JP7282068B2

JP7282068B2 - ステロール及び可溶化剤を含有するゲルカプセル

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Publication number: JP7282068B2
Application number: JP2020196980A
Authority: JP
Inventors: ギルケ，ユルゲン; ヴァイドナー，マルティン; ヘーア，マリアンネ; シュメラー，トルステン; ヘルガソン，スランドゥル; ボーン，ヘリベルト; ウェイランド，アンヤ
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Filing date: 2020-11-27
Publication date: 2023-05-26
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Description

本発明は、栄養補助食品として又は医薬品として使用するための、ステロール及び可溶化剤を含むゲルカプセルに関する。

そのようなゲルカプセルは既知であり、いわゆる硬カプセル及び軟カプセルがある。ゲルカプセルの製造、ゲルカプセルのために使用される投入材料及びその製造は、当業者によく知られている。

栄養補助食品として又は医薬品としてのステロールを含むゲルカプセルの使用も、既に、同様に知られている。

ステロールは水に非常にわずかしか溶解しないので、油が溶媒として一般に使用される。

ステロールエステルは、それより溶解性であるが、一般に、同様に、現在、油又は脂肪物質中に溶解されている。

したがって、ステロール及びステロールエステルは、油中に配合されるようにして使用されるので、配合物のかなりの割合が油である。しかし、投与単位、すなわち、例えば、ゲルカプセル1個当たりに、そのように供給できる配合物の量は、ゲルカプセルの最大許容サイズに起因して、限定される。この配合物の一部のみを油が占めるとしても、供給可能なステロールの量又はステロールエステルの量はさらに限定される。成人に対し一日当たり2から3gの量の遊離ステロールの一日推奨量を提供するために、一日当たりのゲルカプセルの最も少ない可能な数を供給する必要性に向けての取り組みがなされ、ゲルカプセルは、またさらにできるだけ小さくあるべきであり、これは、第1に、「服薬遵守」、すなわち患者が正確な投与量を守ることを向上させ、したがって、治療の有効性を、全体として改善する。さらに、栄養補助食品の場合、使用者による受容性が改善され、したがって最終的に、同様に、介入の有効性が改善される。

ステロールエステル配合物の有効性を改善するためには、特に、胃における低いせん断速度及びpHでさえも、ステロールエステル及びその他の成分は細かいエマルションを形成する必要がある。これは、医薬品産業において、医薬配合物の場合、自己乳化系によって達成される。しかし、これは、非常に大量の希釈用物質及び乳化剤の使用を伴う。同様に、医薬配合物の場合、多様な乳化剤が規制当局に承認されており、したがって、自己乳化系を達成するための配合物の調整は、食糧の場合よりも、相対的に見れば単純である。さらに、一用量当たりにそのような自己乳化系において投与される医薬として活性な物質の量は、食品部門の物質に対する場合より、通常、明らかに少ない。

一用量当たりのステロールエステルの投与の場合、その量は、一用量当たり約1から3グラムの範囲であり、したがって、一用量を1カプセルとして配合する場合、投与される配合物の総量は既に非常に大きい。食品部門の場合、医薬適用と比較すると、乳化剤及び界面活性剤の数が、規制の観点から大いに限定されており、したがって、入手可能な乳化剤の特性の幅もまた非常に限定されるので、少量の食糧として承認された乳化剤及び界面活性剤を用いて自己乳化系を達成することは、明らかにより大きな難問である。胃での低pHが、中和により陰イオン界面活性剤の活性を低下させる。したがって、ステロールエステルの形態でステロールの一日量を供給するために、1回又は最大で2回の投与(すなわち、一日当たり1個又は最大で2個のカプセルの投与)を可能にする、カプセルでのステロールエステルの有効な配合物は現在、入手できない。

したがって、ゲルカプセル中のステロール及びステロールエステルの配合物を、ゲルカプセル1個のためのそのような配合物中の遊離ステロールに対するステロールの重量割合が最大になる程度まで、改善することが望ましい。

ステロールは、とりわけ、フィトステロール、すなわち、植物から得られるステロールであることが、知られている。

原理的には、ステロールエステルは、全ての考え得るカルボン酸との全てのエステルである。しかし、脂肪酸とのエステルだけが、食品及び健康の分野において、通例、興味深い。

脂肪酸のステロールエステルを製造する方法は知られており、最も一般的に使用される方法は、ステロールと脂肪酸とからのエステル化による製造である。この反応を用いて、事実上いずれかの望ましい様式で、変換及びしたがってまたステロールエステルの純度を制御することが可能である。通例、少なくとも80パーセントのステロールエステルへの変換を求めて取り組まれており、事実上100パーセントまでの変換が、知られており、技術的に実行可能である。結晶化、脱ろう等などの精製によって、より高い純度もまた達成できる。そのような方法はすべて、よく知られている。

ステロールエステル及び乳化剤(可溶化剤ともまた呼ばれる)を実質的に含むゲルカプセルのための配合物並びにまた前記配合物を含むゲルカプセルが見い出された。

(適用された開始濃度の%での)6時間後の基本受容培地のコレステロール含有量を示す。 (適用された開始濃度の%での)24時間後の基本受容培地のコレステロール含有量を示す。単独の及び試験される配合物と組み合わせた、コレステロール(「CHOL」)のミセル溶液の赤外線スペクトルを示す。図4:単独の及びさまざまな試験物質(C1からC10)と組み合わせた、コレステロール(「CHOL」)のミセル溶液のPCA分析を示す。表4に関する結果を示す。

この文脈では、「実質的に」は、配合物の全割合が少なくとも61重量パーセントであることを意味する。

本発明の文脈において、「可溶化剤」は、乳化する及び/又は安定化させるように作用する物質を一般に指し、本発明の文脈において、「乳化剤」又は「界面活性剤」と、また同義に呼ばれる。

原理的に、ステロールエステルとして、いずれのステロールからのいずれのステロールエステルも使用することが可能である。好ましいのは、当業者によく知られている、植物からのステロール(「フィトステロール」)を使用することである。本発明の文脈において、用語「ステロール」及び「フィトステロール」は、明確に別段の説明がない限り、それらの水素化類似体、「スタノール」もまた包含する。

特に好ましいのは、(後で水素化されない)ステロールである。

ステロール及びスタノール、特にステロールは、好ましくは脂肪酸でエステル化される。原理的に、いずれの脂肪酸も、脂肪酸として可能である。好ましいのは、天然由来の得られた脂肪酸、特に、植物からの及び海洋生物由来の脂肪酸、又はそれぞれ、それらに相当するが、合成により製造された脂肪酸である。特に好ましいのは、植物又は海洋生物由来の脂肪酸である。脂肪酸は、純粋な物質として又は1つ以上の少数の脂肪酸を優勢に含む物質として、さもなければ、多くの異なる脂肪酸の混合物として使用できる。

好ましいのは、さらなる健康上の恩恵を有する脂肪酸を使用することである。さらなる健康上の恩恵を有する、そのような脂肪酸は、特に、一価不飽和及び多価不飽和脂肪酸、例えば、オメガ3脂肪酸、EPA及びDHAであり、全てのこれらの脂肪酸、それらの製造、取得及び精製は、当業者によく知られている。

本発明の文脈におけるステロールエステルは、遊離ステロール、すなわち、非エステル化ステロールもまた含むことができる。使用されるステロールエステルは、ステロールエステル及び遊離ステロールの混合物であり、ステロールエステル含有量は、(エステル中のステロール部分を基準にして)、好ましくは少なくとも80モルパーセント、特に好ましくは少なくとも90モルパーセント、とりわけ好ましくは少なくとも95モルパーセント、及び特に少なくとも98モルパーセントであり、前記ステロールエステル含有量は、これらの範囲と100パーセントまでの間の全ての値であることが可能である。

したがって、好ましくは、ゲルカプセルのための本発明による配合物及び前記配合物を含むゲルカプセルは、ステロールエステル、特に、一価不飽和又は多価不飽和、特に好ましくは多価不飽和の、好ましくは植物若しくは海洋生物由来の脂肪酸とのステロールエステルと、好ましくは、ポリソルベート20、40、60及び80などのポリソルベート、レシチン並びにステアロイル乳酸ナトリウム(sodium stearoyl-2-lactylate)から選択される、特に好ましくは、ポリソルベート80(ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノオレエート、E433)、レシチン及び100から140のエステル化度を有するステアロイル乳酸ナトリウムから、とりわけ好ましくはポリソルベート80及び/又はレシチンから選択される、少なくとも1種の可溶化剤を含む。特に好ましいのは、少なくとも2種の異なる乳化剤を使用することである。

本発明の文脈におけるレシチンは、いずれかの野菜又は動物源の天然供給源から好ましくは得られた、ある割合のレシチンを含む組成物を意味する。そのような供給源及びそれらの供給源、例えば、卵、ダイズ、ヒマワリ、ナタネから得られたレシチンは、当業者によく知られている。本発明の文脈におけるレシチンは、好ましくは、全ての野菜及び/又は動物供給源、好ましくは、ナタネ、ヒマワリ及び/又はダイズなどの野菜供給源から得られる、レシチン画分、リゾレシチン(例えば、加水分解されたレシチン、酵素処理されたレシチン)及び/又はリン脂質を含む混合物、特に好ましくは、ダイズ豆から得られるそのような混合物、とりわけ好ましくは、少なくとも40、45、50、55、60、65、70若しくは75パーセント以上のホスファチジルコリン及び少なくとも3、4、5、6又は7%のホスファチジルエタノールアミン(この総量は常に100パーセントになる)を含むそのような混合物であり、例えば、Lecicoシリーズの市販品、例えばダイズレシチンLecico F 600、Lecico F 580、Lecico F 300、Lecico F 200、Lecico F 100、Lecico P 900、Lecico P 700、Lecico P 300、ヒマワリレシチンLecico SUN 400、Lecico SUN FM 580、ナタネレシチンLecico RAP 200、Lipoid及びPhospholidonシリーズの市販品、例えば、Lipoid P45、Lipoid P75、Lipoid P75-3、Lipoid P100、Lipoid H100、Lipoid R100、Lipoid P100-3、Lipoid S45、Lipoid S75、Phospholidon 80H、Phospholidon 90H、Phospholidon 90Gであり、好ましくは、それぞれが少なくとも60、65、70若しくは75、80、85、90、95パーセント以上のホスファチジルコリンを有する、例えば、特にLipoid P75、Lipoid S75、Lipoid P75-3、Lipoid P100-3、Phospholidon 80H、Phospholidon 90H、Phospholidon 90G、とりわけ好ましくは、約65から75、特に約70パーセントの割合のホスファチジルコリンを有するものである。

さらに、ゲルカプセルのための配合物及び前記配合物を含むゲルカプセルは、水、アルコール又はそれらの混合物もまた含むことができる。好ましくは、可溶化剤としてレシチンを含む配合物はまた、水及び/又はアルコール、特に好ましくは、優勢に又は非常に優勢に、アルコールを含む。この文脈においては、「非常に優勢に」は、アルコールが、水の残存量を追加的に含んでよいことを意味する。前記残存量は、アルコール中に、好ましくは5重量パーセント未満、4重量パーセント未満、3重量パーセント未満、2重量パーセント未満、1重量パーセント未満又はさらに0.5重量パーセント未満の割合である。

別の実施形態において、可溶化剤としてレシチンを含むゲルカプセルのための配合物は、油、特にヒマワリ油などの植物油を含む。しかし、油の量は、好ましくは、ステロールエステルの量と比較すると少なく、ステロールエステルの及びレシチンの均一な溶解を達成するのに十分なだけの量のみである。

さらなる成分は、本発明による配合物のために可能であるが、配合可能なステロールの量を減らす。したがって、配合物の目的のために必要なそれらの添加物のみが好ましく、例えば、抗酸化剤などのステロールエステルのための安定剤、並びにまた糖エステル、例えば、脂肪酸と糖、好ましくはショ糖のモノ、ジ、及びトリエステル、好ましくはパルミチン酸とショ糖のモノエステル、ステアリン酸とショ糖のモノエステル、及び/又はオレイン酸とショ糖のモノエステルが、好ましい。通例の及び適切な抗酸化剤は、当業者によく知られている。したがって、好ましくは、ゲルカプセルのための本発明による上記の配合物及び前記配合物を含むゲルカプセルは、少量の抗酸化剤を含み、抗酸化剤は、好ましくは、t-ブチルヒドロキシトルエン、t-ブチルヒドロキシアニソール、t-ブチルヒドロキシキノン(butylhydroxyquinone)などの立体障害フェノール系抗酸化剤;アルファ、ベータ、ガンマ及びデルタ-トコフェロールなどのトコフェロール又はこれらのトコフェロールの少なくとも2種を含む混合物;アルファ、ベータ、ガンマ及びデルタ-トコトリエノール又はこれらのトコトリエノールの少なくとも2種を含む混合物;前述の物質及び/又はフェノール系ジテルペン、例えばカルノソール、カルノシン酸、ポリフェノール、例えば没食子酸エピガロカテキン、タンニン酸及び/又はイソフラボンの少なくとも1種を含む天然抽出物;特に、トコフェロール、アスコルビン酸若しくはイソアスコルビン酸又はそれらの好適な誘導体、例えば、パルミチン酸アスコルビル及びステアリン酸アスコルビルなどの脂肪酸とのエステルから選択される。トコフェロール及び脂肪酸アスコルビルエステル、特に、トコフェロール及びパルミチン酸アスコルビルが好ましい。

本発明による配合物は、以下の量の物質を含む。

ステロールエステル
ゲルカプセルのためのフィラー材料として働く全配合物に対して、例えば、60、61、62、63、64、66、67、68、69、71、72、73、74、76、77、78、79、81、82、83、84、86、87、89、90重量パーセントなどの、少なくとも60、65重量パーセント又は好ましくは少なくとも70重量パーセント、特に好ましくは少なくとも75重量パーセント、とりわけ好ましくは少なくとも80重量パーセント、例えば、特に好ましくは少なくとも85重量パーセント又はさらに少なくとも88重量パーセント。

可溶化剤
レシチン並びにレシチン画分及びリン脂質を含む混合物の場合。それぞれの場合において、ゲルカプセルのためのフィラー材料として働く全配合物に対して、例えば、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0重量パーセント及びその間の全ての値などの、下限として、少なくとも1重量パーセント、好ましくは少なくとも1.1重量パーセント、特に好ましくは少なくとも1.2重量パーセント、とりわけ好ましくは、少なくとも1.3重量パーセント及び特に少なくとも1.4重量パーセント、並びに上限として、20重量パーセントまで、好ましくは15まで、特に好ましくは10まで及び特に好ましくは5重量パーセントまで。

ポリソルベート80などのポリソルベート及びステアロイル乳酸塩(stearoyl-2-lactylate)の場合。ゲルカプセルのためのフィラー材料として働く全配合物に対して、例えば、5.1、5.2、5.3、5.4、5.6、5.7、5.8、5.9、6.1、6.2、6.3、6.4、6.6、6.7、6.8、6.9、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.6、8.7、8.8、8.9、9.0、9.1、9.2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9、10.0、10.1、10.2、10.3、10.4、10.5、10.6、10.7、10.8、10.9、11.0、11.5、12.0、12.5、13.0、13.5、14.0、14.5、15.0、15.5、16.0、16.5、17.0、17.5、18.0、18.5、19.0、19.5、20.0重量パーセント及びその間の全ての値などの、少なくとも5重量パーセント、好ましくは少なくとも5.5重量パーセント、特に好ましくは少なくとも6.0重量パーセント、とりわけ好ましくは少なくとも6.5重量パーセント及び特に少なくとも7.0重量パーセント。

水
水は、0から25重量パーセントの量で存在できる。唯一の可溶化剤としてポリソルベートを使用する場合、使用される水の量は、ゲルカプセルのためのフィラー材料として働く全配合物に対して、0から15重量パーセント、好ましくはゼロから10重量パーセント、並びにまたこれらの端点の間の全ての値である。この文脈においては、「少量」とは、10パーセント以下、好ましくは5パーセント以下の水が配合物中に存在することを意味する。

唯一の可溶化剤としてレシチン並びにレシチン画分及びリン脂質を含む混合物を使用する場合、使用される水の量は、ゲルカプセルのためのフィラー材料として働く全配合物に対して、0から25重量パーセント、好ましくは5から23重量パーセント、及び特に好ましくは10から20重量パーセント、並びにまたこれらの端点の間の全ての値である。この文脈においては、「少量」とは、20パーセント以下、好ましくは15パーセント以下の水が配合物中に存在することを意味する。

油
1種又は複数の油は、全配合物に対して、好ましくは20重量パーセント以下、特に好ましくは15重量パーセント以下、とりわけ好ましくは10重量パーセント以下及び特に好ましくは5重量パーセント以下であるが、0から25重量パーセントの量で存在できる。「少量」とは、10パーセント以下、好ましくは5パーセント以下の油が配合物中に存在することを意味する。

原理的に、適切な油は、天然及び合成由来の全ての油(すなわち、トリグリセリド)であるが、好ましくは天然由来、特に植物又は海洋生物由来、とりわけ、当業者によく知られている通り、ヒマワリ、亜麻の種子、亜麻の繊維、アザミ、アーモンド、ナタネ、ココナッツ、ヤシ等からの油若しくはその混合物などの植物由来の油である。使用される場合、さらなる健康上の恩恵をもたらすので、低い割合の飽和脂肪酸及び/又は高い割合の不飽和脂肪酸及び特に多価不飽和脂肪酸を有する油を使用することが好ましいが、その一方で、飽和脂肪酸及び特にトランス脂肪酸は、技術的に可能な及び/又は商業的に(すなわち、特にコストの観点から)耐え得る程度まで、好ましくは避けられるべきである。

したがって、それぞれの場合において、混合物中の脂肪酸の全質量に対して、少量のトランス脂肪酸、好ましくは5、4、3、2パーセント未満、若しくはさらに1パーセント以下のトランス脂肪酸を有する、及び/又は好ましくは7パーセント未満の飽和脂肪酸、好ましくは6、5、4、3又はさらに2若しくは1パーセント未満の飽和脂肪酸の量を有する脂肪酸混合物が好ましい。

特に好ましくは、配合物は、いずれの油も全く含まない。

さらなる成分として、パルミチン酸アスコルビル及び糖エステルを、ゲルカプセルのためのフィラー材料として働く全配合物に対して、それぞれ、20重量パーセントまで、好ましくは15重量パーセントまで、特に好ましくは10重量パーセントまで、及び特に5重量パーセントまでの量で使用することが好ましい。それぞれの場合において、少なくとも1パーセント、例えば、1.5、2、2.5、3、3.5、4又は4.5重量パーセントなどを使用することが好ましい。

したがって、本発明は、本発明による配合物を製造する、好ましくは、特に実施形態A及びAAなどの、配合物の好ましい実施形態の1つを製造する方法もまた包含する。

そのような方法は、以下のステップを含み、好ましくは、以下のステップからなる。a)ステロールエステル及び可溶化剤を、個別に次々と、2つ一組で、同時に2つ以上、又は同時に全て、好ましくは全てを次々と加えること、特に好ましくは、第1の物質としてステロールエステルを加え、その後で、撹拌槽中に、ステップb)の加熱の前、間、又は後に、特に好ましいのはステップb)の加熱の前に、他の物質を加えること。b)ステロールエステルの融点を超える温度まで、個別に最初に投入された物質又は2つ以上の物質の混合物を加熱すること。c)均一な混合物を得るために、1から60分の間、500から2500rpmで、加熱された混合物を混合すること。

原理的に、可能なゲルカプセルは、天然由来、例えば植物及び/又は動物由来の物質、並びに合成由来の物質、例えば、合成により製造された又はバイオテクノロジーの方法を用いて製造されたポリマーから製造される硬及び軟カプセルの全てのタイプを含む。植物物質から構成されるゲルカプセル及び合成ポリマーから構成されるゲルカプセルが好ましい。

そのような材料、それらの製造及び取得、並びにまたゲルカプセルへのそれらの加工は、当業者によく知られている。基礎的な概要は、例えば、「Lehrbuch der Pharmazeutischen Technologie(医薬技術のテキスト)」の、例えば第IV章「Die Herstellung von Hart- und Weichgelatinekapseln(硬及び軟ゼラチンカプセルの製造)」、著者Kurt H. Bauer、Freiburg、58から82ページに、又はこのテキストの第8版、第14章、第6節、344から355ページに、及びまた多くのその他の標準テキストにある。例えば、硬カプセルは、カプセルが、2つの部分のくっついた空カプセルとして製造され、この空カプセルは製造後にのみ充填されて、閉じられるという事実によって識別される。たいていの場合、硬カプセルは、いわゆる浸漬法において、水溶液から製造される(S. Stegmann、PZ Prisma、5、42～56、1998)。デンプン又はゼラチンからの医薬品硬カプセルを製造する射出成形の先行技術の概要は、L. Eithらによって、Drug Dev. Ind. Pharm.、12、2113～2126 (1986)に示されている。硬及び軟ゼラチンカプセルを製造する完全に異なる方法が、W. Fahrig及びU. Hofer、「Die Kapsel(カプセル)」、Wissenschaftliche Verlagsgesellschaft mbH Stuttgart、1983、58～82ページに記載されている。

カプセル並びにそれらの製造及び使用は、多くの特許明細書に、同様に見つけることができる。特に医薬品適用、栄養補助食品等のためのカプセルの既知の製造者は、Catalent社(R.P. Scherer社は、Catalent社に合併された)、Banner社、Capsugel社、Accucaps社、Swiss Caps社(Aenova社に合併された)である。これら及び多くのその他の会社からの対応する公表文献並びに特許出願及び特許が知られている。

以下を、例として言及することができる。WO2014/202754は、アシルジェランガム、デンプン及び可塑剤を含む軟カプセルを開示している。US 20010098784は、植物製剤を含むカプセルを開示している。US6,790,495Bは、デンプン含有軟カプセルの製造及びその製造のための装置を開示している。WO2007/116062は、植物抽出物を含むカプセル又は溶融押出成形物を開示している。US2010291197は、溶融押し出しによって製造され、ポリマー材料から構成されるカプセルを開示している。EP2042180A1は、フィトステロール、10から100パーセントのトリグリセリド、1から40パーセントの12を超えるHLB値を有する乳化剤及び1から80パーセントの11未満のHLB値を有する共乳化剤(coemulsifier)、自己乳化フィラーを含み、水を含まない軟カプセルを開示している。WO2002074861は、ゲル形成剤としてのポリオールの使用及びまたそれからの冷水可溶性ゼラチンゲルカプセルを開示している。US2004060258は、回転ダイス法を用いる、カプセル、特に軟カプセルの製造を開示している。DE2237545A1は、有機溶媒中でポリマー溶液を蒸発させることによってマイクロカプセルを製造する方法を開示している。EP1138322A2は、硬カプセルを開示し、EP1136070(A1)は、軟カプセルを開示しており、それぞれ、例えば医薬品適用のため、ビニルエステルポリマー及び場合によってさらなるモノマー、構造を改善する賦形剤並びにまたさらに通例のシェル成分を含み、それらの使用並びに製造を開示している。EP1926480(B1)は、ポリビニルエステル-ポリエチレングリコールグラフトコポリマーをベースにした軟カプセルシェルを有する軟カプセル及びそれらの製造を開示している。US55,699,466Aは、弾性軟カプセルのための充填組成物を開示している。US5,505,961Aは、ゼラチンカプセルを開示している。US2003085487Aは、軟カプセルを製造するための装置を開示している。US2003232076Aは、噛み砕ける軟カプセルを開示している。

したがって、本発明は、本発明による配合物を含むゲルカプセルを製造する方法、好ましくは、特に実施形態A及びAAなどの、配合物の好ましい実施形態の1つもまた包含する。原理的に、本発明による配合物と適合性があるという条件で、当業者に知られている、全ての材料並びに製造方法及びステップが、ゲルカプセル材料として可能である。

この適合性は、第1に、配合物及びカプセル材料のために使用される物質に基づいて、並びに第2に、好適なカプセル材料での単純な実験を用いて、容易に評価できる。

実施例に示されている通り、個別の乳化剤の使用は、良好な自己乳化の結果をもたらさなかった。しかし、2種の乳化剤を混合した場合、非常に良好な結果及び自己乳化系を得た。これは、SUN FM 580(レシチン)及びSysterna SP 70(糖エステル)の場合、特に驚くべきことであった。それは、Systerna製品は、単独で、配合物中で不溶性であり、ローターステーターミキサーを使用して分散しなければならなかったからである。しかし、少量のSysterna製品の使用は、自己乳化を劇的に改善した。

パルミチン酸アスコルビルは、第1に、胃モデルでの温度で油に不溶性であり、第2に、胃モデルでのpH条件下で、陰イオン性乳化剤として無電荷であり、したがって、非常に低いエマルション安定化活性及びまた水性媒体中で低い溶解度しか示さないが、レシチンを含む配合物に、パルミチン酸アスコルビル及び/又はステアリン酸アスコルビル、特に、パルミチン酸アスコルビルなどの、アスコルビン酸の脂肪酸エステルを加えることによって、胃モデルにおいて自己乳化特性が明確に改善したことが、同様にわかった。最後に、ポリソルベート相は、例えばポリソルベート80の場合、ステロールエステル相から分離するが、レシチンを系に加えることによって、物質がそれぞれ個別に単独で使用される場合と比較すると、分離を防ぎ、自己乳化特性が非常に明確に改善されることが、同様にわかった。

要約すれば、脂肪酸アスコルビルエステル、好ましくはパルミチン酸アスコルビル、並びにまたレシチン及びポリソルベート、好ましくはポリソルベート80の組合せは、さらなる成分として油を含むステロールエステル配合物の特に非常に良好な自己乳化特性など、特に良好な特性をもたらすと述べることができ、したがって、前記組合せは、本発明のとりわけ好ましい実施形態(実施形態A)であり、この実施形態において、前述の割合(広い範囲並びにまたそれぞれに開示されたより狭い及び好ましい限界、例えば、特にまた、さまざまな成分のそれぞれに好ましい範囲の組合せ)が観察されることになり、必要であれば、さらなる任意の成分が存在してよい。特に好ましい実施形態AAにおいて、任意のさらなる成分のいずれも全く存在しない。

配合物の製造
フィトステロールエステル及び乳化剤を合わせ、結晶化を避けるために、及び/又は好ましくは、粘性を低下させるために、60℃まで加熱した。その後、混合を実行した(1分間2000rpmでThinkyミキサーARE-250(Thinky Corporation、USA)、又は約30分間2000rpmでUltra-Turraxチューブドライブ(IKA、Germany)において)。全ての投入材料が液体として存在する場合、Thinkyミキサーを使用したが、その一方で、投入材料の少なくとも1つが、半流動性又は固体物質として存在し、液体フィトステロールエステル相又は約60℃で液化したフィトステロールエステル相に容易に溶解しなかった(例えば、タンパク質、パルミチン酸アスコルビル)場合、Ultra-Turraxミキサーを使用した。製造の間にいずれかの可能な発泡をさせて、一晩で(すなわち、約8から12時間後に)溶解させるために、配合物を室温(約20から25℃)とし、相分離について試験した。相分離が明白でなかった場合、下に記載された適用試験を実行した。

下に示された全ての結果の数値データは、重量パーセントである。

適用試験
人工胃液
1M塩酸2gを蒸留水900mlに加え、1M塩酸でpHを1.6に調整し、蒸留水を使用して、1リットルとした。

小腸液
0.42gのNaOHフレーク、3.95gのNaH₂PO₄ ^*H₂O及び6.19gのNaClを蒸留水900mlに溶解させた。水酸化ナトリウム溶液でpHを6.5に調整し、蒸留水を使用して、溶液を1リットルとした。

胃モデルにおける試験
均一な液体相を得るために、フィトステロールエステル/乳化剤配合物を約60℃まで加熱した。次に、胃液100ml及び小腸液100mlを37～38℃までそれぞれ加熱し、配合物1gをそれぞれの場合において加えた。系を、1時間200rpmで撹拌し、次に、目視検査した。

結果については、表3を参照のこと。

Caco2モデル
配合物を、いわゆるCaco2モデルにおいて同様に試験した。これは、Caco2細胞中へのコレステロールの取り込みに対する配合物の投与の効果を試験することに関する。これは、配合物中のステロールエステルが、細胞のコレステロールの取り込みを減らすことができるかどうか、及びどのようにうまく減らすことができるかという尺度である。コレステロール取り込みの阻止が高ければ高いほど(すなわち、コレステロール取り込みが低ければ低いほど)、配合物は有効である。

Caco2試験の背後にある原理
多孔質膜上でのCaco2細胞の培養;栄養分(この場合、コレステロール)を、頂端側で取り込み、基底側で分泌する、細胞の分極構造。コレステロールの輸送が、フィトステロールをさまざまな媒介物と組み合わせて同時補給することによって影響を受ける度合いを試験する。

試験ステップ
細胞の培養、いわゆる混合ミセルの生成、細胞毒性の判定及び作用濃度の判定、2通過(passes)における基底区画中のコレステロール濃度の測定(補給の開始後、6及び24時間)、それぞれの場合において3連で測定。

細胞毒性テスト
細胞の機能障害なく、全ての試験物質の150μg/mlの濃度を使用することが可能であった。作用濃度50、100、150μg/mlを選択した。

ミセルの形成のために、全ての処理群のために使用されるコレステロールの量を一定に保った。頂端に適用された溶液の分析の間、生成されたミセル中のコレステロール含有量が変化する(ミセル形成の間、コレステロール及びフィトステロールの意図された相互置換によって引き起こされる可能性がある)ことを確証した。

したがって、コレステロール取り込みの結果又は通過輸送の結果を修正して、補給溶液の実際のコレステロール含有量を得た。

使用したステロールエステル
BASF SEからのVegapure 95 Eは、抗酸化剤として、少量のさまざまなトコフェロール及びパルミチン酸アスコルビルを含む。ステロールエステルの割合:少なくとも97%(面積百分率)、遊離ステロールの割合:6%まで(面積百分率)。

使用した可溶化剤
- ポリソルベート20:ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノラウレート、E432
- ポリソルベート80:ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノオレエート、E433、「Tween 80」
- Lipoid P 75:ダイズ豆からのレシチン画分及びリン脂質は、約75%のホスファチジルコリン、7%のホスファチジルエタノールアミンを含む。
- Prefera SSL 6000:100から140のエステル化度を有するステアロイル乳酸ナトリウム(sodium stearoyl-2-lactylate)
- Lametop P 65:FDA規格DATEM(DATEM=モノ-及びジグリセリドのジアセチル酒石酸エステル)、E472e
- Phosal 40 IP:約40パーセントのダイズ豆ホスファチジルコリン及びヒマワリ油及びまた混合トコフェロールを含む液体組成物
- MCT:中鎖トリグリセリド、C8からC10の脂肪酸を優勢に含む油
- Lecico SUN FM 580:Lecicoからのヒマワリレシチン、液体、酵素変性ヒマワリレシチン、56% AU
- CholestOff:NatureMade、USAからの市販の比較製品、植物ステロール及びスタノールを含む。

以下の表1(1a及び1b)は、試験される配合物を示す。

試験の結果
表1(1a及びb):試験した配合物-組成物
図1:(適用された開始濃度の%での)6時間後の基本受容培地のコレステロール含有量
図2:(適用された開始濃度の%での)24時間後の基本受容培地のコレステロール含有量
図3:単独の及び試験される配合物と組み合わせた、コレステロール(「CHOL」)のミセル溶液の赤外線スペクトル
図4:単独の及びさまざまな試験物質(C1からC10)と組み合わせた、コレステロール(「CHOL」)のミセル溶液のPCA分析
図5:表4に関する結果

Caco2モデルからのさらなる結果(表3に関する図)
表2:個別の物質としてのVegapure 95Eと比較した、フィトステロール-媒介物との組合せによるコレステロールの輸送の影響
表3:Caco2モデルからのさらなる結果
表4:胃モデルにおける試験の結果(「ステロールエステル」=BASFからのVegapure 95 E)

ミセル形成の間のフィトステロールによるコレステロールの置換の測定
コレステロール及びフィトステロールは、水にあまり溶けず、混合ミセル中の脂肪酸及び胆汁酸塩と一緒に体内で輸送される。

ミセルからのコレステロールの置換は、コレステロールを減らすためのフィトステロールの作用の重要なメカニズムとして見られる。

測定の目標は、ミセルからのコレステロールの可能な置換の徴候をそのようにして得るために、得られたミセル溶液中のコレステロール濃度に対する試験物質の影響を判定することである。

試験物質を、インビトロでのミセル形成のための規定されたコレステロール濃度と一緒に、5つの異なる濃度で使用した。

得られたミセルエマルションを、SpeCCsアナライザー(Cetics Healthcare)を使用して、赤外分光法によって試験した。

一見して、赤外線スペクトル(図3)は、コレステロール及びフィトステロールの化学構造の類似性に起因して、わずかに異なるだけである。さらなる評価は、試料の類似性を判定することを可能にする、主要成分分析(PC)を使用して、統計学的に行う。

単独の及びさまざまな試験物質(C1からC10)と組み合わせた、コレステロール(CHOL)のミセル溶液のPCA分析(図4)
結果:Lipoid P75+水を含む配合物は、純粋なコレステロールミセルと最も明確に異なり、Vegapure 95 E、ポリソルベート80、Lametop P65+MCT及びPrefera SSL 6000が続き、これを、ミセルからのコレステロールの置換の尺度として見ることができる。

表3における結果は、コレステロールの輸送に、フィトステロールエステル単独より、フィトステロールエステル及び乳化剤(複数可)の組合せを使用する場合の方が、大きな影響を与えることができることを示す。

表4は、表3からの配合物の試験の評価を示す。

図5は、表3からの配合物のCaco2試験における選択された結果を示す。
表4に関する評価:視覚的評価:スケール
1=均質、表面に油がない
2=表面に小から中程度の油滴を有し、ほとんど均質
3=中程度の濁度、表面に目立つ油層
4=わずかに白っぽく濁った外観、表面に厚い油層
5=乳化効果なし、すなわち、事実上、完全な相分離

以下は、本発明の実施形態の一つである。
（１）ステロールエステル及び可溶化剤を実質的に含む、ゲルカプセルのための配合物。（２）ステロールエステルが、植物由来のステロール(フィトステロール)又はその水素化類似体、スタノールから得られた、(1)に記載の配合物。
（３）ステロールエステルが、ステロールから得られた、(2)に記載の配合物。
（４）エステル化のための脂肪酸が、天然由来、好ましくは植物又は海洋生物由来である、(1)から(3)のいずれかに記載の配合物。
（５）脂肪酸が、一価不飽和又は多価不飽和脂肪酸、好ましくは多価不飽和脂肪酸である、(1)から(4)のいずれかに記載の配合物。
（６）脂肪酸が、脂肪酸部分に対して少なくとも30重量パーセントの量で、EPA及び/又はDHAなどのオメガ3脂肪酸を含む、(5)に記載の配合物。
（７）可溶化剤として、ポリソルベート、レシチン及びステアロイル乳酸ナトリウムから選択される少なくとも1つの物質が存在する、(1)から(6)のいずれかに記載の配合物。
（８）アスコルビン酸の脂肪酸エステル、イソアスコルビン酸の脂肪酸エステル、又は糖エステル中の糖として好ましくはショ糖を有する、脂肪酸の糖エステルから選択される少なくとも1つの物質が存在する、(7)に記載の配合物。
（９）脂肪酸アスコルビルエステル、好ましくはパルミチン酸アスコルビル、並びにまたレシチン及びポリソルベート、好ましくはポリソルベート80が選択される、(8)に記載の配合物。
（１０）ステロールエステル及び可溶化剤以外に、少量の水及び/又は油を追加的にのみ含む、(1)から(7)のいずれかに記載の配合物。
（１１）(1)から(10)のいずれかに記載の配合物を含む、ゲルカプセル。
（１２）軟又は硬カプセルの形態の、(11)に記載のゲルカプセル。
（１３）栄養補助食品として又は医薬品として使用するための、(11)又は(12)に記載のゲルカプセル。
（１４）(1)から(10)のいずれかに記載の配合物を製造する方法。
（１５）(11)又は(12)に記載のゲルカプセルを製造する方法。

Claims

ステロールエステル又はスタノールエステル及び可溶化剤を含む、ゲルカプセルのための配合物であって、少なくとも61重量パーセントの配合物がステロールエステル又はスタノールエステル及び可溶化剤からなり、可溶化剤として、レシチン及びポリソルベート80(ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノオレエート、E433)の組合せ、レシチン及び脂肪酸の糖エステルの組合せ、又はレシチン及び脂肪酸アスコルビルエステルの組合せが選択され、可溶化剤がパルミチン酸アスコルビルである場合、パルミチン酸アスコルビルの量が配合物の少なくとも2.5重量パーセントである、配合物。
糖エステル中の糖がショ糖である、請求項1に記載の配合物。
ステロールエステルが、一価不飽和又は多価不飽和脂肪酸でエステル化されている、請求項1又は2に記載の配合物。
ステロールエステルが多価不飽和脂肪酸でエステル化されている、請求項3に記載の配合物。
可溶化剤として、レシチン及び脂肪酸アスコルビルエステルが選択される、請求項1から4のいずれか一項に記載の配合物。
脂肪酸アスコルビルエステルがパルミチン酸アスコルビルである、請求項5に記載の配合物。
i)立体障害フェノール系抗酸化剤、ii)トコフェロール又はその混合物、並びにアルファ、ベータ、ガンマ及びデルタ-トコトリエノール又はこれらのトコトリエノールの少なくとも2種を含む混合物、並びにiii)少なくとも1つの前記の物質及び/又はフェノール系ジテルペン、ポリフェノールを含む天然抽出物からなる群から選択される少量の抗酸化剤を追加的に含む、請求項1から6のいずれか一項に記載の配合物。
立体障害フェノール系抗酸化剤が、t-ブチルヒドロキシトルエン、t-ブチルヒドロキシアニソール及びt-ブチルヒドロキシキノンから選択される、請求項7に記載の配合物。
トコフェロールが、アルファ-、ベータ-、ガンマ-及びデルタ-トコフェロールから選択される、請求項7に記載の配合物。
フェノール系ジテルペンが、カルノソール及びカルノシン酸から選択される、請求項7に記載の配合物。
ポリフェノールが、没食子酸エピガロカテキン、タンニン酸及びイソフラボンから選択される、請求項7に記載の配合物。
抗酸化剤として、トコフェロール、アスコルビン酸若しくはイソアスコルビン酸又はそれらの脂肪酸とのエステルを含む、請求項7から11のいずれか一項に記載の配合物。
アスコルビン酸の脂肪酸とのエステルが、パルミチン酸アスコルビル又はステアリン酸アスコルビルである、請求項12に記載の配合物。
抗酸化剤として、トコフェロール及び脂肪酸アスコルビルエステルを含む、請求項12に記載の配合物。
抗酸化剤として、トコフェロール及びパルミチン酸アスコルビルを含む、請求項14に記載の配合物。
ステロールエステル又はスタノールエステル及び可溶化剤以外に、水及び/又は油を、互いに独立して、配合物に対して10重量パーセント以下の量で追加的に含む、請求項1から15のいずれか一項に記載の配合物。
ステロールエステル又はスタノールエステル中の脂肪酸が、脂肪酸部分に対して少なくとも30重量パーセントの量でオメガ3脂肪酸を含む、請求項1から16のいずれか一項に記載の配合物。
オメガ3脂肪酸がEPA及び/又はDHAである、請求項17に記載の配合物。
請求項1から18のいずれか一項に記載の配合物を含む、ゲルカプセル。
軟又は硬カプセルの形態の、請求項19に記載のゲルカプセル。
栄養補助食品として又は医薬品として使用するための、請求項19又は20に記載のゲルカプセル。
請求項1から18のいずれか一項に記載の配合物を製造する方法であって、以下のステップ:
a)ステロールエステル又はスタノールエステル及び可溶化剤を、個別に次々と、2つ一組で、同時に2つ以上、又は同時に全てを撹拌槽中に加えること、
b)ステロールエステル又はスタノールエステルの融点を超える温度まで、個別に最初に投入された物質又は2つ以上の物質の混合物を加熱すること、
c)1から60分の間、500から2500rpmで加熱された混合物を混合して、均一な混合物を得ること
を含む、方法。
ステップa)において、ステロールエステル又はスタノールエステル及び可溶化剤を全てを次々と加える、請求項22に記載の方法。
ステップa)において、第1の物質としてステロールエステル又はスタノールエステルを加え、ステップb)の加熱の前、間、又は後に、他の物質を加える、請求項22に記載の方法。
ステップa)において、ステップb)の加熱の前に、他の物質を加える、請求項24に記載の方法。
ヒトにおいてステロールを補給して、細胞のコレステロール取り込みを減らすための使用のための、請求項1から18のいずれか一項に記載の配合物又は請求項19から21のいずれか一項に記載のゲルカプセル。