JP6181265B2 - クロロトキシンポリペプチドおよびコンジュゲートならびにその使用 - Google Patents

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Description

クロロトキシンは、腫瘍細胞に特異的に結合することが示されている、サソリＬｅｉｕｒｉｕｓ ｑｕｉｎｑｕｅｓｔｒｉａｔｕｓ由来の毒液のペプチドコンポーネントである。クロロトキシンは、細胞傷害性薬剤および／またはイメージング剤を、転移性腫瘍および悪性神経膠腫などの脳腫瘍を含めた種々の腫瘍に送達するためのターゲティング薬剤として使用されてきた。例えば、クロロトキシンは、放射性同位元素であるヨウ素１３１とコンジュゲートされており、そのようなクロロトキシンコンジュゲートは、有効な抗腫瘍治療剤であることが示されている。サポリンに付着したクロロトキシン−ＧＳＴ融合タンパク質などのタンパク質融合物を含めた他のクロロトキシンコンジュゲートによっても、腫瘍細胞が有意かつ選択的に死滅することが示されている。
クロロトキシンは、潜在的に、細胞傷害性薬剤および／またはイメージング剤を含めた任意の多種多様な作用剤とコンジュゲートすることができる。現在利用可能なクロロトキシンコンジュゲートは、抗腫瘍性が実証されているが、本発明は、クロロトキシンコンジュゲートのレパートリーがより多ければ、より多くの利点がもたらされ得るという理解を包含する。一例を挙げると、異なるクロロトキシンコンジュゲートは、所与の腫瘍型および／または患者に対して特に望ましい可能性があるそれらの独特な薬物動態的性質のセットを有し得る。さらに、本発明は、野生型クロロトキシンポリペプチド（およびそのポリペプチドの多くの変異体）は、コンジュゲーションが起こり得る部位を２つ以上含有するという現実から生じる、特定の種類のクロロトキシンコンジュゲートに伴う、以前に文書で証明されていない、潜在的な問題の原因を特定する。したがって、本発明は、クロロトキシンとのコンジュゲートを生成するための化学反応の結果、多くの場合、コンジュゲート種の混合物が生じるという洞察を提供する。少なくとも一部の実施形態では、そのような異なる種は、異なる性質を有し得る。さらに、そのようなクロロトキシンコンジュゲート混合物を用いてなされた発見を再現する試みは、調製物内の異なる種の分布を再現するという難題に妨害される恐れがある。品質管理、および分析さえも、難しい、または不可能である可能性がある。
本発明は、新型のクロロトキシンコンジュゲートを提供し、他のクロロトキシンコンジュゲートを用いると遭遇する可能性のある問題の原因を特定する。すなわち、本発明は、多くの以前のクロロトキシンコンジュゲートは、対象の部分または実体をクロロトキシンポリペプチドに化学的にコンジュゲートすることによって調製されることを理解する。本発明に従って、少なくともいくつかの例では、そのような手法により、対象の部分または実体が異なるポイントまたは場所でクロロトキシンとコンジュゲートしているコンジュゲートの混成集団が生成することが理解される。本発明は、そのような混成集団は、特徴付けること、および／または再現することが難しく、異なる性質（例えば、薬物動態的性質）を示す可能性があり、差異は予測不可能であり得るという理解を包含する。本発明は、例えば、治療への適用および／または診断への適用において、単一種のクロロトキシンコンジュゲートのみを含有する調製物が、コンジュゲートの混合物を含有する調製物よりも望ましいという理解を包含する。
本発明は、この特定された問題の原因に対する解も提供する。例えば、本発明は、単一種のコンジュゲートを生成することができる低リジンクロロトキシンポリペプチドを提供する。ある特定の実施形態では、低リジンクロロトキシンポリペプチドが提供される。種々の態様において、コンジュゲートするための部位として利用可能なリジンを１つ以下有するクロロトキシンポリペプチドを含むクロロトキシンコンジュゲート（「モノリジンクロロトキシンコンジュゲート」）、そのようなコンジュゲートを含む医薬組成物、およびそのようなコンジュゲートの使用方法が提供される。一部の実施形態では、リジン残基を有さない低リジンクロロトキシンポリペプチドが提供される。
ある特定の実施形態では、本発明は、低リジンクロロトキシンポリペプチドおよびそのコンジュゲートの作製方法および使用方法を提供する。一部の実施形態では、提供される低リジンクロロトキシンポリペプチドおよび／またはそのコンジュゲートは、医薬（例えば、種々の治療的状況および／または診断的状況において）において使用することができる。
特定の実施形態では、例えば以下が提供される：
（項目１）
コンジュゲートするための部位として利用可能なリジンを１つ以下有するクロロトキシンポリペプチド。
（項目２）
配列番号１に対して少なくとも６５％の全体的な配列同一性を有し、両端値を含め、２４アミノ酸から４０アミノ酸の間の長さを有するという点で、配列番号１のアミノ酸配列に対応するアミノ酸配列を有する、項目１に記載のクロロトキシンポリペプチド。
（項目３）
クロロトキシンにおいてリジンが存在する位置に対応する位置にリジンを含む、項目１に記載のクロロトキシンポリペプチド。
（項目４）
前記リジンが、配列番号１の１５位、配列番号１の２３位、および配列番号１の２７位からなる群から選択される位置に対応する位置にある、項目３に記載のクロロトキシンポリペプチド。
（項目５）
前記リジンが、配列番号１の２７位に対応する位置にある、項目３に記載のクロロトキシンポリペプチド。
（項目６）
配列番号１の１５位、２３位および２７位に対応するアミノ酸残基の少なくとも１つがリジンではない、項目１に記載のクロロトキシンポリペプチド。
（項目７）
配列番号１の１５位、２３位および２７位に対応する少なくとも１つのアミノ酸残基がアラニンである、項目６に記載のクロロトキシンポリペプチド。
（項目８）
配列番号１の１５位、２３位および２７位に対応する少なくとも１つのアミノ酸残基がアルギニンである、項目６に記載のクロロトキシンポリペプチド。
（項目９）
配列番号１の１５位、２３位または２７位に対応する少なくとも１つのアミノ酸を欠く、項目１に記載のクロロトキシンポリペプチド。
（項目１０）
リジン残基を有さない、項目１に記載のクロロトキシンポリペプチド。
（項目１１）
少なくとも１つの治療的部分を伴う少なくとも１つのクロロトキシンポリペプチドを含むコンジュゲートであって、前記クロロトキシンポリペプチドが、リジンを１つ以下有するクロロトキシンポリペプチドを含み、前記治療的部分が、前記クロロトキシンポリペプチドと、前記クロロトキシンポリペプチドの単一の前記リジンまたはＮ末端を介して共有結合している、コンジュゲート。
（項目１２）
前記クロロトキシンポリペプチドおよび前記治療的部分が、直接的に共有結合している、項目１１に記載のコンジュゲート。
（項目１３）
前記クロロトキシンポリペプチドおよび前記治療的部分が、リンカーを通じて共有結合している、項目１１に記載のコンジュゲート。
（項目１４）
前記治療的部分が抗癌剤を含む、項目１１に記載のコンジュゲート。
（項目１５）
前記抗癌剤が、癌細胞に対する選択性／特異性が乏しい抗癌剤；癌細胞による取り込みが乏しい抗癌剤；癌細胞における保持が乏しい抗癌剤；難水溶性を示す抗癌剤；癌細胞において時期尚早な不活性化を受ける抗癌剤；癌細胞において活性化不全が生じる抗癌剤；大規模な細胞性分解を受ける抗癌剤；および薬物耐性を伴う抗癌剤からなる群のメンバーである、項目１４に記載のコンジュゲート。
（項目１６）
前記抗癌剤が難水溶性を示す、項目１５に記載のコンジュゲート。
（項目１７）
前記抗癌剤がタキサンである、項目１６に記載のコンジュゲート。
（項目１８）
前記タキサンが、パクリタキセル、ドセタキセル、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される、項目１７に記載のコンジュゲート。
（項目１９）
前記治療的部分が、放射性同位元素、酵素、プロドラッグ活性化酵素、放射線増感剤、干渉ＲＮＡ、スーパー抗原、抗血管新生薬、アルキル化剤、プリンアンタゴニスト、ピリミジンアンタゴニスト、植物アルカロイド、インターカレーティング抗生物質、アロマターゼ阻害剤、代謝拮抗薬、有糸分裂阻害剤、増殖因子阻害剤、細胞周期阻害剤、酵素、トポイソメラーゼ阻害剤、生物学的反応修飾物質、抗ホルモン薬および抗アンドロゲン薬からなる群のメンバーである、項目１４に記載のコンジュゲート。
（項目２０）
前記クロロトキシンポリペプチドが、ネイティブなクロロトキシンにおいてリジンが存在する位置に対応する位置にリジンを含む、項目１１に記載のコンジュゲート。
（項目２１）
前記クロロトキシンポリペプチドが、配列番号１の１５位、配列番号１の２３位、および配列番号１の２７位からなる群から選択される位置に対応する位置にリジンを含む、項目２０に記載のコンジュゲート。
（項目２２）
前記クロロトキシンポリペプチドが、配列番号１の２７位に対応する位置にリジンを含む、項目２１に記載のコンジュゲート。
（項目２３）
配列番号１の１５位、２３位および２７位に対応する、前記クロロトキシンポリペプチドのアミノ酸の少なくとも１つがリジンではない、項目１１に記載のコンジュゲート。
（項目２４）
配列番号１の１５位、２３位または２７位に対応する、前記クロロトキシンポリペプチドの前記少なくとも１つのアミノ酸がアラニンである、項目２３に記載のコンジュゲート。
（項目２５）
配列番号１の１５位、２３位または２７位に対応する、前記クロロトキシンポリペプチドの前記少なくとも１つのアミノ酸がアルギニンである、項目２３に記載のコンジュゲート。
（項目２６）
前記クロロトキシンポリペプチドが、配列番号１の１５位、２３位または２７位に対応する少なくとも１つのアミノ酸を欠く、項目１１に記載のコンジュゲート。
（項目２７）
前記クロロトキシンポリペプチドが、ポリマーを含む部分に共有結合的に付着している、項目１１に記載のコンジュゲート。
（項目２８）
前記ポリマーがポリエチレングリコールである、項目２７に記載のコンジュゲート。
（項目２９）
前記ポリエチレングリコールが、前記クロロトキシンポリペプチドのアミノ末端を介して付着している、項目２８に記載のコンジュゲート。
（項目３０）
有効量の、項目１１から２９までのいずれか一項に記載の少なくとも１つのコンジュ
ゲートまたは生理的に許容できるその塩、および少なくとも１つの薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物。
（項目３１）
項目１１に記載のコンジュゲートを含む組成物を、腫瘍を有するか、または腫瘍を有する疑いがある個体に、前記コンジュゲートが前記腫瘍に特異的に結合するように投与するステップを含む、方法。
（項目３２）
前記腫瘍が神経外胚葉性腫瘍である、項目３１に記載の方法。
（項目３３）
前記神経外胚葉性腫瘍が神経膠腫である、項目３２に記載の方法。
（項目３４）
前記神経膠腫が、多形神経膠芽腫（ＷＨＯグレードＩＶ）、未分化星状細胞腫（ＷＨＯグレードＩＩＩ）、低悪性度の神経膠腫（ＷＨＯグレードＩＩ）、毛様細胞性星状細胞腫（ＷＨＯグレードＩ）、乏突起神経膠腫、神経節腫、髄膜腫、および上衣腫からなる群から選択される、項目３３に記載の方法。
（項目３５）
前記神経外胚葉性腫瘍が、髄芽腫、神経芽細胞腫、褐色細胞腫、黒色腫、末梢性未分化神経外胚葉性腫瘍、小細胞肺癌、ユーイング肉腫、および脳における転移性腫瘍からなる群から選択される、項目３２に記載の方法。
（項目３６）
前記腫瘍が、前立腺癌および乳癌からなる群から選択される、項目３１に記載の方法。
（項目３７）
前記腫瘍が皮膚黒色腫または眼内黒色腫である、項目３１に記載の方法。
（項目３８）
前記腫瘍が転移性腫瘍である、項目３１に記載の方法。
（項目３９）
前記腫瘍が転移性黒色腫である、項目３８に記載の方法。
（項目４０）
前記腫瘍が非小細胞肺癌である、項目３１に記載の方法。
（項目４１）
前記腫瘍が結腸癌または結腸直腸癌である、項目３１に記載の方法。
（項目４２）
前記腫瘍が膵癌である、項目３１に記載の方法。
（項目４３）
項目１１に記載のクロロトキシンコンジュゲートを含む組成物を、異常な血管新生を特徴とする疾患または状態を有するか、または有する疑いがある個体に、前記クロロトキシンコンジュゲートが血管新生の程度を低下させるように投与するステップを含む、方法。
（項目４４）
前記クロロトキシンコンジュゲートにより、新脈管構造の形成が妨げられる、項目４３に記載の方法。
（項目４５）
前記クロロトキシンコンジュゲートにより、現存する新脈管構造の退行が引き起こされる、項目４３に記載の方法。
（項目４６）
前記疾患または状態が黄斑変性症である、項目４３に記載の方法。
（項目４７）
前記疾患または状態が炎症性疾患である、項目４３に記載の方法。
（項目４８）
前記疾患または状態が関節リウマチである、項目４７に記載の方法。
定義
本明細書で使用される場合、「約」および「およそ」という用語は、数に関しては、本明細書では、別段の指定のない限り、または文脈から明らかでない限り、その数のいずれかの方向（それよりも大きい方向、または小さい方向）に２０％、１０％、５％、または１％の範囲内に入る数を含めるために使用される（そのような数が可能性のある値の１００％を超える場合を除く）。
本明細書で使用される場合、「特有の配列エレメント」または「配列エレメント」という用語は、別のポリペプチドに対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％の同一性を示す連続したアミノ酸、一般には、少なくとも５アミノ酸、例えば、少なくとも５〜５０アミノ酸、５〜２５アミノ酸、５〜１５アミノ酸または５〜１０アミノ酸のひと続きを指す。一部の実施形態では、特有の配列エレメントは、ポリペプチドの機能に関与する、またはポリペプチドに機能を付与する。一部の実施形態では、低リジンクロロトキシンポリペプチドは、特有の配列エレメントを含む。いくつかのそのような実施形態では、低リジンクロロトキシンポリペプチドは、ＴＴＤＨＱＭＡＲ（配列番号２９）である特有の配列エレメントを含む。
「化学療法薬」、「抗癌剤」および「抗癌薬」という用語は、本明細書では互換的に使用される。これらの用語は、癌または癌による状態を治療するために使用される薬物療法を指す。抗癌薬は、慣習的に、以下の群のうちの１つに分類される：放射性同位元素（例えば、ヨウ素１３１、ルテチウム１７７、レニウム１８８、イットリウム９０）、毒素（例えば、ジフテリア、シュードモナス、リシン、ゲロニン）、酵素、プロドラッグを活性化するための酵素、放射線感作薬、干渉ＲＮＡ、スーパー抗原、抗血管新生薬、アルキル化剤、プリンアンタゴニスト、ピリミジンアンタゴニスト、植物アルカロイド、インターカレーティング抗生物質（ｉｎｔｅｒｃａｌａｔｉｎｇ ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ）、アロマターゼ阻害剤、代謝拮抗薬、有糸分裂阻害剤、増殖因子阻害剤、細胞周期阻害剤、酵素、トポイソメラーゼ阻害剤、生物学的反応修飾物質（ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｍｏｄｉｆｉｅｒ）、抗ホルモン薬および抗アンドロゲン薬。そのような抗癌剤の例としては、これらに限定されないが、ＢＣＮＵ、シスプラチン、ゲムシタビン、ヒドロキシウレア、パクリタキセル、テモゾロミド、トポテカン、フルオロウラシル、ビンクリスチン、ビンブラスチン、プロカルバジン、デカルバジン、アルトレタミン、メトトレキサート、メルカプトプリン、チオグアニン、リン酸フルダラビン、クラドリビン、ペントスタチン、シタラビン、アザシチジン、エトポシド、テニポシド、イリノテカン、ドセタキセル、ドキソルビシン、ダウノルビシン、ダクチノマイシン、イダルビシン、プリカマイシン、マイトマイシン、ブレオマイシン（ｂｌｅｏｍｙｓｉｎ）、タモキシフェン、フルタミド、ロイプロリド、ゴセレリン、アミノグルチミド（ａｍｉｎｏｇｌｕｔｈｉｍｉｄｅ）、アナストロゾール、アムサクリン、アスパラギナーゼ、ミトキサントロン、ミトタンおよびアミホスチンが挙げられる。
本明細書で使用される場合、「クロロトキシン」という用語は、アミノ酸配列（配列番号１）を有する長さが３６アミノ酸のペプチドを指す。「クロロトキシン」という用語は、本明細書で使用される場合、サソリＬｅｉｕｒｉｕｓ ｑｕｉｎｑｕｅｓｔｒｉａｔｕｓまたはクロロトキシンを見いだすことができる他の生物体の毒液から単離されたクロロトキシン、ならびに組換えクロロトキシンおよび合成クロロトキシンを包含する。
本明細書で使用される場合、「クロロトキシンコンジュゲート」という句は、１つまたは複数の対象の実体または部分と共有結合しているクロロトキシンポリペプチドを指す。一部の実施形態では、対象の実体は、ポリペプチドではなく、かつ／またはポリペプチド鎖内に連結していない。一部の実施形態では、対象の実体は、アミノ酸の側鎖に連結している。一部の実施形態では、対象の実体は、リジン残基を介してクロロトキシンポリペプチドに連結している。
本明細書で使用される場合、「クロロトキシンポリペプチド」という句は、クロロトキシン（配列番号１）に対して少なくとも４５％の全体的な配列同一性を示し、両端の値を含め、２４アミノ酸から４０アミノ酸の間の長さを有するポリペプチドを指す。一部の実施形態では、クロロトキシンポリペプチドは、配列番号１に対して、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の全体的な配列同一性を有する。一部の実施形態では、クロロトキシンポリペプチドは、配列番号１に対して少なくとも６５％の全体的な配列同一性を有する。一部の実施形態では、クロロトキシンポリペプチドは、配列番号１に対して少なくとも９１％の全体的な配列同一性を有する。一部の実施形態では、クロロトキシンポリペプチドは、配列番号１に対して少なくとも９４％の全体的な配列同一性を有する。一部の実施形態では、クロロトキシンポリペプチドは、配列番号１に対して少なくとも９７％の全体的な配列同一性を有する。一部の実施形態では、クロロトキシンポリペプチドは、さらに配列番号１と少なくとも１つの特有の配列エレメントを共有する。一部の実施形態では、特有の配列エレメントはＴＴＤＨＱＭＡＲ（配列番号２９）である。一部の実施形態では、クロロトキシンポリペプチドは、両端値を含め、２４アミノ酸から４０アミノ酸の間の長さを有する。一部の実施形態では、「クロロトキシンポリペプチド」は、一般には、Ｃ末端および／もしくはＮ末端における、ならびに／または配列内に挿入された別個のブロックアミノ酸の１つまたは複数の追加的なひと続きを含む。一般には、そのような追加的なひと続きは、約３〜約１０００アミノ酸長である。一部の実施形態では、追加的なひと続きは、約３〜１００アミノ酸長、３〜９０アミノ酸長、３〜８０アミノ酸長、３〜７０アミノ酸長、３〜６０アミノ酸長、３〜５０アミノ酸長、３〜４０アミノ酸長、３〜３０アミノ酸長または３〜２０アミノ酸長である。一部の実施形態では、追加的なひと続きは、約２０アミノ酸長または２０アミノ酸長未満、約１５アミノ酸長または１５アミノ酸長未満、または約１０アミノ酸長または１０アミノ酸長未満である。一部の実施形態では、追加的なひと続きは、１つまたは複数の公知のタグを含む。一部の実施形態では、追加的なひと続きは、細胞傷害性薬剤を含む。
本明細書で使用される場合、「併用療法」という句は、２種以上の活性薬剤を同じ被験体に、被験体が両方の作用剤に同時に曝露されるように投与することを指す。当業者は、任意の個々の作用剤を、単回投与で、または、多数回の投与、例えば、所定の間隔にわたって間隔を空けて、または所定のパターンで投与することが望ましい場合があることを理解されよう。併用療法は、投薬を受ける被験体が両方の作用剤に同時に曝露される限りは、２種以上の活性薬剤の個々の投薬を同時に施す必要はない。併用療法では、２種以上の活性薬剤を同じ経路で投与する必要もない。一部の実施形態では、併用療法において投与される少なくとも２種の活性薬剤の一方または両方を、単独で投与した場合のその用量または頻度と比較して低い用量および／または頻度で投与する。
「対応する」という句は、本明細書においてアミノ酸配列またはヌクレオチド配列の位置または部位について記載するために使用される場合、当技術分野で理解されている通り使用される。当技術分野で周知の通り、２つ以上のアミノ酸配列またはヌクレオチド配列は、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＣｌｕｓｔａｌＸ、Ｓｅｑｕｅｎｃｈｅｒなどのプログラムを含めた標準のバイオインフォマティクスツールを用いてアラインメントすることができる。たとえ２つ以上の配列が正確に一致せず、かつ／または同じ長さを有さなくても、なお配列のアラインメントを行い、望ましい場合、「コンセンサス」配列を生成することができる。実際に、アラインメントのために使用されるプログラムおよびアルゴリズムは、一般には、定義できるレベルの挿入、欠失、逆位、多型、点突然変異などを含めた差異を許容する。そのようなアラインメントは、一方のヌクレオチド配列のどの位置が、他方のヌクレオチド配列のどの位置に対応するかを決定する助けになり得る。
本明細書で使用される場合、「投薬レジメン」という句は、期間を隔てて個別に投与される単位用量（一般には、２つ以上の）のセットを指す。特定の医薬品または組成物に対して推奨される用量のセット（すなわち、量、タイミング、投与経路など）がその投薬レジメンを構成する。
本明細書で使用される場合、「有効量」および「有効用量」という用語は、その意図された目的（複数可）、すなわち、許容できる損益比で、組織または被験体における所望の生物学的反応または治療効果のある反応を果たすために十分な、化合物または組成物の任意の量または用量を指す。例えば、本発明のある特定の実施形態では、目的（複数可）は、：血管新生を阻害すること、新脈管構造（ｎｅｏｖａｓｃｕｌａｔｕｒｅ）の退縮を引き起こすこと、別の生理活性分子の活性に干渉すること、腫瘍の退縮を引き起こすこと、転移を阻害すること、転移の程度を低下させることなどであり得る。関連する意図された目的は、客観的（すなわち、いくつかの試験またはマーカーによって測定可能な）または主観的（すなわち、被験体により効果の指標または感じが示される）であり得る。一般に、治療有効量を、多数の単位用量を含み得る投薬レジメンで投与する。任意の特定の医薬品について、治療有効量（および／または有効な投薬レジメン内の適切な単位用量）は、例えば、投与経路に応じて、他の医薬品との組み合わせに応じて変動し得る。一部の実施形態では、任意の特定の患者に対する特異的な治療有効量（および／または単位用量）は、治療されている障害および障害の重症度；使用する特異的な医薬品の活性；使用する特定の組成物；患者の年齢、体重、全体的な健康、性別および食事；投与時間、投与経路、および／または使用する特異的な医薬品が排出される速度または代謝される速度；治療の持続時間；および医学の分野で周知の同様の因子を含めた種々の因子に左右され得る。
本明細書で使用される場合、「フルオロフォア」、「蛍光部分」、「蛍光標識」、「蛍光色素」および「蛍光標識用部分」という用語は、本明細書では互換的に使用される。これらの用語は、溶液中で、適切な波長の光で励起されると、光を放出し返す分子を指す。多種多様な構造および特性の多数の蛍光色素が、本発明の実施において使用するために適している。同様に、核酸を蛍光標識するための方法および材料が公知である（例えば、Ｒ．Ｐ．Ｈａｕｇｌａｎｄ、「Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ：Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ Ｐｒｏｂｅｓ ａｎｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ １９９２〜１９９４年」、第５版、ａ １９９４年、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．を参照されたい）。フルオロフォアの選択では、多くの場合、蛍光分子は、高効率（すなわち、それぞれ高モル吸収係数および高蛍光量子収率で）光を吸収し、蛍光を放出し、光安定性である（すなわち、分析を行うために必要な時間内に光励起で著しい分解を受けない）ことが望ましい。
本明細書で使用される場合、「阻害する」という用語は、何かが起こるのを妨げること、何かが起こることの発生を遅らせること、および／または何かが起こる程度または可能性を低下させることを意味する。したがって、「血管新生を阻害すること」および「新脈管構造の形成を阻害すること」は、血管新生が起こる可能性を妨げること、遅らせること、および／または低下させること、ならびに新生血管の数、成長速度、サイズなどを低下させることを包含するものとする。
「標識した」および「検出可能な作用剤または部分で標識した」という用語は、本明細書では、実体（例えば、低リジンクロロトキシンポリペプチドまたはクロロトキシンコンジュゲート）を、例えば、別の実体（例えば、新生物腫瘍組織）に結合させた後に可視化することができることを明示するために互換的に使用される。検出可能な作用剤または部分は、測定することができ、その強度が結合した実体の量に関連する（例えば、比例する）シグナルを生成するように選択することができる。タンパク質およびペプチドを標識し、かつ／または検出するための多種多様なシステムが当技術分野で公知である。標識タンパク質および標識ペプチドは分光学的手段、光化学的手段、生化学的手段、免疫化学的手段、電気的手段、光学的手段、化学的手段または他の手段によって検出可能な標識に組み入れること、またはそれとコンジュゲートすることによって調製することができる。標識または標識用部分は、直接検出可能であってよい（すなわち、検出可能にするためのさらなる反応または操作はいかなるものも必要としない。例えば、フルオロフォアは、直接検出可能である）または、間接的に検出可能であってよい（すなわち、検出可能な別の実体と反応することによって、またはそれに結合することによって検出可能になる。例えばハプテンは、フルオロフォアなどのレポーターを含む適切な抗体と反応させた後に免疫染色することによって検出可能である）。適切な検出可能な作用剤としては、これらに限定されないが、放射性核種、フルオロフォア、化学発光剤、微小粒子、酵素、比色標識、磁気標識、ハプテン、分子ビーコン、アプタマービーコンなどが挙げられる。
本明細書で使用される場合、「黄斑変性症」という用語は、網膜が損傷することによって視野の中央（斑）の視力喪失が生じる医学的状態を指す。黄斑変性症にはいくつかの形態が存在することが公知であり、指定がなければ、「黄斑変性症」という用語は、全形態を含む。「滲出型黄斑変性症」（新生血管型または滲出型（ｅｘｕｄａｔｉｖｅ ｆｏｒｍ）としても公知である）とは、網膜の後ろの脈絡膜からの血管の成長を伴う黄斑変性症を指す。滲出型黄斑変性症では、時には網膜が剥離する場合がある。「萎縮型黄斑変性症（ｄｒｙ ｍａｃｕｌａｒ ｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ）」（非滲出型（ｎｏｎ−ｅｘｕｄａｔｉｖｅ ｆｏｒｍ）としても公知である）では、ドルーゼンと称される細胞の壊死組織片が網膜と脈絡膜の間に蓄積するが、血管形成は起こらない。「加齢黄斑変性」（ＡＲＭＤ）とは、黄斑変性症の最も一般的な形態を指し、一般には、高齢期に始まり、斑内に特徴的な黄色の沈着物を伴う。ＡＲＭＤは、黄斑変性症の滲出型（ｗｅｔ ｆｏｒｍ）または萎縮型（ｄｒｙ ｆｏｒｍ）のいずれでも起こり得る。
本明細書で使用される場合、「転移（ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ）」（時には「ｍｅｔｓ」と省略される；複数形「転移」）という用語は、ある器官または組織から別の場所に腫瘍細胞が拡散することを指す。この用語は、転移の結果として新しい場所に形成される腫瘍組織も指す。「転移性癌」は、その元の、または最初の場所から拡散する癌であり、「二次癌」または「二次腫瘍」とも称することができる。一般に、転移性腫瘍の名称はそれらが由来する原発腫瘍の組織に由来する。したがって、肺に転移した乳癌は、いくつかの癌細胞が肺内に位置するにもかかわらず、「転移性乳癌」と称することができる。
本明細書で使用される場合、「モノリジンクロロトキシンポリペプチド」という句は、コンジュゲートするための部位として利用可能なリジン残基を１つのみ有するクロロトキシンポリペプチドを指す。一部の実施形態では、モノリジンクロロトキシンポリペプチドは、リジン残基を１つのみ有する。一部の実施形態では、モノリジンクロロトキシンポリペプチドは、２つ以上のリジン残基を有するが、リジン残基の１つのみがコンジュゲートするための部位として利用可能である。そのような一部の実施形態では、いくつかのリジン上の１つまたは複数のブロック基により、それらをコンジュゲートするための部位として利用できないようにする。
本明細書で使用される場合、「新脈管構造」という用語は、まだ完全に成熟していない、すなわち、細胞のタイトジャンクションを伴う完全に形成された内皮の内層または平滑筋細胞を囲む完全な層を有さない新しく形成された血管を指す。本明細書で使用される場合、「新生血管」という用語は、新脈管構造内の血管を指すために使用される。
「医薬品」、「治療剤」および「薬物」という用語は、本明細書では互換的に使用される。これらの用語は、疾患、障害、または臨床的状態の治療、阻害、および／または検出において有効な物質、分子、化合物、作用剤、因子または組成物を指す。
「医薬組成物」は、本明細書では、有効量の少なくとも１種の活性成分（例えば、標識されていてもよく、されていなくてもよい低リジンクロロトキシンポリペプチドまたはクロロトキシンコンジュゲート）、および少なくとも１種の薬学的に許容される担体を含む組成物と定義される。
本明細書で使用される場合、「予防すること」という用語は、プロセス（例えば、血管新生、転移、癌の進行など）に対する作用剤の作用を指すために使用される場合、そのプロセスに関連する１つまたは複数の症状または特質が発症する前に作用剤（例えば、クロロトキシンコンジュゲートなどの治療剤）を投与すると、そのようなプロセスの程度を低下させることおよび／またはその開始を遅らせることを意味する。
本明細書で使用される場合、「原発腫瘍」という用語は、腫瘍が最初に生じた元の部位にある腫瘍、すなわち、そこに拡散しているのではない腫瘍を指す。
「プロドラッグ」という用語は、ｉｎ ｖｉｖｏ投与された後、代謝されて、またはその他の方法で変換されて、その化合物の生物学的、薬剤的、または治療的に活性な形態になる化合物を指す。プロドラッグは、副作用または毒性を遮蔽するため、化合物の風味を改善するため、および／または化合物の他の特性または性質を変化させるために、化合物の代謝安定性または輸送特性を変化させるように設計することができる。ｉｎ ｖｉｖｏにおける薬力学的プロセスおよび薬物代謝の知見によって薬学的に活性な化合物が同定されたら、医薬分野の当業者は、一般には、化合物のプロドラッグを設計することができる（Ｎｏｇｒａｄｙ、「Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ａ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ａｐｐｒｏａｃｈ」、１９８５年、Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ：Ｎ．Ｙ．、３８８〜３９２頁）。適切なプロドラッグを選択し、調製するための手順も当技術分野で公知である。一部の実施形態では、プロドラッグは、その活性型への変換（ｉｎ ｖｉｖｏ投与後の）に、酵素の触媒作用を必要とする化合物である。
「タンパク質」、「ポリペプチド」および「ペプチド」という用語は、本明細書では互換的に使用され、中性の（非荷電）形態または塩としての、グリコシル化、側鎖の酸化またはリン酸化によって修飾されていない、または修飾された、種々の長さのアミノ酸配列を指す。ある特定の実施形態では、アミノ酸配列は全長のネイティブなタンパク質である。他の実施形態では、アミノ酸配列は、全長のタンパク質のより小さな断片である。さらに他の実施形態では、アミノ酸配列は、グリコシル単位、脂質、またはリン酸などの無機イオンなどのアミノ酸の側鎖に付着した追加的な置換基、ならびにスルフヒドリル基の酸化などの鎖の化学変換に関する修飾によって修飾されている。したがって、「タンパク質」という用語（または それと等価の用語）は、その特定の性質を変化させない修飾に供される全長のネイティブなタンパク質のアミノ酸配列を含むものとする。特に、「タンパク質」という用語は、タンパク質アイソフォーム、すなわち、同じ遺伝子によってコードされるが、それらのｐＩまたはＭＷ、またはその両方が異なる変異体を包含する。そのようなアイソフォームは、それらのアミノ酸配列が異なり得る（例えば、代替のスライシングまたはタンパク質限定加水分解の結果として）、あるいは、示差的な翻訳後修飾（例えば、グリコシル化、アシル化またはリン酸化）から生じ得る。
本明細書で使用される場合、「低リジンクロロトキシンポリペプチド」という句は、リジン残基がクロロトキシン（配列番号１）よりも少なく、かつ／または、コンジュゲートするための部位として利用可能なリジン残基がクロロトキシンよりも少ないクロロトキシンポリペプチドを指す。ある特定の実施形態では、低リジンクロロトキシンポリペプチドは、リジン残基を１つ以下有する。一部の実施形態では、低リジンクロロトキシンポリペプチドは、リジン残基を１つのみ有する。ある特定の実施形態では、低リジンクロロトキシンポリペプチドは、コンジュゲートするための部位として利用可能なリジン残基を１つ以下有する。一部の実施形態では、低リジンクロロトキシンポリペプチドのリジン残基のうち１つを除いて全てがコンジュゲートするための部位として利用不可能になるように修飾されている。一部の実施形態では、低リジンクロロトキシンポリペプチドのリジン残基の全てが、コンジュゲートするための部位として利用不可能になるように修飾されている。一部の実施形態では、低リジンクロロトキシンポリペプチドは、コンジュゲートするために利用可能な単一の部位を含有する。
「退行する」という用語は、本明細書において血管および／または脈管構造（新脈管構造および／または新生血管を含む）を指すために使用される場合、後退、縮小などを意味するように使用される。
「被験体」および「個体」という用語は、本明細書では互換的に使用される。これらの用語は、疾患または障害（例えば、癌、黄斑変性症など）を患っている可能性がある、またはそれにかかりやすいが、疾患または障害を有していても有していなくてもよいヒトまたは別の哺乳動物（例えば、マウス、ラット、ウサギ、イヌ、ネコ、ウシ、ブタ、ヒツジ、ウマまたは霊長類）を指す。多くの実施形態では、被験体は、ヒトである。多くの実施形態では、被験体は、患者である。別段の指定のない限り、「個体」および「被験体」という用語は、特定の年齢を意味せず、したがって、成体、小児、および新生児を包含する。
本明細書で使用される場合、「かかりやすい」という用語は、何か、すなわち、一般的な集団において観察される疾患、障害、または状態（例えば、癌、転移性癌、黄斑変性症、関節リウマチなど）になる危険性が増していること、および／またはその傾向を有すること（一般には、遺伝的素因、環境因子、個人の病歴、またはそれらの組み合わせに基づいて）を意味する。この用語は、状態に「かかりやすい」個体が、その状態であると決して診断されない可能性があることを考慮に入れる。
本明細書で使用される場合、「全身投与」という用語は、作用剤を、その作用剤が、有意な量で体内の広範囲に分布し、血液中で生物学的効果、例えば、その所望の効果を有し、かつ／または、脈管系を介してその所望の作用部位に到達するように投与することを指す。典型的な全身投与経路としては、（１）作用剤を直接脈管系に導入することによる投与、または（２）経口投与、肺への投与、または筋肉内投与が挙げられ、前記作用剤は、吸着され脈管系に入り、血液によって１つまたは複数の所望の作用部位に運ばれる。
本明細書で使用される場合、「治療すること」という用語は、特定の疾患、障害、および／または状態の１つまたは複数の症状または特徴を、部分的にまたは完全に緩和すること、回復させること、軽減すること、その開始を遅らせること、その進行を阻害すること、その重症度を低下させること、および／またはその発生率を低下させることを指す。例えば、癌を「治療すること」とは、腫瘍細胞の生存、成長、および／または拡散を阻害すること；転移および／または再発が発生する可能性を予防すること、遅らせること、および／または低下させること；および／または転移の数、成長速度、サイズなどを低下させることを指し得る。治療は、疾患、障害、および／もしくは状態の徴候を示していない被験体、ならびに／または、疾患、障害、および／または状態の初期の徴候のみを示す被験体に、その疾患、障害、および／または状態に関連する病態が発症する危険性を低減するために施すことができる。一部の実施形態では、治療は、被験体に医薬組成物を送達することを含む。
本明細書で使用される場合、「単位用量」という句は、所定量の活性成分（例えば、治療剤）を含む医薬組成物の別個の量を指す。活性成分の量は、一般に、被験体に投与されることになる活性成分の投与量、および／またはそのような投与量の都合のよい一部分、例えば、そのような投与量の２分の１または３分の１などと等しい。
Ｉ．低リジンクロロトキシンポリペプチド
表１に示され、配列番号１に列挙されているように、クロロトキシンは、配列番号１の１５位、２３位および２７位に３つのリジン残基を有する３６アミノ酸のペプチドである。ある特定の実施形態では、本発明は、リジン残基の数を減らしたクロロトキシンポリペプチド（「低リジンクロロトキシンポリペプチド」）を提供する。ある特定の実施形態では、低リジンクロロトキシンポリペプチドは、配列番号１に対して少なくとも４５％の全体的な配列同一性を有し、両端値を含め、２４アミノ酸残基から４０アミノ酸残基の間の長さを有するという点で、配列番号１のアミノ酸配列に対応するアミノ酸配列を有する。一部の実施形態では、低リジンクロロトキシンポリペプチドは、配列番号１に対して、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の全体的な配列同一性を有する。一部の実施形態では、低リジンクロロトキシンポリペプチドは、配列番号１に対して少なくとも６５％の全体的な配列同一性を有する。一部の実施形態では、クロロトキシンポリペプチドは、配列番号１に対して少なくとも９１％の全体的な配列同一性を有する。例えば、低リジンクロロトキシンポリペプチドは、クロロトキシンと、３６アミノ酸残基のうち３３アミノ酸残基でアミノ酸配列が同一であってよい（すなわち、約９１．７％の配列同一性）。一部の実施形態では、クロロトキシンポリペプチドは、配列番号１に対して少なくとも９４％の全体的な配列同一性を有する。例えば、低リジンクロロトキシンポリペプチドは、クロロトキシンと、３６アミノ酸残基のうち３４アミノ酸残基でアミノ酸配列が同一であってよい（すなわち、約９４．４％の配列同一性）。一部の実施形態では、低リジンクロロトキシンポリペプチドは、配列番号１に対して少なくとも９７％の全体的な配列同一性を有する。例えば、低リジンクロロトキシンポリペプチドは、クロロトキシンと、３６アミノ酸残基のうち３５アミノ酸残基でアミノ酸配列が同一であってよい（すなわち、約９７．２％の配列同一性）。一部の実施形態では、低リジンクロロトキシンポリペプチドは、その配列が、クロロトキシンの配列に対応する、またはクロロトキシンの配列に対して少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の全体的な配列同一性を示す３３アミノ酸、３４アミノ酸、３５アミノ酸、３６アミノ酸、３７アミノ酸、または３８アミノ酸のひと続きである、および／または、それを含有する。
表１は、クロロトキシンの配列および例示的な低リジンクロロトキシンポリペプチドの配列を示す。表１は、限定的なものではなく、本発明によって提供される特定の例示的な低リジンクロロトキシンポリペプチドを例示するために用いられる。
ある特定の実施形態では、低リジンクロロトキシンポリペプチドは、コンジュゲートするための部位として利用可能なリジンを１つ以下有する。いくつかのそのような実施形態では、１つのリジンが利用可能であり、それは、クロロトキシンにおいてリジンが存在する位置（すなわち、配列番号１の１５位、２３位または２７位）に対応するクロロトキシンポリペプチドの位置にある。一部の実施形態では、利用可能な単一のリジンは、配列番号１の１５位にある。一部の実施形態では、利用可能な単一のリジンは、配列番号１の２３位にある。一部の実施形態では、利用可能な単一のリジンは、配列番号１の２７位にある。一部の実施形態では、単一のリジンは、本発明の低リジンクロロトキシンポリペプチドの、クロロトキシンのリジン残基を含有しない部位に対応する位置に存在する（すなわち、配列番号１の１５位、２３位または２７位のいずれに対応する位置にも存在しない）。
ある特定の実施形態では、低リジンクロロトキシンポリペプチドは、配列番号１の１５位、２３位または２７位に対応する少なくとも１つのアミノ酸残基を欠く。
ある特定の実施形態では、低リジンクロロトキシンポリペプチドは、リジン残基を完全に欠く（例えば、配列番号２、５、６、２４、２５および２６を参照されたい）。一部の実施形態では、通常クロロトキシンにおいてリジン残基が見いだされるところのアミノ酸が欠けている。一部の実施形態では、通常クロロトキシンにおいて見いだされる１つまたは複数のリジン残基が、別のアミノ酸残基および／またはアミノ酸誘導体で置き換えられている。言い換えれば、配列番号１の１５位、２３位または２７位に対応するポリペプチド（ｐｏｌｙｅｐｔｉｄｅ）の少なくとも１つのアミノ酸残基は、リジンではない。一般にポリペプチドを構成する他の天然に存在する１９種のアミノ酸（アラニン、アルギニン、アスパラギン酸、アスパラギン、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、チロシン、トリプトファン、およびバリン）に加えて、種々の置換を用いることができる。置換の非限定的な例としては、他の天然に存在するアミノ酸、Ｄ−アミノ酸などの天然に存在しないアミノ酸、およびアミノ酸誘導体が挙げられる。他の天然に存在するアミノ酸の非限定的な例としては、ベータアラニン、カルニチン、シトルリン、シスチン、ガンマ−アミノ酪酸、ヒドロキシプロリン、オルニチン、およびタウリンが挙げられる。（天然に存在するアミノ酸およびアミノ酸誘導体のさらなる例については、例えば、その内容全体が参照により本明細書に組み込まれる、ＷａｇｎｅｒおよびＭｕｓｓｏ（１９８３年）、「Ｎｅｗ Ｎａｔｕｒａｌｌｙ Ｏｃｃｕｒｉｎｇ Ａｍｉｎｏ Ａｃｉｄｓ」、Ａｇｎｅｗ． Ｃｈｅｍ． Ｉｎｔ． Ｅｄ． Ｅｎｇｌ．、２２巻：８１６〜８２８頁を参照されたい）。一部の実施形態では、１つまたは複数のリジン残基は、アルギニンおよび／またはアラニンで置き換えられている。
低リジンクロロトキシンポリペプチドがリジン残基を完全に欠く一部の実施形態では、低リジンクロロトキシンポリペプチドの末端の一方または両方（すなわち、Ｎ末端および／またはＣ末端）が、化学的にコンジュゲートするための部位としての機能を果たし得る。末端の一方または両方の利用可能性は、使用する特定のコンジュゲート化学反応に左右され得る。低リジンクロロトキシンポリペプチドがリジン残基を完全に欠く一部の実施形態では、Ｎ末端のアルファアミノ基のみがコンジュゲートするための部位として利用可能である。
２つ以上のリジン残基を置き換える複数の実施形態では、リジン残基と置き換えるために、同じまたは異なるアミノ酸残基（複数可）またはアミノ酸誘導体（複数可）を使用することができる。同じアミノ酸残基を使用してリジン残基を置き換えた非限定的な例については、例えば、配列番号１７〜２２を、また、異なるアミノ酸残基を使用してリジン残基を置き換えた非限定的な例については、配列番号２３を参照されたい。
一部の実施形態では、低リジンクロロトキシンポリペプチドは、配列内にリジンを１つのみ有する（「モノリジンクロロトキシンポリペプチド」）。一部の実施形態では、そのようなクロロトキシンポリペプチドは、クロロトキシンにおいてリジン残基が通常存在するところ、例えば、配列番号１の１５位、２３位または２７位に対応する位置にリジン残基を有する（例えば、非限定的な例について、配列番号１４〜２３を参照されたい）。一部の実施形態では、低リジンクロロトキシンポリペプチドは、クロロトキシンにおいてリジン残基が通常存在するところ（すなわち、配列番号１の１５位、２３位および２７位）にリジン残基を１つも有さないが、配列番号１の１５位、２３位および２７位のいずれにも対応しない位置にリジン残基を有する。リジンを全く有さないクロロトキシンポリペプチドと同様に、モノリジンクロロトキシンポリペプチドは、配列番号１の１５位、２３位および２７位に対応する１つまたは複数の位置のアミノ酸が欠けていてよく、かつ／または、配列番号１の１５位、２３位および２７位に対応する１つまたは複数の位置にアミノ酸またはアミノ酸誘導体の置換を有してよい。
一部の実施形態では、提供される低リジンクロロトキシンポリペプチドは、１つ以上のリジン残基を含むが、それにもかかわらず、クロロトキシンと比較してコンジュゲートするために利用可能なリジンの数が減少したアミノ酸配列を有する。一部の実施形態では、本発明で提供される低リジンクロロトキシンポリペプチドにおける１つまたは複数のリジン残基は、クロロトキシンポリペプチドに存在するにもかかわらず、コンジュゲートするための部位として利用できなくなっている。例えば、１つまたは複数のリジン残基は、コンジュゲートするための部位として利用可能な３つ未満、２つ未満または１つ未満（すなわち、「低」リジン）のリジン残基を残して、１つまたは複数のリジン残基が化学的なコンジュゲート反応に関与することからブロックされるように、共有結合的に、または非共有結合的に修飾することができる。このように使用することができるリジン残基に対する共有結合性の修飾の非限定的な例としては、ペグ化（すなわち、ポリエチレングリコールポリマーを付着させることによる修飾）、メチル化（ジメチル化およびトリメチル化を含む）、および他のアルキル基（複数可）の付着が挙げられる。ある特定の実施形態では、イプシロンＮＨ２基において１つまたは複数のリジン残基を修飾する。例えば、リジン残基を共有結合的に修飾するために所与のＲ基（例えば、ブチル、プロピル、またはエチル基）を使用する場合、イプシロンＮＨ２基を修飾してＮＲ２基またはＮＲ３基にすることができる。
表２は、低リジンクロロトキシンポリペプチドを作出するために使用することができる修飾スキームのいくつかの非限定的な例を提示する。
ある特定の実施形態では、特定のリジン残基のブロックは、低リジンクロロトキシンポリペプチドを合成する間の適切なステップ中に、修飾されたリジン（コンジュゲートするために利用可能な部位がすでにブロックされている）を組み入れることによって実現する。修飾されたリジンは、商業的に容易に入手可能であり、当技術分野で公知の常套的な方法によって合成することができる。このように使用することができる修飾されたリジンの非限定的な例としては、これらに限定されないが、二置換リジンまたは三置換リジン（例えば、Ｎ，Ｎ−Ｒ２−リジンまたはＮ，Ｎ，Ｎ−Ｒ３−リジン、Ｒはブロック基である）および短いＰＥＧ分子が付着したリジンが挙げられる。Ｒは、リジンに共有結合的に付着すると、リジン残基を、化学的なコンジュゲート反応に関与することからブロックする機能を果たす任意の基であってよい。例えば、アルキル基（例えば、ブチル、メチル、およびエチル）がブロック基としての機能を果たし得る。例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチル−リジンおよび／またはＮ，Ｎ，Ｎ−トリメチル−リジンを合成の間に使用する。
ある特定の実施形態では、低リジンクロロトキシンポリペプチドの末端の一方または両方（すなわち、Ｎ末端および／またはＣ末端）を、末端の一方または両方が化学的なコンジュゲート反応に関与することを妨げるために、ブロックする。例えば、一部の実施形態では、ブロックされていなければ少なくとも１つの末端がコンジュゲート反応に関与するコンジュゲート化学反応を使用する。ポリペプチドのＮ末端および／またはＣ末端をブロックする種々の方法は、これらに限定されないが、アミンにアルキル基を付加すること（例えば、メチル化）による共有結合性の修飾を含め、当技術分野で公知である。
本明細書に記載の低リジンクロロトキシンポリペプチドの合成方法は、当技術分野で公知である。いくつかのペプチド合成方法では、１つのアミノ酸（またはアミノ酸誘導体）のアミノ基を、別のアミノ酸（またはアミノ酸誘導体）の、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）などの試薬と反応させることによって活性化したカルボキシル基に連結させる。遊離のアミノ基が活性化されたカルボキシル基を攻撃すると、ペプチド結合が形成され、ジシクロヘキシルウレアが遊離する。そのような方法では、他の潜在的な反応性基（例えば、Ｎ末端アミノ酸またはアミノ酸誘導体のα−アミノ基およびＣ末端アミノ酸またはアミノ酸誘導体のカルボキシル基など）を化学反応に関与することからブロック（「保護」）することができる。したがって、特定の活性基のみが、所望の生成物が形成されるように反応する。この目的のために有用なブロック基としては、これらに限定することなく、アミン基を保護するためのｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基（ｔ−Ｂｏｃ）およびベンジルオキシカルボニル（ｂｅｎｚｏｙｌｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ）基；ならびにカルボキシル基を保護するための単純なエステル（例えばメチル基およびエチル基など）およびベンジルエステルが挙げられる。ブロック基は、一般には、その後、ペプチド結合はインタクトなままに残す処理（例えば、希酸を用いた処理）で除去することができる。反応すべきでない反応性基を保護するこのプロセスでは、カップリングしてペプチド結合を形成すること、および反応性基を脱保護することを繰り返すことができる。ペプチドは、成長しているペプチド鎖にアミノ酸を逐次的に加えることによって合成することができる。液相ペプチド合成方法および固相ペプチド合成方法はどちらも、本発明に従って用いるために適している。固相ペプチド合成方法では、成長しているペプチド鎖を、一般には、不溶性のマトリックス（例えば、ポリスチレンビーズなど）に、カルボキシ末端のアミノ酸をマトリックスに連結することによって連結する。合成の終わりに、フッ化水素酸（ＨＦ）などのペプチド結合を破壊しない切断試薬を使用して、マトリックスからペプチドを遊離させることができる。保護基は、一般には、この時に除去することもできる。自動化された、ハイスループットな、かつ／または平行のペプチド合成方法も、本発明に従って使用することができる。ペプチド合成方法に関するより多くの情報については、例えば、そのそれぞれの内容が参照により本明細書に組み込まれる、Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ（１９６９年）「Ｓｏｌｉｄ−ｐｈａｓｅ ｐｅｐｔｉｄｅ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」Ａｄｖ Ｅｎｚｙｍｏｌ Ｒｅｌａｔ Ａｒｅａｓ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ．、３２巻：２２１〜９６頁；Ｆｒｉｄｋｉｎら（１９７４年）Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｂｉｏｃｈｅｍ．、４３巻（０号）：４１９〜４３頁；Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ（１９９７年）「Ｃｏｎｃｅｐｔ ａｎｄ Ｅａｒｌｙ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ Ｓｏｌｉｄ Ｐｈａｓｅ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ、２８９巻：３〜１３頁；Ｓａｂａｔｉｎｏら（２００９年）「Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ ａｕｔｏｍａｔｉｃ， ｍａｎｕａｌ ａｎｄ ｍｉｃｒｏｗａｖｅ−ａｓｓｉｓｔｅｄ ｓｏｌｉｄ−ｐｈａｓｅ ｐｅｐｔｉｄｅ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ Ｄｅｖｅｌ．、１１巻（６号）：７６２〜７０頁、を参照されたい。
一部の実施形態では、リジン残基に対する修飾を本明細書に記載の他の手段（例えば、リジン残基を別のアミノ酸またはアミノ酸誘導体で置き換えること、および／またはクロロトキシンにおいて通常１つが見いだされるリジン残基を欠くこと）と組み合わせて使用する。
一部の実施形態では、合成の終わりにＮ末端の保護基を除去しない。保護基を残すことは、例えば、Ｎ末端がブロックされた低リジンクロロトキシンポリペプチドを生成し、したがって、特定の化学的なコンジュゲートスキームにおいてコンジュゲートするために利用可能な部位を限定するために役立つ。
ＩＩ．クロロトキシンコンジュゲート
ある特定の実施形態では、１つまたは複数の実体または部分が結びついた低リジンクロロトキシンポリペプチドを含むクロロトキシンコンジュゲートが提供される。本発明のクロロトキシンコンジュゲートは、本明細書に記載の低リジンクロロトキシンポリペプチドを含む任意の長さのポリペプチドを含んでよい。
Ａ．コンジュゲーション
一部の実施形態では、１つまたは複数の実体または部分を、低リジンクロロトキシンポリペプチドのリジン残基および／または末端を介して低リジンクロロトキシンポリペプチドに結びつける。いくつかのそのような実施形態では、実体または部分を低リジンクロロトキシンポリペプチドに付着させることができる位置（複数可）は、コンジュゲートするための部位として利用可能なリジン残基の数によって限定される。例えば、実体または部分は、モノリジンクロロトキシンポリペプチドにおける単一の利用可能なリジン残基に付着させることができる。
一部の実施形態では、実体または部分を、低リジンクロロトキシンポリペプチドのＮ末端に、またはＣ末端に結びつける。いくつかのそのような実施形態では、低リジンクロロトキシンポリペプチドは、クロロトキシンの「ネイティブな」位置（例えば、１５位、２３位および２７位に対応する位置）のいずれにおいても、コンジュゲートするために利用可能なリジン残基を１つも有さない。
一部の実施形態では、低リジンクロロトキシンポリペプチドを、１つまたは複数の実体または部分に共有結合的に結びつける。当業者には理解されるように、低リジンクロロトキシンポリペプチドおよび１つまたは複数の実体および／または部分は、直接的に、または間接的に（例えば、リンカーを通じて）付着させることができる。
種々のコンジュゲート化学反応が当技術分野で公知であり、本発明の実施において使用することができる。ある特定の実施形態では、１つまたは複数の実体または部分を、リジン残基のイプシロンアミノ基に付着させる。一部の実施形態では、コンジュゲート化学反応は、ＮＨＳ（Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド）／ＥＤＣ（１−エチル−３−［３−ジメチルアミノプロピル］カルボジイミド塩酸塩）化学反応に基づく。一部の実施形態では、コンジュゲート化学反応は、チオ化化学反応に基づく、すなわち、トラウト試薬（Ｔｒａｕｔ’ｓ ｒｅａｇｅｎｔ）および／または２−イミノチオランなどのチオ化剤を使用する。
ある特定の実施形態では、低リジンクロロトキシンポリペプチドおよび１つまたは複数の実体または部分を、互いに直接的に共有結合的に連結する。そのような直接的な共有結合は、種々のやり方のいずれかで、例えば、アミド結合、エステル結合、炭素−炭素結合、ジスルフィド結合、カルバメート結合、エーテル結合、チオエーテル結合、尿素結合、アミン結合、または炭酸結合によって実現することができる。そのような共有結合は、例えば、１つの実体／複数の実体または１つの部分／複数の部分、および／または低リジンクロロトキシンポリペプチドに存在する官能基を利用することによって実現することができる。使用することができる適切な官能基としては、これらに限定されないが、アミン、酸無水物、ヒドロキシル基、カルボキシル基、チオールなどが挙げられる。ある特定の実施形態では、将来のコンジュゲートの一方の部分の官能基を、将来のコンジュゲートの他方の部分とカップリングさせるために活性化する。例えば、カルボジイミドなどの活性化剤を使用して、そのようなカップリングに影響を及ぼすことができる。多種多様な活性化剤が当技術分野で公知であり、提供されるコンジュゲートを形成するために適している。
一部の実施形態では、低リジンクロロトキシンポリペプチドおよび１つまたは複数の実体または部分は、リンカー基を介して間接的に互いに共有結合的に連結させる。そのような間接的な共有結合性の連結は、同種官能性（ｈｏｍｏｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ）作用剤および異種官能性（ｈｅｔｅｒｏｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ）作用剤を含めた当技術分野で周知のいくつもの安定な二官能性作用剤の任意のものを使用することによって実現することができる。そのような作用剤の非限定的な例については、例えば、Ｐｉｅｒｃｅ Ｃａｔａｌｏｇ ａｎｄ Ｈａｎｄｂｏｏｋを参照されたい。二官能性作用剤によると、生じたコンジュゲートに連結性部分が存在することになるが、一方、活性化剤によると、反応に関与する２つの部分間が直接カップリングするという点で、二官能性作用剤の使用と活性化剤の使用は異なる。二官能性作用剤の役割は、そうでなければ不活性な２つの部分間の反応を可能にすることであり得る。その代わりに、またはそれに加えて、反応生成物の一部になる二官能性作用剤は、コンジュゲートにある程度のコンフォメーションの柔軟性が付与されるように選択することができる。例えば、二官能性作用剤は、いくつかの原子、例えば、２個から１０個の間の炭素原子を含有する直鎖アルキル鎖を含んでよい。その代わりに、またはそれに加えて、二官能性作用剤は、低リジンクロロトキシンポリペプチドと、１つまたは複数の実体または部分との間に形成される連結が切断可能である、例えば、加水分解性であるように選択することができる。（そのようなリンカーの非限定的な例については、例えば、そのそれぞれの内容が参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第５，７７３，００１号；同第５，７３９，１１６号および同第５，８７７，２９６号を参照されたい。）そのようなリンカーは、例えば、低リジンクロロトキシンポリペプチドとコンジュゲートしている実体または部分が、低リジンクロロトキシンポリペプチドから加水分解された後により高い活性を有することが観察される治療的部分である場合に使用することができる。切断を実現するための例示的な機構としては、リソソームの酸性のｐＨにおける加水分解（ヒドラゾン、アセタール、およびシスアコニット酸様アミド）、リソソーム酵素（例えば、カテプシンおよび他のリソソーム酵素）によるペプチド切断、およびジスルフィドの還元が挙げられる。追加的な切断機構としては、細胞外または細胞内の生理的なｐＨにおける加水分解が挙げられる。この機構は、１つまたは複数の実体または部分を低リジンクロロトキシンポリペプチドとカップリングさせるために使用する架橋剤が、例えばポリデキストランなどの生物分解性／生物侵食性の（ｂｉｏｅｒｏｄｉｂｌｅ）実体である場合に適用することができる。
例えば、１つまたは複数の治療的部分を含むコンジュゲートについて、ヒドラゾンを含有するコンジュゲートは、所望の薬物放出の性質をもたらす導入されたカルボニル基を用いて作製することができる。コンジュゲートは、一方の末端にジスルフィド基を有し、他方の末端にヒドラジン誘導体を有するアルキル（ａｌｋｕｌ）鎖を含むリンカーを用いて作製することもできる。
ヒドラゾン以外の官能基を含有するリンカーも、リソソームの酸性の環境で切断される潜在性を有する。例えば、コンジュゲートは、エステル、アミド、およびアセタール／ケタールなどの、ヒドラゾン以外の細胞内で切断可能な基を含有するチオール反応性リンカーから作製することができる。酸素原子の一方が実体または部分に付着し、他方が低リジンクロロトキシンポリペプチドに付着させるためのリンカーに付着した５〜７員環のケトンから作製されたケタールも使用することができる。
ｐＨ感受性リンカークラスの別の例は、アミド基と並列したカルボン酸基を有するシスアコニット酸である。カルボン酸は、酸性リソソームにおけるアミドの加水分解を加速する。いくつかの他の種類の構造を有する同じような型の加水分解速度の加速を実現するリンカーも使用することができる。
リソソーム酵素によるペプチドの酵素的な加水分解は、コンジュゲートから実体または部分を遊離させるためにも使用することができる。例えば、低リジンクロロトキシンポリペプチドを、アミド結合によってパラアミノベンジルアルコールに付着させ、次いで、ベンジルアルコールと実体または部分との間でカルバミン酸エステルまたは炭酸エステルを作製することができる。低リジンクロロトキシンポリペプチドを切断することにより、アミノベンジルカルバメート（ａｍｉｎｏ ｂｅｎｚｙｌｅ ｃａｒａｂａｍａｔｅ）またはアミノベンジルカーボネートが崩壊し、実体または部分が遊離する。別の例として、リンカーを崩壊させることによってカルバミン酸エステルの代わりにフェノールを切断することができる。さらに別の例として、ジスルフィド反応を用いてパラメルカプトベンジルカルバメート（ｐａｒａ−ｍｅｒａｐｔｏｂｅｎｚｙｌ ｃａｒｂａｍａｔｅ）またはパラメルカプトベンジルカーボネートの崩壊を開始させる。
多くの治療的部分、特に抗癌剤の水溶性は、あったとしてもわずかであり、それにより、治療的部分が凝集するので、その薬物のコンジュゲートへの負荷量が限定される。これを克服するための１つの手法は、可溶化基を、例えば、低リジンクロロトキシンコンジュゲートに付着したＰＥＧ二酸チオール酸、またはマレイミド酸、ジペプチドスペーサー、および実体または部分に結合したアミドを有するものを含めた、使用することができるＰＥＧ（ポリエチレングリコール）およびジペプチドからなるリンカーで作製されたリンカーコンジュゲートに付加することである。ＰＥＧ基を組み入れる手法は、凝集および薬物負荷量の限定を克服することにおいて有益であり得る。
クロロトキシンコンジュゲート内の実体または部分がタンパク質、ポリペプチド、またはペプチドである複数の実施形態では、クロロトキシンコンジュゲートは、融合タンパク質であってよい。融合タンパク質は、個々のペプチド骨格を介して共有結合によって連結した２つ以上のタンパク質、ポリペプチド、またはペプチドを含む分子である。本発明の方法において使用する融合タンパク質は、当技術分野で公知の任意の適切な方法によって作出することができる。例えば、融合タンパク質は、ポリペプチド合成機を使用した直接的なタンパク質合成方法によって作出することができる。あるいは、２つの連続した遺伝子断片間に相補的なオーバーハングを生じさせるアンカープライマーを使用して遺伝子断片のＰＣＲ増幅を行うことができ、その後、それをアニーリングし再増幅してキメラ遺伝子配列を生成することができる。融合タンパク質は、標準の組換え方法によって得ることができる（例えば、その内容全体が、参照により本明細書に組み込まれる、Ｍａｎｉａｔｉｓら「Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ」、第２版、１９８９年、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ、Ｎ．Ｙ．を参照されたい）。これらの方法は、一般には、（１）所望の融合タンパク質をコードする核酸分子を構築すること；（２）その核酸分子を組換え型の発現ベクターに挿入すること；（３）その発現ベクターを用いて適切な宿主細胞を形質転換すること；および（４）宿主細胞において融合タンパク質を発現させることを含む。そのような方法によって作出される融合タンパク質は、当技術分野で公知の通り、培地から直接、または細胞を溶解させることによって回収し、単離することができる。形質転換された宿主細胞によって産生されるタンパク質を精製するための多くの方法が当技術分野で周知である。それらとしては、これらに限定されないが、沈殿、遠心分離、ゲル濾過、およびカラムクロマトグラフィー（例えば、イオン交換クロマトグラフィー、逆相クロマトグラフィー、およびアフィニティークロマトグラフィー）が挙げられる。他の精製方法が記載されている（例えば、その内容全体が、参照により本明細書に組み込まれるＤｅｕｔｓｃｈｅｒら「Ｇｕｉｄｅ ｔｏ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ」、Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ、１９９０年、１９２巻、Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓを参照されたい）。
ある特定の実施形態では、低リジンクロロトキシンポリペプチドを、１つまたは複数の実体または部分と非共有結合的に結びつける。非共有結合性の結びつきの例としては、これらに限定されないが、疎水性の相互作用、静電気的な相互作用、双極子相互作用、ファンデルワールス相互作用、および水素結合が挙げられる。
毒素部分と治療剤との間の結びつきの本質に関係なく、結びつきは、一般には、コンジュゲートが、細胞に、およびその中に輸送される前またはその間に解離しないために十分に選択的、特異的、かつ強力である。低リジンクロロトキシンポリペプチドと、１つまたは複数の実体または部分との間の結びつきは、当業者に公知の任意の化学的カップリング、生化学的カップリング、酵素的カップリング、または遺伝子のカップリングを用いて実現することができる。
当業者には容易に理解され得るように、本発明のコンジュゲートは、任意の数の異なるやり方によって互いに結びつく、任意の数の低リジンクロロトキシンポリペプチドと任意の数の実体または部分とを含んでよい。コンジュゲートの設計は、その意図された目的（複数可）およびそれを使用する特定の状況において望ましい性質の影響を受ける。低リジンクロロトキシンポリペプチドと実体または部分を結びつける、または結合させてコンジュゲートを形成するための方法の選択は、当業者の知識の範囲内であり、一般に、所望の結びつきの本質（すなわち、共有結合性か非共有結合性か、および／または切断可能であるか切断不可能であるか）、低リジンクロロトキシンポリペプチドおよび実体／部分の本質、官能性化学基の存在および本質などに左右される。
Ｂ．実体／部分
上記の通り、ある特定の実施形態では、クロロトキシンコンジュゲートは、１つまたは複数のクロロトキシンではない実体を含む。種々のそのような実体または部分の任意のものを使用することができる。
１．治療的な実体／部分
ある特定の実施形態では、提供されるコンジュゲートは、下記の通り、また、その内容全体について、その全体が参照により本明細書に組み込まれる国際特許公報ＷＯ２００９／０２１１３６Ａ１に記載の通り、１つまたは複数の治療的な実体または部分を含む。
ａ．抗癌剤
一部の実施形態では、１つまたは複数の治療的な実体または部分は、抗癌剤を含む。適切な抗癌剤としては、例えば、細胞傷害性薬剤を含めた、癌細胞に対して直接的にまたは間接的に毒性または有害である多種多様な物質、分子、化合物、作用剤または因子の任意のものが挙げられる。本発明の実施において使用するために適した抗癌剤は、合成または天然であってよい。抗癌剤は、単一分子または異なる分子の複合体を含んでよい。
適切な抗癌剤は、これらに限定されないが、小分子、ペプチド、糖類、ステロイド、抗体、融合タンパク質、アンチセンスポリヌクレオチド、リボザイム、低分子干渉ＲＮＡ、ペプチド模倣薬などを含めた種々のクラスの化合物のいずれに属してもよい。同様に、適切な抗癌剤は、これらに限定されないが、アルキル化剤、代謝拮抗薬、抗有糸分裂抗生物質、アルカロイド系抗腫瘍剤、ホルモンおよび抗ホルモン薬、インターフェロン、非ステロイド性抗炎症薬、および種々の他の抗腫瘍剤を含めた任意の種々のクラスの抗癌剤の中に見いだすことができる。
特に適切な抗癌剤は、癌細胞に対する選択性／特異性が乏しいことに起因して望ましくない副作用を引き起こす作用剤；細胞による取り込みおよび／または保持を全く受けない、またはそれが乏しい作用剤；細胞の薬物耐性を伴う作用剤；および、難水溶性、凝集などに起因して、癌患者に投与するために容易に製剤化することができない作用剤である。
本発明のコンジュゲートにおいて使用することができる適切な抗癌剤の例を、以下により詳細に記載する。
難水溶性抗癌薬
ある特定の実施形態では、本発明のコンジュゲート内の抗癌剤は、難水溶性化合物である。当業者には理解されるように、多種多様な難水溶性抗癌剤が、本発明において使用するために適している。
例えば、抗癌剤は、他の抗悪性腫瘍薬に対しては難治性の多くの固形腫瘍の治療において有効な作用剤として理解されているタキサンの中から選択することができる。現在承認されている２種のタキサンは、パクリタキセル（ＴＡＸＯＬ（商標））およびドセタキセル（ＴＡＸＯＴＥＲＥ（商標））である。パクリタキセル、ドセタキセル、および他のタキサンは、紡錘体微小管の形成に不可欠なタンパク質であるチューブリンの重合を増強することによって作用する。チューブリンの重合により、細胞の複製を阻害し、細胞死を導く非常に安定な、非機能性の細管の形成がもたらされる。
パクリタキセルは非常に難水溶性であり、したがって、静脈内投与するために水を用いて実際に製剤化することができない。注射または静脈内注入するためのＴＡＸＯＬ（商標）のいくつかの製剤が、薬物担体としてＣＲＥＭＯＰＨＯＲ ＥＬ（商標）（ポリオキシエチル化されたヒマシ油）を使用して開発されてきた。しかし、ＣＲＥＭＯＰＨＯＲ（商標）ＥＬは、それ自体が毒性であり、少なくとも一部において、そのような調製物の投与に伴う過敏症反応（重度の皮膚発疹、蕁麻疹（ｈｉｖｅｓ）、紅潮、呼吸困難、頻脈（ｔａｃｃｈｙｃａｒｄｉａ）およびその他）の原因であると考えられている。そのような副作用を回避するために、多くの場合、ＣＲＥＭＯＰＨＯＲ（商標）を含有するパクリタキセル製剤と一緒に前投薬を処方する。パクリタキセルの類似体であるドセタキセルは、パクリタキセルと同様に難水溶性である。医薬用途のためにドセタキセルを溶解するために使用される現在最も好ましい溶媒は、ポリソルベート８０（ＴＷＥＥＮ８０）である。患者において過敏症反応を引き起こすことに加えて、ＴＷＥＥＮ８０は、毒性が強いフタル酸ジエチルヘキシルを浸出する傾向があるので、ＰＶＣ送達装置と一緒に使用することができない。
タキサンおよびクロロトキシンポリペプチドを含む本発明によるコンジュゲートは、患者において有害反応を誘導する溶媒および担体の使用を回避するための改善された送達方法として使用することができる。
一部の実施形態では、クロロトキシンコンジュゲート内の抗癌剤は、抗生物質のエンジインファミリーに属してよい。ファミリーとして、エンジイン抗生物質は特に強力な抗腫瘍剤である。いくつかのメンバーは、最も有効な、臨床的に使用される抗腫瘍抗生物質の１つであるアドリアマイシンよりも１０００倍強力である（Ｙ．Ｓ． Ｚｈｅｎら、Ｊ． Ａｎｔｉｂｉｏｔ．、１９８９年、４２巻：１２９４〜１２９８頁）。例えば、本発明のコンジュゲート内の抗癌剤は、カリチアマイシンのエンジインファミリーのメンバーであってよい。土壌微生物であるＭｉｃｒｏｍｏｎｏｓｐｏｒａ ｅｃｈｉｎｏｓｐｏｒａ種ｃａｌｉｃｈｅｎｓｉｓのブロス抽出物から最初に単離されたカリチアマイシンが、強力なＤＮＡ損傷剤についてのスクリーニングにおいて検出された（Ｍ．Ｄ． Ｌｅｅら、Ｊ． Ａｍ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ．、１９８７年、１０９巻：３４６４〜３４６６頁；Ｍ．Ｄ． Ｌｅｅら、Ｊ． Ａｍ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ．、１９８７年、１０９巻：３４６６〜３４６８頁；Ｗ．Ｍ． Ｍａｉｅｓｅら、Ｊ． Ａｎｔｉｂｉｏｔ．、１９８９年、４２巻：５５８〜５６３頁；Ｍ．Ｄ． Ｌｅｅら、Ｊ． Ａｎｔｉｂｉｏｔ．、１９８９年、４２巻：１０７０〜１０８７頁）。
カリチアマイシンは、グリコシル結合によってオリゴ糖鎖に連結した複雑な剛体の二環式のエンジインアリルトリスルフィドコア構造を特徴とする。オリゴ糖部分は、いくつもの置換された糖誘導体、および置換されたテトラヒドロピラン環を含有する。カリチアマイシンのコアを含有するエンジイン部分（またはアグリコン）および炭水化物部分は、これらの分子の生物活性において異なる役割を行うことが報告されている。一般に、コア部分は、ＤＮＡを切断し、一方、カリチアマイシンのオリゴ糖部分は、認識および送達系としての機能を果たし、また、薬物を、薬物をつなぎ留める二本鎖ＤＮＡの副溝に導くと考えられている（「Ｅｎｅｄｉｙｎｅ Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ ａｓ Ａｎｔｉｔｕｍｏｒ Ａｇｅｎｔｓ」、ＤｏｙｌｅおよびＢｏｒｄｅｒｓ、１９９５年、Ｍａｒｃｅｌ−Ｄｅｋｋｅｒ：Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）。二本鎖ＤＮＡの切断は、通常は細胞が修復することができない、または容易に修復することができない損傷の一種であり、ほとんどの場合、致死的である。
それらの化学的性質および生物学的性質に起因して、カリチアマイシンのいくつかの類似体が、前臨床モデルにおいて潜在的な抗腫瘍剤として試験されている。それらの単剤療法としての開発は、遅延毒性により治療の治療量域を限定されるので、追求されてこなかった。しかし、それらの効力は、それらを標的化学療法に特に有用なものにする。
適切な難水溶性抗癌剤の他の例としては、タモキシフェンおよびＢＣＮＵが挙げられる。タモキシフェンは、乳癌、子宮内膜癌、前立腺癌、卵巣癌、腎癌、黒色腫、結腸直腸腫瘍、デスモイド腫瘍、膵癌、および下垂体腫瘍などの種々のエストロゲン受容体陽性の細胞腫を治療することの成功の程度に変動を伴って使用されてきた。難水溶性によって限定されることに加えて、タモキシフェンを使用した化学療法は、細胞の薬物耐性などの副作用を引き起こす恐れがある。ＢＣＮＵ（１，３−ビス（２−クロロエチル）−１−ニトロソウレア）は、その抗腫瘍性について周知であり、１９７２年から、国立がん研究所（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ）により、脳腫瘍、結腸癌、ホジキン病、肺癌および多発性骨髄腫に対する使用についてチャート化されている。しかし、この抗癌薬の効率的な使用も、その低溶解性によって損なわれる。
薬物耐性を伴う抗癌剤
本発明のある特定の実施形態では、クロロトキシンコンジュゲートは、薬物耐性を伴う抗癌剤を含む。本明細書で使用される場合、「薬物耐性を伴う抗癌剤」という用語は、癌細胞が耐性である、または耐性になり得る任意の化学療法薬を指す。すでに上記されている通り、抗癌剤に対する耐性は、多くの因子に起因する可能性があり、異なる機構によって操作することができる。低リジンクロロトキシンポリペプチドおよび薬物耐性を伴う抗癌剤を含む本発明のコンジュゲートを投与することにより、抗癌剤の細胞内取り込みを増強し、それを腫瘍細胞、例えば、耐性の腫瘍細胞に運ぶことができる。
薬物耐性を伴う多種多様な抗癌剤はいずれも本発明において使用するために適している。例えば、薬物耐性を伴う抗癌剤は、メトトレキサートであってよい。広く使用されている制癌剤であるメトトレキサートは、葉酸の類似体であり、それ自体が特異的な構成単位であるチミジル酸の合成に利用される化合物の重大な供給源であり、したがって、ＤＮＡ合成に特に重大であるテトラヒドロ葉酸の合成における重要なステップを遮断する。メトトレキサートに誘導される薬物耐性は、その薬物の細胞内取り込みの欠乏に関連づけられる。
適切な抗癌剤の他の例としては、酵素活性の喪失により薬物が不適切に細胞内活性化されることによる薬物耐性を伴うプリン類似体およびピリミジン類似体が挙げられる。そのようなプリン類似体の例は、６−メルカプトプリン（６−ＭＰ）である。腫瘍細胞の６−ＭＰに対する耐性の一般的な原因は、６−ＭＰを、この薬物の致死的な形態である、対応するヌクレオチドの６−メルカプトホスホリボシルプリン（６−ＭＰＲＰ）に活性化する酵素ヒポキサンチングアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＨＧＰＲＴ）が喪失することである。理論に拘束されることなく、耐性は、６−ＭＰＲＰ自体を細胞に導入することができれば克服することができると仮定される。この化合物は市販されているが、生細胞に適切に輸送されないので癌治療において治療的には未だ使用されていない。６−ＭＰＲＰを本発明による低リジンクロロトキシンポリペプチドに結びつけることにより、細胞膜を渡るその能力が劇的に増大する。チオグアニンは、酵素ＨＧＰＲＴの欠乏による薬物耐性を伴う抗癌剤の別の例である。
不適切に細胞内活性化されることによる薬物耐性を伴うピリミジン類似体の例としては、酵素デオキシシチジンキナーゼ（ＤＯＣＫ）によって、致死的な形態、それぞれシトシン二リン酸およびアデノシン二リン酸に活性化されるシトシンアラビノシドおよびアデノシンアラビノシドが挙げられる。低リジンクロロトキシンポリペプチドは、そのようなピリミジン類似体の活性型にカップリングしてそれらの細胞内取り込みを増強し、細胞の薬物耐性を克服することができる。
薬物耐性を伴う抗癌剤の他の例としては、これらに限定されないが、５−フルオロウラシル、フルオロデオキシウリジン、シトシン、アラビノシド、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、アクチノマイシン、およびブレオマイシンが挙げられる。
他の抗癌剤
一部の実施形態では、抗癌剤は、２、３挙げると、アルキル化薬（例えば、メクロレタミン、クロラムブシル、シクロホスファミド、メルファラン、イホスファミド）、代謝拮抗薬（例えば、メトトレキサート）、プリンアンタゴニストおよびピリミジンアンタゴニスト（例えば、６−メルカプトプリン、５−フルオロウラシル、シタラビン（ｃｙｔａｒａｂｉｌｅ）、ゲムシタビン）、紡錘体阻害剤（例えば、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビノレルビン、パクリタキセル）、ポドフィロトキシン（例えば、エトポシド、イリノテカン、トポテカン）、抗生物質（例えば、ドキソルビシン、ブレオマイシン、マイトマイシン）、ニトロソウレア（例えば、カルムスチン、ロムスチン）、無機イオン（例えば、シスプラチン、カルボプラチン）、酵素（例えば、アスパラギナーゼ）、およびホルモン（例えば、タモキシフェン、ロイプロリド、フルタミド、およびメゲストロール）からなる群から選択される。最新の癌療法のより包括的な考察については、これによりその内容全体が参照により組み込まれる、「ｈｔｔｐ：／／」のすぐ後に「ｗｗｗ．ｃａｎｃｅｒ．ｇｏｖ／」が続くアドレスのウェブサイト、「ｈｔｔｐ：／／」のすぐ後に「ｗｗｗ．ｆｄａ．ｇｏｖ／ｃｄｅｒ／ｃａｎｃｅｒ／ｄｒｕｇｌｉｓｔｆｒａｍｅ．ｈｔｍ」が続くアドレスのウェブサイトにあるＦＤＡに承認された抗腫瘍薬の一覧、およびＴｈｅ
Ｍｅｒｃｋ Ｍａｎｕａｌ、第１７版、１９９９年を参照されたい。
核酸薬剤（ｎｕｃｌｅｉｃ ａｃｉｄ ａｇｅｎｔ）
ある特定の実施形態では、クロロトキシンコンジュゲートは、核酸薬剤を含む。
多数の癌および腫瘍は、さまざまな程度の遺伝子の機能障害、例えば、点突然変異、遺伝子欠失、または複製などを伴うことが示されている。「アンチセンス」、「アンチジーン」および「ＲＮＡ干渉」と称されているものなどの、癌を治療するための多くの新しい戦略が開発されて、遺伝子の発現が調節されている（Ａ． Ｋａｌｏｔａら、Ｃａｎｃｅｒ Ｂｉｏｌ． Ｔｈｅｒ．、２００４年、３巻：４〜１２頁；Ｙ． Ｎａｋａｔａら、Ｃｒｉｔ． Ｒｅｖ． Ｅｕｋａｒｙｏｔ． Ｇｅｎｅ Ｅｘｐｒ．、２００５年、１５巻：１６３〜１８２頁；Ｖ． ＷａｃｈｅｃｋおよびＵ． Ｚａｎｇｍｅｉｓｔｅｒ−Ｗｉｔｔｋｅ、Ｃｒｉｔ． Ｒｅｖ． Ｏｎｃｏｌ． Ｈｅｍａｔｏｌ．、２００６年、５９巻：６５〜７３頁；Ａ． Ｋｏｌａｔａら、Ｈａｎｄｂ． Ｅｘｐ． Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．、２００６年、１７３巻：１７３〜１９６頁）。これらの手法では、例えば、アンチセンス核酸、リボザイム、三重化剤（ｔｒｉｐｌｅｘ ａｇｅｎｔ）、または低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）を利用して、標的遺伝子の特定のｍＲＮＡまたはＤＮＡの転写または翻訳を、アンチセンス核酸を用いてｍＲＮＡを遮蔽すること、または三重化剤を用いてＤＮＡを遮断することによって、リボザイムを用いてヌクレオチド配列を切断することによって、またはＲＮＡ干渉に関与する複雑な機構を通じてｍＲＮＡを破壊することによって遮断する。これらの戦略の多くでは、主にオリゴヌクレオチドが活性薬剤として使用されるが、小分子および他の構造も適用されている。遺伝子発現を調節するためのオリゴヌクレオチドベースの戦略は、いくつかの癌を治療するための莫大な潜在性を有するが、オリゴヌクレオチドを薬理学的に適用することは、主に、これらの化合物の、癌細胞内のそれらの作用部位への送達が効果的でないことによって妨げられてきた（Ｐ． Ｈｅｒｄｅｗｉｊｎら、Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｄｒｕｇ Ｄｅｖ．、２０００年、１０巻：２９７〜３１０頁；Ｙ． ＳｈｏｊｉおよびＨ． Ｎａｋａｓｈｉｍａ、Ｃｕｒｒ． Ｃｈａｒｍ． Ｄｅｓ．、２００４年、１０巻：７８５〜７９６頁；Ａ．Ｗ Ｔｏｎｇら、Ｃｕｒｒ． Ｏｐｉｎ． Ｍｏｌ． Ｔｈｅｒ．、２００５年、７巻：１１４〜１２４頁）。
ある特定の実施形態では、提供されるクロロトキシンコンジュゲートは、低リジンクロロトキシンポリペプチドおよび治療剤（例えば、抗癌剤）として有用な核酸分子を含む。核酸の種々の化学種および構造的な形態が、そのような戦略に適し得る。これらの非限定的な例としては、一本鎖ＤＮＡ（ｓｓＤＮＡ）および二本鎖ＤＮＡ（ｄｓＤＮＡ）を含めたＤＮＡ；これらに限定されないが、ｓｓＲＮＡ、ｄｓＲＮＡ、ｔＲＮＡ、ｍＲＮＡ、ｒＲＮＡ、酵素的なＲＮＡを含めたＲＮＡ；ＲＮＡ：ＤＮＡハイブリッド、三重鎖ＤＮＡ（例えば、短いオリゴヌクレオチドと結びついたｄｓＤＮＡ）などが挙げられる。
一部の実施形態では、核酸薬剤は、長さが約５ヌクレオチドから２０００ヌクレオチドの間である。一部の実施形態では、核酸薬剤は、長さが少なくとも約６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０ヌクレオチドまたはそれ以上である。一部の実施形態では、核酸薬剤は、長さが約２０００、１９００、１８００、１７００、１６００、１５００、１４００、１３００、１２００、１１００、１０００、９００、８００、７００、６００、５００、４５０、４００、３５０、３００、２５０、２００、１５０、１００、５０、４５、４０、３５、３０、２５、２０ヌクレオチド未満である、またはそれよりも短い。
一部の実施形態では、核酸薬剤は、プロモーターおよび／または転写を制御する他の配列を含む。一部の実施形態では、核酸薬剤は、複製開始点および／または複製を制御する他の配列を含む。一部の実施形態では、核酸薬剤は、プロモーターおよび／または複製開始点を含まない。
本発明の実施において使用するために適した核酸抗癌剤（ｎｕｃｌｅｉｃ ａｃｉｄ ａｎｔｉ−ｃａｎｃｅｒ ａｇｅｎｔ）としては、腫瘍形成および細胞の成長または細胞形質転換に関連する遺伝子（例えば、細胞分裂を刺激するタンパク質をコードする癌原遺伝子）、血管新生遺伝子／抗血管新生遺伝子、腫瘍抑制因子遺伝子（細胞分裂を抑制するタンパク質をコードする）、腫瘍の成長および／または腫瘍の移動に関連するタンパク質をコードする遺伝子、および自殺遺伝子（アポトーシスまたは他の形態の細胞死を誘導する）、特に、急速に分裂している細胞において最も活性である自殺遺伝子を標的とする作用剤が挙げられる。
腫瘍形成および／または細胞形質転換に関連する遺伝子の例としては、ＭＬＬ融合遺伝子、ＢＣＲ−ＡＢＬ、ＴＥＬ−ＡＭＬ１、ＥＷＳ−ＦＬＩ１、ＴＬＳ−ＦＵＳ、ＰＡＸ３−ＦＫＨＲ、Ｂｃ１−２、ＡＭＬ１−ＥＴＯ、ＡＭＬ１−ＭＴＧ８、Ｒａｓ、Ｆｏｓ ＰＤＧＦ、ＲＥＴ、ＡＰＣ、ＮＦ−１、Ｒｂ、ｐ５３、ＭＤＭ２など；多剤耐性遺伝子などの過剰発現された遺伝子；サイクリン；ベータカテニン；テロメラーゼ遺伝子；ｃ−ｍｙｃ、ｎ−ｍｙｃ、Ｂｃ１−２、Ｅｒｂ−Ｂ１およびＥｒｂ−Ｂ２；およびＲａｓ、Ｍｏｓ、Ｒａｆ、およびＭｅｔなどの突然変異した遺伝子が挙げられる。腫瘍抑制因子遺伝子の例としては、これらに限定されないが、ｐ５３、ｐ２１、ＲＢ１、ＷＴ１、ＮＦ１、ＶＨＬ、ＡＰＣ、ＤＡＰキナーゼ、ｐ１６、ＡＲＦ、ニューロフィブロミン、およびＰＴＥＮが挙げられる。抗癌療法において有用な、核酸薬剤の標的とすることができる遺伝子の例としては、インテグリン、セレクチン、およびメタロプロテイナーゼなどの腫瘍の移動に関連するタンパク質をコードする遺伝子；新しい血管の形成を促進するタンパク質をコードする抗血管新生遺伝子、例えば、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）またはＶＥＧＦｒなど；新血管形成を阻害するタンパク質をコードする抗血管新生遺伝子、例えば、エンドスタチン、アンジオスタチン、およびＶＥＧＦ−Ｒ２など；ならびに、インターロイキン、インターフェロン、線維芽細胞成長因子（α−ＦＧＦおよび（β−ＦＧＦ）、インスリン様成長因子（例えば、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２）、血小板由来の成長因子（ＰＤＧＦ）、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、形質転換成長因子（例えば、ＴＧＦ−αおよびＴＧＦ−β、上皮成長因子（ＥＧＦ）、ケラチノサイト成長因子（ＫＧＦ）、幹細胞因子およびその受容体ｃ−Ｋｉｔ（ＳＣＦ／ｃ−Ｋｉｔ）リガンド、ＣＤ４０Ｌ／ＣＤ４０、ＶＬＡ−４ ＶＣＡＭ−１、ＩＣＡＭ−１／ＬＦＡ−１、ｈｙａｌｕｒｉｎ／ＣＤ４４などのタンパク質をコードする遺伝子が挙げられる。当業者には理解される通り、前述の実施例は排他的なものではない。
本発明において使用するために適した核酸薬剤は、例えば、抗癌剤または他の治療剤、プローブ、プライマーなどとしての使用を含めた種々の使用のいずれも有し得る。核酸薬剤は、酵素活性（例えば、リボザイム活性）、遺伝子発現を阻害する活性（例えば、アンチセンス薬剤またはｓｉＲＮＡ薬剤などとして）、および／または他の活性を有してよい。核酸薬剤は、それ自体が活性であってよい、または、活性な核酸薬剤を送達するベクターであってよい（例えば、送達される核酸の複製および／または転写によって）。本明細書の目的上、そのようなベクター核酸は、たとえそれら自体に治療的活性がなくとも、治療的に活性な作用剤をコードする、またはそうでなければそれを送達する場合、「治療剤」とみなされる。
ある特定の実施形態では、クロロトキシンコンジュゲートは、アンチセンス化合物を含む、またはそれをコードする核酸治療剤（ｎｕｃｌｅｉｃ ａｃｉｄ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ａｇｅｎｔ）を含む。「アンチセンス化合物またはアンチセンス作用剤」、「アンチセンスオリゴマー」、「アンチセンスオリゴヌクレオチド」および「アンチセンスオリゴヌクレオチド類似体」という用語は、本明細書では互換的に使用され、アンチセンス化合物が、ＲＮＡ内の標的配列にワトソンクリック塩基対合によってハイブリダイズして標的配列内にＲＮＡオリゴマーヘテロ二本鎖を形成することを可能にするヌクレオチド塩基の配列およびサブユニット間の骨格（ｓｕｂｕｎｉｔ−ｔｏ−ｓｕｂｕｎｉｔ ｂａｃｋｂｏｎｅ）を指す。オリゴマーは、標的配列内に正確な配列相補性またはそれに近い相補性を有し得る。そのようなアンチセンスオリゴマーにより、標的配列を含有するｍＲＮＡの翻訳が遮断または阻害され得る、または遺伝子の転写が阻害され得る。アンチセンスオリゴマーは、二本鎖または一本鎖の配列に結合することができる。
本発明の実施において使用するために適したアンチセンスオリゴヌクレオチドの例としては、例えば、以下の概説に記載されているものが挙げられる：Ｒ．Ａ Ｓｔａｈｅｌら、Ｌｕｎｇ Ｃａｎｃｅｒ、２００３年、４１巻：Ｓ８１〜Ｓ８８頁；Ｋ．Ｆ． Ｐｉｒｏｌｌｏら、Ｐｈａｒｍａｃｏｌ． Ｔｈｅｒ．、２００３年、９９巻：５５〜７７頁；Ａ．Ｃ． ＳｔｅｐｈｅｎｓおよびＲ．Ｐ． Ｒｉｖｅｒｓ、Ｃｕｒｒ． Ｏｐｉｎ． Ｍｏｌ． Ｔｈｅｒ．、２００３年、５巻：１１８〜１２２頁；Ｎ．Ｍ． ＤｅａｎおよびＣ．Ｆ． Ｂｅｎｎｅｔｔ、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ、２００３年、２２巻：９０８７〜９０９６頁；Ｎ． Ｓｃｈｉａｖｏｎｅら、Ｃｕｒｒ． Ｐｈａｒｍ． Ｄｅｓ．、２００４年、１０巻：７６９〜７８４頁；Ｌ． Ｖｉｄａｌら、Ｅｕｒ． Ｊ． Ｃａｎｃｅｒ、２００５年、４１巻：２８１２〜２８１８頁；Ｔ． Ａｂｏｕｌ−Ｆａｄｌ、Ｃｕｒｒ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ．、２００５年、１２巻：２１９３〜２２１４頁；Ｍ．Ｅ． ＧｌｅａｖｅおよびＢ．Ｐ． Ｍｏｎｉａ、Ｎａｔ． Ｒｅｖ． Ｃａｎｃｅｒ、２００５年、５巻：４６８〜４７９頁；Ｙ．Ｓ． Ｃｈｏ−Ｃｈｕｎｇ、Ｃｕｒｒ． Ｐｈａｒｍ． Ｄｅｓ．、２００５年、１１巻：２８１１〜２８２３頁；Ｅ． Ｒａｙｂｕｒｎら、Ｌｅｔｔ． Ｄｒｕｇ Ｄｅｓｉｇｎ ＆ Ｄｉｓｃｏｖ．、２００５年、２巻：１〜１８頁；Ｅ．Ｒ． Ｒａｙｂｕｒｎら、Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎ． Ｅｍｅｒｇ． Ｄｒｕｇｓ、２００６年、１１巻：３３７〜３５２頁；Ｉ． ＴａｍｍおよびＭ． Ｗａｇｎｅｒ、Ｍｏｌ． Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．、２００６年、３３巻：２２１〜２３８頁（そのそれぞれについて、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
適切なアンチセンスオリゴヌクレオチドの例としては、例えば、ｂｃ１−２ ｍＲＮＡの開始コドン領域を標的とするホスホロチオエートオリゴマーであるオブリメルセンナトリウム（Ｇｅｎａｓｅｎｓｅ（商標）またはＧ３１２３９としても公知であり、Ｇｅｎｔａ、Ｉｎｃ．、Ｂｅｒｋｅｌｅｙ Ｈｅｉｇｈｔｓ、ＮＪによって開発された）が挙げられる。Ｂｃ１−２は、アポトーシスの強力な阻害剤であり、濾胞性リンパ腫、乳癌、結腸癌、前立腺癌、および中悪性度／高悪性度のリンパ腫を含めた多くの癌において過剰発現される（Ｃ．Ａ． Ｓｔｅｉｎら、Ｓｅｍｉｎ． Ｏｎｃｏｌ．、２００５年、３２巻：５６３〜５７３頁；Ｓ．Ｒ． Ｆｒａｎｋｅｌ、Ｓｅｍｉｎ． Ｏｎｃｏｌ．、２００３年、３０巻：３００〜３０４頁）。他の適切なアンチセンスオリゴヌクレオチドとしては、ｃＡＭＰ依存性プロテインキナーゼＡ（ＰＫＡ）を対象とする混合型骨格オリゴヌクレオチドであるＧＥＭ−２３１（ＨＹＢ０１６５、Ｈｙｂｒｉｄｏｎ、Ｉｎｃ．、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ、ＭＡ）（Ｓ． Ｇｏｅｌら、Ｃｌｉｎ． Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．、２０３、９巻：４０６９〜４０７６頁）；Ａｆｆｉｎｉｔａｋ（ＩＳＩＳ ３５２１またはアプリノカルセン（ａｐｒｉｎｏｃａｒｓｅｎ）、ＩＳＩＳ ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ、Ｉｎｃ．、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ）、ＰＫＣ−アルファのアンチセンス阻害剤；細胞周期の制御、組織リモデリング、脂質輸送、および細胞死に関係づけられる糖タンパク質であり、乳癌、前立腺癌および結腸癌において過剰発現されるクラステリンに対する２’−メトキシエチル修飾されたアンチセンスオリゴヌクレオチドであるＯＧＸ−０１１（Ｉｓｉｓ １１２９８９、Ｉｓｉｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ、Ｉｎｃ．）；ｃ−ｒａｆ−１ ｍＲＮＡの３’−非翻訳領域の配列と相補的なホスホロチオエートオリゴヌクレオチドであるＩＳＩＳ ５１３２（Ｉｓｉｓ １１２９８９、Ｉｓｉｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ、Ｉｎｃ．）（Ｓ．Ｐ． Ｈｅｎｒｙら、Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ
Ｄｒｕｇ Ｄｅｓ．、１９９７年、１２巻：４０９〜４２０頁；Ｂ．Ｐ． Ｍｏｎｉａら、Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ、１９９６年、９３巻：１５４８１〜１５４８４頁；Ｃ．Ｍ． Ｒｕｄｉｎら、Ｃｌｉｎ． Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．、２００１年、７巻：１２１４〜１２２０頁）；ヒトＨ−ｒａｓ ｍＲＮＡの発現のホスホロチオエートオリゴヌクレオチドアンチセンス阻害剤であるＩＳＩＳ ２５０３（Ｉｓｉｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ、Ｉｎｃ．）（Ｊ． Ｋｕｒｒｅｃｋ、Ｅｕｒ． Ｊ． Ｂｉｏｃｈｅｍ．、２００３年、２７０巻：１６２８〜１６４４頁）；アポトーシス経路のかなりの部分を遮断するＸ連鎖アポトーシス抑制タンパク（ＸＩＡＰ）を標的とするオリゴヌクレオチド、例えば、ＧＥＭ ６４０（ＡＥＧ ３５１５６、Ａｅｇｅｒａ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ Ｉｎｃ．およびＨｙｂｒｉｄｏｎ，Ｉｎｃ．）など、または、アポトーシスタンパク質の阻害剤（ＩＡＰ）であるターゲティングサバイビンを標的とするオリゴヌクレオチド、例えば、２’−Ｏ−メトキシエチルキメラオリゴヌクレオチドであるＩＳＩＳ ２３７２２（Ｉｓｉｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ、Ｉｎｃ．）など；ＤＮＡメチルトランスフェラーゼを標的とするＭＧ９８；ならびにヒトリボヌクレオチド還元酵素のＲ２小サブユニットコンポーネントのｍＲＮＡ内のコード領域と相補的な２０−ｍｅｒのオリゴヌクレオチドであるＧＴＩ−２０４０（Ｌｏｒｕｓ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、Ｉｎｃ． Ｔｏｒｏｎｔｏ、Ｃａｎａｄａ）が挙げられる。
他の適切なアンチセンスオリゴヌクレオチドとしては、Ｈｅｒ−２／ｎｅｕ、ｃ−Ｍｙｂ、ｃ−Ｍｙｃ、およびｃ−Ｒａｆに対して開発されているアンチセンスオリゴヌクレオチドが挙げられる（例えば、Ａ． Ｂｉｒｏｃｃｉｏら、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ、２００３年、２２巻：６５７９〜６５８８頁；Ｙ． Ｌｅｅら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．、２００３年、６３巻：２８０２〜２８１１頁；Ｂ． Ｌｕら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．、２００４年、６４巻：２８４０〜２８４５頁；Ｋ．Ｆ． Ｐｉｒｏｌｌｏら、Ｐｈａｒｍａｃｏｌ． Ｔｈｅｒ．、２００３年、９９巻：５５〜７７頁；およびＡ． Ｒａｉｔら、Ａｎｎ． Ｎ． Ｙ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ．、２００３年、１００２巻：７８〜８９頁を参照されたい）。
ある特定の実施形態では、本発明のクロロトキシンコンジュゲートは、干渉ＲＮＡ分子を含む、またはそれをコードする核酸抗癌剤を含む。「干渉ＲＮＡ」および「干渉ＲＮＡ分子」という用語は、本明細書では互換的に使用され、遺伝子発現を阻害または下方制御すること、または遺伝子を配列特異的に、例えば、ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）を媒介することによってサイレンシングすることができるＲＮＡ分子を指す。ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）は、二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）によって誘発される進化的に保存された配列特異的な機構であり、相補的な標的一本鎖ｍＲＮＡの分解および対応する翻訳配列の「サイレンシング」を誘導する（ＭｃＭａｎｕｓおよびＳｈａｒｐ、２００２年、Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖ． Ｇｅｎｅｔ．、２００２年、３巻：７３７頁）。ＲＮＡｉは、長いｄｓＲＮＡ鎖を、生物活性のある長さが約２１〜２３ヌクレオチドの「低分子干渉ＲＮＡ」（ｓｉＲＮＡ）配列に酵素的に切断することによって機能する（Ｅｌｂａｓｈｉｒら、Ｇｅｎｅｓ Ｄｅｖ．、２００１年、１５巻：１８８頁）。ＲＮＡ干渉は、癌の療法のための有望な手法として現れた。
本発明の実施において使用するために適した干渉ＲＮＡは、いくつかの形態のいずれでも提供することができる。例えば、干渉ＲＮＡは、単離された低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、または低分子ヘアピン型ＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）の１つまたは複数として提供することができる。
本発明において使用するために適した干渉ＲＮＡ分子の例としては、例えば、以下の概説において引用されているｉＲＮＡが挙げられる：Ｏ． Ｍｉｌｈａｖｅｔら、Ｐｈａｒｍａｃｏｌ． Ｒｅｖ．、２００３年、５５巻：６２９〜６４８頁；Ｆ． Ｂｉら、Ｃｕｒｒ． Ｇｅｎｅ． Ｔｈｅｒ．、２００３年、３巻：４１１〜４１７頁；Ｐ．Ｙ． Ｌｕら、Ｃｕｒｒ． Ｏｐｉｎ． Ｍｏｌ． Ｔｈｅｒ．、２００３年、５巻：２２５〜２３４頁；Ｉ． Ｆｒｉｅｄｒｉｃｈら、Ｓｅｍｉｎ． Ｃａｎｃｅｒ Ｂｉｏｌ．、２００４年、１４巻：２２３〜２３０頁；Ｍ． Ｉｚｑｕｉｅｒｄｏ、Ｃａｎｃｅｒ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ．、２００５年、１２巻：２１７〜２２７頁；Ｐ．Ｙ． Ｌｕら、Ａｄｖ．
Ｇｅｎｅｔ．、２００５年、５４巻：１１７〜１４２頁；Ｇ．Ｒ． Ｄｅｖｉ、Ｃａｎｃｅｒ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ．、２００６年、１３巻：８１９〜８２９頁；Ｍ．Ａ． Ｂｅｈｌｋｅ、Ｍｏｌ． Ｔｈｅｒ．、２００６年、１３巻：６４４〜６７０頁；およびＬ．Ｎ． Ｐｕｔｒａｌら、Ｄｒｕｇ Ｎｅｗｓ Ｐｅｒｓｐｅｃｔ．、２００６年、１９巻：３１７〜３２４頁（そのそれぞれの内容について、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
適切な干渉ＲＮＡ分子の他の例としては、これらに限定されないが、ｐ５３干渉ＲＮＡ（例えば、Ｔ．Ｒ． Ｂｒｕｍｍｅｌｋａｍｐら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２００２年、２９６巻：５５０〜５５３頁；Ｍ．Ｔ． Ｈｅｍｍａｎら、Ｎａｔ． Ｇｅｎｅｔ．、２００３年、３３巻：３９６〜４００頁）；慢性骨髄性白血病および急性リンパ芽球性白血病の発症に関連するｂｃｒ−ａｂｌ融合を標的とする干渉ＲＮＡ（例えば、Ｍ． Ｓｃｈｅｒｒら、Ｂｌｏｏｄ、２００３年、１０１巻：１５６６〜１５６９頁；Ｍ．Ｊ． Ｌｉら、Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ、２００３年、１３巻：４０１〜４０９頁）、未分化大細胞リンパ腫の７５％に見いだされ、腫瘍形成に関連する構成的に活性なキナーゼの発現を導くタンパク質であるＮＰＭ−ＡＬＫの発現を阻害する干渉ＲＮＡ（Ｕ． Ｒｉｔｔｅｒら、Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ、２００３年、１３巻：３６５〜３７３頁）；Ｒａｆ−１（Ｔ．Ｆ． Ｌｏｕら、Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ、２００３年、１３巻：３１３〜３２４頁）、Ｋ−Ｒａｓ（Ｔ．Ｒ． Ｂｒｕｍｍｅｌｋａｍｐら、Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ、２００２年、２巻：２４３〜２４７頁）、ｅｒｂＢ−２（Ｇ． Ｙａｎｇら、Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ．、２００４年、２７９巻：４３３９〜４３４５頁）などの癌遺伝子を標的とする干渉ＲＮＡ；過剰発現すると、結腸直腸癌における主要な形質転換事象であると考えられているＴ細胞因子標的遺伝子のトランス活性化が導かれるｂ−カテニンタンパク質を標的とする干渉ＲＮＡ（Ｍ． ｖａｎ ｄｅ Ｗｅｔｅｒｉｎｇら、ＥＭＢＯ Ｒｅｐ．、２００３年、４巻：６０９〜６１５頁）が挙げられる。
ある特定の実施形態では、クロロトキシンコンジュゲートは、リボザイムである核酸治療剤を含む。本明細書で使用される場合、「リボザイム」という用語は、他のＲＮＡ分子を標的特異的に切断することができる、触媒作用のあるＲＮＡ分子を指す。リボザイムを使用して、対象の遺伝子の任意の望ましくない産物の発現を下方制御することができる。本発明の実施において使用することができるリボザイムの例としては、これらに限定されないが、ヒト、マウス、およびラットの血管内皮増殖因子受容体（ＶＥＧＦＲ）−１のｍＲＮＡの保存された領域を標的とするリボザイムであるＡＮＧＩＯＺＹＭＥ（商標）（ＲＰＩ．４６１０、Ｓｉｍａ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、Ｂｏｕｌｄｅｒ、ＣＯ）、およびＨｅｒｚｙｍｅ（Ｓｉｍａ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）が挙げられる。
光増感剤
ある特定の実施形態では、クロロトキシンコンジュゲート内の実体または部分は、光線力学的療法（ＰＤＴ）において使用される光増感剤を含む。ＰＤＴでは、患者に光増感剤を局所投与または全身投与した後、治療される組織または器官において光増感剤によって吸収される光を照射する。光増感剤によって光が吸収されることにより、細胞に対して有害な反応性種（例えば、ラジカル）が生成する。効力を最大にするために、光増感剤は、一般には、投与するために適した形態であり、また、多くの場合、正常組織に対するある程度の選択性を伴って、標的部位において容易に細胞の内部移行を受けることができる形態でもある。
いくつかの光増感剤（例えば、Ｐｈｏｔｏｆｒｉｎ（登録商標）、ＱＬＴ、Ｉｎｃ．、Ｖａｎｃｏｕｖｅｒ、ＢＣ、Ｃａｎａｄａ）が単純な水溶液の一部として首尾よく送達されているが、そのような水溶液は、テトラピロールまたはポリピロールに基づく構造を有するものなどの疎水性の光増感薬に適さない場合がある。これらの薬物は、分子が積み重なることによって凝集する固有の傾向があり、その結果、光増感プロセスの効力が著しく低下する（Ｓｉｇｇｅｌら、Ｊ． Ｐｈｙｓ． Ｃｈｅｍ．、１９９６年、１００巻：２０７０〜２０７５頁）。凝集を最小限にするための手法としては、リポソーム製剤（例えば、ベンゾポルフィリン誘導体一酸Ａ、ＢＰＤＭＡ、Ｖｅｒｔｅｐｏｒｆｉｎ（登録商標）、ＱＬＴ、Ｉｎｃ．、Ｖａｎｃｏｕｖｅｒ、Ｃａｎａｄａ；および亜鉛フタロシアニン、ＣＩＢＡ−Ｇｅｉｇｙ、Ｌｔｄ．、Ｂａｓｅｌ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）、および光増感剤を生体適合性ブロック共重合体とコンジュゲートし（Ｐｅｔｅｒｓｏｎら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．、１９９６年、５６巻：３９８０〜３９８５頁）かつ／または抗体とコンジュゲートすること（Ｏｍｅｌｙａｎｅｎｋｏら、Ｉｎｔ． Ｊ． Ｃａｎｃｅｒ、１９９８年、７５巻：６００〜６０８頁）が挙げられる。
光増感剤と結びついた低リジンクロロトキシンポリペプチドを含むクロロトキシンコンジュゲートは、ＰＤＴにおける新しい送達系として使用することができる。光増感剤の凝集を低下させることに加えて、本発明による光増感剤を送達することにより、その他の利点、例えば、標的組織／器官に対する特異性の増加および光増感剤の細胞の内部移行などが示される。
本発明において使用するために適した光増感剤としては、ＰＤＴにおいて有用な光感作性を有する種々の合成分子および天然に存在する分子の任意のものが挙げられる。ある特定の実施形態では、光増感剤の吸収スペクトルは、可視範囲であり、一般には、３５０ｎｍから１２００ｎｍの間であり、４００ｎｍから９００ｎｍの間、例えば、６００ｎｍから９００ｎｍの間であることが好ましい。本発明に従って毒素とカップリングすることができる適切な光増感剤としては、これらに限定されないが、ポルフィリンおよびポルフィリン誘導体（例えば、クロリン、バクテリオクロリン、イソバクテリオクロリン、フタロシアニン、およびナフタロシアニン）；メタロポルフィリン、メタロフタロシアニン、アンゲリシン、カルコゲナピリリウム（ｃｈａｌｃｏｇｅｎａｐｙｒｒｉｌｌｉｕｍ）色素、クロロフィル、クマリン、フラビンおよび関連する化合物、例えば、アロキサジンおよびリボフラビンなど、フラーレン、フェオホルビド、ピロフェオホルビド、シアニン（例えば、メロシアニン５４０）、フェオフィチン、サフィリン、テキサフィリン、プルプリン、ポルフィセン、フェノチアジニウム、メチレンブルー誘導体、ナフタルイミド、ナイルブルー誘導体、キノン、ペリレンキノン（例えば、ヒペリシン、ヒポクレリン、およびセルコスポリン）、プソラレン、キノン、レチノイド、ローダミン、チオフェン、バーディン（ｖｅｒｄｉｎ）、キサンテン色素（例えば、エオシン、エリスロシン、ローズベンガル）、ポルフィリンの二量体の形態およびオリゴマーの形態、ならびに５−アミノレブリン酸などのプロドラッグが挙げられる（Ｒ．Ｗ． ＲｅｄｍｏｎｄおよびＪ．Ｎ． Ｇａｍｌｉｎ、Ｐｈｏｔｏｃｈｅｍ． Ｐｈｏｔｏｂｉｏｌ．、１９９９年、７０巻：３９１〜４７５頁）。
本発明において使用するために適した例示的な光増感剤としては、米国特許第５，１７１，７４１号；同第５，１７１，７４９号；同第５，１７３，５０４号；同第５，３０８，６０８号；同第５，４０５，９５７号；同第５，５１２，６７５号；同第５，７２６，３０４号；同第５，８３１，０８８号；同第５，９２９，１０５号；同第および５，８８０，１４５号（そのそれぞれの内容について、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載のものが挙げられる。
放射線増感剤
ある特定の実施形態では、クロロトキシンコンジュゲートは、放射線増感剤を含む。本明細書で使用される場合、「放射線増感剤」という用語は、腫瘍細胞の放射線療法（ｒａｄｉａｔｉｏｎ ｔｈｅｒａｐｙ）に対する感受性を高める分子、化合物または作用剤を指す。放射線療法を受けている患者に放射線増感剤を投与することにより、一般に、放射線療法の効果が増強される。理想的には、放射線増感剤は、標的細胞に対してのみその機能を発揮する。使いやすさのために、放射線増感剤は、全身投与された場合にさえ、標的細胞を見つけることができるべきである。しかし、現在利用可能な放射線増感剤は、一般には、腫瘍に対して選択的ではなく、哺乳動物の体内に拡散することによって分布する。本発明のクロロトキシンコンジュゲートは、放射線増感剤のための新しい送達系として使用することができる。
種々の放射線増感剤が当技術分野で公知である。本発明において使用するために適した放射線増感剤の例としては、これらに限定されないが、パクリタキセル（ＴＡＸＯＬ（登録商標））、カルボプラチン、シスプラチン、およびオキサリプラチン（Ａｍｏｒｉｎｏら、Ｒａｄｉａｔ． Ｏｎｃｏｌ． Ｉｎｖｅｓｔｉｇ． １９９９年；７巻：３４３〜３５２頁；Ｃｈｏｙ、Ｏｎｃｏｌｏｇｙ、１９９９年、１３巻：２２〜３８頁；Ｓａｆｒａｎら、Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｖｅｓｔ．、２００１年、１９巻：１〜７頁；Ｄｉｏｎｅｔら、Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．、２００２年、２２巻：７２１〜７２５頁；Ｃｉｖｉｄａｌｌｉら、Ｒａｄｉａｔ． Ｏｎｃｏｌ． Ｂｉｏｌ． Ｐｈｙｓ．、２００２年、５２巻：１０９２〜１０９８頁）；ゲムシタビン（Ｇｅｍｚａｒ（登録商標））（Ｃｈｏｙ、Ｏｎｃｏｌｏｇｙ、２０００年、１４巻：７〜１４頁；ＭｏｒｎｅｘおよびＧｉｒａｒｄ、Ａｎｎａｌｓ ｏｆ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ、２００６年、１７巻：１７４３〜１７４７頁）；エタニダゾール（Ｎｉｔｒｏｌｍｉｄａｚｏｌｅ（登録商標））（Ｉｎａｎａｍｉら、Ｉｎｔ． Ｊ． Ｒａｄｉａｔ． Ｂｉｏｌ．、２００２年、７８巻：２６７〜２７４頁）；ミソニダゾール（Ｔａｍｕｌｅｖｉｃｉｕｓら、Ｂｒ． Ｊ． Ｒａｄｉｏｌｏｇｙ、１９８１年、５４巻：３１８〜３２４頁；Ｐａｌｃｉｃら、Ｒａｄｉａｔ． Ｒｅｓ．、１９８４年、１００巻：３４０〜３４７頁）、チラパザミン（Ｍａｓｕｎａｇａら、Ｂｒ． Ｊ． Ｒａｄｉｏｌ．、２００６年、７９巻：９９１〜９９８頁；Ｒｉｓｃｈｉｎら、Ｊ． Ｃｌｉｎ． Ｏｎｃｏｌ．、２００１年、１９巻：５３５〜５４２頁；Ｓｈｕｌｍａｎら、Ｉｎｔ． Ｊ． Ｒａｄｉａｔ． Ｏｎｃｏｌ． Ｂｉｏｌ． Ｐｈｙｓ．、１９９９年、４４巻：３４９〜３５３頁）；ならびに核酸塩基誘導体、例えばハロゲン化プリンまたはハロゲン化ピリミジン、例えば５−フルオロデオキシウリジンなど（Ｂｕｃｈｈｏｌｚら、Ｉｎｔ． Ｊ． Ｒａｄｉａｔ． Ｏｎｃｏｌ． Ｂｉｏｌ． Ｐｈｙｓ．、１９９５年、３２巻：１０５３〜１０５８頁）が挙げられる。
放射性同位元素
ある特定の実施形態では、クロロトキシンコンジュゲートは、放射性同位元素を含む。適切な放射性同位元素の例としては、腫瘍部位に局在すると細胞の破壊をもたらす任意のα−エミッター、β−エミッターまたはγ−エミッターが挙げられる（Ｓ．Ｅ． Ｏｒｄｅｒ、「Ａｎａｌｙｓｉｓ， Ｒｅｓｕｌｔｓ， ａｎｄ Ｆｕｔｕｒｅ Ｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｕｓｅ ｏｆ Ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｅｄ Ａｎｔｉｂｏｄｙ ｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ」、Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｆｏｒ Ｃａｎｃｅｒ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｙ、Ｒ．Ｗ． Ｂａｌｄｗｉｎら（編）、Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ、１９８５年）。そのような放射性同位元素の例としては、これらに限定されないが、ヨウ素１３１（１３１Ｉ）、ヨウ素１２５（１２５Ｉ）、ビスマス２１２（２１２Ｂｉ）、ビスマス２１３（２１３Ｂｉ）、アスタチン２１１（２１１Ａｔ）、レニウム１８６（１８６Ｒｅ）、レニウム１８８（１８８Ｒｅ）、リン３２（３２Ｐ）、イットリウム９０（９０ｙＹ）、サマリウム１５３（１５３Ｓｍ）、およびルテチウム１７７（１７７Ｌｕ）が挙げられる。
スーパー抗原
ある特定の実施形態では、クロロトキシンコンジュゲートは、スーパー抗原またはその生物学的に活性な部分を含む。スーパー抗原は、Ｔ細胞集団の大部分を活性化することにおいて非常に効率的である細菌のタンパク質およびウイルスのタンパク質の一群を構成する。スーパー抗原は、プロセシングされることなく主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）に直接結合する。実際、スーパー抗原は、ＭＨＣクラスＩＩ分子上のプロセシングされていない外側の抗原結合溝に結合し、それによって、従来のペプチド結合部位における多型の大部分を回避する。
固形腫瘍を治療するために、スーパー抗原ベースの、腫瘍を治療する手法が開発されてきた。この手法では、ターゲティング部分、例えば、抗体または抗体断片をスーパー抗原とコンジュゲートし、標的化スーパー抗原をもたらす。抗体または抗体断片が、腫瘍に関連する抗原を認識すると、腫瘍細胞に結合した標的化スーパー抗原が、スーパー抗原によって活性化される細胞傷害性Ｔ細胞を誘発し、スーパー抗原依存性の細胞媒介性細胞傷害によって腫瘍細胞を直接死滅させる。（例えば、その内容の全てが参照により本明細書に組み込まれるＳｏｇａａｒｄら（１９９６年）「Ａｎｔｉｂｏｄｙ−ｔａｒｇｅｔｅｄ ｓｕｐｅｒａｎｔｉｇｅｎｓ ｉｎ ｃａｎｃｅｒ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ」Ｉｍｍｕｎｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、２巻（３号）：１５１〜１６２頁を参照されたい）。
スーパー抗原ベースの腫瘍治療薬はいくつか成功している。例えば、野生型ブドウ球菌のエンテロトキシンＡ（ＳＥＡ）との融合タンパク質が、結腸直腸癌および膵癌の臨床試験において調査されており（そのそれぞれの内容全体が参照により本明細書に組み込まれる、Ｇｉａｎｔｏｎｉｏら、Ｊ． Ｃｌｉｎ． Ｏｎｃｏｌ．、１９９７年、１５巻：１９９４〜２００７頁；Ａｌｐａｕｇｈら、Ｃｌｉｎ． Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．、１９９８年、４巻：１９０３〜１９１４頁；Ｃｈｅｎｇら、Ｊ． Ｃｌｉｎ． Ｏｎｃｏｌ．、２００４年、２２巻：６０２〜６０９頁）；エンテロトキシン遺伝子クラスター（ｅｇｃ）のブドウ球菌のスーパー抗原が、非小細胞肺癌を治療するために研究されており（その内容全体が参照により本明細書に組み込まれるＴｅｒｍａｎら、Ｃｌｉｎ． Ｃｈｅｓｔ Ｍｅｄ．、２００６年、２７巻：３２１〜３２４頁）、また、ブドウ球菌のエンテロトキシンＢが、表在性膀胱癌の膀胱内の免疫療法のために評価されている（その内容全体が、参照により本明細書に組み込まれるＰｅｒａｂｏら、Ｉｎｔ． Ｊ． Ｃａｎｃｅｒ、２００５年、１１５巻：５９１〜５９８頁）。
スーパー抗原、またはその生物学的に活性な部分を、低リジンクロロトキシンポリペプチドに結びつけて、本発明によるクロロトキシンコンジュゲートを形成し、療法、例えば、本明細書に記載の抗癌療法において使用することができる。
本発明において使用するために適したスーパー抗原の例としては、これらに限定されないが、ブドウ球菌のエンテロトキシン（ＳＥ）（例えば、ブドウ球菌のエンテロトキシンＡ（ＳＥＡ）またはブドウ球菌のエンテロトキシンＥ（ＳＥＥ））、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓの外毒素（ＳＰＥ）、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓの毒素性ショック症候群毒素（ＴＳＳＴ−１）、連鎖球菌の分裂促進性外毒素（ＳＭＥ）、連鎖球菌のスーパー抗原（ＳＳＡ）、およびエンテロトキシン遺伝子クラスターのブドウ球菌のスーパー抗原が挙げられる。当業者に公知の通り、上で列挙されているスーパー抗原の三次元構造は、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｄａｔａ Ｂａｎｋから得ることができる。同様に、上で列挙されているスーパー抗原および他のスーパー抗原の核酸配列およびアミノ酸配列は、ＧｅｎＢａｎｋから得ることができる。
プロドラッグ活性化酵素
ある特定の実施形態では、本発明のクロロトキシンコンジュゲートは、指向性酵素プロドラッグ療法において使用することができる。指向性酵素プロドラッグ療法の手法では、指向性／標的化酵素およびプロドラッグを被験体に投与し、標的化酵素は、被験体の体の、プロドラッグを活性な薬物に変換する部分に特に局在する。プロドラッグは、一段階で（標的化酵素によって）、または二段階以上で活性な薬物に変換することができる。例えば、プロドラッグは、標的化酵素によって活性な薬物の前駆物質に変換することができる。次いで、前駆物質を、例えば、１種または複数種の追加的な標的化酵素、被験体に投与された１種または複数種の非標的化酵素、被験体内に、または被験体の標的部位に天然に存在する１種または複数種の酵素（例えば、プロテアーゼ、ホスファターゼ、キナーゼまたはポリメラーゼ）の触媒活性によって、被験体に投与される作用剤によって、および／または酵素的に触媒されない化学的なプロセス（例えば、酸化、加水分解、異性化、エピマー化など）によって、活性な薬物に変換することができる。
対象の部位に酵素を差し向ける／ターゲティングするために、異なる手法が用いられている。例えば、ＡＤＥＰＴ（抗体指向性酵素プロドラッグ療法）では、腫瘍抗原に対して設計／開発された抗体を、酵素に連結させ、被験体に注射し、それにより腫瘍に酵素を選択的に結合させる。腫瘍の酵素レベルと正常な組織の酵素レベルの識別が十分であれば、被験体にプロドラッグを投与する。プロドラッグは、腫瘍内のみで酵素によってその活性型に変換される。選択性は、抗体の腫瘍特異性によって、および腫瘍の酵素レベルと正常な組織の酵素レベルとの間に大きな格差が出るまでプロドラッグの投与を遅らせることによって実現する。初期の臨床試験では、見込みがあり、ＡＤＥＰＴがその腫瘍に関連する抗体または腫瘍に特異的な抗体が公知である全ての固形癌に対する有効な治療になり得ることが示されている。プロドラッグ活性化酵素をコードする遺伝子も腫瘍にターゲティングされている。この手法は、ウイルス指向性酵素プロドラッグ療法（ＶＤＥＰＴ）、またはより一般的には、ＧＤＥＰＴ（遺伝子指向性酵素プロドラッグ療法と称されており、実験室系において良い結果が示されている。指向性酵素プロドラッグ療法の他のバージョンとしては、ＰＤＥＰＴ（ポリマー指向性酵素プロドラッグ療法）、ＬＥＡＰＴ（レクチン指向性酵素活性化プロドラッグ療法）、およびＣＤＥＰＴ（クロストリジウム指向性酵素プロドラッグ療法）が挙げられる。低リジンクロロトキシンポリペプチドに結びついたプロドラッグ活性化酵素を含む本発明によるコンジュゲートを同様に使用することができる。
本発明において使用するために適した酵素／プロドラッグ／活性な薬物の組み合わせの非限定的な例は、例えば、Ｂａｇｓｈａｗｅら、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎｉｏｎｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、１９９９年、１１巻：５７９〜５８３頁；Ｗｉｌｍａｎ、「Ｐｒｏｄｒｕｇｓ ｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ」、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｓｏｃｉｅｔｙ Ｔｒａｎｓａｃｔｉｏｎｓ、１４巻：３７５〜３８２頁、第６１５回会議、Ｂｅｌｆａｓｔ、１９８６年；Ｓｔｅｌｌａら、「Ｐｒｏｄｒｕｇｓ：Ａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ａｐｐｒｏａｃｈ Ｔｏ Ｔａｒｇｅｔｅｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ」、「Ｄｉｒｅｃｔｅｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ」、Ｂｏｒｃｈａｒｄｔら、（編）、２４７〜２６７頁（Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ、１９８５年）に記載されている。酵素／プロドラッグ／活性な抗癌薬の組み合わせの非限定的な例は、例えば、Ｒｏｏｓｅｂｏｏｍら、Ｐｈａｒｍａｃｏｌ． Ｒｅｖｉｅｗｓ、２００４年、５６巻：５３〜１０２頁に記載されている。
プロドラッグ活性化酵素の例としては、これらに限定されないが、ニトロレダクターゼ、チトクロムＰ４５０、プリンヌクレオシドホスホリラーゼ、チミジンキナーゼ、アルカリホスファターゼ、β−グルクロニダーゼ、カルボキシペプチダーゼ、ペニシリンアミダーゼ、β−ラクタマーゼ、シトシンデアミナーゼ、およびメチオニンγ−リアーゼが挙げられる。
プロドラッグをプロドラッグ活性化酵素によって活性化することによりｉｎ ｖｉｖｏで形成することができる抗癌薬の例としては、これらに限定されないが、５−（アジリジン−１−イル（ｙ１））４−ヒドロキシル−アミノ−２−ニトロ−ベンズアミド、イソホスホルアミドマスタード、ホスホルアミドマスタード、２−フルオロアデニン、６−メチルプリン、ガンシクロビル三リン酸ヌクレオチド、エトポシド、マイトマイシンＣ、ｐ−［Ｎ，Ｎ−ビス（２−クロロエチル）アミノ］フェノール（ＰＯＭ）、ドキソルビシン、オキサゾリジノン、９−アミノカンプトテシン、マスタード、メトトレキサート、安息香酸マスタード、ドキソルビシン、アドリアマイシン、ダウノマイシン、カルミノマイシン、ブレオマイシン、エスペラミシン、メルファラン、パリトキシン、４−デスアセチルビンブラスチン−３−カルボン酸ヒドラジド、フェニレンジアミンマスタード、４’−カルボキシフタラト（１，２−シクロヘキサン−ジアミン）白金、タキソール、５−フルオロウラシル、メチルセレノール、およびカルボノチオニックジフルオリド（ｃａｒｂｏｎｏｔｈｉｏｎｉｃ ｄｉｆｌｕｏｒｉｄｅ）が挙げられる。
ｂ．抗血管新生薬
ある特定の実施形態では、本発明のクロロトキシンコンジュゲート内の治療剤（例えば、抗癌剤）は、抗血管新生薬を含む。本発明において使用するために適した抗血管新生薬としては、血管新生のプロセス、または既存の血管から発達することによって新しい血管が形成されるプロセスを遮断する、阻害する、減速する、または低下させる任意の分子、化合物、または因子が挙げられる。そのような分子、化合物、または因子は、これらに限定されないが、（１）発生している血管の膜が溶解されるステップ、（２）内皮細胞が移動し、増殖するステップ、および（３）細胞が移動することにより新しい脈管構造が形成されるステップを含めた血管新生に関与するステップのいずれかを遮断すること、阻害すること、減速させること、または低下させることによって血管新生を遮断することができる。
抗血管新生薬の例としては、これらに限定されないが、ベバシズマブ（ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標））、セレコキシブ（ＣＥＬＥＢＲＥＸ（登録商標））、エンドスタチン、サリドマイド、ＥＭＤ１２１９７４（シレンジタイド）、ＴＮＰ−４７０、スクアラミン、コンブレタスタチンＡ４、インターフェロン−α、抗ＶＥＧＦ抗体、ＳＵ５４１６、ＳＵ６６６８、ＰＴＫ７８７／２Ｋ２２５８４、マリミスタール（Ｍａｒｉｍｉｓｔａｌ）、ＡＧ３３４０、ＣＯＬ−３、ネオバスタット（Ｎｅｏｖａｓｔａｔ）、およびＢＭＳ−２７５２９１が挙げられる。
抗血管新生薬は、これらに限定されないが、抗癌療法および黄斑変性症に対する療法を含めた種々の治療的な状況において使用することができる。
当業者には理解される通り、本明細書において引用されている治療剤特定の例は、本発明の実施において使用するために適した治療剤のうちの非常に少数のみを示している。
２．検出可能な実体／部分
ある特定の実施形態では、提供されるコンジュゲートは、１つまたは複数の検出可能な実体または部分を含む、すなわち、コンジュゲートは、そのような実体または部分で「標識されている」。いくつかのそのような実施形態では、そのようなコンジュゲートは、診断への適用において有用である。
多種多様な検出可能な作用剤はいずれも、本発明の実施において使用することができる。適切な検出可能な作用剤としては、これらに限定されないが、種々のリガンド、放射性核種；蛍光色素；化学発光剤（例えば、アクリジニウム（ａｃｒｉｄｉｎｕｍ）エステル、安定化されたジオキセタンなど）；生物発光剤；スペクトル分解可能な無機蛍光半導体ナノ結晶（すなわち、量子ドット）；微小粒子；金属ナノ粒子（例えば、金、銀、銅、白金など）；ナノクラスター；常磁性金属イオン；酵素；比色標識（例えば、色素、コロイド金など）；ビオチン；ジゴキギゲニン（ｄｉｏｘｉｇｅｎｉｎ）；ハプテン；およびそれに対する抗血清またはモノクローナル抗体が入手可能なタンパク質が挙げられる。
ａ．放射性の同位元素またはイオンおよび／または常磁性の同位元素またはイオン
ある特定の実施形態では、低リジンクロロトキシンポリペプチドを、放射性の同位元素またはイオンおよび／または常磁性の同位元素またはイオンで標識する。例えば、低リジンクロロトキシンポリペプチドは、同位体で標識することができる（すなわち、自然界に通常見いだされる原子質量または質量数とは異なる原子質量または質量数を有する原子で置き換えられた１つまたは複数の原子を含有してよい）または同位元素を、低リジンクロロトキシンポリペプチドに付着させることができる。低リジンクロロトキシンポリペプチドに組み込むことができる同位元素の非限定的な例としては、水素、炭素、フッ素、亜リン酸、銅、ガリウム、イットリウム、テクネチウム、インジウム、ヨウ素、レニウム、タリウム、ビスマス、アスタチン、サマリウム、およびルテチウムの同位元素（すなわち、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１８Ｆ、３２Ｐ、３５Ｓ、６４Ｃｕ、６７Ｇａ、９０Ｙ、９９ＭＴｃ、１１１Ｉｎ、１２５Ｉ、１２３Ｉ、１２９Ｉ、１３１Ｉ、１３５Ｉ、１８６Ｒｅ、１８７Ｒｅ、２０１Ｔｌ、２１２Ｂｉ、２１１Ａｔ、１５３Ｓｍ、１７７Ｌｕ）が挙げられる。
ある特定の実施形態では、低リジンクロロトキシンポリペプチドは、単一光子放射型コンピュータ断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）またはポジトロン放出断層撮影法（ＰＥＴ）によって検出可能な放射性同位元素を含む。そのような放射性核種の例としては、これらに限定されないが、ヨウ素１３１（１３１Ｉ）、ヨウ素１２５（１２５Ｉ）、ビスマス２１２（２１２Ｂｉ）、ビスマス２１３（２１３Ｂｉ）、アスタチン２２１（２２１Ａｔ）、銅６７（６７Ｃｕ）、銅６４（６４Ｃｕ）、レニウム１８６（１８６Ｒｅ）、レニウム１８８（１８８Ｒｅ）、リン３２（３２Ｐ）、サマリウム１５３（１５３Ｓｍ）、ルテチウム１７７（１７７Ｌｕ）、テクネチウム９９ｍ（９９ｍＴｃ）、ガリウム６７（６７Ｇａ）、インジウム１１１（１１ｌＩｎ）、およびタリウム２０１（２０１Ｔｌ）が挙げられる。
ある特定の実施形態では、低リジンクロロトキシンポリペプチドを、ガンマカメラによって検出可能な放射性同位元素で標識する。そのような放射性同位元素の例としては、これらに限定されないが、ヨウ素１３１（１３１Ｉ）、およびテクネチウム９９ｍ（９９ｍＴｃ）が挙げられる。
ある特定の実施形態では、低リジンクロロトキシンポリペプチドを、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）における優良なコントラスト増強剤である常磁性金属イオンで標識する。そのような常磁性金属イオンの例としては、これらに限定されないが、ガドリニウム（ＩＩＩ）（Ｇｄ３＋）、クロム（ＩＩＩ）（Ｃｒ３＋）、ジスプロシウム（ＩＩＩ）（Ｄｙ３＋）、鉄（ＩＩＩ）（Ｆｅ３＋）、マンガン（ＩＩ）（Ｍｎ２＋）、およびイッテルビウム（ＩＩＩ）（Ｙｂ３＋）が挙げられる。ある特定の実施形態では、標識化部分は、ガドリニウム（ＩＩＩ）（Ｇｄ３＋）を含む。ガドリニウムは、ＦＤＡに承認されたＭＲＩ用のコントラスト剤であり、異常な組織に蓄積し、これらの異常な領域を磁気共鳴の画像上で非常に明るくする（増強する）。ガドリニウムにより、体の種々の領域、特に脳において、正常な組織と異常な組織との間に大きなコントラストがもたらされることが公知である。
ある特定の実施形態では、低リジンクロロトキシンポリペプチドを、核磁気共鳴分光法（ＭＲＳ）によって検出可能な安定な常磁性の同位元素で標識する。適切な安定な常磁性の同位元素の例としては、これらに限定されないが、炭素１３（１３Ｃ）およびフッ素１９（１９Ｆ）が挙げられる。
一部の実施形態では、低リジンクロロトキシンコンジュゲートに金属同位元素をキレート化によって非共有結合的に付着させる。キレート化の例としては、金属同位元素の、低リジンクロロトキシンポリペプチドに融合したポリＨｉｓ領域へのキレート化が挙げられる。
一部の実施形態では、ガドリニウム（Ｇｄ）などの金属を、上記の通り、共有結合によって、またはキレート化によって低リジンクロロトキシンポリペプチドに組み込む。
ｂ．蛍光色素
ある特定の実施形態では、低リジンクロロトキシンポリペプチドを、蛍光色素で標識する。多種多様な化学構造および物理的特性の多数の公知の蛍光色素が、本発明の実施において使用するために適している。適切な蛍光色素としては、これらに限定されないが、フルオレセインおよびフルオレセイン色素（例えば、フルオレセインイソチオシアネート（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ ｉｓｏｔｈｉｏｃｙａｎｉｎｅ）またはＦＩＴＣ、ナフトフルオレセイン、４’，５’−ジクロロ−２’，７’−ジメトキシフルオレセイン、６−カルボキシフルオレセインまたはＦＡＭなど）、カルボシアニン、メロシアニン、スチリル色素、オキソノール色素、フィコエリトリン、エリスロシン、エオシン、ローダミン色素（例えば、カルボキシテトラメチルローダミンまたはＴＡＭＲＡ、カルボキシローダミン６Ｇ、カルボキシ−Ｘ−ローダミン（ＲＯＸ）、リサミンローダミンＢ、ローダミン６Ｇ、ローダミングリーン、ローダミンレッド、テトラメチルローダミン（ＴＭＲ）など）、クマリンおよびクマリン色素（例えば、メトキシクマリン、ジアルキルアミノクマリン、ヒドロキシクマリン、アミノメチルクマリン（ＡＭＣＡ）など）、Ｏｒｅｇｏｎ Ｇｒｅｅｎ色素（例えば、Ｏｒｅｇｏｎ Ｇｒｅｅｎ ４８８、Ｏｒｅｇｏｎ Ｇｒｅｅｎ ５００、Ｏｒｅｇｏｎ Ｇｒｅｅｎ ５１４など）、Ｔｅｘａｓ Ｒｅｄ、Ｔｅｘａｓ Ｒｅｄ−Ｘ、ＳＰＥＣＴＲＵＭ ＲＥＤ（商標）、ＳＰＥＣＴＲＵＭ ＧＲＥＥＮ（登録商標）、シアニン色素（例えば、ＣＹ−３（商標）、ＣＹ−５（商標）、ＣＹ−３．５（商標）、ＣＹ−５．５（商標）など）、ＡＬＥＸＡ ＦＬＵＯＲ（商標）色素（例えば、ＡＬＥＸＡ ＦＬＵＯＲ（商標）３５０、ＡＬＥＸＡ ＦＬＵＯＲ（商標）４８８、ＡＬＥＸＡ ＦＬＵＯＲ（商標）５３２、ＡＬＥＸＡ ＦＬＵＯＲ（商標）５４６、ＡＬＥＸＡ ＦＬＵＯＲ（商標）５６８、ＡＬＥＸＡ ＦＬＵＯＲ（商標）５９４、ＡＬＥＸＡ ＦＬＵＯＲ（商標）６３３、ＡＬＥＸＡ ＦＬＵＯＲ（商標）６６０、ＡＬＥＸＡ ＦＬＵＯＲ（商標）６８０など）、ＢＯＤＩＰＹ（商標）色素（例えば、ＢＯＤＩＰＹ（商標）ＦＬ、ＢＯＤＩＰＹ（商標）Ｒ６Ｇ、ＢＯＤＩＰＹ（商標）ＴＭＲ、ＢＯＤＩＰＹ（商標）ＴＲ、ＢＯＤＩＰＹ（商標）５３０／５５０、ＢＯＤＩＰＹ（商標）５５８／５６８、ＢＯＤＩＰＹ（商標）５６４／５７０、ＢＯＤＩＰＹ（商標）５７６／５８９、ＢＯＤＩＰＹ（商標）５８１／５９１、ＢＯＤＩＰＹ（商標）６３０／６５０、ＢＯＤＩＰＹ（商標）６５０／６６５など）、ＩＲＤｙｅｓ（例えば、ＩＲＤ４０、ＩＲＤ ７００、ＩＲＤ ８００など）などが挙げられる。適切な蛍光色素のさらなる例および蛍光色素をタンパク質およびペプチドなどの他の化学的な実体にカップリングさせるための方法については、例えば、「Ｔｈｅ Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ Ｐｒｏｂｅｓ ａｎｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ」、第９版、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ、Ｉｎｃ．、Ｅｕｇｅｎｅ、ＯＲを参照されたい。蛍光標識剤の好都合な性質としては、高いモル吸収係数、高い蛍光量子収率、および光安定性が挙げられる。一部の実施形態では、標識化フルオロフォアは、スペクトルの紫外線領域内（すなわち、４００ｎｍ未満）ではなく可視の（すなわち、４００ｎｍから７５０ｎｍの間の）吸収波長および放出波長を示す。
ｃ．酵素
ある特定の実施形態では、低リジンクロロトキシンポリペプチドを、酵素で標識する。適切な酵素の例としては、これらに限定されないが、ＥＬＩＳＡにおいて使用されるもの、例えば、西洋ワサビペルオキシダーゼ、ベータガラクトシダーゼ、ルシフェラーゼ、アルカリホスファターゼなどが挙げられる。他の例としては、ベータグルクロニダーゼ、ベータ−Ｄ−グルコシダーゼ、ウレアーゼ、グルコースオキシダーゼなどが挙げられる。酵素は、カルボジイミド、ジイソシアネート、グルタルアルデヒドなどのリンカー基を使用して低リジンクロロトキシンポリペプチドとコンジュゲートすることができる。
一部の実施形態では、クロロトキシンではない特定の実体または部分が２つ以上の目的を果たし得ることが当業者には理解されよう。例えば、部分は、治療目的と診断目的の両方を有し得る。一例を挙げると、１３１Ｉなどの放射性ヨウ素は、悪性神経膠腫を含めた種々の腫瘍の治療においてクロロトキシンコンジュゲート内の放射標識と細胞傷害性治療剤の両方として使用されてきた。
ＩＩＩ．医薬組成物
本明細書に記載のクロロトキシンコンジュゲートは、それ自体で、かつ／または医薬組成物の形態で投与することができる。一部の実施形態では、有効量の少なくとも１つのクロロトキシンコンジュゲートおよび少なくとも１つの薬学的に許容される担体を含む医薬組成物が提供される。
クロロトキシンコンジュゲート、またはその医薬組成物は、本発明に従って、少なくとも１つの所望の結果を実現するために必要な、またはそのために十分な量および時間で投与することができる。例えば、本発明の医薬組成物は、癌細胞を死滅させる、腫瘍サイズを低下させる、腫瘍の成長または転移を阻害する、種々の白血病を治療する、かつ／またはそれらの疾患を有する哺乳動物（ヒトを含む）の生存時間を延長する、またはそうでなければ、臨床的利益をもたらすような量および時間で投与することができる。
本発明の医薬組成物は、所望の治療効果を実現するために有効な任意の量および任意の投与経路を用いて投与することができる。
投与する医薬組成物の正確な量は、被験体間で、被験体の種、年齢、および全身状態、状態の重症度などに応じて変動する（以下を参照されたい）。
最適な医薬製剤は、投与経路および所望の投与量に応じて変動し得る。そのような製剤は、投与された化合物の物理的な状態、安定性、ｉｎ ｖｉｖｏ放出の速度、およびｉｎ
ｖｉｖｏクリアランスの速度に影響を及ぼす可能性がある。
本発明の医薬組成物は、投与を容易にし、かつ投与量を均一にするために、単位剤形で製剤化することができる。「単位剤形」という表現は、本明細書で使用される場合、クロロトキシンコンジュゲート（１種または複数種の追加的な作用剤を伴う、または伴わない）の、治療される患者に対する物理的に別個の単位を指す。しかし、本発明の組成物の１日の総使用量は、主治医によって良好な医学的判断の範囲内で決定されることが理解されよう。
１つまたは複数の適切な生理的に許容される担体または賦形剤を所望の投与量で製剤化した後、本発明の医薬組成物を、ヒトまたは他の哺乳動物に任意の適切な経路によって投与することができる。錠剤、カプセル剤、注射用溶液などを含めた種々の送達系が公知であり、それを使用してそのような組成物を投与することができる。投与方法としては、これらに限定されないが、経皮経路、皮内経路、筋肉内経路、腹腔内経路、静脈内経路、皮下経路、鼻腔内経路、肺経路、硬膜外経路、眼経路、および経口経路が挙げられる。組成物は、任意の都合のよい経路またはその他の適切な経路によって、例えば、注入またはボーラス注射によって、上皮または皮膚粘膜の内層（例えば、経口、粘膜、直腸および腸粘膜など）を通じた吸収によって投与することができ、また、他の生物学的に活性な作用剤と一緒に投与することができる。投与は、全身的かつ／または局所的であってよい。
注射可能な調製物、例えば、滅菌された注射可能な水性または油性の懸濁液は、公知の技術に従って、適切な分散剤または湿潤剤、および懸濁化剤を使用して製剤化することができる。滅菌された注射可能な調製物は、無毒性の非経口的に許容できる希釈剤または溶媒中の滅菌された注射可能な溶液、懸濁液またはエマルション、例えば、２，３−ブタンジオール中溶液であってもよい。使用することができる許容できるビヒクルおよび溶媒の主なものは、水、リンゲル液、Ｕ．Ｓ．Ｐ．および等張食塩水である。さらに、滅菌された不揮発性油が溶液または懸濁媒体として慣習的に使用される。この目的のために、合成のモノグリセリドまたはジグリセリドを含めた任意の無刺激性の不揮発性油を使用することができる。オレイン酸などの脂肪酸も、注射製剤の調製において使用することができる。滅菌液体担体は、非経口投与するための組成物由来の滅菌液体において有用である。
注射製剤は、例えば、細菌保持フィルターを通して濾過することによって、または、使用する前に滅菌水または他の滅菌注射用媒体に溶解または分散させることができる滅菌固体組成物の形で滅菌剤を組み込むことによって滅菌することができる。滅菌された液剤または懸濁剤である液体の医薬組成物は、例えば、静脈内注射、筋肉内注射、腹腔内注射または皮下注射によって投与することができる。注射は、単回のプッシュによるもの、または段階的な注入（例えば、３０分の静脈内注入）によるものであってよい。必要な場合、組成物は、注射部位の疼痛を和らげるための局所麻酔薬を含んでよい。
薬物の効果を長引かせるために、多くの場合、皮下注射または筋肉内注射からの薬物の吸収を遅くすることが望ましい。これは、難水溶性の結晶性材料または非結晶性材料の液体懸濁液を使用することによって実現することができる。このとき、薬物の吸収速度はその溶解速度に左右され、その溶解速度は同様に、結晶サイズおよび結晶形に左右され得る。あるいは、非経口的に投与した薬物形態の遅延吸収は、油状のビヒクルに薬物を溶解または懸濁させることによって実現される。注射可能なデポ剤の形態は、ポリ乳酸−ポリグリコリドなどの生分解性ポリマー中の薬物というマイクロカプセルに封入したマトリックスを形成することによって製造される。薬物のポリマーに対する比率および使用する特定のポリマーの本質に応じて薬物放出の速度を調節することができる。他の生分解性ポリマーの例としては、ポリ（オルトエステル）およびポリ（酸無水物）が挙げられる。デポ剤注射製剤は、薬物を体組織と適合するリポソーム（脂質小胞としても公知である）またはマイクロエマルションに閉じ込めることによって調製することもできる。
経口投与するための液体剤形としては、これらに限定されないが、薬学的に許容される乳剤、マイクロエマルション、液剤、懸濁剤、シロップ剤、エリキシル剤、および加圧組成物が挙げられる。活性成分（すなわち、コンジュゲート）に加えて、液体剤形は、当技術分野で一般に使用される不活性な希釈剤、例えば、水または他の溶媒、可溶化剤および乳化剤、例えば、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、油（特に、綿実油、落花生油、トウモロコシ油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油、およびゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコールおよびソルビタンの脂肪酸エステル、ならびにそれらの混合物などを含有してよい。不活性な希釈剤に加えて、経口用組成物は、アジュバント、例えば、湿潤剤、懸濁化剤、保存料、甘味料、調味料、および香料、増粘剤、着色料、粘度調節剤、安定剤または浸透圧調節剤なども含んでよい。経口投与するための適切な液体担体の例としては、水（上記の添加物を部分的に含有する；例えば、セルロース誘導体、カルボキシメチル（ｃａｂｏｘｙｍｅｔｈｙｌ）セルロースナトリウム液剤など）、アルコール（一価アルコールおよびグリコールなどの多価アルコールを含む）およびそれらの誘導体、および油（例えば、精留したヤシ油および落花生油））が挙げられる。
経口投与用の固体剤形としては、例えば、カプセル剤、錠剤、丸剤、散剤、および顆粒剤が挙げられる。そのような固体剤形では、活性成分を、少なくとも１つの不活性な生理的に許容される賦形剤または担体、例えば、クエン酸ナトリウムまたはリン酸二カルシウムなど、および：（ａ）増量剤（ｆｉｌｌｅｒ）または増量剤（ｅｘｔｅｎｄｅｒ）、例えば、デンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール、およびケイ酸など；（ｂ）結合剤、例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロース、およびアラビアゴムなど；（ｃ）保湿剤、例えば、グリセロールなど；（ｄ）崩壊剤、例えば、寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモデンプンまたはタピオカデンプン、アルギン酸、ある特定のケイ酸塩、および炭酸ナトリウムなど；（ｅ）溶解遅延剤、例えば、パラフィンなど；（ｆ）吸収促進剤、例えば、四級アンモニウム化合物など；（ｇ）湿潤剤、例えば、セチルアルコールおよびグリセロールモノステアレートなど；（ｈ）吸収剤、例えば、カオリンおよびベントナイト粘土など；および（ｉ）潤滑剤、例えば、タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウムなど、ならびにそれらの混合物の１つまたは複数と混合する。固形製剤用に適した追加的なまたは代替の賦形剤としては、非イオン性表面修飾剤および陰イオン性表面修飾剤などの表面修飾剤が挙げられる。表面修飾剤の代表的な例としては、これらに限定されないが、ポロキサマー１８８、塩化ベンザルコニウム、ステアリン酸カルシウム、セトステアリルアルコール、セトマクロゴール乳化ワックス、ソルビタンエステル、コロイド状二酸化ケイ素、リン酸、ドデシル硫酸ナトリウム、ケイ酸アルミニウムマグネシウム、およびトリエタノールアミンが挙げられる。カプセル剤、錠剤および丸剤の場合では、剤形は、緩衝剤も含んでよい。固体剤形当たりの固体担体の量は、広範に変動する。一部の実施形態では、固体剤形当たりの固体担体の量は、約２５ｍｇから約１ｇまでである。
同種の固体組成物は、例えばラクトースまたは乳糖ならびに高分子量のポリエチレングリコールなどの賦形剤を使用して軟充填ゼラチンカプセルおよび硬充填ゼラチンカプセル中に充填するものとしても使用することができる。錠剤、糖衣錠、カプセル剤、丸剤、および顆粒剤である固体剤形は、腸溶コーティング、制御放出コーティングなどのコーティングおよびシェルおよび製剤の技術分野で周知の他のコーティングを用いて調製することができる。これらの剤形は、場合によって、乳白剤を含有してよく、活性成分（複数可）が、腸管のある特定の一部分にのみ、またはそこに優先的に、場合によって、遅延して放出される組成物であってよい。使用することができる包埋組成物の例としては、ポリマー物質およびワックスが挙げられる。
ある特定の実施形態では、本発明の組成物を、治療を必要とする領域に局部的に投与することが望ましい場合がある。これは、例えば、とりわけ、外科手術の間に局所的に注入することによって、局部的に塗布すること、注射によって、カテーテルを用いて、坐薬を用いて、または皮膚パッチ剤またはステントまたは他の移植片によって実現することができる。
局部的に投与するためのいくつかの組成物は、ゲル剤、軟膏剤、ローション剤、またはクリーム剤として製剤化することができ、それは、水、グリセロール、アルコール、プロピレングリコール、脂肪アルコール、トリグリセリド、脂肪酸エステル、または鉱油などの担体を含んでよい。他の局部用担体としては、流動石油、パルミチン酸イソプロピル、ポリエチレングリコール、エタノール（９５％）、水中ポリオキシエチレンモノラウレート（５％）、または水中ラウリル硫酸ナトリウム（５％）が挙げられる。必要に応じて、抗酸化剤、保湿剤、粘度安定剤、および同様の作用剤などの他の材料を加えることができる。アゾンなどの経皮浸透増強剤も含めることができる。
さらに、特定の例では、組成物は、皮膚の上、皮内または皮下に設置した経皮デバイスの内部に配置することができる。そのようなデバイスとしては、化合物を皮膚の上に、受動的放出機構または能動的放出機構のいずれかによって放出するパッチ剤、移植片、および注射が挙げられる。経皮投与は、上皮組織および粘膜組織を含めた体の表面および体の通路の内層を渡る投与の全てを含む。そのような投与は、ローション剤、クリーム剤、泡剤、パッチ剤、懸濁剤、液剤、および坐剤（直腸用および膣用）において本組成物を使用して行うことができる。
経皮投与は、例えば、活性成分（複数可）および皮膚に対して無毒性の担体を含有する経皮パッチ剤を使用し、活性成分（複数可）の少なくともいくつかを全身的に吸収させるために皮膚を介して血流中に送達させることによって実現することができる。担体は、クリーム剤および軟膏剤、ペースト剤、ゲル剤、および閉塞デバイスなどの任意の数の形態をとってよい。クリーム剤および軟膏剤は、粘性の液体または水中油型または油中水型のいずれかの半固体のエマルションであってよい。活性成分（複数可）を含有する、石油または親水性の石油に分散した吸収性の粉末で構成されるペースト剤も適切であり得る。活性成分（複数可）を含有する貯蔵器を覆う半透性膜などの種々の閉塞デバイスを使用して、活性成分（複数可）を担体、または活性成分を含有するマトリックスと一緒に、またはそれなしで血流中に放出させることができる。
坐薬製剤は、カカオバターを含めた伝統的な材料から、坐薬の融点を変化させるためのワックス、およびグリセリンを添加して、または添加せずに、作製することができる。種々の分子量のポリエチレングリコールなどの水溶性の坐薬基剤も使用することができる。
種々の製剤を作出するための材料および方法は、当技術分野で公知であり、本発明の実施に適応させることができる。
カプセル封入剤
一部の実施形態では、本発明によって提供される組成物は、１つまたは複数のカプセル封入剤を含む。一般に、カプセル封入剤は、コンジュゲートまたは部分などの実体を閉じ込めるために使用することができる任意の生理的に許容できる作用剤であってよい。「閉じ込められた」とは、カプセル封入剤が実体を取り囲む、またはそれを封入し得ることを意味する、または、「閉じ込められた」実体は、カプセル封入剤を含む材料の内部に部分的にまたは完全に埋め込むことができる。
一部の実施形態では、カプセル封入剤は、部分（治療的部分などの）の一部であり、低リジンクロロトキシンポリペプチドをカプセル封入剤とコンジュゲートする。いくつかのそのような実施形態では、低リジンクロロトキシンポリペプチドをカプセル封入剤の外面とコンジュゲートする。いくつかのそのような実施形態では、低リジンクロロトキシンポリペプチドをカプセル封入剤の外部の環境に露出させる。低リジンクロロトキシンポリペプチドは、カプセル封入剤と、直接的な相互作用（非共有結合性または共有結合性であってよい）によってコンジュゲートすることができる、または、カプセル封入剤と、リンカーを介してとコンジュゲートすることができる。
一部の実施形態では、低リジンクロロトキシンポリペプチドおよび部分（例えば、治療的部分）を含むコンジュゲートをカプセル封入剤によって封入することができる。コンジュゲートは、定義済みの空間または環境（例えば、水性の環境）および／またはカプセル封入剤によって創出される空間または環境（例えば、水性の環境）の内部に部分的または完全に封入することができる。一部の実施形態では、コンジュゲートをカプセル封入剤の内部に少なくとも部分的に埋め込む。例えば、カプセル封入剤が、脂質膜を含む場合、コンジュゲートは、膜内の脂質分子の内部またはその間に少なくとも部分的に埋め込むことができる。一部の実施形態では、コンジュゲートをカプセル封入剤の内部に完全に埋め込む。
カプセル封入剤の種々の型が当技術分野で公知であり、同様に、薬物、生体分子などを閉じ込めるためにそのような作用剤を使用する方法も当技術分野で公知である。ある特定の実施形態では、カプセル封入剤は、コアおよび表面を有する小粒子を含む。そのようなカプセル封入剤としては、これらに限定されないが、リポソーム、ミセル、微小粒子、ナノ粒子などが挙げられる。
リポソームは、一般には、だいたい球形状の二重層構造または小胞であり、天然または合成のリン脂質膜で構成される。リポソームは、コレステロールおよびタンパク質などの他の膜コンポーネントをさらに含んでよい。リポソームの内部のコアは、一般には、水溶液を含有する。治療剤および／またはコンジュゲートは、水溶液に溶解させることができる。前記の通り、治療剤およびコンジュゲートは、リポソームの膜の内部に埋め込むことができる。リポソームは、ｓｉＲＮＡなどの阻害性ＲＮＡを含めた核酸薬剤（例えば上記のものなど）などの作用剤を送達するために特に有用であり得る。
ミセルは、一般に、リン脂質の単層で形成され、内部の水溶液を欠く以外はリポソームと同様である。内部の水溶液を含むように作製された逆ミセルも、本発明に従って使用することができる。
一部の実施形態では、粒子は、その寸法の少なくとも１つの平均が約１μｍよりも小さい微小粒子である。例えば、粒子の最小の寸法は、平均で約１００ｎｍ、約１２０ｎｍ、約１４０ｎｍ、約１６０ｎｍ、約１８０ｎｍ、約２００ｎｍ、約２２０ｎｍ、約２４０ｎｍ、約２６０ｎｍ、約２８０ｎｍ、約３００ｎｍ、約３２０ｎｍ、約３４０ｎｍ、約３６０ｎｍ、約３８０ｎｍ、約４００ｎｍ、約４２０ｎｍ、約４４０ｎｍ、約４６０ｎｍ、約４８０ｎｍ、約５００ｎｍ、約５５０ｎｍ、約６００ｎｍ、約６５０ｎｍ、約７００ｎｍ、約７５０ｎｍ、約８００ｎｍ、約８５０ｎｍ、約９００ｎｍ、または約９５０ｎｍであってよい。
一部の実施形態では、粒子は、その寸法の少なくとも１つの平均が約１００μｍよりも小さいナノ粒子である。例えば、粒子の最小の寸法は、平均で約１ｎｍ、約２ｎｍ、約３ｎｍ、約４ｎｍ、約５ｎｍ、約６ｎｍ、約７ｎｍ、約８ｎｍ、約９ｎｍ、約１０ｎｍ、約１１ｎｍ、約１２ｎｍ、約１３ｎｍ、約１４ｎｍ、約１５ｎｍ、約１６ｎｍ、約１７ｎｍ、約１８ｎｍ、約１９ｎｍ、約２０ｎｍ、約２２ｎｍ、約２４ｎｍ、約２６ｎｍ、約２８ｎｍ、約３０ｎｍ、約３２ｎｍ、約３４ｎｍ、約３６ｎｍ、約３８ｎｍ、約４０ｎｍ、約４２ｎｍ、約４４ｎｍ、約４６ｎｍ、約４８ｎｍ、約５０ｎｍ、約５５ｎｍ、約６０ｎｍ、約６５ｎｍ、約７０ｎｍ、約７５ｎｍ、約８０ｎｍ、約８５ｎｍ、約９０ｎｍ、約９５ｎｍ、または約９９ｎｍであってよい。
一部の実施形態では、粒子のコアは、診断への適用および／または治療への適用において有利であり得る磁気共鳴活性を有する材料を含む。磁気共鳴活性を有する材料としては、金属およびそれらの酸化物、例えば、アルミニウム−、コバルト−、インジウム−、鉄−、銅−、ゲルマニウム−、マンガン−、ニッケル−、スズ−、チタン−、パラジウム−、白金−、セレン−、ケイ素−、銀−、亜鉛−などを含有する金属などが挙げられる。
一部の実施形態では、治療剤は、核酸を含む。核酸は、カプセル封入剤の内部に完全に封入することができる。一部の実施形態では、核酸薬剤をカプセル封入剤の内部に埋め込む。例えば、カプセル封入剤は、リポソームであってよく、核酸薬剤（ｎｕｃｌｅｉｃ ａｇｅｎｔ）をリポソームの内部に封入することができる。核酸薬剤は、リポソームの脂質分子の内部に少なくとも部分的に埋め込むことができる。
医薬パックまたは医薬キット
別の態様では、本発明は、本発明のクロロトキシンコンジュゲートの投与を可能にする、本明細書に記載の医薬組成物の１つまたは複数の成分を含有する１つまたは複数の容器（例えば、バイアル、アンプル、試験管、フラスコまたはビン）を含む医薬パックまたは医薬キットを提供する。
ＩＶ．クロロトキシンコンジュゲートの使用方法
ある特定の実施形態では、本明細書に記載のクロロトキシンコンジュゲートを含む組成物を、腫瘍を有するか、または腫瘍を有する疑いがある個体に、コンジュゲートが腫瘍に特異的に結合するように投与するステップを含む方法が提供される。一部の実施形態では、そのような方法は、癌の治療および／または診断において有用である。一部の実施形態では、そのような方法は、個体が腫瘍を発症する可能性、個体における１つまたは複数の腫瘍のサイズが増大する可能性、個体における１つまたは複数の腫瘍が転移する可能性、および／または任意の他の測定（例えば、臨床的病期など）で癌が進行する可能性を低下させることにおいて有用である。
ある特定の実施形態では、本明細書に記載のクロロトキシンコンジュゲートを含む組成物を、異常な血管新生を特徴とする疾患または状態を有するか、または有する疑いがある個体に、クロロトキシンコンジュゲートによって血管新生の程度が低下するように投与するステップを含む方法が提供される。一部の実施形態では、クロロトキシンコンジュゲートにより、新脈管構造の形成が妨げられる。一部の実施形態では、クロロトキシンコンジュゲートにより、現存する新脈管構造の退行が引き起こされる。
Ａ．投与量および投与
本発明による組成物は、ある期間にわたって、単回用量または複数の用量からなるレジメンに従って投与することができる。
クロロトキシンコンジュゲート、またはその医薬組成物は、所望の効果（例えば、治療的効果、診断的効果など）を実現するために有効な任意の投与経路を用いて投与することができる。本発明のある特定の実施形態では、クロロトキシンコンジュゲート（またはその医薬組成物）を全身に送達する。典型的な全身投与経路としては、これらに限定されないが、筋肉内経路、静脈内経路、肺経路、および経口経路が挙げられる。全身投与は、例えば、注入またはボーラス注射によって、または上皮または皮膚粘膜の内層（例えば、経口、粘膜、直腸および腸粘膜など）に吸収させることによって行うこともできる。ある特定の実施形態では、クロロトキシンコンジュゲートは、静脈内に投与する。
その代わりに、またはそれに加えて、他の投与経路も用いることができる。ある特定の実施形態では、クロロトキシンコンジュゲートは、静脈内、頭蓋内（腔内を含む）、筋肉内、腫瘍内、皮下、眼内、眼周囲、局部的適用からなる群から選択される経路によって、またはそれらの組み合わせによって投与する。
以下で考察されているように、眼の新血管形成疾患における血管新生の程度を低下させることが望ましい。一部の実施形態では、クロロトキシンコンジュゲートを眼に送達することができる。眼への送達は、例えば、硝子体内の注射、結膜下注射などなどの眼内経路および／または眼周囲の経路を用いて実現することができる。クロロトキシン作用剤の眼への局部適用は、点眼剤を用いても実現することができる。
投与の眼経路は、黄斑変性症などの眼の新血管形成疾患を治療するために特に有用であり得る。
投与は、毎日１回または多数回、週に１回（または、いくつかの他の複数日の間隔）、または断続的なスケジュールによるものであってよい。例えば、組成物は、数週間（例えば、４〜１０週間）にわたって、週に１回の頻度で１日当たり１回または複数回投与することができる。あるいは、組成物は、数日（例えば、１〜１０日間）にわたって毎日投与した後に数日（例えば、１〜３０日間）投与せず、このサイクルを所与の回数（例えば、２〜１０サイクル）繰り返すことができる。一部の実施形態では、少なくとも２回、少なくとも３回、少なくとも４回、少なくとも５回、または少なくとも６回の投薬を施す。一部の実施形態では、少なくとも２週間、３週間、４週間、５週間、または６週間にわたって、週に１回、組成物を投与する。
投与は、注射（皮下注射、静脈内注射、筋肉内注射、腹腔内注射など）、経口投与、および／または腔内投与によってなど、任意の都合のよい様式で、または様式の任意の組み合わせで行うことができる。
投与経路に応じて、有効用量は、臓器機能、体重、または治療される被験体の体表面積に従って算出することができる。当業者は、ヒト臨床試験において観察された薬物動態データに照らして、適切な投与量の最適化を容易に行うことができる。最後の投薬レジメンは、主治医が、薬物の作用、例えば、薬物の特異的活性、損傷の重症度および患者の反応性、患者の年齢、状態、体重、性別および食事、存在する任意の感染症の重症度、投与時間、並行療法の使用（または不使用）、および他の臨床的因子を考慮して決定することができる。
典型的な投与量は、体重１ｋｇ当たり約１．０ｐｇから体重１ｋｇ当たり約１００ｍｇまでにわたる。（投与量は、本明細書では、コンジュゲートの低リジンクロロトキシンポリペプチド部分の重量単位で提示されている。）
例えば、全身投与するための典型的な投与量は、体重１ｋｇ当たり約１００．０ｎｇから体重１ｋｇ当たり約１０．０ｍｇまでにわたる。例えば、クロロトキシンコンジュゲートを静脈内に投与するある特定の実施形態では、作用剤の投薬は、約０．００１ｍｇ／ｋｇから約５ｍｇ／ｋｇまで、例えば、約０．００１ｍｇ／ｋｇから約５ｍｇ／ｋｇまで、約０．０１ｍｇ／ｋｇから約４ｍｇ／ｋｇまで、約０．０２ｍｇ／ｋｇから約３ｍｇ／ｋｇまで、約０．０３ｍｇ／ｋｇから約２ｍｇ／ｋｇまで、または約０．０３ｍｇ／ｋｇから約１．５ｍｇ／ｋｇまでのクロロトキシンを含む１つまたは複数の用量を投与することを含んでよい。例えば、一部の実施形態では、それぞれが、約０．００２ｍｇ／ｋｇ、約０．００４ｍｇ／ｋｇ、約０．００６ｍｇ／ｋｇ、約０．００８ｍｇ／ｋｇ、約０．００９ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ、約０．０２ｍｇ／ｋｇまたは０．０２ｍｇ／ｋｇを超えるクロロトキシンを含有するクロロトキシンコンジュゲートの１つまたは複数の用量を投与することができる。一部の実施形態では、それぞれが、約０．０３ｍｇ／ｋｇ、約０．０４ｍｇ／ｋｇ、約０．０５ｍｇ／ｋｇ、約０．０６ｍｇ／ｋｇ、約０．０７ｍｇ／ｋｇ、約０．０９ｍｇ／ｋｇ、約１．０ｍｇ／ｋｇまたは１．０ｍｇ／ｋｇを超えるクロロトキシンを含有するクロロトキシンコンジュゲートの１つまたは複数の用量を投与することができる。一部の実施形態では、それぞれが、約０．０５ｍｇ／ｋｇ、約０．１０ｍｇ／ｋｇ、約０．１５ｍｇ／ｋｇ、約０．２０ｍｇ／ｋｇ、約０．２５ｍｇ／ｋｇ、約０．３０ｍｇ／ｋｇ、約０．３５ｍｇ／ｋｇ、約０．４０ｍｇ／ｋｇ、約０．４５ｍｇ／ｋｇ、約０．５０ｍｇ／ｋｇ、約０．５５ｍｇ／ｋｇ、約０．６０ｍｇ／ｋｇ、約０．６５ｍｇ／ｋｇ、約０．７０ｍｇ／ｋｇ、約０．７５ｍｇ／ｋｇ、約０．８０ｍｇ／ｋｇ、約０．８５ｍｇ／ｋｇ、約０．９０ｍｇ／ｋｇ、約０．９５ｍｇ／ｋｇ、約１．０ｍｇ／ｋｇ、または約１ｍｇ／ｋｇを超えるクロロトキシンを含有するクロロトキシンコンジュゲートの１つまたは複数の用量を投与することができる。さらに他の実施形態では、それぞれが、約１．０ｍｇ／ｋｇ、約１．０５ｍｇ／ｋｇ、約１．１０ｍｇ／ｋｇ、約１．１５ｍｇ／ｋｇ、約１．２０ｍｇ／ｋｇ、約１．２５ｍｇ／ｋｇ、約１．３ｍｇ／ｋｇ、約１．３５ｍｇ／ｋｇ、約１．４０ｍｇ／ｋｇ、約１．４５ｍｇ／ｋｇ、約１．５０ｍｇ／ｋｇ、または約１．５０ｍｇ／ｋｇを超えるクロロトキシンを含有するクロロトキシンコンジュゲートの１つまたは複数の用量を投与することができる。そのような実施形態では、治療において、単回用量のクロロトキシンコンジュゲートを投与すること、または２回用量、３回用量、４回用量、５回用量、６回用量または６回を超える用量を投与することを含んでよい。２つの連続した用量は、１日間隔、２日間隔、３日間隔、４日間隔、５日間隔、６日間隔、７日間隔、または７日を超える間隔（例えば、１０日間、２週間、または２週間超）で投与することができる。
微量注入によって部位に直接投与するための典型的な投与量は、体重１ｋｇ当たり約１ｎｇから体重１ｋｇ当たり約１ｍｇまでにわたる。
クロロトキシンコンジュゲートを局所的に投与するある特定の実施形態、特に、脳に腔内投与する場合では、コンジュゲートの投薬は、約０．０１ｍｇから約１００ｍｇまでのクロロトキシンポリペプチド、例えば、約０．０５から約５０ｍｇまで、約０．１ｍｇから約２５ｍｇまで、約０．１ｍｇから約１０ｍｇまで、約０．１ｍｇから約５ｍｇまで、または約０．１ｍｇから約１．０ｍｇまでを含む１つまたは複数の用量を投与することを含んでよい。例えば、ある特定の実施形態では、それぞれが、約１ｍｇ、約１．５ｍｇ、約２ｍｇ、約２．５ｍｇ、約３ｍｇ、約３．５ｍｇ、約４ｍｇ、約４．５ｍｇまたは約５ｍｇの低リジンクロロトキシンポリペプチドを含有するクロロトキシンコンジュゲートの１つまたは複数の用量を投与することができる。一部の実施形態では、それぞれが、約０．１ｍｇ、約０．１５ｍｇ、約０．２ｍｇ、約０．２５ｍｇ、約０．３ｍｇ、約０．３５ｍｇ、約０．４ｍｇ、約０．４５ｍｇ、約０．５ｍｇ、約０．５５ｍｇ、約０．６ｍｇ、約０．６５ｍｇ、約０．７ｍｇ、約０．７５ｍｇ、約０．８ｍｇ、約０．８５ｍｇ、約０．９ｍｇ、約０．９５ｍｇまたは約１ｍｇの低リジンクロロトキシンポリペプチドを含有するクロロトキシンコンジュゲートの１つまたは複数の用量を投与することができる。一部の実施形態では、治療は、単回用量のクロロトキシンコンジュゲートを投与すること、または２回用量、３回用量、４回用量、５回用量、６回用量または６回を超える用量を投与することを含んでよい。２つの連続した用量は、１日間隔、２日間隔、３日間隔、４日間隔、５日間隔、６日間隔、７日間隔、または７日を超える間隔（例えば、１０日間、２週間、または２週間超）で投与することができる。一部の実施形態では、多数回の投与を施し、投与する低リジンクロロトキシンポリペプチドの量は、投与ごとに異なる。例えば、一部の実施形態では、用量は、担当臨床医によって決定された通りに、ある用量から別の用量に調整する（例えば、段階的に増やす、または減らす）ことができる。
本発明の医薬の組み合わせを、追加的な療法と組み合わせて使用することができる（すなわち、本発明に従った治療は、１つまたは複数の所望の治療法または医学的手順と同時に、その前に、またはその後に施すことができる）ことが理解されよう。そのような併用レジメンにおいて使用するための療法（治療法および／または手順）の特定の組み合わせには、所望の治療法および／または手順の適合性ならびに実現される所望の治療効果を考慮に入れる。
例えば、本発明の方法および組成物は、外科手術、放射線療法（ｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ）（例えば、γ−放射、陽子線放射線療法（ｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ）、電子ビーム放射線療法（ｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ）、陽子治療、密封小線源治療、および全身的な放射性同位元素）、内分泌療法、温熱療法および寒冷療法を含めた他の手順と一緒に使用することができる。
その代わりに、またはそれに加えて、本発明の方法および組成物は、任意の有害作用（例えば、制吐薬）を弱毒化するため他の作用剤と一緒に、かつ／または、これらに限定されないが、２、３挙げると、アルキル化薬（メクロレタミン、クロラムブシル、シクロホスファミド、メルファラン、イホスファミド）、代謝拮抗薬（メトトレキサート）、プリンアンタゴニストおよびピリミジンアンタゴニスト（６メルカプトプリン、５フルオロウラシル、シタラビン、ゲムシタビン）、紡錘体阻害剤（ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビノレルビン、パクリタキセル）、ポドフィロトキシン（エトポシド、イリノテカン、トポテカン）、抗生物質（ドキソルビシン、ブレオマイシン、マイトマイシン）、ニトロソウレア（カルムスチン、ロムスチン）、無機イオン（シスプラチン、カルボプラチン）、酵素（アスパラギナーゼ）、およびホルモン（タモキシフェン、ロイプロリド、フルタミド、およびメゲストロール）を含めた他の承認された化学療法薬と一緒に使用ことができる。最新の癌療法のより包括的な考察については、これによりその内容全体が参照により組み込まれる、ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃａｎｃｅｒ．ｇｏｖ／、ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｆｄａ．ｇｏｖ／ｃｄｅｒ／ｃａｎｃｅｒ／ｄｒｕｇｌｉｓｔｆｒａｍｅ．ｈｔｍにあるＦＤＡに承認された抗腫瘍薬の一覧、およびＴｈｅ Ｍｅｒｃｋ Ｍａｎｕａｌ、第１７版、１９９９年を参照されたい。
本発明の方法および組成物は、治療レジメンの一部として、細胞傷害性薬剤の１つまたは複数の別の組み合わせと一緒に使用することもできる。一部の実施形態では、細胞傷害性薬剤の別の組み合わせは、ＣＨＯＰＰ（シクロホスファミド、ドキソルビシン、ビンクリスチン、プレドニゾン、およびプロカルバジン）；ＣＨＯＰ（シクロホスファミド、ドキソルビシン、ビンクリスチン、およびプレドニゾン）；ＣＯＰ（シクロホスファミド、ビンクリスチン、およびプレドニゾン）；ＣＡＰ−ＢＯＰ（シクロホスファミド、ドキソルビシン、プロカルバジン、ブレオマイシン、ビンクリスチン、およびプレドニゾン）；ｍ−ＢＡＣＯＤ（メトトレキサート、ブレオマイシン、ドキソルビシン、シクロホスファミド、ビンクリスチン、デキサメタゾン、およびロイコボリン）；ＰｒｏＭＡＣＥ−ＭＯＰＰ（プレドニゾン、メトトレキサート、ドキソルビシン、シクロホスファミド、エトポシド、ロイコボリン、メクロレタミン（ｍｅｃｈｌｏｅｔｈａｍｉｎｅ）、ビンクリスチン、プレドニゾン、およびプロカルバジン）；ＰｒｏＭＡＣＥ−ＣｙｔａＢＯＭ（プレドニゾン、メトトレキサート、ドキソルビシン、シクロホスファミド、エトポシド、ロイコボリン、シタラビン、ブレオマイシン、およびビンクリスチン）；ＭＡＣＯＰ−Ｂ（メトトレキサート、ドキソルビシン、シクロホスファミド、ビンクリスチン、プレドニゾン、ブレオマイシン、およびロイコボリン）；ＭＯＰＰ（メクロレタミン、ビンクリスチン、プレドニゾン、およびプロカルバジン）；ＡＢＶＤ（アドリアマイシン／ドキソルビシン、ブレオマイシン、ビンブラスチン、およびダカルバジン）；ＭＯＰＰ（メクロレタミン、ビンクリスチン、プレドニゾンおよびプロカルバジン）とＡＢＶ（アドリアマイシン／ドキソルビシン、ブレオマイシン、およびビンブラスチン）を交互に；ＭＯＰＰ（メクロレタミン、ビンクリスチン、プレドニゾン、およびプロカルバジン）とＡＢＶＤ（アドリアマイシン／ドキソルビシン、ブレオマイシン、ビンブラスチン、およびダカルバジン）を交互に；Ｃｈ１ＶＰＰ（クロラムブシル、ビンブラスチン、プロカルバジン、およびプレドニゾン）；ＩＭＶＰ−１６（イホスファミド、メトトレキサート、およびエトポシド）；ＭＩＭＥ（メチル−ｇａｇ、イホスファミド、メトトレキサート、およびエトポシド）；ＤＨＡＰ（デキサメタゾン、高用量のシタラビン、およびシスプラチン）；ＥＳＨＡＰ（エトポシド、メチルプレドニゾロン、高用量のシタラビン、およびシスプラチン）；ＣＥＰＰ（Ｂ）（シクロホスファミド、エトポシド、プロカルバジン、プレドニゾン、およびブレオマイシン）；ＣＡＭＰ（ロムスチン、ミトキサントロン、シタラビン、およびプレドニゾン）；ＣＶＰ−１（シクロホスファミド、ビンクリスチン、およびプレドニゾン）、ＥＳＨＯＰ（エトポシド、メチルプレドニゾロン、高用量のシタラビン、ビンクリスチンおよびシスプラチン）；ＥＰＯＣＨ（エトポシド、ビンクリスチン、およびドキソルビシンを９６時間にわたって、シクロホスファミドおよび経口的なプレドニゾンのボーラス用量と一緒に）、ＩＣＥ（イホスファミド、シクロホスファミド、およびエトポシド）、ＣＥＰＰ（Ｂ）（シクロホスファミド、エトポシド、プロカルバジン、プレドニゾン、およびブレオマイシン）、ＣＨＯＰ−Ｂ（シクロホスファミド、ドキソルビシン、ビンクリスチン、プレドニゾン、およびブレオマイシン）、ＣＥＰＰ−Ｂ（シクロホスファミド、エトポシド、プロカルバジン、およびブレオマイシン）、ならびにＰ／ＤＯＣＥ（エピルビシンまたはドキソルビシン、ビンクリスチン、シクロホスファミド、およびプレドニゾン）から選択される。
Ｂ．指標
本発明の組成物および方法は、疾患または状態を治療および／または診断するために、種々の抗増殖性の状況および／または抗血管新生の状況において使用することができる。
１．抗増殖性の状況
ある特定の実施形態では、原発癌および／または転移性癌などの、制御されていない細胞増殖を伴う状態および他の癌による状態を治療および／または診断するために本発明の組成物および方法を使用する。例えば、本発明の組成物および方法は、固形腫瘍のサイズを縮小するため、腫瘍の成長または転移を阻害するため、種々のリンパの癌を治療するため、および／またはこれらの疾患に罹患している哺乳動物（ヒトを含む）の生存時間を延長するために有用であるべきである。
本発明に従って治療および／または診断することができる癌および癌の状態の例としては、これらに限定されないが、脳および中枢神経系の腫瘍（例えば、髄膜、脳、脊髄、脳神経およびＣＮＳの他の部分の腫瘍、例えば、神経膠芽腫または髄芽腫など）；頭部癌および／または頸部癌、乳房腫瘍、循環系（例えば、心臓、縦隔および胸膜、および他の胸腔内器官、血管腫瘍、および腫瘍に関連する血管の組織）の腫瘍；血液およびリンパ系の腫瘍（例えば、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、ＡＩＤＳ関連リンパ腫、悪性の免疫増殖性疾患、多発性骨髄腫、および悪性血漿細胞新生物、リンパ性白血病、骨髄性白血病、急性リンパ球性白血病または慢性リンパ球性白血病、単球性白血病、他の特定の細胞型の白血病、細胞型の詳細が不明の白血病、リンパ系、造血組織および関連組織の詳細不明の悪性新生物、例えば、びまん性大細胞型リンパ腫、Ｔ細胞リンパ腫または皮膚のＴ細胞リンパ腫など）；排泄系（例えば、腎臓、腎盂、尿管、膀胱、および他の泌尿器）の腫瘍；胃腸管（例えば、食道、胃、小腸、結腸、結腸直腸、直腸Ｓ状部接合部、直腸、肛門、および肛門管）の腫瘍；肝臓および肝内胆管、胆嚢、ならびに胆道、膵臓、および他の消化器の他の部分に関わる腫瘍；口腔（例えば、唇、舌、歯肉、口腔底、口蓋、耳下腺、唾液腺、扁桃腺、中咽頭、上咽頭、梨状陥凹、下咽頭、および口腔の他の部位）の腫瘍；生殖系（例えば、外陰部、膣、子宮頸部、子宮、卵巣、および女性生殖器に関連する他の部位、胎盤、陰茎、前立腺、睾丸、および男性生殖器に関連する他の部位）の腫瘍；気道の腫瘍（例えば、鼻腔、中耳、副洞、喉頭、気管、気管支および肺、例えば、小細胞肺癌および非小細胞肺癌など）；骨格系（例えば、肢の骨および関節軟骨、骨関節軟骨および他の部位）の腫瘍；皮膚の腫瘍（例えば、皮膚の悪性黒色腫、非黒色腫皮膚癌、皮膚の基底細胞癌、皮膚の扁平上皮癌、中皮腫、カポジ肉腫）；ならびに末梢神経および自律神経系、結合組織および軟組織、後腹膜および腹膜、眼および付属器、甲状腺、副腎、および他の内分泌腺および関連する構造体を含めた他の組織に関わる腫瘍、リンパ節の続発性悪性新生物および詳細不明の悪性新生物、呼吸器系および消化系の続発性悪性新生物、および他の部位の続発性悪性新生物が挙げられる。
一部の実施形態では、腫瘍は、皮膚黒色腫または眼内黒色腫である。一部の実施形態では、腫瘍は転移性黒色腫である。一部の実施形態では、腫瘍は非小細胞肺癌である。いくつかの実施形態では、腫瘍は結腸癌または結腸直腸癌である。
一部の実施形態では、組成物および方法は、神経外胚葉性腫瘍の治療および／または診断において有用である（例えば、米国特許第６，６６７，１５６号を参照されたい；その内容全体が参照により本明細書に組み込まれる）。一部の実施形態では、神経外胚葉性腫瘍は神経膠腫である（例えば、米国特許第５，９０５，０２７号；同第６，０２８，１７４号；同第６，３１９，８９１号；同第６，４２９，１８７号；および同第６，８７０，０２９号；および国際特許出願公開ＷＯ０３／１０１４７５Ａ２、ＷＯ０９／０２１１３６Ａ１、およびＷＯ ２００９／１４０５９９を参照されたい；そのそれぞれの内容が参照により本明細書に組み込まれる）。本発明の組成物および方法が有用である神経膠腫の種類としては、これらに限定されないが、多形神経膠芽腫（ＷＨＯグレードＩＶ）、未分化星状細胞腫（ＷＨＯグレードＩＩＩ）、低悪性度の神経膠腫（ＷＨＯグレードＩＩ）、毛様細胞性星状細胞腫（ｐｌｉｏｃｙｔｉｃ ａｓｔｒｏｃｙｔｏｍａ）（ＷＨＯグレードＩ）、乏突起神経膠腫、神経節腫、髄膜腫、および上衣腫が挙げられる。一部の実施形態では、神経外胚葉性腫瘍は、髄芽腫、神経芽細胞腫、褐色細胞腫、黒色腫、末梢性未分化神経外胚葉性腫瘍、小細胞肺癌、ユーイング肉腫、および脳における転移性腫瘍からなる群から選択される。
本発明のある特定の実施形態では、肉腫の治療および／または診断において組成物および方法を使用する。一部の実施形態では、本発明の組成物および方法を、膀胱癌、乳癌、慢性リンパ腫白血病、頭頸部癌、子宮体癌、非ホジキンリンパ腫、非小細胞肺癌、卵巣癌、膵癌、および前立腺癌の治療および／または診断において使用する。一部の実施形態では、肉腫は、前立腺癌または乳癌からなる群から選択される。（例えば、そのそれぞれの内容が参照により本明細書に組み込まれる、国際特許出願公開ＷＯ０３／１０１４７４Ａ１、ＷＯ０３／１０４７５Ａ２、およびＷＯ ２００９／１４０５９９を参照されたい。）一部の実施形態では、肉腫（ｓａｒｃｏｍｅ）は膵癌である。
本発明のある特定の実施形態では、組成物および方法は、骨髄増殖性疾患（例えば、骨髄起源の腫瘍）および／またはリンパ球増殖性障害（例えば、リンパ起源の腫瘍）の治療および／または診断において有用である。（例えば、その内容全体が参照により本明細書に組み込まれる国際特許出願公開ＷＯ０５／０９９７７４を参照されたい。）
本発明の組成物および方法が有用である骨髄増殖性疾患の種類としては、これらに限定されないが、真性赤血球増加症（ＰＶ）、本態性血小板血症（ＥＴ）、特発性骨髄化生（ＡＭＭ）（特発性骨髄線維症（ＩＭＦ）とも称される）、および慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）が挙げられる。
一部の実施形態では、リンパ球増殖性障害を治療および／または診断するために本発明の組成物および方法を使用する。一部の実施形態では、リンパ球増殖性障害は非ホジキンリンパ腫である。一部の実施形態では、リンパ球増殖性障害は、例えば、前駆Ｂ細胞リンパ芽球性白血病／リンパ腫または成熟Ｂ細胞新生物などのＢ細胞新生物である。成熟Ｂ細胞新生物の非限定的な種類としては、Ｂ細胞性慢性リンパ球性白血病／小リンパ球性リンパ腫、Ｂ細胞性前リンパ球性白血病、リンパ形質細胞性リンパ腫、脾臓辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、有毛細胞白血病、節外周辺帯Ｂ細胞リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、結節性辺縁帯リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、形質細胞腫、および形質細胞骨髄腫が挙げられる。
一部の実施形態では、Ｔ細胞新生物を治療するために本発明の組成物および方法を使用する。Ｔ細胞新生物の非限定的な種類としては、Ｔ細胞性前リンパ球性白血病、Ｔ細胞性大顆粒リンパ球性白血病、ＮＫ細胞性白血病、節外性ＮＫ／Ｔ細胞リンパ腫、菌状息肉腫、原発性皮膚未分化大細胞リンパ腫、皮下脂肪織炎様Ｔ細胞リンパ腫、腸症型腸管Ｔ細胞リンパ腫、肝脾ガンマデルタＴ細胞リンパ腫、血管免疫芽球性Ｔ細胞リンパ腫、末梢性Ｔ細胞リンパ腫、未分化大細胞型リンパ腫、および成体Ｔ細胞リンパ腫が挙げられる。
本発明の組成物および方法を使用して治療することができる腫瘍は、他の化学療法薬を用いた治療に対して難治性であってよい。「難治性」という用語は、本明細書において腫瘍に関して使用される場合、腫瘍（および／またはその転移）が、本発明の組成物以外の少なくとも１つの化学療法薬を用いて治療すると、そのような化学療法剤で治療した後、抗増殖反応を示さない、または弱い抗増殖反応のみを示す（すなわち、腫瘍の成長に対して阻害を示さない、または弱い阻害のみを示す）−すなわち、他の（好ましくは標準の）化学療法薬を用いると腫瘍を全く治療することができない、または不満足な結果のみが伴うこと意味する。本発明は、難治性の腫瘍などの治療について言及する場合、（ｉ）患者を治療する間に、１つまたは複数の化学療法薬がすでに失敗している腫瘍だけでなく、（ｉｉ）他の手段、例えば、生検材料および培養により、化学療法薬の存在下で難治性であることを示すことができる腫瘍も包含すると理解されるべきである。
２．抗血管新生の状況
クロロトキシンは、抗血管新生の性質を発揮することが示されている。例えば、その内容全体が参照により本明細書に組み込まれる国際特許出願公開ＷＯ２００９／１１７０１８を参照されたい。ある特定の実施形態では、例えば、癌（上記の通り転移性癌を含む）、眼の新血管形成（例えば、黄斑変性症など）、炎症性疾患（例えば、関節炎など）などの疾患または状態を治療、診断、および／または改善するために本発明の組成物および方法を使用する。一部の実施形態では、状態または疾患は、脈絡膜血管新生を特徴とする。そのような状態または疾患の例としては、これらに限定されないが、黄斑変性症（滲出型黄斑変性症、加齢黄斑変性などを含む）、近視、眼の外傷、弾力線維性仮性黄色腫、およびそれらの組み合わせが挙げられる。
黄斑変性症は、６５歳以上の米国人における視力喪失および失明の主な原因である。黄斑変性症（ｍａｃｕｌａｒ ｄｅｎｇｅｒａｔｉｏｎ）は、一般には、加齢性の形態で起こる（多くの場合、ＡＭＤまたはＡＲＭＤと称される）が、若年性の黄斑変性症も同様に起こる。ＡＭＤ／ＡＲＭＤでは、鋭い、中心視力に関与する網膜の一部である斑が変性する。黄斑変性症は、一般には、萎縮型（非血管新生性）または滲出型（新生血管性）のいずれかとして診断される。
萎縮型黄斑変性症では、ドルーゼンとして公知の黄色がかった斑点が、主に斑の周りの劣化している組織由来の沈着物または壊死組織片から蓄積し始める。通常、中心視力の低下が徐々に起こり、それは滲出型黄斑変性症における視力喪失ほど重度ではない。
滲出型黄斑変性症は、「新生血管」という名称により示される通り、例えば、斑において異常に成長している新しい血管を特徴とする。そのような新しい血管は、血液および体液を漏出しながら網膜の真下に成長する恐れがある。そのような漏出により、感光性の網膜細胞に恒久的な損傷が引き起こされ、その細胞が死に、中心視力に盲点が生じる。滲出型黄斑変性症は、さらに２つのカテゴリーにグループ分けすることができる。肉眼で見えない形態の滲出型黄斑変性症は、網膜の真下への新しい血管成長は明白ではなく、漏出は明らかに少なく、一般には、視力低下の重症度が低い。典型的な形態の滲出型黄斑変性症では、血管成長および瘢痕は非常に明らかであり、網膜の真下に観察可能な輪郭が描かれる。典型的な滲出型黄斑変性症は、典型的な脈絡膜血管新生としても公知であり、通常、より重度の視力喪失に至る。
多くのＡＭＤ／ＡＲＭＤの症例を含む滲出型黄斑変性症における血管新生の役割を考慮すると、本発明の組成物および方法は、そのような障害を治療すること、診断すること、および／または回復させることにおいて有用であり得る。滲出型黄斑変性症に対する現在の療法は、Ｌｕｃｅｎｔｉｓ（商標）、Ｍａｃｕｇｅｎ（商標）、および／またはＶｉｓｕｄｙｎｅ（商標）などの血管新生阻害剤を伴い、場合によって、光線力学的療法（ＰＤＴ）と組み合わせて薬物を特定の細胞にターゲティングする。異常な血管を伴う網膜の領域に小さな熱傷を創出するために高エネルギーレーザー光を使用する光凝固も、滲出型黄斑変性症を治療するために使用される。
一部の実施形態では、滲出型黄斑変性症および／または加齢黄斑変性に罹患している被験体に、クロロトキシンコンジュゲート（またはその医薬組成物）を投与する。滲出型黄斑変性症に罹患している被験体の中で、被験体は肉眼で見えない形態に罹患していても、典型的な形態に罹患していてもよい。一部の実施形態では、クロロトキシンコンジュゲートにより、現存する新脈管構造の退縮が引き起こされる。一部の実施形態では、クロロトキシンコンジュゲートにより、新しい血管の急な成長が妨げられる。ある特定の実施形態では、クロロトキシンコンジュゲートは、滲出型黄斑変性症に対する他の治療、例えば、光凝固、他の血管新生阻害剤を用いた治療、光線力学的療法などと組み合わせる。
一部の実施形態では、本明細書に記載のクロロトキシン作用剤は、血管新生に関連する疾患、障害、または状態を治療するために推奨される１つまたは複数の治療レジメンを伴う治療レジメンと組み合わせて、またはその一部として投与する。いくつか例を挙げると、癌を治療するために推奨されるレジメンは、国立がん研究所（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ）のウェブサイトであるＵＲＬがｗｗｗ．ｃａｎｃｅｒ．ｇｏｖのウェブサイトにおいて見いだすことができる。黄斑変性症を治療するために推奨されるレジメンは、ＵＲＬがｗｗｗ．ｍａｙｏｃｌｉｎｉｃ ｏｒｇ／ｍａｃｕｌａｒ−ｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ／ｔｒｅａｔｍｅｎｔ．ｈｔｍｌのウェブサイトにおいて見いだすことができる。治療レジメンは、化学療法、外科手術、および／または放射線療法を含んでよい。
（実施例１）
低リジンクロロトキシンポリペプチドの合成
表１および表２に示されている配列番号１〜２８のアミノ酸配列を有する低リジンクロロトキシンポリペプチドは、固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）を使用して合成することができる。小さな固体の多孔質のビーズを、合成されたポリペプチドが、合成の間にそれを通じてビーズに共有結合的に付着するリンカーで処理する。したがって、発生期のポリペプチドは固相上に固定し、洗浄ステップの間保持する。
カップリングおよび脱保護のサイクルの繰り返しを用いて、配列番号１〜２８の配列を有するポリペプチドを生成する。カップリングおよび脱保護の各サイクルにおいて、固相に付着したペプチドまたはポリペプチドの遊離のＮ末端アミンを、そのＮ末端がＦｍｏｃ（９Ｈ−（フルオレン−９−イルメトキシカルボニル）保護基で保護された単一のアミノ酸単位とカップリングさせる。次いで、成長しているペプチド／ポリペプチド鎖のこの単位をジメチルホルムアミド中２０％のピペリジンなどの塩基性条件で脱保護して、カップリング−脱保護の次のラウンドにおいて別のアミノ酸に付着させることができる新しいＮ末端アミンを生成する。
全てのサイクルが所望の通り完了した後、ポリペプチドを、トリフルオロ酢酸を用いてビーズから切断する。
追加的な低リジンクロロトキシンポリペプチドを生成するために、配列番号１、１１、１２および１３のアミノ酸配列を有するポリペプチドを、表２に従ってリジンにおいてペグ化することによって修飾する。
（実施例２）
低リジンクロロトキシンポリペプチドの結合活性についてのアッセイ
クロロトキシンは、Ｕ２５１神経膠腫細胞およびＰＣ３前立腺癌細胞を含めた多くの異なる腫瘍型に選択的に結合することが示されている。本実施例では、実施例２に記載の通り生成した低リジンクロロトキシンポリペプチドをビオチンで標識し、結合活性についてアッセイする。ビオチン化した低リジンクロロトキシンポリペプチドのそれぞれを、半集密（ｓｕｂｃｏｎｆｌｕｅｎｔ）の細胞培養物から得たＵ２５１神経膠腫細胞と一緒に、およびそれとは別に半集密の細胞培養物から得たＰＣ３前立腺癌細胞と一緒にインキュベートする。インキュベートした後、市販のキットを製造者の説明書に従って使用して、細胞をアビジン−ＨＲＰ（西洋ワサビペルオキシダーゼ）で染色する。クロロトキシンを陽性染色対照として使用し、ポリペプチドを伴わないインキュベーション反応を陰性染色対照として使用する。クロロトキシンのアミノ酸配列と比較してスクランブルされたアミノ酸配列を有するペプチドも、陰性染色対照として使用することができる。ＨＲＰの有色の反応生成物が存在することによって証明される陽性染色を、ビオチン化した低リジンクロロトキシンポリペプチドが結合したことの指標として用いる。
次いで、Ｕ２５１細胞またはＰＣ３細胞への結合を示す低リジンクロロトキシンポリペプチドを（標識した形態で）、標識していないクロロトキシンを競合剤として使用する競合結合アッセイにおいて試験する。量を増加させたクロロトキシンの存在下で結合のレベルの減少を示す低リジンクロロトキシンポリペプチドを同定する。
結合した細胞の百分率を定量化するために、ビオチン化したポリペプチドと一緒にインキュベートした後に細胞を染色するために、アビジン−ＨＲＰの代わりにＦＩＴＣまたはＴｅｘａｓ Ｒｅｄなどの蛍光色素とカップリングしたアビジンを使用し、細胞をＦＡＣＳ（蛍光活性化細胞選別）によって分析する。
（実施例３）
低リジンクロロトキシンポリペプチドの結合活性についての追加的なアッセイ
実施例２の細胞において、クロロトキシンと競合的にＵ２５１および／またはＰＣ３に結合することが同定された低リジンクロロトキシンポリペプチドを、より包括的な結合プロファイルを得るために、より広い範囲の細胞型に対する結合活性についてさらにアッセイする。
表３には、そのいずれも、またはその組み合わせのいずれも低リジンクロロトキシンポリペプチドを用いた結合アッセイにおいて試験することができる細胞株および初代培養細胞が列挙されている。表３に列挙されている細胞株および初代培養細胞は、ヒト、ラット、およびマウス由来の神経膠腫細胞株と非神経膠腫細胞株の両方を含む。
（実施例４）
モノリジン（ｍｏｎｏｌｓｙｉｎｅ）クロロトキシンポリペプチドとパクリタキセルのコンジュゲーション
実施例１において合成され、場合によって、実施例２および／または実施例３におけるける知見についてアッセイされた１つまたは複数のモノリジンクロロトキシンポリペプチドを、単独では水不溶性の抗癌治療剤であるパクリタキセルとコンジュゲートする。パクリタキセルは、有糸分裂阻害剤である。
低リジンクロロトキシンポリペプチドを、パクリタキセルエステルリンカーカルボキシ実体（例えば、ＮＨＳ／ＥＥＤＱ）とＰＢＳ中で反応させ、インキュベートした。精製された最終生成物由来の試料を高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）および質量分析（ＭＳ）によって分析して、単一種のコンジュゲートが生成されたことを確認する。生じたコンジュゲートを、溶液の飽和濃度および飽和速度を決定することによって水溶性について試験する。水溶性のコンジュゲートを、さらなる解析のために薬物候補として同定する。
（実施例５）
低リジンクロロトキシンポリペプチドとゲムシタビンのコンジュゲーション
リジン残基を全く有さない低リジンクロロトキシンポリペプチド（例えば、配列番号２、５および６を参照されたい）を、実施例１に記載の通り合成し、場合によって、実施例２および／または３において結合についてアッセイする。低リジンクロロトキシンポリペプチドを、ヌクレオシド類似体であるゲムシタビン（Ｇｅｍｚａｒ（商標））と、Ｎ末端を介してコンジュゲートする。
（実施例６）
クロロトキシンコンジュゲートのｉｎ ｖｉｔｒｏ結合アッセイ
実施例４および５からのクロロトキシンコンジュゲートは、実施例２および３に記載の低リジンクロロトキシンポリペプチドについて記載されている通り、腫瘍細胞株への結合について個別に試験することができる。
（実施例７）
クロロトキシンコンジュゲートのｉｎ ｖｉｔｒｏ細胞毒性アッセイ
実施例４および５から得られ、場合によって、実施例６に記載の通り結合について試験したクロロトキシンコンジュゲートを、表３に列挙されている１つまたは複数の細胞株における細胞傷害性について試験する。培養物中の細胞をクロロトキシンコンジュゲートの濃度を変動させてインキュベートすることによってクロロトキシンコンジュゲートに曝露させる。曝露させた１．５時間後に、細胞の生存能力を測定し、クロロトキシンコンジュゲートのモル濃度に対する生存細胞の百分率のプロットを算出する。比較のために、細胞を別々に単独の細胞傷害性薬剤（例えば、実施例４からのパクリタキセルまたは実施例５からのテモゾロミド）と一緒にインキュベートし、生存能力について同様の用量反応曲線を算出する。
（実施例８）
クロロトキシンコンジュゲートのｉｎ ｖｉｖｏ取り込み
本発明のクロロトキシンコンジュゲートのｉｎ ｖｉｖｏ取り込みは、ｉｎ ｓｉｔｕ放射標識ペプチド（１３Ｃ、２Ｈ、または１５Ｎなどで標識）および／または放射標識した実体／部分を用いたイメージング；ナノ粒子および磁気共鳴画像法；および／または近赤外の色素およびバイオフォトンイメージング（ｂｉｏｐｈｏｔｏｎｉｃｉｍａｇｉｎｅ）によって評価することができる。抗クロロトキシンポリペプチド抗体も、組織への取り込みを検出するために使用することができる。
（実施例９）
低リジンクロロトキシンポリペプチドの、細胞浸潤を阻害する生物活性
低リジンクロロトキシンポリペプチド（またはそのコンジュゲート）の腫瘍細胞の浸潤を阻害する能力について、トランスウェル移動アッセイを用いて試験する。このアッセイでは、腫瘍細胞をトランスウェルの上部のチャンバ−に、低リジンクロロトキシンポリペプチド（またはそのコンジュゲート）と一緒に、またはそれなしで播き、細胞の移動をＶＥＧＦまたはＰＤＧＦなどの増殖因子を用いて刺激する。細胞培養培地中でおよそ２４時間インキュベートした後、トランスウェルフィルターの上部側面上の移動していない残りの細胞を取り出し、下部側面上の移動した細胞を可視化するために染色する。移動した細胞を浸潤の指数として計数する。クロロトキシンと同様の生物活性を有する修飾されたクロロトキシン変異体を、機能活性を保持するとみなす。
（実施例１０）
ｉｎ ｖｉｖｏ乳癌腫瘍モデルにおけるクロロトキシンコンジュゲート
クロロトキシンコンジュゲートの治療的活性を、ｉｎ ｖｉｖｏ乳癌モデルにおいて試験する。本実施例では、ＭＤＡ−ＭＢ−４６８乳癌細胞をレシピエントマウスに異種移植することによって創出したマウス腫瘍モデルを使用して、実施例４において生成したパクリタキセル−クロロトキシンコンジュゲートの、腫瘍の成長に対する影響について試験する。
側腹部の腫瘍を担持するマウスに、３．７ｍｇ／ｋｇのパクリタキセル用量を、１週間当たり３回、合計８用量、静脈内注射する。これらの実験において使用するコンジュゲートの濃度は、コンジュゲートしていないパクリタキセルを用いた同じ投薬レジメンが治療効果を有するのに十分でないという点で「治療量以下」である。マウスの１つの群には、対照として生理食塩水を単独で注射する。マウスの別の群には、パクリタキセルを３．７ｍｇ／ｋｇの用量で注射する。治療の間隔の間、またはその後に、腫瘍の長さおよび幅を測定するためにカリパスを使用して、腫瘍の成長をモニターする。ある期間にわたる腫瘍の成長を時間に対する元の腫瘍サイズの百分率としてプロットする。
他の実施形態
本明細書を考察すること、または本明細書に開示されている本発明を実施することにより、本発明の他の実施形態が当業者に明らかになるであろう。本明細書および実施例は、単に例示とみなされるものとし、真の本発明の範囲は、添付の特許請求の範囲によって示される。

Claims (58)

  1. コンジュゲートするための部位として利用可能な単一のリジンを有するクロロトキシンポリペプチドであって、配列番号１７に従うアミノ酸配列を含む、クロロトキシンポリペプチド。
  2. 少なくとも１つの治療的部分を伴う少なくとも１つのクロロトキシンポリペプチドを含むコンジュゲートであって、前記クロロトキシンポリペプチドが、単一のリジンを含み、前記クロロトキシンポリペプチドが、配列番号１７に従うアミノ酸配列を含み、そして、前記治療的部分が、前記クロロトキシンポリペプチドと、前記クロロトキシンポリペプチドの単一のリジンを介してまたはＮ末端を介して共有結合的に付着している、コンジュゲート。
  3. 前記クロロトキシンポリペプチドと前記治療的部分とが直接的に共有結合的に付着している、請求項２に記載のコンジュゲート。
  4. 前記クロロトキシンポリペプチドと前記治療的部分とがリンカーを介して共有結合的に付着している、請求項２に記載のコンジュゲート。
  5. 前記治療的部分が抗癌剤を含む、請求項２〜４のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
  6. 前記抗癌剤が、
    ＢＣＮＵ、シスプラチン、ゲムシタビン、ヒドロキシウレア、パクリタキセル、テモゾロミド、トポテカン、フルオロウラシル、ビンクリスチン、ビンブラスチン、プロカルバジン、デカルバジン、アルトレタミン、メトトレキサート、メルカプトプリン、チオグアニン、リン酸フルダラビン、クラドリビン、ペントスタチン、シタラビン、アザシチジン、エトポシド、テニポシド、イリノテカン、ドセタキセル、ドキソルビシン、ダウノルビシン、ダクチノマイシン、イダルビシン、プリカマイシン、マイトマイシン、ブレオマイシン（ｂｌｅｏｍｙｓｉｎ）、タモキシフェン、フルタミド、ロイプロリド、ゴセレリン、アミノグルチミド（ａｍｉｎｏｇｌｕｔｈｉｍｉｄｅ）、アナストロゾール、アムサクリン、アスパラギナーゼ、ミトキサントロン、ミトタンおよびアミホスチン
    からなる群より選択される、請求項５に記載のコンジュゲート。
  7. 前記抗癌剤が、癌細胞に対する選択性／特異性が乏しい抗癌剤；癌細胞による取り込みが乏しい抗癌剤；癌細胞における保持が乏しい抗癌剤；難水溶性を示す抗癌剤；癌細胞において時期尚早な不活性化を受ける抗癌剤；癌細胞において活性化不全が生じる抗癌剤；大規模な細胞性分解を受ける抗癌剤；および薬物耐性を伴う抗癌剤からなる群のメンバーである、請求項５に記載のコンジュゲート。
  8. 前記抗癌剤が難水溶性を示す、請求項７に記載のコンジュゲート。
  9. 前記抗癌剤がタキサンである、請求項５に記載のコンジュゲート。
  10. 前記タキサンが、パクリタキセル、ドセタキセル、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項９に記載のコンジュゲート。
  11. 前記治療的部分が、放射性同位元素、酵素、プロドラッグ活性化酵素、放射線増感剤、核酸分子、干渉ＲＮＡ、スーパー抗原、抗血管新生薬、アルキル化剤、プリンアンタゴニスト、ピリミジンアンタゴニスト、植物アルカロイド、インターカレーティング抗生物質、アロマターゼ阻害剤、代謝拮抗薬、有糸分裂阻害剤、増殖因子阻害剤、細胞周期阻害剤、酵素、トポイソメラーゼ阻害剤、生物学的反応修飾物質、抗ホルモン薬および抗アンドロゲン薬からなる群のメンバーである、請求項２に記載のコンジュゲート。
  12. 前記核酸分子が、ＤＮＡ、酵素的ＲＮＡ、ＲＮＡ：ＤＮＡハイブリッド、三重鎖ＤＮＡ、ｓｓＲＮＡ、ｄｓＲＮＡ、ｔＲＮＡ、ｍＲＮＡ、ｒＲＮＡ、またはそれらの任意の組み合わせを含む、請求項１１に記載のコンジュゲート。
  13. 有効量の、請求項２〜１２のいずれか一項に記載の少なくとも１つのコンジュゲートまたは生理的に許容できるその塩、および、少なくとも１つの薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物。
  14. 腫瘍を有するか、または腫瘍を有する疑いがある個体を治療するための、請求項２〜１２のいずれか一項に記載のコンジュゲートを含む組成物であって、前記コンジュゲートが前記腫瘍に特異的に結合することを特徴とする、組成物。
  15. 腫瘍を有するか、または腫瘍を有する疑いがある個体を治療するための医薬の調製における、請求項２〜１２のいずれか一項に記載のコンジュゲートを含む組成物の使用であって、前記コンジュゲートが前記腫瘍に特異的に結合することを特徴とする、使用。
  16. 黄斑変性症または炎症性疾患を有するか、または有する疑いがある個体を治療するための、請求項２〜１２のいずれか一項に記載のコンジュゲートを含む、組成物。
  17. 黄斑変性症または炎症性疾患を有するか、または有する疑いがある個体を治療するための医薬の調製における、請求項２〜１２のいずれか一項に記載のコンジュゲートを含む組成物の使用。
  18. 少なくとも１つの検出可能な部分を伴う少なくとも１つのクロロトキシンポリペプチドを含むコンジュゲートであって、前記クロロトキシンポリペプチドが、単一のリジンを含み、前記クロロトキシンポリペプチドが、配列番号１７に従うアミノ酸配列を含み、そして、前記検出可能な部分が、前記クロロトキシンポリペプチドと、前記クロロトキシンポリペプチドの単一のリジンを介してまたはＮ末端を介して共有結合的に付着している、コンジュゲート。
  19. 前記クロロトキシンポリペプチドと前記検出可能な部分とが直接的に共有結合的に付着している、請求項１８に記載のコンジュゲート。
  20. 前記クロロトキシンポリペプチドと前記検出可能な部分とがリンカーを介して共有結合的に付着している、請求項１８に記載のコンジュゲート。
  21. 前記検出可能な部分が、蛍光標識、放射性または常磁性の同位元素またはイオン、リガンド、化学発光剤、生物発光剤、光増感剤、量子ドット、微小粒子、金属ナノ粒子、ナノクラスター、酵素、比色標識、ハプテン、分子ビーコン、アプタマービーコン、ビオチン、およびジゴキギゲニンからなる群より選択される、請求項１８に記載のコンジュゲート。
  22. 前記検出可能な部分が、蛍光標識を含む、請求項２１に記載のコンジュゲート。
  23. 前記検出可能な部分が、放射性同位元素を含む、請求項２１に記載のコンジュゲート。
  24. 前記検出可能な部分が、常磁性の同位元素またはイオンを含む、請求項２１に記載のコンジュゲート。
  25. 前記検出可能な部分が、アクリジニウムエステル、および、安定化されたジオキセタンからなる群より選択される化学発光剤を含む、請求項２１に記載のコンジュゲート。
  26. 前記検出可能な部分が、ポルフィリン、ポルフィリン誘導体、メタロポルフィリン、メタロフタロシアニン、アンゲリシン、カルコゲナピリリウム色素、クロロフィル、フラビン、アロキサジン、フラーレン、フェオホルビド、ピロフェオホルビド、フェオフィチン、サフィリン、テキサフィリン、プルプリン、ポルフィセン、フェノチアジニウム、メチレンブルー誘導体、ナフタルイミド、ナイルブルー誘導体、キノン、ペリレンキノン、プソラレン、レチノイド、チオフェン、バーディン、キサンテン色素、二量体ポルフィリン、オリゴマーポルフィリン、および５−アミノレブリン酸からなる群より選択される光増感剤を含む、請求項２１に記載のコンジュゲート。
  27. 前記検出可能な部分が、金ナノ粒子、銀ナノ粒子、銅ナノ粒子、および白金ナノ粒子からなる群より選択される金属ナノ粒子を含む、請求項２１に記載のコンジュゲート。
  28. 前記検出可能な部分が、色素、およびコロイド金からなる群より選択される比色標識を含む、請求項２１に記載のコンジュゲート。
  29. 前記検出可能な部分が、水素の同位元素、炭素の同位元素、フッ素の同位元素、亜リン酸の同位元素、銅の同位元素、ガリウムの同位元素、イットリウムの同位元素、テクネチウムの同位元素、インジウムの同位元素、ヨウ素の同位元素、レニウムの同位元素、タリウムの同位元素、ビスマスの同位元素、アスタチンの同位元素、サマリウムの同位元素、およびルテチウムの同位元素からなる群より選択される放射性または常磁性の同位元素を含む、請求項２１に記載のコンジュゲート。
  30. 前記検出可能な部分が、 ３ Ｈ、 １３ Ｃ、 １４ Ｃ、 １８ Ｆ、 ３２ Ｐ、 ３５ Ｓ、 ６４ Ｃｕ、 ６７ Ｇａ、 ９０ Ｙ、 ９９Ｍ Ｔｃ、 １１１ Ｉｎ、 １２５ Ｉ、 １２３ Ｉ、 １２９ Ｉ、 １３１ Ｉ、 １３５ Ｉ、 １８６ Ｒｅ、 １８７ Ｒｅ、 ２０１ Ｔｌ、 ２１２ Ｂｉ、 ２１１ Ａｔ、 １５３ Ｓｍ、および １７７ Ｌｕからなる群より選択される放射性または常磁性の同位元素またはイオンを含む、請求項２１に記載のコンジュゲート。
  31. 前記検出可能な部分が、ヨウ素１３１（ １３１ Ｉ）、ヨウ素１２５（ １２５ Ｉ）、ビスマス２１２（ ２１２ Ｂｉ）、ビスマス２１３（ ２１３ Ｂｉ）、アスタチン２２１（ ２２１ Ａｔ）、銅６７（ ６７ Ｃｕ）、銅６４（ ６４ Ｃｕ）、レニウム１８６（ １８６ Ｒｅ）、レニウム１８８（ １８８ Ｒｅ）、リン３２（ ３２ Ｐ）、サマリウム１５３（ １５３ Ｓｍ）、テクネチウム９９ｍ（ ９９ｍ Ｔｃ）、ガリウム６７（ ６７ Ｇａ）、およびタリウム２０１（ ２０１ Ｔｌ）からなる群より選択される放射性または常磁性の同位元素またはイオンを含む、請求項２１に記載のコンジュゲート。
  32. 前記検出可能な部分が、ガドリニウム（ＩＩＩ）（Ｇｄ３＋）、クロム（ＩＩＩ）（Ｃｒ３＋）、ジスプロシウム（ＩＩＩ）（Ｄｙ３＋）、鉄（ＩＩＩ）（Ｆｅ３＋）、マンガン（ＩＩ）（Ｍｎ２＋）、およびイッテルビウム（ＩＩＩ）（Ｙｂ３＋）からなる群より選択される放射性または常磁性の同位元素またはイオンを含む、請求項２１に記載のコンジュゲート。
  33. 前記検出可能な部分が、炭素１３（ １３ Ｃ）、およびフッ素１９（ １９ Ｆ）からなる群より選択される放射性または常磁性の同位元素またはイオンを含む、請求項２１に記載のコンジュゲート。
  34. 前記検出可能な部分が、ルテチウム（Ｌｕ）の同位元素を含む、請求項２１に記載のコンジュゲート。
  35. 前記ルテチウム（Ｌｕ）の同位元素が、ルテチウム１７７（ １７７ Ｌｕ）を含む、請求項３４に記載のコンジュゲート。
  36. 前記検出可能な部分が、インジウム（Ｉｎ）の同位元素を含む、請求項２１に記載のコンジュゲート。
  37. 前記インジウム（Ｉｎ）の同位元素が、インジウム１１１（ １１１ Ｉｎ）を含む、請求項３６に記載のコンジュゲート。
  38. 前記検出可能な部分が、フルオレセイン色素、ローダミン色素、クマリン色素、シアニン色素、スチリル色素、オキソノール色素、カルボシアニン、メロシアニン、フィコエリトリン、エリスロシン、およびエオシンからなる群より選択される蛍光標識を含む、請求項２１に記載のコンジュゲート。
  39. 前記蛍光標識が、フルオレセイン、フルオレセインイソチオシアネート、ナフトフルオレセイン、４’，５’−ジクロロ−２’，７’−ジメトキシフルオレセイン、および６−カルボキシフルオレセインからなる群より選択されるフルオレセイン色素を含む、請求項３８に記載のコンジュゲート。
  40. 前記蛍光標識が、カルボキシテトラメチルローダミン、カルボキシローダミン６Ｇ、カルボキシ−Ｘ−ローダミン、リサミンローダミンＢ、ローダミン６Ｇ、ローダミングリーン、ローダミンレッド、およびテトラメチルローダミンからなる群より選択されるローダミン色素を含む、請求項３８に記載のコンジュゲート。
  41. 前記蛍光標識が、クマリン、メトキシクマリン、ジアルキルアミノクマリン、ヒドロキシクマリン、およびアミノメチルクマリンからなる群より選択されるクマリン色素を含む、請求項３８に記載のコンジュゲート。
  42. 前記検出可能な部分が、西洋ワサビペルオキシダーゼ、ベータガラクトシダーゼ、ルシフェラーゼ、アルカリホスファターゼ、ベータグルクロニダーゼ、ベータ−Ｄ−グルコシダーゼ、ウレアーゼ、およびグルコースオキシダーゼからなる群より選択される酵素を含む、請求項２１に記載のコンジュゲート。
  43. 前記検出可能な部分が、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）、核磁気共鳴分光法（ＭＲＳ）、単一光子放射型コンピュータ断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）、ガンマカメライメージング、またはポジトロン放出断層撮影法（ＰＥＴ）によって検出可能である、請求項１８に記載のコンジュゲート。
  44. 前記検出可能な部分が、分光学的、光化学的、生化学的、免疫化学的、電気的、光学的、または化学的な検出またはイメージングによって検出可能である、請求項１８に記載のコンジュゲート。
  45. 修飾された前記クロロトキシンペプチドが、ターゲティング薬剤にさらに共有結合的にカップリングされる、請求項１８に記載のコンジュゲート。
  46. 修飾された前記クロロトキシンペプチドが、治療剤にさらに共有結合的にカップリングされる、請求項１８に記載のコンジュゲート。
  47. 前記治療剤が、メトトレキサート、ドセタキセル、シスプラチン、エトポシド、パクリタキセル、一本鎖デオキシリボ核酸（ｓｓＤＮＡ）、二本鎖デオキシリボ核酸（ｄｓＤＮＡ）、低分子干渉リボ核酸（ｓｉＲＮＡ）、低分子ヘアピン型リボ核酸（ｓｈＲＮＡ）、およびリボ核酸干渉（ＲＮＡｉ）を媒介するリボ核酸からなる群より選択される、請求項４６に記載のコンジュゲート。
  48. 前記検出可能な部分が、リボフラビンを含む、請求項１８に記載のコンジュゲート。
  49. 組織をイメージングするための、請求項１８〜４８のいずれか一項に記載のコンジュゲートを含む組成物。
  50. 組織をイメージングするための医薬の製造のための、請求項１８〜４８のいずれか一項に記載のコンジュゲートの使用。
  51. 被験体における癌を検出するための、請求項１８〜４８のいずれか一項に記載のコンジュゲートを含む、組成物。
  52. 被験体における癌を検出するための医薬の製造のための、請求項１８〜４８のいずれか一項に記載のコンジュゲートの使用。
  53. クロロトキシンによって検出可能な癌を診断するための、請求項１８〜４８のいずれか一項に記載のコンジュゲートを含む組成物。
  54. クロロトキシンによって検出可能な癌を診断するための組成物の調製における、請求項１８〜４８のいずれか一項に記載のコンジュゲートの使用。
  55. クロロトキシンによって検出可能な癌を検出および除去するための、請求項１８〜４８のいずれか一項に記載のコンジュゲートを含む組成物であって、
    （ａ）前記検出が、組織に前記コンジュゲートを接触させて、癌性組織を検出することを含み、そして
    （ｂ）前記除去が、前記コンジュゲートによって検出された前記癌性組織を除去することを含む、
    組成物。
  56. クロロトキシンによって検出可能な癌を検出および除去するための組成物の調製における、請求項１８〜４８のいずれか一項に記載のコンジュゲートの使用であって、
    （ａ）前記検出が、組織に前記コンジュゲートを接触させて、癌性組織を検出することを含み、そして
    （ｂ）前記除去が、前記コンジュゲートによって検出された前記癌性組織を除去することを含む、
    使用。
  57. 前記単一のリジン残基が、治療剤、診断剤、イメージング剤、またはターゲティング剤のうち一つ以上に対して共有結合的にカップリングされる、請求項１に記載のクロロトキシンポリペプチドを含むコンジュゲート。
  58. 明細書に記載された発明。
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Families Citing this family (31)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE602006020710D1 (de) * 2005-04-22 2011-04-28 Fred Hutchinson Cancer Res Foundation Fluoreszentes chlorotoxinkonjugat und verfahren zur intraoperativen sichtbarmachung von krebs
CA2724384A1 (en) 2008-05-15 2009-11-19 Transmolecular, Inc. Treatment of metastatic tumors
CN102844044B (zh) 2010-02-04 2016-10-26 摩尔弗泰克有限公司 氯毒素多肽和结合物及其应用
AU2013204119B2 (en) * 2010-05-11 2016-03-31 Fred Hutchinson Cancer Center Chlorotoxin variants, conjugates, and methods for their use
EP3165533B1 (en) * 2010-05-11 2020-04-08 Fred Hutchinson Cancer Research Center Chlorotoxin variants, conjugates and methods for their use
US9181348B2 (en) 2011-08-04 2015-11-10 Toray Industries, Inc. Pharmaceutical composition for treatment and/or prophylaxis of cancer
CA2913029A1 (en) 2012-12-10 2014-06-19 Fred Hutchinson Cancer Research Center Lipocalin fusion partners
US9784730B2 (en) 2013-03-21 2017-10-10 University Of Washington Through Its Center For Commercialization Nanoparticle for targeting brain tumors and delivery of O6-benzylguanine
BR112016005802A2 (pt) 2013-09-17 2017-09-12 Blaze Bioscience Inc conjugados de clorotoxina e métodos de seu uso
US11559580B1 (en) 2013-09-17 2023-01-24 Blaze Bioscience, Inc. Tissue-homing peptide conjugates and methods of use thereof
CN105801706B (zh) * 2014-12-31 2019-10-22 深圳先进技术研究院 蝎氯毒素多肽-铁蛋白重链融合蛋白、自组装蛋白质纳米笼及其制备方法和应用
CN104877016A (zh) * 2015-04-30 2015-09-02 温州生物材料与工程研究所 折叠氯代毒素、氯代毒素变异体与折叠氯代毒素变异体及其制备工艺
CA2987636A1 (en) * 2015-06-26 2016-12-29 Fred Hutchinson Cancer Research Center Therapeutic peptides and methods of use thereof
WO2017044894A2 (en) 2015-09-09 2017-03-16 Fred Hutchinson Cancer Research Center Cartilage-homing peptides
IL302560B2 (en) * 2015-10-13 2025-08-01 Hope City Chimeric antigen receptors containing a chlorotoxin domain
WO2017136769A1 (en) 2016-02-04 2017-08-10 Eisai R&D Management Co., Ltd. Peptide drug conjugates
EP3442555A4 (en) * 2016-04-15 2020-04-01 Blaze Bioscience, Inc. METHOD FOR TREATING BREAST CANCER
US12048732B2 (en) 2016-04-15 2024-07-30 Blaze Bioscience, Inc. Methods of treating breast cancer
KR101678393B1 (ko) 2016-08-25 2016-12-06 (주)넥스젠바이오텍 피부 세포 증식 효과가 증가한 전갈독 융합단백질 및 이를 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선, 피부 탄력 증대 및 항노화 화장료 조성물
US11421005B2 (en) * 2016-12-09 2022-08-23 The Uab Research Foundation Chimeric chlorotoxin receptors
WO2018136614A1 (en) 2017-01-18 2018-07-26 Fred Hutchinson Cancer Research Center Peptide compositions and methods of use thereof for disrupting tead interactions
EP3595699A4 (en) 2017-03-16 2020-12-23 Blaze Bioscience, Inc. PEPTIDIC CONJUGATES OF CARTILAGE ECOTROPISM AND THEIR METHODS OF USE
EP3638290A4 (en) 2017-06-15 2021-04-07 Blaze Bioscience, Inc. KIDNEY HOMING PEPTIDE CONJUGATES AND METHOD OF USING THEREOF
CN111542345B (zh) 2017-09-15 2025-02-25 卫材公司 氯毒素剂及其用途
CA3086040A1 (en) 2017-12-19 2019-06-27 Blaze Bioscience, Inc. Tumor homing and cell penetrating peptide-immuno-oncology agent complexes and methods of use thereof
WO2020243390A1 (en) * 2019-05-31 2020-12-03 The Cleveland Clinic Foundation Functionalized fullerene gel tumor treatment
EP4271702B1 (en) * 2020-12-30 2024-11-06 VRG Therapeutics Zrt. Chlorotoxin derivatives and use thereof
CN113092609B (zh) * 2021-03-31 2022-03-29 中国海洋大学 一种Gymnodimine毒素标准物质的制备方法
CN113527416A (zh) * 2021-08-11 2021-10-22 南开大学 一种硝基还原酶响应氨基酸及肿瘤乏氧荧光探针的制备方法
KR20240015035A (ko) * 2022-07-25 2024-02-02 충남대학교산학협력단 클로로톡신의 분비를 위한 재조합 발현 벡터 및 이로형질전환된 약독화 살모넬라 균주
CN118767155A (zh) * 2023-04-10 2024-10-15 湖南中晟全肽生物科技股份有限公司 一种氯毒素的多肽偶联物及其用途

Family Cites Families (120)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4444744A (en) 1980-03-03 1984-04-24 Goldenberg Milton David Tumor localization and therapy with labeled antibodies to cell surface antigens
DE3407582A1 (de) 1984-03-01 1985-09-05 Dornier System Gmbh, 7990 Friedrichshafen Schaltungsanordnung fuer einen regelkreis
AU617652B2 (en) 1986-09-19 1991-12-05 Scripps Clinic And Research Foundation Monoclonal paratopic molecule directed to human ganglioside gd2
US5171749A (en) 1987-01-20 1992-12-15 University Of British Columbia Wavelength-specific cytotoxic agents
US5591829A (en) 1987-05-29 1997-01-07 Matsushita; Shuzo Antibodies modified with toxic substance
US4904584A (en) 1987-12-23 1990-02-27 Genetics Institute, Inc. Site-specific homogeneous modification of polypeptides
US5051364A (en) 1989-02-16 1991-09-24 The Salk Institute For Biological Studies Anti-lipocortin-I and anti-lipocortin-II monoclonal antibodies
DE3909799A1 (de) 1989-03-24 1990-09-27 Behringwerke Ag Monoklonale antikoerper (mak) gegen tumorassoziierte antigene, ihre herstellung und verwendung
US5173504A (en) 1989-04-21 1992-12-22 Health Research, Inc. Bacteriochlorophyll-a derivatives useful in photodynamic therapy
US5171741A (en) 1989-04-21 1992-12-15 Health Research, Inc. Bacteriochlorophyll-a derivatives useful in photodynamic therapy
US5308608A (en) 1989-06-07 1994-05-03 University Of British Columbia Photosensitizing Diels-Alder porphyrin derivatives
EP0491007B1 (en) 1989-09-08 1996-03-13 The Johns Hopkins University Structural alterations of the egf receptor gene in human gliomas
US5223253A (en) 1989-09-28 1993-06-29 American Home Products Corporation Bovine vaccine compositions and method for preventing trichomonas infections using same
GB2250993B (en) 1990-11-21 1995-02-15 Inst Nat Sante Rech Med Stromelysin-3 and its application in the diagnosis and treatment of malignant breast cancer
US5750376A (en) 1991-07-08 1998-05-12 Neurospheres Holdings Ltd. In vitro growth and proliferation of genetically modified multipotent neural stem cells and their progeny
AU679167B2 (en) 1991-09-20 1997-06-26 Amgen, Inc. Glial derived neurotrophic factor
US5314992A (en) 1991-11-25 1994-05-24 Trustees Of Dartmouth College Lipocortin-1 receptor protein and its uses
EP0642353A1 (en) 1992-05-14 1995-03-15 Oncologix, Inc. Treatment of vascular leakage syndrome and collagenase induced disease by administration of matrix metalloproteinase inhibitors
US5405957A (en) 1992-10-30 1995-04-11 The University Of British Columbia Wavelength-specific photosensitive compounds and expanded porphyrin-like compounds and methods of use
US5726304A (en) 1992-10-30 1998-03-10 The University Of British Columbia Porphocyanine and CNC-expanded porphyrins
EP0922458A1 (en) 1993-01-14 1999-06-16 Cancer Research Campaign Technology Limited Potentiation of temozolomide by an ATase inhibitor
US5773001A (en) 1994-06-03 1998-06-30 American Cyanamid Company Conjugates of methyltrithio antitumor agents and intermediates for their synthesis
US5626862A (en) 1994-08-02 1997-05-06 Massachusetts Institute Of Technology Controlled local delivery of chemotherapeutic agents for treating solid tumors
US5688773A (en) 1994-08-17 1997-11-18 The General Hospital Corporation Method of selectively destroying neoplastic cells
US5648485A (en) 1994-10-26 1997-07-15 University Of British Columbia β, β-dihydroxy meso-substituted chlorins, isobacteriochlorins, and bacteriochlorins
US5985822A (en) 1994-12-09 1999-11-16 The Scripps Research Institute Inhibition of glial cell proliferation with N-CAM homophilic peptides
US5756340A (en) 1995-05-08 1998-05-26 The Regents Of The University Of California Insect control with multiple toxins
JP3809502B2 (ja) 1995-05-30 2006-08-16 二郎 有川 ハンタウィルス抗原蛋白質およびモノクローナル抗体
JPH0971559A (ja) 1995-06-29 1997-03-18 Nippon Nohyaku Co Ltd ヒドロキシルアミン誘導体及び該化合物を含有する殺菌剤
JPH0971599A (ja) 1995-09-06 1997-03-18 Nippon Seibutsu Kagaku Kenkyusho 鶏貧血ウイルス（ｃａｖ）感染鶏血清と高い反応性を示すポリペプチド及びこのポリペプチドに対する抗体、鶏貧血ウイルス感染の診断法及びワクチン
US5905027A (en) 1995-12-27 1999-05-18 Uab Research Foundation Method of diagnosing and treating gliomas
US6667156B2 (en) 1995-12-27 2003-12-23 Uab Research Foundation Diagnosis and treatment of neuroectodermal tumors
US6541212B2 (en) 1997-03-10 2003-04-01 The Regents Of The University Of California Methods for detecting prostate stem cell antigen protein
CZ294715B6 (cs) 1997-05-07 2005-02-16 Qlt Inc. Ethylenglykol estery monohydrobenzoporfyrinových derivátů jako fotoaktivní činidla
US5880145A (en) 1997-05-07 1999-03-09 The University Of British Columbia Class of benzoporphyrin derivative photoactive compounds
US6130101A (en) 1997-09-23 2000-10-10 Molecular Probes, Inc. Sulfonated xanthene derivatives
US6555652B1 (en) 1997-12-05 2003-04-29 Kyogo Itoh Tumor antigen peptide derivatives
WO2000009502A1 (en) 1998-08-12 2000-02-24 Daiichi Pure Chemicals Co., Ltd. Fluorescent labelling reagents
US6703381B1 (en) * 1998-08-14 2004-03-09 Nobex Corporation Methods for delivery therapeutic compounds across the blood-brain barrier
US6214986B1 (en) 1998-10-07 2001-04-10 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of bcl-x expression
SE9901387D0 (sv) 1999-04-19 1999-04-19 Astra Ab New pharmaceutical foromaulations
US6849714B1 (en) 1999-05-17 2005-02-01 Conjuchem, Inc. Protection of endogenous therapeutic peptides from peptidase activity through conjugation to blood components
CA2384429A1 (en) 1999-09-14 2001-03-22 Michael K. Bahr Magnetic nanoparticles having biochemical activity, method for the production thereof and their use
US6623936B1 (en) 1999-09-24 2003-09-23 Imgenex Compositions and methods for improved detection and classification of neoplasms
WO2001037721A2 (en) 1999-11-22 2001-05-31 The Research Foundation Of State University Of New York Magnetic nanoparticles for selective therapy
DE10020376A1 (de) 2000-04-26 2001-11-08 Inst Zelltechnologie E V Dynamische Marker
AU2002220265A1 (en) 2000-11-03 2002-05-15 University Of Vermont And State Agricultural College Compositions for inhibiting grb7
AU2002252160A1 (en) 2001-03-01 2002-09-19 Northwest Biotherapeutics, Inc. Connexin enhances chemotherapy-induced apoptosis in human cancer cells inhibiting tumor cell proliferation
WO2003008583A2 (en) 2001-03-02 2003-01-30 Sagres Discovery Novel compositions and methods for cancer
US20030021810A1 (en) 2001-06-26 2003-01-30 Sontheimer Harald W. Chlorotoxin inhibition of cell invasion, cancer metastasis, angiogenesis and tissue remodeling
CA2453603C (en) 2001-07-16 2007-01-02 Maytag Corporation Method and system for refrigerator with integrated presentation mode
WO2003029462A1 (en) 2001-09-27 2003-04-10 Pieris Proteolab Ag Muteins of human neutrophil gelatinase-associated lipocalin and related proteins
US6972326B2 (en) 2001-12-03 2005-12-06 Molecular Probes, Inc. Labeling of immobilized proteins using dipyrrometheneboron difluoride dyes
AU2003207835A1 (en) 2002-02-04 2003-09-02 Auburn University Peptides for recognition and targeting of glial cell tumors
US20030232013A1 (en) 2002-02-22 2003-12-18 Gary Sieckman Therapeutic and diagnostic targeting of cancers cells with tumor homing peptides
US20060088899A1 (en) 2002-05-31 2006-04-27 Alvarez Vernon L Combination chemotherapy with chlorotoxin
AU2003237347B2 (en) * 2002-05-31 2009-07-23 Transmolecular Inc. Treatment of cell proliferative disorders with chlorotoxin
US7560160B2 (en) 2002-11-25 2009-07-14 Materials Modification, Inc. Multifunctional particulate material, fluid, and composition
US20040101822A1 (en) 2002-11-26 2004-05-27 Ulrich Wiesner Fluorescent silica-based nanoparticles
US20060019256A1 (en) 2003-06-09 2006-01-26 The Regents Of The University Of Michigan Compositions and methods for treating and diagnosing cancer
DE10328251A1 (de) 2003-06-24 2005-01-13 Toximed Gmbh Pharmazeutischer Wirkstoff
WO2005053611A2 (en) 2003-11-26 2005-06-16 Transmolecular, Inc. Treatment of phosphatidylinositol phospholipid disorders
US20080153746A1 (en) 2004-04-06 2008-06-26 Transmolecular, Inc. Diagnosis and Treatment of Myeloid and Lymphoid Cell Cancers
AU2005232616A1 (en) 2004-04-06 2005-10-27 Transmolecular, Inc. Diagnosis and treatment of myeloid and lymphoid cell cancers
CA2565701A1 (en) 2004-05-06 2005-11-17 Jonathan M. Barasch Ngal for reduction and amelioration of ischemic and nephrotoxic injuries
WO2006091231A2 (en) 2004-07-21 2006-08-31 Ambrx, Inc. Biosynthetic polypeptides utilizing non-naturally encoded amino acids
GB0422901D0 (en) 2004-10-14 2004-11-17 Ares Trading Sa Lipocalin protein
KR100681763B1 (ko) 2005-02-28 2007-02-15 재단법인 목암생명공학연구소 인간 리포칼린 2를 유효성분으로 포함하는 암 전이 억제용약학적 조성물, 이를 이용한 암 전이 억제 방법
GB0504767D0 (en) 2005-03-08 2005-04-13 Ares Trading Sa Lipocalin protein
US7462446B2 (en) 2005-03-18 2008-12-09 University Of Washington Magnetic nanoparticle compositions and methods
US20070037232A1 (en) 2005-03-31 2007-02-15 Barasch Jonathan M Detection of NGAL in chronic renal disease
CA2604844A1 (en) 2005-04-07 2006-10-19 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Cancer-related genes
WO2006110582A1 (en) 2005-04-08 2006-10-19 Xcyte Therapies, Inc. Compositions and methods for the treatment of burns and sepsis
US7833979B2 (en) 2005-04-22 2010-11-16 Amgen Inc. Toxin peptide therapeutic agents
CN101232903A (zh) * 2005-04-22 2008-07-30 安姆根有限公司 具有延长的血液半衰期的毒素肽
DE602006020710D1 (de) 2005-04-22 2011-04-28 Fred Hutchinson Cancer Res Foundation Fluoreszentes chlorotoxinkonjugat und verfahren zur intraoperativen sichtbarmachung von krebs
AU2005335491B2 (en) 2005-08-18 2010-11-25 Ambrx, Inc. Compositions of tRNA and uses thereof
US20070084929A1 (en) 2005-10-17 2007-04-19 Hitoshi Watanabe Barcode reader with a music player
CA2647907A1 (en) 2006-03-31 2007-10-18 Transmolecular, Inc. Use of tm-601 for the diagnosis and treatment of tumors
US8106013B2 (en) 2006-05-19 2012-01-31 Georgia Tech Research Corporation ABC transporter ligand GATX1
CN101003788A (zh) 2006-09-21 2007-07-25 武汉大学 一种蝎抗肿瘤转移肽及其制备方法和应用
CN100564517C (zh) 2006-09-21 2009-12-02 武汉大学 一种蝎抗神经胶质瘤肽及其制备方法和应用
PE20081140A1 (es) * 2006-10-25 2008-09-22 Amgen Inc Agentes terapeuticos a base de peptidos derivados de toxinas
SI2173890T1 (sl) 2007-06-21 2011-06-30 Univ Muenchen Tech Biološko aktivni proteini, ki imajo povečano in vivo in/ali in vitro stabilnost
US20090004105A1 (en) * 2007-06-27 2009-01-01 Zhen Cheng Molecular imaging of matrix metalloproteinase expression using labeled chlorotoxin
EP2173385A1 (en) 2007-08-07 2010-04-14 Transmolecular, Inc. Chlorotoxins as drug carriers
US20110283260A1 (en) 2007-08-31 2011-11-17 Iosemantics, Llc Quality assurance tools for use with source code and a semantic model
US20100215575A1 (en) 2007-10-12 2010-08-26 Transmolecular, Inc. Systemic Administration of Chlorotoxin Agents for the Diagnosis and Treatment of Tumors
US7904868B2 (en) 2007-10-17 2011-03-08 International Business Machines Corporation Structures including means for lateral current carrying capability improvement in semiconductor devices
US20090269777A1 (en) 2007-10-19 2009-10-29 Abbott Laboratories Immunoassays and kits for the detection of ngal
US8846036B2 (en) 2007-10-19 2014-09-30 Abbott Laboratories Antibodies that bind to mammalian NGAL and uses thereof
WO2009052400A1 (en) 2007-10-19 2009-04-23 Abbott Laboratories Antibodies that bind to mammalian ngal and uses thereof
US20090123946A1 (en) 2007-10-19 2009-05-14 Abbott Laboratories Immunoassays and kits for the detection of ngal
US20090123970A1 (en) 2007-10-19 2009-05-14 Abbott Laboratories Glycosylated mammalian ngal and use thereof
US20090176274A1 (en) 2007-10-19 2009-07-09 Abbott Laboratories Glycosylated mammalian ngal and use thereof
US20090124022A1 (en) 2007-10-19 2009-05-14 Abbott Laboratories Antibodies that bind to mammalian ngal and uses thereof
ES2475990T5 (es) 2007-11-15 2017-07-06 Bioporto Diagnostics A/S Uso diagnóstico de formas moleculares individuales de un biomarcador
US8815214B2 (en) 2008-01-18 2014-08-26 Visen Medical, Inc. Fluorescent imaging agents
WO2009108762A2 (en) 2008-02-26 2009-09-03 The Penn State Research Foundation Methods and compositions for treatment of retinoid-responsive conditions
US8093060B2 (en) 2008-02-28 2012-01-10 Canon Kabushiki Kaisha Multisite phosphorylated peptide (protein) recognizing compound and detection method, imaging method, alzheimer's disease diagnosing method and reagent kit using the same
CN102026671B (zh) 2008-03-14 2014-09-03 Visen医药公司 整联蛋白靶向试剂及使用其的体内和体外成像方法
US8470607B2 (en) 2008-03-20 2013-06-25 Morphotek, Inc. Inhibition of angiogenesis
GB0807831D0 (en) 2008-04-29 2008-06-04 Cambridge Entpr Ltd Agents for imaging cell death
CN101270158B (zh) 2008-04-30 2010-12-22 武汉大学 一种靶向抗神经胶质瘤蛋白及制备方法和用途
CA2724384A1 (en) 2008-05-15 2009-11-19 Transmolecular, Inc. Treatment of metastatic tumors
JP2009300110A (ja) 2008-06-10 2009-12-24 Olympus Corp 移植細胞の光学的検出方法又はイメージング方法
DK3381933T3 (da) 2008-06-24 2020-08-03 Technische Universität München Muteiner af hngal og relaterede proteiner med affinitet til et givet mål
KR20160095209A (ko) 2008-09-12 2016-08-10 닛토덴코 가부시키가이샤 섬유증 질환의 조영제
US20100098637A1 (en) 2008-09-23 2010-04-22 The Regents Of The University Of Michigan Dye-loaded nanoparticle
CN101381405B (zh) 2008-09-24 2011-07-27 武汉摩尔生物科技有限公司 基因工程肿瘤靶向kct-w1多肽及制备方法和用途
JP2010085108A (ja) 2008-09-29 2010-04-15 Nano Factory:Kk 生体光イメージング用プローブ
US20100105150A1 (en) 2008-10-24 2010-04-29 Abbott Laboratories Isolated human autoantibodies to neutrophil gelatinase-associated lipocalin (ngal) and methods and kits for the detection of human autoantibodies to ngal
CN106519588B (zh) 2009-11-09 2019-08-20 华盛顿大学商业化中心 官能化发色聚合物点及其生物共轭体
CN101921769B (zh) 2010-01-11 2012-07-25 山西大学 一种重组腺病毒及其制备方法和应用
WO2011094671A2 (en) 2010-01-29 2011-08-04 The Uab Research Foundation N-terminally conjugated polypeptides for targeted therapy and diagnosis
CN102844044B (zh) 2010-02-04 2016-10-26 摩尔弗泰克有限公司 氯毒素多肽和结合物及其应用
CN101824084A (zh) 2010-04-08 2010-09-08 山西大学 靶向性抗胶质瘤蛋白质及其应用
EP3165533B1 (en) * 2010-05-11 2020-04-08 Fred Hutchinson Cancer Research Center Chlorotoxin variants, conjugates and methods for their use
EP3299386A1 (en) 2010-08-16 2018-03-28 Pieris Pharmaceuticals GmbH Binding proteins for hepcidin
CN104877016A (zh) * 2015-04-30 2015-09-02 温州生物材料与工程研究所 折叠氯代毒素、氯代毒素变异体与折叠氯代毒素变异体及其制备工艺

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