JP7534494B2 - モズクの盤状体から直立体を発芽させる方法 - Google Patents
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- Cultivation Of Seaweed (AREA)
Description
すなわち、本発明は、下記の構成を含む。
[1]白色光の存在下または非存在下において、
モズクの盤状体に、光量がそれぞれ25μmol/m2/s以上である下記(A)の光および/または(B)の光、ならびに
光量が35μmol/m2/s以下である下記(C)の光を照射することを特徴とする、モズクの盤状体から直立体を発芽させる方法。
(A)400nm以上、500nm未満の波長域の光
(B)500nm以上、600nm未満の波長域の光
(C)600nm以上、700nm未満の波長域の光
[2]モズクの盤状体に、(A)の光および/または(B)の光のみを照射することを特徴とする上記[1]に記載のモズクの盤状体から直立体を発芽させる方法。
[3]モズクの盤状体に、光量が合計で50μmol/m2/s以上である(A)の光および(B)の光と、
光量が35μmol/m2/s以下である(C)の光とを照射することを特徴とする上記[1]に記載のモズクの盤状体から直立体を発芽させる方法。
[4]モズクの盤状体に照射する光が、LED由来の光であることを特徴とする上記[1]~[3]のいずれか1項に記載のモズクの盤状体から直立体を発芽させる方法。
[5]白色光の照射下にモズクの盤状体から直立体を発芽させる方法において、下記(C)の光の照射が資材により低減されていることを特徴とする方法。
(C)600nm以上、700nm未満の波長域の光
[6]白色光の照射下にモズクの盤状体から直立体を発芽させる方法において、下記(A)の光および/または(B)の光を増強させ、または
下記(C)の光の照射を減弱せしめることを特徴とする方法。
(A)400nm以上、500nm未満の波長域の光
(B)500nm以上、600nm未満の波長域の光
(C)600nm以上、700nm未満の波長域の光
(A)400nm以上、500nm未満の波長域の光
(B)500nm以上、600nm未満の波長域の光
(C)600nm以上、700nm未満の波長域の光
上記(A)および(B)の波長域に含まれる光は、モズクの盤状体から直立体を発芽するために好ましい光であり、モズクの盤状体から直立体を発芽することを促進することができる。
(A)400nm以上、500nm未満の波長域の光
(B)500nm以上、600nm未満の波長域の光
上記の(A)の光および(B)の光は、先に記述したとおりである。
(A)400nm以上、500nm未満の波長域の光
(B)500nm以上、600nm未満の波長域の光
(C)600nm以上、700nm未満の波長域の光
上記の(A)の光、(B)の光、および(C)の光は、先に記述したとおりである。
なお、上記海水に特に制限はないが、海中から直接採取した海水、海岸近くの地下または海底(例えば、大陸棚)の地下から採取された地下海水、深海から採取した海洋深層水などであってもよい。また、蒸留水、水道水などに必要なミネラル成分(例えば、カルシウム、カリウム、ナトリウム、マグネシウムなどの塩類)などを添加して海水と同様の組成としたものも使用することもできる。
海水の温度としては、例えば、好ましくは約10~30℃、より好ましくは15~25℃、最も好ましくは20~22℃が挙げられるが、これらに限定されない。
光照射日数としては、例えば、上記光照射時間のサイクルを14日程度以上行うことが挙げられ、28日間程度以上行うことが好ましく、35日間程度以上行うことがより好ましく、42日間程度以上行うことがさらに好ましいが、これらに限定されない。
海水の塩分濃度としては特に制限はないが、例えば、好ましくは1.5~4.5質量%、さらに好ましくは2~3.5質量%、より好ましくは2.8~3.3質量%などが挙げられる。
(C)600nm以上、700nm未満の波長域の光
(A)400nm以上、500nm未満の波長域の光
(B)500nm以上、600nm未満の波長域の光
(C)600nm以上、700nm未満の波長域の光
(A)の光および/または(B)の光を増強させるために、例えば、光源から照射する光量を増大させる方法や、反射板などを用い、光源の光および/または白色光をモズクの盤状体に集光する方法、光源とモズクの盤状体との距離を近づける方法などが挙げられる。また、(C)の光の照射を減弱せしめるために、上記した資材が用いられてもよいが、用いられなくてもよい。例えば、光源から照射する光量を減少させる方法の他、上記したモズクの盤状体が付着した基質を海水中に設置する場合、基質と光源間に存在する海水によって、光の照射が減弱されてもよい。また、光源とモズクの盤状体との距離をとる方法を行ってもよい。上記白色光、(A)の光、(B)の光および(C)の光は、先に記述したとおりである。
(1)モズクの盤状体の作製
中性複子嚢の形成および中性遊走子の遊泳を確認したモズク(オキナワモズク)を通気培養している滅菌海水中にスライドガラスを投入し、水温25℃、光量50μmol/m2/s、明期12時間、暗期12時間の条件で48時間培養して中性遊走子が付着したスライドガラスを得た。中性遊走子が付着したスライドガラスを、滅菌海水を満たしたシャーレに入れ、水温25℃、光量50μmol/m2/s、1日の照射時間サイクルが明期12時間および暗期12時間の条件で3週間培養してモズクの盤状体を得た。
得られたモズク盤状体を、殺菌海水(硝酸態窒素濃度:2μmol/L、リン酸態リン濃度:0.2μmol/L)を満たした6ウェルマイクロプレートの1つのウェル毎に5~10個入れ、恒温槽(型式:CN-40A 三菱機械エンジニアリング社製)内に静置した。そこに下記条件で光を照射し培養を行った。なお、モズクの盤状体は、培養によってモズクの盤状体から同化糸が立ち上り、一部は中性複子嚢となり中性遊走子を発生した後、再び盤状体を形成するため、モズクの盤状体の数は当初の5~10個から100~200倍程度増加した。
培養温度:25℃に設定した。
照射時間サイクル:1日のうち、12時間連続して光を照射し(明期)、12時間消灯し暗所とした(暗期)。
照射する光:光源として三波長可変型LED照射装置(型式:3LH-64 日本医科器械社製)を用いて、以下の光を照射した。
(C)600nm以上、700nm未満の波長域の光(ピーク波長641nm)。以下「R」と略すこともある。
(B)500nm以上、600nm未満の波長域の光(ピーク波長525nm)。以下「G」と略すこともある。
(A)400nm以上、500nm未満の波長域の光(ピーク波長453nm)。以下「B」と略すこともある。
白色光(上記(A)の光、(B)の光および(C)の光を等光量含む光)。以下「RGB」と略すこともある。
照射する光量:表1に記載した光量を照射した。
光照射を開始してから、14日後、21日後、28日後、35日後、42日後に、実体顕微鏡下で写真撮影を行い、1mm2内の盤状体数(未発芽の盤状体と発芽した盤状体の総数)と発芽した盤状体(盤状体の中央部分から同化糸が寄り集まって直立体を形成し、直立体の長さが約1mm以上に達したもの)をカウントし、下記式で発芽率を計算した。
得られた観察日ごとの発芽率を下記基準にて記号化して評価した。結果を表1に示す。なお、観察日14日後、21日後の発芽率は、全ての試験区で0%であったため表1には記載しない。また、表1の試験区1~7は実施例であり、試験区8~15は比較例である。
[評価基準]
D評価:発芽率が0%
C評価:発芽率が0%を超えて、10%未満
B評価:発芽率が10%以上、20%未満
A評価:発芽率が20%以上、30%未満
S評価:発芽率が30%以上、50%未満
SS評価:発芽率が50%以上
評価がB評価以上の場合に、モズクの盤状体から直立体を発芽し、発芽に有効であると判断した。特に、評価がA評価以上の場合に、モズクの盤状体から直立体を発芽し、発芽に非常に有効なだけでなく、発芽の促進効果も見られたと判断した。
(B)の光(ピーク波長525nm:波長域 約500~600nm)と(A)の光(ピーク波長453nm:波長域 約400~500nm)のみ併用して照射し、光量をそれぞれ25μmol/m2/sに調整した試験区ではSの評価であり、モズクの盤状体から直立体を発芽し、発芽に非常に有効であり、発芽の促進も確認された。
(B)の光(ピーク波長525nm:波長域 約500~600nm)のみを照射し、光量を50μmol/m2/sに調整した試験区ではAの評価であり、モズクの盤状体から直立体を発芽し、発芽に非常に有効であり、発芽の促進も確認された。
(C)の光(ピーク波長641nm:波長域 約600~700nm)、(B)の光(ピーク波長525nm:波長域 約500~600nm)および(A)の光(ピーク波長453nm:波長域 約400~500nm)を照射し、光量をそれぞれ33.3μmol/m2/sに調整した試験区ではBの評価であり、モズクの盤状体から直立体を発芽し、発芽に有効であった。
(B)の光(ピーク波長525nm:波長域 約500~600nm)のみを照射し、光量を100μmol/m2/sに調整した試験区ではBの評価であり、モズクの盤状体から直立体を発芽し、発芽に有効であった。
(1)モズク盤状体が付着したモズク種網糸の作製
ガラス容器(梅酒瓶)に中性複子嚢を形成したオキナワモズクと滅菌海水を入れ、水温25℃、白色蛍光灯(光量:50μmol/m2/s)を明期12時間、暗期12時間の条件で照射して30日間通気培養し、中性遊走子が遊泳するのを確認した。
前記中性遊走子が遊泳している滅菌海水中に、モズクの養殖に用いられる養殖網(組成:ナイロン70%、ポリエチレン30%)の一部を切り取った網糸(網目をほどいて30cm程にしたもの)を投入し、前記と同様の条件で2週間通気培養を行い、網糸表面に盤状体が付着したモズク種網糸を得た。なお、盤状体の付着の有無については、網糸の表面を目視で確認した。
得られたモズク種網糸を1.5~2.0cmに裁断し、裁断したモズク種網糸を、殺菌海水(硝酸態窒素濃度:2μmol/L、リン酸態リン濃度:0.2μmol/L)を満たした各300mLの培養用通気フラスコ(以下、単に「フラスコ」という。)に1本ずつ入れ、これを恒温槽(型式:CN-40A 三菱機械エンジニアリング社製)内に静置し、下記条件で光を照射して培養した(試験区16~23)。
なお、前記したフラスコは、同じ恒温槽に対し、それぞれ2つずつ設置し、1つはそのままとし(試験区16~19)、もう1つは青色ネット(商品名:ダイオネオシェード蒼快 ダイオ化成社製)で被覆した(試験区20~23)。また、各モズク種網糸に照射される光量が同等になるように、青色ネットで被覆したフラスコは、被覆していないフラスコよりも、恒温槽上部に設置した光源との距離が近くなるように高台に乗せて設置した。
培養温度:24℃に設定した。
照射時間サイクル:恒温槽を4台使用し、それぞれの恒温槽の1日(24時間中)の明暗時間サイクルが、明期6、8、10、12時間(暗期18、16、14、12時間)の4段階になるように設定した。
殺菌海水の換水頻度:1日1回の頻度で新しい殺菌海水と交換した。
<<「薄青色」の光:青色ネットなし(試験区16~19)>>
照射する光:光源として三波長可変型LED照射装置(型式:3LH-64 日本医科器械社製)を用いて、下記「R」「G」「B」の光の割合を調整し、各フラスコ中の各モズク種網糸に「薄青色」の光として照射した。
「R」:(C)600nm以上、700nm未満の波長域の光(ピーク波長641nm)。
「G」:(B)500nm以上、600nm未満の波長域の光(ピーク波長525nm)。
「B」:(A)400nm以上、500nm未満の波長域の光(ピーク波長453nm)。
照射する光量:トータル光量50μmol/m2/s
(「R」:10.0μmol/m2/s、
「G」:10.0μmol/m2/s、
「B」:30.0μmol/m2/s)の「薄青色」の光を照射した。
照射する光:フラスコの上に青色ネットを被覆し、その上から上記試験区16~19と同じ「薄青色」の光を照射することで、各フラスコ中の各モズク種網糸に「青色」の光として照射した。
照射される光量(青色ネット被覆下):トータル光量50μmol/m2/s
(「R」:3.0μmol/m2/s、
「G」:6.0μmol/m2/s、
「B」:41.0μmol/m2/s)の「青色」の光が照射された。
光照射を開始してから14日後、36日後にモズク種綱糸をシャーレに取り出し、デジタルカメラでモズク種網糸の全体写真を撮影して、モズク種網糸の盤状体から発芽している約1mm以上の直立体数をカウントして発芽状況を観察した。カウントした直立体数を下記評価基準で発芽度合いを記号化して評価した。結果を表2及び図2に示す。
[評価記号と評価基準]
× :全体写真で確認できる直立体数が0個
〇 :全体写真で確認できる直立体数が1~5個
◎ :全体写真で確認できる直立体数が6~15個
◎◎:全体写真で確認できる直立体数が16個以上
評価記号が「〇」以上の場合に、モズクの盤状体から直立体を発芽し、発芽に有効であると判断した。特に、評価記号が「◎◎」以上の場合に、モズクの盤状体から直立体を発芽し、発芽に非常に有効なだけでなく、発芽の促進効果も見られたと判断した。
なお、光照射時間についても、新たに、明期6時間(暗期18時間)~明期8時間(暗期16時間)の照射が直立体の発芽に特に有効であることがわかった。
Claims (2)
- モズクの盤状体に、合計の光量が50μmol/m2/s以上である下記(A)の光、(B)の光、および(C)の光を照射すること、
下記(A)の光の光量が25μmol/m 2 /s以上であること、
下記(C)の光の光量が3.0~10μmol/m 2 /sであること、
光を照射する際の、光照射時間である1日の明暗の時間サイクルが、明期6時間~10時間および暗期18時間~14時間であること、および、
前記1日の明暗の時間サイクルを14日以上行うことを特徴とする、モズクの盤状体から直立体を発芽させる方法。
(A)400nm以上、500nm未満の波長域の光
(B)500nm以上、600nm未満の波長域の光
(C)600nm以上、700nm未満の波長域の光 - モズクがオキナワモズク(Cladosiphon okamuranus)であることを特徴とする、請求項1に記載のモズクの盤状体から直立体を発芽させる方法。
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| JP2020144272A Active JP7650629B2 (ja) | 2019-09-12 | 2020-08-28 | モズクの盤状体から直立体を発芽させる方法 |
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Patent Citations (7)
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Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
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| 山岸大,モズク胞子体(成体)の生長および光合成に及ぼすLED光照射の影響,石川県水産総合センター研究報告 ,第6号,石川県水産総合センター,2019年,p.23-27,https://www.pref.ishikawa.lg.jp/suisan/center/kenpo/documents/kenpo6-5.pdf |
| 石川県水産総合センター研究報告(オンラインISSN 2434-6837 冊子版 ISSN 1345-3726,第6号(2019年1月),石川県,2019年,p,1-5,https://www.pref.ishikawa.lg.jp/suisan/center/kenpo/reportindex1.html |
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