation Modular assembly of antibody genes, antibodies prepared thereby and use
EP0366707A1 (en) * 1987-05-06 1990-05-09 OOSTERWIJK, Egbert Monoclonal antibodies to renal cell carcinoma
US5258498A (en) * 1987-05-21 1993-11-02 Creative Biomolecules, Inc. Polypeptide linkers for production of biosynthetic proteins
US5530101A (en) * 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
GB9015198D0 (en) * 1990-07-10 1990-08-29 Brien Caroline J O Binding substance
DE69616651D1 (de) * 1995-05-26 2001-12-13 Merck Patent Gmbh Antiidiotypische Antikörper die eine Immunantwort gegen den Rezeptor für epidermalen Wachstumsfaktor induzieren
US6057098A (en) * 1997-04-04 2000-05-02 Biosite Diagnostics, Inc. Polyvalent display libraries
AU3657899A (en) * 1998-04-20 1999-11-08 James E. Bailey Glycosylation engineering of antibodies for improving antibody-dependent cellular cytotoxicity
FR2793497B1 (fr) * 1999-05-10 2003-04-18 Centre Nat Rech Scient Anticorps monoclonal dirige contre les cellules de carcinome renal humain
AU763733B2 (en) * 1999-07-06 2003-07-31 Got-A-Gene Ab Recombinant adenovirus
GB0017720D0 (en) * 2000-07-19 2000-09-06 Got A Gene Ab Modified virus
WO2003016909A1 (en) * 2001-08-16 2003-02-27 Ludwig Institute For Cancer Research Method for determining protein component in a biological sample

Also Published As

Publication number Publication date
DK1358318T3 (da) 2007-01-02
PT1358318E (pt) 2007-01-31
WO2002063010A3 (en) 2003-11-27
EP1385959A2 (en) 2004-02-04
HK1094876A1 (en) 2007-04-13
WO2002063010A2 (en) 2002-08-15
US20040219633A1 (en) 2004-11-04
WO2002063010A9 (en) 2002-09-12
ES2266448T3 (es) 2007-03-01
WO2002062972A3 (en) 2002-12-12
MXPA03006992A (es) 2003-11-18
CA2435683A1 (en) 2002-08-15
AU2002238537B2 (en) 2006-07-20
DE60214127T2 (de) 2007-01-11
ES2531909T3 (es) 2015-03-20
CA2435683C (en) 2012-03-20
ATE337395T1 (de) 2006-09-15
AU2002252999A1 (en) 2002-08-19
DE60214127D1 (de) 2006-10-05
EP1358318B8 (en) 2006-11-15
DK1733736T3 (en) 2015-06-01
WO2002062972A2 (en) 2002-08-15
EP1358318B1 (en) 2006-08-23
AU2002238537B8 (en) 2006-08-24
JP2004522447A (ja) 2004-07-29
PT1733736E (pt) 2015-06-11
EP1358318A2 (en) 2003-11-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN112424224B (zh) 抗白细胞介素-17a抗体、其药物组合物及其用途
JP3947570B2 (ja) 変異した不活化ＩｇＧ２ドメインおよびこれを組み込んだ抗ＣＤ３抗体
JP6412083B2 (ja) 安定なＩｇＧ４抗体
CN101134779B (zh) 人cd22特异性抗体及其治疗和诊断应用
WO2017148424A1 (zh) 一种pdl-1抗体、其药物组合物及其用途
WO2018036472A1 (zh) 一种抗pd1单克隆抗体、其药物组合物及其用途
JP2004532608A (ja) ヒト化抗ＬＴ−β−Ｒ抗体
JP2006521085A (ja) Ｇｄ２に結合するマウス１４．１８抗体のヒト化抗体（ｈ１４．１８）およびそのｉｌ−２融合タンパク質
JP2013500703A (ja) Ｍｕｃ１抗体
KR20100122923A (ko) Ｃｓｆ－１ｒ에 대한 항체
WO2001023432A1 (en) Human type complementarity determining region transplantation antibody against ganglioside gd3 and derivatives of antibody against ganglioside gd3
JP2022530301A (ja) Ｃｄ３抗原結合性断片及びその使用
EP1358318B1 (en) Hybridoma cell line g250 and its use for producing monoclonal antibodies
AU2002238537A1 (en) Hybridoma cell line G250 and its use for producing monoclonal antibodies
US9605075B2 (en) Hybridoma cell line G250 and its use for producing monoclonal antibodies
TW201121569A (en) Treatment of cancer involving mutated KRAS or BRAF genes
AU2006230697B2 (en) Hybridoma cell line G250 and its use for producing monoclonal antibodies
EP1733736B1 (en) Method of producing recombinant antibodies against tumours
HK1094876B (en) Method of producing recombinant antibodies against tumours
CN107840886B (zh) Gm-csf抗体及其用途
CN115505041B (zh) 抗EphA2抗体及其应用
CN113164601B (zh) 一种分离的抗原结合蛋白及其用途
CN115073600A (zh) Gitr结合蛋白及其用途
CN114127118A (zh) 一种分离的抗原结合蛋白及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
A621 Written request for application examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621

Effective date: 20040917

RD04 Notification of resignation of power of attorney

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424

Effective date: 20051201

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20070627

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20070927

A02 Decision of refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02

Effective date: 20071206

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20080304

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821

Effective date: 20080425

A911 Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911

Effective date: 20080610

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20080709

A601 Written request for extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601

Effective date: 20081009

A602 Written permission of extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602

Effective date: 20081017

A601 Written request for extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601

Effective date: 20081106

A602 Written permission of extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602

Effective date: 20081113

A601 Written request for extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601

Effective date: 20081208

A602 Written permission of extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602

Effective date: 20081215

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20081225

TRDD Decision of grant or rejection written
A01 Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01

Effective date: 20090123

A01 Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01

A61 First payment of annual fees (during grant procedure)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61

Effective date: 20090212

FPAY Renewal fee payment (event date is renewal date of database)

Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120220

Year of fee payment: 3

R150 Certificate of patent or registration of utility model

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150

Ref document number: 4263485

Country of ref document: JP

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150

FPAY Renewal fee payment (event date is renewal date of database)

Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130220

Year of fee payment: 4

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

FPAY Renewal fee payment (event date is renewal date of database)

Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130220

Year of fee payment: 4

FPAY Renewal fee payment (event date is renewal date of database)

Free format text: PAYMENT UNTIL: 20140220

Year of fee payment: 5

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

EXPY Cancellation because of completion of term