JP4949859B2

JP4949859B2 - インターロイキン−３３（ｉｌ３３）およびｉｌ−３３レセプター複合体の使用

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Publication number: JP4949859B2
Application number: JP2006553342A
Authority: JP
Inventors: ヨッヒェンシュミッツ，; マーティンオフト，; ロバートエー．カステレイン，; ジェイ．フェルナンドバザン，
Original assignee: Schering Corp
Current assignee: Merck Sharp and Dohme LLC
Priority date: 2004-02-17
Filing date: 2005-02-15
Publication date: 2012-06-13
Anticipated expiration: 2025-02-15
Also published as: EP1725261B1; TW201304802A; BRPI0507808A; JP2011178810A; US20090041718A1; EP2283860A2; EP1725261A2; AU2005215528A1; NO20064193L; NZ549040A; WO2005079844A2; DE602005026105D1; US20050203046A1; EP2283860A3; ZA200606844B; CN1917902A; TW200539891A; US20070160579A1; TWI372628B; US9970944B2

Description

（発明の分野）
本発明は、一般的に、哺乳動物サイトカインの使用に関する。より具体的には、本発明は、ＩＬ−３３およびＩＬ−３３に対するレセプターを使用する方法を開示する。

（発明の背景）
免疫系は、個体を感染性因子（例えば、細菌、多細胞生物）ならびに癌から保護する。この系は、いくつかの型のリンパ系細胞および骨髄性細胞（例えば、単球、マクロファージ、樹状細胞（ＤＣ）、好酸球、Ｔ細胞、Ｂ細胞、および好中球）を包含する。これらのリンパ系細胞および骨髄性細胞は、多くの場合、サイトカインとして公知のシグナル伝達タンパク質を産生する。免疫応答は、炎症（すなわち、身体の全身的か、または特に局所における免疫細胞の蓄積）を包含する。感染性因子または外来物質に応答して、免疫細胞は、サイトカインを分泌し、次いでサイトカインは、免疫細胞の増殖、発生、分化、または移動を調節する。免疫応答は、ときとして、病理学的な結果（すなわち、炎症性障害）をもたらす。免疫細胞およびサイトカインに関するこれらの炎症性障害としては、例えば、乾癬、慢性関節リウマチ、クローン病、多発性硬化症、およびアテローム性動脈硬化症が挙げられる（例えば、非特許文献１；非特許文献２；非特許文献３；非特許文献４；非特許文献５；非特許文献６；非特許文献７；非特許文献８；非特許文献９を参照のこと）。

サイトカインのインターロイキン−１（ＩＬ−１）ファミリーは、炎症性障害および増殖性の状態（例えば、関節炎および癌）の病理に寄与する。ＩＬ−１ファミリーのサイトカインとしては、ＩＬ−１α、ＩＬ−１β、ＩＬ−１δ、ＩＬ−１ε、塩基性線維芽細胞成長因子、ＩＬ−１８、ＣＲＥＧおよびＣＲＥＧ２が挙げられる。ＩＬ−１αおよびＩＬ−１βは、３１ｋＤａのポリペプチドとして生合成され、これらは成熟１７ｋＤａ形態にさらに処理されるが、ＩＬ−１δおよびＩＬ−１εは、別個の前駆形態を持たないようである（例えば、非特許文献１０；非特許文献１１；非特許文献１２；非特許文献１３を参照のこと）。

上記ＩＬ−１ファミリーとしてはまた、ＩＬ−１レセプター（すなわち、ＩＬ−１ＲＩ、ＩＬ−１ＲＩＩ、およびＩＬ−１Ｒ補助タンパク質（それぞれ、いわゆるＩＬ−１ＲＩ、ＩＬ−１Ｒ２、およびＩＬ−１Ｒ３）が挙げられる。ＩＬ−１αおよびＩＬ−１βは、ＩＬ−１Ｒ１と結合することによって細胞シグナル伝達を引き起こすが、ＩＬ−１ＲＩＩは、循環するリガンドを吸着する分子として機能し得る。ＩＬ−１レセプターアンタゴニスト（ＩＬ−１Ｒａ）（別のＩＬ−１ファミリーのタンパク質）は、シグナルを伝達せずにＩＬ−１レセプターと結合し、そしてＩＬ−１のインヒビターとして役目を果たす。ＩＬ−１ｒａおよびＩＬ−１δは、レセプターを介するシグナル伝達のアンタゴナイズにおいて同様の役割を果たす（すなわち、ＩＬ−１ｒａは、ＩＬ−１Ｒ１を介してＩＬ−１α媒介性シグナル伝達をアンタゴナイズする一方で、ＩＬ−１δは、ＩＬ−１Ｒ６を介してＩＬ−１ε媒介性シグナル伝達をアンタゴナイズする）（例えば、非特許文献１４；非特許文献１０；非特許文献１５；非特許文献１６を参照のこと）。

ＩＬ−１ファミリーメンバーは、炎症性状態（例えば、慢性関節リウマチ、乾癬、喘息、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、敗血症、および炎症性腸障害（ＩＢＤ）において役割を果たす。慢性関節リウマチ（ＲＡ）は、関節（例えば、滑膜、軟骨、および骨）の分解によって特徴付けられる一般的な慢性炎症性障害である。この障害は、約１％の人口を襲い、そして治癒され得ない。ＩＬ−１は、関節炎の炎症に関する多くの細胞（例えば、線維芽細胞、骨芽細胞、軟骨細胞、および好中球）を刺激し、これらの細胞は、異常増殖を示し得、そして関節の破壊を引き起こす酵素の放出し得る（例えば、非特許文献１７；非特許文献１８；非特許文献１９；非特許文献２０；非特許文献２１；非特許文献２２；非特許文献２３；非特許文献２４；非特許文献２５；非特許文献２６；非特許文献１８（前出）；非特許文献２７；非特許文献２８を参照のこと）。

増殖性の障害は、米国における死亡の第２の最も一般的な原因である（非特許文献２９；非特許文献３０；非特許文献３１；非特許文献３２）。上記ＩＬ−１ファミリーのサイトカインは、増殖性の障害（すなわち、癌）の制御および病理に関係している。ＩＬ−１は、細胞周期（例えば、サイクリン依存性キナーゼおよびサイクリン依存性キナーゼインヒビターの発現を変化させること）によって進行を調節する。高用量のＩＬ−１βは、腫瘍の侵襲性を促進するが、低用量は、腫瘍の免疫性の排除を促進し得る（例えば、非特許文献３３；非特許文献３４；非特許文献３５；非特許文献３６；非特許文献１５（前出）；非特許文献３７；非特許文献３８；非特許文献３９；非特許文献４０；非特許文献４１を参照のこと）。
Ａｂｂａｓら（編）「ＣｅｌｌｕｌａｒａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ」、Ｗ．Ｂ．ＳａｕｎｄｅｒｓＣｏ．、Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ、ＰＡ、２０００年ＯｐｐｅｎｈｅｉｍおよびＦｅｌｄｍａｎｎ（編）「ＣｙｔｏｋｉｎｅＲｅｆｅｒｅｎｃｅ」、ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅｓｓ、ＳａｎＤｉｅｇｏ、ＣＡ、２００１年Ｋａｕｆｍａｎｎら「Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌ．」、２００１年、第２０４巻、６０３〜６１３ページＳａｕｒｅｚおよびＳｃｈｕｌｔｚ−Ｃｈｅｅｒｙ「Ｄｅｖ．Ｃｏｍｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．」、２０００年、第２４巻、２６９〜２８３ページｖａｎＲｅｅｔｈおよびＮａｕｗｙｎｃｋ「Ｖｅｔ．Ｒｅｓ．」、２０００年、第３１巻、１８７〜２１３ページＧａｒｃｉａ−Ｓａｓｔｒｅ「Ｖｉｒｏｌｏｇｙ」、２００１年、第２７９巻、３７５〜３８４ページＫａｔｚｅら「Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．」、２００２年、第２巻、６７５〜６８７ページｖａｎＲｅｅｔｈ「Ｖｅｔ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．」、２０００年、第７４巻、１０９〜１１６ページＴｒｉｐｐ「Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｄｅｓ．」、２００３年、第９巻、５１〜５９ページＤｅｂｅｔｓら「Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．」、２００１年、第１６７巻、１４４０〜１４４６ページＭｃＭａｈｏｎら「Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．」、１９９７年、第２７２巻、２８２０２〜２８２０５ページＩｒｉｋｕｒａら「ＮｅｗＥｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．」、２００２年、第１６９巻、３９３〜３９８ページＫｉｍら「Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．」、２００２年、第２７７巻、１０９９８〜１１００３ページＹｏｕら「ＮｅｗＥｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．」、２００１年、第１９３巻、１０１〜１０９ページＡｐｔｅおよびＶｏｒｏｎｏｖ「Ｓｅｍ．ＣａｎｃｅｒＢｉｏｌ．」、２００２年、第１２巻、２７７〜２９０ページＷｏｎｇら「Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ」、１９９７年、第９４巻、２２７〜２３２ページＤｅｂｅｔｓら「Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．」、１９９７年、第１５８巻、２９５５〜２９６３ページＬａｃｅｙら「ＡｒｔｈｒｉｔｉｓＲｈｅｕｍ．」、２００３年、第４８巻、１０３〜１０９ページＣｈｕｎｇ「Ｅｕｒ．Ｒｅｓｐ．Ｊ．」、２００１年、補遺３４、５０ｓ〜５９ｓページＦｒｅｅｍａｎおよびＢｕｃｈｍａｎ「ＥｘｐｅｒｔＯｐｉｎ．Ｂｉｏｌ．Ｔｈｅｒ．」、２００１年、第１巻、３０１〜３０８ページＤｉｎａｒｅｌｌｏ「Ｃｈｅｓｔ」、２０００年、第１１８巻、５０３〜５０８ページＫｒａｕｓｅら「Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．」、２００２年、第１６９巻、６６１０〜６６１６ページＣｈｏｙおよびＰａｎａｙｉ「ＮｅｗＥｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．」、２００１年、第３４４巻、９０７〜９１６ページＷｏｏｌｌｅｙ「ＮｅｗＥｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．」、２００３年、第３４８巻、１７０９〜１７１１ページＷｉｌｌｉａｍｓら、「ＮｅｗＥｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．」、２０００年、第１６４巻、７２４０〜７２４５ページＦｅｌｄｍａｎｎおよびＭａｉｎｉ「Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．」、２００１年、第１９巻、１６３〜１９６ページＮｉｋｉら「Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．」、２００１年、第１０７巻、１１２７〜１１３５ページＡｔｔｕｒら「Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．」、２０００年、第５１巻、４０３０７〜４０３１５ページＡｎｄｅｒｓｏｎ「ＮａｔｉｏｎａｌＶｉｔａｌＳｔａｔｉｓｔｉｃｓＲｅｐｏｒｔｓ」、２００２年、第５０巻、１〜８６ページＴｏｒｉｂａｒａおよびＳｌｅｉｓｅｎｇｅｒ「ＮｅｗＥｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．」、２００３年、第３３２巻、８６１〜８６７ページＪａｎｎｅおよびＭａｙｅｒ「ＮｅｗＥｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．」、２０００年、第３４２巻、１９６０〜１９６８ページＦｕｃｈｓおよびＭａｙｅｒ「ＮｅｗＥｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．」、１９９５年、第３３３巻、３２〜４１ページＺｅｉｓｌｅｒら「Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ」、１９９８年、第３４巻、９３１〜９３３ページＹｏｓｈｉｄａら「Ｂｒｉｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ」、２００２年、第８６巻、１３９６〜１４００ページＮｅｓｂｉｔら「Ｏｎｃｏｇｅｎｅ」、１９９９年、第１８巻、６４６９〜６４７６ページＤｉｎａｒｅｌｌｏら「Ｊ．Ｌｅｕｋｏ．Ｂｉｏｌ．」、１９９８年、第６３巻、６５８〜６６４ページＳａｉｊｏら「ＮｅｗＥｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．」、２００２年、第１６９巻、４６９〜４７５ページＭｕｒａｉら「Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．」、２００１年、第２７６巻、６７９７〜６８０６ページＫｏｕｄｓｓｉら「Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．」、１９９８年、第２７３巻、２５７９６〜２５８０３ページＺｅｋｉら「Ｊ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．」、１９９９年、第１６０巻、６７〜７３ページＯｓａｗａら「Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．」、２０００年、第１２７巻、８８３〜８９３ページ

炎症性障害および免疫障害を処置することに対する、未だに満たされない必要性が存在する。本発明は、ＩＬ−３３またはＩＬ−３３レセプターのアゴニストおよびアンタゴニストを使用する方法を提供することによって、上記必要性を満たす。

（発明の要旨）
本発明は、ＩＬ−３３もしくはＩＬ−３３レセプターのアゴニストまたはアンタゴニスト（ＩＬ−１００およびＩＬ−１００レセプターとして公知である）が、多くの免疫状態および炎症性状態に対する応答を調節するという知見に、部分的に基づく。

本発明は、免疫障害または免疫状態を調節する方法を提供し、この方法は、有効量の、ＩＬ−３３もしくはＩＬ−３３Ｒ複合体のアゴニストまたはアンタゴニストを投与する工程を包含する。上記障害または状態が、以下：ａ）先天的応答；ｂ）喘息またはアレルギー；ｃ）多発性硬化症；ｄ）炎症性腸障害；ｅ）関節炎；ｆ）感染；ｇ）癌または腫瘍を含む、上記の方法もまた提供される。上記感染が、以下：ａ）細胞内病原体；ｂ）細菌；ｃ）寄生生物；またはｄ）ウイルスを含む、上記の方法；およびこの細胞内病原体が、以下：ａ）Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａｓｐ．；ｂ）Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｓｐ．；ｃ）Ｌｉｓｔｅｒｉａｓｐ．；ｄ）Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａｓｐ．；ｅ）Ｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍａ；またはｆ）呼吸器ウイルスである、上記の方法が、さらに提供される。さらに、本発明は、上記免疫障害または免疫状態がＴＨ１型応答またはＴＨ２型応答を含む上記の方法；およびこのＴＨ２型応答がＴＨ２型応答の初期の事象を含む、上記の方法；ならびに上記関節炎が慢性関節リウマチ；変形性関節症；または乾癬性関節炎を含む上記の方法を提供する。

別の実施形態において、本発明は、アゴニストがＩＬ−３３または核酸を含む上記の方法；およびこの核酸がＩＬ−３３をコードする上記の方法；および上記アンタゴニストがＩＬ−３３またはＩＬ−３３の複合体、Ｔ１／ＳＴ２およびＳＩＧＩＲＲ（ＩＬ−３３Ｒ）に特異的に結合する抗体から得た結合組成物を含む上記の方法を提供する。なお別の実施形態において、本発明は、抗体から得た上記結合組成物がポリクローナル抗体；モノクローナル抗体；ヒト化抗体、もしくはそのフラグメント；Ｆａｂフラグメント、Ｆｖフラグメント、もしくはＦ（ａｂ’）_２フラグメント；抗体のペプチド模倣体；または検出可能な標識を含む上記の方法を提供する。上記アンタゴニストが、以下：ａ）可溶性ＩＬ−３３Ｒ；ｂ）低分子；またはｃ）核酸を含む上記の方法；ならびにこの核酸がＩＬ−３３をコードするポリヌクレオチドと特異的にハイブリダイズする上記の方法；およびこの核酸がアンチセンス核酸または低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）を含む上記の方法もまた、提供される。

別の局面において、本発明は、有効量のＩＬ−３３のアゴニストまたはアンタゴニストを投与する工程を包含する、血球数を調節する方法；およびこのＩＬ−３３アゴニストが白血球；好中球；リンパ球；または好酸球の総数を増大させる上記の方法；ならびにこのＩＬ−３３アンタゴニストが血小板の数を増大させる上記の方法；およびこのＩＬ−３３アンタゴニストが白血球；好中球；リンパ球；または好酸球の総数を減少させる上記の方法を提供する。

本発明のなお別の局面は、上記の免疫状態または免疫障害を診断する方法を提供し、この方法は、生物学的サンプルに、ＩＬ−３３に特異的に結合する結合組成物を接触させる工程、およびこの生物学的サンプルに対するこの結合組成物の特異的結合を、測定または決定する工程を包含する。請求項１に記載の免疫状態または免疫障害の診断のためのキットもまた提供され、このキットは、コンパートメントと、およびＩＬ−３３；ＩＬ−３３Ｒ複合体；ＩＬ−３３およびＩＬ−３３Ｒの複合体；またはＩＬ−３３をコードする核酸に特異的に結合する結合組成物とを備える。

（好ましい実施形態の詳細な説明）
添付の特許請求の範囲を含む本明細書において使用される場合、「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」のような単語の単数形態は、文脈が明らかにそうでないことを示さない限り、それらの対応する複数形の言及を包含する。

本明細書において引用される全ての参考文献は、あたかも各個々の刊行物または特許出願が、具体的かつ独立して参考として援用されることが示されるのと同じ程度に、本明細書において参考として援用される。

（Ｉ．定義）
「活性化」、「刺激」および「処置」とは、細胞またはレセプターに対して適用される場合、文脈によってそうでないことが示されないか、または明示的にそうでないことが示されない限り、同じ意味（例えば、リガンドでの細胞またはレセプターの活性化、刺激または処置）を有し得る。「リガンド」は、天然リガンドおよび合成リガンド（例えば、サイトカイン、サイトカイン改変体、アナログ、ムテイン、および抗体由来の結合組成物）を包含する。「リガンド」はまた、低分子（例えば、サイトカインのペプチド模倣体、および抗体のペプチド模倣体）も包含する。「活性化」は、内部機構ならびに外部機構または環境因子によって調節される場合の細胞の活性化について言及し得る。例えば、細胞、組織、器官または生物の「応答」は、生化学的挙動または生理学的挙動（例えば、生物学的画分内の濃度、密度、接着または移動、遺伝子発現の速度、あるいは分化の状態）の変化を包含し、ここで、この変化は、活性化、刺激または処置、あるいは遺伝的プログラミングのような内部機構と相関する。

分子の「活性」とは、リガンドもしくはレセプターに対する分子の結合、触媒活性；遺伝子発現もしくは細胞シグナル伝達、分化、または成熟を刺激する能力；抗原性活性、他の分子の活性の調節などを説明し得るか、あるいはこれらについていい得る。分子の「活性」はまた、細胞−細胞相互作用（例えば、接着）を調節もしくは維持する活性、または細胞の構造（例えば、細胞膜または細胞骨格）を維持する活性についていい得る。「活性」はまた、比活性（例えば、［触媒活性］／［ｍｇタンパク質］、または［免疫学的活性］／［ｍｇタンパク質］、生物学的画分における濃度など）を意味し得る。「増殖活性」は、例えば、正常な細胞分裂、ならびに癌、腫瘍、異形成、細胞形質転換、転移、および新脈管形成を増強する活性（すなわち、これらに必要とされるか、またはこれらに特異的に関連する活性）を包含する。

「投与」および「処置（処理）」とは、例えば、動物、ヒト、実験被験体、細胞、組織、器官または生物学的流体にＩＬ−３３のアゴニストまたはアンタゴニストの投与を適用する場合、外因性の薬学的因子、治療因子、診断因子、化合物または組成物の、動物、ヒト、被験体、細胞、組織、器官または生物学的流体への接触をいう。「投与」および「処置（処理）」は、例えば、治療的方法、プラシーボ方法、薬物動態学的方法、診断方法、研究方法および実験方法をいい得る。「細胞の処理」とは、細胞への試薬の接触ならびに流体への試薬の接触（ここで、この流体は細胞と接触している）を包含する。「投与」および「処置（処理）」はまた、インビトロ処置（処理）またはエキソビボ処置（処理）（例えば、試薬、診断、結合組成物、または別の細胞による細胞の処理）を意味する。ヒト被験体、獣医学的被験体または研究用被験体に適用される場合、「処置（処理）」とは、研究用途および診断用途のための治療的処置、予防的処置、または予防手段をいう。ヒト被験体、獣医学的被験体または研究用被験体、または細胞、組織もしくは器官に適用される場合、「処置（処理）」は、ＩＬ−３３アゴニストまたはＩＬ−３３アンタゴニストと、ヒト被験体もしくは動物被験体、細胞、組織、生理学的コンパートメント、生理学的流体との接触を包含する。「細胞の処理」はまた、ＩＬ−３３アゴニストまたはＩＬ−３３アンタゴニストが（例えば、流体相またはコロイド相において）ＩＬ−３３レセプター（Ｔ１／ＳＴ２）に接触する状況、ならびにアゴニストまたはアンタゴニストが流体（例えば、ここでこの流体は細胞またはレセプターと接触している）に接触するが、このアゴニストまたはアンタゴニストが、細胞またはレセプターと接触しているということは実証されていない状況を包含する。

「結合組成物」とは、標的に結合可能な、分子、低分子、高分子、抗体、そのフラグメントもしくはアナログ、または可溶性レセプターをいう。ここで、この標的は、例えば、ＩＬ−３３またはＩＬ−３３Ｒである。「結合組成物」はまた、標的に結合可能な、分子の複合体（例えば、非共有結合性の複合体）、イオン化分子、および共有結合的に修飾された分子もしくは非共有結合的に修飾された分子（例えば、リン酸化、アシル化、架橋、環化または限定切断による修飾）をいい得る。「結合組成物」はまた、標的に結合可能な、安定剤、賦形剤、塩、緩衝剤、溶媒または添加剤と組み合わせた分子をいい得る。「結合する」とは、標的との結合組成物の会合として定義され得、ここで、この結合組成物が溶液中に溶解または懸濁され得る場合に、この会合は結合組成物の正常なブラウン運動の縮小をもたらす。

「保存的に修飾された改変体」は、アミノ酸配列および核酸配列の両方に適用される。特定の核酸配列に関して、保存的に修飾された改変体とは、同じアミノ酸配列または本質的に同じアミノ酸配列をコードする核酸、または核酸がアミノ酸配列をコードしない場合、本質的に同じ核酸配列をいう。遺伝暗号の縮重のために、多数の機能的に同じ核酸が任意の所定のタンパク質をコードし得る。アミノ酸配列については、当業者は、１個のアミノ酸または少ない割合のアミノ酸を、コードされた配列において保存されたアミノ酸と置換する、核酸配列、ペプチド配列、ポリペプチド配列またはタンパク質配列への個々の置換が「保存的に修飾された改変体」であるということを認識する。機能的に類似のアミノ酸を提供する保存的置換の表も、当該分野において周知である。保存的置換の例は、以下の群のうちの一つのアミンの酸の、同じ群の別のアミノ酸への交換である（Ｌｅｅらに発行された米国特許第５，７６７，０６３号、ＫｙｔｅおよびＤｏｏｌｉｔｔｌｅ（１９８２）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１５７：１０５−１３２）：
（１）疎水性：ノルロイシン、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｐｈｅ、ＣｙｓまたはＭｅｔ；
（２）中性で親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ；
（３）酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；
（４）塩基性：Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ；
（５）鎖の配向に影響する残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ；
（６）芳香性：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ；
（７）低分子アミノ酸：Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ。

「由来する」とは、例えば、親ペプチド、親オリゴヌクレオチド、または親ポリペプチド（例えば、抗体）からのペプチド、オリゴペプチドまたはポリペプチドの構造に由来することを説明するために使用され得る。この文脈において、由来するとは、例えば、ペプチドが親において見出される配列と同一の配列を有する場合のペプチド構造、例えば、ペプチドが親に同一であるが、親のＮ末端、Ｃ末端またはＮ末端およびＣ末端の両方で切断を有するか、あるいは切断および融合を有するか、あるいは融合のみを有するペプチド構造を包含する。由来するはまた、そのペプチドが親において見出されるのと同一の配列を有するが、保存的なアミノ酸の交換あるいは欠失または挿入を有するペプチドを意味し、ここでこの欠失または挿入は、親に固有であるペプチドの生物学的特性を保つ。「由来する」は、このペプチドまたはポリペプチドが親を開始化合物として使用して合成される状況、およびこのペプチドまたはポリペプチドが親の構造を誘導装置として使用して新規に合成される状況を包含する。

本発明のＩＬ−３３のアゴニストまたはアンタゴニストの「有効量」または「治療有効量」とは、障害または生理学的な状態の症状または兆候を改善するのに十分な量、あるいは障害または生理学的な状態の診断を可能にするか、または容易にするのに十分な量を意味する。特定の患者または獣医学的な被験体についての有効量は、処置される状態、患者の全体的な健康状態、投与の方法経路および用量、ならびに副作用の重篤度のような因子に依存して変動し得る（例えば、Ｎｅｔｔｉらに発行された米国特許第５，８８８，５３０号を参照のこと）。有効量は、最大用量あるいは重大な副作用または毒性作用を避ける投薬プロトコルであり得る。この作用は診断手段、パラメーターまたは検出可能なシグナルの、少なくとも５％、通常は少なくとも１０％、より通常は少なくとも２０％、最も通常は少なくとも３０％、好ましくは少なくとも４０％、より好ましくは少なくとも５０％、最も好ましくは少なくとも６０％、理想的には少なくとも７０％、より理想的には少なくとも８０％、最も理想的には少なくとも９０％の改善（ここで、１００％は正常な被験体によって示される診断パラメーターとして定義される）をもたらす（例えば、Ｍａｙｎａｒｄら（１９９６）ＡＨａｎｄｂｏｏｋｏｆＳＯＰｓｆｏｒＧｏｏｄＣｌｉｎｉｃａｌＰｒａｃｔｉｃｅ，ＩｎｔｅｒｐｈａｒｍＰｒｅｓｓ，ＢｏｃａＲａｔｏｎ，ＦＬ；Ｄｅｎｔ（２００１）ＧｏｏｄＬａｂｏｒａｔｏｒｙａｎｄＧｏｏｄＣｌｉｎｉｃａｌＰｒａｃｔｉｃｅ，ＵｒｃｈＰｕｂｌ．，Ｌｏｎｄｏｎ，ＵＫを参照のこと）。

「外因性の」とは、文脈により、生物、細胞またはヒトの身体の外側で生成される物質をいう。「内因性の」とは、文脈により、細胞、生物またはヒトの身体の内側で生成される物質をいう。

「障害」とは、病理学的状態、または病理学的状態に相関しているか、もしくは病理学的状態になりやすい状態についていう。「感染性障害」とは、例えば、微生物、細菌、寄生生物、ウイルスなどから生じる障害、およびこの障害に対する不適切な免疫応答、効果の無い免疫応答、または異常な免疫応答をいう。「腫瘍形成障害」とは、癌、形質転換細胞、腫瘍、異形成（ｄｉｓｐｌａｓｉａ）、新脈管形成、転移など、およびこの障害に対する不適切な免疫応答、効果の無い免疫応答、または異常な免疫応答を包含する。

「有効量」とは、例えば、障害、状態、または病理学的状態の症状または徴候を改善するのに十分な、ＩＬ−３３アゴニスト、ＩＬ−３３アンタゴニスト、結合化合物または結合組成物の量を意味する。「有効量」はまた、障害、状態、または病理学的状態の症状または徴候の診断を可能にするか、あるいは容易にするのに十分な、ＩＬ−３３アゴニスト、ＩＬ−３３アンタゴニスト、または結合化合物もしくは組成物の量にも関する。

「インヒビター」および「アンタゴニスト」あるいは「活性化因子」および「アゴニスト」は、それぞれ阻害分子または（例えば、（例えばリガンド、レセプター、補因子、遺伝子、細胞、組織または器官の）活性化のための）活性化分子をいう。例えば、遺伝子、レセプター、リガンドまたは細胞の調節因子は、遺伝子、レセプター、リガンドまたは細胞の活性を変更する分子であり、ここで、活性はその調節特性において活性化、阻害または変更され得る。この調節因子は、単独で作用し得るか、または補因子（例えば、タンパク質、金属イオンまたは低分子）を使用し得る。インヒビターは、例えば、遺伝子、タンパク質、リガンド、レセプターまたは細胞の活性を減少、ブロック、阻止、遅延、不活性化、減感、または下方制御する化合物である。活性化因子は、例えば、遺伝子、タンパク質、リガンド、レセプターまたは細胞の活性を、増大、活性化、促進、増強、増感、または上方制御する化合物である。インヒビターまたは、構成的な活性を減少、ブロック、または不活性化する組成物としても定義され得る。「アゴニスト」とは、標的と相互作用し、標的の活性化の増大を引き起こすか、または促進する化合物である。「アンタゴニスト」は、アゴニストの作用を対抗する化合物である。アンタゴニストは、アゴニストの活性を阻止、減少、阻害または中和する。アンタゴニストはまた、同定されたアゴニストが無い場合でさえ、標的（例えば、標的レセプター）の構成的な活性を、阻止、阻害または減少し得る。

阻害の程度を検査するために、例えば、所定のタンパク質、遺伝子、細胞、または生物を含むサンプルまたはアッセイは、強力な活性化因子また強力なインヒビターによって処理され、そしてインヒビターを含まないコントロールサンプルと比較される。コントロールサンプル（すなわち、アンタゴニストによって処理されない）は、１００％の相対活性値を示す。阻害は、コントロールに対する活性値が約９０％以下であり、代表的には８５％以下であり、より代表的には８０％以下であり、最も代表的には７５％以下であり、一般的には７０％以下であり、より一般的には６５％以下であり、最も一般的には６０％以下であり、代表的には５５％以下であり、通常では５０％以下であり、より通常では４５％以下であり、最も通常では４０％以下であり、好ましくは３５％以下であり、より好ましくは３０％以下であり、さらにより好ましくは２５％以下であり、そして最も好ましくは２５％未満である場合に達成される。活性化は、コントロールに対する活性値が、約１１０％であり、一般的には少なくとも１２０％であり、より一般的には少なくとも１４０％であり、より一般的には少なくとも１６０％であり、多くの場合は少なくとも１８０％であり、より多くの場合は少なくとも２倍であり、最も多くの場合は少なくとも２．５倍であり、通常では少なくとも５倍であり、より通常では少なくとも１０倍であり、好ましくは少なくとも２０倍であり、より好ましくは少なくとも４０倍であり、そして最も好ましくは４０倍を超える場合に達成される。

活性化または阻害における終末点は、以下の通りにモニタリングされ得る。例えば、細胞、生理学的流体、組織、器官、および動物被験体またはヒト被験体の、活性化、阻害および処置に対する応答は、終末点によってモニタリングされ得る。この終末点は、例えば、炎症、発癌性、または細胞の脱顆粒もしくは細胞の分泌（例えば、サイトカイン、有毒な酸素、またはプロテアーゼの放出）の印の所定の量または割合を含み得る。この終末点は、例えば、イオンの流れまたはイオンの輸送；細胞移動；細胞接着；細胞増殖；転移の可能性；細胞分化；および表現型の変化（例えば、炎症、アポトーシス、形質転換、細胞周期、または転移に関する遺伝子の発現における変化）の所定の量を含み得る（例えば、Ｋｎｉｇｈｔ（２０００）Ａｎｎ．Ｃｌｉｎ．Ｌａｂ．Ｓｃｉ．３０：１４５−１５８；ＨｏｏｄおよびＣｈｅｒｅｓｈ（２００２）ＮａｔｕｒｅＲｅｖ．Ｃａｎｃｅｒ２：９１−１００；Ｔｉｍｍｅら、（２００３）Ｃｕｒｒ．ＤｒｕｇＴａｒｇｅｔｓ４：２５１−２６１；ＲｏｂｂｉｎｓおよびＩｔｚｋｏｗｉｔｚ（２００２）Ｍｅｄ．Ｃｌｉｎ．ＮｏｒｔｈＡｍ．８６：１４６７−１４９５；ＧｒａｄｙおよびＭａｒｋｏｗｉｔｚ（２００２）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．ＧｅｎｏｍｉｃｓＨｕｍ．Ｇｅｎｅｔ．３：１０１−１２８；Ｂａｕｅｒら、（２００１）Ｇｌｉａ３６：２３５−２４３；ＳｔａｎｉｍｉｒｏｖｉｃおよびＳａｔｏｈ（２０００）ＢｒａｉｎＰａｔｈｏｌ．１０：１１３−１２６を参照のこと）。

阻害の終末点は、一般的にコントロールの７５％以下であり、好ましくはコントロールの５０％以下であり、より好ましくはコントロールの２５％以下であり、そして最も好ましくはコントロールの１０％以下である。一般的に、活性化の終末点は、コントロールの少なくとも１５０％であり、好ましくはコントロールの少なくとも２倍であり、より好ましくはコントロールの少なくとも４倍であり、そして最も好ましくはコントロールの少なくとも１０倍である。

「発現」とは、特異的遺伝子によってコードされるｍＲＮＡまたはポリペプチドの測定をいう。発現の単位は、細胞、組織、細胞抽出物、または組織抽出物による発現の測定における、タンパク質１ｍｇあたりの、ｍＲＮＡまたはポリペプチドの分子の数、細胞１個あたりのｍＲＮＡまたはポリペプチドの分子の数の測定であり得る。発現の単位は、相対的であり得、例えば、コントロール哺乳動物および実験哺乳動物からのシグナルの比較、またはｍＲＮＡまたはポリペプチドに非特異的である試薬に対する、ｍＲＮＡまたはポリペプチドに特異的である試薬を用いたシグナルの比較である。

特異的または選択的である「ハイブリダイゼーション」は、代表的に少なくとも約３０ヌクレオチドの伸展に対して少なくとも約５５％の相同性であり、好ましくは約２５ヌクレオチドの伸展に対して少なくとも約７５％の相同性であり、そして最も好ましくは約２０ヌクレオチドに対して少なくとも約９０％の相同性である場合に起こる（例えば、Ｋａｎｅｈｉｓａ（１９８４）ＮｕｃｌｅｉｃＡｃｉｄｓＲｅｓ．１２：２０３−２１３を参照のこと）。ストリンジェントな条件（例えば、第２の核酸に対する第１の核酸の条件）下でのハイブリダイゼーションは、以下の条件である：（１）洗浄に低イオン強度および高温を使用する条件（例えば、５０℃にて０．０１５Ｍの塩化ナトリウム／０．００１５Ｍのクエン酸ナトリウム／０．１％のドデシル硫酸ナトリウム）；（２）ハイブリダイゼーションの間にホルムアミドのような変性剤を使用する条件（例えば、４２℃にて７５０ｍＭの塩化ナトリウム、７５ｍＭのクエン酸ナトリウムを含むｐＨ６．５の０．１％ウシ血清アルブミン／０．１％Ｆｉｃｏｌｌ（登録商標）（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）／０．１％ポリビニルピロリドン／５０ｍＭリン酸ナトリウム緩衝液を含む５０％（ｖｏｌ／ｖｏｌ）ホルムアミド）；（３）４２℃における０．２×ＳＳＣおよび０．１％ＳＤＳ中での洗浄を伴って、４２℃にて、５０％ホルムアミド、５×ＳＳＣ（０．７５ＭＮａＣｌ、０．０７５Ｍクエン酸ナトリウム）、５０ｍＭリン酸ナトリウム（ｐＨ６．８）、０．１％ピロリン酸ナトリウム、５×デンハート液、超音波処理したサケ精子ＤＮＡ（５０ｎｇ／ｍｌ）、０．１％ＳＤＳ、および１０％硫酸デキストランを使用する条件；または（４）５５℃にて１０％硫酸デキストラン、２×ＳＳＣ（塩化ナトリウム／クエン酸ナトリウム）、および５０％ホルムアミドの緩衝液を使用し、その後５５℃にてＥＤＴＡを含む０．１×ＳＳＣからなる高ストリンジェンシーな洗浄を行う条件（Ｂｏｔｓｔｅｉｎらに発行された米国特許第６，３８７，６５７号）。

核酸のハイブリダイゼーションのためのストリンジェントな条件は、塩、温度、有機溶媒、およびカオトロピック剤の関数である。ストリンジェントな温度条件としては、通常では約３０℃を超える温度が挙げられ、より通常では約３７℃を超える温度が挙げられ、代表的には約４５℃を超える温度が挙げられ、より代表的には約５０℃を超える温度が挙げられ、好ましくは約６５℃を超える温度が挙げられ、そしてより好ましくは約７０℃を超える温度が挙げられる。ストリンジェントな塩条件は、通例では約１Ｍ未満であり、より通例では約５００ｍＭであり、通常では約４００ｍＭ未満であり、より通常では約３００ｍＭ未満であり、代表的には約２００ｍＭ未満であり、好ましくは約１００ｍＭ未満であり、そしてより好ましくは約８０ｍＭであり、約２０ｍＭ未満に下がりさえする。しかし、パラメーターの組み合わせは、任意の単一のパラメーターの測定より重要である（ＷｅｔｍｕｒおよびＤａｖｉｄｓｏｎ（１９６８）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３１：３４９−３７０）。

「免疫状態」または「免疫障害」は、例えば、病理学的な炎症、炎症性障害、および自己免疫障害または自己免疫疾患を包含する。「免疫状態」とはまた、免疫系による排除（ｉｒｒａｄｉｃａｔｉｏｎ）に抵抗する感染、腫瘍、および癌を含む感染、持続感染、および増殖性の状態（例えば、癌、腫瘍、および新脈管形成）をいう。「癌性の状態」としては、例えば、癌、癌細胞、腫瘍、新脈管形成、および異形成のような前癌状態が挙げられる。

「炎症性障害」とは、病理が、例えば、免疫系の細胞の、数の変化、遊走の速度の変化、もしくは活性化における変化から、全体的または部分的にもたらされる障害または病理学的状態を意味する。免疫系の細胞としては、例えば、Ｔ細胞、Ｂ細胞、単球またはマクロファージ、抗原提示細胞（ＡＰＣ）、樹状細胞、小グリア細胞、ＮＫ細胞、ＮＫＴ細胞、好中球、好酸球、肥満細胞、または免疫学と具体的に関連する任意の他の細胞（例えば、サイトカインを産生する内皮細胞または上皮細胞）が挙げられる。

「炎症性障害」とは、病理が、免疫系の細胞（例えば、Ｔ細胞、Ｂ細胞、単球またはマクロファージ、肺胞マクロファージ、樹状細胞、ＮＫ細胞、ＮＫＴ細胞、好中球、好酸球、または肥満細胞）の、数の増加および／もしくは活性化の上昇から、全体的または部分的にもたらされる、障害あるいは病理学的状態を意味する。

本明細書中で使用される場合、「ＩＬ−３３レセプター」、「ＩＬ−３３Ｒ」、または「ＩＬ−３３Ｒ複合体」は、ＩＬ−３３による刺激に対して反応性であるレセプター複合体を形成する２つのＩＬ−１Ｒファミリーメンバー（Ｔ１／ＳＴ２およびＳＩＧＩＲＲ）の結合を意味する。

「リガンド」とは、例えば、低分子、ペプチド、ポリペプチド、および膜関連分子もしくは膜結合分子、またはそれらの複合体をいい、これらは、レセプターのアゴニストまたはアンタゴニストとして作用し得る。「リガンド」はまた、アゴニストまたはアンタゴニストではないが、その生物学的特性（例えば、シグナル伝達または接着）に顕著に影響することなくレセプターに結合し得る因子を包含する。さらに、「リガンド」としては、例えば、化学的方法または組換え方法によって、膜結合リガンドの可溶性バージョンに変換される膜結合リガンドが挙げられる。慣例に従うと、リガンドは、第１の細胞上に膜結合され、レセプターは、通常、第２の細胞上に存在する。この第２の細胞は、第１の細胞と同じかまたは異なる独自性を有し得る。リガンドまたはレセプターは、全体として細胞内にあり得、サイトゾル、核、または一部の他の細胞内コンパートメントに存在し得る。リガンドまたはレセプターは、例えば、細胞内コンパートメントから原形質膜の外面にその配置を変化させ得る。リガンドとレセプターとの複合体は、「リガンドレセプター複合体」と称される。リガンドおよびレセプターが、シグナル伝達経路に関する場合、このリガンドは、そのシグナル伝達経路の上流の位置に存在し、そしてこのレセプターは、そのシグナル伝達経路の下流の位置に存在する。

「第１のポリペプチド鎖」および「第２のポリペプチド鎖」とは、伝統的なペプチド結合の手段によって１つに連結されない２つのポリペプチド鎖をいう。代表的に、この第１のポリペプチド鎖は、Ｎ末端およびＣ末端を含み、そしてこの第２のポリペプチド鎖は、別のＮ末端および別のＣ末端を含み、すなわち全部で、２つのＮ末端および２つのＣ末端が存在する。この第１のポリペプチド鎖は、第１のベクターによってコードされ得る一方で、この第２のポリペプチド鎖は、第２のベクターによってコードされ得る。第１のプロモーターが第１のポリペプチド鎖に作動可能に連結され得、そして第２のプロモーターがこの第２のポリペプチド鎖に作動可能に連結され得る場合、この第１のポリペプチド鎖および第２のポリペプチド鎖は、１つのベクターによってコードされ得、または別の実施形態において、第１のポリペプチド鎖および第２のポリペプチド鎖の両方の発現が、同じプロモーターに作動可能に連結され得る。

「感受性」（例えば、リガンドに対するレセプターの感受性）とは、レセプターへのリガンドの結合が、上記レセプターまたは上記レセプターに特異的に関連した事象もしくは分子の検出可能な変化（例えば、上記レセプターに関連したタンパク質のコンホメーション変化、リン酸化、性質もしくは量）を生じるか、あるいは上記レセプターによって仲介されるか、または上記レセプターに関連する遺伝的発現の変化を生じることを意味する。

「低分子」は、腫瘍および癌の生理機能ならびに障害の処置のために提供される。「低分子」は、１０ｋＤ未満である分子量、代表的には２ｋＤ未満である分子量、および好ましくは１ｋＤ未満である分子量を有する分子として定義される。低分子としては、無機分子、有機分子、無機成分を含む有機分子、放射活性原子を含む分子、合成分子、ペプチド模倣体、および抗体模倣体が挙げられるが、これらに限定されない。治療薬として、低分子は、細胞に対してより浸透性であり得、分解に対する感受性が低く、そして大きい分子より免疫応答を誘導する傾向があり得る。低分子（例えば、抗体およびサイトカインのペプチド模倣体、ならびに低分子毒素）が、記載される（例えば、Ｃａｓｓｅｔら（２００３）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．３０７：１９８−２０５；Ｍｕｙｌｄｅｒｍａｎｓ（２００１）Ｊ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．７４：２７７−３０２；Ｌｉ（２０００）Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１８：１２５１−１２５６；Ａｐｏｓｔｏｌｏｐｏｕｌｏｓら（２００２）Ｃｕｒｒ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．９：４１１−４２０；Ｍｏｎｆａｒｄｉｎｉら（２００２）Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｄｅｓ．８：２１８５−２１９９；Ｄｏｍｉｎｇｕｅｓら（１９９９）Ｎａｔ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．６：６５２−６５６；ＳａｔｏおよびＳｏｎｅ（２００３）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．３７１：６０３−６０８；Ｓｔｅｗａｒｔらに発行された米国特許第６，３２６，４８２号を参照のこと）。

「可溶性レセプター」とは、水溶性であり、そして例えば、細胞外流体、細胞内流体において存在するか、または膜に弱く結合されたレセプターをいう。さらに、可溶性レセプターとは、水溶性となるように操作されているレセプターをいう。Ｔ１／ＳＴ２に関して、可溶性ドメインまたは細胞外ドメインは、配列番号６（ヒト）の残基１〜３３７および配列番号８の残基１〜３４２（マウス）として定義される。ＳＩＧＩＲＲに関して、可溶性ドメインまたは細胞外ドメインは、配列番号１０（ヒト）の残基１〜１１８および配列番号１２（マウス）の残基１〜１１７として定義される。

「結合の特異性」、「結合の選択性」などとは、所定のリガンドと他のリガンドとの間または所定のレセプターと他のレセプターとの間を区別し得る、所定のリガンドと所定のレセプターとの間の結合相互作用をいう。「特異的に」または「選択的に」結合するとは、リガンド／レセプター、抗体／抗原、または他の結合対についていう場合、タンパク質および他の生物学的物質の不均一な集団においてタンパク質の存在の決定因となる結合反応を示す。従って、指定された条件下において、特定化されたリガンドは、特定のレセプターに結合し、かつサンプル中に存在するかなりの量の他のタンパク質には結合しない。抗体、または抗体の抗原結合部位に由来する結合組成物は、任意の他の抗原に対する親和性よりも、少なくとも２倍超、好ましくは少なくとも１０倍超、より好ましくは少なくとも約２０倍超、そして最も好ましくは少なくとも１００倍超の親和性でその抗原に結合する。好ましい実施形態において、上記抗体は、約１０^９リットル／ｍｏｌを超える親和性を有する（例えば、Ｍｕｎｓｅｎら（１９８０）Ａｎａｌｙｔ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１０７：２２０−２３９を参照のこと）。

（ＩＩ．概要）
本発明は、多くの免疫状態および免疫障害の調節または処置のための方法を提供する。特に、本発明は、例えば、喘息、アレルギー、関節炎、ならびに細胞内病原体（例えば、寄生生物）に対する応答および肉芽腫に関する障害（例えば、結核、サルコイドーシス、およびクローン病）に対する応答の処置および診断のためのＩＬ−３３のアゴニストおよびアンタゴニストを提供する。

ナイーブＴ細胞は、その表面上にＴ１／ＳＴ２を発現しないようであるが、発現は、分化型ＴＨ２エフェクター細胞における抗原との接触後に誘導される。Ｔ１／ＳＴ２は、ＴＨ２型Ｔ細胞に対するマーカーとして使用される。Ｔ１／ＳＴ２はまた、肥満細胞および線維芽細胞上に発現される。

Ｔ１／ＳＴ２ノックアウトマウスによる研究は、Ｔ１／ＳＴ２がナイーブＣＤ４^＋Ｔ細胞のＴＨ２型Ｔ細胞への分化の一部を担わないことを示唆するようである。これらの結果は、使用されるアッセイ（例えば、病原生物がチャレンジ研究において使用されるか、またはＴＨ２応答の段階が研究されるアッセイ）の性質の相関であるようである。証拠はまた、ＴＨ２応答の初期の事象におけるＴ１／ＳＴ２についての役割を示唆する（例えば、Ｋｒｏｐｆら（２００２）Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎｉｔｙ７０：５５１２−５５２０；Ｈｏｓｈｉｎｏら（１９９９）Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１９０：１５４１−１５４７；Ｓｅｎｎら（２０００）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３０：１９２９−１９３８；Ｔｏｗｎｓｅｎｄら（２０００）Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１９１：１０６９−１０７５を参照のこと）。

抗Ｔ１／ＳＴ２抗体は、免疫機能におけるＴ１／ＳＴ２の役割に取り組む多くの研究において使用されてきたが、他の研究は、免疫応答についてＴ１／ＳＴ２発現動物モデルを試験している。抗Ｔ１／ＳＴ２抗体による処置は、ＴＨ２型免疫応答の減少をもたらした。この抗体は、好酸球の浸潤、ＩＬ−５の産生、およびＩｇＥの産生を阻害した。Ｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍａによる感染は、例えば、肺および肝臓の肉芽腫における発現を評価することによって決定されるようなＴ１／ＳＴ２の上方制御を誘発した。喘息についての動物モデル（例えば、イエダニ抽出物またはオボアルブミンによる処置）は、ＣＤ４^＋Ｔ細胞でＴ１／ＳＴ２の発現の増加をもたらし、この増加は、アレルギー性の応答または喘息の応答にＴ１／ＳＴ２が果たす役割を示す。ＢＡＬＢ／ｃマウスによる研究は、抗Ｔ１／ＳＴ２抗体による処置が、より高いＴＨ−１型応答を誘導し、このＴＨ−１型応答は、ＩＬ−１２に応答するＣＤ４^＋Ｔ細胞の能力を上昇させることを明らかにした。抗Ｔ１／ＳＴ２抗体はまた、Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａｍａｊｏｒの感染に起因する病変を減少させ、そしてＴＨ２型サイトカインの発現を減少させた。関節炎の動物モデル（コラーゲン誘導性関節炎；ＣＩＡ）は、抗Ｔ１／ＳＴ２抗体によって悪化された。特に、Ｔ１／ＳＴ２は、ＴＨ２型応答の発生の初期の事象において機能する。種々のアレルゲンに対する慢性的な曝露は、ＣＤ４^＋Ｔ細胞のＴ１／ＳＴ２の発現の増加をもたらした。Ｔ１／ＳＴ２は、抗Ｔ１／ＳＴ２抗体がリポ多糖（ＬＰＳ）の毒性効果を深刻にするような、先天的応答を媒介する役割を担う。Ｔ１／ＳＴ２に対する抗体はまた、ウイルス（例えば、ＲＳウイルス）に対する免疫応答を調節した（例えば、Ｘｕら（１９９８）Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１８７：７８７−７９４；Ｌｏｈｎｉｎｇら（１９９８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ９５：６９３０−６９３５；Ｃｏｙｌｅら（１９９９）Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１９０：８９５−９０２；Ｌｏｈｎｉｎｇら（１９９９）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６２：３８８２−３８８９；Ｊｏｈｎｓｏｎら（２００３）Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｃｒｉｔ．ＣａｒｅＭｅｄ．１６９：３７８−３８５；Ｋｒｏｐｆら（２００３）Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎｉｔｙ７１：１９６１−１９７１；Ｘｕら（１９９８）Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１８７：７８７−７９４；Ｋｒｏｐｆら（２００２）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３２：２４５０−２４５９；Ｓｗｉｒｓｋｉら（２００２）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６９：３４９９−３５０６；Ｓｗｅｅｔら（２００１）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６６：６６３３−６６３９；Ｗａｌｚｌら（２００１）Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１９３：７８５−７９２を参照のこと）。

ＩＬ−１ファミリーメンバーは、代表的に、ＩＬ−１レセプターファミリーのヘテロダイマーのメンバーに結合する。別の公知のＩＬ−１ＲファミリーメンバーのＳＩＧＩＲＲ（単一ＩｇＩＬ−１レセプター関連タンパク質）が、Ｔ１／ＳＴ２と複合体化して、ＩＬ−３３に対して機能的なレセプター複合体を形成することが示された。ＳＩＧＩＲＲは、そもそも孤立のＩＬ−１Ｒメンバーとして見出された（例えば、Ｇａｒｌａｎｄａら（２００４）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．１０１：３５２２−３５２６；Ｃｌａｒｋら（２００３）ＧｅｎｏｍｅＲｅｓ．１３：２２６５−２２７０；Ｔｈｏｍａｓｓｅｎら（１９９９）Ｃｙｔｏｋｉｎｅ１１：３８９−３９９；ＧｅｎＢａｎｋ登録番号ＮＰ＿０６８５７７；ＧｅｎＢａｎｋ登録番号ＮＭ＿０２１８０５；ＧｅｎＢａｎｋ登録番号ＮＰ＿０７５５４６；およびＧｅｎＢａｎｋ登録番号ＮＭ＿０２３０４５９を参照のこと）。ＳＩＧＩＲＲは、幅広く発現されるＩＬ−１Ｒメンバーである。

ビオチン化成熟ヒトＩＬ−３３（配列番号２の残基１１２〜２７０）、Ｔ１／ＳＴ２−Ｆｃ融合およびＳＩＧＩＲＲ−Ｆｃ融合を使用する沈降実験において、ＩＬ−３３は、両方のレセプター融合タンパク質に結合し得るが、しかし、ＳＩＧＩＲＲに対するＩＬ−３３の結合は、ＩＬ−３３およびＴ１／ＳＴ２の結合と比較した場合に弱いことが示された。レセプターのいずれかまたは両方のシグナル伝達能力を試験するために、ＮＦ−κＢ依存性アッセイを、実施した。Ｔ１／ＳＴ２およびＳＩＧＩＲＲの両方の同時発現は、ＩＬ−３３による刺激においてＮＦ−κＢシグナル伝達およびＭＡＰキナーゼを活性化するのに必要かつ十分の両方であった。ＪＮＫキナーゼの活性化もまた、観察された。

（ＩＩＩ．アゴニスト、アンタゴニスト、および結合組成物）
本発明は、ＩＬ−３３のアゴニストおよびアンタゴニストを提供し、これらは、ＩＬ−３３またはＩＬ−３３レセプター複合体（Ｔ１／ＳＴ２およびＳＩＧＩＲＲ）に特異的に結合する結合組成物を含む。結合組成物としては、抗体、抗体フラグメントおよび可溶性レセプターが挙げられる。本発明は、ＩＬ−３３もしくはＩＬ−３３Ｒに結合する遮断抗体、またはＩＬ−３３Ｒ複合体を介してシグナル伝達を刺激するアゴニスト性抗体を企図する。本発明の結合組成物としてはまた、ＩＬ−３３またはＩＬ−３３Ｒをコードする核酸に特異的にハイブリダイズする核酸（例えば、アンチセンス核酸および低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ））が挙げられる。抗イディオタイプ抗体もまた、使用され得る。ヒトＩＬ−３３は、ＧｅｎＢａｎｋＮＭ＿０３３４３９に開示される。抗ＩＬ−３３抗体を調製するのに適した、抗原性を増加させる領域は、ＶｅｃｔｏｒＮＴＩ（登録商標）Ｓｕｉｔｅ（Ｉｎｆｏｒｍａｘ，Ｉｎｃ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ）を使用するＰａｒｋｅｒプロットによって、例えば、ＧｅｎＢａｎｋＮＭ＿０３３４３９のアミノ酸１〜２３；アミノ酸３０〜３８；アミノ酸６１〜７８；アミノ酸８４〜９３；アミノ酸９９〜１０６；アミノ酸１２７〜１３３；アミノ酸１３９〜１４４；アミノ酸１４８〜１５８；アミノ酸１６６〜１８０；アミノ酸１９６〜２０４；アミノ酸２３１〜２３７；およびアミノ酸２５２〜２５７に存在する。

これらの細胞外領域に基づくレセプターは、これらの正確なＮ末端アミノ酸およびＣ末端アミノ酸に限定されず、そのリガンド結合特性が実質的に維持される限り、例えば、１個、２個、３個またはそれより多いアミノ酸のぶん、長くても短くてもよい。例えば、精製もしくは安定性を促進するためか、または機能ドメイン（例えば、毒性ポリペプチド）を提供するために、可溶性レセプターに基づく融合タンパク質もまた、企図される。

モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、およびヒト化抗体が、調製され得る（例えば、ＳｈｅｐｅｒｄおよびＤｅａｎ（編）（２０００）ＭｏｎｏｃｌｏｎａｌＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ＯｘｆｏｒｄＵｎｉｖ．Ｐｒｅｓｓ，ＮｅｗＹｏｒｋ，ＮＹ；ＫｏｎｔｅｒｍａｎｎおよびＤｕｂｅｌ（編）（２００１）ＡｎｔｉｂｏｄｙＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，ＮｅｗＹｏｒｋ；ＨａｒｌｏｗおよびＬａｎｅ（１９８８）ＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓＡＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭａｎｕａｌ，ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒＬａｂｏｒａｔｏｒｙＰｒｅｓｓ，ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒ，ＮＹ，ｐｐ．１３９−２４３；Ｃａｒｐｅｎｔｅｒら（２０００）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６５：６２０５；Ｈｅら（１９９８）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６０：１０２９；Ｔａｎｇら（１９９９）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７４：２７３７１−２７３７８；Ｂａｃａら（１９９７）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：１０６７８−１０６８４；Ｃｈｏｔｈｉａら（１９８９）Ｎａｔｕｒｅ３４２：８７７−８８３；ＦｏｏｔｅおよびＷｉｎｔｅｒ（１９９２）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２４：４８７−４９９；Ｖａｓｑｕｅｚらに発行された米国特許第６，３２９，５１１号を参照のこと）。抗体および可溶性レセプターのムテインならびに改変体（例えば、ペグ化または脱アミド化Ａｓｎ残基を除去もしくは置換する突然変異誘発）が、企図される。

抗原の精製は、抗体の産生に必ずしも必要なわけではない。免疫化は、ＤＮＡベクター免疫化によって行われ得る（例えば、Ｗａｎｇら（１９９７）Ｖｉｒｏｌｏｇｙ２２８：２７８−２８４を参照のこと）。あるいは、動物は、目的の抗原を有する細胞によって免疫され得る。その後、脾細胞が、免疫された動物から単離され得、そしてその脾細胞は、骨髄腫細胞株と融合されて、ハイブリドーマを産生し得る（Ｍｅｙａａｒｄら（１９９７）Ｉｍｍｕｎｉｔｙ７：２８３−２９０；Ｗｒｉｇｈｔら、（２０００）Ｉｍｍｕｎｉｔｙ１３：２３３−２４２；Ｐｒｅｓｔｏｎら、（１９９７）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２７：１９１１−１９１８）。生じたハイブリドーマは、機能的アッセイまたは生物学的アッセイ（これらのアッセイは、精製された抗原があることに依存しない）によって所望の抗体の産生についてスクリーニングされ得る。細胞による免疫化は、精製された抗原による免疫化よりも、抗体の産生について優れていることを示し得る（Ｋａｉｔｈａｍａｎａら（１９９９）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６３：５１５７−５１６４）。

抗体は、通常、少なくとも約１０^−３Ｍ、より通常は少なくとも約１０^−６Ｍ、代表的には少なくとも約１０^−７Ｍ、より代表的には少なくとも約１０^−８Ｍ、好ましくは少なくとも約１０^−９Ｍ、そしてより好ましくは少なくとも約１０^−１０Ｍ、そして最も好ましくは少なくとも約１０^−１１ＭのＫ_Ｄで結合する（例えば、Ｐｒｅｓｔａら（２００１）Ｔｈｒｏｍｂ．Ｈａｅｍｏｓｔ．８５：３７９−３８９；Ｙａｎｇら（２００１）Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｏｎｃｏｌ．Ｈｅｍａｔｏｌ．３８：１７−２３；Ｃａｒｎａｈａｎら（２００３）Ｃｌｉｎ．ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．（補遺）９：３９８２ｓ−３９９０ｓを参照のこと）。

ＩＬ−３３レセプター複合体（Ｔ１／ＳＴ２およびＳＩＧＩＲＲ）の細胞外ドメインを含む可溶性レセプターは、同定されたサブユニットの各々の細胞質領域、膜貫通領域、および細胞外領域として調製され得る（例えば、Ｌｅｃａｒｔら（２００２）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３２：２９７９−２９８７；Ｍｉｔｃｈａｍら（１９９６）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７１：５７７７−５７８３；および以下の配列表を参照のこと）。

可溶性レセプターは、標準的な方法に従って調製され、そして使用され得る（例えば、Ｊｏｎｅｓら（２００２）Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ１５９２：２５１−２６３；Ｐｒｕｄｈｏｍｍｅら（２００１）ＥｘｐｅｒｔＯｐｉｎｉｏｎＢｉｏｌ．Ｔｈｅｒ．１：３５９−３７３；Ｆｅｒｎａｎｄｅｚ−Ｂｏｔｒａｎ（１９９９）Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｃｌｉｎ．ＬａｂＳｃｉ．３６：１６５−２２４を参照のこと）。ｓｉＲＮＡ干渉のための組成物もまた、提供される（例えば、ＡｒｅｎｚおよびＳｃｈｅｐｅｒｓ（２００３）Ｎａｔｕｒｗｉｓｓｅｎｓｃｈａｆｔｅｎ９０：３４５−３５９；ＳａｚａｎｉおよびＫｏｌｅ（２００３）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１１２：４８１−４８６；Ｐｉｒｏｌｌｏら（２００３）Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ９９：５５−７７；Ｗａｎｇら（２００３）ＡｎｔｉｓｅｎｓｅＮｕｃｌ．ＡｃｉｄＤｒｕｇＤｅｖｅｌ．１３：１６９−１８９を参照のこと）。

（ＩＶ．治療用組成物、方法）
本発明は、先天的応答、喘息、アレルギー、および関節炎を処置し、そして診断するための方法を提供する。

ＩＬ−３３のアゴニストもしくはアンタゴニストを含む薬学的組成物または滅菌組成物を調製するために、試薬は、薬学的に受容可能なキャリアまたは賦形剤と混合される。治療剤および診断剤の処方物は、例えば、凍結乾燥粉末、スラリー、水溶液、ローションまたは懸濁物の形態で、生理学的に受容可能なキャリア、賦形剤、または安定剤と混合することによって調製され得る（例えば、Ｈａｒｄｍａｎら（２００１）ＧｏｏｄｍａｎａｎｄＧｉｌｍａｎ’ｓＴｈｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢａｓｉｓｏｆＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ，ＮｅｗＹｏｒｋ，ＮＹ；Ｇｅｎｎａｒｏ（２０００）Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：ＴｈｅＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＰｒａｃｔｉｃｅｏｆＰｈａｒｍａｃｙ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ，ａｎｄＷｉｌｋｉｎｓ，ＮｅｗＹｏｒｋ，ＮＹ；Ａｖｉｓら（編）（１９９３）ＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＤｏｓａｇｅＦｏｒｍｓ：ＰａｒｅｎｔｅｒａｌＭｅｄｉｃａｔｉｏｎｓ，ＭａｒｃｅｌＤｅｋｋｅｒ，ＮＹ；Ｌｉｅｂｅｒｍａｎら（編）（１９９０）ＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＤｏｓａｇｅＦｏｒｍｓ：Ｔａｂｌｅｔｓ，ＭａｒｃｅｌＤｅｋｋｅｒ，ＮＹ；Ｌｉｅｂｅｒｍａｎら（編）（１９９０）ＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＤｏｓａｇｅＦｏｒｍｓ：ＤｉｓｐｅｒｓｅＳｙｓｔｅｍｓ，ＭａｒｃｅｌＤｅｋｋｅｒ，ＮＹ；ＷｅｉｎｅｒおよびＫｏｔｋｏｓｋｉｅ（２０００）ＥｘｃｉｐｉｅｎｔＴｏｘｉｃｉｔｙａｎｄＳａｆｅｔｙ，ＭａｒｃｅｌＤｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，ＮｅｗＹｏｒｋ，ＮＹを参照のこと）。

治療薬に対する投与レジメンを選択することは、いくつかの因子（実体（ｅｎｔｉｔｙ）の血清または組織のターンオーバー速度、症状のレベル、実体の免疫原性、および生物学的マトリックス中の標的細胞の接近のしやすさが挙げられる）に依存する。好ましくは、投与レジメンは、受容可能なレベルの副作用と整合性をとって、患者に送達される治療薬の量を最大にする。したがって、送達される生物製剤の量は、部分的に、処置される状態の特定の実体および重症度に依存する。抗体、サイトカイン、および低分子の適切な用量を選択する際の指標が、利用可能である（例えば、Ｗａｗｒｚｙｎｃｚａｋ（１９９６）ＡｎｔｉｂｏｄｙＴｈｅｒａｐｙ，ＢｉｏｓＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃＰｕｂ．Ｌｔｄ，Ｏｘｆｏｒｄｓｈｉｒｅ，ＵＫ；Ｋｒｅｓｉｎａ（編）（１９９１）ＭｏｎｏｃｌｏｎａｌＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ＣｙｔｏｋｉｎｅｓａｎｄＡｒｔｈｒｉｔｉｓ，ＭａｒｃｅｌＤｅｋｋｅｒ，ＮｅｗＹｏｒｋ，ＮＹ；Ｂａｃｈ（編）（１９９３）ＭｏｎｏｃｌｏｎａｌＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓａｎｄＰｅｐｔｉｄｅＴｈｅｒａｐｙｉｎＡｕｔｏｉｍｍｕｎｅＤｉｓｅａｓｅｓ，ＭａｒｃｅｌＤｅｋｋｅｒ，ＮｅｗＹｏｒｋ，ＮＹ；Ｂａｅｒｔら（２００３）ＮｅｗＥｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４８：６０１−６０８；Ｍｉｌｇｒｏｍら（１９９９）ＮｅｗＥｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４１：１９６６−１９７３；Ｓｌａｍｏｎら（２００１）ＮｅｗＥｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４４：７８３−７９２；Ｂｅｎｉａｍｉｎｏｖｉｔｚら（２０００）ＮｅｗＥｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４２：６１３−６１９；Ｇｈｏｓｈら（２００３）ＮｅｗＥｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４８：２４−３２；Ｌｉｐｓｋｙら（２０００）ＮｅｗＥｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４３：１５９４−１６０２を参照のこと）。

抗体、抗体フラグメント、およびサイトカインは、例えば、１日、１週間もしくは１週間に１〜７回の間隔での持続注入によってか、または投薬によって提供され得る。投薬は、静脈内、皮下、局所、経口、経鼻、経直腸、筋肉内、脳室内に、または吸入によって提供され得る。好ましい用量プロトコルは、重大な望まれない副作用を避ける最大用量または投薬頻度を含むものである。全体の週用量は、一般的に少なくとも０．０５μｇ／ｋｇ体重、より一般的には少なくとも０．２μｇ／ｋｇ、最も一般的には少なくとも０．５μｇ／ｋｇ、代表的には少なくとも１μｇ／ｋｇ、より代表的には少なくとも１０μｇ／ｋｇ、最も代表的には少なくとも１００μｇ／ｋｇ、好ましくは少なくとも０．２ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは少なくとも１．０ｍｇ／ｋｇ、最も好ましくは少なくとも２．０ｍｇ／ｋｇ、最適には少なくとも１０ｍｇ／ｋｇ、より最適には少なくとも２５ｍｇ／ｋｇ、そして最も最適には少なくとも５０ｍｇ／ｋｇである（例えば、Ｙａｎｇら（２００３）ＮｅｗＥｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４９：４２７−４３４；Ｈｅｒｏｌｄら（２００２）ＮｅｗＥｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４６：１６９２−１６９８；Ｌｉｕら（１９９９）Ｊ．Ｎｅｕｒｏｌ．Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ．Ｐｓｙｃｈ．６７：４５１−４５６；Ｐｏｒｔｉｅｌｊｉら（２００３）ＣａｎｃｅｒＩｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．５２：１３３−１４４を参照のこと）。低分子治療薬（例えば、ペプチド模倣体、天然生成物、または有機化学物質）の所望の用量は、モル／ｋｇ体重ベースで抗体またはポリペプチドについての用量とほぼ同じである。低分子治療薬の所望の血漿濃度は、モル／ｋｇ体重ベースで、抗体についての用量とほぼ同じである。

特定の患者に対する有効量は、処置される状態、患者の全体的な健康状態、投与の方法、経路および用量、ならびに副作用の重症度のような因子に依存して変化し得る（例えば、Ｍａｙｎａｒｄら（１９９６）ＡＨａｎｄｂｏｏｋｏｆＳＯＰｓｆｏｒＧｏｏｄＣｌｉｎｉｃａｌＰｒａｃｔｉｃｅ，ＩｎｔｅｒｐｈａｒｍＰｒｅｓｓ，ＢｏｃａＲａｔｏｎ，ＦＬ；Ｄｅｎｔ（２００１）ＧｏｏｄＬａｂｏｒａｔｏｒｙａｎｄＧｏｏｄＣｌｉｎｉｃａｌＰｒａｃｔｉｃｅ，ＵｒｃｈＰｕｂｌ．，Ｌｏｎｄｏｎ，ＵＫを参照のこと）。

代表的な獣医学的被験体、実験被験体、または研究被験体としては、サル、イヌ、ネコ、ラット、マウス、ウサギ、モルモット、ウマ、およびヒトが挙げられる。

適切な用量の決定は、例えば、当該分野において処置に影響することが公知もしくはそれが疑われるか、または処置に影響することが予想されるパラメーターあるいは因子を使用して、医師によってなされる。一般的に、上記用量は、最適用量よりもいくらか少ない量で開始され、その後、あらゆるネガティブな副作用に対して所望の効果または最適な効果が達成されるまで、少量ずつ増加される。重要な診断測定としては、例えば、炎症の症状または産生された炎症性サイトカインのレベルの測定が挙げられる。好ましくは、使用される生物製剤は、処置の標的にされる動物と同じ種に由来し、これによってその試薬に対する液性反応を最小にする。

第２の治療因子（例えば、サイトカイン、ステロイド、化学療法剤、抗生物質、または放射線）の同時投与またはこれらでの処置のための方法は、当該分野で周知である（例えば、Ｈａｒｄｍａｎら（編）（２００１）ＧｏｏｄｍａｎａｎｄＧｉｌｍａｎ’ｓＴｈｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢａｓｉｓｏｆＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，第１０版，ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ，ＮｅｗＹｏｒｋ，ＮＹ；ＰｏｏｌｅおよびＰｅｔｅｒｓｏｎ（編）（２００１）ＰｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓｆｏｒＡｄｖａｎｃｅｄＰｒａｃｔｉｃｅ：ＡＰｒａｃｔｉｃａｌＡｐｐｒｏａｃｈ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｐｈｉｌａ．，ＰＡ；ＣｈａｂｎｅｒおよびＬｏｎｇｏ（編）（２００１）ＣａｎｃｅｒＣｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙａｎｄＢｉｏｔｈｅｒａｐｙ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｐｈｉｌａ．，ＰＡを参照のこと）。治療薬の有効量は、代表的に少なくとも１０％まで；通常少なくとも２０％まで；好ましくは少なくとも約３０％まで；より好ましくは少なくとも４０％まで；そして最も好ましくは少なくとも５０％まで症状を軽減する。

投与の経路は、例えば、局所適用または皮膚適用、静脈内の経路、腹腔内の経路、脳内の経路、筋肉内の経路、眼内の経路、動脈内の経路、脳脊髄内（ｉｎｔｒａｃｅｒｅｂｒｏｓｐｉｎａｌ）の経路、病巣内の経路、もしくは肺の経路による注射または注入によるか、あるいは徐放システムまたは移植物による（例えば、Ｓｉｄｍａｎら（１９８３）Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ２２：５４７−５５６；Ｌａｎｇｅｒら、（１９８１），Ｊ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｍａｔｅｒ．Ｒｅｓ．１５：１６７−２７７；Ｌａｎｇｅｒ（１９８２）Ｃｈｅｍ．Ｔｅｃｈ．１２：９８−１０５；Ｅｐｓｔｅｉｎら、（１９８５）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８２：３６８８−３６９２；Ｈｗａｎｇら（１９８０）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ７７：４０３０−４０３４；米国特許第６，３５０，４６６号および同第６，３１６，０２４号を参照のこと）。

（Ｖ．キットおよび診断試薬）
抗体、核酸ハイブリダイゼーション、およびＰＣＲ法に基づく、炎症性障害（例えば、乾癬、クローン病、慢性関節リウマチ、喘息またはアレルギー、アテローム性動脈硬化症、および癌）に対する診断方法が、利用可能である。

本発明は、例えば、ウイルス性障害（インフルエンザＡ型が挙げられる）、および気道および粘膜組織のウイルス性障害を診断するために、診断キットにおいて、ＩＬ−３３のポリペプチド、そのフラグメント、ＩＬ−３３の核酸およびそのフラグメントを提供する。ＩＬ−３３、ならびにその代謝産物および分解産物を検出するための結合組成物（抗体または抗体フラグメントが挙げられる）もまた、提供される。代表的に、このキットは、ＩＬ−３３ポリペプチド、もしくはその抗原性フラグメント、それに対する結合組成物、または核酸（例えば、核酸プローブ、プライマー、または分子ビーコン）のいずれかを含むコンパートメントを有する（例えば、Ｒａｊｅｎｄｒａｎら（２００３）ＮｕｃｌｅｉｃＡｃｉｄｓＲｅｓ．３１：５７００−５７１３；Ｃｏｃｋｅｒｉｌｌ（２００３）Ａｒｃｈ．Ｐａｔｈｏｌ．Ｌａｂ．Ｍｅｄ．１２７：１１１２−１１２０；Ｚａｍｍａｔｔｅｏら、（２００２）Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．８：８５−１０１；Ｋｌｅｉｎ（２００２）ＴｒｅｎｄｓＭｏｌ．Ｍｅｄ．８：２５７−２６０を参照のこと）。

診断の方法は、被験体（例えば、試験被験体）からのサンプルと、ＩＬ−３３もしくはＩＬ−３３レセプターのポリペプチドまたは核酸に特異的に結合する結合組成物とを接触させる工程を包含し得る。上記方法は、コントロール被験体、正常被験体、または試験被験体由来の正常組織もしくは正常流体に由来するサンプルと、上記結合組成物とを接触させる工程をさらに包含し得る。さらに、上記方法は、試験被験体への組成物の特異的結合を、正常被験体、コントロール被験体、または上記試験被験体由来の正常組織または正常流体への組成物の特異的結合と比較する工程をさらに包含し得る。試験サンプルもしくは試験被験体の発現または活性は、コントロールサンプルもしくはコントロール被験体からの発現または活性と比較され得る。コントロールサンプルとしては、例えば、免疫障害に罹患している患者の冒されていない組織または非炎症組織のサンプルが挙げられ得る。コントロール被験体もしくはコントロールサンプルからの発現または活性は、例えば、統計学的に適切な群のコントロール被験体から得られた所定値として提供され得る。

上記キットは、例えば、試薬およびコンパートメント、試薬および使用のための説明書、またはコンパートメントを含む試薬および使用のための説明書を備え得る。上記試薬は、ＩＬ−３３のアゴニストもしくはアンタゴニスト、またはその抗原性フラグメント、結合組成物、あるいはセンス配向および／またはアンチセンス配向の核酸を含み得る。例えば、生物学的サンプルまたは化学的ライブラリーから得られた試験化合物の結合を決定するためのキットは、コントロール化合物、標識化合物、および結合された標識化合物からの遊離した標識化合物を分離するための方法を備え得る。このコントロール化合物は、ＩＬ−３３もしくはＩＬ−３３レセプターのポリペプチドのセグメント、またはＩＬ−３３もしくはＩＬ−３３レセプターをコードする核酸を含み得る。このセグメントは、０個、１個、２個、またはそれ以上の抗原性フラグメントを含み得る。

「標識されている」組成物は、分光学的方法、光化学的方法、生化学的方法、免疫化学的方法、同位体的方法、または化学的方法によって、直接的または間接的に検出可能である。例えば、有用な標識としては、^３２Ｐ、^３３Ｐ、^３５Ｓ、^１４Ｃ、^３Ｈ、^１２５Ｉ、安定な同位体、蛍光色素、高電子密度試薬、基質、エピトープタグ、または酵素（例えば、酵素結合免疫アッセイにおいて使用される）またはフルオレット（ｆｌｕｏｒｅｔｔｅ）が挙げられる（ＲｏｚｉｎｏｖおよびＮｏｌａｎ（１９９８）Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．５：７１３−７２８）。

診断アッセイは、生物学的マトリックス（例えば、生細胞、細胞抽出物、細胞溶解物、固定された細胞、細胞培養物、体液、または法医学的サンプル）を用いて使用され得る。診断またはキットの目的に有用な結合体化抗体としては、色素、同位体、酵素、および金属に結合された抗体が挙げられる。例えば、ＬｅＤｏｕｓｓａｌら（１９９１）ＮｅｗＥｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．１４６：１６９−１７５；Ｇｉｂｅｌｌｉｎｉら（１９９８）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６０：３８９１−３８９８；ＨｓｉｎｇおよびＢｉｓｈｏｐ（１９９９）ＮｅｗＥｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．１６２：２８０４−２８１１；Ｅｖｅｒｔｓら（２００２）ＮｅｗＥｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．１６８：８８３−８８９を参照のこと。ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）、ＥＬＩＳＡ、およびラボオンアチップ（ｌａｂｏｎａｃｈｉｐ）（米国特許番号第６，１７６，９６２号および同第６，５１７，２３４号）のような種々のアッセイ形式が存在する。

遺伝子発現のデータは、疾患および病理学的状態の診断ならびに処置において有用な手段である（例えば、ＬｉおよびＷｏｎｇ（２００１）ＧｅｎｏｍｅＩｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ１２：３−１３；Ｌｏｃｋｈａｒｔら（１９９６）ＮａｔｕｒｅＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１４：１６７５−１６８０；Ｈｏｍｅｙら（２０００）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６４：３４６５−３４７０；Ｄｅｂｅｔｓら（２０００）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６５：４９５０−４９５６を参照のこと）。

（ＶＩ．使用）
本発明は、感染に対する不適切な応答または効果の無い応答を含む、炎症性障害および免疫障害の処置ならびに診断のための方法を提供する。例えば、喘息、アレルギー、関節炎、好酸球性の炎症に関連する障害、および病原性のＴＨ２型応答または効果の無いＴＨ２型応答に関する障害に関連する方法が、提供される。

本発明は、細菌、寄生生物、およびウイルス、細胞内病原体、ならびに癌および腫瘍に対する免疫防御を刺激するための方法を提供する。細胞内の細菌の処置のための方法が、提供される。細胞内の細菌の種としては、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａｓｐ．、Ｓｈｉｇｅｌｌａｓｐ．、Ｌｉｓｔｅｒｉａｓｐ．、Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａｓｐ．、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉａｓｐ．（結核；ライ病）、Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｓｐ．、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａｓｐ．、Ｏｒｉｅｎｔａｓｐ．、Ｅｈｒｌｉｃｈｉａｓｐ．、Ａｎａｐｌａｓｍａｓｐ．、Ｎｅｏｒｉｃｋｅｔｔｓｉａｓｐ．、Ｃｈｌａｍｙｄｉａｓｐ．およびＣｏｘｉｅｌｌａｓｐ．が挙げられる。さらに、ＩＦＮγは、寄生生物（例えば、Ｐｌａｓｍｏｄｉａｓｐ．（マラリア）、Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａｓｐ．、Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａｓｐ．、Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａｓｐ．、およびＣｒｙｐｔｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍｓｐ．）に対する応答を媒介する。ウイルス（例えば、ＨＩＶ、痘瘡ウイルスおよびワクシニアウイルス（痘瘡）のようなオルソポックスウイルス、ならびにアルファヘルペスウイルス（例えば、単純ヘルペスウイルス）およびベータヘルペスウイルス（例えば、サイトメガロウイルス）を含むヘルペスウイルス）を処置するための方法が、提供される。慢性的な炎症性障害の処置のための方法もまた、提供される（例えば、Ｋｅｎｔら、（２０００）Ｖａｃｃｉｎｅ１８：２２５０−２２５６；Ｉｓｍａｉｌら（２００２）ＦＥＭＳＭｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｌｅｔｔ．２０７：１１１−１２０；Ｋａｕｆｍａｎｎ（２００１）ＮａｔｕｒｅＲｅｖｓ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１：２０−３０；ＧｏｅｂｅｌおよびＧｒｏｓｓ（２００１）ＴＲＥＮＤＳＭｉｃｒｏｂｉｏｌ．９：２６７−２７３；Ｈｅｕｓｓｌｅｒら（２００１）Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐａｒａｓｉｔｏｌ．３１：１１６６−１１７６；Ｌｕｄｅｒら（２００１）Ｃａｒｓｔｅｎら（２００１）ＴＲＥＮＤＳＰａｒａｓｉｔｏｌ．１７：４８０−４８６；Ｒｏｏｋら（２００１）Ｅｕｒ．Ｒｅｓｐ．Ｊ．１７：５３７−５５７；ＳｔｅｎｇｅｒおよびＲｏｌｌｉｎｇｈｏｆｆ（２００１）Ａｎｎ．Ｒｈｅｕｍ．Ｄｉｓ．６０：ｉｉｉ４３−ｉｉｉ４６；Ｈａａｓら（２００２）Ａｍ．Ｊ．Ｄｅｒｍａｔｏｐａｔｈｏｌ．２４：３１９−３２３；ＤｏｒｍａｎおよびＨｏｌｌａｎｄ（２０００）ＣｙｔｏｋｉｎｅＧｒｏｗｔｈＦａｃｔｏｒＲｅｖｓ．１１：３２１−３３３；Ｓｍｉｔｈら（２００２）Ｊ．Ｇｅｎ．Ｖｉｒｏｌ．８３（Ｐｔ．１２）２９１５−２９３１；ＣｏｈｒｓおよびＧｉｌｄｅｎ（２００１）ＢｒａｉｎＰａｔｈｏｌ．１１：４６５−４７４；ＴａｎｎｅｎｂａｕｍおよびＨａｍｉｌｔｏｎ（２００２）Ｓｅｍ．ＣａｎｃｅｒＢｉｏｌ．１０：１１３−１２３；Ｉｋｅｄａら（２００２）ＣｙｔｏｋｉｎｅＧｒｏｗｔｈＦａｃｔｏｒＲｅｖｓ．１３：９５−１０９；Ｋｌｉｍｐら（２００２）Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｏｎｃｏｌ．Ｈｅｍａｔｏｌ．４４：１４３−１６１；Ｆｒｕｃｈｔら（２００１）ＴＲＥＮＤＳＩｍｍｕｎｏｌ．２２：５５６−５６０を参照のこと）。

本発明は、増殖性の状態または増殖性の障害（例えば、子宮、頚部、乳房、前立腺、精巣、陰茎、胃腸管（例えば、食道、口腔咽頭部、胃、小腸および大腸、結腸、または直腸）、腎臓、腎細胞、膀胱、骨、骨髄、皮膚、頭部またはくび、皮膚、肝臓、胆嚢、心臓、肺、膵臓、唾液腺、副腎、甲状腺、脳、神経節、中枢神経系（ＣＮＳ）および末梢神経系（ＰＮＳ）、ならびに免疫系（例えば、脾臓または胸腺）の癌）を処置するか、または診断する方法を提供する。本発明は、例えば、免疫原性の腫瘍、非免疫原性の腫瘍、休眠中の腫瘍、ウイルス誘導性の癌（例えば、上皮細胞の癌、内皮細胞の癌、扁平上皮癌、パピローマウイルス、腺癌、リンパ腫、癌腫、黒色腫、白血病、骨髄腫、肉腫、奇形癌、化学的に誘導性の癌、転移、および新脈管形成）を処置する方法を提供する。本発明はまた、例えば調節性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）の活性を調節することによって腫瘍細胞抗原または癌細胞抗原に対する寛容を減少させる工程を企図する（例えば、Ｒａｍｉｒｅｚ−Ｍｏｎｔａｇｕｔら（２００３）Ｏｎｃｏｇｅｎｅ２２：３１８０−３１８７；Ｓａｗａｙａら（２００３）ＮｅｗＥｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４９：１５０１−１５０９；Ｆａｒｒａｒら（１９９９）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６２：２８４２−２８４９；Ｌｅら（２００１）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６７：６７６５−６７７２；ＣａｎｎｉｓｔｒａおよびＮｉｌｏｆｆ（１９９６）ＮｅｗＥｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３３４：１０３０−１０３８；Ｏｓｂｏｒｎｅ（１９９８）ＮｅｗＥｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３３９：１６０９−１６１８；ＬｙｎｃｈおよびＣｈａｐｅｌｌｅ（２００３）ＮｅｗＥｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４８：９１９−９３２；ＥｎｚｉｎｇｅｒおよびＭａｙｅｒ（２００３）ＮｅｗＥｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４９：２２４１−２２５２；Ｆｏｒａｓｔｉｅｒｅら（２００１）ＮｅｗＥｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４５：１８９０−１９００；Ｉｚｂｉｃｋｉら（１９９７）ＮｅｗＥｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３３７：１１８８−１１９４；Ｈｏｌｌａｎｄら（編）（１９９６）ＣａｎｃｅｒＭｅｄｉｃｉｎｅＥｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａｏｆＣａｎｃｅｒ，第４版，ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅｓｓ，ＳａｎＤｉｅｇｏ，ＣＡを参照のこと）。

本発明は、ＩＬ−３３のアゴニストまたはアンタゴニスト、少なくとも１つのさらなる治療因子または診断因子によって、増殖性の状態、癌、腫瘍、または前癌状態（例えば、異形成）を処置するための方法を提供する。上記少なくとも１つのさらなる治療因子または診断因子は、例えば、サイトカインまたはサイトカインアンタゴニスト（例えば、インターフェロンα）、または抗上皮細胞成長因子レセプター、ドキソルビシン、エピルビシン、葉酸代謝拮抗薬（例えば、メトトレキサートまたはフルオロウラシル）、イリノテカン、シクロホスファミド、放射線治療、ホルモン療法または抗ホルモン療法（例えば、アンドロゲン、エストロゲン、抗エストロゲン、フルタミド、またはジエチルスチルベストロール）、手術、タモキシフェン、イホスファミド、ミトラクトール（ｍｉｔｏｌａｃｔｏｌ）、アルキル化剤（例えば、メルファランまたはシスプラチン）、エトポシド、ビノレルビン、ビンブラスチン、ビンデシン、糖質コルチコイド、ヒスタミンレセプターアンタゴニスト、新脈管形成インヒビター、放射線、放射線感作物質、アントラサイクリン、ビンカアルカロイド、タキサン（例えば、パクリタキセルおよびドセタキセル）、細胞周期インヒビター（例えば、サイクリン依存性キナーゼインヒビター）、モノクローナル抗体、モノクローナル抗体と毒素との複合体、Ｔ細胞アジュバント、骨髄移植または抗原提示細胞（例えば、樹状細胞療法）であり得る。例えば、可溶性タンパク質またはタンパク質をコードする核酸のようなワクチンが、提供され得る（例えば、Ｌｅら、前出；ＧｒｅｃｏおよびＺｅｌｌｅｆｓｋｙ（編）（２０００）ＲａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙｏｆＰｒｏｓｔａｔｅＣａｎｃｅｒ，ＨａｒｗｏｏｄＡｃａｄｅｍｉｃ，Ａｍｓｔｅｒｄａｍ；ＳｈａｐｉｒｏおよびＲｅｃｈｔ（２００１）ＮｅｗＥｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４４：１９９７−２００８；Ｈｏｒｔｏｂａｇｙｉ、（１９９８）ＮｅｗＥｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３３９：９７４−９８４；Ｃａｔａｌｏｎａ（１９９４）ＮｅｗＥｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３３１：９９６−１００４；ＮａｙｌｏｒおよびＨａｄｄｅｎ（２００３）Ｉｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ．３：１２０５−１２１５；ＴｈｅＩｎｔ．ＡｄｊｕｖａｎｔＬｕｎｇＣａｎｃｅｒＴｒｉａｌＣｏｌｌａｂｏｒａｔｉｖｅＧｒｏｕｐ（２００４）ＮｅｗＥｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３５０：３５１−３６０；Ｓｌａｍｏｎら（２００１）ＮｅｗＥｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４４：７８３−７９２；Ｋｕｄｅｌｋａら（１９９８）ＮｅｗＥｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３３８：９９１−９９２；ｖａｎＮｅｔｔｅｎら（１９９６）ＮｅｗＥｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３３４：９２０−９２１を参照のこと）。

炎症性障害（例えば、乾癬、クローン病、および慢性関節リウマチ）をスコアリングするための多くの生物マーカーおよび方法が、利用可能である（例えば、Ｂｒｅｓｎｉｈａｎ（２００３）ＡｒｔｈｒｉｔｉｓＲｅｓ．Ｔｈｅｒ．５：２７１−２７８；ＢａｒｎｅｒｏおよびＤｅｌｍａｓ（２００３）Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ．１５：６４１−６４６；Ｇｉｏｎｃｈｅｔｔｉら、（２００３）Ｄｉｇ．Ｄｉｓ．２１：１５７−１６７；Ｗｉｉｋ（２００２）ＡｕｔｏｉｍｍｕｎｅＲｅｖ．１：６７−７２；Ｓｏｓｔｅｇｎｉら（２００３）ＡｌｉｍｅｎｔＰｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｈｅｒ．１７（補遺２）：１１−１７を参照のこと）。

癌をスコアリングするための生物マーカーおよび方法もまた、記載される（例えば、Ａｌｉｓｏｎ（編）（２００１）ＴｈｅＣａｎｃｅｒＨａｎｄｂｏｏｋ，Ｇｒｏｖｅ’ｓＤｉｃｔｉｏｎａｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ；Ｏｌｄｈａｍ（編）（１９９８）ＰｒｉｎｃｉｐｌｅｓｏｆＣａｎｃｅｒＢｉｏｔｈｅｒａｐｙ，第３版，ＫｌｕｗｅｒＡｃａｄｅｍｉｃＰｕｂｌ．，Ｈｉｎｇｈａｍ，ＭＡ；Ｔｈｏｍｐｓｏｎら（編）（２００１）ＴｅｘｔｂｏｏｋｏｆＭｅｌａｎｏｍａ，ＭａｒｔｉｎＤｕｎｉｔｚ，Ｌｔｄ．，Ｌｏｎｄｏｎ，ＵＫ；Ｄｅｖｉｔａら（編）（２００１）Ｃａｎｃｅｒ：ＰｒｉｎｃｉｐｌｅｓａｎｄＰｒａｃｔｉｃｅｏｆＯｎｃｏｌｏｇｙ，第６版，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｐｈｉｌａ，ＰＡ；Ｈｏｌｌａｎｄら（編）（２０００）Ｈｏｌｌａｎｄ−ＦｒｅｉＣａｎｃｅｒＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＢＣＤｅｃｋｅｒ，Ｐｈｉｌａ．，ＰＡ；ＧａｒｒｅｔｔおよびＳｅｌｌ（編）（１９９５）ＣｅｌｌｕｌａｒＣａｎｃｅｒＭａｒｋｅｒｓ，ＨｕｍａｎａＰｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ；ＭａｃＫｉｅ（１９９６）ＳｋｉｎＣａｎｃｅｒ，第２版，Ｍｏｓｂｙ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ；Ｍｏｅｒｔｅｌ（１９９４）ＮｅｗＥｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３３０：１１３６−１１４２；Ｅｎｇｌｅｍａｎ（２００３）Ｓｅｍｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．３０（３補遺８）：２３−２９；Ｍｏｈｒら（２００３）Ｏｎｋｏｌｏｇｉｅ２６：２２７−２３３を参照のこと）。

本発明の広範な範囲は、以下の実施例の参照によって最もよく理解されるが、以下の実施例が、本発明を特定の実施形態に限定することは意図されない。

（Ｉ．一般的方法）
生物化学および分子生物学における標準的な方法が記載される（例えば、Ｍａｎｉａｔｉｓら（１９８２）ＭｏｌｅｃｕｌａｒＣｌｏｎｉｎｇ，ＡＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭａｎｕａｌ，ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒＬａｂｏｒａｔｏｒｙＰｒｅｓｓ，ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒ，ＮＹ；ＳａｍｂｒｏｏｋおよびＲｕｓｓｅｌｌ（２００１）ＭｏｌｅｃｕｌａｒＣｌｏｎｉｎｇ，第３版，ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒＬａｂｏｒａｔｏｒｙＰｒｅｓｓ，ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒ，ＮＹ；Ｗｕ（１９９３）ＲｅｃｏｍｂｉｎａｎｔＤＮＡ，第２１７巻，ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅｓｓ，ＳａｎＤｉｅｇｏ，ＣＡを参照のこと）。標準的な方法はまた、Ａｕｓｂｅｌら（２００１）ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，第１〜４巻，ＪｏｈｎＷｉｌｅｙａｎｄＳｏｎｓ，Ｉｎｃ．ＮｅｗＹｏｒｋ，ＮＹに表され、これは、細菌細胞におけるクローニングおよびＤＮＡ変異誘発（第１巻）、哺乳動物細胞および酵母におけるクローニング（第２巻）、複合糖質およびタンパク質発現（第３巻）、ならびにバイオインフォマティクス（第４巻）を記載する。

免疫沈降、クロマトグラフィー、電気泳動、遠心分離および結晶化を含むタンパク質精製のための方法が記載される（Ｃｏｌｉｇａｎら（２０００）ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＰｒｏｔｅｉｎＳｃｉｅｎｃｅ，第１巻，ＪｏｈｎＷｉｌｅｙａｎｄＳｏｎｓ，Ｉｎｃ．，ＮｅｗＹｏｒｋ）。化学分析、化学修飾、翻訳後修飾、融合タンパク質の産生、タンパク質のグリコシル化が記載される（例えば、Ｃｏｌｉｇａｎら（２０００）ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＰｒｏｔｅｉｎＳｃｉｅｎｃｅ，第２巻，ＪｏｈｎＷｉｌｅｙａｎｄＳｏｎｓ，Ｉｎｃ．，ＮｅｗＹｏｒｋ；Ａｕｓｕｂｅｌら（２００１）ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，第３巻，ＪｏｈｎＷｉｌｅｙａｎｄＳｏｎｓ，Ｉｎｃ．，ＮＹ，ＮＹ，ｐｐ．１６．０．５−１６．２２．１７；Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｃｏ．（２００１）ＰｒｏｄｕｃｔｓｆｏｒＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅＲｅｓｅａｒｃｈ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ；ｐｐ．４５−８９；ＡｍｅｒｓｈａｍＰｈａｒｍａｃｉａＢｉｏｔｅｃｈ（２００１）ＢｉｏＤｉｒｅｃｔｏｒｙ，Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，Ｎ．Ｊ．，ｐｐ．３８４−３９１を参照のこと）。ポリクローナル抗体およびモノクローナル抗体の、産生、精製、および断片化のための方法が記載される（Ｃｏｌｉｇａｎら（２００１）ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｃｏｌｓｉｎＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，第１巻，ＪｏｈｎＷｉｌｅｙａｎｄＳｏｎｓ，Ｉｎｃ．，ＮｅｗＹｏｒｋ；ＨａｒｌｏｗａｎｄＬａｎｅ（１９９９）ＵｓｉｎｇＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒＬａｂｏｒａｔｏｒｙＰｒｅｓｓ，ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒ，ＮＹ；ＨａｒｌｏｗａｎｄＬａｎｅ，前出）。リガンド／レセプター相互作用を特徴化するための標準的な方法が利用可能である（例えば、Ｃｏｌｉｇａｎら（２００１）ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｃｏｌｓｉｎＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，第４巻，ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ，Ｉｎｃ．，ＮｅｗＹｏｒｋを参照のこと）。

フローサイトメトリー（蛍光表示式細胞分取器（ＦＡＣＳ）が挙げられる）のための方法が利用可能である（例えば、Ｏｗｅｎｓら（１９９４）ＦｌｏｗＣｙｔｏｍｅｔｒｙＰｒｉｎｃｉｐｌｅｓｆｏｒＣｌｉｎｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙＰｒａｃｔｉｃｅ，ＪｏｈｎＷｉｌｅｙａｎｄＳｏｎｓ，Ｈｏｂｏｋｅｎ，ＮＪ；Ｇｉｖａｎ（２００１）ＦｌｏｗＣｙｔｏｍｅｔｒｙ，第２版；Ｗｉｌｅｙ−Ｌｉｓｓ，Ｈｏｂｏｋｅｎ，ＮＪ；Ｓｈａｐｉｒｏ（２００３）ＰｒａｃｔｉｃａｌＦｌｏｗＣｙｔｏｍｅｔｒｙ，ＪｏｈｎＷｉｌｅｙａｎｄＳｏｎｓ，Ｈｏｂｏｋｅｎ，ＮＪを参照のこと）。例えば、診断試薬として使用するための核酸（核酸プライマーおよび核酸プローブ、ポリペプチド、ならびに抗体が挙げられる）の修飾に適切な蛍光試薬が利用可能である（例えば、ＭｏｌｅｃｕｌａｒＰｒｏｂｅｓ（２００３）Ｃａｔａｌｏｇｕｅ，ＭｏｌｅｃｕｌａｒＰｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｅｕｇｅｎｅ，ＯＲ；Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（２００３）Ｃａｔａｌｏｇｕｅ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯを参照のこと）。

免疫系の組織学に関する標準的な方法が記載される（例えば、Ｍｕｌｌｅｒ−Ｈａｒｍｅｌｉｎｋ（編）（１９８６）ＨｕｍａｎＴｈｙｍｕｓ：ＨｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙａｎｄＰａｔｈｏｌｏｇｙ，ＳｐｒｉｎｇｅｒＶｅｒｌａｇ，ＮｅｗＹｏｒｋ，ＮＹ；Ｈｉａｔｔら（２０００）ＣｏｌｏｒＡｔｌａｓｏｆＨｉｓｔｏｌｏｇｙ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ，ａｎｄＷｉｌｋｉｎｓ，Ｐｈｉｌａ，ＰＡ；Ｌｏｕｉｓら（２００２）ＢａｓｉｃＨｉｓｔｏｌｏｇｙ：ＴｅｘｔａｎｄＡｔｌａｓ，ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ，ＮｅｗＹｏｒｋ，ＮＹを参照のこと）。

動物モデル（例えば、ノックアウトマウス）を使用するための方法、ならびに診断因子、治療因子、および医薬品を試験、評価、およびスクリーニングするための細胞ベースのアッセイが、利用可能である（例えば、ＣａｒおよびＥｎｇ（２００１）Ｖｅｔ．Ｐａｔｈｏｌ．３８：２０−３０；Ｋｅｎｙｏｎら（２００３）Ｔｏｘｉｃｏｌ．Ａｐｐｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１８６：９０−１００；Ｄｅｕｒｌｏｏら（２００１）Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒ．ＣｅｌｌＭｏｌ．Ｂｉｏｌ．２５：７５１−７６０；Ｚｕｂｅｒｉら（２０００）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６４：２６６７−２６７３；Ｔｅｍｅｌｋｏｖｓｋｉら（１９９８）Ｔｈｏｒａｘ５３：８４９−８５６；Ｈｏｒｒｏｃｋｓら（２００３）Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．ＤｒｕｇＤｉｓｃｏｖ．Ｄｅｖｅｌ．６：５７０−５７５；Ｊｏｈｎｓｔｏｎら（２００２）ＤｒｕｇＤｉｓｃｏｖ．Ｔｏｄａｙ７：３５３−３６３を参照のこと）。

例えば、抗原性フラグメント、リーダー配列、タンパク質の折り畳み、機能的ドメイン、グリコシル化部位、および配列アラインメントを決定するためのソフトウェアパッケージならびにデータベースが、利用可能である（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ、ＶｅｃｔｏｒＮＴＩ（登録商標）Ｓｕｉｔｅ（Ｉｎｆｏｒｍａｘ，Ｉｎｃ．，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ）；ＧＣＧウィスコンシンパッケージ（Ａｃｃｅｌｒｙｓ，Ｉｎｃ．，ＳａｎＤｉｅｇｏ，ＣＡ）；ＤｅＣｙｐｈｅｒ（登録商標）（ＴｉｍｅＬｏｇｉｃＣｏｒｐ．，ＣｒｙｓｔａｌＢａｙ，Ｎｅｖａｄａ）；Ｍｅｎｎｅら（２０００）Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ１６：７４１−７４２；Ｍｅｎｎｅら（２０００）ＢｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓＮｏｔｅ１６：７４１−７４２；Ｗｒｅｎら（２００２）Ｃｏｍｐｕｔ．ＭｅｔｈｏｄｓＰｒｏｇｒａｍｓＢｉｏｍｅｄ．６８：１７７−１８１；ｖｏｎＨｅｉｊｎｅ（１９８３）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１３３：１７−２１；ｖｏｎＨｅｉｊｎｅ（１９８６）ＮｕｃｌｅｉｃＡｃｉｄｓＲｅｓ．１４：４６８３−４６９０を参照のこと）。

（ＩＩ．インターロイキン−１００）
ＩＬ−１ファミリーの他のメンバーに対するヒトＩＬ−３３のアミノ酸配列の類似度は、以下の通りである。ＩＬ−１Ｒａとの類似度は、３４％であり；ＩＬ−１δとの類似度は、３６％であり；ＩＬ−１Ｆ１０との類似度は、３６％であり；ＩＬ−１ζとの類似度は、９％であり；ＩＬ−１Ｆ８との類似度は、３２％であり；ＩＬ−１εとの類似度は、４０％であり；そしてＩＬ−ＩＦ９との類似度は、３１％である。

インターロイキン−１００を、計算上の配列分析を用いて見出し、そしてＩＬ−１ファミリーのメンバー（それぞれ、ＩＬ−１βおよびＩＬ−１８）との２次構造の比較によって、新規なＩＬ−１ファミリーメンバーとして同定した。ＩＬ−１ファミリーメンバーは、病原体のチャレンジに対する応答において放出される、免疫系の高度な炎症制御因子である。ＩＬ−３３のヒト相同体およびマウス相同体を同定し、そしてラットＩＬ−３３およびイヌＩＬ−３３を同定した。遺伝子発現分析は、ヒトＩＬ−３３が上皮細胞、平滑筋細胞およびメサンギウム細胞において発現することを示した。ＩＬ−１βおよびＴＮＦ−αによる刺激において、ヒトＩＬ−３３ｍＲＮＡレベルは、初代正常ヒト皮膚線維芽細胞および肺線維芽細胞において高度に誘導され、そして気管支の平滑筋において高度に誘導される。乾癬の皮膚サンプルおよび肺胞タンパク症におけるＩＬ−３３ｍＲＮＡの発現は、著しく上昇した。

ＩＬ−１およびＩＬ−１８と同様に、ＩＬ−３３は、シグナルペプチドを有さない。代わりに、ＩＬ−３３は、成熟した生物学的に活性な形態を放出するための大規模なプロセッシングを必要とする大きなプレプロタンパク質として作られ、そして分泌される。プレプロＩＬ−３３は、カスパーゼによって処理されるようである。本発明者らは、タンパク質配列のカスパーゼ切断部位を同定し、そしてインビトロで翻訳されたヒトＩＬ−３３が、構成的に活性な組換えカスパーゼ−１によって切断されることを示した。ＩＬ−３３の推定上の生物学的役割を調査するために、Ｅ．ｃｏｌｉ中で組換えタンパク質を発現させ、そして精製した。これによって、ＩＬ−３３遺伝子を、ｐＥＴ３ａ細菌発現ベクター中にクローニングした。組換えタンパク質のＮ末端を、成熟した生物学的に活性なタンパク質が、プロドメイン（ｐｒｏ−ｄｏｍａｉｎ）を欠くようなＩＬ−１βおよびＩＬ−１８と、ＩＬ−３３の成熟した配列とを比較することによって選択した。完全長のタンパク質のアミノ酸１１２を、Ｎ末端のアミノ酸として選択した。組換えタンパク質を、Ｅ．ｃｏｌｉで発現させ、そしてＥ．ｃｏｌｉから精製した。インビボの研究を実施した。５ｕｇ／日または５０ｕｇ／日のいずれかの投薬量による、マウス（Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ）に対する組換えヒトＩＬ−３３の腹腔内（ＩＰ）注射は、７日後に重篤な好酸球増加および巨脾腫を生じた。数種のサイトカインの血清レベルを、３日目および７日目に試験した。５０ｕｇのｒｈＩＬ−３３／日の群においてＩＬ−５を１００００ｐｇ／ｍｌまで導入し、そして５ｕｇのｒｈＩＬ−３３／日の群においてＩＬ−５を１０００ｐｇ／ｍｌまで導入して、３日目に観察した。ＩＬ−５の血清レベルは、５０ｕｇのｒｈＩＬ−３３／日の群において１１００ｐｇ／ｍｌまで減少し、そして５ｕｇのｒｈＩＬ−３３／日の群において５００ｐｇ／ｍｌまで減少した。ＩＬ−１３血清レベルはまた、５ｕｇのＩＬ−３３／日または５０ｕｇのＩＬ−３３／日のいずれかによる処置後７日目に、３０ｐｇ／ｍｌおよび１００ｐｇ／ｍｌにてそれぞれ検出可能であった。ＩＬ−５およびＩＬ−１３は、ＰＢＳ処理したコントロール群において検出できなかった。さらに、ＩＦＮ−γ、ＴＮＦ−α、ＩＬ−１２、ＩＬ−１０、ＩＬ−６、ＩＬ−４、ＩＬ−２またはＭＣＰ−１の上昇したレベルは、ＩＬ−３３処置したマウスまたはコントロール群において検出できなかった。

２日間の５０ｕｇのｒｈＩＬ−３３／日のＩＰ注射の後に肝臓リンパ球を回収した。細胞を２ｘ１０ｅ６／ｍｌの培養培地を伴う培養皿にプレートし、そして５０ｎｇ／ｍｌのＰＭＡおよびｌｕＭのイオノマイシンで４時間刺激した。最後の２時間の間、ＢｒｅｆｅｌｄｉｎｇＡ（分泌インヒビター）を添加した。細胞を、ＣＤ３およびＮＫ１．１について表面染色し、そしてＩＬ−５またはＩＬ−４のいずれかについて細胞内染色し、そしてＦＡＣＳによって分析した。ＩＬ−３３によって２日間処置したマウスに由来するＣＤ３／ＮＫ１．１ポジティブな肝臓リンパ球細胞は、ＩＬ−５およびＩＬ−４の蓄積を示した。これらの結果は、ＩＬ−３３は、ＮＫＴ細胞を活性化してＩＬ−４およびＩＬ−５を分泌させることを示唆する。

ＩＬ−３３がＮＫＴ細胞に結合するか否かを試験するために、ビオチン化ＩＬ−３３を、結合実験のために使用した。ＰＢＭＣに由来するヒトＮＫＴ細胞を、Ｓｔｒｅｐｄａｖｉｄｉｎ−ＰＥ、またはビオチン化ｒｈＩＬ−３３およびＳｔｒｅｐｄａｖｉｄｉｎ−ＰＥのいずれかと一緒にインキュベートした。この染色した細胞を、ＦＡＣＳによって分析した。ヒトＮＫＴ細胞に対するｒｈＩＬ−３３の結合を観察した。この結合は、非ビオチン化ｒｈＩＬ−３３と競合し得た。

ＩＬ−１ファミリーメンバーは、細胞表面レセプターと相互作用することによってそれらの生物学的応答を発揮した。本発明者らは、ＩＬ−３３に関する細胞レセプターとしてオーファンＩＬ−１レセプターＳＴ２／Ｔ１を同定した。ＳＴ２／Ｔ１特異的モノクローナル抗体によるマウス肥満細胞株のＦＡＣＳ染色は、この肥満細胞株がＳＴ２／Ｔ１レセプターを発現することを示した。この染色を、この肥満細胞株をＩＬ−３３タンパク質とインキュベートすることによって、特異的かつ用量依存的に競合した。

ＮＫＴ細胞は、喘息のマウスモデルにおけるアレルゲン誘導性の気道の反応性亢進において、気道の炎症、ならびにＩＬ−４の産生およびＩＬ−１３の産生に必須である。ＮＫＴ細胞におけるＩＬ−３３によるＩＬ−５の誘導およびＩＬ−１３の誘導は、ＩＬ−３３が、これらの疾患の誘導に関与し得ることを示唆する。ＩＬ−３３を中和する治療用抗体の産生は、これらの疾患の処置に有利であり得る。

ＮＫＴ細胞は、多くの疾患に関わっている。ＮＫＴ細胞の調節因子としてのＩＬ−３３の同定は、ＩＬ−３３が、他の疾患（例えば、狼瘡、多発性硬化症、悪性腫瘍、気道の炎症および感染性疾患）に影響し得ることを示唆する。ＩＬ−３３によるＴｈ２サイトカイン（例えば、ＩＬ−５およびＩＬ−１３）の誘導は、微生物感染に対する保護または腫瘍に対する保護に役立ち得る。

ＩＬ−１ファミリーメンバーは、代表的に、ＩＬ−１レセプターファミリーの２つの異なるメンバーに結合して、完全なレセプター複合体を形成する。ＩＬ−３３に関するレセプターをなすサブユニットの１つとしてのＩＬ−３３およびＳＴ２／Ｔ１の同定は、このサブユニットが、第２のＩＬ−３３レセプターサブユニットの同定することを可能にする。完全なＩＬ−３３レセプターの同定は、ＩＬ−３３によって誘導される生物学的応答の詳細な同定を可能にする。

Ｔａｑｍａｎを使用するリアルタイムＰＣＲ分析は、ＩＬ−３３が、多くの細胞および組織で発現したことを示した（表１）。本発明は、炎症性障害および自己免疫障害ならびに炎症性状態および自己免疫性状態（例えば、乾癬、喘息、アレルギーおよび炎症性腸疾患（例えば、胃の炎症、潰瘍性大腸炎、クローン病、セアリック病および過敏性腸症候群）を調節するためのＩＬ−３３のアゴニストおよびアンタゴニストを提供する。

ＩＬ−１βにＴＮＦ−αを加えることによるＩＬ−３３の誘導（８時間）を、培地単独によるＩＬ−３３の誘導と比較した。誘導を、示した細胞型において研究した（表２）。

インビトロで翻訳されたヒトＩＬ−３３が、見出してカスパーゼ−１によって切断されることを見出した。カスパーゼ処理を伴わない、ＳＤＳＰＡＧＥによる分析は、プロ−ヒトＩＬ−３３に対応する約３２ｋＤａにおいてバンドを示した。３７℃にて１時間のカスパーゼ−１による処理は、ほぼ同じ強度の２つのバンドを生じ、これらのバンドの一方は、プロ−ＩＬ−３３に対応し、そして他方は、約２０〜２２ｋＤａ（成熟ヒトＩＬ−３３）に移動した。３７℃にて２時間の処理は、同じ２つのバンドを生じたが、これらのバンドは、約３分の２のタンパク質が約２２ｋＤａに移動した。同様の研究はまた、インビトロで翻訳されたヒトＩＬ−３３が、エラスターゼまたはカテプシンＧによって、約２０〜２２ｋＤａに移動する種へと切断され得るが、ＭＭＰ−３処理は、使用した条件下において切断を生じなかったことを実証した。ＩＬ−３３のアミノ酸１１２は、他のＩＬ−１ファミリーメンバーとの相同性に起因して、成熟ＩＬ−３３を産生する切断の位置であると考えられる。

Ｔ１／ＳＴ２を、ヒトＩＬ−３３に関するレセプターの少なくとも１つのサブユニットとして同定した。Ｔ１／ＳＴ２の発現は、以下の通りであった（表３）。

ヒトＩＬ−３３を、ｐＥＴ３ａベクター中にクローニングし、そしてＥ．ｃｏｌｉ中で発現した。このクローニングしたタンパク質は、アミノ酸１１２で始まり、１５８アミノ酸長（１８ｋＤａ）であった。ＩＰＴＧを使用して発現を誘導し、そしてそのタンパク質が、水溶性であることを見出した。この発現したタンパク質を、Ａ−カラムおよびＳｅｐｈａｄｅｘゲル濾過を使用して精製した。この精製した調製物を、内毒素について試験し、その結果は、１μｇのタンパク質あたり約０．０２３ＥＵであることを実証した。非還元条件を使用するＳＤＳＰＡＧＥによる分析は、少なくとも９５％のタンパク質が、１８ｋＤａの単一分子量に移動したことを示した。

ＩＬ−３３を、Ｂ６／Ｂａｌｂ／ｃマウスの腹腔内（ｉ．ｐ．）に注射した。以下の、３群のマウスを使用した：（１）リン酸緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ）の注射；（２）ｈＩＬ−３３（５μｇ／日）の注射；および（３）ｈＩＬ−３３（５０μｇ／日）の注射。このプロトコルはまた、処置の３日後に屠殺する３日間の注射（ｉ．ｐ．）、または処置の７日後に屠殺する７日間の注射（ｉ．ｐ．）を含んだ。血液、血清、血液塗沫標本、白血球細胞の鑑別、組織学を行った。胸腺／脾臓細胞懸濁物を、ＦＡＣＳ分析によって分析した。

ＩＬ−３３処置は、ＩＬ−５およびＩＬ−１３の血清レベルを測定することによって決定されたように、ＩＬ−５およびＩＬ−１３を誘導する（表４）。サイトカインＩＬ−４、ＩＬ−５、およびＩＬ−１３をまた、ＩＬ−３３投与を伴う種々の器官において測定した。この試験した器官は、胸腺、肺、脾臓、および肝臓であった。これらの３つのサイトカインが、全て誘導されたこと見出した。これらは、ＩＬ−３３による処置の７日後に決定した。増加を、両方のレベルのＩＬ−３３（５μｇのＩＬ−３３および５０μｇのＩＬ−３３）において見出した。例えば、肺において、生理食塩水処置によるＩＬ−４の発現、ＩＬ−５の発現、およびＩＬ−１３の発現は、約１．０以下であった。しかし、ＩＬ−３３（５０μｇ）によるＩＬ−４の発現は、８．０であり；ＩＬ−５の発現は、１１．０であり；そしてＩＬ−１３の発現は、４１．０であった。ＩＬ−３３処置はまた、血清ＩｇＥおよび血清ＩｇＡの増加を引き起こした。７日間の処置によって、ＩｇＥレベルは、３０，０００ｎｇ／ｍｌ（ＰＢＳ）および１７，０００ｎｇ／ｍｌ（５０μｇのＩＬ−３３）であった。７日間の処置によって、ＩｇＡレベルは、９０ｎｇ／ｍｌ（ＰＢＳ）および４２０ｎｇ／ｍｌ（５０μｇのＩＬ−３３）であった。ＩＬ−３３処置はまた、巨脾腫をもたらした。ここで、ＰＢＳ（コントロール）処置マウスの脾臓の重量は、８０ｍｇであり、５μｇのＩＬ−３３で７日間処置したマウスの脾臓は１５０ｍｇであり、５０μｇのＩＬ−３３で７日間処置したマウスの脾臓は１９０ｍｇであった。ＩＬ−３３処置はまた、脾臓における骨髄外造血、および胸腺の形成不全（胸腺の大きさの減少）、および胸腺の皮質の形成不全を生じた。

形質転換細胞および非形質転換細胞を、マウスに注射し、その後マウス内での細胞のインキュベーション期間をおき、そして注射した細胞の回収および精製を行い、Ｔ１／ＳＴ２の発現を評価した（表５）。非形質転換乳腺細胞およびｒａｓ形質転換乳腺細胞を使用した。宿主免疫欠損ヌードマウスに対するｒａｓ形質転換細胞の注射によって、ｒａｓ形質転換細胞は、Ｔ１／ＳＴ２を増加したレベルで発現し、その発現は、１０３であった（表５）。インタクトな免疫系を有する宿主マウスに対するｒａｓ形質転換細胞の注射、形質転換細胞の回収、およびＴａｑｍａｎ（登録商標）分析によって、より大きいＴ１／ＳＴ２発現の増加を示した。Ｔ１／ＳＴ２発現のこれらの増加は、可溶性Ｔ１／ＳＴ２の増加を反映し、この可溶性Ｔ１／ＳＴ２は、囮として作用することが考えられる。可溶性Ｔ１／ＳＴ２が囮として作用する場合、これはＩＬ−３３に結合し、そして宿主が腫瘍細胞に対するＴＨ２型免疫応答を増大するのを妨げた。使用したインタクトな免疫系を有する宿主マウスは、ＸｔｂマウスおよびＸＢａｌｂマウスであった（表６）。Ｔ１／ＳＴ２の可溶性バージョン（いわゆるＦｉｔ１）が、記載される（例えば、Ｂｅｒｇｅｒｓら（１９９４）ＥＭＢＯＪ．１３：１１７６−１１８８；Ｒｅｉｋｅｒｓｔｏｒｆｅｒら（１９９５）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７０：１７６４５−１７６４８を参照のこと）。

ＩＬ−３３を、４Ｔ１乳癌を有するマウスに投与した。投与したＩＬ−３３は、腫瘍の大きさを減少するのに効率的であった（表６）。本発明は、癌および腫瘍を含む増殖性の状態の処置のためのＩＬ−３３のアゴニスト（例えば、ＩＬ−３３またはＩＬ−３３をコードする核酸）を提供する。

ヒト組織サンプルのＴａｑｍａｎ分析は、種々の癌（例えば、乳癌および卵巣癌）におけるＩＬ−３３の減少した発現を示した（表７）。この結果は、免疫系の活性化を回避して抗腫瘍応答を増大するために、腫瘍細胞がＩＬ−３３の産生を控えることを示す（表７）。

ＩＬ−３３処置は、実験的自己免疫性脳炎（多発性硬化症に関する動物モデル）を延長する。ＥＡＥを、プロテオリピドタンパク質（ＰＬＰ）によって引き起こした（Ｋｊｅｌｌｅｎら（２００１）Ｊ．Ｎｅｕｒｏｉｍｍｕｎｏｌ．１２０：２５−３３；Ｌａｍａｎら（２００１）Ｊ．Ｎｅｕｒｏｉｍｍｕｎｏｌ．１１９：１２４−１３０；Ｆｉｆｅら（２００１）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６６：７６１７−７６２４）。３群のマウスを、ＰＢＳ、０．５μｇのＩＬ−３３、または２．０μｇのＩＬ−３３の注射のために使用した。これは、０日目〜１２日目まで毎日のｉ．ｐ．注射であった。疾患スコアを、７日目〜２３日目に評価した（表８）。この結果は、ＰＢＳ処置マウスにおいて、この疾患が自発的に回復されたことを実証した。しかし、ＩＬ−３３のいずれかの用量による処置によって、この疾患は延長され、ＰＢＳ処置によって見出される疾患より高度であり、そして２．５〜３．０の間の疾患スコアに疾患を維持した（表８）。本発明は、中枢神経系の自己免疫障害（例えば、多発性硬化症）を含む自己免疫障害の処置のための、ＩＬ−３３のアンタゴニストを提供する。

ＩＬ−３３処置は、ＮＫＴ細胞においてＩＬ−５の誘導を生じた。ＮＫＴ細胞を、ＮＫ１．１マーカーおよびＣＤ３マーカーの両方の存在によって同定した。Ｂｌａｃｋ−６マウスを、ＰＢＳまたは５０μｇ／日のＩＬ−３３で２日間処置した。肝臓リンパ球を単離し、そしてＰＭＡイオノマイシンで３時間再び刺激し、そしてブレフェルジン（ｂｒｅｆｅｌｄｉｎ）で１時間刺激した。この結果は、ＩＬ−３３が、ＮＫＴ細胞においてＩＬ−５を誘導することを実証した。

抗Ｔ１／ＳＴ２抗体を、野生型肥満細胞（ＷＴＭＣ）にその結合する能力、およびこの肥満細胞に対するこの抗体の結合に対する添加したＩＬ−３３の影響について試験した。ＩＬ−３３を添加することは、抗Ｔ１／ＳＴ２抗体のこの肥満細胞に結合する能力を無効にし、ＩＬ−３３のレセプターが、Ｔ１／ＳＴ２であることを実証した。

（ＩＩＩ．ＩＬ−３３抗体処置のインビトロでの効果）
ヒトＩＬ−３３に対するマウスモノクローナル抗体を、当該分野で周知である方法を使用して産生した（上記を参照のこと）。ＩＬ−３３活性に拮抗するこの抗体の能力を試験するために、Ｂａｌｂ／ｃマウスに、０日目に０．２ｍｇの抗ＩＬ−３３抗体を皮下に注射した。１日目に、このマウスに、１００ｎｇのｍＩＬ−３３を腹腔内に注射した。血清を、２日目に回収し、そしてＩＬ−５レベルを測定した。抗ＩＬ−３３抗体による処置は、ＩＬ−３３単独で処置したマウスならびにアイソタイプコントロール抗体およびＩＬ−３３で処置したマウスと比較した場合に、ＩＬ−５をわずかに産生するか、全く産生しなかった（図１を参照のこと）。

（ＩＶ．コラーゲン誘導性関節炎（ＣＩＡ）の処置）
Ｂ１０．ＲＩＩＩマウス（ＣＩＡの発症に対して感受性であることが知られる）に、完全なフロイントアジュバント（Ｄｉｆｃｏ）中のウシコラーゲンＩＩ型（ウシＣＩＩ；Ｓｉｇｍａ）を注射した。マウスに、１００ｕｌの１ｍｇ／ｍｌウシＣＩＩのエマルジョンを尾基底（ｔａｉｌｂａｓｅ）上に注射した。第２の追加免疫用量を、２１日目に投与した。マウスを、以下の臨床スケールによって評価した：０＝正常；１＝１つの関節／部位における発赤および／または腫れ；２＝１つより多い関節／部位における発赤および／または腫れ；ならびに３＝肢全体における発赤および／または腫れ。ＣＩＡを誘導したマウスは、７０〜９０％の疾患発現の割合を有する。

マウスを、１ｍｇの抗ＩＬ−３３抗体またはアイソタイプコントロール抗体で２３日目に処置した。抗体を、さらに２つの処置について７日ごとに投与した。抗ＩＬ−３３処置マウスは、減少した疾患スコアおよびより低い疾患発現の発生の割合を示した（図２および図３を参照のこと）。抗ＩＬ−３３処置マウスはまた、関節炎の肢の平均の数はより低かった（図４を参照のこと）。

（Ｖ．実験的自己免疫性脳炎（ＥＡＥ）の処置）
Ｃ５７ＢＬ／６マウスを、５０ｕｇのミエリンオリゴデンドロサイト糖タンパク質（ＭＯＧ）ペプチドで免疫してＥＡＥを誘導した。この疾患の臨床的評価は、以下のように記録される：１＝力のない尾；２＝後肢の脱力；３＝立ち直りの不全（ｉｎａｂｉｌｉｔｙｔｏｒｉｇｈｔ）＋１つの後肢の脱力；４＝立ち直りの不全＋片方の後肢麻痺；５＝両方の後肢麻痺；６＝両方の後肢麻痺＋腹部の虚脱（ａｂｄｏｍｅｎｃｏｌｌａｐｓｅ）；および７＝６＋瀕死。ＥＡＥマウスを、１００ｍｇの抗ＩＬ−３３抗体またはアイソタイプコントロール抗体のいずれかで皮下的に処置した。抗ＩＬ−３３処置マウスは、コントロール群より低い疾患スコアおよび疾患の発生率を示した（図５および図６を参照のこと）。

（ＶＩ．ＩＬ−３３Ｒ複合体を同定するためのプルダウンアッセイ）
ＩＬ−３３を、ＥＸ−ＬＩＮＫＳｕｐｈｏ−ＮＨＳ−Ｂｉｏｔｉｎ（Ｐｉｅｒｃｅ）でビオチン化した。２μｇのビオチン化ＩＬ−３３のプルダウンを、５０μｌの５０％のＡｇａｒｏｓｅｂｏｕｎｄＡｖｉｄｉｎＤ（ＶｅｃｔｏｒＬａｂｏｒｉｔｉｅｓ）５０％スラリーを含む５００μｌのＲＩＰＡ溶解緩衝液（アップステート（ｕｐｓｔａｔｅ）の細胞シグナル伝達溶液）中で行った。５μｇの組換え細胞外ＳＴ２−Ｆｃ（Ｒ＆ＤＳｙｓｔｅｍｓ）または５μｇの組換え細胞外ＳＩＧＩＲＲ−Ｆｃ（Ｒ＆ＤＳｙｓｔｅｍｓ）のいずれかを使用した。４℃にて一晩のインキュベーションの後、沈殿を、５００μｌのＲＩＰＡ溶解緩衝液で３回洗浄した。この沈殿したタンパク質を、ＳＤＳ−Ｐａｇｅによって分離し、電気ブロット（ｅｌｅｃｔｒｏｂｌｏｔ）し、そしてＳＴ２（Ｒ＆ＤＳｙｓｔｅｍｓ）またはＳＩＧＩＲＲ（Ｒ＆ＤＳｙｓｔｅｍｓ）に対して特異的な抗体を用いたウェスタンブロット／ＥＣＬ反応によって可視化した。ＳＴ２ＦｃまたはＳＩＧＩＲＲ−Ｆｃによるビオチン化ＩＬ−３３のプルダウンを、プロテインＧ−Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ（ＡｍｅｒｓｈａｍＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）をＡｇａｒｏｓｅｂｏｕｎｄＡｖｉｄｉｎＤの代わりに使用することを除いては、上記と同じ様式で行った。ＩＬ−３３の存在を、Ｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ−ＨＲＰ結合体（Ｐｉｅｒｃｅ）およびＥＣＬ反応を介して可視化した。

（ＶＩＩ．ＮＦ−κＢおよびＭＡＰキナーゼのリン酸化）
肥満細胞株ＷＴＭＣは、これまでに記載された（例えば、Ｗｒｉｇｈｔら（２００３）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１７１：３０３４−３０４６を参照のこと）。細胞を、ＣｏｍｐｌｅｔｅＭｉｎｉプロテアーゼインヒビターカクテル（Ｒｏｃｈｅ）および１０ｍＭＮａ_３ＶＯ_４を含むＲＩＰＡ溶解緩衝液（Ｕｐｓｔａｔｅ）中に溶解した。タンパク質を、ＳＤＳ−Ｐａｇｅによって分離し、Ｉｍｍｏｂｉｌｏｎ−Ｐメンブレン（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）に移し、リン酸化ｐ６５ＮＦ−κＢ、ｐ６５ＮＦ−κＢ、リン酸化ｐ４４／４２ＭＡＰキナーゼ、ｐ４４／４２ＭＡＰキナーゼ、リン酸化ｐ３８ＭＡＰキナーゼ、およびｐ３８ＭＡＰキナーゼに対する抗体（全てＣｅｌｌＳｉｇｎａｌｉｎｇＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙからの抗体）を使用して免疫ブロットした。

（ＶＩＩＩ．一過性トランスフェクションおよびレポーター遺伝子アッセイ）
製造業者の推薦に示されるように、ＮＦ−κＢ駆動性ＧＦＰレポーター遺伝子構築物（ｐＮＦ−κＢ−ｈｒＧＦＰ；Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ）およびＳＴ２もしくはＳＩＧＩＲＲまたはその両方についてコードするプラスミドの組み合わせによるトランスフェクションの前に、ＨＥＫ２９３ＦＴ細胞を、Ｆｕｇｅｎｅ−６（Ｒｏｃｈｅ）とともに播種した。細胞を、トランスフェクション２４時間後に、分けた。２４時間後、細胞を、未処置のままか、または５０ｎｇ／ｍｌの濃度にてマウスＩＬ−３３で刺激した。刺激の１６時間後に、細胞を、ＦＡＣＳによってＧＦＰ発現について分析した。

本明細書中の全ての引用は、各個々の刊行物、特許出願、または特許が、あたかも具体的かつ個別に、全ての図面（ｆｉｇｕｒｅ）および図面（ｄｒａｗｉｎｇ）を含んで参考として援用されることが示されるのと同じ程度に、本明細書において参考として援用される。

本発明の多くの改変および変化物が、当業者には明らかなように、本発明の目的、趣旨および範囲を保存するために、特定の状況、材料、組成物、プロセス、処置工程に適合するようになされ得る。全てのこのような改変物は、本発明の趣旨および範囲から逸脱することなく、本明細書に添付される特許請求の範囲の範囲内であることが意図される。本明細書において記載される特定の実施形態は、実施例のみによって提供され、そして本発明は、権利を与えられるこのような特許請求の範囲と等価の全体の範囲に加えて、添付された特許請求の範囲の用語によって限定されるべきである。そして、本発明は、実施例によって本明細書中に提示されている特定の実施形態によって限定されるべきではない。

図１は、ＩＬ−３３＋抗ＩＬ−３３抗体処置マウス対ＩＬ−３３単独処置マウスおよびアイソタイプコントロール抗体処置マウスにおけるＩＬ−５の産生を示す。図２は、抗ＩＬ−３３処置マウスおよびアイソタイプコントロール処置マウスについてのＣＩＡ疾患スコアを示す。図３は、抗ＩＬ−３３処置マウスおよびアイソタイプコントロール処置マウスにおけるＣＩＡの発生率を示す。図４は、抗ＩＬ−３３抗体またはアイソタイプコントロール抗体によって処置したマウス関節炎の肢の平均の数を示す。図５は、抗ＩＬ−３３処置マウスおよびアイソタイプコントロール処置マウスのＥＡＥ疾患のスコアを示す。図６は、抗ＩＬ−３３処置マウスおよびアイソタイプコントロール処置マウスのＥＡＥの発生率を示す。

Claims

免疫障害を処置するための組成物であって、該組成物は、
ＩＬ−３３のアンタゴニスト
を含み、
該アンタゴニストは、ＩＬ−３３に特異的に結合する抗体であり、
該障害が、
ａ）喘息またはアレルギー；
ｂ）多発性硬化症；あるいは
ｃ）関節炎を含む
組成物。
ＩＬ−３３のアゴニストを含む癌または腫瘍の処置のための組成物であって、該アゴニストはＩＬ−３３である、組成物。
前記関節炎が、
ａ）慢性関節リウマチを含む、請求項１に記載の組成物。
前記抗体が、
ａ）ポリクローナル抗体；
ｂ）モノクローナル抗体；
ｃ）ヒト化抗体、またはそのフラグメント；
ｄ）Ｆａｂフラグメント、Ｆｖフラグメント、またはＦ（ａｂ’）_２フラグメント；
ｅ）抗体のペプチド模倣体；あるいは
ｆ）検出可能な標識
を含む、請求項１に記載の組成物。
前記ＩＬ−３３アゴニストが、
ａ）全白血球；
ｂ）好中球；
ｃ）リンパ球；または
ｄ）好酸球
の数を増加させる、請求項２に記載の組成物。
前記ＩＬ−３３アゴニストが、血小板の数を減少させる、請求項２に記載の組成物。
免疫状態または免疫障害を診断することを支援するための方法であって、該方法は、
結合組成物を生物学的サンプルに接触させる工程であって、該結合組成物は、ＩＬ−３３に特異的に結合する抗体である、工程、および
該結合組成物の該生物学的サンプルへの特異的結合を測定または決定する工程を包含する、方法。
免疫状態または免疫障害の診断をするためのキットであって、該キットは、
コンパートメント；および
ＩＬ−３３に特異的に結合する抗体
を備える、キット。